UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

PRACTICA 5

TIEMPO GENERACIONAL

RESUMEN / PALABRAS CLAVE

1. OBJETIVOS
 Aplicar técnicas de siembra y dilución seriada.
 Determinar el tiempo generacional
 Determinar la curva concentración de microorganismos vs tiempo.
2. TEORÍA
2.1. Tiempo generacional
2.2. Curva de crecimiento microbiano
2.3. Reproducción de bacterias
3. PARTE EXPERIMENTAL
3.1. Material y Equipos
 Cajas Petri.
 Lámpara de alcohol
 Asa de Digralski
 Incubadora
 Tubos de ensayo

3.2. Sustancias y reactivos

 Medios de Cultivo.
 Microorganismo activado.
 Agua peptonada

3.3. Procedimiento
3.3.1. Preparar un medio de cultivo adecuado para el microorganismo E.coli.
3.3.2. Activar el microorganismo 24 horas antes a utilizar para medir el tiempo
generacional.
3.3.3. Preparar 7 tubos de ensayos con 9ml de agua peptonada.
3.3.4. Inocular el primer tubo con 1 ml de muestra (solución madre).
3.3.5. Aplicar la técnica de dilución seriada con factor de dilución 1/10 (empezamos desde
10-1 hasta 10-7)
3.3.6. Usar la técnica de extensión con asa de Digralski para sembrar en las placas,
colocando 0.1 ml de cada dilución, la siembra de cada tubo se realiza cada 20
minutos.
3.3.7. Llevar a incubar a 37 0 C
3.3.8. Transcurridas 24 horas realizar el recuento de células viables y reportar como
UFC/ml
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4.1 Datos Experimentales.

Tabla 4.1-1
Dilución seriada

Variable Valor
Microorganismo
Concentración inicial
Volumen de agua peptonada
Volumen de inóculo
Factor de dilución

Tabla 4.1-2
Tiempo Generacional
Variable Valor
Número de bacterias a t=0
Número de bacterias a tiempo=t
Tiempo de crecimiento

4.2. Cálculos.
4.2.1. Factor de dilución.
Cax=Ca0∗f

x=número de dilucion .
Ca=Concentracion de la especie a
f =factor de dilucion .

4.2.1. Cálculo de conteo de colonias

Tabal 4.1-3
Colonias observadas
Variable Valor
Colonias observadas
Volumen de muestra utilizado

CO∗f
¿ UFC=
v
Co=colonias observadas
f =factor de dilucion .
V =volumen de muestra .
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4.2.2. Tiempo Generacional.

y
n=3,3 log Ec 4.2.2-1
x
 Deducir la ecuación 4.2.2-1

N=número de generaciones
X =bacterias en t=0
Y =bacterias en tiempo=t

t
G= Ec. 4.2.2-2
n

T =tiempo
N=número de generaciones

4. RESULTADOS.
Tabla 4.1-1
Dilución seriada.

Dilución Vol. agua Ca0 Ca

1
2
3
4

Tabla 4.1-2
Tiempo Generacional

Variable Valor
Tiempo generacional

5. DISCUSIÓN
6. CONCLUSIONES
7. CUESTIONARIO.
7.1. Explique un ejemplo del ciclo celular en función del tiempo de generación.
7.2. ¿Cuál debe ser el control adecuado del ciclo celular?
7.3. Usos en la industria de la biotecnología del microorganismo E-coli.
7.4. Establezca ventajas y desventajas de los métodos de conteo directos e indirectos
del crecimiento de poblaciones bacteriana.
8. ANEXOS
8.1. Diagrama del equipo. (Detallado)
8.2. Construcción de la curva de crecimiento microbiano: Cantidad de bacterias vs
Tiempo.
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