SCOLR Pharma, Inc.

 
691  Evaluation of the Ninhydrin Assay for Gabapentin Determination  3625 132 nd  Ave SE #400 
Karla LaPorte, Stephen Turner, Mike Hite, Alan Brunelle, Haiyan Zhang  Bellevue, WA. 98006 

Figure 1. – Calibration curve of gabapentin  Figure  4.  –  Release  rate  of  gabapentin  by 

Summary  Experimental Method  Figure  3  below  shows  the  dissolution  profile  of 
performed on 6/8/06 using ninhydrin assay  gabapentin  Formula  A31  using  the  ninhydrin  ninhydrin assay vs HPLC. 
Dissolution setup and procedure:  1.0 
Calibration Curve of Gabapentin; 06/08/06 
assay.  Fresh  calibration  curves  were  used  to  Formula A36:    Colorimetric Assay vs HPLC 
Due  to excipient  interference  in  the  UV­detection  Tablet dissolution was performed in a USP Type II  produce  dissolution  profiles  that  were  compared  1.00 
of a sustained release gabapentin formulation, an  apparatus  at  50  rpm  and  37ºC.    Dissolution  0.8  y = 1.5069x ­ 0.2079  across two separate days.  The release rates are 
alternative  dissolution  detection  method  using  0.80 

Absorbance at 402nm 
2 
medium  was  900mL  of  deionized  water  (dH2O).  R  = 0.9985 
essentially  identical,  indicating  the  ninhydrin 

Fraction Released 
ninhydrin  was  evaluated.    This  method  was  Samples of 5mL each were automatically collected  0.6  method is reproducible.  0.60 
determined  to  be  linear,  reproducible  and  from  each  vessel  at  predetermined  intervals,  and 
accurate  in  the  release  rate  determination  of  an  the  volume  replaced  with  dH2O.    After  completion  0.4  y = 1.589x ­ 0.2239  0.40 
2 
R  = 0.9973 
ER gabapentin formulation.  of the  exam,  a maximum dissolution determination  Figure 3. – Day to day dissolution comparison  0.20 
was  performed  by  increasing  paddle  speed  to  250  0.2 
of Formula A31 using the ninhydrin assay 
rpm  for  1  hour  and  collecting  a  final  sample.  0.00 
0.0  0.00  2.00  4.00  6.00  8.00  10.00  12.00 
Maximum  absorbance  values  of  tablets  were  used  Formula A31:    Ninhydrin Assay ­ Day to Day 
Introduction  0.00  0.10  0.20  0.30  0.40 
Concentration (mg/ml) 
0.50  0.60  0.70  0.80 
Dissolution Comparison 
Elapsed Time (h.mm) 

to  calculate  fractional  release  of  the  active  Gabapentin Only  Full Formula 

1.00  FA­36 by Ninhydrin  FA36­ by HPLC
Conventional  analysis  of  gabapentin  during  ingredient.  Linear (Gabapentin Only)  Linear (Full Formula) 

dissolution  is  performed  by  UV­detection  at 

Fraction Released 
0.80 
Sample analysis and Gabapentin detection: 
215nm.    During  the  development  of  a  novel  12  All  samples  were  treated  for  Schiff’s  base  Reproducibility  of  the  method  was  evaluated  by  Conclusion 
0.60 
hour  sustained  release  gabapentin formulation,  it  formation  as  previously  described1.    1.0mL  of  comparing  the  slopes  generated  over  two 
was  found  that  certain  raw  materials  and  tablet  0.8%  ninhydrin  solution  and  0.5mL  of  0.2M  different days. (Figure 2).  0.40 
The  ninhydrin  assay  is  a  simple  and  reliable 
excipients  had  significant  absorbance  at  the  215  sodium  phosphate  buffer  pH  6.0  were  added  to  method  for  the  determination  of  gabapentin  in 
0.20 
nm  wavelength  and  consequently  interfered  with  5mL  sample  solution.    These  samples  were  Figure 2. – Calibration curve of gabapentin 
dissolution.  The  method  corresponds  well  with 
the detection and quantification of the gabapentin  heated  at  85ºC  for  30  minutes,  the  reaction  performed on separate days using ninhydrin  0.00  HPLC  sample  analysis.  The  gabapentin 
within  the  formulation.    Therefore,  a  quick  stopped  by  running  under  cold  tap  water.  assay  0.00  2.00  4.00  6.00  8.00  10.00  12.00 
calibration  curve,  generated  using  the  ninhydrin 
alternative  method  was  necessary  to  accurately  Calibration Curve of Gabapentin; 06/08/06  Elapsed Time (h.mm) 
Samples  were  allowed  to  come  to  room  1.0  assay,  is  linear  within  the  dissolution 
assess  the  release  rate  of  gabapentin  upon  temperature  before  detection.    Detection  was 
FA­31 Cal Curve 6/7/06  FA­31 Cal Curve 06/02/06 
concentration  range  of  gabapentin  and  the 
dissolution  in  order  to  support  rapid  formulation  performed  at  402nm  and  568nm  at  appropriate  0.8  method is reproducible from day to day. 
y = 1.5069x ­ 0.2079 
development. 

Absorbance at 402nm 
2 
dilutions for the linear range of the instrument.  R  = 0.9985 

0.6 
Finally,  the  accuracy  of  the  dissolution  profile  References 
Ninhydrin is a test reagent that reacts with alpha­ 
Results and Discussion  y = 1.5024x ­ 0.1852  is  confirmed  with  the  UV  analysis  of 
amino acids to produce a purple color that can be  0.4 
2 
R  = 0.9932  1.  Y.  Wu,  M.  Hussain,  and  R.  Fassih.  Development  of  a  simple 
gabapentin  by  HPLC.    The  release  rate  of 
detected  at  402nm  and  568nm.    Previous  work  analytical  methodology  for  determination  of  glucosamine 
The gabapentin calibration curve, generated using  gabapentin, determined by the ninhydrin assay  release from modified release matrix tablets. J. Pharm. Biomed. 
was  performed  by  Wu,  et  al 1,2  to  develop  an  0.2 

the  ninhydrin  assay,  is  linear  in  the  concentration  is  essentially  identical  to  the  release  profile  Anal. 38(2): 263­269 
assay  to  accurately  assess  the  release  rate  of  2.  Wu,Y.,  et  al.,  Unconventional  Dissolution  Method  for 
range  0.13mg/ml  –  0.70mg/ml.      The  gabapentin  determined  by  HPLC  analysis  (as  shown  in 
glucosamine  from  a  sustained  release  matrix.  0.0  Determination of Glucosamine From Sustained Release Matrix; 
only  calibration  curve  closely  approximates  the 
0.00  0.10  0.20  0.30  0.40  0.50  0.60  0.70  0.80 
Figure 4).  Dept of Pharmaceutical Sciences, Temple University School of 
This current work looks to assess the applicability  Concentration (mg/ml) 
Gabapentin 06­08­06  Gabapentin 06­06­08  Pharmacy, Philadelphia, PA  19140. 
of  the  ninhydrin  assay  to  determine  the  release  calibration  curve  of  the  full  formula  indicative  of  Linear (Gabapentin 06­08­06)  Linear (Gabapentin 06­06­08) 

profile of gabapentin during dissolution.  minimum excipient interference (Figure 1).