Вы находитесь на странице: 1из 12

Тема занятия: БУФЕРНЫЕ РАСТВОРЫ.

Цель занятия. Усвоить представления о составе, класси


фикации и механизме действия буферных систем. Научиться
применять теоретический материал для расчета рН и буферной
емкости буферных систем. Изучить медико-биологическое зна
чение буферных систем.

После изучения темы студент должен:


знать:
состав буферных систем;
классификацию буферных систем;
механизм буферного действия;
факторы, влияющие на буферную емкость и рН буферных
систем;
уметь:
выводить формулы для расчета рН буферных систем;
рассчитывать буферную емкость;
применять теоретический материал к рассмотрению буфер
ных систем в биологических объектах.

Исходный уровень знаний и умений.


1.Знание теории электролитической диссоциации.
2.Умение пользоваться таблицей логарифмов.
3.Умение рассчитывать рН растворов электролитов.

Учебно-целевые вопросы.

1. Граница применяемости рН в водных растворах в зависимости от:


температуры;
концентрации электролита.
2. Активная, потенциальная и общая кислотность (щелочность) растворов:
сильных электролитов;
слабых электролитов.
3. Буферные растворы:
определение, классификация, число компонентов;
вывод формулы рН буферных систем;
механизм буферного действия.
4. Свойства буферных систем:
влияние на рН соотношения компонентов;
влияние на рН разбавления раствора.
5. Буферная емкость:
зависимость от абсолютных концентраций компонентов;
зависимость от соотношения компонентов;
буферная емкость по кислоте и по щелочи.
6. Медико-биологическое значение буферных систем.

Задачи.
1. Определить общую и активную щелочность раствора
гидроксида бария, если на титрование 15 мл его израсходо -
вано 7,5 мл 0,2М соляной кислоты.
Ответ: Собщ = 0,1 моль/л, Сакт = 0,2 моль-экв/л
2. Чему равно рН ацетатного буфера, если 1 л его содер
жит 0,9 моль-экв уксусной кислоты и 0,6 моль-экв ацетата нат-
рия (константа диссоциации уксусной кислоты 1,75-10 -5)?
Ответ: рН = 4,56.
3. Сколько мл 0,2М раствора уксусной кислоты нужно доба-
вить к 40 мл 0,1М раствора ацетата натрия, чтобы получить ра-
створ с рН 4?
Ответ: 110 мл.
4. Рассмотреть, как изменится рН 0,4М ацетатного буфера
при добавлении к 1 л этого раствора:
а) 0,2 моль-экв гидроксида натрия,
б) 0,2 моль-экв соляной кислоты,
в) 0,4 моль-экв соляной кислоты.
Ответ: а) ΔрН = 0,48; б) ΔрН = 0,48; в) ΔрН = 4,58.
5. Рассчитать величину буферной емкости фосфатного бу
ферного раствора, если после добавления 10 мл 0,5М раствора
гидроксида натрия к 20 мл этого раствора рН последнего уве
личивается с 7,2 до 8,0.
Ответ: 0,3125 моль-экв.

Темы докладов УИРС.


1. Буферная емкость по кислоте и по щелочи.
2. Области применения буферных систем.
БУФЕРНЫЕ РАСТВОРЫ

Буферными называют растворы, обладающие свойством достаточно


стойко сохранять постоянство концентрации водородных ионов при добавле-
нии к ним небольших количеств сильной кислоты или щелочи, а также при
разбавлении и концентрировании.
Сама способность стойко сохранять постоянное значение рН называ-
ется буферным действием. Буферные системы позволяют точно регулировать
концентрацию ионов водорода и гидроксид-ионов, и, следовательно, делают
возможным контроль реакций, зависящих от величины рН.

1. Состав буферных растворов


С точки зрения прототолитической теории кислот и оснований
Ч. Бренстеда и Т. Лоури (1923 г.) буферное действие растворов обу-
словлено наличием кислотно-основного равновесия:
В + Н+→ ВН+
основание - сопряженная кислота
НА → H+ + A-
кислота - сопряженное основание
Сопряженные кислотно-основные пары В/ВН+ и НА/А- называют буферными
системами.
Буферные системы могут быть четырех типов:
а) слабая кислота и сопряженное с ней основание НА/А- Например, ацетатная
буферная система
СН3СООН / СН3СОО -.
СН3СООН → СН3СОО - + Н+
кислота сопряженное основание

водородкарбонатная система Н2С03/ НС03-


Н2СО3  НСО3 -+ Н+
кислота сопряженное основание

формиатная система НСООН / НСОО -


НСООН → НСОО - + Н+
кислота сопряженное основание

б) слабое основание и сопряженная с ним кислота. Например, аммиачная


буферная система NH3· H2O / NH3
NH3+H+ → NH4+
основание сопряженная кислота

в) анионы кислой и средней соли или двух кислых солей. Например, карбо-
натная буферная система С032- /НСО32- (в растворе Na2C03/NaHC03)
C032- + H+ → НСО32-
основание сопряженная кислота
фосфатная буферная система Н2Р04- / НР042-
Н2РО4- + Н+ → HPO42-
кислота сопряженное основание
г) ионы и молекулы амфолитов. К ним относят аминокислотные и белковые
буферные системы. Если аминокислоты или белки находятся в изоэлектриче-
ском состоянии (суммарный заряд молекулы равен нулю), то растворы этих
соединений не являются буферными. Они начинают проявлять буферное
действие, когда к ним добавляют некоторое количество кислоты или щело-
чи.Тогда часть белка (аминокислота) переходит из изоэлектрического состо-
яния в форму «белок-кислота» (катионная форма аминокислоты) или в фор-
му «белок-основание» (анионная форма аминокислоты):
+
Н3 N- СН- COOH → Н2 N- СН- COO -
I I
R R

катионная форма анионная форма


При этом образуется смесь: слабая «белок-кислота» + соль этой слабой кис-
лоты; слабое «белок-основание» - соль этого слабого основания
+
- +
Н2 N- СН- COO + Н → Н3 N- СН- COOH
I I
R R

основание А- сопряженная кислота НА

+
Н3 N- СН- COOH → Н2 N- СН- COO - + Н+
I I
R R
+
кислота ВН сопряженное основание В-

2. Механизм буферного действия

Рассмотрим буферное действие ацетатного буфера. В этом растворе со-


держатся такие ионы:
CH3COOH/CH3COO -
РКа
снъсоон) =1,8·10 – 5.
CH3COONa → CH3COО - + Na+
Главный источник ацетат-ионов - сильный электролит CH3COONa.
Если к этой системе добавить сильную кислоту, то ионы будут взаимо-
действовать с анионами соли, образуя слабодиссоциирующую уксусную кис-
лоту
CH3COONa + HCl → CH 3COOH + NaCl
CH3COO - + Н+ → СН3СООH
Как видим, сильная кислота заменяется эквивалентным количеством слабой,
диссоциация которой в присутствии ацетат-ионов подавлена.
В соответствии с законом разведения Оствальда повышение концентрации
уксусной кислоты понижает степень ее диссоциации, а в результате этого
концентрация ионов Н+ в буфере увеличивается незначительно.
При добавлении к буферному раствору щелочи концентрация водородных
ионов и рН изменяется также незначительно. Щелочь при этом будет реа-
гировать со слабой кислотой по реакции нейтрализации:
СН3СООН + NaOH →CH3COONa + Н20
СНъСООН + ОН - → СН3СОО - + Н20
В результате этого добавленная щелочь заменяется эквивалентным коли-
чеством слабоосновной слои, в меньшей степени влияющей на реакцию сре-
ды. Незначительное изменение рН может происходить за счет гидролиза и
уменьшения концентрации уксусной кислоты.
В процессе этой реакции расходуется уксусная кислота. Однако активная
кислотность смеси (определяется концентрацией ионов водорода) почти не
изменяется, так как вместо прореагировавших ионов кислоты (Н+ и СН3СОО -
) за счет потенциальной кислотности (определяется концентрацией недиссо-
циированных молекул кислоты) образуются новые ионы Н+ и СН3СОО -.
Механизм действия фосфорного буфера аналогичен действию ацетатного
буфера.
При добавлении к буферу сильной кислоты
Na2HP04 +НС1→ NaH2PO4 +NaCl
2- + -
НРО4 + Н → Н2РО4 уменьшается количество сопряженного основания, но
увеличивается количество слабой кислоты.
Если к этой системе добавить щелочь
NaH2PO4 + NaOH → Na2HP04 + Н20
Н2Р04 - + NaOH →НРО4- + Н20
то произойдет уменьшение концентрации слабой кислоты и увеличение ко-
личества сопряженного основания.
Механизм действия аммиачного буфера заключается в том, что при до-
бавлении к буферу сильной кислоты происходит реакция нейтрализации и
сильная кислота заменяется эквивалентным слабой сопряженной кислоты:
NH4 OH + НC1 → NH4CI + Н20
NH4 OH + Н+ →NH4 + + Н20
Концентрация свободных гидроксид-ионов восполняется за счет потен-
циальной основности гидроксида аммония.
Щелочь, добавленная к буферу, взаимодействует с сопряженной кислотой, в
результате чего образуется слабое основание, и рН среды мало изменяется:
NH4Cl + NaOH → NH4 OH + NaCl
NH4+ + OH- → NH4OH

3. Расчет рН буферных систем

В основе расчета рН буферных систем лежит закон действующих масс для


кислотно-щелочного равновесия.
В состав ацетатного буфера входит слабая уксусная кислота. Кислота ча-
стично диссоциирует на ионы
СН3СООН → СН3СОО - + Н+
К процессу диссоциации слабой уксусной кислоты можно применить закон
действующих масс и записать выражение для константы диссоциации:

[ СН 3СОО  ][ H  ]
Ка  [ CH 3COOH ]

Решив это уравнение соотносительно равновесной концентрации ионов во-


дорода, получим выражение:

Н   К CH
CH COO  
 3

COOH 
а
3

откуда следует, что концентрация ионов водорода зависит от константы дис-


социации кислоты и соотношения концентраций недиссоциированных мо-
лекул кислоты и анионов.
В присутствии второго компонента буферного раствора - сильного элек-
тролита CH3COONa кислотно-основное равновесие уксусной кислоты сдви-
нуто влево. Потому с достаточным приближением можно считать, что кон-
центрация недиссоциированных молекул кислоты равна исходной концен-
трации соли
[CH 3COOH ] = кислота
СН 3СОО  = Na   =[ СН 3 СООNa;] [соль] = [сопряженное основание]. То-

гда можно записать:


[кислота]
[ H  ]  Ka
[соль]
или в логарифмическом виде
[кислота ]
 Lg[ H  ]  1gKa  1g
[соль]
[кислота ]
pH  pKa  1g (3.1)
[соль]
[кислота ]
pH  pKa  1g
[соль]
Уравнение 3.1 называется уравнением Гендерсона-Хассельбаха.
По теории Бренстеда-Лоури, анион кислоты является для нее сопряженным
основанием. В более общем виде уравнение Гендерсона-Хассельбаха за-
писывается так:

[сопряженное основание]
pH  pKa  lg
[кислота]

Для аммиачной буферной системы NH4OH/NHАС1 концентрацию ионов во-


дорода можно рассчитать, исходя из константы кислотно-основного равнове-
сия:
NH4+  NH3+ H+

[ NH 3 ][ H  ]
Ka 
[ NH 4 ]
Отсюда уравнение Гендерсона-Хассельбаха для расчета рН аммиачного бу-
фера:
[ NH 4OH ]
pH  pKa  lg (3.2)
[ NH  4 ]
Уравнение можно представить в следующем виде:

[ NH 4 ]
pH  14  pKв  lg , pKв   lg K в ( NH 4 OH )
[ NH 4OH ]
Для фосфатной буферной системы уравнение кислотно-основного равно-
весия слабой кислоты (дигидрофосфата - иона):
[ HPO42 ][ H  ]
Ka   [ H 2 PO4 ]

[ H 2 PO4 ] , отсюда [ H ]  Ka ,
[ HPO42  ]
[ HPO42 ]
pH  pKa  lg
[ H 2 PO 4 ]

pKa   lg Ka ( H 2 PO4 )

4. Влияние разбавления и концентрирования на рН буферных


растворов.
Концентрация ионов водорода буферного раствора зависит от константа дис-
социации слабого электролита и соотношения концентраций кислоты и соли:
[кислота]
[ H  ]  Ka
[соль]
Если буферный раствор разбавить в 10-20 раз, то заметного изменения рН не
наблюдается, так как при разбавлении или концентрировании одновременно
изменяется концентрация обоих компонентов, а их соотношение остается та-
ким же, например:

[кислота ] 10 10[кислота ]
[ H  ]  Ka ; [ H  ]  Ka
[соль] 10 10[соль]

Конечно, некоторое изменение рН происходит, поскольку с уменьшением


концентрации, увеличивается степень диссоциации слабой кислоты, а умень-
шение концентрации слои также изменяет степень гидролиза. Однако это из-
менение весьма незначительно.

5. Буферная емкость

Способность буферных систем поддерживать постоянное значение рН не яв-


ляется беспредельной, она ограничена. Этот предел характеризуется буфер-
ной емкостью.
Буферная емкость В - это количество вещества эквивалента сильной кислоты
или сильного основания, которое следует добавить к 1 л буферного раствора,
чтобы изменить его рН на единицу.
Буферная емкость по кислоте (моль/л):
1 1 
n( HA) с HA   v( B)
Ba  z  z 
pH  v (буфера) ( pH 1  pH 2 )  v(буфера)

Буферная емкость по щелочи (моль/л):̀


1 1 
n( B ) с B   v ( B )
Ba  z  z 
pH  v (буфера) ( pH 1  pH 2 )  v(буфера)
где V(HA), V(B) - объемы добавленных кислоты НА или щелочи В, л;

1 1
n( HA) , n( B) - количество эквивалента кислоты или щелочи, моль;
z z
 1  1 
с HA  , с B  - молярная концентрация эквивалента кислоты или щелочи,
z  z 
моль/л;
pH 1 , pH 2 - значение рН буферного раствора до и после добавления кислоты
или щелочи;
( pH 1  pH 2 ) - разность рН по модулю
v(буфера) - объем буферного раствора, л.

Буферная емкость зависит от ряда факторов:


1. Чем выше концентрация компонентов буферного раствора, тем выше бу-
ферная емкость:
[кислота ]
[ H  ]  Ka
[соль]
10 ммоль
А) [ H  ]  Ka
10 ммоль
100 ммоль
Б) [ H  ]  Ka
100 ммоль

Если в оба раствора добавить 5 ммоль сильной кислоты, то:


10  5 15
А) [ H  ]  Ka  Ka   Ka  3
10  5 5
100  5 105
Б) [ H  ]  Ka  Ka   Ka  1,1
100  5 95
В первом случае соотношение компонентов буферного раствора изменится в
3 раза, а во втором - всего лишь в 1,1 раза.
2. Буферная емкость максимальна при соотношении компонентов, равном
единице.
Сравним буферные растворы, содержащие
50 ммоль кислоты
А) 1
50 ммоль соли
80 ммоль кислоты
Б) 4
20 ммоль соли
Если к обеим системам добавить одинаковое количество сильной кислоты
(по 10 ммоль), оно по-разному будет влиять на изменение концентрации ио-
нов водорода:
50  10
а) [ H  ]  Ka  Ka  1,5
50  10

80  10
6) [ H  ]  Ka  Ka  9
20  10
В первом случае отношение концентраций компонентов изменилось только в
1,5 раза, во втором - в 9 раз.
Поэтому при приготовлении буферных растворов обычно учитывают эти
факторы, то есть приготавливают буферные системы из достаточно концен-
трированных растворов с соотношением компонентов, близким к единице.
Лабораторная работа

Приготовление буферных растворов и изучение их свойств.

Цель работы: 1. Приготовить буферные растворы с различным соотношением


компонентов.
2. Изучить свойства буферных растворов.

Выполнение эксперимента.

Опыт №1.

Приготовить три фосфатных буферных раствора в пробирках объемом


по 10 мл каждый с соотношением компонентов согласно таблицы №1.
Таблица 1.
Растворы Соотно- Значе- Значение Значение Значение
шение ние рН рН рас- рН растворов рН
объемов раство- творов, после раз- растворов
(мл) ров, теорети- бавления после
опытное ческ. в 2 раза разбавления
в 3 раза

1 NaH2 9
PO4 1
Na2
HPO4
2 NaH2PO4 5
Na2HPO4 5
3 NaH2PO4 1
Na2HPO4 9

Растворы перемешать, затем добавить к каждому раствору 2 – 3 капли


раствора универсального индикатора.
После добавления универсального индикатора растворы не перемеши-
вать.
В каждой пробирке образуется окрашенный верхний слой раствора.
Окраску окрашенных слоев сравнивают с эталонной шкалой рН универсаль-
ного индикатора. Определенные значения рН каждого раствора записать в
табл.1.
Рассчитать значение рН каждого буферного раствора по уравнению:
V(Na2 HPO4)
рН = рКа + lg ------------------ , где Ка = 7,6 ·10-8
V( NaH2PO4)

Найденные теоретические значения рН записать в табл.1.

Опыт №2.
Приготовить три буферных раствора с соотношениями, указанными в
первом опыте. Затем каждый раствор (10 мл) разделить на две части по 5 мл.
В три пробирки по 5 мл каждого раствора добавить по 5 мл дистилирован-
ной воды, перемешать ( разбавление в 2 раза).
В оставшиеся три пробирки с 5 мл каждого раствора добавить по 10 мл
дистилированной воды. Растворы перемешать ( разбавление в 3 раза).
Во все пробирки добавить 2-3 капли раствора универсального индикато-
ра. Верхние окрашенные слои растворов сравнить с эталонной шкалой рН
универсальгого индикатора. Найденные значения рН записать в табл.1.

Сделать выводы из результатов опытов 1 и 2.

Тестовый контроль.

1.Какие из перечисленных веществ могут быть взяты для приготовления бу-


ферных растворов:
а) КОН + КС1; б) НС1 + КС1;в) Н2СО3 + NaНСО3 ;г) КС1 + NаNО3 ?
2.С какими значениями рН можно приготовить бикарбонатный буфер если
рКа ( н2со3 ) = 6,35:
а) рН = 2; б) рН = 9; в) рН = 4; г) рН = 7?
4. При концентрировании буферных систем их значение рН:
а) резко увеличивается; б) остается практически неизменным; в) резко
уменьшается; г) сохраняется абсолютно неизменным?
5. При добавлении к буферной системе небольших количеств сильной кисло-
ты ее значение рН:
а ) сохраняется неизменным; б) незначително понижается; в) резко возраста-
ет; г) незначительно повышается?
6. Буферные растворы состоят из:
а) из слабой кислоты и сопряженного с ней основания; б) из двух сильных
кислот; в) из сильной кислоты и сопряженного с ней основания; в) из слабой
кислоты и сильного основания?
7. Буферная емкость максимальна при соотношении компонентов:
а) больше единицы; б) равном единице; в) меньше единицы; г) равном 7?
8. Какая буферная система находится и в плазме и в эритроцитах:
а) бикарбонатная; б) гемоглобиновая; в) оксигемоглобиновая; г) протеино-
вая?
9. Значение рН плазмы в норме составляет:
а) 7,6; б) 7,4; в) 6,7; г) 4,7 ?
10.В результате гипервентиляции рН крови составило 7,5. Такое состояние
называют:
а) респираторным ацидозом; б) метаболическим алкалозом; в) респиратор-
ным алкалозом; г) метаболическим ацидозом?
11.Что в фосфатном буфере выполняет роль слабой кислоты:
а) гидрофосфат натрия; б) ортофосфорная килота; в) дигидрофосфат натрия;
в) фосфат натрия?

Литература

1. А.П.Садовничая, В.Г.Хухрянский, П.Я.Цыганенко “Биофизическая хи-


мия» - К.: «Вища школа», 1986.
2. А.С.Ленский «Введение в бионеорганическую и биофизическую химию" -
М.; «Высшая школа», 1989.
3. Ю.А.Ершов, В.А.Попков, А.С.Берланд, А.З.Книжник, Н.И. Михайличен-
ко « Бифизическая химия. Химия биогенных элементов» - М.: Высшая
школа», 1993.
4. В.А.Попков, С.А.Пузаков « Общая химия». – М.:ГЭОТАР – Медиа»,
2007.
5. А.С.Ленский, И.Ю.Белавин, С.Ю.Быликин «Биофизическая и бионеорга-
ническая хиия»-М.:»Медицинское информационное агенство», 2008.
6. Конспекты лекций.