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Sérodiagnostic

de Widal et Félix

Pr. A. Iyane SOW


Bactériologie – Virologie
Objectifs pédagogiques
 Expliquer le principe de la réaction

 Décrire la technique

 Interpréter les résultats


1. Généralités
- Diagnostic indirect (sérologique) salmonelloses
- Recherche d’anticorps spécifiques anti O, H et Vi des
salmonelles majeures
- Trois types d’antigènes :
/ Ag O : avec facteurs antigéniques parfois communs :
coagglutinations
/ Ag H : flagellaires chez les sérovars mobiles
/ Ag d’enveloppe : Vi (chez 3 sérotypes : S. Typhi, S.
Paratyphi C, S. Dublin)
NB: Ag Vi en grande quantité cache Ag O (qui devient
inagglutinable)
O1
O2

O8 O5
O17
O34 O7

O22
Salmonelle 1 Salmonelle 2

Sérum anti O de salmonelle 1 =


Ac anti O1, O2, O8, O17, O22
2. Principe
• Réaction d’agglutination : entre anticorps spécifique
(dans le sérum) et antigènes bactériens (suspensions :
commerce)

• Mettre en présence : dilutions croissantes du sérum à


tester et suspensions antigéniques des différents
sérotypes.

• Vérifier : présence d’agglutinats et dilutions


correspondantes
3. Technique
En deux temps :
- Rechercher présence d’anticorps anti O, H, Vi avec
sérums dilués au 1/100 et 1/200
- Vérifier taux limite d’agglutination avec dilutions
supérieures : 1/400, 1/800, 1/1600 …

Centrifuger

Suspension antigénique O
Sérum dilué au 1/100
En grains : agglutinats
Soulever le culot Réaction positive

En fumée :
Réaction négative
TO TH AO AH BO BH

Ag O et H de S. Typhi : TO et TH
Ag O et H de S. Paratyphi A : AO et AH
Ag O et H de S. Paratyphi B : BO et BH
Ag O et H de S. Paratyphi C : CO et CH
Ag Vi

Pour chaque suspension : faire les différentes dilutions


4. Interprétation

 Précise :
– Le sérotype en cause
– La période d’évolution

 Tient compte de la cinétique des anticorps (ou


agglutinines)
Titres Ac Agglutinines H

800

400
Agglutinines O/ Vi
200

J8 J10 S2 S3 Temps

Courbe d’évolution des agglutinines


Rendu des résultats :
TO = TH = AO = AH =
BO = BH =CO = CH =
Vi =

Interprétation des résultats :


1) TO = 0 TH = 800 AO = 0 AH = 0
BO = 0 BH = 0 CO = 0 CH = 0
Vi = 400

Salmonellose à Salmonella Typhi après 10 j (phase


d’état, 2e septennaire) avec TO caché par Vi
2) TO = 400 TH = 800 AO = 0 AH = 0
BO = 0 BH = 0 CO = 100 CH = 0
Vi = 0
Salmonellose à Salmonella Typhi à la phase d’état, avec
coagglutination CO

3) TO = 0 TH = 0 AO = 0 AH = 200
BO = 0 BH = 0 CO = 0 CH = 0
Vi = 0
Salmonellose à Salmonella Paratyphi A après guérison
4) TO = 0 TH = 0 AO = 0 AH = 0
BO = 0 BH = 0 CO = 0 CH = 800
Vi = 400
Salmonellose à Salmonella Paratyphi C à la phase d’état
(CO caché par Vi)

5) TO = 0 TH = 400 AO = 0 AH = 200
BO = 0 BH = 200 CO = 0 CH = 0
Vi = 0
Sujet vacciné au TAB depuis plus de 3 semaines
4) TO = 0 TH = 0 AO = 0 AH = 0
BO = 0 BH = 0 CO = 0 CH = 0
Vi = 400
. Salmonellose à Salmonella Paratyphi C au début (CO
caché par Vi)
ou
. Salmonellose à Salmonella Typhi au début (TO caché
par Vi)
ou
. Sujet vacciné au Typhim Vi
MERCI