UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA

MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE ACUICULTURA  E

INDUSTRIAS PESQUERAS
INFORME DE LA PRÁCTICA N°3
TÍTULO: siembra de cultivo:

Riveros Avila Jack Gary 20160414

FACULTAD Y ESPECIALIDAD:

Pesquería
HORARIO DE PRÁCTICA (DÍA Y HORA):

Martes de 11:00 am – 1:00 pm

PROFESORA DE LABORATORIO:
MARTINEZ ORDINOLA

FECHA DE PRÁCTICA:
17/09/19

FECHA DE ENTREGA:
22/09/2019

LA MOLINA, 2019
1- INTRODUCCION
En la naturaleza los microorganismos crecen exponencialmente en poblaciones
mixtas, habiendo innumerables especies que interactúan entre sí, para poder 
analizarlo se aísla y realiza cultivos en medios de cultivos una de ellas es el agar,
medio de cultivo más común.
Se cultivan para caracterizar su crecimiento, identificarlos y determinar sus actividades
metabólicas.
Existen diferentes tipos de medios de cultivo, que pueden clasificarse según sus
componentes químicos, naturaleza física y función. Algunos medios, por su
composición, permiten el crecimiento de una gran diversidad de microorganismos.
Otros en cambio, se utilizan para la selección de determinados grupos de organismos,
o se desarrollan para el estudio de determinadas pruebas fisiológicas o bioquímicas
Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en un
medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y
multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura
adecuada para el crecimiento. (Ortega M.2009)

2- OBJETIVOS
- Conocer las distintas técnicas de aislamiento de medios de cultivos
sólidos para la obtención de colonias aisladas .
- Aplicar exitosamente la técnica de siembra por agotamiento en placas
de Petri

3- MATERIALES Y METODOS
Trasplante, resiembra o repique

 Tubos con agar nutritivo en posición vertical

 Tubos con agar nutritivo en posición inclinada
 Tubos con agar TSI (triple azúcar hierro) en posición semi-inclinada
 Tubos con cultivos puros de m.o. de 18 a 24 horas.
 Asa y aguja de kolle, espátulas drigalsky, plumón.

. Cultivo por aislamiento

 .Placas con agar XLD (Agar xilosa lisina desoxicolato)
 Cultivo impuro
 Asa de kolle
Por agotamiento en superficie

 Placas con PCA (Plate count agar)

 Tubos conteniendo diluciones hechas a partir de una muestra de pescado
  Pipetas serologicas estériles de 1 ml.
 Espátulas drigalsky
 Modo operativo
 Tomar 3 placas conteniendo el medio PCA, señalarlas con las diluciones 10–1,
10-2 y 10-3.
Por derrame o vertido en placa
 Medio PCA
 Placas petri estériles
 Diluciones a partir del músculo de pescado
 Pipetas estériles

4- RESULTADOS
A) TRASPLANTE

Agar profundo o recto: se muestra un desarrollo en los

alrededores de la parte a la línea de inocuidad, de un
color blanquecino y un crecimiento liso. Alrededor del tubo no
presenta un desarrollo microbiano.
ESTREPTOCOCUS: alargada, forma globular y lineal
BACILLIUS: alargada, forma de burbujas

Agar inclinada (estrías): el desarrollo del

microorganismo es abundante con un borde
decrecimiento irregular, consistencia viscosa.
ESTREPTOCOCUS: zigzag grueso
BACILLIUS: zigzag delgado

Agar semi-inclinado(pico flauta): presenta un cambio de

coloración del medio mayormente en la superficie de la
parte inclinada, demuestra ser un indicador de pH.
ESTREPTOCOCUS: color amarillo rojizo
BACILLIUS: todo de color amarillo
Caldo nutritivo: como resultado se observa un presentación de desarrollo
escaso, al distribuirse solo en la parte superficial del medio formando un velo o
película.
ESTREPTOCOCUS: más turbio, concentrado en el fondo circular
BACILLIUS: menos turbio y circular

SIEMBRA POR AISLAMIENTO

TIPO: bacillos (6 individuos)
COLOR: Amarillo
Forma: circular

AISLAMIENTO POR DILUSION

Dilución 0.1 ml 0.01ml 0.001ml

A. De superficie 7830 ufc 2610 ufc 1305 ufc
B. Por derrame 15660 ufc 5220 ufc 2610 ufc

5- DISCUSIONES
La siembra por trasplante se realiza en un medio que contiene glucosa,
sacarosa y lactosa, hierro y un indicador que es el rojo fenol. En este medio se
siembra por picadura y estrías en superficie, como ya se conoce, para estudiar
los cambios que ocurrirán en superficie y profundidad. A lo largo del canal se
desarrollan los microorganismos, y según lo hagan en la parte superior o
inferior del tubo, estarán indicando su comportamiento frente a los azucares,
los cambios indican el desarrollo microbiano, esto se da mayormente en
siembra semi inclinado dando un color diferente puede vser un microorganismo
indicador de Ph. (Auqui V. 2014).
En medio semisólido se podrá comprobar si el microorganismo es o no móvil,
ya que en el primer caso se observará que el crecimiento difunde alrededor de
la zona donde se hizo la picadura, detectándose turbidez. Los microorganismos
inmóviles crecerán únicamente a lo largo de la picadura. Una siembra con ansa
o con un cierto movimiento de vaivén podría originar un patrón de crecimiento
que se interpretaría erróneamente como movilidad bacteriana. Este tipo de
siembra en picadura sirve, también, como otro método de conservación de
microorganismos anaerobios facultativos, Esto se presenta en siembra
profundo, ya que el desarrollo se da alrededor del hincón (FAO, 2019).
Las placas se incuban en estufa es un lugar adecuado, permitiendo que las
células aisladas experimenten un número suficiente de divisiones para formar
colonias visibles. Aunque cada colonia posiblemente representa un clon
derivado de una sola célula, no podemos asegurarlo. En el método de vertido en
placa, las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten en placa.
Algunas colonias quedarán embebidas en el agar y otras crecerán en la superficie. Las
colonias superficiales se extenderán y serán más grandes. Se analiza para la
separación o aislamiento de microorganismos en siembra por dilución.

6- CONCLUSION
Se logró observar el crecimiento de las bacterias streptotocus y bacilos en medios de cultivo
como agar nutritivo inclinado, agar nutritivo vertical y caldo nutritivo.

Se logró separar colonias con la técnica de estrías y observar colonias individuales con dos asas
a partir del inóculo de una mezcla de bacterias.

7- BIBLIOGRAFIA
- Auqui V., 2014, CULTIVO MICROBIOLÓGICO. UNIVERSIDAD
NACIONAL DEL CALLAOFACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y
RECURSOSNATURALES Callao, Perú
- FAO, 2019. SIEMBRA, AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE
MICROORGANISMOS MICROBIOLOGÍA GENERAL TRABAJO PRÁCTICO
Nº 2

8- EVALUACION DE LA PRACTICA 3

1. De 5 ejemplos de cepas

- Enterobacter aerogenes
- Pseudomona aeruginosa
- Salmonella typhimurium
- Listeria monocytogenes
- Listeria ivanuvii

2. Completar el cuadro
 Imagen Tipo de siembra Cuando se usa
Siembra por dilución y Es para aislar el miembro
derrame o vertido en predominante numéricamente  de
placa una población microbiana mixta.

Siembra de repique por Este método se utiliza para

picadura profunda estudiar la movilidad de los
microorganismos por medio de
cultivo. Semisólido.

Siembra por  vaciado en Método para contar

placa bacterias

Siembra en agar semi- Este método se hace con la

inclinado finalidad de estudiar los
cambios que ocurrirán en
superficie,

Siembra en medio agar Los micro organismos cromo

inclinado génicos pueden producir
pigmentos intracelulares que
son responsables de la
coloración de las colonias; la
mayoría de los microorganismos
son no-cromo génicos y
aparecen en tonalidades que
van desde el blanco al gris.

9- ARTICULO CIENTIFICO
file:///C:/Users/LUIS%20ANTONIO/Downloads/17102259-6%C2%BA-LABORATORIO-DE-
MICROBIOLOGIA-I.pdf