TECNICAS DE COLORACION BACTERIANA

BACTERIAS
Características
Son procariontes
El tamaño generalmente vario de 0,5 a 5 micrómetros
Solo pueden ser vistas con el microscopio
Sin el microscopio es posible ver las colonias
FORMAS Y ARREGLOS BACTERIANOS

BACILOS

COCOS

ESPIRAL

LOS COCOS PUEDEN UNIRSE EN COLONIAS

Formas esférica-coco
 División a lo largo del mismo plano, formando cadenas cortas
2 cocos juntos- diplococos
4-20 en cadenas- estreptococos
 División a lo largo de 2 planos diferente
 Tétradas
 División a lo largo de 3 planos
 Regularmente- sarcinas
 Irregularmente-estafilococos
LOS BACILOS PUEDEN UNIRSE EN COLONIAS
Forma de vara- bacilos
Dos bacilos- diplobacilos
Cadenas- estreptobacilos

PARED CELULAR
 Compuesta de peptidoglicano
 Peptidoglicano- está formado por “eneasetilglucosamina” NAG y
“eneasetilacidomuramico” NAM
Unido a cada NAM se encuentra un tetrapeptido, es decir 4 aminoácidos unidos
entre ellos mediante enlaces peptídicos

CADENA DE GLICANO
Es una cadena continua de NAG y NAM
 NAG NAM NAG NAM CADENA DE GLICANO

TETRAPEPTIDO

NAG NAM NAG

NAM

Enlace o cadena peptídica- une los tetrapeptido

Puente peptídico

CATEGORIZACION DE LA BACTERIAS
Dos grandes grupos
1. Bacteria gran positiva- tiñen purpura
2. Bacteria gran negativa- tiñen rojo
PARED CELULAR DE LA GRAM POSITIVA
Gruesa capa de peptidoglicano
 Contiene ACIDOS TEICOICOS- permite una mayor estabilidad en cada
cadena de glicano

ESTRUCTURAS ACIDOS LIPOTEICOICOS

Permiten una mayor estabilidad entre las cadenas de glicano y la membrana
plasmática
PARED CELULAR DE LAS GRAM NEGATIVAS
Tiene una membrana plasmática externa
ESPACIO PERIPLASMATICO
Espacio entre membrana y membrana

TINCIONES EN MICROBIOLOGIA
Una tinción es el resultado de la interacción entre un tinte con una superficie
El tinte es una molecula orgánica natural o sintética que imparte color a las
sustancias con las que entra en contacto
TINTE
CROMOGENOS
Benceno- solvente orgánico incoloro
Cromoforo- grupo químico que imparte color al benceno

AUXOCROMO
Grupo químico que le da al cromoforo la propiedad de ionizarse (+) (-)
TINTE BASICO
tiene carga positiva (catiónica), la porción de cromógeno interacciona con
superficies, componentes o compuestos celulares negativos
TINTE ACIDO
tiene carga negativa (anionica) gran afinidad por los compuestos positivos

TIPOS DE TINCION
TINCION SIMPLE- uso de un solo tinte
 Para visualización de formas (cocos, bacilos y espirilos) y arreglos
(cadenas, clúster, pares y tétradas)
Ejemplo: azul de metileno--- tiene cargas positivas
TINCION DIFERENCIAL- Uso de dos tintes o mas
Se puede categorizar (Gram positiva o Gram negativas)
Se podrá visualizar formas y arreglos
TINCION ACIDA- es para los bacilos alcohol resistente (BAAR) permite identificar
las microbacterium que ocasionan tuberculosis y lepra
nos permite la visualización de estructuras
tinción de flagelo
tinción de capsula
tinción de espora
tinción nucleares
PROCEDIMIENTO
se limpia el portaobjeto
se toma la muestra (ya sea un medio solido o un medio liquido)
se deja secar y se fija la muestra (para detener el metabolismo de la
bacteria y para que se adhiera al vidrio)
se tiñe
se lleva al microscopio al objetivo 100x con aceite de inmersión
TINCIONES DIFERENCIALES
PROCEDIMIENTO
verter cristal violeta por 1 minuto
agregar lugol por 2 minutos
se usa un descolorizante (alcohol acetona)
agregamos safranina alrededor de 20 segundos