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BIOLABO

www.biolabo.fr APOLIPOPROTEINE B
FABRICANT :
BIOLABO SAS, Test Immunoturbi di métri que
Les Hautes Rives
02160, Maizy, France Réactif pour le dosage quantitatif de l’Apolipoprotéine B (Apo B)
dans le sérum humain.

REF APOB 620E R1 1 x 50 mL R2 1 x 10 mL R3 1 x 1 mL

REF APOB 050E R1 1 x 20 mL R2 1 x 4 mL R3 1 x 1 mL

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SUPPORT TECHNIQUE ET COMMANDES
Tel : (33) 03 23 25 15 50
IVD USAGE IN VITRO
Fax : (33) 03 23 256 256

INTERET CLINIQUE (1) (4) (5) PRECAUTIONS


La concentration en Apo B à elle seule est parfaitement corrélée avec Les réactifs BIOLABO sont destinés à du personnel qualifié, pour un
l’apparition d’altérations athérosclérotiques vasculaires et a donc, usage in vitro.
conjointement avec un taux de cholestérol total douteux, une plus • Utiliser des équipements de protection (blouse, gants, lunettes).
grande valeur prognostique. • Ne pas pipeter avec la bouche.
L’Apo B est une des principales protéines composant les LDL • En cas de contact avec la peau ou les yeux, rincer abondamment à
(lipoprotéines de faible densité). Elle intervient dans la réaction avec l’eau et consulter un médecin.
les récepteurs LDL hépatiques et les membranes cellulaires. L’Apo B
• Les réactifs contiennent de l’azide de sodium (concentration < 0,1%)
est donc impliquée dans le transport du cholestérol du foie vers les
qui peut réagir avec les métaux tel que le cuivre ou le plomb des
vaisseaux sanguins. Une concentration élevée en Apo B est
canalisations. Rincer abondamment.
fréquemment rencontrée en cas d’altérations athérosclérotiques
• Chaque plasma individuel utilisé dans la fabrication des calibrants de
vasculaires et est donc significative d’un facteur de risque
protéines sériques a été analysé et a donné des résultats négatifs
d’athéroclérose.
pour l’antigène de surface de l’hépatite B (HBsAg), les anticorps de
l’hépatite C (anti-HCV) et du VIH 1 et VIH 2 par des tests
PRINCIPE (1) recommandés par la FDA.
Mesure photométrique de la réaction entre les antigènes de l’Apo B du • La fiche de données de sécurité peut être obtenue sur simple
spécimen et les anticorps anti-Apo B du réactif. demande.
L’intensité du trouble induit est mesurée en méthode point final à • Elimination des déchets : respecter la législation en vigueur.
Par mesure de sécurité, traiter tout spécimen, calibrant et contrôles
340 nm. comme potentiellement infectieux. Respecter la législation en vigueur.

PREPARATION DES REACTIFS


REACTIFS
Les réactifs sont prêt à l’emploi.
flacon R1 TAMPON (Concentration dans le test)
Tampon TRIS, NaCl pH 8,00 PRELEVEMENT ET PREPARATION DU SPECIMEN (2)
PEG 60 g/L Sérum fraîchement prélevé sur patient à jeun depuis > 12 heures.
Détergent 0,1 % Séparer du culot globulaire par centrifugation.
Azide de sodium 0,95 g/L Si le test ne peut pas être réalisé dans la journée, stocker le sérum à
2-8 C au maximum une semaine.
flacon R2 ANTI-APO B Pour une conservation prolongée, congeler le spécimen à -20° C au
Tampon HEPES, NaCl pH 7,40 maximum 6 mois.
Anti-APO B humain monospécifique (titré en méthode turbidimétrique)
Origine (Chèvre) INTERFERENCES (3)
Azide de sodium 0,95 g/L Toute turbidité ou présence de particules dans le spécimen peut
interférer avec le dosage. C’est pourquoi, des particules provenant
Flacon R3 A1B Calibrant Haut d’une coagulation incomplète ou d’une dénaturation des protéines
Plasma humain liquide stabilisé, supplémenté en Apo A1 et Apo B. doivent être éliminées par centrifugation avant dosage.
Autres composants : NaCl 9 g/L et azide de Sodium 0.95 g/L Aucune interférence significative constatée pour l’hémoglobine
La concentration du calibrant est spécifique du lot (3,2 g/L), la bilirubine (290 mg/L), les triglycérides (10 g/L), l’héparine
(voir § VALEURS DE CALIBRATION sur l’étiquette du flacon). (0,5 mg/mL), le fluorure de sodium (4,0 mg/mL), le citrate de sodium
(5,0 mg/mL) et l’EDTA (5,0 mg/mL).
Young D.S. a publié une liste des substances interférant avec le
STABILITE ET CONSERVATION dosage.
Stocker à 2-8° C et à l’abri de la lumière (Ne pas congeler).
• Avant ouverture, les réactifs sont stables jusqu'à la date de REACTIFS ET MATERIEL COMPLEMENTAIRES
péremption indiquée sur l’étiquette. 1. Equipement de base du laboratoire d’analyses médicales.
• Après ouverture et en l’absence de contamination : 2. Chlorure de Sodium à 9 g/L.
Le calibrant (flacon R3) bien rebouché dans son flacon d’origine et 3. Calibrants et contrôles.
stocké à 2-8°C est stable au moins 6 semaines.
Les réactifs sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur
l’étiquette à 2-8° C et 30 jours à bord de l’analyseur.

IVD REF LOT →


Fabricant Date de péremption Usage “In vitro” Température de conservation Référence Produit Consulter la notice Numéro de lot Conserver à l’abri de la lumière Suffisant pour diluer avec

Made in France Dernière version : www.biolabo.fr Version : 20/11/2014


CALIBRATION LIMITE DE LINEARITE
Utiliser le Calibrant Haut REF A1B CALH1 comme indiqué dans la La réaction est linéaire jusqu’à 3,00 g/L.
notice (§ MODE OPERATOIRE) pour réaliser la courbe de calibration. Au-delà, diluer le spécimen avec une solution NaCl à 9 g/L et refaire le
La valeur du calibrant est traçable sur un matériel de référence (SP1- dosage en tenant compte de la dilution dans le calcul du résultat. La
01, SP3-01) de l’IFCC (Standardisation OMS). limite de linéarité dépend du rapport de dilution spécimen/réactif.
La fréquence de calibration dépend des performances de l’analyseur
et des conditions de conservation du réactif. MODE OPERATOIRE
Il est recommandé de calibrer à nouveau dans les cas suivants : Les réactifs sont adaptables sur tous les systèmes ouverts et
1. Changement du lot de réactif.
photomètres.
2. Après opération de maintenance sur l’analyseur.
3. Les valeurs de contrôle sortent des limites de confiance indiquées, Des procédures spécifiques sont disponibles pour les analyseurs
même après utilisation d’un deuxième flacon de contrôle fraîchement automatiques. Contacter le service technique BIOLABO.
reconstitué.
Ramener les réactifs et spécimens à température ambiante.
CONTRÔLE DE QUALITE
• APO A1B Contrôle REF A1B CONT1. Ne pas diluer les contrôles et spécimens
• Tout autre sérum de contrôle titré pour cette méthode.
Courbe de calibration :
• Programme externe de contrôle de la qualité.
Réaliser la courbe de calibration par dilutions successives au 1/1, 1/2,
Il est recommandé de contrôler dans les cas suivants :
1/4, 1/8, 1/16, du Calibrant Haut REF A1B CALH1 dans NaCl 9 g/L .
• Au moins un contrôle par série.
Utiliser NaCl 9 g/L pour déterminer le point zéro.
• Au moins un contrôle par 24 heures.
• Changement de flacon de réactif.
Test:
• Après opérations de maintenance sur l’analyseur.
Lorsqu’une valeur de contrôle se trouve en dehors des limites de Blanc Calibrants Dosage
confiance indiquées, appliquer les actions suivantes :
1. Répéter l’opération en utilisant le même contrôle. Tampon (Flacon R1) 250 µL 250 µL 250 µL
2. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, préparer un
NaCl 9 g/L 3 µL
contrôle fraîchement reconstitué et répéter le test.
3. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, utiliser un autre Calibrant dilué 3µL
calibrant ou un calibrant fraîchement reconstitué et répéter le test.
4. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, calibrer à nouveau Spécimen dilué 1/10 3 µL
en utilisant un autre flacon de réactif et répéter le test.
5. Si la valeur obtenue reste en dehors des limites, contacter le service Mélanger. Lire les absorbances (Abs A1) des calibrants, contrôles et essais
technique BIOLABO ou le revendeur local. à 340 nm contre le blanc.

Anti ApoB (Flacon R2) 50 µL 50 µL 50 µL


INTERVALLES DE REFERENCE (6)
Mélanger. Laisser reposer exactement 5 minutes à température ambiante.
Les valeurs mentionnées ci-dessous sont données à titre indicatif.
Lire les absorbances (Abs A2) des calibrants, contrôles et essais à 340 nm
Elles peuvent varier légèrement selon les populations étudiées :
contre le blanc.
Population Valeurs (g/L)
CALCUL
Adulte 0,46-1,74
Le résultat est déterminé d’après la formule suivante :
Enfants 0,41-1,39
Il est recommandé à chaque laboratoire de définir ses propres valeurs Calculer ∆Abs (Abs A2 – Abs A1) des calibrants, contrôles et essais.
de référence pour la population concernée.
Tracer la courbe de calibration “Concentration = f(∆Abs)”.
Reporter les absorbances des contrôles et essais sur le graphe et lire
PERFORMANCES les concentrations (g/L).
Les études de répétabilité, de reproductibilité et d’exactitude du réactif Si l’absorbance lue pour un spécimen est supérieure à l’absorbance
ont été réalisées sur Cobas Mira® du Calibrant le plus concentré, il convient de diluer à nouveau le
spécimen et refaire le dosage.
Précision :
CV % Taux faible Taux moyen Taux élevé REFERENCES
(1) TIETZ N.W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Répétabilitén=10 1,4 2,5 2,8 Ashwood, W.B. Saunders (1999) p.822, p.853-855, p.1802.
(2) Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N.W. TIETZ (1995) p. 68-71.
Reproductibilité n=10 2,8 3,8 3,7 (3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1990)
p.3-61à 3-65
(4) Kottke B. A. et al., 61,(1986), p.313-320
Exactitude : Valeur Attendue Mesurée (5) Naito H. K., J. Clin. Immunoassay, 9, (1986), p.155
rd
[g/L] (6) TIETZ N.W. Clinical guide to Laboratory Tests, 3 Ed., W.B. Saunders
Bio Rad 1 0,48 (0,38-0,57) 0,50 (1995) p68
Bio Rad 2 1,00 (0,80-1,20) 1,03
Bio Rad 3 1,50 (1,20-1,80) 1,51

Limite de détection : 0,01 g/L (Hitachi 911®)


Sensibilité: > 0,315 à 2,00 g/L (Hitachi 911®)
> 0,150 à 1,00 g/L (Hitachi 911®)
Spécificité : monospécifique

Effet de prozone : Au-delà de 12 g/L (Hitachi 911®)


Comparaison avec une méthode immunoturbidimétrique (Behring) sur
Cobas Mira® : Y = 0,92x + 2,96 r = 0,904 n = 35
Domaine testé : 0,00 à 3,00 g/L

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