“AÑO DEL BUEN SERVICIO AL CIUDADANO”

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TEMA : Medio de cultivo, crecimiento y genética bacteriana.
FACULTAD : Medicina Humana
ESCUELA : Enfermería
ASIGNATURA : Microbiología y Parasitología

2017

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 ÍNDICE
Pg.

4 Dedicatoria………………………………………………………………………………………………………………………03
4 Introducción…………………………………………………………………………………………………………………….04
4 Medio de cultivo………………………………………………………………………………………………………………05
Concepto…………………………………………………………………………………………………………………………05
Clasificación…………………………………………………………………………………………………………………….05
Medios de cultivo comunes……………………………………………………………………………………………..07
4 Crecimiento bacteriano…………………………………………………………………………………………………...08
Ciclo normal del crecimiento……………………………………………………………………………………………10
4 Genética bacteriana…………………………………………………………………………………………………………12
Recombinación genética………………………………………………………………………………………………….13

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 DEDICATORIA

Al creador de todas las cosas, el que nos ha dado la

fortaleza para continuar con nuestras metas; por
ello, con toda nuestra humildad que de nuestro
corazón puede emanar, dedicamos primeramente
este trabajo a Dios.
De igual forma, dedicamos el presente trabajo a
nuestros padres que nos han sabido formar con
buenos sentimientos, hábitos y valores, lo cual nos
ha ayudado a salir adelante en los momentos más
difíciles.

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 INTRODUCCIÓN
En el presente trabajo monográfico

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 MEDIO DE CULTIVO, CRECIMIENTO Y
GENÉTICA BACTERIANA

 MEDIO DE CULTIVO
Concepto: Un medio de cultivo es una técnica de laboratorio que consta de
un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en
condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas.

Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en
condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una
amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más importantes
para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e
hidrógeno.

Clasificación de los medios de cultivo

Según su origen:

a) NATURALES: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen

animal o vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composición
química no se conoce exactamente.

b) SINTÉTICOS: son los medios que contienen una composición química definida
cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
reproducibles.

c) SEMISINTÉTICOS: son los sintéticos a los que se les añaden factores de

crecimiento bajo una forma de un extracto orgánico complejo, como por ejemplo
extracto de levadura.

Según su consistencia:

a) LÍQUIDOS: se denominan caldos y contienen los nutrientes en solución acuosa.

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b) SÓLIDOS: se preparan añadiendo un agar a un medio líquido (caldo) a razón
de 15g/litro. El agar es una sustancia inerte polisacárido (hidrato de carbono) que
se extrae de las algas.

c) SEMISÓLIDOS: contienen 7,5 g de agar /litro de caldo. Se utilizan para

determinar la motilidad de las especies en estudio. Actualmente se encuentran
disponibles comercialmente con el agregado de agar.

Según su composición:

a) COMUNES O UNIVERSALES: su finalidad es el crecimiento de la mayor parte

de los microorganismos poco existentes. Es el medio más frecuentemente
utilizado para mantener colonias microbianas. Por ejemplo: agar común o caldo
común.

b) ENRIQUECIDOS: están compuestos de un medio base como apoyo del

crecimiento al cual se le puede agregar un gran exceso de nutrientes como
suplementos nutritivos, por ejemplo: sangre, suero, líquido ascítico, etc. Se utiliza
para microorganismos que tienen grandes exigencias nutricionales.

c) SELECTIVOS: Este tipo de medio sólo permite el crecimiento de un grupo de

microorganismos e inhibiendo el de otros. Se utiliza para seleccionar y aislar
microorganismos a partir de poblaciones mixtas.

d) DIFERENCIALES: son medios de cultivos que nos permiten distinguir entre

varios géneros y especies de microorganismos. Por ejemplo si al medio se le ha
añadido un carbohidrato y un indicador; y la bacteria que se cultiva es capaz de
fermentar dicho carbohidrato, se produce una acidificación del medio con el
consiguiente viraje de color del indicador por el cambio de pH.

e) DE ENREQUESIMIENTO: El enriquecimiento es una técnica que utiliza un

medio selectivo líquido para permitir el desarrollo de un microorganismo a partir de
una muestra que contiene una gran variedad de microorganismos. Así, aquellos
microorganismos para los que el ambiente sea más favorable crecerán más que
los otros y finalmente serán predominantes.

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f) DE TRANSPORTE: son utilizados para asegurar la viabilidad de la bacteria sin
multiplicación significativa de los microorganismos desde el momento de su
extracción hasta su posterior estudio. Se utilizan generalmente cuando las
muestras deben ser enviadas de un laboratorio a otro.

Condiciones generales para el cultivo:

 Disponibilidad de nutrientes adecuados.

 Consistencia adecuada del medio
 Presencia (o ausencia) de oxígeno y otros gases
 Condiciones adecuadas de humedad
 Luz ambiental
 Ph
 Temperatura
 Esterilidad del medio

Medios de cultivos comunes:

Son los más corrientemente utilizados, y aunque no vamos a enumerarlos todos,

sí son los más conocidos en un laboratorio de Microbiología.

4 Agar nutritivo: Es un medio de cultivo usado normalmente como rutina

para todo tipo de bacteria. Es muy útil porque permanece solido incluso a
relativas altas temperaturas
4 Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza además para la
investigación de los diversos tipos de hemólisis (α, ß o gamma). Se utiliza
para el crecimiento de estreptococos.
4 Agar C.L.E.D: El medio C.L.E.D. (Cistina Lactosa Electrólito Deficiente)
está recomendado para el recuento e identificación presuntiva de los
microorganismos de las vías urinarias.
4 Agar S.S: Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella y de
algunas especies de Shigella, a partir de heces, alimentos y otros
materiales en los cuales se sospeche su presencia.

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4 Agar Hektoen: Es un medio más diferencial y menos selectivo que el agar
SS. Se utiliza para facilitar el aislamiento de las enterobacterias.
4 Agar Tripticase de soja: Es un medio utilizado para el crecimiento de
gérmenes exigentes, como Brucella, Neisseria o Streptococcus. Es un
medio recomendado para controles de esterilidad. Permite el cultivo de
aerobios, anaerobios y microaerófilos.
4 Agar chapman o manitol salino: Permite el crecimiento de un
determinado grupo de bacterias mientras que inhibe el crecimiento de otras.
4 Agar Baird-Parker: Permite el crecimiento de estafilococos coagulasa
positivos, a la vez que los diferencia del resto.
4 Agar Levine o EMB: El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio
utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram
negativos. Este medio también es conocido como Agar EMB por sus siglas
en inglés.
4 Agar Schaedler: Es un medio con sangre y vitamina K muy adaptado para
el cultivo de anaerobios.
4 Agar Gardnerella: Agar con sangre humana más una mezcla de
antibióticos que permiten la observación de colonias betahemolíticas
características de Gardnerella vaginalis.

 CRECIMIENTO BACTERIANO
Se puede considerar como crecimiento al incremento de células individuales
por un lado, y por otro lado se puede considerar al crecimiento del número de
células (proliferación de la población). En lo que se refiere al crecimiento de
células individuales, este consiste en el aumento del tamaño y peso de las
células que precede a la división celular. Esta división trae aparejada un
aumento en el número de células (proliferación de la población). Las bacterias
se dividen por fisión binaria, a través de la una cual célula madre al alcanzar un
determinado volumen se divide dando dos células hijas. El proceso de fisión
binaria consiste en la autoduplicación del material hereditario seguido de la

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 repartición en las dos células hijas, las que se separan por estrangulamiento de
la membrana celular y formación de la pared. (Fig. 1)

Fig. 1.
División binaria de células procariotas.

Basado en el concepto que una célula se divide dando dos células hijas, y éstas a
su vez se vuelven a dividir dando dos células cada una de ellas, se presenta en el
siguiente cuadro la proliferación de una población de células a partir de una sola,
con un tiempo de generación de 30 minutos.

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Se conoce como tiempo de duplicación generacional al tiempo en que tarda una
población en duplicar su número.
Los tiempos de duplicación varían según el microorganismo del que se trate. Por
ejemplo:
 Eschericha coli 0,35 hs
 Rhizobium meliloti 1,8 hs
 Nitrobacter sp aproximadamente 20 hs
Ciclo normal del crecimiento
Las poblaciones microbianas raramente mantienen un crecimiento exponencial
prolongado. Si ello ocurriera en poco tiempo la tierra estaría tapada de una masa
microbiana mayor que la de la tierra misma. El crecimiento está normalmente
limitado por el agotamiento de nutrientes o por la acumulación de productos del
mismo metabolismo microbiano, que les son tóxicos a la población. La
consecuencia es que el crecimiento al cabo de un cierto tiempo llega a disminuir
hasta detenerse.

Es posible distinguir cuatro fases en el crecimiento bacteriano:

1) Fase de latencia o de retardo.

2) Fase exponencial.

3) Fase estacionaria.

4) Fase de muerte.

En la fase de latencia existe un aparente reposo en el que las células sintetizan

las enzimas necesarias para la actividad metabólica que deben llevar adelante.
Cuando se hacen mediciones del número de células en distintos tiempos dentro
de esta fase, el valor no cambia sustancialmente. En cambio, interiormente las
células trabajan activamente adaptando el equipo enzimático al medio de cultivo.
La bacteria se prepara para hacer uso de los nutrientes que este medio le aporta,
por lo tanto es la fase de adaptación al medio, con aumento de la masa celular
pero no del número de células. La edad del inóculo va a influir en el tiempo de
latencia en el medio fresco debido a la acumulación de materiales tóxicos y a la

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falta de nutrientes esenciales dentro de la célula durante el crecimiento anterior.
En general, inóculos viejos alargan la fase de latencia.

Pasado este período, el cultivo entra en la denominada fase de crecimiento

exponencial, donde la velocidad de crecimiento es máxima. La velocidad de
crecimiento que alcanza un cultivo, depende del tipo de microorganismo que se
trate y diversos factores ambientales como son la temperatura, el pH, oxigenación,
etc.

La velocidad de crecimiento comenzará a disminuir hasta hacerse nula cuando

alcance la fase estacionaria, ya que cambios en la composición y concentración
de nutrientes entre el cultivo del inóculo y el medio fresco pueden desencadenar el
control y la regulación de la actividad enzimática.

Esta fase se presenta por agotamiento del suministro de algún nutriente esencial o
por acumulación de productos metabólicos que sean tóxicos. También puede ser
por la disminución de la oxigenación o cambios en las condiciones de pH del
medio de cultivo (acidificación o alcalinización):

En esta fase se equilibran el número de células nuevas con el número de células

que mueren.

Por último, el cultivo entra en la fase de muerte, en la que el número de células

que mueren se va haciendo mayor.

 GENÉTICA BACTERIANA
El material genético bacteriano es muy simple: un solo cromosoma (ADN doble
cadena circular), plásmidos y transposones.

- Transposones: porciones de ADN que pueden moverse de un lugar a otro del

cromosoma. No son independientes al cromosoma bacteriano y se replican con él.

La reproducción es principalmente asexual por diversos procedimientos: fisión

binaria, gemación, fragmentación múltiple. Generalmente las bacterias se

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reproducen por bipartición: Tras la duplicación del ADN, la pared bacteriana crece
hasta formar un tabique transversal separador de las dos nuevas bacterias.

Pero además de este tipo de reproducción asexual, las bacterias poseen unos
mecanismos de reproducción sexual o parasexual, mediante los cuales se
intercambian fragmentos de ADN.

Los cambios genotípicos pueden darse por tres mecanismos:

a. Transposición

b. Mutación

c. Recombinación

Recombinación genética:
Proceso por medio del cual se forma un nuevo cromosoma recombinante,
diferente al de las células progenitoras.
Los microorganismos poseen diversos tipos de recombinación. La forma más
común es la recombinación general, que consiste en un intercambio recíproco
entre un par de secuencias homólogas de ADN.
La meiosis no existe entre los organismos bacterianos, sin embargo, puede darse
recombinación tras la transferencia horizontal de genes, en donde los genes de un
organismo maduro e independiente se transfieren a otro.
En bacterias es una transferencia unidireccional, en eucariotas tiende a ser
recíproca. El desplazamiento del ADN de una bacteria donadora al receptor puede
producirse de 3 mecanismos:
1. Conjugación: transferencia directa entre dos bacterias que han establecido
contacto físico temporal.
2. Transformación: transferencia de un fragmento de ADN desnudo.
3. Transducción: Transporte de ADN bacteriano por bacteriófagos.
CONJUGACIÓN:

Proceso de transferencia de información genética desde una célula donadora a

otra receptora, promovido por determinados tipos de plásmidos

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Requiere contactos directos entre ambas células, con intervención de estructuras
superficiales especializadas y de funciones específicas. (Pili sexual)

TRANSFORMACIÓN:

Captación de ADN desnudo libre en el medio, con la posterior recombinación con

el genoma de la célula. Tras la transformación, la célula que ha recibido el ADN se
suele denominar transformante.
Dos tipos:
Natural: ADN procede de una bacteria donadora y es un proceso aleatorio.
Cuando las bacterias se lisan, liberan cantidades considerables de ADN al medio
que las rodea, estos fragmentos liberados pueden ser relativamente grandes y
contener diversos genes. Si un fragmento contacta a una célula competente dicho
fragmento puede unirse a la célula y se transporta a su interior.
Los fragmentos del donador compiten entre sí. Sólo se ha descrito en ciertos
géneros bacterianos: Streptococcus, Bacillus, Thermoactinomyces Haemophilus,
Neisseria, Moraxella, Acinetobacter, Azotobacter y Pseudomonas.
Artificial: se lleva a cabo en el laboratorio. Diversas técnicas, que aumentan la
permeabilidad de la membrana al ADN. Mediante la utilización de plásmidos ya
que no se degradan fácilmente como los fragmentos lineales y son capaces de
replicarse dentro del huésped.
TRANSDUCCIÓN:

Los Bacteriófagos (virus bacterianos) participan en este tipo de transferencia

génica. Después de infectar a la célula huésped, el fago toma el control y lo obliga
a fabricar numerosos copias del virus, luego la célula libera los nuevos fagos. Este
ciclo denominado ciclo lítico consta de 4 fases:
1. Adsorción: La partícula viral se fija a un receptor específico de la superficie
bacteriana.
2. Penetración: El material genético del virus (ADN bicatenario) penetra la célula,
se producen ácidos nucleicos y proteínas del virus.
3. Ensamblaje: El ácido nucleico se “empaqueta” en la cápside proteica viral.
4. Lisis: La célula se rompe para liberar los nuevos fagos.
Muchos fagos de ADN, son capaces de establecer una relación diferente: luego de
la adsorción y penetración, el genoma viral no toma el control del huésped ni lo
destruye, al tiempo que produce nuevos fagos. El genoma permanece en el
interior de la célula y se reproduce junto con el cromosoma bacteriano.

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Se origina un clon de células infectadas. Este proceso se conoce con el nombre
de lisogenia. La forma latente del genoma viral que permanece en la célula
huésped se denomina profago y suele estar integrado al genoma bacteriano.
La transducción es la transferencia de genes bacterianos por medio de virus. Se
produce por la incorporación de genes bacterianos al interior de la cápside de un
fago como consecuencia de errores cometidos durante el ciclo vital del virus. El
virus que tiene estos genes los inyecta a otra bacteria.

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CONCLUSIONES

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 BIBLIOGRAFÍA

 https://www.ecured.cu/Medio_de_cultivo_(Microbiolog%C3%ADa)
 https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-
un-laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf
 http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp4.pdf
 http://www.fca.uner.edu.ar/files/academica/deptos/catedras/microbiologia/un
idad_3_crecimiento_bacteriano.pdf
 http://www.unavarra.es/genmic/microgral/Tema%2002.-%20Cultivo%20de
%20microorganismos.pdf
 https://es.wikipedia.org/wiki/Crecimiento_bacteriano
 https://es.slideshare.net/trecemicro/genetica-bacteriana
 http://geneticabacteriana.blogspot.pe/

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