Открыть Электронные книги
Категории
Открыть Аудиокниги
Категории
Открыть Журналы
Категории
Открыть Документы
Категории
Материалы конференции
Минск
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси, 2016
УДК 577.21
УДК 577.21
Секретариат
СОДЕРЖАНИЕ
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Содержание 5
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
6 Содержание
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Содержание 7
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
8 Содержание
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Содержание 9
С.И. Гордей, Е.Н. Кулинкович
Создание новых форм яровой пшеницы с использованием внутривидовой, отдаленной
гибридизации, эмбриокультуры in vitro и экспериментального мутагенеза для селекции
на урожайность, болезнеустойчивость и качество продукции................................................................ 103
Т.Е. Денискова, А.В. Доцев, М.И. Селионова, Г. Брем, К. Виммерс, Х. Рейер, Е.А. Гладырь,
А.-М.М. Айбазов, Н.А. Зиновьева
ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ ПОРОД ОВЕЦ ДАГЕСТАНА НА ОСНОВЕ полногеномного
SNP-СКРИНИНГА........................................................................................................................................................................... 104
Т.В. Долматович, А.А. Булойчик, С.И. Гриб
Молекулярный анализ сортов мягкой яровой пшеницы на наличие генов устойчивости
к бурой ржавчине..........................................................................................................................................................105
Н.И. Дробот, Е.А. Сычева, Е.Б. Бондаревич, Л.А. Соловей, Н.И. Дубовец
АНАЛИЗ АЛЛЕЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ГЕНОВ ХОЗЯЙСТВЕННО-ЦЕННЫХ ПРИЗНАКОВ У РЕКОМБИНАНТНЫХ
ЛИНИЙ ТРИТИКАЛЕ..................................................................................................................................................................... 106
М. Дука, С. Клапко, О. Табэрэ, Л. Цапу
РАСПРОСТРАНЕНИЕ ЗАРАЗИХИ (OROBANCHE CUMANA WALLR.) НА ПОЛЯХ ПОДСОЛНЕЧНИКА
В РЕСПУБЛИКЕ МОЛДОВА..........................................................................................................................................107
Р.С. Ержебаева, А.М. Абекова, А. Васим
ПОЛУЧЕНИЕ ДИГАПЛОИДНЫХ ЛИНИЙ ПШЕНИЦЫ И ТРИТИКАЛЕ МЕТОДОМ КУЛЬТУРЫ ПЫЛЬНИКОВ.... 108
О.И. Зайцева, А.Т. Бабкенов, Е.К. Каиржанов, С.А. Бабкенова, В.А. Лемеш
АЛЛЕЛЬНОЕ РАЗНООБРАЗИЕ ГЕНОВ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ГЛЮТЕНИНОВ У МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ....109
С.Т. Захидов, Н.М. Муджири, В.М. Рудой, О.В. Дементьева, И.А. Зеленина, Т.Л. Маршак
ПРЯМЫЕ И КОМБИНИРОВАННЫЕ ДЕЙСТВИЯ НАНОЧАСТИЦ ЗОЛОТА НА ГЕНЕТИЧЕСКИЕ СТРУКТУРЫ
МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК МЫШЕЙ................................................................................................................... 110
С.И. Ивановская, В.Е. Падутов, Д.И. Каган
УРОВЕНЬ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ В ДРЕВОСТОЯХ РАЗЛИЧНОГО
КЛАССА ВОЗРАСТА....................................................................................................................................................... 111
Д.И. Каган, В.Е. Падутов, В.М. Арнольбик, С.И. Ивановская, Т.С. Маркевич
ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ЛОКУСА MT15-D02 PICEA ABIES (L.) KARST. НА ТЕРРИТОРИИ НАЦИОНАЛЬНОГО
ПАРКА «БЕЛОВЕЖСКАЯ ПУЩА».............................................................................................................................................112
В.Н. Кипень, А.О. Рябцева, С.А. Котова, Н.В. Журина, А.И. Ганджа, И.С. Цыбовский
КЛАССИФИКАЦИЯ КОММЕРЧЕСКИХ ПОРОД ДОМАШНИХ СВИНЕЙ C УЧЕТОМ ПОЛИМОРФНЫХ
ВАРИАНТОВ В ГЕНЕ МЕЛАНОКОРТИНА MC1R........................................................................................................ 113
М.С. Кобозева, Р.Б. Ахмедов, В.В. Заякин, И.Я. Нам
ИНФОРМАТИВНОСТЬ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА БИОТИПОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ
АНТРАКНОЗА ЛЮПИНА............................................................................................................................................... 114
З.А. Козловская
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВИДОВОГО РАЗНООБРАЗИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИХ РЕСУРСОВ РАСТЕНИЙ В СОЗДАНИИ
СОРТОВ ПЛОДОВЫХ КУЛЬТУР................................................................................................................................... 115
Е.В.Колбанова
Определение устойчивости смородины чёрной к почковому клещу с использованием
молекулярного маркера гена Се...................................................................................................................... 116
Е.В. Колбанова
ОПТИМИЗАЦИЯ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСА РЕВЕРСИИ СМОРОДИНЫ ЧЁРНОЙ (BLACKCURRANT REVERSION
VIRUS, BRV) ....................................................................................................................................................................................117
О.О. Коломиец, С.В. Глушен
ОЦЕНКА ПРОЛИФЕРАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК МЕТОДОМ ДИНАМИЧЕСКОЙ ДНК-ЦИТОМЕТРИИ...... 118
О.Ю. Конева, Е.А. Ровба, А.М. Слуквин, Н.Б. Кульжанов
ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ SSR-PCR В ИССЛЕДОВАНИЯХ У СТЕРЛЯДИ (ACIPENSER RUTHENUS L.) ............ 119
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
10 Содержание
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Содержание 11
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
12 Содержание
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1
Молекулярная генетика, геномика
и биоинформатика
14 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 15
О.Ю. Баранов
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
16 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 17
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
18 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 19
Н.В. Воронова, Ю.В. Бондаренко, М.М. Воробьева, П.Ю. Кветко, А.В. Кривая
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
20 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 21
Льноволокно является важным сырьем как для инновационной, так и для традиционной
индустрии. Ценные селекционные сорта льна, продуцирующие высококачественное волокно,
были получены благодаря длительной селекции данной культуры. Льноволокно относят к лу-
бяному волокну, которое формируется за счет гипертрофии клеточной стенки клеток данной
ткани. Биоинженерное улучшение льноволокна сдерживается недостатком фундаментальных
знаний о биогенезе волокон льна. Исследования профиля экспрессии генов, ассоциированных
с биогенезом клеточной стенки у различных подвидов льна, позволят идентифицировать ге-
ны, ответственные за качество льноволокна. Цель данной работы – оценка экспрессии генов,
включенных в биогенез волокон льна (CesA- и Csl-генов), методами количественной ПЦР и
РНК-секвенирования.
Методами биоинформационного анализа в геноме льна обнаружены 38 последователь-
ностей генов, которые имеют домен Pfam 03552 (кодируют CesA или Csl-гены). В результате
филогенетического анализа данные гены были отнесены к группам CesA, CslD, CslB, CslE,
CslG. Для детекции Csl-генов льна методом ПЦР созданы праймеры (по одной паре для CslB
и CslE, две – для генов CslG и семь – для CslD). Уровень экспрессии CesA- и Csl-генов оцени-
вали в количественной ПЦР.
Оценку экспрессии CesA- и Csl-генов проводили на стадии быстрого роста в стебле льна-
долгунца (subsp. elongatum Vav. et Ell., сорт Блакіт) и льна-прыгунца (subsp. crepitans Boenn.,
ландраса Dehiscent.). Наибольшим уровнем экспрессии среди CesA-генов обладали гены, ас-
социированные с вторичной клеточной стенкой (CesA4 и CesA7). Cреди Csl наибольшим уров-
нем обладали CslD-гены из подгруппы, обозначенной нами D2D3, они экспрессировались на
уровне CesA-генов вторичной клеточной стенки. Гены CslG экспрессировались в 2,2–4,9 раз,
а гены CslE в 16,9–37,5 раз слабее CesA-генов. Между образцами льна различных подвидов
статистически значимые различия были обнаружены в экспрессии генов CslD1 (Lus10000755,
Lus10011736) и CslG4 (Lus10023057, Lus10032415, Lus10032416, Lus10023056).
Для анализа данных РНК-секвенирования использовали проект PRJNA251268, который
содержал профили экспрессии флоэмы и ксилемы стебля масличного льна сорта Bethune. Был
использован инструмент псевдо-выравнивания «kallisto» и R-пакет Sleuth для вычисления
значения TPM для всех указанных выше генов, а также для нормализации результатов и DE-
анализа. По данным РНК-секвенирования, уровень экспрессии CesA-генов, отвечающих за
синтез первичной клеточной стенки, примерно одинаковый в ксилеме и флоэме, а экспрессия
CesA-генов вторичной клеточной стенки в 7–8 раз выше в ксилеме. Многие Csl-гены, по дан-
ным РНК-секвенирования, не экспрессируются или экспрессируются слабо как в ксилеме, так
и во флоэме, в общем пуле Csl-генов доминируют CslD-гены. Гены CslB и CslG демонстриро-
вали более высокий уровень экспрессии во флоэме по сравнению с ксилемой.
Работа выполнена при поддержке НАН Беларуси – договор Б15УК/А-041 и БРФФИ до-
говор – Б15-147 и Б15М-101.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
22 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
М.В. Глазков
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 23
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
24 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
1
Всероссийский институт животноводства им. Л.К.Эрнста
Россия, 142132, Московская обл., Подольский р-н, п. Дубровицы, 60
e-mail: asnd@mail.ru
2
Институт биологических проблем криолитозоны СО РАН
Россия, 677000, г. Якутск, пр. Ленина, 41
3
Institut fur Tierzucht und Genetik, University of Veterinary Medicine, Austria, Vienna
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 25
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
26 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 27
Плацента является источником ряда регуляторных факторов (ИЛ-2, ИЛ-10, ТРФβ, ИДО),
являющихся индукторами экспрессии транскрипционного фактора Foxp3, определяющего су-
прессорный эффект Т-регуляторных клеток (Т-рег). Ранее нами в экспериментальной модели
ревматоидного артрита – адъювантном артрите (АА) – были получены данные, подтвержда-
ющие определенную связь клинической манифестации патологии с изменением содержания
Т-рег СD4+СD25+ клеток в лимфоидных органах мышей до и после применения криоконсер-
вированных клеток плаценты. В контексте изучения механизма реализации иммунорегуля-
торного действия нативной и криоконсервированной в различных режимах суспензии клеток
плаценты (СКП) целью данной работы было определение экспрессии гена foxp3 в клетках се-
лезенки животных с АА до и после введения СКП.
Работа выполнена на мышах линии СВА/Н. СКП получали путем гомогенизации плаценты
на 18–19-е сутки гестации. Криоконсервирование СКП проводили под защитой 10% раствора
диметилсульфоксида (суспензия КД) или пропандиосахароля (суспензия КП). АА индуцировали
субплантарным введением полного адъюванта Фрейнда. Развитие АА выражали в виде индекса
артрита, который оценивали по отношению диаметра опытного голеностопного сустава к диа-
метру интактного в течение 28 суток ежедневно. Нативную (нСКП) или криоконсервированную
СКП вводили внутривенно на 7-е сутки индукции патологии. Контрольным животным вводили
преднизолон (Биофарма, Украина) или клетки костного мозга. Методом прямой иммунофлюо-
ресценции с использованием моноклональных антител к мембранным структурам СD4 и СD25
(BD Pharmingen TM) определяли количество СD4+СD25+ Т-рег клеток на проточном цитофлюо-
риметре (FACS Calibur, BD) в селезенке животных с АА до и после введения СКП. Экспрессию
гена foxp3 оценивали в клетках селезенки мышей методом мультиплексной полимеразной цеп-
ной реакции с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) на 14-е и 28-е сутки после индукции
АА. В ПЦР использовали пары праймеров к гену foxp3 и гену «домашнего хозяйства» – β-actin.
Количество транскриптов исследуемых генов сравнивали на основе относительной полуколи-
чественной оценки продуктов амплификации в биоанализаторе Agilent 2100 (США).
Снижение клинических признаков развития АА наблюдалось после введения как натив-
ных, так и криоконсервированных клеток. Эффект вводимых клеток плаценты в отношении
Т-рег определялся режимом криоконсервирования. Уменьшение отека сустава коррелирова-
ло с содержанием Т-рег клеток в селезенке у животных после введения нСКП или КД. Было
установлено снижение уровня экспрессии foxp3 в клетках селезенки животных с АА на 28-е
сутки, что свидетельствует об участии этого фактора в патогенезе АА в отдаленные сроки раз-
вития патологии. Снижение индекса отека коррелировало с уровнем экспрессии foxp3 в клетках
селезенки во всех исследованных группах. Суспензии КД и КП обладали разной иммуносу-
прессорной активностью, что доказывает значимость условий криоконсервирования плаценты
в проявлении ее регуляторной активности.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
28 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Органотипические модели кожи, созданные из двух и более типов клеток, позволяют ими-
тировать развитие патологического процесса наследственных заболеваний, а также тестиро-
вать экспериментальные препараты на стадии доклинических испытаний.
Целью представленной работы была характеристика новой экспериментальной модели ко-
жи, созданной на основе иммортализованных кератиноцитов человека (HaCaT) и первичных
кератиноцитов мыши. Нашей непосредственной задачей было провести трехмерную рекон-
струкцию эпидермиса из указанных типов клеток и описать изменения в полученных образцах,
вызванные подавлением экспрессии транскрипционного фактора FOSL1.
Для проведения трехмерной реконструкции эпидермиса кератиноциты человека и мыши
(1:1) высевали на коллагеновый гель, содержавший первичные фибробласты мыши, предвари-
тельно обработанные митомицином. Культивирование проводили на границе разделения фаз
в течение 10–14 дней. Клетки HaCaT с пониженной экспрессией FOSL1 получали методом
лентивирусной трансдукции, используя вектор вирусного происхождения с закодированной в
его геноме малой ингибирующей РНК к FOSL1 (FOSL1 миРНК). Для проведения гистологи-
ческих исследований из образцов получали срезы, используя криогеновый метод. Чтобы оце-
нить изменения генной экспрессии использовали метод количественной ПЦР.
Согласно результатам гистологического анализа, реконструированный эпидермис состоял
из 10–15 рядов клеток. При этом базальный слой был представлен несколькими рядами клеток.
Большинство клеток базального слоя утратили характерную для здорового эпидермиса кубо-
видную форму. Граница же между базальным и шиповатым слоями была размыта. Гранулярный
слой был прерывист. Ороговение верхних слоев клеток было выражено слабо. В некоторых
клетках ороговевшего слоя наблюдалась задержка в деградации ядер (паракератоз). После 10
дней культивирования количество флуоресцирующих клеток HaCaT в полученных образцах
составляло не менее 25%. При этом флуоресцирующие клетки были преимущественно сосре-
доточены в базальном и шиповатом слоях. Анализ изменений экспрессии генов в образцах,
обработанных и не обработанных ростовыми факторами – фактором некроза опухоли (ФНО),
интерфероном гамма (ИФНГ) и интерлейкином 17 (ИЛ17) – показал, что ФНО оказывает наи-
более сильное влияние на экспрессию FOSL1-зависимых генов. Напротив, влияние ИФНГ и
ИЛ17 на гены, контролируемые FOSL1, было разнонаправленым и менее выраженым.
Полученная экспериментальная модель может быть использована для изучения роли от-
дельных генов, как в патогенезе наследственных заболеваний, так и в поддержании нормаль-
ного гомеостаза кожи.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 29
М.Е. Михайлова, А.И. Киреева, Е.Л. Романишко, Н.И. Тиханович, Н.А. Камыш
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
30 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Известно, что на ростовые процессы организма влияет комплекс факторов, важную роль
в этих процессах играет гормон роста. Регуляция синтеза гормона роста представляет собой
многоуровневый каскад взаимодействий белок-рецепторов, тесно связанных между собой.
Ключевыми звеньями соматропинового каскада являются инсулиноподобные факторы роста-1
и 2 (IGF-1 и IGF-2), запускающие внутриклеточные ответы на воздействие соматотропина.
Выявление нуклеотидной замены G→A в третьем интроне импринтингового гена рIGF-2
актуально, так как экспрессия мутантного аллеля А связана с интенсивным мышечным ро-
стом, а в геноме экспрессируется только отцовский аллель, поэтому важно проводить ДНК-
диагностику хряков. Определен полиморфизм (A3072G) гена рIGF-2 (3-й интрон) методом
секвенирования.
Ген рIGF-2 – один из QTL-локусов, значимых для селекционной работы в свиноводстве,
для которого характерна моноаллельная отцовская экспрессия. Различие в активности алле-
лей гена рIGF2 вызвано геномным импринтингом, в основе которого лежит специфическое
для особей разного пола метилирование цитозиновых оснований ДНК, которое выключает
транскрипцию одного из родительских аллелей. Цитозиновые основания ДНК метилируют-
ся в основном в CpG-динуклеотидах. Замена (A3072G) в 3 интроне гена pIGF-2 находится
в районе, богатом СрG-участками, что усложняет подбор праймеров. Для ПЦР отобраны 7 пар
праймеров, с одной из пар был получен специфичный фрагмент гена pIGF-2. Секвенированны
аллельные варианты (АА, АG, GG) гена pIGF-2 с использованием BigDye® Terminator (v3.1).
Оценка и обработка данных проводились с помощью программного обеспечения Sequencing
Analysis-5.4, которое является частью автоматического генетического анализатора Applied
Biosystems 3500.
Определены частоты встречаемости аллелей и генотипов по локусу гена pIGF-2. Уста-
новлено, что исследованные выборки животных белорусской крупной белой породы свиней
и заводского типа породы йоркшир значительно отличались по частоте встречаемости особей
с предпочтительным генотипом QQ. Так в выборке животных заводского типа породы йорк-
шир частота встречаемости генотипа QQ – 47%, а у животных белорусской крупной белой
породы – 7%. Для ускорения отбора особей с желательным генотипом QQ необходимо вести
отбор не только против животных с гомозиготным генотипом qq, но и против животных с ге-
терозиготным генотипом Qq, поскольку потомство таких хряков в дальнейшем получит одну
из нежелательных аллелей, а полученный желательный аллель Q от матери не будет работать
в следствии наличия на нем «отпечатка» импринтинга.
При анализе молодняка белорусской крупной белой породы на контрольном откорме в за-
висимости от генотипа отца по гену рIGF-2 выявлено, что животные, полученные от хряков
с генотипом рIGF–2 QQ, по показателю толщина шпика превосходили животных с отцовским
генотипом Qq на 1,83 мм, или 7%, и животных с отцовским генотипом qq – на 1,52 мм, или
6% (P<0,05). Исходя из полученных данных, ген IGF-2 можно рекомендовать к использованию
в качестве маркера в селекции свиней.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 31
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
32 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Ю.Л. Орлов, Е.В. Кулакова, А.М. Спицина, И.В. Чадаева, В.Н. Бабенко
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 33
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
34 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
1
Институт биофизики и клеточной инженерии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: valentina_rassadina@rambler.ru
2
Южный федеральный университет
Россия, 344091, г. Ростов-на-Дону, пр. Стачки, 194/1
e-mail: usatova@mail.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 35
И.Э. Рубель1, О.Ю. Баранов1, С.В. Пантелеев1, О.А. Разумова1, В.А. Гущин2, В.В. Макаров2
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
36 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Н.Н. Рудакова, М.Г. Алексеева, Д.А. Мавлетова, А.А. Ватлин, О.Б. Беккер, Н.В. Захаревич,
В.Н. Даниленко
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 37
Мужские половые клетки имеют сложный транскриптом. Помимо матричных РНК, коди-
рующих белки, в нем присутствует много некодирующих РНК, включая микроРНК. Известно,
что микроРНК (миРНК) являются важными регуляторами экспрессии генов. Они функциони-
руют в основном посттранскрипционно, контролируя стабильность или трансляцию их целе-
вых мессенджеров – мРНК. Эти миРНК экспрессируются в клетке и во время сперматогенеза
участвуют в контроле каждого этапа дифференцировки мужских половых клеток. Поскольку
совершенно разные группы генов экспрессируются в митотических сперматогониях, в мейо-
тических сперматоцитах и в гаплоидных сперматидах.
Систематизируя литературные данные, мы охарактеризовали все известные к настоящему
моменту микроРНК, участвующие в сперматогенезе, оценили их функциональную значимость
на разных этапах дифференцировки половых клеток и наметили ряд наиболее перспективных
микроРНК, которые возможно использовать в качестве маркеров для создания диагностиче-
ских панелей мужского бесплодия.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
38 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 39
A.А. Стахеев, С.К. Завриев
Аскомицетные грибы рода Fusarium могут наносить существенный ущерб сельскому хо-
зяйству, а также представлять угрозу для здоровья человека и животных, поскольку являются
продуцентами широкого спектра вторичных токсических метаболитов – фузариотоксинов.
Наиболее распространённой группой токсических соединений, продуцируемых грибами рода
Fusarium, являются трихотеценовые микотоксины, представляющие собой сесквитерпеноид-
ные соединения, разделяемые на 4 основных группы (A–D) в зависимости от строения боковой
цепи. Примером опасности, которую представляют эти соединения, может служить вспыш-
ка алиментарно-токсической алейкии в Поволжье, Западной Сибири и на Урале, результатом
которой стала гибель порядка 40 тысяч человек. Как было установлено, основной причиной
вспышки стало потребление в пищу перезимовавшего в поле зерна, контаминированного три-
хотеценовыми токсинами, прежде всего Т-2 токсином и деацетоксисцирпенолом (ДАС).
Основными продуцентами трихотеценовых токсинов являются виды F. graminearum,
F. culmorum, F. sporotrichioides, F. poae. Серьёзный интерес также представляют недавно вы-
деленные в качестве отдельных видов F. langsethiae, F. ussurianum, F. sibiricum. Гены, ответ-
ственные за синтез трихотеценовых токсинов, сгруппированы в 3 кластера, расположенных на
разных хромосомах. Общее число генов, вовлеченных в биосинтетический каскад, составляет
15 генов, некоторые из которых могут быть нефункциональными в зависимости от конкрет-
ного вида и его токсинового профиля. Изучение структуры трихотеценового кластера важно
для понимания эволюции грибных геномов, а также механизмов приспособления грибов к
условиям среды обитания.
В составе основного кластера, состоящего из 12 генов, присутствуют 2 гена, функция которых
до сегодняшнего дня не установлена – TRI9 и TRI14. Кроме того, структуры этих генов опреде-
лены лишь у двух видов – F. graminearum и F. sporotrichioides. Проблема их функциональной ха-
рактеристики затрудняется тем, что в международных базах данных не содержится информации
о каких-либо сходных по структуре генов с известной функцией у других организмов.
В настоящей работе определена структура генов TRI9 и TRI14 у 8 видов грибов рода
Fusarium, характеризующихся различными хемотипами и образующих разные количества три-
хотеценовых токсинов. С помощью методов биоинформатики определены вероятные структуры
белков, кодируемых этими генами, а также проведен филогенетический анализ исследованной
выборки штаммов. Изучена динамика экспрессии генов TRI9 и TRI14 на разных этапах разви-
тия культуры гриба. Кроме того, проведена подготовительная работа по получению мутантных
по генам TRI9 и TRI14 штаммов видов F. graminearum, F. sporotrichioides и F. poae.
Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ 16-34-01369.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
40 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 41
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
42 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 43
А.Б. Шевцов1, Е.С. Шевцова1, Д.К. Камалова1, Т.Б. Карибаев2, И.И. Сытник2, Е.М. Раманкулов1,
К.К. Муканов1
1
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК
Республика Казахстан, 010000, г. Астана, Кургальжинское шоссе, 13/5
e-mail: shevtsov@biocenter.kz
2
РГП «Национальный референтный центр по ветеринарии» МСХ РК
Республика Казахстан, 010000, г. Астана, ул 150 лет Абая, 22/3
e-mail: ncmr@minagri.kz
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
44 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Подсолнечник является одной из самых важных культур для сельского хозяйства Респу-
блики Молдова, занимая третье место по культивируемой площади после пшеницы и куку-
рузы. На территории Республики Молдова одним из наиболее опасных растений-паразитов,
которые значительно снижают урожайность подсолнечника, является заразиха (Orobanche cu-
mana Wallr.). Вирулентность данного паразита напрямую зависит от физиологической расы.
На данный момент, известны восемь физиологических рас заразихи подсолнечника (A–H).
Иформация о географическом распространении физиологических рас патогена является важ-
ной для фермеров и селекционеров, позволяя подбирать соответствующие гибридные формы
для выращивания в различных регионах.
Таким образом, целью данной работы являлась оценка генетического разнообразия различ-
ных популяций заразихи из Республики Молдова. Сбор биологического материала осущест-
влялся в 80 населенных пунктах из 27 районов Республики Молдова. Всего были исследованы
44 популяции (41 – из Республики Молдова и по одной – из Румынии, Украины и Испании).
Образцы ДНК выделяли с помощью набора реактивов GeneJET Plant Genomic DNA Purification
Mini Kit (Thermo Scientific). Для оценки генетического разнообразия использовали 15 микро-
сателлитных маркеров (Ocum-52, -59, -70, -74, -75, -81, -87, -108, -122, -141, -160, -174, -196,
-197 и -206), ранее описанных в литературе как высокополиморфные. ПЦР осуществлялась со
следующей концентрацией компонентов реационной смеси: 200 мкM дНТФ, 2,0 мM MgCl2,
1,0 ед. ДНК-полимеразы DreamTaq Green DNA Polymerase (Thermo Scientific), 0,4 мкM каждо-
го праймера, 50 нг ДНК. Реакция проходила в объёме 15 мкл. Для амплификации использова-
ли следующую программу: 95 °С – 3 мин; 35 циклов 95 °С – 30 с, 57 °С – 45 с, 72 °С – 1 мин;
72 °С – 5 мин. Результаты амплификации анализировали в 8%-ном полиакриламидном геле в
ТБЕ-буффере.
В ходе исследования был выявлен различный уровень генетического полиморфизма изу-
чаемых популяций. Наибольший уровень полиморфизма был отмечен для трёх маркеров из
15-ти изучаемых – Ocum-197, -160 и -59. В дальнейшем планируется установить связь между
генетическим профилем популяции, полученном с помощью микросателлитных маркеров,
физиологической расой и географическим распространением / ареалом. Эти данные позволят
выявить специфические маркеры для дискриминации физиологических рас и установления
филогенетических связей между популяциями, что имеет важное теоретическое и приклад-
ное значение.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 45
Н.А. Шкутэ
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
46 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
Г.В. Шпаковский, Ю.В. Долудин, А.В. Аралов, И.Ю. Словохотов, В.Н. Клыков,
Д.Г. Шпаковский, Е.К. Шематорова
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 47
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
48 Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика
DNA-barcoding has been proposed by P. Heber (2003) as a molecular method to identify species.
This method uses the short standard genetic sequence from a standard part of the genome. The standard
barcode for almost all animal groups is a 648 base-pair region in the mitochondrial cytochrome c
oxidase 1 gene (COI). Study of COI using for species identification of crustaceans was conducted
in 2007 (Costa et al., 2007). They confirmed that use of COI gene was successful to identify Crustacea
specimens correctly.
9 alien invasive species of amphipods are revealed in Belarus nowadays (Semenchenko et al.,
2009). There is a problem to identify these specimens on early developmental stage. Molecular
methods can help to solve this problem.
Analysis of 77 specimens belonging to 9 alien invasive species was conducted. Material for this
study was collected in 2007–2014 and stored in ethanol at room temperature. DNA-analysis was
carried out during the Global Taxonomy Initiative Course on rapid identification of invasive alien
species for achieving Aichi Biodiversity Target 9 at the Biodiversity Institute of Ontario (Guelph,
Canada) in 2015. DNA was extracted from amphipods according to standard barcoding protocol
(CCDB Protocols) for invertebrates (non-CTAB).
CrustDR1 and CrustDF1 were used for PCR analysis (Steinke, 2007, unpublished). All sequences
were aligned using CodonCode and analyzed in BOLD and MEGA (Tamura et al., 2013). Sequence
analyses were conducted using MEGA 4.0 (Tamura et al. 2007). Nucleotide sequence divergence
was calculated using the Kimura two-parameter distances. A neighbor-joining method was used
to construct a phylogenetic tree. Confidence in the resulting relationships was assessed using a
bootstrap procedure with 1000 replications.
Only 19 COI sequences belonging to 5 alien invasive species (Chelicorophium curvispinum
(Sars, 1895), Dikerogammarus haemobaphes (Eichwald, 1841), Dikerogammarus villosus bispinosus
(Martynov 1925), Echinogammarus ischnus (Stebbing, 1899), E. trichiatus (Martynov, 1932)) were
derived.
Sequence divergence for all sequences compared at the species level. The mean within-species
distance for D. haemobaphes was 0.56 ± 0.01%, whereas maximal distance was 2.46%; these values
for E. ischnus were 1.58 ± 0.22% and 2.16% correspondingly. Only one sequence was obtained
for D. villosus bispinosus and E. trichiatus. The sequence of D. villosus bispinosus belonged
to D. haemobaphes cluster. We analyzed all available sequences in BOLD database for species
belonging to Dikerogammarus genus. We obtained that between-species distance for D. villosus
bispinosus and D. villosus varied from 20.35% to 75%, whereas between-species distance
for D. villosus bispinosus and D. haemobaphes was 0–2,31%. Thus, the sequence of D. villosus
bispinosus was resembled D. haemobaphes sequence, although adults of these species can be well
distinguished. To solve this discrepancy we are planning to conduct additional study.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 1. Молекулярная генетика, геномика и биоинформатика 49
1
N.I. Vavilov Institute of General Genetics
Russia, 199911, Moscow, Gubkin str. 3
2
Institute of Evolution, Haifa University
Israel, 31905, Haifa, Mount Carmel
e-mail: sergey8585@mail.ru
Meiotic sex chromosome inactivation (MSCI) is the process of transcriptional silencing of sex
chromosomes: chromatin of the X and the Y undergoes remodeling by incorporation and modifi-
cation of specific proteins that result the formation of a subnuclear heterochromatic domain called
the sex body.
In the last decade a large number of studies have been devoted to the MSCI in different animals.
Investigation of chromatin remodelling is possible by immunodetection of specific epigenetic MSCI
markers, such as BRCA1, ATR, γH2AFX, SUMO-1, ubiH2A. It has been previously found that ATR,
γH2AFX, SUMO-1, ubiH2A play an important role in maintaining an inactive form of the chromatin
and, in general, in the formation of a sex body. MSCI is an example of a general mechanism called
meiotic silencing of unsynapsed chromatin (MSUC).
Israeli subterranean mole rats of Nannospalax ehrenbergi involves four chromosome forms: 2n =
52, 54, 58 and 60. The X chromosome is a big submetacentric, and the Y is a small acrocentric. The G-
banding pattern of sex chromosomes in all cytotypes is the same, however, the Y chromosomes of
52 and 54 cytotypes differ from cytotypes 58 and 60 by presence of interstitial blocks of telomeric
sequences (Ivanitskaya et al., 2008).
Taking into consideration the mole rat chromosome variability including specificity of the Y-
chromosome, both electron microscopy and immunocytochemistry were applied for a comprehen-
sive analysis of synapsis, behaviour and chromatin configuration of the sex bivalent in pachytene
spermatocytes in the cytotype of 2n = 60 for the first time.
Mole rat sex chromosomes form a short synaptic segment in the pseudoautosomal region (PAR)
at meiotic prophase I. Usual unpaired site of the Y lies along thickened unpaired site of the X-chro-
mosome. At early – mid pachytene stage, the sex bivalent gradually moves from the centre of the nu-
cleus to its periphery and forms a so-called XY or sex body.
HORMAD1 is required for normal synaptonemal complex (SC) formation and for the efficient
build-up of ATR on asynaptic chromosome regions, crucial process for MSUC and MSCI progression
(Daniel et al., 2011). HORMAD1 signals were immunodetected along the chromosome axial elements
in mole rat zygotene spermatocytes. At the middle pachytene stage, when chromosome synapsis is
completed, HORMAD1 is localized only in asynaptic segments of the XY bivalent.
ATR is located along asynaptic axis of the sex bivalent at mid pachytene. ATR surrounds XY
in peripheral sex body at the late pachytene.
At the zygotene stage, γH2AFX localization has two patterns: either along unpaired chromosomal
regions or full filling of the entire meiotic nucleus. γH2AFX covers chromatin within the entire sex
bivalent at the mid pachytene.
SUMO-1 and ubiH2A have similar localization: the signals are distributed diffusely in chromatin
of the sex bivalent in pachytene spermatocytes.
Thus, the MSCI in mole rat spermatocytes appear to be quite similar to the same process in mamma-
lian males. However, uniform distributed SCP3 within mole rat sex body was often detected at the late
pachytene, that is not typical for other mammals with the exception of the human sex bivalent.
This work was partially supported by the Presidium of the Russian Academy of Sciences Program
“Biodiversity of natural systems”, subprogram “Gene pool of wildlife and conservation”.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
52 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 53
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: axenova_elena@mail.ru
2
Белорусский государственный медицинский университет
Республика Беларусь,220116 г. Минск, пр. Дзержинского, 83
Для лечения пациентов с ревматоидным артритом (РА) одним из базисных препаратов яв-
ляется метотрексат (МТХ). Задачей нашего исследования было проанализировать генотипы
пациентов с ревматоидным артритом, отличающихся по степени отзывчивости (чувствитель-
ности), а также токсической реакции на МТХ по полиморфным аллелям генов, участвующих
в молекулярных механизмах терапии МТХ: C677T (rs1801133), A1298C (rs1801131) гена ме-
тилентетрагидрофолат редуктазы (MTHFR), 347C>G однонуклеотидного полиморфизма гена
аминоимидазол-карбоксамидорибозид-трансформилаза/инозинмонофосфат-цикло-гидролазы
(ATIC), c.80G>A локуса гена SLC19A1, кодирующего мембранный белок-транспортер (пере-
носчик) фолатов (Reduced Folate Carrier – RFC1).
Всего было проанализировано 33 пациента с РА, отличающихся по степени отзывчивости
(чувствительности), а также токсической реакции на МТХ. Среди пациентов, для которых отмече-
на либо неэффективность лечения МТХ, либо токсическая реакция на этот препарат, преобладали
гомозиготные генотипы -1298AA (у 51,8% пациентов); -677CС и -677CТ (по 46,4% пациентов)
гена MTHFR; гетерозиготный генотип 347CG (у 53,6% пациентов) гена ATIC и гомозиготный
генотип c.80AА (у 67,9% пациентов) гена SLC19A1. Не выявлено ни одного обладателя неблаго-
приятного с точки зрения эффективности лечения МТХ генотипа c.80GG гена SLC19A1. Среди
6 пациентов с положительной эффективностью лечения не выявлено ни одного обладателя 347GG
ATIC и -677ТТ MTHFR генотипов. Тогда как среди 7 пациентов с отсутствием эффективности
лечения (в дозе МТХ 20 мг в неделю) данные генотипы встречались с одинаковой частотой –
14,3%, а генотип -1298СС MTHFR у этих пациентов не был обнаружен (у пациентов с хорошей
эффективностью этот генотип обнаружен с частотой 16,7%).
Распределение генотипов у 14 пациентов с гепатотоксической реакцией (превышение
биохимических показателей ферментов печени более чем в 3 раза) было следующим: MTHFR
-1298СС – 28,6%; -1298СА – 14,3%; -1298АА – 57,1%; MTHFR -677СС – 50,0%; -677СТ – 42,9%;
-677ТТ – 7,1%; ATIC 347CС – 42,9%; 347CG – 50,0%; 347GG – 7,1%; SLC19A1 c.80AА – 57,1%;
c.80AG – 42,9%. Интересно, что частота генотипов по гену SLC19A1 у пациентов хорошей эф-
фективностью лечения и ее отсутствием была примерно одинаковая: c.80AА – 83,3%; c.80AG –
16,7%. и c.80AА – 85,7%; c.80AG – 14,3%. соответственно. У 71,4% пациентов с отсутствием
эффективности лечения обнаружен генотип -1298СА MTHFR, а у пациентов с хорошей эф-
фективностью преобладал генотип -1298АА MTHFR (66,7%). Почти в 2 раза реже встречался
генотип 347GG ATIC у пациентов с отсутствием эффективности лечения (28,6%), по сравне-
нию с пациентами с хорошей эффективностью лечения (50,0%). В силу маленькой выборки,
подсчитать статистическую достоверность результатов не удалось. Сопоставление генотипов
по всем четырем изученным генам определенной взаимосвязи между генотипом и реакцией
на лечение МТХ не выявило.
Работа выполнена по заданию 1.2.109 ГПНИ «Медицина и фармация», подпрограмма
«Фундаментальная и прикладная медицина».
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
54 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
А.С. Бабенко1, Л.В. Статкевич1, Н.А. Балашенко2, С.Н. Шевцова2, С.Е. Дромашко2
ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ TP53, CDKN1A, MYC, TERF1, TERF2, NFX1, HIF1A, EPAS1,
CTNNB1 И EGFR В ОБРАЗЦАХ КУЛЬТУРЫ КЛЕТОК РАКА ЛЕГКОГО
ЧЕЛОВЕКА А549
1
РНПЦ онкологии и медицинской радиологии имени Н.Н. Александрова МЗ РБ
Республика Беларусь, 223040, Минский р-н, а/г Лесной
e-mail: labmdbt@gmail.com
2
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: shevtsova308@gmail.com
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 55
Рак молочной железы (РМЖ) является наиболее распространенной формой рака у женщин,
и в России ежегодно регистрируются более 60 000 новых случаев злокачественных новооб-
разований груди и более 23 000 смертей. Частота распространения РМЖ в разных регионах
России различна, по данным официальной статистики (2013), стандартизованные показатели
заболеваемости РМЖ на территории варьируют в пределах 28,21%–61,02%. Причины различий
в частоте встречаемости РМЖ по России связаны как с «чистотой» официальных данных, так
и действительными различиями в природе этноспецифических факторов, прямо или опосре-
дованно влияющих на возникновение опухоли. За последние годы исследования молекуляр-
ной природы раковых опухолей дали убедительные доказательства генетической детермини-
рованности злокачественного процесса. На сегодняшний день одними из наиболее изученных
биомаркеров РМЖ и рака яичников (РЯ) являются гены BRCA1 и BRCA2, прогностический
и клинический эффект мутаций которых показан в многочисленных исследованиях. До 30%
случаев рака молочной железы приписаны герминальным мутациям генов BRCA1 и BRCA2.
Согласно международным базам данных, более чем 1400 мутаций типировано в гене BRCA1
и около 1100 – в BRCA2. В разных популяционных группах наблюдается широкая вариабель-
ность в спектре выявляемых мутаций в генах BRCA1 и BRCA2, из которых наиболее часто
встречающимися являются: в гене BRCA1 – 185delAG, 4153delA, 3819del GTAAA, 3875del
GTCT, 300T>G (Cys61Gly), 2080delA и в BRCA2 – мутация 6174delT. Однако с наибольшей ча-
стотой во многих из них встречается вариант BRCA1 c.5266dup (5382insC), для которого пред-
полагают эффект основателя. Молекулярно-генетические исследования РМЖ, проведенные
в ряде российских регионов показали, что мутация c.5266dup встречается в основном у лиц,
имеющих славянское происхождение, и не обнаруживается у представителей других этносов.
В проведенном нами ПДРФ-анализе ДНК 215 больных РМЖ женщин чеченской нацио-
нальности со спорадическими и наследственными формами и 300 потенциально здоровых
лиц, у которых на момент забора крови не было выявлено онкопатологий, также не была об-
наружена мутация c.5266dup в гене BRCA1. Мы продолжили скрининг вышеперечисленных
мутаций в чеченской популяции с использованием набора реагентов Онкогенетика (ООО
«ДНК-Технология»), предназначенного для определения аллельных вариантов генов BRCA1/2
методом ПЦР в режиме реального времени. В исследовании была использована геномная ДНК,
выделенная из периферической крови этнических чеченок (n=54) с диагнозом РМЖ (без ве-
рификации по молекулярным подтипам типам и стадиям), средний возраст которых составил
45,6 лет. Этническую принадлежность устанавливали анкетированием. В исследованной вы-
борке женщин с наследственными и спорадическими формами злокачественных новообразо-
ваний груди нами не было обнаружено ни одной из исследуемых мутаций. Анализ результатов
амплификации позволяет предположить генетическую гетерогенность полиморфизмов и под-
тверждает необходимость дальнейшего исследования генов BRCA1/2, исходя из их медицин-
ской и социальной значимости.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
56 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
В.А. Будевич1, А.В. Зураев1, И.Б. Моссэ1, Л.Г. Гелис2, Е.А. Медведева2, С.Ф. Золотухина2
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: vl.budevich@gmail.com
2
Республиканский научно-практический центр «Кардиология»
Республика Беларусь, 220036, г. Минск, ул. Р. Люксембург, 110
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 57
В.М. Веремейчик, Н.Н. Кузуб, С.Р. Боровко, А.В. Павлюченко, А.Г. Шимко
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
58 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 59
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
60 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 61
Н.Б. Гусина, Е.С. Будейко, С.О. Мясников, Т.С. Зимовина, Е.Г. Требко, О.А. Громыко, А.А. Гусина
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
62 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
И.Б. Моссэ, А.Л. Гончар, Л.А. Кундас, М.Д. Амельянович, Н.Г. Седляр
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 63
А.А. Гусина, А.В. Зиновик, Т.С. Зимовина, Т.М. Ефимчик, Н.Б. Гусина
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
64 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 65
Высокий удельный вес врожденных пороков развития (ВПР) в структуре причин мертво-
рождаемости, младенческой и ранней детской заболеваемости и смертности, детской инвалид-
ности, повсеместный рост, а также их экозависимость послужили причиной создания регистров
ВПР, базисом которых являются системы мониторинга на основе учета случаев нарушений
эмбрионального развития в популяции. Системы мониторинга позволяют определять популя-
ционные частоты (ПЧ), динамику и структуру ВПР, осуществлять долговременный контроль
окружающей среды с возможностью изучения причин наблюдаемых колебаний частотных
трендов ВПР (Lazjuk G.I. et al., 2003), планировать объем диагностических, лечебных, реаби-
литационных и профилактических мероприятий. В Беларуси мониторинг аномалий развития
осуществляется в рамках Белорусского регистра ВПР (БР ВПР), функционирующего с 1979 г.
В системе мониторинга БР ВПР учету подлежат все случаи ВПР у живорожденных, мертво-
рожденных и плодов, абортированных по генетическим показаниям, в масштабах республики.
Анализ базы данных БР ВПР показал, что за период 2005–2014 гг. по республике в целом
ПЧ всех форм ВПР (32,4 ± 0,54‰), как и частоты ВПР строгого учета (СУ) (13,8 ± 0,35‰), легко
диагностируемых пороков, сохранялись примерно на одном уровне, за исключением г. Минска
и Гомельской области, где отмечена положительная динамика роста частот ВПР. Наименьшие
ПЧ, как всех форм ВПР, так и ВПР СУ, как и в предыдущие годы (Lazjuk G.I. et al., 2002–2006),
характерны для Витебской области. За анализируемый период в Гомельской области ПЧ всех
форм ВПР и ВПР СУ остаются статистически значимо выше по сравнению c аналогичными
данными по Витебской области (для всех форм ВПР 34,1 ± 1,41‰ и 28,0 ± 1,49‰ соответствен-
но, t = 2,95, P < 0,05; для ВПР СУ 14,5 ± 0,93‰ и 11,6 ± 0,96‰, t = 2,17, P < 0,05). В г. Минске
ПЧ всех форм ВПР и ВПР СУ статистически значимо превышают аналогичные показатели не
только по Витебской области, но и по республике в целом. Так, в г. Минске и республике для
всех форм ВПР ПЧ составили 41,2 ± 1,37‰ и 32,4 ± 0,54‰ соответственно (t = 5,97, P < 0,05);
для ВПР СУ – 18,9 ± 0,94‰ и 13,8 ± 0,35‰ соответственно (t = 5,12, P < 0,05). Причины вы-
соких ПЧ ВПР в отдельных регионах республики требуют изучения и на основе полученных
результатов принятия управленческих решений по улучшению экологической ситуации и со-
вершенствованию мер профилактики.
Необходимо отметить эффективность пренатальной диагностики и предупреждения рож-
дения детей с некурабельными, инвалидизирующими формами ВПР. Так по данным БР ВПР,
в республике только в 2014 г. с пороками было 15 мертворожденных, умерло 137 детей (из
них 30 – до 6 суток, 107 – до года). Прервано по поводу ВПР и хромосомных болезней у пло-
да 943 беременности, что внесло существенный вклад в показатели детской заболеваемости,
инвалидности и смертности.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
66 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 67
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
68 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
Е.А. Климов1,2, А.В. Малахова1, Е.А. Наумова1,2, З.Г. Кокаева1, А.А. Анучина1, Ю.Э. Азимова3,
Н.М. Фокина4, Г.Р. Табеева3,5, О.И. Рудько1
1
Московский государственный университет имени М.В.Ломоносова
Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, 1, стр. 12
2
Университетская диагностическая лаборатория
Россия, 119331, г. Москва, пр. Вернадского, 29, пом. I
3
Университетская клиника головной боли
Россия, 121467, г. Москва, ул. Молодогвардейская, 2, к.1
4
Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова
Россия, 127473, г. Москва, ул. Делегатская, 20, стр. 1
5
Отдел неврологии НИЦ Первого Московского государственного медицинского университета им.
И.М. Сеченова
Россия, 119435, г. Москва, ул. Россолимо, 11
e-mail: klimov_eugeney@mail.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 69
Бесплодие фиксируется в 10–20% семей. Около 50% случаев обусловлено мужским бес-
плодием. Основным методом решения проблемы бесплодия для пациентов с азооспермией
является метод интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ). Нами иссле-
дованы микробиоптаты яичек, полученные от пациентов с секреторной азооспермией, в том
числе, от пациентов с микроделециями локуса AZF Y-хромосомы и пациенты с азоосперми-
ей, у которых делеции локуса AZF не выявлены. Биоптаты получены и исследованы с инфор-
мированного согласия пациентов. У всех пациентов проведен анализ суспензии клеток био-
птата яичка, что позволяет оценить шансы получения сперматозоидов с помощью процедуры
тестикуляной экстракции сперматозоидов (ТЕSE) и шансы получения тотальных препаратов
распластанных синаптонемных комплексов (СК) из клеток конкретного образца. Проведен
сравнительный анализ результатов исследования клеточного состава и иммуноцитохимиче-
ского исследования белков в распластанных ядрах сперматоцитов, полученных из «свежих»
и криоконсервированных биоптатов. Полученные результаты свидетельствуют об идентич-
ности результатов исследования препаратов, полученных этими двумя способами, что дает
дополнительные диагностические возможности в тех случаях, когда первая попытка ИКСИ
не удалась, а исследование СК не проводилось.
Для выявления нарушений сперматогенеза проведено электронно-микроскопическое ис-
следование ультратонких срезов ткани яичек. Использован разработанный в нашей лаборато-
рии метод многораундового иммуноцитохимического окрашивания одного и того же препарата,
позволяющий в одном ядре сперматоцита последовательно выявлять особенности синапсиса
и десинапсиса гомологичных хромосом, особенности распределения узелков ранней и поздней
рекомбинации DSBs; белков, участвующих в сайленсинге хроматина. Сопоставление результатов
комплексного исследования сперматогенеза позволяет заключить, что у пациентов с микроделе-
циями субрегиона AZFb происходит нарушение архитектоники ядер, отмечается фрагментация
хромосом, мейоз блокируется на ранних стадиях профазы I мейоза. У двух пациентов с азоо-
спермией выявлена так называемая gr/gr-делеция субрегиона AZFb, которую идентифицируют
по отсутствию маркера SY1291. По данным литературы, отсутствие маркера SY1291 встречается
и у пациентов с нормозооспермией. При анализе СК у двух пациентов с этой делецией выявлены
нарушения рекомбинации и синапсиса хромосом, превышение количества ядер сперматоцитов
с признаками пахитенного ареста. При электронно-микроскопическом исследовании срезов яи-
чек у 7 из 9 исследованных пациентов с разными микроделециями, захватывающими субрегионы
AZFb, AZFb+с или AZFc, выявлены нарушения структуры базальной мембраны (БМ) семенных
канальцев: утолщение, многослойность и формирование завитков. Такие нарушения структуры
БМ у пациентов без делеций AZF локуса встречаются крайне редко. Возможно, описанные нару-
шения структуры БМ обусловлены неизвестной мутацией или, возможно, являются проявлением
усиления гемато-тестикулярного барьера (ГТБ) в условиях накопления в яичке специфических
только для клеток сперматогенного ряда аутоантигенов, которые появляются в яичке с первой
волной сперматогенеза и проникновение которых через ГТБ за пределы семенных канальцев
может индуцировать развитие аутоиммунного процесса в яичке.
Исследование поддержано грантами РФФИ № 16-04-01447 и РНФ № 14-50-00029.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
70 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
В.А. Кордюм
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 71
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
72 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
А.А. Лазаревич
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 73
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: 666555@tut.by
2
Белорусский государственный медицинский университет
Республика Беларусь, 220116, г. Минск, пр. Дзержинского, 83
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
74 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 75
И.В. Наумчик
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
76 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 77
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
78 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 79
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
80 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
1
ГУ «Республиканский научно-практический центр «Мать и дитя»
Республика Беларусь, 220053, г. Минск, ул. Орловская, 66
e-mail: pribushenya@yandex.ru
2
ГУ «Республиканский клинический медицинский центр»
Управление делами Президента Республики Беларусь
Республика Беларусь, 220030, г. Минск, ул. Красноармейская, 10
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 81
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
82 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 83
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: cytoplasmic@mail.ru
2
Республиканский научно-практический центр «Кардиология»
Республика Беларусь, 220036, г. Минск, ул. Р. Люксембург, 110
Ген LMNA (MIM 150330) кодирует белки ядерной ламины – ламин А и С. Ядерная лами-
на определяет прочность ядерной оболочки, организацию ядерных пор, защищает хроматин
от физических повреждений, вовлечена в контроль репликации ДНК, организацию хроматина,
экспрессию генов, процессинг и апоптоз. Мутации в гене LMNA проявляются как минимум
десятью разными клинически тяжелыми фенотипами, названными ламинопатиями.
Представлены три случая ламинопатий в Беларуси, связанные с носительством мутаций
в гене LMNA: дилатационной кардиомиопатии 1А (ДКМП, OMIM 115200), конечностно-
поясной мышечной дистрофии 1В (КПМД1В, OMIM 159001) и мышечной дистрофии Эймери-
Дрейфуса типа 2 (ЭДМД2, OMIM 181350). Диагнозы были верифицированы у трех нерод-
ственных пациентов по результатам комплексного клинического исследования (ЭКГ, ЭхоКГ,
ядерно-магнитный резонанс, вирусологический ПЦР-скрининг, коронарная ангиография, ней-
ромышечные и лабораторные исследования). Методом прямого секвенирования был осущест-
влен поиск мутаций в экзонах гена LMNA на ДНК-образцах пациентов.
У пациентки 23-х лет первые симптомы ДКМП1А (частое сердцебиение, атриовентрику-
лярная (АВ) блокада 1–2 ст.) предшествовали развитию дилатационного фенотипа и сердечной
недостаточности (СН). Фибрилляция предсердий с полной АВ-блокадой и обмороки появи-
лись на стадии дилатации всех камер сердца. У пациентки выявлена гетерозиготная мутация
p.R190P (c.569G>C), приходящаяся на α-спиральный rod-домен ламина А/С. Этот домен не-
обходим для димеризации и дальнейшей сборки белка в единую сеть. Замена p.R190P нару-
шает регулярную структуру α-спирали, тем самым препятствует правильной сборке ядерной
ламины и выполнению ею функций.
У 27-летней женщины первично была обнаружена патология сердца: полная АВ-блокада,
расширение левых отделов сердца, обмороки. Проявления КПМД1В обнаружены в возрасте
30 лет. Прогрессирующая слабость и боли в скелетных мышцах, гипотрофия мышц нижних
конечностей развивались одновременно с симптомами СН. У пациентки выявлена мутация
p.W520R (c.1558T>C), приводящая к замене высококонсервативного аминокислотного остатка
в коре Ig-домена ламина. Она изменяет внутримолекулярные силы и приводит к нарушению
фолдинга этого домена.
У пациента с диагнозом ЭДМД2 первые признаки слабости в мышцах верхних и нижних
конечностей появились в 5-летнем возрасте и усиливались с возрастом. К третьей декаде жиз-
ни у него развились множественные сухожильные контрактуры и выраженный тетрапарез.
До момента манифестации сердечной патологии (в 40 лет) пациенту был выставлен диагноз
миодистрофии Дюшенна. Молекулярно-генетический анализ гена LMNA позволил верифи-
цировать диагноз ЭДМД2. Пациент оказался гетерозиготным носителем мутации p.T528R
(с.1583С>G) в Ig-домене ламина.
Исследование родственников пациентов определило возникновение мутаций de novo во всех
трех случаях. Анализ родословных выявил связь мутаций с появлением в семьях заболевания,
ранее нехарактерного для их членов.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
84 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
И.Г. Удина1, П.Р. Бутовская1, О.Е. Лазебный2, В.А. Васильев3, Д.В. Шибалев3, Е.В. Веселовская4,
М.Л. Бутовская4
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика 85
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: N.Chakova@igc.by
2
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Республика Беларусь, 220013, г. Минск, ул. П. Бровки, 3, корп. 3
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
86 Секция 2. Генетика человека, медицинская и спортивная генетика
А.А. Яцкив1, Н.В. Никитченко1, Т.А. Глушкова2, Е.В. Сечко2, А.М. Чичко2, А.В. Сукало2, Р.И. Гончарова1
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3
А.А. Адамбаева1, Р.Б. Ахмедов2, М.С. Кобозева2, В.В. Заякин2, А.А. Султанов1, И.Я. Нам2
1
Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт
Республика Казахстан, 050016, г. Алматы, пр-т Райымбека, 223
2
Брянский государственный университет им. акад. И.Г. Петровского
Россия, 241036, г. Брянск, ул. Бежицкая, 14
e-mail: iyanam1@yandex.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 89
А.В. Амосова1, С.А. Зощук1, Н.Л. Большева1, М.О. Твардовская2, И.О. Андреев2, О.Ю. Юркевич1,
Т.Е. Саматадзе1, В.А. Кунах2, О.В. Муравенко1
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
90 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 91
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
92 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 93
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
94 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Д.М. Бекенов1, А.А. Спанов1, А.И. Сембаева1, И.Я. Нам2, А.М. Омбаев1
1
ТОО «Казахский НИИ животноводства и кормопроизводства»
Республика Казахстан, 050035, г. Алматы, ул. Жандосова, 51
e-mail: ironlan-1983@inbox.ru
2
Брянский государственный университет им. акад. И.Г. Петровского
Россия, 241036, г. Брянск, ул. Бежицкая, 14
e-mail: iyanam1@yandex.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 95
П.А. Борозан
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
96 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 97
П.П. Васько
Фестулолиум – это новый вид многолетней злаковой травы, полученный путем межродово-
го скрещивания райграса пастбищного или многоукосного и овсяницы луговой или овсяницы
тростниковой. Фестулолиум приобретает от овсяниц такие качества, как холодостойкость, за-
сухоустойчивость и выносливость к болезням, а от райграсов – способность к быстрому отрас-
танию, повышенному содержанию белка, сахаров и переваримостью органических веществ.
В зависимости от подбора родительских форм и их морфотипов гибриды наследуют опре-
деленное сочетание признаков. Фестулолиум морфотипа райграса многоукосного характери-
зуется быстрыми темпами роста в первый год жизни и формированием травостоев в после-
дующие годы использования, высоким качеством корма и относительной выносливостью к
неблагоприятным погодным условиям.
Сорт фестулолиума райграсового морфотипа Удзячны белорусской селекции включен в Го-
сударственный реестр сортов с 2015 года, характеризуется интенсивным отрастанием и форми-
рованием пастбищных травостоев с 6–7 циклами стравливания и урожайностью зеленой массы
от 385 ц/га на супесчаных и до 646 ц/га – на суглинистых почвах. Фестулолиум сорта Удзяч-
ны хорошо сочетается с райграсом пастбищным и клевером ползучим в многокомпонентной
пастбищной травосмеси. Включение в состав многокомпонентных пастбищных травосмесей
фестулолиума повышает их урожайность и качество корма, что отмечают как отечественные,
так и зарубежные исследователи.
Создан межродовый гибрид райграса пастбищного (Lolium perenne) и овсяницы луговой
(Festuca pretense) – сорт Метеор, формирующий на супесчаной почве 6–7 циклов стравлива-
ния при пастбищном использовании, или 4 укосные травостои при сенокосном использовании.
Зимостойкость на уровне 4,5 балла, содержание сырого протеина 22–24%, общей обменной
энергии 11,7 МДж/кг СВ при пастбищной спелости травостоя и 18–19% и 10,5 МДж/кг СВ
соответственно – при сенокосной спелости травостоя.
Сорт Метеор находится с 2016 года в государственном сортоиспытании. Сорт фестулоли-
ума Метеор сформировал в конкурсном сортоиспытании при неустойчивом водном режиме
413,8 ц/га зеленой массы, что выше контрольного сорта на 28%. При достаточном увлажне-
нии за вегетационный период накоплено свыше 670 ц/га зеленой массы, что превышает кон-
трольный сорт на 20%.
Создание фестулолиума овсяничного морфотипа, характеризующегося высокой зимостой-
костью, адаптивностью к климатическим условиям Беларуси, формирующего 6–7 циклов страв-
ливания при пастбищном использовании с содержанием обменной энергии 10,5–11,0 МДж/кг
СВ и сырого протеина на уровне 17–18% позволит повысить продуктивность луговых угодий,
качество кормов и сбор белка, а также оптимизировать сортовую структуру травостоев по
срокам созревания с целью расширения оптимальных сроков уборки травостоев и снижения
напряженности уборочных работ.
В результате оценки растений межродового гибрида овсяницы тростниковой и райграса
многоцветкового выявлены источники хозяйственно-полезных признаков: по скороспелости,
интенсивности отрастания, кормовой и семенной продуктивности, показателям качества кор-
мов, зимостойкости, мягкости листьев, облиственности.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
98 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
1
Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции
промышленных микроорганизмов
Россия, 117545, г. Москва, 1 Дорожный проезд, 1
e-mail: voeikova.tatyana@yandex.ru
2
Институт биохимической технологии и нанотехнологии РУДН
Россия, 117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, 10, корп. 2
3
Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова
Россия, 119991, г. Москва, Ленинские горы, 1
4
Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
Россия, 119071, г. Москва, Ленинский пр., 33
5
|Институт химической физики им. Н.Н. Семенова РАН
Россия, 119334, г. Москва, ул. Косыгина, 4
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 99
Е.А. Волуевич
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
100 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 101
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
102 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
И.С. Гордей
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 103
С.И. Гордей, Е.Н. Кулинкович
В России В.А. Зыкиным были созданы перспективные формы мягкой пшеницы, характери-
зующиеся достаточно высокой урожайностью и высоким качеством зерна, причем эти ценные
признаки сцеплены с таким маркерным признаком, как фиолетовая окраска зерна. Сцепление
с таким маркерным признаком делает довольно простой задачу гибридизации и последующих
отборов высокопродуктивных и одновременно высокобелковых и высоколизиновых форм,
на основе визуального отбора продуктивных форм с фиолетовой окраской зерна, с дальней-
шей оценкой их качества и наследования по потомству. Данные формы мягкой пшеницы мы
использовали в этой работе, включая их в гибридизацию с другими формами и видами (Triti-
cum durum; T. turgidum) с последующим использованием эмбриокультуры in vitro, обработкой
УФ-лучами и отбором селекционно-ценных генотипов. Новые формы пшеницы с геномом В
от тетраплоидных пшениц могут служить также исходным материалом при создании сортов
тритикале, т.к. геному В принадлежит ведущая роль в диплоидизации мейоза, что важно в слу-
чае присутствия генома R ржи. Установлено, что локус Ph (pairing homeology), ответственный
за бивалентную коньюгацию, расположен на длинном плече 5В-хромосомы.
Проведена гибридизация по 18 комбинациям мягкой пшеницы с фиолетовой окраской зерна
(♀) с образцами твердой и тургидной пшеницы (♂). В среднем по всем комбинациям завязы-
ваемость гибридных зерновок составила 5,7% при варьировании от 0,0% до 13,6%.
Для преодоления постгамной несовместимости использовали эмбриокультуру in vitro.
С целью усиления рекомбиногенеза проводилась обработка гибридов F1 УФ-лучами с пред-
варительной сенсибилизацией. После облучения растения пересаживались в искусственную
почву Биона 112. В процессе акклиматизации в искусственной почве отмечена гибель 29,6%
растений, что, скорее всего, связано со значительными хромосомными перестройками после
облучения УФ-лучами.
В результате получено 87 растений-регенерантов межвидовых гибридов F1 яровой пше-
ницы. Полученные гибридные растения по фенотипу сходны с материнской формой мягкой
пшеницы. Фиолетовая окраска зерна ярко выражена у всех гибридных растений без исклю-
чения. По высоте растения первого поколения имели промежуточные показатели. Изучение
колоса показало, что гибриды F1 значительно превосходили обоих родителей по длине, числу
колосков и числу зерен с колоса.
На последующих этапах исследований будет проведено изучение расщепления по раз-
личным признакам в поколениях и выделение селекционно-ценных генотипов (урожайность,
болезнеустойчивость, качество).
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
104 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Т.Е. Денискова1, А.В. Доцев1, М.И. Селионова2, Г. Брем1,3, К. Виммерс4, Х. Рейер4, Е.А. Гладырь 1,
А.-М.М. Айбазов2, Н.А. Зиновьева1
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 105
Бурая ржавчина, вызываемая грибом Puccinia triticina Erikss. – одна из наиболее распро-
страненных и вредоносных болезней пшеницы. Ежегодные потери урожая от этого заболева-
ния составляют 5–15%, а в годы эпифитотий – до 70%. Создание сортов, сочетающих высокий
потенциал урожайности с генетической защитой его от болезней, является одним из ключевых
направлений современной селекции пшеницы.
В каталоге генных символов McIntosh с соавт. по состоянию на 2016 год зарегистрирова-
но около 80 генов устойчивости к бурой ржавчине, из которых 66 присвоен соответствующий
Lr-символ.
Проведен анализ на наличие генов устойчивости Lr1, Lr9, Lr10 и локусов сцепленных
генов: Lr19/Sr25, Lr24/Sr24, Lr26/Sr31/Yr9/Pm8, Lr34/Yr18/Pm38, Lr35/Sr39 и Lr37/Sr38/Yr17
среди 36 сортов и линий мягкой яровой пшеницы различного географического происхожде-
ния и 23 сортов мягкой яровой пшеницы, внесенных в Государственный реестр Республики
Беларусь по состоянию на 2016 г.
В результате проведенного маркерного анализа 59 сортов и линий яровой пшеницы вы-
явлены фрагменты амплификации, указывающие на присутствие генов устойчивости к бурой
ржавчине: Lr1, Lr10, Lr19, Lr24, Lr26, Lr34 и Lr37.
Ген устойчивости Lr1 идентифицирован в сортах пшеницы: Ульяновская 101 и Каменка
(Россия), Sorbas, Munk, Fasan, Marin (Германия), KWS Torridon, линии СЕ 22 (Великобрита-
ния), Koksa, Verbena, Nawra (Польша), Venera (Сербия), Ласка, Весточка (Беларусь), Septima
(Чехия), Elissavet (Греция), Vittorio (Италия), Ruble (США). Ген устойчивости Lr10 выявлен
у сортов: Агата, Ульяновская 101, Ульяновская 106, Воронежская 18, Тулайковская надежда,
Эстер (Россия), линии ShTRU 1122, 30.2 (Германия), KWS Torridon (Великобритания), Пода-
рунок, Улюблена (Украина), Venera (Сербия), Elissavet (Греция). Ген Lr19 идентифицирован
в сортах российской селекции Ульяновская 106 и Тулайковская надежда. Ген Lr24 – в сортах
KWS Akvilon, Kvintus (Германия) и линии KWS В-274 (Великобритания). Наличие транслока-
ции 1BL.1RS с генами устойчивости Lr26/Sr31/Yr9/Pm8 выявлено у сорта российской селекции
Тулайковская надежда, а транслокации 1AL.1RS с генами устойчивости Lr24/Sr24/Pm17/Gb2
у сорта Етюд (Украина). У сорта Sorbas (Германия) идентифицирован комплекс сцепленных
генов устойчивости Lr34/Yr18/Pm38, а у сорта Septima (Чехия) – Lr37/Sr38/Yr17.
Носителями нескольких генов устойчивости к бурой ржавчине являются сорта: Ульянов-
ская 101 (Lr10, Lr19), KWS Torridon, Elissavet и Venera (Lr1, Lr10), Sorbas (Lr1, Lr34), Septima
(Lr1, Lr37), Тулайковская надежда (Lr10, Lr19, Lr26).
Выделенные сорта служат источниками генов устойчивости к бурой ржавчине и исполь-
зуются в селекционном процессе яровой пшеницы в Республике Беларусь.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
106 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Н.И. Дробот, Е.А. Сычева, Е.Б. Бондаревич, Л.А. Соловей, Н.И. Дубовец
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 107
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
108 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 109
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
110 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
1
Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Россия, 119991, г. Москва, Ленинские горы, 1, стр. 12
2
Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН
Россия, 117334, г. Москва, ул. Вавилова, 26
3
Институт физической химии и электрохимии им. А.Н. Фрумкина РАН
Россия, 119071, г. Москва, Ленинский пр., 31
e-mail: 4361.idb@bk.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 111
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
112 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Д.И. Каган1, В.Е. Падутов1, В.М. Арнольбик2, С.И. Ивановская1, Т.С. Маркевич1
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 113
В.Н. Кипень1, А.О. Рябцева1, С.А. Котова1, Н.В. Журина2, А.И. Ганджа2, И.С. Цыбовский1
1
ГУ «НПЦ Государственного комитета судебных экспертиз Республики Беларусь»
Республика Беларусь, 220073, г. Минск, ул. Кальварийская, 43
e-mail: slavakipen@rambler.ru
2
РУП «Научно-практический центр НАН Беларуси по животноводству»
Республика Беларусь, 222160, г. Жодино, ул. Фрунзе, 11
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
114 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 115
З.А. Козловская
Институт плодоводства
Республика Беларусь, 223013, Минская обл., пос. Самохваловичи, ул. Ковалева, 2
e-mail: zoya-kozlovskaya@tut.by
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
116 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Е.В.Колбанова
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 117
Е.В. Колбанова
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
118 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 119
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
120 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 121
1
Всероссийский научно-исследовательский институт генетики и разведения
сельскохозяйственных животных
Россия, 196601, г. Санкт-Петербург - Пушкин, Московское шоссе, 55а
e-mail: prof.kouzmina@mail.ru
2
ФГБОУ ВО Чеченский государственный университет
Россия, 364907, Чеченская республика, г. Грозный, Шерипова, 32
e-mail: muti-eva01@mail.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
122 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Л.В. Кухарева1, Б.Ю. Аношенко1, С.В. Кубрак2, Т.В. Гиль1, В.В. Титок1
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 123
Ген DGAT1 известен как кандидат на связь с признаками молочной и мясной продуктив-
ности у крупного рогатого скота, поскольку кодируемый им белок является катализатором за-
ключительной стадии синтеза триглицеридов у млекопитающих.
Несмотря на значительные данные по изменчивости гена DGAT1 у зарубежных пород,
российские породы изучены слабо. Известна частотная изменчивость генотипов и аллелей
данного гена DGAT1 у калмыцкой породы. Практически отсутствуют данные о внутрипород-
ном полиморфизме у костромской породы, одной из лучших пород мясо-молочного направ-
ления селекции. В исследовании представлены результаты анализа изменчивости данного
гена по известной несинонимичной динуклеотидной замене ApA→GpC в экзоне 8 (K232A)
в пяти выборках племенного крупного рогатого скота костромской породы из Костромской
области: ОПХ «Минское», СПК «Гридино» (2008 г.), СПК «Гридино» (2014 г.), ГОУП ПЗ
«Лужки», ОАО Племзавод «Караваево», (n = 349), выполненного методами ПЦР-ПДРФ и
аллель-специфичной ПЦР с применением статистической обработки данных в программе GE-
NEPOP 3.2. В четырех выборках проведен анализ связи данного полиморфизма с признаками
молочной и мясной продуктивности.
Распределение частот аллелей локуса K232A гена DGAT1 в исследованных выборках не-
равномерно: частота K-аллеля варьирует от 0,05 в ОАО Племзавод «Караваево» до 0,60 и 0,70
в ОПХ «Минское» и СПК «Гридино» (2008 г.), соответственно. Сравнение пар популяций по
распределению частот аллелей гена DGAT1 свидетельствует о сходстве большинства из них,
кроме одной пары (ОПХ «Минское» – СПК «Гридино» (выборка 2008 г.), G-тест, P = 0,3. По-
парные межвыборочные значения Fst варьируют в широком интервале – от 0,010 до 0,662.
В отдельных выборках методом дисперсионного анализа выявлена связь гомозигот по
A-аллелю с живой массой телят при рождении (кг) по сравнению с гетерозиготами (P < 0,05),
что ранее не было известно у других пород, а также с удоем (кг, 305 дней лактации) и содер-
жанием молочного белка (P < 0,05). Кроме того, установлена стабильная положительная ассо-
циация содержания жира (P < 0,05) с генотипом AK во всех исследованных выборках, в одной
из них – в трех первых лактациях. У ряда зарубежных пород генотип AK также ассоциирован
с высокими показателями содержания (%) и выхода (кг) молочного жира.
Таким образом, нами впервые получены характеристики внутрипородной изменчивости
данного гена у костромского скота, которые свидетельствуют о существовании различий меж-
ду популяциями (общее значение Fst для всех выборок составляет 0,308). Устойчивая связь
генотипа AK с высоким содержанием молочного жира позволяет рекомендовать данный по-
лиморфизм гена DGAT1 как надежный маркер жирномолочности у костромской породы КРС.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
124 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
В.А. Лемеш1, Г.В. Мозгова1, Я.Э. Пилюк2, С.А. Тронза1, Е.С. Бык2
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 125
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
126 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 127
В.И. Лукша, О.Н. Свиточ, Е.В. Воронкова, О.Н. Гукасян, В.М. Жарич, А.П. Ермишин
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
128 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
1
РУП «Опытная научная станция по сахарной свекле»
Республика Беларусь, 222603, г. Несвиж, ул. Озерная, 1
e-mai: bel-os@tut.by
2
ГНУ «Институт леса НАН Беларуси»
Республика Беларусь, 246001, г. Гомель, ул. Пролетарская, 71
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 129
Е.Н. Макеева
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
130 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
О.А. Межнина, О.Ю. Урбанович
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 131
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
132 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 133
Н.А. Невестенко1, М.М. Добродькин1, И.Г. Пугачева1, Т.В. Никитинская2, О.Г. Бабак2,
А.В. Кильчевский2
Перец сладкий является одной из наиболее ценных овощных культур, богатых биологиче-
ски активными веществами. Ограниченное возделывание перца сладкого в Республике Бела-
русь обусловлено более низкой урожайностью в сравнении с другими овощными культурами,
невысокой рентабельностью производства и небольшим сортиментом отечественных сортов,
способных в полной мере реализовать свой биологический потенциал в агроклиматических
условиях Беларуси. Таким образом, создание отечественных сортов и гибридов, совершен-
ствование технологии выращивания перца сладкого позволит повысить урожайность и сни-
зить его себестоимость.
Целью наших исследований является испытание ранее созданных в процессе гибридиза-
ции и отбора константных форм перца сладкого для пленочных теплиц.
Конкурсное испытание константных линий перца сладкого проводилось на опытном поле
кафедры сельскохозяйственной биотехнологии и экологии УО «БГСХА» в течение 2014–2015 гг.
Изучали 59 линий перца сладкого, стандартом являлся сорт Тройка.
Изучаемые образцы в теплицах высаживались в 3-х-кратной повторности. Агротехника –
общепринятая для перца сладкого в защищенном грунте. Сборы и учет урожая проводились
при достижении плодами технической спелости.
В среднем за 2014–2015 гг. исследований наибольшая товарная урожайность отмечалась
у линий 158/1, 162/1, 149/3 и 137/2 и составила 6,1–6,9 кг/м2, значение стандарта превышено
на 24–100%. По признаку «общая урожайность» высокое значение (6,2–7,1 кг/м2) отмечалось
у линий 158/1, 107/1, 162/1 и 137/2, что больше стандарта на 24–107%. Остальные образцы
имели товарную и общую урожайность ниже 6 кг/м2. Лучшие линии формировали плоды мас-
сой 150–190 г.
В 2015 году у 23 высокопродуктивных линий проводилась оценка показателей качества
плодов. Содержание сухого вещества у лучших по этому признаку линий колебалось от 8,5
до 10,3%, что более чем на 20% превосходит стандарт. По содержанию каротина лучшими
являлись линии 112/2 и 123/1 со значениями 13,3–16,9 мг/кг. По содержанию витамина С пре-
взошли стандарт (148,4 мг/100г) 8 линий со значениями признака 150,4–229,4 мг/100г. Лучшими
по содержанию растворимых углеводов были линии 155/2, 112/2 и 160/0, которые превзошли
стандарт (5,56 мг/100г) более чем на 15%.
В результате проведенных исследований нами отобраны две лучшие линии перца сладко-
го, обладающие высокими хозяйственно ценными признаками, и переданы в Государственное
сортоиспытание под названиями Жоўты магнат и Чырвоны магнат.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
134 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
С.Н. Нековаль, А.В. Беляева, О.А. Маскаленко, Ю.А. Молчанова, С.А. Дешпет
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 135
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
136 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
1
Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства им. академика Л.К. Эрнста
1421432, Россия, Московская обл., Подольский р-н, пос. Дубровицы, 60
2
Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства
141311, Россия, Московская обл., Сергиев-Посад, ул. Птицеградская, 10
e-mail: novg-inna2005@yandex.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 137
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
138 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 139
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
140 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
Кила – наиболее серьёзное заболевание овощных культур рода Brassica, вызываемое обли-
гатным, биотрофным почвенным фитопатогеном Plasmodiophora brassicae Woronin. Инфици-
рование приводит к формированию галлов на корневой системе, что препятствует минераль-
ному и водному транспорту, задерживает рост и, как правило, приводит к гибели растения.
На сегодняшний день не существует эффективных приемов борьбы с возбудителем
P. brassicae, поэтому селекция ориентирована на создание устойчивых сортов Brassica, вклю-
чая представителей B. napus, B. rapa и B. oleracea (Crute и др. 1980).
Предполагается, что устойчивость к киле определяется несколькими генами (Voorips
и Visser, 1993, Laurens и Thomas, 1993). В ходе многочисленных исследований представителей
рода Brassica обнаружены расо-специфичные локусы с полигенным и моногенным контролем
(Landry и др., 1992, Voorrips и др., 1997, Suwabe и др., 2003, Werner и др., 2008), которые мо-
гут быть введены в перспективные отечественные сорта B. oleracea с помощью классических
генетических либо биотехнологических подходов.
Исходя из данной информации, мы задались вопросом о применимости для B. oleracea
маркеров, которые ранее использовались для идентичных ДНК-регионов B. rapa и A. thaliana
и позволяли эффективно идентифицировать устойчивые генотипы. В итоге скрининга соз-
данной в РУП «Институт овощеводства» селекционной коллекции 50 образцов капусты бе-
локочанной на наличие локусов устойчивости к возбудителю килы расы 2 Crr1, Crr2 и Crr3
определены формы с аллелями, детерминирующими невосприимчивость к заболеванию. Это
делает выделенные образцы капусты белокочанной потенциальными кандидатами при отборе
в селекции на устойчивость к киле у Brassica oleracea L. var. Capitata L. f. alba DC. Так, аллель,
определяющий устойчивость по локусу Crr2, выявлен у образцов L141 и Халиф, а по локусу
Crr3 – Дт46, Халиф и части генотипов Sx962; гетерозиготами по локусу Crr2 оказалась часть
генотипов образца Белорусская 85 и по локусу Crr3 – Par9мс.
Таким образом, образцы L141, Халиф, Белорусская 85, Sх962, Дт46, и Par9мс являются
перспективными для включения в селекцию на устойчивость к киле при создании местных
улучшенных сортов и гибридов капусты белокочанной.
Работа выполнена при поддержке Белорусского республиканского фонда фундаменталь-
ных исследований в рамках договора Б15-151.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 141
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
142 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
1
Мироновский институт пшеницы имени В.Н. Ремесло НААН Украины
Украина, 08853, Киевская обл., Мироновский р-н, с. Центральное
2
Институт физиологии растений и генетики НАН Украины
Украина, 03022, г. Киев, ул. Васильковская, 31/17
e-mail: pykserg@ukr.net
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 143
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
144 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
А.О. Рябцева1, В.Н.Кипень1, С.А. Котова1, Н.В. Журина2, А.И. Ганджа2, К. Рембала3 , И.С. Цыбовский1
1
ГУ «Научно-практический центр Государственного комитета судебных экспертиз
Республики Беларусь»
Республика Беларусь, 220073, г. Минск
ул. Кальварийская, 43; e-mail: npc@sudexpertiza.by
2
РУП «Научно-практический центр НАН Беларуси по животноводству»
Республика Беларусь, 222160, г. Жодино, ул. Фрунзе, 11
3
Гданьский медицинский университет, кафедра судебной медицины
г. Гданьск, ул. Марии Склодовской-Кюри 3А, 80-210, Польша
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 145
1
Институт генетики и цитологии НАН Беларуси
Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
e-mail: sauchyndzmitry@gmail.com
2
Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН
Российская Федерация, 664033, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 132
e-mail: borovskii@sifibr.irk.ru
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
146 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 147
О.Г. Силкова1, Ю.Н. Иванова1, Е.А. Кривошеина1, Е.Б. Бондаревич2, Л.А. Соловей2, Н.И. Дубовец2
Для повышения адаптивных свойств у мягкой пшеницы в качестве источника ценных при-
знаков используется рожь Secale cereale L. К настоящему времени широкое распространение
сохраняется за сортами, несущими пшенично-ржаную транслокацию 1RS.1BL (Shlegel, 2010;
Yediay et al., 2010). Во время трансмиссии хромосом ржи в геном пшеницы происходит их мо-
дификация (Badaeva et al., 1986; Bento et al., 2010), однако информация об изменении струк-
туры хромосом субгеномов пшеницы очень ограничена (Bolsheva et al., 1986; Силкова и др.,
2006; Fu et al., 2013).
На модели пшенично-ржаных двойных моносомиков 1Rv-1A было изучено поведение
хромосом в мейозе и проведено кариотипирование самоопыленного потомства F2. С исполь-
зованием GISH в каждом мейоците обнаружено два унивалента, 1R и 1A, иногда хромосомы
пшеницы также были унивалентными. С помощью центромеро-специфичного зонда pAet06
определено, что хромосома 1R ориентируется биполярно чаще, чем 1А (58,6% и 34,7% клеток,
соответственно). Однако количество мейоцитов с расхождением 1R на сестринские хроматиды
увеличивалось до 70,53% клеток. Хромосома 1R разрывалась по центромере в 8,9% мейоцитах,
также происходили разрывы хромосом пшеницы (9,9% мейоцитов). Среди мейоцитов на стадии
АI в 10,89% клеток кроме хромосом 1R и 1A, 2 хромосомы пшеницы делились на сестринские
хроматиды. Хромосома 1R образовывала микроядра в 14,23% мейоцитов, включалась в микро-
споры в виде хроматид в 27,69% и в виде плечей – в 23,65% мейоцитов. Кариотипы потомства
F2 проанализированы с помощью С-окрашивания, GISH и фрагментальной in situ гибридиза-
ции. Кроме ожидаемых изменений для хромосом 1R и 1A в их структуре и элиминации, нами
были обнаружены изменения хромосомного состава всех субгеномов пшеницы и их аберрации.
Кариотипы растений F2 характеризовались анеуплоидией по хромосомам 1D, 2D, 3D, 3B, 3A,
4A, 5D, 6B, 6A, 7D. Хромосома 7D в моносомном состоянии обнаружена у 4-х растений, 1D
и 3D – у трех, 5D – у двух растений. По одному растению были моносомны по хромосомам 2D,
3B, 3A, 4A, 6B и 6A. Структурные изменения произошли у хромосом 1-ой группы генома ржи
и трех субгеномов пшеницы, а также у 2B, 5D, 6B, 7B хромосом. Чаще аберрациям подверга-
лись хромосомы 1R и 6В. Преобладающим типом аберраций являлся центромерный разрыв,
с меньшей частотой встречались делеции и измененный паттерн локализации повтора pSc119.2.
Работа выполнена при финансовой поддержке грантов РНФ № 16-16-00011 и БРФФИ
Б15СО-030.
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
148 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
И.С. Слука1, М.М. Добродькин1, И.Г. Пугачева1, Н.А. Некрашевич2, О.Г. Бабак2, А.В. Кильчевский2
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 149
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
150 Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология
III Международная научная конференция «Генетика и биотехнология XXI века: проблемы, достижения, перспективы»
Секция 3. Генетика, селекция и биотехнология 151