Ayudas Didácticas Bioquímica

BENÉMERITA!UNIVERSIDAD!AUTÓNOMA!DE!PUEBLA!
VICERRECTORÍA!DE!DOCENCIA!
DIRECCIÓN!GENERALDE!EDUCACIÓN!SUPERIOR!
FACULTAD!DE!CIENCIAS!QUÍMICAS!
!
!
!
LICENCIATURA!EN!QUÍMICO!FARMACOBIÓLOGO!
!
ÁREA:!BIOQUÍMICA!6!ALIMENTOS!
ASIGNATURA:!BIOQUÍMICA!I!(MOLECULAR)!
!
CÓDIGO:!QFBM6017!
!
!
CRÉDITOS:!6!
!
!
!
!
FECHA:!MAYO!2009!
!
!
! 1!
!
!
!
NIVEL!EDUCATIVO:!! Licenciatura!
NOMBRE!DEL!PROGRAMA!
Licenciatura!en!Químico!Farmacobiólogo!
EDUCATIVO:!
MODALIDAD!ACADÉMICA:! Presencial!
NOMBRE!DE!LA!ASIGNATURA:! BIOQUÍMICA!I!(MOLECULAR)!
UBICACIÓN:! Nivel!Básico!
CORRELACIÓN:!
–! ASIGNATURAS! Química!Analítica!Básica,!Química!Orgánica!I!
PRECEDENTES:!! (Paralela)!
–! ASIGNATURAS!
Bioquímica!II,!Bromatología,!Biotecnología!
CONSECUENTES:!
–! CONOCIMIENTOS! Química!Analítica!Básica,!Química!Orgánica!
–! HABILIDADES!Y! Responsabilidad,!puntualidad,!trabajo!en!
ACTITUDES!! equipo!
Tolerancia!hacia!los!compañeros,!interés!por!
–! VALORES!PREVIOS:! los!compañeros!y!la!asignatura,!compromiso!
con!la!que!será!su!profesión!
!
CARGA!HORARIA!DEL!ESTUDIANTE!
!
HORAS!POR!
PERIODO! NUMERO!DE!
CONCEPTO!
(PERIODO!=!16! CREDITOS!
SEMANAS)!
! 96!
HORAS!TEORIA!Y!PRÁCTICA.! (4!HT/Semana!=!64! 6!
2!HP/Semana!=!32!
HORAS! DE! PRÁCTICA! PROFESIONAL! 0! 0!
CRÍTICA.!
HORAS!DE!TRABAJO!INDEPENDIENTE.!! 0! 0!
TOTAL! 96! 6!
!
!
!
! 2!
!
!
!
D.!C.!Patricia!Aguilar!Alonso!
M.!C.!Raúl!Ávila!Sosa!Sánchez!
M.!C.!Rosa!Ma.!Dávila!Márquez!
M.!C.!Gonzalo!A.!Flores!Mendoza!
M.C.!Leticia!García!Albarrán!
M.!C.!Francisco!González!Salomé!
AUTORES:! M.!C.!Martín!Lazcano!Hernández!
M.!C.!Armando!Mena!Contla!
M.!C.!Laura!Morales!Lara!
D.!C.!Addí!Rhode!Navarro!Cruz!
M.!C.!Ivonne!Pérez!Xochipa!
M.!C.!Eustoquia!Ramos!Ramírez!
Q.F.B.!Obdulia!Vera!López!
FECHA!DE!DISEÑO:! MAYO!2009!
FECHA!DE!LA!ÚLTIMA!
!
ACTUALIZACIÓN:!
REVISORES:! !
SINOPSIS!DE!LA!REVISIÓN!Y/O!
!
ACTUALIZACIÓN!
!
!
PRESENTACIÓN!
!
!
Este! Curso! introduce! al! alumno! al! estudio! químico! de! las! moléculas! que! están!
presentes! en! un! organismo,! formando,! a! partir! de! pequeñas! estructuras! otras! más!
complejas!que!obedecen!leyes!fisicoquímicas!al!igual!que!cualquier!molécula!presente!en!la!
naturaleza.!
Se! estudian! moléculas! como! los! aminoácidos,! su! comportamiento! químico! y! su!
función!como!predecesores!de!proteínas,!estas!últimas,!importantes!por!la!gran!variedad!de!
funciones! que! desempeñan! y! en! particular! como! catalizadores! biológicos! que! permiten! la!
realización!de!reacciones!que!mantienen!vivo!a!un!organismo.!
Otras! moléculas! importantes! a! estudiar! serán,! las! responsables! del! transporte! de!
energía!en!los!organismos!y!finalmente!se!estudiarán!a!los!carbohidratos!desde!su!aspecto!
químico.!
Todos! estos! conocimientos! permitirán! el! estudio! funcional! de! las! moléculas! y! sus!
interacciones!en!un!organismo,!aspectos!que!se!abordarán!en!la!Bioquímica!II.!
! 3!
!
!
El! estudio! de! las! moléculas! desde! el! punto! de! vista! bioquímico! tiene! aplicación! en!
materias!como!la!Inmunología,!Microbiología,!Bacteriología,!Fisiología,!y!Bromatología!por!
citar!algunas.!
!
OBJETIVOS:!
a.! Educacional:! Los! participantes! de! esta! asignatura! adquirirán! conocimientos! sobre!
Bioquímica! molecular! introduciendo! al! alumno! al! estudio! químico! de! las! moléculas!
que!están!presentes!en!los!seres!vivos,!formando!a!partir!de!pequeñas!estructuras!
otras! más! complejas! que! obedecen! leyes! fisicoquímicas! al! igual! que! cualquier!
molécula!presente!en!la!naturalezai!desarrollarán!actitudes!positivas!hacia!el!trabajo!
en! equipo! y! además! reforzarán! sus! valores! para! desempeñarse! con! éxito!
profesionalmente.! Logrando! formar! de! manera! integral! licenciados! en! Químico!
Farmacobiólogo! con! sentido! ético! y! responsabilidad! social,! cumpliendo! así! con! su!
perfil!de!egreso!universitario!y!de!la!licenciatura!
b.! General:! Al! término! del! curso,! los! alumnos! describirán! químicamente! a! las!
moléculas!presentes!en!los!organismos!vivos!y!relacionarán!sus!estructuras!con!las!
funciones! que! desempeñan! dentro! de! la! célula,! mencionarán! los! factores! físicos! y!
químicos! que! afectan! a! las! biomoléculas! y! explicarán! los! efectos! que! presentan!
dichos! factores! sobre! las! funciones! que! desempeñan! las! biomoléculas.! Adquirirán!
los! conocimientos! necesarios! previos,! que! le! permitirán! estudiar! las! diferentes! vías!
metabólicas!que!realizan!los!organismos!vivos.!
c.! Específicos:2Al!término!del!curso!los!alumnos:!
!! Definirán!Bioquímica!y!relacionarán!a!esta!con!los!diferentes!campos!científicos!en!
que!se!aplica,!ejemplificando!cada!relación!establecida!
!! Explicarán! el! papel! de! los! aminoácidos! como! formadores! de! proteínas,! sus!
características!anfotéricas,!las!reacciones!que!pueden!sufrir!y!los!métodos!con!que!
pueden! ser! separados! e! identificados,! resolviendo! todos! los! ejercicios! que! se! les!
presenten!
!! Explicarán! cómo! se! forma! un! péptido! a! través! de! enlaces! peptídicos! y! cómo! se!
nombrani!ejemplificarán!algunos!péptidos!con!función!biológica!sin!equivocarse!
!! Describirán!de!manera!precisa!a!las!proteínas,!su!funcionalidad!y!su!importancia!en!
los!organismos!
!! Describirán! las! técnicas! adecuadas! para! purificar! proteínas! proponiendo! el! control!
de! los! parámetros! fisicoquímicos! necesarios! para! evitar! la! desnaturalización!
protéica.!
! 4!
!
!
!! Explicarán!la!importancia!de!las!enzimas!en!el!metabolismo!celular.!
!! Explicarán! el! papel! de! los! carbohidratos! en! los! organismos,! sus! características!
químicas,! reacciones! y! usos! como! fuente! de! energía! celular,! resolviendo! todos! los!
ejercicios!que!se!les!presenten!
!! Describirán!con!precisión!al!sistema!ADP6!ATP!como!responsable!de!la!vinculación!
entre! procesos! exergónicos! y! endergónicos,! así! como! su! papel! en! la! conservación!
de!la!energía!de!oxidación!
!! A!través!de!la!investigación!bibliográfica,!exposición!oral,!presentación!de!diagramas!
y!resúmenes,!ejercitarán!su!capacidad!de!análisis,!síntesis!y!comunicación!tanto!de!
manera!individual!como!en!equipo!
!
METODOLOGÍA!
!
! Este! curso! se! fundamenta! en! el! enfoque! participativo,! propositivo! y! autoevaluativo!
requerido!en!cualquier!proceso!de!enseñanza!6!aprendizaje!donde!los!involucrados!de!este!
evento!(facilitador!y!alumnos)!tienen!la!misma!responsabilidad!para!alcanzar!el!éxito!en!la!
tarea.!
! Se!contará!con!el!apoyo!de!lectura!de!artículos!y!discusión!de!los!mismos,!tareas!e!
investigaciones!de!temas!relacionados.!
! Para! el! óptimo! aprovechamiento! de! los! participantes! y! una! mejor! dinámica! de!
trabajo!se!espera!de!los!asistentes:!Puntualidad,!atención,!participación!y!aportación,!todo!
en!un!marco!de!respeto.!
!
BIBLIOGRAFÍA!
!
•! BOHINSKY,!R.C.!!Bioquímica.!!5ª!Edición.!!E.U.A.!!Addison!6!Wesley!!Iberoamericana,!S.!
A.!!
•! LEHNINGER,!A.!L.!!Bioquímica!!2ª!Edición!!España!(Barcelona)!Ediciones!Omega!S.A.!
•! RAWN,! J.D.! ! Bioquímica! ! Tomos! I! y! II! ! 1ª! Edición! ! Mc.! Graw! Hill! ! Interamericana! de!
España!!!
•! STRYER!L.!!Bioquímica!!3ª!Edición!!España!!!Editorial!Reverté,!S!.A.!!!
•! HERRERA,!E.!!Bioquímica!!1ª!Edición!!España!!Interamericana,!S.!A.!!!!
•! HORTON,! MORAN,! OCHS,! RAWN,! SCRIMGEOUR.! Bioquímica! 1ª! Edición! México!
Prentice!Hall!Hispanoamericana,!S.A.!
•! MATHEWS,!VAN!HOLDE.!Bioquímica!Mc.!Graw!Hill!Interamericana!
! 5!
!
!
!
CRITERIOS!DE!EVALUACIÓN!
CRITERIOS!! PORCENTAJE!
Realizará! y! aprobará! las! La!calificación!obtenida!en!el!laboratorio!representa!20%!de!
prácticas! de! LABORATORIO! su! calificación! final! además! de! conferir! el! derecho! a! ser!
con! una! calificación! mínima! evaluado!globalmente!en!la!asignatura,!el!80%!restante!se!
de!7.0!(cada!práctica!contiene! conforma!con!actividades!realizadas!en!la!teoría.!
un! objetivo! específico! que!
implica! la! aplicación! de! la!
teoría!y/o!actividad!a!realizar)!
TEORÍA! 80%!
Exámenes!! Realizar! y! aprobar! exámenes! parciales! referentes! a! la!
teoría,! con! una! calificación! mínima! de! 7.0i! El! promedio! de!
sus!calificaciones!representa!el!50%!de!su!evaluación!
Trabajos!de!investigación! Realizar! trabajos! de! investigación! complementarios! a! los!
temas! tratados! en! clase,! representa! el! 10%! de! su!
evaluación!
Seminarios! Presentar! y! discutir! en! forma! grupal! en! clase! permitirá!
contrastar! la! información! obtenida! por! cada! equipo,!
representa!el!10%!de!su!evaluación!
Participación!activa! Participar! en! clase! mediante! preguntas! y/o! respuestas!
relacionadas! con! el! tema! expuesto,! representa! el! 10%! de!
su!evaluación!
Elaboración!de!modelos! Elaborar! y! presentar! en! una! exposición! modelos!
relacionados!con!la!unidad!estudiada,!representa!el!10%!de!
su!evaluación.!
Tareas!! Realizar! ejercicios! relacionados! con! la! unidad! estudiada,!
representa!el!10%!de!su!evaluación!
Búsqueda!de!datos!en! Presentar! información! obtenida! y! seleccionada! de! la! web,!
Internet! representa!10%!de!su!evaluación!
Discusión!de!artículos! Leer! y! discutir! artículos! referentes! a! los! temas! del! curso!
(proporcionados! por! el! profesor! o! propuestos! por! los!
alumnos),!representa!el!10%!de!su!evaluación!
Autoevaluación! Reflexionar! de! forma! crítica! sobre! su! desempeño,!
representa!10%!de!su!evaluación!
Los!porcentajes!de!las!actividades!realizadas!desde!el!punto!2!son!acordadas!por!el!
facilitador!y!los!alumnos!al!inicio!del!curso!haciendo!que!la!suma!sea!100%!que!
después!se!considera!como!el!80%!de!la!teoría!
!
! 6!
BUAP:!Facultad!de!Ciencias!Químicas!
Departamento:!Bioquímica!–!Alimentos!
CONTENIDO!TEMÁTICO!
!
OBJETIVO!
UNIDAD!! CONTENIDO!TEMÁTICO!
ESPECÍFICO!
! •! Los! alumnos! definirán! !
UNIDAD!I!! Bioquímica! y! relacionarán! a!
! !
esta! con! los! diferentes! campos!
ESTUDIO! Y! científicos! en! que! se! aplica,! !
RELACIONES! ejemplificando! cada! relación!
DE! LA! A)! Definición! de!
establecida.!
BIOQUÍMICA! •! Los! alumnos! relacionarán! a! los! Bioquímica!
! bioelementos!con!las!diferentes!
! B)! Aplicación! de! la!
biomoléculas! que! formani!
! Bioquímica!
asociando! a! los! diferentes!
(4!HORAS)!
componentes! celulares! con! su! C)! Estructura! y! función!
función!de!manera!inequívoca.!
•! Los! alumnos! explicarán! celular!
basándose! en! las! propiedades! D)! El! agua! y! su! función!
fisicoquímicas! del! agua,! la!
importancia! de! esta! en! los! biológica!
organismos!vivos!con!precisión!
!
!
! 7!
!
INTRODUCCIÓN!
!
La! Bioquímica! es! una! ciencia! relativamente! joven! que! se! inicia! como! tal! a! fines! del! siglo! XIX,!
etimológicamente!significa!"Química!de!la!vida",!término!que!a!primera!vista!no!proporciona!una!
visión! clara! de! su! campo! de! estudio,! en! los! siguientes! párrafos! se! presenta! un! panorama!
general!de!este,!su!importancia!y!relación!con!otras!áreas!del!conocimiento!humano.!
!
En!la!definición!etimológica!señalamos!que!la!ciencia!que!nos!ocupa!estudia!la!Química!de!la!
Vida,!esto!nos!conduce!a!una!pregunta!¿Qué!es!la!vida?.!
!
La! vida! ha! sido! definida! siempre! en! términos! de! algunas! propiedades! que! presentan! los!
organismos!vivos,!como!son:!el!crecimiento,!el!desplazamiento,!la!irritabilidad,!la!reproducción,!
etc.!Sin!embargo!hay!materia!no!viva!que!presenta!alguna!de!estas!propiedades,!por!ejemplo,!
los!cristales!crecen.!Es!pues!fácil!observar!la!dificultad!de!definir!a!la!vida!y!sin!embargo,!todos!
diferenciamos!a!un!ser!vivo!de!uno!no!vivo,!aún!más!sabemos!que!el!término!"vivo"!involucra!
una!serie!de!fenómenos!complejos!asociados!a!todos!los!organismos!que!existen.!El!tratar!de!
estudiar!los!fenómenos!que!presenta!cada!organismo!en!particular!significa!un!reto!enorme!y!a!
veces! infructuoso,! el! problema! se! simplifica! al! observar! que! existen! características!
fundamentales! que! comparten! los! organismos! más! sencillos! con! aquellos! más! complejos! la!
primerai!el!hecho!de!estar!formados!por!células!(estructuras!independientes!que!poseen!todas!
las!propiedades!de!la!vida),!segundo!que!en!las!células!existen!un!grupo!reducido!de!moléculas!
que! desempeñan! en! conjunto! las! funciones! propias! de! la! célula.! Por! lo! tanto,! si! queremos!
comprender! que! es! la! vida! debemos! comprender! las! bases! moleculares! de! las! actividades!
celulares.!
!
La!Bioquímica!tiene!como!finalidad!determinar!de!que!manera!el!conjunto!de!moléculas!
que!integran!a!una!célula!interactúan!para!mantener!el!estado!de!vida.!
!
Podemos!presentar!ahora!algunas!de!las!áreas!de!investigación!en!Bioquímica.!
!
1.6! Analiza! la! ultraestructura! de! la! célula! para! determinar! sus! componentes,! su!
ordenamiento!y!su!relación!para!establecer!su!función.!
2.6! Determina! la! estructura! química! de! los! biopolímeros! como! proteínas! y! ácidos!
nucléicos!ya!que!apreciando!la!estructura!de!estos!se!puede!establecer!con!mayor!certeza!su!
función.!
! 8!
3.6! Estudia! la! naturaleza! de! las! reacciones! catalizadas! por! enzimas,! teniendo! como!
objetivos!el!saber!de!que!manera!participa!la!enzima!y!que!factores!pueden!aumentar!o!reducir!
la!actividad!enzimática.!
4.6! Investiga! el! metabolismo! intermediario! (total! de! reacciones! que! se! realizan! en! un!
organismo),! con! la! finalidad! de! determinar! cuales! moléculas! participan! en! una! reacción!
(incluyendo! a! las! enzimas),! los! requerimientos! especiales! de! cada! reacción! y! la! interrelación!
que! exista! entre! un! conjunto! o! conjuntos! de! reacciones.! En! este! campo! existen! subdivisiones!
especializadas! como! la! Bioenergética,! la! Biosíntesis! de! proteínas! y! ácidos! nucléicos,! y,! los!
mecanismos!de!control!celular.!
5.6!El!estudio!de!las!bases!moleculares!de!los!fenómenos!biológicos!permite!establecer!
la!participación!de!las!moléculas!y!después!explicar!de!que!modo!ésta!participación!se!expresa!
siempre!de!una!manera!única.!
!
Es!importante!marcar!que!la!Bioquímica!no!es!una!ciencia!aislada!ya!que!los!conocimientos!de!
la! humanidad! han! crecido! tanto! que! muchas! de! las! disciplinas! científicas! se! han! entrelazado!
estableciéndose!límites!puramente!convencionales,!en!este!marco!señalaremos!algunas!de!las!
ciencias!con!que!se!relaciona!la!Bioquímica:!Biología,!Química!(Inorgánica!y!Orgánica),!Física,!
Fisicoquímica,!Fisiología,!Farmacología,!Bromatología!y!otras.!
!
La! Bioquímica! es! una! ciencia! con! variadas! aplicaciones! de! las! cuales! citaremos! algunos!
ejemplos:!
!
! I.6!ÁREA!DE!LA!SALUD!
!
•! Nutrición.d!Determinando!la!clase!y!cantidad!de!nutrimentos!requeridos!en!la!
dieta!
•! Endocrinología.d! Estableciendo! la! estructura! y! comportamiento! de! las!
hormonas,!ya!que!estas!participan!regulando!el!metabolismo!intermediario!
•! Bioquímica! Clínica.d! El! determinar! los! niveles! de! algunas! moléculas!
presentes!en!el!organismo!ayuda!al!establecimiento!de!un!diagnóstico!clínico,!
por! ejemplo! al! cuantificar! algunas! enzimas! se! sabe! de! la! existencia! de! un!
infarto! al! miocardio,! la! cuantificación! de! bilirrubina! ayuda! a! detectar! una!
posible! obstrucción! biliar,! y,! la! cuantificación! de! glucosa! en! sangre! puede!
ayudar!a!detectar!alteraciones!en!el!metabolismo!de!carbohidratos!
! 9!
•! Microbiología.d! Determinando! las! diferentes! vías! metabólicas! de! los!
microorganismos,! ya! que! el! conocimiento! de! estas! proporciona! herramientas!
claves!para!su!identificación!y!manejo!
•! Farmacología.d!Estableciendo!la!posible!respuesta!de!un!individuo!ante!a!un!
fármaco!debida!a!la!estructura!del!mismo!
•! Genética.d! participando! activamente! en! el! estudio! de! la! estructura! y! función!
del!material!genético,!así!como!la!regulación!en!la!expresión!del!mismo.!
! II!ÁREA!INDUSTRIAL!
!
•! Alimenticia.d! En! la! conservación! y/o! elaboración! de! alimentos! con! un! mayor!
grado!de!aprovechamiento!por!el!hombre!
•! Farmacéutica.d! En! el! diseño! y! estabilidad! de! fármacos! basándose! en! una!
estructura.!
!
! III!EN!EL!CAMPO!
!
•! Agricultura.d! Estableciendo! el! desarrollo! bioquímico! de! las! plantas! y!
participando! en! la! selección! y! uso! apropiado! de! fertilizantes! naturales! o!
químicos!
•! Ganadería.d!Auxilia!en!la!mejora!del!ganado!productor!de!leche!o!carne.!
!
!
!
CARACTERÍSTICAS!DE!LA!MATERIA!VIVA!
!
!
A)!Es!compleja!pero!con!un!alto!grado!de!organización.!
B)!Cada!uno!de!sus!componentes!tiene!una!función!que!cumplir.!
C)!Extrae!y!transforma!la!energía!del!entorno!para!realizar!sus!funciones!vitales.!
D)!Forma!réplicas!exactas!de!sí!misma.!
!
!
!
! 10!
CLASIFICACIÓN!DE!LOS!BIOELEMENTOS!POR!SU!PRESENCIA!Y!!
!
CANTIDAD!EN!LOS!ORGANISMOS!
!
!
!
Presentes!en!todos!los!organismos!
!
!
!
! Bioelementos! ! ! ! !!!!!!!!!Iones!
!
!
!
! ! O2!! ! ! ! ! ! Na+!
!
! ! C!!! ! ! ! ! ! K +!
! Principales!
Trazas!
! ! H2!! ! 2!6!60!%!
! ! ! ! Mg+2! 0.02!60.1!%!
!
! ! N2!! ! ! ! ! ! Ca+2!
!
! ! P!!!! ! ! ! ! ! Cl6!
! Trazas! !
! ! S!
!
!
!
!
Mn+2!
!
Fe+2!
! Ultratraza!
Co+2! Menos!del!0.001!%!
!
Cu+2!
!
Zn+2!
!
! !
!
!
Presentes!en!algunos!organismos!
!
!
! ! B!!!!!!Al!!!!!!Si!!!!!!V!!!!!!Mo!!!!!!I!!!!!!Ni!!!!!!Cr!!!!!!F!!!!!!Se!!!!!!Sn!!!!!!As!
!
Ultratraza!
!
!
! 11!
JERARQUIZACIÓN!DE!LAS!BIOMOLÉCULAS!
!
!
!
! !
!
!
!
!
! Célula!
!
!
!
!
! Lisosomas,!
! Cloroplastos,!
Organelos! Núcleo.!
!
! Mitocondrias!
!
!
! Asociaciones! Ribosomas,!Membranas,!
! Cromosomas,!Complejos!
supramoleculares!
! multienzimáticos!
!
!
!
! Biomacromoléculas! Lípidos,!Proteínas,!Polisacáridos,!
! Ácidos!nucléicos!
!
!
!
! Biomoléculas! Nucleótidos,!Aminoácidos,!Glicerol,!
! Monosacáridos,!Ácidos!grasos!
Monómeras!
!
!
!
! Precursores!
! CO2!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!H2O!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!NH3!
del!entorno!
!
!
!
!
! Bioelementos! C!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!H2!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!N2!!!!!!!!!!!!!!!!!!!O2!
!
!
!
!
!
!
!
! 12!
!
ESTRUCTURA!DEL!AGUA!
!
Es! un! tetraedro! irregular! con! el! átomo! de! oxígeno! en! el! centro,! la! electronegatividad! de! los!
átomos!que!forman!al!agua!hace!posible!la!presencia!de!cargas!parciales!por!lo!tanto!se!dice!
que! el! agua! es! d ip o la r ! lo! que! a! su! vez! permite! que! se! asocie! formando! PUENTES! DE!
HIDRÓGENO.!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
! !
!
!
MODELO!DEL!AGUA!EN!ESTADO!SOLIDO!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
! 13!
!
!
!
MODELO!DEL!AGUA!EN!ESTADO!LÍQUIDO!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
! !
Se!ha!propuesto!que!el!agua!en!estado!líquido!presenta!áreas!ordenadas!y!desordenadas!que!
cambian!su!ubicación!de!manera!constante!originando!los!llamados!"parpadeos"!
!
!
!
!
!
!
PROPIEDADES!DEL!AGUA!COMPARADA!CON!OTROS!LÍQUIDOS!
!
!
PROPIEDAD! LÍQUIDOS!
! Agua! Etanol! Hexano! Cloroformo!
Capacidad!calorífica!(Cal/g)! 1! 0.6! 0.5! 0.24!
Calor!de!vaporización!(Cal/g)! 596!!a!!00C! 262!!a!!640C! 79!!a!!680C! 59!!a!!610C!
Calor!latente!de!fusión!(Cal/g)! 79.7!!a!!00C! 24.9!a!d114.40C! dd! dd!
Tensión!superficial!(erg/cm2)! 76! 22! 18! 11!
Constante!dieléctrica! 79! 24! 1.9! 5!
! 14!
!
!
OBJETIVO!
UNIDAD!! CONTENIDO!TEMÁTICO!
ESPECÍFICO!
! •! Los!alumnos!explicarán!el!papel! A)!Identificación!de!grupos!
UNIDAD!II!! de! los! aminoácidos! como! funcionales,!Carbono!α!
! formadores! de! proteínas,! sus! asimétrico,!radical!R!y!
AMINOÁCIDOS! características! anfotéricas,! las! estereoquímica!(L!
! reacciones! que! pueden! sufrir! y! aminoácidos).!
(14!HORAS)! los! métodos! con! que! pueden! B)!Comportamiento!iónico!en!
! ser! separados! e! identificados,! función!del!pH!
resolviendo! todos! los! ejercicios! C)!Reacciones!químicas!de!
que!se!les!presenten.! los!aminoácidos!
D)!Separación!e!identificación!
de!aminoácidos!
!
AMINOÁCIDOS!
!
Son! compuestos! orgánicos! formados! por! Carbono,! Nitrógeno,! Oxígeno! e! Hidrógenoi! (algunos!
poseen!Azufre).!
!
Los!aminoácidos!reciben!este!nombre!porque!presentan!los!grupos!funcionales!Amino!(NH3+)!y!
carboxilo!(COO6)i!algunos!autores!los!definen!como!derivados!aminados!de!ácidos!carboxílicos.!
!
Con!esta!definición!podemos!encontrar!cientos!de!compuestos,!sin!embargo!nos!limitaremos!a!
estudiar!a!los!llamados! α!aminoácidos,!denominados!así!porque!el!amino!y!el!carboxilo!están!
unidos!al!mismo!carbono.!
!
!
!
!
! 15!
!
!
Las! funciones! que! cumplen! los! aminoácidos! en! un! organismo! son! variadas! siendo! la! más!
importante!la!de!formar!proteínas.!
!
! FUNCIONES!DE!LOS!AMINOÁCIDOS!
! !! Aminoácidos!para!síntesis!de!proteínas!!
! !! !Precursores!de!otras!moléculas!no!proteicas!de!importancia!biológica!
! !! Donadores!de!Nitrógeno!para!otras!moléculas!no!protéicas!
! !! Fuente! de! energía! cuando! los! combustibles! usuales! (carbohidratos! y!
! lípidos)!no!están!disponibles!
!
!
ESTEREOQUÍMICA!
!
Los! aminoácidos! que! emplean! los! organismos! para! formar! proteínas! u! otros! compuestos!
presentan! una! disposición! espacial! específica! y! es! la! denominada! L! (en! orgánica! S)! para!
entender!esta!forma!tomaremos!como!ejemplo!a!un!aminoácido,!la!Serina!!
!
!
!
!
(b)! Se! orienta! la! molécula! con! el! grupo! de!
!
(a)! A cada grupo unido al mayor! prioridad! 646! hacia! atrás! del! carbono!
! carbono α (quiral) se le asigna un quiral!y!se!traza!un!círculo!del!más!pequeño!al!
valor considerando su peso más! grandei! si! seguimos! el! sentido! de! las!
!
manecillas! del! reloj! se! dice! que! el! compuesto!
!
atómico, siendo 4 el más alto es! D! (en! orgánica! R)! si! va! en! el! sentido!
contrario!de!las!manecillas!se!dice!que!es!L!(en!
!
orgánica!S)!!
! 16!
!
!
FORMA!IÓNICA!
!
Dada!la!proximidad!de!los!grupos!amino!y!carboxilo!se!influyen!mutuamente!haciendo!que!se!
ionicen!y!así!los!aminoácidos!se!encuentran!en!forma!de!Zwitterión.!
!
!
!
CLASIFICACIÓN!DE!AMINOÁCIDOS!
!
! Por!ser!formadores!de!Proteínas! Por!la!función!que!realizan!en!la!
! !! Protéicos! proteína!
! !! No!protéicos! !!Esenciales!
! !! Poco!frecuentes! !!No!esenciales!
!
! Por!su!síntesis!por!los!organismos!
!
!
!! Dispensables!
! !! Indispensables!
!
!
!
!
!
!
! 17!
!
CLASIFICACIÓN!DE!AMINOÁCIDOS!POR!LA!POLARIDAD!!
!
DEL!GRUPO!!!!!R!!!!!a!!!!!pH!!=!!7.0!
!
!
!
!
Aminoácidos!No!Polares!
!
!
!
! ! !!!!!R!! ! ! ! ! ! ! ! R!
!
Alanina! H Leucina! H
Ala! Leu!
%
A! CH 3 C COO L! CH3
CH (CH2 #
! +
C COO
NH 3 CH3
! ! +
! NH3
! !
H
Valina! Isoleucina! H
Val! CH 3
#
Ile!
CH C COO '
V! I! CH3 CH2 CH %C COO
CH 3
! NH 3
+ +
CH3 NH3
! ! !
!
!
Metionina! H Triptófano!
H
Met! Trp!
M! CH3 S CH2 CH2 $C COO
& W! CH2 !C COO
$
!
+
! NH3
+ NH3
! ! N
! H
Fenilalanina! Prolina! !
H
Fen!!(Phe)! Pro! COO
$
F! $ P! H
CH2 !C COO
! N
! NH3
+
H
! ! !
!
! ! ! ! !!!!!!Iminoácido!
!
!
!
! 18!
Aminoácidos!Polares!sin!carga!
!
!
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!R! ! ! !!!!R!
! H
H
Glicocola!(Glicina)!! Serina! $
HO CH 2 !C COO
Gli!! H !C COO
$ Ser!
G!! S! NH 3
+
! NH 3
+ !
! !
Treonina!! Cisteína! H
OH H
Tre!(Thr)! Cis!(Cys)! $
HS CH 2 !C COO
T! CH3 CH C COO # C!
! NH 3
+
! NH3+ !
! !
Tirosina! Asparagina!
Tir!(Tyr)! Asn! H
%
Y! CH2 CH COO N! O $
C CH 2
! NH3
+ !C COO
HO NH 2
! ! NH3
+
! !
!
!
Glutamina!
Gln! H
Q! O $
C CH 2 CH 2 !C COO
!
! NH 2
+
NH 3
! !
!
!
Aminoácidos!con!carga!negativa!(aminoácidos!ácidos)!
!
!
! ! ! ! ! ! ! R!
!
Ácido!aspártico! H
Asp! O $
C CH 2 !C COO
D! $
O
! NH 3
+
! !
!
! ! Ácido!Glutámico! H
Glu! O
$
C CH2 CH2 !C COO
E! $
O
! +
NH3
! !
!
Aminoácidos!Polares!con!carga!positiva!(aminoácidos!básicos)!
! 19!
!
!
! ! ! R! ! ! ! ! ! ! R!
!
H
Histidina! H Arginina!
His! Arg! $
# NH2 C NH (!CH2!)! 3 !C COO
H! CH2 C COO R!
! +
H N NH + NH2!
+
NH3
+
! NH3 !
!
!
!
! ! ! ! ! ! ! ! !!!!!!R!
!
H
! ! ! Lisina!
! ! ! Lis!(Lys)! NH 3
+
CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 !C COO
$
! ! ! K!
+
! NH 3
!
!
!
!
!
!
AMINOÁCIDOS!POCO!FRECUENTES!
!
(Sólo!se!encuentran!en!algunas!proteínas)!
!
!
!
H
! HO
! NH3
+
CH2 CH2 CH 2 CH2 !C COO
$
+ %
! N COO
OH +
! NH3 H H
! !
!
! !!!!!Hidroxilina!(5!6!Hidroxilisina)!! ! ! !!4!6!Hidroxiprolina!
!
!
!
!
I I
! H
! $
O CH2 !C COO
!
! I I NH3
+
! !
! ! ! ! ! ! Tiroxina!!
!
!
!
!
! 20!
AMINOÁCIDOS!NO!PROTÉICOS!
!
(No!se!encuentran!en!proteínas,!pero!cumplen!funciones!específicas!en!el!organismo)!
!
!
!
!
!
! H H
! + $ +
NH 3 CH 2 CH 2 CH 2 !C COO NH 3 C NH CH2 CH 2 CH2 !C COO
$
!
! NH 3
+ O +
NH3
! ! !
! ! Ornitina!! ! ! ! ! ! Citrulina!
!
!
!
!
!
! NH 3
+
!
+ ( $ $
! NH3 CH2 CH2 COO OOC (!CH 2!)! 2 !C COO
!
!
! H
!
! ! !!β!6!Alanina!! ! ! ! ! Ácido!!D!6!Glutámico!
!
!
!
!
!
! 21!
VALORES!DE!pK!DE!LOS!AMINOÁCIDOS!!
!
FORMADORES!DE!PROTEÍNAS!
!
!
!
! ! ! !
Aminoácido! pK1!(!dα!COOd)! pK2!(!dα!NH3+)! pK3!(!d!R)!
! ! ! !
Ala!!(A)! 2.34! 9.69! 6666!
Val!!(V)! 2.32! 9.62! 6666!
Leu!!(L)! 2.36! 9.60! 6666!
Ile!!(I)! 2.36! 9.68! 6666!
Pro!!(P)! 1.99! 10.60! 6666!
Fen!!(F)! 1.83! 9.13! 6666!
Trp!!(W)! 2.38! 9.39! 6666!
Met!!(M)! 2.28! 9.21! 6666!
Gli!!(G)! 2.34! 9.6! 6666!
Ser!!(S)! 2.29! 9.15!
∗! !
Tre!!(T)! 2.69! 10.43!
∗! !
Cis!!(C)! 1.71! 10.78! 8.33!
Tir!!(Y)! 2.20! 10.07! 9.11!
Asn!!(N)! 2.02! 8.8!
∗! !
Gln!!(Q)! 2.17! 9.13!
∗! !
Asp!!(D)! 2.09! 9.82! 3.86!
Glu!!(E)! 2.19! 9.67! 4.25!
Lis!!(K)! 2.18! 8.95! 10.53!
Arg!!(R)! 2.17! 9.04! 12.48!
His!!(H)! 1.82! 9.17! 6.0!
!
dddd!No!presentan!
∗!!No!determinadas!
!
!
! 22!
REACCIONES!DE!LOS!AMINOÁCIDOS!
!
Los! aminoácidos! son! capaces! de! sufrir! reacciones! en! cualquiera! de! sus! grupos! funcionales!
(amino,!carboxilo!o!radical),!se!presentan!sólo!las!más!importantes!para!el!curso.!
!
Debidas!al!grupo!carboxilo!
!
1.2Formación!de!Ésteres!
2.2Formación!de!haluros!de!ácido!
3.2Sufren!reducción!
! LiBH4!
R!6!CH!6!COO!6!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!R!6!CH!6CH2!6OH!
!
! ! ! !!!!!*NH3! ! ! ! !!!!!!!!*NH3!
!
4.!Sufren!descarboxilación!
!
! Ejemplos!
! + CO2
! NH3 NH 3
+
! $
CH 2 !C COO CH 2 !C H
!
+
! HN N
H
+
HN N
H
!
!
! Histidina
Histamina !
!
!
!
+ NH 3
NH 3
$ $
CH 2 !C COO CH 2 !C COO
H O
N N
Ácido!
Triptófano Indolpirúvico
CO2
$
CH2 COO
Ácido!Indolacético !
! 23!
!
La!descarboxilación!de!Ornitina!origina!a!la!Putrescina!
La!descarboxilación!de!Lisina!origina!a!la!Cadaverina!
La!descarboxilación!de!Tirosina!origina!a!la!Tiramina!
Putrescina! y! Cadaverina! son! sustancias! tóxicas! que! reciben! el! nombre! genérico! de!
PTOMAÍNAS.!
!
Debidas!al!grupo!Amino!
!
1.!Acilación:!Reacción!utilizada!en!la!síntesis!"in!vitro"!de!péptidos!
!
!
+ Cl
! NH 3
! CH2 C O
$ O
! ! R! !C ! COO! !!!!!!+!
!
H
! ! ! ! !! ! !! Clorocarbonato!de!bencilo!
!
! H
!
! $
R !C COO
!
! NH
! ! ! ! ! ! ! ! !!!!Carbobenzoxiderivado!
! CH2 !! O C O
!
! !
!
!
!
2.! Reacción! con! Ninhidrina:! Reacción! utilizada! para! la! detección! y! medición! cuantitativa! de!
aminoácidos!y!péptidos.!
!
a)!
!
! ! H ! ! ! O ! !!!!!!!CO2! O
! $
R !C COO OH OH
! ! !!!!!!!!!+!! ! !OH ! ! ! ! !! ! !H +!!NH3+!
! NH 3
+
! ! ! ! ! ! O ! !!!!!R!6CHO! O
!
! !
! ! ! ! Ninhidrina! ! ! !!!!!!!!Hidrantina!
!
! 24!
!
b)!
!
Hidrantina!!!!+!!!!Ninhidrina!!!!+!!!!NH3+!
!
! ! ! ! ! ! ! ! !!3!H2O!
!
! O
O
!
Azul!de!Ruheman,!tiene!
!! N !!
un!color!azul!6!violáceo!excepto!
para!la!Prolina!que!es!amarillo!
! O
O
! !
!
!
3.! Reacción! con! 2,4! C! Dinitro! Fluorobenceno! (Reactivo! de! Sanger):! Reacción! utilizada! para!
determinar!el!residuo!N!6!Terminal!de!cadenas!peptídicas.!
!
! R
! ! H ! ! ! ! !!!HF!
NH !C H
! !F
!!
$ !!
R
! !C !COO +! (
!!
! !NO2 !NO2
COO
NO2
! +
NO2
! !
NH 3
! ! ! ! ! ! ! ! ! Dinitro!fenil!derivado!(DNP) !
! ! ! ! ! ! ! ! Presenta!color!amarillo!
!
4.! Reacción! con! Fenil! isotiocianato! (Reactivo! de! Edman):! Reacción! utilizada! principalmente!
para!determinar!la!secuencia!de!cadenas!peptídicas!iniciando!por!el!residuo!N!6!Terminal.!
!
a)! R
H S
!
! $
N C S
N C NH H
R !C COO !C
+!
!!
! ! ! !! **! !! !!
! NH 3
+
COO
(
! ! ! !
!
b)!
S
!
! R
S C
! N NH
! N C NH !C H
! **! !!
!! C C H
! COO
(
O R
! !
! ! ! ! ! ! ! ! ! Derivado!Feniltiohidantoína!
! ! ! ! ! ! ! ! ! !!!!!!(PTH)!
!
! 25!
!
5.!Reacción!con!5!C!dimetilamino!naftalén!sulfonilo!(Cloruro!de!dansilo):!Reacción!utilizada!para!
determinar!el!residuo!N!6!Terminal!
!
! H
! SO2!Cl
! !R !!C ! !!!!+!
!!
$ CH 3 !!
COO
! N
! + CH3
NH 3 !
! !
!
! R
SO2 NH !C
Derivado!de!dansilo!
H
! CH3 !!
!!
(
! N COO
! CH3
!
!
Debidas!al!Radical! !
!
!
1.!Formación!de!Cistina!por!oxidación!de!Cisteína!
!
!
!
!
2.!Esterificación!de!Serina!
!
! 26!
!
!
!
!
!
!
!
!
REACCIÓN!ESPECIAL:!Formación2Del2Enlace2Peptídico!
!
!
!
!
!
!
!
!
! 27!
!
!
OBJETIVO! CONTENIDO!
UNIDAD!!
ESPECÍFICO! TEMÁTICO!
! •! Los! alumnos! explicarán! cómo! se! !
UNIDAD!III!! forma! un! péptido! a! través! de! enlaces!
! !
peptídicos! y! cómo! se! nombrani!
PÉPTIDOS! ejemplificarán! algunos! péptidos! con! función! A)!Estructura! de! los!
! biológica!sin!equivocarse.!
! péptidos!
•! Los!alumnos!inferirán!con!precisión!
! B)!Importancia!
que!la!secuencia!aminoacídica!de!un!
(4!HORAS)!
péptido!es!determinante!en!la!función!
! Biológica! de! algunos!
específica!que!desempeñan,!comparando!a!
Vasopresina!y!Oxitocina! péptidos!
!
!
!
PÉPTIDOS!
!
!
!
!
!
Dirección!de!los!Péptidos.!
!
!
!
! O O O
O
!
! +NH3 CH C NH CH C NH CH C NH CH C
! O
'
! R R R R
! !
! Residuo!!
Residuo!! Carboxilo!Terminal!
Amino!Terminal! !
! (Cdterminal)!
(Ndterminal)!
!
!
! 28!
!
Nomenclatura!
!
!
1º.6!Los!péptidos!se!nombran!como!derivados!del!aminoácido!C6terminal.!
2º.6!Todos!los!residuos!(aminoácidos)!restantes!se!nombran!como!radicales!con!la!terminación!
i l .!
3º.6!!Se!nombran!a!partir!del!residuo!N6terminal!hacia!el!C6terminal.!(dirección!del!péptido).!
!
Ejemplo!
! O O O
! O
! +NH3 CH C NH CH C NH CH C NH CH C
! O
'
! CH2 CH
CH3 H
!
! CH 3 CH 3
SH
! !
Alanilcisteinilvalinilglicina!
o!
Ala!6!Cis!6!Val6!Gli!
o!
A!6!C!6!V!–!G!
!
!
! 29!
!
!
PÉPTIDOS!NO!PROTEÍCOS!
!
!
!
!
! GLUTATIÓN
! O
! O
α
! +
NH3 CH CH2 '
! γCH2 C NH CH C NH CH2 COO
! '
! COO CH2
!
! SH
! γ 'Glutamilcisteinilglicocola 77777(GSH) !
!
!
!
!
!
! ! ! ! Oxidación!! !!!Reducción!
!
!
!
!
!
!
! O O
! α
! NH 3+ CH CH 2
γCH 2 NH CH
C C NH CH 2 '
! COO
! ' CH 2
! COO
! S
!
!
! S
!
! O CH 2 O
! α
! +
! NH 3 CH CH 2 CH 2 C NH CH C NH CH2 COO'
! γ
! COO
'
! !
! (GS6SG)!
!
!
!
! 30!
!
!
!
!
!
Residuo!#!3!=!I! ! ! ! ! ! Residuo!#!3!=!F!
!
Residuo!#!8!=!L! ! ! ! ! ! Residuo!#!8!=!R!
!
!
!
!
!
Orn!=!Ornitina.!
!
!
! 31!
!
!
PEPTIDOS!PROTEÍCOS!
!
!
! CININAS:!
!
R !6!P !6!P !6!G !6!F !6!S !6!P !6!F !6!R ! ! B R A D IC IN IN A !
K !6!R !6!P !6!P !6!G !6!F !6!S !6!P !6!F !6!R ! ! L IS IL !B R A D IC IN IN A !
M !6!K !6!R !6!P !6!P !6!G !6!F !6!S !6!P !6!F !6!R ! M E T IO N IL !L IS IL !B R A D IC IN IN A !
!
La!Bradiquinina!(Bradicinina)!es:!!
!! Vasodilatador!!
!! Provoca!la!contracción!de!músculo!liso!no!vascular!
!! Aumenta!la!permeabilidad!vascular!!
!! Relacionado!con!el!mecanismo!del!dolor.!!
!! Se!secreta!en!las!vénulas!y!no!en!las!arteriolas.!
!
! La!hormona!del!crecimiento!(GH)!o!somatotropina!!
! !La!hormona!estimulante!de!tiroides!(TSH)!!
! !Adrenocorticotrófica!o!adrenocorticotropina!(ACTH)!
! !La!prolactina!(LTH),!también!llamada!hormona!lactopénica!o!luteotropina!!
!
En!1975,!los!científicos!identificaron!una!sustancia!llamada!endorfina!que!actúa!en!animales!de!
experimentación! controlando! el! dolor! en! situaciones! de! estrés.! La! endorfina! y! la! ACTH! se!
forman!a!partir!de!una!proteína!de!cadena!larga!que,!más!tarde,!se!rompe.!!
La!misma!prohormona!que!contiene!la!ACTH!y!la!endorfina!también!contiene!otros!péptidos!
cortos!como! la! hormona! estimulante! del! melanocito.! Esta! sustancia! es! análoga! a! la! hormona!
que! regula! la! pigmentación! en! peces! y! anfibios,! pero! en! los! seres! humanos! apenas! tiene!
importancia.!!
Parathormona,! también! denominada! hormona! paratiroidea! o! PTH,! esta! hormona! es! un!
péptido,! sintetizado! primero! en! los! ribosomas! como! una! preprohormona! de! 110! aminoácidos,!
después!se!escinde!en!una!prohormona!de!90!aminoácidos!y!ya!en!el!retículo!endoplasmático!y!
en!el!aparato!de!Golgi!se!convierte!en!una!cadena!peptídica!de!84!aminoácidos,!estructura!que!
corresponde!a!la!parathormona.!!
!
! 32!
!
!
!
!
UNIDAD!!
! •!Los!alumnos!describirán!de!manera!precisa!los! !
UNIDAD!IV!!
diferentes!niveles!estructurales!de!una!proteína! !
!
PROTEÍNAS! relacionándolos! con! los! enlaces! que! presentan! A)! Clasificación! y!
! y!la!funcionalidad!de!la!molécula!a!medida!que! estructura!
!
! crece!su!complejidad! B)! Niveles! estructurales!
(18!HORAS)! •!Los! alumnos! emplearán! diferentes! técnicas! de!las!proteínas!
!
para! determinar! el! nivel! estructural! primario! de! C)!Alteraciones!
una! proteína,! resolviendo! diferentes! ejercicios! estructurales! de! las!
que!se!les!presenten! proteínas! por! diversos!
•!Los! alumnos! relacionarán! con! certeza! el! agentes!
nombre!de!proteínas!específicas!con!su!función! D)!Solubilidad! de! las!
en!2!listas!que!se!les!presenten! proteínas!
•!Los! alumnos! explicarán! la! acción! de! agentes! E)! Purificación! y!
que! afectan! la! estructura! de! las! proteínas,! caracterización! de!
ejemplificando!el!efecto!de!algunos!agentes! proteínas!
•!Los!alumnos!propondrán!diferentes!técnicas! !
para!purificar!proteínas!de!origen!intra!o!
extracelular,!resolviendo!diferentes!ejercicios!
que!se!les!presenten!
!
!
!
! 33!
!
CLASIFICACIÓN!DE!PROTEÍNAS!
!
Son! biomacromoléculas! formadas! por! cadenas! de! aminoácidos! unidos! por! enlaces!
peptídicos!y!con!un!peso!molecular!mayor!o!igual!a!5000g/mol.!Se!descubrieron!en!1838!y!
hoy!se!sabe!que!son!los!componentes!principales!de!las!células!y!que!suponen!más!del!50%!
del! peso! seco! de! los! animales.! El! término! proteína! deriva! del! griego! proteios,! que! significa!
primero.!!
Las!proteínas!son!biomacromoléculas!que!se!han!clasificado!considerando!diferentes!aspectos!
y!así!tenemos:!
!
! Por!su!composición:!
!
a)! Simples.6!Son!aquellas!que!al!hidrolizarse!sólo!liberan!aminoácidos.!
!
! ! b)! Conjugadas.6! Son! aquellas! que! al! hidrolizarse! liberan! aminoácidos! y! otro!
compuesto!que!recibe!el!nombre!de!grupo!prostético!(átomo!o!molécula).!
!
!
Se!subclasifican!de!acuerdo!a!su!grupo!prostético!
!
(Algunos!ejemplos!son)!
!
!
NOMBRE! GRUPO!PROSTÉTICO!
!
! Metaloproteínas! Iónes!metálicos!
!
Lipoproteínas! Lípidos!
!
! Cromoproteínas! Algún!pigmento!
!
Nucleoproteínas! Ácido!nucléico!
!
! Glicoproteínas! Carbohidratos!
!
!
!
! 34!
!
Por!su!solubilidad!
!
!
!
NOMBRE! SOLUBLES!EN!:!
Albúminas! Agua!y!soluciones!salinas!
Globulinas! Soluciones!salinas!isotónicas!
Histonas! Soluciones!salinas!
Prolaminas! Etanol!70!u!80!%!
Glutelinas! En!ácidos!y!bases!diluidos!
Escleroproteínas! Insolubles!en!agua!
!
!
! Por!su!forma:!
!
! ! a)! Fibrosas.6! Son! aquellas! que! parecen! enrollarse! a! lo! largo! de! un! eje! común.!
Generalmente! estas! proteínas! efectúan! funciones! de! sostén,! Por! ejemplo:! Colágeno! presente!
en!tejido!conjuntivo.!
!
!
! ! b)!Globulares.6!Son!aquellas!que!presentan!plegamientos!que!les!dan!apariencia!
esférica.! Generalmente! estas! proteínas! están! asociadas! a! funciones! dinámicas,! por! ejemplo:!
Hemoglobina,!Enzimas,!Inmunoglobulinas!
!
! 35!
!
! Por!su!función:!
!
! ! a)!Estructurales.6!Por!ejemplo!las!que!forman!parte!de!la!membrana.!
!
! ! b)!Reserva.6!Por!ejemplo!Gliadina!en!el!trigo,!Albúmina!en!el!huevo.!(El!hombre!
no!tiene!proteínas!de!reserva).!
!
! ! c)!Hormonas.6!Por!ejemplo!la!Insulina!
!
! ! d)! Catalizadoras.6! Son! aquellas! que! aceleran! reacciones! y! reciben! el! nombre!
genérico!de!Enzimas.!
!
! ! e)!Toxinas.6!Por!ejemplo!la!Ricina!o!algunos!venenos!de!serpientes.!
!
! ! f)! Inmunoglobulinas.6! Son! las! encargadas! de! proteger! al! organismo! de! agentes!
extraños.!En!conjunto!confieren!la!llamada!inmunidad!humorali!ejemplos!son:!IgG,!IgM!IgE.!
!
! ! g)!Transportadoras.6!Son!aquellas!que!trasladan!moléculas,!iones!o!electrones.!
!
NIVELES!ESTRUCTURALES!
Las! proteínas! presentan! diferentes! estados! en! su! plegamiento! hasta! alcanzar! el! de! mayor!
complejidad!determinado!genéticamente!y!en!éste!son!capaces!de!realizar!su!función!biológicai!
en!el!esquema!se!presentan!estos!niveles!estructurales.!
! 36!
!
!
ENLACES!
NIVEL! REPRESENTA!
CARACTERÌSTICOS!
! !
Primario! Tipo,!cantidad!y!secuencia!de!aminoácidos! Enlace!peptídico!
en!la!proteína!
!
Puentes!de!hidrógeno!
Orientación!geométrica!(parcial)!de!la!
Secundario! establecidos!entre!los!
cadena!
integrantes!del!enlace!
peptídico!
!
Enlaces!no!covalentes!como:!
Orientación!espacial!de!la!cadena!
iónicos!y!puentes!de!
Para!algunas!proteínas!éste!es!su!nivel!más!
Terciario! hidrógeno!entre!radicales,!
complejo!y!por!lo!tanto!presentan!su!
efecto!hidrofóbico!
actividad!biológica!
Covalentes!lábiles!como!el!
puente!disulfuro!
! !
Resulta!de!la!asociación!de!varias!cadenas! Enlaces!no!covalentes!como:!
que!se!encuentran!en!su!nivel!terciario.! iónicosy!puentes!de!
Cuaternario!
Para!algunas!proteínas!éste!es!su!nivel!más! hidrógeno!entre!radicales.!
complejo!y!por!lo!tanto!presentan!su! Covalentes!lábiles!como!el!
actividad!biológica! puente!disulfuro!
!
NIVEL PRIMARIO
! 37!
!
POSIBLES!ETAPAS!PARA!DETERMINAR!EL!NIVEL!ESTRUCTURAL!!
!
PRIMARIO!DE!UNA!PROTEÍNA.!
!
!
ESTUDIOS!PRELIMINARES.!
!
1º.6!Determinar!el!peso!molecular.!
•Cromatografía!de!exclusión!molecular.!
!
2º.6!Determinar!el!tipo!de!grupo!prostético!
•Técnicas!de!análisis!
!
3º.6!Determinar!la!presencia!de!puentes!disulfuro.!
•Técnicas!de!modificación!química!selectiva.!
1.6!Reducción!con!m e r c a p t o e t a n o l ! o ! d i t i o e r i t r o l .!
i).!Método!de!Ellman!
ii).6!Reducción.!
iii).!Método!de!Ellman!
!
2.6!Oxidación!con!ácido!perfórmico.!
i).!Electroforesis!
ii).6!Oxidación!
iii).!Electroforesis!
!
DETERMINACIÓN!DE!CLASE!Y!CANTIDAD!DE!AMINOÁCIDOS.!
!
1º.6!Se!determina!el!número!de!cadenas!polipeptídicas.!
1.6!Determinando!el!aminoácido!carboxilo!terminal.!
a).6!Hidrazina.!
b).6!Carboxipeptidasa.!
!
2.6!Determinando!el!aminoácido!amino!terminal.!
a).6!Aminopeptidasa.!
b).6!Cloruro!de!dansilo.!
c).6!Reactivo!de!Sanger.!
d).6!Reactivo!de!Edman.!
2º.6!Si!tiene!dos!o!más!cadenas!polipeptídicas!se!separan!por!electroforésis.!
! 38!
3º.6! Si! la! proteína! tiene! puentes! disulfuro! (se! determinó! en! el! tercer! paso! de! los! estudios!
preliminares).!Se!reducen!con!mercaptoetanol.!
4º.6!Se!alquilan!todos!los!grupos!sulfhidrilo!con!ácido!iodoacético.!
5º.6!La!proteína!se!somete!a!hidrólisis!total.!
1.6!Hidrólisis!ácida!con!HCl!6N!o!H2SO4!8!N.!
2.6!Hidrólisis!básica!con!NaOH!2N!o!Ba!(OH)2!8N.!
3.6!Hidrólisis!enzimática!con!Pronasas.!
!
!
!
DETERMINACION!DE!LA!SECUENCIA!DE!AMINOÁCIDOS.!
!
1º.6!Se!identifican!los!aminoácidos!N!y!C!terminal.!
2º.6! La! cadena! polipeptídica! intacta! se! rompe! en! una! serie! de! fragmentos! menores!
mediante!hidrólisis!enzimática!o!química.!
1.6!Tripsina.!
2.6!Quimotripsina.!
3.6!Pepsina.!
4.6!Termolisina.!
5.6!Bromuro!de!cianógeno.!
!
3º.6!Se!separan!los!fragmentos.!
4º.6!Determinar!la!secuencia!de!cada!fragmento.!
1.6!Método!de!Edman.!
!
5º.6! Se! hidroliza! otra! muestra! de! la! cadena! polipeptídica! usando! un! método! diferente! al!
empleado!anteriormente.!
6º.6!Se!separan!los!fragmentos.!
7º.6!Se!determina!la!secuencia!aminoacídica!de!cada!fragmento.!
8º.6! Para! proporcionar! la! secuencia! completa,! se! comparan! las! secuencias! aminoacídicas!
de! los! 2! conjuntos! de! fragmentos! peptídicos,! superponiendo! los! fragmentos! de! la! 1ª.!
hidrólisis!parcial!con!los!fragmentos!obtenidos!en!la!2ª.!hidrólisisi!tomando!como!punto!
de!referencia!los!aminoácidos!N!y!C!terminales.!
! 39!
!
DETERMINACIÓN!DEL!PESO!MOLECULAR!
!
CROMATOGRAFÍA!DE!EXCLUSIÓN!
!
o!
!
FILTRACIÓN!EN!GEL!
!
Para!esta!técnica!se!utiliza!un!polímero!de!glucosa!
que!forma!enlaces!cruzados!con!glicerol!originando!
las! llamadas! villas! con! poros! de! diámetro!
específico!que!permite!filtrar!moléculas!debido!a!su!
tamaño.!
El! gel! debe! estabilizarse! al! pH! del! buffer! utilizado!
durante!la!separación!para!mantener!el!tamaño!del!
poro!constante.!
!
!
Las! moléculas! más! grandes! atraviesan! la! columna! utilizando! los! espacios! que! dejan! las! villas!
del!gel!haciendo!su!recorrido!en!poco!tiempo!mientras,!que!las!moléculas!más!pequeñas!“caen”!
al!interior!de!las!villas!lo!que!retarda!su!movimiento!en!la!columna.!
!
! 40!
!
!
Calibración!de!la!Columna!
Proteína!de!P.M!conocido!! Fracción!en!la!que!eluye!!
A!! 10!a!20!!
(130!000!daltones)!!
B! 30!a!40!!
(80!000!daltones)!!
C! 50!a!55!!
(60!000!daltones)!!
!
La!proteína!problema!eluyó!en!las!fracciones!41!a!50!¿Cuál!es!su!peso!molecular?!
!
!
! 41!
!
ULTRACENTRIFUGACIÓN!
!
!
Esta!técnica!se!fundamenta!en!la!sedimentación!de!moléculas!de!diferentes!densidades!sujetas!
a!una!fuerza!centrífuga!en!donde!se!aumenta!en!miles!de!veces!la!fuerza!de!gravedad.!
!
Se!requiere!de!una!solución!con!un!gradiente!de!densidad!que!dependiendo!de!la!molécula!a!
medir!puede!ser!de!Sacarosa!o!de!Cloruro!de!Cesio.!
!
! !
La!molécula!sedimenta!hasta!que!se!localiza!en!una!zona!cuya!densidad!es!igual!a!la!suya.!
!
El!peso!molecular!se!detecta!midiendo!la!velocidad!del!movimiento!de!la!muestra,!ésta!se!mide!
en! unidades! Svedberg! (1! S! =! 1! X! 10613! segundos)! y! se! considera! entre! otros! parámetros! la!
velocidad!angular!del!rotor,!distancia!recorrida!por!la!muestra,!fuerza!de!fricción!y!la!densidad!
del!solvente!
!
Debido!a!la!velocidad!a!la!que!se!trabaja!el!proceso!se!sigue!con!películas!de!alta!velocidad.!
!
! 42!
DETERMINACIÓN!DE!LA!PRESENCIA!DE!UN!GRUPO!PROSTÉTICO!
!
Se!realiza!mediante!un!análisis!químico!generali!por!ejemplo:!
GRUPO!BUSCADO!! ACCIÓN!! SE!OBSERVA!!
Cromógeno!! Observación!! Color!!
Iones!metálicos!! Adición!de!agentes! Color,!precipitado,!absorción!de!

quelantes!! color…!!
Carbohidratos!! Reactivo!de!Molish!! Color!violeta!!
Lípidos!! Sudán!III!! La!solución!se!tiñe!

homogéneamente!de!rojo!!
DNA!! Orcinol!! Color!amarillo!!
!
!
!
DETERMINACIÓN!DE!LA!PRESENCIA!DE!PUENTES!DISULFURO!
!
!
! 43!
!
!
!
¿Cómo!saber!que!los!grupos!HS!provienen!de!la!reducción!de!puentes!disulfuro?!
!
! 44!
!
!
!
!
!
!
!
!
! 45!
!
!
!
DETERMINACIÓN!DEL!NÚMERO!DE!CADENAS!
Cuantificación!del!residuo!C6Terminal!
a)! Empleando!Hidrazina!
! 46!
!
!
b)! Haciendo!reducción!del!CCterminal!
!
La!mezcla!se!separa,!analiza,!cuantifica!e!identifica!al!aminoalcohol!formado!
!
c)! Con!la!enzima!CARBOXIPEPTIDASA!(rompe!enlaces!peptídicos!iniciando!por!el!residuo!
C!–!terminal)!
!
! 47!
!
Cuantificación!del!residuo!N6Terminal!
!
a)! Empleando!reactivo!de!Sanger!
!
!
La!mezcla!resultado!de!la!hidrólisis!se!separa!por!cromatografía!!empleando!los!fenil!derivados!
estándares!adecuados.!La!determinación!del!residuo!N!–!terminal!también!puede!realizarse!con!
el!Cloruro!de!dansilo!!
!
b)! Con!la!enzima!AMINOPEPTIDASA!(rompe!enlaces!peptídicos!iniciando!por!el!residuo!N!
–!terminal)!!
! 48!
!
!
!
!
!
IDENTIFICACIÓN!Y!CUANTIFICACIÓN!DE!AMINOÁCIDOS!!
!
Una! vez! realizada! la! hidrólisis! total! de! la! proteína! se! realiza! la! separación! de! la! mezcla,! la!
técnica!utilizada!permite!identificar!y!cuantificar!a!los!aminoácidos!presentes!en!la!proteína.!
!
CROMATOGRAFÍA!DE!INTERCAMBIO!IÓNICO!
!
Para!esta!cromatografía!se!usa!una!resina!con!grupos!cargados!negativamente!conocida!como!
Dowex!–!50!
!
Debido! a! que! se! parte! del! hidrolizado! ácido,! todos! los! aminoácidos! tienen! carga! positiva! y! se!
fijan!a!la!columna!desplazando!a!iones!sodio!de!la!siguiente!manera:!
a.a.+
O O
'+ '
S O Na S O +a.a.
O O
O O
'+ '+
S O Na S O Na
O O
! 49!
En! esta! técnica! se! mantienen! unidos! los! aminoácidos! a! la! resina,! debido! a! la! formación! de!
enlaces!de!tipo!iónicoi!el!orden!de!fijación!dependiente!de!la!carga!e!intensidad!de!la!misma!es:!
1º.! Polares!básicos!
2º.! No!polares!
3º.! Polares!sin!carga!
4º.! Polares!ácidos!
!
Para! lograr! la! elución! (salida)! de! los! aminoácidos! es! necesario! hacer! pasar! por! la! resina!
soluciones!buffer!de!pH!creciente!y!de!manera!continua.!El!orden!de!elución!es!inversa!a!la!de!
fijación.!
!
Usando!un!espectrofotómetro!se!sigue!la!elución!de!los!aminoácidos!y!se!construye!una!gráfica!
en!la!que!se!calcula!el!área!bajo!la!curva!para!determinar!la!cantidad!de!los!aminoácidos.!
Área!bajo!la!curva!
Absorbancia!
! ! ! ! ! ! ! ! ! ! ml!de!buffer!
!
!
HIDRÓLISIS!SELECTIVA!
!
! 50!
NIVEL SECUNDARIO
CARACTERÍSTICAS!DEL!ENLACE!PEPTÍDICO!
!
!
!
!
!
!
1.6!Los!átomos!del!enlace!peptídico!(!6!CO!6!NH!6!)!lo!mismo!que!los!carbonos!α!están!en!un!
mismo!plano.!
2.6!Los!átomos!de!N2!y!O2!están!en!posición!TRANS.!
3.6!Los!carbonos!α!son!TRANS!uno!respecto!al!otro.!
4.6!Los!grupos!R!son!TRANS!y!quedan!fuera!del!plano.!
5.6!El!enlace!peptídico!es!un!enlace!rígido!ya!que!presenta!un!carácter!parcial!de!doble!enlace.!
Esto!se!explica!por!efectos!de!resonancia!o!tautomería.!
!
!
!
!
!
!
!
!
! ! ! !!!!!!!RESONANCIA!! ! ! ! ! !!!TAUTOMERÍA!!!CETO!6!ENOL!
!
!
!
6.6!Los!enlaces!!!CO!6!Cα!y!NH!6!Cα!son!sencillos!por!lo!que!presentan!mayor!libertad!de!giro.!
!
!
7.6! El! ángulo! del! enlace! ! CO! 6! Cα! se! denominan! ψ! (psi)! y! el! ángulo! del! enlace! NH! 6! Cα! se!
denomina! φ! (Phi).! Ambos! pueden! girar! en! sentido! de! las! manecillas! del! reloj! (+)! o! en! sentido!
contrario!(6).!
!
! 51!
En!el!Nivel!Secundario!la!orientación!geométrica!puede!ser!helicoidal,!laminar!o!al!azar!
!
Alfa!Hélice!
Características!Principales!De!La!
ALFA!HÉLICE!
!
1.6!La!hélice!6!alfa!es!estabilizada!por!
PUENTES! DE! HIDROGENO! que! se!
forman!entre!el!átomo!de!H2!unido!a!
un! N2! y! el! O2! carbonílico! del! cuarto!
residuo.!(aminoácido).!
!
2.6! Cada! enlace! peptídico! participa!
en! el! puente! de! hidrógeno.! Esto!
confiere!máxima!estabilidad.!
3.6! Una! Hélice! Alfa! se! forma!
espontáneamente! puesto! que! es! la!
conformación!de!más!baja!energía.!
!
4.6! La! hélice! con! giro! hacia! la!
derecha! es! mucho! más! estable! que!
la! hélice! con! giro! a! la! izquierda,! ya!
que!el!giro!hacia!la!derecha!proyecta!
los!radicales!hacia!afuera.!
!
Factores!Desestabilizantes!De!La!HÉLICE!6!ALFA!
!
1.6!Presencia!de!Prolina.!
!
!
! A.6!Es!un!iminoácido!
! B.6!Rotación!restringida.!
! C.6!Rotación!libre.!
! D.6!El!N!carece!de!hidrógeno!
! para!formar!puentes!de!
! hidrógeno!
!
!
!
!!
2.6!La!presencia!de!grupos!R!con!la!misma!carga!ocasiona!Repulsiones.!
3.6!La!presencia!de!grupos!R!con!diferente!carga!ocasiona!Atracciones.!
4.6!La!presencia!de!grupos!R!grandes!en!posiciones!cercanas!presentan!Impedimentos!
Estéricos.!
!
!
!
!
! 52!
!
Laminar!o!β!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
Esta!conformación!se!puede!presentar!en!forma!Paralela!o!Antiparalela.!La!orientación!
ANTIPARALELA!es!la!más!estable!(en!el!esquema).!
!
!
ORIENTACION! GRADOS!DE!ROTACION!
! ! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!O!
! ! !!!!!!!!!!!!!!!!!!II!
! Enlaces!Cα!6! Enlaces!Cα6!C!6!!
NH!6!
! !φ!!!(Phi)! !!ψ!!!(Psi)!
Hélice!Alfa!(!hacia! 648! 657!
la!derecha)!
Laminar! 6140! +135!
(Antiparalela)!
Laminar!(Paralela)! 6119! 113!
Al!Azar! Los!grados!de!rotación!de!ψ!y!φ!NO!tienen!valores!
constantes!
!
!
!
!
! 53!
!
!!
!
NIVEL TERCIARIO
!
!
!
! !2!
1!
!
!
! 3!
!
!
!
!
!
4!
!
! 6!
!
! 5!
!
!
! 7!
!
!
!
! !
!
!
1.6!Estructura!laminar!de!enlaces!de! 2.6!Estructura!helicoidal!de!enlaces!
hidrógeno.! de!hidrógeno.!
3.6!Coordinación!con!iones!metálicos.! 4.6!Atracción!electrostática!entre!
grupos!R.!
5.6!Puente!disulfuro.! 6.6!Interacciones!hidrofóbicas!entre!
7.6!Enlace!De!hidrógeno!entre! conjuntos!de!grupos!R!no!polares!
cadenas!laterales!R!
!
!
“Representación2 esquemática2 de2 las2 fuerzas2 estabilizadoras2 en2 una2 proteína2 globular.2
Sólo2se2muestra2un2tipo2de2cada2enlace.2La2frecuencia2de2existencia2de2cada2tipo2varía2de2
proteína2en2proteína.”2
!
!
!
! 54!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
PROTEÍNAS!GLOBULARES!
1.6!Presentan!un!plegamiento!compacto!con!
poco!o!ningún!espacio!para!moléculas!de!
agua.!!
!
2.6!Se!localizan!en!el!exterior!casi!todos!los!
grupos!R!hidrófilos.!!
!
3.6!Se!localizan!en!el!interior!todos!los!
grupos!R!hidrófobos.!!
!
4.6!En!las!curvaturas!se!encuentran!restos!
de!Prolina!y!algunos!aminoácidos!que!no!
forman!arrollamientos!helicoidales!como!
Isoleucina!y!Serina.!!
!
!
! 55!
!
!
!
NIVEL CUATERNARIO
!
!
Hemoglobina
!
!
!
DOMINIOS!
Son! unidades! estructurales! compactas,! estables,! dentro! de! una! proteína,! formadas! por!
segmentos!de!una!cadena!peptídica!que!se!pliegan!de!forma!independiente,!con!una!estructura!
y! función! distinguible! de! otras! regiones! de! la! proteína! y! estabilizadas! por! las! mismas! fuerzas!
que!la!estructura!terciaria.!
!
Siguiendo! esta! definición,! es! posible! distinguir! tres! dominios! en! esta! representación! de! la!
Piruvato!Kinasa:!
!
!
!
!
! 56!
!
!
!
!
!
FUNCIONES!DE!LOS!DOMINIOS!
!! Enlaza!a!un!pequeño!ligando!!
!! !“Atravesar”!la!membrana!plasmática!(proteínas!transmembrana)!!
!! !Contiene!el!sitio!catalítico!(enzimas)!!
!! !Enlazar!al!DNA!(en!factores!de!transcripción)!!
!! !Provee!una!superficie!para!enlazarse!específicamente!a!otra!proteína!!
!
!
! 57!
!
!
AGENTES!QUE!AFECTAN!A!LAS!PROTEÍNAS!
!
Las!proteínas!son!moléculas!constituidas!por!aminoácidos!de!estructura!variada!por!lo!que!se!
puede! esperar! que! presenten! diferentes! arreglos! en! el! espacio! y! éstos! tengan! el! mínimo! de!
energía!lo!que!les!haría!estables,!sin!embargo,!de!todos!los!posibles!arreglos!espaciales!SÓLO!
UNO!permite!LA!ACTIVIDAD!BIOLÓGICA!DE!LA!PROTEÍNA.!A!la!conformación!que!presenta!
actividad!biológica!se!le!llama!CONFORMACIÓN NATIVA.!
!
A! la! pérdida! de! la! conformación! nativa! se! le! conoce! como! DESNATURALIZACIÓN! e! implica!
cambios!en!los!niveles!estructurales!caracterizados!por!la!presencia!de!enlaces!no!covalentes!
es!decir,!el!secundario,!terciario!y!cuaternario!
!
DESNATURALIZACIÓN PROTÉICA:! Proceso! o! serie! de! procesos! en! el! que! se! altera! la!
disposición! espacial! de! las! cadenas! polipeptídicas! dentro! de! la! molécula,! transformándose! la!
estructura!típica!de!la!proteína!nativa!en!otra!más!desordenada.!
!
Cuando! se! afecta! el! nivel! estructural! primario! se! dice! que! ha! ocurrido! una!
DESTRUCCIÓN!de!la!proteína.!
!
TEMPERATURA
!
La!mayoría!de!las!proteínas!a!temperaturas!mayores!de!450C!–!600C!sufren!desnaturalización!
debido! a! la! ruptura! de! puentes! de! hidrógeno! y! fuerzas! de! Van! Der! Waals.! Algunas! proteínas!
recobran! su! conformación! al! bajar! lentamente! la! temperatura,! a! esto! se! le! llama!
renaturalización.!
!
pH
!
La!mayoría!de!las!proteínas!sufren!desnaturalización!a!valores!de!pH!menores!de!6!y!mayores!
a!8!debido!al!cambio!de!carga!en!los!radicales!de!los!residuos!aminoacídicos,!lo!que!ocasiona!
la!ruptura!de!puentes!de!hidrógeno!debida!a!radicales!y!enlaces!iónicos.!
!
β − Mercapto etanol!
!
Agente! que! reduce! los! puentes! disulfuro! lo! que! ocasiona! que! se! rompan! y! por! lo! tanto! se!
desnaturaliza!la!proteína.!!
! 58!
!
! 59!
Detergentes!
!
Por! tratarse! de! agentes! tensoactivos! disminuyen! el! efecto! hidrofóbico! lo! que! ocasiona! la!
desnaturalización!de!la!proteína.!
!
Agitación vigorosa
!
La! agitación! conlleva! el! aumento! de! la! energía! cinética! de! la! molécula! lo! que! ocasiona! la!
ruptura!de!Fuerzas!de!Van!Der!Waals!!y!puentes!de!hidrógeno.!
!
!
Cloruro de Guanidina (4 ó 6 M) o Urea (6 u 8 M)
!
Son! agentes! que! rompen! puentes! de! hidrógeno! propios! de! la! molécula,! intercalándose! entre!
ellos.!
!
!
SOLUBILIDAD!DE!LAS!PROTEÍNAS!
!
Las! proteínas! en! disolución! se! ven! afectadas! en! su! solubilidad! por:! pH,! fuerza! iónica.!
Propiedades!dieléctricas!del!disolvente,!y!temperatura.!
!
pH
!
El!cambio!de!pH!de!la!solución!en!que!se!encuentra!la!proteína!promueve!cambio!en!las!cargas!
de! los! residuos! y! por! lo! tanto! un! cambio! de! carga! total! de! la! proteína.! Cuando! el! número! de!
cargas! positivas! se! iguala! con! el! número! de! cargas! negativas! se! dice! que! la! proteína! se!
encuentra!en!su!pH!isoeléctrico!(Punto!isoeléctrico)!y!presenta!el!mínimo!de!solubilidad!ya!que!
no!hay!repulsión!electrostática!entre!las!moléculas.!
!
!
! 60!
El! valor! del! pH! isoeléctrico! de! una! proteína! determinada,! puede! variar! dependiendo! de! la!
cantidad!de!iones!presentes!en!la!solución!(aniones!o!cationes).!Cuando!se!eliminan!todos!los!
iones!diferentes!a!H+!o! –OH!se!determina!el!llamado!pH!isoiónico!y!este!no!varía!en!la!proteína!
específica.!
!
Se! pueden! separar! proteínas! usando! precipitación! por! su! punto! isoeléctrico! ya! que! cada!
proteína!tiene!un!valor!específico.!Además!las!proteínas!presentan!su!conformación!nativa!y!es!
posible!solubilizarlas!en!una!solución!con!el!pH!adecuado.!
!
Fuerza Iónica
!
La!descripción!completa!de!una!solución!incluye!el!o!los!tipos!de!iones!presentes!(es!decir!su!
carga)! y! su! cantidad,! tal! descripción! se! expresa! a! través! del! término! fuerza! iónica! (Ι)! y!
matemáticamente!se!define!como:!
1
I= ∑ c z2
2
!
! ! ! c!=!Concentración!del!ión!
! ! ! z!=!Carga!del!ión!
!
La! solubilidad! de! las! proteínas! en! solución! está! influenciada! por! la! fuerza! iónica! que! ésta!
presente,!así,!a!mayor!fuerza!iónica!menor!solubilidad!de!las!proteínas!y!a!menor!fuerza!iónica!
mayor!solubilidad!de!las!proteínas!!
La! explicación! física! de! este! comportamiento! es! compleja! pero! al! parecer,! los! iones! son!
capaces!de!eliminar!la!capa!de!hidratación!de!las!proteínas,!lo!que!favorece!su!interacción!y!por!
ello! precipitan,! a! este! proceso! se! le! conoce! como! Precipitación! por! salado! o! simplemente!
Salado.!
!
! !
!
! 61!
Se! pueden! separar! proteínas! usando! precipitación! por! salado! ya! que! cada! proteína! tiene! un!
grado! diferente! de! hidratación.! Además! las! proteínas! presentan! su! conformación! nativa! y! es!
posible!solubilizarlas!en!una!solución!con!fuerza!iónica!adecuada!
!
Propiedades dieléctricas del disolvente
!
La! constante! dieléctrica! se! define! como! la! capacidad! de! mantener! separados! a! iones! de!
diferente!carga,!en!este!sentido!el!agua!presenta!la!mayor!constante!dieléctrica!lo!que!permite!
mantener! en! solución! a! las! proteínas.! La! adición! de! solventes! de! menor! capacidad! de!
separación!de!iones!hace!que!las!proteínas!precipiten.!
Se! usan! como! agentes! precipitantes! solventes! miscibles! con! el! agua! como! Acetona! y! Etanol.!
Se!debe!trabajar!a!temperatura!baja!para!evitar!la!desnaturalización!de!la!proteína.!
!
Temperatura
Es! necesario! considerar! que! como! cualquier! molécula,! las! proteínas! se! encuentran! en!
constante!movimiento,!un!aumento!en!la!temperatura!hace!que!este!movimiento!aumente!y!por!
lo!tanto!la!proteína!interacciona!mejor!con!el!agua!manteniéndose!soluble.!
El! rango! de! temperatura! que! permite! la! solubilización! de! proteínas! se! encuentra! entre! 00C! y!
400C.!
!
Es!importante!insistir!que!los!factores!aquí!mencionados!están!actuando!al!
mismo! tiempo! en! una! disolución! protéica! y! por! lo! tanto,! si! la! finalidad! es!
mantener!a!la!proteína!soluble!deben!ser!controlados!para!no!favorecer!la!
precipitación.!
!
! 62!
PURIFICACIÓN!DE!PROTEÍNAS!
!
Cada!proteína!tiene!características!que!la!hacen!única!como:!
!
⇒! Tamaño!
⇒! Carga!
⇒! Solubilidad!
⇒! Actividad!Biológica!
!
Considerando! lo! anterior! se! realiza! purificación! de! proteínas! haciendo! uso! de! diferentes!
técnicas.!
!
Para!purificar!una!proteína!debe!considerarse!antes!de!iniciar:!
!
!! Localización!de!la!proteína!
Exógena!
!
! En!el!Citoplasma!
Endógena! !
Dentro!de!un!organelo!
!
!! Fuente!de!la!proteína!
!! Rendimiento!de!la!fuente!
!! Accesibilidad!de!la!fuente!
!
En!caso!de!ser!una!proteína!endógena!debe!realizarse!la!lísis!celular!eligiendo!el!método!más!
adecuado!y!evitando!la!desnaturalización!de!la!proteína!de!interés.!
!
TÉCNICAS!DE!SEPARACIÓN!CONSIDERANDO!EL!TAMAÑO!DE!LA!PROTEÍNA!
!
"! Ultrafiltración!
"! Diálisis!
"! Cromatografía!de!exclusión!molecular!
!
TÉCNICAS!DE!SEPARACIÓN!CONSIDERANDO!LA!CARGA!DE!LA!PROTEÍNA!
!
♦! Cromatografía!de!Intercambio!iónico!(Para!eluír!a!las!proteínas!se!usa!un!gradiente!
de! fuerza! iónica! en! lugar! de! uno! de! pH! para! evitar! la! desnaturalización! protéica).!
Existen!diferentes!resinas!que!intercambian!cationes!o!aniones!(por!ejemplo!DEAE!–!
Sephadex!y!CM!–!Celulosa)!
! 63!
♦! Electroforesis!
♦! Punto!isoeléctrico!
!
TÉCNICAS!DE!SEPARACIÓN!CONSIDERANDO!LA!SOLUBILIDAD!DE!LA!PROTEÍNA!
!
*! Punto!isoeléctrico!
*! Salado!
*! Cambio!de!solventes!
!
!
! 64!
!
!
UNIDAD!!
! •!Los!alumnos!explicarán!el!comportamiento!de! !
UNIDAD!V!! las! enzimas! como! catalizadores,! !
! nomenclatura! y! el! uso! del! número! de!
A).!Generalidades!
ENZIMAS! clasificación! propuesto! por! la! C.I.E.!
proponiendo!ejemplos!para!cada!caso.! B).!Componentes!de!las!
!
•!Los! alumnos! explicarán! en! que! consiste! la! enzimas!!
!
especificidad! enzimática! y! los! diferentes! tipos!
! de! ésta! que! pueden! presentar! las! enzimas,! C).!Cofactores,!
(14!HORAS)! apoyándose! en! los! modelos! que! con! este! fin!
! coenzimas,!grupos!
existen.!
•!Los!alumnos!conocerán!la!clasificación!de!las! prostéticos!
vitaminas! y! las! relacionarán! con! las! D).!Términos!enzimáticos!
coenzimas!que!de!ellas!derivan!
•!Los! alumnos! diferenciarán! a! las! coenzimas! E).!Cinética!enzimática!
por! su! actividad! coadyuvante! en! las! F).!Inhibición!enzimática!
reacciones! enzimáticas,! en! las! cuales!
participan.! G).!Efectos!alostéricos!
•!Los! alumnos! describirán! con! certeza! los! H).!Cromatografía!de!
factores!que!afectan!a!la!cinética!enzimática!y!
el!uso!de!inhibidores!como!herramientas!útiles! afinidad!
en!el!estudio!de!las!enzimas.! !
•!Los! alumnos! explicarán! la! importancia! de! las!
enzimas!alostéricas!en!el!metabolismo!celular.!
!
!
ENZIMAS!
!
! 65!
!
!
!
Las! reacciones! químicas! que! se! producen! en! las! células! tendrían! lugar! a! velocidades!
extremadamente! lentas! en! ausencia! de! ayuda.! Sin! embargo,! las! enzimas,! aceleran! estas!
reacciones! millones! de! veces.! Estas! enzimas! son! catalizadores! biológicos.! Sin! ellas,! los!
humanos!y!otros!organismos!vivos!no!podrían!sobrevivir.!
La!función!de!una!enzima,!básicamente,!es!incrementar!la!velocidad!de!una!reacción.!
Presentan!las!siguientes!características:!
1ª.d!Son!proteínas.!
2ª.d! Son! los! catalizadores! más! eficientes! que! se! conocen.! La! mayor! parte! de! las! reacciones!
celulares! ocurren! a! una! velocidad! alrededor! de! un! millón! de! veces! más! alta! de! lo! que!
serían!en!ausencia!de!enzimas.!
3ª.d! La! mayoría! de! las! enzimas! se! distinguen! por! su! especificidad,! lo! que! significa! que! cada!
conversión! de! un! reactivo! (llamado2 sustrato)! en! un! producto! es! catalizada! por! una!
enzima!determinada.!
4ª.d! Quizá! una! de! las! más! notables! características! es! que! las! acciones! de! muchas! enzimas!
están! reguladas! de! modo! que! pueden! cambiar! de! un! estado! de! baja! actividad! a! uno! de! alta!
actividad,!dependiendo!de!las!condiciones!celulares!en!las!que!se!encuentren!
!
!
! 66!
!
!
!
! ! ¿Cómo aceleran reacciones?
! ! ¿Qué es el sustrato?
!
! ¿Qué es la especificidad?
!
!
!
Para!contestar!a!estas!preguntas!debemos!recordar!primero!que!las!proteínas!globulares!están!
asociadas! a! funciones! dinámicas! y! la! catálisis! es! una! función! dinámicai! segundo,! debemos!
conocer!a!una!enzima!para!responder!a!estas!preguntas.!
!
!
!
!
SITIO!ACTIVO.6!Es!la!agrupación!ordenada!espacialmente!pero!estructuralmente!asimétrica!de!
un! pequeño! número! de! residuos! aminoacídicos! responsables! de! la! actividad! catalítica! de! la!
enzima.!El!sitio!activo!recibe!también!el!nombre!de!Sitio!Catalítico!o!Centro!Activo!
!
!
! 67!
!
!
!
!
! 68!
!
!
Los!residuos!del!sitio!activo!cumplen!dos!funciones:!
!
!! Fijan!al!sustrato!
!! Realizan!la!catálisis!!
!
¿Por qué aceleran reacciones?

!
!
!
!
! 69!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
Los! MODELOS! que! han! sido! utilizados! para! explicar! las! diferentes! ESPECIFICIDADES! QUE!
PRESENTAN!LAS!ENZIMAS!son:!
!
!
LLAVE! Y! CERRADURA.! (Emil! Fischer)! Propone! una! estructura! rígida.! Este! modelo! sólo!
puede!aplicarse!a!la!Especificidad!Absoluta!.!
!
! 70!
AJUSTE! INDUCIDO! (D.! Koshland)! Propone! una! estructura! protéica! flexible.! Este! modelo!
explica!la!Especificidad!relativa.!
!
TRES!PUNTOS!(Ogston)!
!
Propone!que!la!conversión!asimétrica!de!un!sustrato!simétrico!se!logra!uniendo!sólo!tres!puntos!
de!dicho!sustrato.!Este!modelo!explica!la!Estereoespecificidad!absoluta.!
!
!
!
!
!
!
NOMENCLATURA!DE!LAS!ENZIMAS!
!
Algunas!enzimas!tienen!nombres!no!descriptivos!como!tripsina,!quimotripsina,!pepsina,!etc.!Sin!
embargo! la! mayoría! de! las! enzimas! se! denominan! con! la! terminación! –asaC! tomando! como!
base!el!tipo!de!reacción!que!catalizan!y/o!el!sustrato!que!transforman!
!
SUSTRATO!! ENZIMA!!
Almidón!(Amylum)!! Amilasa!!
Lípido!! Lipasa!!
Lactosa!! Lactasa!!
! 71!
! 72!
!
!
CLASIFICACIÓN!TRADICIONAL!DE!LAS!ENZIMAS!
!
!
!! DESHIDROGENASAS.6! Catalizan! la! pérdida! de! hidrógeno! (H+! y! e6)! de! un! sustrato!
teniendo!como!aceptor!una!molécula!diferente!al!oxígeno.!
!! OXIDASAS.6!Catalizan!la!pérdida!de!hidrógeno!de!un!sustrato!teniendo!como!aceptor!al!
oxígeno.!
!! QUINASAS! (CINASAS).6! Catalizan! la! transferencia! de! grupos! fosfato! del! ATP! a! otra!
molécula.!
!! TRANSAMINASAS.6!Transfieren!grupos!amino!a!grupos!carbonilo.!
!! FOSFATASAS.6!Rompen!enlaces!fosfoéster!en!presencia!de!agua.!
!! TIOQUINASAS!(TIOCINASAS).6!Forman!enlaces!tioéster!dependientes!de!ATP!a!partir!
de!la!coenzima!A!y!ácidos!carboxílicos.!
!! MUTASAS.6!Catalizan!rearreglos!intramoleculares!de!grupos!funcionales.!
!! TRANSALDOLASAS! Y! TRANSCETOLASAS.6! Transfieren! grupos! de! tres! y! dos!
carbonos!respectivamente.!
!! EPIMERASAS.6! Catalizan! la! formación! de! compuestos! con! orientaciones! espaciales!
diferentes.!Por!ejemplo:! D! ! L! ó! L! ! D!
!! DESCARBOXILASAS.6!Eliminan!grupos!carboxilo.!
!! SINTETASAS.6!Forman!nuevos!compuestos!por!condensación!de!dos!sustratos.!
!! HIDROLASAS.6!Rompen!enlaces!introduciendo!una!molécula!de!agua!
!! FOSFORILASAS.6!Introducen!fosfato!inorgánico.!
!
! 73!
!
!
En!1960!se!creó!la!Comisión!Internacional!de!Enzimas!quien!propuso:!
!! El!uso!de!un!nombre!propio.!
!! El!uso!de!un!nombre!descriptivo.!
!! El!uso!de!un!nombre!sistemático.!
!! El!uso!de!un!número!de!clasificación.!
!
NÚMERO!DE!CLASIFICACIÓN!DE!LAS!ENZIMAS.!
!
!
El!número!de!clasificación!de!las!enzimas!consta!de!4!dígitos!separados!por!puntos.!!
A!.!B!.!C!.!D!
!
El!primer!dígito!es!la!CLASE.!Indica!el!tipo!de!reacción!
El!segundo!dígito!es!la!SUBCLASE.!Indica!el!sustrato!
El!tecer!dígito!es!la!SUB!SUB!CLASE.!Indica!el!cosustrato.!
El!cuarto!dígito!es!el!NÚMERO!DE!ORDEN.!
!
! La!comisión!internacional!de!las!enzimas!ha!clasificado!a!las!enzimas!en!6!clases!que!
son:!
!
No.!de!clase! NOMBRE! REACCIÓN!QUE!CATALIZAN!
Catalizan!reacciones!de!óxido6reducción!
1! OXIDORREDUCTASAS!
Catalizan! reacciones! de! transferencia! de!
2! TRANFERASAS!
grupos!
! 74!
Catalizan! ruptura! de! enlaces! químicos! con!
3! HIDROLASAS!
adición!de!agua.!
Catalizan! la! ruptura! de! enlaces! químicos! sin!
4! LIASAS!
participación! de! agua! (adición! a! dobles!
enlaces).!
Catalizan!reacciones!de!isomerización.!
5! ISOMERASAS!
Catalizan! reacciones! que! consisten! en! unir!
6! LIGASAS!O!SINTETASAS!
dos!moléculas.!
Reacción! acoplada! con! la! intervención! de!
enlaces!fosfato!de!ATP!(consumen!energía)!
!
! 75!
!
!
Tomado!de!Lehninger,!A.!Bioquímica.!
!
!
!
!
!
!
!
!
!
! 76!
!
Algunas!enzimas!tienen!una!alta!actividad!catalítica!por!si!mismas,!sin!embargo,!otras!requieren!
de!un!coadyuvante!para!presentar!su!máxima!actividad!catalítica.!Estos!coadyuvantes!pueden!
ser!iones!metálicos!o!moléculas!orgánicas.!
!
!
!
!
! 77!
!
!
!
COENZIMAS!TRANSPORTADORAS!DE!HIDRÓGENO!(ELECTRONES)!
!
!
D i n u c l e ó t i d o ! d e ! n i c o t í n a m i d a !! ! ! NAD+!(DPN)!
D i n u c l e ó t i d o ! d e ! n i c o t í n a m i d a ! f o s f a t o !! NADP+!(TPN)!
!
!
! O
!
! C NH2
!
! O N+
! ! ! ! ! ! ! !!!Nucleótido!de!nicotínamida!
! O P O CH2 O O
!
!
!
!
NH2
! O
! N
N
!
! N
N !!!!!!Nucleótido!de!Adenina!
!
O P O CH2 O O
!
!
O Si!X!es!H!se!trata!de!NAD+!
OH O X Si!X!es!un!fosfato!se!trata!de!NADP+!
! !
!
La! parte! activa! de! esta! coenzima! es! la! nicotinamida,! transportando! un! protón! y! un! par! de!
electrones.!
!
!
!
! H O
H H O
!
! C NH2
C NH2
! + (+(((2H+(((+(((2e*
! N
N +((H+
!
! R
¨
R
! !
!
!!!!!!!!!!!!NAD+! ! ! ! ! ! !
+
NADH!!+!!H !
!!!!!!!!(Oxidado)!! ! ! ! ! ! !!(Reducido)!
!
! 78!
!
!
F l a v í n ! m o n o n u c l e ó t i d o !! ! ! FMN!
Flavín!adenin!dinucleótido! ! FAD!
!
!
!
! Anillo!de!Isoaloxacina!! ! ! ! ! ! ! !!!Adenina!
!
!
! O
CH 3 NH 2
! N
NH N
! N
! CH 3 N N O ( (
O O N N
!
O
! CH2 CH CH CH CH O P O P O CH2
!
OH OH OH H O
! O
!
!
!
! ! ! ! Ribitol! ! ! ! ! !!!!!!!!Ribosa!
!
!
!
!
! ! ! !!!!!!!FMN!
!
!
!
! ! ! ! ! ! FAD!
!
!
!
La!parte!activa!de!estas!coenzimas!es!el!anillo!de!Isoaloxacina,!transfiriendo!una!molécula!de!
Hidrógeno!(2!H+!y!2!e6)!
!
!
! H
! O O
CH3 CH3
! N N
NH NH
!
! CH3 N N
+
O +(2H ((+(2e + O
CH3 N N
!
R R H
! !
!
! ! FMN!!ó!!FAD! ! ! ! ! ! FMNH2!!ó!!FADH2!
! ! !!!!Oxidado! ! ! ! ! ! !!!!!!!Reducido!
! 79!
!
!
Ácido!Lipóico!!(Acido!Tiótico)!
!
!
!
!
! (CH2)' 4 COOH +''2H+''+''2e,'' (CH2)' 4 COOH
! S S S S
!
H H
! !
! !!!!!Oxidado! ! ! ! ! !!!!!!!!!!!Reducido!
!
!
!
!
!
Coenzima!Q!!(Co!Q)!!o!!Ubiquinona!
!
!
!
! O
! CH3
CH3 O CH3 n! es! diferente! para!
! cada! organismo,! en!
CH3 O (CH2 CH C CH2 ) n H
! mamíferos! es! igual! a!
! O 10,! por! ello! se! llama!
! también!Co!Q10!
! !
!
!
!
!
! O OH
! CH3 O CH3 CH3 CH3
! O
! CH 3 O R +''2H+''+''2e* CH3 O R
!
! O OH
! !
! ! !!!!!!CoQ! ! ! ! ! ! !!!!!!!CoQH2!
! ! !!!!!!Oxidado! ! ! ! ! ! !!!!!!!!Reducido!
!
!
!
!
! 80!
!
!
!
COENZIMAS!TRANSPORTADORAS!DE!GRUPOS!FUNCIONALES!
!
Fosfato!de!Piridoxal!
!
Forma! activa! de! la! vitamina! B6,! Transfiere! grupos! aminos,! está! unida! covalentemente! a! la!
enzima!(grupo!prostético).!
!
!
! CHO O
!
! HO CH2 O P OH
!
! CH3
N OH
! !
!
!
!
Pirofosfato!de!Tiamina!
!
Vitamina!B1,!interviene!en!reacciones!de!descarboxilación!de!α6cetoácidos.!
!
!
! NH2
! S O O
! +
N CH2 N
! CH2 CH2 OH P O P OH
CH2 O
! N CH3
! OH OH
! !
!
!
!
Biotina!
!
Vitamina,!transporta!CO2!en!reacciones!de!carboxilación.!
!
! O
!
! N N
!
!
(CH2)) 4 COOH
! S
! !
!
! 81!
C o e n z i m a ! A ! ( H S 6 C o A ! o ! C o A )!
!
Interviene!en!reacciones!de!Acilación,!la!parte!activa!de!la!enzima!es!el!sulfihidrilo!(SH)!
!
La!coenzima!A!es!una!de!las!coenzimas!más!importantes!en!la!célula!ya!que!las!reacciones!de!
acilación! no! ocurren! fácilmente! por! formación! de! iones! carboxilatos! dado! que! estos,! son! muy!
estables! y! por! lo! tanto! poco! reactivos,! la! célula! resuelve! este! problema! formando! los!
respectivos! Tioésteres! que! son! menos! estables! que! los! carboxilatos! ! y! pueden! ser! utilizados!
fácilmente.!
!
!
!
! NH2
! N N
!
# # N
! O O CH3 O O N
! HS CH2 CH2 NH C (CH2)+ 2 NH C CH P O P O CH2
O
C CH2 O
!
! OH CH3 O O
PO3=
! !
!
!!Grupo!Activo!
!
!
!
!
!
! COOH
! CH3 COOH + C O No)se)puede)formar)el)citrato
!
! CH2
! COOH
! !
!
!
!
! COOH
O COOH
!
CH2
! CH3 C S Co$A + C O
! HOOC C OH
CH2
!
! CH2
COOH
! HS Co$A COOH
! !
! 82!
!
!
!
TÉRMINOS!USADOS!EN!ENZIMOLOGÍA!
!
!
Haloenzima! u! Holoenzima.6! Enzima! que! presenta! la! conformación! más! activa! y! que! se!
encuentra!unida!a!su!cofactor!
!
Apoenzima.6!Enzima!que!presenta!la!conformación!menos!activa!y!que!no!se!encuentra!unida!a!
su!cofactor!
!
Isoenzimas.6! Son! enzimas! que! catalizan! la! misma! reacción! pero! que! difieren! en! su! nivel!
estructural!primario!
!
La!existencia!de!las!isoenzimas!se!justifica!por!que!se!ubican!en!diferentes!tejidos!y!responden!
a! condiciones! diferentes! del! medio! que! les! rodea,! un! ejemplo! de! isoenzima! es! LACTATO!
DESHIDROGENASA! (LDH)! que! presenta! 5! isoenzimas! ubicadas! en! el! corazón,! Eritrocitos,!
Músculo!esquelético!y!Hepatocitos!e!interviene!en!!la!conversión!de!Piruvato!en!Lactato!
!
!
Zimógenos! o! Proenzimas.6! Son! enzimas! que! deben! sufrir! cambios! para! alcanzar! su!
conformación! activa,! dichos! cambios! pueden! ser! pérdida! de! algunos! residuos! o! ganancia! de!
algún!grupo!funcional!en!un!aminoácido!
!
La! mayoría! de! las! enzimas! responsables! de! la! digestión! se! sintetizan! en! el! Páncreas! pero! su!
actividad!la!realizan!en!el!intestino!delgado,!estas!enzimas!son!liberadas!por!el!Páncreas!como!
zimógenos! y! es,! en! el! intestino! donde! se! activan! ¿Qué! pasaría! si! se! secretaran! activas! del!
Páncreas?!
!
!
!
!
! 83!
FORMAS!DE!ORGANIZACIÓN!DE!LAS!ENZIMAS!
!
Como! ya! hemos! comentado! el! metabolismo! implica! una! serie! de! reacciones! sucesivas! y!
ordenadas,! las! enzimas! son! las! responsables! de! estas! reacciones! y! para! llevarlas! a! cabo! se!
organizan!de!diferentes!formas:!
!
Sistemas!multienzimáticos!solubles!
!
Las! enzimas! se! encuentran! distribuidas! en! el! citoplasma! y! el! sustrato! debe! migrar! hasta!
“encontrar!o!ser!encontrado”!por!la!enzima!
!
!
Complejos!multienzimáticos!solubles!
!
! ! Las!enzimas!se!encuentran!asociadas!tan!estrechamente!que!si!se!retira!una!de!
ellas!el!complejo!pierde!actividad!
!
!
!
Sistemas!enzimáticos!unidos!a!membranas!
!
! ! Las!enzimas!se!encuentran!ligadas!a!membranas!
!
! 84!
!
CINÉTICA!ENZIMÁTICA!
!
Variables!que!influyen!en!la!velocidad!de!una!reacción!enzimática!
!
1.!Concentración!de!enzima!
2.!Temperatura!
3.!pH!
4.!Concentración!de!sustrato!
5.!Efectores!(Activadores!e!Inhibidores)!
!
Efecto!de!la!temperatura!
!
Manteniendo![S],![E],!pH!=!constantes!
!
!
La! temperatura! afecta! a! las!

reacciones! químicas.! Las!
reacciones! enzimáticas! no! son! la!
excepción.! Pero! debido! a! que! las!
enzimas! son! proteínas! se!
presenta! una! desnaturalización!
térmica!!
!
!
Efecto!de!la!Concentración!de!la!enzima!
!
Manteniendo![S],!T,!pH!=!constantes!
!
!
Velocidad!
!!!de!
Reacción!
!
!
!
! Manteniendo! la! concentración!
! de! sustrato! constante! la!
! velocidad! de! reacción! es!
! directamente! proporcional! a! la!
! concentración!de!la!enzima!!
!
!
! 85!
! E!
Efecto!del!pH!
!
!
!
! ! TRIPSINA! ! ! ! ! COLINESTERASA!
! V! ! ! ! ! !!!!!!V!
!
!
!
!
!
!
!
!!!!!!!6!!!!8!!!!10!! !pH! ! ! !!!!!6!!!!8!!!!10!!! pH!!
!
!
!
!
!
! ! PEPSINA! ! ! ! ! ! PAPAINA!
! V! ! ! ! ! ! !!!!!!!V!
!
!
!
!
!
!
!
! !!!!!!!2!!!!!!4!!!!!!6!!!pH! ! ! ! ! !!!!!!!!4!!!!!!!!!!6!!!!!!8!!pH!
!
Las! enzimas! presentan! un! comportamiento! diferente! frente! a! los! cambios! de! pH! dependiendo!
del!comportamiento!ácido6base!de!la!enzima!y!el!sustrato!
!
Estos!comportamientos!pueden!explicarse!por:!
!
!
1.! Una!alteración!de!la!carga!neta!de!la!proteína!que!repercute!en!la!solubilidad.!
2.! Alteración!de!la!conformación!de!la!proteína!al!afectar!los!niveles!3º!y/o!4º!lo!cual!
repercute!en!una!mayor!o!menor!actividad.!
3.! Un!efecto!del!pH!sobre!el!sustrato!
4.! Una!combinación!de!los!efectos!anteriores.!
!
El! pH! óptimo! de! una! enzima! no! es! necesariamente! idéntico! al! pH! de! su! entorno! intracelular!
normal.!Esto!probablemente!sea!una!de!las!maneras!de!controlar!la!actividad!enzimática.!
!
!
!
! 86!
!
Efecto!de!la!concentración!de!sustrato!!
Manteniendo!![E],!T,!pH!=!constantes!!
! 87!
! 88!
! 89!
Significado!de!la!constante!Km!!
1.!Constante!de!equilibrio!de!disociación!del!complejo!ES!(en!condiciones!de!equilibrio!rápido)!
2.! Medida! inversa! de! la! afinidad! de! la! enzima! por! el! sustrato! (en! condiciones! de! equilibrio!
rápido)!
! ! Valores!de!Km!Grandes!66666666666Afinidad!Pequeña!
! ! Valores!de!Km!Pequeños!666666666Afinidad!Grande!
!
3.!Mide!la!función!de!fijación!(en!cond.de!equilibrio!rápido)!
4.!Es!la!concentración!de!sustrato!que!produce!la!mitad!de!la!velocidad!máxima!y!donde!
están!saturadas!la!mitad!de!las!moléculas!enzimáticas!!
5.6! Este! concepto,! relaciona! la! afinidad! de! unión! y! saturación! de! una! enzima! con! la!
especificidad!de!la!misma!
6.!Se!define!para!una!pareja!enzima6substrato!
7.!Se!mide!en!unidades!de!concentración!
!
!
! 90!
!
Para! obtener! valores! más! exactos! de! Km! se! utilizan! gráficas! de! línea! recta! como! la! de!
Lineweaver6Burk.!(Dobles!recíprocos).!
!
!
!
!
! 1
! v !
!
!
1
v = VKmmax 1
[S ]
1
+ V. max !!
!
!
!
! 1
V. max !
! 1
− Km !
!
!
! 1
! [s ] !
! 91!
!
ENZIMAS!ALOSTÉRICAS!
!
Definición.6! Son! enzimas! oligoméricas! (formadas! por! dos! o! más! cadenas! polipeptídicas)! cuya!
actividad!está!regulada!por!la!unión!de!moléculas!específicas!en!lugares!distintos!al!sitio!activo.!
!
Estas! enzimas! se! encuentran! generalmente! al! inicio! de! las! rutas! metabólicas! (reacción!
determinante)!y!por!lo!tanto!el!proceso!completo!se!ve!aumentado!o!disminuido!dependiendo!de!
la!actividad!que!presente!la!enzima.!
!
!
! ! ! ! A!! ! B!! ! C!! ! D!
!
!
! ! ! ! Reacción!determinante!
!
!
Las! moléculas! específicas! que! regulan! la! actividad! de! estas! enzimas! reciben! el! nombre! de!
MODULADORES!o!EFECTORES!alostéricos.!Si!estabilizan!la!forma!inactiva!son!moduladores!
negativos!!(!M!(!!!!!)!ó!E!(!!!!!)!)!i!si!estabilizan!la!forma!activa!son!moduladores!positivos!!(M!(+)!
ó!E!(+)!)!!
!
!
!
! Lugar!para!! !!!!!Lugar!para!
! Efector!(6)!! !!!!!Efector!(+)!
!
!
!
!
!
Sitio!!
Activo!!
!
!
!
!
!
!Estado!Inactivo!de!una!! ! !!!!!Estado!Activo!de!una!
!Enzima!alostérica!(TT)!! ! !!!!!Enzima!alostérica!(RR)!
!
Los!moduladores!pueden!ser!moléculas!DIFERENTES!al!sustrato!o!SER!el!sustrato!mismo.!
!
Cuando!una!enzima!tiene!varios!moduladores!se!dice!que!es!POLIVALENTE!
!
! 92!
!
!
MODELOS!DE!ACCIÓN!DE!LAS!ENZIMAS!ALOSTÉRICAS!
!
CONCERTADO!SIMÉTRICO!(Monod,!Wyman!y!Changeaux)!
!
!
Proponen!un!estado!de!baja!afinidad!o!inactivo!(TT)!y!otro!de!alta!afinidad!o!activo!(RR)!
!
!
!
! E!(+)!
!
!
!
! E!(d!)!
!
!
!
! !
!
!
Los! estados! TT! y! RR! se! encuentran! en! equilibrio,! si! aumenta! la! concentración! del! efector!
positivo! (E! +)! el! equilibrio! se! desplaza! totalmente! a! la! forma! RR! mientras! que,! si! la!
concentración!del!efector!negativo!(E!6)!es!la!que!aumenta,!el!equilibrio!se!desplaza!totalmente!
a!la!forma!TT!
!
AJUSTE!INDUCIDO!(SECUENCIAL)!!(D.!Koshland!Jr.)!
!
!
!
!
! E!(+)! E!(+)!
!
!
!
!
!
! ! !
! Estado!TT! ! ! ! ! ! Estado!TR!
!
!
! Propone!un!cambio!gradual!de!
E!(+)! la! enzima! generando! estados!
!
! intermedios! TR! debido! a! la!
! unión! progresiva! de! los!
! efectores.!
! En! el! esquema! se! muestra! el!
! cambio! de! TT! a! RR! por! unión!
! ! del!E!(+)!!
!
! 93!
! ! ! !!!!!!Estado!RR!
! 94!
TÉCNICA!DE!SEPARACIÓN!CONSIDERANDO!LA!ACTIVIDAD!BIOLÓGICA!DE!LA!
PROTEÍNA!
!
!! Cromatografía!de!afinidad!
!
Esta!técnica!es!muy!utilizada!para!separar!enzimas,!se!fundamenta!en!la!unión!de!la!proteína!
con! un! compuesto! por! el! que! tenga! afinidad! pero! del! que! no! puede! separarse! de! manera!
espontánea.!
!
!
! ! ! Ligando!
!
!
En!el!caso!de!las!enzimas,!el!ligando!es!un!inhibidor!competitivo!es!decir!una!molécula!por!la!
que! la! enzima! tiene! afinidad! pero! que! no! puede! transformar! y! a! la! que! queda! unida,! para!
separar!a!la!enzima!se!adiciona!el!sustrato!en!cantidad!mayor!a!la!del!inhibidor.!
!
! 95!
!
!
UNIDAD!!
! •!Los! alumnos! explicarán! el! papel! de! los! A)! Definición!
UNIDAD!VI!! monosacáridos! como! formadores! de!
B)! Clasificación!
! polisacáridos,! sus! características!
CARBOHIDRATOS! químicas,! reacciones! y! usos! como! C)!Isomería! de! los!
! fuente! de! energía! celular,! resolviendo!
monosacáridos!
! todos! los! ejercicios! que! se! les!
! presenten.! D)!Nomenclatura! y!
(6!HORAS)! •!Los! alumnos! ejemplificarán! los! conformación! de! los!
! principales! oligosacáridos! y! su!
nomenclatura!con!precisión.! monosacáridos!
•!Los! alumnos! relacionarán! a! los! E)! Reacciones! de! los!
polisacáridos! con! las! funciones! que!
desempeñan! en! un! organismo! con! monosacáridos!
certeza! F)! Oligosacáridos!
G)!Polisacáridos!
!
CARBOHIDRATOS!
!
Compuestos! orgánicos! formados! por! Carbono,! Oxígeno! e! Hidrógenoi! SE! DEFINEN!
químicamente! por! los! grupos! funcionales! que! presentan,! son:! POLIHIDROXIALDEHIDOS! o!
POLIHIDROXICETONAS.!!
!
!
!
! 96!
FUNCIONES!BIOLÓGICAS:!!
!! Fuente!de!energía!
!! Reserva!energética!
!! Formación!de!estructuras!
!
CLASIFICACIONES:!
Existen!diversos!criterios!para!clasificarlos,!por!ejemplo:!
!
Por!la!característica!Físico6Química! !! Edulcorantes!
! !! Colorantes!
que!confiere!a!la!solución!en!que!se!
! encuentre! !! Espesantes!
!
Clasificación!química!(Por!el!número!de!unidades)!!
"! Monosacáridos!(constituidos!por!una!sola!unidad!estructural),!!
"! Oligosacáridos!(dos!a!diez!unidades)!!
"! Polisacáridos!(numerosas!unidades)!
!
A!su!vez!cada!grupo!tiene!otras!formas!de!ser!clasificados!
!
! 97!
!
MONOSACÁRIDOS!
Debido! a! que! los! monosacáridos! son! la! unidad! funcional,! empezaremos! por! estudiar! a! este!
grupo.!
!
Características!
Grupo!funcional:!Aldehido!o!Cetona!
Moléculas:!! !!!!Lineales!o!Cíclicas!
Su!Nombre:!! !!!!Termina!en!OSA!
!! Tienen!mínimo!3C!
!! Tienen!máximo!7C!!
!! Blancos!!
!! Cristalinos!!
!! Todos!Dulces!
!! Solubles!en!agua!!
!
!
Estereoisomería!
!
!
Los!Monosacáridos!que!emplean!los!organismos!vivos!tienen!estereoisomería!D!por!lo!tanto!
Oligosacáridos!y!polisacáridos!tienen!unidades!con!este!mismo!arreglo!espacial.!
! 98!
!
Actividad!Óptica!
Los!carbohidratos!(independientemente!del!número!de!unidades)!son!capaces!de!desviar!la!luz!
polarizada!y!así!encontramos!por!ejemplo:!
!
DESVIACIÓN!DE!LA!LUZ!
CARBOHIDRATO! OBSERVACIÓN!
POLARIZADA!
Glucosa! A!la!derecha! Monosacárido! que! también!
se!llama!Dextrosa!
Fructosa! A!la!izquierda! Monosacárido! que! también!
se!llama!Levulosa!
Sacarosa! A!la!derecha! Disacárido!
Almidón! Presenta!Birrefringencia!! Polisacárido!
!
Nomenclatura!
Todos! los! monosacáridos! tienen! nombre! propio! que! termina! en! OSAi! además! pueden!
designarse! por! un! nombre! que! indica! el! grupo! carbonilo! que! presentan! ó! el! número! de!
carbonos!ó!ambos.!
!
NÚMERO!DE!
MONOSACÁRIDO! GRUPO!FUNCIONAL! AMBOS!
CARBONOS!
Eritrosa! Aldehido! Aldosa! 4! Tetrosa! Aldotetrosa!
Ribosa! Aldehido! Aldosa! 5! Pentosa! Aldopentosa!
Glucosa! Aldehido! Aldosa! 6! Hexosa! Aldohexosa!
Ribulosa! Cetona! Cetosa! 5! Pentosa! Cetopentosa!
Xilulosa! Cetona! Cetosa! 5! Pentosa! Cetopentosa!
Fructosa! Cetona! Cetosa! 6! Hexosa! Cetohexosa!
!
Representación!
Los!monosacáridos!suelen!escribirse!con!fórmulas!semidesarrolladas!o!su!proyección!de!Fisher!
(aunque!no!es!igual!a!la!que!se!emplea!en!Química!Orgánica)i!a!continuación!se!encuentran!la!
familia!de!las!D!–!Aldosas!y!de!la!familia!de!las!D!–!Cetosas.!
! 99!
BUAP:&Facultad&de&Ciencias&Químicas&
Departamento:&Bioquímica&–&Alimentos&
Licenciatura&en&Químico&Farmacobiólogo&
FAMILIA&DE&LAS&DFALDOSAS&
1.F&El&Aldehido&se&representa&
con&un&círculo&
2.F&La&cadena&carbonada&es&
una&vertical&en&la&que&se&
representan&los&OH&con&líneas&
perpendiculares&que&no&deben&
cruzar&la&vertical&
3,.&Los&OH&de&los&carbonos&
simétricos&NO&se&representan&
con&perpendiculares&
&
& 100&
&
FAMILIA&DE&LAS&DFCETOSAS&
&
1.F&El&grupo&Ceto&se&representa&con&un&
círculo&relleno&
2.F&La&cadena&carbonada&es&una&
vertical&en&la&que&se&representan&los&
OH&con&líneas&perpendiculares&que&no&
deben&cruzar&la&vertical&
3,.&Los&OH&de&los&carbonos&simétricos&
(primero&y&último)&NO&se&representan&
con&perpendiculares&
&
&
& 101&
La&D&Glucosa&en&solución&presenta&el&fenómeno&denominado&mutarrotación&que&consiste&en&la&
variación&del&valor&del&ángulo&en&que&desvía&la&luz&polarizadaH&Haworth&explicó&este&fenómeno&al&
demostrar& que& la& glucosa& se& cicla& formando& dos& estereoisómeros& denominados& anómero& α& y&
anómero&β.&
&
&
&
&
& 102&
&
FORMULAS&DE&LA&PROYECCIÓN&DE&HAWORTH&
&
&
&
Es&importante&notar&que&aunque&en&solución&las&estructuras&en&anillo&sean&las&más&frecuentes,&
se&encuentran&de&todas&maneras&cadenas&abiertas&en&equilibrio&con&las&variedades&en&anillo.&&
&
Haworth& propuso& un& modelo& para& representar& la& estructura& real& (cíclica)& de& los& azúcares& en&
fórmulas&impresas.&
&
Daremos& a& continuación& algunos& pasos& básicos& para& transformar& una& cadena& abierta&
(Representación&de&Fisher)&a&su&forma&cíclica&(Representación&de&Haworth).&
&
PASOS&BÁSICOS&
&
Aldohexosas:.`&Tomemos&como&ejemplo&a&la&D`Glucosa.&
&
& H 1 O
& C
& 2
& HC OH
3
& HO CH
1.`& Escribir& la& forma& abierta& del&
& 4 azúcar&y&numerar&los&carbonos.&
& CH OH
5
& CH OH
& 6
CH 2OH
& &
&
&
&
&
2.`& Escribir& la& estructura& base& (para& el& caso& de& las& aldohexosas& la& estructura& base& semeja& al&
pirano)&y&numerar&los&carbonos.&
& 6
& CH 2OH
& O
& 4
5
1
& 2
3
& &
& 103&
3.`& Colocar& los& OH& de& los& carbonos& 2,3& y& 4& sobre& esta& estructura,& tomando& en& cuenta& que&
cuando&aparecen&a&la&derecha&en&la&representación&de&Fisher&en&la&representación&de&Haworth&
aparecen&hacia&abajo&del&plano&y&cuando&aparecen&a&la&izquierda&en&la&representación&de&Fisher&
en&la&representación&de&Haworth&aparecen&hacia&arriba&del&plano.&
&
&
&
& H 1 O
& C 6
& 2
CH 2OH
& HC OH
3 O
& 4
5
1
HO CH OH
& 4 HO 3 2
& $CH OH
OH
& 5
& $CH OH
6
& CH 2OH
& &
&
&
&
4.`& Observe& que& el& carbono& número& uno& en& que& la& representación& de& Fisher& es& un& carbono&
carbonílico,&mientras&que&en&la&representación&de&Haworth&este&carbono&se&ha&convertido&en&un&
nuevo&carbono&asimétrico&llamado&CARBONO&ANOMÉRICO.&El&OH&en&este&carbono&se&puede&
encontrar& hacia& abajo& del& plano& cuando& se& trata& del& anómero& alfa& (α)& o& bien& hacia& arriba& del&
plano&cuando&se&trata&del&anómero&beta&(β),&
&
&
&
& CH2OH CH 2OH
& O O OH
& OH OH
& HO OH HO
OH
& OH
&
&
5.`&Para&nombrar&el&azúcar&se&nombra&como&derivado&del&pirano,&de&modo&tal&que&el&nombre&de&
la&glucosa&será:&
&
Para&el&anómero&α:&α`D`glucopiranosa.&
Para&el&anómero&β:&β`D`glucopiranosa.&
&
& 104&
Aldopentosas.`&Tomemos&como&ejemplo&a&la&D`Xilosa.&
&
& H 1 O
& C
& 2 1.`&Escribir&la&forma&abierta&del&azúcar&y&
& HC OH
numerar&los&carbonos.&
& 3
& HO CH
4
& OH
"CH
& 5
& CH 2OH
& &
2.`& Escribir& la& estructura& base& (para& el& caso& de& las& aldopentosas& la& estructura& base& semeja& al&
furano).&Numerar&los&carbonos.&
&
& 5 O
& CH 2OH
& 4 1
&
&
& 3
2
& &
&
3.`&Colocar&los&OH&de&los&carbonos&2&y&3&como&se&mencionó&en&el&paso&3&en&las&aldohexosas.&
&
& H O
& C
5 O
CH 2OH
& OH
HC 4 1
&
& HO CH OH
& HC OH 3
2
& OH
CH 2OH
& &
4.`& Colocar& el& OH& del& carbono& número& uno& (CARBONO& ANOMÉRICO).& Ver& paso& 4& de& las&
aldohexosas.&Nombrar&el&azúcar&como&derivado&del&furano&
&
& O
O CH2OH OH
& CH2OH
&
& OH OH
OH
&
& OH
& OH
&
&
& 105&
Cetohexosas..`&Tomemos&como&ejemplo&a&la&D`Sorbosa.&
&
& 1
& CH 2OH
& 2
C O
& 3 1.`& Escribir& la& forma& abierta& del&
& HC OH
azúcar&y&numerar&los&carbonos.&
4
& CH
HO
& 5
& HC OH
6
& CH 2OH
& &
2.`& Escribir& la& estructura& base& (para& el& caso& de& las& Cetohexosas& la& estructura& base& semeja& al&
furano).&Numerar&los&carbonos.&
&
O
& O CH2OH
CH2OH CH2OH
&
&
CH2OH
&
& &
&
Observe& que& están& representadas& dos& estructuras& base.& Una& corresponde& al& anómero& alfa& y&
otra&al&anómero&beta.&Esto&deriva&del&hecho&de&que&el&carbono&anomérico&es&el&carbono&2&y&por&
lo&tanto&la&posición&del&carbono&1&dependerá&del&lugar&que&ocupe&el&OH&del&carbono&anomérico&
&
3.`Colocar&los&OH&del&los&carbonos&3&y&4&como&se&indicó&en&el&paso&3&de&las&aldohexosas.&
&
& 1
& CH2OH
& 2
C O 6 O 1
6
O
CH2OH
& 3 CH2OH CH 2OH 2
& HC OH 5 2 5
4
& CH OH
CH 2OH
1
HO OH
& 5
3
3 4
& HC OH 4
OH
6 OH
& CH2OH
& &
&
4.`& Colocar& los& OH& del& carbono& número& 2& (CARBONO& ANOMÉRICO).& Ver& paso& 4& de& las&
aldohexosas.&Nombrar&el&azúcar&como&derivado&del&furano.&
&
& HOCH2 O CH2OH HOCH2 O OH
&
& OH OH
& OH CH2OH
&
& OH OH
&
& 106&
&
REACCIONES&DE&LOS&CARBOHIDRATOS."
"
"
"
1.`&Formación&de&los&ésteres&fosfóricos&
&
& CH 2OH
=
CH 2OPO3
&
O O
&
Hexoquinasa
&
&
& ADP
ATP
& &
&
&
2.`&Formación&de&azúcares&ácidos.&(POR&OXIDACIONES).&
&
&
& a).`&Por&oxidación&de& &&CHO& & & & ÁCIDOS&ALDÓNICOS&
&
H O
& C COOH
&
HC OH HC OH
&
& HO CH OXIDACIÓN+SUAVE HO CH
& HC OH HC OH
&
& HC OH HC OH
& CH2OH CH2OH
&
D Glucosa Ác.+D Glucónico
& &
&
& b).`&Por&oxidación&de&CH2OH&& & ÁCIDOS&URÓNICOS&
&
&
CH2OH COOH
&
O OXIDACIÓN O
&
& SUAVE
&
& &
& & & &&&&&D&–&Glucosa&&&& & & Ácido&D&`&Glucurónico&
&
&
& 107&
&
&
&
& c).`&Por&oxidación&de&CHO& y&CH2OH& & ÁCIDOS&ALDÁRICOS&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
& &
&
& & & &&&&&&D&–&Glucosa&& & Acido&D&`&Glucárico&
&
&
& d).`&Por&oxidación&completa.&
&
GLUCOSA&&+&&O2& & & CO2&&+&&H2O&
&
&
&
3.`&Formación&de&aminoazúcares.&
&
&
CH2OH COOH CH2OH CH2OH
&
O O O O
&
& NÀcetil`Galactosamina&
&
NH2 NH2 NH NH
&
& D`&Glucosamina& D`&Galactosamina& COCH 3
COCH3
& &
& NÀcetil`&
& Glucosamina&
&
&
&
&
& 108&
4.`&Reducción&de&azúcares.&
&
& a).`&Formación&de&azúcares&polihidroxilados.&
&
&
& H O
& C CH2OH
&
CHOH CHOH
& & & & & & & & &&&&&&&&Riboflavina&
REDUCCIÓN
& CHOH CHOH
&
CHOH CHOH
&
& & CH& 2OH & & & CH& 2OH & & &&&&&FAD&
& &
& &&&&D&–&Ribosa& & & &&&&&D&`&Ribitol&
&
&
&
& H O H H
C C
& Reducción
& & & H C &OH & & H C& OH & & Lípidos&
& CH2OH CH2OH
&
D&'&Gliceraldehido Glicerol &
&
&
&
& b).`&Formación&de&desoxiazúcares.&
&
&
& HOCH 2 O HOCH2 O
& Reducción
&
& OH OH OH H
&
D&'&Ribosa D&'&2&Desoxirribosa&
&
&
&
5.`&Poder&reductor:&Los&carbohidratos&que&presentan&al&carbono&anomérico"libre&son&capaces&
de&reducir&iones&metálicos.&(Esta&reacción&es&utilizada&para&caracterizar&azúcares&reductores&y&
no&reductores.)&
&
& H O &
HC OH HC O:
& C
& C OH C OH
HCOH
&
& R R R
& Anión1enólico
Aldehido Enol
& Responsable1de1la1reducción &
&
&
& 109&
&
&
&
6.`&Formación&de&Enlaces&Glucosídicos.&
&
& Se&forman&por&la&reacción&entre&el&OH&del&carbono&anomérico,&que&es&el&más&reactivo&en&
un&azúcar,&y&el&OH&de&cualquier&otro&carbono&de&otro&monosacárido,&lo&cual&origina&la&formación&
de&un&acetal&completo&llamado&glucósido.&
&
& Los& distintos& enlaces& glucosídicos& se& forman& por& las& diferentes& & combinaciones& que&
pueden&existir&entre&carbonos&anoméricos&alfa&o&beta&y&los&diferentes&OH&del&otro&azúcar,&dando&
por& consecuencia& diferentes& tipos& de& interacciones& glucosídicas,& de& las& cuales& escribiremos&
algunos&ejemplos.&
&
&
& HOCH 2 HOCH 2 HOCH 2
HOCH 2
& O O
O O
& & & & & & ó&
&
O O
&
& Interacción.α.1.0.4& Interacción.α.1.0.4&
&
&
&
&
& HOCH2
HOCH2 HOCH2 O
& O
O O
&
& & & & O& & &&ó& O
& HOCH2
&
& Interacción.β.1.0.4& Interacción.β.1.0.4&
&
&
& HOCH2
& O
&
&
O
&
& CH 2
& O
&
&
&
& Interacción.α.1.0.6&
&
& 110&
NOMENCLATURA&DE&DISACÁRIDOS.&
&
& Existen& diferentes& maneras& para& nombrar& a& los& disacáridos,& una& de& ellas& es& la& que& a&
continuación&se&describe:&
&
1.`&Se&nombra&al&disacárido&como&derivado&de&la&unidad&monosacárida&que&presente&el&carbono&
anomérico&libre&(&&∗&)&
&
&
&
& HOCH 2 HOCH2
& & & O & &O &&&&(&&∗&&)&
& & & & & & Este&disacárido&es&derivado&de&&
& &
O & & & & la&α`D`glucopiranosa.&
& &
&
&
2.`&La&otra&unidad&monosacárida&se&nombra&como&radical&con&la&terminación&il.&
&
&
& HOCH2 HOCH2
& O O
& & & & & & &&&&D&`&Glucopiranosil&
& O
& &
&
&
&
3.`& Para& iniciar& el& nombre& deberá& marcarse& el& tipo& de& enlace& glucosídico& que& presenta,& en& el&
ejemplo&que&estamos&describiendo&el&enlace&glucosídico&se&establece&entre&el&carbono&#&4&y&el&
carbono&anomérico,&cuyo&hidroxilo&está&en&posición&(α).&
&
&
& HOCH2 HOCH2
& O O
&&&&α 4&
& & & &O & & & & 4&–&O&`&α&
& &
&
& & & O&(oxi)&
&
4.`&Escribir&el&nombre&del&radical.&
&
& 4`0`α`D`glucopiranosil…..&
&
5.`&Escribir&el&nombre&del&azúcar&del&cual&se&deriva&el&disacárido.&
&
& 4`0`α`D`glucopiranosil`α`D`glucopiranosa.&
& 111&
DISACÁRIDOS&
&
&
& &&&&&&&&&α&`&Maltosa& & & & & &&&&&"β&`&Maltosa&
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2
& O O O O
&
& O O
& & &
&
4&–&O&`&α&`&D&–&Glucopiranosil&–&&& & & 4&–&O&–&D&`&Glucopiranosil&
&&&&&&&"α&`&D&–&Glucopiranosa& & & & &&&&β&`&D&`&Glucopiranosa&
&
&
&
&
& &&&&&&α&`&Isomaltosa& & & & & β&`&Isomaltosa&
&
& HOCH 2 HOCH 2
& O O
&
& O O
&
& CH 2 CH 2
& O O
&
&
&
& &
&
&
&
&
&
&
&
& & α&`&Celobiosa& & & & & &&&&β&`&Celobiosa&
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2
HOCH2
& O O
O O
&
& O O
&
& & &
&
&
&
&
&
&
& 112&
&
&
&
&
&
& & α&`&Lactosa& & & & & & β `&Lactosa&
&
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2
& O O O O
&
O O
&
&
& &
&
&
&
&
&
&
&
&
&
& & & & &&&&&&&&&&&&&&&&&&Sacarosa&
&
&
& HOCH 2
& O
&
&
& O
& HOCH 2
& O
& CH 2OH
&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
& 113&
POLISACÁRIDOS&&
&
HOMOPOLISACÁRIDOS&&
&
& CELULOSA:&& Función:&Estructural&
& & & Unidad&monosacárida:&β`D`glucosa&
& & & Unidad&disacárida:&β`Celobiosa&
& & & Unión&glucosídica:&β (1,4)&
& & & Origen:&Vegetal&
&
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2
& O O O O O O
& O O
O O O O
&
& &
&
&
&
& ALMIDÓN:&& Componentes:&Amilosa&y&amilopectina&
& & & Función:&Reserva&
& & & Unidad&monosacárida:&α`D`glucosa&
& & & Origen:&Vegetal&&
&
&
AMILOSA:&Enlaces&glucosídicos:&α (1,4)&
&
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH
2 HOCH2 HOCH2
& O O O O O O O O
&
& O O O O O O O
& &
&
&
&
&
&
&
&
Conformación&de&la&
Amilosa&
&
&
&
& &
&
&
&
&
& 114&
&
&
& & AMILOPECTINA:&Enlaces&glucosídicos:&α (1,4)&y&α (1,6)&
&
&
HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2
& O O O O
&
& O O O
& O
&
& HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 HOCH2 CH2 HOCH2 HOCH2
& O O O O O O O O
&
& O O O O O O O
& &
&
&
&
&
&
&
& & Conformación&de&la&
& & & Amilopectina&
&
&
&
&
&
&
& &
&
& GLUCÓGENO:&Función:&Reserva&
& & & &&Origen:&Animal&
& & & &&Unidad&monosacárida:&α`D`glucosa&
& & & &&Enlaces&glucosídicos:&α (1,4)&y&α (1,6)&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
&
& &
& 115&
&
HETEROPOLISACÁRIDOS&
&
& ÁCIDO&HIALURÓNICO:&Función:&estructural&
& & & & &&&&Origen:&Animal&
& & & & &&&&Unidades&monosacáridas:&Ácido&D`glucurónico&y&&
& & & & &&&&Nàcetil`D`glucosamina&
& & & & &&&&Enlace&i n t r a d i s a c á r i d o : &β (1,3)&
& & & & &&&&Enlace&i n t e r d i s a c á r i d o : &β (1,4)&
&
&
& & & & & β1−4
&
&
& COOH HOCH2
O COOH HOCH2
& O
& O O O
& O O
&
& NH
& NH
& CO CH3
CO CH3
& &
&
& & & β1−3
&
&
&
& CONDROITINA:&Función:&Estructural&
& & & &&&Origen:&Animal&
& & & &&&Unidades&monosacáridas:&Ácido&D`glucurónico&y&&
& & & &&&Nàcetil`D`galactosamina&
& & & &&&Enlace&i n t r a d i s a c á r i d o : &β (1,3)&
& & & &&&Enlace&i n t e r d i s a c á r i d o : &β (1,4)&
&
&
& COOH HOCH2
& O COOH HOCH2
O
&
O O O O
&
& O O
& NH
& NH
& CO CH3
& CO CH3
& &
&
& 116&
&
&
OBJETIVO"
UNIDAD"" CONTENIDO"TEMÁTICO"
ESPECÍFICO"
& •&Los&alumnos&describirán& A)& Estructura&y&propiedades&del&ATP&&
UNIDAD&VII&& B)& Variación& de& la& energía& libre& de&
con&precisión&al&sistema&
&
EL& SISTEMA& ADP& `& ADP`&ATP&como& Gibbs&al&hidrolizarse&el&ATP&
ATP& Y& SU& responsable&de&la& C)&Variación& de& la& energía& libre& de&
IMPORTANCIA&
vinculación&entre&procesos& Gibbs&de&otros&compuestos&fosforilados&
&
& exergónicos&y& al&sufrir&hidrólisis&
&
endergónicos,&así&como&su& D)&Papel&central&del&sistema&ADP&`&ATP&
(4&HORAS)&
& papel&en&la&conservación& E)& Conservación& de& la& energía& de&
de&la&energía&de&oxidación& oxidación&
F)& Utilización&de&la&energía&del&ATP&
&
&
&
& 117&
SISTEMA&&ADP&–&ATP&
&
&
&
& A&
NH2 D&
&
& N E&
N
Adenina& N&
& # # # N O&
O O O N
& S&
# O
O P O P O P O CH2 & I&
Ribosa&& N&
& O O O A&
& &
&
& & & & & & &&&&&&&AMP&&(Adenosín&mono&fosfato)&
&
& & & & & & ADP&&(Adenosín&di&fosfato)&
&
& & & & & ATP&&(Adenosín&tri&fosfato)&
&
&
El& ATP& es& una& molécula& que& contiene& enlaces& de& alta& energía,& misma& que& se& libera& cuando&
dichos&enlaces&se&hidrolizanH&la&hidrólisis&del&ATP&puede&ser&como&se&indica&a&continuación.&
&
& Hidrólisis&Ortofosfórica&
&
&
# #
& O
# O
#
O
# O
# O O
& # #
P #
ADENOSINA O P O P
O
P O P O P O# O O
& ADENOSINA
O
O O
& O O O O
O
ΔG &&`&7.3& Pi
& ATP ADP &
(Kcal/mol)&
&
&
&
& Hidrólisis&Pirofosfórica&
&
&
# # # # # #
& O O O O O O
& # # # P O P O
ADENOSINA O P O P O P O ADENOSINA O P O O
& O
& O O O ΔG &&`&7.3& O O O
& (Kcal/mol)& AMP
ATP PPi &
& O
& ΔG &&`&7.3&
& (Kcal/mol)&
& PPi&& & & &&2&Pi&
&
&
& 118&
&
&
&
&
&
&
ENERGÍA&LIBRE&ESTÁNDAR&(ΔG0)&DE&&
&
HIDRÓLISIS&DE&COMPUESTOS&FOSFORILADOS&
&
&
&
&
&
& & Sentido& de&
COMPUESTO& O
ΔG ’&&(Kcal&/&mol)& transferencia&
de& grupos&
& & fosfato&
Fosfoenolpiruvato& `&14.8&
1,&3&`&Difosfoglicerato& `&11.8&
Fosfocreatina& `&10.3&
Acetilfosfato& `&10.1&
ATP& `&7.3&
Glucosa&–&1P& `&5.0&
Fructosa&–&6P& `&3.8&
Glucosa&–&6P& `&3.3&
3&`&Fosfoglicerato& `&2.4&
Glicerol&–&3P& `&2.2&
&
&
& 119&
TRANSFERENCIA*DE*FOSFATOS*DE*DONADORES*DE*ALTA*ENERGÍA*A*
*
ACEPTORES*DE*BAJA*ENERGIA*
&
&
&
&
&
ΔGo&Hidrólisis& &
&&&&&&&&&&&&&&&`&16.0& &
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&Fosfoenolpiruvato& &
&&&&&&&&&&&&&&&`&14.0& &
& """""""∼"P"
Fosfatos&de&alta&
&&&&&&&&&&&&&&&`&12.0& & energía&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1,3&–&Difosfoglicerato& &
&&&&&&&&&&&&&&&`&10.0&&&&&&&&Fosfocreatina& &∼"P"
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&∼P" &
&&&&&&&&&&&&&&&&&`&8.0& &
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&(ADP)& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&ATP&
&&&&&&&&&&&&&&&&&`&6.0& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&∼"P"
& &&&&&&&&∼"P"
&&&&&&&&&&&&&&&&&&`4.0& &
Fosfatos&
de&baja&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&(Glucosa)& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&Glucosa&6P&
energía&
&&&&&&&&&&&&&&&&&`&2.0&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&(Glicerol)& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&Glicerol&3P&
& &
&
& & & & & & & & & & Transferencia&
&
&
&
&
&
&
& 120&
&
&
PAPEL&DEL&SISTEMA&ADP"–"ATP&COMO&INTERMEDIARIO&COMÚN&
&
&
& 1,&3&–&Difosfoglicerato&& & & &&&&&&&&&3&`&Fosfoglicerato&
&
&
&
&
& & & & """""""ADP"""""""""ATP"
&
&
&
& & Glucosa&6P& & & & &&&&&&&&&Glucosa&
&
&
&
&
&
&
&
&
PRINCIPALES&USOS&DE&LA&ENERGÍA&DEL&ATP&
&
&
& Trabajo&eléctrico&
& & & & & ATP"
&
Moléculas&combustibles& Trabajo&de&
& transporte&
&
&
Oxígeno& Trabajo&
& mecánico&
& Respiración"
&
& Biosíntesis&
&
&
&
&
CO2,&&H2O& & & & ADP&&+&&Pi&
&
&
&
&
& 121&

Ayudas Didácticas Bioquímica

Загружено:

Сведения о документе

Исходное описание:

Оригинальное название

Авторское право

Доступные форматы

Поделиться этим документом

Поделиться или встроить документ

Параметры публикации

Этот документ был вам полезен?

Это неприемлемый материал?

Авторское право:

Доступные форматы

Ayudas Didácticas Bioquímica

Загружено:

Авторское право:

Доступные форматы

BENÉMERITA!UNIVERSIDAD!AUTÓNOMA!DE!PUEBLA!

Capacidad!calorífica!(Cal/g)! 1! 0.6! 0.5! 0.24!

Calor!de!vaporización!(Cal/g)! 596!!a!!00C! 262!!a!!640C! 79!!a!!680C! 59!!a!!610C!

Calor!latente!de!fusión!(Cal/g)! 79.7!!a!!00C! 24.9!a!d114.40C! dd! dd!

Tensión!superficial!(erg/cm2)! 76! 22! 18! 11!

Constante!dieléctrica! 79! 24! 1.9! 5!

! !! Fuente! de! energía! cuando! los! combustibles! usuales! (carbohidratos! y!

K !6!R !6!P !6!P !6!G !6!F !6!S !6!P !6!F !6!R ! ! L IS IL !B R A D IC IN IN A !

•!Los! alumnos! explicarán! la! acción! de! agentes! E)! Purificación! y!

que! afectan! la! estructura! de! las! proteínas,! caracterización! de!

GRUPO!BUSCADO!! ACCIÓN!! SE!OBSERVA!!

Cromógeno!! Observación!! Color!!

Iones!metálicos!! Adición!de!agentes! Color,!precipitado,!absorción!de!

Carbohidratos!! Reactivo!de!Molish!! Color!violeta!!

Lípidos!! Sudán!III!! La!solución!se!tiñe!

DNA!! Orcinol!! Color!amarillo!!

¿Por qué aceleran reacciones?

La! temperatura! afecta! a! las!

Вам также может понравиться