MÉTODOS PARA EL CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS AEROBIAS

MICROBIOLOGIA

MARIA INES GALLEGO

ANDERSON BETANCURT FRANCO

VALENTINA MEDINA MUÑOZ
MARÍA ESTEFANÍA MONTOYA SUAREZ
PAULA ZUÑIGA FRANCO

UNIVERSIDAD DEL QUINDIO

FACULTAD DE CIENCIAS AGORINDUSTRIALES
INGENIERIA DE ALIMENTOS
2020-2
 MÉTODOS PARA EL CULTIVO Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS AEROBIAS
-SIMULACRO

En el traspaso de bacterias de los cultivos a placas de agar, han de tenerse ciertas

precauciones para evitar contaminaciones con gérmenes extraños, que pueden
encontrarse en el aire, polvo, muebles y objetos. Al mismo tiempo debe cuidarse
que en la manipulación de los cultivos se escapen los gérmenes del medio;
pueden ser patógenos.
Pasteur hacía el traslado de bacterias de los cultivos a medios recientes, utilizando
una pipeta terminada en capilar muy fino y que ahora se conoce con el nombre de
“pipeta de Pasteur”.
Desde los tiempos de Koch se emplea más comúnmente la aguja o asa
bacteriológica de metal; se fabrican generalmente de platino o níquel – cromado,
con mango metálico.
Existen asas bacteriológicas con mango de Kolle para aguja de platino; otras con
mango de Rosemberger y Greenman. Los mangos de vidrio no son recomendados
por su fragilidad.

Siembras:
La transferencia de las bacterias desde los productos patológicos a un medio de
cultivo se denomina siembra; la transferencia de un cultivo a otro: subcultivo o
comúnmente repique.
Las siembras se practican por medio de un escobillón, de asa de alambre delgado,
o de pipetas.

TIPOS DE SIEMBRA
a. Siembra en la caja de petri por agotamiento

Siembra en la caja
de petri por
agotamiento

Se toma la caja de petri en la palma

de la mano izquierda ligeramente
inclinada

Con ella se
recoge el
material de Con la mano derecha se maneja el asa O en el caso de usar
cultivo previamente esterilizada escobillón se inocula
en una pequeña área
de la caja
 Se quema el
Se trazan estrías paralelas hasta la
asa Se hace girar
mitad o tercera parte de la caja
la caja

Se quema
nuevamente el asa Se hacen estrías en la misma
forma hasta la mitad de la
superficie libre Se hace girar
la caja

Se trazan estrías perpendiculares

Se esteriliza el asa a las anteriormente practicadas
antes de descartarla en el cuadrante libre.

FIGURA 1. Siembra en la caja de petri por agotamiento

Inoculación en placas de Agar

La estría en placa es usada en primer lugar para aislar cultivos puros de los
cultivos mixtos.
Se usa también para estudiar la morfología y propiedades hemolíticas de colonias
aisladas, característica de gran valor en la identificación de bacterias.

Materiales

 Agares  Agitador de  Autoclave

 Cajas de Petri vidrio  Canasta de
 Erlenmeyer  Mechero alambre
PROCEDIMIENTO 1

Siembras
 La superficie del agar debe ser lisa y
húmeda, pero no en demasía

Esterilice el asa bacteriológica.

Usando el dedo pequeño de la mano

derecha derecha, quite el tapón de
algodón o la tapa de rosca del tubo
que contiene la muestra (espécimen)

Con el aro del asa, tome una capa o

película delgada de la muestra que va
a sembrar.

Tape nuevamente el tubo de cultivo

Coloque el tubo utilizado, flameando la boca del tubo
en la gradilla. antes de poner el tapón

Con la mano izquierda levante la Tape la caja

tapa de la caja de petri. Pase el asa
haciendo estrías en la forma indicada
hasta la mitad de la placa

Esterilice el asa bacteriológica a la Déjela enfriar

llama.
Rote ¼ la caja
de petri
 Con el mismo material que hay Esterilice el asa
Rote nuevamente sembrado haga estrías. y déjela enfriar
la caja de petri.

Como en el caso anterior, con el Tape la caja de

material de caja haga estrías en el petri.
Esterilice el asa y área restante.
deje enfriar.

Rotule la tapa de la caja de petri con Marque bien la

los datos necesarios, caja para evitar
confusiones.

Incube colocando las

cajas invertidas, es decir,
que la caja de agar quede
hacia arriba.

FIGURA 2. Procedimiento de siembra.

b. Siembra en tubos o frascos bacteriológicos

La siembra en medios contenidos en tubos requiere mayor cuidado ya que
un solo organismo contaminante del aire puede superar en crecimiento al
organismo patógeno. Por tanto se deben tener las siguientes precauciones:
  Mantener inclinado el tubo que contiene el cultivo que se va a
transferir de modo que los microorganismos del aire caigan en las
paredes externas del tubo y no en la boca.
 Los tapones de los tubos deben mantenerse en la mano derecha
sostenidas entre el meñique y el anular y entre el anular y el dedo del
corazón. Nunca deben colocarse sobre la mesa de trabajo o algún
otro lugar. Deben prepararse de algodón no absorbente.

PROCEDIMIENTO 2

Siembra en tubos
o frascos
bacteriológicos

Esterilice el asa según instrucciones

Quite la tapa rosca del tubo.

Flamear la boca del tubo

Sumergir el asa en el medio. Sin tocar las

paredes del tubo.

Enfriar el asa en una parte del medio

Tomar el inóculo con el asa El aro lleno.

Después de practicar la siembra,

esterilizar el asa y flamear
nuevamente la boca del tubo.
 Colocar los
tapones.

Transferir el material al
otro tubo.

FIGURA 3. Procedimiento de siembra en tubos o frascos bacteriológicos .

Teniendo en cuenta la clase de siembra en tubo, se procede así; si el medio es

sólido:
 Siembre con asa en estrías
Se realiza en un tubo con medio sólido inclinado en bisel, deslizando el asa
sobre le superficie y marcando surcos o estrías. (Ver figura No. 3a).

 Siembra con aguja en picadura central

Se designa con este nombre a la siembra que se realiza con asa recta en
tubos de medios sólidos o semisólidos generalmente sin inclinar; se
introduce el asa cargada con la bacteria al medio de cultivo por el centro de
la superficie al fondo. (Ver figura 3c).

Si el medio es semisólido:
 Siembra mixta
Igualmente se realizan siembras mixtas en picadura central en el fondo del
tubo y luego se desliza el asa por la superficie en bisel marcando estrías.
(Ver figura 3b).

c. Siembra en medio liquido

Para transferir un producto contenido en un medio liquido o sólido a otros
medios líquidos se puede usar pipetas estériles o asa; si se hace con
pipeta, unas pocas gotas (2-3) son suficientes para el desarrollo bacteriano,
si se practica con asa una o dos asadas.
Procurando que todo el material tomado quede en el nuevo medio.
 Nota:
 En toda siembra se debe anotar en forma clara la fecha y número de
registro.
 Las cajas de petri se incuban invertidas para impedir que el agua de
condensación que se deposita en la tapa caiga sobre el medio y disperse las
colonias.
 Al manipular con los tubos que contienen los microorganismos, aquellos han
de ser sostenidas de modo que queden casi paralelos a la superficie de la
mesa para evitar la contaminación con el aire.
 Cuando se trata de hacer extensiones en lámina o placas, se colocan los
tapones en su sitio de esparcir el material sobre el portaobjetos.

CUESTIONARIO
1. ¿Por qué debe ser lisa la superficie del agar? Consulta diferentes tipos
de agares que se utilizan en Microbiología.
Un agar debe ser liso, ya que permite observar mejor las bacterias, para su conteo
y para que no haya pérdida de las colonias, además también se necesita para que
crezcan de manera adecuada.
Agar/Caldo LB (Luria Bertani) – Agar/Caldo Miller’s LB
Es un medio de cultivo nutritivo, no selectivo ni diferencial que contiene triptona,
extracto de levadura y cloruro de sodio. Tiene los nutrientes necesarios para el
crecimiento óptimo de la mayoría de los microorganismos. El Miller’s LB tiene
proporciones diferentes al LB típico.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]
Agar Sangre
Es un medio enriquecido y diferencial. Es la combinación de un agar nutritivo con
sangre de mamiferos (normalmente oveja, aunque también hay de conejo o
humanos) a una concentración de 5-10%. Se usa para aislar principalmente
microorganismos del género Streptococcus (S. pyogenes y S. aureus como más
comunes).[ CITATION Cri11 \l 2058 ]
Es diferencial para detectar actividad hemolítica (lisis y digestión de eritrocitos)
según si las bacterias pueden hacer β-hemolisis (lisis completa y se ve un halo
incolor alrededor de la colonia) o α-hemolisis (hemolisis parcial y aparece un halo
verdoso alrededor de la colonia).
Agar sangre con tres especies de Streptococcus spp. S. mitis (α-hemolysis ); S.
pyogenes (β-hemolysis); S. salivarius (γ-hemolysis = no-hemolitico),.
Fuente: Wikipedia

Agar Chocolate
Es un tipo de agar sangre, en este caso la sangre se le ha aplicado un tratamiento
de calor para lisar los glóbulos rojos dándole una coloración más marrón, como de
chocolate. Se utiliza sobretodo para aislar a Haemophilus influenzae y Neisseria
meningitidis. Al aplicar este tratamiento calorífico se liberan factores de
crecimiento de los glóbulos rojos que necesitan estos microorganismos. [ CITATION
Cri11 \l 2058 ]

Brucella sp en agar Chocolate. Crédito: Todd Parker

Agar McConkey
Es un medio selectivo y diferencial. En este medio crecen bacterias Gram
negativas tanto aerobias como anaerobias facultativos incluyendo todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae. Contiene sales biliares y cristal violeta
inhibiendo el crecimiento de Gram positivas.Es diferencial porque permite detectar
bacterias que fermentan Lactosa (L+) de las que no (L-). Las L+ (Escherichia coli,
Klebsiella) degradan la lactosa acidificando el medio haciendo que las colonias y
el medio tomen un color rosado o rojizo, las L- (Salmonella, Proteus, Yersinia) al
no degradar lactosa no hacen este cambio de color en el medio. [ CITATION Cri11 \l
2058 ]

Agar McConkey con colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa.

Crédito: Medimicro

Agar Sabouraud
Es un medio utilizado para cultivar hongos. Tiene una concentración de dextrosa
alto y un pH bajo (5.6) que inhibe el crecimiento de la mayoría de las bacterias.
Además, tiene el antibiótico gentamicina que inhibe específicamente las bacterias
Gram negativas.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Hongo Sporothrix schenckii en agar Sabouraud. Crédito: Dr. Lucille K. Georg

Agar Levine (EMB)

Medio selectivo y diferencial gracias a los colorantes Eosina y Azul de Metileno.
Estos compuestos son tóxicos para los Gram positivos.
Es selectivo a partir de la fermentación de la Lactosa (L+, L-). Las L- son incolores
y las L+ son negro-azulada y pueden tenir brillo metálico que a veces es verdoso.
[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Colonias de E. coli en agar Levine. Crédito: Budhavee S.N.A

Agar entérico de Hektoen (HEK)

Medio selectivo y diferencial para bacterias Gram negativas, concretamente
para Salmonella y Shigella. Tiene un indicador de pH, las bacterias que acidifican
el medio vuelven el agar de color amarillo o rojo, las que alcalinizan el medio
(Salmonella y Shigella) lo vuelven de color azulado. Además la presencia de
Tiosulfato o citrato de amonio férrico permite diferenciar estas dos bacterias,
formando Salmonella colonias negras al producir ácido sulfhídrico. [ CITATION Cri11 \l
2058 ]

Primer plano de una placa con colonias de Shigella. Crédito: Todd Parker

Agar Manitol Salado (MSA)
Medio de cultivo selectivo y diferencial. Contiene una alta concentración de sal
(7.5 – 10%) haciéndolo selectivo para Staphylococcus. Además es diferencial por
la fermentación de manitol, formando los microorganismos fermentadores (S.
aureus) colonias de color amarillo con o sin halo amarillo y las no fermentadores
(otras especies de Staphylococcus) colonias del color del medio o rojizas. [ CITATION
Cri11 \l 2058 ]

Ejemplo de MSA: Micrococcus sp. (1) , S. epidermidis (2), S. aureus (3)

Crédito: Navaho

Caldo Tioglicolato
Se trata de un medio de enriquecimiento diferencial y no selectivo. Contiene
peptona y extracto de levadura que permite que crezcan la mayoría de
microorganismos. Es un medio líquido, aunque tiene una pequeña cantidad de
agar. La función de este medio es la de poder observar y diferenciar
microorganismos según sus necesidades de oxígeno, según si son aerobios,
anaerobios, aerotolerantes, etc. En el siguiente dibujo podéis ver como crecerían
cada uno:[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

1. Aerobios estrictos 2. Anaerobios estrictos 3. Aerobios facultativos 4.

Microaerófilos 5. Aerotolerantes. Crédito: Pixie
Agar Thayer-Martin
Es un medio nutritivo y selectivo para el aislamiento de Neisseria
meningitidis y Neisseria gonorrhoeae. Es una mezcla entre agar Chocolate y agar
Mueller-Hinton, teniendo una gran cantidad de nutrientes pero a la vez
con antibióticos impidiendo el crecimiento de muchos microorganismos. [ CITATION
Cri11 \l 2058 ]

Agar Cysteine lactose electrolyte deficient (CLED)

Es un medio de cultivo diferencial para aislamiento, diferenciación y conteo de las
bacterias presentes en la orina. Favorece el crecimiento de los microorganismos
patógenos urinarios aunque, debido a la ausencia de electrolitos, impide la
indebida proliferación de especies de Proteus. El agar es semitransparente y por
acción de azul de bromofenol, las colonias de bacterias fermentadoras de lactosa
producen colonias amarillas; y las no fermentadoras de lactosa dan colonias
azules.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Agar CLED con colonias fermentadoras y no fermentadoras de Lactosa.

Crédito: Microrao

Agar Müller-Hinton
Es un medio nutritivo, no selectivo con infusión/extracto de carne, triptona y
almidón. Permite el crecimiento de una gran mayoría de microorganismos. Se
utiliza para hacer pruebas con antimicrobianos y antibióticos. Al no tener una
concentración muy elevada de agar, permite la difusión de los antimicrobianos con
facilidad.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Placa de Müeller-Hinton con parches con antibióticos. Fuente: Public Domain Files

Tryptic Soy Agar and Broth (TSA/TSB)

Es un medio rico y multiuso producida por la digestión enzimática de soja y
caseína. Es la base de otros tipos de agar, como el agar sangre que está hecho
de TSA enriquecido con sangre. Se puede utilizar en placa de Petri (sólido) o
como caldo (líquido). Su función es variada: ya sea para observar morfología de
colonias, tener un cultivo puro o como medio de enriquecimiento para obtener más
cantidad.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]
Caldo / Agar papa dextrosa (PDA)
Es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras. Se puede añadir
antibióticos para asegurarse que no crezcan bacterias. Principalmente se utiliza
para hacer recuento de colonias, además la forma de la colonia variará según el
hongo que sea.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Colonias de Aspergillus alabamensis en PDA. Crédito: Medmyco

Agar inclinado Lowenstein-Jensen
Es un medio de enriquecimiento para micobacterias. Se utiliza en tubo inclinado. A
diferencia de otros medios que utilizan agar como base, en este caso la base es a
partir de huevo y patata permitiendo una larga durabilidad. El colorante verde de
malaquita inhibe el crecimiento de Gram positivos y algunos Gram negativos y
dando el color verde pálido típico. Puede añadirse glicerina que estimula el
crecimiento de Mycobacterium tuberculosis pero inhibe a M. bovis. La colonia de la
bacteria de la tuberculosis es de color crema o amarillenta, y a la vista de textura
rugosa o cremosa.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]
Agar-Hierro-Triple-Azucar (Triple Sugar Iron en inglés o TSI)
Es un medio de cultivo nutritivo y diferencial para Gramnegativos. Se usa en tubos
de ensayo con agar inclinado. La diferenciación se basa en si son capaces de
fermentar (o no) la glucosa, la lactosa y/o la sacarosa, además de si producen (o
no) gas y ácido sulfhídrico siendo los resultados lo siguientes (FOTO):
Si fermenta glucosa, se acidificará el medio por la parte del fondo y se volverá
amarillo, sinó seguirá rojo
Si fermenta lactosa y/o sacarosa se volverá amarillo la superfície del medio
Si produce ácido sulfhídrico el medio se volverá negro. Esto también implica que la
bacteria es capaz de fermentar glucosa
Si aparecen roturas del medio es que el microorganismo es productora de gas.
[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Ejemplos de tubos con TSI. Fuente: Wikipedia

Agar bilis esculina (BEA)

Medio de cultivo selectivo y diferencial para determinar si hay microorganismos
capaces de crecer en un medio con bilis. Se usa principalmente para diferenciar
entre Enterococcus y Streptococcus. Si son capaces de degradar la esculina del
medio volverán el medio de color negro debido a la interacción entre los
subproductos y el citrato férrico del medio. [ CITATION Cri11 \l 2058 ]

BEA con colonias de Enterococcus. Fuente: Wikimedia Commons

Agar tiosulfato citrato bilis sacarosa (agar TCBS)

Medio diferencial y selectivo para ailsar y cultivar Vibrio cholerae. Contiene
sacarosa y axul de timol y bromotimol como indicadores. El medio tiene color
verde-azulado y las colonias son de color amarillo si son capaces de fermentar la
sacarosa (como V. cholerae) o verdes si no son capaces.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Agar TCBS con colonias amarillas de V. cholerae. Crédito: Rafa Solana

Agar Regan Lowe
Medio selectivo para Bordetella spp y concretamente B. pertussis. Es selectivo por
la presencia de los antibioticos cefalexina y cefalosporina que inhibe la microbiota
de muestras nasofaríngeas. El medio es de color negro y las colonias
de Bordetella spp suelen ser pequeñas, grisáceas, con un brillante de color perla y
convexas. Existen variantes de este medio en semisólido y de transporte. [ CITATION
Cri11 \l 2058 ]

Agar Regan Lowe con colonias de Bordetella spp. Fuente Wikimedia Commons

Agar Cetrimida
Medio de cultivo selectivo para Pseudomonas aeruginosa. La cetrimida es el
elemento selectivo ya que inhibe el crecimiento de bacterias diferentes a P.
aeruginosa. además, el cloruro de magnesio y el sulfato de potasio estimulan la
producción de pigmentos de esta bacteria: piocianina (azul-verdoso), pioverdina
(verde), piorrubina (rojizo), piomelanina (marrón) y fluoresceína. Las colonias que
se forman son redondas, lisas, con bordes regulares y del color de los pigmentos
(normalmente azul-verdoso). Estas colonias pueden brillar si son expuestas a luz
ultravioleta.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Ejemplo de fluorescencia de P. aeruginosa en luz UV. Fuente: Wikimedia

Commons

Agar Cefsulodina-Irgasan-Novobiocina (agar CIN)

Medio selectivo y diferencial para aislar Yersinia enterocolítica. Se inhibe el
crecimiento de bacterias del genero Escherichia y Staphylococcus. Las colonias
crecen con un color rojo oscuro y con un borde transparente (gracias al manitol y
al rojo neutro que actúan como indicador).[ CITATION Cri11 \l 2058 ]
Agar sulfito de bismuto (agar BSA)
Medio selectivo y diferencial para conseguir aislar Salmonella enterica serotipo
Tiphi. Gracias al sulfito de bismuto y al verde brillante se inhibe el crecimiento de
bacteria Gram positivas y de algunas Gram negativas. Además, es diferencial
gracias a la presencia del sulfato ferroso que interacciona con el H 2S que
producen algunas bacterias formando un precipitado negro insoluble. Las colonias
de S. enterica Tiphi tiene un centro negro con un halo brillante verde a las 24h y se
vuelven totalmente negras a las 48h.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Agar BSA con colonias de S. enterica Tiphi. Fuente Microbitos Blog

Agar rosa de Bengala

Medio selectivo para el crecimiento de hongos y levaduras en el ambiente (suelo,
alimentos, aire). El cloranfenicol sirve como un agente selectivo, inhibiendo el
crecimiento bacteriano. El rosa de bengala es un agente selectivo que inhibe el
crecimiento de bacterias y limita el tamaño y la altura de los hongos con
crecimiento rápido, lo que permite el desarrollo y la detección de otras levaduras
de crecimiento más lento. Algunos hongos van a formar colonias rosadas.
[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Agar Carbón Cefoperazona Deoxicolato (agar CCDA)

Actualmente se usa una variante de este medio de cultivo llamado: “Agar
Campylobacter Exento de Sangre“. Se trata de un medio selectivo ya que contiene
sulfato ferroso, piruvato de sodio y carbón que promueven el crecimiento de
especies de Campylobacter spp. Además tiene algunos antibióticos y antifúngicos
para evitar el crecimiento de otros microorganismos.
Las colonias de Campylobacter spp. son planas, redondas, grisáceas y a veces
con un brillo metálico.[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

Izquierda: Placa con agar CCDA sin cultivo. Derecha: Placa agar CCDA con
colonias de Campylobacter jejuni. Fuente: VetBact
Agar Manitol-Yema de huevo-Polimixina (agar MYP)
Agar selectivo y diferencial para aislamiento y recuento de Bacillus cereus.
La polimixina inhibe a microorganismos Gram negativos y además, B. cereus tiene
una cierta tolerancia a este compuesto. Este medio de cultivo es diferencial
gracias al manitol ya que B. cereus es manitol-negativo (medio rojo-rosa) y se
puede diferencia de microrganismos manitol-positivos (medio color amarillo). Otro
compuesto diferencial es la yema de huevo: B. cereus produce lecitinasas que
degradaran la lecitina del huevo formando un precipitado blanco alrededor de las
colonias, en cambio, Bacillus subtilis no produce este halo de precipitación.
[ CITATION Cri11 \l 2058 ]

2. ¿Según su experiencia qué precauciones debe tener para obtener una

superficie lisa en el agar?
Tener en cuenta el buen uso de los materiales y las condiciones en las que estos
se encuentran para asi obtener una superficie lisa y poder observar mejor el
aspecto de las colonias, observar mejor las bacterias, observas mejor la cantidad
de colonias.
3. ¿Por qué no debe ser demasiado húmeda la superficie del
agar?.Consulta los aportes de Koch a los medios de cultivo
Una superficie demasiado húmeda puede alterar las moléculas del agar, además
de afectar las colonias del agar y sus medios de cultivo.
Koch aportó a los medios de cultivo, medios de cultivos sólidos, un avance
importante para la separación de bacterias de forma que era posible obtener un
cultivo puro de cada tipo microbiano de una muestra, además era possible realizar
el conteo y observer mejor las características de los microorganismos. [ CITATION
Jua18 \l 2058 ]

4. ¿Por qué al destapar el tubo de cultivo no deja el tapón sobre la mesa de

trabajo?

Para el estudio de los microorganismos es indispensable contar entre otras cosas

con material y medios de cultivo estériles. En Microbiología la esterilización se
define como “el proceso mediante el cual se eliminan todos los microorganismos.
La siembra en medios contenidos en tubos requiere mayor cuidado ya que un solo
organismo contaminante de aire puede superar en crecimiento el organismo
patógeno. Los tapones de los tubos deben mantenerse en la mano derecha
sostenidos entre el meñique y el anular y el dedo del corazón. Nunca deben
colocarse sobre la mesa de trabajo o algún otro lugar. Esto se debe a que el tapón
pueda contaminarse y pueda ocasionar errores en el cultivo o fallas en la
muestra. En otros casos no se deja el tapón, ya que la superficie de la mesa debe
de estar desinfectada y esterilizada, y el tapón por ende pueda estar contaminado
o con restos del cultivo y pueda dañar el campo estéril de la superficie de la mesa.
[ CITATION Car14 \l 9226 ].

5. ¿Para qué debe flamear la boca del tubo de cultivo antes de taparlo?
Consulta los aportes de Robert Lister.
Los tubos de ensayo y otros buques que contienen muestras biológicas sensibles
se deben flamear alrededor del casquillo y del cuello como se abren, para prevenir
los contaminantes que entran en el tubo. Los anillos, también conocidos como
rizos de la inoculación o de la mancha, se utilizan con frecuencia en microbiología
con el propósito de transferencia y de la cultura de microorganismos. Son
esterilizados flameando sobre un quemador de Bunsen, siendo calentado a brillar
intensamente rojos, para asegurarse de que todos los microorganismos presentes
en el rizo están destruidos. [CITATION Mic26 \l 9226 ]. Joseph Liste nació el 5 de abril
de 1827 en medio de una familia adinerada de la comunidad del condado de
Essex, Gran Bretaña. Lister, creador de la medicina preventiva y antiséptica,
revolucionó la práctica quirúrgica. Hizo de esta una especialidad mucho más
segura. Por otra parte, elevó la práctica quirúrgica —aun sin proponérselo— al
justo escenario de rigor y exigencia que le corresponde como disciplina de enorme
responsabilidad. En suma, Lister sentó un precedente histórico para su ocupación
al hacer ver que la antisepsia era imprescindible a la hora de atender pacientes
que requirieran cirugías. De este modo, las deplorables condiciones de
insalubridad cambiaron y se fundó lo que hoy se denomina en medicina moderna
o alopatía como asepsia. [ CITATION Ira17 \l 9226 ].
 6. Qué precauciones debe tomar al destapar la caja de petri. ¿Por qué?

La placa o caja de Petri es un instrumento de laboratorio que consta de una base

circular y sus paredes son de una altura baja, aproximadamente de 1 cm. Posee
una cubierta de la misma forma pero algo más grande de diámetro, para que se
pueda colocar encima y cerrar el recipiente, aunque no de forma hermética, para
proteger el cultivo de agentes externos que lo podrían contaminar. Este
instrumento es de cristal o plástico transparente, lo que permite observar el
crecimiento de los cultivos. Las cápsulas de plástico se desechan una vez que se
han utilizado. Las de vidrio, por su parte, se pueden reutilizar después de haber
sido descontaminadas y esterilizadas. Las precauciones más importantes es la
aplicación de la técnica aséptica antes de la utilización de la placa, ya que
después de abrir se podrá presentar contaminación del medio externo al interno.
Después de realizar la siempre o cultivo no abrir la caja de Petri totalmente
preferiblemente a menos de 45°. Del mismo modo que los elementos que entren
en contacto con esta debe de estar esterilizados en cual se busca reducir la
diseminación de microrganismo. Al abrir Se debe manipular usando
la indumentaria necesaria, siendo necesario evitar el contacto directo con la
misma, ya que podría contaminar la muestra, y a ti mismo. Es por ello que
usar guantes de laboratorio es primordial. [ CITATION Rid14 \l 9226 ].

7. ¿Cuál cree que sea el objeto de esterilizar el asa bacteriológica en los pasos 6,
8 y 9?
El asa de siembra o asa bacteriológica es probablemente la herramienta más usada por el
microbiólogo, debido a que esta herramienta es tan utilizada para la siembra de cultivo, y
el control de los microorganismo en microbiología, es de súbita importancia que esto
estén esterilizados cuando se van a utilizar en diferentes cultivos, lo que quiere decir que
cada vez que se utilizado este debe para por el proceso de esterilización, sometiéndolo a
un mechero, donde este le proporcionara una alta temperatura, la cual eliminara las
bacterias restantes en el asa. Esto con el objetivo de evitar la contaminación entre un
cultivo y otro, lo que causaría un daño entre los cultivos, lo que causaría una pérdida de
investigación. Además de que sería demasiado peligroso la mezcla de microbios, por ello,
existe la posibilidad de que nazca una nueva bacteria que sea perjudicial a los seres
vivos, y ponga en riesgo la vida que se conoce.

8. ¿Por qué no puede destapar los dos tubos al tiempo?

Los tubos de cultivo de siembra no se pueden destapar al tiempo debido a que al ser
destapados estos van a entrar en contacto con el medio en el que se encuentran, por ello
van a entrar a compartir el mismos espacio, lo que llevaría a que existe una probabilidad
muy alta a que estos cultivos se contaminen el uno con el otro, siendo peligroso.
 9. ¿Qué ventajas tiene el cultivo en frasco bacteriológico?

 Permite el aislamiento de bacterias desde una muestra o material patógeno o de

un alimento.
 Brinda la posibilidad de la clasificación y tipificación de bacterias por estudio de
sus propiedades bioquímicas en medios diferenciales.
 Realizamos procedimientos con sensidiscos que ayudan al análisis de sensibilidad
antimicrobiana.
 Nos aseguramos de utilizar placas de Agar cromogénico para la identificación y
diferenciación de uropatógenos y otros microorganismos a partir de otras muestras
diferentes a orina.
 Manejamos diferentes placas de agares para microbiología, estos permiten el
mejor desarrollo y crecimiento de microorganismos, según sus necesidades.

[ CITATION MDM16 \l 2058 ]

Bibliografía
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Descubrimientos. Obtenido de https://www.lifeder.com/joseph-lister/
Borrego, J. (17 de 03 de 2018). jornades.uab.cat. Obtenido de jornades.uab.cat:
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Gamazo, C. (2014). Manual practico de Microbiologia. En C. Gamazo, Carlos
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Greenwod, M. (26 de 02 de 2016). Técnicas asépticas en microbiología. Obtenido
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