Вы находитесь на странице: 1из 9

НАУЧНЫЕ СООБЩЕНИЯ

Лука: проблемы региональной и глобальной экологии.


2020. – Т. 29. – № 1. – С. 88-96.
УДК 579.695+546.85+502.55+661.63 DOI 10.24411/2073-1035-2020-10304

ИССЛЕДОВАНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ДЕГРАДАЦИИ


ЭЛЕМЕНТНОГО ФОСФОРА
© 2020 А.З. Миндубаев1, Э.В. Бабынин2, А.Д. Волошина1,
К.А. Сапармырадов2, Е.К. Бадеева1, С.Т. Минзанова1,
Л.Г. Миронова1, Х.Р. Хаяров2
1
Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова
Казанского научного центра РАН, г. Казань (Россия)
2
Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань (Россия)
Поступила 12.12.2019
Впервые наблюдался рост микроорганизмов различных таксономических групп (грибов, стреп-
томицетов и бактерий) в культуральных средах, содержащих в качестве источника фосфора
элементный (белый и красный) фосфор. Это первый известный пример включения элементного
фосфора в биосферный круговорот фосфора. Самая высокая концентрация, применённая в
данном исследовании, соответствует превышению ПДК белого фосфора в сточных водах в
5000 раз, а в питьевой воде – в 100000000 раз! Впервые проведена селекция на рост устойчиво-
сти культур. Мы идентифицировали микроорганизмы, растущие на белом фосфоре, как новые
штаммы Aspergillus niger и Streptomyces sampsonii, которым были присвоены номера A. niger
АМ1 и S. sampsonii А8. Показано, что штаммы грибов Aspergillus niger адаптируются к токси-
канту лучше, чем бактерии.
Ключевые слова: биодеградация, белый фосфор, красный фосфор, защита окружающей среды,
химическое загрязнение, Aspergillus niger, Streptomyces sampsonii.

Mindubaev A.Z., Babynin E.V., Voloshina A.D., Saparmyradov K.A., Badeeva E.K., Minzanova
S.T., Mironova L.G., Khayarov Kh.R. Investigating the biological degradation of elemental
phosphorus. – The growth of microorganisms of various taxonomic groups (fungi, streptomyces and
bacteria) was observed for the first time in culture media containing elemental (white and red) phos-
phorus as the source of phosphorus. This is the first known example of the incorporation of elemental
phosphorus into the biospheric circulation of the phosphorus. The highest concentration applied in this
study exceeds the Threshold Limit Value (TLV) of white phosphorus in wastewater by 5000 times,
and in drinking water by up to 100000000 times! The growth selection of cultures resistant was car-
ried out for the first time. We identified the microorganisms, growing on white phosphorus, as new
strains of Aspergillus niger and Streptomyces sampsonii. The number A. niger AM1 and S. sampsonii
A8 were assigned to them, respectively. Strains of the A. niger isolates were shown to better adapt to
toxicant than the bacteria.
Keywords: biodegradation, white phosphorus, red phosphorus, environmental protection, chemical
pollution, Aspergillus niger, Streptomyces sampsonii.

лого фосфора в 2004 году составляла 5,7%, а


ВВЕДЕНИЕ
Казахстана 8,1% (Китая 71,1%, США 8,6%, За-
Белый фосфор Р 4 широко применяется в падной Европы 5,8%, Индии 0,7%). Поэтому
промышленности и является ключевым соеди- существует возможность проникновения бело-
нением при производстве лекарств, фосфорных го фосфора в окружающую среду. Белый фос-
удобрений, полимеров, красного фосфора и ря- фор – это один из самых опасных загрязните-
да других важнейших веществ и материалов. лей окружающей среды [10]. Смертельная доза
По материалам обзорной статьи (Gleason, для взрослого человека составляет всего 0,05-
2007), доля России в мировом потреблении бе- 0,1 г: в позапрошлом столетии белый фосфор
88
применялся в качестве пестицида, а также ис- го тушения. В силу ряда сложностей обраще-
пользовался самоубийцами. ния с белым фосфором, вопрос об утилизации
Горючесть и высочайшая токсичность бело- таких боеприпасов до пожара в Удмуртии даже
го фосфора опосредовали его применение в во- не рассматривался [4].
енных целях, в качестве зажигательного оружия Протокол III к «Конвенции о конкретных
(рис. 1, вверху слева). Еще в XIX веке ирланд- видах обычного оружия» 1980 г. официально
ские сепаратисты готовили на основе белого запрещает использование Р 4 в военных целях.
фосфора зажигательные смеси («огонь фениев»). Однако запрет постоянно нарушается, что вле-
В Первую мировую войну фосфором начиня- чёт за собой человеческие жертвы и сильное
лись пули, которыми расстреливали вражеские загрязнение окружающей среды. Эффективные
дирижабли. А в 1916 году на вооружение бри- методы очистки природных сред от этого за-
танских войск были приняты фосфорные грана- грязнителя до сих пор не созданы [10, 11]. В
ты. Во Вторую мировую войну широко приме- течение одного 2012 года на территории обанк-
нялись фосфорные авиабомбы. Позже фосфор- ротившегося ОАО «Фосфор» (Тольятти, Са-
ные боеприпасы применялись израильской ар- марская область) зафиксировано 36 случаев
мией в Ливанских войнах; Вьетнамской Народ- возгорания содержащего белый фосфор шлама!
ной армией против Красных кхмеров; босний- Проблема не решена до сих пор. Вообще, сле-
скими сербами в Сараево; Соединенными Шта- дует особо обратить внимание на тот факт, что
тами в Никарагуа, Басре, Фаллудже, Секторе на территории Российской Федерации все за-
Газа; армией Украины в ДНР и ЛНР [9]. грязнения белым фосфором находятся в бас-
К сожалению, варварское применение бело- сейне Волги (Дзержинск, Новочебоксарск, То-
го фосфора в военных целях продолжается. льятти, Волгоград) и представляют угрозу для
Так, осенью 2016 года боевики ИГИЛ приме- великой русской реки и проживающего по ее
нили в г. Алеппо (Сирия) боеприпасы, содер- берегам населения.
жащие белый фосфор, хлор и иприт – отравля- Красный фосфор значительно менее опасен
ющие вещества, запрещенные в качестве бое- для окружающей среды, по сравнению с белым,
вых. В настоящее время в арсеналах Россий- но для этой аллотропной модификации элемен-
ской Федерации хранится более миллиона та также не известны примеры утилизации жи-
устаревших боеприпасов, снаряженных белым выми организмами.
фосфором, включающих ручные гранаты и В то же время, фосфор обладает уникальным
снаряды калибра 82-240 мм. Большинство из качеством – будучи в виде простого вещества
них представляет угрозу для окружающей сре- сильнейшим ядом, в окисленном состоянии это
ды и населения. Это продемонстрировал, биогенный элемент, абсолютно необходимый
например, пожар на складе боеприпасов вблизи всем живым организмам (рис. 1, вверху спра-
удмуртского поселка Пугачево (35 км от Ижев- ва). Задача состоит в том, чтобы найти эффек-
ска, 10 км от татарстанского Агрыза) в июне тивный и экологически безвредный способ
2011 г. Из-за наличия на нем белого фосфора, окисления элементного (в первую очередь, бе-
пожар неожиданно возобновлялся после полно- лого) фосфора до фосфата. Мы предлагаем ис-
пользовать для этой цели микроорганизмы.
Биодеградация является одним из наиболее
Миндубаев Антон Зуфарович, старший научный значимых и часто применяемых на практике
сотрудник, кандидат химических наук, доцент, методов обезвреживания промышленных сто-
mindubaev@iopc.ru; mindubaev-az@yandex.ru; Бабы- ков [19].
нин Эдуард Викторович, кандидат биологических На рис. 1, внизу, продемонстрирована пока-
наук, доцент, edward.b67@mail.ru; Волошина Алек- зательная схема усвоения сразу нескольких
сандра Дмитриевна, кандидат биологических наук,
токсичных веществ в едином метаболическом
старший научный сотрудник, заведующий лабора-
торией микробиологии, microbi@iopc.ru; Сапармы- пути, демонстрирующая совершенство биохи-
радов Керемли Ашырмухаммедович, аспирант ка- мии микроорганизмов, изображенная на основе
федры биохимии, xkesha93x@mail.ru; Бадеева Елена литературных источников [12, 14, 17, 18, 20].
Казимировна, научный сотрудник, кандидат хими- Включение сразу двух токсичных ксенобиоти-
ческих наук; ybadeev.61@mail.ru; Минзанова Сали- ков (формальдегид и синильная кислота) в со-
ма Тахиятулловна, старший научный сотрудник, став сахаров и аминокислот, является, пожалуй,
кандидат технических наук, доцент, наиболее показательным примером биодегра-
minzanova@iopc.ru; Миронова Любовь Геннадьевна, дации.
инженер-исследователь, mironoval1963@gmail.com;
Хаяров Хасан Рафаэлевич, инженер
khayarov.kh@gmail.com

89
Метан СН О2 Кислород L-Аспарагиновая кислота
4

СН3ОН Метанол

NH3
Н2О Вода Аммиак
СН2=О Формальдегид

D-Рибулоза

L-Серин
β-Циано-L-Аланин L-Аспарагин

D-Фруктоза

Синильная кислота
Глицин

Рис. 1. Многоликость фосфора


Слева вверху: взрывы фосфорных боеприпасов (изображение с сайта http://hasshe.com). Справа
вверху: предельно окисленная форма фосфора – фосфат – является подкормкой для растений и
играет важнейшую роль в существовании абсолютно всех форм жизни. Изображение с сайта
https://tass.ru/moskva Внизу: включение формальдегида и цианида в состав сахаров и аминокислот
– убедительный пример биодеградации. Синтез метанола из метана, который сам является продук-
том микробного метаболизма [11] осуществляется метанотрофными бактериями, серина и фрукто-
зы из формальдегида – некоторыми метилотрофными бактериями и дрожжами, β-циано-L-аланина
из синильной кислоты и серина – некоторыми бактериями, аспарагина из цианоаланина – рядом
растений. Рисунок А.З. Миндубаева.

Это является весомым фундаментальным аргу- Цель настоящей работы – сравнить устойчи-
ментом в пользу возможности биодеградации вость и способность к биодеградации белого
даже такого опасного ксенобиотика, как белый фосфора у микроорганизмов различных штам-
фосфор. мов и таксономических групп. А также найти
Данная публикация является продолжением для них минимальные ингибирующие концен-
цикла работ нашего коллектива [5-8], которые трации (МИК) этого вещества. Кроме того, в
показали, что микроорганизмы выживают при рамках исследования впервые наблюдался рост
контакте с таким губительным для всех форм микроорганизма в среде, содержащей красный
жизни веществом, как белый фосфор, адапти- фосфор в качестве единственного источника
руются к его присутствию в окружающей среде фосфора.
и перерабатывают его в менее опасные соеди-
нения.

90
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ производили в данную среду, с содержанием
белого фосфора в концентрации 0,01 и 0,05%
Нами впервые произведён посев устойчивой
по массе. В положительный контроль вносился
микробиоты в искусственную питательную
фосфат. В отрицательный контроль источники
среду, содержащую в качестве единственного
фосфора не вносились. Через 60 дней биомассу
источника фосфора белый фосфор в концен-
грибов пересевали в концентрации белого фос-
трациях от 0,01 до 1%, где и наблюдался рост.
фора 0,05; 0,1 и 0,2%. После следующих 60
Посев производился в модифицированную сре-
дней штаммы пересевали в более высокие кон-
ду Придхем-Готлиба. Классическая среда При-
центрации Р 4 0,5; и 1%. Аналогично был произ-
дхем-Готлиба не содержит моносахариды в ка-
веден посев Streptomyces sp. A8, выделенный из
честве источников углерода, а в качестве тако-
осадка сточных вод после добавления в него
вых выступают нефтепродукты. Наша модифи-
белого фосфора. Концентрации белого фосфора
кация включает глюкозу в качестве источника
0,05; 0,1 и 0,2% по массе использовали для
углерода. Состав модифицированной среды (в
культуры грибов и стрептомицетов, но не бак-
перерасчете на 1 л): глюкоза – 5 г, (NH 4 ) 2 SO 4 –
терий, поскольку последние не переносят вы-
2,64 г, MgSO 4 – 0,49 г, CuSO 4 ·5H 2 O – 0,1 г,
сокие концентрации данного вещества.
FeSO 4 ·7H 2 O – 0,02 г, MnCl 2 ·4H 2 O – 0,15 г,
Посев A. niger АМ1 и S. sp. A8 осуществляли
ZnSO 4 ·7H 2 O – 0,27 г, и белый фосфор в раз-
в виде спор, бактерии в виде вегетативных кле-
личных концентрациях, либо красный фосфор.
ток. Взвесь спор содержала 108 грибковых тел в
В контрольную среду в качестве источника
мл, вносилась по 0,2 мл на 20 мл среды. Куль-
фосфора вносили K 2 HPO 4 ·3H 2 O – 7,4 г,
туры выращивали в колбах в 20 мл питательной
KH 2 PO 4 – 2,38 г . Полужидкая модификация
среды без перемешивания и чашках Петри.
среды достигалась после внесения агара – 4-8 г.
Культивирование производилось в термостате,
Белый фосфор эмульгировали в стерилизован-
при 25°С.
ной автоклавированием дистиллированной во-
Для генетического анализа образцы ДНК из
де. Концентрация белого фосфора до культиви-
культуры гриба A. niger АМ1 и стрептомицета
рования рассчитывалась следующим образом.
S. sp. A8 выделялись по методике, описанной в
Готовилась эмульсия из 1 г белого фосфора в
[15]. Далее проводилась полимеразная цепная
50 мл воды, её расчётная концентрация состав-
реакция (ПЦР) полученных фрагментов ДНК.
ляла 2%. После культивирования концентрация
Для сравнения устойчивости к белому фос-
не замерялась, однако рост микроорганизма
фору штаммов чёрного аспергилла, применялся
сам указывает на её снижение: для роста нужен
наш штамм Aspergillus niger АМ1, а также три
фосфат, а он мог образоваться только из белого
штамма из Всероссийской коллекции микроор-
фосфора. Красный фосфор вносился в среды в
ганизмов при ИБФМ им. Г.К. Скрябина (табл.
виде порошка.
1).
Посев Aspergillus niger АМ1, споры которо-
го были внесены вместе с белым фосфором,
Таблица 1
Штаммы Aspergillus niger из Всероссийской коллекции микроорганизмов,
с которыми велась работа
Вид Штамм Субстрат выделения Место выделения
Многолетнемерзлые отложения,
Aspergillus niger ВКМ FW-650 возраст - 170 лет, глубина 20.50- Таглу, Канада
20.55 м

Пепел вулканический мерзлый, Полуостров Камчатка,


Aspergillus niger ВКМ FW-2664
глубина 1.8-1.85 м Россия

Мерзлота, пепел вулканический, Полуостров Камчатка,


Aspergillus niger ВКМ FW-2731
глубина 14.5 м Россия

Культуры высевались в планшеты Corning, Максимальная концентрация белого фосфора


скорость роста оценивалась микропланшетным достигала 1%. Использование планшетов и
ридером Infinite F200 Pro, Tecan (Австрия) по планшетного ридера позволило нам произво-
интенсивности поглощения света λ 550 нм. дить параллельные посевы разных штаммов и

91
сравнивать скорость их роста в средах с раз- щения можно было объяснить химической ре-
личными концентрациями белого фосфора. акцией. Мы впервые провели дальнейшую мо-
Для сравнения высевались культуры бакте- дификацию среды Придхем-Готлиба, исключив
рий Achromobacter xylosoxidans, Pseudomonas из ее состава не только источник фосфора фос-
aeruginosa, Bacillus firmus и Salmonella фат, но и сульфат меди. Только исключив из
typhimurium. Целью данных исследований яв- состава CuSO 4 , и наблюдая, тем не менее, рост
лялось обнаружение минимальной ингибиру- микроорганизмов, мы можем получить более
ющей концентрации (МИК) белого фосфора обоснованные доводы в пользу биодеградации
для перечисленных микроорганизмов. белого фосфора.
Для установления природы устойчивости Посев производился в модифицированную
аспергилла к Р 4 произведен пересев в среду с среду Придхем-Готлиба (ПГ). В модификацию
фосфатом в качестве источника фосфора, без среды без двухвалентной меди не вносили ком-
Р 4 . Подросшую в этой среде культуру снова понент CuSO 4 ·5H 2 O.
пересеяли в среду с 0,2% белого фосфора. В Статистическую обработку данных прово-
качестве контроля посеяли также A. niger АМ1, дили в программе Excel.
до этого росший в среде с белым фосфором.
ХОД ИССЛЕДОВАНИЯ
С целью наблюдения за переработкой P 4 был
И РЕЗУЛЬТАТЫ
использован ЯМР спектрометр высокого разреше-
ния Avance 400 (Bruker). Для съёмки спектра В отрицательном контроле без источников
среды отбирались при помощи инсулиновых фосфора выросли немногочисленные колонии
шприцев. Опытную среду очищали от гифов Aspergillus niger АМ1. Они занимают сравни-
гриба при помощи фильтра Millex®-HV тельно большую площадь, очень медленно рас-
(Syringe-driven Filter Unit), надеваемого на тут (с неразвитым мицелием и слабым споро-
шприц. Диаметр фильтра 33 мм, диаметр пор ношением). По всей видимости, сказалась не-
0,45 мкм. Параметры съёмки спектров: Bruker хватка фосфора. Любопытно, что в опыте - сре-
Avance III 400 МГц 31P{1H} – (161,9 МГц, 25 де с 0,05% белого фосфора - колоний выросло
ºC). меньше (33 колонии), чем в положительном
Поскольку белый фосфор при комнатной контроле (49 колоний), однако они нормально
температуре активно реагирует с ионами двух- растут и спороносят, не испытывают дефицит
валентной меди, до последнего времени не был фосфора (табл. 2).
подтвержден факт его биодеградации: превра-
Таблица 2
Рост грибов A. niger в средах с различными источниками фосфора
через шесть суток после пересева.
Источник фосфора Количество колоний A. niger Внешний вид колоний
K 2 HPO 4 ·3H 2 O – 7.4 г, KH 2 PO 4 – 49 Мелкие спорообразующие
2.38 г
Р 4 0.05% масс 11 Крупные спорообразующие
Нет 33 Крупные, спорообразование
снижено

Отсюда следует вывод, что в среде с белым фосфора в водных объектах хозяйственно-
фосфором выживают не все споры гриба, но питьевого и культурно-бытового водопользо-
выжившие обладают способностью использо- вания составляет всего 0,0001 мг/л, т.е. концен-
вать в качестве источника фосфора либо сам Р 4 , трация 1% превышает её уже в сто миллионов
либо продукты его химических превращений. (1·108) раз [1]. В средах с более низким содер-
Следующие пересевы был произведен в среды с жанием Р 4 рост грибов более интенсивный –
более высокими концентрациями белого фос- это определялось визуально. Стрептомицет по-
фора, 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1% Р 4 , с целью адап- сле четвертого пересева тоже стал расти при
тации гриба к ним. Результаты позволяют за- концентрации Р 4 1%, т.е. выработал устойчи-
ключить, что чёрный аспергилл переносит при- вость даже быстрее и эффективнее, чем гриб.
сутствие белого фосфора в среде даже в кон- Для генетической идентификации гриба, по
центрации 1%. Самая высокая исследованная морфологическим признакам отнесённого к
нами концентрация белого фосфора 1% соот- виду A. niger, была определена нуклеотидная
ветствует превышению ПДК белого фосфора в последовательность его регионов ITS1 и ITS2.
сточных водах в 5000 раз! А ПДК элементного Сравнение полученной последовательности с

92
последовательностями базы данных GenBank с приспособленность к существованию в данной
помощью системы BLAST позволило иденти- среде выше, чем у предковой культуры. Мы
фицировать данный микроорганизм, как новый дали этому штамму название A. niger АМ2.
штамм Aspergillus niger. Ему мы присвоили но- Метод ЯМР показал устойчивость культуры
мер A. niger АМ1 [7]. АМ1 к продуктам неполного окисления Р 4 . Сам
Для штамма А8 сходство по нуклеотидным факт возникновения устойчивости к этой груп-
последовательностям 16S рДНК (амплифика- пе веществ очень интересен (фосфиты и гипо-
ция праймерами fD1 и rP2) сравниваемых фосфиты являются антимикробными агентами
фрагментов стрептомицетов, выбранных из ба- [16], однако ожидаемый результат – полное ме-
зы данных NCBI, тестируемых изолятов, со- таболическое превращение белого фосфора в
ставляло 94,0–99,7% [13]. В частности, фосфат – еще предстоит подтвердить.
наибольшее сходство (99,74%) было установ- Оказалось, что все четыре штамма A. niger
лено между изолятом А8 и Streptomyces FW-650, FW-2664 и FW-2731 и АМ1
sampsonii. К данному виду и предложено отно- выдерживают концентрацию белого фосфора
сить наш штамм. 1%. МИК для них так и не была найдена.
Очень интересно спонтанное появление в Поскольку все исследованные штаммы
среде с белым фосфором культуры Aspergillus представляют собой случайную выборку из
niger АМ1 с изменённой морфологией и окрас- общего разнообразия A. niger, можно
кой, быстрее растущей в среде с исследуемым предполагать, что высокая устойчивость к
ксенобиотиком. В одном повторе посева коло- белому фосфору – признак, характеризующий
ния стала развиваться быстрее, чем в других, все чёрные аспергиллы, или большинство из
хотя условия были совершенно идентичны. Че- них. Тем не менее, при концентрациях 0,5 и
рез 55 суток после посева лидирующая культу- 0,25% штамм АМ1 рос быстрее, т.е. оказался
ра стала вырабатывать пигмент и приобретать более устойчивым (рис. 2). Для бактерий МИК
более насыщенную жёлтую окраску. Окраси- была найдена и составила для A. xylosoxidans
лась не только колония, но и культуральная 0,125%, B. firmus 0,25%, P. aeruginosa и S.
среда, т.е. пигмент хорошо растворим в воде. А typhimurium 0,5%. Из этого следует вывод, что
судя по тому, что этот гриб эффективнее наби- чёрные аспергиллы более устойчивы к белому
рал биомассу в среде с белым фосфором, его фосфору по сравнению с бактериями.

Рис. 2. Рост штаммов A. niger в среде с белым фосфором без фосфата, на третьи сутки после посева.
Ось абсцисс – концентрация белого фосфора, %. Ось ординат – оптическое поглощение при λ 550
нм. Обращает внимание скорость роста штамма АМ1

Ожидалось, что после роста в благоприят- ресева на фосфате, продолжал расти в среде с
ных условиях – в среде с фосфатом – A. niger Р 4 [8]. Из этой картины можно сделать вывод,
АМ1 мог утратить устойчивость к белому фос- что резистентность к белому фосфору у иссле-
фору. В действительности, гриб, росший до пе- дуемого нами штамма чёрного аспергилла за-
93
креплена в геноме, и является наследуемым вестно, какую колоссальную роль играют соли
признаком, передающимся в ряду поколений переходных металлов в жизнедеятельности [2,
даже в отсутствие Р 4 . 3]. Но на практике выяснилось, что в культу-
Исключая из состава питательной среды ральной среде, не содержащей сульфат меди,
сульфат меди, мы опасались, что это сделает ее рост грибов не отличается от роста в контроле с
непригодной для роста микроорганизмов. Из- медью (рис. 3).

Рис. 3. Рост A. niger АМ1 на пятые сутки после посева. Видно, что рост в варианте среды с медью и без
меди практически одинаковый. Ось абсцисс – концентрация белого фосфора, %. Ось ординат –
оптическое поглощение при λ 550 нм

том в пользу того, что имеет место биодеграда-


ция белого фосфора, а не химическая нейтрали-
зация ионами меди.
Интересно, что красный фосфор оказался
практически лишенным токсичности для аспер-
гилла. При выращивании в полноценной (с
фосфатом) среде на чашке Петри, с нанесения-
ми красного фосфора в физиологическом рас-
творе, мицелий гриба растет буквально на
красном фосфоре. Зоны подавления роста во-
круг нанесенного вещества не образуются!
Отмечена стимуляция спорообразования
красным фосфором: конидиеносцы со спорами
Рис. 4. Рост A. niger АМ1 в присутствии красного появляются в первую очередь в местах сопри-
фосфора (на фотографии выглядит как пятна косновения мицелия с исследуемым веществом
пурпурного цвета). Зона подавления роста отсут- (рис. 4). Мы предполагаем, что красный фос-
ствует, и в местах соприкосновения мицелия с фор оказывает на культуру гриба легкое стрес-
красным фосфором образование спор началось сирующее действие, ускоряющее переход к
раньше. Снимок сделан через 4 суток после посе- размножению.
ва В среде без фосфата, с красным фосфором в
Следует отметить, что при внесении эмуль- качестве единственного источника фосфора,
сии белого фосфора в среду, не содержащую также наблюдается рост аспергилла. Красный
медь, не наблюдалось выпадение черного осад- фосфор практически нерастворим в водных
ка, отмеченное нами в более ранних работах. средах и в пробирках с культуральной средой
Значит, Р 4 не вступает в химическую реакцию оседает на дно. Но, по-видимому, происходит
и сохраняется в среде более длительное время. медленное окисление красного фосфора с обра-
Этот факт является дополнительным аргумен-
94
зованием фосфорной кислоты, возможно, уско- ность и цитогенетическое действие белого фосфора
ряемое метаболическими процессами гриба. // Известия вузов. Прикладная химия и биотехноло-
гия. 2019. Т. 9, № 1. С. 81-94.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ 6. Миндубаев А.З., Белостоцкий Д.Е., Минза-
Представленная работа впервые продемон- нова С.Т., Миронов В.Ф., Алимова Ф.К., Миро-
нова Л.Г., Коновалов А.И. Метаногенез: Биохи-
стрировала включение элементного фосфора в мия, Технология, Применение // Ученые записки
природный круговорот фосфора. Уникальность Казанского ун-та. Сер. Естеств. науки. 2010. Т. 152,
фосфора состоит в том, что этот элемент абсо- кн. 2. С. 178-191.
лютно необходим для жизнедеятельности всех 7. Миндубаев А.З., Волошина А.Д., Бабынин
форм жизни. Тем не менее, простое вещество Э.В., Бадеева Е.К., Хаяров Х.Р., Минзанова
белый фосфор – это яд первого класса опасно- С.Т., Яхваров Д.Г. Микробиологическая деграда-
сти, с большим трудом подвергающийся де- ция белого фосфора // Экология и промышленность
струкции в окружающей среде, и, вопреки России. 2018. Т. 22, № 1. С. 33-37.
официальному запрету, применяющийся в во- 8. Миндубаев А.З., Волошина А.Д., Бабынин
енных целях. До начала наших работ биодегра- Э.В., Валидов Ш.З., Сапармырадов К.А., Хаяров
Х.Р., Бадеева Е.К., Барсукова Т.А., Минзанова
дация белого и красного фосфора (как и других
С.Т., Миронова Л.Г., Акосах Й.А., Яхваров Д.Г.
его аллотропных модификаций) не была описа- Обезвреживание белого фосфора посредством мик-
на в литературе. робиологического разложения // Бутлеровские со-
Значение представленной работы как раз и общения. 2017. Т. 52, № 12. С. 87-118.
состоит в том, что она впервые показала воз- 9. Миндубаев А.З., Яхваров Д.Г. Фосфор: свой-
можность роста микроорганизмов из различ- ства и применение // Бутлеровские сообщения. 2014.
ных, далеких друг от друга таксономических Т. 39, № 7. С. 1-24.
групп, в культуральных средах, содержащих 10. Duerksen-Hughes P., Richter P., Ingerman L.,
элементный фосфор в качестве единственного Ruoff W., Thampi S., Donkin S. Toxicological profile
источника фосфора. Таким образом, было пока- for white phosphorus // U.S. Department of health and
human services. USA. 1997. 248 p.
зано окисление элементного фосфора до фос-
11. Gleason W. An Introduction to Phosphorus:
фата – безвредного компонента всех живых History, Production, and Application // JOM. 2007. V.
клеток – и дальнейшее включение в микробную 59, No. 6. P. 17-19. DOI: 10.1007/s11837-007-0071-y
биомассу. 12. Holloway-Phillips M. Photosynthetic Oxygen
Мы планируем, что полученные результаты Production: New Method Brings to Light Forgotten
станут основой для эффективного метода ре- Flux // Plant Physiology. 2018. V. 177, No.1. P. 7-9.
шения экологической проблемы, устранения DOI: https://doi.org/10.1104/pp.18.00344
загрязнений веществом первого класса опасно- 13. James T.Y., Kauff F., Schoch C.L., Matheny
сти, защиты здоровья населения и природных P.B., Hofstetter V., Cox C.J., Celio G., Gueidan C.,
экосистем Волжского бассейна. Fraker E., Miadlikowska J., Lumbsch H.T., Rauhut
A., Reeb V., Arnold A.E., Amtoft A., Stajich J.E.,
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Hosaka K., Sung G.-H., Johnson D., O’Rourke B.,
Crockett M., Binder M., Curtis J.M., Slot J.C.,
1. Алексеенко В.А., Бузмаков С.А., Панин Wang Z., Wilson A.W., Schübler A., Longcore J.E.,
М.С. Геохимия окружающей среды. Пермь: Изда- O’Donnell K., Mozley-Standridge S., Porter D.,
тельство Пермского государственного национально-
Letcher P.M., Powell M.J., Taylor J.W., White
го исследовательского университета. 2013. 359 с.
M.M., Griffith G.W., Davies D.R., Humber R.A.,
2. Бертини И., Грей Г., Стифель Э., Валентине
Morton J.B., Sugiyama J., Rossman A.Y., Rogers
Дж. Биологическая неорганическая химия: структу- J.D., Pfister D.H., Hewitt D., Hansen K., Hambleton
ра и реакционная способность. Т. 1. Пер. с англий- S., Shoemaker R.A., Kohlmeyer J., Volkmann-
ского. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2013. 456 Kohlmeyer B., Spotts R.A., Serdani M., Crous P.W.,
с.
Hughes K.W., Matsuura K., Langer E., Langer G.,
3. Бертини И., Грей Г., Стифель Э., Валентине
Untereiner W.A., Lücking R., Büdel B., Geiser D.M.,
Дж. Биологическая неорганическая химия: структу-
Aptroot A., Diederich P., Schmitt I., Schultz M.,
ра и реакционная способность. Т. 2. Пер. с англий- Yahr R., Hibbett D.S., Lutzoni F., McLaughlin D.J.,
ского. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2013. 623 Spatafora J.W., Vilgalys R. Reconstructing the early
с. evolution of Fungi using a six-gene phylogeny // Na-
4. Касаткин А.В., Ватутин Н.М., Колтунов ture. 2006. V. 443. P. 818-822.
В.В., Малинин С.Е. Особенности фосфоросодер- DOI: 10.1038/nature05110
жащих боеприпасов специального назначения и ме- 14. Maier T.H.P. Semisynthetic production of un-
тоды их утилизации // Вестник технологического natural L-α-aminoacids by metabolic engineering of the
университета. 2017. Т. 20, № 5. С. 39-43. cysteine biosynthetic pathway // Nature biotechnology.
5. Миндубаев А.З., Бабынин Э.В., Бадеева 2003. V. 21, No.4. P. 422-427. DOI:10.1038/nbt807
Е.К., Пискунов Д.Б., Махиянов А.Н., Минзанова 15. Sambrook J., Russell D.W. Molecular Cloning:
С.Т., Миронова Л.Г., Волошина А.Д. Генотоксич- A Laboratory Manual. V. 1, 2, 3. New York: Cold
95
Spring Harbour Laboratory Press, 2001. Veenhuis M. The significance of peroxisomes in meth-
16. Smillie R., Grant B.R., Guest D. The Mode of anol metabolism in methylotrophic yeast // Biochimica
Action of Phosphite: Evidence for Both Direct and Indi- et Biophysica Acta. 2006. V. 1763, No. 12. P. 1453-
rect Modes of Action on Three Phytophthora spp. in 1462. DOI: 10.1016/j.bbamcr.2006.07.016
Plants // Phytopatology. 1989. V. 79, No. 9. P. 921-926. 19. Wackett L.P. The Metabolic Pathways of Bio-
DOI: 10.1094/Phyto-79-921 degradation // The Prokaryotes. 2014. V. 2. P. 383-393.
17. Tinberg C.E., Lippard S.J. Oxidation reactions (https://doi.org/10.1007/978-3-642-31331-8_76)
performed by soluble methane monooxygenase hydrox- 20. Zidenga T., Siritunga D., Sayre R.T. Cyano-
ylase intermediates H peroxo and Q proceed by distinct gen Metabolism in Cassava Roots: Impact on Protein
mechanisms // Biochemistry. 2010. V. 49. P. 7902- Synthesis and Root Development // Front Plant Sci.
7912. DOI: 10.1021/bi1009375 2017. V. 8, No. 220. P. 1-12. DOI:
18. Van der Klei I.J., Yurimoto H., Sakai Y., 10.3389/fpls.2017.00220

96