Вы находитесь на странице: 1из 111

ЧАСТЬ ПЕРВАЯ.

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ.
ГЛАВА 1.
МЕСТО МИКРООРГАНИЗМОВ СРЕДИ ДРУГИХ ЖИВЫХ
СУЩЕСТВ
КЛАССИФИКАЦИЯ И СИСТЕМАТИКА
Зрительное восприятие объектов окружающего мира является одним из наиболее важных способов его
познания Однако, человеческий глаз видит объекты величиной около 0,1 мм, а различает детали в объектах
размером не менее 1 мм В то же время существует целый мир живых существ, разных по своей природе,
строению, свойствам, которые вследствие своих малых размеров недоступны зрению человека Такие живые
существа называют микроорганизмами. Различаются три царства, эукариоты, прокариоты, вирусы.
Эукариоты (греч eu - хорошо, karyon - ядро) - высшие микроорганизмы Клетка эукариот имеет истинное
ядро (лат - nucleus). отделенное от цитоплазмы ядерной мембраной и содержащее двойной набор хромосом.
Клетки эукариотов делятся как по типу митоза, так и по типу мейоза, в их цитоплазме содержатся
эндоплазматическая сеть, митохондрии или хлоропласты. В цитоплазме эукариотов содержатся 80S-рибосомы (S
- константа седиментации, характеризующая размер частиц) Все эукариоты - аэробы.
Прокариоты, напротив, не имеют истинною ядра - у них нуклеоид, содержащий ДНК, не отделен от
цитоплазмы ядерной мембраной и свободно располагается в цитоплазме. Деление прокариотических клеток
происходит по типу амитоза. Цитоплазма содержит 70S-рибосомы, которые меньше по размеру, чем рибосомы в
цитоплазме эукариотов. Строение клеточных мембран и жгутиков у прокариотов иное, а клеточная стенка
содержит полимерное соединение – пептидогликан, которого нет у эукариотов. Среди прокариотов есть аэробы и
анаэробы.
Эти различия имеют практическое значение. Так, избирательность действия на микроорганизмы
антибиотиков объясняется различиями в структуре прокариотов и эукариотов. Например, пенициллин действует
на клетки, содержащие пептидогликан, тетрациклины - на функцию 70S-рибосом, а полиеновые антибиотики,
например, нистатин, - на клеточную мембрану эукариотов.
Согласно современной классификации микроорганизмов, к царству эукариотов относятся простейшие и
грибы (табл. 1). Все прокариоты относятся к отделу Bacteria, вирусы составляют особое царство вирусов (Vira). В
нашей схеме прокариоты разделены на актиномицеты, спирохеты, собственно бактерии, микоплазмы, риккетсии,
хламидии, так как эти группы микробов отличаются по структуре и физиологическим свойствам. Среди
прокариотов актиномицеты имеют черты сходства с грибами, а спирохеты - с простейшими. В том порядке, в
каком в данной схеме расположены отдельные группы прокариотов, наблюдается уменьшение размеров клеток,
упрощение структуры и уменьшение способности к самостоятельному существованию. Бактерии осуществляют
свой собственный обмен веществ и способны жить и размножаться вне организма хозяина. Микоплазмы лишены
клеточной стенки и могут жить только в изотонической и гипертонической среде, риккетсии - строгие
внутриклеточные паразиты: они способны к биосинтезу своего белка, но не могут самостоятельно осуществлять
процесс дыхания. Хламидии по своим размерам близки к вирусам и являются строгими внутриклеточными
паразитами, способны к биосинтезу белка но, подобно риккетсиям, являются "дыхательными паразитами".
Вирусы не только наиболее малы по размерам, но и по своим биологическим свойствам настолько
отличаются от микроорганизмов, что выделены в особое царство Vira.
Распределением живых существ по группам в зависимости от общих признаков занимается биологическая
систематика или таксономия (греч. taxis - порядок, nomos - закон). По Международному Кодексу номенклатуры
бактерий имеются следующие категории царства прокариотов: отдел, класс, порядок, семейство, вид. Название
вида у микроорганизмов дают по биноминальной (двойной) номенклатуре, предложенной Карлом Линнеем для
высших организмов. Первое слово обозначает род и пишется с прописной буквы, второе слово - видовое
название микроба и пишется с строчной буквы. Например, Corynebacterium diphtheriae - возбудитель дифтерии.
При повторном упоминании названия в данном тексте принято сокращать родовое название до начальной буквы,
например, С. diphtheriae.
Современная таксономия микроорганизмов основана на морфологии, биохимических и физиологических
признаках. Более точным являются современные методы геносистематики, основанные на изучении состава ДНК.
Наиболее общепризнанным среди микробиологов руководством для систематики прокариотов является
определитель американского микробиолога Bergy. Первое издание определителя было опубликовано в 1923 году.
После смерти Берги вышло еще несколько изданий. Грибы, простейшие и вирусы не включены в определитель.

ГЛАВА 2. МОРФОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ


Бактерии
Бактерии - это одноклеточные прокариотные микроорганизмы. Величина их измеряется в микрометрах
(мкм). Бактерии не отличаются разнообразием форм. Различают три основные формы: шаровидные бактерии -
кокки, палочковидные и извитые. Кроме того, существуют промежуточные формы (рис. 2).
Кокки (греч. kokkos - зерно) имеют шаровидную или слегка вытянутую форму. Различаются между собой
в зависимости от того, как они располагаются после деления. Одиночно расположенные кокки - мик рококки,
расположенные попарно - диплококки. К патогенным диплококкам относятся пневмококки, имеющие
ланцетовидную форму, и бобовидные диплококки - менингококки и гонококки. Стрептококки делятся в одной
плоскости и после деления не расходятся, образуя цепочки (греч. streptos - цепочка). Патогенные стрептококки
являются возбудителями гнойно-воспалительных заболеваний, ангины, рожи, скарлатины. Тетракокки образуют
сочетания из четырех кокков в результате деления в двух взаимно перпендикулярных плоскостях, сарцины (лат.
sarcio - связывать) образуются при делении в трех взаимно перпендикулярных плоскостях и имеют вид
скоплений по 8-16 кокков. Стафилококки в результате беспорядочного деления образуют скопления, напо-
минающие гроздь винограда (греч. staphyle - виноградная гроздь). Среди них есть патогенные виды, вызывающие
гнойно-воспалительные и септические заболевания.
Палочковидные бактерии (греч. bacteria - палочка), способные образовывать споры, называют
бациллами в том случае, если спора не шире самой палочки, и клостридиями, если диаметр споры превышает
диаметр палочки. Палочки, неспособные к спорообразованию, называют бактериями. Палочковидные бактерии, в
отличие от кокков, разнообразны по величине, форме и расположению клеток: короткие (1 -5 мкм) толстые, с зак-
ругленными концами бактерии кишечной группы; тонкие, слегка изогнутые палочки туберкулеза;
располагающиеся под углом тонкие палочки дифтерии; крупные (3-8 мкм) палочки сибирской язвы с
"обрубленными" концами, образующие длинные цепочки - стрептобациллы. К извитым формам бактерий
относятся вибрионы, имеющие слегка изогнутую форму в виде запятой (холерный вибрион) и спириллы,
состоящие из нескольких завитков. К извитым формам также относятся кампилобактеры, похожие под
микроскопом на крылья летящей чайки.
Структура бактериальной клетки. Структурные элементы бактериальной клетки можно условно
разделить на: а) постоянные структурные элементы - имеются у каждого вида бактерий, в течение всей жизни
бактерии; это клеточная стенка, цитоплазматическая мембрана, цитоплазма, нуклеоид; б) непостоянные
структурные элементы, которые способны образовывать не все виды бактерий, а те бактерии, которые образуют
их, могут терять их и вновь приобретать в зависимости от условий существования. Это капсула, включения,
пили, споры, жгутики.
Клеточная стенка покрывает всю поверхность клетки. У грамположительных бактерий клеточная
стенка более толстая: до 90% - это полимерное соединение пептидогликан, связанный с тейхоевыми кислотами, и
слой белка. У грамотрицательных бактерий клеточная стенка тоньше, но сложнее по составу: состоит из тонкого
слоя пептидогликана, липополисахаридов, белков; она покрыта наружной мембраной. Наружная мембрана
грамотрицательных бактерий является барьером для некоторых антибиотиков, в том числе таких, которые
получены в последнее время. Возможно, что этим можно объяснить, почему с недавнего времени в
возникновении внутрибольничных инфекций все возрастающую роль играют грамотрицательные бактерии, такие
как кишечная палочка, синегнойная палочка. Ранее первенство в этой области принадлежало стафилококкам.
Клеточная стенка выполняет важную биологическую роль: придает бактерии определенную форму,
защищает ее от воздействий окружающей среды, участвует в транспорте питательных веществ и продуктов
обмена. В то же время пептидогликан клеточной стенки является мишенью для действия пенициллина и других
антибиотиков, которые нарушают процесс формирования полимерного пептидогликана. Отсюда понятно, почему
пенициллины действуют преимущественно на грамположительные бактерии, причем на молодые растущие
клетки.
Значение клеточной стенки в сохранении определенной формы и в защите от окружающей среды
наглядно демонстрируется на примере сферопластов и протопластов, которые образуются при разрушении
клеточной стенки под действием пенициллина или лизоцима. Полностью или частично лишенные клеточной
стенки, они имеют сферическую форму, могут выживать только в гипертонической среде и неспособны к
размножению. L-формы бактерий - это бактерии, полностью или частично утратившие клеточную стенку, но
сохранившие способность к размножению. Свое название они получили в честь института имени Листера в
Англии, где были впервые получены. Не имея клеточной стенки, они также приобретают сферическую форму. L-
формы возникают и в естественных условиях, длительно сохраняются в организме человека и играют важную
роль в патогенезе некоторых инфекционных заболеваний.
Цитоплазматическая мембрана расположена непосредственно под клеточной стенкой. Она обладает
избирательной проницаемостью, и благодаря этому регулирует водно-солевой обмен клетки, транспорт пита-
тельных веществ в клетку и выведение наружу продуктов обмена. В этих процессах участвуют ферменты
пермеазы. Кроме того, здесь имеются ферменты, осуществляющие биологическое окисление.
Цитоплазматическая мембрана путем инвагинации внутрь клетки образует мембранные структуры -
мезосомы. Геном клетки (ДНК) связан с мезосомой, и отсюда начинается процесс репликации ДНК при делении
клетки.
Цитоплазма - внутреннее гелеобразное содержимое бактериальной клетки, пронизано мембранными
структурами, создающими жесткую систему. В цитоплазме содержатся рибосомы (в которых осуществляется
биосинтез белков), ферменты, аминокислоты, белки, рибонуклеиновые кислоты.
Нуклеоид - это хромосома бактерий, двойная нить ДНК, кольцевидно замкнутая, связанная с мезосомой.
В отличие от ядра эукариотов, нить ДНК свободно располагается в цитоплазме, не имеет ядерной оболочки,
ядрышка, белков-гистонов. Нить ДНК во много раз длиннее самой бактерии (например, у кишечной палочки
длина хромосомы более 1 мм).
Помимо нуклеоида, в цитоплазме могут находиться внехромосомные факторы наследственности,
называемые плазмидами. Это короткие кольцевидные нити ДНК, прикрепленные к мезосомам.
Включения содержатся в цитоплазме некоторых бактерий в виде зерен, которые можно обнаружить при
микроскопии. Большей частью это запас питательных веществ. Например, у дифтерийных палочек на концах
видны зерна волютина, и это является важным признаком для определения этого вида бактерий. Вместе с тем это
могут быть и скопления неорганических веществ, например, серы, и продукты бактериального метаболизма.
Пили (лат. pili - волоски) иначе реснички, фимбрии, бахромки, ворсинки - короткие нитевидные отростки
на поверхности бактерий. Пили общего типа (common pili) в количестве нескольких сотен равномерно
покрывают бактерию. Они осуществляют прикрепление (адгезию) бактерии к клетке хозяина и участвуют в
питании. Половые пили (sex-пили) имеют внутри канал и образуются только клетками-донорами. Они
обеспечивают конъюгацию у бактерий и переход ДНК из одной клетки в другую.
Споры образуют среди патогенных бактерий только палочки - бациллы и клостридии. Споры бактерий не
являются способом размножения, поскольку из одной клетки формируется только одна спора. Биологическая
роль спор - сохранение вида в неблагоприятных условиях внешней среды.
Превращение бактериальной клетки в спору происходит при попадании бактерии во внешнюю среду,
чаще всего - в почву. Спора формируется внутри клетки, затем вегетативное тело лизируется. Образование споры
происходит в течение суток. Споры чрезвычайно устойчивы и могут длительное время сохранять
жизнеспособность: десятками лет остаются живыми в почве споры возбудителей сибирской язвы, столбняка,
ботулизма. Они не погибают при 100°С, убить их можно только автоклавированием, сухим жаром при 160-170°С
в течение 1-2 часов, или с помощью спороцидных химических веществ. При попадании в благоприятные условия
(оптимальная температура, достаточная влажность, наличие питательных веществ) происходит прорастание спор
в вегетативные формы. Прогревание спор при 100°С вызывает их тепловую активацию с последующим
прорастанием. Это явление используется при стерилизации дробными методами.
Спорообразование - одно из свойств, характерное для определенных видов бактерий. Форма и
расположение споры внутри клетки являются постоянным признаком вида и могут быть использованы для его
идентификации. Форма спор бывает круглой или овальной. Расположение центральное - у бацилл сибирской
язвы, субтерминальное (ближе к одному из концов) - у клостридий ботулизма и газовой анаэробной инфекции,
терминальное (на конце) - у клостридий столбняка. Для окраски спор применяют способ Ожешки, основанный на
их кислотоустойчивости.
Жгутики. Многие виды бактерий способны передвигаться благодаря наличию жгутиков. Из патогенных
бактерий только среди палочек и извитых форм имеются подвижные виды. Жгутики представляют собой тонкие
эластичные нити, длина которых у некоторых видов в несколько раз больше длины тела самой бактерии. Число и
расположение жгутиков является характерным видовым признаком бактерий. Различают бактерии: монотрихи - с
одним жгутиком на конце тела, лофотрихи - с пучком жгутиков на конце, амфитрихи, имеющие жгутики на
обоих концах, и перитрихи, у которых жгутики расположены по всей поверхности тела. К монотрихам относится
холерный вибрион, к перитрихам - сальмонеллы брюшного тифа.
Жгутики настолько тонки, что не видны в световом микроскопе. Их можно видеть в электронном
микроскопе, а также при специальных способах окраски, когда толщину жгутика искусственно увеличивают: при
помощи танина достигают набухания жгутикового белка, а затем обрабатывают азотнокислым серебром или
красителем, который оседает на жгутиках, увеличивая их толщину. Можно косвенно судить о наличии жгутиков,
наблюдая подвижность живых бактерий в препаратах "раздавленной" или "висячей" капли. Определение
подвижности у бактерий является важным диагностическим признаком, и при повседневной практической работе
удобно применять метод посева. В столбик полужидкого питательного агара уколом производится посев
бактерий. Неподвижные бактерии растут по ходу укола, а у подвижных наблюдается диффузный рост.
Капсула - наружный слизистый слой, который имеется у многих бактерий. У одних видов он настолько
тонок, что обнаруживается только в электронном микроскопе - это микрокапсула. У других видов бактерий
капсула хорошо выражена и видна в обычном оптическом микроскопе - это макрокапсула. Капсула обычно
состоит из полисахаридов, а у палочки сибирской язвы - из полипептидов
Одни бактерии образуют капсулу только в организме хозяина, например, пневмококки, палочка
сибирской язвы, палочка чумы; другие постоянно сохраняют ее, - это капсульные бактерии, например,
клебсиеллы. Капсула защищает бактерии от фагоцитоза и антител, поэтому в инфекционном процессе она играет
роль одного из факторов патогенности, обеспечивающего антифагоцитарную активность возбудителя болезни.
Наличие капсулы является дифференциальным признаком для определения вида таких микробов, как
пневмококк, палочка сибирской язвы, клебсиеллы пневмонии, которые образуют макрокапсулу, видимую в
световом микроскопе. Для обнаружения капсулы применяют способ окраски по Бурри-Гинсу: при этом на
темном фоне туши видны окрашенные фуксином бактерии, окруженные бесцветной капсулой.
Микоплазмы
Микоплазмы относятся к прокариотам, размеры их 125-200 нм. Это наиболее мелкие из клеточных
микробов, величина их близка к пределу разрешающей способности оптического микроскопа. У них отсутствует
клеточная стенка, и в этом отношении они близки к L-формам бактерий. С отсутствием клеточной стенки
связаны характерные особенности микоплазм. Они не имеют постоянной формы, поэтому встречаются
сферические, овальные, нитевидные формы. Так как микоплазмы не образуют пептидогликана, они
нечувствительны к пенициллинам и другим антибиотикам, избирательно подавляющим синтез этого вещества.
Микоплазмы широко распространены в природе. Их можно выделить из почвы, сточных вод, от
животных и человека. Существуют и патогенные виды: Mycoplasma pneumoniae является возбудителем рес-
пираторных заболеваний. Условно-патогенные Микоплазмы также играют роль в развитии заболеваний:
M.hominis - заболеваний мочеполового тракта, M.arthritidis - ревматоидного артрита. Из рода уреаплазм
патогенными являются Ureaplasma urealyticum, вызывающие заболевания мочеполовых органов.
Риккетсии
Риккетсии - прокариотные микробы, получили свое название в память американского микробиолога
Говарда Тейлора Риккетса, погибшего в результате лабораторного заражения сыпным тифом. Риккетсии сходны
с бактериями по клеточному строению и структуре, а с вирусами их сближает строгий внутриклеточный
паразитизм. Они не могут размножаться вне живых клеток хозяина, так как не синтезируют дыхательные
ферменты и поэтому неспособны к самостоятельному биологическому окислению. В отличие от вирусов, они
содержат оба вида нуклеиновых кислот - ДНК и РНК - и осуществляют процесс биосинтеза белков.
Для риккетсий характерен плеоморфизм, то есть в зависимости от условий существования у них
изменяется морфология. В благоприятных для размножения условиях это кокковидные формы (300-400 нм) или
короткие палочки, в условиях, когда процесс роста происходит быстрее, чем размножение, преобладают длинные
палочки и нитевидные формы.
Многие виды риккетсий вызывают заболевания человека, называемые риккетсиозами. Это Rickettsia
prowazekii (риккетсий Провацека) - возбудитель эпидемического сыпного тифа и Coxiella burneti (коксиелла
Бернета) -возбудитель Ку-лихорадки.
Хламидии
Хламидии - мелкие прокариотные микробы, сходные по химическому составу с грамотрицательными
бактериями. Это строгие внутриклеточные паразиты, так как не образуют АТФ и потому не способны к
самостоятельному процессу биологического окисления, т.е. это "энергетические паразиты". Вне клеток хозяина
хламидии представляют собой элементарные тельца сферической формы размером 300 нм. В клетке хозяина они
превращаются в более крупные ретикулярные тельца, которые делятся и образуют микроколонии хламидии,
которые можно видеть в клетке в виде включений. Образовавшиеся в результате элементарные тельца выходят из
клетки и совершают новый цикл в других клетках. Патогенные для человека виды: Chlamydia psittaci
-возбудитель орнитоза, источником которого являются птицы; C.trachomatis - возбудитель трахомы, поражающей
конъюнктиву глаз и хламидиозного уретрита - заболевания, передающегося половым путем; C.pneumoniae -
возбудитель воспаления легких.
Актиномицеты
Актиномицеты - одноклеточные микроорганизмы, относятся к прокариотам. Их клетки имеют такую же
структуру, как бактерии: клеточную стенку, содержащую пептидогликан, цитоплазматическую мембрану; в
цитоплазме расположены нуклеоид, рибосомы, мезосомы, внутриклеточные включения. Поэтому патогенные
актиномицеты чувствительны к антибактериальным препаратам. В то же время они имеют сходную с грибами
форму ветвящихся переплетающихся нитей, а некоторые актиномицеты, относящиеся к семейству стрентомицет,
размножаются спорами. Другие семейства актиномицет размножаются путем фрагментации, то есть распада
нитей на отдельные фрагменты.
Актиномицеты широко распространены в окружающей среде, особенно в почве, участвуют в круговороте
веществ в природе. Среди актиномицетов есть продуценты антибиотиков, витаминов, гормонов. Большинство
антибиотиков, применяемых в настоящее время, продуцируется актиномицетами. Это стрептомицин,
тетрациклин и другие.
Патогенные представители актиномицетов вызывают у человека актиномикоз и нокардиоз. Это
Actinomyces israelli, Nocardia asteroides и другие. Возбудители актиномикоза вне организма, на питательной среде
представляют собой длинные ветвящиеся нити, местами распадающиеся на фрагменты. В организме человека
патогенные актиномицеты образуют друзы - переплетающиеся нити в центре с отдельными отходящими в виде
лучей нитями по периферии. Отсюда название: актиномицеты - лучистые грибы. Концы нитей, погруженные в
ткань, утолщены, ослизнены и имеют иной химический состав, и, подобно капсуле бактерий, защищают микроб
от фагоцитоза.
Спирохеты.
Спирохеты относятся к прокариотам. Имеют признаки, общие как с бактериями, так и с простейшими
микроорганизмами. Это одноклеточные микробы, имеющие форму длинных тонких спирально изогнутых клеток,
способны к активному движению. В неблагоприятных условиях некоторые из них могут переходить в форму
цисты.
Исследования в электронном микроскопе позволили установить структуру клеток спирохет. Это
цитоплазматические цилиндры, окруженные цитоплазматической мембраной и клеточной стенкой, содержащей
пептидогликан. В цитоплазме находятся нуклеоид, рибосомы, мезосомы, включения. Под цитоплазматической
мембраной расположены фибриллы, обеспечивающие разнообразное движение спирохет - поступательное,
вращательное, сгибательное.
Сапрофитные спирохеты имеются в окружающей среде. Несколько непатогенных видов являются
постоянными обитателями организма человека. Патогенные для человека виды относятся к трем родам:
Treponema, Borrelia, Leptospira. Они различаются по форме и расположению завитков. Трепонемы состоят из 8-12
одинаковых по величине завитков, положение которых при движении не меняется. Боррелии образуют 5-8
завитков, меняющихся при движении подобно движению змейки. Лептоспиры состоят из 40-50 очень мелких
постоянных завитков, концы изогнуты в виде крючков и имеют утолщения. При движении концы лептоспир
изгибаются в разные стороны, причем образуются форму в виде русской буквы С или латинской S. Спирохеты за
исключением боррелий, плохо воспринимают анилиновые красители, поэтому их окрашивают по Романовскому-
Гимза. По лучше всего наблюдать спирохеты в живом виде в темном поле зрения.
Патогенные представители спирохет: Treponema pallidum - вызывает сифилис, Borrelia recurrentis -
возвратный тиф, Borrelia burgdorferi - болезнь Лайма, Leptospira interrogans - лептоспироз.
Грибы.
Грибы (Fungi, Mycetes) - эукариоты, низшие растения, лишенные хлорофилла, в связи с чем они не
синтезируют органические соединения углерода, то есть это гетеротрофы, имеют дифференцированное ядро,
покрыты оболочкой, содержащей хитин. В отличие от бактерий, грибы не имеют в составе оболочки
пептидогликана, поэтому нечувствительны к пенициллинам. Для цитоплазмы грибов характерно присутствие
большого количества разнообразных включений и вакуолей.
Среди микроскопических грибов (микромицетов) имеются одноклеточные и многоклеточные
микроорганизмы, различающиеся между собой по морфологии и способам размножения. Для грибов характерно
разнообразие способов размножения: деление, фрагментация, почкование, образование спор - бесполых и
половых.

При микробиологических исследованиях наиболее часто приходиться сталкиваться с плесенями,


дрожжами и представителями сборной группы так называемых несовершенных грибов.
Плесени образуют типичный мицелий, стелющийся по питательному субстрату. От мицелия вверх
подымаются воздушные ветви, которые оканчиваются плодоносящими телами различной формы, несущими
споры.
Мукоровые или головчатые плесени (Mucor) - одноклеточные грибы с шаровидным плодоносящим телом,
наполненным эндоспорами.
Плесени рода Aspergillus - многоклеточные грибы с плодоносящим телом, при микроскопии
напоминающим наконечник лейки, разбрызгивающей струйки воды; отсюда название "леечная плесень". Некото-
рые виды аспергилл используются в промышленности для производства лимонной кислоты и других веществ.
Есть виды, вызывающие заболевания кожи и легких у человека - аспергиллезы.
Плесени рода Penicillum, или кистевики - многоклеточные грибы с плодоносящим телом в виде кисточки.
Из некоторых видов зеленой плесени был получен первый антибиотик - пенициллин. Среди пенициллов есть
патогенные для человека виды, вызывающие пенициллиоз. Различные виды плесеней могут быть причиной
порчи пищевых продуктов, медикаментов, биологических препаратов.
Дрожжи - дрожжевые грибы (Saccharomycetes, Blastomycetes) имеют форму круглых или овальных
клеток, во много раз крупнее бактерий. Средний размер дрожжевых клеток приблизительно равен поперечнику
эритроцита (7-10 мкм). Отличительной морфологической особенностью дрожжей является отсутствие
нитевидного мицелия и обычное размножение почкованием. На поверхности материнских клеток возникают
отростки, которые, отделившись затем от материнской клетки, превращаются в самостоятельные новые особи.
Кроме почкования, истинные дрожжи могут размножаться половым способом, образуя аски - половые споры.
Большинство видов дрожжей непатогенны. Их способность вызывать брожение широко используется в
промышленности - в хлебопечении, виноделии, в получении спиртов и витаминов. Существуют патогенные
дрожжевые грибы, вызывающие заболевания, например, Blastomyces dermatitidis - возбудитель бластомикоза,
Pneumocystis carinii - возбудитель пневмоцистоза легких.
Несовершенные грибы не имеют специальных органов плодоношения. К ним относятся
дрожжеподобные грибы и дерматомицеты.
Дрожжеподобные грибы, подобно истинным дрожжам, представляют собой круглые или овальные
клетки, размножающиеся почкованием. Но есть два существенных признака, по которым их отличают при
проведении микробиологических исследований: дрожжеподобные грибы, в отличие от истинных дрожжей,
образуют псевдомицелий и не образуют половых спор. Дрожжеподобные грибы рода Candida могут быть
обнаружены на слизистых оболочках здоровых людей. У новорожденных и грудных детей, у ослабленных
больных они вызывают кандидоз - поражение слизистых оболочек, кожи, внутренних органов. Это заболевание
может возникнуть вследствие экзогенного заражения. Но чаще кандидоз развивается как эндогенная инфекция
при длительном лечении антибиотиками широкого спектра действия, которые, будучи направлены против
бактерий - возбудителей заболевания, попутно подавляют рост бактерий - представителей нормальной
микрофлоры организма, что ведет к дисбактериозу. Будучи эукариотамй, грибы Кандида нечувствительны к
антибактериальным антибиотикам. Освободившись от антагонистического влияния бактерий, они безудержно
размножаются и вызывают кандидозы. Наиболее часто возбудителями кандидозов у человека являются виды
Candida albicans, C.tropicalis и другие.
Дерматомицеты являются возбудителями заболеваний кожи (греч. derma - кожа), волос, ногтей. Это
трихофитон - возбудитель трихофи-тии, эпидермофитон - возбудитель эпидермофитии, микроспорой - воз-
будитель микроспории, ахорион - возбудитель парши. В волосах, чешуйках кожи, соскобах ногтей отрезки
мицелия дерматомицстов хорошо видны, так как сильно преломляют свет.
Простейшие
Простейшие - Protozoa (греч. proto - начало, zoa - животное) - эукариоты, микроскопические
одноклеточные животные организмы. По сравнению с бактериями характеризуются более сложным строением. У
них имеются примитивные органы, такие, как ротовое и анальное отверстие, сократительные вакуоли, мионемы.
Ядро дифференцированное. Оболочки, обособленной от протоплазмы, простейшие не имеют, хотя некоторые из
них образуют пелликулу за счет уплотнения наружного слоя протоплазмы. Движение простейших осу-
ществляется при помощи разных механизмов: перемещением протоплазмы, образующей псевдоподии (амебы),
наличием жгутиков (жгутиковые) или ресничек (реснитчатые). При размножении проходят сложные циклы
развития, с чередованием полового и бесполого цикла, в организме основного хозяина - переносчика инфекции и
промежуточного хозяина - человека или животного. При этом на разных стадиях развития разные формы одного
и того же микроорганизма могут настолько отличаться друг от друга, что против них применяются разные
химиотерапевтические препараты. Например, на половые и бесполые формы плазмодиев малярии избирательно
действуют разные препараты.
Среди амеб патогенной для человека является дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica),
первооткрыватель ее - Ф.А. Леш (1875 г.). К жгутиковым относятся: лямблии - Lamblia intestinalis (Д.Ф. Лямбль,
1859 г.), трихомонады - Trichomonas hominis, обитатель кишечного тракта, Trichomonas vaginalis - паразит
урогенитального тракта, возбудитель распространенного заболевания человека; лейшмании - Leshmania tropica,
L.donovani, L.braziliensis; трипаносомы - Trypanosoma gambiense. К классу споровиков, названных так по одной
из стадий развития, относят четыре вида плазмодиев малярии и токсоплазмы -Toxoplasma gondii - возбудитель
токсоплазмоза. К реснитчатым относится кишечный балантидий - Balantidium coli.
Изучение морфологии простейших может производиться в живом состоянии, при этом можно наблюдать
их движение. Для исследования в окрашенном виде простая окраска непригодна, так как она не по зволяет
выявить сложную структуру этих микроорганизмов. Применяется метод окраски по Романовскому-Гимза,
дифференцирующий отдельные элементы клетки.

ГЛАВА 3.
МЕТОДЫ МИКРОСКОПИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
МИКРОБОВ

Методы микроскопического исследования используют для изучения формы и структуры клетки,


подвижности микробов.
Микроскопия в световом оптическом микроскопе
Световой микроскоп состоит из механической и оптической части. Механическая часть микроскопа - это
штатив, состоящий из основания и колонки, к которой прикреплены тубус и предметный столик. В колонке
имеются две винтовые системы для установки тубуса. Макрометрический винт служит для установки на фокус
при слабых увеличениях (объектив х8), а при сильных объективах (х40, х90) - доя первоначальной, грубой
установки. Для более точной установки служит микрометрический винт. Это одна из наиболее хрупких частей
микроскопа, и работа с ним требует особой осторожности.
Оптическая часть микроскопа состоит из осветительного аппарата, объективов и окуляров.
Осветительный аппарат расположен под предметным столиком. В большинстве микроскопов свет
отражается от зеркала и, пройдя через линзы конденсора, фокусируется в плоскости препарата. В современных
микроскопах освещение достигается с помощью вмонтированного в микроскоп источника света.
Объективы представляют собой систему линз в металлической оправе. Передняя (фронтальная) линза -
самая маленькая. От нее главным образом зависит увеличение микроскопа. Расположенные за ней линзы
называются коррекционными, так как они предназначены для устранения недостатков оптического изображения.
На оправе объективов обозначается создаваемое ими увеличение: х8, х40, х90. Объективы х 8 (малое
увеличение) и х40 - это сухие объективы. При работе с ними между фронтальной линзой объектива
и препаратом находится воздух. При этом, вследствие разницы показателей преломления стекла (1,52) и
воздуха (1,0), часть световых лучей, проходя через оптически неоднородные среды, рассеивается. При
микроскопии с объективами х 8 и х 40 это не имеет значения. Но мик робы настолько малы, что для их
исследования необходимо более сильное увеличение, которое дает объектив х90. При работе с этим объективом
рассеивание света должно быть устранено. Для этого между предметным стеклом и линзой помещают каплю
жидкости, показатель преломления которой равен показателю преломления стекла. Более всего для этого
подходит кедровое масло или его заменители. При микроскопии объектив погружают в каплю масла, поэтому
объектив называют иммерсионным (лат. immercio - погружение), а масло - иммерсионным маслом.
Иммерсионный объектив требует особо осторожного обращения. Фронтальная линза имеет настолько короткое
фокусное расстояние до исследуемого объекта, что опускать объектив нужно медленно, глядя сбоку, чтобы не
раздавить препарат, что связано с порчей линзы.
Окуляры имеют две линзы: верхняя называется глазной г нижняя -собирательной. Окуляры обозначают
по тому увеличению, которое они дают, например: х7, х10, х15. Окуляр дает увеличение, ничего не добавляя в
деталях изображения, данного объективом.
Чтобы определить общее увеличение микроскопа, нужно умножить увеличение объектива на увеличение
окуляра.
Разрешающая способность светового микроскопа - это наименьшее расстояние между точками в
препарате, которые еще не сливаются в одно изображение. Для светового микроскопа эта способность зависит от
длины волны видимого света, и предел разрешения оптического микроскопа равен 0,2 мкм.
Изображение объекта в микроскопе увеличенное и обратное.
Правила микроскопии с иммерсионной системой
Работать сидя.
Поднять конденсор до уровня предметного столика.
Глядя на верхнюю поверхность конденсора, осветить поле зрения.
Установить иммерсионный объектив.
На предметный столик поместить препарат с каплей Иммерсионного масла.
Глядя сбоку, осторожно опустить тубус с помощью макровинта до соприкосновения объектива с маслом
и чуть-чуть погрузить его в масло, не доводя до соприкосновения с предметным стеклом.
Глядя в окуляр, медленно поднимать макровинтом тубус до получения изображения в поле зрения. Не
разрешается опускать макровинтом тубус, глядя в окуляр.
Микровинтом, вращая его не более чем вполоборота, найти ясное изображение и рассматривать его.
Держать оба глаза открытыми. Левой рукой передвигать препарат для общего обозрения. Если предметный
столик подвижный - можно для более мелких и точных движений пользоваться боковыми винтами. Правой рукой
слегка вращать микровинт, чтобы препарат всегда был в фокусе.
После просмотра препарата поднять тубус при помощи макровинта, снять препарат, установить объектив
х8, вытереть мягкой салфеткой масло с иммерсионного объектива.
Микроскопия в темном поле. Для микроскопии в темном поле применяются особые конденсоры, у
которых центральная часть линзы затемнена, за исключением узкой полоски по периферии. Кроме того, боковые
поверхности конденсора представляют собой не прямую линию, а параболу. Внутренняя поверхность такого
темнопольного параболоид-конденсора зеркальная. Лучи света попадают в темнопольный конденсор только
через узкую полоску по периферии линзы. Затем они отражаются от его зеркальной поверхности и, если в поле
зрения нет никакого объекта, то ни один луч не попадает в объектив. Поле зрения кажется совершенно черным.
Если же в поле зрения есть какие-то объекты, например, микробы, то лучи, отраженные от них, попадают в
объектив, и их можно видеть светящимися на темном фоне.
Это явление подобно тому, которое наблюдается в комнате с затемненными окнами, когда в косых лучах
света, проникающих через щель, видны танцующие пылинки, при обычном освещении невидимые (феномен
Тиндаля).
За неимением специального темнопольного конденсора можно обычный конденсор превратить в
темнопольный, поместив между его линзами кружок черной бумаги, немногим меньше по диаметру линзы
конденсора. В таком "приспособленном" конденсоре можно наблюдать достаточно ясно живых светящихся
микробов, но поле зрения будет не черным, а серым.
Преимущество микроскопии в темном поле зрения состоит в том, что при этом можно видеть объекты
более мелкие. Кроме того, в темном поле зрения лучше наблюдать в живом состоянии такие микробы, как
лептоспиры, которые в водной среде не преломляют света и поэтому в проходящем свете совершенно прозрачны.
Фазовоконтрастная микроскопия. При прохождении через непрозрачные объекты, такие как
окрашенные препараты микроорганизмов, амплитуда световых волн уменьшается. Такие изменения, называемые
амплитудными, улавливаются человеческим глазом. Поэтому окрашенные микробы видны в обычном
микроскопе.
Объекты, разные по плотности, но одинаковые по прозрачности, не меняют амплитуды световых волн, а
только изменяют фазу. Такие фазовые изменения человеческий глаз не способен уловить. Поэтому живые клетки
микробов, их структурные элементы в живом состоянии прозрачны в проходящем свете и для нас невидимы.
Фазовоконтрастный микроскоп превращает фазовые изменения в амплитудные. Поэтому структурные
элементы с различной плотностью выглядят как более светлые и более темные. Это позволяет наблюдать не
только фазовые объекты целиком, но и структурные элементы микробов.
Фазовоконтрастная микроскопия осуществляется с помощью обычного светового микроскопа, в котором
заменяют объективы и конденсор на специальные - фазово-контрастные.
Люминесцентная микроскопия. Люминесценция - это свечение объекта за счет поглощенной световой
энергии коротковолновой или ультрафиолетовой части спектра. Большинство микроорганизмов не обладает
собственной люминесценцией, поэтому пользуются наведенной люминесценцией путем обработки микробов
флюорохромами. Чаще всего используют акридин-оранж, аурамин, изоцианат флюоресцеина, которые светятся
под влиянием ультрафиолетовых лучей. Некоторые флюорохромы избирательно связываются с определенными
структурами, такими, как ядро, цитоплазма, включения. Таким образом, можно дифференцировать эти
структуры. Препараты, обработанные флюорохромами, микроскопируют в специальных люминесцентных
микроскопах, в которых объекты исследуются в ультрафиолетовых лучах.
Люминесцентная микроскопия используется для реакции иммунофлюоресценции (РИФ). В этой реакции
для определения вида микробов препарат-мазок из исследуемого материала обрабатывают специфической
антисывороткой, соединенной с флюорохромом. Если в материале содержатся микробы, соответствующие
антисыворотке, то при микроскопии препарата в люминесцентном микроскопе наблюдается свечение микробов.
Электронная микроскопия. Возможности разрешающей способности светового микроскопа ограничены
не качеством линз, а длиной волны видимого света. В электронном микроскопе вместо световых лучей
используется поток электронов. Источником электронов является раскаленная вольфрамовая нить. Роль линз в
электронном микроскопе выполняет круговое магнитное поле. Вначале электроны попадают в магнитный
конденсор и сходятся в одной точке на рассматриваемый предмет, лежащий в безвоздушной среде на тонкой
пленке коллодия. Затем пучок электронов проходит через объективную и проекционные линзы. Наблюдатель
видит не поток электронов, а изображение, которое проецируется на флуоресцирующий экран или
фотографическую пленку. Возникновение изображения на экране обусловлено тем, что различные части
исследуемого объекта обладают неодинаковой проницаемостью для электронов. Электроноплотные участки
выглядят темными, электронопрозрачные - светлыми.
С помощью электронного микроскопа можно наблюдать вирусы, детали морфологии микробов.
Используя метод иммуноэлектронной микроскопии (ИЭМ), можно видеть и сфотографировать вирусы с при -
соединившимися к ним антителами.

ГЛАВА4. ФИЗИОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

Как все живые существа, микроорганизмы осуществляют процессы питания, дыхания, роста и
размножения. В то же время для микроорганизмов характерны некоторые особенности, отличающие их от
высших организмов. Будучи одноклеточными, микроорганизмы самостоятельно осуществляют все жизненные
процессы, и регуляция этих процессов заложена в каждой клетке.

Химический состав микроорганизмов


Значительную часть клетки составляет вода - от 70 до 85% от общей массы. Вода служит средой, в
которой протекают разнообразные химические процессы микробной клетки. В ней растворяются кристаллоиды,
диссоциируют электролиты, формируются коллоиды. Кроме того, сама вода как химический компонент,
непосредственно участвует в реакциях гидролиза белков, углеводов и липоидов. Количество воды в клетке
постоянно, и это постоянство регулируется цитоплазматической мембраной.
Сухой остаток микробной клетки составляет от 15% до 30%. Из них половина приходится на белки. Это
простые белки - протеины и сложные белки - протеиды. Аминокислотный состав белков характе рен для
различных видов микроорганизмов. Белки входят в состав ферментов. Белками являются экзотоксины, с
которыми связана патогенность целого ряда микробов; белками являются многие антигены, с ними связана
специфичность микробов.
Нуклеиновые кислоты являются важнейшими компонентами микробов. В ДНК зашифрована вся
наследственная информация клетки, а РНК участвует в процессах считывания информации, передачи се на
рибосомы и синтеза в них белка - соответственно: матричная РНК (мРНК), рибосомальная РНК (рРНК) и
транспортная РНК (тРНК).
Установлено, что состав нуклеотидов ДНК, а именно соотношения гуанин + цитозин/аденин + тимин
является стабильным признаком. Поэтому его можно использовать для определения таксономического
положения бактерий. Например, у стафилококков процентное содержание Г+Ц-28%-39%, а у сходных с ними
микрококков Г+Ц=65%-83%, следовательно, они принадлежат к разным родам.
Липиды у бактерий, не содержащих жировые вещества в виде включений, составляют около 10% сухого
остатка. У бактерий, имеющих особые жировые включения, например, у микобактерий туберкулеза, количество
липидов достигает 40%, что обеспечивает этим бактериям устойчивость к кислотам, щелочам, спиртам. В состав
липидов входят нейтральные жиры, фосфолипиды и свободные жирные кислоты. Фосфолипиды являются
составной частью цитоплазматической мембраны, принимают участие в транспорте веществ. Липиды входят в
состав липополисахарида клеточной стенки грамотрицательных бактерий - это их эндотоксин и О-антиген.
Углеводы выполняют в клетке пластическую роль и являются источником энергии, необходимым для
обменных процессов. Количество углеводов в клетке непостоянно даже у одной и той же бактерии (от 10% до
30%) и зависит не только от рода и вида, но и от условий развития микробов. Бактерии содержат моносахариды,
дисахариды, полисахариды. У некоторых бактерий полисахаридный антиген настолько специфичен, что
позволяет разграничить отдельные типы внутри вида. Например, капсульный антиген пневмококков,
поверхностный С-антиген стрептококков.
Минеральные вещества микроорганизмов разнообразны, количество и состав их зависит от вида
микробов и состава питательной среды. Основные элементы, необходимые для жизнедеятельности клетки -
натрий, калий, фосфор, кальций, магний, железо, медь, сера, хлор, кремний. Некоторые металлы - железо,
кальций - входят в состав ферментов. Фосфор входит в состав аденозинтрифосфорной кислоты, которая является
своеобразным аккумулятором энергии. Ионы металлов участвуют в поддержании постоянства осмотического
давления, реакции среды (рН) в клетке. Реакция цитоплазмы слабощелочная. Заряд на поверхности бактерий -
отрицательный, у спирохет - положительный. Благодаря одноименному заряду, бактерии в физрастворе образуют
равномерно-мутную взвесь. Склеивание их между собой и образование хлопьев наблюдается при реакции
агглютинации, а также при потере поверхностного заряда клетки, например, у шероховатых R-форм бактерий.

Метаболизм (обмен веществ) микроорганизмов


Питание микробов (конструктивный метаболизм).
Как у всего живого, метаболизм микроорганизмов состоит из двух взаимосвязанных, одновременно
протекающих, но противоположных процессов - анаболизма, или конструктивного метаболизма, и катабо лизма,
или энергетического метаболизма.
Обмен веществ у микроорганизмов имеет свои особенности.
1) Быстрота и интенсивность обменных процессов. За сутки микробная клетка может переработать такое
количество питательных веществ, которое превышает ее собственный вес в 30-40 раз.
2) Выраженная приспособляемость к изменяющимся условиям внешней среды.
3) Питание осуществляется через всю поверхность клетки. Прокариоты не проглатывают питательные
вещества, не переваривают их внутри клетки, а расщепляют их вне клетки с помощью экзоферментов до более
простых соединений, которые транспортируются в клетку.
Для роста и жизнедеятельности микроорганизмов обязательно наличие в среде обитания питательных
материалов для построения компонентов клетки и источники энергии. Для микробов необходимы вода,
источники углерода, кислорода, азота, водорода, фосфора, калия, натрия и других элементов. Требуются также
микроэлементы: железо, марганец, цинк, медь для синтеза ферментов. Различные виды микробов нуждаются в
тех или иных факторах роста, таких, как витамины, аминокислоты, пуриновые и пиримидиновые основания.
В зависимости от способности усваивать органические или неорганические источники углерода и азота
микроорганизмы делятся
на две группы - аутотрофов и гетеротрофов.
Аутотрофы (греч. autos - сам, trophic - питающийся) получают углерод из углекислоты (СО2) или ее солей.
Из простых неорганических соединений они синтезируют белки, жиры, углеводы, ферменты.
Гетеротрофы (греч. heteros - другой, trophic - питающийся) используют сложные органические
соединения, такие как углеводы, спирты, аминокислоты, органические кислоты. Среди гетеротрофных микро-
организмов различают сапрофитов (греч. sapros - гнилой, phyton - растение) и паразитов. Сапрофиты используют
мертвые органические соединения. Они широко распространены в природе, разлагают органические вещества,
отбросы, участвуя таким образом в санитарной очистке окружающей среды. Паразиты живут и размножаются в
тканях человека, животных, растений.
Микробы могут изменять свой тип питания с паразитического на сапрофитный. Их можно
культивировать вне организма, на питательных средах. Среди прокариотов исключение составляют риккетсии и
хламидии, которые могут жить только в живых клетках хозяина. Их называют строгими, или облигатными
паразитами (лат. obligatus - обязательный). Облигатными паразитами являются также все вирусы.
Транспорт питательных веществ
Через клеточную стенку и цитоплазматическую мембрану внутрь клетки прокариотов проникают только
небольшие молекулы, поэтому белки, полисахариды и другие биополимеры вначале расщепляются
экзоферементами до более простых соединений, которые транспортируются внутрь клетки.
Проникновение питательных веществ в клетку происходит с помощью различных механизмов.
Пассивная диффузия - вещества поступают в клетку за счет диффузии по градиенту концентрации, то есть
вследствие того, что концентрация вне клетки выше, чем внутри.
Облегченная диффузия - также совершается по градиенту концентрации, но с участием ферментов-
переносчиков, так называемых пермеаз. Этот фермент присоединяет к себе молекулы вещества на внешней
стороне цитоплазматической мембраны и отдает его на внутренней стороне в неизмененном виде. Затем
свободный переносчик перемещается снова к наружной стороне мембраны, где связывает новые молекулы
вещества. При этом каждая пермеаза переносит какое-то определенное вещество.
Эти два механизма переноса не требуют энергетических затрат.
Активный перенос происходит также с участием пермеаз, причем осуществляется против градиента
концентрации. Микробная клетка может накопить вещество в концентрации, в тысячи раз превышающих ее во
внешней среде. Такой процесс требует затрат энергии, то есть расходуется АТФ.
Транслокация радикалов - это четвертый механизм передачи веществ. Это активный перенос химически
измененных молекул, с участием пермеаз. Например, такое простое вещество, как глюкоза, переносится в
фосфорилированном виде.
Выход веществ из бактериальной клетки происходит путем пассивной диффузии или путем облегченной
диффузии с участием пермеаз.
Ферменты
Ферменты - катализаторы биологических процессов. Характерным свойством ферментов является их
специфичность. Каждый фермент участвует только в определенной реакции с определенным химическим
соединением.
Ферменты, которые выделяются бактериальной клеткой в окружающую среду и осуществляют
внеклеточное переваривание, называются экзоферментами. К экзоферментам относится также беталактамаза,
которая разрушает пенициллин и другие бета-лактамные антибиотики, защищая бактерии от их действия.
Эндоферменты участвуют в процессах метаболизма внутри клетки.
Для бактерий, в силу их малых размеров, характерна высокая степень саморегуляции продукции
ферментов. В этом отношении ферменты можно разделить на конститутивные и адаптивные. Конститутивные
ферменты продуцируются клеткой постоянно. Адаптивные ферменты, в свою очередь, подразделяются на
индуцируемые и ингибируемые. Продукция индуцируемых ферментов происходит в присутствии субстрата.
Например, ферменты, расщепляющие лактозу, образуются в клетке в только присутствии этого углевода.
Продукция ингибируемых ферментов, напротив, подавляется присутствием в среде конечного субстрата в
достаточно большой концентрации (например, трип-тофана).
Многие патогенные бактерии, кроме ферментов обмена, выделяют ферменты, являющиеся факторами
вирулентности. Например, такие ферменты, как гиалуронидаза, коллагеназа, дезоксирибонуклеаза,
нейраминидаза способствуют проникновению и распространению патогенного микроба в организме.
Способность бактерий продуцировать определенные ферменты -признак настолько постоянный, что его
используют для идентификации, то есть определения вида бактерий. Определяют сахаролитические свойства
(ферментацию углеводов) и протеолитические свойства (ферментацию белков и пептона).
Для микробов характерна высокая ферментативная активность. Это используется в промышленности. В
медицине находят применение такие лечебные средства, как стрептокиназа (фибринолизин стреп тококков),
террилитин (протеаза Aspergillus terricola). Ферменты микробного происхождения - липазы и протеазы, входящие
в состав моющих средств и стиральных порошков, расщепляют белковые и жировые загрязнения до
воднорастворимых веществ, которые легко смываются водой.
Биологическое окисление (энергетический метаболизм)
Процесс биологического окисления дает энергию, необходимую для жизни клетки. Сущность процесса
заключается в последовательном окислении субстратов с постепенным освобождением энергии. Энергия
запасается в молекулах АТФ.
Окислению подвергаются углеводы, спирты, органические кислоты, жиры и другие вещества. Но для
большинства микроорганизмов источником энергии служат гексозы, в частности, глюкоза.
У микроорганизмов существует два типа биологического окисления: аэробный и анаэробный. При
аэробном типе участвует кислород, и этот процесс называется дыханием в строгом смысле слова. При
анаэробном типе биологического окисления освобождение энергии из органических молекул происходит без
участия кислорода и называется брожением.
Начальный этап анаэробного расщепления глюкозы с образованием пировиноградной кислоты (ПВК)
происходит одинаково. Эта
кислота является тем центральным пунктом, от которого расходятся пути дыхания и многих видов
брожений.
При аэробном типе дыхания пировиноградная кислота вступает в цикл трикарбоновых кислот. Водород
ПВК поступает в дыхательную цепь. Это цепь окислительных ферментов (цитохромы и цитохромоксидаза). По
цепи цитохромов передается водород и присоединяется к активированному под действием цитохромоксидазы
кислороду с образованием воды. Конечные продукты аэробного окисления глюкозы - диоксид углерода
(углекислота) и вода. В процессе дыхания на одну молекулу глюкозы образуется 38 молекул АТФ.
При анаэробном типе биологического окисления энергия образуется в результате брожений. При
спиртовом брожении ПВК превращается в конечном итоге в спирт и углекислоту. Конечным продуктом
молочнокислого брожения является молочная кислота, маслянокислого брожения - масляная кислота. При
процессах брожения на одну молекулу глюкозы образуется только 2 молекулы АТФ.
Микробную природу брожений впервые открыл и доказал Пастер. Изучая маслянокислое брожение,
Пастер впервые столкнулся с возможностью жизни без кислорода, то есть с анаэробиозом. Он также установил
явление, которое впоследствии было названо "эффектом Пастера": прекращение процесса брожения при
широком доступе кислорода.
Анаэробиоз существует только среди прокариотов. Все микроорганизмы по типу дыхания делятся на
следующие группы: облигатные аэробы, облигатные анаэробы, факультативные анаэробы, микроаэрофилы.
Облигатные аэробы размножаются только при наличии свободного кислорода. К ним можно отнести
микобактерии туберкулеза, холерный вибрион, чудесную палочку. ,
Облигатные или строгие анаэробы получают энергию при отсутствии доступа кислорода. Они имеют
неполный набор окислительно-восстановительных ферментов, у них нет цитохромной системы, поэтому у них не
происходит полного окисления субстрата (глюкозы) до конечных продуктов - СО 2 и Н2О. Более того, в
присутствии свободного кислорода образуются токсические соединения: перекись водорода Н2О2 и свободный
перекисный радикал кислорода О2. Аэробы при этом не погибают, так как продуцируют ферменты, разрушающие
эти токсические соединения (супероксиддисмутазу и каталазу). Спорообразующие анаэробы в этих условиях
прекращают размножение и превращаются в споры. Неспорообразующие анаэробы погибают даже при
кратковременном контакте с кислородом.
К облигатным спорообразующим анаэробам относятся клостридии столбняка, ботулизма, анаэробной
раневой инфекции; к неспорообразующим анаэробам - бактероиды, пептобактерии, бифидумбактерии.
Большинство патогенных бактерий - факультативные (условные) анаэробы, например, энтеробактерии.
Они имеют полный набор ферментов и при широком доступе кислорода окисляют глюкозу до конечных
продуктов; при низком содержании кислорода они вызывают брожение.
Микроаэрофилы размножаются в присутствии небольших количеств кислорода. Например,
кампилобактеры могут размножаться при 3-6% кислорода.
Рост и размножение микроорганизмов
Термином "рост" обозначают увеличение размеров отдельной особи, а "размножение" - увеличение числа
особей в популяции.
Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам, реже путем почкования. У
грамположительных бактерий из клеточной стенки и цитоплазматической мембраны образуется перегородка,
врастающая внутрь. У грамотрицательных бактерий образуется перетяжка, и затем происходит разделение
клетки на две особи.
Делению клеток предшествует репликация бактериальной хромосомы по полуконсервативному типу. При
этом двуспиральная цепь ДНК раскручивается, каждая нить достраивается комплиментарной нитью и в
результате каждая дочерняя клетка получает одну материнскую нить и одну вновь образованную.
Быстрота размножения разных видов бактерий различна. Большинство бактерий делятся каждые 15-30
минут. Микобактерии туберкулеза делятся медленно - одно деление за 18 часов, спирохеты - одно деление за 10
часов.
Если посеять бактерии в жидкую питательную среду определенного объема и затем каждый час брать
пробу и определять количество живых бактерий в такой замкнутой среде и составить график, на котором по оси
абсцисс откладывать время в часах, а по оси ординат логарифм количества живых бактерий, то получим кривую
роста бактерий. Рост бактерий подразделяют на несколько фаз (рис. 5):
1) латентная фаза (лаг-фаза) - бактерии адаптируются к питательной среде, количество их не
увеличивается;
2) фаза логарифмического роста - количество бактерий увеличивается в геометрической прогрессии;
3) фаза стационарного роста, во время которой число вновь образованных бактерий уравнивается числом
погибших, и количество живых бактерий остается постоянным, достигая максимального уровня. Это М-
концентрация - величина, характерная для каждого вида бактерий;
4) фаза отмирания, когда число отмирающих клеток начинает преобладать над числом жизнеспособных
бактерий вследствие накопления продуктов метаболизма и истощения среды.
Культура бактерий в такой замкнутой несменяющейся среде называется периодической. Если же в
засеянный объем непрерывно подают свежую питательную среду и удаляют такое же количество жидкости, то
такую культуру называют непрерывной. Количество живых бактерий в такой культуре будет постоянно в М-
концентрации. Непрерывное культивирование применяют в микробиологической промышленности.
Образование микробами пигментов, ароматических веществ. Светящиеся микроорганизмы
Некоторые виды микробов вырабатывают красящие вещества -пигменты. Если пигмент растворим в воде,
то окрашенными представляются и колонии микробов, и питательная среда. Например, синий пигмент,
выделяемый синегнойной палочкой (Pseudomonas aeruginosa), окрашивает среду в синий цвет. Пигменты,
растворимые в органических растворителях, но нерастворимые в воде, не окрашивают питательную среду. Такой
пигмент красного цвета, так называемый продигиозан, растворимый в спирте, выделяет чудесная палочка
(Serratia marcescens). К этой же группе относятся пигменты желтого, оранжевого, красного цвета, характерные
для кокковой воздушной микрофлоры. У некоторых видов микробов пигменты настолько прочно связаны с
протоплазмой клетки, что не растворяются ни в воде, ни в органических растворителях. Среди патогенных
бактерий такие пигменты золотистого, палевого, лимонно-желтого цвета образуют стафилококки.
Цвет пигмента используется для определения вида бактерий.
Некоторые микроорганизмы в процессе метаболизма вырабатывают ароматические вещества. Например,
для синегнойной палочки характерен запах жасмина. Характерный запах сыров, сливочного масла, особый
"букет" вина объясняется жизнедеятельностью микробов, которые используются для производства этих
продуктов.
Свечение (люминесценция) микробов происходит в результате освобождения энергии при биологическом
окислении субстрата. Свечение бывает тем интенсивнее, чем сильнее приток кислорода Светящиеся бактерии
были названы фотобактериями. Они придают свечение чешуе рыб в море, грибам, гниющим деревьям, пищевым
продуктам, на поверхности которых размножаются. Свечение может наблюдаться при низких температурах,
например, в холодильнике. Патогенных для человека среди фотогенных бактерий не установлено.
Свечение пищевых продуктов, вызванное бактериями, не приводит к их порче, и даже может
свидетельствовать о том. что в этих продуктах не происходит гниения, поскольку оно прекращается при развитии
гнилостных микроорганизмов.

ГЛАВА 5.
МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ. ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ И
БИОХИМИЧЕСКИХ
СВОЙСТВ
Культивирование, то есть выращивание микроорганизмов в лаборатории, применяется для изучения их
свойств и для получения биомассы. Бактерии, грибы, актиномицеты, спирохеты и некоторые простейшие
культивируются на питательных средах. Хламидии, риккетсии, вирусы и некоторые простейшие способны
размножаться только в организме животного или в живых клетках.
Культуральные свойства данного вида микроорганизмов - это: 1) условия, необходимые для размножения,
и 2) характер роста на питательных средах. Культуральные свойства - это одна из характеристик, которые
учитываются при идентификации (определения вида) микроорганизмов.
Питательные среды
Питательные среды должны соответствовать определенным требованиям. Они должны содержать все
питательные вещества, необходимые для размножения данного вида микробов. Одни патогенные мик-
роорганизмы растут на простых питательных средах, другие для своего размножения нуждаются в добавлении
крови, сыворотки крови, витаминов.
В питательных средах должны быть созданы определенные условия путем добавления хлорида натрия
или буферных растворов. Для большинства бактерий благоприятной является питательная среда, содержащая
0,5% хлорида натрия. Реакция питательной среды, благоприятная для большей части патогенных бактерий -
слабощелочная, что соответствует рН=7,2-7,4. Холерный вибрион растет при рН=7,8-8,5, грибы - при рН=5-5,5.
Питательные среды должны быть влажными, то есть содержать достаточное количество воды, быть по
возможности прозрачными и стерильными, то есть до посева не содержать микробов.
По составу и происхождению питательные среды бывают естественные, искусственные и синтетические.
Естественные питательные среды - это натуральный продукт, например, картофель, другие овощи.
Искусственные питательные среды готовят по определенной прописи из продуктов с добавлением органических
и неорганических соединений. Синтетические среды содержат определенные химические соединения в
известных концентрациях.
По консистенции питательные среды бывают жидкие, полужидкие, плотные. В качестве уплотнителя
обычно применяют агар-агар -полисахарид, выделенный из морских водорослей. Агар-агар не используется
микроорганизмами в качестве питательного вещества, образует в воде гель, плавящийся при 100°С и
застывающий при 45°С.
Для получения плотной питательной среды агар-агар добавляют в концентрации 1,5-2%, для полужидкой
- 0,5%.
По целевому назначению питательные среды могут быть разделены на обычные (простые), специальные,
элективные, дифференциально-диагностические.
Обычные (простые) питательные среды применяют для культивирования большинства микроорганизмов,
это мясопептонный бульон (МПБ), мясопептонный агар (МПА).
Специальные питательные среды применяют для культивирования микроорганизмов, которые не растут
на простых средах. Например, кровяной агар и сахарный бульон для стрептококка, сывороточный агар для
менингококка и гонококка.
Элективные питательные среды используют для выделения одного какого-либо вида из смеси различных
бактерий. Данный вид бактерий растет на этой среде быстрее и лучше других, опережая их в своем росте; рост
других бактерий задерживается на этой среде. Например, свернутая сыворотка для палочки дифтерии, щелочная
пептонная вода для холерного вибриона, желчный бульон для палочки брюшного тифа, солевые среды для
стафилококка.
Дифференциально-диагностические питательные среды применяются для отличия одних видов бактерий
от других по их ферментативной активности (см. соответствующий раздел).
Культивирование и выделение чистых культур аэробных бактерий
Для культивирования микроорганизмов необходимы определенные условия: температура, аэробные или
анаэробные условия.
Температура должна быть оптимальной для данного вида. Большинство патогенных бактерий
размножаются при 37°С. Однако для некоторых видов оптимальной является более низкая температура, что
связано с особенностями их экологии. Так, для палочки чумы, естественным местом обитания которой являются
грызуны в период зимней спячки, оптимум температуры составляет 28°С, как и для лептоспир, для палочки
ботулизма - 28°С-35°С.
Кроме оптимальной температуры, для культивирования микроорганизмов, в зависимости от вида,
необходима аэробность или анаэ-робность среды.
Для того, чтобы изучить морфологию, Культуральные, биохимические и другие свойства микробов,
необходимо получить чистую культуру. Обычно культурой микробов называют скопление их на питательной
среде в виде помутнения, придонного (пристеночного) роста или пленки на поверхности жидкой среды или
колоний на плотной среде. Отдельная колония образуется из одной микробной клетки. Чистая культура - это
культура микробов одного вида, полученная из одной колонии. В лабораториях для различных исследований
применяют определенные известные штаммы микробов. Штамм - это чистая культура микробов, полученная из
определенного источника, в определенное время, обладающая известными свойствами. Как правило, штаммы
микробов обозначают определенным номером. Например, штамм Staphylococcus aureus 209P применяется для
определения активности пенициллина.
Выделение чистых культур аэробов занимает, как правило, три дня и производится по следующей схеме:
1-й день - микроскопия мазка из исследуемого материала, окрашенного (обычно по Граму) - для
предварительного ознакомления с микрофлорой, что может быть полезным в выборе питательной среды для
посева. Затем посев материала на поверхность застывшего питательного агара для получения изолированных
колоний. Рассев можно произвести по методу Дригальского на три чашки Петри с питательной средой. Каплю
материала наносят на первую чашку и распределяют шпателем по всей чашке. Затем этим же шпателем
распределяют оставшуюся на нем культуру на второй чашке и таким же образом - на третьей. Наибольшее
количество колоний вырастет на первой чашке, наименьшее - на третьей. В зависимости от того, сколько было
микробных клеток в исследуемом материале, на одной из чашек вырастут изолированные колонии.
Такого же результата можно достигнуть, произведя рассев на одной чашке. Для этого делят чашку на
четыре сектора. Исследуемый материал засевают бактериологической петлей штрихами на первом секторе,
затем, прокалив и остудив петлю, распределяют посев из первого сектора во второй и таким же образом
последовательно в третий и четвертый сектор. Из отдельных микробных клеток после суточного инкубирования
в термостате образуются изолированные колонии.
2-й день - изучение колоний, выросших на чашках, описание их. Колонии могут быть прозрачными,
полупрозрачными или непрозрачными, они имеют различные размеры, округлые правильные или неправильные
очертания, выпуклую или плоскую форму, гладкую или шероховатую поверхность, ровные или волнистые,
изрезанные края. Они могут быть бесцветными или иметь белый, золотистый, красный, желтый цвет. На
основании изучения этих характеристик выросшие колонии разделяются на группы. Затем из исследуемой
группы отбирают изолированную колонию, готовят мазок для микроскопического исследования с целью
проверки однородности микробов в колонии. Из этой же колонии производят посев в пробирку со скошенным
питательным агаром.
3-й день - проверка чистоты культуры, выросшей на скошенном агаре путем микроскопии мазка. При
однородности исследуемых бактерий выделение чистой культуры можно считать законченным.
Для идентификации выделенных бактерий изучаются культураль-ные признаки, то есть характер роста на
жидких и плотных питательных средах. Например, стрептококки на сахарном бульоне образуют придонный и
пристеночный осадок, на кровяном агаре - мелкие, точечные колонии; холерный вибрион образует пленку на
поверхности щелочной пептонной воды, а на щелочном агаре - прозрачные колонии; палочка чумы на
питательном агаре образует колонии в виде «кружевных платочков» с плотным центром и тонкими волнистыми
краями, а в жидкой питательной среде - пленку на поверхности, а затем -нити, отходящие от нее в виде
«сталактитов».
Культивирование и выделение чистых культур анаэробных бактерий
Для культивирования анаэробов необходимо понизить окислительно-восстановительный потенциал
среды, создать анаэробиоз путем удаления кислорода физическими, химическими или биологическими методами.
К физическим методам можно отнести:
1) механическое удаление воздуха с помощью насоса из анаэ-ростата, в котором помещают чашки с
посевами. Одновременно можно заменить воздух индифферентным газом: азотом, водородом, углекислым газом.
2) выращивание в среде, содержащей редуцирующие вещества. Среда Китта-Тароцци - это сахарный
бульон с кусочками печени или мяса. Глюкоза и кусочки органов обладают редуцирующей способностью. Среду
заливают сверху слоем вазелинового масла, чтобы преградить доступ кислорода воздуха.
3) Наиболее простой, но менее надежный способ - выращивание в глубине высокого столбика сахарного
агара.
Химические методы заключаются в том, что чашки с посевами анаэробов ставят в герметически закрытый
эксикатор, куда помещают химические вещества, например, пирогаллол и щелочь, реакция между которыми идет
с поглощением кислорода.
Биологический метод основан на одновременном выращивании анаэробов и аэробов на плотных
питательных средах в чашках Петри, герметически закрытых после посева. Вначале кислород поглощается
растущими аэробами, а затем начинается рост анаэробов.
Выделение чистой культуры анаэробов начинают с накопления анаэробных бактерий путем посева на
среду Китта-Тароцци. В дальнейшем получают изолированные колонии одним из двух способов:
1) посев материала производят путем смешивания с расплавленным теплым сахарным агаром в
стеклянных трубках. После застывания агара в глубине его вырастают изолированные колонии, которые извле-
кают путем распила трубки и пересевают на среду Китта-Тароцци (способ Вейнберга);
2) посев материала производят на чашки с питательной средой и инкубируют в анаэростате. Выросшие на
чашке изолированные колонии пересевают на среду Китта-Тароцци (способ Цейсслера).

Культивирование других микроорганизмов


Культивирование микоплазм
Микоплазмы культивируются на питательных средах с добавлением сыворотки и углеводов. Поскольку
микоплазмы лишены клеточной стенки, они растут только в изотонических или гипертонических средах. На
плотных питательных средах в течение нескольких суток образуются очень мелкие колонии, напоминающие
яичницу-глазунью - с выпуклым центром и плоской полупрозрачной периферией. Микоплазмы можно
выращивать также на курином эмбрионе или культуре клеток.
Культивирование риккетсий и хламидий
Риккетсии и хламидий - облигатные внутриклеточные паразиты. Для их культивирования используют
культуры клеток, куриный эмбрион и заражение животных.
Культивирование грибов
Для культивирования грибов применяют плотные и жидкие питательные среды: чаще всего среду Сабуро,
а также среды, содержащие пивное сусло. Грибы растут медленнее, чем бактерии, они образуют видимый рост в
течение нескольких суток. Температура культивирования ниже, чем у бактерий - 22-30°С.
Культивирование спирохет и простейших
Среди спирохет наиболее легко выращивать лептоспиры, питательной средой для которых может служить
вода с примесью сыворотки крови кролика. Боррелии и трепонемы культивируют в анаэробных условиях на
более сложных питательных средах, содержащих сыворотку, кусочки тканей животных.
Среди простейших культивируются на питательных средах дизентерийная амеба, лямблии, трихомонады,
лейшмании, трипаносомы, балантидии.Токсоплазмы культивируют в куриных эмбрионах и культурах тканей.
Методы культивирования малярийных плазмодиев разрабатываются.
Методы изучения ферментативной активности (биохимических свойств)
В микробиологической практике изучение ферментативной активности используют для идентификации
микроорганизмов, поскольку каждый микробный вид обладает определенным набором ферментов.
Для определения протеолитической активности микробы засевают уколом в столбик желатина и после 3-5
суток инкубирования при комнатной температуре отмечают характер разжижения желатина: в виде воронки,
гвоздя, чулка или в виде опрокинутой елки. Протеолитическую активность определяют также по образованию
продуктов разложения белка: индола, сероводорода, аммиака. Для их определения засевают микроорганизмы в
мясо-пептонный бульон, и между горлышком пробирки и ватной пробкой помещают индикаторные бумажки,
исключая их контакт со средой. При образовании индола бумага, пропитанная насыщенным раствором
щавелевой кислоты, приобретает розовый цвет; в присутствии сероводорода бумага, пропитанная аце татом
свинца, чернеет; при образовании аммиака красная лакмусовая бумажка синеет.
Для определения сахаролитических свойств микробов применяют дифференциально-диагностические
среды такие, как среды Гисса, среда Олькеницкого, среда Эндо, среда Левина, среда Плоскирева.
Среды Эндо, Левина, Плоскирева в чашках Петри применяются для дифференцировки бактерий
кишечной группы по их способности сбраживать лактозу. Эти среды содержат питательный агар, лактозу и
индикатор, изменяющий свой цвет в кислой среде - индикатор рН. Если посеять на такую среду бактерии,
которые сбраживают лактозу, например кишечную палочку, то в результате сбраживания лактозы образуется
кислота, и индикатор изменит свой цвет в кислой среде. Поэтому колонии кишечной палочки на таких средах
будут окрашенными соответственно цвету индикатора: на среде Эндо и среде Плоскирева - в красный цвет, на
среде Левина - в черно-синий. Колонии бактерий, не сбраживающих лактозу, таких как сальмонеллы и палочки
дизентерии, будут бесцветными.
Среды Гисса (среды "пестрого ряда") готовятся на основе пептон-ной воды или полужидкого мясо-
пептонного агара. Содержат какой-либо один углевод или многоатомный спирт и индикатор. При росте на среде
Гисса микроба, сбраживающего данный субстрат с образованием кислоты и газа, среда изменит цвет, в
полужидкой среде появятся пузырьки и разрывы в толще агара, в жидкой среде - пузырек газа в стеклянном
поплавке. При сбраживании субстрата только до кислоты происходит лишь изменение цвета среды.
Применяются также комбинированные среды, содержащие не один углевод, а два или три, например,
среда Олькеницкого. Одна пробирка этой среды заменяет скошенный агар и среды Гисса с лактозой, глюкозой и
сахарозой. После стерилизации в расплавленном виде среду в пробирке скашивают так, чтобы получился столбик
и скошенная часть. Посев производится штрихом по скошенной части и уколом в столбик. При сбраживании
лактозы или сахарозы изменяется цвет всей среды, при сбраживании одной глюкозы изменяется цвет только
столбика. Образование газа определяется по наличию пузырьков в столбике агара. При выделении микробами
аммиака цвет среды не меняется. Образование сероводорода проявляется почернением в столоике агара
Для экспресс-метода определения ферментативной активности бактерий применяются микротестсистемы
и система индикаторная бумажная (СИБ)
Микротестсистема представляет собой контейнер из прозрачного полистирола, состоящий из нескольких
ячеек Ячейки содержат высушенные питательные среды с углеводами и индикаторами рН В каждую ячейку
засевают взвесь культуры бактерий определенной густоты В контрольные ячейки наливают физ раствор
Результат учитывают после 3 - 4-хчасовой инкубации в термостате по изменению цвета
индикатора
Системы индикаторные бумажные (СИБ) для идентификации семейства энтеробактерий представляет
собой диски или полоски хроматографической бумаги, покрытые защитной пленкой и содержащие определенный
субстрат и индикатор В пробирки с физиологическим или буферным раствором вносят исследуемую культуру,
затем помещают диски В контрольные пробирки культуру бактерий не вносят Результат учитывают по
изменению цвета индикатора Для определения сероводорода диск помещают на поверхность МПА, засеянного
уколом, что позволяет одновременно определить подвижность
Во всех пробирках учитывают предварительный результат в тот же день и окончательный - на следующий
день
Оксидазная активность определяется путем растирания культуры на индикаторной бумажке Результат
учитывается через минуту.

ГЛАВА 6.
ОБЩАЯ ВИРУСОЛОГИЯ

Общая характеристика вирусов, морфология


и структура вирионов

Первооткрывателем вирусов, основоположником вирусологии является русский ученый Дмитрий


Иосифович Ивановский, открывший в 1892 году вирус табачной мозаики (ВТМ)
Вирусы настолько отличаются от микроорганизмов, что выделены в особое царство - царство Vira
Особенности вирусов, отличающие их от всех других живых существ
1) наличие только одного типа нуклеиновой кислоты - ДНК или РНК, в то время как клетки всех
остальных живых существ содержат ДНК и РНК, взаимодействие которых необходимо для биосинтеза белков,
2) отсутствие собственных белоксинтезирующих систем и клеточного строения;
3) внутриклеточный паразитизм на молекулярном (генетическом) уровне.
Внеклеточная форма вируса - вириои и вирус, находящийся внутри клетки хозяина - это две разные
формы вируса.
Вирионы разных вирусов имеют размеры от 15 до 400 нанометров. Нанометр - это 10-9 метра (рис. 6).
Наиболее мелкие вирусы - вирусы полиомиелита - имеют вирион размером 17-25 им, средние - вирус гриппа - 80-
120 нм, крупные - вирус оспы - 300-400 им.
В центре вириона располагается его геном. Это нуклеиновая кислота - ДНК или РНК (однонитевая или
двунитевая). Плюс-однонитевая РНК несет две функции: наследственную и информационную, например у вируса
полиомиелита. Минус-однонитевая РНК, как, например, у вируса гриппа, несет только наследственную функцию,
и только в процессе репродукции вируса к ней достраивается плюс-нить иРНК.
Вокруг нуклеиновой кислоты симметрично располагаются белковые молекулы - капсомеры,
составляющие капсид (лат. capsa - коробка). Различают спиральный тип симметрии, когда капсомеры уложены
по всей длине молекулы нуклеиновой кислоты, и кубический, когда капсомеры располагаются в виде
двадцатигранника (икосаэдра).
Вирионы, содержащие только нуклеиновую кислоту и белок, составляют нуклеокапсид. Это простые
вирусы, например, ВТМ, вирус полиомиелита.
У вирионов сложноорга-низованных вирусов имеется еще поверхностная оболочка - суперкапсид,
содержащий, кроме белков, также углеводы, липиды, компоненты клетки хозяина. Строение вириона лежит в
основе классификации вирусов. По типу нуклеиновой кислоты их делят на: рибовирусы и дезоксири-бовирусы,
далее по структуре вирионов, по месту размножения и по другим признакам проводится деление на семейства и
роды.
Вследствие малых размеров вирусы не видны в световом микроскопе. Только наиболее крупный из них -
вирус оспы - можно наблюдать в виде мелких точечных образований - элементарных телец Пашена.
Размножаясь в чувствительных клетках организма, вирусы оспы, бешенства, гриппа образуют в них
внутриклеточные включения. Их можно обнаружить в световом или в люминесцентном микроскопе. Обна-
ружение внутриклеточных включений используется для диагностики. Например, включения Бабеша-Негри в
нервных клетках обнаруживаются при бешенстве.
Морфологию вирионов изучают в электронном микроскопе. Вирусы имеют разные формы: сферическую,
нитевидную, палочковидную.
Репродукция вирусов
Вирусы не способны размножаться на питательных средах - это строгие внутриклеточные паразиты.
Более того, в отличие от риккетсий и хламидий, вирусы в клетке хозяина не растут и не размножаются путем
деления. Составные части вируса - нуклеиновые кислоты и белковые молекулы синтезируются в клетке хозяина
раздельно, в разных частях клетки - в ядре и в цитоплазме. При этом клеточные белоксинтезирующие системы
подчиняются вирусному геному, его НК.
Репродукция вируса в клетке происходит в несколько фаз (рис.7):
- Первая фаза - адсорбция вируса на поверхности клетки, чувствительной к данному вирусу.
- Вторая фаза - проникновение вируса в клетку хозяина путем виропексиса.
- Третья фаза - «раздевание» вирионов, освобождение нуклеиновой кислоты вируса от суперкапсида и
капсида. У ряда вирусов проникновение нуклеиновой кислоты в клетку происходит путем слияния оболочки
вириона и клетки-хозяина. В этом случае вторая и третья фазы объединяются в одну.
В зависимости от типа нуклеиновой кислоты этот процесс совершается следующим образом.
ДНК-содержащие (ДНК —> иРНК —>белок)
1. Репродукция происходит в ядрх: аденовирусы, герпес,папо-вавирусы. Используют ДНК-зависимую
РНК - полимеразу клетки.
2. Репродукция происходит в цитоплазме: вирусы имеют свою ДНК-зависимую РНК полимеразу. РНК-
содержащие.
1. Рибовирусы с позитивным геномом (плюс-нитиевые): пикор-
на-, тога-, коронавирусы. Транскрипции нет.
РНК —>белок
2. Рибовирусы с негативным геномом (минус- нитиевые): грипп,
корь, паротит, орто-, парамиксовирусы.
(-)РНК —> иРНК —> белок (иРНК комплементарная (-)РНК) Этот процесс идет при участии
специального вирусного фермента - вирионная РНК-зависимая PHK-полимераза ( в клетке такого фермента
быть не может).
3. Ретровирусы
(-)РНК -> ДНК —> иРНК —>белок (и РНК гомологична РНК) В этом случае процесс образования ДНК
на базе (-)РНК возможен при участии фермента - РНК-зависимой ДНК-полимеразы (обратной транскриптазы
или ревертазы)
- Четвертая фаза - синтез компонентов вириона. Нуклеиновая кислота вируса образуется путем
репликации. На рибосомы клетки транслируется информация вирусной иРНК, и в них синтезируется вирус-
специфический белок.
- Пятая фаза - сборка вириона. Путем самосборки образуются нуклеокапсиды.
- Шестая фаза - выход вирионов из клетки. Простые вирусы, например, вирус полиомиелита, при выходе
из клетки разрушают ее. Сложноорганизованные вирусы, например, вирус гриппа, выходят из клетки путем
почкования. Внешняя оболочка вируса (суперкапсид) формируется в процессе выхода вируса из клетки. Клетка
при таком процессе на какое-то время остается живой.
Описанные типы взаимодействия вируса с клеткой называются продуктивными, так как приводят к
продукции зрелых вирионов.
Иной путь - интегративный - заключается в том, что после проникновения вируса в клетку и "раздевания"
вирусная нуклеиновая кислота интегрирует в клеточный геном, то есть встраивается в определенном месте в
хромосому клетки и затем в виде так называемого прови-руса реплицируется вместе с ней. Для ДНК- и РНК-
содержащих вирусов этот процесс совершается по-разному. В первом случае вирусная ДНК интегрирует в кле-
точный геном. В случае РНК-содержащих вирусов вначале происходит обратная транскрипция: на матрице
вирусной РНК при участии фермента "обратной транскриптазы" образуется ДНК, которая встраивается в
клеточный геном. Провирус несет дополнительную генетическую информацию, поэтому клетка приобретает
новые свойства. Вирусы, способные осуществить такой тип взаимодействия с клеткой, называются
интегративными. К интегративным вирусам относятся некоторые онкогенные вирусы, вирус гепатита В, вирус
герпеса, вирус иммунодефицита человека, умеренные бактериофаги.
Кроме обычных вирусов, существуют прионы - белковые инфекционные частицы, не содержащие
нуклеиновую кислоту. Они имеют вид фибрилл, размером до 200 нм. Вызывают у человека и у животных
медленные инфекции с поражением мозга: болезнь Крейтцфельда-Якоба, куру, скрепи и другие.
Методы культивирования вирусов
Вирусы - строгие внутриклеточные паразиты, поэтому их можно выращивать только в живых клетках.
Для культивирования вирусов используют лабораторных животных, развивающиеся куриные эмбрионы и
культуры клеток.
Лабораторные животные: белые мыши (для вирусов гриппа, Коксаки), кролики (вирус бешенства).
Индикацию, то есть обнаружение вируса, проводят на основании развития типичных признаков заболевания и
изменений органов животного.
Куриные эмбрионы 5-19-дневной инкубации пригодны для культивирования большинства вирусов:
Преимущества метода: стерильность и отсутствие скрытых вирусных инфекций, возможность получения вирусов
в больших количествах, простота техники работы. В зависимости от цели и от вида вируса материал вносят на
хорион-аллантоисную оболочку, в аллантоисную полость, желточный мешок, амниотическую полость.
Индикацию вирусов проводят по характеру колоний вируса на хорион-аллантоисной оболочке. В аллантоисной
жидкости вирусы обнаруживают по реакции гемагглютинации. Эта реакция основана на способности вируса
гриппа и некоторых других вирусов агглютинировать (склеивать) куриные эритроциты.
Культура клеток - это клетки из органа животного или человека, которые живут и размножаются вне
организма в питательном растворе (в среде 199 или в среде Хенкса). Культивирование в культуре клеток - один
из наиболее распространенных методов в вирусологии. Чаще всего применяются однослойные культуры клеток,
прикрепленные к стенкам пробирок или плоских флаконов. Различают несколько типов культур.
1) первично-трипсинизированные, которые получают, обрабатывая трипсином исходную ткань,
например, почки обезьян, или эмбриональную ткань человека. Культура клеток используется однократно.
2) перевиваемые культуры клеток способны размножаться при многократных посевах на свежие
питательные среды. Они могут поддерживаться в лаборатории путем постоянных пересевов в течение десятков
лет. Во многих лабораториях применяются перевиваемые культуры, полученные из раковой ткани человека:
HeLa, ИЕр-2 и др.
3) полуперевиваемые культуры клеток - это, например, диплоидные клетки из фибробластов
человеческого эмбриона, способные размножаться в течение 40-50 пассажей (пересевов), сохраняя исходный
диплоидный набор хромосом.
Обнаружение вирусов в культуре клеток. Вирусы в культуре клеток обнаруживаются по цитопатическому
действию (ЦПД), которое вызывают многие вирусы, например, вирус полиомиелита. ЦПД проявляется в
дегенерации и разрушении клеток, или в формировании многоядерных клеток.
ЦПД можно обнаружить по цветной пробе. Для этого используют клетки, помещенные в питательную
среду с индикатором, например, метиловым красным. При размножении незараженных клеток образуются
кислые продукты метаболизма, и индикатор меняет цвет на желтый. Если клетки заражены вирусом, происходит
нарушение нормального метаболизма клеток, и цвет среды не меняется.
Репродукцию вируса в клетке можно обнаружить и по образованию внутриклеточных включений.
Для подсчета количества вирионов используют метод бляшек. Клеточный монослой, покрытый тонким
слоем агара, в плоском флаконе, заражают вирусом и по количеству бляшек или "стерильных пятен"
подсчитывают количество вирионов. Считается, что одна бляшка образуется при размножении одного вириона.
Репродукцию вируса в клетке можно обнаружить также по реакции гемадсорбции. Это вариант реакции
гемагглютинации. Эритроциты, внесенные в культуру клеток, адсорбируются на поверхности клеток,
зараженных вирусом. Реакцию применяют, например, для обнаружения вируса гриппа.

ГЛАВА 7. БАКТЕРИОФАГИ И БАКТЕРИОФАГИЯ

Явление бактериофагии открыл и изучил французский микробиолог д'Эррель. В 1917 г. он наблюдал


лизис культуры бактерий дизентерии после внесения в нее фильтрата испражнений больного, выздоравлива -
ющего от дизентерии. При многократных пассажах, то есть переносе из одной культуры в другую, фильтраты
сохраняли свою лизирующую активность и даже усиливали ее. Ученый сделал из этого правильный вывод о том,
что лизирующий агент - живой и при пассажах размножается в бактериях. Д'Эррель назвал этот агент
бактериофагом (лат. phagos -пожирающий), а само явление лизиса - бактериофагией.
Позже было подтверждено, что бактериофаг - живой. Это вирус бактерий, он размножается в бактериях,
вызывая их лизис. Добавление бактериофага в культуру бактерий на жидкой питательной среде вызывает
просветление среды. На плотных питательных средах при посеве смеси бактерий и бактериофага на фоне
сплошного роста бактерий появляются стерильные пятна или негативные колонии фагов (рис. 8).
Бактериофаг и специфичны, то есть лизируют определенные виды бактерий. Отсюда их названия:
дизентерийный бактериофаг, стафилококковый бактериофаг. Обнаружены фаги не только бактерий, но и
актиномицетов.
В практической медицине бактериофаги нашли применение как лечебные и профилактические средства,
Важное значение имеет то, что на примере бактериофагии были открыты и изучены многие проблемы
общей вирусологиии и молекулярной генетики.
Структура бактериофагов
Размеры бактериофагов колеблются от 20 нм до 200 нм. Как все вирусы, содержат ДНК, или РНК, и
белковый капсид. Чаще всего встречаются и лучше изучены бактериофаги, имеющие форму сперматозоида или
головастика. Состоят они из головки, хвостового отростка, батальной пластинки с короткими шинами и
хвостовыми нитями. Внутри головки располагается спирально скрученная пить ДНК, покрытая белковым
капсидом. Хвостовой отросток - что полый цилиндрический стержень, окруженный сократительным чехлом.
Базальная пластинка и нити осуществляют процесс адсорбции бактериофага на бактериальной клетке (рис. 9).
Существуют бакте-риофаш. имеющие другое строение: с короткими отростком, с отростком без сократительного
чехла, без отростка, нитевидной формы.
Взаимодействие бактериофага с бактериальной клеткой
Как все вирусы, бактериофаги не размножаются на питательных средах. Их размножение происходит
только в чувствительных к ним бактериальных клетках, в процессе взаимодействия, в котором наблюдаются те
же фазы, что при взаимодействии других вирусов с клеткой.
Адсорбция бактериофага. Как все вирусы, фаги неподвижны, и столкновение с бактерией происходит
случайно, затем адсорбция становится прочной, если у клетки имеются на поверхности фагос-пецифические
рецепторы. Фаги, имеющие сократительный чехол, адсорбируются с помощью хвостового отростка.
Внедрение фага внутрь клетки. Под действием фермента лизо-цима, который находится в хвостовом
сегменте, в клеточной стенке бактерии образуется отверстие. Через это отверстие в результате сокращения хво-
стового чехла внутрь бактериальной клетки переходит ДНК фага. Белковый капсид остается снаружи.
Синтез ДНК и белка бактериофага. В клетке прекращается синтез бактериальных белков. Образуются
фаговые ДНК, а на рибосомах бактерий синтезируются молекулы фагового белка.
Формирование фага. Сборка зрелых фагов из ДНК и капсида происходит в цитоплазме клетки. Выход
зрелых фагов из клетки происходит при разрушении бактерий с помощью лизоцима, а затем зрелые фаги
внедряются в новые клетки.
"Урожай" фага, в зависимости от его вида, составляет от 20 до 200 частиц. Весь цикл взаимодействия,
занимающий от 10 минут до нескольких часов, называется литическим циклом, а фаг при таком взаимодействии -
вирулентным.
В отличие от вирулентных, умеренные фаги не лизируют бактерии. Их геном, проникнув в клетку,
встраивается в хромосому бактерии и в дальнейшем остается в хромосоме в виде профага и реплицируется вме -
сте с ней. Бактерии, несущие профаг, называются лизогенными, а само явление - лизогенией. Лизогенные
бактерии встречаются очень часто. Профаг, находясь в геноме бактерии, придает ей какие-либо новые свой ства.
Так, например, продукция экзотоксина у палочек дифтерии и ботулизма связана с наличием профага.
В определенных условиях (воздействия температуры, химических веществ и др.) профаги могут
превратиться в вирулентные бактериофаги. Размножаясь, они лизируют бактерии и могут переходить в другие
бактериальные клетки. При выходе из хромосомы профаг может захватить соседние гены бактериальной
хромосомы и при заражении другой бактерии, встроившись в ее хромосому, передать эти гены. Передача
генетического материала от одной бактерии к другой с помощью умеренного бактериофага называется
трансдукцией. Таким образом могут передаваться такие признаки, как устойчивость к антибиотикам, способность
продуцировать какие-либо ферменты. Умеренные бактериофаги применяются в генетической инженерии в
качестве вектора - переносчика генов.

Практическое значение бактериофагов


Препараты бактериофагов применяются для диагностики, профилактики и лечения. Фагодиагностика
основана на специфичности бактериофагов: видоспецифические бактериофаги лизируют только определенные
виды бактерий. Более того, бактерии одного и того же вида различаются по чувствительности к разным типовым
бактериофагам, Таким образом можно с помощью набора типовых бактериофагов определять фаговары
стафилококков, сальмонелл, вибрионов, Фаготипирование помогает установить источник инфекции и пути
передачи.
Лечебно-профилактическое действие фагов основано на их литической активности.
Для получения препарата бактериофага культуру бактерий заражают бактериофагом. На следующий день
лишрованную культуру фильтруют через бактериальный фильтр. К фильтрату в качестве консерванта добавляют
хинозол.
Для количественной характеристики бактериофагов используют такой критерий, как титр бактериофага.
Титр фага можно выразить двумя показателями:
1) наибольшее разведение препарата, при котором бактериофаг лизирует соответствующие бактерии:
2) количество активных корпускул бактериофага в 1 мл препарата.
Методы титрования бактериофага:
1) метод серийных разведении в пробирках с жидкой питательной средой по Аппельману;
2) двуслойный агаровый метод, при котором подсчитывают число негативных колоний фага на фоне
сплошного роста бактерий – метод Грациа.
Готовый жидкий препарат бактериофага должен быть совершенно прозрачным. При кишечных
инфекциях препарат применяют вместе с раствором питьевой соды, так как кислое содержимое желудка
разрушает бактериофаг. Препараты некоторых бактериофагов для инъекций и местного применения выпускают в
ампулах. Для приема внутрь препараты бактериофагов выпускаются также в виде таблеток с кислотоустойчивым
покрытием, которое в щелочной среде тонкого кишечника растворяется. В качестве покрытия применяется
пектин или ацетилфталилцеллюлоза (ЛФП).
В нашей стране выпускаются препараты дизентерийного, сальмонеллезного, коли-протейпого,
стафилококкового и других бактериофагов, а также наборы типовых фагов для фаготипирования стафилококков,
брюшнотифозных и других бактерий.
ГЛАВА 8.
ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ (МИКРОЭКОЛОГИЯ)
Экологическая микробиология изучает взаимоотношения микро-и макроорганизмов, совместно
обитающих в биотопах. Это часть общей экологии - науки, изучающей взаимоотношения животных, растений,
микроорганизмов между собой и с окружающей средой.
Основные понятия:
- биотоп - участок биосферы с относительно однородными условиями жизни;
- популяция - совокупность особей одного вида, обитающих в определенном биотопе;
- микробиоценоз - сообщество популяций разных микроорганизмов, обитающих в определенном биотопе;
- экосистема (экологическая система) - совокупность организмов и среды их обитания, то есть система,
состоящая из биотопа и биоценоза; .
- геосфера - почвенная экосистема;
- гидросфера - водная экосистема;
- атмосфера - воздушная экосистема;
- биосфера - общая сумма всех экосистем, область распространения жизни на Земле.
В зависимости от среды обитания микроорганизмы разделяют на свободноживущяе и симбионты.
Свободноживущие заселяют почву, воду, воздух и различные объекты внешней среды. В природе микроор-
ганизмы распространены гораздо шире, чем другие живые существа. Благодаря малым размерам,
приспособляемости к изменению условий существования, разнообразию источников питания, микроорганизмы
можно обнаружить там, где другие живые существа жить не могут.
Характеризуя микрофлору почвы, воды и воздуха, целесообразно придерживаться определенного плана:
1) постоянная микрофлора данной среды;
2) значение данной среды как фактора передачи возбудителей заболеваний;
3) определение микробной флоры.
При исследовании объектов внешней среды методами санитарной микробиологии определяются
количественные показатели - общее количество микроорганизмов в определенном объеме. Важной задачей
исследования является обнаружение патогенных микробов и их токсинов. Однако непосредственное их
выявление представляет значительные трудности. Причина в том, что патогенные микроорганизмы встречаются
во внешней среде непостоянно, обычно в небольших количествах, их трудно культивировать на питательных
средах, некоторые из них вообще не культивируются на искусственных средах. Поэтому возможное загрязнение
внешней среды патогенными микробами определяют по косвенному показателю - обнаружению санитарно-
показа-тельного микроорганизма.
В качестве санитарно-показательных выбирают те микробы, которые постоянно и в больших количествах
содержатся в тех выделениях человека, которые для данной среды наиболее опасны. Сроки их выживания во
внешней среде должны совпадать примерно со сроками выживания патогенных микробов. Санитарно-
показательные микроорганизмы не должны интенсивно размножаться во внешней среде и должны легко
обнаруживаться при лабораторном исследовании.
Микрофлора почвы
Почва является основной средой обитания многих микроорганизмов, которые вместе с растениями и
животными составляют разнообразные биогеоценозы. Состав микробиоценозов почвы зависит от многих
внешних факторов, в том числе от агротехнических мероприятий, таких как вспашка, внесение удобрений,
ядохимикатов.
Самый поверхностный тонкий слой почвы содержит мало микроорганизмов, так как они погибают под
влиянием солнечных лучей и высушивания. Наиболее обильна микрофлора почвы на глубине 10-20 см, а в более
глубоких слоях количество микробов уменьшается.
Видовой состав почвенной микрофлоры весьма разнообразен: анаэробные и аэробные бактерии, грибы,
простейшие, вирусы.
Значение микрофлоры почвы велико для круговорота веществ в природе. Микробы осуществляют
разложение и минерализацию органических животных и растительных остатков, попадающих в почву, процесс
очищения ее от нечистот и отбросов.
Среди патогенных микробов имеются такие, для которых почва является постоянным местом обитания.
Это возбудители ботулизма, актиномицеты и грибы - возбудители микозов. Вторая группа - это спо-
рообразующие бациллы и клостридии, которые попадают в почву с выделениями человека и животных и могут
длительно здесь сохраняться в виде спор. Это бациллы сибирской язвы, клостридии столбняка и газовой
анаэробной инфекции.
К третьей группе относятся неспорообразующие бактерии и вирусы, которые попадают в почву с
выделениями человека и животных, сохраняются здесь в течение нескольких дней и месяцев. Это бактерии -
возбудители брюшного тифа и дизентерии, палочки туберкулеза, лептоспиры, вирусы. Значение почвы как
фактора передачи при этих инфекциях относительно невелико.
Микробиологическое исследование почвы имеет значение при строительстве жилищ, детских
учреждений, водохранилищ. Пробы почвы берут из глубины. Определяют микробное число - общее количество
микроорганизмов в 1 г почвы и наличие санитарно-показательных микроорганизмов. Присутствие в почве
Escherichia coli и Streptococcus faecalis указывает на свежее фекальное загрязнение, бактерий рода Citrobacter и
Enterobacter - на несвежее, a Clostridium perfringens - на давнее.
Микрофлора воды
Вода открытых водоемов, подобно почве, является естественной средой обитания многих видов бактерий,
грибов, вирусов, простейших. В воде обитают также различные виды микробов, принимающих участие в
круговороте веществ в природе и способствующих самоочищению воды благодаря разложению органических
соединений. Характер микрофлоры воды зависит от многих причин, и в особенности от загрязнения стоками
ливневых, фекальных и промышленных нечистот. По мере удаления от населенных пунктов число микробов
постепенно уменьшается. Наиболее чистыми являются воды глубоких артезианских скважин и родников.
Вода имеет эпидемиологическое значение как фактор передачи инфекций. Наблюдались водные
эпидемии холеры, брюшного тифа, лептоспирозов и других инфекционных болезней.
Санитарно-гюказательными микроорганизмами для воды являются бактерии группы кишечной палочки
(БГКП), принадлежащие к разным родам семейства энтеробактерий. Санитарно-микробиологическое состояние
воды оценивается по следующим показателям:
1) микробное число - общее количество бактерий в 1 мл воды;
2) коли-титр - наименьший объем воды в миллилитрах, в котором обнаруживаются БГКП;
3) коли-индекс - количество БГКП в 1 литре воды;
4) кроме того, в воде определяют наличие патогенных и условнопатогенных микроорганизмов:
энтерококков, сальмонелл, холерного вибриона, энтеровирусов.
В соответствии с ГОСТом на питьевую водопроводную воду, микробное число ее должно быть не более
100, коли-титр должен быть не ниже 300, коли-индекс - не более 3.
Микрофлора воздуха
В воздух микробы попадают из почвы с поверхностей растений и животных, а также с промышленными
отходами некоторых предприятий. В отличие от воды и почвы, где микробы могут размножаться, в воздухе они
только сохраняются в течение некоторого времени, а затем гибнут вследствие высыхания и влияния солнечных
лучей. Устойчивые к таким воздействиям микроорганизмы могут долго сохраняться в воздухе. Это споры грибов,
споры бактерий, сарцины и другие кокки, образующие пигменты. Больше всего микробов в воздухе
промышленных городов, меньше всего - в воздухе лесов и гор. В открытом воздухе количество микробов летом
больше, чем зимой, в воздухе закрытых помещений - наоборот.
Воздух может служить фактором передачи патогенных микробов: стафилококков, стрептококков, палочек
дифтерии, коклюша, туберкулеза, а также вирусов кори, гриппа. Передача воздушно-капельным и воздушно-
пылевым путем почти всегда происходит в закрытых помещениях и редко - на открытом воздухе.
Показатели санитарно-микробиологического состояния воздуха закрытых помещений:
- микробное число - количество микробов, обнаруженных в 1 м 3 воздуха;
- наличие санитарно-показательных бактерий: Streptococcus haeraolyticus и Staphylococcus aureus.
Чистота воздуха зависит от своевременного проветривания помещения и влажной уборки. Применяется
обработка воздуха бактерицидными УФ-лампами. Для уменьшения контаминации воздуха применяют марлевые
и ватно-марлевые маски.
Микроорганизмы пищевых продуктов
Пищевые продукты и готовые блюда являются благоприятной средой для размножения микроорганизмов.
Некоторые пищевые продукты содержат специфические виды микробов, необходимые для технологии их
изготовления, например молочнокислые микробы в кисломолочных продуктах, квашеных овощах, некоторых
напитках. Неспецифическая микрофлора - это микробы, случайно попавшие в пищевые продукты из внешней
среды. Одни из них не оказывают действия на пищевые продукты, другие вызывают их порчу.
Пищевые продукты могут быть факторами передачи возбудителей кишечных инфекций: дизентерии,
холеры, брюшного тифа, а также сибирской язвы, бруцеллеза, Ку-лихорадки и других.
Попадание в пищевые продукты и размножение в них сальмонелл, стафилококков, возбудителей
ботулизма приводит к возникновению у человека пищевых токсикоинфекций и интоксикаций.
Для санитарно-микробиологической оценки пищевых прдуктов определяют микробное число и
санитарно-показательные микроорганизмы (БГКП), а также наличие патогенных микробов. Санитарно-
микробиологические показатели некоторых молочных продуктов, колбасных, консервированных изделий и
других продуктов нормированы ГОСТами.
Микрофлора различных объектов
Разнообразные предметы в окружении человека можно разделить на три группы: бытовые,
производственные и медицинские. В медицинских учреждениях, кроме бытовых предметов, имеются специфи-
ческие медицинские объекты. Это медицинские инструменты, оборудование, перевязочный и шовный материал,
лекарственные средства, дезинфицирующие растворы, халаты, предметы ухода за больными. В этих объектах
могут быть обнаружены как безвредные для человека, так и условно-патогенные и патогенные бактерии.
Некоторые возбудители инфекционных заболеваний (легионеллы, синегнойная палочка, протей, иерсинии)
способны размножаться в ванных комнатах, душевых, раковинах, кондиционерах. Другие микроорганизмы, не
размножаясь в объектах внешней среды, могут сохраняться здесь в течение сроков, достаточных для того, чтобы
могло произойти заражение. Возбудители кори, коклюша могут сохраняться в течение нескольких минут,
возбудители туберкулеза - месяцами, а споры палочки сибирской язвы - годами.
Санитарно-микробиологические иследования проводятся в медицинских и детских учреждениях,
предприятиях общественного питания и пищевой торговой сети. Определяют бактериологическую заг-
рязненность рук работающего персонала и предметов окружающей обстановки путем исследования микрофлоры
смывов. В смывах определяют: общее микробное число, наличие БГКП, протея, энтерококка, синегнойной
палочки, стафилококка и других патогенных бактерий.
Роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе, в возникновении и существовании
биосферы
На Земле с момента ее возникновения совершается процесс превращения и перемещения веществ,
происходит взаимодействие живых существ с неживой природой, а также зеленых растений с животным миром.
Роль зеленых растений в том, что они путем фотосинтеза строят органические соединения из минеральных
веществ. Кроме того, разлагая диоксид углерода, они выделяют в окружающую среду свободный кислород.
Животные и бесхлорофильные растения, лишенные способности строить белок из неорганических соединений,
нуждаются в готовых органических веществах и питаются растениями или другими животными. Они постепенно
разлагают органические вещества, накопленные зелеными растениями, до более простых соединений с ос-
вобождением большого количества энергии. При этом они используют кислород, который выделяют зеленые
растения.
Эта простая и стройная схема взаимоотношений зеленых растений, животных и неживой природы не
может объяснить равновесия между живой и неживой природой. Остается неясной причина минерализации
органических веществ с образованием таких окисленных неорганических соединений, как вода, углекислота,
минеральные соли, вполне пригодные для питания растений. В организме животных и ра стений не все
органические вещества окисляются до этих продуктов. С мочой и испражнениями животных, с остатками
растений и трупами животных в почву попадает огромное количество органических веществ, непригодных для
питания растений. Эти органические остатки завалили бы Землю и сделали бы невозможной дальнейшую жизнь
на ней, если бы они не разрушались и не вступали вновь в круговорот веществ в природе. Этот важнейший
процесс минерализации органических соединений осуществляют микробы. Они постепенно разлагают сложные
органические соединения на простые, доступные для питания растений, и таким образом обеспечивают
завершение круговорота углерода, азота, фосфора, серы и других элементов. Первым, кто указал на роль
микробов как необходимых посредников между живой и неживой природой, был Пастер. Большую роль в
изучении участия микробов в круговороте веществ сыграли работы Сергея Николаевича Виноградского и
Мартинуса Виллема Бейеринка.
Круговорот азота (рис. 10). С остатками растений, с трупами животных в почву попадают сложные
азотсодержащие соединения, главным образом, белки. Эти вещества подвергаются гниению (аммонификации) с
участием гнилостных микроорганизмов. Аэробные гнилостные бактерии (В. subtilis, В. niesentericus, Proteus
vulgaris) осуществляют гидролиз белков до аминокислот, затем до конечных продуктов: сероводорода, аммиака и
др. При действии анаэробных гнилостных микробов преобладают восстановительные процессы, и распад бел ков
идет не до конечных продуктов. Разложение мочевины осуществляют уробактерии, с образованием аммиака и
углекислоты. Аммонийные соли подвергаются дальнейшему окислению нитрифицирующими бактериями. Этот
процесс идет в два этапа: 1) одни бактерии окисляют аммонийные соли до нитритов; 2) другие бактерии
окисляют нитриты до нитратов. Две фазы нитрификации - это пример метабиоза: один микроб живет, используя
продукты жизнедеятельности другого микроба. Азотнокислые соли наилучшим образом усваиваются
растениями, поэтому образование нитратов повышает плодородие почвы.
В почве происходит обратный процесс денитрификации - разложение нитритов и нитратов
денитрифицирующими бактериями с выделением свободного азота, что приводит к снижению плодородия
почвы.
В то же время имеются микроорганизмы, которые усваивают атмосферный азот и синтезируют
азотсодержащие органические соединения. Это две группы микробов: свободноживущие почвенные азот-
фиксирующие бактерии и клубеньковые бактерии, живущие в симбиозе с бобовыми растениями, образуя
клубеньки на корнях. Азотфиксиру-ющие бактерии обогащают почву азотом, повышая ее плодородие.
Круговорот углерода. Зеленые растения и фотосинтезирующие бактерии усваивают диоксид углерода
(СО2) атмосферного воздуха, синтезируя углеводы (глюкозу, фруктозу), полимерные соединения: целлюлозу,
крахмал, пектин. Образовавшиеся органические соединения используются человеком и животными для питания.
После гибели растений и животных органические вещества попадают в почву.
Возвращение диоксида углерода в атмосферу происходит в процессе окисления аэробными
микроорганизмами углеводов с образованием СО2, в процессе брожения. Микробная природа брожений была
впервые установлена Пастером. В зависимости от образующихся продуктов различают следующие виды
брожения: спиртовое, уксуснокислое, молочнокислое, маслянокислое, а также разложение целлюлозы
(клетчатки). Микроорганизмы, вызывающие брожение, имеют промышленное значение.
Спиртовое брожение - распад углеводов с образованием этилового спирта и диоксида углерода -
вызывают дрожжевые грибы. Этот вид брожения известен давно и используется при изготовлении спирт ных
напитков.
Уксуснокислые бактерии окисляют этиловый спирт в аэробных условиях до уксусной кислоты. Они
используются в промышленности, но при попадании в вино или пиво могут приводить к их порче.
Молочнокислое брожение вызывают лактобактерии. Конечным продуктом процесса является молочная
кислота, которая губительно действует на гнилостные микробы кишечника. Молочнокислые бактерии
применяют для изготовления кисломолочных продуктов: простокваши, йогурта, ацидофилина. Препарат
лактобактерии, применяемый для устранения дисбактериоза, содержит культуру живых молочнокислых
бактерий.
Маслянокислое брожение осуществляют анаэробные бактерии. Конечным продуктом брожения является
масляная кислота, образование которой вызывает порчу консервированных продуктов.
Процессы разложения клетчатки, составляющей оболочку растительных клеток, и брожение пектина -
межклеточного вещества растений - имеют большое значение в круговороте углерода в природе.
Круговорот серы, фосфора, железа
Круговорот серы совершается в результате жизнедеятельности бактерий, причем одни из них окисляют
серу, другие - восстанавливают.
Фосфор освобождается из органических соединений в результате процессов гниения. Фосфорные
бактерии, находящиеся в почве и в воде, в процессе своей жизнедеятельности переводят нерастворимые
соединения фосфора в растворимые.
Круговорот железа осуществляют железобактерии, живущие в воде. Они используют растворимые соли
железа как источник энергии, окисляя их до окисных соединений, нерастворимых в воде. Образующийся осадок
откладывается в оболочке бактерий. Иногда большое количество железобактерий, накапливаясь в просветах
водопроводных труб, вызывает их сужение и закупорку.
Микробиологические аспекты охраны окружающей среды
Задачей охраны окружающей среды является сохранение экологического равновесия в биосфере.
Микробиологические аспекты состоят в следующем:
1) охрана микроорганизмов, участвующих в круговороте веществ в природе. Сброс в почву и воду
промышленных и автомобильных отходов приводит к гибели почвенных микробов, осуществляющих процессы
минерализации органических веществ, а это в свою очередь, ведет к накоплению неразложившихся органических
веществ, к уменьшению количества нитратов в почве, снижению ее плодородия.
2) охрана микроорганизмов, осуществляющих биодеградацию, то есть разрушение вредных для человека
веществ, которые обычно не встречаются в природе и попадают во внешнюю среду в результате деятельности
человека. С другой стороны, подавление развития микроорганизмов, вызывающих порчу пищевых продуктов и
лекарств или разрушение различных материалов и приборов;
3) защита биосферы от загрязнения (контаминации) патогенными и условно-патогенными
микроорганизмами.
С прогрессом науки возникают новые аспекты. С развитием генетической инженерии возникла проблема
защиты природы от искусственно полученных рекомбинантов, а с освоением космоса - защита от заноса на нашу
планету внеземных и попадания в космос земных микроорганизмов.

ГЛАВА 9.
ВЛИЯНИЕ ФАКТОРОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ НА МИКРООРГАНИЗМЫ
Находясь во взаимосвязи с различными объектами окружающей среды, микробы постоянно подвергаются
ее воздействию.
На микроорганизмы оказывают влияние факторы внешней среды:
1) физические (температура, высушивание, излучения, ультразвук, осмотическое давление);
2) химические (различные вещества):
3) биологические (другие виды микробов и вирусы).
Влияние физических факторов
Температура. Следует различать 1) температурные условия, при которых микроорганизмы растут и
размножаются и 2) температурные границы, при которых микроорганизмы остаются живыми. Понятно, что во
втором случае диапазон температур шире.
1) В зависимости от температурных условий, которые требуют микроорганизмы для своего роста и
размножения, различают три группы: психрофилы, растущие при низкой температуре, мезофилы - при сред ней, и
термофилы - при высокой температуре
Для психрофилов оптимальная температура для роста 10-15°С. минимальная 0-5°С, максимальная 25-
30°С. Большинство из них свободноживущие и паразиты холоднокровных животных, по есть и патогенные для
человека, например, иерсинии, псевдомонады. Они размножаются при температуре бытового холодильника и
более вирулентны при низких температурах.
Мезофилы размножаются преимущественно в организме теплокровных животных и человека.
Оптимальная температура для их роста 30-37°С, максимальная 43-45°С, минимальная 15-20°С. Большинство па-
тогенных микроорганизмов относятся к мезофилам. В окружающей среде они обычно не размножаются, но могут
сохраняться живыми.
Для термофилов оптимальная температура для роста 50-60°С, минимальная равна 45°С максимальная
90°С. Термофильные бактерии живут в юрячей воде гейзеров. Они не размножаются в организме человека.
2) Температурные зоны гибели микроорганизмов шире, чем температуры, при которых они могут расти.
Микроорганизмы более чувствительны к высоким температурам, при которых наступает их гибель
вследствие свертывания белков и повреждения ферментов. Вегетативные формы бактерии погибают при 60-80°С
в течение часа, при 100°С - через 1 минуту. Споры бактерий устойчивы к 100°С, например, споры палочек
столбняка и ботулизма выдерживают кипячение в течение нескольких часов. Для того, чтобы убить споры,
создают температуру сухого жара 160-170°С, пара под давлением 120-134°С. Высокие температуры применяют
при стерилизации - обеспложивании различных материалов.
К низким температурам микроорганизмы более устойчивы. Многие из них переносят замораживание.
Холерный вибрион, сальмонеллы, кишечная палочка могут сохраняться во льду. Особенно устойчивы к низким
температурам споры бактерий и вирусы. В то же время есть виды микробов, не переносящих температуры ниже
20°С: менингококки, гонококки, возбудители коклюша, сифилиса.
Высушивание. Вода необходима для нормальной жизнедеятельности микробов, так как питательные
вещества поступают в клетку в растворенном виде. При недостатке воды рост микробов прекращается, хотя
некоторые их них остаются живыми в течение какого-то времени. Чувствительны к высушиванию менингококки,
гонококки, возбудители сифилиса, коклюша, гриппа; устойчивы стафилококки, возбудитель туберкулеза.
Наиболее устойчивы споры бактерий, так как вода в них находится в связанном состоянии. Для сохранения
живых микроорганизмов применяют метод лиофилизации - высушивание под вакуумом из замороженного
состояния. Лиофилизированные живые культуры микроорганизмов, вакцины, биопрепараты в течение ряда лет
сохраняются, не изменяя своих свойств.
Действие излучений. Ионизирующая радиация - гамма-излучение радиоактивных веществ и электроны
высоких энергий - губительно действуют на микроорганизмы, хотя смертельные дозы для них выше, чем для
животных и растений. Ионизирующие излучения применяют для стерилизации одноразовых пластиковых
шприцев и посуды, питательных сред, лекарственных препаратов.
Неионизирующие излучения - ультрафиолетовые лучи - повреждают микроорганизмы в большей
степени, чем животных и растения. УФ-лучи повреждают геном микробных клеток, что приводит их к гибели.
Для обеззараживания воздуха в лечебных учреждениях и в микробиологических лабораториях применяются
бактерицидные лампы ультрафиолетового излучения.
Ультразвук при определенной частоте вызывает разрушение структуры микробных клеток вследствие
образования кавитационных полостей и может применяться как метод обработки пищевых продуктов.
Осмотическое давление, его постоянство, имеет большое значение для жизни микробов. При
повышении или понижении осмотического давления происходит разрыв клеточной мембраны и гибель клеток.
Повышенные концентрации солей задерживают развитие микроорганизмов, особенно гнилостных, что
используется для сохранения впрок пищевых продуктов: овощей, грибов, рыбы, мяса. На том же принципе
основано применение концентрированных растворов сахара в варенье, сиропах. Концентрированные растворы
лекарственных средств растительного происхождения являются более стойкими сравнительно с разведенными
растворами.
Высокое атмосферное давление не оказывает значительного действия на микроорганизмы.
Влияние химических факторов
Химические вещества, оказывающие антимикробное действие, применяются для дезинфекции - от des
(французской приставки, означающей отрицание) и inficere (лат. - заражать). С помощью дезинфекции
производится уничтожение возбудителей инфекционных болезней на зараженных объектах внешней среды.
Дезинфицирующие вещества являются общетоксическими ядами, в отличие от химеотерапевтическнх
средств и антибиотиков, оказывающих избирательное действие на микроорганизмы. Механизм действия
дезинфицирующих веществ в основном заключается в нарушении физико-химической структуры микробной
клетки
Окислители (хлор и его соединения, вещества, содержащие йод, перекись водорода) обладают
повышенной способностью окислять органические соединения в микробной клетке, что приводит к ее гибели.
Вещества, свертывающие белок (фенол, крезол, гексахлорофен, лизол, спирты, соли тяжелых металлов,
например, сулема), проникая в микробную клетку, вступают в соединение с ее белками, денатурируют их и таким
образом нарушают жизненные функции микроорганизма.
Детергенты (поверхностно-активные вещества (ПАВ)) - вещества, обладающие высокой поверхностной
активностью, моющим, а многие из них и антимикробным действием - мыла, моющие средства. Вы сокой
активностью обладают четвертичные аммониевые основания (ЧАО), вызывающие повреждение клеточной
стенки бактерий, не проникая внутрь клетки.
Некоторые металлы в незначительных количествах обладают выраженным антимикробным действием
(серебро, медь, золото и другие). Объясняется это тем, что они выделяют в воду ноны Такое явление называют
олигодинамическим действием (греч. oligos - малый). Достаточно ничтожною количества ионов в жидкости,
чтобы они концентрировались на поверхности микробов и, изменив ее заряд с "-" на "+", оказывали
антимикробное действие.
Выбор способа дезинфекции зависит от биологичсских свойств микроба и от той среды, в которой он
находится. Например, сулема мало пригодна для дезинфекции белковых субстратов, таких как гной. кровь,
мокрота. Под влиянием сулемы происходит свертывание белков, и свернувшийся белок предохраняет микробов
от действия дезин-фектанта. Этиловый спирт используют для обеззараживания рук, различных предметов, для
консервации биологических объектом. Наиболее выражено бактерицидное действие 70%-ного спирта, поскольку
чистый спирт вызывает свертывание поверхностных белков бактерий и не проникает внутрь клетки.
Значительным бактерицидным действием обладает гексахлорофен, причем грамположительные кокки
более чувствительны к нему, чем грамотрицательнве палочки. Гексахлорофен применяется для обеззараживания
кожи в виде мыла, содержащею 2-5% этого вещества; для санации полости носа в виде мази, содержащей 1%, для
санации носоглотки путем орошения с целью борьбы со стафилококковым носительством - 0,1%-ный раствор.
Влияние биологических факторов
Микроорганизмы в природе являются составной частью биоценоза, развиваясь совместно с растениями,
животными, другими видами бактерий, грибов, вирусов. Взаимоотношения различных микроорганизмов между
собой могут быть взаимовыгодными, например, при совместном культивировании дрожжей к молочнокислых
бактерий они развиваются лучше, чем каждый в отдельности. Возможна стимуляция размножения одного
микроорганизма другим. Например, размножение палочки чумы усиливается в присутствии сарцин. Во многих
случаях один вид микробов в результате своей жизнедеятельности создает благоприятные условия для развития
другого вида. Например, развитие анаэробов в почве невозможно без аэробов, которые поглощают кислород
почвы.
В процессе эволюции у микробов выработались также антагонистические отношения. Молочнокислые
бактерии являются антагонистами гнилостных микробов, бактерий дизентерии. Некоторые микроорганизмы
вырабатывают вещества, угнетающие и убивающие микробов других видов, так называемые бактериоцины.
Явления антагонизма используются в медицине с целью получения антибиотиков и создания препаратов
для бактериотерапии.
Асептика, антисептика, дезинфекция, стерилизация
Асептика - комплекс мероприятий, направленных на предупреждение попадания микробов в рану, или в
пробирку с питательной средой, в ампулу с лекарственным средством и т.д.
Антисептика - способ обеззараживания ран, операционного поля, рук хирурга, а также воздействие на
инфекцию в организме пациента с помощью химических веществ - антисептиков.
Дезинфекция - уничтожение патогенных микробов в окружающей среде и различных объектах с целью
прервать путь передачи и распространения инфекционного заболевания. Для дезинфекции используют
химические вещества, лучевые и другие воздействия.
Стерилизация - процесс, направленный на полное уничтожение всех микроорганизмов в каком-либо
объекте. Для стерилизации используют физические, химические методы и их сочетание.
К физическим способам относятся: стерилизация высокой температурой, УФ-облучением,
ионизирующим излучением, ультразвуком, фильтрованием через бактериальные фильтры.
Наиболее часто применяют следующие методы
Стерилизация высокой температурой
Прокаливание на огне. Это надежный метод стерилизации, но он имеет ограниченное применение из-за
порчи предметов. Таким способом стерилизуются бактериологические петли.
Стерилизация сухим жаром. Проводится в печи Пастера (сухожаровой шкаф) при температуре 160-
170°С в течение 1-го часа. Этим способом стерилизуют лабораторную стеклянную посуду, пипетки, завернутые в
бумагу, пробирки, закрытые ватными пробками. При температуре выше 170°С начинается обугливание бумаги,
ваты, марли.
Стерилизация паром под давлением (автоклавирование). Наиболее универсальный метод
стерилизации. Проводится в автоклаве - водо-паровом стерилизаторе. Принцип действия автоклава основан на за -
висимости температуры кипения воды от давления.
Автоклав представляет собой двустенный металлический котел с герметически закрывающейся крышкой.
На дно автоклава наливают воду, в рабочую камеру помещают стерилизуемые предметы, закрывают крышку,
сначала не завинчивая ее герметически. Включают нагревание и доводят воду до кипения. Образующийся при
этом пар вытесняет из рабочей камеры воздух, который выходит наружу через открытый выпускной кран. Когда
весь воздух будет вытеснен, и из крана пойдет непрерывной струей пар, кран закрывают, крышку закрывают
герметически. Доводят пар до нужного давления под контролем манометра. Температура пара зависит от
давления: при нормальном атмосферном давлении стрелка манометра стоит на 0 атм. - температура пара 100°С,
при 0,5 атм. - 112°С, при 1 атм. -121°С, при 1,5 атм. - 127°С, при 2 атм. - 134°С. По окончании стерилизации
автоклав отключают, ждут, пока давление не снизится, выпускают постепенно пар и открывают крышку. Обычно
при давлении 1 атм. в течение 20-40 минут стерилизуют простые питательные среды и растворы, не содержащие
белков и углеводов, перевязочный материал, белье. Стерилизуемые материалы должны быть проницаемы для
пара. При стерилизации материалов в больших объемах (хирургические материалы) время увеличивают до 2
часов. При давлении 2 атм. производят обеззараживание патологического материала и отработанных культур
микробов.
Питательные среды, содержащие сахара, нельзя стерилизовать при 1 атм., так как они карамелизуются,
поэтому их подвергают дробной стерилизации текучим паром, или автоклавированнию при 0,5 атм.
Для контроля режима стерилизации применяются биологический и физический методы. Биологичесжй
метод основан на том, что одновременно со стерилизуемым материалом помещают споры Bacillus
stearothermophilus, которые погибают при 121°С за 15 минут. После проведения стерилизации споры не должны
дать рост на питательной среде. Физический метод основан на применении веществ, имеющих определенную
точку плавления, например, серу (119°С), бензойную кислоту (120°С). Запаянные трубки, содержащие вещество в
смеси с сухим красителем (фуксин) помещают в автоклав вместе со стерилизуемым материалом. Если
температура в автоклаве достаточна, вещество расплавится и окрасится в цвет красителя.
Стерилизация текучим паром_проводится в аппарате Коха или в автоклаве при незавинченной крышке
и открытом выпускном кране. Воду в аппарате нагревают до 100°С. Образующийся пар проходит через
заложенный материал и стерилизует его. Однократная обработка при 100°С не убивает споры. Поэтому
применяют дробный метод стерилизации - 3 дня подряд по 30 минут, в промежутках оставляя на сутки при
комнатной температуре. Прогревание при 100°С вызывает тепловую активацию спор, вследствие чего они
прорастают до следующего дня в вегетативные формы и погибают при втором и третьем прогревании.
Вследствие этого стерилизация текучим паром могут подвергаться только питательные среды, т.к. для
прорастания спор необходимо наличие питательных веществ.
Для материалов, разрушающихся при 100°С (например, сыворотки, питательные среды, содержащие
белок) применяют другой вид дробной стерилизации - тиндализацию. Стерилизуемый материал прогревают на
водяной бане при 56-60°С в течение 5-6 дней подряд - в первый день в течение 2 часов, в остальные дни по 1
часу.
Стерилизация облучением
УФ-лучи. Лампы ультрафиолетового излучения используют для обеззараживания воздуха лечебных
учреждений, бактериологических боксов и лабораторий, а также для стерилизации жидкостей с помощью особых
аппаратов.
Стерилизации ионизирующим излучением подвергаются в медицинской и микробиологической
промышленности разнообразные объекты: лекарственные средства, перевязочные материалы, шелк,
хирургические перчатки, одноразовые шприцы, пластмассовые трубки для внутривенного введения и многие
другие материалы.
Применение ионизирующей радиации имеет ряд преимуществ перед тепловой стерилизацией. При
стерилизации с помощью ионизирующего излучения температура стерилизуемого объекта поднимается
незначительно, в связи с чем такие методы называют холодной стерилизацией. При стерилизации в больших
масштабах может быть создан конвейер. Материалы стерилизуют в упакованном виде. Имеется два вида
оборудования для облучения - гамма-установки с кобальтом-60 и ускорители электронов.
Химическая и физико-химическая стерилизация
Химическую стерилизацию применяют для обработки рук хирурга, операционного поля пациента,
хирургических инструментов и перчаток, анестезирующих масок. Применяют некоторые дезинфицирующие
средства, хлоргексидин и многие другие вещества.
Газовую стерилизацию проводят с помощью таких веществ, как окись этилена, метилбромид, окись
пропилена, формальдегид, глютаральдегид, бета-пропиолактан, озон и другие. Такие вещества вводят в
небольшое замкнутое пространство (автоклав, специальный контейнер), куда предварительно помещают
стерилизуемые объекты. Газовая стерилизация - более сложный процесс, чем стерилизация с помощью высокой
температуры и требует более строгого контроля.
Для упаковки объектов применяют материал, через который легко проходят газ и влага, но не проходят
мелкая пыль и микроорганизмы. Лучше всего применять прозрачные полимерные пленки, через которые можно
видеть предметы, не нарушая целостности упаковки. При проведении биологического контроля газовой
стерилизации применяются материалы, содержащие лиофилизированные живые культуры золотистого
стафилококка, кишечной палочки и споры сенной палочки.
После стерилизации для удаления газа камеры продувают стерильным воздухом, а затем выдерживают
стерилизованный материал в течение нескольких суток. Проводится контроль остаточной концентрации газа в
материале, так как газы токсичны,
Физико-химические методы - это сочетание физических и химических воздействий на микроорганизмы,
например, действие дезинфицирующего вещества и нагревания.
Методы частичного обеспложивания
Кипячение - применяется для обработки шприцев, игл, инструментов. Стерилизацию проводят в течение
30 минут в специальных стерилизаторах для инструментов, в воду для устранения ее жесткости и повышения
температуры кипения рекомендуется добавить 1-2% бикарбоната натрия. При кипячении споры бактерий не
погибают, поэтому для стерилизации питательных сред этот способ не применяется. Подлежащие кипячению
инструменты подвергаются обработке специальными мющими растворами для удаления крови и т.п.
Пастеризация. Метод был предложен Пастером для частичного обеспложивания жидкостей, теряющих
свои качества под действием высокой температуры. Применяется для обработки вина, молока, дру гих пищевых
продуктов. При прогревании жидкости при 50-60°С в течение 30 минут, 70-80°С 5-10 минут и 90°С 2 минуты
погибает большинство бесспоровых микробов. Споры остаются живыми. Поэтому во избежание их прорастания
пастеризованный продукт необходимо хранить в холодильнике.
Холодная стерилизация
Фильтрование - освобождение жидкостей от микробов, применяется в тех случаях, когда материал не
может быть подвергнут нагреванию. Фильтры должны быть настолько мелкопористыми, чтобы задерживать
микробы. Бактериальные фильтры изготавливаются из мелкопористых веществ в виде фарфоровых свечей,
асбестовых пластинок Зейтца или мембранных фильтров. Фильтрование производят, создавая с помощью насоса
разрежение в приемнике. Перед употреблением фильтрующее устройство должно быть простерилизовано.
Вирусы проходят через бактериальные фильтры, поэтому метод фильтрования можно отнести к методам
частичного обеспложивания. Этот метод используют не только для стерилизации питательных сред и растворов,
но и для того, чтобы освободить от микробов токсины, антибиотики, бактериофаги, вирусы.

ГЛАВА 10. ГЕНЕТИКА МИКРООРГАНИЗМОВ


Организация генетического материала у бактерий. Генотип и фенотип
Материальной основой наследственности бактерий является ДНК. По сравнению с геном ом эукариотов
геном бактерий устроен более просто - это молекула ДНК, замкнутая в кольцо, которое прикреплено к одной из
мезосом. В отличие от парных хромосом эукариотов, у бактерий одна хромосома, то есть гаплоидный набор
генов, поэтому у них нет явления доминантности.
Кроме хромосомы, у бактерий имеются внехромосомные генетические элементы - плазмиды. Это
молекулы ДНК, которые или находятся вне хромосомы, в автономном состоянии, в виде колец, прикрепленных к
мезосомам, или встроены в хромосому (интегрированное состояние). Плазмиды придают бактерии
дополнительные наследственные признаки, но не являются обязательными для нее. Плазмида может быть
элиминирована (удалена) из бактерии, что не влияет на ее жизнеспособность.
В настоящее время известно свыше 20 типов плазмид у бактерий. Назовем некоторые из них :
F-плазмида, фактор фертильности (лат. fertilis - плодовитый), или половой фактор, определяет
способность бактерий к образованию половых ворсинок и к конъюгации.
R-плазмиды определяют резистентность бактерий к лекарственным средствам. Передача R-плазмид от
одних бактерий к другим приводит к быстрому распространению лекарственноустойчивых бактерий.
Col-плазмиды кодируют синтез бактериоцинов - антибактериальных веществ, вызывающих гибель других
бактерий того же илиродственных видов. Впервые они были обнаружены у Escherichia соН,отсюда и их название
- колицины. Известны бактериоцины стафилококков (стафилоцины), палочек чумы (пестицины) и других бакте-
рий. Наличие плазмиды бактериоциногенности придает бактериям селективные преимущества в биоценозах. Это
может иметь для организма человека положительное значение, если колицины кишечной палочки губительно
действуют на патогенные энтеробактерии, и отрицательное, если бактериоцины продуцируются патогенными
микробами.
Ent-плазмиды определяют продукцию энтеротоксина. Н1у-плаз-мида - гемолитическую активность.
Дополнительными генетическими элементами являются также профаги - геномы умеренных фагов,
которые, встраиваясь в хромосому бактерии, могут придавать ей определенные свойства. Например, tox-гены,
кодирующие образование экзотоксинов коринебактерий дифтерии, клостридий ботулизма и др.
Генотип - это общая сумма генов микроба. В отношении микроорганизмов "генотип" означает то же, что
"геном".
Фенотип - это весь комплекс свойств микроба, проявление генотипа в определенных, конкретных
условиях существования.
Генотип - это возможные способности клетки, а фенотип - видимое их проявление.
Гены, ответственные за синтез какого-то соединения, обозначают строчными буквами латинского
алфавита по названию соединения, например, при наличии гена, кодирующего синтез лейцина, - ieu+, при
отсутствии - leu-. Гены, ответственные за резистентность к лекарственным средствам, бактериофагам, ядам,
обозначают буквой г (лат. resistentia), а чувствительные - буквой s (лат. sensitiv - чувствительный). Например,
чувствительность к стрептомицину обозначают str5, резистентность strr. Фенотип бактерий обозначается теми же
знаками, но с прописной буквы: соотвественно Leu+, Leir, Str1, Str8.
Изменчивость микроорганизмов
Наследственность - способность сохранения постоянства специфических свойств организма на
протяжении ряда поколений, то есть способность воспроизводить себе подобных.
Изменчивость - различие в свойствах между особями одного вида. Различают изменчивость
наследственную и ненаследственную.
Ненаследственная или фенотипическая изменчивость (модификации) не затрагивает геном микроба, не
передается по наследству. Модификации возникают в ответ на изменяющиеся условия окружающей среды. При
устранении фактора, вызвавшего модификацию, изменение исчезает. Например, кишечная палочка только в
присутствии лактозы продуцирует ферменты, разлагающие этот углевод. Стафилококки образуют фермент,
разрушающий пенициллин, только в присутствии этого антибиотика. Примером модификаций является также
образование L-форм бактерий под действием пенициллина и возврат к исходной форме после прекращения его
действия.
Наследственная или генотипическая изменчивость возникает в результате изменения самого генома.
Изменение генома может наступить в результате мутаций или рекомбинаций.
Мутации (лат. mutatio - изменение) - изменение последовательности нуклеотидов в молекуле ДНК, в
результате которого происходит появление или потеря признака. Таким признаком может быть способность
синтезировать какую-либо аминокислоту или резистентность к антибиотику.
По происхождению мутации могут быть спонтанными или индуцированными. Индуцированные мутации
получают в эксперименте под влиянием мутагенов: радиации, некоторых химических веществ. Спонтанные
мутации возникают под влиянием естественных факторов. Частота спонтанных мутаций невелика, в среднем 1 на
10 млн. Об-

разевавшиеся микробы называют мутантами. Если возникшая мутация выгодна для микроба и создает для
него преимущества в определенных условиях среды, то мутанты выживают и дают многочисленное потомство.
Если же мутация не создает преимуществ, мутанты погибают.
Мутации микроорганизмов могут иметь важное практическое значение. Получены штаммы-мутанты
грибов и актиномицетов, являющиеся продуцентами антибиотиков во много раз более активных, чем исходные
культуры. Из мутантов с ослабленной вирулентностью могут быть получены вакцинные штаммы для получения
живых вакцин.
Диссоциация бактерий (лат. dissociatio - расщепление) - одно из проявлений мутаций. В популяции
микроорганизмов появляются особи, вырастающие при посеве на плотную питательную среду в виде гладких S-
форм и шероховатых R-форм колоний (англ, smooth - гладкий, rough - шероховатый). S-формы колоний -
круглые, влажные, с гладкой блестящей поверхностью, с ровными краями. R-формы колоний неправильной
формы, сухие, с изрезанными краями и шероховатой поверхностью.
Процесс диссоциации, то есть расщепления особей в популяции, обычно протекает в одном направлении:
от S- к R-форме, иногда через промежуточные формы. У большинства видов бактерий вирулентными являются S-
формы. Исключение составляют возбудители,чумы, сибирской язвы, туберкулеза.
Генетические рекомбинации
Генетические рекомбинации - (лат. recombinatio - перестановка) у бактерий - это передача
генетического материала (ДНК) от клетки-донора к клетке-реципиенту, в результате появляются рекомбинанты с
новыми свойствами.
Известны три типа генетических рекомбинаций: трансформация, трансдукция, конъюгация (рис.11, табл.
2).
Трансформация (лат. transforma-tio - превращение) - передача ДНК в виде свободного растворимого ве-
щества, выделенного из клетки донора, в клетку реципиента. При этом рекомбинация происходит, если ДНК
донора и реципиента родственны друг другу, и может произойти обмен гомологичных участков своей и
проникшей извне ДНК. Впервые явление трансформации открыл Ф. Гриффите в 1928 г. Он ввел мышам живой
невирулентный бескапсульный штамм пневмококка и одновременно убитый вирулентный кап-сульный штамм
пневмококка Мыши погибли, из их крови была выделена живая культура вирулентного капсульного пневмококка
Сам Гриффите считал, что трансформация произошла путем поглощения невирулентным пневмококком
капсульного вещества вирулентного штамма Позже, в 1944 г О Эвери, К Мак Леод и М Мак-Карти доказали, что
трансформирующее вещество - это ДНК, которая является носителем генетической информации Гак впервые
была доказана роль ДНК как материального субстрата наследственности
Трансдукция (лат transductio - перенос) - передача ДНК от бактерии-донора к бактерии-реципиенту с
помощью бактериофага Различают неспецифическую трансдукцию, специфическую и абортивную
При неспецифической трансдукции может быть перенесен любой фрагмент ДНК донора При этом ДНК
донора попадает в головку бактериофага, не включаясь в его геном Принесенный бактериофагом фрагмент ДНК
донора может включиться в хромосому реципиента Таким образом, бактериофаг в этом случае является только
переносчиком ДНК, сама фаговая ДНК не участвует в образовании рекомбинанта
При специфической трансдукции гены хромосомы донора замещают собою некторые гены бактериофага
В клетке реципиента фаговая ДНК вместе с фрагментом хромосомы донора включается в строго определенные
участки хромосомы реципиента в виде профага Реципиент становится лизогенным и приобретает новые свойства
Трансдукция называется абортивной, если фрагмент ДНК, принесенный бактериофагом, не вступает в
рекомбинацию с хромосомой реципиента, а остается в цитоплазме и может кодировать синтез како го-то
вещества, но не реплцируется при делении, передается только одной из двух дочерних клеток и затем
утрачивается.
Конъюгация (лат. conjugatio - соединение) - это переход ДНК из клетки-донора ("мужской") в клетку-
реципиент ("женскую") через половые пили при контакте клеток между собой. Донором является "мужская"
клетка (F+-клетка), она содержит F-фактор - половой фактор, который кодирует образование половых пилей.
Клетки, не содержащие F-фактора (F--клетки), являются женскими. При конъюгации клетки-доноры соединяются
с клетками-реципиентами с помощью F-пилей, через которые происходит переход ДНК. Если клетка-реципиент
получает F-фактор, она становится "мужской" F+-клеткой.
Если F-фактор включен в хромосому, то бактерии способны передавать фрагменты хромосомы и
называются Hfr-клетками (англ, high frequency of recombination - высокая частота рекомбинации). При конъ-
югации хромосома разрывается в месте нахождения F-фактора и реплицируется, причем одна нить ДНК
передается в клетку реципиента, а копия остается в клетке донора. F-фактор включается в хромосому в опре-
деленном ее участке, поэтому перенос отдельных генов хромосомы совершается в строго определенное время.
Таким образом, прерывая процесс конъюгации через разные промежутки времени путем встряхивания взвеси
бактерий, можно выяснить, какие признаки передаются за это время. Это позволяет построить карту хромосомы,
то есть последовательность расположения генов в хромосоме. Перенос всей хромосомы может длиться до 100
минут. F-фактор при этом переносится последним.
Особенности генетики вирусов
Модификации. Ненаследуемые изменения у многих вирусов происходят в результате включения в состав
их внешней оболочки липидов и углеводов клеток хозяина, в которых вирус репродуцируется.
Мутации. Спонтанные мутации возникают в результате ошибок при репликации генома вируса.
Индуцированные мутации происходят под действием мутагенов. Одни из них (азотистая кислота) влияют на
внеклеточный вирион, другие (акридин, аналоги азотистых оснований) - на процесс репликации вирусной
нуклеиновой кислоты в клетке. Мутанты отличаются от исходных вирусов по строению и величине бляшек,
которые они образуют в культуре клеток, по антигенам, по чувствительности к температуре.
Рекомбинации. При одновременном паразитировании двух вирусов в одной клетке хозяина возможен
обмен генетическим материалом между ними. В результате генетической рекомбинации происходит обмен
участками HK между разными вирусами, и образуются рекомбинанты, обладающие генами двух исходных
вирусов. Вирус гриппа имеет геном, состоящий из восьми фрагментов РНК. При одновременной репродукции в
одной клетке двух разных вирусов гриппа между ними может происходить обмен генами. Образовавшинеся
рекомби-нанты будут представлять собой новый тип вируса гриппа.
При одновременном паразитировании двух видов вируса в одной клетке в момент формирования зрелых
вирионов возможно фенотипическое смешивание, когда геном одного вируса одевается капсидом другого вируса
(феномен транскапсидации). Так, например, известны случаи, когда геном вируса иммунодефицита человека
(ВИЧ) оказывается включенным в белковый капсид другого вируса. В результате такой вирус приобретает
способность поражать такие виды клеток, которые были нечувствительны к исходному вирусу.
Практическое значение учения о генетике микробов
При микробиологической диагностике инфекционных заболеваний возникают затруднения в определении
вида атипичных микробов, например, бактерий дизентерии, не агглютинирующихся сыворотками. Для их
идентификации приходится применять другие методы.
В процессе лечения больных инфекционными болезнями создаются препятствия в виде устойчивости
возбудителей к антибиотикам, и требуются специальные методы для преодоления лекарственной устойчивости.
Селекция в условиях стационаров штаммов микроорганизмов, обладающих множественной лекарственной
устойчивостью и высокой вирулентностью для человека, привело к формированию так называемых
«госпитальных» штаммов, вызывающих внутрибольничныс инфекции. Такие штаммы известны среди
стафилококков, а также среди сальмонелл и других грамотрицательных палочек.
Методами направленной мутации и селекции получены живые вакцины, с успехом применяющиеся для
профилактики инфекционных болезней.
Достижения молекулярной генетики используются для современных методов идентификации микробов:
методы индикации нуклеиновых кислот, полимеразная цепная реакция (ПЦР). Полимеразная цепная реакция
является высокочувствительной реакцией, т.к. позволяет увеличить число копий исследуемой цепи ДНК в сотни
тысяч раз за несколько часов. ПЦР может быть использована особенно тогда, когда в исследуемом материале
имеется очень малые концентрации возбудителя или трудно выделить чистую культуру, а также при его высокой
антигенной изменчивости.
Генетическая инженерия
Генетическая инженерия основана на создании рекомбинантных организмов, содержащих встроенные в
их хромосому гены, кодирующие продукцию необходимых для производства соединений.
Последовательные этапы рекомбинации:
1) получение ДНК. Участки ДНК, то есть гены, кодирующие синтез необходимого вещества, выделяют из
хромосомы путем разрезания ферментами (рестриктазами). В некоторых случаях удается получить методом
химического синтеза небольшие гены, аналогичные природным;
2) полученный ген (отрезок ДНК) с помощью ферментов (лигаз) соединяют ("сшивают") с другим
отрезком ДНК, который будет служить вектором для встраивания гибридного гена в клетку. В качестве вектора
можно использовать плазмиды, бактериофаги, вирусы;
3) вектор, несущий встроенный в него ген, встраивается в бактериальную или животную клетку, которая
приобретает способность продуцировать не свойственное этой клетке вещество. В качестве таких реципиентов
используют клетки Е. coli, P. aeruginosa, дрожжи, вирус осповакцины. Подбирая подходящего реципиента,
учитывают выраженность синтеза необходимого вещества. Некоторые штаммы бактерий, получивших чужой
ген, способны переключать половину своего потенциала на синтез соединения, кодируемого этим геном. Учиты-
вается также возможность секреции вещества в окружающую среду, возможность культивирования в
промышленных масштабах, экологическая безопасность.
Биологические препараты, полученные методом генетической инженерии: интерфероны,
интерлейкины, инсулин, гормон роста, вакцина против гепатита В, антигены ВИЧ для диагностики и другие
препараты.
Методы генетической инженерии перспективны:
- для получения антигенов с целью диагностики заболеваний, возбудители которых или не
культивируются на питательных средах (сифилис, малярия) или опасны для культивирования;
- для получения препаратов, сырье для которых дорогостоящее или дефицитное: интерфероны, инсулин,
гормон роста, интерлейкины и другие цитокины, регулирующие иммунитет, а также антитела.
ГЛАВА11. АНТИБИОТИКИ
По современной классификации, термин «антибиотики» объединяет все лекарственные препараты,
избирательно подавляющие микроорганизмы и не повреждающие органы и клетки человека. Их разделяют на
следующие группы:
а) природные - продуцируемые живыми организмами;
б) полусинтетические - полученные в результате модификации структуры природных антибиотиков;
в) синтетические - полученные методом синтеза (прежнее их название - химиотерапевтические средства).
Исторически сложилось так, что вначале были получены синтетические препараты, получившие название
химиотерапевтических, а лечение этими препаратами - химиотерапии. Основоположником химиотерапии
является немецкий химик Пауль Эрлих (1854-1915), который установил возможность создания химических
соединений, избирательно действующих на определенные виды микробов. Первыми химиотерапевтическими
средствами, синтезированными Эрлихом, были
сальварсан и неосальварсан, обладающие противосифилитическим действием. Эрлих сформулировал
основные положения химиотерапии, понятие об этиотропном лечении (греч. aitia - причина), направленном
против возбудителей заболевания, а также впервые обнаружил явление лекарственной устойчивости микробов.
В 1932 г. Г. Домагк синтезировал первый сульфаниламидный препарат - стрептоцид. В дальнейшем были
получены препараты биологического происхождения, по своей антимикробной активности на несколько
порядков превосходящие синтетические препараты. Их действие основано на антагонизме микробов. Чаще всего
антагонизм наблюдается среди почвенных микробов. Еще в 1887 г. Л. Пастер обнаружил подавление роста
бацилл сибирской язвы гнилостными бактериями при совместном их выращивании. Идея об антагонизме микро-
бов нашла практическое применение в трудах И.И. Мечникова, предложившего использовать антагонистическое
действие молочнокислых бактерий на гнилостные микробы кишечника и путем введения лакто-бактерий
изменять кишечную флору. Идея И.И. Мечникова о возможности и целесообразности направленного изменения
кишечной микрофлоры и об использовании с этой целью микробов-антагонистов лежит в основе
бактериотераиии (лечения живыми микробами) п современного учения об антибиотиках.
В 1929 г. английский микробиолог А. Флеминг обнаружил на чашках Петри лизис колоний золотистого
стафилококка вблизи плесени Penicillium notatum и показал, что фильтрат бульонной культуры этой плесени
обладал антибактериальным действием в отношении грампо-ложительных бактерий. Однако препарат
пенициллина получили лишь в 1941 г. Г.У. Флори и Э. Чейн. В Советском Союзе пенициллин был получен З.В.
Ермольевой в 1942 г. из плесени Penicillium crustosum.
Вслед за получением пенициллина начались и продолжаются в настоящее время широкие поиски новых
антибиотических веществ природного происхождения и получение высокоактивных синтетических препаратов.
Синтезированные в последнее время фторхинолоны по своей активности приближаются к антибиотикам
природного происхождения.
Для оценки пригодности антибиотика к применению служит химиотерапевтический индекс. Величина
индекса определяется по формуле:

Максимально переносимая доза (Dosis tolerantia)


ХТИ = -------------------------------------------------------------
Минимальная терапевтическая доза (Dosis curavita)
ХТИ должен быть не менее 3.
Природные и полусинтетические антибиотики
Природные антибиотики продуцируются живыми организмами (продуцентами). В зависимости от
источника получения различают несколько групп природных антибиотиков:
1) антибиотики, продуцентами которых являются микроскопические грибы: пенициллин, цефалоспорин,
фузидин, гризеофульвин;
2) антибиотики, полученные из актиномицетов: стрептомицин, тетрациклины, неомицин, эритромицин и
другие;
3) антибиотики, полученные из бактерий: полимиксины;
4) антибиотики, полученные из животных тканей: люоцим (из белка куриного яйца), интерферон
(продуцируется донорскими лейкоцитами), эктерицид (из рыбьего жира);
5) антибиотики, полученные из растений (фитонциды): хлорофиллипт - из эвкалипта, сальвин - из
шалфея.
Полусинтетические антибиотики получают путем модификации структуры природных антибиотиков, с
целью придания препарату новых полезных свойств. Так, природный пенициллин имеет недостат ки: быстро
выводится из организма, разрушается в желудочно-кишечном тракте, имеет узкий спектр действия, разрушается
бета-лакта-мазой - ферментом, выделяемым устойчивыми к пенициллину бактериями. Получены
полусинтетические препараты пенициллина: 1) устойчивые к действию бета-лактамазы (оксациллин); 2)
устойчивые к действию желудочного сока (феноксиметилпенициллин); 3) пенициллины широкого спектра
действия (амнициллин, амоксициллин, карбенициллин); 4) пенициллины пролонгированного действия
(бициллины).
Получен целый ряд полусинтетических цефалоспоринов.
Химиотерапевтические средства (синтетические антибиотики)
К антимикробным препаратам, полученным методом синтеза, относятся:
сульфаниламиды: сульфадимезин, уросульфан, сульфазин, фталазол, сульгин, сульфадиметоксин и
другие;
- комбинированные препараты сульфаниламидов с триметопримом: бактрим (бисептол),
сульфатон;производные нитроимидазола: метрони-дазол (трихопол);
- производные нитрофурана (фурацилин, фурадонин, фурагин);
- хинолины (производные 8-оксихинолина): нитроксолин (5-НОК);
- хинолоны I поколения: налидиксовая кислота (невиграмон), пипемидиновая кислота (полин);
хинолоны II поколения (фторхинолоны): ципрофлоксацин (ципробай), офлоксацин, перфлоксацин,
норфлоксацин.
Аналогами природных антибиотиков являются синтетические препараты: левомицетин, циклосерин.
По химическому составу антибиотики подразделяют на несколько групп.
1) бета-лактамные антибиотики - гетероциклические соединения с бета-лактамным кольцом. К этой
группе относятся пенициллины и цефалоспорины.
2) Тетрациклины: окситетрациклин, хлортетрациклин, доксицик-
лин, метациклин, вибромицин, морфоциклин. Содержат четыре бензольных кольца с радикалами.
3) Аминогликозиды. К ним относится группа стрептомицина и его производные: неомицин, канамицин.
Аминогликозиды II поколения: тобрамицин, сизомицин; III поколения: нетилмицин, амнкацин.
4) Полипептиды - полимиксин.
5) Макролиды - соединения, содержащие макроциклическое лак-тонное кольцо: эритромицин,
азитромицин (сумамед).
6) Анзамицины - рифампицин.
7) Полиеновые антибиотики - нистатин, леворин, амфотерицин В, имеющие двойные связи СН=СН.
Спектр активности антибиотиков
Спектр активности - это перечень видов микробов, на которые препарат оказывает действие. Принято
делить антибиотики по спектру активности в зависимости от того, на какие микробы они действуют:
антибактериальные, противогрибковые, противовирусные, противоопухолевые. При этом различают
антибиотики широкого и узкого спектра действия.
Антибактериальные антибиотики. Сюда относится большинство препаратов. К антибиотикам узкого
спектра активности относится бен-зилпенициллин, который оказывает действие на гноеродные кокки, некоторые
грамположительные палочки и на спирохеты. Полимиксин действует только на грамотрицательные бактерии.
Антибиотики широкого спектра действия активны в отношении многих грамположительных и
грамотрицательных бактерий, а некоторые из них - также в отношении риккетсий, хламидий, микоплазм. К
антибиотикам широкого спектра действия относятся тетрациклины, левомицетин, аминогликозиды, макролиды.
Противогрибковые антибиотики. Это леворин, гризеофульвин. Широким спектром действия обладает
амфотерицин В, активный при многих микозах, в том числе глубоких. Нистатин - антибиотик узкого спектра
действия, активен в отношении грибов рода Кандида.
Противовирусный природный антибиотик животного происхождения - интерферон. Это
низкомолекулярный белок, образуется в клетках организма или в культуре клеток под действием индукторов
инерферона и является одним из факторов неспецифнческой противовирусной защиты. Индукторами могут быть
не только вирусы, но и бактерии, ЛПС бактерий, некоторые лекарственные средства. В начале изучения
интерферона было открыто его противовирусное действие, в дальнейшем было обнаружено несколько типов
интерферонов и многообразное их действие: противовирусное, противоопухолевое, иммуномодулирующее,
радиопротекторное. Интерферон неспецифичен в отношении вида вируса, но обладает видовой специфичностью.
Поэтому для лечения человека эффективен интерферон, выделяемый культурой человеческих клеток.
Интерферон не оказывает непосредственного действия на вирус, но подавляет синтез вирусных белков в клетке и
таким образом препятствует образованию вирионов. Известно несколько типов интерферона, из которых в
качестве противовирусного средства применяется лейкоцитарный а-интерферон.
С помощью методов генетической инженерии получен рекомби-нантный интерферон - реаферон.
Противоопухолевые антибиотики задерживают размножение или оказывают цитотоксическое действие на
опухолевые и быстроразмножающиеся нормальные клетки организма, подавляя синтез нуклеиновых кислот или
белка. Это митомицин С, рубомицин, оливомицин и многие другие, применяющиеся при определенных видах
опухолей.
Активность каждого антибиотика определяется по его действию на соответствующий тест-микроб. За
единицу активности (ЕД) для большинства антибиотиков принимают специфическую активность, содержащуюся
в 1 мкг чистого вещества. Для пенициллина 1 мкг = 1,67 БД, для нистатина 1 мкг = 4 ЕД.
Типы и механизмы действия
Различают бактерицидное и бактериостатическое действие:
- бактериостатическое (лат. stasis - стояние) - задержка роста бактерий;
- бактерицидное (лат. caedere - убивать) - губительное действие на бактерии.
Бактериостатическое действие обнаруживается по его обратимости: после пересева бактерий в свежую
питательную среду без препарата наблюдается рост бактерий. При бактерицидном действии пересев на свежую
среду не дает роста.
Тот или иной тип действия зависит от характера препарата и от дозы. Как правило, при малых дозах
препарата наблюдается бактериостатическое действие, при больших - бактерицидное. Но есть исключения.
Например, налидиксовая кислота в малых дозах повреждает ДНК и таким образом оказывает бактерицидное
действие, а в больших дозах повреждает РНК, вызывает нарушение биосинтеза белка, что ведет к
бактериостатическому действию. Большинство антибиотиков обладает бактерицидной активностью.
Преимущественно бактериостатическое действие оказывают тетрациклины, левомицетин, макролиды.
По механизму действия различают следующие группы антибиотиков:
1) антибиотики, подавляющие синтез клеточной стенки бактерий: пенициллин, цефалоспорины,
циклосерин. Пенициллин нарушает процесс образования полимерного соединения - пептидогликана, поэтому
действует на молодые растущие клетки бактерий. Поскольку клетки человеческого организма не содержат
пептидогликана, пеницилин не повреждает их;
2) антибиотики, нарушающие функции цитоплазматической мембраны: полимиксины, а также
полиеновые противогрибковые антибиотики: нистатин, леворин, амфотерицин В. Полиеновые антибиотики
адсорбируются на цитоплзматической мембране, взаимодействуют со стерольным компонентом, повышают
проницаемость мембраны, что приводит к нарушению водно-солевого обмена клетки и к ее гибели. У бактерий и
риккетсий в мембране нет стеролов, поэтому эти микроорганизмы нечувствительны к полиеновым антибиотикам;
3) антибиотики, ингибирующие синтез белка на рибосомах бактериальных клеток: аминогликозиды,
тетрациклины, левомицетин, макролиды. Перечисленные антибиотики блокируют рибосомы бактериальной
клетки и не оказывают действия на рибосомы клеток человека вследствие различий в структуре и молекулярной
массе рибосом прокариотов и эукариотов.
4) антибиотики, ингибирующие РНК-полпмеразы - рифампицин, подавляющий синтез РНК на матрице
ДНК;
5) антибиотики, вызывающие лизис клеточной стенки бактерий - лизоцим.
Механизм действия многих химиотерапевтических препаратов связан с тем, что они являются
антиметаболитами, то есть структурными аналогами важнейших метаболитов, участвующих в обмене веществ
бактерий. Будучи сходными с метаболитом, они вытесняют его из обменного процесса, но не обеспечивают
нормального его течения. Так, сульфаниламиды являются структурными аналогами парааминобензойной
кислоты (ПАБК) - кофермента фолпевой кислоты. Норсульфазол - аналог тиамина (витамина В1).
Противотуберкулезные препараты - гидразиды изоникотиновой кислоты (ГИНК) - аналоги изоникотиновой
кислоты.
Иной механизм действия производных нитрофурана, которые нарушают процесс биологического
окисления микробов. Особенно высокой активностью обладают фторхинолоновые препараты, которые по-
давляют синтез ДНК микробов.
Мишенями действия противовирусных препаратов являются какие-либо этапы репродукции вируса в
клетке хозяина. Так, ремантадин повреждает процесс депротеинизации - "раздевания" вируса, а также биосинтез
вирусного белка на рибосомах клетки. Ингибиторы проте-аз (е-аминокапроновая кислота) нарушает процесс
расщепления белка вируса гриппа, препятствуя таким образом репликации вируса. Рибавирин (виразол), будучи
структурным аналогом пуриновых оснований, нарушает репликацию вирусных нуклеиновых кислот. Азидоти-
мидин подавляет процесс обратной транскрипции, присущий ретро-вирусам, к которым относится вирус
иммунодефицита человека (ВИЧ).
Побочные явления при антибиотикотерапии
К настоящему времени получено несколько тысяч антибиотиков, но для лечения больных применяется
только несколько десятков, так как многие антибиотики оказывают вредное воздействие на организм. И даже те,
которые нашли практическое применение, не лишены нежелательных реакций. Различают следующие виды
побочных действий антибиотиков.
1) Прямое токсическое действие: стрептомицин оказывает токсическое действие на почки и на слуховой
нерв; тетрациклин вызывает поражение печени, задержку развития костей и зубов; левомицетин подавляет
процесс кроветворения, а также отрицательно влияет на внугриутробное развитие гшода.
2) Обострение течения болезни, повышение температуры, так называемая лихорадка Герца-Геймера, как
следствие освобождения сразу большого количества эндотоксинов из разрушенных бактерий.
3) Аллергические реакции вызывают пенициллин, цефалоспори-ны, стрептомицин и др. У людей с
повышенной чувствительностью к этим препаратам при их введении могут возникнуть такие явления, как сыпь,
зуд, крапивница, в тяжелых случаях - анафилактический шок, который требует оказания немедленной
медицинской помощи. Koнтактный дерматит может развиваться как профессиональная болезнь на предприятиях,
изготовляющих антибиотики.
4) Дисбактериоз - нарушение состава нормальной микрофлоры организма. Возникает при лечении
больного антибиотиками широкого спектра действия, которые подавляют рост не только возбудителей болезни,
но и представителей нормальной микрофлоры организма. Следствием этого может быть гиповитаминоз. Кроме
того, вследствие дисбактериоза могут развиваться вторичные инфекции, вызванные грибами или бактериями,
размножение которых подавлялось микробами-антагонистами. Например, грибы рода Кандида, нечувстви-
тельные к антибактериальным препаратам, при гибели микробов-антагонистов начинают безудержно
размножаться и вызывают вторичную инфекцию - кандидоз. Вторичные инфекции вызывают также бактерии,
которые быстро приобретают устойчивость к антибиотикам, например, стафилококки.
5) Угнетение образования антител может наблюдаться по двум причинам. Во-первых, при лечении
антибиотиками возбудитель гибнет в самом начале болезни, поэтому организм не формирует иммунный ответ.
Это наблюдается, например, при лечении левомицетином больных брюшным тифом и при лечении
пенициллином больных скарлатиной. Поэтому рекомендуется сочетать лечение антибиотиками со средствами,
стимулирующими иммунитет. Во-вторых, некоторые антибиотики, в частности, левомицетин, угнетают
биосинтез белка и, следовательно, образование антител.
Лекарственная устойчивость микробов
Под устойчивостью микробов к антибактериальному препарату понимают сохранение способности
размножаться при таких концентрациях этого препарата, которые создаются при введении в организм
терапевтических доз.
Типы антибиотикоустойчивости:
1) природная, свойственная данному виду микробов;
2) приобретенная: а) первичная; б) вторичная.
1) Природная устойчивость обусловлена свойствами данного вида микробов и механизмом действия
антибиотика Например, устойчивость грамотрицательных палочек к бензилпенициллину или грибов - к
антибактериальным препаратам.
2) Приобретенная устойчивость. Устойчивость называют приобретенной в тех случаях, когда появляются
варианты устойчивых микробов, принадлежащих к виду, по природе своей чувствительному к данному
антибиотику. Например, появление стафилококков, устойчивых к пенициллину.
Первичной называют устойчивость, которая обнаруживается с самого начала болезни, так как произошло
заражение антибиотикоустойчивым возбудителем. Вторичная устойчивость развивается в течение болезни.
Генетические механизмы антибиотикорезистентности: 1) хромосомная и 2) плазмидная.
1) Хромосомная антибиотикорезистентность. В популяции чувствительных бактерий появляются
единичные клетки-мутанты, устойчивые к данному антибиотику, причем это происходит не под действием
антибиотика Обычно мутанты в отсутствие антибиотика через какое-то время погибают. Если же популяция
подвергается действию антибиотика, то чувствительные бактерии погибают, а устойчивые выживают и дают
начало резистентной популяции, то есть происходит селекция.
2) Плазмидная антибиотикорезистентность связана с R-плазмидами. Это обычно множественная
устойчивость, сразу к нескольким антибиотикам. R-плазмиды могут передаваться бактериям тогЪ же вида или
другого вида или даже рода. Например, дизентерийные бактерии могут стать устойчивыми к нескольким
антибиотикам, получив R-плазмиду от дизентерийных или от кишечных палочек путем рекомбинации.
Фенотипические проявления антибиотикорезистентности. Устойчивость бактерий к антибиотикам
реализуется за счет следующих механизмов:
1) образование специфических ферментов, разрушающих данный антибиотик. Так фермент р-лактамаза
разрушает р-лактамное кольцо пенициллинов и цефалоспоринов. Этот фермент продуцируют стафило кокки с
приобретенной резистентностью к пенициллину. Устойчивость к левомицетину и аминогликозидам связана с
продукцией ферментов трансфераз;
2) снижение проницаемости клеточной стенки для данного антибиотика, например, для тетрациклина, или
нарушение транспортного механизма цитоплазмагической мембраны;
3) формирование обходного пути метаболизма взамен поврежденного антибиотиком;
4) изменение структуры мишени действия антибиотика;
5) превращение бактерий в L-формы, лишенные клеточной стенки, но способные к реверсии, то есть к
обратному превращению в обычные формы.
Устойчивость микробов к антибиотикам в клинике имеет важное значение, так как снижает
эффективность лечения. Само по себе возникновение хромосомных мутаций и R-плазмид не связано с открытием
антибиотиков и внедрением их в практику. Но антибиотики играют роль фактора отбора устойчивых микробов.
Поэтому бесконтрольное, неоправданное, без соответствующих показаний, применение антибиотиков
способствует массовой селекции и распространению антибиотикорезистентных бактерий. Кроме того, этому
способствует применение антибиотиков в животноводстве и птицеводстве с целью ускорения роста животных и
птиц.
Преодоление и предупреждение развития лекарственной устойчивости. Для ограничения
распространения лекарственноустойчивых бактерий и повышения эффективности лечения применяются
следующие меры:
- получение новых антибиотиков с иным механизмом действия;
- лечение больных с учетом чувствительности возбудителей к антибиотикам;
- применение для лечения сочетания антибиотиков с разным механизмом действия;
- применение антибиотиков только при наличии соотвествующих показаний;
- использование в животноводстве и птицеводстве только таких антибиотиков, которые в медицине не
применяются;
- для подавления действия продуцируемых бактериями ферментов, разрушающих антибиотики,
используются ингибиторы ферментов. Так, клавулановая кислота и клавуланаты, а также сульбактам ингибируют
фермент р-лактамазу. Рекомендуется применять ингибиторы вместе с антибиотиком против возбудителя,
устойчивого к антибиотику. Например, амоксициллин + клавуланат (препарат аугментин), ампициллин +
сульбактам (уназин).
Определение чувствительности микробов к антибиотикам
Существует несколько методов: метод серийных разведении, метод стандартных дисков, ускоренные
методы. При этом материал от больного должен быть взят до начала лечения антибиотиками.
Метод стандартных дисков (метод диффузии в агар) - наиболее простой и широко применяемый. Это
качественный метод, позволяющий определить, к каким антибиотикам чувствителен микроб, выделенный от
больного. Испытуемую культуру засевают сплошным газоном на
чашку с питательным агаром. Затем на поверхность агара помещают бумажные диски, пропитанные
антибиотиками. После суточного ин-кубирования в термостате измеряют диаметр зон задержки роста вокруг
каждого диска и по таблице проводят оценку результата.
Определение проводят с чистыми культурами бактерий. Однако в некоторых случаях для быстрого
получения ориентировочных результатов используют непосредственно патологический материал.
Метод серийных разведении является более точным, количественным, так как позволяет определить не
только антибиотики, к которым чувствителен микроб, но и минимальную подавляющую концентрацию (МПК)
антибиотика. Для проведения исследования необходима чистая культура испытуемого микроба.
Метод серийных разведении в жидкой питательной среде. В ряду пробирок с жидкой питательной
средой готовят последовательные разведения антибиотика. Контролем служит пробирка с питательной средой
без антибиотика. Затем в каждую пробирку засевают определенное количество испытуемых микробов. После
суточного инкубирования в термостате учитывают результат: отмечают последнюю пробирку с полной
задержкой роста. Концентрация антибиотика в этой пробирке является МПК.
Метод серийных разведении на плотной питательной среде. В пробирках с расплавленной агаровой
питательной средой готовят последовательные разведения антибиотика, затем выливают в чашки. После
застывания агара производят посев испытуемых микробов (по одной петле из разведения 10 7 микробных тел в 1
мл). На каждую чашку можно засеять до 20 культур. Контролем служит чашка с питательной средой без
антибиотика. После суточного инкубирования в термостате учитывают результат по последней чашке с
задержкой роста.

ГЛАВА 12. МИКРОФЛОРА ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА


Взаимоотношения микробов и макроорганизма
В отличие от свободноживущих микробов, которые адаптировались к условиям существования на
неживых объектах внешней среды, микробы-симбионты в процессе эволюции приспособились к условиям
симбиоза (греч. simbiosis - сожительство) с организмом хозяина. Различают формы симбиоза: мутуализм,
комменсализм, паразитизм.
Мутуализм (лат. mutuus - взаимный) - взаимно полезное сожительство. Например, для человека
полезными симбионтами являются молочнокислые бактерии - антагонисты гнилостной микрофлоры кишечника.
Комменсализм (фр. commensal - сотрапезник) - сожительство, односторонне полезное для одного из
симбионтов, не причиняющее вреда другому. Например, комменсалом человека является непатогенная кишечная
амеба, питающаяся остатками пищи и не причиняющая человеку вреда.
Эти две формы симбиоза характерны для нормальной микрофлоры организма здорового человека.
Паразитизм (греч. parasites - нахлебник) - взаимоотношения, при которых микроорганизм, питаясь за
счет хозяина, причиняет ему вред. К паразитам относятся микробы - возбудители инфекционных заболеваний.
Характеристика микрофлоры организма человека
Микрофлора организма человека является результатом взаимного приспособления в процессе
взаимодействия микроорганизмов и хозяина. Все многообразие микробов, встречающихся в организме человека,
можно условно разделить на три группы:
Транзиторная микрофлора - микробы, случайно попавшие в организм, не имеющие приспособлений для
выживания в нем.
Резидентная микрофлора - микробы постоянно живущие, приспособившиеся к существованию в
определенных областях организма, преимущественно полезные для него.
Условно-патогенные, способные вызвать заболевание при ослаблении сопротивляемости организма, при
нарушении нормальной микрофлоры.
Организм ребенка при рождении свободен от микробов, но уже в процессе родов и в первые дни жизни
микробы заселяют поверхность тела, ротовую полость, дыхательные пути, кишечник. В дальнейшем при
взаимодействии микробов с организмом ребенка, в результате взаимной адаптации одни микробы будут удалены,
другие приживутся. При этом для каждой области организма характерны определенные виды.
Свободны от микрофлоры кровь и внутренние органы, не сообщающиеся с внешней средой, такие как
мозг, сердце, печень, селезенка и другие. В норме не имеют резидентной микробной флоры такие орга ны, как
матка, мочевой пузырь, легкие.
Микрофлора кожи. На поверхности кожи обитают, главным образом, транзиторные микробы: сарцины,
стафилококки, коринебактерии; в глубоких слоях кожи постоянным обитателем является эпидермальный
стафилококк. Кожа, в особенности чистая, обладает бактерицидностью благодаря действию выделений потовых
и сальных желез.
Полость рта наиболее богата по разнообразию видов бактерий, грибов, простейших, вирусов.
Постоянные обитатели способны к адгезии - прикреплению к поверхности зубов или слизистой оболочки. Состав
микрофлоры зависит от состояния организма, от состава пищи, от гигиены полости рта.
Микрофлора желудка бедна. Несмотря на то, что несколько раз и день в желудок попадает большое
количество микробов, многие из них
погибают иод действием желудочного сока. Могут встречаться в небольшом количестве сарцины,
дрожжи. При пониженной кислотности желудочного сока число микробов возрастает.
Микрофлора тонкой кишки небогата вследствие бактерицидных свойств кишечного секрета.
Микрофлора толстой кишки наиболее обильна по количеству микробов. Состав ее формируется в
течение первых месяцев жизни и зависит от способа вскармливания. Вскоре после рождения у грудных детей,
питающихся молоком матери, формируется стабильная кишечная микрофлора, состоящая, в основном, из
анаэробных неспоровых грам-положительных Bacterium bifidum и факультативно-анаэробных молочнокислых
грамположительных Bacterium acidophilum. Эта бифидум-флора является основой микрофлоры толстой кишки
здоровых детей первых месяцев жизни. В этом возрасте такие обычные для взрослых бактерии, как кишечная
палочка, могут вызвать патологический процесс. Поэтому даже лечебные препараты, содержащие живые кишеч-
ные палочки (колибактерин, бифпкол) назначаются только после 6-месячного возраста.
У детей, вскармливаемых искусственно, в кишечной флоре, кроме молочнокислых бактерий, встречаются
кишечные палочки, стафилококки, энтерококки, другие микробы, и у таких детей чаще возникают кишечные
заболевания.
У более старших детей и у взрослых в кишечной микрофлоре также преобладают анаэробы:
грамположительные бифидумбактерии и грамотрицательные анаэробные бактероиды. На них приходится 96-99%
всей микрофлоры. От 1 до 4% составляют факультативные анаэробы - кишечные палочки, энтерококки,
лактобактерии; на долю остаточной микрофлоры - стафилококков, протея, дрожжей, клостридий -приходится
менее 1%.
Микрофлора толстой кишки, в основном, является полезной для человека. Бактерии, тесно связанные со
слизистой оболочкой благодаря адгезии (главным образом, бифидо- и лактобактерии), образуют на ее
поверхности биологическую пленку, препятствующую размножению и проникновению патогенных микробов.
Кроме того, микробная флора является антагонистом гнилостной микрофлоры, а также играет роль в водно-
солевом обмене, в превращении пищеварительных ферментов, в продукции витаминов.
Микрофлора дыхательных путей. Микроорганизмы, содержащиеся во вдыхаемом воздухе, большей
частью погибают в полости носа. Постоянными обитателями здесь являются микрококки, стафилококки,
дифтероиды, нейссерии. Трахея и бронхи свободны от постоянной микрофлоры.
Микрофлора конъюнктивы глаза, благодаря бактерицидному действию лизоцима очень бедна. В
небольшом количестве встречаются Corynebacterium xerosis, стафилококки.
Микрофлора мочеполовой системы. В нижней части мочеиспуска-
тельного канала встречаются бактероиды, коринебактерии, микобактерии, кишечные палочки. На
наружных половых органах обнаруживаются микобактерии смегмы, сходные по морфологии с палочками ту-
беркулеза, и непатогенные трепонемы, которые следует отличать от возбудителя сифилиса.
Микрофлора влагалища у новорожденных девочек состоит из молочнокислых бактерий, полученных от
матери в момент рождения. У девочек до периода полового созревания микрофлора влагалища не постоянна (в
основном, это кокки) и во многом зависит от гигиенических навыков ребенка. С наступлением половой зрелости
создаются благоприятные условия для развития грамположительной молочно-кислой бактерии, так называемой
палочки Додерлейна. Наличие этой палочки препятствует размножению других микробов. Поэтому следует
осторожно использовать антибактериальные средства, к которым чувствительны молочнокислые бактерии.
Различают четыре степени чистоты влагалищного секрета: I степень - реакция среды кислая, в мазке -
палочки Додерлейна, клетки плоского эпителия; II степень - реакция близка к нейтральной, в мазке палочки
Додерлейна, клетки плоского эпителия, небольшое количество других микробов; III степень - реакция
слабощелочная, в мазке палочек Додерлейна мало, преобладают кокки, много лейкоцитов; IV степень - палочек
Додерлейна нет, много лейкоцитов, кокков, палочек. Неблагоприятное действие на микрофлору влагалища
оказывают воспалительные процессы, аборт, нарушение гормонального состояния (диабет). Во время
беременности гормональная перестройка способствует нормализации влагалищной микрофлоры, развитию
молочнокислых бактерий, с которыми встречается новорожденный в процессе родов.
Значение микрофлоры организма человека Дисбактериоз
И.И. Мечников еще в 1907-1908 годах высказал предположение, что микрофлора организма может быть
для человека полезной, вредной или безразличной. Как правило, при физиологических условиях, в местах
обычного своего обитания, микроорганизмы оказывают положительное действие. Они обладают
антагонистическими свойствами по отношению к патогенным микробам; способствуют созреванию иммунной
системы; способствуют пищеварению; синтезируют некоторые витамины.
В то же время при попадании микробов в необычное место обитания возможно развитие воспалительного
процесса, например, перитонита при ранении в живот и повреждении кишечника. Кроме того, кишечные
микроорганизмы продуцируют вредные для человека продукты гниения. И, наконец, в процессе эволюционного
развития происходит отщепление патогенных вариантов бактерий, например, Е. coli.
Дисбактериоз - это нарушение количественного и качественного
состава нормальной микрофлоры. Причинами дисбактериоза могут быть:
- кишечные заболевания, например дизентерия;
- заболевания иной локализации;
- длительное применение антибиотиков и антисептиков, которые угнетают развитие одних видов
микробов и не влияют на другие; в результате наступает бесконкурентное размножение стафилококков, протея,
грибов Candida;
- снижение иммунитета, вызванное облучением, лечением иммунодепрессантами.
Чаще всего в клинической практике сталкиваются с дисбактериозом кишечника.
Диагноз дисбактериоза устанавливается бактериологическими исследованиями, путем посевов на
питательные среды и определения количественных соотношений разных видов микробов.
Дисбактериоз проявляется клинически примерно в половине случаев, в виде кишечных расстройств
Нормальная микрофлора кишечника, нарушенная из-за лечения антибиотиками, восстанавливается обычно в
течение месяца после прекращения лечения.
Для предотвращения и устранения дисбактериоза применяется бак-териотерапия с помощью
биологических бактериальных препаратов (ББП), в отношении которых применяются также термины: пробио-
тики, эубиотики. ББП содержат живые культуры бактерий: кишечной палочки, бифидобактерий, лактобактерий.
Колибактерин содержит живые Е. coli штамма М-17 - антагониста патогенных энтеробактерий.
Бифидумбакгерин содержит живые бифидумбактерии.
Бификол - сочетание колибактерина и бифидумбактерина
Лактобактерин - живые молочнокислые бактерии.
Препараты выпускаются в лиофилизированном виде, для применения per os или в клизмах. Эффект их
состоит в приживлении в кишечнике и замещении нормальной микрофлоры до ее восстановления.
Детям до 6-месячного возраста назначают препараты, не содержащие кишечную палочку. Взрослым же,
при нарушении состава аэробных бактерий назначаются колисодсржащие препараты, при на рушении состава
аэробных и анаэробных бактерий - бификол. При наличии язвенного процесса кишечника не назначаются
колисодержащие препараты.
ББП применяются также в виде вагинальных суппозиториев и гам-ионов - при нарушении вагинальной
микрофлоры.
Следует иметь в виду, что бактерии, входящие в состав ББП, чувствительны к определенным
антибиотикам и не могут применяться в сочетании с ними. Относительно более устойчивы лактобактерий.
Для нормализации микрофлоры кишечника применяются также бифидогенные средства,
благоприятствующие размножению собственных бифидобактерий. К таким препаратам относится лактулоза.

ГЛАВА 13. ИНФЕКЦИЯ


Инфекция (лат. inficere - заражать), или инфекционный процесс -это процесс взаимодействия патогенного
микроорганизма и восприимчивого макроорганизма (хозяина) в определенных условиях внешней среды. В
крайней своей форме инфекционный процесс выражается в виде инфекционного заболевания.
Попадание микроорганизма в организм человека не всегда приводит к заболеванию. Возникновение,
течение и исход инфекционного процесса зависят от трех основных условий. Это: I) свойства патогенного
микроорганизма; 2) состояние восприимчивого макроорганизма; 3) условия внешней среды. Кроме того, имеют
значение входные ворота инфекции и доза микробов.
Свойства патогенного микроорганизма
Патогенность (лат. pathos - страдание, греч. genesis - происхождение) буквально означает
болезнетворность, способность вызвать болезнь. Это видовой признак микроба, передающийся по наследству.
Патогенность - потенциальная способность, которая не всегда реализуется, а только при наличии определенных
условий. Существуют микроорганизмы безусловно патогенные, условно-патогенные и непатогенные, и резких
границ между ними нет. Для патогенных микробов характерна специфичность - способность вызывать
определенную болезнь. Туберкулез вызывает только туберкулезная палочка. Органотропность -способность
патогенного микроба паразитировать только в определенных органах и тканях. Так, холерный вибрион по ражает
слизистую оболочку тонкой кишки. В то же время стафилококки не обладают такой органотропностью и могут
поражать различные органы и ткани. Патогенность - это признак, который характеризует вид в целом. Например,
палочки дизентерии патогенны. Но внутри вида могут быть более или менее патогенные штаммы. Степень или
мера патогенности - это вирулентность. Вирулентность определяют на Лабораторных животных. Минимальная
смертельная доза, Dosis letalis minima (Dlm) - это минимальная доза, которая вызывает гибель всех зараженных
этой дозой животных. Более точной является срединная летальная доза (LD50), вызывающая гибель 50% взятых в
опыт животных. Этот показатель вычисляется математически по формуле.
Факторы (материальные основы) патогенности (вирулентности) микробов
Патогенность микробов обусловлена следующими свойствами:
- адгезивность и способность к колонизации;
- инвазивность;
- антифагоцитарная активность;
- токсинообразование.
Адгезивность (лат. adhaesio - прилипание) - способность микроба прикрепляться к определенным
клеткам. Адгезивность гра-мотриц*ательных бактерий связана с пилями общего типа, грамполо-жительных - с
белками и липотейхоевыми кислотами клеточной стенки.
Начало инфекционного процесса связано с адгезией и колонизацией - размножением на поверхности
чувствительных клеток.
Инвазивность - способность патогенных микробов проникать и распространяться в тканях организма.
Связана с выделением ферментов, разрушающих соединительную ткань или оболочки клеток.
Гиалуронидаза разрушает гиалуроновую кислоту - межклеточное вещество соединительной ткани,
коллагеназа - коллагеновые волокна, фибринолизин - фибрин, образующийся в очагах воспаления, му-циназа -
слизистое вещество, нейраминидаза - нейрамнновую (сиаловую) кислоту мембраны клеток.
Антифагоцитарная активность - способность противостоять фагоцитозу. Она связана с капсулой
патогенных микробов, с поверхностными белками (А-протеин стафилококка, М-протеин стрептококка), с
полисахаридной слизью синегнойной палочки.
Токсинообразование. Токсические вещества бактерий подразделяют на экзотоксины и эндотоксины.
Экзотоксины выделяются микробами в окружающую среду в процессе жизнедеятельности. Получают их
путем выращивания микробов на жидкой питательной среде с последующим фильтрованием через бак-
териальный фильтр или центрифугированием для получения бесклеточного фильтрата или центрифугата. По
химической природе это белки, в большинстве своем они термолабильны, разрушаются при 60°С. Экзотоксины
высокотоксичны. Сила их токсического действия измеряется в Dlm или LD50. Самый сильный из экзотоксинов -
ботулинический токсин. Очищенный кристаллический токсин в 1 мг содержит 100 млн. Dlm для белой мыши.
Для экзотоксинов характерна способность избирательно действовать на определенные органы и ткани.
Например, столбнячный токсин поражает двигательные нейроны. Клиническая картина заболевания
определяется избирательностью действия токсина.
Экзотоксины - сильные антигены, в ответ на них в организме вырабатываются антитела - антитоксины
(греч. anti - против), способные специфически нейтрализовывать именно тот токсин, в ответ на который они
образовались.
При комбинированном действии формалина и тепла экзотоксины теряют ядовитость, но сохраняют
антигенность. Таким образом получают анатоксины (греч. ana - подобно), или, как принято называть их в
зарубежной литературе, - токсоиды. Эти препараты используют с профилактической целью, для создания в
организме искусственного антитоксического иммунитета.
Бактерии, продуцирующие экзотоксин, называют токсигенными.
Это стафилококки, стрептококки, один из видов бактерий дизентерии, холерные вибрионы, палочки
дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции и другие.
Эндотоксины содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий, освобождаются при
разрушении микробной клетки. По химической природе это липополисахариды (ЛПС). Они термостабильны,
переносят кипячение и даже автоклавирование в нейтральной среде. Менее токсичны, чем экзотоксины.
Эндотоксины не обладают избирательностью действия. Независимо от того, из каких бактерий получены
эндотоксины, они вызывают однотипную клиническую картину. При больших дозах эндотоксина наблюдается
угнетение фагоцитоза, интоксикация, диарея, угнетение сердечной деятельности, понижение температуры тела.
При внутривенном и внутримышечном введении малых доз отмечается повышение температуры тела,
стимуляция фагоцитоза, активация комплемента по альтернативному пути, повышение проницаемости капил-
ляров.
Эндотоксины грамотрицательных бактерий применяются в качестве пирогенов (греч. pyr - жар) -
лекарственных препаратов, вызывающих повышение температуры тела, стимуляцию иммунитета. Это пирогенал,
колипироген и другие.
Наличие пирогенов недопустимо в лекарственных препаратах, предназначенных для внутривенного
введения. Пирогенный эффект может возникать вследствие присутствия в лекарственных препаратах
бактериальных эндотоксинов, не разрушенных при стерилизации.
Бактерии, содержащие эндотоксин, называют токсичными. Эндотоксины содержат грамотрицательные
бактерии: палочки дизентерии, брюшного тифа и др.
Некоторые бактерии одновременно образуют и экзо- и эндотоксины, например, кишечная палочка,
холерный вибрион.
Генетический контроль вирулентности. Образование факторов вирулентности контролируется
хромосомными или плазмидными генами. С плазмидами связаны, например, такие свойства, как продукция
гемоли-зинов и энтеротоксинов кишечной палочки. Образование экзотоксина холерного вибриона
контролируется хромосомными tox-генами. Среди палочек дифтерии токсигенными являются лизогенные
культуры, в составе хромосомы которых имеегся tox-ген, связанный с профагом.
Изменчивость вирулентности, а именно, ослабление ее может быть: 1) фенотипической, нестойкой,
связанной с неблагоприятными условиями культивирования и 2) генотипической, наследственной, обуслов-
ленной селекцией маловирулентных клеток из гетерогенной бактериальной популяции. Известный авирулентный
штамм БЦЖ был получен путем селекции из вирулентной культуры туберкулезных бактерий при многократных
пересевах на питательной среде, содержащей бычью желчь. Методы ослабления вирулентности патогенных
микроорганизмов применяются для получения живых вакцин.
Повышение вирулентности также происходит в результате селекции вирулентных бактерий при
культивировании маловирулентной популяции в благоприятных условиях или при пассажах через организм
чувствительного животного.
Значение состояния макроорганизма и условий внешней среды в инфекционном процессе
Для возникновения и течения инфекционного процесса имеет значение восприимчивость - видовая или
индивидуальная. Например, дети менее чувствительны к токсинам, для них более характерны септические
процессы. Имеет значение гормональное состояние: у больных сахарным диабетом чаще наблюдаются гнойно-
воспалительные процессы. Угнетенное состояние центральной нервной системы, физическое и умственное
переутомление способствуют возникновению и более тяжелому течению заболевания.
На восприимчивость к инфекционным болезням влияют климатические и погодные условия. Так, амебная
дизентерия обычно встречается в условиях жаркого климата; случаи скарлатины и дифтерии чаще наблюдаются
на севере.
Но на человека условия внешней среды влияют, как правило, не непосредственно, а опосредованно, через
социальные условия. Это, главным образом, условия быта, труда и состояние здравоохранения.
Большое значение имеет значение характер питания, обеспеченность витаминами, особенно витаминами
А, С, Г). При белковом голодании и авитаминозе наблюдается повышенная заболеваемость и неблагоприятное
течение туберкулеза, холеры, дизентерии.
На возникновение и течение инфекционных заболеваний оказывают влияние ионизирующая радиация,
ультрафиолетовое облучение, напряженность естественного геомагнитного поля.
Состояние здравоохранения, противоэпидемические мероприятия, организация и проведение массовых
прививок существенно влияют на возникновение и течение инфекционных болезней, особенно таких, как
дифтерия, полиомиелит, корь.
Входные ворота или место проникновения патогенного микроба в организм могут иметь значение для
возникновения заболевания или для формы его проявления. Так, возбудители холеры, дизентерии вызывают
заболевание при проникновении через рот, возбудитель гриппа - при попадании на слизистую оболочку верхних
дыхательных путей или глаз, гонококк - на слизистую оболочку мочеполовых органов или конъюнктиву глаза.
От места проникновения палочки чумы зависит форма заболевания: бубонная форма - при внедрении в кожу, ле-
гочная - через дыхательные пути, кишечная - через рот.
Доза микробов. Инфицирующая доза - минимальное количество микробов, способное вызвать
заболевание. Естественно, что в отношении человека этот вопрос изучен мало. Все же, по-видимому, очень
малые дозы палочек чумы могут вызвать заболевание у человека, в то время как холера возникает при заражении
более высокими дозами. Как правило, условно-патогенные микробы вызывают заболевание при попадании в
организм в больших дозах.
Характерные черты инфекционного заболевания
Инфекционные болезни имеют ряд особенностей, отличающих их от неинфекционных болезней. Это:
- наличие возбудителя болезни;
- заразительность;
- способность к эпидемическому распространению;
- наличие инкубационного периода;
- цикличность течения;
-иммунный ответ после перенесенного заболевания: невосприимчивость или повышенная
чувствительность к возбудителю.
Периоды течения инфекционного заболевания
Инкубационный период - время от момента заражения до появления первых признаков заболевания. В
это время происходит приспособление, размножение, накопление микроба в организме. Длительность периода
характерна для каждого вида микроба, но зависит также от инфицирующей дозы, от входных ворот, от состояния
организма человека.
При гриппе инкубационный период короткий - от нескольких часов до суток, при большинстве
инфекционных болезней - несколько дней или недель, при бешенстве - до нескольких месяцев, при проказе
-несколько лет.
Продромальный - период предвестников - неопределенных признаков длится от нескольких часов до
нескольких дней: слабость, потеря аппетита, общее недомогание. Наблюдается при брюшном тифе, кори, чуме.
Такие заболевания, как малярия, сыпной тиф начинаются без продромы, внезапно.
Период разгара - это период клинических проявлений, характерных для данного заболевания.
Исход: выздоровление, переход в хроническую форму или смерть больного.
Формы проявления инфекционного процесса
По происхождению различают экзогенные и эндогенные инфекции.
Экзогенные инфекции возникают при заражении извне, например, грипп, холера.
Эндогенные или аутоинфекции - без заражения извне, возникают при ослаблении иммунитета
вследствие других болезней, охлаждения, голодания, действия ионизирующих излучений. Возбудителями явля-
ются условнопатогенные микробы - представители собственной нормальной микрофлоры, например, коли-сепсис
при лучевой болезни;
пневмония, вызванная пневмококком.
По длительности течения различают инфекционные болезни острые и хронические. Острые
инфекционные болезни протекают кратковременно (грипп, корь, скарлатина, сыпной тиф). Болезни с
хроническим течением - большей длительностью - месяцы, иногда годы (бруцеллез, туберкулез, проказа) с
чередованием периодов обострения и ремиссий.
По характеру локализации и путям распространения различают очаговые и генерализованные
инфекции. При очаговых инфекциях возбудители остаются в ограниченном очаге. При генерализованных - про-
исходит распространение микробов в организме.
Бактериемия - распространение бактерий но кровяному руслу без их размножения, наблюдается как
одна из стадий в течении болезни, например, при брюшном тифе.
Сепсис, септицемия - тяжелая генерализованная форма инфекции, когда возбудитель размножается в
крови при резком угнетении иммунитета.
Септикопиемия характеризуется тем, что одновременно с размножением микробов в крови развиваются
гнойные очаги в органах.
Токсинемия - поступление в кровь экзотоксинов. Инфекции, при которых это происходит, называются
токсинемическими, например, столбняк, ботулизм, дифтерия.
При газовой анаэробной инфекции наблюдается сочетание септических и токсйнемических явлений.
Формы инфекционного процесса в зависимости от клинических проявлений. Инфекционный
процесс может протекать в форме заболевания, причем различают формы типичные, атипичные, стертые, в
зависимости от того, насколько выражены симптомы этого заболевания.
Не всегда заражение ведет к развитию клинических проявлений болезни. Существуют бессимптомные
формы инфекционного процесса. К ним относятся латентная форма инфекции и носительство. Латентная или
скрытая форма инфекции при неблагоприятных условиях переходит в клинически выраженную форму
(туберкулез, герпес, СПИД). Носительство - это бессимптомная форма инфекции, при которой микробы живут
и размножаются в организме, причем носитель, ' оставаясь здоровым, является источником инфекции для
окружающих. Носительство может сформироваться после перенесенного заболевания (брюшной тиф, вирусный
гепатит В) - это носительство реконвалесцентов. Носительство может сформироваться и вне связи с
перенесенным заболеванием. Это так называемое здоровое носительство (дифтерия, полиомиелит).
Понятие о смешанной, вторичной инфекции, реинфскции, суперинфекции, рецидиве.
Моноинфекция - заболевание, вызванное одним видом микробов. Смешанная инфекция возникает при
заражении двумя-тремя видами микробов. Такие заболевания протекают тяжелее и не всегда диагиосцируются.
Например, одновременное заболевание корью и туберкулезом, дифтерией и стрептококковой ангиной.
Вторичная инфекция - это осложнение основного инфекционного заболевания, вызванное другим видом
микробов: например, присоединение стафилококковой инфекции при гриппе. Реинфекция - повторное заражение
тем же видом возбудителя после перенесенного заболевания, например, при дизентерии, гонорее и других
болезнях, которые не оставляют иммунитета. Суперинфекция - новое заражение тем же видом возбудителя при
наличии еще не закончившегося заболевания. Нередко наступает в больничных условиях, при острых и
хронических заболеваниях, например, при туберкулезе. Рецидив - возврат клинических проявлений болезни за
счет оставшихся в организме возбудителей, например, рецидивы при остеомиелите, ангине, рожистом
воспалении.
Особенности вирусных инфекций
Особенности вирусных инфекций связаны со строгим внутриклеточным паразитизмом вирусов на
молекулярном уровне. Отсюда -выраженный тропизм вирусов к определенным клеткам. При вирусных
инфекциях обязательным является проникновение вируса в клетку. Для некоторых вирусных инфекций
характерно образование внутриклеточных включений, например, включений Бабеша-Негри в нервных клетках
при бешенстве.
Взаимодействие вируса с клеткой может протекать в виде продуктивной инфекции и интегративной
инфекции. Продуктивная инфекция - процесс взаимодействия вируса с клеткой, завершающийся образованием
зрелых вирионов и выходом их из клетки, как, например, при гриппе. Интегративная инфекция возникает в
результате встраивания (интеграции) вирусного генома в геном клетки. Такой процесс происходит с вирусом
гепатита В, с онкогенными вирусами. Интеграция РНК-вирусов в клеточный геном происходит при участии
фермента РНК-зависимой ДНК-полимеразы, иначе называемой обратной транскриптазой или ревертазой. Так
происходит с вирусом иммунодефицита человека, с РНК-содержащими онкогенными вирусами.
При некоторых вирусных инфекциях наблюдается персистенция (лат. persisto - оставаться).
Персистирующая инфекция проявляется в форме латентной, хронической или медленной инфекции. Пример
латентной инфекции - герпес, хронической - гепатит В. Медленные инфекции характеризуются длительным
инкубационным периодом, постепенным нарастанием симптомов и летальным исходом. Это такие
прогрессирующие болезни, как подострый склерозирующий панэнцефалит (ПСПЭ), рассеянный склероз, болезнь
Крейтцфельда-Якоба и другие.
Врожденные инфекции
Наследственные инфекции у человека не описаны. Наследственными можно считать такие инфекции, при
которых возбудитель передается с половой клеткой, как это происходит с вирусом энцефалита у клещей.
У человека описаны врожденные инфекции, развивающиеся вслед
ствие передачи возбудителя от матери плоду через плаценту. Возможность такого проникновения
увеличивается вследствие патологического изменения плаценты. Известны такие врожденные заболевания, как
сифилис, токсоплазмоз, краснуха, СПИД и другие.
Условно-патогенные микроорганизмы
Это микроорганизмы, вызывающие у человека болезни только при определенных условиях. Известно
около 100 видов условно-патогенных микробов (УПМ). Они принадлежат к разным родам: Staphylococcus,
Escherichia, Klebsielja, Proteus, Pseudomonas, Candida, Pneumocystis и другим. Одни из них обитают во внешней
среде, другие являются постоянными обитателями организма человека и могут вызвать заболевание при
снижении сопротивляемости организма: при иммунодефи-цитных состояниях, у онкологических больных, при
лучевой болезни, при ВИЧ-инфекции.
Факторами патогенности у УПМ являются адгезивность, эндотоксины или экзотоксины, ферменты:
нейраминидаза, гиалуронидаза, коагулаза и другие. У них отсутствуют такие факторы патогенности, как
способность подавлять фагоцитоз и другие защитные механизмы организма, поэтому они вызывают болезнь
только при ослаблении иммунитета.
Для популяций условно патогенных микробов характерна неоднородность, особенно по устойчивости к
антибиотикам и другим антимикробным факторам. Поэтому при микробиологической диагностике необходимо
исследовать не одну, а несколько культур.
Внутрибольничные инфекции
К внутрибольничным или госпитальным инфекциям относят все инфекционные заболевания,
возникающие у больных или у больничного персонала в результате пребывания в больнице. Большинство внут-
рибольничных инфекций вызывается условно-патогенными микробами, но в некоторых случаях и патогенными
возбудителями, например, вирусом гриппа.
Внутрибольничные инфекции известны давно. До открытия микроорганизмов и введения асептики и
антисептики бактериальные инфекции были обычными спутниками хирургических послеоперационных ран и
травматических повреждений. С введением антисептики в 60-х гг. XIX века частота инфекционных осложнений
уменьшилась. С открытием антибиотиков и введением их в лечебную практику в 40-50-х гг. XX века резко
снизилось число инфекционных осложнений и летальность от них. Однако в настоящее время наблюдается
нарастание частоты внутрибольничных инфекций. Причины этого отчасти связаны с достижениями современной
медицины:
1) широкое, часто неоправданное применение антибиотиков, приведшее к распространению резистентных
микробов;
2) применение в медицинской практике инвазивных методов диагностики с нарушением целостности
кожи и слизистых оболочек и проникновением во внутренние органы;
3) увеличение числа пациентов со сниженным уровнем защитных сил организма: недоношенных детей,
лиц преклонного возраста;
4) применение лекарственных средств, подавляющих иммунную систему;
5) ухудшение экологической обстановки.
Возникновению внутрибольничных инфекций способствует скученность больных, особенно в больших
стационарах.
Возбудителями внутрибольничных инфекций часто являются так называемые "госпитальные" штаммы
микробов. Они формируются в больничных условиях из культур, циркулирующих среди больных, как результат
пассажей через восприимчивый организм больных при постоянном воздействии антимикробных средств. Чаще
всего это штаммы стафилококков, энтеробактерий, синегнойных палочек. Для них характерна множественная
лекарственная устойчивость, более высокая вирулентность и контагиозность, то есть способность передаваться.
Клиническими проявлениями внутрибольничных инфекций могут быть гнойно-воспалительные заболевания,
сепсис, раневые и ожоговые инфекции, бронхолегочные инфекции, острые кишечные инфекции.
Для снижения частоты внутрибольничных инфекций применяются такие меры, как рациональная
планировка корпусов и комплексов, создание обсервационных палат, строгое соблюдение санитарно-
гигиенических правил.

ГЛАВА 14.
ИММУНИТЕТ
Иммунитет (лат. immunitas - освобождение от чего-либо) - совокупность реакций организма,
направленных на защиту постоянства внутренней среды от генетически чужеродных агентов. Это происхо дит,
например, при инфекционных заболеваниях, при вакцинации, переливании несовместимой крови, при
трансплантации тканей или органов. Чужеродные клетки возникают и в самом организме вследствие мутаций, и
постоянной функцией иммунной системы является функция "надзора" - удаления таких измененных клеток. При
снижении этой функции такие клетки-мутанты могут дать начало развитию злокачественного новообразования.
Вначале понятие "иммунитет" складывалось как "невосприимчивость к инфекционным болезням". Давно
было отмечено, что человек, перенесший инфекционную болезнь, становится невосприимчивым к повторному
заражению. В древнем Китае, в Индии делались попытки проводить прививки против оспы путем искусственного
заражения детей. В средние века людей, переболевших чумой, привлекали к уходу за больными и захоронению
умерших.
Впервые Эдуард Дженнер провел вакцинацию против оспы путем заражения человека оспой коров.
Пастер создал вакцины против бешенства и сибирской язвы и научно обосновал принципы получения живых
вакцин. Мечников построил фагоцитарную теорию иммунитета. Бухнер обнаружил бактерицидные свойства
сыворотки крови. Эрлихом была предложена гуморальная теория иммунитета. Беринг и Ру создали лечебные
антитоксические сыворотки против дифтерии и столбняка. Это направленние иммунологии ("инфекционная
иммунология") развивалась в дальнейшем и продолжает развиваться. Достигнуты значительные успехи в
профилактике, лечении и диагностике инфекционных заболеваний. Но уже с начала XX века стало известно, что
чужеродными для организма являются не только микробы и их токсины, но и чужеродные клетки или вещества.
Сложилось особое направление - "неинфекционная иммунология".
Виды иммунитета. Неспецифические факторы защиты.
Различают видовой и приобретенный иммунитет.
Видовой иммунитет передается но наследству, характерен для данного вида. Например, человек
невосприимчив к чуме рогатого скота, к куриной холере, собаки невосприимчивы к туберкулезу. Видовой им -
мунитет неспецифичен, то есть одни и те же защитные механизмы действуют против разных видов микробов.
Это наиболее прочный вид иммунитета.
Неспецифические факторы естественной резистентности защищают организм от микробов при первой
встрече с ними. Эти же факторы участвуют и в формировании приобретенного иммунитета.
Ареактивность клеток является наиболее стойким фактором естественной защиты. При отсутствии
клеток, чувствительных к данному микробу, токсину, вирусу организм полностью защищен от них. Так,
например, крысы нечувствительны к дифтерийному токсину.
Кожа и слизистые оболочки представляют собой механический барьер для большинства патогенных
микробов. Кроме того, на микробы губительно действуют выделения потовых и сальных желез, содержащие
молочную и жирные кислоты. Чистая кожа обладает более сильными бактерицидными свойствами. Удалению
микробов с кожи способствует слущивание эпителия.
В секретах слизистых оболочек содержится лизоцим (lysozyme) -фермент, лизирующий клеточную стенку
бактерий, главным образом, грамположительных. Лизоцим содержится в слюне, секрете конъюнктивы, а также в
крови, в макрофагах, в слизи кишечника. Открыт впервые П.Н. Лащенковым в 1909 г. в белке куриного яйца.
Эпителий слизистых оболочек дыхательных путей является препятствием для проникновения патогенных
микробов в организм. Частицы пыли и капли жидкости выбрасываются наружу со слизью, выделяющейся из
носа. Из бронхов и трахеи попавшие сюда частицы выводятся движением ресничек эпителия, направленным
кнаружи. Эта функция мерцательного эпителия обычно нарушена у злостных курильщиков. Немногие частички
пыли и микробы, достигшие легочных альвеол, захватываются фагоцитами и обезвреживаются.
Секрет пищеварительных желез. Желудочный сок губительно действует на микробов, поступающих с
водой и пищей, благодаря наличию соляной кислоты и ферментов. Пониженная кислотность желудочного сока
способствует ослаблению сопротивляемости к кишечным инфекциям, таким как холера, брюшной тиф,
дизентерия. Бактерицидным действием обладают также желчь и ферменты кишечного содержимого.
Лимфатические узлы. Микробы, проникшие через кожу и слизистые оболочки, задерживаются в
регионарных лимфатических узлах. Здесь они подвергаются фагоцитозу. В лимфатических узлах также со-
держатся так называемые нормальные (естественные) киллеры-лимфоциты (англ, killer - убийца), несущие
функцию противоопухолевого надзора - разрушение собственных клеток организма, измененных вследствие
мутаций, а также клеток, содержащих вирусы. В отличие от иммуных лимфоцитов, формирующихся в результате
иммунного ответа, естественные киллеры распознают чужеродные агенты без предварительного контакта с ними.
Воспаление (сосудисто-клеточная реакция)- одна из филогенетически древних защитных реакций. В
ответ на проникновение микробов формируется местный воспалительный очаг в результате сложных из менений
микроциркуляции, системы крови и клеток соединительной ткани. Воспалительная реакция способствует
удалению микробов или задерживает их развитие и поэтому играет защитную роль. Но в ряде случаев, при
повторном попадании агента, вызвавшего воспаление, оно может принять характер повреждающей реакции.
Фагоцитоз - процесс активного поглощения клетками организма микробов и других чужеродных частиц
(греч. phagos - пожирающий + kytos - клетка), в том числе собственных погибших клеток организма. И.И.
Мечников - автор фагоцитарной теории иммунитета - показал, что явление фагоцитоза - это проявление
внутриклеточного переваривания, которое у низших животных, например, у амеб, является способом питания, а у
высших организмов фагоцитоз является механизмом защиты. Фагоциты освобождают организм от микробов, а
также уничтожают старые клетки собственного организма.
По Мечникову, все фагоцитирующие клетки подразделяются на макрофаги и микрофаги. К микрофагам
относятся полиморфноядерные гранулоциты крови: нейтрофилы, базофилы, эозинофилы. Макрофаги - это
моноциты крови (свободные макрофаги) и макрофаги различных тканей организма (фиксированные) - печени,
легких, соединительной ткани.
Микрофаги и макрофаги происходят из единого предшественника - стволовой клетки костного мозга.
Гранулоциты крови - это зре-
лые короткоживущие клетки. Моноциты периферической крови - незрелые клетки и, выходя из кровяного
русла, попадают в печень, селезенку, легкие и другие органы, где созревают в тканевые макрофаги.
Фагоциты выполняют разнообразные функции. Они поглощают и уничтожают чужеродные агенты:
микробы, вирусы, отмирающие клетки самого организма, продукты распада тканей. Макрофаги принимают
участие в формировании иммунного ответа, во-первых, путем презентации ( представления ) антигенных
детерминант ( эпитопов на своей мембране и, во-вторых, пугем выработки биологически активных веществ -
интерлейкинов, которые необходимы для регуляции иммунного ответа.
В процессе фагоцитоза различают несколько стадий (рис. 12):
1) приближение и присоединение фагоцита к микробу - осуществляется благодаря хемотаксису -
передвижению фагоцита в направлении чужеродного объекта. Передвижение наблюдается вследствие понижения
поверхностного натяжения клеточной мембраны фагоцита и образования псевдоподий. Присоединение
фагоцитов к микробу происходит благодаря наличию рецепторов на их поверхности,
2) поглощение микроба (эндоцитоз). Мембрана клетки прогибается, образуется впячивание, в результате
формируемся фагосома -фагоцитарная вакуоль. Этот процесс }сшшвается при участии комплемента и
специфических антител. Для фагоцитоза микробов, обладающих антифагоцитарной активностью, участие
указанных факторов является необходимым;
3) внутриклеточная инактивация микроба. Фагосома сливается с лизосомой клетки, образуется
фаголизосома, в которой накапливаются бактерицидные вещества и ферменты, в результате действия которых
настутет гибель микроба;
4) переваривание микроба и других фагоцитированных частиц происходит в фаголизосомах.
Фагоцитоз, который приводит к инактивации микроба, то есть включает в себя все четыре стадии,
называется завершенным. Незавершенный фагоцитоз не приводит к гибели и перевариванию микробов.
Захваченные фагоцитами микробы выживают и даже размножаются внутри клетки (например, гонококки).
При наличии приобретенного иммунитета к данному микробу антитела-опсонины специфически
усиливают фагоцитоз. Такой фагоцитоз называется иммунным. В отношении патогенных бактерий, обладающих
антифагоцитарной активностью, например, стафилококков, фагоцитоз возможен только после опсонизации.
Функция макрофагов не ограничивается только фагоцитозом. Макрофаги вырабатывают лизоцим,
белковые фракции комплемента, участвуют в формировании иммунного ответа: взаимодействуют с Т- и В-
лимфоцитами, продуцируют интерлейкины, регулирующие иммунный ответ. В процессе фагоцитоза частицы и
вещества самого организма, такие как отмирающие клетки и продукты распада тканей, перевариваются
макрофагами полностью, то есть до аминокислот, моносаха-ридов и других соединений. /Чужеродные агенты,
такие как микробы и вирусы, не могут быть полностью разрушены ферментами макрофага. Чужеродная часть
микроба (детерминантная группа- эпитоп) остается непереваренной, передается Т- и В- лимфоцитам, и таким
образом начинается формирование иммунного ответа. Макрофаги продуцируют интерлейкины, регулирующие
иммунный ответ.
Гуморальные факторы защиты. В крови, лимфе и других жидкостях организма (лат. humor - жидкость)
находятся вещества, обладающие антимикробной активностью. К гуморальным факторам неспецифической
защиты относятся: комплемент, лизоцим, бета-лизины, лейкины, противовирусные ингибиторы, нормальные
антитела, интерфероны.
Комплемент - важнейший гуморальный защитный фактор крови, представляет собой комплекс белков,
которые обозначаются как С1, С2, СЗ, С4, С5, ... С9. Вырабатываются клетками печени, макрофагами и
нейтрофилами. В организме комплемент находится в неактивном состоянии. Активируясь, белки приобретают
свойства ферментов.
Существуют два пути активации комплемента: классический и альтернативный.
Классический путь осуществляется с участием антител. К комплексу антиген-антитело присоединяется
фракция С1, затем последовательно С4, С2, СЗ, далее активируются С5, С6, С7, С8, С9. Каждая предыдущая
фракция вызываег активацию последующей. В результате такого "каскадного" процесса активации последние
фракции приобретают способность лизировать микробы, эритроциты и др.
Альтернативный путь совершается без участия антител, под влиянием антигена и начинается с активации
С3.
Система комплемента осуществляет: 1) лизис клеток; 2) активацию фагоцитоза; 3) участие в реакции
анафилаксии и в процессе воспаления; 4) участие в иммунном ответе.
Комплемент термолабилен, разрушается при 56°С в течение 30 минут. Сыворотка крови, обработанная
таким образом, называется инактивированной. Коммерческий препарат комплемента, применяемый в
лаборатории, представляет собой сыворотку крови морской свинки. Выпускается в ампулах в
лиофилизированном виде.
Лизоцим вырабатывается моноцитами крови и тканевыми макрофагами, оказывает лизирующее действие
на бактерии, термостабилен.
Бета-лизин выделяется тромбоцитами, обладает бактерицидными свойствами, термостабилен.
Нормальные антитела содержатся в крови, возникновение их не связано с заболеванием, они оказывают
антимикробное действие, способствуют фагоцитозу.
Интерферон - белок, вырабатываемый клетками в организме, а также культурами клеток. Интерферон
подавляет развитие вируса в клетке. Явление интерференции заключается в том, что в клетке, зара женной одним
вирусом, вырабатывается белок, подавляющий развитие других вирусов. Отсюда название - интерференция (лат.
inter - между + ferens - переносящий). Интерферон открыли А. Айзеке и Дж. Линденман в 1957 г.
Защитное действие интерферона оказалось неспецифическим в отношении вируса, так как один и тот же
интерферон защищает клетки от разных вирусов. Но он обладает видовой специфичностью. Поэто му в организме
человека действует тот интерферон, который образован клетками человека.
В дальнейшем было обнаружено, что синтез интерферона в клетках может быть индуцирован не только
живыми вирусами, но и убитыми вирусами, бактериями. Индукторами интерферона могут быть некоторые
лекарственные средства.
В настоящее время известно несколько интерферонов. Они не только препятствуют размножению вируса
в клетке, но и задерживают рост опухолей и оказывают иммуномодулирующее действие, то есть норма лизуют
иммунитет.
Интерфероны разделяют на три класса: альфа-интерферон (лейкоцитарный), бета-интерферон
(фибробластный), гамма-интерферон (иммунный).
Лейкоцитарный а-интерферон продуцируют в организме в основном макрофаги и В-лимфоциты.
Донорский препарат альфа-интерферона получают в культурах донорских лейкоцитов, подвергнутых действию
индуктора интерферона. Применяется как противовирусное средство.
Фибробластный бета-интерферон в организме продуцируют фибробласты и эпителиальные клетки.
Препарат бета-интерферона получают в культурах диплоидных клеток человека. Обладает противовирусным и
противоопухолевым действием.
Иммунный гамма-интерферон в организме продуцируют, в основном, Т-лимфоциты, стимулированные
митогенами. Препарат гамма-интерферо-на получают в культуре лимфобластов. Обладает иммуностимулирую -
щим действием: усиливает фагоцитоз и активность естественных киллеров (NK-клеток).
Продукция интерферона в организме играет роль в процессе выздоровления больного инфекционным
заболеванием. При гриппе, например, продукция интерферона возрастает в первые дни заболевания, в то время
как титр специфических антител достигает максимума только к 3-й неделе.
Способность людей продуцировать интерферон выражена в разной степени. "Интерфероновый статус"
(ИФН-статус) характеризует состояние системы интерферона:
1) содержание интерферонов в крови определяется по их действию на определенные виды вирусов;
2) способность лейкоцитов, полученных от пациента, вырабатывать интерферон в ответ на действие
индукторов.
В лечебной практике применяют альфа-, бета-, гамма-интерфероны естественного происхождения.
Получены также рекомбинантные (генноинженерные) интерфероны: реаферон и другие.
Эффективным в лечении многих заболеваний является применение индукторов, способствующих
выработке в организме эндогенного интерферона.
Приобретенный иммунитет
В отличие от видового, приобретенный иммунитет формируется в ответ на действие генетически
чужеродного агента (антигена), это антигензависимый иммунитет. Он специфичен по отношению к антигену.
Так, человек, переболевший корью, приобретает иммунитет только против кори; человек, получивший прививку
против дифтерии, приобретает невосприимчивость только к дифтерии. Приобретенный иммунитет не передается
по наследству, он является индивидуальным.
Сила и продолжительность иммунного ответа регулируется генами иммунного ответа. Это Ir-гены (англ,
immune - иммунный, response -ответ). Они кодируют образование la-белка, участвующего в иммунном ответе.
Виды и формы приобретенного иммунитета
В зависимости от способа формирования различают виды приобретенного иммунитета (табл. 3).
Активный иммунитет вырабатывается организмом в ответ на антиген. Вследствие перенесенного
инфекционного заболевания вырабатывается активный естественный (постинфекционный) иммунитет. В ответ на
введение вакцины или анатоксина - активный искусственный (поствакцинальный) иммунитет. Под влиянием
антигена в организме происходит активная перестройка иммунной системы. В результате образуются антитела,
которые соединяются с микробами или их токсинами, обезвреживая их или усиливая фагоцитоз. Постинфекци -
онный иммунитет может быть пожизненным или длиться годами, как при кори, коклюше, брюшном тифе,
дифтерии. Повторные заболевания возможны, но редко. Непродолжителен иммунитет при гриппе.
Поствакцинальный иммунитет формируется не сразу, а через некоторое время (дни, недели) после
введения вакцины или анатоксина, сохраняется при применении живых вакцин несколько лет, убитых - до одного
года.
Пассивно приобретенный иммунитет возникает, если организм получает от другого, иммунного
организма, готовые антитела. При введении иммунных сывороток создается искусственный (постсывороточный)
иммунитет. Например, при лечении ребенка, больного дифтерией, путем введения ему сыворотки крови лошади,
иммунизированной дифтерийным токсином. Пассивно приобретенный иммунитет, в отличие от активного,
создается быстро, но сохраняется недолго.
Пассивный естественный иммунитет создается, когда антитела передаются от матери плоду через
плаценту (плацентарный иммунитет) или ребенку с материнским молоком Благодаря этому грудные дети в
первые месяцы жизни невосприимчивы к некоторым инфекционным болезням, например, к кори, дифтерии.
При большинстве инфекций по мере развития невосприимчивости организм освобождается от микробов.
Но при некоторых заболеваниях, например, при туберкулезе, сифилисе иммунитет поддерживается
сохранившимися в организме возбудителями Такой иммунитет называют нестерильным.
Местный иммунитет - это особый вид защиты против внедрения в организм возбудителей инфекций,
главным образом кишечных и воздушно-капельных. Большую роль здесь играют неспецифические факторы и
антитела, так называемые секреторные иммуноглобулины класса A (SIgA).
Различают виды иммунитета в зависимости от того, против чего он напрвлен. При антибактериальном
иммунитете защитные силы организма направлены на уничтожение бактерий, при антитоксическом -антитела-
антитоксины нейтрализуют бактериальные экзотоксины. Этот вид иммунитета имеет большое значение при
токсинемнческих инфекциях, таких, как дифтерия, столбняк, ботулизм, газовая анаэробная инфекция.
Противовирусный иммунитет обеспечивает нейтрализацию вирионов или подавление их образования.
Противоопухолевый иммунитет направлен против опухолей. Трансплантационный иммунитет возникает
вследствие несовместимости тканей при трансплантации.
Антигены
Антигены (греч. anti - против, genos - рождение) - генетически чужеродные вещества, которые при
попадании в организм вызывают иммунный ответ. Специфические иммунные реакции, которые могут возникать
в ответ на антиген, это: синтез антител, появление иммунных лимфоцитов, аллергические реакции,
иммунологическая толерантность, иммунологическая память.
Полноценные антигены обладают двумя свойствами: иммуногенностью и специфичностью. Под
иммуногенностью понимают способность антигена вызывать в организме иммунный ответ, в частности,
образование антител и иммунных лимфоцитов. Специфичность антигена выражается в том, что он соединяется
только с теми антителами и иммунными лимфоцитами, которые возникли в ответ на его введение.
Неполноценные антигены или гаптены не обладают иммуногенностью, но могут соединяться с
готовыми специфическими для них антителами. Антитела, специфические для гаптена, вырабатываются при вве-
дении в организм гаптена с белком.
Для того, чтобы действовать как антигены, вещества должны быть распознаны макроорганизмом как
чужеродные, "не свои", так как обычно антитела к "своим" белкам не образуются. Антигенами могут быть
биоиолимерные вещества, чужеродные для данного организма, с большой молекулярной массой, имеющие
жесткую химическую структуру, образующие колоидный раствор. Это, в основном, белки. Среди антигенов
микробного происхождения имеются и небелковые антигены - это липополисахариды (ЛПС) клеточной стенки
грамотрицательных бактерий.
Специфичность антигена определяется его детерминантными группами. Это небольшие участки
молекулы антигена (эпитоны), расположенные на ее поверхности. Именно они распознаются как чужеродные
лимфоцитами (антигенраспознающими, иммунокомпетентными клетками). По химической природе
детерминантные группы - это углеводы, пептиды, липиды, нуклеиновые кислоты. Если отделить их от молекулы-
носителя, то они ведут себя как гаптены.
Иммуногенность повышается при введении антигенов с адъюванта-ми (лат. adjuvantis - вспомогающий).
В качестве адъюванта часто применяется гидроксид алюминия - А1(ОН)3.
Антигены микроорганизмов. Каждый микроорганизм содержит несколько антигенов. Различают
групповые антигены, общие для нескольких родственных видов, ангигены видовые, свойственные отдельным
видам, и типовые, специфичные для определенных типов или вариантов (серологические варианты или
серовары).
По локализации в микробной клетке различают антигены жгутиковые, соматические, капсульные или
поверхностные.
Жгутиковые Н-актигены (нем. Hauch - дыхание) находятся в жгутиках подвижных бактерий, по
химической природе это белки - фла-геллины. Термолабильны. Хорошо сохраняются в присутствии формалина.
Это используется при изготовлении Н-диагностикумов для реакции агглютинации.
Соматические О-антигепы (нем. ohne Hauch - без дыхания) входят в состав клеточной стенки, у
грамотрицательных бактерий это липо-полисахариды (ЛПС) по химической природе. Термосггабильны, пере -
носят кипячение, не разрушаются этиловым спиртом. О-антигены токсичны.
Капсульные или поверхностные К-антшепы хорошо изучены у сальмонелл и эшерихий. Расположены
на поверхности микробной клетки. Среди них есть термостабильные и термолабильные: К поверхностным
антигенам относится Vi-антиген. Он был впервые обнаружен в штаммах бактерий, обладающих высокой
вирулентностью, отсюда его название.
Капсульные антигены имеются у бактерий, образующих видимую под микроскопом капсулу.
Пневмококки по типоспецифическим капсульным антигенам делятся на серовары.
Антигены, извлеченные из микробных тел, применяются для создания химических вакцин, например, О-
и Vi-антигены палочек брюшного тифа, О-антиген холерного вибриона.
Протективный (лат. protectio - покровительство, защита) или защитный антиген впервые был
обнаружен в экссудате у животных, зараженных сибирской язвой. Этот антиген обладает выраженными антш
енны-ми свойствами, создает в организме невосприимчивость к возбудителю. Защитные протективные антигены
образуют и некоторые другие микробы при попадании в организм хозяина, причем в культурах микробов,
выращенных на питательных средах, эти антигены могут и не присутствовать.
Искусственные антигены получают путем присоединения детерми-нантных групп к молекуле белка-
носителя.
Перекрестно-реагирующие антигены. Некоторые микроорганизмы имеют общие антигены с
антигенами клеток и органов человека. Например, возбудители чумы, дизентерии - с эритроцитами, гемолитичес-
кие стрептококки группы А - с антигенами мышцы сердца и клубочков почек. С такой антигенной мимикрией
(маскировкой) связывают роль стрептококков в развитии ревмокардита и гломерулонефрита.
Токсины и ферменты бактерий как антигены. Токсины бактерий являются антигенами. В ответ на
эндотоксины в организме вырабатываются антимикробные антитела, то есть антитела к тому виду бактерий, из
которых выделен эндотоксин.
Экзотоксины являются сильными антигенами. В ответ на экзотоксины вырабатываются специфические
антитоксины, способные нейтрализовать данный экзотоксин. При обработке формалином и теплом экзотоксины
теряют ядовитые свойства, сохраняя антигенность Полученные препараты применяются для создания
искуственного антитоксического иммунитета при токсинемических инфекциях.
Антигенными свойствами обладают некоторые ферменты бактерий: гиалуронидаза, фибринолизин,
коагулаза, вызывая в организме выработку соответствующих антител.
Антигены вирусов. Антигены просто организованных вирионов, не имеющих внешних оболочек,
связаны с их нуклеокапсидами. У сложноорганизованных вирионов одни антигены - это нуклеокапсиды, дру гие
содержатся во внешней оболочке - суперкапсиде. Например, вирус гриппа имеет три антигена: внутренний
растворимый нуклеопротеид и два поверхностных - гемагглютинин "Н" и нейраминидаза "N". Изменчивость
вируса обусловлена изменениями поверхностных антигенов.
Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) имеет сложный состав антигенов: белковые антигены
сердцевины и гликопротеидные антигены поверхности.
Аутоантигены. Вещества собственных тканей организма в норме не вызывают иммунного ответа. В
условиях патологии происходит выработка антител к антигенам собственных тканей (аутоантитела).
Иммунная система организма
Специфический иммунный ответ формирует иммунная система организма, основу которой составляет
лимфоидная ткань. Роль иммунной системы - распознавание чужеродных веществ и клеток и устранение их.
Клетки, способные распознавать антиген и отвечать иммунной реакцией, называют иммунокомпетентными
клетками.
Различают центральные и периферические органы иммунной системы человека.
Периферические органы иммунной системы. К ним относят селезенку, лимфоузлы, лимфоидную ткань
различных органов желудочно-кишечного тракта, дыхательной и мочеполовой систем. В периферических
органах иммунной системы происходит выработка антител и иммунных лимфоцитов в ответ на антиген.
Формирование и функционирование периферических органов иммунной системы зависит от центральных
органов.
Центральные органы иммунной системы. К ним относятся тимус (вилочковая железа) и костный мозг.
В центральных органах происходит созревание и дифференцировка лимфоцитов, в результате чего они при-
обретают способность распознавать антигены. Кроме того, центральные органы продуцируют гормоны
иммунной системы, несущие регу-ляторную функцию.
Процесс созревания лимфоцитов происходит в организме постоянно, независимо от антигена
(антигеннсзависимый процесс). Предшественниками лимфоцитов являются стволовые клетки, образующиеся в
костном мозге. В тимусе из них формируются Т-лимфоциты, которые затем расселяются в периферические
лимфоидные органы, образуя в них тимусзависмые зоны. В-лимфоциты формируются в костном мозге и затем
попадают в периферические лимфоидные органы, образуя в них тимуснезависимые зоны.
Клетки иммунной системы, участвующие в иммунном ответе (им-муногенезе), выполняют следующие
функции:
Макрофаги - захват и переработка (процессинг) антигена, концентрация его детерминантных групп
вместе с la-белком на поверхности клетки, представление (презентация) антигенной информации лимфоцитам.
Выработка интерлейкшюв - веществ, стимулирующих лимфоциты.
В - лимфоциты - распознавание и восприятие антигенной стимуляции на поверхности макрофага,
дифференциация и превращение в плазматические клетки, продуцирующие антитела. С В-лимфоцитами связан
гуморальный иммунный ответ.
Т - лимфоциты - распознавание антигенной информации на поверхности макрофага, дифференциация и
превращение в иммунные лимфоциты: Т-эффекторы (Те) и Т-киллеры (Тк). С Т-лимфоцитами связан клеточный
иммунитет.
Регуляторные лимфоциты:
Т-хелперы (Тх) - Т-лимфоциты, усиливающие иммунный ответ; вырабатывают интерлейкины.
Т-супрессоры (Тс) - Т-лимфоциты, тормозящие иммунный ответ,
Иммунный ответ (иммуногенез)
Различают следующие формы иммунного ответа: гуморальный иммунный ответ, клеточный иммунный
ответ, иммунологическая память и иммунологическая толерантность.
Гуморальный иммунный ответ. Иммунный ответ в виде продукции специфических антител
(иммуноглобулинов) происходит следующим образом (рис. 15).
Макрофаги фагоцитируют проникший в организм антиген, переваривают, перерабатывают
(осуществляют процессинг), концентрируют его детерминантные группы и в соединении с Ia-белком предс-
тавляют на своей поверхности (презентация) эту антигенную информацию Т-хелперам и В-лимфоцитам.
la-белок образуется в макрофаге, образование его кодируется Ir-геном, который таким образом регулирует
иммунный ответ. При этом макрофаги выделяют интерлейкины (монокины), стимулирующие Т-лимфоциты, и, в
свою очередь, Т-хелперы продуцируют интерлейкины (лимфокины), стимулирующие пролиферацию
(размножение) и дифференциацию В-лимфоцитов и превращение их в плазматические клетки, продуцирующие
антитела против данного антигена. Процесс этот регулируется Т-лимфоцитами-супрессорами, которые тормозят
его. Таким образом, гуморальный иммунный ответ формируется при трехклеточной кооперации, то есть при
участии макрофагов, В-лимфоцитов, Т-лимфоцитов. Некоторые антигены, имеющие высокополимерное
строение, способны вызвать образование антител без участия Т-хелперов. Такие антигены назы вают
тимуснсзависимыми, например, липополисахариды грамотрица-тельных бактерий.
Защитная роль гуморального иммунитета осуществляется таким образом, что антитела, специфичные к
данным бактериям, соединяются с ними, подготавливают их, делают чувствительными к лизису при участии
комплемента, к обезвреживанию фагоцитами. Для некоторых патогенных бактерий, которые обладают
антифагоцитарной активностью, например, стафилококки, бруцеллы, возбудители туберкулеза, фагоцитоз бывает
завершенным только при участии специфических антител - опсонинов. Что касается антитоксинов, то их
защитная роль заключается в непосредственном соединении с токсинами и нейтрализации их.
Антитела участвуют также в реакциях гиперчувствительности немедленного типа (ГЧНТ).
Пассивная передача гуморального иммунитета возможна с помощью сыворотки крови, поскольку
антитела (иммуноглобулины) циркулируют в крови.
Клеточный иммунный ответ формируется при взаимодействии макрофагов и Т-лимфоцитов.
Макрофаги передают антигенную информацию Т-лимфоцитам. Интерлейкины (монокины), выделяемые
макрофагами, стимулируют Т-хелперы, те, в свою очередь, выделяют интерлейкины (лимфокины),
стимулирующие дифференциацию и пролиферацию Т-лимфоцитов и превращение их в иммунные лимфоциты:
Т-эффекторы (Те) и Т-киллеры (Тк) В дальнейшем Те участвуют в реакциях гиперчувствительности
замедленного типа, а Тк - в уничтожении чужеродных клеток ("клеток-мишеней").
Клеточный иммунитет лежит в основе воспалительных процессов, противоопухолевого,
противовирусного, трансплантационного иммунитета.
Пассивная передача клеточного иммунитета не осуществляется с помощью сыворотки крови. В
эксперименте возможна передача с помощью иммунных лимфоцитов, в клинике - с помощью интерлейкинов
Иммунологическая память. При формировании иммунного ответа часть В- и Т-лимфоцитов, получив
антигенную информацию, не размножаются. Такие долгоживущие клетки памяти, сохранившие свою спе-
цифичность, обеспечивают более быстрый и сильный вторичный иммунный ответ при повторном введении
антигена.
Иммунологическая толерантность - специфическая не отвечаем ость на определенный антиген. Это
явление, обратное иммунному ответу. Благодаря врожденной иммунологической толерантности иммунная
система в норме не реагирует на антигены собственного организма. Приобретенную толерантность можно
создать искусственно.
Явление иммунологической толерантности используется при трансплантациях и при аутоиммунных
заболеваниях.
Антитела (иммуноглобулины)
Антитела (иммуноглобулины) - белки плазмы крови, которые образуются в организме под влиянием
антигенов. Основным свойством антител является специфичность, то есть способность соединяться с тем
антигеном, который вызвал их образование. Специфичность антител обусловлена активными центрами,
то есть участками молекулы иммуноглобулина, которые соединяются с детерминантными группами (эпитопами)
антигена. Число активных центров называют валентностью антител.
Антитела содержатся в жидкой части крови и в других жидкостях организма. Сыворотку, содержащую
антитела, называют иммунной, в отличие от нормальной, не содержащей специфических антител.
Химическая природа антител. Это гликопротеиды. Состоят из двух тяжелых полипептидных цепей - Н-
цепей (англ, heavy - тяжелый) и двух легких цепей - L-цепей (англ, light - легкий). Цепи связаны дисульфидными
мостиками. Как в легких, так и в тяжелых цепях имеется вариабельная V-обдасть с непостоянной
последовательностью аминокислот, и константная С-область. Аминокислоты в полипептидных цепях
направлены таким образом, что их NН2-концевые группы расположены в вариабельной части, а СООН-концевые
группы - в константной.
При обработке протеолитическим ферментом папаином молекула иммуноглобулина распадается на Fab-
фрагменты (англ, fragment antigen binding - фрагмент, связывающий антиген) и Fc-фрагмент (англ. fragment
cristalline - кристаллизующийся фрагмент). В состав Fab-фрагмента входит целиком легкая цепь и часть тяжелой
цепи, концевые их части составляют активный центр. В состав Fc-фрагмента входят остатки двух тяжелых цепей.
Активный центр молекулы иммуноглобулина по конфигурации соответствует конфигурации
детерминантной группе антигена. Он очень мал, занимает лишь 2% поверхности антитела. Описанная
мономерная молекула иммуноглобулина имеет два активных центра, то есть может связать две молекулы
антигена.
Будучи белками, антитела (иммуноглобулины) обладают антигенной, видовой специфичностью.
Детерминантная группа, определяющая специфичность, расположена в области Fc-фрагмента. Наличие
антигенной специфичности иммуноглобулинов имеет практическое значение, так как позволяет обнаружить их с
помощью антиглобулиновых сывороток.
Различают пять классов иммуноглобулинов, которые обозначаются IgG, IgM, IgA, IgD, IgE и отличаются
между собой по физико-химическим свойствам и биологическим функциям (рис. 17).
Иммуноглобулины класса G (Ig G) являются мономерами, то есть состоят из двух легких и двух
тяжелых цепей, молекулярная масса 160 кД, константа седиментации (скорость осаждения в центрифуге) 7S.
Составляют основную массу сывороточных иммуноглобулинов (70-80%). Единственные из всех классов
проникают через плаценту и играют важную роль в защите новорожденного от инфекции.
Иммуноглобулины класса М (Ig М) первыми появляются после введения антигена. Молекула IgM
состоит из 5 субъединиц, то есть является пентамером. Молекулярная масса 300 кД, константа седиментации 19S.
Содержание в сыворотке крови 5-10%.
Иммуноглобулины класса A (Ig А) синтезируются в селезенке, лимфоузлах и подслизистом слое
дыхательных путей и кишечного тракта. По физико-химическим свойствам неодинаковы и могут иметь
константы седиментации 7,9,11 и 18S. Часть IgA попадает в кровь - это сывороточные IgA. Большая же часть IgA
- это секреторные SIgA, у которых два или три мономера соединены между собой секреторным фрагментом,
защищающим иммуноглобулин от разрушения ферментами. Секреторные SIgA проникают на поверхность сли-
зистых оболочек, содержатся в секретах и играют важную роль в защите организма от проникновения
возбудителей, например, вирусов гриппа, полиомиелита.
Иммуноглобулины класса D (Ig D) - молекулярная масса 180 кД, константа седиментации 7S.
Содержание в сыворотке крови около 0,2%. Роль IgD пока неизвестна
Иммуноглобулины класса Е (Ig E) - молекулярная масса 200 кД, константа седиментации 8S,
содержатся в нормальной сыворотке крови в небольших количествах (0,002%). Их называют также реагинами,
поскольку они способны присоединяться к клеткам (цитофильны) и принимают участие в реакции анафилаксии
Форма и размеры иммуноглобулинов G и М были изучены в электронном микроскопе. IgG имеют
форму вытянутых эллипсов с тупыми концами, a IgM - форму паучка с пятью ножками.
Динамика образования антител (рис 18). Синтез антител протекает в две фазы. Первая - индуктивная,
которая длится 3-5 суток от момента введения антигена до появления антител в крови. Вторая - продуктивная,
когда антитела появляются в крови, количество их нарастает к 15-30 суткам и затем снижается. Иммунный ответ
после первого введения антигена называют первичным. Особенностью его является то, что первоначально
синтезируются IgM, затем IgG.
Вторичный иммунный ответ развивается при повторном введении того же антигена и отличается от
первичного следующими особенностями, индуктивная фаза короче (1-2 суток), уровень анти тел нарастает
быстрее, достигает более высоких значений и сохраняется дольше, медленно снижаясь в течение нескольких лет
При вторичном иммунном ответе с самого начала образуются IgG. Более быстрая и сильная выработка антител
при вторичном иммунном ответе объясняется тем, что после первичного введения в организме остаются "клетки
памяти", которые при вторичном введении того же антигена быстро размножаются и интенсивно включают про-
цесс образования антител.
В практической медицине учитываются особенности динамики ан-тителообразования:
1) при составлении рациональных графиков вакцинации с определенными интервалами;
2) при экстренной профилактике столбняка людям, получившим травму, если они были ранее привиты
столбнячным анатоксином, вводят не антитоксическую сыворотку, которая может дать нежелательные
аллергические реакции, а анатоксин, - в расчете на быстрый и сильный иммунный ответ;
3) при серологической диагностике дифференцируют первичное заболевание сыпным тифом от рецидива
(болезни Брилля) по наличию в крови больного IgM.
Виды антител. Принято различать полные и неполные антитела. Полные антитела имеют не менее двух
активных центров, поэтому при постановке реакции агглютинации, преципитации и других реакций иммунитета
они обусловливают видимый эффект. Неполные антитела способны соединяться с антигеном, но видимой
реакции агглютинации или преципитации не наблюдается. Причина в том, что неполные антитела имеют только
один активный центр, способный соединяться с антигеном (второй блокирован). Неполными являются антитела к
резус-антигену эритроцитов. При многих инфекциях они появляются
наряду с полными антителами. Для выявления неполных антител используют реакцию Кумбса.
По характеру действия антитела разделяют на антимикробные, антитоксические, вируснейтрализующие,
гемолизины, аутоантитела и др. Антимикробные антитела вызывают агглютинацию бактерий или преципитацию
антигенов, извлеченных из них, лизис бактерий при участии комплемента, усиление фагоцитоза - опсонизацию;
антитоксины нейтрализуют токсины; вируснейтрализующие антитела оказывают противовирусное действие.
Аутоантитела вырабатываются организмом против собственных белков и клеток при изменении их химической
структуры или при освобождении антигенов из разрушившихся органов и тканей, или при утрате естественной
нммунологической толерантности к каким-то собственным антигенам.
Моноклональные антитела. При введении антигена в иммунный ответ вовлекается множество
лимфоцитов. Они могут различаться между собой по специфичности, различия эти могут быть совсем
незначительными. Однако при иммунизации даже таким антигеном, который содержит одну детерминантную
группу, образуются антитела, различающиеся по своей специфичности.
Для получения антител одной специфичности необходимо получить потомство-клон (греч. klon -
отпрыск, ветвь) из одного лимфоцита. Но культуру лимфоцитов в искусственной питательной среде получить
трудно (вследствие ограниченного числа делений и времени жизни клетки). Только опухолевые клетки могут
культивироваться in vitro без ограничения при условии поступления питательных веществ .
Задачу получения культуры клеток, полученных из одного лимфоцита и способных длительно
размножаться в питательной среде, решили Г.Келер и К. Мильштейн (1975 г., Нобелевская премия, 1984 г.).
Авторы разработали методику получения гибридом (гибридных клеток) от слияния лимфоцитов
иммунизированных животных с миеломными (опухолевыми) клетками. Слияние осуществляется с помощью
полиэтиленгликоля или электрического разряда. Полученные гибридомы наследуют от лимфоцита способность
синтезировать специфическое антитело, а от миеломной клетки способность бесконечно размножаться в
питательной среде in vitro. Синтезируемые гибридомами антитела могут быть получены в неограниченном
количестве. Антитела идентичны и по специфичности, и по классу иммуноглобулинов. Таким образом,
полученный in vitro препарат может служить идеальным по специфичности средством для диагностики и лечения
(рис. 19).
Аллергия
Термином "аллергия" (греч. allos - другой, ergon - действие) в настоящее время обозначают повышенную
чувствительность организма к антигену (аллергену). Различают два типа аллергии: гиперчувствительность
немедленного типа (ГЧНТ) и гиперчувствительность замедленного типа (ГЧЗТ).
Гиперчувствительность немедленного типа (ГЧНТ) связана с антителами, следовательно, зависит от
В-лимфоцитов (В-зависимая аллергия). Аллергические реакции этого типа проявляются уже через 20-30 минут
после повторной встречи с антигеном. К ГЧНТ относятся: анафилаксия, сывороточная болезнь, сенная лихорадка,
бронхиальная астма, феномен Артюса и другие.
Анафилаксия (греч. ana - обратный, filaxis -защита). В основе анафилаксии лежит сенсибилизация, то
есть образование антител в ответ на введение аллергена парентеральным путем. Явление анафилаксии наиболее
четко демонстрируется на морских свинках. Подкожно морской свинке вводится сенсибилизирующая доза
чужеродного белка -0,01-0,0001 мл лошадиной сыворотки. Через 10-14 дней в кровяное русло вводится
разрешающая доза этого же белка в количестве 0,01-0,1 мл. Через 1-5 минут у морской свинки развивается
анафилактический шок. Животное начинает беспокоиться, чешет лапками нос, чихает, шерсть взъерошена,
появляется одышка, непроизвольное выделение мочи и кала, судороги. Через 5-10 минут в большинстве случаев
свинка погибает.
Если выжившему после шока животному снова ввести тот же антиген, то реакции не развивается, так как
наступило состояние десенсибилизации, сохраняющееся в течение 2-3 недель. Шок не возникает также и в том
случае, если разрешающую дозу антигена ввести вскоре после сенсибилизации или вводить под наркозом.
Анафилактический шок может возникнуть у человека как осложнение при введении, чаще повторном,
гетерологичной (чужеродной) лечебной сыворотки или антибиотиков. Сразу же после введения сыворотки или
даже во время ее введения появляется беспокойство пациен-
та, одышка, падение кровяного давления и температуры, потеря сознания. Бели не оказана немедленная
медицинская помощь, наступает смерть.
Для предупреждения анафилактического шока иммунные гетеро-логичные (например, лошадиные)
сыворотки вводят по способу, предложенному A.M. Безредка в 1907 г. Способ в настоящее время видоизменен и
усовершенствован.
1) Внутрикожно вводят 0,1 мл нормальной лошадиной сыворотки, разведенной 1:100. Ампула с такой
сывороткой имеется в коробке с лечебной сывороткой. Наблюдают реакцию пациента в течение 20 минут.
2) При отрицательной реакции (диаметр папулы в месте инъекции не более 0,9 см, краснота
незначительная) вводят лечебную сыворотку в дозе 0,1 мл подкожно. Наблюдают в течение 30-60 минут за общей
реакцией пациента.
3) При отсутствии реакции вводят всю необходимую дозу лечебной сыворотки
При положительной реакции, указывающей на повышенную чувствительность, лечебную сыворотку
вводят только по жизненным показаниям. Предварительно проводится десенсибилизация с помощью
разведенной сыворотки при соблюдении необходимых мер предосторожности, предусмотренных инструкцией
Во всех случаях применения гетерологичной сыворотки следует помнить о возможности возникновения,
хотя и в редчайших случаях, анафилактического шока Поэтому необходимо обеспечить медицинское
наблюдение за привитыми в течение часа после инъекции.
Сывороточная болезнь возникает через 7-15 дней после первичного введения обычно больших доз
чужеродной сыворотки. Болезнь проявляется в виде отека кожи и слизистых оболочек, повышения температуры
тела, 6 эли в суставах, сыпи, кожного зуда.
Гиперчувствительность замедленного типа. ГЧЗТ связана не с антителами, а с иммунными
лимфоцитами - Т-эфекторами (Те). Это Т-зависимая аллергия. К данному типу аллергии относитися
инфекционная аллергия. Наблюдается она при туберкулезе, бруцеллезе, туляремии, ток-соплазмозе, грибковых
заболеваниях. Аллергические пробы используют в диагностических целях. Аллергены, полученные из микробов,
вводят внутрикожно или накожно. При наличии повышенной чувствительности к возбудителю через 24-48-72
часа развивается воспалительная реакция. Диагностические аллергические пробы применяются при туберкулезе
(реакция Манту с туберкулином), при бруцеллезе, сибирской язве и др.
Контактная аллергия. Повышенная чувствительность аллергического характера к лекарственным
препаратам связана с выработкой антител или иммунных лимфоцитов. Это явление существенно отлича ется от
обычного усиления фармакологического действия лекарственного препарата.
Некоторые лекарственные средства имеют достаточно высокую молекулярную массу, чтобы действовать
как полноценные антигены и вызвать иммунный ответ. Но в большинстве случаев аллергические реакции
развиваются к лекарственным средствам, имеющим молекулярную массу менее 1 кД. Эти вещества действуют
как гаптены и становятся полноценными антигенами после соединения с белком хозяина. Некоторые лекарства
могут прямо соединяться с протеинами, но большинство, такие как аспирин, барбитураты, сульфаниламиды,
вначале подвергаются частичному метаболизму.
При повышенной чувствительности к лекарствам может наблюдаться любой тип аллергической реакции.
Ответственными за это являются антитела и иммунные лимфоциты. Клинические проявления: лихорадка,
высыпания на коже и слизистых оболочках, отек, анафилактический шок, астма, васкулиты, аутоиммунные
реакции.
Аллергии могут быть острыми и хроническими. Наиболее тяжелое проявление - это анафилактический
шок, который встречается редко, но наступить может неожиданно.
Для выявления лекарственной непереносимости выясняется анамнез. Кожные пробы небезопасны, так как
у пациента с повышенной чувствительностью даже ничтожная доза препарата может вызвать патологическую
реакцию. Разработаны лабораторные тесты in vitro, в частности, химическая эритрограмма (ускорение гемолиза
эритроцитов пациента под влиянием лекарственного средства), а также РПГА - реакция пассивной
гемагглютинации, в которой антитела сыворотки крови пациента реагируют с лекарственным средством,
адсорбированном на эритроцитах.
Наиболее полно изучены аллергические реакции к пенициллину. Реакции эти разнообразны. Продукты
распада бензилпенициллина в организме могут вызвать как ГЧНТ, так и ГЧЗТ. Большинство нор мальных
взрослых людей имеют сывороточные антитела к бензилпенициллину. Наиболее часто встречаются IgG, но они
не принимают участия в аллергических реакциях. Напротив, IgG действуют как блокирующие антитела,
предотвращая аллергические реакции. Иммуноглобулины класса IgE участвуют в аллергической реакции немед-
ленного типа - анафилактическом шоке и в крапивнице. Дерматиты являются ГЧЗТ с участием иммунных
лимфоцитов и наблюдаются преимущественно среди лиц, занятых производством антибиотиков.
При аллергическом шоке, вызванном пенициллином, для немедленной помощи в качестве антидота
применяется пенициллиназа (синоним - Neutropen).
Особенности противовирусного иммунитета
Характер иммунитета при вирусных инфекциях связан с особенностями вирусов как строгих
внутриклеточных паразитов.
Неспецифическая противовирусная резистентность обусловлена
такими механизмами, как:
1) отсутствие в организме чувствительных клеток к данному вирусу;
2) наличие неспецифических вирусных ингибиторов;
3) повышенная температура тела;
4) интерферон - один из основных противовирусных факторов защиты.
Фагоцитоз в отношении вирусов имеет меньшее значение, чем в отношении бактерий и часто бывает
незавершенным.
Специфические противовирусные антитела могут нейтрализовать внеклеточные формы - вирионы,
препятствуя их проникновению в клетки организма. Против внутриклеточных форм вирусов антитела
неэффективны. Существенную роль играют секреторные SIgA, создающие местный иммунитет в воротах
инфекции, например, при гриппе. Сывороточные антитела, циркулирующие в кровяном русле, играют защитную
роль при вирусемии.
В противовирусном иммунитете действует особый механизм. Клетки, зараженные вирусом, имеют на
своей поверхности антигенные детерминанты. Поэтому они становятся мишенями для цитотоксических
лимфоцитов - Т-киллеров. При этом зараженные клетки погибают вместе с вирусом. Например, при вирусном
гепатите В происходит гибель гепатоцитов, зараженных вирусом.
Иммунодефицитные состояния
Иммунодефицитами называют неполноценное функционирование иммунной системы.
Иммунодефицитные состояния разделяют на первичные (врожденные) и вторичные (приобретенные).
Врожденные иммунодефициты связаны с генетическими дефектами развития иммунной системы.
Дефекты В-снстемы ведут к пониженной выработке или полному отсутствию Ig-глобулинов. Чаще наблюдается
избирательная недостаточность SIgA, что ведет к снижению местной защиты слизистых оболочек.
Преимущественные дефекты Т-системы - это недоразвитие тимуса, которое обусловливает недостаточность
клеточного иммунитета. Тяжелые последствия вызывают комбинированные дефекты Т- и В-системы.
Наблюдаются также избирательные дефекты фагоцитов и дефекты системы комплемента.
Вторичные (приобретенные) иммунодефициты развиваются при многих бактериальных и вирусных
инфекциях, при болезнях, сопровождающихся потерей белка (ожоги, болезни почек), при применении с лечебной
целью рентгеновских лучей или иммуносупрессивных средств. Причинами развития вторичных
иммунодефицитов могут быть диабет, ожирение, атеросклероз, истощение.
Приобретенные иммунодефициты инфекционной природы возникают вследствие размножения
возбудителей непосредственно в клетках иммунной системы. Вирус иммунодефицита человека репродуцируется
в Т-хелперах и макрофагах, и при этом страдают и клеточный, и гуморальный иммунитет, поскольку Т-хелперы
являются регуляторами иммунного ответа.
Иммунодефицитные состояния способствуют возникновению инфекций, вызванных условно-
патогенными микроорганизмами, и развитию опухолей. Например, у больных СПИДом часто развивается
саркома Капоши или пневмония, вызванная Pneumocysta carinii - микроскопическим грибом, который у людей с
нормальным уровнем иммунитета не вызывает заболевания.
Оценка иммунного статуса организма
Иммунодефицитные состояния, так же, как и состояние избыточного реагирования иммунной системы
(аллергические реакции и аутоиммунные процессы) поддаются лечению и коррекции. Однако такое лечение
может проводиться только после оценки иммунного статуса организма. Исследование начинается с
ориентировочного клинического этапа, на котором собирается иммунологический анамнез: инфекционные
заболевания в прошлом, их течение, наличие очагов хронической инфекции. Проводится клинический анализ
крови: количество полиморфноядерных лейкоцитов, лимфоцитов, моноцитов, Выявляется носительство бактерий
или вирусов.
В иммунологической лаборатории проводится исследование с использованием тестов 1-го и 2-го уровней.
Тесты 1-го уровня позволяют выявить грубые нарушения иммунной системы. Определяются следующие
показатели:
- процентное содержание и абсолютное количество Т- и В-лим-фоцитов;
- концентрация сывороточных IgM, IgG, IgA: уровень сывороточных иммуноглобулинов отражает
состояние В-системы иммунитета;
- для оценки факторов неспецифической защиты организма определяют фагоцитарную активность
нейтрофилов крови и уровень комплемента крови.
Тесты 2-го уровня позволяют уточнить характер выявленного дефекта. К тестам 2-го уровня относится:
определение соотношения Тх/Тс, оценка функциональной активности субпопуляций Т-лимфоцитов и др.
Иммунофармакологические средства
Нарушения иммунной системы можно устранять с помощью им-мунофармакологических средств,
направленных на стимуляцию или угнетение иммунной системы или отдельных ее компонентов.
Иммуностимулирующим действием обладают следующие группы веществ:
1) гормоны иммунной системы: гормоны тимуса (тактивин, тима-
лин), стимулирующие Т-систему лимфоцитов; гормоны костного мозга (миелопиды), стимулирующие В-
систему лимфоцитов;
2) медиаторы иммунной системы - интерлейкины: лимфокины, монокины, интерферон, фактор некроза
опухолей (ФНО);
3) лекарственные средства: левамизол (декарис), целый ряд про-теолитических ферментов: террилитин,
стрептолиаза; сосудорасширяющие средства: дибазол, курантил, эуфиллин; нуклеинат натрия, пирогенал,
продигиозан.
Эффективным методом иммуностимуляции является экстракорпоральная иммунофармакотерапия. Один
из методов заключается в том, что полученные от пациента клетки, способные продуцировать ин терлейкины,
обрабатывают иммуномодулирующим веществом, например, диуцифоном или фосфолипидами и затем вновь
вводят пациенту.
Иммуносупрессивные средства применяются в тех случаях, когда возникает необходимость в
подавлении иммунитета, например, при трансплантации, при аутоиммунных заболеваниях.
Иммуносупрессивным действием обладают некоторые гормональные препараты и лекарственные средства:
циклоспорин А, азатиоприн, батрпден, сали-цилаты, антилимфоцитарная сыворотка. Иммуносупрессивным
действием обладают также стероидные гормоны, применение которых может проводиться только по строгим
показаниям.
Становление и развитие иммунной системы в онтогенезе
Начальные этапы онтогенеза. Индивидуальное развитие организма начинается с момента
оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом огца. Образуется зигота, из которой развивается зародыш, поровну
наследующий геном родителей. Следовательно, он в генетическом отношении не является идентичным ни
матери, ни отцу. По законам иммунологии материнская иммунная система должна препятствовать имплантации
оплодотворенной яйцеклетки. Поэтому дальнейшее развитие зародыша возможно благодаря сложной системе
защиты его от иммунного ответа матери.
Доступ сперматозоида к яйцеклетке и слияние их возможны потому, что: 1) система местного иммунитета
женского полового тракта не препятствует продвижению сперматозоидов; 2) женские половые пути отчасти
изолированы от общего кровотока; 3) семенная жидкость содержит вещества, подавляющие иммунные процессы.
В дальнейшем оплодотворенная яйцеклетка имплантируется в матке и не отторгается благодаря тому, что
иммунная система беременной женщины проявляет относительную толерантность к антигенам эмбриона.
Функцию изоляции плода от иммунной системы матери выполняет плацентарный барьер (трофобласт). Крово-
ток матери и плода оказываются полностью изолированными друг от друга. Плацента и плод синтезируют белки
и гормональные вещества, подавляющие реакцию отторжения. При нормально протекающей беременности в
организме беременных вырабатываются факторы, угнетающие иммунный ответ против антигенов плода. В то же
время способность женского организма формировать иммунный ответ против бактерий и вирусов во время
беременности полностью сохраняется.
У плода тимус закладывается на 6-7-й неделе внутриутробного развития, формирование его заканчивается
к концу 3-го месяца, в дальнейшем происходит увеличение коркового слоя. На 11-12-й неделе селезенка, костный
мозг и печень заселяются лимфоцитами. Лимфатические узлы закладываются на 4-м месяце, но полностью
формируются после рождения. Т-лимфоциты появляются у плода на 40-й день, отвечают на антигенное
воздействие на 16-й неделе. Зрелые В-лимфоциты появляются на 12-15-й неделе, способность формировать
гуморальный иммунный ответ - с 10-12-й недели развития плода, причем образуются IgM.
Трансплацентарная передача антител осуществляется с помощью плацентарных клеток, которые
поглощают белковые молекулы и переносят их в неизмененном виде. Переносятся только IgG, причем ин-
тенсивность передачи регулируется концентрацией IgG у матери: при высоких концентрациях передача
замедляется, при низких усиливается. Таким образом поддерживается постоянный уровень IgG в крови плода.
Антитела класса IgM через плаценту не проходят, поэтому новорожденные оказываются недостаточно
защищенными от гра-мотрицательных микробов (кишечных палочек, сальмонелл).
Околоплодные воды обладают защитными свойствами, они почти всегда стерильны, в них
обнаруживаются лизоцим, р-лизин, имму-ноглобулины.
Комплемент через плацентарный барьер не проникает. В тканях плода отдельные фракции появляются на
6-й неделе, в крови - на 10-й неделе, к 19-й неделе кровь содержит весь комплекс белков" комплемента, но при
этом у новорожденных отмечается слабая опсоническая активность крови, с чем связана их чувствительность к
инфекции.
Фагоцитирующие клетки появляются в печени плода на 2-м месяце беременности. Фагоцитарная
активность у них выражена слабо. При наличии инфекции количество их резко падает.
Период новорожденности. В этом периоде происходит интенсивное развитие механизмов иммунитета,
которое определяет иммунный статус в последующем. Исходный уровень компонентов иммунной системы
определяется в пуповинной крови.
Уже в первые часы после рождения организм ребенка сталкивается с разнообразной микрофлорой,
заселяющей его кожу, дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт. В результате происходит стимуляция
лимфоидного аппарата и интенсивное его развитие. Резко повышается количество лимфоцитов. Уже на первой
неделе жизни -физиологический лимфоцитоз, сохраняющийся до 5-6 лет.
У новорожденных слабо выражена активность Т-киллеров, а также реакции ГЗТ, выявляемые
аллергическими кожными пробами. Ос-
лаблены процессы активации комплемента, продукции интерлейкинов и интерферона.
Количество В-лимфоцитов у новорожденных выше, чем у взрослых, но функция их слабее. Гуморальный
иммунитет новорожденного зависит от материнских IgG, которые защищают от вирусов полиомиелита, кори,
краснухи, от менингококков, стрептококков, бордетелл коклюша, коринебактерий дифтерии, клостридий
столбняка.
Слабая фагоцитарная активность лейкоцитов связана в основном с недостатком опсонинов.
Концентрация лизоцима в пуповинной крови выше, чем у матери. В первые три дня количество его
нарастает, к концу первой недели снижается до уровня лизоцима у взрослых.
Грудное молоко содержит не только необходимые питательные вещества в оптимальных для ребенка
соотношениях, но и такие защитные факторы, как систему комплемента в стимулированной форме, лизоцим,
антитела, гормоны, ферменты. Антитела относятся в основном к секреторным SIgA.
Грудное вскармливание защищает от инфекций в наиболее уязвимом возрасте. В условиях стационара
грудное вскармливание предохраняет ребенка от внутрибольничных инфекций.
Реакции иммунитета
В основе реакций иммунитета лежит специфическое взаимодействие между антигеном и антителами.
Реакции происходят в том случае, если антиген и антитела соответствуют, специфичны друг для друга.
Следовательно, реакции иммунитета можно использовать в двух направлениях: 1) с помощью известных
антигенов определить наличие антител в сыворотке крови больного и 2) с помощью известных антител, которые
содержатся в иммунной сыворотке, определить вид и тип микроорганизма.
Поскольку в реакциях иммунитета участвует сыворотка, их называют серологическими (лат. serum -
сыворотка).
Процесс взаимодействия антигена и антитела происходит в две фазы. Первая фаза - это специфическое
соединение антигена и антител, вторая - неспецифическая, видимая фаза, происходит обычно в при сутствии
электролитов. Видимое проявление зависит от антигена: если это корпускулярный антиген, например, микробы,
то образуются хлопья (агглютинация), если антиген растворимый (молекулярно-дисперс-ный), например, белки
или полисахариды, то образуется осадок (преципитация)
Реакция нейтрализации токсина антитоксином
В этой реакции антигеном является экзотоксин, антителами - антитоксины. При их взаимодействии
происходит нейтрализация токсина. Реакцию ставят в пробирках для определения силы антитоксической
сыворотки. Внешнее проявление реакции - флоккуляция (помутнение). Для обнаружения токсина с
диагностической целью при ботулизме, столбняке, газовой анаэробной инфекции ставят реакцию нейтрализации
токсина антитоксином в биологическом опыте на животных.
Реакция агглютинации
Реакция агглютинации - склеивание бактерий под влиянием специфических антител. Реакция протекает в
две фазы. В первой фазе происходит специфическое присоединение антител к поверхности клетки, во второй -
образование хлопьев в присутствии электролита (хлорида натрия). Видимая реакция происходит в том случае,
если антитела имеют два активных центра, к каждому их них присоединяется антиген, и в результате образуется
"решетка".
Методы постановки реакции агглютинации:
1) развернутая реакция агглютинации ставится в пробирках с последовательными разведениями
сыворотки;
2) реакция агглютинации на предметном стекле в капле сыворотки, разведенной 1:5 - 1:10; наступает в
течение нескольких минут.
Для определения антигенной структуры микробов, выделенных из организма пациента, используют
агглютинирующую сыворотку, полученную из крови животного (кролика, барана), иммунизированного этими
микробами. Титром диагностической агглютинирующей сыворотки называется наибольшее ее разведение,
которое вызывает агглютинацию.
Если агглютинирующая сыворотка содержит антитела против Н-антигена, то подвижные бактерии
склеиваются своими жгутиками, образуются рыхлые хлопья. Это крупнохлопчатая агглютинация, наступающая
быстро - в течение двух часов.
Сыворотка, содержащая О-агглютинины, вызывает мелкозернистую агглютинацию в течение 18-24 часов.
Агглютинирующие сыворотки, полученные путем иммунизации животных микробами, могут содержать
антитела против родственных микробов, то есть являются поливалентными. Для повышения специфичности
сывороток из них удаляют групповые антитела методом адсорбции по Кастелляни, с помощью групповых
антигенов. Полученные сыворотки называют адсорбированными. Оставляя антитела только к одному антигену,
получают монорецепторные сыворотки. С такими сыворотками ставят реакцию агглютинации на стекле, которая
в этом случае является окончательной, а не ориентировочной.
Для обнаружения антител в сыворотке крови пациента в качестве известного антигена используют убитые
культуры микробов, так называемые диагностикумы. При постановке серологического диагноза учитывают
диагностический титр сыворотки - для большинства заболеваний 1:100 или 1:200.
Реакции непрямой или пассивной гемагглютинации.
Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА или РПГА) более чувствительна и
специфична, чем реакция агглютинации. Эту реакцию также используют в двух направлениях.
1) Для обнаружения антител в сыворотке крови больного применяются эритроцитарные диагностикумы, в
которых антиген адсорбирован на поверхности обработанных танином эритроцитов. В отношении этой реакции
чаще употребляют термин РПГА.
Исследуемую сыворотку разводят в лунках пластмассовых планшетов и добавляют эритроцитарный
диагностикум. При положительной реакции появляется тонкая пленка по стенкам лунки в виде "кружевного
зонтика», при отрицательной реакции - плотный осадок эритроцитов в виде "пуговки".
2) Для обнаружения токсинов и бактериальных антигенов в исследуемом материале применяют
антительные эритроцитарные диагностикумы, полученные путем адсорбции антител на эритроцитах. В от-
ношении этой реакции чаще употребляется термин РНГА. Например, с помощью антительных диагностикумов
обнаруживают антиген палочки чумы, дифтерийный экзотоксин, ботулинический экзотоксин.
Реакция Кумбса (аптиглобулиновый тест)
Реакцию применяют для выявления неполных антител, например, антител к резус-фактору. К Rh+
эритроцитам добавляют исследуемую сыворотку, в которой предполагается присутствие неполных антител к
резус-фактору. Присоединившись к эритроцитам, неполные антитела не вызывают агглютинации, так как имеют
только один активный центр. Затем добавляют антиглобулиновую сыворотку, содержащую антитела к
глобулинам человека. Соединившись с неполными антителами, антиглобулиновая сыворотка вызывает
агглютинацию эритроцитов.
Реакция преципитации
Сущность реакции состоит в осаждении (преципитации) антигена под действием специфических антител.
Для получения видимой реакции необходимо присутствие электролита. Антигеном в реакции преципитации
являются молекулярно-дисперсные вещества.
Реакция кольцепреципитации ставится в узких преципитационных пробирках. В пробирку наливают
иммунную сыворотку, на нее осторожно наслаивают исследуемый материал. При наличии в нем антигена на
границе двух жидкостей образуется непрозрачное кольцо преципитата.
Реакцию применяют в судебной медицине для определения видовой принадлежности белков в кровяных
пятнах, в сперме и т.д.; для определения антигена при диагностике сибирской язвы (реакция Асколи), менингита
и других инфекций; в санитарно-гигиенических исследованиях - для установления фальсификации пищевых
продуктов. Иммунные преципитирующие сыворотки получают путем иммунизации животных соответствующим
антигеном. Например, сыворотка, преципитирующая белок человека, получена путем иммунизации кролика
белком человека. Титр преципитирующей сыворотки - это наибольшее разведение антигена, с которым она
дает реакцию. Сыворотку обычно применяют неразведенной или в разведении 1:5.
Реакция преципитации в агаровом геле проводится несколькими методами. Это реакция двойной
иммунодиффузии, реакция радиальной иммунодиффузии, реакция иммуноэлектрофореза.
Реакция двойной иммунодиффузии (по Оухтерлони). Растопленный агаровый гель выливают в чашку
Петри и после затвердевания в нем вырезают лунки. В одни лунки помещают антиген, в другие - иммун ные
сыворотки, которые диффундируют в агар, образуют в месте встречи преципитат в виде белых полос.
Реакция радиальной иммунодиффузии (по Манчини). В растопленный агаровый гель вносят иммунную
сыворотку, выливают в чашку. После застывания агара в нем вырезают лунки и помещают в них антигены,
которые, диффундируя в агар, образуют кольцевые зоны преципитации вокруг лунок. Чем выше концентрация
антигена, тем больше диаметр кольца. Реакцию применяют, например, для определения в крови
иммуноглобулинов различных классов. Иммуноглобулины классов IgG, IgM, IgA действуют в этой реакции как
антигены, а антитела против них содержатся в специфических мо-норецепторных сыворотках.
Иммуноэлектрофорез. В агаровом геле проводят электрофорез белковых антигенов. В канавку, которая
идет параллельно направлению движения белков, вносят преципитирующую сыворотку. Антигены и антитела
диффундируют в агар, и в месте их встречи образуются линии преципитации.
Реакции иммунного лизиса
Антиген (эритроциты или бактерии), соединившись со специфическими антителами, образует иммунный
комплекс, к которому присоединяется комплемент (С1), и происходит активация комплемента по классическому
пути. Активированный комплемент лизирует эритроциты (гемолиз) или бактерии (бактериолиз). Реакция
бактериолиза применяется для идентификации холерного вибриона.
Реакция гемолиза. Антигеном в реакции служат эритроциты, антитела (гемолизины) содержатся в
гемолитической сыворотке. Гемолизины присоединяются к эритроцитам, происходит активация комплемента,
который лизирует эритроциты. Мутная взвесь эритроцитов превращается в прозрачную ярко-красную жидкость -
«лаковую кровь». Поскольку реакция гемолиза происходит только в присутствии комплемента, ее применяют как
индикаторную для обнаружения комплемента.
Реакция локального гемолиза в геле (реакция Ерне) - вариант реакции гемолиза. Служит для
определения количества антителообразующих клеток (АОК) в селезенке и лимфатических узлах.
Растопленный агаровый гель смешивают с суспензией клеток селезенки и эритроцитами и после
застывания агара добавляют комплемент. Вокруг каждой клетки, продуцирующей гемолизины, образуется зона
гемолиза. По числу таких зон определяют количество клеток, продуцирующих гемолизины.
Реакция связывания комплемента
Реакция связывания комплемента (РСК) ставится в две фазы: в первой фазе антиген соединяют с
исследуемой сывороткой, в которой предполагают наличие антител, и добавляют комплемент, инкубируют в
термостате 30 минут или 18-20 часов в холодильнике.
Вторая фаза: добавляют гемолитическую систему (эритроциты барана + гемолитическая сыворотка).
После инкубации в термостате в течение 30 минут учитывают результат.
При положительной РСК антитела сыворотки, соединившись с антигеном, образуют иммунный комплекс,
который присоединяет к себе комплемент, и гемолиза не произойдет. Если реакция отрицательная (антител в
исследуемой сыворотке нет), комплемент останется свободным, и произойдет гемолиз.
РСК применяется для серологической диагностики сифилиса, гонореи, сыпного тифа и других
заболеваний.
РСК можно применять и для определения антигена, например, вируса. В этом случае в качестве антител
применяется диагностическая иммунная сыворотка.
В качестве комплемента для РСК применяется сыворотка крови морской свинки. Гемолитическую
сыворотку получают из крови кроликов, иммунизированных эритроцитами барана.
Реакции с участием меченых антигенов или антител
Реакции основаны на использовании меченых иммунореагентов. Помечены могут быть антигены,
антитела или антиглобулиновая сыворотка. В качестве метки используют флюоресцентные красители (РИФ),
ферменты (ИФА), радиоизотопы (РИА), электронноплотные соединения (ИЭМ).
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция Кунса. Это метод экспресс-диагностики. Для
постановки РИФ применяются иммунные сыворотки, меченные флюорохромными красителями, например,
изоти-оцианатом флюоресцеина. Флюорохромы вступают в химическую связь с сывороточными белками, не
нарушая их специфичности.
Прямой метод РИФ. Из исследуемого материала, в котором предполагается наличие антигена
(например, холерного вибриона), готовят препарат-мазок и обрабатывают его флюоресцирующей сывороткой,
содержащей антитела к данному антигену (в нашем случае - противохолерной сывороткой). При микроскопии в
люминесцентном микроскопе наблюдают светящиеся микробы.
Недостатком прямого метода РИФ является необходимость иметь большой набор флюоресцирующих
сывороток против каждого антигена.
Непрямой метод РИФ. Препарат-мазок обрабатывают иммунной кроличьей антисывороткой к антигену
(противохолерной кроличьей сывороткой), а затем - флюоресцирующей антиглобулиновой сывороткой,
содержащей антитела против глобулинов кролика. Затем наблюдают в люминесцентном микроскопе светящиеся
микробы.
При использовании этого метода можно иметь одну флюоресцирующую сыворотку против глобулинов
кролика.
Иммуноферментный анализ (ИФА). Как и другие реакции иммунитета, ИФА используется 1) для
определения неизвестного антигена с помощью известных антител или 2) для выявления антител в сыворот ке
крови больного с помощью известного антигена. Особенность реакции в том, что известный ингредиент реакции
соединен с ферментом, и его присутствие определяется с помощью субстрата, который при действии фермента
окрашивается.
Наиболее широко применяется твердофазный ИФА.
1) Обнаружение антигена (рис. 20). Первый этап - адсорбция специфических антител на твердой фазе, в
качестве которой используют полистироловые или поливинилхлоридные поверхности лунок пластиковых
панелей.
Второй этап - добавление исследуемого материала, в котором предполагается наличие антигена. Антиген
связывается с антителами. После этого луночки промывают.
Третий этап - добавление специфической сыворотки, содержащей антитела против данного антигена,
меченые ферментом. В качестве
фермента используют пероксидазу или щелочную фосфатазу. Меченые антитела присоединяются к
антигенам, а их избыток удаляется промыванием. Таким образом, в случае присутствия в исследуемом ма териале
антигена на поверхности твердой фазы образуется комплекс антитело-антнген-антитела, меченные ферментом.
Для обнаружения фермента добавляют субстрат. Для пероксидазы субстратом служит ортофенилдиамин в смеси
с Н2О2 в буферном растворе. При действии фермента образуются продукты, имеющие коричневую окраску, ин -
тенсивность которой позволяет количественно определить результаты опыта фотометрированием.
2) Обнаружение антител (рис. 21). Первый этап - адсорбция специфических антигенов на стенках лунки.
Обычно в коммерческих системах антигены уже адсорбированы на поверхности твердой фазы - в лунках или на
пластиковых шариках.
Второй этап - добавление исследуемой сыворотки. При наличии антител образуется комплекс антиген-
антитела.
Третий этап - после отмывания лунок добавляют антиглобулиновые антитела (антитела против
глобулинов человека), меченные ферментом.
Результаты реакции учитывают, как указано выше.
В качестве контролей используют образцы заведомо положительные и заведомо отрицательные.
Разрабатываются "безреагентные" системы для ИФА, в которых все компоненты реакции соединены с
поверхностью полимера. Для проведения анализа необходимо внести исследуемый материал и наблюдать
изменение окраски.
ИФА применяется при многих инфекционных заболеваниях, в частности, при ВИЧ-инфекции, при
вирусных гепатитах.
Иммуноблоттинг - это вариант ИФА, сочетание электрофореза и ИФА. Методом электрофореза в геле,
содержащем ферменты, разделяют биополимеры, например, антигены вируса иммунодефицита человека. Затем
церено-

Лечебные и профилактические препараты Вакцины


Иммунобиологические медицинские лечебные и профилактические препараты служат для профилактики
и лечения больных инфекционными заболеваниями путем создания искусственного иммунитета.
Вакцины - препараты, содержащие антигены и предназначенные для создания в организме
искусственного активного иммунитета. Введение вакцины в организм называют вакцинацией. Вакцины приме-
няют чаще для профилактики, реже - для лечения.
В зависимости от природы антигена, который они содержат, вакцины разделяют на живые, убитые,
химические, анатоксины, ассоциированные.
Вакцины и анатоксины с уменьшенной дозировкой антигена (БЦЖ-м, АД-м и другие) применяют для
вакцинации и ревакцинации при наличии противопоказаний к прививкам полной дозой антигена.
Вакцины против одной инфекции называют моновакцинами, против двух, трех, нескольких -
соответственно дивакцинами, тривакцинами, поливакцинами.
Поливалентными называют вакцины, содержащие несколько серологических вариантов возбудителей
одного вида, например, противогриппозные вакцины типов А и В.
Живые вакцины готовят из живых микроорганизмов, вирулентность которых ослаблена, а
иммуногенные свойства сохранены. Научные основы получения вакцинных штаммов разработал Л. Пастер, уста -
новив возможность искусственного ослабления вирулентности патогенных микробов.
Для получения вакцинных штаммов применялись разные способы.
1) Выращивание на питательных средах, неблагоприятных для роста и размножения возбудителя. Так,
французские микробиологи А. Кальметт и Г. Герен получили вакцинный штамм микобактерий ту беркулеза
(БЦЖ) путем культивирования возбудителей на питательной среде, содержащей желчь.
2) Пассажи возбудителя через организм животных Таким способом Л. Пастер получил вакцину против
бешенства. Многократные пассажи привели к тому, что вирус адаптировался к организму кролика, возросла его
вирулентность для кроликов и снизилась вирулентность для человека.
3) Отбор естественных культур микроорганизмов, маловирулентных для человека. Так были получены
вакцины против чумы, бруцеллеза, туляремии, полиомиелита и др.
Живые вакцины имеют ряд преимуществ по сравнению с убитыми вакцинами. Размножение в организме
человека вакцинного штамма микробов приводит к развитию вакцинальной инфекции - доброкачественно
протекающего процесса, приводящего к формированию специфического иммунитета. Живые вакцины вводятся
более простыми способами (перорально, интраназально, накожно, внутрикожно) и, как правило, однократно.
Благодаря способности вакцинного штамма размножаться в организме и оказывать длительное антигенное воз-
действие создается напряженный, стойкий иммунитет.
Для сохранения стабильности живые вакцины выпускают в виде лиофилизированных препаратов.
Хранить их следует в холодильнике, при температуре 4°-8°С в течение всего срока хранения, а также при
транспортировке вакцин. В противном случае жизнеспособность вакцинного штамма может быть утеряна, и
прививки не дадут нужного эффекта.
При проведении прививок живыми вакцинами соблюдаются определенные правила. За один-два дня до
введения вакцины и в течение недели после вакцинации не следует применять антимикробные пре параты,
иммунные сыворотки, иммуноглобулины. Для введения вакцины нельзя употреблять горячие инстументы.
Вскрытую ампулу употреблять немедленно или в течение 2-3 часов; защищать от солнечных лучей и нагревания.
Кожу обрабатывать летучими веществами, например, спиртом, и вакцину вводить после его испарения; не приме-
нять с этой целью йод, карболовую кислоту и другие соединения, которые задерживаются на коже. Оставшуюся
неиспользованной или забракованную вакцину не выливать, а предварительно убить. Местную реакцию на
введение вакцины не лечить антибактериальными средствами.
Живые вакцины не рекомендуется применять при иммунодефицит-ных состояниях (например, при
лучевой болезни), на фоне которых вакцинные штаммы могут вызвать инфекционные осложнения.
Живые вакцины применяются для профилактики следующих заболеваний: туберкулез, чума, туляремия,
бруцеллез, сибирская язва, корь, оспа, паротит, полиомиелит, желтая лихорадка.
Убитые (инактивированные) вакцины содержат бактерии, вирусы, инактивированные прогреванием,
УФ-лучами, формалином, фенолом, спиртом. Для получения убитых вакцин используют штаммы, полноценные
по иммуногенности. Инактивацию проводят так, чтобы надежно убить микробы, не повредив антигенных
свойств.
Заболевания, для профилактики которых применяют убитые вакцины: лептоспироз, коклюш, грипп,
бешенство, клещевой энцефалит.
Прививки убитыми вакцинами проводятся двукратно или троекратно; иммунитет менее
продолжительный.
Вакцинотерапия. Вакцины из убитых микробов применяются для лечения больных хроническими
вялотекущими инфекционными заболеваниями, такими, как бруцеллез, хроническая дизентерия, хроническая
гонорея, хронический рецидивирующий герпес, хронические стафилококковые инфекции. Лечебный эффект при
этом связан со стимуляцией фагоцитоза и иммунного ответа.
Лечение вакцинами проводится индивидуально, под врачебным наблюдением, так как вакцинотерапия
нередко вызывает обострение инфекционного процесса.
В некоторых случаях для лечения применяют аутовакцины, которые приготавливают из бактерий,
выделенных от самого пациента.
Химические вакцины содержат извлеченные из микробных клеток и из вирусов антигены, обладающие
протективным (защитным) действием. Таким образом, в отличие от живых и убитых вакцин, являющихся
корпускулярными, химические вакцины не содержат микробных клеток или цельных вирионов. Их можно
назвать молекулярнодисперсными.
Преимуществом химических вакцин является то, что они не содержат балластных веществ, они менее
реактогенны, то есть вызывают меньше побочных реакций.
Примеры химических вакцин: брюшнотифозная - содержит О-антиген; холерная (О-антиген);
менингококковая - содержит полисахаридный антиген; сыпнотифозная - содержит поверхностный растворимый
антиген из риккетсий Провацека. Вирусные субъединичные (расщепленные) вакцины содержат наиболее
иммуноленные антшены вирусов. Например, гриппозная вакцина (АГХ) содержит гемагглютинин и
нейраминидазу.
Химические вакцины для повышения иммуногенности адсорбируют на адъюванте (гидроксиде
алюминия). Адъювант укрупняет антп-генные частицы, замедляет резорбцию антигена, удлиняя ею действие.
Кроме того, адъювант является неспецифическим стимулятором иммунного ответа.
Анатоксины - препараты, полученные из бактериальных экзотоксинов, лишенных ядовитых свойств, но
сохранившие иммуногеные свойства. Метод получения анатоксинов предложил в 1923 г. французский ученый Г.
Рамон. Для приготовления анатоксина к экзотоксину прибавляют 0,3-0,4% формалина и выдерживают при
температуре 37-40°С в течение 3-4 недель до полного исчезновения токсических
свойств.
Анатоксины выпускают в виде нагивных препаратов или в виде очищенных адсорбированных на
адъювантах концентрированных препаратов.
Анатоксины применяют для создания искусственного активного антитоксического иммунитета.
Применяются анатоксины, стафилококковый нативный и очищенный адсорбированный, холероген-анатоксин;
адсорбированный дифтерийный (АД, АД-м), дйфтерийно-столбнячный (АДС, АДС-м), трианатоксин
(ботулинический типов А, В, Е), тетра-анатоксин (ботулинический типов А, В, Е и столбнячный).
Ассоциированные вакцины содержат антигены, разные по своей природе. Адсорбированная коклюшно-
дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС) содержит инактивированную коклюшную вакцину, дифтерийный и
столбнячный анатоксины, адсорбированные на гидроксиде алюминия.
Вакцины новых поколений. Это вакцины будущего, некоторые из них уже применяются.
1) Искусственные вакцины, составленные из детерминантных групп антигенов, соединенных с белком-
носителем.
2) Генноинженерные вакцины. Методами генетической инженерии гены, ответственные за синтез
антигена, встраиваются в геном бактерий, дрожжей, вирусов. Создана вакцина, содержащая антигены вируса
гепатита В, продуцируемые рекомбинантными клетками дрожжей; готовится генноинженерная вакцина против
ВИЧ-инфекции из антигенов вируса, продуцируемых рекомбинантными штаммами Е. coli; вакцина из антигенов
ВИЧ в составе вируса осповакцины.
3) Разрабатывается метод получения вакцин на основе антиидиотипических антител, то есть антител,
специфичных к иммуноглобулину. Например, антитела против антитоксина могут иммунизировать животное или
человека подобно токсину (или анатоксину).
Вакцины вводят накожно, внутрикожно, подкожно, внутримышечно, интраназально, перорально,
ингаляционно. Для массовых прививок применяют безыгольную инъекцию с помощью автоматов пистолетного
типа, а также пероральное введение вакцины и ингаляционный способ.
Система вакцинации для профилактики инфекционных болезней среди населения регламентируется
календарем прививок, в котором определено проведение обязательных прививок для каждого возраста и
прививок по показаниям.
При введении вакцин могут возникать местные и общие реакции. Общая реакция: повышение
температуры до 38°-39°С, недомогание, головная боль. Эти симптомы обычно проходят через 1-3 дня после при-
вивки. Местно через 1-2 дня на месте инъекции могут появиться покраснение и инфильтрация. Некоторые живые
вакцины - оспенная, туляремийная, БЦЖ при внутрикожном введении вызывают характерные кожные реакции,
что свидетельствует о положительном результате прививки.
Основные противопоказания к применению вакцин: острые инфекционные заболевания, активная форма
туберкулеза, нарушение сердечной деятельности, функции печени, почек, эндокринные расстройства, аллергия,
заболевания центральной нервной системы. Для каждой вакцины существует подробный перечень
противопоказаний, приведенный в инструкции. В случае эпидемии или при угрожающих жизни показаниях (укус
бешеным животным, случаи чумы) необходимо прививать и лиц с противопоказаниями, но под специальным
медицинским наблюдением.
Иммунные сыворотки и аммуноглобулины
В течение многих инфекционных заболеваний в организме вырабатываются антитела, играющие
защитную роль. Но накопление их в достаточном количестве наблюдается обычно через две-три недели от начала
заболевания. Поэтому для специфического лечения и экстренной профилактики (при непосредственной угрозе
заболевания) создают искусственный пассивный иммунитет путем введения иммунных сывороток или
иммуноглобулинов.
По происхождению лечебные сыворотки делятся на гетерологичные (чужеродные) и гомологичные
(полученные из крови человека).
Пассивный иммунитет создается быстро, так как введенные антитела немедленно оказывают защитное
действие, но продолжается недолго. При введении чужеродных сывороток иммуноглобулины выводятся из
организма через 1-2 недели, при введении гомологичных сывороток антитела сохраняются в организме в течение
4-5 недель.
По характеру содержащихся в них антител лечебные сыворотки можно разделить на антитоксические,
антибактериальные, противовирусные.
Антитоксические сыворотки получают путем многократной иммунизации (гипериммунизации)
лошадей, от которых можно получить достаточно большое количество крови. Иммунизацию проводят сначала
анатоксином, затем токсином. Сыворотку крови подвергают очистке от балластных белков методом
ферментирования и диализа ("Диаферм").
Силу антитоксических сывороток измеряют в международных единицах (ME) по способности
нейтрализовать определенную дозу токсина. При практическом применении антитоксических сывороток их
назначают не в весовых или объемных единицах, а в ME.
Сыворотки вводят внутримышечно, подкожно, иногда внутривенно. Поскольку антитоксические
сыворотки являются гетерологичными, введение их производится по Безредка (см. "Аллергия").
Наиболее эффективно раннее применение лечебных сывороток, когда токсин еще не связался с
чувствительными клетками.
Антитоксические сыворотки применяются при токсинемических инфекциях. На практике используются
сыворотки: противодифтерийная, противостолбнячная, противоботулиническая, противогангренозная.
Антибактериальные сыворотки получают гипериммунизацией лошадей соответствующими вакцинами.
Применение антибактериальных сывороток ограничено ввиду их малой эффективности.
Более широко применяются противовирусные сыворотки.
Иммуноглобулины. Для очистки и концентрации иммунных сывороток используют метод, основанный
на разделении белковых фракций сывороток и выделении активных иммуноглобулинов-этиловым спиртом при
низкой температуре (метод водно-спиртового осаждения на холоде). Препараты иммуноглобулинов для внутри-
венного введения получают путем ферментативного гидролиза с химической модификацией, с использованием
более мягких, по сравнению с этанолом, осадителей, ионообменной хроматографией.
Исходным материалом для получения гетерологичных иммуноглобулинов служит сыворотка или плазма
крови гипериммунизированных животных. Таким образом получены иммуногло-булины:
противосибиреязвенный, лептоспирозный, антирабический (против бешенства), против клещевого энцефалита.
Преимуществом гетерологичных иммуноглобулинов является возможность получения препарата с более
высоким титром антител, недостатком - риск аллергических реакций, в связи с чем эти препараты вводят по
Безредка.
Материалом для приготовления гомологичных иммуноглобулинов служит плазма крови человека.
Нормальный иммуноглобулин, называемый также противокоревым, получают из крови доноров или плацен-
тарной крови. Поскольку исходным сырьем при промышленном изготовлении иммуноглобулина является плазма
большого числа доноров (не менее 5000 человек), препараты содержат широкий набор антибактериальных,
антитоксических и противовирусных антител. Нормальный иммуноглобулин используется для экстренной
профилактики и лечения кори, коклюша, менингококковой инфекции, полиомиелита, скарлатины, гепатита, а
также во всех случаях иммунодефицитных состояний, связанных с недостаточностью антител.
Нормальные иммуноглобулины обладают способностью связывать гистамин (гистаминопексия). Эта
способность снижена у больных бронхиальной астмой. На практике применяются препараты -аллерглобулин и
гистоглобулин для лечения больных бронхиальной астмой, экземой, нейродермитами.
Нормальный иммуноглобулин для внутримышечного введения представляет собой 10-16% белковый
раствор, для внутривенного введения - 5% раствор.
Донорские иммуноглобулины направленного действия получают или путем отбора образцов донорской
крови с высоким титром соответствующих антител, или путем предварительной иммунизации доноров.
Применяются иммуноглобулины направленного действия для экстренной профилактики и лечения столбняка,
клещевого энцефалита, гриппа, стафилококковой инфекции.
В качестве средств для создания пассивного иммунитета возможно применение препарата, полученного
из сыворотки молока иммунизированных коров. Например, лактоглобулин, полученный из сыворотки молока
коров, иммунизированных дизентерийными палочками, применяется путем, приема внутрь для лечения детей,
больных дизентерией.
В будущем возможно применение для создания пассивного иммунитета моноклональных антител,
полученных с помощью гибридом из клеток человека. Такие препараты будут максимально специфич ны при
минимальном риске осложнений.
ЧАСТЬ ВТОРАЯ

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ


Лабораторная диагностика инфекционных заболеваний проводится по следующим направлениям: 1)
обнаружение возбудителя заболевания в патологическом материале; 2) обнаружение специфических антител в
сыворотке крови больного (серологическая диагностика); 3) выявление у больного повышенной
чувствительности к возбудителю с помощью аллергических проб.
Обнаружение и идентификацию возбудителя заболевания проводят, используя микроскопический,
микробиологический и биологический методы.
Микроскопический метод используется для обнаружения возбудителя непосредственно в патологическом
материале. Может применяться как самостоятельный метод в отношении некоторых микроорганизмов с
характерной морфологией. С помощью микроскопического метода можно сделать заключение при обнаружении
гонококков в гное, менингококков в спинномозговой жидкости, палочек туберкулеза, а также простейших:
плазмодиев малярии, лейшманий, дизентерийной амебы. Микроскопия применяется как обязательный этап
исследования при микробиологическом методе.
Микробиологический метод применяется для выделения чистой культуры микробов и их идентификации
по ряду признаков: морфологии, способности окрашиваться красителями (тинкториальные свойства), характеру
роста на питательных средах (культуральные свойства), ферментации углеводов, белков и других веществ
(биохимические свойства) и по антигенной структуре. Для эпидемиологического анализа проводят
внутривидовую идентификацию - определение серовара, фа-говара, биовара. С целью назначения рациональной
антибиотикоте-рапии определяют чувствительность выделенной культуры к антибиотикам.
Для экспресс-диагностики применяют РИФ со специфическими сыворотками. Метод позволяет выявить
возбудителя в исследуемом материале в течение нескольких часов.
В последнее время для идентификации микробов применяют методы, основанные на исследовании
состава ДНК. Для этого существует несколько методов.
1) Определение процентного соотношения гуанин + цитозин/ аденин + тимин (Г+Ц/А+Т) (см. главу 4).
2) Определение последовательности нуклеотидов в ДНК микроба. С этой целью путем нагревания
вызывают разделение ДНК на две нити, добавляют ДНК-зонд - участок известной ДНК, меченный
радиоактивной меткой, или ферментом, или биотином. ДНК-зонд присоединяется к одной из нитей исследуемой
ДНК, если он комплементарен, то есть соответствует ей. Присоединение обнаруживается по наличию метки.
3) Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить количество исследуемой ДНК с помощью
фермента полимеразы и таким образом обнаружить даже небольшие количества ДНК.
Биологический метод заключается в заражении животных исследуемым материалом с последующим
выделением чистой культуры или в обнаружении токсина и определения его вида и типа.
Серологические методы направлены на выявление специфических антител в сыворотке крови пациента.
Для этого используют реакции иммунитета. С целью выявления динамики нарастания титра антител исследуют
парные сыворотки, полученные от пациента в начале болезни и через 1-3 недели.
Аллергический метод применяется для выявления повышенной чувствительности к возбудителю путем
постановки внутрикожных проб с аллергеном.
Взятие материала на исследование и пересылка его в лабораторию. Результат микробиологического
исследования во многом зависит от правильного взятия и пересылки материала в лабораторию. Выбор ма териала
зависит от характера заболевания и локализации патологического процесса. Исследуют мокроту, гной,
испражнения, мочу, кровь и др. Материал следует брать до лечения антибиотиками, в достаточном количестве, в
стерильную посуду, с соблюдением приемов, обеспечивающих стерильность. Посуда и инструменты для взятия
материала не должны содержать следов дезинфицирующих веществ. Испражнения собирают в стерильные
картонные тарелки; используют также судна, обработанные дезинфицирующим раствором и тщательно промы-
тые горячей водой. Мочу берут стерильным катетером. Рвотные массы собирают в стерильные банки, мокроту в
стерильные банки с пробкой или в чашки Петри. Гнойное отделяемое ран берут стерильным ватным тампоном
или исследуют тампоны, извлеченные из ран при перевязках. Соскобы со слизистых оболочек зева и носа -
стерильным ватным тампоном на проволоке.
Специальные приемы используются при коклюше (метод кашле-вых пластинок), при исследовании на
менингококковое носительство (носоглоточный тампон).
Материал для исследования на неспорообразующие анаэробы при взятии и пересылке тщательно
оберегают от соприкосновения с воздухом.
Кровь для посева берут с соблюдением правил асептики, предварительно протерев кожу 70% спиртом,
стерильным шприцем из локтевой вены в количестве 5-10 мл и сразу же засевают во флакон с жидкой
питательной средой, количество которой должно быть в 10 раз

дырка
эпидермальный и S. saprophyticus - сапрофитный стафиркокк. Заболевания чаще вызывают золотистые,
реже - эпидермальные, еще реже - сапрофитные стафилококки.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Стафилококки имеют шаровидную форму, в
чистой культуре располагаются в виде гроздьев винограда, в мазках из гноя располагаютсяя поодиночке,
попарно, небольшими скоплениями (цветная вклейка рис. 25). Факультативные анаэробы, лучше растут в
аэробных условиях, при рН 7,2-7,8, на простых питательных средах. Оптимальная температура для роста 37 оС.
В жидких питательных средах образуют равномерное помутнение, на плотных средах образуют гладкие,
выпуклые, блестящие, с ровными краями колонии. Благодаря образованию пигмента колонии могут быть
золотистого, палевого, лимонно-желтого, белого цвета. Пигментообразование лучше всего выражено на средах с
добавлением молока. Стафилококки могут размножаться на средах с большим количеством (8-10%) хлорида
натрия, поэтому солевые среды применяются в качестве элективных: молочно-солевой агар, желточно-солевой
агар.
Стафилококки сбраживают углеводы с образованием кислоты без газа, обладают протеолитическими
свойствами. S. aureus отличаются от двух других видов тем, что продуцируют фермент, вызывающий свер-
тывание плазмы крови (плазмокоагулазу), ферментируют маннит в анаэробных условиях, продуцируют токсины
и ферменты патогенности (табл. 4).
Наличие пигмента не является таксономическим признаком.
Антигены. Стафилококки содержат целый ряд полисахаридных и белковых антигенов. Классификация
по антигенной структуре не получила практического применения.
Фаговары. По чувствительности к типовым бактериофагам стафилококки делятся на фаговары.
Фаготипирование проводится с помощью международного набора бактериофагов.
Токсинообразование. Патогенные стафилококки продуцируют экзотоксины. Гемолизины вызывают
гемолиз эритроцитов разных видов животных и человека. Основным из них является альфа-гемолизин, на основе
которого приготовлен стафилококковый анатоксин. Стафилококки, продуцирующие гемолизин, образуют на
кровяном агаре колонии, окруженные бесцветной зоной гемолиза. Лейкоцидины разрушают лейкоциты.
Эксфолиатины вызывают пузырчатку новорожденных, отслойку эпителия кожи с образованием пузырей,
"синдром ошпаренной кожи". Обнаружен токсин, вызывающий токсический шок (ТТШ). Энтеротоксины,
вызывающие пищевую интоксикацию, в отличие от других экзотоксинов, термостабильны, не разрушаются при
кипячении.
Ферменты, обладающие патогенным действием: гиалуронидаза, лецитиназа, плазмокоагулаза.
Стафилококки, устойчивые к пенициллину и другим b-лактамным антибиотикам, продуцируют b-
лактамазу.

дырка

ях, при постоянной циркуляции стафилококков среди больных могут формироваться так называемые
"госпитальные" стафилококки определенных фаготипов, высоковирулентные, обладающие множественной
лекарственной устойчивостью, нечувствительные к дезинфицирующим средствам. Особенно большое значение в
возникновении внутрибольничных инфекций имеют стафилококки, устойчивые к пенициллину, метициллину.
Заболевания у человека. Стафилококковые заболевания чаще возникают в результате заражения извне,
реже - как эндогенная инфекция.
Стафилококки, главным образом, S. epidermidis, являются представителями нормальной микрофлоры
кожи человека, дыхательных путей и пищеварительного тракта.
У здоровых людей довольно часто встречается носительство S. aureus, главным образом, на слизистой
оболочке носа. Установлено, что только небольшая часть людей постоянно свободна от золотистого
стафилококка. У большинства они обнаруживаются периодически, часть людей являются постоянными
бактерионосителями. Имеется категория носителей, у которых постоянно и в большом количестве обитают S.
aureus с признаками "госпитальных" штаммов. Такие носители, особенно среди медицинского персонала, а также
больные со стафилококковыми заболеваниями, являются основным источником стафилококковых инфекций в
больницах.
Инфекция передается, главным образом, контактным путем или через воздух.
Стафилококки вызывают разнообразные гнойно-воспалительные заболевания: гнойничковые поражения
кожи и подкожной клетчатки, ангины, отиты, пневмонии, уретриты, холециститы, энтероколиты, сепсис и т.д.
Особенно велика их роль в акушерской практике и в хирургии. Стафилококки нередко являются причиной
гнойно-воспалительных заболеваний у новорожденных, маститов у рожениц, гнойных послеоперационных
осложнений, постинъекционных абсцессов. Возбудителями чаще всего являются S. aureus.
S. epidermidis вызывает заболевания такие, как инфекционный эндокардит и другие, главным образом, у
ослабленных больных, в отделениях интенсивной терапии, где заражение может происходить через системы для
внутрисосудистых вливаний, различные катетеры из полимерных соединений.
S. saprophyticus являются частой причиной острых инфекций мочевыводящих путей у молодых женщин.
Особое место занимают пищевые интоксикации, возникающие в результате употребления в пищу
продуктов (чаще всего молочных и сладких блюд), в которых произошло размножение стафилококков и
накопление энтеротоксина. Этот токсин термоустойчив, и даже после термической обработки продукты,
содержащие энтеротоксин, могут вызвать пищевое отравление.
Стафилококки могут явиться причиной токсического шока. Впер-
вые вспышка этого синдрома возникла в США в 1983 году, у женщин, пользующихся во время
менструации гигроскопичными гигиеническими тампонами. У заболевших наблюдалось повышение
температуры тела, гиперемия слизистых оболочек, боли в мышцах, кожная сыпь с шелушением, падение
кровяного давления. Заболевание возникало только при использовании тампонов, выпускаемых одной из фирм.
БЫЛО установлено, что случаи токсического шока возникали вследствие ряда причин: тампоны содержали
карбоксиметилцеллюлозу с глюкозой и соединениями натрия, обладали сунерадсорбирующимп свойствами,
поэтому чрезмерно высушивали слизистую оболочку и травмировали ее; при инфицировании стафилококками
происходило их быстрое размножение в благоприятной среде, чему способствовало присутствие натрия в составе
тампона. После запрета на продажу продукции этой фирмы вспышка прекратилась. В дальнейшем токсический
шок наблюдался у хирургических больных, особенно при использовании гигроскопичных перевязочных
материалов определенных сортов.
Было установлено, что токсический шок вызывают стафилококки, продуцирующие экзотоксин,
названный токсином токсического шока (ТТШ).
Иммунитет. Человек обладает в некоторой степени врожденной устойчивостью к стафилококкам
благодаря защитным свойствам кожи, фагоцитозу, наличию нормальных антител.
После перенесенного заболевания иммунитет непродолжительный. Характерна склонность к рецидивам.
Восприимчивость к стафилококковой инфекции возрастает при травмах, диабете, действии ионизирующих
излучений.
Стафилококковые заболевания не относятся к острозаразным, больных лечат не в клиниках
инфекционных болезней, а в других отделениях больниц.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются гной, слизь из зева и носа, мокрота,
кровь, испражнения, моча; при пищевых отравлениях - рвотные массы, промывные воды желудка, пищевые
продукты.
Микроскопия мазка из исследуемого материала позволяет обнаружить грамположительные кокки и
отметить их количество. Для выделения чистой культуры производят посевы на элективные для стафилококка
среды (молочно-солевой или желточно-солевой агар) и среды для стрептококка (кровяной агар). В случае, если
выделена чистая культура стафилококка, определяют видовую принадлежность по признакам: плазмокоагулаза,
анаэробное сбраживание и аэробное окисление глюкозы и маннита, гемолиз на кровяном агаре, наличие лецити-
назы, ДНК-азы. Определяют чувствительность к антибиотикам. В целях эпидемиологического анализа проводят
фаготипирование.
При пищевых отравлениях определяют наличие энтеротоксина в пищевом продукте с помощью
специфических антисывороток или биопробы на котятах.
Профилактические и лечебные препараты. Стафилококковый анатоксин нативный, применяется для
активной иммунизации с целью лечения при хронических заболеваниях. Стафилококковый анатоксин
очищенный адсорбированный прменяется, главным образом, для профилактики.
Иммуноглобулин человеческий противостафилококковый содержит стафилококковый антитоксин,
приготовлен из крови доноров, иммунизированных стафилококковым анатоксином. Применяется для создания
пассивного иммунитета с целью лечения.
Стафилококковый антифагин (вакцина) - для создания активного иммунитета с целью лечения.
Стафилококковый бактериофаг жидкий. Применяется наружно, внутрикожно, внутримышечно для
лечения.
Стрептококки.
Стрептококки впервые были обнаружены Т. Бильротом в 1874 г. при рожистом воспалении и Л. Пастером
в 1879 г. при гнойных заболеваниях и сепсисе. Выделены в чистой культуре Ф. Розенбахом в 1894 г.
В медицине наиболее важное значение имеют: Streptococcus pyogenes (пиогенный стрептококк), S.
pneumoniae (пневмококк), S. faecalis (энтерококк).
Пиогенные (гноеродные) стрептококки
Морофология, культуральные, биохимические свойства. Клетки стрептококков имеют шаровидную
или овальную форму, размеры 0,5-1 мкм. Располагаются цепочками. Спор не образуют, жгутиков не име ют, в
организме иногда образуют микрокапсулу, грамположительны (цветная вклейка рис. 26).
Факультативные анаэробы. На простых питательных средах растут плохо. Культивируют в сахарном
бульоне и на кровяном агаре, при рН 7,2-7,6, оптимальная температура роста для них 37°С.
В сахарном бульоне образуют придонный и пристеночный рост, оставляя среду прозрачной, на плотных
средах растут в виде мелких точечных колоний.
По характеру роста на кровяном агаре различают стрептококки: р-гемолитические, образующие вокруг
колоний бесцветную зону полного гемолиза; альфа-гемолитические, окруженные зеленоватой зоной вследствие
превращения гемоглобина в метгемоглобин; гамма-стрептококки - не-гемолитические.
Антигены. По полисахаридному С-антигену клеточной стенки стрептококки разделяют на 20
серологических групп, обозначаемых латинскими буквами от А до V. Заболевания человека чаще вызывают
стрептококки группы А. Внутри серогрупп стрептококки разделяют на серовары по белковым антигенам М, Р и
Т. Серовары обозначают цифрами.
Антигенами являются также экзотоксины и ферменты, выделяемые стрептококками.
Токсинообразование, факторы патогенности. Стрептококки продуцируют несколько экзотоксинов. 1)
Гемолизины (стрептолизины): О-стрептолизин - белок, антиген, но антитела к нему не обладают защит ным
действием; S-стрептолизин - небелковый токсин, не является антигеном, повреждает лейкоциты. 2) Эритрогенин
А - скарлатинозный, термолабильный, вызывает явления, характерные для начального этапа скарлатины.
Продукцию этого токсина кодирует профаг (геном умеренного фага). Токсин белковой природы, антиген.
Эритрогенпн А стрептококков всех сероваров одинаков в антигенном отношении. Антитела к нему
(антитоксины) обладают защитными свойствами. 3) Эритрогенин S, термостабильный - аллерген, вызывает
реакцию гиперчувствительности замедленного типа.
Ферменты, оказывающие патогенное действие: гпалуронидаза способоствует распространению в
организме; стрептокнназа (фибринолизин) разрушает фибрин, выпадающий в очаге воспаления, и та ким образом
способствует генерализации процесса. Ферменты являются антигенами.
На поверхности клеток стрептококков имеется М-протеин. обладающий антифагоцитарным действием.
Устойчивость. В окружающей среде стрептококки менее устойчивы, чем стафилококки. На различных
предметах, в пыли они сохраняются в течение нескольких дней, но утрачивают патогенность. Низкие тем -
пературы переносят хорошо. При 56°С погибают через 30 минут. Дезинфицирующие средства в обычных
концентрациях убивают стрептококки в течение 15 минут.
Заболевания у человека. Во внешней среде стрептококки встречаются реже, чем стафилококки. В
организме здорового человека стрептококки обнаруживаются в полости рта, в верхних дыхательных путях, на
коже, в кишечнике. Заболевания могут возникать в результате аутоинфекции, особенно у людей с ослабленным
иммунитетом, или при заражении извне (экзогенная инфекция). Источником заражения являются больные люди
и бактерионосители, путь заражения - воздушно-капельный или контактный.
Стрептококки вызывают разнообразные заболевания. Это ангина, хронический тонзиллит, рожистое
воспаление кожи, скарлатина, гнойные поражения кожи и подкожной клетчатки, нефрит, ревматизм, гнойный
отит, септический процесс. Стрептококки могут быть причиной вторичной инфекции при гриппе, кори, коклюше,
дифтерии, при острых респираторных вирусных инфекциях. Не было обнаружено различий между
стрептококками, вызывающими такие разные по клинической картине заболевания. Только в отношении
скарлатины известно, что эту болезнь вызывают стрептококки группы А, продуцирующие эритрогенин.
Иммунитет. Невосприимчивость после перенесенных стрептококковых заболеваний (кроме скарлатины)
очень слабая. Во время болезни образуются антитела, но защитного значения они не имеют, так как
антитоксический иммунитет (антитела против эритрогенина А) защищает только от скарлатины, а
антимикробный иммунитет (против белка М) является типоспецифическим. Напротив, у людей, перенесших
стрептококковую инфекцию, развивается повышенная чувствительность к возбудителю и в результате -
склонность к рецидивам и повторным стрептококковым заболеваниям: повторные ангины, рожистое воспаление,
хронический тонзиллит, нефрит, ревматизм. В развитии ревматизма имеют значение явления аутоиммунитета -
образование антител к собственным тканям организма. Имеет значение также сохранение в организме L-форм
стрептококков.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат слизь из зева, гной, кровь, мокрота,
моча и другие материалы в зависимости от локализации патологического процесса. Исследуемый материал
засевают в сахарный бульон и на кровяной агар. Дальнейший ход исследования заключается в выделении чистой
культуры и определении вида по морфологии, характеру роста, по гемолизу на кровяном агаре. Определение
серогруппы проводится с помощью реакции преципитации.
Серологические исследования проводятся при ревматизме. Определяют титр антител (анти-О-
стрептолизина, антигиалуронидазы) в динамике для диагностики и для контроля за эффективностью лечения.
Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения
применяют антибиотики, в том числе пенициллин, к которому стрептококки группы А не приобрета ют
устойчивости. К сульфаниламидным препаратам устойчивость может развиваться. Для предупреждения перехода
в хроническую форму заболеваний необходимо полностью проводить курс антибиотикотерапии. За детьми,
перенесшими повторные ангины, устанавливается наблюдение для профилактики ревматизма.
Скарлатинозный стрептококк
Возбудитель скарлатины - (3-гемолитический стрептококк любого серовара, продуцирующий
эритрогенины.
Скарлатина отличается от других стрептококковых инфекций по патогенезу и по механизму иммунитета.
Заболевание протекает циклически. На первом этапе проявляется действие эритрогенина А (ангина,
интоксикация, мелкоточечная сыпь). На втором этапе оказывают действие сами стрептококки (гнойный
лимфаденит, мастоидит, отит), так как антимикробный иммунитет мало выражен. Позже проявляется роль
аллергических реакций, поэтому возможно развитие гломерулонефрита, артериитов, поражение сердца.
Иммунитет. В отличие от других стрептококковых инфекций, после перенесенной скарлатины остается
прочный антитоксический им-
мунитет. Но антимикробный иммунитет типоспецифпчен и слабо выражен, поэтому не предохраняет
переболевшего скарлатиной от других стрептококковых заболеваний.

Пневмококки
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Пневмококки (Streptococcus pneumoniae)
имеют вытянутую форму, напоминающую пламя свечи или ланцет. Располагаются попарно (диплококки), остры-
ми концами в разные стороны. Каждая пара окружена капсулой. Пневмококки не образуют спор и Ж1 утиков.
Грамположительны (цветная вклейка рис. 27).
На простых питательных средах не растут, на кровяном агаре образуют мелкие колонии с зеленоватой
зоной вокруг. В отличие от пио-генных стрептококков расщепляют инулин и растворяются в желчи.
Антигены. Пневмококки имеют капсульный антиген, М-белок, расположенный под капсулой, и
полисахаридный антиген клеточной стенки. По капсульному антигену пневмококки разделяют на 84 серовара.
Факторы патогенности. Пневмококки образуют ферменты, участвующие в патогенезе заболеваний:
гиалуронидазу, фибринолизин, ге-мотоксин, лейкоцидин. М-белок участвует в адгезии пневмококков к клеткам,
капсула создает устойчивость к фагоцитозу.
Устойчивость. Во внешней среде пневмококки неустойчивы. При 60 оС погибают через 10 минут,
чувствительны к дезинфицирующим веществам, но в высушенной мокроте могут сохраняться долго.
Заболевания у человека. Пневмококки вызывают у человека крупозную пневмонию. Они могут также
вызвать генерализованные формы инфекции: менингит, сепсис. В то же время пневмококки являются
обитателями слизистой оболочки верхних дыхательных путей здоровых людей и при снижении
сопротивляемости организма (застойные явления в легких, снижение их защитной функции) могут вызвать пнев -
монию. Заболевания возникают и при заражении извне, воздушно-капельным путем. Источником инфекции
могут быть больные и носители. Возникновению пневмонии способствует переохлаждение, перенесение гриппа
и другие неблагоприятные факторы.
Иммунитет. У многих людей имеется неспецифическая резистентность к пневмококковой инфекции.
После перенесенного заболевания иммунитет слабый, кратковременный, типоспецифический, Часто на -
блюдаются случаи повторной пневмонии вследствие повышенной чувствительности к возбудителю.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования являются мокрота, кровь, спинномозговая
жидкость. Материал надо доставлять в лабораторию немедленно, так как пневмококк быстро погибает.
Обнаружение в мазках грамположительных ланцетовидных диплококков, окруженных капсулой, позволяет
предположить наличие пневмококков. Чистую культуру можно выделить путем посева на кровяной агар, но при
этом помехой могут оказаться посторонние микробы. Эффективным методом является заражение белых мышей
внутрибрюшинно, что приводит к развитию у них сепсиса. Из посевов крови можно выделить чистую культуру
пневмококка.
Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Для предупреждения
эндогенной инфекции у пациентов, которые должны подолгу лежать, а также у больных, получающих гор-
мональную или лучевую терапию, проводится иммуностимулирующая терапия.
Для лечения больных пневмонией применяют пенициллин, макролидные антибиотики.
Энтерококки
Энтерококки (Streptococcus faecalis) - кокки слегка вытянутой формы, располагаются цепочками.
Способны размножаться в средах с 6,5% хлорида натрия, 40% желчи, при рН 9,6-10,2. Устойчивы к кристал-
лвиолету, пенициллину, неомицину. Это используется для создания элективных сред.
Энтерококки устойчивы к действию факторов внешней среды. При 60°С погибают только через 30 минут.
Обладают гемолитическими и протеолитическими свойствами. Могут размножаться в пищевых
продуктах даже при комнатной температуре и вызывать пищевую токсикоинфекцию.
Энтерококки - условно-патогенные микробы, обитают в кишечнике; могут быть причиной гнойно-
воспалительных процессов, чаще в смешанных инфекциях с кишечной палочкой, протеем, стафилококкаи.
Энтерококки, свежевыделенные от больных, продуцируют ферменты патогенности: коагулазу, гиалуронидазу,
ДНК-азу, фибринолизин, протеиназу. При пересевах эта способность утрачивается.
Менингококки
Менингококки - Neisseria meningitidis - впервые описал Л. Вексель-баум в 1887 г.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Менингококки имеют бобовидную форму или
вид кофейных зерен, размером 0,6-1 мкм, располагаются парами, причем вогнутые стороны обраще ны друг к
другу. Грамотрицательны (цветная вклейка рис. 30). В организме образуют микрокансулу, которую утрачивают
при росте на питательных средах.
На простых питательных средах не растут, их культивируют на средах с добавлением сыворотки крови.
Оптимум роста 37°С. Аэробы. Биохимически малоактивны.
Антигены. По капсульному антигену менингококки делятся на 8 серологических групп: А, В, С, D, X, Y,
Z, W-135. Эпидемические вспышки чаще связаны с менингококками группы А.
Факторы патогенности. Менингококки не продуцируют экзотоксина. Содержат эндотоксин в клеточной
стенке. С помощью фимбрий происходит прикрепление (адгезия) менингококков к поверхности эпителиальных
клеток.
Устойчивость. Во внешней среде менингококки неустойчивы, погибают при высушивании, при 50°С
гибнут в течение 5 минут, дезинфицирующие вещества убивают их немедленно. Не переносят низких
температур, погибают даже при комнатной температуре, поэтому при транспортировке материал надо оберегать
от охлаждения.
Заболевание у человека. Источником инфекции является человек -больной или носитель, механизм
передачи - воздушно-капельный. Заражение происходит только при тесном и длительном общении: в казарме,
общежитии, школе, детском саду. Попав на слизистую оболочку носоглотки, менингококки прикрепляются к
клеткам эпителия, размножаются.
Менингококковая инфекция проявляется у человека в разных формах.
1) Носительство - протекает бессимптомно.
2) Назофарингит - воспаление в месте внедрения возбудителя.
3) Эпидемический цереброспинальный менингит - гнойное воспаление мозговых оболочек, вызванное
менингококками, проникшими из носоглотки по лимфатическим и кровеносным сосудам.
4) Менингококцемия - в случае преодоления защитного барьера слизистых оболочек менингококки
проникают в кровь, происходит массовая гибель возбудителя с освобождением эндотоксина, что приводит к
интоксикации.
Иммунитет. Большинство людей обладают врожденным иммунитетом к менингококковой инфекции и
после заражения становятся носителями. Стойкий иммунитет формируется и после перенесенного заболевания, и
в результате носительства.
Лабораторная диагностика при исследовании на носительство и при назофарингите материалом служит
слизь из носоглотки, при менингите - спинномозговая жидкость, при менингококцемии - кровь. При об-
наружении в мазках из спинномозговой жидкости грамотрицательных бобовидных диплококков, расположенных
внутри лейкоцитов, выдают ориентировочный ответ. Выделенные чистые культуры дифференцируют от сходных
по морфологии непатогенных нейссерий, обитающих на слизистой оболочке носоглотки.
При менингите в спинномозговой жидкости можно обнаружить ме-нингококковые антигены с помощью
реакции преципитации или ИФА.
Профилактические и лечебные препараты. Для специфической профилактики применяют химическую
вакцину из полисахаридных антигенов серогрупп А и С. Для лечения применяют антибиотики (пенициллин,
левомицетин) и сульфаниламидные препараты.

Гонококки
Neisseria gonorrhoeae впервые были обнаружены в 1879 г. А. Ней-ссером.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Гонококки по форме сходны с
менингококками, бобовидные диплококки. Гра-мотрицательны (цветная вклейка рис. 28). В патологическом
материале вокруг гонококков образуется слизистое капсулоподобное вещество. Спор и жгутиков гонококки не
образуют.
Гонококки чрезвычайно требовательны к питательным средам и к условиям культивирования.
Питательная среда должна содержать человеческий белок (сыворотку крови или асцитическую жидкость) и дол-
жна быть влажной. Температура при культивировании должна быть 37°С.
Биохимические свойства гонококков слабо выражены.
Антигены. Антигенная структура гонококков изменчива, серологическое типирование не применяется.
Факторы патогенности. Гонококки не образуют экзотоксина. При разрушении клеток выделяется
эндотоксин. С помощью фимбрий осуществляется прикрепление (адгезия) гонококков к поверхности эпите-
лиальных клеток.
Устойчивость. Гонококки во внешней среде малоустойчивы, не переносят высыхания, охлаждения,
гибнут даже при комнатной температуре, Чувствительны и к повышению температуры - погибают при 40°С. Но в
гное, во влажной среде (полотенца, салфетки) могут сохраняться в течение суток. Погибают в растворе
азотнокислого серебра 1:10000, фенола 1%, биглюконата хлоргексидина 0,05%. Чувствительны к пенициллину,
тетрациклину, эритромицину, но приобретают устойчивость к ним.
Заболевания у человека. Гонококки вызывают гонорею - гнойное воспаление слизистых оболочек
мочеполовых органов и бленнорею -гнойное воспаление конъюнктивы глаза. Возможна гонококковая инфекция с
локализацией в прямой кишке и в зеве.
Гонореей болеет только человек. Источник инфекции - больной человек, механизм передачи -
контактный, половой, реже - непрямой контакт (через предметы). Входными воротами для гонококков служит
эпителий уретры, шейки матки. Распространяясь по слизистой оболочке, вызывает гнойное воспаление: острый
уретрит, цервицит. У мужчин в процесс вовлекаются семенные пузырьки, простата, у женщин, помимо матки,
также маточные трубы, яичники. Могут возникнуть осложнения: артрит, эндокардит, менингит, септикопиемия.
Бленнорея новорожденных возникает при прохождении родовых путей матери, больной гонореей.
Болезнь опасна: может привести к слепоте.
Иммунитет. У человека нет врожденного иммунитета к гонорее. Перенесенное заболевание не создает
невосприимчивости. Перебо
левший гонореей может вновь заболеть в результате реинфекцин. В течение болезни образуются
антитела, но они не обладают защитными свойствами. Клеточный иммунитет не формируется.
Лабораторная диагностика. Микробиологические исследования необходимы во всех случаях, для того,
чтобы отличить гонорею от хла-мидиозов и уретритов иной этиологии. При острой гонорее лабораторный
диагноз может быть поставлен бактериоскопическим методом. Для исследования у мужчин берут отделяемое
уретры, у женщин -отделяемое уретры и шейки матки. Мазки из исследуемого материала окрашивают
метиленовой синью и по Граму. Обнаружение бобовидных грамотрицательных диплококков, расположенных
внутри лейкоцитов, позволяет ставить лабораторный диагноз. Однако под действием лекарственных средств и
при хроническом течении болезни гонококки могут изменяться: встречаются грамположительные кокки, крупные
шары, мелкие зерна. При отсутствии в мазках типичных гонококков проводится бактериологическое
исследование - выделение чистой культуры и идентификация.
При хронической гонорее проводят серологическую диагностику - обнаружение специфических антител с
помощью РСК или РНГА.
Профилактические и лечебные препараты. Препарата для плановой иммунизации нет. Для
индивидуальной профилактики в порядке экстренной меры рекомендовано использовать 0,05% раствор
биглюконата хлоргексидина, который выпускается во флаконах с пипеткой под названием "кожный дигитан".
Для предупреждения бленнореи детям сразу после рождения на конъюнктиву глаза накапывают раствор пени-
циллина, альбуцида или другого антимикробпого препарата.
Для лечения больных гонореей применяют антибиотики, к которым чувствителен гонококк.
Эффективный препарат - азитромицин (сумамед).
При хронической гонорее применяют убитую гонококковую вакцину, которая вводится внутрикожно или
внутримышечно, дозируется в млн. микробных клеток.
СЕМЕЙСТВО КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ
Семейство кишечных бактерий (Enlerobacteriaceae) - энтеро-бактерии. Это короткие палочки от 1 до 5
мкм в длину, диаметром 0,4-0,8 мкм. Они не образуют спор, одни из них подвижны, другие не образуют
жгутиков. Видимой при микроскопии капсулы они не имеют, но в организме некоторые из них окружены
капсуловидным слизистым веществом. Грамотрицательны.
Хорошо растут на простых питательных средах. Факультативные анаэробы.
Среди энтеробактерий есть непатогенные, условно-патогенные, обитающие в кишечнике и патогенные,
вызывающие, главным образом, кишечные заболевания. Предполагают, что родоначальником энтеробактерий
была кишечная палочка, от которой в процессе эволюционного развития произошли виды, приспособившиеся к
паразитическому существованию.
Заболевания человека наиболее часто вызывают представители родов: Bscherichia, Salmonella, Shigella,
Klebsiella, Proteus, Yersinia.
Ферментативная активность лучше всего выражена у менее патогенных видов этого семейства (кишечная
палочка) и снижается по мере возрастания патогенности (шигеллы, иерсинии). Определение сахар о литических и
протеолитических свойств используется для идентификации (установления вида) (табл. 5).
Энтеробактерии имеют О-антиген (соматический), К-антиген (капсульный), подвижные бактерии имеют
Н-антиген (жгутиковый). Изучение антигенной структуры применяется для определения видов и серологических
вариантов энтеробактерий.
Таблица 5 Ферментативные свойства кишечных бактерий
Вид Ферментация углеводов Образование
Лактоза Глюкоза Маннит Сахароза индола H2S
Escherichia coli КГ КГ КГ КГ + +
Salmonella typhi - К К - - +
Salmonella paratyphi A - КГ КГ - - -
Salmonella paratyphi В - КГ Кг - - +
(shottmuelleri)
Shigella dysenteriae - К - - -
Shigella flexneri - К К - + -
Shigella boydii - К К К + -
Shigella sonnei К медленно К К К медленно - -
Условные,обозначения: "К" - кислота; "КГ" - кислота и газ; "+" - наличие, "-" - отсутствие, "±" -
встречаются разные варианты
Эшерихии
Род Escherichia назван в честь немецкого ученого Т. Эшериха, который в 1885 г. выделил из фекалий
человека и описал кишечную палочку - Escherichia coli. В этот род входят условно-патогенные кишечные
палочки, являющиеся постоянными обитателями кишечника человека и животных, а также патогенные для
человека варианты, в том числе энтеропатогенные.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Эшерихии представляют собой короткие
толстые палочки, в препаратах располагаются беспорядочно. Спор не образуют, некоторые варианты образуют в
организме микрокапсулу. Есть варианты подвижные (перит-рихи), есть неподвижные. Грамотрицательны
(цветная вклейка рис. 29).
Факультативные анаэробы, растут на простых питательных средах при рН 7,2-7,8, оптимум для роста
37°С. Штаммы Е. coli, выделенные от человека и теплокровных животных, развиваются и при 43-45°С, а
кишечные палочки рыб и холоднокровных животных при такой температуре не размножаются. Это различие
используют для определения санитарного состояния воды, так как только обнаружение Е. coli теплокровных
свидетельствует о фекальном загрязнении.
На дифференциально-диагностических средах Эндо, Левина, Плос-кирева кишечные палочки образуют
окрашенные колонии, так как разлагают лактозу. Они обладают выраженными сахаролитически-ми свойствами:
ферментируют с образованием кислоты и газа лактозу, глюкозу и другие углеводы (табл. 5) и протеолитическими
свойствами - разлагают белки до индола и сероводорода. Желатин не разжижают. Некоторые варианты разлагают
сахарозу.
Антигены. Кишечные палочки имеют О-антиген, который является основным для установления
серовара, в частности, при диагностике кишечных эшерихиозов. К-антиген - это общее обозначение всех по -
верхностных антигенов, среди которых есть термолабильные и термостабильные. У возбудителей кишечных
эшерихпозов это термолабильный В-антиген. Он расположен более поверхностно, чем О-антиген, поэтому для
выявления О-антигена в лаборатории разрушают В-антиген путем кипячения исследуемой культуры. Н-антигены
имеются у подвижных вариантов кишечной палочки, при типировании не определяются. Антигенную структуру
штаммов эшерихиий записывают в виде формулы, например, Е. coli О111:К58:Н12.
Устойчивость. В воде, в почве кишечные палочки месяцами остаются живыми. При 60°С погибают через
15 минут, при кипячении -немедленно. Чувствительны к дезинфицирующим веществам.
Значение Е. coli для человека. 1) Кишечная палочка - представитель нормальной микрофлоры толстой
кишки, приносит пользу как антагонист патогенных бактерий и грибов, принимает участие в синтезе витаминов.
2) Е. coli является санитарно-показательным микроорганизмом для определения фекального загрязнения воды,
пищевых продуктов, оборудования пищеблоков, рук и спецодежды медицинского первсонала и т д Е coh при
этом расценивается не как возбудитель заболевания, а как показатель загрязнения выделениями человека, ко -
торые могут содержать возбудителей кишечных заболеваний 3) Кишечные палочки как условно-патогенные
микроорганизмы у людей с ослабленным иммунитетом могут вызвать гнойно-воспалительные процессы за
пределами желудочно-кишечного гракта пиелиты, циститы, холециститы У пациентов с выраженным
иммунодефицитом может развиться коли-сепснс Гнойное воспаление ран, постинъекционные абсцессы могут
возникнуть в результате заражения извне Кишечные палочки вызывают пищевые гоксикоинфекции при
накоплении в большом количестве в пищевом продукте 4) Энтеропатогенные кишечные палочки вызывают
инфекционные острые кишечные заболевания -эшерихиозы Они возникают как экзогенные инфекции
Источником являются больные люди или бактерионосители, механизм заражения -фекально-оральный Болеют
чаще дети, главным образом в возрасте до 2 лет
Среди возбудителей эшерихиозов различают энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП),
энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИК11), энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП),
энтерогемолитические кишечные палочки (ЭГКП) (табл 6) Они различаются по антигенной структуре, по
возрасту больных и по характеру заболе вания
Энтерогемолйт ические кишечные палочки (ЭГКП), обнаруженные в последнее время, вызывают
геморрагический колит и гемолитическую уремию Эти возбуди! ел и вырабатывают Шига-подобный токсин,
который адсорбируется энтеральными клетками и вызывает токсине-мию Описаны вспышки
тяжелопротекающих пищевых токсикоинфек-ций, вызванных Е coh 0157, среди детей Кроме того, еще выделена
провизорная группа энтероадгерентных Е coh РАКП)
Иммунтет. Устойчивость к эшсрихиозам у детей раннею возраста создается бифидум-флорои кишечника
и антителами грудного материнского молока После перенесенного заболевания иммунитет слабо выражен,
возможны повторные случаи
Лабораторная диагностика основана на выделении чистой культуры возбудителя и определения вида и
серовара При гнойно-воспалительных заболеваниях исследуемым материалом служат моча, желчь, гной из ран и
из полости абсцесса, при сепсисе - кровь, при пищевых токсикоинфекциях - рвотные Массы, промывные воды
желудка, пищевые продукты
Выделенные чистые культуры идентифицируют по биохимическим и антигенным свойствам
При острых кишечных инфекциях исследуют испражнения Посевы производят на дифференциально-
диагностические среды, обычно на среду Эндо Из выросших изолированных колоний кишечной палочки
отбирают те, которые агглютинируются диагностическими ОВ-сыворотками. Пересевают их на скошенный агар,
выделяют чистую культуру и затем определяют серовар в развернутой реакции агглютинации с живой культурой
(В-агглютинация) и прогретой кипячением культурой (О-агглютинация).
Профилактика и лечение. Профилактика эшерихиозов - это, в первую очередь, соблюдение правил
личной гигиены. Это выполнение санитарно-гигиенических правил в родильных домах, молочных кух нях, в
детских садах, в стационарах, на предприятиях пищевой промышленности и общественного питания, постоянный
надзор за качеством пищевых продуктов и воды.
Для лечения эшерихиозов применяют препараты из микробов-антагонистов: бифидумбактерин,
лактобактерин. Кишечные палочки чувствительны к антибиотикам (левомицетин, тетрациклин, полимик-син), к
нитрофурановым препаратам. Но эффективность лечения снижается из-за распространения
лекарственноустойчивых эшерихий, приобретающих устойчивость путем передачи R-плазмид.

Сальмонеллы
Род Salmonella получил свое название в честь американского ученого Д. Салмона, описавшего в 1885 г.
первого из представителей этого рода.
К роду сальмонелл относятся: 1) возбудители брюшного тифа, паратифов А и В; 2) сальмонеллы -
возбудители гастроэнтеритов (сальмонеллезов).
Сальмонеллы - возбудители брюшного тифа и паратифов
Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi был впервые обнаружен в 1880 г. К. Эбертом в органах
людей, погибших от брюшного тифа. Позже у больных, у которых наблюдалась клиническая картина брюшного
тифа, были обнаружены палочки, по биохимическим и серологическим свойствам отличающиеся от палочки
брюшного тифа. Они были названы Г. Шоттмюллером палочками паратифа А и В. Современные их названия:
Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi В (schottmuelleri).
Морфология, кулыуральные, биохимические свойства. Сальмонеллы брюшного тифа и паратифов -
это короткие палочки с закругленными концами, в среднем 1-2 мкм длиной. Все они подвижны (перитрихи), спор
и капсул не образуют. Грамотрицательны. Факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых питательных
средах, при рН 7,2-7,4, оптимум роста при 37°С. Элективной средой для них являются среды, содержащие желчь,
которая препятствует росту кишечных палочек и других бактерий.
Ферментативные свойства сальмонелл используются для определения вида (табл. 5). В отличие от
эшерихий, сальмонеллы не сбражи-вают лактозу и сахарозу, сбраживают глюкозу и маннит, причем па лочка
брюшного тифа только до кислоты, а паратифозные палочки -до кислоты и газа. Палочка паратифа А, в отличие
от палочки паратифа В, не образует сероводорода.
Антигены. Сальмонеллы содержат О-антигены, Н-антигены и К-антиген. Идентификация проводится по
антигенной структуре в соответствии с классификацией, разработанной Кауфманом и Уайтом (табл. 7). По этой
схеме все сальмонеллы по О-антигенам разделены на группы: А, В, С, D, Е и т.д. каждая группа имеет
специфический О-антиген (например, в группе D - это О9). Некоторые группы имеют общие О-антигены
(например, группы А, В и D имеют общий антиген 012). S. typhi, ее вирулентные штаммы, содержат Vi-антиген,
который располагается более поверхностно, чем О-антиген. У Н-антигенов сальмонелл различают I и II фазу. По
I (специфической) фазе внутри групп сальмонеллы делятся на виды.
Пользуясь схемой Кауфмана-Уайта, определяют виды сальмонелл: с помощью монорецепторных О-
сывороток определяют группу, к которой принадлежит выделенная культура сальмонелл, с помощью Н-
сывороток определяют вид.
Факторы патогенности. Сальмонеллы не продуцируют экзотоксина, содержат эндотоксин, который
выделяется при их разрушении. Патогенность их связана также со способностью проникать в клетки и
размножаться в них (инвазивность).
Устойчивость. Возбудители тифо-паратифозных инфекций относительно устойчивы во внешней среде. В
воде открытых водоемов, в в почве, куда они попадают с испражнениями людей, они могут сохраняться в
течение 1 -3 месяцев, на овощах и фруктах 5-10 дней, во льду -до 2 месяцев. При 50°С погибают в течение часа,
при 100°С - немедленно. Дезинфицирующие вещества убивают их в течение нескольких минут.
Заболевания у человека. Брюшным тифом болеет только человек. Источником заражения являются
больные люди и бактерионоси-тели. Механизм заражения фекально-оральный. Возбудители проникают через
рот, попадают в тонкий кишечник, размножаются в лимфоидных тканях тонкого кишечника. Это происходит в
инкубационном периоде, который длится в среднем 10-14 дней. Затем бактерии проникают в кровь, наступает
бактериемия - начало заболевания. С током крови они разносятся по всему организму, внедряясь в печень,
селезенку, почки, костный мозг. Бактерии разрушаются, выделяется эндотоксин, вызывающий интоксикацию.
Попадая из печени в желчный пузырь, возбудители находят здесь благоприятные условия для размножения и
вместе с желчью на третьей неделе заболевания вновь поступают в кишечник, в лимфатические образования. В
результате повторного заноса бактерий в уже сенсибилизированные лимфатические ткани развивается воспале -
ние аллергического характера, приводящее к некрозу и образованию язв. Это может привести к опасным
последствиям: кровотечению из язв и прободению кишечника. Сальмонеллы в это время выводятся из организма
с испражнениями и мочой.
У некоторых больных возбудители могут обнаруживаться в испражнениях и моче после выздоровления в
течение нескольких месяцев, а иногда и лет. Бактерии сохраняются у них в желчном пузыре, откуда время от
времени попадают в кишечник и выделяются с испражнениями, а у некоторых носителей - через почки
выделяются с мочой.
Бактерионосители представляют опасность для окружающих как возможный источник инфекции.
Иммунитет. Во время болезни вырабатываются антитела, титр которых нарастает со второй недели
болезни. Антитела способствуют лизису бактерий, усилению фагоцитоза. Определение антител используется для
диагностики. Возникновение рецидивов болезни и бактерионосительства объясняется недостаточностью
иммунитета.
Лабораторная диагностика. На первой неделе заболевания берут кровь для выделения гемокультуры. С
соблюдением правил асептики из локтевой вены берут кровь в количестве 10 мл, засевают в 100 мл желчного
бульона, направляют в лабораторию. Выделенную чистую культуру (гемокультуру) идентифицируют по
морфологии, биохимическим свойствам и антигенной структуре, определяют фа-говар.
Начиная с третьей недели заболевания, возбудителя выделяют из испражнений, мочи, желчи.
В сыворотке крови определяют антитела, титр которых нарастает к концу первой - началу второй недели
заболевания. Ставят реакцию агглютинации по Видалю, РИГА с эритроцитарными диагностикумами, ИФА.
Для выявления бактерионосительства исследуют с целью обнаружения возбудителя испражнения, мочу,
желчь; с целью обнаруже-
ния Vi-антигена ставят РИГА с эритроцитарным Vi-диапюстикумом. Используют аллергическую кожную
пробу с Vi-тифином (Vi-антиге-ном)
Профилактические и лечебные препараты. Массовой вакцинации не проводится, так как
заболеваемость носит спорадический характер. Существуют химическая брюшнотифозная вакцина, содержащая
О-антиген (применяется по показаниям). Лицам, которые были в контакте с больным, назначают
брюшнотифозный бактериофаг. Из антибиотиков чаще всего применяют левомицетин.
Сальмонеллы - возбудители острых гастроэптероколитов
Сальмонеллы чаще всего вызывают пищевые токсикоинфекции. В последнее время описаны
внутрибольничные сальмонеллезы, возбудители которых являются "госпитальные" штаммы сальмонелл.
Сальмонеллы - возбудители пищевых токеикоинфекций
Пищевые токсикоинфекции - это острые кишечные заболевания, возникающие в результате употребления
пищи, обсемененной сальмонеллами. Возбудителями являются нетифозные сальмонеллы. По схеме Кауфмана-
Уайта известно около 700 сероваров, вызывающих гастроэнтероколит, чаще всего это S. typhimurium, S.
enterilidis, S. heidelberg, S. choleraesuis, S. anatum, S, infantis. Они относительно устойчивы к действию внешних
факторов и способны размножаться в пищевых продуктах. Соление и копчение не убивает их. Большинство
патогенных для человека сальмонелл вызывают заболевания у животных (домашние животные и птицы,
грызуны).
Заболевание у человека. Чаще всего заболевание связано с употреблением в пищу мяса крупного
рогатого скота, кур и яиц. Мясо может быть инфицировано при жизни больного животного или после убоя, при
разделке туши, хранении мяса и приготовлении и хранении готовых блюд. Чаще всего это мясные, молочные
продукты, а также кондитерские изделия, содержащие яйца, не подвергнутые термической обработке.
Для возникновения заболевания имеет значение количество сальмонелл, которые попали с пищей в
желудок. При массовой их гибели освобождается эндотоксин, который попадает в кровь и вызывает ин-
токсикацию уже через несколько часов после приема пищи. В некоторых случаях сальмонеллы проникают в
кровь, вызывая кратковременную бактериемию.
Развитие болезни связано с действием самих возбудителей и их эндотоксина, то есть это
токсикоинфекция. Основные симптомы: боли в животе, тошнота, рвота, частый жидкий стул, озноб, повышение
температуры тела. Заболевание продолжается не более 4-5 дней. Возбудители быстро исчезают из крови и
кишечника. Лица в окружении больного не заражаются.
Иммунитет. В крови больных и реконвалесцентов обнаруживаются антитела, и это можно использовать
для диагностики. После перенесения заболевания невосприимчивости не создается.
Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом служат рвотные массы, промывные воды
желудка, испражнения, моча, кровь, остатки пищи, которую употребляли заболевшие. Проводятся
бактериологические исследования, выделенную чистую культуру идентифицируют по морфологии,
биохимическим свойствам и по антигенной структуре в соответствии со схемой Кауфмана-Уайта с помощью
монорецепторных сывороток.
В сыворотке крови определяют антитела с помощью реакции агглютинации с возбудителем, выделенным
из исследуемых материалов и со стандартными диагностикумами, а также РИГА с эритроцитарными
диагностикумами. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в парных сыворотках крови,
взятых в первый день заболевания и на второй неделе.

Сальмонеллы - возбудители внутриболъничпых инфекций


Возбудителями внутриболытичного сальмонеллеза являются "госпитальные" штаммы сальмонелл, чаще
всего Salmonella typhimurium. В отличие от "диких" (природных) штаммов тех же видов, они не вызывают гибели
мышей при заражении через рот, но более патогенны для человека, и обладают множественной лекарственной
устойчивостью благодаря наличию R-плазмид. «Госпитальные» штаммы обнаружены также среди S. enteritidis.
Заболевание у человека. Источником инфекции являются больные люди. Распространение
внутрибольничных сальмонеллел происходит контактно-бытовым, воздушно-пылевым и пищевым путем.
Проявления болезни разнообразны: бессимптомные бактерионосительство, легкие формы, тяжелые
кишечные расстройства с интоксикацией, бактериемией, иногда с септическими осложнениями. Особенно тяжело
протекает болезнь у детей раннего возраста.
Лабораторная диагностика. Исследуются испражнения, кровь. Выделенные чистые культуры
идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам, антигенной структуре.
Профилактика и лечение. Необходимо соблюдение санитарно-гигиенического режима в лечебных
учреждениях, на предприятиях общественного питания; выявление носителей сальмонелл и санация их. С целью
экстренной профилактики внутрибольничной инфекции назначают поливалентный сальмонеллезный
бактериофаг детям, контактировавшим с больными и носителями, а также матерям.
Антибактериальные препараты (левомицетин, ампициллин) применяют для лечения больных
генерализованными формами сальмонеллеза.
Шигеллы
Возбудителями дизентерир (шигеллеза) являются несколько видов бактерий, объединенных в род
Shigella. Одного из них,впервые обнаружил в 1891 г. русский врач А. Григорьев и изучил во время эпидемии в
Японии в 1898 г. Шига. Впоследствии были выделены и описаны другие виды шигелл. По современной
классификации к роду Shigella относятся 4 группы, соответственно 4 вида. Все виды, кроме S. sonnei, разделены
на серовары, S. flexneri - еще на подсеровары (табл. 8).
В последние десятилетия дизентерию чаще всего вызывают шигеллы Флекснера и Зонне, реже шигеллы
Бойда. S. dysenteriae (Григорьева-Шига) в России не встречается.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Шигеллы представляют собой короткие
грамотрицательные палочки, они не образуют спор и капсул, в отличие от сальмонелл не имеют жгутиков.
Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах, оптимум температуры 37°С, рН 6,8-
7,2. По биохимическим свойствам различаются (табл. 5) Сбраживают глюкозу, лактозу в первые сутки не
ферментируют (шигеллы Зонне - через несколько суток), ман-нит ферментируют все виды, кроме S. dysenteriae.
Антигены. Шигеллы содержат О-антигены, некоторые серовары имеют К-антиген. Среди О-антигенов
есть специфические и групповые.
Токсинообразование. Экзотоксин, обладающий нейротропным действием, продуцируют S. dysenteriae, и
этот вид вызывает заболевание в наиболее тяжелой форме. Все шигеллы содержат термостабильный эндотоксин.
Устойчивость. Наиболее устойчивы во внешней среде S. sonnei. Кипячение убивает шигеллы
немедленно, при 60°С они гибнут через 10-20 минут, но встречаются термоустойчивые S. sonnei, погибающие
только при 70оС в течение 10 минут, то есть способные выжить при пастери зации молока. В воде, почве, в
пищевых продуктах, на предметах, в посуде шигеллы сохраняются жизнеспособными в течение одной-двух
недель. S. sonnei могут размножаться в молоке. В кишечнике мух и на их лапках шигеллы выживают в течение 2-
3 дней. Перелетая с нечистот и отбросов на пищевые продукты, мухи могут переносить возбудителей.
В то же время шигеллы очень нестойки в пробах фекалий, так как погибают под влиянием микробов-
антагонистов и кислой реакции среды. Поэтому пробы, взятые для исследования, надо сразу же засевать на
питательную среду.
Заболевание у человека. Источником инфекции является человек -больной или носитель. Механизм
передачи фекально-оральный. Заражение происходит через рот. Инкубационный период длится от 2 до 7 дней.
Возбудитель проникает в клетки эпителия слизистой оболочки толстой кишки и размножается в них. Это
приводит к воспалению (колиту) и образованию язв. Основные симптомы: повышение температуры тела, боли
внизу живота, рвота, частый стул, в тяжелых случаях примесь в стуле слизи и крови; характерный признак -
тенезмы (ложные болезненные позывы). Болезнь длится 8-10 дней. Больные с легкими формами заболевания
часто не обращаются за квалифицированной помощью, занимаясь самолечением. Недолеченная дизентерия
может переходить в хроническую форму.
Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет нестойкий. Во время заболевания образуются
антитела, обнаружение которых имеет диагностическое значение.
Лабораторная диагностика. Материалом для бактериологического исследования являются испражнения
(faeces). Пробу следует брать до начала антибактериальной терапии, посев производить сразу же или помещать
пробу в консервирующую жидкость (30% глицерина и 70% буферного раствора) не более, чем на один день. Для
посева отбирать комочки слизи. Количество шигелл в пробе может быть очень скудным, поэтому посев
производится на элективную среду Плоскирева или на среду обогащения - селенитовую.
Выделенную чистую культуру идентифицируют по морфологии, биохимическим свойствам и в реакции
аглютинации с адсорбированными видовыми сыворотками. Определяют чувствительность к антибиотикам.
Шигеллы относятся к числу бактерий, быстро приобретающих устойчивость к антибиотикам, в большинстве
случаев связанную с R-плазмидами. Кроме того, антигены шигелл выявляют в фекалиях с помощью ИФА.
С целью диагностики используют серологические реакции: агглютинации, РИГА. Антитела появляются
на второй-третьей неделе заболевания.
Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. В очагах заболеваемости
используют дизентерийный бактериофаг.
Лечение антибиотиками следует проводить с учетом чувствительности к ним возбудителей. Применяют
левомицетин, тетрациклин; эффективны нитрофурановые препараты, поливалентный бактериофаг. При
хронической дизентерии применяют вакцинотерапию с помощью химической вакцины, вводимой через рот.
Клебсиеллы
Род Klebsiella получил свое название в честь немецкого ученого Э. Клебса. Среди представителей этого
рода: Klebsiella pneumoniae, Klebsiella ozaenae, Klebsiella rhinoscleromatis.
Морфология, культуральные свойства. Клебсиеллы - короткие, толстые палочки. В препарате
располагаются поодиночке, парами и короткими цепочками Жгутиков не имеют, спор ие образуют. Характерным
признаком клебсиелл является образование капсул как в организме, так и на питательных средах.
Растут на простых питательных средах, на плотных средах образуют слизистые колонии.
Дифференциация их проводится по биохимическим признакам.
Антигены. Клебсиеллы содержат липополисахаридные О-антигены и полисахаридные капсульные
антигены, на основе которых проводится серотипирование. Некоторые антигены являются общими с антигенами
эшерихий и сальмонелл.
Патогенность связана у клебсиелл с наличием капсулы, препятствующей фагоцитозу, и эндотоксинов.
Устойчивость. Клебсиеллы устойчивы во внешней среде, длительно сохраняются в воде, на предметах, в
молочных продуктах могут размножаться при комнатной температуре и в холодильнике. Погибают при
кипячении и при действии дезинфицирующих веществ.
Заболевания у человека. Клебсиеллы пневмонии вызывают воспаление легких (бронхопневмонию),
иногда также сепсис, цистит, острые кишечные инфекции; часто встречаются при смешанных инфекциях.
Клебсиеллы озены являются возбудителями хронического забо левания верхних дыхательных путей с
выделением вязкого секрета и образованием корочек, издающих зловонный запах. Заболевание за разительно,
передается воздушно-капельным путем.
Клебсиеллы риносклеромы вызывают хронический воспалительный процесс слизистых оболочек верхних
дыхательных путей, с образованием узелков (гранулем).
Иммунитет. В течение заболеваний образуются антитела, но они не обеспечивают невосприимчивости.
Хроническое течение заболевания связано с развитием ГЧЗТ.
Лабораторная диагностика. Исследуемые материалы: при пневмонии - мокрота, при озене - слизь из
зева, носа, трахеи, при риносклероме - кусочки тканей из гранулем. Исследование основано на выделении чистых
культур и идентификации по морфологии, культуральным, биохимическим свойствам и определении серовара.
Ставится РСК для обнаружения антител в сыворотке крови больных.
Лечебные препараты. Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики
(стрептомицин, левомицетин, неомицин, тетрациклин), препараты сурьмы.

Протеи
Среди бактерий рода Proteus возбудителями пищевых токсикоинфекций и гнойно-воспалительных
процессов могут быть Proteus vulgaris и Proteus mirabilis.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Протеи - полиморфные палочки, короткие,
длинные, нитевидные, спор и капсул не образуют, имеют жгутики, расположенные перитрихиально. Грам
отрицательны.
Хорошо растут на простых питательных средах. Для протеев характерен «ползучий» рост в виде
голубоватого налета на плотных питательных средах, который образуют роящиеся Н-формы. Штаммы,
потерявшие жгутики и способность к роению, образуют колонии с ровными краями (О-формы). При посеве по
методу Шукевича в конденсационную воду на дне пробирки со скошенным агаром протей быстро покрывает всю
его поверхность.
Протеи обладают хорошо выраженными протеолитическими свойствами: разжижают желатин и
свернутую сыворотку, свертывают молоко, расщепляют мочевину, образуют сероводород, индол, аммиак.
Ферментируют многие углеводы.
Антигены. Протеи имеют О-антигены и Н-антигены, часть из них общие с другими энтеробактериями.
Токсинообразование. Экзотоксина не продуцируют, содержат липополисахаридный эндотоксин
клеточной стенки.
Устойчивость и распространение. Бактерии рода Proteus широко распространены во внешней среде.
Они встречаются в почве, воде, в кишечнике человека и животных. Участвуют в процессах гниения, размножаясь
в отбросах, содержащих органические вещества.
Заболевания у человека. Протеи - условно-патогенные микробы. Могут вызывать у человека гнойно-
воспалительные заболевания: нагноение ран, отит, перитонит, пиелонефрит, цистит. При употреблении в пищу
продуктов, содержащих большое количество этих бактерий, возникает пищевая токсикоинфекция. P. mirabilis
вызывает гнойно-воспалительные заболевания мочевыводящей системы. Они могут возникнуть в результате
заноса бактерий с урологическими инструментами. У новорожденных попадание протея в пупочную ранку
приводит к септическому процессу.
Лабораторная диагностика. Исследуемыми материалами служат, в зависимости от заболевания, гной,
моча, рвотные массы, пищевые продукты. Используется метод посева по Шукевичу. выделенные чистые
культуры идентифицируют по культуральным и биохимическим свойствам и по реакции агглютинации.
Лечебные препараты. Применяют коли-протейный бактериофаг, на-лидиксовую кислоту, антибиотики.
Иерсинии
Среди бактерий, относящихся к роду Yersinia, заболевания у человека вызывают Yersinia peslis
(возбудитель чумы), Yersinia pseudotuberculosis и Yersinia enterocolitica.
Иерсинии чумы
Yersinia pestis был открыт в 1894 г. А. Иерсеном и С. Китазато во время эпидемии чумы в Гонконге.
Морфология, культу-ральные, биохимические свойства. Y. pestis - грамотрицательные небольшие
овоидной формы палочки величиной 1-2 мкм, неподвижные. Спор не образуют, имеют капсулу. В мазках из
патологического материала окрашиваются метиленовой синькой наиболее интенсивно по концам - биполярно
(рис. 31). При размножении на плотных питательных средах имеют вид удлиненных палочек.
Факультативные анаэробы. Растут на простых питательных средах при температуре 28°С, могут расти
при более низких температурах (до +5°С), что можно использовать при выделении чистой культуры. В жидких
питательных средах палочки чумы образуют пленку на поверхности и отходящие от нее вниз нити, похожие на
сталактиты, и осадок в виде хлопьев. На плотной питательной среде образуют колонии, напоминающие
"кружевной платочек" - с плотным центром и фестончатыми краями. Такие R-формы колоний образуют
вирулентные штаммы, а S-формы - невирулентные. Характерные культуральные свойства иерсиний чумы
используются при идентификации.
Сбраживают углеводы с образованием кислоты. Протеолитическая активность выражена слабо (табл. 9).
Антигены. Палочки чумы содержат соматический термостабильный антиген, общий с другими
иерсиниями, а также антиген, общий с эритроцитами людей О-группы. Вирулентные штаммы имеют капсульный
термолабильный антиген, с которым связана иммуногенность возбудителя.
Факторы патогенности. Палочки чумы образуют токсические вещества, которые содержатся в теле
бактерии и в капсуле и обладают свойствами экзо- и эндотоксина. Вирулентность обусловлена также
поверхностно расположенными веществами, обладающими антифагоцитарной активностью, и ферментами:
гиалуронидазой, фибринолизином, гемолизинами, плазмокоагулазой.
Устойчивость. Во внешней среде могут длительно сохраняться, хорошо переносят низкие температуры, в
замороженных трупах, блохах - год и более, в молоке - 3 месяца. При кипячении погибают в течение 1 минуты.
Чувствительны к дезинфицирующим веществам. Прямой солнечный свет убивает их в течение 2-3 часов.
Заболевания у человека. Основной резервуар иерсиний чумы в природе - грызуны (суслики, тарбаганы,
крысы и др.). Чума - зоонозное заболевание. Источником инфекции для человека являются животные и человек.
От животных заражение происходит трансмиссивным путем - при укусе зараженной блохой, контактным путем.
При этом микроб проникает через кожу. От человека, больного легочной чумой, возбудитель передается через
воздух. Клиническая форма чумы зависит от входных ворот инфекции. Бубонная форма развивается при про-
никновении возбудителя через кожу с последующим поражением реги-онарных лимфатических узлов, которые
увеличиваясь, превращаются в бубоны. Отсюда возбудители могут распространяться по лимфатическим или
кровеносным сосудам, вызывать поражение других лимфоузлов, привести к развитию септической формы,
вторичной легочной пневмонии.
При заражении через воздух развивается первичная легочная чума. При всех формах чумы
патологический процесс поражает все органы и системы.
Иммунитет. После перенесенного заболевания иммунитет стойкий.
Лабораторная диагностика. Чума - особо опасная инфекция. Все
исследования проводятся в специальных режимных лабораториях, подготовленным персоналом
Материалом для исследования служат содержимое бубона, мокрота, кровь, испражнения, кусочки орга нов
умерших, трупов животных Если при бактериоскопии мазков из материала обнаруживаются грамотрицательные
овоидные биполярно окрашенные палочки, ставится предварительный диагноз Окончательный диагноз ставится
на основании выделения чистой культуры и ее идентификации но морфологии, культуральным, биохимическим,
антигенным свойствам, по чувствитечьности к чумному бактериофагу По этим признакам дифференцируют их от
других видов иерсиний Ставят биологическую пробу на морских свинках Используется также РИФ В материалах
из загнивших трупов животных возможно обнаружение чумного антигена с помощью реакции преципитации
Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика проводится по
эпидемическим показаниям, живой чумной вакциной, содержащей штамм EV
Из лечебных средств эффективны стрептомицин, тетрациклины Иерсиний псевдотуберкулеза
Yersmm pseudotuberculosis - возбудитель псевдотуберкулеза - открыт Л Малассе и Р Виньялем в 1883 г
Вызывает заболевания, характеризующиеся образованием в органах узелков, внешне сходных с
туберкулезными Одна из форм псевдотуберкулеза, наблюдавшаяся во Владивостоке, описана как "даль-
невосточная скарлатиноподобная лихорадка"
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Грамотрицательные коккобактерии, не
образуют спор, имеют жгутики и капсулу Факультативные анаэробы, хорошо размножаются на простых
питательных средах Важным для эпидемиологии заболевания свойством возбудителей является их
психрофильность Оптимальная температура размножения 20-28°С, размножаются также и при 0 - +4°С
Ферментируют рамнозу, мочевину (табл 9)
Антигены. Содержат О-соматический и Н-жгутиковый антигены Серовары и подсеровары различают по
О- и Н-атигенам
Факторы патогенноеги. Иерсиний псевдотуберкулеза содержат эндотоксин, освобождающийся при их
гибели Некоторые серовары продуцируют экзотоксины
Устойчивость. Во внешней среде устойчивы Будучи психрофилами, могут накапливаться в больших
количествах в пищевых продуктах, хранящихся длительное время в холодильнике
При кипячении погибают через несколько секунд, чувствительны к дезинфицирующим веществам
Заболевания у человека. Источником инфекции являются грызуны Заражение людей происходит
алиментарным путем Факторами передачи чаще всего бывают овощные блюда (салаты, винегреты) и молочные
продукты.
Обозначения: "+" - наличие признака, "-" - отсутствие признака, "±" - признак непостоянен ные продукты,
не подвергшиеся термической обработке. Имеет значение и водный путь передачи.
Возбудители попадают в организм человека через рот. Преодолев защитный барьер желудка, попадают в
тонкий кишечник, в результате развивается гастроэнтерит. Проникновение возбудителей в мезентериальные узлы
приводит к развитию лимфаденита с признаками раздражения брюшины и образованием инфильтрата
(псевдотуберкулезный аппендицит). При прорыве иерсиний в кровь возникают генерализованные формы с
поражением суставов, с проявлениями скарлатиноподобной лихорадки.
Иммунитет. В течение болезни обнаруживаются антитела, но они не обладают протективным действием.
Лабораторная диагностика вследствие большого разнообразия проявлений заболевания имеет
решающее значение. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, фекалии и рвотные мас-
сы. Культивирование возбудителей и выделение чистой культуры проводится при оптимальной для них
температуре. Чистую культуру дифференцируют от других иерсиний по биохимическим свойствам. Для
серологической диагностики исследуют парные сыворотки, взятые в начале и на третьей неделе болезни, в
реакции агглютинации и РНГА.
Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяется
левомицетин и другие антибиотики, нитрофурановые препараты.
Возбудитель кишечного иерсиниоза
Yersinia enterocolitica описан в 1939 г. Дж. Шлейфстейн и М. Колеман. Рапространение иерсиниоза во
многих странах мира наблюдается с конца 60-х годов.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Y. enterocolitica представляет собой
грамотрицательные полиморфные палочки, спор и капсул не образуют, имеют перитрихиально расположенные
жгутики.
Психрофилы, культивируются при 20-26°С, могут размножаться при более низких температурах. При
37°С теряют подвижность. Растут на простых питательных средах. По ферментативным свойствам более
активны, чем другие иерсиний (табл. 9). Различают 5 биохимических вариантов Y. enterocolitica.
Антигены. Имеют О- и Н-антигены. По О-антигенам разделяются
на серовары.
Токсинообразование. Содержат эндотоксин, который выделяется при разрушении бактериальных
клеток. Некоторые штаммы продуцируют экзотоксин. В организме проявляют способность к адге-зии,
внутриклеточному размножению, к инвазии (последняя выражена в меньшей степени, чем у иерсиний
псевдотуберкулеза).
Устойчивость. Устойчивы к низким температурам. При температуре бытового холодильника (4-8°С)
способны длительно сохраняться и размножаться на овощах, фруктах и в молоке. При кипячении погибают через
несколько секунд. Чувствительны к дезинфицирующим средствам.
Заболевания у человека. Y. enterocolitica широко распространены в природе. Источником инфекции
являются грызуны и домашние животные. Вместе с тем, возбудители могут размножаться и во внешней среде как
сапрофиты. Поэтому иерсиниоз можно отнести к сапрозоонозам.
Основной путь заражения - алиментарный. Факторами передачи являются инфицированные мясные
продукты, овощи, молоко, вода.
Проникнув через рот и преодолев защитный барьер желудка, попадают в кишечник, вызывая воспаление
подвздошной кишки, мезентериальных лимфоузлов, иногда и червеобразного отростка и слепой кишки.
Развивается интоксикация и аллергическое состояние. Если возбудители проникают в кровь, возникает
бактериемия и генерализованные формы болезни.
Иммунитет. В течение болезни обнаруживаются антитела к возбудителю, но иммунитет не является
прочным.
Лабораторная диагностика. Материалами для бактериологического исследования служат смыв из
носоглотки, кровь, моча, спинномозговая жидкость, удаленный червеобразный отросток. В оптимальных для
возбудителя температурных условиях выделяют чистую культуру, идентифицируют по морфологии и
ферментативным свойствам, определяют серовар.
Серологическая диагностика проводится с парными сыворотками с помощью реакции агглютинации,
РНГА, ИФА.
Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют
левомицетин и другие антибиотики, бисептол, нитрофурановые препараты.

ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН
Холерный вибрион Vibrio cholerae впервые выделил из испражнений больных и трупов погибших от
холеры и изучил Р. Кох в 1882 г. в Египте. В 1906 г. Ф. Готшлих на карантинной стан ции Эль Тор в Египте
выделил из фекалий паломника вибрион, сходный с вибрионом Коха. Этиологическая роль Vibrio eltor была
признана в 1962 г. по решению ВОЗ.
Таким образом, признано существование двух биоваров: V. cholerae и V. eltor.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Холерные вибрионы имеют форму тонкой
изогнутой палочки, напоминающей запятую, длиной 2-4 мкм, грамотрицательны, не образуют спор и капсулы,
имеют один жгутик (монотрих), очень подвижны (рис. 32).
Очень неприхотливы к питательным средам. Хорошо растут на простых питательных средах щелочной
реакции (рН 8,5-9,0), оптимальная температура для их роста 37°С. Элективной средой для них является щелочная
пептонная вода и щелочной агар. Характерной особенностью холерных вибрионов является быстрый рост.
Будучи аэробами, они в щелочной пептонной воде через 3-4 часа образуют пленку на поверхности среды. На
плотной среде растут в виде прозрачных голубоватых колоний.
Холерные вибрионы проявляют ферментативную активность: разжижают желатин, образуют индол,
быстро расщепляют крахмал, расщепляют до кислоты маынозу и сахарозу, не расщепляют арабинозу (I группа
Хайберга), что является тестом для дифференциации их от
других вибрионов.
Антигены. Вибрионы имеют О-антигены и Н-ан-тигены. Дифференциация видов проводится по О-
антигену (всего их известно 139). Холерные вибрионы - Vibrio cholerae и Vibrio eltor относятся к 01. Между собой
они не различаются по антигенной структуре. Антиген О1 состоит из компонентов А,В и С. По этим
компонентам холерные вибрионы делят на серовары: серовар Огава содержит компоненты А и В, Инаба - А и С,
Гикошима - А, В и С. В 1992 г. в Мадрасе
(Индия), а затем в других странах Азии, наблюдались массовые заболевания холерой, вызванные
холерным вибрионом, имеющим антиген не О1, а О139. Это новый вид Vibrio cholerae О139Bengal (Бенгальский).
Существуют вибрионы, сходные с холерными, по не агглютинирующиеся О-сывороткой. Их назвали
неагглютинирующиеся вибрионы (НАГ'и). НАГ'и выделяются от больных диареей и от здоровых людей,
вызывают гастроэнтериты, которые могут сопровождаться интоксикацией.
Факторы патогешюсти. Холерные вибрионы продуцируют экзотоксин, который носит название
"холероген". Под действием холерогена в тонкой кишке происходит потеря воды и ионов натрия, калия и хлора.
Они обладают также способностью к адгезии. Лишены инвазивности - не проникают ни в клетки, ни в кровь.
Устойчивость. Вибрионы чувствительны к высокой температуре: при 60°С погибают через 5 минут, при
кипячении - немедленно. Быстро погибают при высушивании и действии света. Низкие темпе ратуры переносят
хорошо, во льду сохраняются в течение нескольких дней. В пищевых продуктах, воде, почве, испражнениях
выживают от нескольких суток до нескольких недель. Очень чувствительны вибрионы к кислотам, даже слабой
концентрации. В растворе 1:10000 соляной и серной кислот они погибают в течение несколь ких секунд.
Дезинфицирующие вещества в обычных концентрациях убивают их в течение нескольких минут. Vibrio eltor, по
сравнению с Vibrio cholerae, более устойчив к действию различных внешних факторов.
Заболевания у человека. Холера - антропонозная инфекция. Источником инфекции являются больные
люди и носители. Механизм передачи - фекально-оральный, чаще всего холера передается водным путем, реже
пищевым и контактно-бытовым. Инкубационный период при холере от нескольких часов до 5 суток.
Попав через рот в желудок, холерные вибрионы могут погибнуть под действием кислого желудочного
сока. При пониженной кислотности риск развития заболевания выше. Преодолев желудочный барьер, вибрионы
проникают в тонкий кишечник, прикрепляются к эпителию, размножаются. Выделяющийся холероген вызывает
нарушение водно-солевого обмена - потерю воды и солей. Клинически это проявляется обильной диареей,
Иммунитет. В течение заболевания образуются антитоксины и аптимикробные антитела. Защитную роль
играют секреторные IgA, препятствующие адгезии холерных вибрионов на клетках эпителия тонкой кишки.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат испражнения и рвотные массы, при
вскрытии трупов - отрезок тонкой кишки. Исследуют также воду, пищевые продукты, а также содержимое
кишечника здоровых людей на носительство.
Исследования проводятся в лаборатории особо опасных инфекций. При взятии и пересылке необходимо
соблюдать меры, обеспечивающие безопасность.
Микробиологическое исследование имеет значение для лечения и должно проводиться возможно в
наиболее краткие сроки. Микроскопия мазка из исследуемого материала носит предварительный характер.
Первый ориентировочный ответ можно получить при постановке РИФ.
Через 5-6 часов в посевах на жидких питательных средах исследуют пленку на поверхности среды,
определяют морфологию, подвижность, ставят реакцию агглютинации со специфической сывороткой. Выдают
первый предварительный ответ.
Через 10-12 часов изучают колония на плотных питательных средах, выдают второй предварительный
ответ.
Окончательный ответ выдается после выделения и изучения чистой культуры. Идентификацию культуры
проводят на основании морфологии, подвижности, агглютинации специфическими сыворотками, изучения
биохимических свойств. Для дифференциации Vibrio eltor от Vibrio cholerae используется его способность расти
в питательной среде с полимиксином, агглютинировать куриные эритроциты, лизирфваться специфическим
бактериофагом.
Профилактические и лечебные препараты. Для лечения наиболее важным является восполнение
дефицита воды и электролитов с помощью солевых растворов. Применение тетрациклина дополняет лечение и
позволяет уменьшить объем вводимых солевых растворов. Для специфической профилактики существуют
вакцины: 1)кор-пускулярная убитая; 2)холероген-анатоксин; 3)ассоциированная вакцина (холероген-анатоксин +
О-антиген).
КАМПИЛОБАКТЕРЫ
К роду Campylobacter (греч. campylo - изогнутая) относятся патогенные для человека виды: С. jejuni, С.
fetus, С. coli, С. pylori (Helicobacter pylori).
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Кампилобактерии - тонкие, длиной до 5 мкм,
изогнутые по оси грамотрицательные палочки, напоминающие крылья летящей чайки. Спор и капсул не
образуют. Жгутики, расположенные на одном конце или на обоих концах клетки, создают характерные
винтообразные движения.
Кампилобактеры - микроаэрофилы, то есть растут при пониженной концентрации кислорода (5-8%).
Оптимум рН=7,0, температурный оптимум для роста С. jejuni и С. coli равен 42-43°С, для С. fetus и Н. pylori 37°C.
Для культивирования применяется среда, содержащая аминокислоты, кровь, активированный уголь. Могут
культивироваться на среде, предназначенной для бруцелл. Элективные среды для кампило-бактеров содержат
полимиксин, линкомицин или триметоприм. Растут медленно, колонии появляются через двое-трое суток.
Биохимически мало активны, углеводы не расщепляют, энергию получают путем расщепления
аминокислот.
Антигены. Содержат О- и Н-антигены, видоспецифические.
Факторы пагогенности. Патогенность кампилобактерий связана с адгезивностью, инвазивностыо,
продукцией энтеротоксина. сходного с холерогеном.
Устойчивость. Во внешней среде - в испражнениях больных, в воде кампилобактерий сохраняются в
течение недели, в замороженном мясе
- несколько месяцев, на различных предметах при комнатной температуре - до двух недель.
Чувствительны к дезинфицирующим веществам, к высокой температуре, при кипячении погибают. Устойчивы к
действию желудочного сока и желчи, что позволяет им преодолевать желудочный барьер и сохраняться в
желчном пузыре.
Заболевания у человека. Кампшюбактериозы - зоонозные заболевания. Источником инфекции являются
животные, главным образом домашние и сельскохозяйственные. От человека человеку заболевание передается
очень редко. У животных инфекционный процесс протекает или бессимптомно, или в виде кишечных
заболеваний, спонтанного аборта. Возбудители выделяются у них с испражнениями, мочой, молоком.
Механизм передачи инфекции - фекально-оральный, пути передачи
- водный и пищевой, при употреблении мяса и молока больных животных, возможно заражение при уходе
за больными животными.
Кампилобактерий проникают в организм обычно через рот, реже через поврежденную кожу. Возможно
заражение плода через плаценту.
С. jejuni, С. coli вызывают энтерит, гастроэнтерит, энтероколит, С. fetus у ослабленных людей могут
вызвать менингит, энцефалит, эндокардит, перитонит и др.
II. pylori участвует в развитии гастрита и язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.
Лабораюрная диагностика. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные массы, кровь,
пунктат из суставов, ликвор, биоптат со слизистой оболочки желудка. Исследуют мазки, окрашенные по Граму,
биоптат - гематоксилином и эозином.
Выделяют чистую культуру и идентифицируют.
Применяют серологический метод - обнаружение антител в парных сыворотках с помощью РСК, РНГА.
Лечебные препараты. Эритромицин, гентамицин, метронидазол, фуразолидон, при желудочном
заболевании - Де-нол.
ГЕМОФИЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ
Гемофильные бактерии - это разнородная группа мелких грамотрициательных аэробных
неспорообразующих неподвижных палочек, которые требуют для культивирования среды, содержащие кровь.
Некоторые бактерии из этой группы входят в состав нормальной микрофлоры слизистых оболочек, другие имеют
существенное значение в патологии человека: Haemophilus influenzae, Bordetella pertussis.
Haemophilus influenzae
Палочка инфлюэнцы была обнаружена в мокроте больных во время пандемии гриппа М.И. Афанасьевым,
выделена и изучена в 1822 г. Р. Пфейффером и С. Китазато. Ошибочно ее считали возбудителем гриппа, в
дальнейшем было установлено, что палочка инфлюэнцы сопутствует заболеванию гриппом и вызывает
воспалительные процессы.
Н. influenzae - грамотрицательные мелкие, иногда кокковидные палочки, неподвижные, в организме
образуют капсулу. Требовательны к питательным средам, растут на средах с гретой кровью. Вблизи дру гих
микробов, например стафилококков, образуют более крупные колонии.
Содержат О-антиген, инкапсулированные варианты имеют капсульный антиген, по которому их можно
типировать. Не продуцируют экзотоксин, патогенность их связана с капсулой и эндотоксином.
Во внешней среде нестойки, погибают при 60°С. Чувствительны к дезинфицирующим средствам.
Палочки инфлюэнцы обнаруживаются на слизистых оболочках верхних дыхательных путей и бронхов.
Вызывают вторичные инфекции при гриппе и других заболеваниях. Может происходить заражение извне, в
результате передачи воздушно-капельным путем.
Палочки инфлюэнцы являются возбудителями острых гнойно-воспалительных процессов, таких как
назофарингит, воспаление среднего уха у детей, менингит, пневмония. У грудных детей иногда развивается
ларинготрахеит с резким отеком надгортанника, что требует быстрого выполнения трахеостомии для
предупреждения гибели ребенка.
Микробиологический диагноз ставят путем выделения чистой культуры из мокроты, слизи из носа, гноя,
крови, ликвора и дифференциации ее от других гемофильных бактерий.
У детей до 3 месяцев имеется пассивный иммунитет, переданный им от матери. Чаще всего менингит,
вызванный палочками инфлюэнцы, встречается у детей от 6 месяцев до 3 лет. У взрослых людей появляются
антитела, предохраняющие от инфекции.
Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики и сульфаниламиды.
Некоторые штаммы продуцируют бета-лактамазу и поэтому нечувствительны к пенициллину и ампициллину.
Бордетеллы коклюша
Bordetella pertussis был выделен Ж. Борде и О. Жангу в 1906 г. от больного ребенка.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Бордетеллы коклюша - короткие
грамотрицательные палочки, неподвижны, спор не образуют. Имеют тонкую капсулу.
Строгий аэроб, оптимальная температура для роста 37°С. Требователен к питательным средам, хорошо
растет на картофельно-глицериновом агаре с добавлением сыворотки крови или на казе-иново-угольном агаре
(КУА). Ферментативная активность у палочек коклюша выражена очень слабо.
Антигены. Антигенная структура бордетелл сложна. Выявлены антигены, общие для всех бордетелл,
антигены, специфичные только для Bordetella pertussis и антигены, по которым определяют серо-вары внутри
этого вида.
Факторы патогенности. Основной фактор патогенности - токсин, состоящий из термолабильной и
термостабильной фракций. Кроме того, бордетеллы коклюша содержат сенсибилизирующий фактор и фактор,
стимулирующий лимфоциты.
Устойчивость. Во внешней среде палочки коклюша неустойчивы. Прямой солнечный свет убивает их
через 1-2 часа, УФ-лучи - через несколько минут. При 56°С они погибают через 20-30 минут. Чувствительны к
дезинфицирующим веществам.
Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек, который заразен в
катаральном периоде и в течение 1-1,5 месяцев. Передача происходит воздушно-капельным путем при непосред-
ственном общении с больным, так как возбудитель рассеивается вокруг больного не более чем на 2-2,5 м и
малоустойчив во внешней среде. Возбудитель попадает в организм через верхние дыхательные пути, вызывает
воспаление. Внутрь клеток не проникает. Коклюшный токсин вызывает раздражение слизистой оболочки
дыхательных путей, что ведет к возникновению кашля. Токсин всасывается в кровь и действует на дыхательный
центр, вызывает его возбуждение, которое может распространяться на рвотный центр.
Инкубационный период при коклюше равен 3-15 дням. В течение болезни различают три периода:
катаральный, спазматического кашля и разрешения. У привитых вакциной детей болезнь протекает в легкой
(стертой) форме.
Иммунитет. После перенесения заболевания образуется прочный иммунитет. В течение болезни
образуются антитела, которые определяются в реакции агглютинации и РСК.
Лабораторная диагностика заключается в посеве исследуемого материала, выделении чистой культуры,
ее идентификации. Материалом для исследования служит слизь из носоглотки, которую берут заглоточным
тампоном. При наличии характерного кашля используют метод "кашлевых пластинок": во время приступов
кашля чашку с питательной средой держат вертикально у рта ребенка на расстоянии 5-10 см в течение
нескольких секунд. Идентификация выделенных культур и дифференциация от паракоклюшных бактерий
проводится по кульгуральным, биохимическим и антигенным свойствам
Для подтверждения диагноза используется серологическое исследование реакция агглютинации РСК,
PНГA
Лечебные и профилактические препараты, Дла создания активною иммунитета применяется АКДС и
АКДС-м адсорбированная коклюшно-дифтериино-столбнячная вакцина, в которой коклюшный компонент
представлен убитыми бордетеллами коклюша Для лечения применяют противококлюшный иммуноглобулин и
ангибиотики.
Другие бактерии группы Haemophilus
Bordetclla parapertussis - могут вызывать заболевания сходные с коклюшем, хотя они отличаются ог
кишечных В. pertussis по биологическим свойствам
Haemophiius parainfluen/ae - сходны с H. influenzae и являются обитателями дыхательных путей
человека Обнаружены при инфекционном эндокардите.
Haemophilus ducreyi - возбудитечь мягкого шанкра (болезнь передающаяся половым путем)
СИНЕГНОЙНАЯ ПАЛОЧКА
Синегнойная палочка - Pseudomonas aeruginosa - относится к роду Pseudomonas. К этому роду относят
также Pseudomonas mallei - возбудитель сапа и Pseudomonas pseudomallei возбудитель мелиоидоза.
Pseudomonas aeruginosa впервые описана Л Люкке в 1862 г Является условно-патогенным
микроорганизмом. В постеднее время роль этою микроба в возникновении гнойно-воспалительных процессов
возросла.
Морфология, культуральные свойства. Р aeruginosa - грамотрицательная палочка прямая или cлегкa
изогнутая, длиной до 3 мкм, подвижная - имеет один или два полярно расположенных жгутика. Спор не образует.
Слизистое вещество на поверхноси клеток выполняет роль капсулы.
Aэpoб. Растет на обычных питательных средах. Характерным при знаком Р aeruginosa является
образование пигмента и ароматических веществ вследствие чего питательные среды при росте микроба окра
шиваются в снне-зсленый цвет и издают запах жасмина.
Сахаролитическая активность у синегнойной палочки слабо выражена, она ферментирует только глюкозу.
Протеолитическая активность высокая разжижает желатин и свернутую сыворотку свертывает молоко Многие
штаммы продуцируют бактериоцины (пиоцины)
Антигены. Синептонная палочка имеет О- и Н-антшены по ко-юрым их разделяют на типы
Факторы патогенности. К ним относятся экзотоксин А, гемолизины лейкоцидин, и ферменты -
коагулаза эластаза Капсулоподобное сли
зистое вещество защищает микроб от фагоцитоза Липополисахарид клеточной стенки обладает
свойствами эндотоксина
Устойчивость. Синегнойная палочка обитает в почве, в воде, на растениях, долго сохраняется на
предметах, медицинских инструментах При кипячении погибает сразу, при 60°С - через 15 минут Чувстви тельна
к дезинфицирующим веществам Обладает природной устойчивостью к ряду антибиотиков
Заболевания у человека. Синегнойная палочка относится к условно-патогенным гноеродным бактериям
Она вызывает гнойно-воспалительный процесс при инфицировании ран, чаще всего ожоговых, а также отиты,
пневмонию, пищевые отравления, сепсис, часто в ассоциации с другими микробами Инфекция возникает чаще у
лиц с ослабленным иммунитетом Синегнойная палочка - один из главных возбудителей внутрибольничной
инфекции В условиях клиники распространены "госпитальные" штаммы этого микроба - высокоустойчивые к
антибактериальным средствам и дезинфектантам
Лабораторная диагностика. С целью диагностики из исследуемого материала выделяют чистую
культуру и идентифицируют по морфологии, культуральным признакам и биохимическим свойствам Опреде-
ляют чувствительность к антибиотикам
При санитарно-микробиологических исследованиях выявляют синегнойную палочку как один из
показателей микробного загрязнения Профилактические и лечебные препараты. Для создания активного
иммунитета существует вакцина
Для лечения применяют антибиотики с учетом чувствительности к ним возбудителя карбенициллин,
гентамицин и др , а также гетерологичный иммуноглобулин, иммунную плазму, пиопммуноген.

ЛЕГИОНЕЛЛЫ
Впервые заболевание, названное позже легионеллезом, наблюдалось в 1976 г среди участников съезда
американских легионеров в Филадельфии Заболел 221 человек, умерло 34 В 1977 г Д МайкДейц и Шепард
описали неизвестный ранее микроорганизм, названный Legionella pncumophilla В настоящее время известно 9 ви-
дов, относящихся к роду Legionella
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Легионеллы - грамотрицательные палочки 2-3
мкм в длину, встречаются нитевидные формы Характерная морфологическая особенность - заостренные концы
палочки Спор и капсул не образуют, имеют жгутики (рис 33)
Аэробы, растут в присутствии 5% диоксида углерода, культивируются на угольно-дрожжевом агаре в
виде колоний с коричневым пигментом, диффундирующим в среду Культивируются также в куриных эмбрионах
и в культуре клеток Биохимически мало активны Некоторые штаммы способны флюоресцировать в УФ-лучах.
Факторы патогенности - термостабильный эндотоксин, у некоторых штаммов обнаружен экзотоксин.
Устойчивость. Легионеллы размножаются во внешней среде - в почве, в воде, особенно в теплой (25-
30°С), то есть являются сапрофитами. Чувствительны к дезинфицирующим веществам. Устойчивы к
пенициллинам.
Заболевание у человека. Легионеллез относят к сапронозньш инфекциям. Считают, что источником
инфекции являются объекты внешней среды. Путь передачи - воздушно-капельный. Факторы передачи: вода в
виде атрозоля, почва в виде пыли. В системах кондиционирования воздуха, в душевых создаются условия для
накопления достаточно большого количества возбудителей, чтобы вызвать заболевание у человека. Легионеллез
часто возникает как внутрибольничная инфекция, особенно в специализированных клиниках, отделениях ре-
анимации, центрах гемодиализа. Заболевают преимущественно пожилые люди, курильщики, алкоголики,
наркоманы, лица с иммунодефицитами. Чаще болеют мужчины.
Входными воротами инфекции являются дыхательные пути. Возбудители могут проникать в кровь,
вызывая бактериемию.
Инкубационный период длится от 2 до 10 суток. Клинические формы легионеллеза: 1) болезнь
легионеров, протекающая как тяжелая пневмония; 2) острое респираторное заболевание без пневмонии - болезнь
Понтиак (наблюдалась в 1968 г. в г. Понтиак, США); 3) острое лихорадочное заболевание с сыпью - лихорадка
Форт-Брагг. При тяжелом течении легионеллеза возможен инфекционно-токсическнй шок со смертельным
исходом.
Иммунитет видоспецифичен, механизм его клеточный.
Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом является плев-
ральная жидкость, мокрота, кровь. Применяют РИФ для обнаружения возбудителя непосредственно в
исследуемом материале. Бактериологический метод сложен и применяется в специализированных лабораториях.
Серологический метод применяется широко. В парных сыворотках обнаруживают нарастание титра антител на 2-
3-й неделе заболевания.
Лечебные препараты. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения применяют
эритромицин, рпфампицин.

БРУЦЕЛЛЫ
Род Brucella получил свое название в честь английского ученого Д. Брюса, который в 1886 г. выделил
возбудителя из селезенки умершего человека. К роду Brucella относятся виды: Brucella melitensis, Brucella abortus,
Brucella suis и др.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Бруцеллы -грамотрицательные мелкие,
длиной до 1,5 мкм, палочки овоидной формы. Не образуют спор, не имеют жгутиков и капсулы. Под влиянием
антибиотиков превращаются в L-формы.
Аэробы. В. abortus растут в присутствии 5-10% диоксида углерода. Требовательны к питательным средам,
их культивируют на специальных средах. Выделенные из организма бруцеллы растут медленно, рост
обнаруживается через 1-3 недели, в последующих пересевах растут
быстрее.
Биохимическая активность невысокая. Дифференциация видов основана на способности продуцировать
сероводород и расти в присутствии фуксина и тионина.
Антигены. Бруцеллы содержат поверхностные Yi-антигены и ви-доспецифические соматические
антигены А и М: у В. melitensis преобладает М-антиген, у В. abortus и В. suis - А-антиген.
Факторы патогенности. Бруцеллы содержат эндотоксин и продуцируют фактор инвазивности - фермент
гиалуронидазу.
Устойчивость. Бруцеллы устойчивы к низким температурам, сохраняются в замороженном мясе до 5
месяцев, в брынзе - до 4 месяцев. К высокой температуре чувствительны: при кипячении погибают сразу, при
60°С - за 30 минут, то есть пастеризация молока их убивает. К дезинфицирующим средствам бруцеллы
чувствительны.
Заболевание у человека. Бруцеллез - зоонозная инфекция. В. melitensis вызывает заболевания коз и овец,
В. abortus - крупного рогатого скота, В. suis - свиней. Характерный признак бруцеллеза у животных -
инфекционный аборт. Инфицированными оказываются выделения животных, молоко и молочные продукты. В
России основной источник бруцеллеза - овцы, реже - коровы. Больные люди не являются источником инфекции.
Человек чаще всего заражается алиментарным путем; возбудители могут проникать также через кожу и
слизистые оболочки. Инкубационный период длится 1-3 недели. В развитии заболевания играет роль эндотоксин
бруцелл, их инвазивность, а также сенсибилизация организма. Клиническая картина очень разнообразна: дли-
тельная лихорадка, повышенная потливость, поражение суставов, нервной , сердечно-сосудистой систем.
Течение обычно затяжное и хроническое.
Иммунитет. В течение болезни формируется нестерильный иммунитет. Освобождение организма от
возбудителей происходит путем фагоцитоза. Аллергическое состояние (ГЧЗТ) возникает в первые дни болезни и
сохраняется затем долго.
Лабораторная диагностика. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, моча,
испражнения, иногда - ликвор. Бактериологические исследования проводятся в лаборатории особо опасных
инфекций. Посевы выдерживают в течение месяца, периодически производят высевы. Идентификацию культуры
проводят по морфологии, потребности в диоксиде углерода для роста, наличию роста на средах, содержащих
фуксин и тионин, наличию М- и А-антнгенов, чувствительности к фагу, окислению аминокислот.
Применяют серологическую диагностику с помощью реакции агглютинации Райта и Хеддльсона, PНГА,
РОК, а также аллергическую пробу Бюрне.
Профилактические и лечебные препараты. Основная роль в профилактике принадлежит сашггарно-
гигиеническим мероприятиям. По эпидемическим показаниям применяют живую бруцеллезную вакцину, Для
лечения используют антибиотики (левомицетин, рифамицин, тетрациклин, доксициклин, стрептомицин), при
хроническом бруцеллезе -убитую вакцину.
БАКТЕРИИ ТУЛЯРЕМИИ
Возбудителя туляремии (Francisella tularcnsis) впервые выделили в 1910-1912 гг. американские
бактериологи Г. Мак Кой и Ш. Чепин от больных сусликов и подробно изучил Э. Френсис в местности Туляре
(Калифорния), откуда произошло название болезни и возбудителя.
Морфология, культуральные свойства. Возбудитель туляремии представляет собой мелкие
кокковидные, размером до 0,5 мкм, грамотрицательные палочки, жгутиков не имеет, спор не образует, вокруг
бактерий образуется тонкий слизистый кансулоподобный слой.
Факультативные анаэробы. Па простых питательных средах не растут, их культивируют на средах с
добавлением яичного желтка, на сахарно-кровяном агаре с добавлением цистсина. Ферментативная активность
слабая.
Патогенность связана с эндотоксином и инвазивностыо.
Устойчивость. Длительно сохраняется во внешней среде, особенно при низкой температуре. При
кипячении погибает сразу, при 60°С гибнет через 20 минут. Чувствителен к дезинфицирующим среяствям.
Заболевание у человека. Туляремия - зоонозное заболевание. Источником инфекции являются грызуны.
Человек высоковосприимчив к туляремии. Характерно разнообразие механизмов передачи возбудителя.
Заражение происходит при укусе инфицированными клещами, комарами, слепнями, при прямом контакте с
больными животными или их трупами, через зараженную воду и пищевые продукты, при вдыхании воздуха с
пылью, зараженными выделениями грызунов или при попадании инфицированных частичек пыли на слизистую
оболочку глаз. От человека человеку возбудитель не передается
Инкубационный период составляет 3-7 дней.
В зависимости от путей проникновения возбудителя в организм развивается та или иная форма
туляремии: бубонная, язвенно-бубонная, глазо-бубоныая, ангинозно-бубонная, абдоминальная, легочная, гене-
рализованная.
Иммунитет. После перенесенного заболевания остается стойкий иммунитет и состояние повышенной
чувствительности к возбудителю (ГЧЗТ).
Лабораторная диагностика. Бактериологические исследования проводятся в лаборатории особо опасных
инфекций. Материалом для исследования служат пунктат из бубона, соскоб из язвы, отделяемое конъюнктивы,
слизь из зева, мокрота, кровь. В первичном посеве материала на питательные среды роста не получается, поэтому
вначале производят заражение животных (мышей или морских свинок), а затем из их органов делают мазки-
отпечатки и посев на питательную среду.
Серологическим методом, реакцией агглютинации или РИГА выявляют антитела в сыворотке крови со 2-
й недели болезни.
Аллергическая проба с тулярином положительна уже с 3-5-го дня заболевания.
Профилактические и лечебные препараты. Для создания активного иммунитета по эпидемическим
показаниям применяют живую туляремийную вакцину, полученную отечественными учеными Н.А Гайским и
Б.Я Эльбертом. Вакцина высокоэффективна, вводится однократно накожно.
Для лечения применяют стрептомицин, тетрациклин, хлорамфеникол.

БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ


Возбудитель сибирской язвы Bacillus anthracis открыт в 1849 г. А. Поллендером, выделен и изучен Р.
Кохом в 1876 г.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Bacillus anthracis - грамположительная,
крупная, длиной 5-10 мкм палочка, жгутиков не имеет. Вне организма образует споры, расположенные цент-
рально; в организме человека и животного и на специальных питательных средах образует капсулу. В препаратах
располагаются цепочками.
Аэроб, факультативный анаэроб. Бациллы хороню растут на простых питательных средах. На плотных
средах образуют шероховатые колонии с неровными краями, которые при малом увеличении микроскопа
напоминают локоны волос или львиную гриву. В питательном бульоне растут в виде осадка, оставляя среду про-
зрачной. Биохимическая активность высокая. Желатин разжижают в виде елочки вершиной вниз. Расщепляют
крахмал, казеин, углеводы.
Антигены. Содержат в капсуле видовой белковый антиген, а в клеточной стенке групповой соматический
полисахаридный антиген. Соматический антиген не разрушается при кипячении, и его выявляют с помощью
реакции термоирецпитации по Асколи в зараженных материалах (в коже, шерсти, трупах животных).
Факторы патогенности. Бациллы сибирской язвы продуцируют экзотоксин, состоящий из белковых
компонентов: летального, отечного и протективного. Капсула бацилл обладает антифагоцитарной активностью.
Устойчивость. Вегетативные формы чувствительны к факторам внешней среды - при 60°С погибают в
течение 15 минут. В почве, куда возбудитель попадает с испражнениями, мочой больных животных или трупами,
сибиреязвенные палочки образуют споры. Они высокорезнстентны: в почве остаются живыми в течение многих
лет, выдерживают кипячение в течение 20 минут. Убить их можно сухим жаром или автоклавированием в
режиме стерилизации.
Заболевание у человека. Сибирская язва - зоонозное заболевание. Источником инфекции являются
больные животные, которые заражаются, поедая корм, содержащий споры бацилл, сохранившиеся в почве,
человек заражается при уходе за животными, через инфицированные предметы, изделия из кожи, меха, шерсти,
через мясо больных животных, при вдыхании пыли, содержащей микробы, при укусе кровососущими
насекомыми. Больной человек для окружающих незаразен. Инкубационный период равен 2-3 дням. Клинические
формы сибирской язвы: кожная, легочная, кишечная, проявляются в зависимости от места проникновения
возбудителя. При кожной форме образуется карбункул. При кишечной форме развивается интоксикация,
геморрагические поражения кишечника, при легочной форме - тяжелая бронхопневмония. При любой форме
может наступить септицемия со смертельным исходом.
Иммунитет у переболевших стойкий. В течение болезни развивается ГЧЗТ, которую выявляют с
помощью внутрикожной пробы с антраксином.
Лабораторная диагностика. Бактериологические исследования проводятся в лаборатории особо опасных
инфекций. Материалом для исследования служит содержимое карбункула, мокрота, испражнения, кровь. При
микроскопии мазка обнаруживают грамположительные бациллы, окруженные капсулой. Выделяют чистую
культуру, иденти-
фицируют. Для обнаружения антигена используют РИФ л реакцию Асколи. Аллергическая внутрикожная
проба с аптракшчом становится положительной в первые дни болезни и после выздоровления сохраня ется
надолго.
Профилактические и лечебные препараты. Для специфической профилактики применяется живая
вакцина СТИ, которая содержит споровую культуру бескапсульного варианта сибиреязвенных бацилл.
Вакцинацию проводят по эпидемическим показаниям.
Для лечения используют противоязвснный гетерогенный пмму-ноглобулин и антибиотики: пенициллин,
тетрациклипы, левомнце-тин, рнфампицин.

КОРИНЕБАКТЕРИИ ДИФТЕРИИ
К роду коринсбактерпй относится возбудитель дифчсрин Соrуnebacterium diphtheriae и
условнонатогенные коринебактерии. ложнодифтерийные коринебактерии С. pseudodiphtheriticum, С. xerosis и С.
ulcerans, обитающие в организме человека.
Corynehactcrium diphtheriae обнаружен в 1883 г. Э. Клсбсом. выделен в 1884 г. Ф. Леффлером.
Морфология, кулыуральные, биохимические свойства. Коринебактерии дифтерии - тонкие, слегка
изогнутые грамноложительные палочки длиной 1-5 мкм, жгутиков, спор и капсул не образуют. Ха рактерные
морфологические признаки этих бактерий: булавовидные утолщения на концах, в которых находятся зерна
волютина, расположение палочек в мазке под углом друг к другу, в виде буквы V. Зерна волютина выявляются
при окраске синькой Леффлера (окрашиваются интенсивнее, чем тело бактерии) или по Псйссеру (тело бактерии
окрашивается в желтый цвет, зерна волютнна - в темно-синий) (цветная вклейка рис. 34).
Факультативный анаэроб. Оптимальная температура для роста 37°С, рН среды 7,6. Растет на специальных
питательных средах: на элективной среде - свернутой сыворотке, на среде Клауберга. содержащей свернутую
сыворотку и теллурит калия. В зависимости от биологических свойств, различают биовары палочек дифтерии:
палочки биовара гравис образуют на среде Клауберга крупные серые колонии с неровными краями, радиальной
исчерченностью, напоминающие цветок маргаритки; биовар митис - мелкие, черные, выпуклые колонии с
ровными краями; интермедиус - колонии промежуточного типа. Наибольшей вирулентностью обладает тип
гравис. Характерен рост на скошенной свернутой сыворотке - даже при обильном посеве сплошного роста не
образуется, колонии не сливаются, рост напоминает булыжную мостовую или шагреневую кожу.
Различия в ферментативных свойствах отдельных видов коринебактерии используется в дифференциации
их (табл. 10).
Антигены. По О-атигену С. diphtheriae делят на 11 сероваров. Факторы пагогенности. Основное
свойство возбудителя дифтерии
- токсигенность. Экзотоксин палочки дифтерии вызывает местную воспалительную реакцию и общую
интоксикацию организма с поражением надпочечников, миокарда, нервной системы. Существуют токсигенные и
нетоксигенные штаммы С. diphtheriae. Дифтерию вызывают токсигенные штаммы. Способность вырабатывать
экзотоксин связана с наличием в клетке профага, несущего ген tox+, ответственный за синтез токсина.
Сила токсина измеряется в Dlm - наименьшее количество токсина, убивающее морскую свинку массой
250 г в течение 3-4 суток. Токсин всех дифтерийных палочек одинаков в антигенном отношении, серотипов нет.
Кроме токсина, коринебактерий дифтерии продуцируют ферменты: гиалуронидазу, нейраминидазу,
фибринолизин, которые обеспечивают распространение их в тканях, но бактериемия клинически не проявляется.
Устойчивость. Палочки дифтерии устойчивы к высушиванию, к действию низких температур. Попадая
со слюной и пленками на посуду, детские игрушки, могут длительно здесь сохраняться. Чувствительны к
дезинфицирующим средствам, при кипячении немедленно погибают.
Заболевание у человека. Источником инфекции являются больные люди и носители. Основной путь
передачи - воздушно-капельный, возможен и контактно-бытовой - через посуду, игрушки. Заболевания
возникают у лиц, не имеющих антитоксического иммунитета. У лиц, имеющих антитоксический иммунитет, при
отсутствии у них антимикробного иммунитета против коринебактерин дифтерии, может сформироваться
носительство этих возбудителей с локализацией на слизистой оболочке зева или носа.
Инкубационный период заболевания 2-10 дней. Па месте внедрения развивается воспаление, образуется
дифтеритичсская пленка. Экзотоксин проникает в кровь, развивается токсинемия. Клинические формы дифтерии:
дифтерия зева (85-90% всех случаев), носа, гортани, глаз, наружных половых органов, кожи, ран и др.
Иммунитет. После перенесенного заболевания остаемся стойкий антитоксический иммунитет, но
повторные случаи псе же наблюдаются Уровень антитоксина в крови можно определить с помощью РНГА с
эритроцитарным диапюстикумом, содержащим эритроциты с адсорбированным на них дифтерийным
анатоксином.
Лабораторная диагностика. Ранняя диагностика имеет важное значение для тою, чтобы своевременно
начать лечение. Материал для исследования берут с мест поражения двумя стерильными ватными тампонами.
При исследовании на носительство берут слизь из зева и из носа. Очень важно сразу направить материал в
лабораторию.
Один из тампонов используют для посева, а с другою тампона делают мазки для микроскопического
исследования, но оно редко даст положительный результат. Основным является бактериологическое ис-
следование - посев на чашку с питательной средой, исследование выросших колоний: мазки, изучение
морфологии, определение токсигенносш методом преципитации в агаре с антитоксической сывороткой.
Определение вида С. diphlheriae проводится по биохимическим свойствам. В результатах бактериологического
исследования указывается: "выделена токсигенная С. diphtheriae" или "выделена нетокснгенная С. diphtheriae".
Поскольку эффективность лечения зависит от возможно более раннего ею начала, применяется ускоренный
метод обнаружения дифтерийного токсина непосредственно в исследуемом матриале с помощью реакции
задержки РИГА. Принцип реакции: исследуемый материал в разных разведениях добавляют к определенному
количеству антитоксической сыворотки, затем добавляют эритроцитарный диагностнкум, содержащий
дифтерийный анатоксин. В контроле (без исследу-мого материала) антитоксическая сыворотка вышвает
агглютинацию эритроцнтов. Если в исследуемом материале содержится токсин, он соединяется с сывороткой и
вызывает задержку PHГА.
Профилактические и лечебные препараты. Основное значение в профилактике дифтерии имеет
активная иммунизация, которая проводится, начиная с трехмесячного возраста, вакциной, содержащей дифтерий-
ный анатоксин: АКДС, АДС. В дальнейшем проводят ревакцинацию детям, а затем и взрослым людям.
Противопоказания к проведению прививок очень ограничены.
Имеются вакцины с пониженным содержанием антигенов: АКДС-м, АДС-м, АД-м. используемые для
иммунизации люден, которым противопоказано введение полной дозы вакцины.
Для лечения больных наиболее важна ранняя специфическая серотерапия с помощью антитоксической
противодифтерийной сыворотки с использованием доз в зависимости от локализации процесса. Сыворотка
вводится по способу Безредка. Одновременно проводится ан-тибиотикотерапия (бензилпенициллин,
эритромицин, рифампицин и др.
Другие коринебактерии
Corynebacterium vaginale. С. vaginale выделяют от здоровых женщин, а также при вагинитах в
ассоциации с анаэробными бактериями. Для лечения вагинитов применяют метронидазол.

МИКОБАКТЕРИИ
К роду Mycobacterium относятся патогенные представители - возбудители туберкулеза, возбудители
нетуберкулезных микобактериозов, возбудители лепры, а также большое количество сапрофитов и условно-
патогенных видов, например. М. smegmatis - обитатель наружных половых органов, М. phlei - обитатель объектов
внешней среды.
Микобактерии туберкулеза
Туберкулез - одна из важнейших проблем медицины. Впервые Mycobacterium tuberculosis был открыт Р.
Кохом в 1882 г. Туберкулез у человека вызывают в большинстве случаев М. tuberculosis (более, чем в 90%
случаев), реже М. bovis.
Морфология, культуральные свойства. М. tuberculosis - прямые или слегка изогнутые тонкие палочки
длиной 1-4 мкм, жгутиков, спор и капсул не образуют. Содержат большое количество липидов, поэтому
устойчивы к кислотам, щелочам и спиртам, плохо окрашиваются анилиновыми красителями, для окраски
применяется метод Циля-Нильсена. Встречаются зернистые формы, ветвящиеся формы, отдельные зерна Муха
(кислотоустойчивые и кислотоподатливые). Микобактерии туберкулеза способны переходить в L-формы,
длительно сохраняющиеся в организме.
На простых питательных средах не растут. Для культивирования применяют среду Левенштейна-Йенсена
(яичная среда с добавлением картофельной муки, глицерина, малахитовой зелени), картофельно-гли-цершювую
среду Сотона. Микобактерии туберкулеза растут медленно. На жидких средах через 2-3 недели образуется рост в
виде морщинистой пленки, на плотной среде - морщинистые сухие колонии (R-формы). М. tuberculosis
высоковирулентны для морских свинок.М. bovis отличаются от М. tuberculosis. Это короткие толстые палочки,
растут на питательных средах без глицерина. К этому виду чувствительны кролики.
Вирулентные штаммы М. tuberculosis в микроколониях растут виде переплетенных кос или веревки
благодаря наличию липоидного вещества, названною "корд-фактором" (англ, cord - веревка).
Ангшены. Микобакгерии туберкулеза содержат антигены, общие с другими видами тгого рода и
специфические. Прошш (туберкулин) является аллергеном. Он вызывает воспалительною реакцию только у
людей инфицированных или привитых, у интактных людей не возникает реакции на введение туберкулина.
Факторы патогенности. Микобактерии туберкулеза не продуцируют токсинов. Заболевание возникает в
результате проникновения в макроорганизм и размножения в нем вирулентных бактерий. Патогенность их
связана с действием липидов, корд-фактора, с сенсибилизирующим действием губеркулина.
Устойчивость. Микобакгерии туберкулеза устойчивы к высушиванию, в высохшей мокроте па
предметах сохраняются в течение нескольких месяцев. К действию дезинфицирующих веществ более устойчивы,
чем другие бактерии в 5% растворе карболовой кислоты и в растворе сулемы 1*1000 погибают через сутки. Из
дезинфицирующих средств наиболее чувствительны к хлорной извести и хлорамину.
Заболевание у человека. Источником инфекции являются люди, больные активно протекающим
туберкулезом, и животные. Пути передачи - преимущественно воздушно-капельный, реже контактно-бытовой,
алиментарный (например, через молоко больных коров).
Чаще всего туберкулез поражает легкие, затем но частоте поражения следуют лимфоузлы, кишечник,
составы, кожа, почки и другие органы.
При первичном проникновении возбудителей в организм происходит образование туберкулезных
бугорков, обычно в легком, с вовлечением в процесс лимфатических узлов, формируется первичный комплекс.
При благоприятном течении первичный очаг рассасывается, пораженный участок обызвествлястся.
Туберкулиновая реакция становится положительной. Этот тип первичной инфекции наблюдается обычно у детей,
но его обнаруживают и у взрослых, если они не были инфицированы в детстве и если туберкулиновая реакция у
них осталась отрицательной.
Вторичный туберкулез может возникнуть как экзогенная инфекция, вызванная бактериями, проникшими
извне, или как эндогенная инфекция, связанная с бактериями туберкулеза, сохранившимися в первичном очаге.
Иммунитет. Человек обладает в какой-то степени врожденной невосприимчивостью к микобактериям
туберкулеза, так как не всегда заражение ведет к заболеванию.
Приобретенный иммунитет при туберкулезе имеет свои особенности: 1) невосприимчивость сочетается с
повышенной чувствительностью (ГЧЗГ) к возбудителю; 2) иммунитет нестернльный, поддерживается
присутствием возбудителя в организме; 3) механизм защиты клеточный; специфические антитела образуются в
течение болезни, их можно обнаружить, но они не создают невосприимчивости. Иммун ные Т-лимфоциты,
продуцируя интерлейкины, активируют макрофаги и другие клетки. Образуются бугорки, которые ограничивают
размножение микобактерий, фиксируют их в очагах, препятствуя их распространению.
При туберкулезе особенно важное значение имеет состояние макроорганизма. Восприимчивость к
инфекции увеличивается при неблагоприятных условиях жизни. Развитию туберкулезного процесса спо-
собствуют такие факторы, как сахарный диабет, нервная депрессия и др.
Лабораторная диагностика. Исследуемым материалом является мокрота, моча, промывные воды
желудка, экссудат. Мазки из исследуемого материала окрашивают по Цилю-Нильсену (цветная вклейка рис. 35 и
36). При этом для обесцвечивания применяют не кислоту, а солянокислый спирт, так как микобактерий
туберкулеза, в отличие от сапрофитных микобактерий, обитающих в организме человека, не обесцвечиваются
спиртом. Применяется также РИФ с флюоресцирующей антисывороткой.
Непосредственная микроскопия мазка дает положительный результат, если количество возбудителей
велико. При малом количестве бактерий применяют методы обогащения: метод гомогенизации и метод
флотации, позволяющие сконцентрировать бактерии в небольшом объеме материала.
Более эффективен бактериологический метод - посев на питательные среды, выделение культуры и ее
идентификация, но он требует длительного времени - 3-4 недели. Ускоренный метод состоит в том, что из
исследуемого материала готовят мазок на предметном стекле и помещают в жидкую питательную среду. Через 3-
4 дня образуются микроколонии, которые можно обнаружить при микроскопии мазка, окрашенного по Цилю-
Нильсену.
Наиболее чувствительным методом является биологическая проба - заражение морской
свинки.Аллергическая проба Манту ставится путем внутрикожного введения туберкулина. Используется PPD
(англ, purifed protein derivative) - очищенный белок микобактерий туберкулеза. У людей, которые не имели
контакта с микобактериями туберкулеза реакция отрицательная. Реакция положительная у инфицированных лиц,
в том числе у здоровых, а также у вакцинированных.
Профилактические и лечебные препараты. Для специфической профилактики применяют живую
вакцину BCG (Bacille Calmette-Gue-rin). Вакцинный штамм БЦЖ был получен А. Кальметтом и М. Гере-ном
путем многократных пересевов палочек туберкулеза на питательной среде, содержащей желчь. Вакцинация
проводится всем новорожденным в возрасте 5 или 7 дней внутрикожно. Ревакцинацию проводят лицам с
отрицательной туберкулиновой пробой через 5-7 лет до 30-летнего возраста.
Для лечения применяют антибиотики и химиотерапевтические средства с учетом чувствительности
возбудителей, Препараты I ряда: тубазид, фтивазид, изониазид, дигидрострептомицин. Если возбудители
устойчивы к этим препаратам, применяют препараты II ряда: этионамид, циклосерин, канамнцин, рифамици,
виомицин.

Микобактерии лепры
Возбудитель проказы (лепры) Mycobacterium leprae впервые был описан в 1874 г. норвежским врачом Г.
Ганссном. По морфологии сходны с микобактериями туберкулеза: прямые пли слегка изогнутые палочки длиной
до 7 мкм, отличаются меньшей кислото- и спиртоустойчивостью и характерным расположением в тканях в виде
"пачек сигар" внутри клеток. Палочки неподвижны, ие образуют спор и капсул.
На искусственных питательных средах не культивируются. В качестве экспериментальной модели
используются дсвятшюясные броненосцы, у которых в месте введения образуются типичные узелки - лепромы, а
при внутривенном заражении развивается генерализованный процесс.
Антигены. Имеется 2 антигена: термостабильный полисахаридный. общий для микобактерий и
термолабильный белковый, специфичный для микобактерий лепры.
Токсинообразование. Экзотоксина ие продуцируют. Содержат эндотоксины и аллергены.
Устойчивость во внешней среде экспериментально не изучалась, поскольку чистые культуры ие
получены.
Заболевание у человека. Источником инфекции является больной человек. Заражение происходит при
длительном и тесном общении с больным, поскольку лепра не относится к высококонтагиозным инфек циям.
Считают, что заражение происходит путем прямого контакта и через предметы. Заболевание по наследству не
передается - ребенок, отделенный от матери сразу после рождения, не заболевает лепрой.
Проникновение.возбудителя в организм возможно через поврежденную кожу или через слизистые
оболочки верхних дыхательных путей. Характерен для лепры длительный инкубационный период -в среднем 3-5
лет, ио описаны случаи с более коротким инкубационным периодом в несколько месяцев и с более длительным -
до 20 лег. Характерно медленное течение заболевания. Заболевание может протекать в тяжелой лепроматозной
форме и в более доброкачественной - туберкулоидной форме.
Иммунитет. Человек обладает врожденной резистентностью к лепре. Даже люди, находящиеся в течение
длительного времени в общении с больными, заболевают редко. В течение болезни при тяжелой лепроматозной
форме угнетается клеточный иммунитет, и внутрикожная проба Мицуды с лелромином отрицательная. При
туберкулоидной форме проба положительна.
Антитела к микобактсриям лепры обнаруживаются у больных, но защитной роли не играют.
Лабораторная диагностика проводится бактериоскопическим методом. В мазках из носовой слизи,
соскобов с пораженных участков, окрашенных по Цилю-Нильсену, обнаруживают при микроскопии "лепрозные
шары" с характерно располагающимися в них микобактериями лепры. Проба с лепромином используется как
прогностическая.
Лечебные препараты. Специфической профилактики нет. Однако отмечается снижение заболеваемости
после применения вакцины БЦЖ . Больных лечат в лепрозориях. Для лечения применяют сульфоновые
препараты, средства, стимулирующие иммунитет, диуцифон.

АКТИНОМИЦЕТЫ
Возбудителями актшюмикоза являются различные виды лучистых грибов - актиномицеты: Actinomyces
israelii, Actinomyces bovis и другие. По морфологии они представляют собой нитевидные клетки, ветвящиеся,
распадающиеся на короткие палочковидные и кокковидные формы. Грамположительны.
Факультативные анаэробы, культивируются в присутствии СО 2, при 35-37°С.
В пораженных тканях образуют друзы, которые в виде мелких зерен можно видеть простым глазом. Под
микроскопом в центре друзы обнаруживается скопление ветвящихся нитей, окруженное лучами с колбообразно
вздутыми концами.
По антигенам, содержащимся в клеточной стенке, актиномицеты делятся на серогруппы.
Актиномицеты устойчивы во внешней среде, длительно сохраняются в высушенном состоянии,
выдерживают нагревание до 60°С в течение часа.
Заболевание может возникнуть при заражении извне, через поврежденную кожу или слизистые оболочки
при жевании колосков злаков, уколе соломой, шипами растений. Возможна эндогенная инфекция, так как
актиномицеты обитают в полости рта, на слизистой оболочке верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного
тракта. Возникновению болезни способствует ослабление защитных сил организма. Чаще всего актиномикозом
поражается нижняя челюсть, легкие, плевра, реже печень, кишечник, мозг. Вначале образуются плотные
инфильтраты, которые затем нагнаиваются и вскрываются с образованием долго не заживающих свищей с
выделением гноя.
После перенесенного заболевания невосприимчивость не формируется, антитела не обладают защитным
действием. Развивается аллергическое состояние - ГЧЗТ.
Микробиологическая диагностика проводится путем исследования гноя из свищей, мокроты, мочи,
пунктата из инфиль-
трата. Из исследуемого материала выбирают желтоватые зерна, микроскопируют, в препарате
раздавленной капли в 10-20% растворе щелочи, определяют наличие друз. Выделяют культуру актиномицетов на
специальной питательной среде, определяют вид по ферментативным свойствам и с помощью РИФ. Антитела в
сыворотке крови больных определяют в РСК. Ставят внутрикожную аллергическую пробу с экстрактом из
актиномицетов.
Для лечения применяют пенициллины, тетрациклины, левомицетин, сульфаниламиды. С целью
иммуностимуляции используют актинолизат или вакцину.

ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ РОДА CLOSTRIDIUM


К патогенным клостридиям относятся возбудители столбняка, анаэробной газовой инфекции, ботулизма.
Патогенные анаэробы имеют общие свойства. Это крупные грамположительные палочки, образующие споры,
которые располагаются терминально или субтерминально.
В аэробных условиях не размножаются. Не погибают, благодаря способности к спорообразованию.
Вырабатывают экзотоксины. Естественным местом их обитания является кишечник человека и животных, с
испражнениями которых клостридии попадают в почву и в виде спор могут длительное время находиться в ней.
Клостридии столбняка
Возбудитель столбняка Clostridium tetani (лат. tetanus - судорога) обнаружен в 1883 г. Н.Д. Монастырским
и в 1884 г. А. Николайером.
Морфология, культу-ральные свойства, С. tetani -грамположительные палочки длиной 4-8 мкм,
образуют круглые терминально расположенные споры, размеры которой превышают их поперечник, что придает
им вид барабанных палочек. Подвижны, жгутики расположены перитрихиально. Капсулу не образуют (рис. 37).
Облигатные анаэробы, растут при рН 6,8-7,4 и температуре 37°С. Биохимически неактивны.
Антигены. По специфическим жгутиковым Н-антигенам различают несколько сероваров. все они имеют
общий О-антнген, и нее они продуцируют один и тот же экзотоксин, что важно в практическом отношении.
Токсинообразование. Токсин С. tetani - белок, но механизму действия различают тетаносиазмин,
повреждающий нервные клетки, что приводит к судорогам, и тетанолизин, вызывающий гемолиз. Ферменты
желудочно-кишечного тракта не разрушают токсин, но он не всасывается через слизистую оболочку кишечника и
поэтому безопасен при попадании, в пищеварительную систему через рот.
Устойчивость. Споры обладают большой устойчивостью во внешней среде. В почве, на предметах
сохраняются десятками лет, выдерживают кипячение в течение часа. Под действием дезинфицирующих веществ
погибают через 8-10 часов.
Заболевание у человека. Столбняк - раневая инфекция. Возбудитель столбняка является постоянным
обитателем кишечника травоядных животных, встречается также у людей, попадает с фекалиями в почву, где в
форме спор сохраняется длительное время. Из почвы заносится на одежду человека, на различные предметы.
Заболевание может наступить даже в случаях незначительных повреждений кожи и слизистых облочек, при
ожогах и отморожениях, у рожениц при несоблюдении правил асептики, при криминальных абортах, у
новорожденных. Особенно опасны глубокие раны, в которые создаются анаэробные условия. Споры возбудителя
попадают в рану из почвы. С. tetani не являются инвазивными микробами, возбуди гели остаются
локализованными в области поврежденных тканей (ранение, ожог, .травма, пупочная культя, матка после в
небольничного аборта, хирургический шов), в которые попали споры. Развитие заболевания обусловлено
токсинемией. Чем больше токсина, тем. короче инкубационный период, в среднем 5-14 дней, он может быть
укорочен до 1 дня и удлинен до 30 дней.
Токсин проникает в центральную нервную систему, вызывает ее поражение. У человека столбняк
развивается по нисходящему типу: вначале наблюдается спазм жевательных мышц (тризм, "замкнутая челюсть"),
которые сокращаются до такой степени, что трудно открыть рот. Постепенно в процесс вовлекаются другие попе-
речно-полосатые мышцы. Любой внешний раздражитель вызывает судороги. Больной находится в сознании, боль
при судорогах, бывает сильной. Смерть обычно наступает от асфиксии или от паралича сердца. Больной
столбняком не заразен для окружающих.
Иммунитет. Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета. Введение анатоксина создает
продолжительный иммунитет.
Лабораторная диагностика. Лабораторные исследования для диагностики заболевания проводятся
редко. В клинике диагноз столбняка ставится, в основном, по симптомам заболевания. В сомнительных слу чаях
исследуют материалы вскрытия. Исследования на наличие воз-, будителя столбняка проводят с целью проверки
стерильности перевязочных материалов и инъекционных растворов. Исследования прово-
дят бактериологическим методом и путем постановки биологической пробы - заражения исследуемым
материалом мышей, у которых развивается столбняк по типу восходящего, начиная с конечностей, хвоста ("хвост
трубой"). Контрольные мыши, получившие исследуемый материал вместе с противостолбнячной сывороткой,
остаются здоровыми.
Профилактические и лечебные препараты. Специфическая профилактика направлена на создание
искусственного антитоксического иммунитета. Плановая иммунизация проводится столбнячным анатоксином,
который входит в состав вакцин АКДС, АДС. Иммунизируют детей с 5-6-месячного возраста с последующими
ревакцинациями.
При угрозе развития столбняка (ранение, ожоги II и III степени, отморожения II и III степени, роды на
дому, внебольничные аборты, операции на кишечнике) осуществляют экстренную профилактику. С этой целью
лицам, привитым не более 10 лет назад, достаточно ввести 0,5 мл анатоксина. Непривитым необходима активно-
пассивная иммунизация: введение анатоксина 1,0 мл и противостолбнячной сыворотки 3000 ME - разными
шприцами, в разные части тела, с интервалом в 30 минут. Сыворотку вводят по Безредка. В дальнейшем вводят
анатоксин по схеме.
Специфическим лечебным препаратом являются противостолбнячная сыворотка или
противостолбнячный донорский иммуноглобулин, полученный от людей, иммунизированных анатоксином.
Клостридии анаэробной газовой инфекции
Анаэробная газовая инфекция - заболевание полимикробное, вызывается, как правило, ассоциацией
нескольких видов анаэробных бактерий с аэробами - стафилококками, стрептококками и др. Чаще всего в
анаэробной газовой инфекции участвуют Clostridium perfringens (лат. perfringo - разрывать), С. novyi (в честь
ученого Нови, другое название - C.oederaatiens), С. septicum, С. histolyticum и другие. В подавляющем
большинстве случаев обнаруживается С. perfringens. Кроме анаэробной газовой инфекции, этот микроб может
вызвать пищевую токсикоинфекцию.
Морфология, культуральные, биохимические свойства. Все клос-тридии - возбудители анаэробной
газовой инфекции представляют собой крупные грамположительные палочки, образуют овальные
субтерминально расположенные споры, в диаметре превышающие поперечник палочки (рис. 38). С. perfringens
неподвижна, в организме образует капсулу, остальные виды подвижны, капсулу не образуют. По форме С.
perfringens короче и толще других, С. novyi -наиболее крупные из них, до 22 мкм в длину, С. septicum в культуре
могут иметь нитевидные формы, С. histolyticum - меньше и тоньше других.
Анаэробы, наиболее строгие из них С. novyi и С. septicum, не переносят даже малого количества
кислорода.
Клостридии различаются по виду колоний: С. perfringens в S-форме образуют колонии в виде чечевицы, в
R-формс - в виде комочков ваты, С. novyi - в виде хлопьев ваты, С. scpticum - чече-видеобразные колонии.
Ферментативная активность у них различна. С. perfringens сбраживает многие углеводы до кислоты и
газа, быстро свертывает молоко с образованием губчатого сгустка, пронизанного пузырьками газа. С. novyi и С.
septicum менее активны, С. histolytieum не ферментирует углеводы, но обладает- сильными протеолити-ческими
свойствами.
Факторы патогенности. Возбудители-продуцируют экзотоксины, специфические для каждого вида, у С.
perfringens различают серовары по антигенным свойствам токсина: А, В, С, D, E, F. Токсины оказывают
миотоксическое гемолитическое, нейротоксичсское, ка-пилляротоксическое действие, выраженное по-разному у
разных видов. Некоторые штаммы С. perfringens продуцируют очень сильный эн-теротоксии, вызывающий
диарею, Клостридии обладают инвазив-. ностыо, продуцируя ферменты: гиалуронидазу, коллагеназу, нейра-
минидазу, протеииазу.
Устойчивость - споры высоко устойчивы к факторам внешней среды: переносят кипячение до 30 минут,
а споры С. novyi - до 2 часов. В окружающей среде, в почве сохраняются годами.
Заболевание у человека. Естественной средой обитания клостридий является кишечник животных, с
испражнениями которых они попадают в почву и в виде спор сохраняются в почве и на различных предметах.
'Заражение происходит при попадании спор в рану. Развитие анаэробной инфекции зависит от характера ранения,
наличия некротизированных тканей, в которых размножаются возбудители, от сроков оказания хирургической
помощи. Анаэробная инфекция чаще возникает при ранениях с массивным повреждением мышечных тканей,
особенно нижних конечностей, может возникнуть, как осложнение операций, внебольничных абортов.
Клинические проявления: газовая гангрена или анаэробный сепсис.
Иммунитет. После перенесенного заболевания невосприимчивость не формируется. Иммунизация
анатоксином создает прочный антитоксический иммунитет.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат раневое отделяемое, взятые из
глубины кусочки пораженных тканей, кровь. Проводится бактериоскопия, РИФ с антисыворотками. Бакте-
риологическое исследование проводится путем посевов в анаэробных условиях, идентификации возбудителей по
биологическим свойствам, определения токсина па животных в реакции нейтрализации с диагностическими
антитоксическими сыворотками.
Профилактические и лечебные препараты. Экстренная профилактика проводится одновременно с
первичной хирургической обработкой ран, путем введения антитоксической сыворотки, содержащей антитела
против токсинов клостридий, чаще всего вызывающих это заболевание (обычно антиперфрингенс,
антиэдематиенс, антисептикум). Для лечения больных применяют сыворотку в более высоких дозах. Сыво ротку
вводят по способу Безредка в подогретом виде (37°С).
Поскольку в патогенезе анаэробной инфекции участвует как ток-синемический фактор, так и микробная
инвазия, применяют для лечения также антибиотики.
Активная иммунизация анатоксином (перфрингенс и эдематиенс) для профилактики проводится по
специальным показаниям.
Клостридии ботулизма
Clostridium botulinum описан впервые Э. ван Зрмепгсмом в 1896 г. при расследовании вспышки
ботулизма.
Морфология, культуральные свойства. С. botulinum - грамположительная палочка длиной 4-9 мкм,
подвижная, перитрих, капсулу не имеет, образует субтерминально расположенную спору. Палочка со спорой
похожа на теннисную ракетку (рис. 39).
Строгий анаэроб. Оптимальная температура роста ниже, чем у большинства патогенных бактерий - 25-
37°С, рН среды 7,2-7,4. Ферментативная активность для идентификации не используется.
Токсинообразование. С. botulinum продуцирует экзотоксин, самый сильный из известных биологических
ядов. Обладает нейротоксическим действием. Полученный в кристаллическом виде, он в 1 мг содержит 100 млн
Dlm для белой мыши. Для человека смертельная доза нейротоксина не превышает 0,001
мг/кг.
По антигенной структуре различают несколько типов токсина: А, В, Cl, C2, D, Е, F, G. Каждый тип
токсина нейтрализуется только гомологичной сывороткой. Люди наиболее чувствительны к токсинам типов А, В,
Е.
Токсин относительно устойчив к нагреванию (разрушается при кипячении через 10 минут), к кислой
реакции, высоким концентрациям поваренной соли, не разрушается желудочным соком. Более того, действие
токсина усиливается в желудке под влиянием протеолитических ферментов. Токсин нейтрализуется в щелочной
среде.
Устойчивость. Споры С. botulinum обладают высокой рсзис-тентностью к высоким температурам,
выдерживают кипячение в течение 3-5 часов.
Заболевание у человека. Ботулизм у человека - пищевая интоксикация. Естественной средой обитания
клостридий ботулизма является кишечник животных, рыб, а также почва, куда клостридий попадают с
испражнениями и не только сохраняются, но и могут прорастать в вегетативные формы, некоторые при
благоприятных условиях размножаются.
Попав в пищевые продукты, клостридий размножаются в анаэробных условиях, продуцируют экзотоксин.
В большинстве случаев ботулизм связан с употреблением продуктов домашнего консервирования: грибов,
овощей, рыбы, мяса, сала и др. В условиях домашнего консервирования споры не погибают, а затем, если в
продукте созданы анаэробные условия, и он хранится не в холодильнике, то создаются условия для размножения
клостридий и накопления токсина.
Ботулинический токсин попадает с пищей в пищеварительный тракт, здесь он не разрушается,
всасывается в кровь, создается токси-немия. Нейротоксин блокирует освобождение ацетилхолина в ней-
ромышечных синапсах. Инкубационный период, в зависимости от количества токсина, продолжается от
нескольких часов до 6 дней, затем развиваются явления общей интоксикации, появляются признаки паралича
мышц гортани, глотки, дыхательных мышц, глазных мышц, нарушается аккомодация зрения. Гибель больных
наступает от паралича дыхания, летальность высокая. Ботулизм от человека человеку не
передается.
В некоторых случаях у грудных детей возникает ботулизм при заражении живыми возбудителями
алиментарным путем.
Иммунитет. После перенесенного заболевания невосприимчивость
не формируется.
Лабораторная диагностика. Материалом для исследования служат промывные воды желудка, рвотные
массы, остатки пищи. Наиболее доказательным является обнаружение токсина в исследуемом матери-
але. Одновременно проводится бактериологическое исследование для выделения возбудителя в чистой
культуре и определения в ней наличия токсина. Для выявления токсина и определения его типа ставят биоло -
гический опыт на мышах: в опытной группе мышам вводится исследуемый материал с типовой антитоксической
сывороткой, контрольной группе - материал без сыворотки. При наличии токсина контрольные мыши погибают,
а в опытной остаются живыми те, у которых тип введенной сыворотки совпал с типом токсина.
Профилактические и лечебные препараты. Основным и необходимым средством лечения является
антитоксическая противоботули-ническая сыворотка. До установленния серотипа токсина, вызвавшего
заболевание, вводят поливалентную сыворотку против токсинов А, В, Е. В дальнейшем, при необходимости
повторного введения, - типовую моновалентную. Лицам, принимавшим ту же пищу, что больные, с
профилактической целью вводится поливалентная антитоксическая сыворотка. Введение сыворотки проводится
по Безредка.
Для активной иммунизации применяется ботулинический анатоксин по специальным показаниям,
например, в целях профилактики ботулизма у лиц из персонала лабораторий, имеющих контакт с возбудителями
ботулизма.

НЕСПОРООБРАЗУЮЩИЕ АНАЭРОБЫ
Неспорообразующие анаэробы - это группа облигатных анаэробов, принадлежащих к разным родам и
семействам. К ним относятся: грам отрицательные:
бактероиды - Bacteroides (палочки)
фузобактерии - Fusobacterium (веретенообразные палочки) вейлонеллы - Veilonella (кокки)
грамположительные: пропионобактсрии - Propionobacteirum (палочки)
эубактерии - Eubacterium (палочки) пептококки - Peptococcus (кокки) пептострептококки -
Peptostreptococcus (кокки) Неспорообразующие анаэробы культивируются в строго анаэробных условиях.
Применяется удаление воздуха и замена газовой смесью (азот, диоксид углерода, водород).
В аэробных условиях быстро погибают. Устойчивость к факторам внешней среды такая же, как и у
других вегетативных форм бактерий.
Неспорообразующие анаэробы - это условно-патогенные микроорганизмы, обитатели организма
человека, обнаруживаются в полости рта, на коже, в толстой кишке, во влагалище.
Вызываемые ими заболевания возникают чаще как эндогенная инфекция, обычно у пациентов с
иммунодефицитными состояниями.
Неспорообразующие анаэробы вызывают гнойно-воспалительные процессы различной локализации: в
челюстно-лицевой области, в легких, печени, мочеполовых органах. Они вызывают аппендицит, перитонит,
сепсис. Как правило, патологический процесс связан с ассоциацией анаэробов и аэробов.
Причиной гнойно-воспалительных заболеваний чаще всего бывают бактероиды. Фузобактерии вызывают
некротические процессы слизистых оболочек глотки, а в сочетании со спирохетами - ангину Симановского-
Вснсана. Propionobacterium acnes в ассоциации со Staphylococcus epidermidis - причина появления угрей.
Материалом для микробиологического исследования служат кровь, гной, пунктат из пораженных
участков, в зависимости' от локализации процесса. Результат исследований зависит от правильного взятия и
пересылки материала. Для этого применяют флакон с газовой смесью, плотно закрытый резиновой пробкой.
Пробу на анализ берут шприцем с плотно прилегающим поршнем и сразу же, проткнув иглой шприца резиновую
пробку, вводят иглу внутрь флакона и в таком виде доставляют в лабораторию.
Посевы и последующее культивирование проводят в строго анаэробных условиях. Выделенную чистую
культуру идентифицируют по морфологии и биохимической активности. Для обнаружения продуктов
метаболизма неклостридиальных анаэробов применяют газожидкостную хроматографию. Определяют
чувствительность к антибиотикам.
Для лечения из антибактериальных препаратов применяют метронидазол, клиндамицин, цефалоспорины,
левомицетин, эритромицин,

ПАТОГЕННЫЕ СПИРОХЕТЫ
Патогенные спирохеты относятся к семейству Spirochetaccae. Возбудители заболеваний человека
принадлежат к трем родам: к роду Treponema относится возбудитель сифилиса, род Borrelia включает в себя
возбудителей возвратных тифов и болезни Лайма, род Leptospira - возбудителей лептоспирозов.
Спирохеты имеют извитую форму. Отличаются друг от друга по размерам, глубине спирали, характеру
завитков, по отношению к окраске. По способу Романовского-Гимза хорошо окрашиваются боррелии, хуже -
лептосгшры и очень слабо - трепонсмы. Все спирохеты грамотрицательны.
В микробиологической диагностике спирохетозов используют микроскопический метод - обнаружение
возбудителей в патологическом материале. Применяются также серологические реакции для об наружения
специфических антител в сыворотке крови больного.
Трепонсмы. Возбудитель сифилиса
Бледная трепонема -Treponerna pallidum была открыта в 1905 г. Ф. Ша-удином и Э. Гофманом.
Морфология, биологические свойства. Т. pallidum имеет вид тонкой спирали длиной 6-20 мкм, с 8-14
равномерными завитками, с жгутиками на концах (рис. 40). Слабо воспринимает анилиновые красители, отсюда
ее название. По Романове-кому-Гимза окрашивается в бледнорозовый цвет. При обработке инфицированных,
тканей методом серебрения тренонемы выглядят черными. При исследовании живых трепоием в темпом поле
зрения они отличаются от сапрофитных спирохет: они тоньше, совершают плавные волнообразные движения,
сгибаются под углом, при этом положение завитков остается неизменным.
В неблагоприятных условиях, в организме под действием лечебных препаратов трепонемы могут
переходить в L-формы Или превращаться в цисты - свернутые в шар спирохеты, покрытые слизистой оболочкой.
Цисты могут долго находиться в неактивном состоянии в организме больного. При благоприятных условиях
цисты вновь превращаются в спиралевидные формы, восстанавливают свою патогеи-ность.
Трепонемы пе размножаются на простых питательных средах. Их удается культивировать на средах,
содержащих почечную пли мозговую ткань, в анаэробных условиях, при 35°С. Культуралышс трепомемы теряют
вирулентность. При заражении в ткани яичек кроликов трепонемы размножаются, такие тканевые трепонемы
сохраняют свои исходные свойства.
Устойчивость. Во внешней среде трепонема'быстро погибает, неустойчива при высушивании,
чувствительна к солям тяжелых металлов, например, к сулеме, к кислотам, к дезинфицирующим веществам, к по -
вышению температуры: при 40оС погибает через 2 часа, при 55°С -через 15 минут.
Заболевание у человека. Сифилисом болеет только человек. Источником инфекции является больной
человек. Заражение в большинстве случаев происходит половым путем, реже - через предметы (стаканы, зубные
щетки и др.), при поцелуях. Врожденный сифилис возникает вследствие передачи инфекции плоду через
плаценту от больной матери.
Входными воротами инфекции являются слизистые оболочки и кожа. Инкубационный период
продолжается в среднем 3-4 недели. При отсутствии достаточного лечения заболевание протекает в три периода.
Первичный сифилис - на месте внедрения возбудителя появляется язва - твердый шанкр. Трепонемы
обнаруживаются в большом количестве в тканевом содержимом язвы и в увеличенном регионарном лим-
фатическом узле. Примерно через 6 недель язва заживает, наступает латентный период, продолжающийся 6-8
недель.
Вторичный сифилис характеризуется генерализацией процесса и появлением высыпаний на слизистых
оболочках и на коже. Трепонемы обнаруживаются в высыпаниях. Продолжительность этого периода 2-3 года.
Третичный сифилис - гуммозный. Гуммы образуются в различных органах. Трепонемы в этом периоде не
обнаруживаются.
В некоторых случаях через 10 и более лет могут развиться специфические поражения нервной системы.
Иммунитет. В течение болезни формируется нестерильный иммунитет, который сочетается с
повышенной чувствительностью к возбудителю (ГЧЗТ). Иммунитет - клеточный, способствует локализации
возбудителя в гранулемах. Антитела образуются, но не обладают защитным действием.
После перенесения заболевания и освобождения организма от возбудителя невосприимчивости не
возникает. При реинфекции возможно повторное заболевание.
Лабораторная диагностика. При первичном сифилисе проводится микроскопическое исследование
материала из твердого шанкра. К концу первичного периода становятся положительными серологические
реакции: реакции Васссрмана, осадочные ре