Вы находитесь на странице: 1из 7

Факторы, влияющие на эффективность трансплантации эмбрионов

Елена Владимировна Солодова, кандидат биологических наук, научный


сотрудник

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение


«ВНИИ коневодства», 391105, Рязанская обл., Рыбновский р-он,
п. Дивово, e-mail: l.solodowa2012@yandex.ru

Аннотация
Были проведены исследования зависимости уровня извлечения
эмбрионов от возраста кобыл-доноров и влиянию репродуктивного статуса
кобыл-реципиентов на приживаемость и итоговые результаты трансплантации.
Результаты исследований показали, что уровень извлечения эмбрионов от
кобыл разных возрастных групп снижается с увеличением возраста кобыл с
83,3 до 37, 9 %. Анализ результатов пересадок к двум группам кобыл-
реципиентов (жеребившимся и не жеребившимся) показал высокую
приживаемость (72,7 - 80 %) эмбрионов у обеих групп. Однако, итоговые
результаты трансплантации были значительно ниже у группы молодых, не
жеребившихся кобыл.
Ключевые слова: кобыла, донор, реципиент, эмбрион, жерёбость,
трансплантация.

Введение. Пересадка эмбрионов — является одним из основных


современных биотехнологических методов в коневодстве, широко
применяемых за рубежом последние два десятка лет. В нашей стране после
двадцатилетнего перерыва возрождение интереса к этой технологии
стимулируется заинтересованностью со стороны коневладельцев в плане
получения большего числа жеребят от высоко оценённых по качеству
потомства кобыл, а также от маток, имеющих проблемы с зажеребляемостью и
сохранением жерёбости [4].
Главным образом, успех трансплантации складывается из вероятности
извлечения эмбриона и приживления его в матке реципиента, а также
успешного вынашивания плода кобылой-реципиентом. Процент извлечения
эмбрионов зависит от возраста доноров и состояния их репродуктивной
системы. Закономерно, что он ниже у старых (13-25 летнего возраста), по
сравнению с молодыми и среднего возраста кобылами (4-12 лет). Это связано с
понижением качества ооцитов, процента оплодотворяемости, увеличением
количества дефектов эмбрионов, эмбриональной смертностью в яйцеводах и,
часто, в неблагоприятных условиях маточной среды.
Одним из главных факторов, влияющих на успех трансплантации
эмбрионов, является выбор кобылы-реципиента. В качестве реципиентов
рекомендуют использовать только молодых и среднего возраста (от 5 до 10
лет), клинически здоровых кобыл, не имеющих аномалий в строении
репродуктивных органов [1], без гинекологических заболеваний, проверенных
на зажеребляемость. Кобылы доноры и реципиенты должны соответствовать
друг другу по размерам.
Предварительная диагностика состояния матки реципиента может быть
проведена с помощью ректального, вагинального, ультразвукового, при
необходимости бактериального и цитологического исследований. Обнаружение
при ультразвуковом исследовании жидкости, воздуха, больших кист в матке
делает кобылу непригодной для использования в качестве реципиента [2].
Также, из числа потенциальных реципиентов должны быть исключены
кобылы с систематическими нерегулярными и патологическими половыми
циклами. При использовании в качестве реципиента кобылы после выжеребки,
необходимо пропустить 2-3 цикла перед пересадкой эмбриона, чтобы повысить
шанс приживления эмбриона [3].
Перед использованием кобылы в качестве реципиента через 5-6 дней
после овуляции проводят её окончательное обследование. У кобыл,
подходящих для этой роли, матка нормальных размеров с хорошим тонусом,
шейка матки закрыта, отсутствуют складки эндометрия, в яичнике видно
жёлтое тело. У неподходящих кобыл обычно слабый маточный тонус, шейка
матки размягчена и раскрыта, имеются складки эндометрия и (или) жидкость в
матке.
Цель и задача исследования. Поставлена задача проанализировать
результаты трансплантации с целью выяснить влияние возраста кобыл-доноров
на уровень извлечения 6,5-8 суточных эмбрионов и репродуктивного статуса
кобыл-реципиентов на результативность пересадок свежих эмбрионов.
Материал и методика. Анализ факторов, влияющих на результаты
трансплантации, проводился по двум племенным заводам: ЗАО «Конный завод
Локотской», Брянская область и ЗАО «Воронцовский конный завод»,
Ярославская область. Процент извлечения эмбрионов был подсчитан для
разных возрастных групп: первая группа - молодые кобылы от 6 до 9 лет,
вторая - среднего возраста - от 12 до 16 лет, третья - старые кобылы от 20 до 24
лет. Всего были проанализированы данные по 21 голове.
Кобылы-реципиенты были разделены на две группы: 1 группа - кобылы
от 3 до 6 лет, впервые идущие в случку; 2 группа - кобылы от 5 до 9 лет уже
жеребившиеся и принёсшие одного или более жеребят. Был проведён анализ
по приживаемости в матке эмбрионов после пересадки, абортам,
мертворожденным, падежу после рождения и рождению жизнеспособного
приплода. Полученные данные обрабатывали методом математической
статистики с оценкой достоверности результатов по Меркурьевой (1970).
Результаты исследований и обсуждение. Данные об уровне извлечения
эмбрионов у разных возрастных групп кобыл приведены в таблице 1.
Таблица 1 – Уровень извлечения 6,5-8,0 суточных эмбрионов у кобыл
разных возрастных групп
Возрастные Голов Кол-во Найдено % извлечения
группы кобыл вымываний эмбрионов
1. 20-24 года 5 29 11 37,9±9,01а
2. 12-16 лет 8 20 12 60,0±10,95
3. 6 - 9 лет 8 12 10 83,3±10,76 b
ab
p ≥ 0,999
Разница между первой и третьей группами высоко достоверна ( p ≥ 0,999)
и составила 45,4%.
Из данных таблицы 1 видно, что % извлечения эмбрионов снижается с
возрастом. У самых старых кобыл он не превышает 38%. Это можно
объяснить пониженной оплодотворяемостью в этом возрасте, а также
гибелью эмбрионов в яйцепроводах. К тому же, это может быть связано с
тем, что очень часто невозможно извлечь весь объём промывочного раствора
из матки в связи с её растянутостью и более глубоким расположением в
брюшной полости.
Наши данные согласуются с данными зарубежных исследователей,
которые отмечают, что извлечение эмбрионов у кобыл младше 15 лет
составляет от 56 до 57%, у кобыл проблемных и старше 15 лет — от 34 до 39%
[6], [7].
Данные о результатах пересадок по двум группам кобыл
представлены в таблице 2. Почти все извлечённые эмбрионы были отнесены по
качеству к категории «жизнеспособные». Два отнесены к числу
«сомнительных». Очевидно, этим объясняется хорошая приживаемость
эмбрионов в матке у кобыл-реципиентов обеих групп после пересадок (72,7 -
80%) (Таблица 2). Наши данные согласуются с данными, полученными
B.A.Ball, R.B.Hilman, G.L.Woods, которые также не нашли различий в
жизнеспособности пересаженных эмбрионов в матках субфертильных и
нормальных кобыл с 12 по 28 день жерёбости [5].
Таблица 2 - Результаты пересадок эмбрионов в зависимости от
репродуктивного статуса кобыл-реципиентов
Группы Число Прижилось Аборты Мертво- Падёж Выход жеребят
реципиентов пересадок эмбрионов рожденные после
рождения
n % n % n % n % n %
5-9 лет
10 8 80,0 1 12,5 0 0 1 12,5 6 60±15,49
(жеребившиеся)
3-6 лет
(не жеребившиеся)
11 8 72,7 3 37,5 1 12,5 1 12,5 3 27,3±13,43
Из таблицы 2 видно, что дальнейшая судьба пересаженных эмбрионов
значительно различается. У кобыл-реципиентов второй группы наблюдалось в
два с половиной раза больше случаев абортов, мертворожденных, гибели
жеребят после рождения.
Следует отметить, что большая часть неудачных пересадок была в
Локотском конном заводе. Одной из причин этого являются разные условия
при выборе реципиентов в Локотском и Воронцовском конном заводах.
В Воронцовском конном заводе в связи с небольшим поголовьем кобыл
и ограниченным выбором кобыл-реципиентов, проводился целенаправленный
отбор реципиентов и синхронизация половых циклов кобыл-доноров и
реципиентов с помощью инъекций эстрофана и хорионического гонадотропина.
В итоге, от пяти пересадок получено четыре жизнеспособных
жеребёнка. У одной кобылы произошёл поздний аборт травматического
характера.
В Локотском конном заводе в связи с большим количеством маток
(около 150 голов) кобылы-реципиенты выбирались из менее ценных в
племенном отношении кобыл, одновременно пришедших в охоту с кобылами-
донорами эмбрионов. Синхронизация половых циклов проводилась только с
помощью инъекций хорионического гонадотропина. Полного анализа их
половых циклов и зажеребляемости не проводилось. Они допускались в группу
реципиентов только на основании ректального, ультразвукового и вагинального
исследований. В итоге четырёхлетней работы от 15 пересадок получено лишь 5
жизнеспособных жеребят.
Большинство кобыл-реципиентов, имеющих отрицательный итоговый
результат пересадок (6 голов) относилось к группе молодых, ни разу не
жеребившихся кобыл. Ретроспективный анализ их половых циклов показал, что
у 4 из них наблюдались разные по длине половые циклы (укороченные или
пролонгированные) и прохолосты в 1-3 циклах до пересадки эмбрионов. При
этом ультразвуковое исследование этих кобыл не показывало присутствие
воспаления в матке. Было отмечено, что у таких кобыл часто происходила
овуляция фолликула, имевшего небольшие размеры (35 мм) и отёк матки не
совсем спадал к этому периоду.
Результаты по двум группам показательны и позволяют сделать вывод
о том, что для допуска кобыл в качестве реципиентов необходимо помимо УЗИ
и вагинальных исследований проводить ретроспективный анализ
зажеребляемости, регулярности и полноценности половых циклов и отдавать
предпочтение кобылам, уже принёсшим жизнеспособных жеребят. При
отнесении кобылы-реципиента в категорию «сомнительные», целесообразно
проводить дополнительные бактериальные или цитологические исследования и
по результатам исследований проводить лечение.

Выводы:
1. Уровень извлечения эмбрионов зависит от возраста кобыл-доноров,
состояния их репродуктивных органов и снижается с возрастом.
2. Приживаемость «жизнеспособных» эмбрионов одинаково высокая как
у кобыл- реципиентов уже имеющих жеребят, так и впервые идущих в случку,
но для высокого процента выхода жеребят предпочтение при выборе кобыл-
реципиентов следует отдавать уже благополучно жеребившимся молодым
кобылам .
3. При выборе в качестве реципиента молодой нежеребившейся кобылы
следует проводить предварительную проверку на зажеребляемость и анализ
полноценности и регулярности её половых циклов.
На основании выше изложенных выводов мы рекомендуем в целях
достижения высокого процента извлечения эмбрионов и избежания
неоправданных затрат труда и средств, включать в программу по
трансплантации высокоценных в племенном отношении кобыл раньше, до
достижения ими шестнадцатилетнего возраста. Для этого после 3-4 жерёбостей
целесообразно предоставлять годичный отдых кобыле и использовать её только
для пересадки свежих эмбрионов и заморозки 6,5 -7-суточных эмбрионов. Это
будет способствовать лучшему сохранению её собственной способности к
зажеребляемости и вынашиванию плода.

Литература
1. Лебедева, Л. Ф. Анализ плодовой деятельности кобыл с различной
конфигурацией наружных половых органов / Л. Ф. Лебедева, Е. В. Солодова //
Коневодство и конный спорт.- 2017. - № 2. – С. 27-30.
2. Лебедева, Л. Ф. Ультразвуковые характеристики матки и яичников
кобыл при различных репродуктивных патологиях / Л. Ф. Лебедева //
Коневодство и конный спорт. –2013. - № 6. - С. 15-18.
3. Лебедева, Л. Ф. Оплодотворяемость кобыл в послеродовую охоту / Л.
Ф. Лебедева, С. Г. Бурмистрова // Коневодство и конный спорт. - 2015. - № 3.
С. 15-17.
4. Лебедева, Л.Ф. Трансплантация эмбрионов лошадей: ретроспективный
анализ и современное состояние основных аспектов технологии/ Лебедева
Л.Ф.//Коневодство и конный спорт.-2011.-№1.-С.14-17.
5. Ball,B.A. Survivl of equin embryos transferred to normal and subfertile
mares/ B.A.Ball, R.B. Hillman, G.L. Woods//Teriogenology.-1987.- Vol.-P.167-174.
6.Douglas, R.H. Some aspects of equine embryo transfer /
R.H.Douglas//J.Reprod Fertil 1982. - Suppl.32. - P.405-408.
7. Squires, E.L. Factors affecting reproductive efficiency in an equine embryo
transfer programme/E.L.Squires, K.J.Imel, M.F.Iuliano and R.K.Shideler//J.Reprod
Fertil 1982.-Suppl.32.-P.409-414.