UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

BIOQUÍMICA II
PRÁCTICA N°07: DETERMINACIÓN DE VIH EN SANGRE

INTEGRANTES:
 Arismendiz Castillo, Sergio
 Riveros Reyes, Derlys
 Rodríguez Castañeda, Natalia
 Rodríguez Chávez, Leticia
 Rodríguez Salinas, David

DOCENTE EVALUADOR:
 Abanto Zamora, Francisco

SECCIÓN:
 B2
Se determina que, es el virus que por lo consiguiente causa el sida, este es el estadio más
avanzado de esta infección, es decir, la enfermedad que causa este virus. el VIH infecta a
las células del sistema inmunitario, alterando o anulando su función.
Se refiere a la realización de pruebas diagnósticas a
personas, en principio sanas, para distinguir aquellas
que probablemente estén enfermas de las que
probablemente no lo están.
 Se encarga de detectar anticuerpos en sangre.
 Se caracterizan por una alta sensibilidad, cercana al 100%, y una buena
especificidad (99,5%) que aún es superior a la de las pruebas rápidas.
 ELISA directo
Es el ensayo más simple y rápido de todos, donde un anticuerpo primario marcado con una enzima se
unirá directamente al antígeno de interés permitiendo la detección y/o cuantificación del mismo.
 ELISA indirecto
Es un ensayo parecido al ELISA directo pero en dos pasos, lo que permite amplificar la señal
obtenida. En este caso se utilizan dos anticuerpos, uno primario y otro secundario, y es este último el
que irá conjugado a una enzima.
 ELISA tipo sándwich
El antígeno queda inmovilizado entre dos anticuerpos, uno de captura y otro de detección también
conocidos como pares de anticuerpos, que se unirán a dos epítopos distintos de un mismo antígeno.
 ELISA competitivo
Es una variante más compleja de la técnica ELISA, también conocido como ELISA de inhibición
debido al uso de un antígeno de referencia que competirá con el antígeno de la muestra por unirse al
anticuerpo primario.
Cuando los resultados de las pruebas de tamizaje determinan un diagnóstico presuntivo de infección por VIH,
se recurrirá a las pruebas confirmatorias que se caracterizan por su alta especificidad.

WESTERN BLOT
 El resultado positivo confirma
definitivamente la infección por el VIH;
el negativo la descarta, excepto cuando
existe evidencia de exposición reciente y
reiterada a esta infección.
 En tales circunstancias se debe repetir el
ensayo luego de tres y seis meses
respectivamente.

 En el Perú se utilizan los valores del CDC, que considera

positiva la prueba de WB cuando aparecen la p24 + (gp160,
gp120 o gp41) o la p41 + (gp160 o gp120).
 E s u n i n mu n o e n s a y o l i n e a l ( p é p t i d o s s i n t e t i z a d o s e n c o n f o r ma c i ó n p r i ma r i a ) b a s a d o
e n e l p r i n c i pi o d e s á n dw i c h s i mp l e .

 Los antíg enos q ue rep resentan las diferent es regiones del geno ma , NS4 , NS5 Core
obt eni dos en forma s int éti ca se en cu ent ran fijada s en ti ra s de nylon . El conjuga do
es un anti IgG a coplado co n fos fatasa alcalina . El revelado s e realiza con b ro mo -
cloro -in dolfosfato . El desarrollo d e color s ugiere la p res en cia de anticu erpos
es p ecí ficos co n t ra l a s d i s t int as reg i ones d el v i ru s, s eg ú n el b a n d eo o b t enido .
 Ti e n e n c o mo mí n i mo l a mi s ma s e n s i b i l i d a d q u e e l E L I S A y u n a
e s p e c i f i c i d a d s u p e r i o r.

 Estas técnicas pueden incorporar antígenos de envoltura de

VIH-2.
PASO 1: RECOGER

PASO 1.A: FINGERSTICK SANGRE TOTAL

PASO 1.B: VENIPUNCTURA SANGRE TOTAL

PASO 2: MEZCLA PASO : PRUEBA

Muestras SANGRE - SUERO
NEGATIVAS