Biochimie clinique

L’acide urique
INTRODUCTION

- Produit de dégradation métabolique des purines et pyrimidines (endogène et exogène)

- Filtré par le glomérule et réabsorbé par les tubules à 90%.
- Circule dans le plasma sous forme d’urates monosodiques.

II. PRELEVEMENT

Sérum ou plasma :
- Anticoagulants oxalates, fluorures interfèrent avec certaines méthodes de
dosage .
- Eviter l’hémolyse ;résultat faussement élevé.
- Eviter le thé, le café ,théophylline ; fournissent l’acide urique.
Urines : urines de 24 heures ,éviter la précipitation de l’acide urique (conservation dans
le NaOH)

III. PRINCIPE

 Enzymatique colorimétrique

Acide urique URICASE CO2 + Allantoine + H2O2

H2O2 POD H2O + ½ O2

½ O2 + chromogène réduit (incolore) chromogène oxydé (coloré) DO (λ)

 La densité optique est proportionnelle à la quantité d’acide urique présente dans

l’échantillon.

Avantage

 Spécifique .
 Sensible.

IV. AUTRES METHODES

Méthode enzymatique à la catalase.

Méthode enzymatique dans l’UV (uricase).
Méthode colorimétrique au réactif phosphptungstique.

V. COURBE D’ETALONNAGE

 Choix des points  : se fait afin de déterminer les limites inférieure et supérieure de la
technique et de balayer toutes les zones des valeurs physiopathologiques dans les
limites de la technique.
A partir d’une solution mère à C= mg /l, on fait des dilutions pour obtenir des
solutions filles .
Cmère x Vmère = Cfille x Vfille

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Valeurs usuelles de l’acide urique :

Homme : 40 – 70 mg/l
Femme : 30 – 60 mg/l
Urines : 400 – 800 mg/24H

Remarque

Il faut choisir au minimum

- Une concentration basse.

- Une concentration moyenne .
- Une concentration élevée.

Les points choisis doivent convenir avec la concentration de la solution mère.

Les volumes choisis doivent convenir avec le volume de la solution mère.

Les points choisis sont :

/ / / /………./ / dernier point = Cmère

Intérêt de la courbe

- Se fait à chaque fois qu’il y a un dosage en série.

- Permet de déterminer la concentration du paramètre dans l’échantillon à doser.
- Permet de déterminer les limites de linéarité et de sensibilité de la technique.

Intérêt des contrôles

- Permettent de valider la manipulation (ou d’effectuer un contrôle de qualité)

Intérêt du blanc réactif

- Permet d’éliminer les interférences.

 Tableau des dilutions

Vfinal = x ml

Cm x Vm = Cf x Vf  Vm = (Cf x Vf)/ Cm

V eau distillée = Vfinal – Vm

Cf mg/l
Vm ml
V ed ml

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V. DOSAGE

On réalise le dosage du paramètre suivant le protocole :

 On réalise les dilutions.

 Manipulation (réactions proprement dite).
 Lecture au spectrophotomètre à λ = nm contre le blanc réactif.

Tableau des résultats

C mg/l PN PP S1 S2
D.O

La loi de Beer-Lambert

D.O= ε. l . C ou

ε : coefficient d’extinction molaire ( cte)

l : longueur de la cuve = 1 cm. (cte)

C : concentration (variable)

On peut tracer la courbe D.O = f (C)

Le tracé (voir papier millimétré)

Titre : dosage de l’acide urique sanguin ( et / ou urinaire) D.O = f (C)

Echelle : en abscisse 1cm

En ordonnée 1cm

La courbe est une droite qui passe par l’origine .

La limite de linéarité pratique = mg/l

La linéarité selon la littérature = 120 mg/l.

VII. EXPLORATION

 Détermination des concentrations du PN,PP et des sérums par extrapolation.

 Multiplier par l’inverse de la dilution si elle avait eu lieu.

PN PP S1 S2 Sn
D.O
C mg/l

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Interprétation

Augmentations physiologiques
-Repas, exercice physique violent.
-Alcoolisme.
Variations pathologiques
-Augmentation
Gouttes
Insuffisance rénale
Traitement prolongé par les salidiurétiques
Hypercatabolisme cellulaire (hémopathie traitée par les agents cytolytiques)
Syndrome de Lesch-Nyhan
Toxémie gravidique
-Diminution
Insuffisance hépatique (défaut de production)
Anomalie tubulaire rénale
Uricofréinateurs hypouricémiants ,AINS
Déficit en ADA

Uricurie  : lithiases urinaires

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