Вы находитесь на странице: 1из 5

УДК: 615.

074
ЭКСТРАКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА И ТСХ АНАЛИЗ ФЛАВОНОИДОВ И
САПОНИНОВ ТРАВЫ И КОРНЕВИЩ С КОРНЯМИ СИНЮХИ
ГОЛУБОЙ, ЗАГОТОВЛЕННОЙ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ
доцент, к.фарм.н. Гудкова А.Аа)., аспирант Шестакова Г.Ю., ассистент, к.фарм.н. Чистякова
А.С., студентка 3 курса Чавро П. В.
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего
образования Воронежский государственный университет
а) Автор для переписки alinevoroneg@mail.ru
Аннотация. Синюха голубая Polemonium caeruleum L.- растение из семейства
синюховые Polemoniaceae, широко распространено в средней полосе России. Корневища с
корнями синюхи – Polemonii caerulei rhizomata cum radicibus, включены в ГФ XIV и
рекомендованы в качестве отхаркивающего средства. Целью работы являлось изучение
экстрактивных веществ и ТСХ анализ флавоноидов и сапонинов извлечений из травы и
корневищ с корнями синюхи голубой. В результате работы установлены закономерности
извлечения экстрактивных веществ из травы и подземных органов синюхи голубой.
Выявлено, что в траве синюхи показатель «Экстрактивные вещества» (ЭВ), не зависимо от
используемого экстрагента, превышает их количество в подземных органах. Максимальный
выход ЭВ наблюдается при экстракции 50% спиртом этиловым, как для травы, так и
корневищ с корнями синюхи (37,18% и 22,17% соответственно).
Выявлено различие в составе как флавоноидов, так и сапонинов в извлечениях из
травы и корневищ с корнями синюхи голубой. В траве синюхи голубой по величинам Rf
установлено присутствие рутина и кверцетина, в подземных органах – рутина. Во всех
органах растения показано наличие соединения, по значению Rf, совпадающее с таковым β-
эсцина.

Ключевые слова: синюха голубая, экстрактивные вещества, ТСХ, флавоноиды,


сапонины

ВВЕДЕНИЕ
Синюха голубая Polemonium caeruleum L. - растение из семейства синюховые
Polemoniaceae, достаточно широко распространено в средней полосе России. Корневища с
корнями синюхи – Polemonii caerulei rhizomata cum radicibus, включены в ГФ XIV. В
народной медицине использованию подлежит трава растения [1-4]. Основными
биологически активными веществами синюхи голубой являются тритерпеновые сапонины.
По степени возрастания полярности они названы полемониозидами А, В, С, D и Е [5]. Также
растение содержит флавоноиды, органические кислоты, смолы и другие соединения [1,4,5].
Показателем, характеризующим суммарное содержание биологически активных
компонентов в растительном сырье, является параметр «Экстрактивные вещества» [6,7].
Информация, полученная в результате изучения данного показателя, может быть
использована при разработке лекарственных растительных препаратов. В России и Беларуси
проводились исследования по разработке жидких экстрактов из травы и корневищ с корнями
синюхи голубой, в работе [1] рекомендовано использование в качестве экстрагента спирта
этилового 70%, в источнике [8] описано получение лекарственных форм с применением
спирта этилового 40%.
Целью работы являлось изучение экстрактивных веществ и ТСХ анализ флавоноидов
и сапонинов извлечений из травы и корневищ с корнями синюхи голубой.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалы: Объектами исследования являлись образец травы и корневища с корнями
синюхи голубой, заготовленные в Воронежской области и приобретенные у частного
поставщика. Трава синюхи была собрана во время цветения, подземные органы – в осенний
период на первом году жизни растения. Все образцы подвергались воздушно – теневой
сушке.
Методы: Определение экстрактивных веществ осуществляли согласно
гравиметрической методике, приведенной в ГФ XIV РФ ОФС.1.5.3.0006.15 «Определение
содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных
растительных препаратах». В качестве экстрагента были использованы растворители,
наиболее часто используемые для производства лекарственных растительных препаратов
(вода, спирт этиловый 20%, 50%, 70% и 95%) по методу 1 [2].
Качественный анализ флавоноидов и сапонинов в извлечениях, полученных по
вышеописанной методике, проводили методом ТСХ на хроматографических пластинах
Sorbfil на алюминиевой подложке (ПТСХ АФ-Ф) (Россия). Условия хроматографирования
приведены в табл.1.
Таблица 1 – Условия проведения ТСХ анализа извлечений из травы и корневищ с корнями
синюхи голубой
Параметр Флавоноиды Сапонины
Объем пробы, мкл 10 (трава), 15 (корневища с 20
корнями)
Элюирующая система Этилацетат : муравьиная н-бутанол : этанол : аммиак
кислота : вода (10:2:3) (7:2:5)
Детектирующий реагент 5% спиртового раствор 25% спиртовой раствор
хлорида алюминия с фосфорновольфрамовой
последующей обработкой в кислоты с последующим
УФ – свете нагреванием при 1050С

Стандартный раствор 0,05% спиртовой раствор 0,05% спиртовой раствор


стандартного образца рутина стандартного образца β-
10 мкл эсцина 10 мкл

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Анализируя данные рис.1., нужно отметить, что количественное содержание ЭВ в
траве синюхи, не зависимо от используемого экстрагента, превышает в полтора – два раза
их количество в подземных органах. Необходимо отметить, что при использовании в
качестве экстрагента воды, а также спирта этилового 20 и 70%, количество ЭВ различается в
рамках образца в пределах двух-трех единиц (иногда, в пределах ошибки определения). Так,
для травы синюхи голубой при экстракции 20% и 70% спиртом, количество ЭВ одинаково,
чуть больше данный показатель при использовании воды – 34,86%. Анализ ЭВ подземных
органов, показал, что содержание ЭВ почти одинаково при использовании воды и этанола
70%, чуть ниже значение данного показателя при экстракции 20% этанолом. Максимальный
выход ЭВ наблюдается при экстракции 50% спиртом этиловым, как для травы, так и
корневищ с корнями синюхи (37,18% и 22,17% соответственно). Наименьшее количество ЭВ
извлекалось в результате применения спирта этилового 95% (21,20% и 9,97% для травы и
подземных органов соответственно).
Рисунок 1 - Содержание экстрактивных веществ в траве и корневищах с корнями синюхи
голубой
Таблица 1 - Величины Rf зон (±0,02, n=3) флавоноидов извлечений из травы и корневищ с
корнями синюхи голубой, полученных разными растворителями
Трава Корневища с корнями
96% 70% 40% 20% H2O 96% 70% 40% 20% H2O
0,93* 0,93 0,94 0,94 0,94 0,92 0,92 0,92 - -
0,89 0,90 0,89 0,91 0,89 0,89 0,89 0,91 0,89 -
- - - - - 0,86 0,86 0,87 0,87 -
0,69 0,70 0,69 0,70 0,69 0,71 0,69 0,71 0,73 0,69
- - - - 0,65 - - - - -
0,53 0,52 0,52 0,53 0,52 0,54 0,52 0,54 0,56 -
0,44* 0,43 0,45 0,45 0,43 0,46 0,46 0,46 0,47 -
0,38 0,36 0,35 0,36 0,36 0,39 0,37 0,39 0,41 0,36
0,33 0,31 0,31 0,31 0,31 - - - - -
0,24 0,23 0,22 0/23 0,24 - - - - -
0,19 0,17 0,19 0,17 0,16 - - - - -
*- кверцетин (Rf 0,93), ** - рутин (Rf 0,45)
Таблица 2 - Величины Rf зон (±0,02, n=3) сапонинов извлечений травы и корневищ с корнями
синюхи голубой, полученных разными растворителями
Трава Корневища с корнями
96% 70% 40% 20% H2O 96% 70% 40% 20% H2O
- - - - - 0,91 - - - -
0,87 0,86 0,85 - - 0,88 0,87 0,87 - 0,85
0,81 0,83 0,82 0,82 - - 0,83 0,82 0,82 -
- 0,74 0,72 0,75 - 0,71 - - - -
- - - - - 0,66 0,66 0,65 0,64 -
0,62 - - - - 0,59 0,62 0,59 0,60 -
- - - - - - 0,55 0,54 - 0,52
0,50 0,51 0,50 0,49 0,49 0,48 0,49 0,48 0,49 0,48
0,45 0,46 0,46 0,45 0,45 - 0,46 0,45 0,44 0,46
- 0,40 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43 0,44 0,42 0,44
0,34 - - 0,32 0,34 0,35 0,33 0,33 0,34 0,35
0,28 0,28 0,28 0,24 0,26 0,29 0,26 0,27 0,26 0,28
- 0,23 0,23 - 0,21 - - - - 0,22
0,18 0,17 0,17 0,16 0,15 - - - - 0,13
*-Эсцин (Rf 0,50)
Анализируя полученные данные, нужно отметить разницу в составе как флавоноидов,
так и сапонинов в извлечениях из травы и корневищ с корнями синюхи голубой. При
изучении флавоноидов в спиртовых извлечениях из травы синюхи голубой, на треках
насчитывается 9 зон со сходными значениями Rf, в водном извлечении выявлена 10 зона (
Rf 0,65). Состав флавоноидов спиртовых извлечений из подземных органов сходен и
представлен 7 соединениями, в водном извлечении обранужено два соединения
флавоноидной природы. По значениям Rf в траве синюхи были идентифицированы рутин
(Rf 0,45) и кверцетин (Rf 0,93), в корневищах с корнями рутин.
Состав сапонинов извлечений из травы представлен 7 (водное извлечение) – 9
соединениями (спиртовые извлечения). Зоны сапонинов окрашивались в розово –
фиолетовый и коричневато – фиолетовый цвет. При анализе хроматограмм извлечений из
корневищ с корнями синюхи, полученных экстракцией 40% - 95% спиртом, на треках
обнаружено 10 зон, 20% спиртом этиловым 8 зон, в извлечении, полученном водой,
установлено наличие 9 зон, характерных для сапонинов. Зоны, визуализирующиеся на
хроматограмме, кроме традиционной розовато или коричневато – фиолетовой окраски,
имели желтый (Rf 0,55), сине – фиолетовый (Rf 0,59), зеленоватый (Rf 0,65) цвет. В
извлечениях из травы и корневищ с корнями синюхи голубой показано наличие соединения,
по значению Rf, совпадающее с таковым β-эсцина (Rf 0,50).
ВЫВОДЫ
Установлены закономерности извлечения экстрактивных веществ из травы и
подземных органов синюхи голубой. Выявлено, что в траве синюхи показатель
«Экстрактивные вещества», не зависимо от используемого экстрагента, превышает их
количество в подземных органах. Максимальный выход ЭВ наблюдается при экстракции
50% спиртом этиловым, как для травы, так и корневищ с корнями синюхи (37,18% и 22,17%
соответственно).
Установлено различие в составе как флавоноидов, так и сапонинов в извлечениях из
травы и корневищ с корнями синюхи голубой. В траве синюхи голубой по величинам Rf
установлено присутствие рутина и кверцетина, в подземных органах – рутина. Во всех
органах растения показано наличие соединения, по значению Rf, совпадающее с таковым β-
эсцина.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Мальцева А.А. Исследование комплекса биологически активных веществ растения
Polemonium coeruleum L : дис. …канд.фарм.наук / А.А. Мальцева. - М., 2011.- 162 с.
2. Щербинина Е.Ф. Фармакогностическое изучение синюхи голубой флоры Западной
Сибири : автореф. дис .... канд. фарм. наук / Е.Ф. Щербинина. – Пятигорск, 1990. – 24
с.
3. Государственная фармакопея Российской Федерации : в 4 т. – 14-е изд. – Москва,
2018. – URL: http://femb.ru/femb/pharmacopea.php (дата обращения: 14.05.2018).
4. Количественное определение суммы тритерпеновых сапонинов в корневищах с
корнями синюхи / Ю.А. Голяк [и др.] // Химико-фармацевтический журнал.-2008.-№8.
-С. 16-19.
5. Башилов А.В. Антиокислительная активность экстрактивных веществ Polemonium
coeruleum L и представителей рода Fiupendula Mill./ А.В. Башилов// Вестник БГУ.
Сер. 2. - 2007. - № 2. – С. 66 - 69. Электронный ресурс. – Режим доступа:
http://elib.bsu.by/bitstream/123456789/13769/1/65-69.pdf
6. Сорокина А.А. Содержание экстрактивных веществ в лекарственном растительном
сырье / А.А. Сорокина, Н.В. Молчан, И.П. Рудакова, И.А. Самылина // Фармация. –
2010.-№3.-С.3-4.
7. Тринеева О.В. Определение экстрактивных веществ в некоторых видах
лекарственного растительного сырья / О.В. Тринеева, А.И. Сливкин, П.М. Карлов //
Вестник ВГУ. Сер. Химия. Биология. Фармация. – 2013. - №2.- С.220-224.
8. Дубашинская Н.В. Влияние некоторых факторов на качество жидкого экстракта
корневищ с корнями синюхи / Н.В. Дубашинская, О.М. Хишова // Вестник фармации.
- 2008. - № 4 (42). -С. 46-51.

EXTRACTIVES AND TLC ANALYSIS OF FLAVONOIDS AND SAPONINS GRASS AND


RHIZOMES WITH ROOTS GREEK VALERIAN, HARVESTED IN THE VORONEZH
REGION
Associate Professor, Ph.D. Gudkova A.Aa), Graduate student Shestakova G.Yu., assistant, candidate
of pharmaceutical sciences Chistyakova A.S., 3rd year student Chavro P.V.
Voronezh State University
a) Author for correspondence alinevoroneg@mail.ru

Abstract. Greek valerian (Polemonium caeruleum L.) of the family Polemoniaceae is widespread in
central Russia. Rhizomes with cyanosis roots - Polemonii caerulei rhizomata cum radicibus, are
included in the Russian Pharmacopoeia XIV and are recommended as an expectorant. The aim of
the work was to study extractive substances and TLC analysis of flavonoids and saponins of
extracts from grass and rhizomes with greek valerian roots obtained by different estragents. As a
result of the work, patterns of extraction of extractives from grass and underground organs of greek
valerian have been established. It was revealed that in the cyanosis grass, the indicator “Extractive
substances” (ES), regardless of the extractant used, exceeds their amount in underground organs.
The maximum yield of ES is observed upon extraction with 50% ethyl alcohol, both for grass and
rhizomes with greek valerian roots (37.18% and 22.17%, respectively). A difference was found in
the composition of both flavonoids and saponins in extracts from grass and rhizomes with greek
valerian roots. The presence of rutin and quercetin was established in the greek valerian grass in
terms of Rf, and rutin was found in the underground organs. In all organs of the plant, the presence
of a compound according to Rf value coinciding with that of β-escin is shown.
Key words: Greek valerian, extractive substances, TLC, flavonoids, saponins