MARCO TEORICO

En toda separación cromatográfica hay una fase estacionaria y una fase móvil.

La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido que se queda fijo en la misma
posición. La fase móvil puede ser un líquido o un gas que corre a través de una
superficie y de la fase estacionaria. Las sustancias que están en un sistema de
cromatografía interaccionan tanto con la fase estacionaria como con la fase móvil. La
naturaleza de estas interacciones depende de las propiedades de las sustancias así como
también de la composición de la fase estacionaria.

La rapidez con que viaja una sustancia a través del sistema de cromatografía depende
directamente de la interacción relativa entre las sustancias y las fases móvil y
estacionaria. En el caso de una mezcla, si cada componente interacciona diferente con la
fase móvil y la fase estacionaria, cada uno de ellos se moverá diferente.

En la siguiente tabla se observan diferentes fases móviles y fases estacionarias en

diferentes técnicas de cromatografía:

Fase
Técnica Fase móvil
estacionaria
Cromatografía de
Gas Sólido o líquido
gases
Cromatografía líquida Líquido Sólido o líquido
 en fase inversa (polar) (menos polar)
Cromatografía líquida Líquido Sólido o líquido
en fase normal (menos polar) (polar)
Cromatografía líquida Líquido
Sólido
de intercambio iónico (polar)
Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de exclusión
Cromatografía líquida
Líquido Sólido
de adsorción
Cromatografía de
Líquido Sólido
fluidos supercríticos

En la cromatografía se tiene en cuenta la velocidad del soluto y la del eluente para pode
determinar la siguiente relación.

Rf = Velocidad de movimiento del soluto

Velocidad de movimiento del eluente

Los fenómenos rectores del proceso de retención y separación son la adsorción y

la absorción. El primero queda delimitado a la superficie interfacial es decir se
refiere a la fijación o retención de la sustancia entre la superficie de las dos
fases; se relaciona con fuerzas químicas y físicas que dependen de  la naturaleza
de la sustancia absorbida, temperatura, naturaleza del absorbente y
concentración. El segundo fenómeno determina la retención de una especie
química por parte de una masa y depende de la tendencia que tiene ésta a formar
mezcla o reaccionar químicamente con la misma.

• éter de petróleo

• -tolueno

• -dietil-éter, t-butil-éter

• -diclorometano

• -acetato de etilo

• -n-pentano, n-hexano

• -ciclohexano

• -tetracloruro de carbono

• -éter dietílico

• -cloroformo

• -acetona
 • -iso-propanol

• -etanol

• -metanol

• -ácido acético

La elección del eluyente depende del componente que se va a separar y del material en
que la separación se lleva a cabo.

Principales eluyentes en orden creciente de polaridad:

Eter de petróleo. Eter dietílico. Ciclohexano. Acetato de etilo. Tetracloruro de carbono.*

Piridina. Benceno.* Etanol. Cloroformo.* Metanol. Diclorometano. Agua. Ácido
acético.

 compuestos cancerígenos.

En la elección del eluyente influyen varios factores:

Precio. Pureza. No utilizar mezclas de eluyentes (reproducibilidad). No utilizar

compuestos muy volátiles. Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores). La
elección del eluyente se realiza de forma empírica. Hay que estudiar la polaridad del
componente y probar con eluyentes cada vez menos polares.