ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ

Ïðÿìîé ïàðîôàçíûé ìåòîä îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà

â æèäêèõ ñðåäàõ: ìàòåðèàëû âàëèäàöèè
Áàðèíñêàÿ Ò.Î.1 ê.ôàðì.í., âðà÷ êëèíè÷åñêîé ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêè õèìèêî-òîêñèêîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè
Þõòåíêî Å.Â.1 âðà÷ êëèíè÷åñêîé ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêè õèìèêî-òîêñèêîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè
Àíäðèÿêî Ò.Á.1 ê.ôàðì.í., âðà÷ êëèíè÷åñêîé ëàáîðàòîðíîé äèàãíîñòèêè õèìèêî-òîêñèêîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè
Ñìèðíîâ À.Â.1 ê.ôàðì.í., çàâåäóþùèé õèìèêî-òîêñèêîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèåé
Âèõðîâà Ñ.Â.2 íà÷àëüíèê îòäåëà ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ èçìåðåíèé
Ôàòêóäèíîâà Ø.Ð.2 ê.õ.í., çàìåñòèòåëü íà÷àëüíèêà ôèçèêî-õèìè÷åñêèõ èçìåðåíèé

1 — ÃÁÓÇ ã. Ìîñêâû «Ìîñêîâñêèé íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêèé öåíòð íàðêîëîãèè Äåïàðòàìåíòà çäðàâîîõðàíåíèÿ ã. Ìîñêâû»

109390, ã. Ìîñêâà, óë. Ëþáëèíñêàÿ, ä. 37/1
2 — ÔÃÓÏ «Âñåðîññèéñêèé íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèé èíñòèòóò ìåòðîëîãè÷åñêîé ñëóæáû»
Ìîñêâà

Àâòîð äëÿ êîððåñïîíäåíöèè. Áàðèíñêàÿ Òàòüÿíà Îñêàðîâíà; e-mail: barto1605@yahoo.com

Ôèíàíñèðîâàíèå. Èññëåäîâàíèå íå èìåëî ñïîíñîðñêîé ïîääåðæêè.
Êîíôëèêò èíòåðåñîâ. Àâòîðû çàÿâëÿþò îá îòñóòñòâèè êîíôëèêòà èíòåðåñîâ.
Ïîñòóïèëà: 09.09.2017.

Íàðÿäó ñ àëêèëíèòðèòíûì ìåòîäîì îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà â áèîñðåäàõ, àòòåñòîâàííûì â 2010—2012 ãã.,

â ïîñëåäíèå ãîäû â Ðîññèè ïîëó÷èë ðàñïðîñòðàíåíèå ìåòîä ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè, íàèáîëåå øèðîêî èñ-
ïîëüçóþùèéñÿ íà Çàïàäå, îñíîâàííûé íà ïðÿìîé ïàðîôàçíîé ýêñòðàêöèè àíàëèòà. Ìû ïðèâîäèì ìàòåðèà-
ëû âàëèäàöèè ñîîòâåòñòâóþùåé ìåòîäèêè, îòëè÷àþùåéñÿ îò äâóõ ïðåäûäóùèõ âàëèäèðîâàííûõ âàðèàí-
òîâ, âî-ïåðâûõ, òåì, ÷òî àíàëèç îäíîâðåìåííî ïðîòåêàåò íà äâóõ êîëîíêàõ, ÷òî ïîâûøàåò ñïåöèôè÷íîñòü
ìåòîäà, ïîçâîëÿÿ äèôôåðåíöèðîâàòü êîìïîíåíòû, èíòåðôåðèðóþùèå íà îäíîé èç êîëîíîê, à âî-âòîðûõ,
ïðèìåíåíèåì îäíîâðåìåííî äâóõ âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ (ïðîïàíîëà-1 è áóòàíîëà-2), ÷òî ïîçâîëÿåò îñó-
ùåñòâëÿòü êîëè÷åñòâåííûé àíàëèç â ïðèñóòñòâèè â îáúåêòå ëþáîãî èç íèõ. Âàëèäèðîâàíû òàêæå ìåòðî-
ëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè îïðåäåëåíèÿ íåêîòîðûõ ñîïóòñòâóþùèõ êîìïîíåíòîâ: àöåòîíà, ìåòàíîëà,
ïðîïàíîëà-2 è ïðîïàíîëà-1. Âàëèäàöèÿ îñóùåñòâëåíà â îáúåìå, äîñòàòî÷íîì äëÿ ðóòèííûõ ìåòîäîâ èññëå-
äîâàíèÿ, è ðåêîìåíäóåòñÿ äëÿ âñåõ ëàáîðàòîðèé, îñíàùåííûõ àíàëîãè÷íûì îáîðóäîâàíèåì.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: àöåòîí, ìåòàíîë, ïðîïàíîë, ïàðîôàçíàÿ ãàçîâàÿ õðîìàòîãðàôèÿ, ïîâòîðÿåìîñòü, ïðå-
öèçèîííîñòü, ïðàâèëüíîñòü, òî÷íîñòü.

Ââåäåíèå ÷òî â ïîëíîé ìåðå ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü ìåæäóíà-

åñêîëüêî äåñÿòèëåòèé â Ðîññèè ïîâñåìåñòíî
Í èñïîëüçîâàëñÿ ëèøü îäèí ìåòîä êîëè÷åñòâåí-
íîãî îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà â áèîîáúåêòàõ,
íå èçâåñòíûé íà Çàïàäå, — àëêèëíèòðèòíûé ìåòîä
ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè, âêëþ÷àþùèé äåðèâàòèçàöèþ
àíàëèòà [10]. Â òî æå âðåìÿ, â ìèðå äî ñèõ ïîð íàè-
áîëåå øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ ìåòîä ãàçîâîé õðîìàòîã-
ðàôèè ñ òåðìîñòàòèðîâàíèåì îáðàçöà, îñíîâàííûé
íà ïðÿìîé ïàðîôàçíîé ýêñòðàêöèè [11—13].
Àíàëîãè÷íûé ìåòîä ñ àâòîìàòè÷åñêèì ïðîáîîòáîðîì,
íî áåç òåðìîñòàòèðîâàíèÿ, ñòàë ïðèìåíÿòüñÿ è â Ðîñ-
ñèè ñ òåõ ïîð, êàê â íåêîòîðûõ õèìèêî-òîêñèêîëîãè-
÷åñêèõ ëàáîðàòîðèÿõ (ÕÒË) ïîÿâèëèñü ãàçîâûå õðî-
ìàòîãðàôû ôèðìû Agilent áåç òåðìîñòàòèðóåìîãî
ïðîáîîòáîðíèêà [9]. Íàêîíåö, íåäàâíî â îòå÷åñòâåí-
íûõ ëàáîðàòîðèÿõ ïîÿâèëèñü ãàçîâûå õðîìàòîãðàôû
Agilent è Êðèñòàëë ñ òåðìîñòàòèðîâàíèåì îáðàçöà,
àâòîìàòè÷åñêèì ïðîáîîòáîðíèêîì (àâòîñàìïëåðîì),
42
ðîäíûé îïûò.
Ê ìîìåíòó âûõîäà íàøåé ñòàòüè, â êîòîðîé ìû îá-
îñíîâàëè íåîáõîäèìîñòü ââåäåíèÿ ïðåäåëüíî äîïóñòè-
ìîé êîíöåíòðàöèè (ÏÄÊ) ýòàíîëà â êðîâè (àíàëîãè÷íî
ïðèíÿòîé ÏÄÊ â âûäûõàåìîì âîçäóõå) [3], ëèøü îäèí
ìåòîä — àëêèëíèòðèòíûé — èìåë ìåòðîëîãè÷åñêóþ
àòòåñòàöèþ â Ðîññèè [5]. Ðàçëè÷íûå ðàçíîâèäíîñòè àë-
êèëíèòðèòíîãî ìåòîäà, à òàêæå ïðÿìîé ïàðîôàçíûé ìå-
òîä áåç òåðìîñòàòèðîâàíèÿ òàê è íå ïðîøëè ïîëíîöåí-
íîé ìåòðîëîãè÷åñêîé àòòåñòàöèè. Òîëüêî ÷òî ïîÿâèâ-
øèéñÿ â Ðîññèè ïðÿìîé ïàðîôàçíûé ìåòîä ñ òåðìîñòà-
òèðîâàíèåì â òîò ïåðèîä äåëàë ñâîè ïåðâûå øàãè.
 íàñòîÿùåå âðåìÿ ïîÿâèëñÿ åùå îäèí àòòåñòîâàííûé
âàðèàíò «àëêèëíèòðèòíîé» ìåòîäèêè [7], à òàêæå äâå àò-
òåñòîâàííûå ìåòîäèêè èçìåðåíèÿ êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà
â æèäêèõ îáðàçöàõ, îñíîâàííûå íà ïðÿìîé ïàðîôàçíîé
ýêñòðàêöèè àíàëèòà. Âïåðâûå (â Ðîññèè) ïîäîáíàÿ ìåòî-
äèêà áûëà ðàçðàáîòàíà â ÕÒË Óëàí-Óäý (ðåñïóáëèêà
ISSN 1682-8313
Áóðÿòèÿ) è àòòåñòîâàíà ÔÃÓÏ «ÂÍÈÈÌÑ» â 2014 ã.
(ñâèäåòåëüñòâî îá àòòåñòàöèè ¹ 01.00225/205-34-14
îò 15.10.2014 ã., ÔÐ.1.31.2014.19160) [8]. Çàòåì áûëà
àòòåñòîâàíà ìåòîäèêà, ðàçðàáîòàííàÿ ÎÎÎ «ÅÑÀ Ñåð-
âèñ» (Ñàíêò-Ïåòåðáóðã) ïî çàêàçó Ñ.-Ïåòåðáóðãñêîãî
ÁÑÌÝ [6].
 íàñòîÿùåé ðàáîòå ìû ïðåäñòàâëÿåì ìàòåðèàëû
ïî âàëèäàöèè òðåòüåé ìåòîäèêè: «Ìåòîäèêà èçìåðåíèé
ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè íèçêîìîëåêóëÿðíûõ ñïèðòîâ è
àöåòîíà â âîäíûõ ðàñòâîðàõ, êðîâè è ìî÷å», ðàçðàáî-
òàííîé â Õèìèêî-òîêñèêîëîãè÷åñêîé ëàáîðàòîðèè
ÌÍÏÖ íàðêîëîãèè ÄÇÌ, ïðîøåäøåé ìåòðîëîãè÷åñ-
êóþ àòòåñòàöèþ âî ÂÍÈÈÌÑ (ñâèäåòåëüñòâî îá àò-
òåñòàöèè ¹ 205-26/RA.RU.311787-2016/2017 îò
20.03.2017 ã., çàðåãèñòðèðîâàííîé â Ôåäåðàëüíîì
èíôîðìàöèîííîì ôîíäå ïî îáåñïå÷åíèþ åäèíñòâà èç-
ìåðåíèé ïîä íîìåðîì ÔÐ.1.31.2017.26452 è èìåþ-
ùåé ñóùåñòâåííûå îòëè÷èÿ îò äâóõ ïðåäûäóùèõ.
 ñëåäóþùåé ñòàòüå ìû íàìåðåíû ñðàâíèòü âñå òðè
ïåðå÷èñëåííûå âûøå ìåòîäèêè ìåæäó ñîáîé è ñ çàðó-
áåæíûì àíàëîãîì, à òàêæå ñôîðìóëèðîâàòü ïðèíöè-
ïû âûáîðà çíà÷åíèÿ ÏÄÊ äëÿ êðîâè.
Ìàòåðèàëû è ìåòîäû
Îáîðóäîâàíèå
Òðè ãàçîâûõ õðîìàòîãðàôà Agilent Technologies
7890B (ÑØÀ), îñíàùåííûõ äâóìÿ ïëàìåííî-èîíè-
çàöèîííûìè äåòåêòîðàìè, äâóìÿ êàïèëëÿðíûìè êî-
ëîíêàìè 30 ì õ 320 ìêì òèïîâ DB-ALC1 (êîëîíêà
«À», òîëùèíà ñëîÿ íåïîäâèæíîé ôàçû 1,8 ìêì) è
DB-ALC2 (êîëîíêà «Â», òîëùèíà íåïîäâèæíîé ôà-
çû 1,2 ìêì), èìåþùèìè ðàçëè÷íóþ ïîëÿðíîñòü íå-
ïîäâèæíîé ôàçû. Êîëîíêè ïîäñîåäèíåíû ê îäíîìó
ïîðòó ââîäà ïðîáû ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà (èíæåêòî-
ðó), ñíàáæåííîìó äåëèòåëåì ïðîáû. Â êîìïëåêòå
ñ êàæäûì ïðèáîðîì èìååòñÿ ïàðîôàçíûé àâòîñàì-
ïëåð òèïà Agilent Technologies 7697A (ÑØÀ), îáåñ-
ïå÷èâàþùèé íàãðåâ ïðîáû ñ öåëüþ ñòàòè÷åñêîé ïàðî-
ôàçíîé ýêñòðàêöèè ëåòó÷èõ êîìïîíåíòîâ è àâòîìàòè-
÷åñêèé ïåðåíîñ ãàçîâîé ôàçû â êîëîíêó. Ïðèëàãàåìàÿ
ê ýòîìó êîìïëåêòó îáîðóäîâàíèÿ ñèñòåìà ñáîðà è îá-
ðàáîòêè äàííûõ GC OPEN LAB îäíîâðåìåííî ðå-
ãèñòðèðóåò è îáðàáàòûâàåò ñèãíàëû äâóõ íåçàâèñè-
ìûõ äåòåêòîðîâ, ñòðîèò ãðàäóèðîâî÷íûå õàðàêòåðèñ-
òèêè äëÿ êàæäîãî äåòåêòîðà â îòäåëüíîñòè è ðàññ÷è-
òûâàåò äâà ðåçóëüòàòà, ïîëó÷åííûå íà äâóõ êîëîíêàõ.
Äëÿ ãåíåðàòîðà âîäîðîäà ÃÂ×-12À (ïðîèçâîäñòâî
ÍÏÏ Õèìýëåêòðîíèêà, Ìîñêâà), à òàêæå ïðèãîòîâ-
ëåíèÿ è ðàçâåäåíèÿ âîäíûõ ðàñòâîðîâ èñïîëüçîâàëàñü
äèîíèçèðîâàííàÿ âîäà, ïîëó÷åííàÿ ñ ïîìîùüþ ñèñòå-
ìû Adrona B 30/Integrity+ (Ëàòâèÿ).
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ è ðàçâåäåíèÿ ðàñòâîðîâ, à òàê-
æå äëÿ ïðáîïîäãîòîâêè ïðèìåíÿëèñü äîçàòîðû
ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12
Humapette 5—50 ìêë è BIOHIT 100—1000 ìêë,
ïîãðåøíîñòü ìåíåå 1%, ïîâåðåííûå â óñòàíîâëåííîì
ïîðÿäêå, è ìåðíûå êîëáû 2-ãî êëàññà òî÷íîñòè.
Ðåàêòèâû
Ãîñóäàðñòâåííûå ñòàíäàðòíûå îáðàçöû ñîñòàâà
âîäíûõ ðàñòâîðîâ ýòàíîëà, êîìïëåêò ÂÐÝ-1 (ÃÑÎ
¹7969-2001, ïðîèçâîäñòâà ÎÎÎ «Ìîíèòîðèíã», ÑÏá),
ñ îòíîñèòåëüíîé ïîãðåøíîñòüþ ±1% (P = 0,95),
ñ ìàññîâîé êîíöåíòðàöèåé 0,1508; 1,009; 2,012; 4,01
è 6,01 ã/ë èñïîëüçîâàëèñü äëÿ ãðàäóèðîâêè õðîìàòîã-
ðàôîâ íà ýòàíîë. Äðóãèå ðàñòâîðû òîãî æå íàáîðà
ñ êîíöåíòðàöèåé 0,505; 3,00 è 5,03 ã/ë ïðèìåíÿëèñü
äëÿ îïðåäåëåíèÿ òî÷íîñòè è ïðåöèçèîííîñòè ìåòîäà.
Ñòàíäàðòíûé îáðàçåö ñîñòàâà âîäíîãî ðàñòâîðà ýòà-
íîëà ÂÐÝ-2 (ÃÑÎ 8789-2006, ïðîèçâîäñòâà ÎÎÎ
«Ìîíèòîðèíã», ÑÏá), ñ êîíöåíòðàöèåé 0,3 ã/ë èñ-
ïîëüçîâàëñÿ êàê äëÿ ãðàäóèðîâêè, òàê è äëÿ åæåäíåâ-
íîãî êîíòðîëÿ êà÷åñòâà. Ìåäèöèíñêèé àíòèñåïòè÷åñ-
êèé ðàñòâîð, ðåã. íîìåð ËÏ 001809-300615, èñïîëü-
çîâàëñÿ äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ìîäåëüíûõ ðàñòâîðîâ ýòà-
íîëà â ìî÷å ñ êîíöåíòðàöèåé 0,293; 1,462; 2,927 è
4,879 ã/ë. Ðàñ÷åò îáúåìîâ ïðè ýòîì ïðîèçâîäèëñÿ
ïî àëêîãîëåìåòðè÷åñêîé òàáëèöå.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ íèæíåãî ïîðîãà êîëè÷åñòâåííîãî
îïðåäåëåíèÿ ãîòîâèëè åùå äâà âîäíûõ ðàñòâîðà ýòàíî-
ëà è äâà îáðàçöà êðîâè ïóòåì äâóêðàòíîãî ïîñëåäîâà-
òåëüíîãî ðàçâåäåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîãî ðàñòâîðà ñ êîí-
öåíòðàöèåé 0,1508 ã/ë èç êîìïëåêòà ÂÐÝ-1 è îáðàçöà
êðîâè ñ êîíöåíòðàöèåé 0,142 ã/ë. Ýòîò ïîñëåäíèé ìà-
òåðèàë ïðåäñòàâëÿë ñîáîé ðåàëüíûé îáðàçåö êðîâè ïà-
öèåíòà, â êîòîðîì êîíöåíòðàöèÿ ýòàíîëà áûëà îïðåäå-
ëåíà àòòåñòîâàííûì àëêèëíèòðèòíûì ìåòîäîì ñ ïî-
ãðåøíîñòüþ ±0,03 ã/ë. Òàêèì îáðàçîì, áûëè ïîëó÷å-
íû îáðàçöû ÂÐÝ ñ êîíöåíòðàöèåé 0,0754 è 0,0377
ã/ë è îáðàçöû êðîâè ñ êîíöåíòðàöèåé 0,071 è 0,036
ã/ë. Äëÿ ðàçâåäåíèÿ êðîâè ïðèìåíÿëàñü êðîâü äðóãîãî
ïàöèåíòà, íå ñîäåðæàùàÿ ýòàíîë.
Êîìïëåêò âîäíûõ ðàñòâîðîâ ñìåñè ñïèðòîâ è àöå-
òîíà (â àìïóëàõ) äëÿ ãðàäóèðîâêè õðîìàòîãðàôà:
Multicomponent Alcohol Calibrqtion Kit (C1—C3)
A-054. Lot FN05071401 (äàëåå — ìóëüòèêîìïîíåí-
òíàÿ ñìåñü) èñïîëüçîâàëñÿ äëÿ ãðàäóèðîâêè õðîìà-
òîãðàôîâ íà àöåòîí, ìåòàíîë è ïðîïàíîë-2, à òàêæå
äëÿ îïðåäåëåíèÿ ïðåöèçèîííîñòè. Íàáîð èç 4 àìïóë
ñîäåðæèò ñìåñè ñ êîíöåíòðàöèÿìè êàæäîãî êîìïî-
íåíòà 0,5; 1,0; 2,0 è 4,0 ã/ë. Îñòàëüíûå ðàñòâîðû,
èñïîëüçóåìûå äëÿ îïðåäåëåíèÿ ãðàäóèðîâî÷íîé çàâè-
ñèìîñòè ìåòàíîëà, ïðîïàíîëà-2 è àöåòîíà, à èìåííî,
ðàñòâîðû ñ êîíöåíòðàöèåé êàæäîãî êîìïîíåíòà
0,03125; 0,0625; 0,125 è 0,25 ã/ë, áûëè ïîëó÷åíû
ðàçâåäåíèåì âîäîé èñõîäíûõ ðàñòâîðîâ. Äëÿ ãðàäóè-
ðîâêè íà ïðîïàíîë-1 ãîòîâèëñÿ âîäíûé ðàñòâîð ñ êîí-
öåíòðàöèåé 4,00 ã/ë ñ ïîñëåäóþùèì ïîñëåäîâàòåëü-
43
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ

íûì ðàçâåäåíèåì åãî äî êîíöåíòðàöèè 0,03125 ã/ë. Ïðîáîïîäãîòîâêà è àíàëèç

Àöåòàëüäåãèä, äèýòèëîâûé ýôèð, ýòèëàöåòàò, ïðîïà- Â âèàëó äëÿ ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè Agilent âìåñ-
íîë-1, áóòàíîë-2, òðåò-áóòàíîë, àöåòîíèòðèë, õëîðî- òèìîñòüþ 20 ìë âíîñÿò 0,5 ìë ðàñòâîðà âíóòðåííèõ
ôîðì, òîëóîë, 1,2-äèõëîðýàí êâàëèôèêàöèè «äëÿ õðî- ñòàíäàðòîâ, çàòåì äîáàâëÿþò 0,05 ìë îáðàçöà (èññëå-
ìàòîãðàôèè» ñ ìàññîâîé äîëåé îñíîâíîãî âåùåñòâà äóåìîãî áèîîáúåêòà, ãðàäóèðîâî÷íîãî èëè êîíòðîëü-
íå ìåíåå 99,5% ïðèìåíÿëèñü äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîîò- íîãî ðàñòâîðà èëè âîäû — â ñëó÷àå èññëåäîâàíèÿ
âåòñòâóþùèõ âðåìåí óäåðæèâàíèÿ. Ñ ýòîé öåëüþ ãî- «ôîíîâîé» ïðîáû). Ñðàçó ïîñëå äîçèðîâàíèÿ ôëàêîí
òîâèëèñü âîäíûå ðàñòâîðû ýòèõ êîìïîíåíòîâ (êðîìå çàêðûâàþò àëþìèíèåâûì êîëïà÷êîì ñ ñåïòîé, îáæè-
1,2 äèõëîðýòàíà è õëîðîôîðìà) ñ êîíöåíòðàöèåé ìàþò äëÿ ñîçäàíèÿ ãåðìåòè÷íîñòè, âñòðÿõèâàþò è ïî-
0,1 ã/ë. Ðàñòâîðû 1,2-äèõëîðýòàíà è õëîðîôîðìà ãî- ìåùàþò â øòàòèâ àâòîñàìïëåðà. Äàëüíåéøèå ïðîöå-
òîâèëèñü â äâà ýòàïà: ñíà÷àëà ðàñòâîð êîìïîíåíòà äóðû — òåðìîñòàòèðîâàíèå, äîçèðîâàíèå àëèêâîòû
â ýòàíîëå ñ êîíöåíòðàöèåé 10 ã/ë, à çàòåì ýòîò ðàñ- âîçäóøíîé ôàçû â êîëîíêó, ðåãèñòðàöèÿ ïèêîâ â âèäå
òâîð ðàçâîäèëñÿ âîäîé â 100 ðàç. õðîìàòîãðàììû è ðàñ÷åò ðåçóëüòàòîâ — îñóùåñòâëÿ-
Ïðîïàíîë-1 è áóòàíîë-2 áûëè âûáðàíû íàìè äëÿ þòñÿ àâòîìàòè÷åñêè. Äëÿ ðàñ÷åòà èñïîëüçóåòñÿ ìåòîä
èñïîëüçîâàíèÿ â êà÷åñòâå âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ. âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà.
Ðàñòâîð âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà, òàêèì îáðàçîì, ñî-
äåðæèò äâà êîìïîíåíòà ñ êîíöåíòðàöèÿìè: ïðîïà- Óñëîâèÿ òåðìîñòàòèðîâàíèÿ
íîë-1 (0,0241 ã/ë), áóòàíîë-2 (0,145 ã/ë). Êîíöåí- è õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ
òðàöèè âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ áûëè ïîäîáðàíû íàìè
òàê, ÷òîáû ïëîùàäè èõ ïèêîâ áûëè ñðàâíèìû ñ ïëî- Òåðìîñòàòèðîâàíèå â òå÷åíèå 7 ìèí ïðè 70°Ñ;
ùàäüþ ïèêà ýòàíîëà ïðè íèçêèõ êîíöåíòðàöèÿõ òåìïåðàòóðà ïåðåíîñà (transfer line) 90°Ñ, âðåìÿ ïå-
(â îáëàñòè ïðåäïîëàãàåìîé âåëè÷èíû ÏÄÊ). Ïðè ðåíîñà — 0,5 ìèí, îáúåì ââîäèìîé ãàçîâîé ôàçû
ýòîì äîñòèãàåòñÿ íàèáîëüøàÿ òî÷íîñòü èìåííî â çîíå (îáúåì ïåòëè) 1 ìë; òåìïåðàòóðà: èíæåêòîðà —
ïîâûøåííîãî èíòåðåñà. 110°Ñ, òåðìîñòàòà êîëîíîê — 40°Ñ (èçîòåðìè÷åñêèé
Êðîâü ïàöèåíòîâ äëÿ àíàëèçà íà ýòàíîë, îòîáðàí- ðåæèì), äåòåêòîðà — 250°Ñ. Ãàç-íîñèòåëü — àçîò
íàÿ â âàêóòåéíåðû, ñîäåðæùèå ÝÄÒÀ â êà÷åñòâå àí- ãàçîîáðàçíûé, ÃÎÑÒ 9293-74, ðàñõîä —
òèêîàãóëÿíòà, à òàêæå ìî÷à, ñîäåðæàùàÿ ýòàíîë, áû- 6,6—6,7 ìë/ìèí; âðåìÿ àíàëèçà — 4 ìèí; ïîëíîå
ëè ïîëó÷åíû èç ðàçíûõ áîëüíèö ã. Ìîñêâû. âðåìÿ öèêëà — 5 ìèí.
Òàáëèöà 1
Ñðåäíèå çíà÷åíèÿ àáñîëþòíûõ âðåìåí
Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå
óäåðæèâàíèÿ êîìïîíåíòîâ (n = 12), ìèí
Èäåíòèôèêàöèÿ êîìïîíåíòîâ
Êîìïîíåíò Êîëîíêà «À» Êîëîíêà «Â»
è èçáèðàòåëüíîñòü ìåòîäà
Âðåìåíà óäåðæèâàíèÿ ìåòàíîëà, ýòàíîëà, ïðîïà-
Àöåòàëüäåãèä 0,94—0,96 0,85—0,89 íîëà-2 è àöåòîíà îïðåäåëÿëèñü ïðè àíàëèçå ìóëüòè-
Ìåòàíîë 0,85—0,87 0,92—0,97 êîìïîíåíòíîé ñìåñè, ïîñêîëüêó èíñòðóêöèÿ, ïðèëàãà-
åìàÿ ê ïðèáîðàì, ñîäåðæèò ïðèìåðíóþ õðîìàòîãðàì-
Ýòàíîë 1,08—1,10 1,16—1,23
ìó, è ïîðÿäîê âûõîäà ïèêîâ çàðàíåå èçâåñòåí. Âðåìå-
Äèýòèëîâûé ýôèð 1,31—1,33
1,02—1,07
íà óäåðæèâàíèÿ ïèêîâ îñòàëüíûõ êîìïîíåíòîâ îïðå-
(ïðîïàíîë-2) äåëÿëèñü íà êàæäîì ïðèáîðå ïóòåì àíàëèçà èíäèâè-
Ïðîïàíîë-2 1,33—1,35 1,37—1,45 äóàëüíûõ ðàñòâîðîâ êîìïîíåíòîâ ñ êîíöåíòðàöèåé
àíàëèòà 0,1 èëè 1,0 ã/ë (òàáë. 1, ðèñ. 1). Ïðè ýòîì
Àöåòîí 1,60—1,63 1,29—1,36 âìåñòî ðàñòâîðà âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà â âèàëó âíî-
t-Áóòàíîë 1,58—1,61 1,55—1,56 ñèëè 0,5 ìë âîäû.
(àöåòîí) (àöåòîíèòðèë) Äèàïàçîí çíà÷åíèé îõâàòûâàåò âðåìåíà, ïîëó÷åííûå
Àöåòîíèòðèë 1,57—1,68
íà òðåõ ÃÕ. Âàðèàöèÿ (CV) âðåìåí óäåðæèâàíèÿ íà
1,59—1,62 (àöåîí) êàæäîì ïðèáîðå ñòàòèñòè÷åñêè íåçíà÷èìà; âî âñåõ ñëó-
(t-áóòàíîë)
÷àÿõ îíà ñîñòàâëÿåò íå áîëåå ñîòûõ äîëåé ìèíóòû.
Ïðîïàíîë-1 1,80—1,83 2,03—2,17
Òîëóîë: ïèê òîëóîëà âûõîäèò ìåæäó 7- è 8-é ìèíó-
Áóòàíîë-2 2,40—2,45 2,53—2,71 òàìè õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ, ÷òî ïðè ìàññîâîì àíàëèçå
Ýòèëàöåòàò 3,05—3,11 2,12—2,26
ñóùåñòâåííî óâåëè÷èâàåò âðåìåííûå çàòðàòû, à ïîòîìó
ìû íå âêëþ÷èëè òîëóîë â ÷èñëî êîìïîíåíòîâ, êîòîðûå
1,2-Äèõëîðýòàí 3,20—3,26 3,14—3,35 ìîæíî èäåíòèôèöèðîâàòü ñ ïîìîùüþ äàííîé ìåòîäèêè.
Îäíàêî åñëè îí ïðèñóòñòâóåò â ïðîáå, òî ñîîòâåòñòâóþ-
44
ISSN 1682-8313
ùèå ïèêè ïîÿâëÿþòñÿ â ñëåäóþùåé õðîìàòîãðàììå. Â
ýòîì ñëó÷àå ïðåäûäóùàÿ ïðîáà èññëåäóåòñÿ ïîâòîðíî ñ
óâåëè÷åííûì âðåìåíåì àíàëèçà.
Òðåò-áóòàíîë è àöåòîíèòðèë èìåþò ïðàêòè÷åñêè
îäèíàêîâûå âðåìåíà óäåðæèâàíèÿ íà êàæäîé êîëîí-
êå, òàê ÷òî ðàçëè÷èòü èõ ìåæäó ñîáîé íåâîçìîæíî.
Êðîìå ýòîãî, íà êîëîíêå «À» ïèêè ýòèõ êîìïîíåíòîâ
âûõîäÿò îäíîâðåìåííî ñ ïèêîì àöåòîíà, õîòÿ íà êî-
ëîíêå «B» îíè îò÷åòëèâî äåëÿòñÿ ñ áëèæàéøèìè êîì-
ïîíåíòàìè (ðèñ. 1), ÷òî ïîäòâåðæäàþò è çàðóáåæíûå
èñòî÷íèêè [15]. Ýòî ñîçäàåò îïðåäåëåííûå òðóäíîñòè
ïðè èäåíòèôèêàöèè è êîëè÷åñòâåííîì àíàëèçå àöåòî-
íà: åãî ìîæíî ñ÷èòàòü èäåíòèôèöèðîâàííûì, åñëè ïè-
êè àöåòîíà ïðèñóòñòâóþò íà îáåèõ êîëîíêàõ. Åñëè ðå-
çóëüòàòû êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ àöåòîíà, ïî-
ëó÷åííûå íà ðàçíûõ êîëîíêàõ, îòëè÷àþòñÿ îäèí îò
äðóãîãî áîëåå, ÷åì ýòî äîïóñêàåò ïðåäåë ïîâòîðÿå-
ìîñòè, ñëåäóåò ñ÷èòàòü èñòèííûì ðåçóëüòàò, ïîëó÷åí-
íûé íà êîëîíêå «Â». Íà ýòîé æå êîëîíêå ïðè ýòîì
äîëæåí ïîÿâèòüñÿ ïèê, ñîîòâåòñòâóþùèé òðåò-áóòà-
íîëó èëè àöåòîíèòðèëó (ðèñ. 2 è 3).
Ðèñ. 1. Õðîìàòîãðàììû ñìåñè ñïèðòîâ è àöåòîíà â ïðèñóòñòâèè ïðîïàíîëà-1 è áóòàíîëà-2, ïîëó÷åííûå íà êîëîíêàõ «À» (ââåðõó) è «Â» (âíèçó).
Êîíöåíòðàöèÿ êîìïîíåíòîâ, êðîìå äâóõ ïîñëåäíèõ, — 0,25 ã/ë
ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12
Õëîðîôîðì ïðè óêàçàííûõ óñëîâèÿõ àíàëèçà
ïðàêòè÷åñêè íå îïðåäåëÿåòñÿ äàæå ïðè êîíöåíòðàöèè
ðàñòâîðà â 1,0 ã/ë.
Àöåòëüäåãèä è ìåòàíîë îò÷åòëèâî ðàçäåëÿþòñÿ
(ðèñ. 4).
Äèýòèëîâûé ýôèð ñîâïàäàåò ïî âðåìåíè óäåðæè-
âàíèÿ ñ ïðîïàíîëîì-2 íà êîëîíêå «À» è èäåíòèôèöè-
ðóåòñÿ ïðîãðàììîé êàê ïðîïàíîë-2, òîãäà êàê íà êî-
ëîíêå «Â» ýòè êîìïîíåíòû âûõîäÿò îòäåëüíûìè ïè-
êàìè (ðèñ. 4).
Äèõëîðýòàí âûõîäèò ñ êîëîíîê ïîñëå áóòàíîëà-2,
íî â òå÷åíèå 4-ìèíóòíîãî àíàëèçà.
Ñòåïåíü ðàçäåëåíèÿ äâóõ ñîñåäíèõ ïèêîâ îïðåäå-
ëÿåòñÿ ïî ôîðìóëå:
t Ra - t Rb
Rs = ,
w 0a,5 + w 0b,5
ãäå tR — âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ êîìïîíåíòà, ìèí;
w0,5 — øèðèíà ïèêà íà ïîëîâèíå âûñîòû (ìèí), à èí-
äåêñû «a» è «b» îòíîñÿòñÿ ê äâóì ñîñåäíèì ïèêàì.
Íàèìåíüøåå çíà÷åíèå Rs õàðàêòåðèçóåò ïèêè àöåòîíà
45
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ
è ïðîïàíîëà-2 íà êîëîíêå «Â»: îíî äîëæíî áûòü
íå íèæå 1,5. Ñòåïåíè ðàçäåëåíèÿ ýòàíîëà è íàèáîëåå
áëèçêèõ ïèêîâ, à èìåííî ýòàíîëà è àöåòàëüäåãèäà
íà êîëîíêå «À»; ýòàíîëà è äèýòèëîâîãî ýôèðà íà êîëîí-
êå «Â», ðàâíû 3, îäíàêî èìååòñÿ ïî êðàéíåé ìåðå îäíî
âåùåñòâî, èíòåðôåðèðóþùåå ñ ýòàíîëîì íà êîëîíêå «Â»
— ñåâîôëóðàí (Sevoflurani, C4H3F7O) [2, 15]. Ïðåïà-
ðàò ñåâîôëóðàí èñïîëüçóåòñÿ äëÿ èíãàëÿöèîííîãî
íàðêîçà. Íà êîëîíêå «À» ýòè ïèêè îò÷åòëèâî ðàçäåëå-
íû (âðåìÿ óäåðæèâàíèÿ 1,225 ìèí). Èíòåðôåðåíöèÿ
ïèêîâ íåêîòîðûõ êîìïîíåíòîâ íà îäíîé èç êîëîíîê
ïðèâîäèò ê âûâîäó î íåîáõîäèìîñòè ïðèìåíåíèÿ äâóõ-
êîëîíî÷íîãî ìåòîäà âî èçáåæàíèå ïîäîáíûõ îøèáîê.
Îñîáåííî âàæíî èñïîëüçîâàòü èñêëþ÷àþùèé îøèáêè
äâóõêîëîíî÷íûé ìåòîä â îòíîøåíèè àíàëèçà íà ýòàíîë,
ïîñêîëüêó â ýòîì ñëó÷àå îøèáêè ïðèâîäÿò ê ñåðüåçíûì
þðèäè÷åñêèì ïîñëåäñòâèÿì.
Ðèñ. 2. Õðîìàòîãðàììû ðàñòâîðà t-áóòàíîëà (0,237 ã/ë) â ïðèñóòñòâèè ïðîïàíîëà-1, ïîëó÷åííûå íà êîëîíêàõ «À» (èäåíòèôèöèðîâàí ïðî-
ãðàììîé êàê àöåòîí) è «Â»
Ðèñ. 3. Õðîìàòîãðàììû ðàñòâîðà àöåòîíèòðèëà ïðè êîíöåíòðàöèè 0,1 ã/ë â ïðèñóòñòâèè ïðîïàíîëà-1 è áóòàíîëà-2, ïîëó÷åííûå íà êîëîíêàõ «À»
(èäåíòèôèöèðîâàí ïðîãðàììîé êàê àöåòîí) è «Â»
46
Ëèíåéíîñòü è âûáîð ãðàäóèðîâî÷íîé ìîäåëè
Íà êàæäîì èç øåñòè êîíöåíòðàöèîííûõ óðîâíåé
áûëî ïðîàíàëèçèðîâàíî ïàðàëëåëüíî 3—4 îáðàçöà.
Ðàñ÷åò ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè âûïîëíÿåòñÿ
ïî ìåòîäó íàèìåíüøèõ êâàäðàòîâ îòäåëüíî äëÿ êàæ-
äîé êîëîíêè (èíà÷å — äëÿ êàæäîãî äåòåêòîðà) ñî-
ãëàñíî ìîäåëüíîìó óðàâíåíèþ: y = ax + b, ãäå
y = SAS/S'IS (ñîîòíîøåíèå ïëîùàäåé ïèêîâ àíàëèòà è
âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà); x = CAS/CIS (ñîîòíîøåíèå êîí-
öåíòðàöèé àíàëèòà è âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà); «a» — êî-
ýôôèöèåíò îòíîñèòåëüíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè (òàíãåíñ
óãëà íàêëîíà ãðàäóèðîâî÷íîé êðèâîé (slope)); b — îòðå-
çîê, îòñåêàåìûé íà îñè «y» (intersept).
Ãðàäóèðîâî÷íûå çàâèñèìîñòè äëÿ ìåòàíîëà, ïðî-
ïàíîëà-2 è àöåòîíà óñòàíàâëèâàëè ïî ðåçóëüòàòàì
äâóõ-òðåõ ïàðàëëåëüíûõ àíàëèçîâ ìóëüòèêîìïî-
íåíòíûõ ñìåñåé íà êàæäîì óðîâíå êîíöåíòðàöèè.
ISSN 1682-8313
Ïðè ýòîì èñïîëüçîâàëàñü òà æå ìîäåëü, ÷òî è ïðè
ãðàäóèðîâêå íà ýòàíîë.
Ýòà æå ìîäåëü èñïîëüçîâàëàñü è ïðè ïîñòðîåíèè
ãðàäóèðîâî÷íîé çàâèñèìîñòè äëÿ ïðîïàíîëà-1, äëÿ
÷åãî ãîòîâèëèñü ðàñòâîðû ñ òàêèìè æå êîíöåíòðàöèÿ-
ìè, êàê äëÿ ãðàäóèðîâêè íà îñòàëüíûå êîìïîíåíòû.
Ïðè ýòîì ïðèìåíÿëñÿ ìåòîä äîáàâîê: äîáàâëåíèÿ
îïðåäåëåííîãî êîëè÷åñòâà êîìïîíåíòà ê èçâåñòíîìó,
êîòîðîå óæå ñîäåðæèòñÿ â ïðîáå (â êà÷åñòâå âíóòðåí-
íåãî ñòàíäàðòà). Òàêèì îáðàçîì ïîëíîñòüþ èìèòèðî-
âàëàñü ñèòóàöèÿ, êîòîðàÿ ìîæåò íàáëþäàòüñÿ â êðîâè
ïàöèåíòîâ ïðè íåîáû÷àéíî áîëüøîì ïèêå ïðîïàíî-
ëà-1. Àíàëîãè÷íî ìîæíî îïðåäåëèòü ãðàäóèðîâî÷íóþ
Ðèñ. 4. Õðîìàòîãðàììû ðàñòâîðîâ àöåòàëüäåãèäà, äèýòèëîâîãî ýôèðà, ýòèëàöåòàòà(0,2 ã/ë) è ìåòàíîëà (1 ã/ë) â ïðèñóòñòâèè ïðîïàíîëà-1 è
áóòàíîëà-2 íà êîëîíêàõ «À» (ââåðõó) è «Â» (âíèçó)
ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12
õàðàêòåðèñòèêó áóòàíîëà-2, îäíàêî â íàøåé ïðàêòèêå
ìû íèêîãäà åùå íå ñòàëêèâàëèñü ñ ýòèì êîìïîíåíòîì
â áèîîáúåêòàõ.
Äëÿ êàæäîãî êîìïîíåíòà êðîìå ïðîïàíîëà-1 ðàñ÷åò
ãðàäóèðîâî÷íîé õàðàêòåðèñòèêè âûïîëíÿþò äâàæäû:
1) ñ÷èòàÿ âíóòðåííèì ñòàíäàðòîì ïðîïàíîë-1;
2) ñ÷èòàÿ âíóòðåííèì ñòàíäàðòîì áóòàíîë-2, â ðå-
çóëüòàòå ÷åãî ñîçäàþòñÿ äâà ìåòîäà îáðàáîòêè.
Åñëè ïëîùàäè ïèêîâ âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ ïðè-
ìåðíî ðàâíû, à èìåííî, 0,90 < Sbt-2/Spr-1 < 1,20,
ïðèìåíÿåòñÿ ìåòîä ðàñ÷åòà ïî ïðîïàíîëó-1; åñëè ñî-
îòíîøåíèå Sbt-2/Spr-1 £ 0,90, ïðèìåíÿåòñÿ ìåòîä ðàñ-
÷åòà êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà è äðóãèõ êîìïîíåíòîâ
47
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ

ïî áóòàíîëó-2. Êðîìå ýòîãî, ïî ãðàäóèðîâî÷íîé çàâè-
ñèìîñòè ïðîïàíîëà-1 (ñ áóòàíîëîì-2 â êà÷åñòâå âíóò-
ðåííåãî ñòàíäàðòà) îïðåäåëÿåòñÿ êîíöåíòðàöèÿ ýòîãî
êîìïîíåíòà.
Àíàëîãè÷íî ñêàçàííîìó, ñîîòíîøåíèå
Sbt-2/Spr-1 ³ 1,2 ñâèäåòåëüñòâóåò î ïðèñóòñòâèè áóòà-
íîëà-2 â îáðàçöå.  ýòîì ñëó÷àå ïðè íåîáõîäèìîñòè
ñëåäóåò îïðåäåëèòü ãðàäóèðîâî÷íóþ çàâèñèìîñòü,
àíàëîãè÷íóþ òàêîâîé äëÿ ïðîïàíîëà-1, è ðàññ÷èòàòü
êîíöåíòðàöèþ áóòàíîëà-2.
Ãðàäóèðîâî÷íàÿ çàâèñèìîñòü ñ÷èòàåòñÿ ïðèåìëå-
ìîé, åñëè R2 ³ 0,999. Â òàáë. 2 ïîêàçàíû êîýôôèöè-
åíòû ãðàäóèðîâî÷íîé çàâèñèìîñòè ýòàíîëà, ïîëó÷åí-
íûå íà êàæäîì èç òðåõ ïðèáîðîâ, è ñîîòâåòñòâóþùå
êîýôôèöèåíòû äåòåðìèíàöèè, äîêàçûâàþùèå íàëè-
÷èå ïðèåìëåìîé ëèíåéíîñòè â äèàïàçîíå êîíöåíòðà-
öèé, ñëóæàùèõ óðîâíÿìè ãðàäóèðîâêè (îò 0,15 äî
6,00 ã/ë). Ïðàâèëüíîñòü ãðàäóèðîâêè ïðîâåðÿþò ïå-
ðåä êàæäîé ðàáî÷åé ñåðèåé àíàëèçîâ ïóòåì àíàëèçà
îäíîãî-äâóõ êîíòðîëüíûõ ðàñòâîðîâ (ðåçóëüòàòû
íå äîëæíû âûõîäèòü çà ãðàíèöû ïîãðåøíîñòè â ñîîò-
âåòñòâóþùåì äèàïàçîíå êîíöåíòðàöèé).
Òî÷íîñòü è ïðåöèçèîííîñòü
Äëÿ îöåíêè òî÷íîñòè è ïðåöèçèîííîñòè (âîñïðî-
èçâîäèìîñòè) èññëåäîâàëàñü âîäíûå ðàñòâîðû ýòàíî-
ëà (ÂÐÝ-1) â òðåõ òî÷êàõ äèàïàçîíà êîíöåíòðàöèé.
7 ïàðàëëåëüíûõ îïðåäåëåíèé áûëî ñäåëàíî íà êàæ-
äîì èç òðåõ ïðèáîðîâ (øåñòè êîëîíêàõ) â êàæäûé
èç òðåõ äíåé (N = 126), òàêèì îáðàçîì, ôàêòîðàìè
âîñïðîèçâîäèìîñòè ñòàëè: ïðèáîð, êîëîíêà, äåíü èñ-
ñëåäîâàíèÿ. Ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè ðàñ-
ñ÷èòàíû îòäåëüíî ïðè ïðèìåíåíèè ïðîïàíîëà-1 è áó-
òàíîëà-2 â êà÷åñòâå âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ (òàáë. 3).

Òàáëèöà 2
Ãðàäóèðîâî÷íûå õàðàêòåðèñòèêè ýòàíîëà è êîýôôèöèåíòû äåòåðìèíàöèè (R2)

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1

Ïðèáîð Êîëîíêà À Êîëîíêà Â

à (slope) b (intersept) R2 à (slope) b (intersept) R2

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1

ÃÕ-1 0,0580 -0,0449 1,0000 0,0581 -0,0507 0,9999

ÃÕ-2 0,0581 -0,0392 0,9999 0,0563 -0,0485 0,9999

ÃÕ-3 0,0591 -0,0534 0,9999 0,0613 -0,0635 0,9999

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò - áóòàíîë-2

ÃÕ-1 0,0344 -0,0565 0,9999 0,0344 -0,0623 0,9998

ÃÕ-2 0,0340 0,0450 0,9997 0,0330 -0,0537 0,9997

ÃÕ-3 0,0344 -0,0598 1,0000 0,0356 -0,0698 0,9999

Òàáëèöà 3
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü ïðè àíàëèçå ÂÐÝ

Âíóòð. ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòð. ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

Ñ (àòòåñòîâ.
çíà÷åíèå), 1CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü2 CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü
ã/ë 3RE, % RE, %
ðÿåìîñòè, % M, ã/ë CV, % ðÿåìîñòè, % M, ã/ë CV, %

0,505 0,42—1,03 0,504 0,46 -0,17 0,48—1,20 0,503 0,29 -0,30

3,000 0,28—0,68 2,978 0,72 -0,74 0,46—1,48 2,977 0,88 -0,75

5,030 0,17—0,96 5,017 0,54 -0,26 0,46—1,39 5,011 0,97 -0,37

Ïðèìå÷àíèÿ: 1 — â ñòîëáöàõ «CV ïîâòîðÿåìîñòè, %» ïðåäñòàâëåíû ìèíèìàëüíîå è ìàêñèìàëüíîå çíà÷åíèÿ, ïîëó÷åííûå â õîäå
âñåõ îïûòîâ; 2 — ïðè îöåíêå âîñïðîèçâîäèìîñòè ñðàâíèâàëèñü ñðåäíèå ðåçóëüòàòû àíàëèçîâ, ïîëó÷åííûõ â óñëîâèÿõ ïîâòîðÿå-
ìîñòè; 3 — ïðàâèëüíîñòü (îòíîñèòåëüíàÿ ïîãðåøíîñòü, RE) ðàññ÷èòàíà êàê ðàçíîñòü ñðåäíåé âåëè÷èíû è àòòåñòîâàííîãî çíà÷å-
íèÿ, â % îò àòòåñòîâàííîãî çíà÷åíèÿ; Ñ — êîíöåíòðàöèÿ; M — ñðåäíåå àðèôìåòè÷åñêîå (çäåñü è äàëåå â àíàëîãè÷íûõ òàáëèöàõ).

48
ISSN 1682-8313 ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12

Ñóäÿ ïî äàííûì òàáë. 3, ìåòîä ðàñ÷åòà ïî áóòàíî-
ëó-2 ñëåãêà óñòóïàåò ìåòîäó ñ ïðîïàíîëîì-1 â îòíî-
øåíèè ïîâòîðÿåìîñòè, íî íå óñòóïàåò â îòíîøåíèè
ïðàâèëüíîñòè. Îáà ñïîñîáà îáëàäàþò ìåòðîëîãè÷åñ-
êèìè ïîêàçàòåëÿìè, âïîëíå ñîîòâåòñòâóþùèìè òðåáî-
âàíèÿì ìåæäóíàðîäíûì ñòàíäàðòàì, ñîãëàñíî êîòî-
ðûì ïîãðåøíîñòü ïðè îöåíêå ïðàâèëüíîñòè íå äîëæíà
áûòü âûøå 15% [16].
Ýòî îòíîñèòñÿ è ê ìåòðîëîãè÷åñêèì ïàðàìåòðàì
àíàëèçà áèîñðåä. Âî âñåõ îáðàçöàõ êðîâè è ìî÷è, èc-
ïîëüçóåìûõ äëÿ èññëåäîâàíèÿ ìåòðîëîãè÷åñêèõ ïàðà-
ìåòðîâ, êîíöåíòðàöèþ ýòàíîëà ïðåäâàðèòåëüíî îïðå-
äåëÿëè àòòåñòîâàííûì àëêèëíèòðèòíûì ìåòîäîì â
óñëîâèÿõ ïðåöèçèîííîñòè (íà 6 ïðèáîðàõ ÌÕ). Ïî-
ëó÷åííûé ðåçóëüòàò ïðèíèìàëñÿ â êà÷åñòâå îïîðíîãî
çíà÷åíèÿ, ñ êîòîðûì ñðàâíèâàëèñü ðåçóëüòàòû íîâîãî
ìåòîäà (òàáë. 4).
Ïðè èçó÷åíèè ìåòðîëîãè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê
àíàëèçà ìî÷è ïîìèìî îáðàçöîâ, ïîëó÷åííûõ èç áîëü-
íèö, èññëåäîâàëèñü ïðèãîòîâëåííûå íàìè ðàñòâîðû
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà â öåëüíîé êðîâè
ýòàíîëà â èñõîäíî íå ñîäåðæàùåé ýòàíîë ìî÷å. Ïðè
ýòîì ðàññ÷èòàííûå êîíöåíòðàöèè ïðèíèìàëèñü
çà îïîðíîå çíà÷åíèå (òàáë. 5).  îñòàëüíûõ ñëó÷àÿõ
îïîðíûì çíà÷åíèåì êîíöåíòðàöèè ñëóæèëè ñðåäíèå
ðåçóëüòàòû îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà àëêèëíèòðèòíûì ìå-
òîäîì íà 6 ïðèáîðàõ ÌÕÊ. Êàê è ïðè ðàáîòå
ñ êðîâüþ, áûëî ïðîàíàëèçèðîâàíî ïî òðè ïàðàëëåëü-
íûõ îáðàçöà íà êàæäîì èç 3 õðîìàòîãðàôîâ è íà êàæ-
äîì óðîâíå êîíöåíòðàöèè.
Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ìåòðîëîãè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê
àíàëèçà äðóãèõ êîìïîíåíòîâ (êðîìå ïðîïàíîëà-1) èñ-
ñëåäîâàëè ãîòîâûå âîäíûå ðàñòâîðû (ìóëüòèêîìïîíåí-
òíûå ñìåñè) è èõ ðàçâåäåíèÿ, âñåãî 9 óðîâíåé êîíöåí-
òðàöèè.  êà÷åñòâå îïîðíîãî çíà÷åíèÿ ïðèíèìàëè àò-
òåñòîâàííóþ êîíöåíòðàöèÿ îáðàçöà èëè ðàññ÷èòàííóþ
ïî ïðîöåäóðå ïðèãîòîâëåíèÿ. Ýêñïåðèìåíòû ïðîâîäè-
ëèñü íà òðåõ ïðèáîðàõ â òå÷åíèå 3 äíåé, ÷èñëî ïàðàë-
ëåëüíûõ îïðåäåëåíèé ñîñòàâëÿëî 3 èëè 4 (òàáë. 6—8).
Ñ öåëüþ îïðåäåëåíèÿ òî÷íîñòè ìåòîäà â îòíîøåíèè
ïðîïàíîëà-1 àíàëèç ãðàäóèðîâî÷íûõ ðàñòâîðîâ
Òàáëèöà 4

Âíóòð. ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòð. ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

Ñ (îïîðíîå
çíà÷åíèå), CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü
ã/ë ðÿåìîñòè, RE, % ðÿåìîñòè, RE, %
% Ñð., ã/ë CV, % % Ñð., ã/ë CV, %

0,139 0,23—0,56 0,142 3,2 2,5 0,09—1,04 0,140 6,7 0,5

0,487 0,41—1,12 0,494 1,0 1,4 0,52—1,69 0,492 2,0 1,0

1,395 0,42—0,93 1,411 0,8 1,1 0,56—1,00 1,426 0,9 2,2

2,469 0,08—0,19 2,466 1,6 -0,1 0,34—0,59 2,480 1,5 0,4

3,501 0,28—1,03 3,552 1,0 1,4 0,48—1,26 3,593 1,5 2,6

Òàáëèöà 5
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà â ìî÷å

Âíóòð. ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòð. ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

Ñ (îïîðíîå
çíà÷åíèå), CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü CV ïîâòî- Ïðåöèçèîííîñòü
ã/ë ðÿåìîñòè, RE, % ðÿåìîñòè, RE, %
% Ñð., ã/ë CV, % % Ñð., ã/ë CV, %

0,293 0,64—1,24 0,290 1,5 -1,1 0,30—1,56 0,282 3,1 -3,8

0,992 0,47—1,17 1,036 0,4 4,4 0,62—1,04 1,040 1,2 4,9

1,463 0,05—1,41 1,438 0,9 -1,7 0,40—0,83 1,433 0,9 -2,1

1,887 0,54—0,95 1,836 0,7 -2,7 0,59—1,02 1,831 1,1 -3,0

2,927 0,25—1,07 2,930 0,7 0,1 0,16—1,35 2,931 1,0 0,1

4,879 0,42—0,94 4,651 0,6 -4,7 0,74—1,28 4,663 0,8 -4,4

5,540 0,49—1,20 5,513 3,5 -0,5 0,58—0,80 5,547 0,7 0,1

49
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ

(8 óðîâíåé êîíöåíòðàöèè) ïîâòîðÿëè ÷åðåç 4 äíÿ ïî- Ìàòðèêñ-ýôôåêò

ñëå ãðàäóèðîâêè. 2—3 ïàðàëëåëüíûõ ïðîáû áûëî ïðî-
àíàëèçèðîâàíî íà êàæäîì èç òðåõ ïðèáîðîâ (òàáë. 9).
Èñïîëüçîâàëñÿ ìåòîä äîáàâîê: ðàñòâîð ïðîïàíî-
ëà-1 âíîñèëè â âèàëó, ñîäåðæàùóþ ðàñòâîð âíóòðåí-
íèõ ñòàíäàðòîâ, ñðåäè êîòîðûõ áûë è ïðîïàíîë-1.
Ïðè áîëåå âûñîêèõ çíà÷åíèÿõ êîíöåíòðàöèÿõ CV
îöåíêè ïîâòîðÿåìîñòè è ïðåöèçèîííîñòè, à òàêæå îò-
íîñèòåëüíàÿ îøèáêà, õàðàêòåðèçóþùàÿ ïðàâèëüíîñòü
(RE), ñîñòàâëÿëè ìåíåå 1%.
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ àöåòîíà â âîäíûõ ðàñòâîðàõ
Îòñóòñòâèå ýôôåêòà ìàòðèêñà áûëî äîêàçàíî ïóòåì
ñðàâíåíèÿ ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà êðîâè, ïîëó÷åííûõ
îïèñûâàåìûì ìåòîäîì íà òðåõ ïðèáîðàõ (øåñòè êî-
ëîíêàõ) ïðè ãðàäóèðîâêå ïî âîäíûì ðàñòâîðàì ýòàíîëà
è àëêèëíèòðèòíûì (àòòåñòîâàííûì) ìåòîäîì íà øåñòè
ãàçîâûõ õðîìàòîãðàôàõ òèïà ÌÕÊ (òàáë. 4). Ïîêàçà-
íî îòñóòñòâèå çíà÷èìîãî ðàñõîæäåíèÿ ìåæäó ðåçóëü-
òàòàìè, ïîëó÷åííûìè àëêèëíèòðèòíûì ìåòîäîì, ïðà-
âèëüíîñòü êîòîðîãî â îòíîøåíèè êðîâè äîêàçàíà,
Òàáëèöà 6

Êîíöåíòðàöèÿ Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

ýòàíîëà
n Ïðåöèçèîííîñòü Ïðåöèçèîííîñòü
(îïîðíîå CV ïîâòîð., % RE CV ïîâòîð., % RE
çíà÷åíèå), ã/ë Ñðåäíåå CV Ñðåäíåå CV

0,031 44 0,0—5,2 0,031 11,7% -1,2% 0,0—4,3 0,034 10,9% 7,2%

0,063 42 0,0—3,0 0,062 6,4% -0,3% 0,4—1,7 0,064 5,2% 2,8%

0,125 38 0,3—1,8 0,125 2,5% 0,2% 0,3—1,1 0,127 1,7% 1,2%

0,250 42 0,2—1,9 0,249 1,2% -0,4% 0,4—1,5 0,248 1,0% -0,6%

0,500 40 0,2—2,7 0,502 1,5% 0,3% 0,2—2,2 0,505 1,6% 1,1%

1,000 42 0,3—2,1 1,005 2,0% 0,5% 0,2—1,3 0,998 2,1% -0,2%

2,000 28 0,3—3,2 1,997 1,5% -0,1% 0,3—3,6 1,999 1,2% 0,0%

3,000 40 0,4—1,4 2,985 0,9% -0,5% 0,4—0,7 2,982 1,1% -0,6%

4,000 34 0,1—1,4 4,017 0,5% 0,4% 0,2—1,2 4,022 0,5% 0,5%

Òàáëèöà 7
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ ìåòàíîëà â âîäíûõ ðàñòâîðàõ

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

Êîíöåíòðàöèÿ
ýòàíîëà Ïðîìåæóòî÷íàÿ Ïðîìåæóòî÷íàÿ
n
(îïîðíîå CV ïîâòîð., % ïðåöèçèîííîñòü RE CV ïîâò., % ïðåöèçèîííîñòü RE
çíà÷åíèå), ã/ë
Ñðåäíåå CV Ñðåäíåå CV

0,031 40 0,2—3,3 0,035 7,7% 12,7% 0,1—2,4 0,037 7,9% 18,5%

0,063 42 0,3—1,7 0,065 4,3% 4,5% 0,2—1,8 0,067 4,4% 6,7%

0,125 34 0,3—1,2 0,125 3,0% -0,4% 0,1—1,2 0,126 3,1% 0,6%

0,250 42 0,3—2,3 0,243 1,9% -2,7% 0,4—2,9 0,243 1,7% -2,9%

0,500 36 0,1—0,9 0,501 1,6% 0,1% 0,1—1,5 0,501 1,7% 0,2%

1,000 38 0,4—1,6 0,996 1,4% -0,4% 0,2—18 0,992 1,2% -0,8%

2,000 28 0,1—0,9 1,999 0,9% -0,1% 0,0—1,0 1,997 0,6% -0,2%

3,000 26 0,2—1,8 3,003 0,6% 0,1% 0,2—2,2 3,005 0,6% 0,2%

4,000 33 0,3—1,7 4,005 0,5% 0,1% 0,0—1,4 4,010 0,6% 0,2%

50
ISSN 1682-8313 ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12

è ðåçóëüòàòàìè, ïîëó÷åííûìè íàøèì ìåòîäîì è ðàñ-
ñ÷èòàííûìè ïðè ãðàäóèðîâêå ïî âîäíûì ðàñòâîðàì,
÷òî ïîçâîëÿåò ñäåëàòü âûâîä îá îòñóòñòâèè âëèÿíèÿ
ìàòðèöû. Ýòîò ôàêò îòëè÷àåò ïðÿìîé ïàðîôàçíûé
ìåòîä îò àëêèëíèòðèòíîãî, äëÿ êîòîðîãî â ïðîöåññå
âàëèäàöèè áûëî äîêàçàíî íàëè÷èå ìàòðèêñ-ýôôåêòà,
â ðåçóëüòàòå ÷åãî ñ öåëüþ ãðàäóèðîâêè ïî âîäíûì
ðàñòâîðàì áûë ðàññ÷èòàí êîððåêòèðóþùé ôàêòîð äëÿ
àíàëèçà êðîâè (ìíîæèòåëü 0,82). Àíàëîãè÷íî áûëî
äîêàçàíî îòñóòñòâèå ìàòðèêñ-ýôôåêòà ïðè àíàëèçå
ìî÷è (òàáë. 5).
Ïîðîã êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ (LLOQ)
Ñóùåñòâóåò äâà ïîäõîäà ê îïðåäåëåíèþ íèæíåãî
ïîðîãà êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ êîìïîíåíòà
(Low limit of quantification, LLOQ) [16]. Ïåðâûé
îïðåäåëÿåò åãî êàê êîíöåíòðàöèþ, ïðè êîòîðîé ñèãíàë
äåòåêòîðà ïðåâûøàåò àìïëèòóäó «øóìà» íóëåâîé ëè-
íèè â 10 ðàç. Ìû ïðèìåíÿëè äðóãîé, áîëåå ôóíêöèî-
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ ïðîïàíîëà-2 â âîäíûõ ðàñòâîðàõ
íàëüíûé ïîäõîä, ïðè êîòîðîì ïîðîãîì êîëè÷åñòâåí-
íîãî îïðåäåëåíèÿ ñ÷èòàåòñÿ êîíöåíòðàöèÿ, îïðåäåëÿå-
ìàÿ ñ çàäàííîé òî÷íîñòüþ. Ñîãëàñíî ìåæäóíàðîäíûì
òðåáîâàíèÿì, ïðèåìëåìàÿ îòíîñèòåëüíàÿ ïîãðåø-
íîñòü, õàðàêòåðèçóþùàÿ ïðåöèçèîííîñòü è ïðàâèëü-
íîñòü â îáëàñòè íèçøåãî ïîðîãà, ñîñòàâëÿåò 20%.
Âîäíûå ðàñòâîðû è ñìåñè ýòàíîëà ñ êðîâüþ ñ íèç-
êèìè êîíöåíòðàöèÿìè ýòàíîëà áûëè ïðîàíàëèçèðîâà-
íû â 4 ïàðàëëåëÿõ íà êàæäîì èç 3 ïðèáîðîâ
(òàáë. 10). Ðåçóëüòàòû ïîêàçûâàþò, ÷òî ïðèåìëåìûå
ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè àíàëèçà ïîÿâëÿþòñÿ
òîëüêî â îáëàñòè êîíöåíòðàöèè 0,07 ã/ë.
Ïðè ðåøåíèè âîïðîñà î LLOQ (à òàêæå ïðè îïðå-
äåëåíèè äèàïàçîíîâ ñ ðàçëè÷íîé ïîãðåøíîñòüþ) ìû ðó-
êîâîäñòâîâàëèñü âåëè÷èíîé ïîãðåøíîñòè, õàðàêòåðèçó-
þùåé òî÷íîñòü ìåòîäà, ðàññ÷èòàííîé â ñîîòâåòñòâèè
ñ ÃÎÑÒ Ð ÈÑÎ 5725-2002 [4] (ðèñ. 5). Ãðàôèêè
íà ýòèõ ðèñóíêàõ ïîêàçûâàþò, ÷òî ïðè èñïîëüçîâàíèè
ïðîïàíîëà-1 â êà÷åñòâå âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà ìåòîä îá-
Òàáëèöà 8

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò - ïðîïàíîë-1 Âíóòðåííèé ñòàíäàðò - áóòàíîë-2

Êîíöåíòðàöèÿ
ýòàíîëà Ïðîìåæóòî÷íàÿ Ïðîìåæóòî÷íàÿ
n
(îïîðíîå CV ïîâò., % ïðåöèçèîííîñòü RE CV ïîâò., % ïðåöèçèîííîñòü RE
çíà÷åíèå), ã/ë
Ñðåäí. CV Ñðåäí. CV

0,031 40 0,2 - 6,0 0,032 8,0% 2,1% 0,1 - 5,5 0,034 9,4% 8,4%

0,063 42 0,3 - 2,8 0,062 4,2% -0,2% 0,1 - 2,8 0,064 5,3% 2,2%

0,125 34 0,4 - 0,8 0,124 1,9% -0,8% 0,1 - 2,1 0,125 1,5% 0,2%

0,250 42 0,0 - 1,0 0,248 1,1% -0,7% 0,2 - 1,7 0,248 1,3% -1,0%

0,500 36 0,2 - 3,1 0,502 0,7% 0,4% 0,3 - 2,6 0,502 0,7% 0,5%

1,000 38 0,2 - 2,8 1,005 1,0% 0,5% 0,1 - 2,0 1,000 1,2% 0,0%

2,000 28 0,2 - 2,9 1,986 1,4% -0,7% 0,0 - 3,3 1,987 1,1% -0,7%

3,000 26 0,1 - 1,2 2,994 0,4% -0,2% 0,2 - 1,1 2,991 0,5% -0,3%

4,000 33 0,1 - 0,8 4,003 0,2% 0,1% 0,1 - 1,3 4,016 0,2% 0,4%

Òàáëèöà 9
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü îïðåäåëåíèÿ ïðîïàíîëà-1 â âîäíûõ ðàñòâîðàõ

Êîíöåíòðàöèÿ ýòàíîëà Ïðåöèçèîííîñòü

CV ïîâòîðÿåìîñòè RE
(îïîðíîå çíà÷åíèå), ã/ë Ñðåäí. CV

0,031 0,60—5,39% 0,035 9,4% 11,1%

0,063 0,47—3,00% 0,063 6,2% 0,7%

0,125 0,66—1,62% 0,126 2,4% 0,9%

0,250 0,09—0,86% 0,250 0,4% 0,0%

51
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ

Åñëè ïðèñóòñòâèå ýòàíîëà â êîíöåíòðàöèÿõ íèæå

Ðèñ. 5. Çàâèñèìîñòü îòíîñèòåëüíîé ïîãðåøíîñòè, õàðàêòåðèçóþ-
ùåé òî÷íîñòü àíàëèçà (%), îò êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà â âîäíîì ðàñ-
òâîðå (ñëåâà) è â êðîâè (ñïðàâà) ïðè èñïîëüçîâàíèè ïðîïàíîëà-1 è
áóòàíîëà-2 â êà÷åñòâå âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ
ëàäàåò âïîëíå ïðèåìëåìûìè ìåòðîëîãè÷åñêèìè õàðàêòå-
ðèñòèêàìè óæå ïðè êîíöåíòðàöèè 0,07 ã/ë. Ïðè èñ-
ïîëüçîâàíèè áóòàíîëà-2, îäíàêî, ïîãðåøíîñòü íåñêîëü-
êî ïðåâûøàåò 20%. Íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî ìåòîä ñ áóòà-
íîëîì-2 ïðèìåíÿåòñÿ êðàéíå ðåäêî, ìû ðåøèëè óíèôè-
öèðîâàòü õàðàêòåðèñòèêè è ïðèìåíèòü àáñîëþòíóþ ïî-
ãðåøíîñòü, ðàâíóþ ±0,04 ã/ë, â äèàïàçîíå êîíöåíòðà-
öèé îò 0,07 äî 0,50 ã/ë. Òàêèì îáðàçîì, ìèíèìàëüíûé
ðåçóëüòàò, èìåþùèé þðèäè÷åñêîå çíà÷åíèå, ñîñòàâëÿåò
(0,07+0,03) = 0,10 (ã/ë), ïîñêîëüêó ýòî ìèíèìàëüíîå
÷èñëî, êîòîðîå ïðè âû÷èòàíèè àáñîëþòíîé ïîãðåøíîñòè
íå âûéäåò çà ðàìêè äèàïàçîíà èçìåðåíèé.
Ïðàâèëüíîñòü è ïðåöèçèîííîñòü àíàëèçà ÂÐÝ è êðîâè
ñ êîíöåíòðàöèÿìè ýòàíîëà â îáëàñòè ïîðîãà êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ
0,1 ã/ë íå èìååò êàêîãî-ëèáî êëèíè÷åñêîãî èëè þðè-
äè÷åñêîãî çíà÷åíèÿ, òî îñòàëüíûå èç èññëåäîâàííûõ
êîìïîíåíòîâ äàæå ïðè òàêîì óðîâíå ìîãóò áûòü òîê-
ñè÷íû èëè ñâèäåòåëüñòâîâàòü î ïàòîëîãèè. Âïîëíå çà-
êîíîìåðíî, ÷òî ïðè íèçêèõ êîíöåíòðàöèÿõ
(0,03—0,06 ã/ë) îòíîñèòåëüíûå ïîêàçàòåëè (êîýô-
ôèöèåíòû âàðèàöèé ïîâòîðÿåìîñòè è âîñïðîèçâîäè-
ìîñòè, îòíîñèòåëüíàÿ îøèáêà) çàìåòíî âûøå, ÷åì ïðè
áîëåå âûñîêèõ. Ìû, îäíàêî, ðåøèëè íå îãðàíè÷èâàòü
äèàïàçîí èçìåðåíèé â îòíîøåíèè àöåòîíà è íèçøèõ
ñïèðòîâ (ïîìèìî ýòàíîëà), òàê êàê èõ âûÿâëåíèå ïðè
ëþáûõ êîíöåíòðàöèÿõ èìååò âàæíîå äèàãíîñòè÷åñêîå
çíà÷åíèå.
Ïðè èññëåäîâàíèè ìåòàíîëà, àöåòîíà, ïðîïàíî-
ëà-2 è ïðîïàíîëà-1 â íèçøåé êîíöåíòðàöèîííîé òî÷êå
êîýôôèöèåíò âàðèàöèè (ÎÑÊÎ), õàðàêòåðèçóþùèé
âîñïðîèçâîäèìîñòü, à òàêæå ïðàâèëüíîñòü çàìåòíî
íèæå îáùåïðèçíàííîé âåëè÷èíû â 20% (òàáë. 11),
÷òî óêàçûâàåò íà ýòîò óðîâåíü êàê íà ïðèåìëåìóþ íè-
æíþþ ãðàíèöó äèàïàçîíà èçìåðåíèé.
Îòíîñèòåëüíàÿ îáùàÿ ïîãðåøíîñòü, õàðàêòåðèçó-
þùàÿ òî÷íîñòü ìåòîäà, ðàññ÷èòàííàÿ â ñîîòâåòñòâèè
ñ ÃÎÑÒ Ð ÈÑÎ 5725-2002, ïî÷òè â äâà ðàçà âûøå
(ðèñ. 6), ïîýòîìó â íèæíåì äèàïàçîíå êîíöåíòðàöèé
(îò 0,03 ã/ë) ïðèìåíÿåòñÿ àáñîëþòíàÿ ïîãðåøíîñòü
(± 0,008—0,02 ã/ë).
Òàáëèöà 10

Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — ïðîïàíîë-1 Âíóòðåííèé ñòàíäàðò — áóòàíîë-2

Ñ (îïîðíîå
Îáúåêò çíà÷åíèå), Ïðåöèçèîííîñòü Ïðåöèçèîííîñòü
ã/ë RE RE
Ñðåäíÿÿ CV Ñðåäíÿÿ CV

0,038 0,044 11,8% 16,9% 0,040 26,1% 5,6%

ÂÐÝ
0,075 0,080 5,8% 5,6% 0,075 12,2% -0,6%

0,036 0,044 11,8% 21,3% 0,037 22,3% 2,1%

Êðîâü
0,071 0,072 4,5% 1,1% 0,069 11,0% -3,4%

Òàáëèöà 11
Âîñïðîèçâîäèìîñòü è ïðàâèëüíîñòü àíàëèçà ïðè îïðåäåëåíèè ëåòó÷èõ êîìïîíåíòîâ
â íèçøåé êîíöåíòðàöèîííîé òî÷êå (0,03125 ã/ë)

Êîìïîíåíò n M, ã/ë CV âîñïðîèçâîäèìîñòè Ïðàâèëüíîñòü

Àöåòîí 44 0,031 11,70% -1,20%

Ìåòàíîë 40 -0,035 7,70% 12,70%

Ïðîïàíîë-2 50 0,032 8,00% 2,10%

Ïðîïàíîë-1 16 0,035 9,40% 11,10%

52
ISSN 1682-8313 ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12

Âåðõíèì ïîðîãîì êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ

ÿâëÿåòñÿ ìàêñèìàëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ àíàëèòà, èñ-
ïîëüçóåìàÿ ïðè ãðàäóèðîâêå.  êà÷åñòâå âåðõíåãî ïî-
ðîãà îáû÷íî ñëóæèò óñëîâíàÿ ëåòàëüíàÿ êîíöåíòðà-
öèÿ àíàëèòà. Äëÿ ýòàíîëà ýòî òðàäèöèîííî 6 ã/ë, äëÿ
äðóãèõ àíàëèòîâ — 4 ã/ë. Áîëåå âûñîêèå çíà÷åíèÿ
âñòðå÷àþòñÿ êðàéíå ðåäêî. Òàêèå îáðàçöû ðàçâîäÿò â
2 ðàçà âîäîé è çàòåì ïîâòîðÿþò àíàëèç, ó÷èòûâàÿ
ðàçâåäåíèå ïðè ðàñ÷åòå ðåçóëüòàòà.
Ïðåäåë îáíàðóæåíèÿ (LOD)
Ïðåäåë îáíàðóæåíèÿ (÷óâñòâèòåëüíîñòè äåòåêòî-
ðà, LOD) îáû÷íî áûâàåò ãîðàçäî íèæå ïîðîãà êîëè-
÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ. Ýòîò ïðåäåë íåîáõîäèìî
çíàòü, ïîñêîëüêó äàæå ïîëóêîëè÷åñòâåííûå èëè êà-
÷åñòâåííûå äàííûå î ïðèñóòñòâèè ïîñòîðîííåãî àíà-
ëèòà â îðãàíèçìå ÷ðåçâû÷àéíî âàæíû. Ïðåäåë îáíà-
ðóæåíèÿ îïðåäåëÿåòñÿ êàê ñèãíàë, â 3 ðàçà ïðåâûøà-
Ðèñ. 6. Çàâèñèìîñòü îòíîñèòåëüíîé ïîãðåøíîñòè, õàðàêòåðèçóþ-
þùèé àìïëèòóäó «øóìà» íóëåâîé ëèíèè, è ðàññ÷èòû- ùåé òî÷íîñòü àíàëèçà (%), îò êîíöåíòðàöèè êîìïîíåíòà
âàåòñÿ åãî ïî ôîðìóëå:
3 ´ DH ´ C Ñòàáèëüíîñòü
C lim =
H Ñòàáèëüíîñòü îáðàçöà â ïðîöåññå èññëåäîâàíèÿ
ãäå Ñlim — ìèíèìàëüíàÿ äåòåêòèðóåìàÿ êîíöåí- Èíòåðâàëû âðåìåíè
òðàöèÿ, èëè ïîðîã îáíàðóæåíèÿ, ã/ë; DH — «øóì» ìåæäó ïðîáîïîäãîòîâêîé è ÃÕ-àíàëèçîì
íóëåâîé ëèíèè, èçìåðåííûé â òå÷åíèå íå ìåíåå 30 ñ Ïðè âûïîëíåíèè âàëèäàöèîííûõ ýêñïåðèìåíòîâ
â íåïîñðåäñòâåííîé áëèçîñòè îò ïèêà ýòàíîëà, pA; îíè ñîñòàâëÿëè îò 10 ìèí äî 3 ÷, ïîýòîìó ìîæíî ñêà-
H — âûñîòà ïèêà ýòàíîëà, pA; Ñ — êîíöåíòðàöèÿ çàòü, ÷òî ïîäãîòîâëåííûå îáðàçöû ìîãóò èññëåäî-
àòòåñòîâàííîãî ðàñòâîðà ýòàíîëà, ã/ë (èñïîëüçîâà- âàòüñÿ â òå÷åíèå äíÿ áåç óõóäøåíèÿ ìåòðîëîãè÷åñêèõ
ëèñü âñå ãðàäóèðîâî÷íûå ðàñòâîðû, à òàêæå ðàñòâîðû õàðàêòåðèñòèê.
ñ êîíöåíòðàöèÿìè 0,031 è 0,072 ã/ë).
Ïîðÿäîê ÃÕ-èññëåäîâàíèÿ
Ïðåäåë îáíàðóæåíèÿ ýòàíîëà â âîäíûõ ðàñòâîðàõ
ñîñòàâèë 0,004 ã/ë äëÿ îáåèõ êîëîíîê.  ìî÷å è îñî- Ñðàâíåíèå ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà êîíòðîëüíîãî ðàñ-
áåííî â êðîâè, îäíàêî, íàáëþäàåòñÿ çíà÷èòåëüíî áîëü- òâîðà ñ êîíöåíòðàöèåé 0,3 ã/ë, îñóùåñòâëÿåìîãî
øèé øóì íóëåâîé ëèíèè çà ñ÷åò ïîñòîÿííîãî ïðèñó- â íà÷àëå ðàáîòû è ïîñëå àíàëèçà 36, 72 è 108 îáðàç-
òñòâèÿ ýíäîãåííûõ êîìïîíåíòîâ: ìåòàíîëà, àöåòàëüäå- öîâ (ïðè ïîëíîé çàãðóçêå àâòîñàìëåðà) ïîêàçûâàåò,
ãèäà è àöåòîíà (õîòÿ è â êîíöåíòðàöèÿõ íèæå ïîðîãà ÷òî íàáëþäàåìîå ïðè ýòîì íåçíà÷èòåëüíîå óâåëè÷å-
îáíàðóæåíèÿ). Ïîýòîìó ïðåäåë äåòåêòèðîâàíèÿ êîì- íèå ïîêàçàíèé íå âûõîäèò çà ãðàíèöû ïîãðåøíîñòè,
ïîíåíòîâ â áèîñðåäàõ çíà÷èòåëüíî âûøå (òàáë. 12). ñîñòàâëÿÿ îò 0,005 äî 0,018 ã/ë.
Ïðåäåëîì äåòåêòèðîâàíèÿ ìû ñ÷èòàëè ìàêñèìàëü- Îñòàòî÷íûé ýôôåêò (carryover)
íîå èç çíà÷åíèé, ïîëó÷åííûõ íà òðåõ ïðèáîðàõ ïðè Îñòàòî÷íûé ýôôåêò îòñóòñòâóåò: â ôîíîâûõ îáðàçöàõ
÷èñëå èçìåðåíèé 5—8 íà êàæäîì èç íèõ. (ò.å. íå ñîäåðæàùèõ àíàëèòà, «blank-samples») îñòàòêè
Òàáëèöà 12
Ïðåäåë äåòåêòèðîâàíèÿ êîìïîíåíòîâ â âîäíûõ ðàñòâîðàõ è áèîñðåäàõ, ìã/ë

Àíàëèò Ýòàíîë Ìåòàíîë Ïðîïàíîë-2 Àöåòîí

Êîëîíêè À Â À Â À Â À Â

Âîäíûå
4 4 3 4 2 2 1 1
ðàñòâîðû

Êðîâü 21 19 6 9 4 5 3 3

Ïðèìå÷àíèå: «À» è «Â» — êîëîíêè ãàçîâîãî õðîìàòîãðàôà.

53
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ
ýòàíîëà íå îáíàðóæåíû, äàæå åñëè îíè ïîäâåðãàëèñü
õðîìàòîãðàôèðîâàíèþ íåïîñðåäñòâåííî âñëåä çà ãðàäóè-
ðîâî÷íûìè îáðàçöàìè ñ íàèâûñøåé êîíöåíòðàöèåé ýòà-
íîëà (6 ã/ë). Îòñóòñòâèå ýòîãî ýôôåêòà äîêàçàíî íà îá-
åèõ êîëîíêàõ òðåõ ïðèáîðîâ.
Óñòîé÷èâîñòü îáðàçöîâ ïðè õðàíåíèè
Ðàíåå ìû èçó÷àëè âëèÿíèå 12-äíåâíîãî õðàíåíèÿ
êðîâè ïðè -4°Ñ ïóòåì åæåäíåâíîãî îïðåäåëåíèÿ
óðîâíÿ ýòàíîëà è ïðèøëè ê âûâîäó, ÷òî ïðè çàïîëíå-
íèè åìêîñòè «ïîä ãîðëûøêî» è ïëîòíî óêóïîðêå, à
òàêæå â ïðèñóòñòâèè ôòîðèäà íàòðèÿ (äëÿ îáðàçöîâ
òðóïíîé êðîâè) óðîâåíü ýòàíîëà â òå÷åíèå ýòîãî ñðî-
êà íå ìåíÿåòñÿ, à êîëåáàíèÿ ðåçóëüòàòîâ íå âûõîäÿò
çà ãðàíèöû ïðåäåëà âîñïðîèçâîäèìîñòè [1]. ×åðåç
äâà ìåñÿöà õðàíåíèÿ â òåõ æå óñëîâèÿõ (ïðè -4°Ñ)
óðîâåíü ýòàíîëà â êðîâè ñíèæàëñÿ â ñðåäíåì íå áîëåå
÷åì íà 5% (àíàëèç ïðîèçâîäèëñÿ ÷åðåç êàæäûå 2 íå-
äåëè) [1].
Çàìîðàæèâàíèå è ðàçìîðàæèâàíèå
Ñîãëàñíî Ïðèêàçó Ìèíçäðàâà Ðîññèè, êîíòðîëü-
íûå îáðàçöû áèîæèäêîñòåé, îòîáðàííûå ó âîäèòåëåé
òðàíñïîðòíûõ ñðåäñòâ, äîëæíû õðàíèòüñÿ â çàìîðî-
æåííîì ñîñòîÿíèè â òå÷åíèå òðåõ ìåñÿöåâ. Åñëè
â ýòîò ïåðèîä ó ñëåäñòâåííûõ îðãàíîâ âîçíèêàþò ñî-
ìíåíèÿ â ïðàâèëüíîñòè ðåçóëüòàòà, ýòîò îáðàçåö ìî-
æåò áûòü ïîäâåðãíóò àíàëèçó â äðóãîé ëàáîðàòîðèè.
×òîáû ñðàâíèòü ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû, íåîáõîäèìî
íå òîëüêî çíàòü âîñïðîèçâîäèìîñòü (ïðåöèçèîííîñòü)
ìåòîäà, íî è ó÷èòûâàòü âëèÿíèå ïðîöåäóðû çàìîðà-
æèâàíèÿ-ðàçìîðàæèâàíèÿ íà êîíöåíòðàöèþ ýòàíîëà
â èññëåäóåìîé áèîñðåäå. Ïðè âàëèäàöèè àëêèíèòðèò-
íîãî ìåòîäà áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ýòà ïðîöåäóðà íèêàê
íå ñêàçûâàåòñÿ íà óðîâíå ýòàíîëà â ìî÷å, à óðîâåíü
ýòàíîëà â êðîâè ïðè ýòîì ñíèæàåòñÿ ïðèìåðíî
íà 9%, â ðåçóëüòàòå ÷åãî áûë ðàññ÷èòàí êîððåêòèðó-
þùèé ôàêòîð äëÿ ãåìîëèçèðîâàííîé êðîâè. Ïðè àíà-
ëèçå ïðÿìûì ïàðîôàçíûì ìåòîäîì ðåçóëüòàòû àíàëè-
çà êðîâè, ïîëó÷åííûå äî çàìîðàæèâàíèÿ è ïîñëå ðàç-
ìîðàæèâàíèÿ, ñîâïàäàþò, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò îá îò-
Âëèÿíèå çàìîðàæèâàíèÿ íà ðåçóëüòàò àíàëèçà ýòàíîëà
Êîíöåíòðàöèÿ Êîíöåíòðàöèÿ
n, N
äî çàìîðàæèâàíèÿ, ã/ë ïîñëå çàìîðàæèâàíèÿ, ã/ë
0,190 0,179 4; 6
0,910 0,914 3; 6
3,270 3,270 4; 6
Ïðèìå÷àíèå: N — ÷èñëî êîëîíîê (2), óìíîæåííîå íà ÷èñëî ïðèáîðîâ (3); n — ÷èñëî ïàðàëëåëüíûõ àíàëèçîâ. Âíóòðåííèé ñòàí-
äàðò — ïðîïàíîë-1.
54
ñóòñòâèè âëèÿíèÿ ýòîãî ïðîöåññà (òàáë. 13). Ïðè÷è-
íà, ïî-âèäèìîìó, ñîñòîèò â òîì, ÷òî â îáîèõ ñëó÷àÿõ
âî âðåìÿ ïðîáîïîäãîòîâêè â îáðàçöå êðîâè ïðîèñõî-
äèò ãåìîëèç.
×óâñòâèòåëüíîñòü ê èçìåíåíèÿì (robustness)
Èçìåíåíèå êîíöåíòðàöèè âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ
ïðè ñîîòâåòñòâóþùåé ãðàäóèðîâêå èëè êîððåêòèðóþ-
ùèõ ðàñ÷åòàõ íå âëèÿåò íà ðåçóëüòàò è ìåòðîëîãè÷åñ-
êèå õàðàêòåðèñòèêè àíàëèçà. Óâåëè÷åíèå îáúåìà îá-
ðàçöà äî 0,1 ìë ïðè ñîîòâåòñòâóþùåé ãðàäóèðîâêå
ïîâûøàåò ÷óâñòâèòåëüíîñòü ìåòîäà (ñíèæàåò ïðåäå-
ëû îáíàðóæåíèÿ è êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ),
íå ñêàçûâàÿñü íåãàòèâíî íà ìåòðîëîãè÷åñêèõ õàðàêòå-
ðèñòèêàõ.
Çàêëþ÷åíèå
Îïèñàííàÿ íàìè ìåòîäèêà ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé âà-
ðèàíò íàèáîëåå ÷àñòî èñïîëüçóåìîãî â ìèðîâîé ïðàê-
òèêå ìåòîäà, ìíîãîêðàòíî îïèñàííîãî â ðàçíîãî ðîäà
ïîñîáèÿõ è ñïðàâî÷íèêàõ, òàê íàçûâàåìîãî «çîëîòîãî
ñòàíäàðòà» â îáëàñòè êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ
ýòàíîëà. Íàñòîÿùèé âàðèàíò îòëè÷àåòñÿ íåêîòîðûìè
îñîáåííîñòÿìè, ïðèâíåñåííûìè íàìè ïðè àäàïòàöèè
ìåòîäèêè ê ñòîÿùèì ïåðåä íàìè çàäà÷àì.
Èçâåñòíî, ÷òî ãàçî-æèäêîñòíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ —
íåäîñòàòî÷íî ñïåöèôè÷íûé ìåòîä â îòíîøåíèè èññëå-
äóåìûõ êîìïîíåíòîâ, ÷òî ïîäòâåðäèëîñü è â íàøåé ðà-
áîòå, â ÷àñòíîñòè, ñîâïàäåíèåì âðåìåí óäåðæèâàíèÿ
äèýòèëîâîãî ýôèðà è ïðîïàíîëà-2, àöåòîíèòðèëà, t-áó-
òàíîëà è àöåòîíà, ýòàíîëà è ñåâîôëóðàíà íà îäíîé èç
êîëîíîê. Ïîýòîìó â ìèðîâîé ïðàêòèêå ïðèíÿòî îïðå-
äåëÿòü ýòàíîë â þðèäè÷åñêè çíà÷èìûõ ñëó÷àÿõ äâóìÿ
ïðèíöèïèàëüíî ðàçëè÷íûìè ìåòîäàìè. Îäíàêî, áëàãî-
äàðÿ ïðèìåíåíèþ ãàçîâûõ õðîìàòîãðàôîâ ñ äâóìÿ êî-
ëîíêàìè, äâóìÿ äåòåêòîðàìè è ñèñòåìîé äåëåíèÿ ïðî-
áû, èìååòñÿ âåëèêîëåïíàÿ âîçìîæíîñòü ïîëó÷èòü äâà
íåçàâèñèìûõ ðåçóëüòàòà èç îäíîãî îáðàçöà, ÷òî ñíè-
æàåò íå òîëüêî âðåìÿ àíàëèçà, òðóäîâûå è ìàòåðèàëü-
íûå çàòðàòû, íî è ïîâûøàåò âîñïðîèçâîäèìîñòü àíà-
Òàáëèöà 13
CV âîñïðîèçâîäè-
CV ïîâòîðÿåìîñòè, % RE
ìîñòè, %
0,4—1,7 3,3 -6,0%
0,9—2,2 0,6 0,4%
0,4—1,3 1,4 0,0%
ISSN 1682-8313
ëèçà çà ñ÷åò îäíîêðàòíîé ïðîáîïîäãîòîâêè. Èìåííî
ýòîò âàðèàíò ðåàëèçîâàí â íàñòîÿùåé ìåòîäèêå.
Îïðåäåëåíû ìåòðîëîãè÷åñêèå õàðàêòåðèñòèêè àíà-
ëèçà íå òîëüêî ýòàíîëà, íî è íèçøèõ ñïèðòîâ è àöåòî-
íà, êîòîðûå íåðåäêî âñòðå÷àþòñÿ â êðîâè ïàöèåíòîâ,
âêëþ÷àÿ ïðîïàíîë-1, ÿâëÿþùåãîñÿ âíóòðåííèì ñòàí-
äàðòîì.
Ñóùåñòâåííûì îòëè÷èåì íàñòîÿùåé ìåòîäèêè
ñëóæèò ïðèìåíåíèå îäíîâðåìåííî äâóõ âíóòðåííèõ
ñòàíäàðòîâ. Âñå ìåòîäèêè, èñïîëüçóþùèå äëÿ ðàñ÷åòà
ìåòîä âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà, íå ïðåäíàçíà÷åíû äëÿ
êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ àíàëèòà, åñëè â ïðîáå
ïðèñóòñòâóåò êîìïîíåíò, èäåíòè÷íûé âíóòðåííåìó
ñòàíäàðòó. Ýòî ñóùåñòâåííî îãðàíè÷èâàåò îáëàñòü èõ
ïðèìåíåíèÿ. Ïîñêîëüêó çàðàíåå íåèçâåñòíî, êàêèå
êîìïîíåíòû ñîäåðæèò èññëåäóåìûé áèîìàòåðèàë, âñå
ìåòîäèêè, âêëþ÷àÿ àëêèëíèòðèòíûé ìåòîä, òðåáóþò
ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà îáðàçöà ñíà÷àëà â îòñóòñòâèå
âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà, äëÿ êà÷åñòâåííîé èäåíòèôè-
êàöèè êîìïîíåíòîâ, è ëèøü çàòåì — àíàëèç ñ âíóò-
ðåííèì ñòàíäàðòîì äëÿ êîëè÷åñòâåííîé îöåíêè.
 ìàññîâîì àíàëèçå íà ýòàíîë ýòî ñîçäàåò ñóùåñ-
òâåííûå òðóäíîñòè, òàê êàê óâåëè÷èâàåò âðåìåííûå,
òðóäîâûå è ìàòåðèàëüíûå çàòðàòû âäâîå ïðè òîì, ÷òî
èñêîìûé êîìïîíåíò (â íàøåì ñëó÷àå — ïðîïàíîë-1)
îáíàðóæèâàåòñÿ â áèîîáúåêòàõ ÷ðåçâû÷àéíî ðåäêî.
Îáðàçöû òðóïíîé êðîâè èíîãäà ñîäåðæàò íåáîëüøîå
êîëè÷åñòâî ïðîïàíîëà-1, ïîýòîìó îäíà èç íîâûõ ìå-
òîäèê [6] ïðåäóñìàòðèâàåò íåêîòîðîå ðàñøèðåíèå ïî-
ãðåøíîñòè ðåçóëüòàòîâ îïðåäåëåíèÿ ýòàíîëà â ñëó÷àå
ïðèñóòñòâèÿ íåáîëüøîãî ïèêà ïðîïàíîëà-1, îäíàêî
ýòî ïðèñóòñòâèå ñíà÷àëà òàêæå äîëæíî áûòü âûÿâëå-
íî â õîäå îòäåëüíîãî àíàëèçà.  îáùåì ñëó÷àå, åñëè
â ïðîáå âûÿâëåí ïðîïàíîë-1, êîëè÷åñòâåííûé àíàëèç
íà ýòàíîë è ëþáûå äðóãèå êîìïîíåíòû ñòàíîâèòñÿ íå-
âîçìîæíûì. Åñëè æå â ïðîáå ïðèñóòñòâóþò äâà âíóò-
ðåííèõ ñòàíäàðòà, è ñîîòíîøåíèå èõ ïëîùàäåé (âû-
ñîò) â îòñóòñòâèå áèîìàòåðèàëà èçâåñòíî, òî ïî íàðó-
øåíèþ ýòîãî ñîîòíîøåíèÿ â òó èëè äðóãóþ ñòîðîíó
ïðè àíàëèçå áèîîáúåêòà ìîæíî ñäåëàòü âûâîä î ïðè-
ñóòñòâèè â íåì òîãî èëè äðóãîãî êîìïîíåíòà.
Êîíöåíòðàöèè âíóòðåííèõ ñòàíäàðòîâ äîëæíû
áûòü òàêèìè, ÷òîáû îáåñïå÷èòü ïðèìåðíîå ðàâåíñòâî
ïëîùàäåé ñ ó÷åòîì ðàçíîé ÷óâñòâèòåëüíîñòè êîëîíîê
ê ýòèì êîìïîíåíòàì.  ýòîì ñëó÷àå ïåðåâåñ òîãî èëè
èíîãî êîìïîíåíòà ñðàçó ñòàíîâèòñÿ î÷åâèäíûì. Ñèòó-
àöèÿ ïðèñóòñòâèÿ îáîèõ êîìïîíåíòîâ (â íàøåì ñëó÷àå
— ïðîïàíîëà-1 è áóòàíîëà-2), ïðè÷åì èìåííî â òà-
êîé êîíöåíòðàöèè, êîòîðàÿ íå íàðóøàåò èñõîäíîå ñî-
îòíîøåíèå, ïðåäñòàâëÿåòñÿ íàì ñòðåìÿùåéñÿ ê íóëþ.
 ñëó÷àå îáíàðóæåíèÿ â ïðîáå êîìïîíåíòà, ÿâëÿ-
þùåãîñÿ âíóòðåííèì ñòàíäàðòîì, íåò íåîáõîäèìîñòè
ïîâòîðÿòü àíàëèç, äîñòàòî÷íî ïðèìåíèòü ðàñ÷åò êîí-
öåíòðàöèè ïðèñóòñòâóþùèõ êîìïîíåíòîâ, âêëþ÷àÿ
ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12
òîò, êîòîðûé èñïîëüçóåòñÿ â êà÷åñòâå îäíîãî èç âíóò-
ðåííèõ ñòàíäàðòîâ, ñ èñïîëüçîâàíèåì âòîðîãî âíóò-
ðåííåãî ñòàíäàðòà. Äâà âíóòðåííèõ ñòàíäàðòà ïðèìå-
íÿþòñÿ â íåêîòîðûõ ëàáîðàòîðèÿõ, ðàáîòàþùèõ
ñ òðóïíûì ìàòåðèàëîì çà ðóáåæîì, ïðàâäà, â ýòîì
ñëó÷àå â êà÷åñòâå âòîðîãî âíóòðåííåãî ñòàíäàðòà
èñïîëüçîâàëñÿ òðåò-áóòàíîë [16].
Ìåòðîëîãè÷åñêèå ýêñïåðèìåíòû âûïîëíåíû íàìè
â îáúåìå, äîñòàòî÷íîì, ñîãëàñíî ìåæäóíàðîäíûì
íîðìàì, äëÿ âàëèäàöèè ðóòèííûõ ìåòîäîâ èññëåäîâà-
íèÿ. Ìû ðåêîìåíäóåì åå ïðèìåíåíèå âî âñåõ ëàáîðà-
òîðèÿõ, îñíàùåííûõ àíàëîãè÷íûì îáîðóäîâàíèåì.
Ñïèñîê ëèòåðàòóðû
1. Àíóøêèíà Å.Ñ., Áàðèíñêàÿ Ò.Î., Øàåâ À.È., Ñàëîìàòèí
Å.Ì., Ìîðîçîâ Þ.Å., Ñìèðíîâ À.Â. Âëèÿíèå ñðîêîâ õðàíåíèÿ
êðîâè â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ íà èçìåíåíèå ñîäåðæàíèÿ â íåé
ýòèëîâîãî àëêîãîëÿ. Ìàòåðèàëû Âñåðîññèéñêîãî ñîâåùàíèÿ ñó-
äåáíî-ìåäèöèíñêèõ ýêñïåðòîâ ïî ïðèìåíåíèþ ïðàâèë è ìåäè-
öèíñêèõ êðèòåðèåâ îïðåäåëåíèÿ ñòåïåíè òÿæåñòè âðåäà, ïðè÷è-
íåííîãî çäîðîâüþ ÷åëîâåêà è èòîãîâîé íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêîé
êîíôåðåíöèè ÐÖÑÌÝ ïàìÿòè À.Ô.Ðóáöîâà. Ì., 2008.
Ñ. 212-217.
2. Áàðèíñêàÿ Ò.Î., Êèðè÷åê À.Â., Øàáàëèíà À.Ý., Ïåòó-
õîâ À.Å., Ñìèðíîâ À.Â. Ïîäòâåðæäåíèå ôàêòà èíòåðôåðåíöèè
ñåâîôëóðàíà è ýòàíîëà ïðè àíàëèçå êðîâè íà àëêîãîëü ïðÿìûì
ïàðîôàçíûì ìåòîäîì ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè ñ ïëàìåííî-èîíè-
çàöîííîé è ìàññ-ñåëåêòèâíîé äåòåêöèåé. Íàðêîëîãèÿ 2017; (6):
56-58.
3. Áàðèíñêàÿ Ò.Î., Ñìèðíîâ À.Â., Çåðåíèí À.Ã., Áóðöåâ À.À.,
Ñàëîìàòèí Å.Ì., Íèêèòèí Ï.Â., Ôàòêóäèíîâà Ø.Ð.
Àíòèàëêîãîëüíûé çàêîí äëÿ âîäèòåëåé è àíàëèç êðîâè. Íàðêî-
ëîãèÿ 2014; (8): 23-34.
4. ÃÎÑÒ Ð ÈÑÎ 5725 — 2002. Òî÷íîñòü (ïðàâèëüíîñòü è
ïðåöèçèîííîñòü) ìåòîäîâ è ðåçóëüòàòîâ èçìåðåíèé. Ýëåêòðîí-
íûé ôîíä ïðàâîâîé è íîðìàòèâíî-òåõíè÷åñêîé äîêóìåíòàöèè.
[Ýëåêòðîííûé ðåñóðñ]. Ðåæèì äîñòóïà: http://docs.cntd.ru/
document/1200029975 Äàòà îáðàùåíèÿ: 11.09.2017.
5. Ìåòîäèêà èçìåðåíèé ìàññîâîé êîíöåíòðàöèè ýòàíîëà â
êðîâè, ìî÷å è ñëþíå. Àòòåñòîâàíà ÔÃÓÏ «Âñåðîññèéñêèé Íà-
ó÷íî-Èññëåäîâàòåëüñêèé èíñòèòóò Ìåòðîëîãè÷åñêîé Ñëóæáû»,
ñâèäåòåëüñòâî îá àòòåñòàöèè ¹ 01.00225/205-42-12 îò
14.07.2012 ã., çàðåãèñòðèðîâàíà â Ôåäåðàëüíîì èíôîðìàöèîí-
íîì ôîíäå ïî îáåñïå÷åíèþ åäèíñòâà èçìåðåíèé ïîä íîìåðîì
ÔÐ.1.93.2012.12815. [Ýëåêòðîííûé ðåñóðñ]. Ðåæèì äîñòóïà:
http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:MwZM
OKUkZsIJ:www.sudmedugra.ru/index.php%3Foption%3Dcom_
docman%26task%3Ddoc_download%26gid%3D178%26Itemid
%3D6+&cd=1&hl=ru&ct=clnk&gl=ru Äàòà îáðàùåíèÿ:
11.09.2017.
6. Ìåòîäèêà èçìåðåíèé ñîäåðæàíèÿ íèçêîìîëåêóëÿðíûõ ñïèðòîâ
è àöåòîíà â îáðàçöàõ êðîâè è ìî÷è ìåòîäîì ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêîãî
àíàëèçà ðàâíîâåñíîé ïàðîâîé ôàçû ñ ïëàìåííî-èîíèçàöèîííûì äå-
òåêòîðîì. Àòòåñòîâàíà Âñåðîññèéñêèì íàó÷íî-èññëåäîâàòåëüñêèì èí-
ñòèòóòîì ìåòðîëîãèè èì. Ä.È. Ìåíäåëååâà, ñâèäåòåëüñòâî îá àòòåñ-
òàöèè ¹ 754/242-(01.00250)-2016 îò 30.05.2016 ã.,
ÔÐ.1.31.2016.24810. [Ýëåêòðîííûé ðåñóðñ]. Ðåæèì äîñòóïà:
http://ecaservice.ru/files/documents/9/b20cadf4d477ed77e567
ebc11aceef89.pdf Äàòà îáðàùåíèÿ: 11.09.2017.
7. Ìåòîäèêà êà÷åñòâåííîãî îáíàðóæåíèÿ è èçìåðåíèÿ êîíöåí-
òðàöèè ñïèðòîâ â êðîâè è ìî÷å ìåòîäîì ãàçîæèäêîñòíîé õðîìàòîãðà-
ôèè íà àïïàðàòíî-ïðîãðàììíîì êîìïëåêñå «Õðîìàòýê-Êðèñòàëë».
Ðàçðàáîòàíà ÇÀÎ Ñïåöèàëüíîå êîíñòðóêòîðñêîå áþðî «Õðîìàòýê»,
Éîøêàð-Îëà. Àòòåñòîâàíà Öåíòðîì ìåòðîëîãèè ì ñåðòèôèêàöèè
«Ñåðòèìåò» Óðàëüñêîãî îòäåëåíèÿ ÐÀÍ, ñâèäåòåëüñòâî îá àòòåñ-
55
ËÀÁÎÐÀÒÎÐÍÀß ÄÈÀÃÍÎÑÒÈÊÀ
òàöèè ¹ 88-16374-015-01.00076-2014 îò 19.03.2014 ã. [Ýëåê-
òðîííûé ðåñóðñ]. Ðåæèì äîñòóïà: http://www.chromatec.ru/
application/medicine_alcool/ Äàòà îáðàùåíèÿ: 11.09.2017.
8. Ìèõååâ À.Ñ., Òóìóðîâà Ë.Â., Ìàêñèìîâ À.À., Äîðæèåâà Ò.Â.
Ãàçîõðîìàòîãðàôè÷åñêîå îïðåäåëåíèå àëêîãîëÿ è åãî ñóððîãàòîâ
â êðîâè ñ èñïîëüçîâàíèåì ìåòîäà ñòàòè÷åñêîãî ïàðîôàçíîãî àíà-
ëèçà. Íàðêîëîãèÿ 2016; (4): 88-95.
9. Îáíàðóæåíèå è êîëè÷åñòâåííîå îïðåäåëåíèå ëåòó÷èõ òîê-
ñè÷íûõ âåùåñòâ è ãëèêîëåé â áèîëîãè÷åñêèõ îáúåêòàõ ìåòîäàìè
ãàçîâîé õðîìàòîãðàôèè è õðîìàòî-ìàññ-ñïåêòðîìåòðèè. Ïîñîáèå
äëÿ âðà÷åé ÊËÄ. ÌÌÀ èì. Ñå÷åíîâà. Ïîäãîòîâëåíî Ñ.À. Ñàâ-
÷óêîì è À.Í. Âåäåíèíûì ïîä ðóê. ïðîô. Á.Í. Èçîòîâà. Óòâåð-
æäåíî Ïðåäñåäàòåëåì Ñåêöèè ïî íàðêîëîãèè Ó÷åíîãî Ñîâåòà
ÌÇ ÐÔ Í.Í. Èâàíöîì 23.09.2003. Ì., 2003. 33 ñ. [Ýëåê-
òðîííûé ðåñóðñ]. Ðåæèì äîñòóïà: http://ecaservice.ru/files/
documents/9/b20cadf4d477ed77e567ebc11aceef89.pdf
Äàòà îáðàùåíèÿ: 11.09.2017.
10. Ïîíîìàðåâ Â.Ô. Îïðåäåëåíèå ýòèëîâîãî ñïèðòà â êðîâè
ìåòîäîì ãàçî-æèäêîñòíîé õðîìàòîãðàôèè. Ñá. òðóäîâ Ðåñïóáëè-
êàíñêîãî áþðî ñóäåáíî-ìåäèöèíñêîé ýêñïåðòèçû è êàôåäðû ñó-
äåáíîé ìåäèöèíû Òàäæèêñêîãî ãîñóäàðñòâåííîãî ìåäèöèíñêîãî
èíñòèòóòà èì. Àáó àëè Èáí-Ñèíî. Âûï. 9. Äóøàíáå, 1967.
Ñ. 57-69.
11. Clarke's Analysis of Drugs and Poisons in pharmaceuticals,
body fluids and postmortem material. Fourth edition. London,
Chicago: Pharmaceutical Press, 2011. 2473 p.
12. Drug Abuse Handbook. Ed. By Karch S.B. Second edition.
Boka Raton, London, New York: CRC Press, 2007. P. 350-354.
13. Forensic Issues in Alcohol Testing. Ed. By Karch S.B. Boka
Raton, London, New York: CRC Press, 2008. 142 p.
14. Kugelberg F.C., Jones A.W. Interpreting results of ethanol
analysis in postmortem specimens: A review of the literature.
Forensic Science International 2007; (165-1): 10-29.
15. Monteiro C., Proenca P., Tavares C., Real F.C.
Interference of anesthetics in blood alcohol analysis by HS-GC-FID:
a case report. Forensic Science International 2016; (265): 65-69.
16. Peters F.T., Drummer O.H., Musshoff F. Validtion of new
methods. Forensic Science International 2007; (165): 216-224.
References
1. Anushkina E.S., Barinskaja T.O., Shaev A.I., Salomatin
E.M., Morozov Ju.E., Smirnov A.V. Vlijanie srokov hranenija krovi
v standartnyh uslovijah na izmenenie soderzhanija v nej jetilovogo
alkogolja. Materialy Vserossijskogo soveshhanija
sudebno-medicinskih jekspertov po primeneniju pravil i medicinskih
kriteriev opredelenija stepeni tjazhesti vreda, prichinennogo zdorov'ju
cheloveka i itogovoj nauchno-prakticheskoj konferencii RCSMJe
pamjati A.F.Rubcova. M., 2008. P. 212-217. (In Russ.)
2. Barinskaya T.O., Kirichek A.V., Shabalina A.E.,
Petukhov A.E., Smirnov A.V. Podtverzhdenie fakta interferentsii
sevoflurana i etanola pri analize krovi na alkogol' pryamym
parofaznym metodom gazovoy khromatografii s Forensic Science International 2007; (165-1): 10-29.
plamenno-ionizatsonnoy i mass-selektivnoy detektsiey [Confirmation
of the fact of Sevoflurane/ethanol interference in blood alcohol
analysis by headspace gas chromatography with flame-ionization and
mass-selective detectors]. Narkologiya [Narcology] 2017; (6):
56-58. (In Russ.)
56
3. Barinskaya T.O., Smirnov A.V., Zerenin A.G., Burtsev A.A.,
Salomatin E.M., Nikitin P.V., Fatkudinova Sh.R. Antialkogol'nyy
zakon dlya voditeley i analiz krovi. [Antialcoholic Law for drivers and
blood analysis]. Narkologiya [Narcology] 2014; (8): 23-34.
(In Russ.)
4. GOST R ISO 5725-2002. Accuracy (trueness and
precision) of measurement methods and results. Available at:
http://docs.cntd.ru/document/1200029975 Accessed: 11.09.2017.
(In Russ.)
5. Methods for measuring the mass concentration of ethanol in blood,
urine and saliva. Available at: http://webcache.googleusercontent.com/
search?q=cache:MwZMOKUkZsIJ:www.sudmedugra.ru/index.ph
p%3Foption%3Dcom_docman%26task%3Ddoc_download%26g
id%3D178%26Itemid%3D6+&cd=1&hl=ru&ct=clnk&gl=ru
Accessed: 11.09.2017. (In Russ.)
6. A method for measuring the content of low molecular weight
alcohols and acetone in blood and urine samples by gas
chromatographic analysis of the equilibrium vapor phase with a flame
ionization detector. Moscow: D.I. Mendeleyev Institute for
Metrology. Available at: http://eca service.ru/files/documents/9/
b20cadf4d477ed77e567ebc11aceef89.pdf Accessed: 11.09.2017.
(In Russ.)
7. The method of qualitative detection and measurement of the
concentration of alcohols in blood and urine by gas-liquid
chromatography on the hardware-software complex
«Chromatec-Crystal». Available at: http://www.chromatec.ru/
application/medicine_alcool/ Accessed: 11.09.2017. (In Russ.)
8. Mikheev A.S., Tumurova L.V., Maksimov A.A., Dorzhieva T.V.
Gazokhromatograficheskoe opredelenie alkogolya i ego surrogatov v
krovi s ispol'zovaniem metoda staticheskogo parofaznogo analiza.
[Gas chromatography detection of alcohol and its byproducts in
blood using the method static headspace]. Narkologiya [Narcology]
2016; (4): 88-95. (In Russ.)
9. Detection and quantification of volatile toxic substances and
glycols in biological objects by gas chromatography and
chromatography-mass spectrometry. Manual for Clinical Diagnostic
Physiciansþ Moscow, 2003. 33 p. Available at:
http://ecaservice.ru/files/documents/9/b20cadf4d477ed77e567e
bc11aceef89.pdf Accessed: 11.09.2017. (In Russ.)
10. Ponomarev V.F. Determination of ethyl alcohol in blood by
gas-liquid chromatography. Dushanbe, 1967. P. 57-69. (In Russ.)
11. Clarke's Analysis of Drugs and Poisons in pharmaceuticals,
body fluids and postmortem material. Fourth edition. London,
Chicago: Pharmaceutical Press, 2011. 2473 p.
12. Drug Abuse Handbook. Ed. By Karch S.B. Second edition.
Boka Raton, London, New York: CRC Press, 2007. P. 350-354.
13. Forensic Issues in Alcohol Testing. Ed. By Karch S.B. Boka
Raton, London, New York: CRC Press, 2008. 142 p.
14. Kugelberg F.C., Jones A.W. Interpreting results of ethanol
analysis in postmortem specimens: A review of the literature.
15. Monteiro C., Proenca P., Tavares C., Real F.C.
Interference of anesthetics in blood alcohol analysis by HS-GC-FID:
a case report. Forensic Science International 2016; (265): 65-69.
16. Peters F.T., Drummer O.H., Musshoff F. Validtion of new
methods. Forensic Science International 2007; (165): 216-224.
ISSN 1682-8313 ÍÀÐÊÎËÎÃÈß. 2017. ¹12

DIRECT VAPOR-PHASE METHOD FOR THE DETERMINATION OF ETHANOL IN LIQUID MEDIA:

VALIDATION MATERIALS
Barinskaya T.O.1, Yukhtenko E.V.1, Andriyako T.B.1, Smirnov A.V.1, Vikhrova S.V.1, Fatkudinova Sh.R.2
1 — Moscow Research and Practical Center for Narcology
Moscow, Russia
2 — Russian Research Institute for Metrological Service
Moscow, Russia

Corresponding author: Barinskaya Tatyana; e-mail: barto1605@yahoo.com

Funding. The study had no sponsorship.
Conflict of interest. The author declare no conflict of interests.
Received: 09.09.2017.

Together with alkyl nitrite GLC method of ethanol determination, certified in 2010-2012, gas chromatography method based on the direct vapor-phase
extraction of the analyte, widely used in the West, spread in Russia recently. The validation data of a new method is shown in this paper. It differs from
previous two validated methods, first, because the analysis takes place in two columns simultaneously that increases its specificity, allowing
to differentiate components that may interfere in one of columns, second, using of two internal standards simultaneously (propanol-1 and butanol-2)
that allows quantitative analysis in the presence of any standard. Metrologic characteristics of the determination of some concomitant components,
such as acetone, methanol, propanol-2 and propanol-1 were validated too. Sufficient validation was carried out for routine methods of investigation
and it is recommended for all labs supplied with analogous equipment.
Keywords: acetone, methanol, propanol, headspace gas chromatography, repeatability, precision, bias, accuracy.

57