Открыть Электронные книги
Категории
Открыть Аудиокниги
Категории
Открыть Журналы
Категории
Открыть Документы
Категории
Билет № 4
Билет № 5
Билет №6
Билет №7
1. Спорообразование у бактерий. Биологическое значение спор.
Особенности структуры спор, методы окраски.
Билет № 8
Билет № 9
1. Открытие вирусов Д.И.Ивановским. Природа вирусов. Морфология и
репродукция вирусов.
Вирусы-это автономные генетические структуры, способные функционировать и
репродуцироваться в восприимчивых к ним клетках, используя их генетический и
белоксинтезирующий аппарат. Основоположник вирусологии-Дмитрий Иосифович
Ивановский(19-20век).(мазаичная болезнь табака, которая наносила экономический
ущерб табакопроизводству. Пропуская через бактериальные фильтры сок из пораженных
листьев он установил, что данную болезнь вызывают микроорганизмы.) Гипотезы
происхождения виросув: вирусы-потомки доклеточных форм жизни; вирусы-результат
регрессивной эволюции одноклеточных организмов; вирусы-произошли от определенных
генов, которые приобрели способность покидать клетку, но сохранили способность легко
в нее возвращаться. Морфология:вирус, находящийся внутри клетки называется
вирионом, основной компонент которого капсид-белковая оболочка, содержащая внутри
нуклеиновую кислоту. Капсиды построены из белковых субъединиц(капсомеров). Многие
вирусы имеют суперкапсид(дополнительную оболочку). По типу строения вирионов
выделяют: спиральны тип симметрии(вирусы гриппа); квазисферический; смешанный(у Т-
четных бактериофагов). Репродукция:ранняя(1.адсорбция вириона на чувствительные
клетки, 2.проникновение в клетку,3.раздевание вириона) и поздняя фазы.
Билет № 10
Билет 11
1. Этиология ВИЧ-инфекции. Свойства вирусов иммунодефицита
человека. Особенности эпидемиологии, диагностики и профилактики ВИЧ-
инфекции.
ВИЧ относится к семейству Retroviridae ,РНК-содержащих вирусов.обладает ферментом
ревертазой(обратной транскриптазой),необходимой для синтеза ДНК на матрице
вирусной РНК. После этого ДНК встраивается в геном клетки-хозяина.ВИЧ является Т-
лимфотропным,семейства Lentivirinae .Известны 2 типа ВИЧ:ВИЧ-1 и ВИЧ-2.ВИЧ открыл
французский вирусолог Л.Монтенье из лимфоузла гомосексуалиста.Вирус представляет
собой ядро,в котором двойная вирусная РНК,ревертаза.интеграза и протеаза.Ядро
окружено двумя оболочками-наружной и внутренней.Наружная оболочка включает белки:
gp 160, gp 120, gp 41.Вн.оболочка р17,р24,р55. Методы лабораторной
диагностики:вирусологические , серологические,иммунологические и молекулярно-
генетические. Серологический,Для выявления антител к ВИЧ используют ИФА.антитела
появляются не сразу а ч-з 2-3 месяца после заражения.если результат «+ « анализ в
лаборатории должен проводиться дважды с той же сывороткой и при повторном
получение положительного результата сыворотка направляется для постановки
подтверждающего теста. Для подтверждения специфического результата используют
метод иммуноблотинга(экспертный метод) который выявляет антитела к белкам
вируса.При обнаружении антител к одному из гликопротеинов gp 160, gp 120, gp 41
говорят о положительном результате иммуноблотинга. Молекулярно-генетические методы
диагностики ВИЧ.Полимеразно цепная реакция(ПЦР)-это качественное определение
провирусной ДНК ВИЧ в клетках крови и количественное определение РНК ВИЧ в плазме
крови.для лечения ВИЧ инфекции предложено огромное количество пепаратов-
ингибиторы обратной трансрипции(ставудин),препараты,взаимодействующие с
регуляторными белками ВИЧ,ингибиторы протеаз и т.д.
2. Микробиология газовой гангрены. Морфология, тинкториальные,
культуральные и биохимические свойства возбудителей. Схема лабораторной
диагностики. Специфическая профилактика.
Отличительные особенности бактерий возбудителя газовой гангрены — строго
положительная окраска по Грому и отсутствие подвижности. In vivo образуют капсулы
(единственный капсулообразуюший вид среди патогенных клостридии)
. Бактерии возбудителя газовой гангрены хорошо окрашиваются анилиновыми
красителями; в старых культурах могут быть грамотрицательными. Споры крупные,
овальные, расположены центрально (у С. perfringens типа А — также субтерминально).
Термоустойчивость спор сероваров В и D возбудителя газовой гангрены относительно
невысока (погибают при кипячении в течение 15-30 мин), споры типов А и С более
устойчивы и выживают при кипячении и даже автоклавировании в течение 1-6 ч.
Спорообразование обычно происходит в почве и кишечнике организма-хозяина.
Культуральные свойства клостридий ( возбудителя газовой гангрены ) По сравнению с
другими клостридиями clostridium perfringens типа А относительно толерантна к
кратковременным кислородным воздействиям и способна расти в высоких столбиках сред
без герметизации вазелиновым маслом. На плотных средах бактерии возбудителя газовой
гангрены образуют S- и R-колонии. S-колонии круглые, сочные, куполообразные, с
гладкими ровными краями. Сначала они прозрачные, позднее становятся мутными,
серовато-белыми. R-колонии неправильной формы, бугристые, с неровными
шероховатыми краями; в глубине агара напоминают комочки ваты. На агаре Цейсслера
через 12-18 ч образуют гладкие сероватые колонии с ровными краями и плотным
возвышением в центре. Колонии окружены зоной гемолиза; гемолиз может быть полным
либо частичным.
Характерное свойство колоний clostridium perfringens типа А, служащее
дифференцирующим признаком, — способность менять серовато-белый цвет на
зеленовато-оливковый после кратковременного пребывания в аэробных условиях. На
желточном агаре бактерии возбудителя газовой гангрены образуют колонии, окружённые
зоной перламутрового преципитата (фосфорилхолин), образующегося из лецитина
куриного желтка под действием лецитиназы (рис. 10, см. цветную вклейку). Рост в жидких
и полужидких средах. Культуры С. perfnngens типа А имеют характерный запах масляной
кислоты. Оптимум рН 7,2-7,4, ко могут расти в интервале 5,0-8,5. На средах, содержащих
глюкозу, рост происходит очень бурно с образованием Н, и СО,, и заканчивается через 8-
12 ч. Первые признаки роста на среде Китта-Тароцци могут проявляться уже через 1—2 ч
(особенно при 43 °С) и проявляются помутнением и появлением пузырьков газа из-под
кусочков печени при встряхивании.
Газовая гангрена(ГГ). возбудителей ГГ по степени патогенности делят на три группы: 1)
наиболее патогенные,каждый из которых отдельно может вызвать ГГ( C . perfingens , C .
novyi , C . septicum ) 2) каждый способен вызывать ГГ.но чаще они встречаются в
ассоциации с другими анаэробами(С. bifermentans , C . sporogenes , C . fallax ) 3)
маловирулентные клостридии не способны вызывать ГГ,но ухудшают течение( C . tertium ,
C . butiricum , sordelii ) C . perfingens (А,В,С,Д) в жидких питательных средах(казеин)растет
быстро с газообразованием и изменением pH в кислую сторону. C . perfingens -гладк ий( S
),шероховатый( R ) и слизистый( M ). C . septicum грам+,анаэроб. C . fallax -то же самое. В
развитии ГГ играет важную роль лецитиназа атоксин он вызывает некроз
ткани.гемолитические изменения.
Диагностика :исследованию подлежат раневое отделяемое,кусочки пораженной
ткани,шовный материал и т.д.Кровь берут из локтевой вены и засевают «в постели
больного» в питательную среду. ЭТАПЫ: 1)первый проводят микроскопию,на
лаб.животных биолюпробы и посев на питательные среды.Окраска поГрамму. 2)второй
получение изолированных колоний анаэробов.На анаэробном кровяном агаре вырастают
в виде шероховатых крупных колоний имеющие зону гемолиза. 3)третий посеваем на
среды пестрого ряда.включающего глюкозу,галактозу ит.д. окончательно выявляем
экзотоксин,и его инактивация антитоксином на лабороторных животных.для этого
используют сыворотки.
Профилактика : 1.хирургическое иссечение всех нежизнеспособных тканей
2.Сразу после выявления гангрены, необходима интенсивная инфузионная терапия с
введением альбумина, плазмы, растворов электролитов и белков. Больным анемией
проводится переливание свежеприготовленной одногруппной цельной крови или
эритроцитарной массы. Одновременно внутривенно или внутриартериально начинают
вводить высокие дозы антибиотиков.
Билет 13.
1. Микробиология хламидиозов. Классификация, тинкториальные,
культуральные и морфологические свойства. Микробиологическая
диагностика орнитоза и урогенитальных хламидиозов.
Билет № 14
1. Взаимодействие вируса с восприимчивой клеткой. Особенности
противовирусного иммунитета. Интерфероны. Принципы химиотерапии
вирусных инфекций.
Процесс взаимодействия вирусов с чувствительной клеткой называется
репродукцией. Выделяют раннюю позднюю ее фазы. Ранняя фаза включает:1)адсорбцию
вириона на чувствительной клетке 2)проникновение в клетку (пенетрация) 3)раздевание
вириона.
В развитии вирусных инфекций возможны три варианта иммунного ответа: 1)
«вирус свободен» (в этом случае в первую очередь работают неспецифические факторы.
Интерферон вызывает образование протективных белков и в клетке вирус не может
размножаться. Основными противоинфекционными факторами в этой ситуации являются
«нормальные» антитела, комплемент, NK-клетки, фагоцитоз) 2) «вирус сидит на
мембране клетки»(в этом случае основными факторами противоинфекционной защиты
будутNK-клетки, К-клетки, нормальные антитела, комплемент, фагоцитоз.если произошел
иммунный ответ, то присоединяются Т-киллеры) 3) «вирус в клетке»(эффективны те же
факторы, что и при втором, но к ним присоединяются специфические антитела).
Интерфероны- система гликопротеидов, которая обладает антивирусной
активностью. Различают три класса человеческого интерферона: 1)альфа-интерферон,
который продуцируется лейкоцитами, известно 14 субтипов, 2) бета-интерферон,
продуцируется фибробластами, известно 5 субтипов 3)гамма-интерферон, продуцируется
лимфоцитами, ЕК-известен 1 субтип.
.При химиотерапевтическом лечении взаимодействуют три фактора: макроорганизм ,
микроорганизм и лекарство. Ряд химиотерапевтических средств избирательно
(селективно) взаимодействуют с микроорганизмом, замедляют его развитие,
останавливают рост и тем самым обладают избирательной токсичностью. Воздействуя на
среду обитания микроорганизма, химиотерапевтические средства вступают во
взаимодействие с токсинами микроорганизмов или продуктами их жизнедеятельности,
оказывая, таким образом, бактериостатическое действие. Ряд химиотерапевтических
средств оказывает прямое действие на микроорганизмы, прекращает их
жизнедеятельность и тем самым оказывают бактерицидный эффект. Таким образом,
химиотерапевтические средства относят к этиотропным средствам, что и предопределяет
требования к их назначению. Назначение химиотерапевтических препаратов носит
эмпирический характер и направлено против вероятных возбудителей.Необходимо
учитывать локализацию инфекционного процесса, симптомы заболеваний, особенности
больного и данные лабораторных исследований.
Билет № 15
Билет №17
1. Микробиология стрептококковой инфекции. Морфология,
тинкториальные, культуральные и биохимические свойства стрептококков.
Антигенная структура. Схема лабораторной диагностики.
Т.Бильрот в 1874 впервые описал при рожистом воспалении стрептококков. Название
происходит от греч стрептос-цепочка. Род Streptococcus включает в себя 29 видов
вызывают поражения дых путей лор органов ССС гнойно-воспалительные заболевания
кожи и подкожной клетчатке ЦНС детские инфекции сепсис. Наибольшее значение в
этиологии стрептококковой инфекции имеют пиогенные стрептококки, стрептококки
группы В,бета-гемолитические стрептококки группы Си G , и пневмококки.Бета-
гемолитические стрептококки группы А способны вызывать у человека тяжелые
постстрептококковые осложнения.
Морф: грам+ сферические или слегка вытянутые распологающиеся парами и цепочками
различной длины
Культуральные+ биохим. Св-ва: Факультативные
анаэробы,каталазоотрицательные.Растут на питательных средах с добавлением
крови,сыворотки,углеводов. При росте,обоазуют мелкие сероватые/бесцветные колонии.
Альфа-гемолитический- частичный гемолиз+ позеленение среды вокруг колоний) , Бэта-
гемолитический(полный гемолиз) и гамма-гемолитические-не изменяют кровяной агар.
Билет №18
1. Вакцины. Определение. Классификация. Практическое применение.
Вакцины (Vaccines) - препараты, предназначенные для создания активного иммунитета в
организме привитых людей или животных. Основным действующим началом каждой
вакцины является иммуноген, т. е. корпускулярная или растворенная субстанция,
несущая на себе химические структуры, аналогичные компонентам возбудителя
заболевания, ответственным за выработку иммунитета.
В зависимости от природы иммуногена вакцины подразделяются на:
-цельномикробные или цельновирионные, состоящие из микроорганизмов, соответственно
бактерий или вирусов, сохраняющих в процессе изготовления свою целостность;
-химические вакцины из продуктов жизнедеятельности микроорганизма (классический
пример - анатоксины) или его интегральных компонентов, т.н. субмикробные или
субвирионные вакцины;
-генно-инженерные вакцины, содержащие продукты экспрессии отдельных генов
микроорганизма, наработанные в специальных клеточных системах;
-химерные, или векторные вакцины, в которых ген, контролирующий синтез
протективного белка, встроен в безвредный микроорганизм в расчете на то, что синтез
этого белка будет происходить в организме привитого и, наконец,
-синтетические вакцины, где в качестве иммуногена используется химический аналог
протективного белка, полученный методом прямого химического синтеза.
В свою очередь среди цельномикробных (цельновирионных) вакцин выделяют
инактивированные, или убитые, и живые аттенуированные. У первых возможность
проявления патогенных свойств микроорганизма надежно устраняется за счет
химической, термальной или иной обработки микробной (вирусной) взвеси, другими
словами, умерщвления возбудителя болезни при сохранении его иммунизирующей
активности; у вторых - за счет глубоких и стабильных изменений в геноме
микроорганизма, исключающих вероятность возвращения к вирулентному фенотипу, т.е.
реверсии. Эффективность живых вакцин определяется в конечном счете способностью
аттенуированного микроорганизма размножаться в организме привитого, воспроизводя
иммунологически активные компоненты непосредственно в его тканях. При
использовании убитых вакцин иммунизирующий эффект зависит от количества
иммуногена, вводимого в составе препарата, поэтому с целью создания более
полноценных иммуногенных стимулов приходится прибегать к концентрации и очистке
микробных клеток или вирусных частиц. Иммунизирующую способность
инактивированных и всех других нереплицирующихся вакцин удается повысить путем
сорбции иммуногена на крупномолекулярных химически инертных полимерах, добавления
адъювантов, т. е. веществ, стимулирующих иммунные реакции организма, а также
заключения иммуногена в мельчайшие капсулы, которые медленно рассасываются,
способствуя депонированию вакцины в месте введения и пролонгированию, тем самым,
действия иммуногенных стимулов.
Компоненты вакцин
Как известно, основу каждой вакцины составляют протективные антигены,
представляющие собой лишь небольшую часть бактериальной клетки или вируса и
обеспечивающие развитие специфического иммунного ответа. Протективные антигены
могут являться белками, гликопротеидами, липополисахаридобелковыми комплексами.
Они могут быть связаны с микробными клетками (коклюшная палочка, стрептококки и
др.), секретироваться ими (бактериальные токсины), а у вирусов располагаются
преимущественно в поверхностных слоях суперкапсида вириона.
В состав вакцины, кроме основного действующего начала, могут входить и другие
компоненты - сорбент, консервант, наполнитель, стабилизатор и неспецифические
примеси. К последним могут быть отнесены белки субстрата культивирования вирусных
вакцин, следовое* количество антибиотика и белка сыворотки животных, используемых в
ряде случаев при культивировании клеточных культур.
(* - следовым называется количество вещества, неопределяемое современными
методиками). Консерванты входят в состав вакцин, производимых во всем мире. Их
назначение состоит в обеспечении стерильности препаратов в тех случаях, когда
возникают условия для бактериальной контаминации (появление микротрещин при
транспортировке, хранение вскрытой первичной многодозной упаковки). Указание о
необходимости наличия консервантов содержится в рекомендациях ВОЗ. Что касается
веществ, используемых в качестве стабилизаторов и наполнителей, то в производстве
вакцин используются те из них, которые допущены для введения в организм человека.
Прививки необходимо начинать как можно раньше после укуса и проводить согласно
существующей инструкции. Иммунитет, возникающий после прививки, сохраняется до 6
мес. Людям при появлении признаков заболевания прививки не делают. При тяжелых
укусах в области головы, шеи одновременно с антирабической вакциной вводят гамма-
глобулин или антирабическую сыворотку. За подозрительными животными ведут
наблюдение в течение 7 дней и, если признаков заболевания не наблюдается, их считают
здоровыми.
Билет № 20
Билет 23
1. Понятие о чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Методы
отпределения чувстыительности бактерий к антибиотикам. Значения для
практической медицины.
Для определения чувствительности бактерий к антибиотикам (антибиотикограммы)
обычно применяют: 1)Метод диффузии в агар. На агаризованную питательную среду
засевают исследуемый микроб, а затем вносят антибиотики. Обычно препараты вносят
или в специальные лунки в агаре, или на поверхности посева раскладывают диски с
антибиотиками («метод дисков»). Учет результатов проводят через сутки по наличию или
отсутствию роста микробов вокруг лунок (дисков). Метод дисков — качественный и
позволяет оценить, чувствителен или устойчив микроб к препарату.
2) Методы определения минимальных ингибирующих и бактерицидных концентраций, т.
е. минимального уровня антибиотика, который позволяет in vitro пре дотвратить видимый
рост микробов в питательной среде или полностью ее стерилизует. Это количественные
методы, которые позволяют рассчитать дозу препарата, так как концентрация
антибиотика в крови должна быть значительно выше минимальной ингибирующей
концентрации для возбудителя инфекции. Введение адекватных доз препарата
необходимо для эффективного лечения и профилактики формирования устойчивых
микробов. Есть ускоренные способы, с применением автоматических анализаторов.
Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков. Исследуемую
бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в чашке
Петри. Среда АГВ: сухой питательный рыбный бульон, агар-агар, натрий фосфат
двузамещенный. На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом
расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных
антибиотиков. Посевы инкубируют при 37 °С до следующего дня. По диаметру зон
задержки роста исследуемой культуры бактерий судят о ее чувствительности к
антибиотикам. Для получения достоверных результатов необходимо применять
стандартные диски и питательные среды, для контроля которых используются эталонные
штаммы соответствующих микроорганизмов. Метод дисков не дает надежных данных при
определении чувствительности микроорганизмов к плохо диффундирующим в агар
полипептидным антибиотикам (например, полимиксин, ристомицин).
Билет 24
Понятие об антибиотиках. Классификация антибиотиков. Механизмы
антимикробного действия.
Антибиотики — химиотерапевтические препараты из химических соединений
биологического происхождения, а также их полусинтетические производные и
синтетические аналоги, которые в низких концентрациях оказывают избирательное
повреждающее или губительное действие на микроорганизмы.
В настоящее время существуют различные классификации антибиотиков, однако ни одна
из них не является общепринятой. В основу главной классификации антибиотиков
положено их химическое строение. Наиболее важными классами синтетических
антибиотиков являются хинолоны и фторхинолоны (например, ципрофлоксацин),
сульфаниламиды (сульфадиметоксин), имидазолы (метронидазол), нитрофураны
(фурадонин, фурагин).
По спектру действия антибиотики делят на пять групп в зависимости от того, на какие
микроорганизмы они оказывают воздействие. Каждая из этих групп включает две
подгруппы: антибиотики широкого и узкого спектра действия. Антибактериальные
антибиотики составляют самую многочисленную группу препаратов. Преобладают в ней
антибиотики широкого спектра действия, оказывающие влияние на представителей всех
трех отделов бактерий. К антибиотикам широкого спектра действия относятся
аминогликозиды, тетрациклины и др. Антибиотики узкого спектра действия эффективны в
отношении небольшого круга бактерий, например ванкомицин влияет на
грамположительные бактерии. В отдельные группы выделяют противотуберкулезные,
противолепрозные, противосифилитические препараты. Противогрибковые антибиотики
включают значительно меньшее число препаратов. Широким спектром действия об-
ладает, например, амфотерицин В, эффективный при кандидозах, бластомикозах,
аспергиллезах; в то же время нистатин, действующий на грибы рода Candida , является
антибиотиком узкого спектра действия.
Антипротозойные и антивирусные антибиотики насчитывают небольшое число
препаратов. Противоопухолевые антибиотики представлены препаратами, обладающими
цитотоксическим действием. Большинство из них применяют при многих видах опухолей,
например митомицин С. Действие антибиотиков на микроорганизмы связано с их
способностью подавлять те или иные биохимические реакции, происходящие в микробной
клетке.
В зависимости от механизма действия различают пять групп антибиотиков: 1.
антибиотики, нарушающие синтез клеточной стенки. К этой группе относятся, например,
В-лактамы. Препараты этой группы характеризуются самой высокой избирательностью
действия: они убивают бактерии и не оказывают влияния на клетки микроорганизма, так
как последние не имеют главного компонента клеточной стенки бактерий —
пептидогликана. В связи с этим В-лактамные антибиотики являются наименее токсичными
для макроорганизма;
2. антибиотики, нарушающие молекулярную организацию и синтез клеточных мембран.
Примерами подобных препаратов являются полимиксины, полиены;
3. антибиотики, нарушающие синтез белка; это наиболее многочисленная группа
препаратов. Представителями этой группы являются аминогликозиды, тетрациклины,
макроли-ды, левомицетин, вызывающие нарушение синтеза белка на разных уровнях;
4. антибиотики — ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот. Например, хинолоны
нарушают синтез ДНК, рифампицин — синтез РНК;
5. антибиотики, подавляющие синтез пуринов и аминокислот. К этой группе относятся,
например, сульфаниламиды.
Источники антибиотиков. Основными продуцентами природных антибиотиков
являются микроорганизмы, которые, находясь в своей естественной среде (в основном, в
почве), синтезируют антибиотики в качестве средства выживания в борьбе за
существование. Животные и растительные клетки также могут вырабатывать некоторые
вещества с селективным антимикробным действием (например, фитонциды), однако
широкого применения в медицине в качестве продуцентов антибиотиков они не получили.
Таким образом, основными источниками получения природных и полусинтетических
антибиотиков стали: Актиномицеты (особенно стрептомицеты) — ветвящиеся бактерии.
Они синтезируют большинство природных антибиотиков (80 %). Плесневые грибы—
синтезируют природные бета-лактамы (грибы рода Cephalosporium и Penicillium ) H
фузидиевую кислоту. Типичные бактерии— например, эубактерии, бациллы,
псевдомонады — продуцируют бацитрацин, полимиксины и другие вещества, обладающие
антибактериальным действием.
Микробиология возвратных тифов. Морфология, тинкториальные и
культуральные свойства возбудителей. Патогенность для животных. Схема
лабораторной диагностики.
Спирохеты рода Borrelia вызывают антропонозные (возвратный тиф), зоонозные
(болезни Лайма) инфекционные болезни с трансмиссивным механизмом передачи
возбудителей (клещ. Морфологические свойства: тонкие спирохеты с крупными
завитками. Двигательный аппарат представлен фибриллами. Они хорошо воспринимают
анилиновые красители, по Романовскому—Гимзе окрашиваются в сине-фиолетовый цвет.
Боррелии обладают генетическим аппаратом, который состоит из небольших размеров
линейной хромосомы и набора циркулярных и линейных плазмид. Культуральные
свойства : культивируются на сложных питательных средах, содержащих сыворотку,
тканевые экстракты, а также в куриных эмбрионах. Чувствительны к высыханию и
нагреванию. Устойчивы к низким t -рам.
Возвратные тифы- группа инфекционных заболеваний, вызываемых боррелиями,
характеризующихся острым началом, приступообразной лихорадкой, общей
интоксикацией. Возбудителем эпидемического возвратного тифа является В. recurrentis .
Эпидемический возвратный тиф - антропоноз. Специфические переносчики - платяная,
головная вши. Человек заражается возвратным тифом при втирании гемолимфы раздав-
ленных вшей в кожу при расчесывания места укуса. Эндемический возвратный тиф —
зооноз. Возбудители - В. duttoni и В. persica . Резервуар - грызуны, клещи. Человек
заражается через укусы клещей. Патогенез: Попав во внутреннюю среду организма,
боррелии внедряются в клетки лимфоидно-макрофагальной системы, где размножаются и
поступают в кровь, вызывая лихорадку, головную боль, озноб. Взаимодействуя с АТ,
боррелии образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая закупорку
капилляров, следствием чего является нарушение кровообращения в органах.
Иммунитет : к эпидемическому возвратному тифу гуморальный, непродолжительный.
Микробиологическая диагностика. Бактериоскопический метод — обнаружение
возбудителя в крови, окрашенной по Романовскому—Гимзе. Биопробу ставят для
дифференциации В. recurrentis от возбудителей эндемического возвратного тифа. В
качестве вспомогательного используют серологический метод с постановкой РСК.
Лечение: антибиотики тетрациклинового ряда, левомицетин, ампициллин. Профилактика.
Неспецифическая.
Болезнь Лайма - возбудитель В. burgdorferi . Хроническая инфекция с поражением
кожи, сердечной и нервной систем, суставов. Морфология и культуральные свойства
:типичные боррелии. Антигенная структура: Сложная. Белковые антигены
фибриллярного аппарата и цитоплазматического цилиндра, антитела к которым
появляются на ранних этапах инфекции. Протективную активность имеют антигены,
представленные липидмодифицированными интегральными белками наружной мембраны
А, В, С, D , E , F . Факторы патогенности. Липидмодифицированные белки наружной
мембраны обеспечивают способность боррелий прикрепляться и проникать в клетки
хозяина. В результат Патогенез: На месте укуса клеща образуется красная папула.
Возбудитель распространяется из места укуса через окружающую кожу с последующей
диссеминацией с током крови к различным органам, особенно сердцу, ЦНС, суставам.
Клиника подразделяется на 3 стадии: 1.Мигрирующая эритема, которая
сопровождается развитием гриппоподобного симптомокомплекса. 2.Развитие
доброкачественных поражений сердца и ЦНС 3.Развитие артритов крупных суставов
Иммунитет. Гуморальный, видоспецифический к антигенам клеточной стенки.
Микробиологическая диагностика. Используются бактериоскопический,
серологический методы и ПЦР в зависимости от стадии заболевания. Материалом для
исследования служат биоптаты кожи, синовиальная жидкость суставов, ликвор, сыворотка
крови. На 1-й стадии заболевания проводится бактериологическое исследование
биоптатов кожи из эритемы. Начиная со 2-й стадии заболевания осуществляется
серологическое исследование определением IgM или нарастания титра IgG ИФА или РИФ.
ПЦР используется для определения наличия боррелий в ликворе, суставной жидкости.
Лечение: антибиотики тетрациклинового ряда. Профилактика. Неспецифическая.
Микробиология пищевых токсикоинфекций. Возможные возбудители.
Особенности их биологии, важные для профилактики пищевых
токсикоинфекций. Схема лабораторной диагностики.
Токсикоинфекции-острые заболевания,возникающие при употреблении в пищу
продуктов, содержащих массивное количество живых клеток и их токсинов, выделенных
при гибели микроорганизмов.
По эпидемическим показаниям продукты исследуют на наличие патогенных и условно
патогенных микроорганизмов – возбудителей пищевых отравлений. Обнаружение
санитарно – показательных бактерий в продуктах питания – кишечной палочки, БГКП,
энтерококка, золотистого стафилококка, клостридий. Обнаружение сальмонелл – при
исследовании продуктов из мяса. Отсутствие характерной молочнокислой микрофлоры на
молочных продуктах и наличие посторонней микрофлоры (плесневые грибы, дрожжи) –
неудовлетворительное качество. Консервированные продукты питания не должны
содержать кишечную палочку, протей и патогенные микробы.
При исследовании предусмотрено: обнаружение аэробных, анаэробных микроорганизмов,
ботулинических экзотоксинов. 1. Общее микробное число (обсеменение). Определяют
факультативные анаэробные макроорганизмы, выросшие в виде колоний на плотной
питательной среде после инкубации при 37С в теч. 24 ч.
2. Обнаружение санитарно-показательных бактерийв продуктах питания — кишечной
палочки, БГКП, энтерококка, золотистого стафилококка, бактерий группы протея,
клостридий.
3. Обнаружение сальмонелл - при исследовании продуктов из мяса. По
эпидемиологическим показаниям продукты исследуют на наличие патогенных и условно-
патогенных микроорганизмов — возбудителей пищевых отравлений микробной этиологии.
В кисломолочных продуктах исследуют молочнокислую микрофлору бактериоскопическим
изучением мазков из них, окрашенных метиленовым синим. Отсутствие характерной
молочнокислой микрофлоры и наличие посторонней микрофлоры (плесневые грибы,
дрожжи и др.) указывают на неудовлетворительное качество. Консервированные
продукты питания не должны содержать кишечную палочку, протей и патогенные
микробы. При исследовании таких пищевых продуктов, как консервы овощные, рыбные,
мясные, предусмотрено: обнаружение аэробных микроорганизмов; обнаружение
анаэробных микроорганизмов; определение ботулинических экзотоксинов. е
взаимодействия боррелий с макрофагами происходит выделение ИЛ-1, который индуци-
рует воспалительный процесс.
При расследовании пищевых отравлений используется материал: остатки пищи, суточные
пробы ,рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, моча, кровь, слизь из
зева. Смывы с предметов, питьевая вода.
Билет 25
1. Иммуноглобулины. Строение. Классы. Механизм образования. Значение в
практике профилактики и терапии инфекционных болезней.
Иммуноглобулин- это белки сыворотки крови. Они секретируются плазматическими
клетками в ответ на антиген. Молекулы состоят из 2 пар полипептиных цепей: двух
тяжелых H и двух легких L. Тяжелые и легкие связаны между собой попарно
дисульфидными связями. Между тяж также есть дисульфидная связь - шарнирный
участок. Такой тип межпептидного соединения позволяет легко менять молекуле ИГ свою
конформацию в зависимости отокружающих условий и состояния.
Основная структурная единица – гетеротетрамер.
Различают 5 типов тяжелых цепей: альфа гамма мю эпсилон и дельта . 2 типа легких-
каппа и лямбда. В нормальной сыворотке крови 80% всех ИГ составляют lgG , на долю
lgM – 6%, lgA – 13,5%, lgE и lgD – все остальные. На N концах тяжелых и легких цепей
расположены вариабельные области которые в сочетании образуют антигенсвязывающую
структуру – паратоп в составе Fab фермента. Fab фермент учавствует в реакциях антиген-
антитело, но не во всех в виду того что обрезан FC фрагмент – обеспечивает побочный
эффект антител: взаим-ет с комплиментом, опсонинами, ревматоидным фактором,
неспецифически взаим-ет с белком AS и G – белком стрептококков
.IgG – способен преодолевать плацентарный барьер и обеспечивать гуморальный
иммунитет новорожденных, он составляет осн. массу антител при вторичном иммунном
ответе. Обеспечивает антибактериальную и антитоксическую защиту. Продуцентами IgG
являютсяплазматические клетки, возникающие в ходе индуцированной антигеном
дифференцировки В-лимфоцитов – предшественников, несущих мембранные IgM и IgG
или в результате клональной экспансии уже сформированных В – клеток памяти. 8,0-17,-
г\л
. Ig М пентамер, состоящий из 5 4х цепочечных структур, его наз. макроглобулином. Он
синтезируется раньше других классов в онтогенезе. Этот класс ИГ первым появляется на
самых ранних стадиях гуморального иммунного ответа на инфекцию. В качестве фактора
противоинфекционной защиты он функционирует в лимфе и межклеточной среде. В
сыворотке 0,5-1,9 г\л.
Ig А представлен 2 классами А1 и А2 и существует в 2х различных формах – секреторной
и сывороточной. Является основным ИГ секретов слизистых и экзокринных желез. Его
синтезируют лимфоидные ткани, связанные со слизистыми покровами кишечника,
дыхательных и мочеполовых путей, а также с железистым эпителием молочных, слюнных
и др. желез. В организме секреторный Ig А препятствует адгезии микроорганизмов на
слизистых и реализации их патогенного потенциала. В сыворотке содержится в
количестве 1,4-3,2 г/л.
Ig Е основное свойство состоит в способности сенсибилизировать в отношении
определенного АГ мембраны тучных клеток и базофилов. Связывание молекул с
мембранным Ig Е служит сигналом для освобождения из этих клеток ряда БАВ,
вызывающих спазм гладкой мускулатуры. Повышение проницаемости сосудов,
воспалительные реакции и др. сдвиги, лежащие в основе явлений гиперчувствительности
немедленного типа. Концентрация в сыворотке 0,002-0,004 г\л Увеличение его
продукции наблюдается при аллергических заболеваниях, иммунодифецитах,
паразитарных инвазиях. Участие в аллергических реакциях
IgD Находится на поверхности В – лимфоцитов, выполняя фунцию иммуноглобулиновых
АГ- распознающих рецепторов. В процессе дифференцировке В лимфоцитов эти
рецепторы. В сыворотки крови: 0,03-0,2 г\л
2 Этиология парентеральных вирусных гепатитов. Характеристика
вирусов. Методы лабораторной диагностики.
Вирус гепатита А является единственным Гепатотропным представителем семейства
Picornaviridae и выделен в самостоятельный род. Передается алиментарным путем.
Вирусная частица содержит РНК и окружена плотной белковой оболочкой. Вирус
выделяется с фекалиями и его АГ или РНК могут быть там обнаружены в инкубационном
периоде в течение 1-2 недели до начала болезни. Для обнаружения АГ используют
иммуноферментный анализ и реакцию не прямой гемагглютинации. Наличие вирусной
РНК устанавливают методом молекулярной гибридизации и с помощью полимеразной
цепной реакции. Наиболее надежным критерием гепатита А является наличие АТ к ВГ-А
классам Ig М .
Вирус гепатита В. Диагностика основана на обнаружении АГ ДНК ВГ-В и АТ к этому
возбудителю, маркерами острой формы гепатита В являются оболочечный АГ. В
настоящее время определяют с помощью иммуноферментного анализа, обнаруживается в
сыворотке крови и слюне больных. Вирус гепатита С. Семейство Flaviviridae . Методом
диагностики явл. определение сероконверсии антител к ВГ-С класса IgG АТ определяют
используя ИФА как в сыворотке крови, так и слюне больного. Наиболее эффективным
метожом ранней диагностики гепатита С является индикация РНК вируса гепатита С с
помощью ПЦР(полимеразно цепной реакции).
Вирус гепатита Д. самостоятельно не способен проникать в чувствительные клетки.
Обладает свойством комплексироваться с лишенной ДНК оболочкой вируса гепатита В.
Только в таком виде вирус гепатита Д может проникать в гепатоциты, где происходит его
автономная репликация. Для установления острой инфекции вызванной гепатитом Д в
сыворотке крови больных определяют наличие вирусного антигена. В первые 2 недели
болезни применяют ИФА, после – ПЦР.
Вирус гепатита Е. семейство Caliciviridae . Передается алиментарным путем.
Диагностика заключается в выявлении АГ в фекалиях больных, индикации РНК в
сыворотке крови. АГ выявляют с помощью ИФА. Наличие РНК вируса гепатита Е
определяют с помощью ПЦР. АТ появляются в сыворотке крови больных спустя 6-10 сутки
от начала желтухи.
Вирус гепатита G . Род Hepacivirus , семейство Flaviviridae . Инфекцию вирусом гепатита
G определяют по наличию в сыворотке крови пациента вирусной РНК. Рнк определяют с
помощью ПЦР. А для детекции АТ используют ИФА.
3. Микробиология иерсиниозов.
Морфология и физиология Мелкие коккобактерии, имеющие жгутики, пили и
микрокапсулу. Спор не образуют. Для них характерна биполярная окраска. Y.
enterocolitica хорошо растет на основных питательных средах в широких диапазонах
температур. Их можно отнести к умеренным психрофилам.
Антигены Y. enterocolitica имеет О-соматический и Н-жгутиковые антигены. Для
серологической дифференцировки используют их различия по О-антигенам. При
заболеваниях человека чаще других встречаются серовары 03, 05, 06 и 08.
Патогенностъ и патогенез Вирулентность данных иерсинии обусловлена их адгезией
на энтероцитах, в которой участвуют пили, соединяющиеся с фибронектином, белки
наружной мембраны, взаимодействующие с рецепторами макрофагов и тромбоцитов. Это
приводит к нарушению цитоскелета. Иерсинии, попавшие в макрофаги, размножаются в
них. Вместе с тем Y. enterocolitica продуцируют фосфатазу и протеинкиназу, которые
нарушают функции макрофагов. Токсическое действие этих бактерий связано с ЛПС и с
выделением термостабильного энтеротоксина. Кишечный иерсиниоз проявляется в
развитии острого гастроэнтерита, а также тяжелых и септических форм, которые чаще
возникают у пожилых лиц, страдающих хроническими заболеваниями.
эпидемиология Кишечный иерсиниоз антропонозо-зоонозная инфекция. Источниками
инфекции являются больные люди и животные, а также бактерионосители. Передача
инфекции происходит алиментарным путем с зараженными пищевыми продуктами:
фруктами, овощами, мороженым. Особенностью кишечных иерсиний является их
способность размножаться в пищевых продуктах, хранящихся в холодильниках.
Кишечный иерсиниоз Иерсиниоз кишечника вызывает Yersinia enterocolitica.
Заболевание характеризуется лихорадкой, преимущественным поражением
пищеварительного тракта, токсико-аллергическими проявлениями, разнообразием
клинических форм. Заражение человека наступает алиментарным путем через пищевые
продукты и воду, контаминированные выделениями больных животных. Источником
инфекции для человека являются больные иерсиниоз грызуны и синатропни животные
(коровы, свиньи, козы, телята, лошади). Это заболевание имеет место в большинстве
стран мира, но чаще встречается в скандинавских странах.. Антигенная структура Y
enterocolitica сложная. По характеру О-антигену различают 34 серовары. Подавляющее
большинство культур, выделенных от больных людей, относящихся к сероваров 03, 05,
08, 09. Микробиологическая диагностика кишечного иерсиниоза во многом подобна
бактериологических исследований при псевдотуберкулеза. При подозрении на это
заболевание обязательно исследуют кровь, испражнения, рвотные массы, дуоденальное
содержимое, мочу, ликвор. Если в начале болезни является воспаление глотки и
миндалин, исследуют слизь из носоглотки. Посевы делают на плотные дифференциально-
диагностические Агари Эндо или Плоскирева и среду обогащения (селенитовый бульон).
Для выделения Yenterocolitica из фекалий зарубежные фирмы предлагают плотные
селективные среды, содержащие цефсулодин, иргазан и новобиоцин (CIN-arap) и агар
Мак Конка. Оптимальная температура для культивирования 28-30 ° С. На этих средах
колонии мелкие, блестящие, часто выпуклые, имеют голубоватый оттенок. На агаре Эндо
имеют слабо рожевеве окраску. R-формы колоний для этого вида иерсиний не
характерны. Изолированные колонии исследуют микроскопически, на подвижность при 25
° С, отсеивают на среду Олькеницького и идентифицируют так же, как и Y. enterocolitica.
Для серологической диагностики кишечного ерсиниозу используют реакцию
объемной агглютинации, РНГА, метод ИФА. Важно ставить эти реакции с парными
сыворотками. Нарастание титра антител в 4 раза и более свидетельствует о
специфичности инфекционного процесса. Возможна также постановка аллергической
пробы с диагностической целью и экспериментальное заражение лабораторных
животных.
Профилактика и лечение Специфическая профилактика отсутствует. Для лечения
применяют антибиотики широкого спектра действия.
Билет 26
1. Бактериофаги. Морфология, основные свойства и механизм
репродукции. Практическое применение.
Бактериофаги- вирусы, специфически проникающие в бактерии, использующие их
биосинтетические системы для своей репродукции и вызывающие их лизис.
Вирус бактерий, паразитирующий только на живой микробной клетке и являющийся
важным генетическим фактором микроорганизмов. Открыт в 1917 французским ученым
Эрелем. Название происходит от греч. ФАГОС – пожиратель. Он имеет корпускулярное
строение и представляет собой шаровидное тело с отростком. . Состоят из нуклеиновой
кислоты ( ДНК или РНК) и белковой оболочки- капсид. Размеры фага колеблются от 45 до
100 нм.
В зависимости от формы, структурной организации и типа НК фаги разделяют на
несколько морфологических типов:1) к 1 типу относятся нитевидные днк-содержащие
фаги, взаимодействующие с мужскими особями бактерий. Геном фагов представлен
однонитевой днк, заключенной в спиральный капсид. 2) 2 тип включаеи мелкие рнк
содержащие и однонитевые днк-содержащие, геном которых находится внутри капсида с
аналогом отростка. 3) к 2 типу относятся икосаэдрические фаги с коротким отростком,
содержащие двунитевую днк. 4) 4 и 6 типв- сложные по морфологии днк-содержашие
фаги, имеющие форму сперматозоида.
Стадии взаимодействия бак.фага с бактерией(репродукция) 1. Адсорбция на
клетке при соответствии фаговых рецепторов с рецепторами бактерии. 2. Внедрение фага
в клетку. 3. Репликация фаговой РНК или ДНК. Синтез фагоспецифеческих ферментов
транскрипции и репликации. 4. Сборка фаговых частиц, которая происходит гораздо
быстрее чем других вирусов. 5. Выход фага из клетки происходит по типу взрыва, во
время которого зараженная бактерия лизируется.
Существуют вирулентные и умеренные фаги. Вирулентные фаги вызывают инфецию с
лизисом бак.клетки и синтезом новых фаговых частиц. Умеренные фаги не лизируют
зараженные клетки. ДНК этих фагов включается в хромосому бактерии и передается при
их делении.
В практической работе фаги применяют для: 1) Фаготипирования бактерий, что
важно для маркировки исследуемых культур приэпидемиодлгическим анализе
заболеваний.
2) Дифференцировке бак. культур с целью установления их видовой принадлежности.
3) Фагодиагностике. Фаги используются для иммунизации животных с целью получения
диагностических антифаговых сывороток.
4) А также для фаготерапии в лечении инф. заболеваний.
2. Микробиология менингитов. Морфология, тинкториальные,
культуральные и биохимические свойства менингококков. Антигенная
структура. Основы патогенеза. Схема лабораторной диагностики.
Специфическая профилактика.
Возбудитель менингоковой инфекции является Neisseria meningitides. Они
представляют собой не подвижные грамм отрицательные диплококки, округлой формы,
окруженные нежной капсулой. Не спорообразующие.
Культуральные и биохимические свойства: строгие аэробы, растут на средах с
добавлением белка (сыворотка, кровь). На плотной среде образуют нежные бесцветные
округлые мелкие колонии. На кровяном агаре не дают гемолиза. Растут при 37С, 5% СО2
стимулирует их рост. Биохимическая активность низкая. Ферментируют глюкозу и
мальтозу. Малоустойчивы во внешней среде, погибают при высыхании, темп ниже 30
градусов, высокочувствительны к обычным дезинфектантам.
При менингите развивается острое воспаление мозговых оболочек, тромбоз кровеносных
сосудов и выпотевание полиморфноядерных лейкоцитов, в рез. чего поверхность мозга
покрывается толстым слоем гнойного экссудата. От 5 до 30 % здоровых людей могут быть
носителем менингококков носоглотки во время межэпидемического периода.
Антигенная структура. Обладают сложной антигенной структурой. По капсульным
полисахаридным антигенам делятся на 13 серогрупп. Групповые антигены
обнаоуживаются в крови и ликворе у больных с активной формой инфекции.
Факторы патогенности- основные факторы патогенности: капсула,пили, эндотоксин,
белки наружной мембраны, ферменты агрессии. Капсула- важный фактор патогенности,
нейтрализует фагоцитарную активность клеток. Пили обеспечивают адгезию
менингококков к клеткам эпителия носоглотки. Белки наружной мембраны- комплекс
множества белков на пов-ти клетосной стенки, которые учавствуют в прикреплении
менингококка с клетками хозяина, способствуют проникновению менингококка внутрь
клетки.
Диагностика. В качестве материалов использую ликвор, кровь, носоглотачная слизь с
задней стенки глотки. Кровь необходима для культурального исследования и в некоторых
случаях для серологических. Первичный посев при проведении диагностич. исследования
проводят на 3 чашках. Чашку с сывороточным агаром для менингококков, с кровяным
агаром для выделения пневмококков и чашку с шеколадным агаром для гемофильных
бактерий. Инкубируют во влажной атмосфере с 5% СО2 при +37 градусах.
Специфическая профилактика осуществляется после установления серогруппы
возбудителя, вызвавшего массовые заболевания, используют либо моновакцину
сегрогруппы А, либо дивакцину серогрупп А и С.
Препаратами выбора для лечения менингококковой инфекции стали пенициллин и
др В-лактамные антибиотики, а также хлорамамфеникол. Для сонации носительства и
химиопрофилактики лиц, имеющих тесный контакт с источником инфекции могут быть
исполдьзованы антибиотики из группы рифампицина.
3. Принцип организации лаборатории для работы с возбудителями особо
опасных инфекций. Режим работы.
Микробиологические лаборатории занимаются бактериологической диагностикой
инфекционных заболеваний, исследуя испражнения, мочу, кровь, мокроту больных с
целью обнаружения патогенных микроорганизмов — возбудителей заболевания,
проводят санитарно-бактериологические исследования воды, воздуха, смывов с
окружающих предметов, рук, пищевых продуктов для обнаружения санитарно-
показательных микроорганизмов, указывающих на загрязнение патогенными микробами.