Российский химико-технологический университет

имени Д. И. Менделеева

24 Мая 2011 г.

I Научно-практическая конференция

«ТЕХНОЛОГИЯ И АНАЛИЗ
КОСМЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ
И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ»

Сборник тезисов

Москва, 2011
 ОГЛАВЛЕНИЕ

Белов А. А.
ТЕКСТИЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ ПРО-
ТЕИНАЗЫ ДЛЯ МЕДИЦИНСКИХ И КОСМЕТИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ…………………..4

Королёва М. Ю.
НАНОЭМУЛЬСИИ ДЛЯ ИНКАПСУЛИРОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ:
ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА……………………………………………………………….5

Бутова С. Н., Гаврилова Д. В.

ПЕКТИН КАК БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО В ФУНКЦИОНАЛЬ-
НЫХ КОСМЕТИЧЕСКИХ ПРОДУКТАХ……………………………………..…………7

Клышинская Е. В., Бутова С. Н., Кривченкова М. В.

РАЗРАБОТКА РЕЦЕПТУРЫ УСТОЙЧИВОЙ ГУБНОЙ ПОМАДЫ С ИСПОЛЬЗО-
ВАНИЕМ СИЛИКОНОВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ…………………………...................9

Листошин С. Б.
ЛАЗЕРНАЯ ДИФРАКЦИЯ, ДИНАМИЧЕСКОЕ РАССЕЯНИЕ СВЕТА, РЕОЛОГИ-
ЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЭКСКЛЮЗИОННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ В ЗАДА-
ЧАХ В КОСМЕТИЧЕСКОЙ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОС-
ТИ…………………………………………………………………………………………..10

Сомарёв С. А.
ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ. СОВРЕМЕН-
НЫЕ ТРЕБОВАНИЯ И ПОДХОДЫ……………………………………………………..11

Тихонова Т. В.
РАЗРАБОТКА И АНАЛИЗ МИКРОЭМУЛЬСИОННЫХ КОМПОЗИЦИЙ ДЛЯ КОС-
МЕТИЧЕСКОЙ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ И ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШЛЕННОС-
ТИ…………………………………………………………………………………………..12

Мочалова К. Р., Авраменко Г. В., Фрумин Л. Е., Хлябич Г. Н.

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ
СУБСТАНЦИИ ХОНДРОИТИНСУЛЬФАТА ИЗ ВТОРИЧНОГО ПРИРОДНОГО
СЫРЬЯ……………………………………………………………………………………..14

1
Насибулина Н. В., Долотова Т. А., Карякин А. В.
СРАВНЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОСТАТОЧНОЙ
ВЛАГИ В БЕЛКОВЫХ ПРЕПАРАТАХ И СУБСТАНЦИЯХ ПОЛИСАХАРИДОВ И
НЕОРГАНИЧЕСКИХ СОЛЕЙ……………………………………………………………15

Бондарь А. А., Завадский С. П., Абизов Е. А.

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ ТАБЛЕ-
ТИРОВАННОЙ ФОРМЫ СУХОГО ЭКСТРАКТА ТРАВЫ AEGOPODIUM PODAG-
RARIA L…………………………………………………………………………………….16

Гартман О. Р., Воробьева В. М., Журова С. О., Гончарова Н. С., Базарнова Н. Г.

РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ТАБЛЕТОК НА ОСНО-
ВЕ МЕХАНООБРАБОТАННОЙ КОМПОЗИЦИИ ХИТОЗАН–АЦЕТИЛСАЛИЦИЛО-
ВАЯ КИСЛОТА…………………………………………………………………………...18

Ярушок Т. А., Раменская Г. В., Шохин И. Е.

КАЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ РАСТВОРИМОСТИ
СУБСТАНЦИЙ……………………………………………………………………………20

Дзвонковский С. Л., Буяновская А. Г., Смирнова Н. Н., Аль-Ассаф Б. Б., Антоно-

ва М. М., Фрумин Л. Е.
СИНТЕЗ, ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ, ОЧИСТКА И АНАЛИЗ НИЗКОМОЛЕКУЛЯР-
НОГО ГЕПАРИНА…………………………………………………..…………................22

Кузовкова А. А., Калмыков А. Г., Яровая О. В., Киенская К. И., Авраменко Г. В.

ПОЛУЧЕНИЕ ВЫСОКОДИСПЕРСНОГО ОКСИДА ЦИНКА………………………..23

Перепухов А. М., Лохмотов А. Ю., Негримовский В. М., Максимычев А. В.

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ ЯМР ДЛЯ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ПРЕПАРАТА АЛА-
СЕНС® И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ………………………………………………………...24

Смагина В. В., Герасимова Е. Г, Авраменко Г. В.

ИММОБИЛИЗАЦИЯ ТЕРРИЛИТИНА В ПОЛИМЕРНЫЕ МАТРИЦЫ, ПОЛУЧЕН-
НЫЕ МЕТОДОМ РАДИАЦИОННОГО СШИВАНИЯ…………………………………26

2
Шендер В. О., Косарев С. А., Воробьев И. И.
МОДЕЛИРОВАНИЕ СТРАТЕГИИ ФЕРМЕНТАЦИИ РЕКОМБИНАНТНОГО
ШТАММА ПРОДУЦЕНТА E. COLI ДЛЯ ПРОДУКЦИИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ
ПЛАЗМИДНОЙ ДНК pCMV-VEGF165…………………………………………………30

Флегонтов П. А., Михайлова Е. В., Скоцеляс Е. Д., Карякин А. В.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЕТЕКТОРА МНОГОУГЛОВОГО ЛАЗЕРНОГО СВЕТО-
РАССЕЯНИЯ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ПРЕПАРАТОВ ПЛАЗМЫ КРОВИ…………………31

Мочалова К. Р., Авраменко Г. В., Фрумин Л. Е., Хлябич Г. Н.

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ МЯГКОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДЛЯ ЛЕЧЕ-
НИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВА-
НИЙ СУСТАВОВ…………………………………………………………………………33

Седякина Н. Е., Силаева А. О., Авраменко Г. В.

ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКИ ХИТОЗАНОВЫХ МИКРОСФЕР С ВКЛЮ-
ЧЁННЫМ ИНСУЛИНОМ………………………………………………………………...34

Насибулина Н. В., Февралёва И. С., Судариков А. Б., Карякин А. В.

ВЫЯВЛЕНИЕ ПРИМЕСИ ЭУКАРИОТИЧЕСКОЙ ДНК В ПРЕПАРАТАХ НА ОСНО-
ВЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ МЕТОДОМ ПЦР В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕ-
НИ…………………………………………………………………………………………..36

Сардушкин М. В., Киенская К. И., Авраменко Г. В.

ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА МИКРОЧАСТИЦ РИФАМПИЦИНА С ПОЛИ-
ЛАКТИДНОЙ ОБОЛОЧКОЙ…………………………………………………………….37

Ерёмин Д. В., Кедик С. А., Панов А. В.

РАЗРАБОТКА НОВЫХ ТРАНСПОРТНЫХ СИСТЕМ ДЛЯ ГИДРОФОБНЫХ ЛЕ-
КАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОЙ АМИЛОЗЫ..39

Сапельников М. Д., Кедик С. А., Панов А. В., Петрова Е. А., Тихонова Н. В.

ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ PLGA НА РАЗМЕР МИКРОСФЕР И СТЕПЕНЬ
ВКЛЮЧЕНИЯ НИКОТИНАМИДА В НИХ…………………………………………….40

Ха Кам Ань, Кедик С. А., Седишев И. П., Панов А. В., Денисова С. В., Пулина Е. В.
ПОДХОДЫ К СОЗДАНИЮ НОВЫХ КОМПОЗИЦИЙ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ НА ОС-
НОВЕ ТАУРИНА И ПОЛИГЕКСАМЕТИЛЕНГУАНИДИНА…………………….…..42

3
 ТЕКСТИЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, СОДЕРЖАЩИЕ ИММОБИЛИЗОВАННЫЕ
ПРОТЕИНАЗЫ ДЛЯ МЕДИЦИНСКИХ И КОСМЕТИЧЕСКИХ ЦЕЛЕЙ

Белов А. А.

РХТУ им. Д. И.Менделеева, каф. Биотехнологии, г. Москва, Россия.

E-mail: ABelov2004@yandex.ru

Важной предпосылкой к интенсивному развитию лекарственной энзимологии

явилось решение теоретических и технологических вопросов модификации фермен-
тов с приданием им новых свойств, причём именно таких, которые имеют карди-
нальное значение для терапии заболеваний человека. С позиций поиска новых лекар-
ственных средств белковой природы представляет интерес рассмотрение результатов
химической модификации (а для данной работы иммобилизации на нерастворимые
носители) терапевтически активных БАВ. Природные и химические волокна и нити
(хлопок, лён, полиамиды, натуральный шёлк, полипропиленовые и др.) широко при-
меняются при изготовлении перевязочных и хирургических шовных материалов,
протезов кровеносных сосудов и других используемых в эндопротезировании изде-
лий, эластичных бинтов и т. д. Однако в целом ряде случаев для изготовления изде-
лий медицинского назначения необходимы не только традиционные природные и
химические волокна и нити, но и волокнистые специальные материалы, обладающие
особыми свойствами: антимикробными, гемостатическими, анестезирующими, и др.
Полимерные системы с иммобилизованными белками и разнообразными биологиче-
ски активными веществами находят всё более широкое применение в биотехнологии
и различных областях медицины. Очень перспективным является использование в
гнойной хирургии ферментных препаратов. Но при этом возникают следующие про-
блемы: протеиназы чувствительны к изменениям рН и температурным факторам, об-
ладают антигенными и пирогенными свойствами, инактивируются ингибиторами,
содержащимися в тканях и крови, они быстро выводятся из организма, либо утили-
зируются им. Нативные ферментные препараты дороги и многие из них дефицитны.
Преодолеть эти недостатки удается путём иммобилизации ферментов на различных
природных и синтетических носителях.
При модификации волокон с целью придания им биологической активности
связь между полимерной матрицей и биологически активным веществом может быть

4
ковалентной, координационной и ионной. Выбор каждого из названных типов связи
определяется практическим назначением создаваемых материалов. Обычно, перевя-
зочные лечебные материалы содержат ферменты (или иные БАВ), связанные с носи-
телем тремя видами взаимодействий: механически включенными, адсорбированные
(за счёт физических или ионных взаимодействий) и химически связанные. Наиболь-
шее применение в медицине и косметологии находят ферменты, относящиеся к груп-
пе гидролаз, а именно протеиназы. Нами разработаны промышленные технологии по-
лучения препаратов гидролаз, иммобилизованных на альдегидсодержащих волокни-
стых материалах (в основном на основе модифицированной целлюлозы) для космети-
ческих и медицинских целей [1].

ЛИТЕРАТУРА

1. Белов А. А. Разработка промышленных технологий получения новых медицин-

ских материалов на основе модифицированных волокнообразующих полимеров,
содержащих биологически активные белковые вещества. // Дисс. … докт. техн. на-
ук. -М., РХТУ, 2009, с. 385.

НАНОЭМУЛЬСИИ ДЛЯ ИНКАПСУЛИРОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ

ВЕЩЕСТВ: ПОЛУЧЕНИЕ, СВОЙСТВА

Королёва М. Ю.

Российский химико-технологический университет им. Д. И. Менделеева,

кафедра наноматериалов и нанотехнологии

В последние время значительно возрос интерес к наноэмульсиям (НЭ) и спосо-

бам их получения. Прежде всего, это связано с возможными перспективами исполь-
зования таких дисперсных систем в медицине, в качестве средства для целевой дос-
тавки лекарственных веществ, в фармацевтике и косметике, для синтеза наночастиц и
др.
5
 НЭ представляют собой особый класс жидких дисперсных систем – размеры ка-
пель внутренней фазы в НЭ не превышают 100 нм, но при этом они являются кинети-
чески устойчивыми. Несмотря на отсутствие термодинамической стабильности НЭ
могут существовать длительное время – в течение несколько месяцев и даже лет.
Основной причиной нестабильности прямых НЭ является оствальдово созрева-
ние, обратных НЭ – флокуляция капель внутренней фазы и последующая седимента-
ция. Для обеспечения стабилизации НЭ М/В относительно оствальдова созревания
наиболее эффективно использовать добавки в дисперсную фазу второго компонента,
менее растворимого в дисперсионной среде, чем основной компонент. В НЭ В/М за-
медление флокуляции капель внутренней фазы может быть достигнуто при использо-
вании соответствующих ПАВ и полимерных добавок, образующих стерический барь-
ер на поверхности капель и препятствующих их сближению.
Для получения НЭ в настоящее время используются высоко-, низкоэнергетиче-
ские и комбинированные методы. Среди высокоэнергетических методов наибольшей
популярностью пользуются гомогенизация под давлением в клапанных аппаратах и
микрофлюидных устройствах. Однако данные методы позволяют получать эмульсии
с нанометровыми размерами капель только при низких и средних долях внутренней
фазы. При увеличении вязкости системы размер капель внутренней фазы резко воз-
растает. Высокоэнергетические аппараты имеют достаточно сложную конструкцию,
энергозатратны. Но при этом они обладают неоспоримым преимуществом – исполь-
зование данных устройств позволяет инкапсулировать неограниченный круг соеди-
нений и лекарственных веществ при условии, что они сохраняют химическую ста-
бильность и биологическую активность при высоких давлениях и скоростях сдвига.
Особый интерес представляют низкоэнергетические методы, основанные на ин-
версии фаз при изменении температуры или состава системы, и спонтанное эмульги-
рование. При инверсии фаз возможно получение НЭ с размерами капель менее 50 нм
с достаточно узким распределением по размерам. Эмульгирование протекает практи-
чески одновременно во всем объёме, что эффективно с энергозатратной точки зрения
при крупномасштабном промышленном производстве. Основным недостатком дан-
ных методов является их зависимость от физико-химических свойств системы, глав-
ным образом от типа ПАВ. Низкоэнергетические методы наиболее целесообразно ис-

6
пользовать при инкапсулировании нестойких соединений, разрушающихся в высоко-
энергетических аппаратах.

ПЕКТИН КАК БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОЕ ВЕЩЕСТВО

В ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ КОСМЕТИЧЕСКИХ ПРОДУКТАХ

Д. б. н., член-корр. РАЕН, проф. Бутова С. Н., аспирант Гаврилова Д. В.

ГОУ ВПО Московский государственный университет пищевых производств,

ООО «АВ Тауэр»

Данная работа была проведена с целью получения нового натурального много-

функционального компонента косметических средств – пектина, а также исследова-
ние его свойств с целью использования в качестве биологически активной добавки.
За последние несколько лет в сознании человека укрепилась информация о пре-
имуществах натуральной косметики. Во всем мире производители занимаются разра-
боткой уникальной рецептуры косметических средств, позволяющих сохранить как
можно дольше кожу человека здоровой и красивой. Одновременно каждый произво-
дитель стремится внести все новые и необычные компоненты в рецептуры. Использо-
вание природного полимера – пектина, обладающего рядом свойств, незаменимых
для косметических средств, является перспективным направлением в косметической
промышленности [1].
По результатам проведённых исследований можно сделать вывод о том, что пек-
тин является:
• прекрасным структуро-, гелеобразователем;
• эмульгатором природного происхождения;
• способен адсорбировать тяжелые металлы, образовывая с ними комплексы [2];
• способен нормализовать рН кожи, тем самым, восстанавливая кислотную ман-
тию кожи;

7
 • оказывает бактерицидное действием по отношению к следующим микроорга-
низмам: Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella en-
teritidis;
• ускоряет заживление при ожогах;
• способен связывать и удерживать молекулы воды [3].

Вследствие того, что производства пектина в России нет, экономически выгод-

ным является самостоятельное получение пектина из отходов плодового и ягодного
сырья. В настоящей работе пектин был получен при помощи ферментативного гидро-
лиза [4].

ЛИТЕРАТУРА

1. Донченко Л. В., Фирсов Г. Г. Пектин: основные свойства, производство и приме-

нение. - М.: ДеЛи принт, 2007. – 276 с.
2. Калайциди Л. Ю. Биохимическое обоснование и разработка технологии пектино-
вых веществ с заданными комплексообразующими свойствами из различных видов
сырья // Дисс. ... канд. тех. наук. - Краснодар, 1998. - 156 с.
3. Марголина А. А., Эрнандес Е. И. Новая косметология. Том 1. – М.: ООО «Фирма
Клавель», 2005. – 424 с.
4. Бутова С. Н. Биохимические основы биологически активных веществ раститель-
ного сырья и отходов его переработки. Часть 3. Пектин. Методические указания к
выполнению лабораторных работ. – М.: МГУПП, 2007. - 28 с.

8
 РАЗРАБОТКА РЕЦЕПТУРЫ УСТОЙЧИВОЙ ГУБНОЙ ПОМАДЫ
С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СИЛИКОНОВ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ
Клышинская Е. В., д. б. н., член-корр. РАЕН, проф. Бутова С. Н., Кривченкова М. В.

ООО «АВ Тауэр», ГОУ ВПО Московский государственный университет пищевых

производств

Представляемая работа является исследованием возможности использования

органосиликоновых плёнкообразователей, обеспечивающих повышенную стойкость к
стиранию, в создании рецептур устойчивых губных помад.
В последнее время устойчивые продукты для макияжа прочно заняли свою нишу
на рынке декоративной косметики. Большинство представленных на рынке устойчи-
вых губных помад сохраняются на губах в течение длительного времени, но цвет яв-
ляется абсолютно матовым, а после нанесения появляется чувство стянутости и дис-
комфорта. Целью проведённого исследования стала разработка рецептуры такой губ-
ной помады, которая бы в течение долгого времени держалась на губах, придавала им
глянец, обеспечивала комфортные ощущения после нанесения. Для этого было изу-
чено влияние различных плёнкообразователей на структуру, устойчивость и органо-
лептические свойства губной помады.
В процессе исследования был проведён анализ широкого спектра ингредиентов
(восков, масел, эмолентов, плёнкообразователей, наполнителей), на основании кото-
рого была разработана базовая рецептура губной помады. По выбранной рецептуре
были приготовлены пять опытных образцов губной помады, содержащих в своём со-
ставе различные силиконовые плёнкообразователи, в качестве которых были выбра-
ны силиконовая смола и два полиорганосилсесквиоксана. Один из них имеет в своём
составе дополнительный молекулярный уровень, что позволяет достичь сочетания та-
ких свойств, как непереводимость и эластичность образующейся плёнки. Он условно
был назван полиорганосилсесквиоксаном №1. Второй полиорганосилсесквиоксан
имеет в своём составе органические заместители, отличные от заместителей в составе
полиорганосилсесквиоксана №1. Ему было присвоено условное название полиоргано-
силсесквиоксан №2. Образец №1 содержал 5% полиорганосилсесквиоскана №2, обра-
зец №2 – 5% полиорганосилсесквиоксана №1, образец №3 – 2,5% полиорганосилсе-
сквиоксана №1 и 2,5% полиорганосилсесквиоксана №2, образец №4 – 5% силиконо-

9
вой смолы, образец №5 – 2,5% полиорганосилсесквиоксана №1 и 2,5% силиконовой
смолы.
Опытные образцы губной помады были проанализированы по физико-
химическим и органолептическим показателям с привлечением группы пробантов.
Полученные результаты показали, что наилучшими органолептическими свойствами
и достаточной степенью стойкости обладает губная помада, в состав которой входит
смесь силиконовой смолы и полиорганосилсесквиоксана №1.

ЛАЗЕРНАЯ ДИФРАКЦИЯ, ДИНАМИЧЕСКОЕ РАССЕЯНИЕ СВЕТА,

РЕОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ЭКСКЛЮЗИОННАЯ
ХРОМАТОГРАФИЯ В ЗАДАЧАХ В КОСМЕТИЧЕСКОЙ И
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ ПРОМЫШЛЕННОСТИ

Листошин С. Б.

ЗАО «Экситон Аналитик», оборудование Malvern Instruments Ltd, специалист по раз-

витию

В косметической и фармацевтической промышленности контроль производства

и разработка новых продуктов основан на умениях видеть, понимать и предсказы-
вать.
Дифракционные гранулометры и анализаторы динамического рассеяния света
«видят» размер частиц, составляющих пробу или образец. Реометры прогнозируют
поведение продуктов без проведения «полевых» или долгосрочных испытаний. Экс-
клюзионная/гель-проникающая хроматография разделяет образцы по размеру и «по-
нимает» внутреннюю структуру каждой фракции.
Доклад включает примеры исследований (назальный спрей, сырьё, крем с ре-
тинолом, зубная паста, хитозан), краткое описание физических основ и приборов.

10
 ИЗУЧЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ НОВЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ.
СОВРЕМЕННЫЕ ТРЕБОВАНИЯ И ПОДХОДЫ

Сомарёв С. А.

ОАО «АКРИХИН», ведущий специалист R&D

Проверка и подтверждение стабильности разрабатываемых лекарственных пре-

паратов на первых этапах жизненного цикла продукта представляет собой важную
задачу для современных производителей. Известно, что ошибка, допущенная на ста-
дии разработки и обнаруженная после внедрения на производство, может обернуться
для предприятия многомиллионными затратами. Для фармацевтических компаний,
стабильность это ещё гарантия безопасности и эффективности. Сегодня многие круп-
ные компании создают специальные отделы по изучению стабильности, а также ак-
тивно стремятся брать на вооружение лучшие рекомендации ведущих мировых стан-
дартов по изучению стабильности, такие как ICH, которые считаются обязательными
в США, Японии и Европе.

Стабильность зависит, с одной стороны, от факторов окружающей среды (та-

ких как температура, влажность, свет), а с другой стороны, от факторов, связанных с
самим продуктом, то есть химических и физических свойств субстанции и вспомога-
тельных веществ, лекарственной формы, технологического процесса и упаковочных
материалов. Исследования стабильности, как правило, проводят в упаковке, которая
идентична и моделируют упаковку, предлагаемую для хранения и дистрибуции. Тех-
нологический процесс получения образцов поступающих на изучение стабильности
должен обеспечить выпуск продукта того же качества, как и планируемого для про-
дажи.

Помимо долгосрочных испытаний проводятся испытания в стрессовых условиях

и ускоренные испытания. Каждое из таких испытаний имеет свою конкретную цель:
выявить за короткий срок лучшего кандидата для продолжения разработки; опреде-
лить, как поведёт себя препарат при возможных отклонениях от установленного ре-
жима хранения; продемонстрировать наличие или отсутствие тенденции к изменению
критических параметров. При разработке программы по изучению стабильности сле-
дует базироваться на знании свойств активного вещества, лекарственной формы, а

11
также на опыте, приобретённом при разработке других продуктов. Информация по
стабильности может включать результаты физических, химических, биологических и
микробиологических испытаний, в том числе специфических характеристик лекарст-
венной формы таких как, например, профиль растворения.

При изучении стабильности необходимо правильно распределять имеющиеся в

лаборатории новых разработок ресурсы, иначе процесс изучения стабильности может
оказаться неподъёмным грузом. Разработка программы исследования основывается
не только на том, что мы хотим проверить, как часто, в каких вариантах упаковки.
Следует чётко понимать, какие параметры являются обязательными для анализа, а
какие нет, какое количество серий является статистически достоверным и др. Грамот-
но построенная система изучения стабильности – это всегда баланс между тем, что
мы хотели бы проверить в идеале и тем, что реально позволяют наши возможности.
При этом чёткая система может позволить не только оптимизировать имеющиеся ре-
сурсы, но в значительной степени повышает вероятность разработки качественных
продуктов, даёт возможность разрабатывать их быстро. Оценив риск по стабильно-
сти, и своевременно проведя корректирующие мероприятия, компания может в наме-
ченный срок добиться поставленных целей по выводу на рынок нового продукта.

РАЗРАБОТКА И АНАЛИЗ МИКРОЭМУЛЬСИОННЫХ КОМПОЗИЦИЙ

ДЛЯ КОСМЕТИЧЕСКОЙ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ И ПИЩЕВОЙ ПРОМЫШ-
ЛЕННОСТИ

Тихонова Т. В.

Российский химико-технологический университет им. Д. И. Менделеева

125480, г. Москва, ул. Героев Панфиловцев, д. 20
E-mail: gluktv@mail.ru

Эмульсионные системы составляют основу современных косметических и

фармацевтических препаратов. Наиболее эффективными и удобными в применении

12
являются микроэмульсии (МЭ) благодаря способности солюбилизировать большие
объёмы водо- и маслорастворимых биологически-активыных веществ и лекарствен-
ных субстанций. Микроэмульсии представляют собой термодинамически агрегативно
устойчивые дисперсные системы, самопроизвольно образующиеся при смешивании
не растворимых друг в друге воды и масла в присутствии поверхностно-активных
веществ. Размер капель микроэмульсии, как правило, от 10 до 200 нм [1, 2].

Самопроизвольное превращение макрогетерогенных систем в термодинамиче-

ски равновесные лиофильные коллоидные системы, в том числе – микроэмульсии,
возможно при очень низких значениях межфазного натяжения σ. Для этого необхо-
димо, осуществить грамотный подбор поверхностно-активных веществ, обладающих
высокой поверхностной активностью наряду с безопасностью применения в космети-
ческих и фармацевтических композициях.

К основным методам исследования микроэмульсионных систем относятся тем-

пературные, вискозиметрические, тензиометрические. При изменении температуры
или состава дисперсной фазы в таких системах возможно выявить структурные пере-
ходы (прямая-бинепрерывная-обратная микроэмульсии).

С ростом температуры или объёмной доли дисперсной фазы число соударений

капель микроэмульсии растёт и приводит к образованию динамических скоплений из
мицелл. При этом происходит резкий рост электропроводности системы и увеличива-
ется скорость обмена каплями своим содержимым. Такое явление называется «перко-
ляцией» и характеризует МЭ как транспортные системы переноса вещества через
мембранные структуры.

1. Микроэмульсии. Структура и динамика / под ред. Фридберга С. Е. и Боторе-

ля П. М. - М.: Мир. - 1990. – C. 320.
2. Huibers P. D. T. Surfactant self-assembly, kinetics and thermodynamics of micellar and
microemulsion systems. Dissertation… PhD. University of Florida. 1996.

13
 РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ ХОНДРОИТИНСУЛЬФАТА
ИЗ ВТОРИЧНОГО ПРИРОДНОГО СЫРЬЯ

Мочалова К. Р., Авраменко Г. В., Фрумин Л. Е., Хлябич Г. Н.

ФГУ Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов

(«ГИКиМП»),
Российский Химико-Технологический Университет им. Д.И. Менделеева.

Хондроитинсульфат играет важную роль в метаболизме и регенерации тканей,

поврежденных в результате обменных процессов при заболеваниях костно-хрящевых
тканей человека.
Вторичное природное сырьё, а именно, опорно-каркасные и покровные ткани
осетровых рыб являются источником гликозаминогликанов, в частности хондроитин-
сульфата.
Представляется перспективной разработка комплексной технологии переработки
опорно-каркасных и покровных тканей осетровых рыб, богатых биологически актив-
ными компонентами, необходимыми для получения субстанции хондроитинсульфата.
Методом щелочного гидролиза из очищенной от мышечной ткани хрящевой
ткани русского осетра (Acipenseriformes) был получен сырец хондроитинсульфата [1].
Выход сырца из данного вида сырья составил 0,6-0,8%. Были предложены параметры
очистки гидролизата. С помощью ВЭЖХ была определена молекулярная масса гете-
рополисахарида. Контроль качества полученной субстанции осуществлялся по пока-
зателям фармакопейной статьи предприятия, с учётом повышенных требований, ус-
тановленных «ГИКиМП» при входном контроле на субстанцию хондроитинсульфат.

ЛИТЕРАТУРА
1. Ежова Е. А, Быкова В. М. / Хондроитин из хрящей рыб.// Рыбпром. -2007. -№3. –С.
18-20.

14
 СРАВНЕНИЕ ФАРМАКОПЕЙНЫХ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ОСТАТОЧНОЙ ВЛАГИ В БЕЛКОВЫХ ПРЕПАРАТАХ И СУБСТАНЦИЯХ
ПОЛИСАХАРИДОВ И НЕОРГАНИЧЕСКИХ СОЛЕЙ

Насибулина Н. В., Долотова Т. А., Карякин А. В.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Гематологический научный

центр» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Одной из важнейших характеристик фармацевтических субстанций и лекарст-

венных препаратов, влияющей на качество и сроки хранения, является влажность.
Существует несколько фармакопейных методик определения содержания влаги, сре-
ди которых метод определения содержания воды титрованием по Фишеру является
наиболее точным. Точность обусловлена тем, что в ходе анализа представляется воз-
можным определить всю влагу вследствие экстракции воды из образца в метанол при
растворении или суспендировании пробы.
Основная проблема при постановке методики состоит в правильном подборе
рабочей среды для проведения анализа. Рабочая среда должна обеспечивать эквива-
лентное протекание реакции, лежащей в основе метода Карла Фишера, и позволять
индикацию конечной точки титрования.
Для определения воды в субстанциях для производства инфузионных раство-
ров (в частности, Гидроксиэтилкрахмал, Глюкоза моногидрат, Декстран, Поливинил-
пирролидон, а также неорганические соли – хлориды натрия, калия, магния), а также
белковых препаратах (лиофилизаты иммуноглобулинов, рекомбинантных белков) ме-
тодом Карла Фишера использовался автоматический титратор марки V30 фирмы Met-
tler Toledo, а для гравитационного определения – аналитический влагомер марки MX-
50, производства фирмы «A&D Co. LTD», Япония.
Титрование белков осуществлялось в среде метанола или смеси метанола с
формамидом и позволяло получать воспроизводимые результаты.
Неорганические соли титровали в метаноле, причём достижение точки эквива-
лентности происходило быстро и чётко, что свидетельствовало о том, что кристалли-
зационная вода быстро высвобождалась из кристаллов соли и переходила в метанол.
Содержание при гравиметрическом определении не отличалось от результата, полу-

15
ченного при титриметрическом методе, следовательно, целесообразнее для определе-
ния воды в солях пользоваться гравиметрическим методом как более дешёвым.
Гравиметрическое определение содержания влаги не давало точных и воспро-
изводимых результатов при анализе образцов полимерных субстанций, не раствори-
мых в метаноле и осаждающихся на электродах при проведении анализа. Это было
связано с тем, что в субстанциях, представляющих из себя порошки полимеров, кроме
гигроскопической влаги находится также и кристаллизационная вода, которая не пол-
ностью экстрагировалась растворителем при перемешивании. Предварительное рас-
творение пробы в небольшом объёме формамида и добавление формамида в рабочую
среду позволило добиться воспроизводимых результатов.
Были разработаны и отвалидированы методики для определения содержания
влаги в исследуемых препаратах, которые с некоторыми изменениями пригодны и
для ручного титрования воды.

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПРОИЗВОДСТВА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ

ТАБЛЕТИРОВАННОЙ ФОРМЫ СУХОГО ЭКСТРАКТА ТРАВЫ
AEGOPODIUM PODAGRARIA L.

Бондарь А. А., Завадский С. П., Абизов Е. А.

Первый Московский государственный медицинский университет им. И. М. Сеченова

Сныть обыкновенная (Aegopodium podagraria L.) – широко распространённое в

Европейской части России многолетнее травянистое растение семейства Apiaceae
Lindl. (Сельдерейные) высотой до 1 м. В народной медицине, а также гомеопатии
траву этого вида используют как противовоспалительное, мягчительное, диуретиче-
ское, ранозаживляющее обезболивающее при ревматизме, подагре, рожистых воспа-
лениях, экссудативном диатезе, желудочно-кишечных заболеваниях, болезнях почек
и мочевого пузыря. Химический состав надземной части сныти обыкновенной пред-
ставлен: аминокислотами; углеводами (глюкозой, фруктозой, умбеллиферозой);

16
эфирным маслом до 0,07% в составе которого преобладают лимонен и β-фелландрен;
кумарином – умбеллифероном; β-ситостерином; аскорбиновой и кофейной кислота-
ми; флавоноидами (кверцетином, кемпферолом и их гликозидами) [1].
Целью настоящей работы являлась разработка состава и технологии табле-
ток на основе сухого экстракта из травы Aegopodium podagraria L. и их стандар-
тизация.

Материалы и методы: объектом исследования являлся сухой экстракт из травы

сныти обыкновенной, полученный на основе 70%-го спирта этилового – гигроско-
пичный зеленовато-коричневый порошок, горьковатый на вкус, растворимый в воде,
практически не растворимый в органических растворителях. Для улучшения техноло-
гических свойств прессуемых масс в состав таблеток вводили различные количества
сахарной пудры, молочного сахара, глюкозы, кальция карбоната, картофельного крах-
мала, кальция стеарата, микрокристаллической целлюлозы. Каждую смесь в отдель-
ности увлажняли 60-, 70-, 96%-ным этиловым спиртом, водой очищенной, 2-, 3-, 5-,
7%-ным крахмальным клейстером, 2-, 3-, 5%-ными гелями МЦ, NaKMЦ и 60%-ным
сахарным сиропом. Влажные массы сушили, гранулировали и получали модельные
таблетки на ручном гидропрессе. Таблетки оценивались по внешнему виду, прочно-
сти и распадаемости. Сумму экстрактивных веществ определяли согласно методике
указанной в ГФ XI вып. 1 стр. 295 [2].
Результаты: проведённые опыты показали целесообразность введения в состав
таблеток картофельного крахмала в качестве разрыхляющего и связывающего веще-
ства, а антифрикционного – кальция стеарата. На основе полученных данных реко-
мендуется следующая технология получения таблеток: экстракт просеивают через си-
то диаметром отверстия 150 мкм, тщательно перемешивают и увлажняют 5% крах-
мальным клейстером до получения оптимальный влажной массы, которую высуши-
вают при 40-50°С, гранулируют и опудривают смесью картофельного крахмала и
кальция стеарата. Готовые гранулы прессуют по 0,500 г на таблеточной машине
ударного типа. Состав не прилипает к пресс-форме, средняя масса таблеток в процес-
се прессования стабильная. Сумма экстрактивных веществ в готовом продукте 86,4 ±
1,8%.
Выводы: предложена технологическая схема производства таблеток на основе
сухого экстракта из травы Aegopodium podagraria L. и проведена их стандартизация.

17
Подобран оптимальный состав и количество вспомогательных веществ, метод табле-
тирования, обеспечивающий получение качественных таблеток.

ЛИТЕРАТУРА

1. Пименов М. Г., Скляр Ю. Е.. Сем. Apiaceae // Растительные ресурсы СССР: Цвет-
ковые растения, их химический состав, использование; Семейства Rutaceae – Elaeag-
naceae. – Ленинград: Наука, 1988. – 358 с.

2. Государственная фармакопея СССР. 11-е изд. – М.: Медицина, 1987. – Вып. 1.–
334 с.

РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ТАБЛЕТОК НА

ОСНОВЕ МЕХАНООБРАБОТАННОЙ КОМПОЗИЦИИ ХИТОЗАН–
АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВАЯ КИСЛОТА

Гартман О. Р., Воробьева В. М., Журова С. О., Гончарова Н. С., Базарнова Н. Г.

ГОУ ВПО Алтайский государственный медицинский университет, ГОУ ВПО

Алтайский государственный университет

На современном этапе одной из важных задач фармацевтической технологии яв-

ляется совершенствование уже известных лекарственных средств, улучшение их
биофармацевтических свойств, создание лекарственных форм, обеспечивающих оп-
тимальное терапевтическое действие при минимуме побочных эффектов [1, 2]. К из-
вестным лекарственным средствам относится ацетилсалициловая кислота (АСК).
Широкое применение АСК обусловлено её многогранной терапевтической активно-
стью: АСК оказывает противовоспалительное, жаропонижающее, анальгезирующее и
антиагрегантное действие.
Одним из путей повышения терапевтической эффективности лекарственных
средств является применение их в виде иммобилизированных препаратов. Для кон-
тролированного высвобождения лекарственных веществ часто применяется полиса-

18
харид – хитозан. Хитозан, как производное природного биополимера хитина, биосо-
вместим и биодеградируем до обычных для организма веществ (N-ацетилглюкоза-
мин) и поэтому не обладает общетоксическим действием.
Современные технологии всё чаще используют совместную механообработку
(механоактивацию) полимеров и низкомолекулярных веществ с целью получения
супрамолекулярных комплексов различного типа [3]. Исследования процессов меха-
нообработки смеси хитозана с АСК позволили нам получить композицию оптималь-
ного состава и свойств с массовым соотношением компонентов 1:1.
Целью проведённого нами исследования являлась разработка состава и техно-
логии получения таблеток на основе комплекса механообработанного хитозана с аце-
тилсалициловой кислотой и исследование основных технологических характеристик
полученной лекарственной формы.
Для выбора оптимальных условий таблетирования были исследованы такие тех-
нологические свойства, как сыпучесть, угол естественного откоса, прессуемость, на-
сыпная масса, влажность, отсыреваемость композиции хитозана–АСК. Учитывая тех-
нологические свойства, нами были составлены 20 прописей таблеток с использовани-
ем вспомогательных веществ, получены массы для таблетирования и спрессованы
5 серий таблеток. Оценку качества таблеток проводили по показателям, регламенти-
руемым ГФ XI изд., вып. 2, статья «Таблетки», ОФС 42-0003-04 «Растворение» и ОСТ
91500.05.001-00 «Стандарты качества лекарственных средств».
Таким образом, в результате комплекса технологических и биофармацевтиче-
ских исследований выбран состав, разработана технология методом прямого прессо-
вания и определены нормы качества таблеток механообработанного комплекса хито-
зан–АСК.

ЛИТЕРАТУРА

1. Быков, В. А. Изучение влияния различных факторов на высвобождение лекарст-

венных веществ из матричных таблеток / В. А. Быков, Н. Б. Демина, В. А. Кеменова,
Е. В. Великая, О. Г. Чулюков // Химико-фармацевтический журнал. – 2005. – Т. 39. –
№5. – С. 40-45.

19
2. Тенцова, А. И. Лекарственная форма и терапевтическая эффективность лекарств:
введение в биофармацию / А. И. Тенцова, И. С. Ажгихин. – М.: Медицина, 1974. -
С. 5-7, 28.
3. Стид Дж. В., Этвуд Дж. Л. Супрамолекулярная химия. Пер.с англ.: в 2 т./ Джона-
тан В Стид, Джерри Л. Этвуд. – М.: ИКЦ «Академкнига», 2007. – Т. 1. – 2007. – 480 с.

КАЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ РАСТВОРИМОСТИ

СУБСТАНЦИЙ

Ярушок Т. А., Раменская Г. В., Шохин И. Е.

ГОУ ВПО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова, Москва, Россия

Цель: провести определение и сделать качественную оценку биофармацевтиче-

ской растворимости субстанции пироксикама.

Материалы и методы: Определение равновесной растворимости проводили на

приборе для проведения теста «Растворение» Erweka DT600 (Германия), аппарат
«Лопастная мешалка» при 200 об/мин. в трех средах: буферных растворах с pH 4,5;
6,8 и 0,1 M HCl. Испытание проводили в трех повторностях для каждой из сред рас-
творения. В стакан со средой растворения помещали по 0,040 г (что соответствует
максимальной суточной дозе в 250 мл) субстанции пироксикама. Последовательный
отбор проводили через 2, 3, 4 ч по 3,8 мл после начала испытания и незамедлительно
фильтровали через фильтр «синяя лента». Количественный анализ проводили мето-
дом УФ-спектрофотометрии. Оптическую плотность проб измеряли на спектрофото-
метре Agilent 8453 (США) при следующих максимумах поглощения: 242 нм для 0,1 М
раствора хлороводородной кислоты, 250 нм для ацетатного буферного раствора со
значением рН 4,5 и 253 нм для фосфатного буферного раствора с рН 6,8 (различия в
максимумах поглощения при разных значениях рН связано с полиморфизмом пирок-
сикама) в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя соответствующую среду раство-
рения в качестве раствора сравнения.

20
 Результаты: для всех трех сред, в которых проводили изучение растворимости
субстанции, значение растворимости значительно не различалось для каждой из вре-
менных точек (0,078-0,080 мг/мл в фосфатном буфере, 0,024-0,030 мг/мл в ацетатном
буфере и 0,077-0,082 мг/мл в 0,1 M HCl). Таким образом, можно сделать заключение о
том, что в течение 4 ч было достигнуто термодинамическое равновесие процесса пе-
рехода пироксикама в раствор. В связи с этим значение концентрации пироксикама в
среде растворения спустя 4 ч после начала испытания было принято за значение его
равновесной биофармацевтической растворимости. Далее проводили расчёт дозового
числа (Do = 250*S, мг/мл / Dmax, мг, где S, мг/мл – биофармацевтическая раствори-
мость, Dmax, мг – максимальная дозировка; критерий приемлемости Do ≥ 1) и отноше-
ния дозы к растворимости (D/S = Dmax, мг / S, мг/мл; критерий приемлемости D/S ≤
250 мл) для временной точки 4 ч. Дозовое число составило 1,025 для 0,1 M HCl, 0,363
для среды pH 4,5, 1,000 для среды pH 6,8; отношение дозы к растворимости – 244 мл
для 0,1 M HCl, 690 мл для среды pH 4,5 и 250 мл для среды pH 6,8.

Выводы: на основании экспериментальных данных биофармацевтическая рас-

творимость пироксикама в физиологическом диапазоне рН (1,0-6,8) может быть клас-
сифицирована как «низкая». В то же время, его растворимость при низких значениях
рН (1,0-1,2) переклассифицирована как «высокая». Принимая во внимание «высо-
кую» проницаемость пироксикама, его следует отнести ко II Классу Биофармацевти-
ческой Классификационной Системы.

21
 СИНТЕЗ, ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ, ОЧИСТКА И АНАЛИЗ
НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕПАРИНА

Дзвонковский С. Л., Буяновская А. Г., Смирнова Н. Н., Аль-Ассаф Б. Б., Антоно-

ва М. М., Фрумин Л. Е.

Институт элементоорганических соединений им. А. Н. Несмеянова РАН,

Российский химико-технологический университет им. Д. И. Менделеева,
ФГУ «Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов»

На автоматическом CHNS-анализаторе vario Microcube Elementar проведено оп-

ределение азота и серы в нескольких партиях низкомолекулярного гепарина, выде-
ленного на разных стадиях синтеза этого препарата в процессе отработки технологии
его получения. Показано, что определение серы осложняется присутствием натрия,
входящего в состав образцов в виде сульфокислотных солей гепарина и, возможно,
ацетата натрия. В процессе сжигания образцов в кислороде происходит частичное об-
разование термостойкого сульфата натрия, что приводит к увеличению ошибок коли-
чественного определения серы в виде SO2. Общее содержание натрия в образцах оп-
ределяли методом атомно-эмиссионной спектрометрии после разложения их концен-
трированной H2SO4 по Кьельдалю. Для устранения мешающего влияния натрия на
определение серы автоматическим методом использованы добавки порошкообразно-
го WO3 к навеске в соотношении 3:1 [1]. Правильность полученных результатов под-
тверждена определением серы методом сжигания в колбе с кислородом по Шенигеру
[2], который является стандартным при анализе фармпрепаратов на серу [3].

ЛИТЕРАТУРА

1. Application Report AB-A-050294-E-01. CNS-Determination in Soil and Spruce-needles

with the Elemental Analyzer vario EL. P.1. Elementar Analysensysteme GmbH. 2003; Ap-
plication Report AB-B-141096-E-01. CNS-Determination in Coal with the Elemental Ana-
lyzer vario EL. P.1. Elementar Analysensysteme GmbH. 2003.
2. Методы количественного органического элементного микроанализа. М. Химия.
1987. с.233.
3. Государственная фармакопея СССР. 11 изд. Вып.1. М. Медицина.1987.с.181.

22
 ПОЛУЧЕНИЕ ВЫСОКОДИСПЕРСНОГО ОКСИДА ЦИНКА

Кузовкова А. А., Калмыков А. Г., Яровая О. В., Киенская К. И., Авраменко Г. В.

Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева

В последнее время частицы нанометровых размеров начали привлекать внима-

ние исследователей разных областей науки, так как специфические свойства металлов
в высокодисперсном состоянии открывают широкие возможности для создания но-
вых эффективных катализаторов, сенсорных систем, препаратов с высокой биологи-
ческой активностью для применения в экологии, медицине и косметике.

Оксид цинка – неорганический материал с уникальным сочетанием физико-

химических свойств. Усиленный интерес к оксиду цинка связан с возможностью соз-
дания светоизлучающих устройств, работающих в ближнем ультрафиолетовом диапа-
зоне. Порошок оксида цинка – перспективный материал в качестве рабочей среды для
порошковых лазеров. В косметической промышленности уже давно сформировался
рынок подростковой косметики и солнцезащитных кремов на основе оксида цинка.
В данной работе рассматривается получение водных дисперсий наночастиц ок-
сида цинка.

На первом этапе синтеза проводили гидролиз 0,2 М раствора Zn(NO3)2 в присут-

ствии водного раствора аммиака. Отмытый от электролита гидроксид цинка диспер-
гировали в дистиллированной воде, нагревали и добавляли 0,1 М раствор Zn(NO3)2,
который выполнял функцию пептизатора. В результате получали агрегативно устой-
чивый золь молочно-белого цвета с рН 7,0-7,5 и размером частиц 30-100 нм. В ходе
работы было установлено, что на процесс формирования золя оказывает влияние тем-
пература пептизации, величина рН пептизирующего агента, а так же мольное соот-
ношение [OH-]:[Zn2+]. Процесс пептизации осуществлялся в диапазоне температур от
30 до 100°С. В ходе эксперимента было установлено, что при температуре пептизации
ниже 50°С пептизация проходит не полностью и получаемая система агрегативно не-
устойчива. При температурах пептизации от 50 до 100°С наблюдается полная пепти-
зация осадка, однако агрегативно устойчивые системы получаются только при темпе-
ратурах выше 90°С.

23
 В ходе дальнейшего эксперимента было установлено, что изменение рН пепти-
зирующего агента оказывает влияние на устойчивость и размеры частиц получаемой
системы. рН пептизирующего агента варьировали в интервале от 4,0 до 6,3. Проана-
лизировав полученные данные, было установлено, что наиболее устойчивые системы
получаются при рН петизирующего агента, равном 5.
Исходя из полученных данных были выбраны температура пептизации равная
100°С и рН пептизирующего агента, равное 5.
Далее представляло интерес рассмотреть влияние времени термообработки на
размер частиц получаемой системы.
Полученный золь оксида цинка доводили до кипения и через каждые 30 минут
проводили измерения оптической плотности золя и размер частиц системы. Анализи-
руя полученные данные, можно предположить, что при нагревании золя более 30 ми-
нут происходит кристаллизация частиц, что приводит к потере агрегативной устойчи-
вости. Таким образом, дополнительная термообработка при синтезе гидрозоля оксида
цинка методом пептизации не требуется.

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДОВ ЯМР ДЛЯ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ПРЕПАРАТА

АЛАСЕНС® И ЕГО ПРОИЗВОДНЫХ
1
Перепухов А. М., 2Лохмотов А. Ю., 2Негримовский В. М., 1Максимычев А. В.
1
МФТИ, 2 ФГУП «ГНЦ «НИОПИК»

Методы флуоресцентной диагностики и фотодинамической терапии находят

широкое применение в практике здравоохранения для диагностики и терапии онколо-
гических заболеваний. В основе метода лежит возбуждение светом селективно нако-
пившегося в патологической ткани фотосенсибилизатора (ФС), люминесценция кото-
рого является диагностическим признаком, позволяющим определить локализацию
патологии. Терапевтический эффект вызывается цитотоксическим агентом – актив-

24
ными формами кислорода, возникающими в результате переноса энергии от возбуж-
дённого ФС к свободному кислороду.
Одним из наиболее популярных ФС является природное вещество протопорфи-
рин IX, накопление которого в патологической ткани вызывается интервенцией 5-
аминолевулиновой кислоты (АЛК) – исходного вещества в цепи биосинтеза всех при-
родных порфиринов. Во ФГУП «ГНЦ «НИОПИК» разработана оригинальная техно-
логия получения АЛК в форме гидрохлорида, зарегистрирован и выпускается содер-
жащий АЛК препарат АЛАСЕНС®. Методы ЯМР имеют ключевое значение для кон-
троля качества АЛК и её производных.
В схеме получения АЛК последней стадией является каталитическое восстанов-
ление метил-5-нитролевулината водородом над палладием, причём недостаточная ак-
тивность катализатора может привести к образованию заметного количества побоч-
ного продукта – хлорида аммония. Если его содержание в АЛК превышает 5%, то
требуется корректировка технологического процесса очистки. Показано, что наиболее
достоверную информацию о количественном содержании NH4Cl даёт метод 1Н-ЯМР.
В настоящее время метод 1Н-ЯМР используется при технологическом контроле про-
цесса получения технической АЛК.
Исследуются возможности применения 1,4-13С2 и 1,4,5-13С3 изотопомеров АЛК
для эффективной диагностики онкологических заболеваний методом МРТ. Изотоп-
ный состав является обязательной характеристикой изотопно-меченых лекарственных
13
препаратов. Методы С- и 1Н-ЯМР позволили количественно определить изотопный
состав АЛК, обогащённой изотопом 13С.
Применение методов ЯМР для количественной оценки содержания исходной
АЛК в гексиловом эфире АЛК (также используемом в практике флуоресцентной ди-
агностики) показало, что порог надёжного определения примеси АЛК в целевом про-
дукте составляет 0,05%.
Таким образом, метод ЯМР является надёжным инструментом контроля качест-
ва препарата АЛАСЕНС® и его производных.

25
 ИММОБИЛИЗАЦИЯ ТЕРРИЛИТИНА В ПОЛИМЕРНЫЕ МАТРИЦЫ,
ПОЛУЧЕННЫЕ МЕТОДОМ РАДИАЦИОННОГО СШИВАНИЯ

Смагина В. В., Герасимова Е. Г, Авраменко Г. В.

Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева

К настоящему времени выполнен большой цикл исследований по разработке

новых ранозаживляющих средств на основе ферментов. В связи с этим очевидна ак-
туальность внедрения в практику лечебно-профилактических средств, содержащих
ферменты с многоплановым пролонгированным действием, которые можно приме-
нять длительное время. Таким требованиям отвечают препараты системной энзимо-
терапии, относящиеся к группе гидролаз микробного происхождения (террилитин).
Важным этапом при разработке гидрогелей и плёнок медицинского назначения
является определение способа иммобилизации и изучение его воздействия на актив-
ность ферментов и стабильность под воздействием рН среды, температуры, ингиби-
торов, после процесса стерилизации [1].
В данной работе рассматриваются гидрогелевые матрицы, полученные путём
радиационного сшивания.
Исследовано воздействие ионизирующего излучения на фармакокинетические
и физико-химические свойства полимерной матрицы, содержащей поливинилпирро-
лидон, полиэлектролит, в качестве носителя – производные целлюлозы с включённым
в него протеолитическим ферментом террилитином. Облучение образцов проводили
на γ-установке РХМ-γ-20 в диапазоне доз от 15 до 35 кГр. Для облучённых образцов
выход гель-фракции определяли с помощью золь-гель анализа.
Коэффициент равновесного набухания определяли как долю воды в облучён-
ном геле в условиях равновесного набухания:
Qs = Мsw – Мdry / Мdry;
долю гель-фракции определяли по следующей формуле:
gel(%) = Мdry / Мпол.·100%,
где Мsw – масса набухшего геля, г; Мdry – масса сухого геля после вымывания золь-
фракции, г; Мпол. – навеска полимеров, г.

26
 Величиной, характеризующей плотность радиационно-химического сшивания,
является коэффициент равновесного набухания полученной полимерной сетки [2]. На
рисунке 1 изображена зависимость коэффициента равновесного набухания от дозы
облучения для образцов различного состава.

90
ГЭЦ +ПВП
80 ГЭЦ+ПВП+0,2АЛГ

70 ГЕЦ+ПВП+0.5АЛГ
ГПЦ+ПВП
60
50
Qs

40
30
20
10
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40
D, кГр

Рисунок 1 – Зависимость коэффициента равновесного набухания от дозы облучения

для образцов различного состава

Плотность поперечных сшивок напрямую влияет на такие свойства гидрогелей,

как механическая прочность и эластичность, проницаемость и коэффициент диффу-
зии активного компонента [3]. В присутствии полиэлектролита (альгината натрия)
относительная плотность поперечных сшивок уменьшается и способность гидрогеля
к набуханию возрастает, что позволяет получить более пористую структуру. Также по
полученным данным видно, что при увеличении дозы облучения в диапазоне доз от
15 до 35 кГр способность гидрогеля к набуханию снижается. Эти данные коррелиру-
ют с результатами, полученными при определении активности иммобилизованного
террилитина в образцах 1-5, облучённых дозой 25 кГр, и зависимости активности от

27
 рН среды и температуры. Диффузия фермента к субстрату повышалась с увеличением
содержания альгината натрия. Определение активности фермента проводили методом
Куница (модификационный метод с применением казеина в качестве субстрата).

100

80
нативный (5мг/мл)
А / А m ax , %

60
ПВП+ГЭЦ

40 ПВП+ГЭЦ+Альгинат0,3

ПВП+ГЭЦ+Альгинат0,5
20

0
4 5 6 7 8 9 10
рН

Рисунок 2 – Зависимость протеолитиче- Рисунок 3 – Зависимость протеолитической

ской активности иммобилизованного тер- активности иммобилизованного террилитина
рилитина от температуры от pH

Рисунок 3 – Сравнительная диаграмма протеолитической активности террилитина до

и после облучения. 1 – ПВП1+ГЭЦ+АЛГ 0,3; 2 – ПВП+ГЭЦ+АЛГ 0,5; 3 – ПВП+ГЭЦ;
4 – ПВП+ГЭЦ+АЛГ 0,3; 5 – ПВП+ГЭЦ+АЛГ 0,5.

28
 Диффузия фермента к субстрату повышалась с увеличением содержания аль-
гината натрия, активность иммобилизованного террилитина сохранялась на высоком
уровне. Предположительно иммобилизация фермента предотвращает радиационно-
химическую деструкцию белка за счёт миграции свободной валентности на полимер-
носитель по эстафетно-диффузионному механизму.

Выводы:
1. Высокая плотность поперечных сшивок приводит к более высокой механиче-
ской прочности, но в то же время и к понижению эластичности и набухания
гидрогеля, а также к затруднению диффузии фермента к субстрату и возмож-
ному снижению активности препарата. В итоге важно достичь оптимального
значения плотности радиационно-химического сшивания.
2. Активность облучённого иммобилизованного террилитина сохраняется на вы-
соком уровне для образцов содержащих альгинат натрия. Предположительно
иммобилизация фермента предотвращает радиационно-химическую деструк-
цию белка за счёт миграции свободной валентности на полимер-носитель по
эстафетно-диффузионному механизму.

ЛИТЕРАТУРА
1. Березин И. В., Мартинек К. Химическая энзимология. – М.: Изд. М. ун-та,
1983. – 278 с.
2. Пикаев А. К. Современная радиационная химия. – М., «Наука», 1987. -448 с.
3. Кудряшов Ю. Б. Радиационная биофизика (ионизирующее излучение). – М.:
ФИЗМАТЛИТ, 2003. -442 с.

29
 МОДЕЛИРОВАНИЕ СТРАТЕГИИ ФЕРМЕНТАЦИИ
РЕКОМБИНАНТНОГО ШТАММА ПРОДУЦЕНТА E. COLI ДЛЯ
ПРОДУКЦИИ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЙ ПЛАЗМИДНОЙ ДНК pCMV-VEGF165
1
Шендер В. О., 2Косарев С. А., 1,2Воробьёв И. И.
1
ФГБУ Гематологический научный центр МЗСР РФ,
2
УРАН Институт биоорганической химии им. академиков М. М. Шемякина и Ю. А.
Овчинникова РАН

Разработка и производство генно-терапевтических лекарственных препаратов и

вакцин на основе плазмидных ДНК являются одним из наиболее быстро растущих
сегментов в области биотехнологии. До недавнего времени, основные усилия при
разработке процесса получения плазмидных ДНК были сконцентрированы на стадиях
выделения и очистки. Однако ферментация продуцентов плазмидных ДНК играет
ключевую роль, так как посредством оптимизации условий роста плазмид-
продуцирующих штаммов, могут быть достигнуты значительные улучшения в увели-
чении выхода биомассы, количества и качества плазмиды [1].
Целью настоящей работы явилось моделирование стратегии ферментации для
получения культуры с высокой плотностью, продуцирующей плазмидную ДНК.
В работе использовали штамм E. coli TOP10/pCMV-VEGF165 – продуцент те-
рапевтической плазмидной ДНК, кодирующей фактор роста эндотелия сосудов.
Плазмидная конструкция, использованная для трансформации штамма E. coli TOP10,
любезно предоставлена Киселёвым С.Л.
Нами было изучено влияние трёх факторов на состояние бактериальной куль-
туры и на выход плазмидной продукции: 1) оптимизация состава питательной среды;
2) варьирование температуры в процессе ферментации (30-42○С); 3) ведение фермен-
тации с экспоненциально возрастающей подачей питающего раствора.
В результате проведённых экспериментов и математических расчетов был раз-
работан оптимальный состав питательной полусинтетической среды, содержащей ис-
точники азота и углерода, соли, витамины и следовые количества солей металлов, не-
обходимых для плазмидной продукции. Было показано, что при использовании стра-
тегии ферментации с экспоненциальной подпиткой при сниженной температуре
(30°С), удельная скорость роста бактериальной культуры поддерживалась на задан-

30
ном уровне (0,30±0,02) ч-1, количество плазмиды в клетках оставалось неизменным,
что позволило получить культуру с высокой плотностью 35 о. е. (520 нм). Термоин-
дукция, проведённая на десятом часу культивирования, способствовала увеличению
количества плазмиды в клетках. При 13-ти часовой ферментации культуры при по-
ниженной температуре с экспоненциально возрастающей подпиткой, с термоиндук-
цией от 30 до 42°С (после 10 часов ферментации) количество биомассы составило
25 г/л, выход плазмидной ДНК – 66 мг/л, удельный выход плазмиды составил
2,64 мг/г биомассы, что в 5 раз больше по сравнению с обычной периодической фер-
ментацией.
Таким образом, корректное регулирование температуры с экспоненциальной
подачей лимитирующего компонента при использовании сбалансированной полусин-
тетической среды позволяет увеличить выход плазмидной ДНК и сократить затраты
на производство единицы продукции.

ЛИТЕРАТУРА

1. Aaron E. Carnes. Fermentation Design for the Manufacture of the Therapeutic Plasmid
DNA. BioProcess International. October 2005: 3 – 9.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЕТЕКТОРА МНОГОУГЛОВОГО ЛАЗЕРНОГО

СВЕТОРАССЕЯНИЯ ДЛЯ КОНТРОЛЯ ПРЕПАРАТОВ ПЛАЗМЫ КРОВИ

Флегонтов П. А., Михайлова Е. В., Скоцеляс Е. Д., Карякин А. В.

ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России

125167, г. Москва, Новый Зыковский проезд, д. 4

Для характеристики молекулярно-массового распределения в препаратах альбу-

мина и иммуноглобулина различных производителей в соответствии с требованиями
ЕФ используется метод эксклюзионной ВЭЖХ с УФ-детектированием фракций при
280 нм [1, 2]. Данная методика не предполагает определение молекулярных масс

31
(ММ) хроматографических фракций. В настоящей работе хроматографическая систе-
ма, рекомендуемая ЕФ, была дополнена детектором многоуглового лазерного свето-
рассеяния (МУЛС) и дифференциальным рефрактометром (ДР). Сигнал МУЛС прямо
пропорционален ММ и концентрации молекул, что делает его более чувствительным
по сравнению с концентрационными детекторами (УФ и ДР). ММ рассчитывали по
данным МУЛС, ДР и УФ детекторов с помощью программы Astra (Wyatt Technology),
а также по «трёхдетекторовому» методу [3] с использованием белковых стандартов
(MP Biomedicals, Inc).
Для анализа были использованы коммерческие препараты альбумина и имму-
ноглобулина в пределах их сроков годности различных отечественных и зарубежных
производителей (Biotest, Baxter, Talecris Biotherapeutics, Микроген, ОСПК Нижний
Новгород, ОСПК Самара, ОСПК Тюмень, Иммуно-Гем), соответствующие требова-
ниям ЕФ.
На хроматограммах препаратов альбумина УФ, ДР и МУЛС-детекторами выяв-
лены 3 пика с ММ: 63-76 кДа (мономеры, 88-97%), 130-170 кДа (димеры, 1-8%) и
свыше 1 000 кДа (полимеры и агрегаты, 0,2-4%). Во всех исследованных препаратах
альбумина не выявлено пиков в области молекулярных масс от 200 до 400 кДа, соот-
ветствующих тримеру и тетрамеру.
В препаратах иммуноглобулинов для внутримышечного и внутривенного введе-
ния УФ, ДР и МУЛС-детекторами выявлены 4 фракции с ММ: 87-120 кДа (фрагмен-
ты, 1-3%), 140-170 кДа (мономеры, 80-94%), 300-330 кДа (димеры, 5-18%) и свыше
1 000 кДа (агрегаты, 0,4-2%). В комплексном препарате иммуноглобулина для перо-
рального применения, представляющем собой смесь иммуноглобулинов различных
классов, отмечен дополнительный пик с ММ 700 кДа. Распределение по фракциям
составляло 55-11-7-7-20%, соответственно.
В препаратах иммуноглобулинов детектор МУЛС выявляет высокомолекуляр-
ные примеси, не регистрируемые ДР и УФ-детекторами.

ЛИТЕРАТУРА

1. Monograph 01/2008:0255 EP 6.0

2. Monograph 01/2009:0918 EP 6.3
3. Jie Wen, Tsutomu Arakawa, John S. Philo. Analytical Biochemistry 240, 155-166 (1996)

32
 РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ МЯГКОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДЛЯ
ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ДЕГЕНЕРАТИВНО-ДИСТРОФИЧЕСКИХ
ЗАБОЛЕВАНИЙ СУСТАВОВ

Мочалова К. Р., Авраменко Г. В., Фрумин Л. Е., Хлябич Г. Н.

ФГУ Государственный институт кровезаменителей и медицинских препаратов,

Российский Химико-Технологический Университет им. Д. И. Менделеева.

Цель: разработать технологию мягкой лекарственной формы (МЛФ) на основе

хондроитинсульфата для лечения и профилактики дегенеративно-дистрофических за-
болеваний суставов.

Материалы и методы: основным действующим веществом явился гетероген-

ный гликозаминогликан [1]. Для изготовления МЛФ с хондроитинсульфатом в каче-
стве активного компонента использовались гидрофильные и дифильные основы. В
качестве основы использовали в разных соотношениях карбопол, натросол, метил-
целлюлозу, вазелиновое масло. Вспомогательными веществами являлись: глицерин,
ДМСО, диметикон, эмульгатор Т2. Для определения оптимального состава были при-
готовлены 10 композиций, которые подвергались биофармацевтическим и технологи-
ческим исследованиям. С целью оценки высвобождения действующего вещества бы-
ло определено сравнительное содержание хондроитинсульфата натрия методом тит-
рования с цетилпиридинием хлоридом [2] в водных извлечениях. Упруго-вязкостные
свойства мазей изучали при помощи ротационного вискозиметра «Реотест-2» с ци-
линдрическим устройством.

Результаты: по результатам биофармацевтических исследований наибольшей

степенью высвобождения обладает МЛФ на основе карбопола, натросола, которые
высвобождают через 40 мин 60,7% действующего вещества, а через 40 мин – около
90% . Реологические исследования показали, что исследуемые МЛФ обладают тиксо-
тропными свойствами, что обеспечивает оптимальную растекаемость, хорошую нама-
зываемость и способность выдавливания из туб. Композиции на дифильной основе
обладают улучшенными органолептическими свойствами. Все исследуемые образцы
стабильны при хранении в естественных условиях и при пониженной температуре.

33
 Выводы: в результате проведённых исследований разработана технология геля
с хондроитинсульфатом, биофармацевтическими и реологическими исследованиями
подтвержден состав МЛФ с хондроитинсульфатом в качестве активного компонента.

ЛИТЕРАТУРА
1. Северин Е. С. Биохимия: Учебник / Под ред Е. С. Северина. 3-е издание, испр.
– М.: ГЭОТАР-Медиа, 2005. –784 с.
2. British Pharmocopoeia 2007.

ПОЛУЧЕНИЕ И ХАРАКТЕРИСТИКИ ХИТОЗАНОВЫХ МИКРОСФЕР

С ВКЛЮЧЁННЫМ ИНСУЛИНОМ

Седякина Н. Е., Силаева А. О., Авраменко Г. В.

Российский химико-технологический университет им. Д. И. Менделеева

Хитозан – биосовместимый и биодеградируемый полимер, обладающий мукоад-

гезивными свойствами. Хитозановые микрокапсулы широко применяются для созда-
ния контролируемого высвобождения пептидных лекарств, поскольку они имеют
значительную адгезию к слизистой тонкого кишечника и хорошо проникают через
биологические поверхности.
Микросферы хитозана с включённым инсулином для пероральной доставки
белка были приготовлены на основе обратной эмульсии вода/парафиновое масло с
последующим отверждением хитозана лимонной кислотой. Раствор хитозана в 2%-
ной уксусной кислоте приливали к раствору ПАВ в парафиновом масле и перемеши-
вали на магнитной мешалке при 60°С. В качестве ПАВ использовали полиглицерил-6-
полирицинолеат (Nikkol Hexaglyn PR-15, Nikko Chemicals Co). К полученной эмуль-
сии добавляли по каплям раствор сшивающего агента для отверждения микросфер, и
перемешивали смесь в течение 5,5 часов при нагревании. В ходе приготовления варь-
ировали такие параметры, как соотношение водной и масляной фаз в эмульсии и кон-

34
центрация растворов хитозана. Были оценены характеристики полученных микро-
сфер: выход от теоретического, морфология частиц, размеры, распределение по раз-
мерам, полидисперсность и эффективность включения белка.
На основании полученных результатов можно говорить о том, что соотношение
водной и масляной фаз в исходной эмульсии в значительной степени влияет на харак-
теристики хитозановых микросфер. Так, с уменьшением содержания воды в системе
от 90% до 20% масс. процент включения белка в микросферы повышается от 17% до
81,43%. Также было показано, что эффективность включения инсулина зависит от со-
держания полимера в системе. При увеличении концентрации полимера в растворе
уксусной кислоты от 0,05% масс до 0,1% масс. процент включения возрастает от 71%
до 93,66%, дальнейшее увеличение концентрации до 0,4% масс. снижает процент
включения до 29,49%.
Было показано, что применение полиглицерил-6-полирицинолеата позволило
значительно увеличить эффективность включения белка в микросферы по сравнению
с образцами, полученными тем же методом, в процессе приготовления которых ис-
пользовали эмульгатор спэн-40 (Span-40) [1].

ЛИТЕРАТУРА

1. Varshosaz J., Alinagari R. Effect of citric acid as cross-linking agent on insulin loaded
chitosan microspheres // Iranian Polymer Journal, 2005, 14(7). - P. 647-656.

35
 ВЫЯВЛЕНИЕ ПРИМЕСИ ЭУКАРИОТИЧЕСКОЙ ДНК В ПРЕПАРАТАХ
НА ОСНОВЕ РЕКОМБИНАНТНЫХ БЕЛКОВ МЕТОДОМ ПЦР В РЕАЛЬНОМ
ВРЕМЕНИ

Насибулина Н. В., Февралёва И. С., Судариков А. Б., Карякин А. В.

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Гематологический научный

центр» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Рекомбинантные белковые препараты в современной медицине получили широ-

кое распространение, в частности, как препараты для лечения гемофилии, анемии,
диабета, вирусных инфекций и др. В качестве штамм-продуцентов в производстве
препаратов данного ряда являются чаще всего клетки хомяка и человека. Проблема
определения содержания остаточной ДНК штамм-продуцента как показателя чистоты
препаратов решается методом дот-гибридизации, однако, в европейских центрах по-
следнее время всё чаще пользуются метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Нормы для этого показателя выбираются для каждого конкретного препарата инди-
видуально, однако существуют и международные нормы.
В данной работе была поставлена задача разработать универсальную методику
для выявления остаточной ДНК при применении в качестве продуцентов эукариоти-
ческих клеток. Для этого с помощью электронной базы BLAST в последовательно-
стях эукариотических ДНК был найден общий участок ДНК для большинства эука-
риотов, разработан и синтезирован набор праймеров и флюоресцентная гибридизаци-
онная проба для выявления этого участка с помощью ПЦР в реальном времени.
Были отработаны оптимальные методы выделения ДНК из препарата рекомби-
нантного белка, в котором следует выявить остаточную ДНК, отработаны условия
прохождения ПЦР в реальном времени концентрации праймеров и пробы, параметры
циклов ПЦР. Для контроля за успешным прохождением всех стадий в систему на на-
чальной стадии был введён внутренний положительный контроль, представляющий
из себя плазмиду со вставленным охарактеризованным участком неэукариотической
ДНК, выявляемый параллельно с искомой ДНК в ПЦР в реальном времени.
На сегодняшний день такой подход не имеет аналогов. Мы полагаем, что после
доработки тест-система будет внедрена в практику для выявления остаточной ДНК в
препаратах, производимых эукариотическими клетками-продуцентами.

36
 ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА МИКРОЧАСТИЦ РИФАМПИЦИНА
С ПОЛИЛАКТИДНОЙ ОБОЛОЧКОЙ

Сардушкин М. В., Киенская К. И., Авраменко Г. В.

Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева

В настоящее время активно позиционируется возможность ингаляционного

применения микрокапсулированных лекарственных средств в лечении инфекционных
заболеваний лёгких. Для микрокапсулированных систем важными характеристиками
являются степень вовлечения и кинетические параметры высвобождения инкапсули-
рованного препарата. Кроме того, при ингаляционном пути введения микрокапсули-
рованных препаратов значимым параметром, определяющим скорость и место оседа-
ния микрочастиц в лёгких, является их размер. Известно, что частицы с аэродинами-
ческим диаметром более 5 мкм оседают в верхних дыхательных путях, с размерами 1-
2 мкм достигают поверхности альвеол, а с диаметром менее 0,5 мкм не успевают
осесть за фазу вдоха и преимущественно выводятся из лёгких с выдохом [1].
В настоящей работе в качестве антибактериального агента был выбран практи-
чески не растворимый в воде полусинтетический антибиотик рифампицин (РФП),
входящий в группу препаратов I ряда в лечения туберкулёза [2]. В качестве плёнко-
образующего материала использовался синтетический полимер – полилактид (ПЛА) с
молекулярной массой 9100 и 30500 Да. ПЛА – биосовместимый и биодеградируемый
полимер, характеризующийся отсутствием токсического эффекта и аллергенности, не
вызывающий воспалительных реакций [3]. Микрокапсулирование РФП проводили
методом простой коацервации, растворяя активный компонент и плёнкообразователь
в хлороформе с последующим эмульгированием в водных растворах поливинилового
спирта (ПВС) или ди-2-этилгексилсульфосукцината натрия (АОТ). Предварительны-
ми опытами были установлены оптимальные условия микрокапсулирования РФП.
Выявлено, что степень вовлечения активного компонента (эффективность микрокап-
сулирования) выше при использовании ПВС в качестве стабилизатора, и зависит от
молекулярной массы плёнкообразователя. Максимальная эффективность микрокап-
сулирования (17%) была достигнута при использовании ПЛА с молекулярной массой
30500 Да. Диаметр полученных микрочастиц варьировал от 0,5 мкм до 5 мкм, основ-
ная фракция 0,5-1,0 мкм.

37
 В работе изучалась кинетика высвобождения и оценивалось суточное высво-
бождение РФП из микрочастиц в физиологический раствор (pH 6,7), цитратный
(pH 4,0) и фосфатный (pH 7,4) буферные растворы. Кинетика высвобождения и эф-
фективность микрокапсулирования определялась спектрофотометрическим методом.
Установлено, что кинетика высвобождения зависит от значения pH среды. За 25 суток
эксперимента количество высвободившегося РФП в физиологический и фосфатный
буферный растворы в два раза превысило этот показатель в цитратный буфер. Кине-
тика высвобождения РФП из микрокапсул с оболочкой из ПЛА (30500 Да) схожа с
таковой для ПЛА (9100 Да), но характеризуется значительно меньшими количествами
высвобожденного РФП.

ЛИТЕРАТУРА

1. Tomoda K., Makino K. Effects of lung surfactants on rifampicin release rate from
monodisperse rifampicin-loaded PLGA microspheres // Colloids and Surfaces B: Biointer-
faces. – 2007. – Vol. 55. – P. 115–124.
2. Mariappan T., Singh S. Positioning of rifampicin in the biopharmaceutсis classifi-
cation system (BCS) // Journal of Controlled Release. – 2008. – Vol.129. – P. 93-99.
3. Kumari A., Yadav S.K., Yadav S.C. Biodegradable polymeric nanoparticles based
drug delivery systems // Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. – 2008. – Vol. 75. – P. 1-
18.

38
 РАЗРАБОТКА НОВЫХ ТРАНСПОРТНЫХ СИСТЕМ ДЛЯ ГИДРОФОБНЫХ
ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ МОДИФИЦИРОВАННОЙ
АМИЛОЗЫ

Ерёмин Д. В., Кедик С. А., Панов А. В.

Московская Государственная Академия Тонкой Химической Технологии

имени М. В. Ломоносова (МИТХТ)

Способность амилозы образовывать комплексы включения с различными гид-

рофобными соединениями позволяет создавать на её основе системы доставки лекар-
ственных веществ. Применение в качестве молекулы «хозяина» нативной амилозы
ограничено в виду её низкой растворимости в воде, а также из-за склонности к обра-
зованию ассоциатов с последующим выпадением осадка при хранении. Для увеличе-
ния растворимости и изучения комплексообразующей способности различных моди-
фикаций амилозы были синтезированы серии её гидроксиэтилированных и гидроли-
зованных образцов. Гидроксиэтилирование проводили до степеней замещения 0,15,
0,25 и 0,30. Полученные образцы подвергали частичному кислотному гидролизу до
значения средневесовой молекулярной массы 45, 30 и 25 кДа. Теоретические характе-
ристики образцов амилозы были подтверждены методами ЯМР и ГПХ.
Комплексообразующую способность модифицированной амилозы исследовали
с использованием в качестве молекулы «гостя» 2,6-изопропилфенола (пропофол). Об-
разование комплекса включения регистрировали по изменению спектра поглощения.
Наибольшая степень включения была получена на образце гидролизованной гидро-
ксиэтилированной амилозы (ГГА) с характеристиками 45/0,3. При увеличении соот-
ношения ГГА к пропофолу от 1:1 до 10:1 (осново-моль:моль) интенсивность полосы
поглощения пропофола (430 нм) увеличивается в 16,7 раз, что свидетельствует об
увеличении его концентрации в растворе.
Наблюдаемое падение интенсивности данной полосы поглощения с течением
времени при добавлении гидролитического фермента α-амилазы подтверждает, что
увеличение концентрации пропофола в воде происходило за счёт образования соеди-
нения включения. Для исключения возможности увеличения растворимости пропо-
фола в воде за счёт сольватационных процессов с модифицированной амилозой был
проведён эксперимент по растворению пропофола в водном растворе гидроксиэтили-

39
рованного крахмала. Анализ спектра поглощения полученного раствора показал, что
пропофол растворяется в растворе ГЭК в тех же количествах, что и в воде.
На основании полученных данных показана принципиальная возможность соз-
дания с использованием ГГА новых транспортных систем для гидрофобных лекарст-
венных средств.

ВЛИЯНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ PLGA НА РАЗМЕР МИКРОСФЕР И СТЕПЕНЬ

ВКЛЮЧЕНИЯ НИКОТИНАМИДА В НИХ
1
Сапельников М. Д., 2Кедик С. А., 1,2Панов А. В., 2Петрова Е. А., 2Тихонова Н. В.

1 – Российский Химико-Технологический Университет имени Д.И. Менделеева,

2 – Московская Государственная Академия Тонкой Химической Технологии
имени М. В. Ломоносова (МИТХТ)

В настоящее время с целью модификации эффектов лекарственных веществ всё

большую актуальность приобретает создание новых лекарственных форм, обеспечи-
вающих как направленность действия фармакологически активных веществ, так и оп-
тимальные параметры профиля высвобождения. Одним из перспективных направле-
ний является создание сферических носителей, характеризующихся микроразмерно-
стью и устойчивостью системы лекарственных и вспомогательных веществ. С целью
увеличения стабильности и активности данной системы целесообразным является
изучения влияния технологических факторов на размер микросфер и степень включе-
ния лекарственного вещества.
В качестве субстанции для инкапсуляции в данной работе используется нико-
тинамид (витамин PP, амид пиридин-3-карбоновой кислоты), который применяется
для предупреждения и лечения пеллагры.
Цель работы заключалась в определении влияния концентрации PLGA (сопо-
лимер молочной и гликолевой кислот) на размер частиц и степень включения нико-
тинамида в микросферы.

40
 В работе были использованы: PLGA с соотношением мономеров 50:50 (Boe-
hringer Ingelheim); хлористый метилен; никотинамид (Sigma No. N3376), который
проявляет ярко выраженные гидрофильные свойства. В качестве стабилизатора ис-
пользовался поливиниловый спирт (молекулярная масса 16 кДа).
Для получения микросфер использовался метод диффузии растворителя. Нико-
тинамид инкапсулировался в полимер по технологии двойного эмульгирования. Раз-
мер частиц определялся методом лазерного светорассеивания. Степень включения
модельного вещества в микросферы определялась методом УФ-спектрофотометрии
на приборе СФ-104.
Переменным параметром при приготовлении микросфер была концентрация
PLGA. Эмульгирование проводили на лопастной мешалке при скорости вращения
400 об/мин, в качестве внешней среды использовался гидроколлоид (метилцеллюло-
за), концентрация которого в растворе составляла 2%. Вязкость раствора метилцел-
люлозы составила 90 сПа. Концентрация растворов стабилизатора составила 2%.
Раствор никотинамида (концентрация раствора 60%) эмульгировался с раство-
рами PLGA в хлористом метилене различных концентраций на гомогенизаторе при
скорости вращения 9000 об/мин. Первичную эмульсию (в/м) эмульгировали с раство-
ром гидроколлоида на лопастной мешалке. Полученные микросферы выдерживались
в стакане с водой очищенной в течение 16 ч при определённом температурном режи-
ме. Требуемые параметры для суспензии для инъекционного введения достигнуты
при использовании PLGA в концентрации 34%. Размер полученных частиц составил
60 мкм, степень включения никотинамида 79,41%.
Таким образом, оптимальная концентрация PLGA, необходимая для достиже-
ния требуемого размера частиц и степени включения составила 34%.

41
ПОДХОДЫ К СОЗДАНИЮ НОВЫХ КОМПОЗИЦИЙ ГЛАЗНЫХ КАПЕЛЬ НА
ОСНОВЕ ТАУРИНА И ПОЛИГЕКСАМЕТИЛЕНГУАНИДИНА

Ха Кам Ань, Кедик С. А., Седишев И. П., Панов А. В., Денисова С. В., Пулина Е. В.

Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М.В. Ло-

моносова (МИТХТ)

В настоящее время широко применяются производные полигексаметиленгуа-

нидина (ПГМГ) в качестве биоцидных средств. Особенностью этих полимеров явля-
ется их высокая эффективность (по отношению к подавляющему большинству пато-
генных микроорганизмов и спор), низкая токсичность, пролонгированное действие и
отсутствие резистентости у микроорганизмов к этому соединению. Вместе с тем, на-
ша попытка применения промышленно производимого гидрохлорида ПГМГ
(ПОЛИСЕПТ) в составе глазных капель была неудачной, поскольку такие капли вы-
зывали заметное раздражение глаз у опытной партии кроликов. Этот результат мы
связываем с наличием (порядка 1%) остаточного высокотоксичного гексаметилен-
диамина (ГМДА) в образцах ПОЛИСЕПТА.
На первом этапе нами была разработана технология получения высокоочищен-
ного сукцината ПГМГ. Эта технология предусматривала получение промежуточного
основания ПГМГ, на этой стадии обеспечивалась основная очистка полимера от ток-
сичных низкомолекулярных примесей. Затем проводили взаимодействие с янтарной
кислотой с получением целевого сукцината ПГМГ. Продукт содержал менее 0,1% ос-
таточного хлора, менее 0,01% ГМДА, более 95% основного вещества. Следует отме-
тить, что увеличение загрузок от десятков граммов до килограмма не сказалось на ка-
честве получаемого продукта. В настоящее время ведётся подготовка технологиче-
ского регламента и проекта ФСП.
Разработка состава глазных капель предусматривала использование двух суб-
станций: сукцината ПГМГ (антисептик) и таурина (2-аминоэтансульфокислота). По-
следний входит в состав препарата «Тауфон» и используется в терапии глаукомы и
катаракты. Сочетание этих соединений в составе капель может обеспечить пролонга-
цию действия и расширение области применение препарата. В качестве вспомога-
тельных компонентов использовали фосфатный буфер и приозводные целлюлозы.
Фосфатный буфер, кроме получения оптимального значения рН~7, обеспечивал вме-

42
сте с таурином оптимальное значение осмолярности, равное 308 мОсмоль/л. Кроме
всего прочего, такой состав должен усиливать работу К+\Na+ насоса и проникновение
действующих веществ глазных капель в клетки и ткани. Введение 1-3% гидроксипро-
пропилметилцеллюлозы (ГПМЦ) марки НМ3 обеспечивало оптимальное значение
динамической вязкости для длительного и эффективного контакта раствора с тканями
глаза. Предлагаемый состав, ко всему прочему, обладает коэффициентом преломле-
ния порядка nD20~ 1,344, близким по значению для слёзной жидкости. Полученные
составы новых глазных капель проходят доклиническое испытание.

43