27

Глава 3. Токсикометрия
Токсичность - свойство химических веществ, которое можно
измерить.
Измерение токсичности означает определение КОЛИЧЕСТВА вещества,
действуя в котором оно вызывают различные формы токсического процесса.
Чем в меньшем количестве вещество инициирует токсический процесс, тем оно
токсичнее.
Раздел токсикологии, в рамках которого оценивается токсичность,
называется “токсикометрия”. Выделяют теоретическую и практическую
токсикометрию. Теоретическая токсикометрия - область токсикологии
разрабатывающая и совершенствующая методы количественной оценки
токсичности химических веществ. Практическая токсикометрия - это
повседневная деятельность токсикологов по определению количественных
характеристик токсичности различных веществ.
Определение количественных характеристик токсичности вещества
осуществляется в экспериментах на лабораторных животных, а затем
уточняется (применительно к человеку) в условиях клиники и/или в ходе
популяционных исследований (эпидемиологические методы исследования).
Впервые количественно оценивать токсичность веществ в опытах на
экспериментальных животных предложил J.W. Trevan в 1927 г.
В процессе токсикометрических исследований определяют токсические
дозы, токсические концентрации, токсодозы, действуя в которых вещества
вызывают различные неблагоприятные эффекты (нарушают
работоспособность, вызывают заболевание или смерть и т.д.).
Количество вещества, попавшее во внутренние среды организма и
вызвавшее токсический эффект, называется токсической дозой (D).
Токсическая доза выражается в единицах массы токсиканта на единицу массы
организма (мг/кг).
Количество вещества, находящееся в единице объема (массы) некоего
объекта окружающей среды (воды, воздуха, почвы), при контакте с которым
развивается токсический эффект, называется токсической концентрацией
(С). Токсическая концентрация выражается в единицах массы токсиканта на
единицу объема среды (воздуха, воды) - (мг/л; г/м 3) или единицу массы среды
(почвы, продовольствия) - (мг/кг).
Для характеристики токсичности веществ, действующих в виде пара, газа
или аэрозоля часто используют величину, обозначаемую как токсодоза (W).
Эта величина учитывает не только содержание токсиканта в воздухе
(токсическую концентрацию), но и время пребывания человека в зараженной
атмосфере. Расчет величин токсодозы предложен немецким химиком Габером в
начале 20-го века, для оценки токсичности боевых отравляющих веществ:

W = ct , где
W - токсодоза,
 28
с - концентрация вещества в окружающем воздухе,
t - время действия вещества.

При расчете токсодозы допускается, что одинаковый эффект наблюдается

при кратковременном действии токсиканта в высокой концентрации и
продолжительной аппликации малых концентраций вещества. Единицы
измерения токсодозы - мг мин/м3. Так, токсодоза фосгена по Габеру - 450 мг
мин/м3; т.е. одинаковый эффект следует ожидать при ингаляции в течение 1
мин вещества в концентрации 450 мг/м3 и 10 мин - 45 мг/м3.
В военной токсикологии, как правило, оценивают три уровня эффектов,
развивающихся при действия токсиканта на организм:
- смертельный: характеризуется величиной летальной дозы
(концентрации) - LD(LC);
- непереносимый: характеризуется величиной дозы (концентрации),
вызывающей существенное нарушение дееспособности (транзиторную
токсическую реакцию) - ID(IС);
- пороговый: характеризуется дозой (концентрацией), вызывающей
начальные проявления действия токсиканта - Lim D (Lim C).
В промышленной, сельскохозяйственной, коммунальной токсикологии,
при оценке токсичности веществ иногда измеряют дозы и концентрации, в
которых исследуемый агент вызывает самые разные эффекты
(кардиотоксический, гепатотоксический, нефротоксический,
иммунотоксический и т.д.). Доза (концентрация) вещества, вызывающая любое,
оцениваемое исследователем неблагоприятное действие, обозначается, как
эффективная доза (ЕD).
Поскольку живым организмам свойственна внутривидовая изменчивость
(в том числе проявляющаяся и неодинаковой чувствительностью к токсиканту),
для характеристики смертельной, непереносимой, пороговой дозы
(концентрации) используют специальные методы постановки эксперимента и
оценки полученных результатов. В основе методов определения токсичности
лежит нахождение зависимости “доза - эффект”.
Наиболее распространенный способ определения зависимости “доза-
эффект” состоит в формировании в группе подопытных животных нескольких
подгрупп. Животным, входящим в подгруппу токсикант вводят в одинаковой
дозе, а в каждой последующей подгруппе доза увеличивается. Формирование
подгрупп должно осуществляться методом случайных выборок. С увеличением
дозы будет увеличиваться часть животных в каждой из подгрупп, у которых
развился оцениваемый эффект. Получаемую при этом зависимость можно
представить в виде кумулятивной кривой частот распределения, где количество
животных с положительной реакцией на токсикант (часть общего количества
животных в подгруппе) является функцией дозы (рисунок 2).
 29
эффект(%)
гипореактивность
100

наклон
50 средний ответ (ЕД50 )

основной ответ

0
гиперреактивность logД

Рисунок 2. Типичная кривая “доза-эффект” для группы животных,

симметричная относительно средней точки (50 % ответ). Основные
значения ответа группы на токсикант сосредоточены вокруг среднего значения.

В большинстве случаев график представляет собой S-образную кривую

log-нормального распределения, симметричную относительно средней точки.
Можно выделить ряд важных характеристик этой кривой, которые
целесообразно учитывать при интерпретации получаемых результатов.
1. Центральная точка кривой (значение 50% ответа) или
среднеэффективная доза (ЕD50) - удобный способ характеристики токсичности
вещества. Если оцениваемый эффект - летальность животных в группе, эта
точка обозначается, как среднесмертельная доза. Среднесмертельная доза
является наиболее точной количественной характеристикой токсичности
любого вещества, поскольку значение 95% доверительного интервала здесь
минимальны, а оцениваемый эффект - несомненен (гибель).
2. Небольшая часть популяции в левой части кривой “доза-эффект”
реагирует на малые дозы токсиканта. Это группа гиперчувствительных или
гиперреактивных особей. Другая часть популяции в правой части кривой
реагирует лишь на очень большие дозы токсиканта. Это гипочувствительные,
гипореактивные или резистентные особи.
3. Наклон кривой “доза-эффект”, особенно в близи среднего значения,
характеризует разброс доз, вызывающих эффект. Эта величина указывает, как
велико будет изменение реакции популяции на действие токсиканта с
изменением действующей дозы. Крутой наклон указывает на то, что большая
часть популяции будет реагировать на токсикант примерно одинаково в узком
диапазоне доз, в то время как пологий наклон свидетельствует о существенных
различиях в чувствительности особей к токсиканту.
Для удобства анализа кривая “доза-эффект” часто преобразуется в
линейную зависимость путем её построения в координатах “log-пробит”: доза
токсиканта представляется в логарифмах, выраженность ответной реакции - в
пробитах (единицах вероятности развития эффекта). Соотношение частоты
развития эффекта (в %) и вероятности его развития (в пробитах) определяется
по специальным таблицам (рисунок 3).
 30

эффект(%) А пробит Б

logД logД

Рисунок 3. Преобразование экспериментальных данных определения

зависимости “ДОЗА - ЭФФЕКТ”: А) зависимость “ЭФФЕКТ - log ДОЗЫ”; Б)
зависимость “ПРОБИТ ЭФФЕКТА - log ДОЗЫ”.

Это преобразование позволяет исследователю легко, на основе анализа

графика (Б), оценить результаты эксперимента: рассчитать токсические дозы и
концентрации, вызывающие оцениваемый эффект у той или иной части
популяции - LD(LC)50, LD(LC)16, 84 и т.д., доверительный интервал искомых
величин токсичности, крутизну наклона кривой и т.д.
Поскольку чувствительность животных различных видов к токсикантам
не одинакова, а порой отличается очень значительно, опыты по оценке
токсичности выполняют минимум на трех видах животных, один из которых -
крупные (собаки, кошки).
Токсичность неодинакова при различных способах введения веществ
(таблица 2). Поэтому, в процессе исследования, вещество вводят различными
путями.

Таблица 2.
Влияние способа введения на токсичность зарина и атропина
для лабораторных животных

Токсикант Животное Способ введения Смертельная доза (мг/кг)

Зарин Крысы внутримышечно 0,17
через рот 0,6
внутривенно 0,05
Атропин Мыши через рот 800
внутривенно 90

Большую сложность представляет количественная оценка способности

веществ вызывать заболевания у человека при длительном действии в малых
дозах, а также специальные формы токсического процесса (тератогенез,
канцерогенез и т.д.). Исследования подобного рода требуют продолжительного
эксперимента, проводимого по специально разработанным программам. В
современной токсикометрии до конца не преодолены две основные трудности.
 31
Первая - перенос результатов, полученных в опытах на животных, на человека.
Вторая - распространение результатов, полученных при относительно высоких
уровнях воздействий, к малым, порой чрезвычайно малым, дозам и
концентрациям ксенобиотиков, встречающимся в повседневной жизни. Для
преодоления этих трудностей все данные, полученные экспериментально, по
возможности, верифицируются в условиях клинических наблюдений за
отравленными, а также в ходе популяционных исследований состояния
здоровья людей, контактировавших с вредными веществами.