ENZIMAS

Proteínas
Catalisadores biológicos – reações –sistema
ENZIMAS


biológico

PH ótimo

Concentração

Tótima

Afinidade / Especificidade

Sítio Ativo

Pro-enzimas
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CLASSIFICAÇÃO DAS ENZIMAS Oxidorredutases:

São enzimas que catalisam reações de

As enzimas podem ser classificadas transferência de elétrons, ou seja:
de acordo com vários critérios. O mais reações de oxi-redução. São as
importante foi estabelecido pela União Desidrogenases e as Oxidases.
Internacional de Bioquímica (IUB), e

estabelece 6 classes: .

1
HIDROLASES TRANSFERASES

Catalisam reações de hidrólise de

Enzimas que catalisam reações de transferência de
ligação covalente. Ex: peptidades. grupamentos funcionais como grupos amina,

fosfato, acil, carboxil, etc. Como exemplo temos as
Quinases e as Transaminases.

LIASES ISOMERASES

Catalisam a quebra de ligações
Catalisam reações de interconversão
covalentes e a remoção de moléculas entre isômeros ópticos ou
de água, amônia e gás carbônico. Ex.: geométricos. As Epimerases são
Dehidratases e as Descarboxilases . exemplos.

2
LIGASES COFATOR

Catalisam reações de formação e
novas moléculas a partir da ligação
entre duas já existentes, sempre às
custas de energia (ATP). São as
Sintetases.

COMPLEXO ESPECIFICIDADE

3
CENTRO ATIVO ESTUDO DAS ENZIMAS

Importância clínica

Medidas – plasma sanguíneo

Sintetizadas compartimento
intracelular.

ENZIMAS ENZIMAS PLASMA-ESPECÍFICAS

Ativas

Enzimas plasma-específicas
Mecanismo de coagulação sanguínea

Enzimas secretadas
Fibrinólise

Enzimas celulares
Ex.: pró-coagulantes: trombina, fator
XII, fator X.

4
ENZIMAS SECRETADAS

Forma inativa

Ativação – extracelular

Proteases ou hidrolases – sistema
digestório

Ex.: lipase, α-amilase, tripsinogênio,
fosfatase ácida prostática e PSA.
ENZIMAS TECIDUAIS

Meia-vida grande variabilidade

Uso para diagnóstico e prognóstico:
algumas horas até semanas.

Ex.: CK-MB: pico 8-12 horas.
ENZIMAS CELULARES

Baixos teores séricos

Aumento da liberação por tecidos
lesados

Fígado, pâncreas e miocárdio

Ex.: transaminses, lactato
desidrogenase, etc.
RAZÕES PARA ELEVAÇÃO DA
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Lesão celular extensa: isquemia ou
toxinas celulares.

Ex.: CK-MB após infarto do miocárdio
5
RAZÕES PARA ELEVAÇÃO DA
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Proliferação celular e aumento da
renovação celular: aumento da fosfatse
alcalina – aumento da atividade
osteoblástica.
RAZÕES PARA ELEVAÇÃO DA
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Obstrução de ductos: enzimas
encontradas nas secreções exócrinas.

Ex.: amilase, lipase.
RAZÕES PARA ELEVAÇÃO DA
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Aumento da síntese enzimática:
aumento da gama glutamil-transferase
após ingestão de álcool
REDUÇÃO DA REMOÇÃO DE
ENZIMAS DO PLASMA DEVIDO
À INSUFICIÊNCIA RENAL

Enzimas excretadas pela urina

Ex.: Amilase ( elevada na IR)
6
REDUÇÃO REDUÇÃO

Síntese enzimática reduzida:
colinesterase baixa na insuficiência
Variantes enzimáticas inerentes com
hepática severa ( redução do nº de atividade biológica: variantes anormais
hepatócitos). da colinesterase.

Deficiência congênita de
enzimas:fosfatase alcalina baixa –
hipofosfatasemia congênita

Distribuição de algumas enzimas de Distribuição de algumas enzimas de

importância diagnóstica importância diagnóstica
ENZIMA Principal Aplicações ENZIMA Principal Fonte Aplicações
Fonte Clínicas Clínicas
Amilase Glândulas Enfermidade Antígeno Próstata Carcinoma de
salivares, pancreática prostático próstata
pâncreas, específico
ovários Creatinoquinase Músculo Infarto do
Aminotransfer- Fígado, músculo Doenças do esquelético, miocárdio,
ases esquelético, parênquima cérebro, enfermidades
(transminases) coração, rim, hepático, infarto coração, musculares
eritrócitos do miocárdio, músculo liso
doença muscular Fosfatase ácida Próstata, Carcinoma da
eritrócitos próstata

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 Distribuição de algumas enzimas de
importância diagnóstica ENZIMAS
ENZIMA Principal Aplicações
Fonte Clínicas
Fosfatase Fígado, osso, Doenças
AMILASE
alcalina mucosa ósseas,
LIPASE e TRIPSINA
intestinal, enfermidades

FOSFATSE ALCALINA
placenta, rim hepáticas
Lipase Pâncreas Enfermidade
FOSFATASE ÁCIDA
pancreática
GAMA-GLUTAMILTRANSPEPTIDASE
Gama- Fígado, rim Enfermidade
glutamiltranspep hepatobiliar,
tidase alcolismo

AMILASE

Classe das hidrolases.

Atua extracelular
cliva o amido e o
AMILASE glicogênio de dieta.

Secreta: glândulas salivares ( forma S ),
celulas acinares do pâncreas ( forma P ).

Secretada no intestino
ducto
pancreático.

Amilase: degrada o amido ( hidrólise ) –
boca e esôfago.

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HIPERAMILASEMIA Distúrbio inflamatório
agudo associado a
Pancreatite aguda edema, intumescência,
necrose e em alguns
casos de hemorragia.
 Pancreatiteaguda.
 Lesões traumáticas.
↑ 2 – 12 h após início
 Cálculo ou CA de pâncreas. Amilase P do episódio de dor
 Abscesso pancreático. abdominal.

Dosagem 4 a 6X do V.R. (12–72 h)

HIPERAMILASEMIA NÃO HIPERAMILASEMIA POR

PANCREÁTICA
 InsuficiênciaRenal: ↓ depuração.
 Neoplasias de pulmão, ovário, mama e
cólon.
 Lesões das glândulas salivares:
DESEORDENS DE ORIGEM COMPLEXA

Mecanismos desconhecidos.
 Doenças do trato biliar.
 Eventos intra-abdominais.
 Trauma cerebral.
 Queimaduras e choques traumáticos.

caxumba ou cirurgia maxilofacial.  Hiperamilasemia pós-operatória.

 Cetoacidose diabética.
 Macroamilasemia: 1 a 2% da população
 Transplante renal.

combinação da amilase + (IgA e IgG)
 Alcolismo agudo.
+ proteínas plasmáticas.

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AMILASE URINÁRIA DETERMINAÇÃO DA AMILASE
 Hiperamilasúria = hiperamilasemia
 Paciente:
 Urina de 1 hora.
 Urina de 24 horas. Não é exigida preparação especial.
 Depuração da amilase.  Amostra:

 Pancreatite aguda = depuração Soro sem hemólise e não lipêmico.

 Depuração amilase ↑ creatinina.
Amilase urina X creat soro =
 Depuração = Amilase no soro X creat urina
VR = 1 a 4%.
Pancreatite aguda = 7 a 15%.
Urina: 1 h ou 24 h sem conservantes.
X 100 = % Atividade amilásica: cálcio e cloretos
(evitar citratos, oxalato e EDTA).
Estável: 1 semana em T ambiente
 refrigerada: vários meses.

DETERMINAÇÃO DA AMILASE DETERMINAÇÃO DA AMILASE

 Métodos:
Sacarogênicos, amiloclasticos e
V.R para amilase
cromolíticos.

 Interferências:
► Soro: 60 a 160 U/dl
 ↑ : aspirinas, analgésicos narcóticos,
anti-concepcionais. ► Urina: 24 h 1.500 a 1.800 U/d
 ↓ : Glicose e fluoretos. 1 h 70 a 275 U/h

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 LIPASE

 Enzima específica.
 Hidrólise dos triglicerídeos em
LIPASE presença de sais bilares e um co-fator
(colipase).
 Lipase: produzida por células acinares
do pâncreas.
 Lipase: mucosa intestinal, leucócitos,
células do tecido adiposo, língua e
leite.

LIPASE DETERMINAÇÃO DA LIPASE

 Paciente: não é exigido cuidados
Pancreatite aguda / especiais.
complicações.  Amostra: soro (s/hemólise), estável 1
HIPERLIPASEMIA Pancreatite crônica. semana no refrigerador e por vários
Enfermidade renal aguda meses a -20ºC.
ou crônica.  Interferentes: ↑: codeína, heparina,
morfina e betanecol.
Dosagem é usada EXCLUSIVAMENTE  Método: Titulometria, Turbidimetria e
diagnóstico de desordens pancreáticas. enzimático.
Soro, plasma, líquido ascítico e pleural. V.R: 0,1 a 1,0 Ud ou 28 a 280 U/L

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 TRIPSINA

TRIPSINA  Enzima proteolítica.

 Precursora tripsinogênio inativo.
 Tripsinogênio
enteroquinase

tripsina (duodeno).

TRIPSINA

AUSÊNCIA DE TRIPSINA NAS FEZES:

FOSFATASE
 Pacientes com insuficiência
pancreática.
ALCALINA (FA)
 Fibrose cística ( avançada ).
 Má absorção em crianças.
 Pancreatite crônica.

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FOSFATASE ALCALINA (FA) HIPERFOSFATASEMIA ALCALINA
 Obstrução intra-hepática: 2 a 3 X ou 10 a 15 X
 Enzimas relativamente inespecíficas. (estase biliar).
 Obstrução extra-hepática das vias biliares: 3 a
 Distribuída amplamente: mucosa intestinal,
10X
túbulos renais, baço, ossos (osteoblastos),
 Doenças ósseas: 10 a 15X (osteíte deformante),
fígado (canalículos biliares), leucócitos e
raquitismo etc. (2 a 4X).
placenta.
 Gravidez: 3º trimestre (2 a 3X) pré-eclâmpsia e
 Origem: Fígado e músculo esquelético. eclâmpsia.
 Função metabólica desconhecida.  Outras causas: pancreatite aguda e crônica,
 Associada com o transporte lipídico no intestino IRC, neoplasias e outras.
e processos de calcificação óssea.

OBSTRUÇÃO INTRA-HEPÁTICA ISOENZIMAS DA FA

 Incremento na síntese da enzima.
 Retenção de ácidos biliares no fígado q/
solubilizando a FA e a removem da m.
plasmática dos hepatócitos.  Encontradas provenientes: fígado, ossos,
 Regurgitação da enzima p/ a circulação pelo intestino e placenta.
impedimento da excreção.  Regan e Nagao: processos neoplásicos.
 Lesões expansivas: CA hepatocelular,
metástases
 Hepatite viral e cirrose.
 Fármacos: Amoxacilina, eritromicina, esteróides,
anabolizantes etc...

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DETERMINAÇÃO DA FA DETERMINAÇÃO DA FA
 Paciente: jejum 8 h.
 Amostra: soro ou plasma (heparina). V. R.
 Evitar hemólise ( 6 X FA ).
 Adultos: 20 a 105 U/L.
 Interferências ↑: paracetamol, aspirina, agentes
 Crianças (0 a 3 meses): 70 a 220 U/L.
antifúngicos, barbitúricos, morfina,
anticoncepcionais orais.  Crianças (3 meses a 10 anos): 60 a 150U/L.
 Métodos: β – Glicerofosfato  Jovens (10 a 15 anos): 60 a 260 U/L
P – Nitrofenilfosfato
4 – Nitrofenilfosfato
α - Naftol monofosfato

FOSFATASE ÁCIDA TOTAL e FOSFATASE ÁCIDA TOTAL e

FRAÇÃO PROSTÁTICA FRAÇÃO PROSTÁTICA
Abreviação: FAC  Homem  fração prostática 50% FAC total.
 Corresponde um grupo heterogênio de  50%: fígado e desintegração de
fosfatases inespecíficas. plaquetas e eritrócitos.
 Mulher  Fígado, eritrócitos e plaquetas.
 PH ótimo: 4,5 e 7.
 Catalisam a hidrólise de monoéster ortofosfórico
→ OH e PO4 FAC - IMPORTÂNCIA CLÍNICA
 Diagnóstico e monitorização do CA próstático.
 Glândula prostática, células osteoblasticas,
fígado, baço, rins, eritrócitos e plaquetas.  Fração prostática da fosfatase ( FACP )

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HIPERFOSFATESEMIA ÁCIDA DETERMINAÇÃO DA FAC
 Neoplasia de próstata.  Paciente: não é exigido preparo especial.
 Hipertrofia prostática benigna (HPB).
 Amostra: soro ou plasma (Heparina, sem
 Pós-cirúrgico ou terapia antiandrogênica. hemolise ou não lipênico).
 Palpação retal.
 ↑: Clofibrato.
 Enfermidades ósseas associadas aos
 ↓: Etanol e estrogênio – terapia para CA.
osteoclatos.
 Metodos ezimas imunoensaio,
 Hiperparatireoidismo.
radioimunoensaio, cinética fluoremétrica.
 Invasão maligna do CA de seio.
 V.R.: 0,5 a 1,9 U/L.
 Leucemia mielocítica.

AMINOTRANSFERASE
(Transaminase)
 AST/TOG: Transaminase glutâmica –
AMINOTRANSFERASE oxalacética.
 ALT/TGP: Transaminase Glutâmica – pirúvica.
(Transaminase) Aspartato + α - cetoglutarato  oxalacetato + ac .
glutâmico.
Alamina + α - cetoglutarato  piruvato + ac . glutâmico.

 Aminotransferase: papéis centrais síntese e

degradação de AA, pontes no metabolismo de AA
e corboidratos.

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AMINOTRANSFERASE AUMENTO DAS
(Transaminase) AMINOTRANSFERASE
DOENÇAS HEPATOBILIARES:
LOCALIZAÇÃO  AST (TGO) e ALT (TGP): citoplasma dos hepatócitos.
 Lesão ou morte celuar → liberam – ezimas →
circulação.

Amplamente distribuidos nos tecidos  ALT (TGP): citoplasma do hepatócito.
 AST (TGO): 80% mitocôndria.
humano.
 Dano hepatocelular leve – predominando no soro –

TGO: miocárdio, fígado mm. Esquelático, citoplasmática.
↓ rins, pâncreas, baço, cérebro, pulmões  Lesões graves: liberação enzima mitocondrial –
elevação da relação AST/ALT.
eritrócitos.

PATOLOGIAS:
PATOLOGIAS:

Hepatite viral aguda

Distrofia muscular progressiva.

Hepatites virais ou tóxicas: AST/ALT < 1.

Pancreatite aguda.

Outras hepatites: auto-imunes, B ou C.

Embolia pulmonar.

Cirrose: AST/ALT > 1.

Insuficiência cardíaca congestiva.

Mononucleose infecciosa.

Outras desordens: gangrenas,

Colestase extra-hepática aguda. esmagamento muscular, infecções por

Infarto do miocárdio: aumento TGO/ 18 e parasitas e outras.
24 h. VR – retorna ~ 5º dia.

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DETERMINAÇÃO DAS
INTERFERENTES
TRANSAMINASES

Paciente: não necessita cuidados
Aumento: paracetamol, ampicilina,

especiais. agentes anestésicos, cloranfenicol,

Amostra: soro isento de hemólise. codeína, etanol, anticoncepcionais orais,

Conservação: 24 horas temp. ambiente e sufonamidas e tiazidas.
7 dias sob refrigeração.

MÉTODOS GAMA-GLUTAMILTRANSPEPTIDASE

Enzimáticos.
Catalisa a transferência de um grupo γ-

glutamil de um peptídio para outro

VR: peptídio ou para um AA.
AST/TGO – 5 A 34 U/L.
Fígado, vias biliares, rins, intestino,

ALT/TGP – 6 A 37 U/L próstata, pâncreas, pulmões, cérebro e

coração.

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AUMENTOS NA ATIVIDADE DETERMINAÇÃO Y-GT

Valor clínico na avaliação da γ-GT no estudo

das desordens hepatobiliares.

Obstrução intra-hepática e extra-hepática.

Doenças hepáticas relacionadas ao alcool.

Hepatite infecciosa, CA prostático, lupus.

Neoplasmas, fibrose cística.

Esteatose hepática, fármacos (barbitúricos)

Paciente: jejum de 8 horas, não ingerir
alcool – 24 h antes da prova.

Amostra: soro.

Conservação: 7dias temp. ambiente e 73
meses congelado.

MÉTODOS LACTATO DESIDROGENASE

Enzimáticos.

LD.

Citoplasma de todas as células.

VR:

Miocárdio, fígado, músculo esquelético, rins
Homens – 5 A 25 U/L.
e eritrócitos.
Mulheres – 8 A 40 U/L

Aumento dos teores séricos é inespecífico.

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ISOENZIMAS DETERMINAÇÃO DA LD

LD1 – miocárdio e eritrócitos.

Paciente: não é exigido cuidado especial.

LD2 – miocárdio e eritrócitos.

Amostra: soro ou plasma (heparina) ou

LD3 – pulmão, linfócitos, baço, pâncreas.
LCR.

LD4 – fígado, músculo esquelético.

Conservação: 24 h temp. ambiente. Não

LD5 – fígado, músculo esquelético.
refrigerar.

MÉTODOS CREATINOQUINASE

CK.

Enzimáticos – velocidade de
transformação do piruvato a lactato.
Músculo esquelético, cérebro e tecido
cardíaco – atividades mais elevadas.

VR:
Rins, diafragma, tireóide, plascenta,

Soro – 95 A 225 U/L. bexiga, útero, baço, pulmão, estômago,

Urina – 42 A 98 U/L reto, cólon, pâncreas – atividade reduzida.
LCR – 7 a 30.
Fígado e eritrócitos – desprovidos.

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ISOENZIMAS DETERMINAÇÃO CK

Paciente: evitar exercícios vigorosos e

Subunidades: B – cérebro e M – muscular.
não ingerir alcool – 24 h antes da prova.

CK-BB ou CK-1: cérebro.

Amostra: soro ou plasma.

CK-MB ou CK-2: miocárdio.

Conservação: 7dias refrigerado e no

CK-MM ou CK-3: músculo esquelético.
escuro. 20 Cº por mais de 30 dias.

MÉTODOS OUTRAS ENZIMAS

Enzimáticos: método de Oliver–Rosalki.
Aldolase: ALD.

Elevação em doenças ativas do músculo

VR: esquelético.
Homens – 15 A 160 U/L.
30 minutos de repouso antes da coleta.

Mulheres – 15 A 130 U/L
Amostra sem hemólise.

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OUTRAS ENZIMAS OUTRAS ENZIMAS

5’ – nucleotidase.

Isocitrato desidrogenase.

Estabelece o diagnóstico diferencial entre

ICD.
CA ósseo e hepático.

Sensível em doenças hepáticas

Elevada no CA ósseo.
parenquimatosas.

Valores reduzidos: Hepatite.

Valores reduzidos: necrose hepatocelular.

OUTRAS ENZIMAS

Colinesterase.

Capacidade de hidrolizar acetilcolina para
formar colina e o ácido correspondente.

Colinesterase I: eritrócitos, pulmão, baço,
terminação nervosa e matéria cinza do cérebro.

Colinesterase II: Fígado e materia branca dop
Cérebro.

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