Вы находитесь на странице: 1из 3

земледелие и растениеводство

УДК 543.545:547.962.7:631.531.12:633.13
Использование метода электрофореза
проламинов в первичном семеноводстве
на примере сорта овса Отрада
М.Н. Фомина1, кандидат сельскохозяйственных В реализации потенциальных возможностей сорта
наук, главный научный сотрудник (e-mail: maria_f72@ важную роль играет качество посевного материала. Се-
mail.ru) мена высоких кондиций обеспечивают прибавку урожая
Г.В. Тоболова2, кандидат сельскохозяйственных до 15-20 % [3]. Контроль сортового качества семян по-
наук, доцент зволяет долгое время сохранять ее на таком уровне.
А.В. Остапенко2, аспирант Многие современные сорта овса – это сложные попу-
1
Научно-исследовательский институт сельского ляции, состоящие из нескольких биотипов. Политипные
хозяйства Северного Зауралья, ул. Бурлаки, 2, пос. сорта сложнее поддерживать в процессе семеновод-
Московский, Тюменский р-н, Тюменская обл., 625501, ства, так как составляющие их биотипы, отличаясь по
Российская Федерация биологическим свойствам, часто трудно различимы по
2
Государственный аграрный университет Северного морфологическим признакам. В связи с этим в процесс
Зауралья, ул. Республики, 7, Тюмень, 625003, Россий- семеноводства внедряются новые подходы и методы.
ская Федерация. Для идентификации и регистрации сортов и био-
типов зерновых культур успешно используют электро-
Резюме. На базе лаборатории селекции зернофуражных форез спирторастворимых запасных белков зерна  –
культур ФГБНУ «НИИСХ Северного Зауралья» и лаборатории проламинов [4, 5, 6].
сортовой идентификации семян Агротехнологического инсти-
тута ФГБОУ ВПО «ГАУ Северного Зауралья» в 2014-2015 гг. Проламины – это основная группа белков в семенах
проведено изучение и определение биотипного состава ново- зерновых культур. Лучше всего они растворяются в
го сорта овса посевного Отрада. Дана характеристика сорта 60-80 %-ном водном растворе этилового спирта. Про-
по морфологическим, биологическим и хозяйственно-ценным ламин пшеницы назван глиадином, ржи – секалином,
признакам. Для исследования в 2014 г. было отобрано 2500 ячменя – гордеином, кукурузы – зеином, овса – авени-
метёлок. В ходе морфологического анализа для дальнейших
испытаний оставлено 1115 семей, которые изучали методом ном. Особенность проламинов  – низкое содержание
электрофореза запасных спирторастворимых белков – про- лизина, наибольшая величина этого показателя харак-
ламинов. Для электрофоретического анализа от каждой терна для авенина [7, 8, 9, 10].
семьи случайным образом отбирали по три зерновки. Всего Электрофоретический спектр авенинов представлен
было выявлено 35 типов электрофореграмм. Первый и второй тремя зонами: α, β и быстрыми проламинами (БП) [11,
биотипы были характерны для большинства изученных семей
(89,9 %) и присутствовали в популяции в соотношении 2:1. По 12]. Компоненты электрофоретических спектров аве-
результатам идентификации аллелей авенин-кодирующих нина наследуются группами и контролируются тремя
локусов (АКЛ) первый и второй биотипы отличались аллелью независимыми локусами: Avn A, Avn B, Avn C [13].
локуса Avn A. Генетическая формула сорта Отрада имела вид Так как проламинам свойственна видовая и со-
Avn Anew+4В4C1. В 2015 г. семьи первого и второго биотипов ртовая специфичность, на их использовании осно-
объединили в отдельные блоки и высеяли на опытном поле.
После уборки для контроля биотипного состава анализиро- ваны принятые, как в России, так и в мире методы
вали зёрна с не обмолоченных метёлок 320 семей первого определения подлинности и сортовой чистоты семян
биотипа и 255 семей второго биотипа. В ходе электрофоре- по электрофоретическому спектру белков [14]. В
тического анализа выявлены линии гетерозиготные по АКЛ, частности, выяснение численного соотношения типов
а также механическая примесь. Эти семьи исключили из электрофореграмм отдельных зерновок сорта на этапе
дальнейшего размножения. Использование электрофореза
проламинов в первичных звеньях семеноводства позволило первичного семеноводства необходимо для того, чтобы
достаточно быстро и эффективно получить оригинальные се- эффективно поддерживать постоянство его биотипного
мена на первых этапах размножения и внедрения сорта в про- состава, а также своевременно выявлять биологиче-
изводство, а также поддерживать их чистоту и соотношение ское и механическое засорение [15].
биотипов в процессе дальнейшего воспроизводства сорта. Цель наших исследований – изучение и определе-
Ключевые слова: овес, сорт, электрофорез, запасные белки,
авенин, аллель, биотипный состав. ние биотипного состава нового сорта овса посевного
Для цитирования: Фомина М.Н., Тоболова Г.В., Остапенко Отрада.
А.В. Использование метода электрофореза проламинов в Условия, материалы и методы. Исследования
первичном семеноводстве на примере сорта овса Отрада // проводили на базе лаборатории селекции зернофу-
Достижения науки и техники АПК. 2016. Т.30. №12. С. 14-16. ражных культур ФГБНУ «НИИСХ Северного Зауралья»
и лаборатории сортовой идентификации семян Агро-
Необходимое условие повышения урожайности и технологического института ФГБОУ ВПО «ГАУ Северного
качества зерна овса, наряду с совершенствованием тех- Зауралья» в 2014-2015 гг. Сорт овса пленчатого Отрада
нологии возделывания, – создание и распространение создан в НИИСХ Северного Зауралья методом гибри-
в производстве новых сортов, сочетающих высокую по- дизации сортов различного эколого-географического
тенциальную продуктивность с устойчивостью к небла- происхождения (WW 170079 × Pc 39) × (Mutica 600 × Ristо)
гоприятным факторам окружающей среды в конкретных с последующим индивидуальным отбором в F4. Раз-
природно-климатических условиях. В последнее десяти- новидность mutica. По результатам Государственного
летие в Тюменской области на смену старым сорта овса сортоиспытания он внесен в Государственный реестр
пришли новые более урожайные – Талисман, Отрада, селекционных достижений и рекомендован для возде-
Фома. Увеличилась площадь, занимаемая сортами этой лывания в Уральском (9), Западносибирском (10) и Даль-
культуры селекции НИИСХ Северного Зауралья. Если в невосточном (12) регионах Российской Федерации.
2000 г. их доля в сортовых посевах региона составляла Для формирования питомников первичного семено-
24,1 %, то в 2015 г. – уже более 95 % [1, 2]. водства в 2014 г. на участке размножения нового нерайо-
14 Достижения науки и техники АПК. 2016. Т. 30. № 12
земледелие и растениеводство

Таблица. Основные показатели сорта овса Отрада, КСИ, 2012-2015 гг. разнотипные семьи сорта
Показатель Отрада Мегион (St) Талисман (St) Отрада. Доля семей с пер-
Период вегетации, дни 70 68 70 вым типом электрофорети-
Урожайность, т/га 4,37 3,91 4,09 ческих спектров авенина со-
Количество растений, шт./м2: ставила 58,8 %; со вторым –
по всходам 332 356 374 31,1 %; с четвертым – 1,5 %;
перед уборкой 240 244 264 с пятнадцатым – 1,0 %; всех
Количество продуктивных стеблей, шт./м2 375 371 422 остальных – 7,4 %.
Продуктивная кустистость 1,70 1,60 1,65
Таким образом, для боль-
Масса зерна, г:
с одного растения 1,92 1,82 1,65 шинства семей (89,9 %)были
с одной метелки 1,12 1,11 1,00 характерны первый и второй
Масса 1000 семян, г 34,5 34,5 34,0 биотипы, присутствующие
Количество зерен в метелке, шт. 32,5 32,4 29,6 в популяции в соотношении
Высота растений, см 84,2 85,7 83,7 2:1. Семьи с отличающими-
Устойчивость к полеганию, балл 4,7 4,6 4,4 ся от них спектрами авенина
Урожайность зеленой массы, т/га 23,3 24,3 26,2 были исключены из дальней-
Сбор сухого вещества, т/га 8,34 7,91 8,71 шего исследования.
Содержание белка в зеленой массе, % 9,31 10,51 10,72 Для первого и второ-
Облиственность, % 45,4 44,3 45,2 го биотипов сорта Отрада
Натура зерна, г/л 469,3 462,8 462,8
Пленчатость, % идентифицированы аллели
25,4 25,2 26,8
Содержание в зерне, %: по локусам Avn А, Avn В и
белок 11,99 10,59 10,39 Avn C������������������
. Биотипы различа-
жир 5,44 4,98 4,41 лись между собой по локусу
крахмал 46,95 47,88 47,00 Avn А. У второго биотипа
К хоз 37,5 37,3 33,1 присутствовала аллель А4,
у первого  – новая аллель,
нированного сорта (РННС) отобрали 2500 метёлок. По отсутствующая в каталоге генетической номенклатуры
результатам морфологического анализа в лаборатории авенинов. Исходя из этого, генетическую формулу сорта
селекции зернофуражных культур НИИСХ Северного За- Отрада можно записать как Avn Anew+4В4C1 (рис.1).
уралья для дальнейшего изучения оставили 1115 семей.
От каждой семьи в лаборатории сортовой идентифика-
ции ГАУ Северного Зауралья для электрофоретического
анализа случайным образом отбирали по три зерновки.
Всего проанализировали 3345 зерновок.
Одномерный электрофорез авенинов осуществляли
по стандартной методике [16] с некоторыми модифи-
кациями [17, 18].
Результаты и обсуждение. Сорт пленчатого овса
Отрада среднеспелый. За период оценки в Государ-
ственном сортоиспытании (2011-2013 гг.) в зависимости
от регионов возделывания продолжительность вегета-
ционного периода у него изменялась от 63 (Удмуртия)
до 95 (Республика Алтай) суток. Высота растений 67,8-
96,0 см. Высокая урожайность отмечена в 2011 г. на
Ишимском государственном сортоучастке Тюменской
области (7,03 т/га) и в 2013 г. на Барачатском ГСУ Кеме-
ровской области (7,63 т/га). В 2014 г. в ОПХ «Ишимское»
(Тюменская область) на площади 15 га была достигну- Рис. 1. Электрофоретические спектры и схемы овса
та максимальная урожайность 8,1  т/га. В среднем за посевного сорта Отрада: 1.а – первый биотип; 1.б – второй
биотип; St – стандарт (Astor).
последние 4 года изучения на заключительном этапе
селекционного процесса (конкурсное сортоиспытание) В 2015 г. семьи первого и второго биотипов объ-
в условиях северной лесостепи Тюменской области единили в отдельные блоки и высеяли на опытном
сбор зерна с единицы площади составил 4,37 т/га, что поле НИИСХ Северного Зауралья. Наблюдения за
на 0,46 т/га выше стандарта – сорта Мегион. Рост уро- ростом и развитием растений в течение вегетации
жайности обеспечили преимущественно продуктивная не выявили морфологических различий между ними.
кустистость и продуктивность растения. Уборку осуществляли по блокам с дополнительной
Технологическая и биохимичесая оценка зерна лабораторной браковкой по метёлкам. Для контроля
показала, что сорт Отрада не уступает стандартам по биотипного состава использовали не обмолоченные
большинству показателей качества, а по некоторым метёлки 320 семей первого биотипа и 255 семей
(содержание в зерне белка и жира) превосходит их (см. второго биотипа.
табл.). Сорт устойчив к осыпанию зерна, среднеустой- Электрофоретический анализ зерновок показал, что
чив к весенне-летней засухе. В естественных условиях у 5 семей первого биотипа имели тип спектра авенина,
устойчив к пыльной и покрытой головне. соответствовал второму биотипу. Вероятно, это обу-
Анализ полученных электрофореграмм показал, словлено механическим засорением в процессе фор-
что зерновки имели различный компонентный состав. мирования питомника. В 17 семьях были обнаружены
Всего было установлено 35 типов электрофореграмм. отдельные зерновки с другим компонентным составом,
Сравнение спектров авенина выявило однотипные и что свидетельствовало о гетерозиготности этих линий
Достижения науки и техники АПК. 2016. Т. 30. № 12 15
земледелие и растениеводство

по авенин-кодирующим локусам. Такие семьи исклю-


чили из дальнейшего размножения. Среди 255 семей
второго биотипа 22 по типу спектра относились к перво-
му биотипу (рис.2), ещё 20 семей были гетерогенными
по компонентному составу авенина.
Заключение. На основании полевых опытов и био-
химических методов выявлена генетическая неодно-
родность сорта овса посевного Отрада. Сорт Отрада
политипный (35 биотипов), однако для большинства
семей (89,9 %) характерны два биотипа – первый и вто-
рой в соотношении 2:1. Семьи этих биотипов следует
использовать для поддержания генетической стабиль-
ности сорта при организации оригинального семено-
Рис. 2. Электрофоретические спектры семей второго водства. При формировании питомников испытания
биотипа (2015 г.): 130-134  – номер семьи. Семья №132  – потомства I и II годов рекомендуется использовать
первый биотип. электрофоретический анализ.
Литература.
1. Фомина М.Н. Овес в Северном Зауралье (история культуры и селекции) // Селекция, семеноводство и технология воз-
делывания зернофуражных культур: мат. междунар. науч.- практ. конф. Ульяновск: Ульяновский НИИСХ, 2008. С. 195–199.
2. Фомина М.Н. Среднеспелый сорт овса ярового Отрада // Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. 2014. №3. С.56–62.
3. Бабушкина Т.Д., Фомина М.Н., Ярославцев А.А. Обоснование норм использования оригинальных, элитных и репро-
дукционных семян зерновых и зернобобовых культур в Тюменской области // Научное обеспечение национального проекта
развития АПК Тюменской области: состояние, перспективы. Сб. науч. тр. Тюмень: «Ризограф» Тюменский Аграрный Акаде-
мический Союз, 2009. С. 190–194.
4. Конарев А.В. Адаптивный характер молекулярного полиморфизма и его использование в решении проблем генетических
ресурсов растений и селекции // Аграрная Россия. 2002. №3. С.4–11.
5. Зобова Н.В., Онуфриенок Т.В., Чуслин А.А. Особенности полиморфизма проламинов сортов ячменя, возделываемых в
Красноярском крае // Достижения науки и техники АПК. 2014. №6. С. 7–10.
6. Чесноков Ю.В. Молекулярно-генетические маркеры и их использование в предселекционных исследованиях. СПб.:
АФИ, 2013. 116 с.
7. Белкина Р.И., Михайлова А.В., Фадеева Е.Ф. Основы биохимии зерна: учебное пособие. Тюмень: ТГСХА, 2010. 230 с.
8. Draper S.R. Amino acid profiles of chemical and anatomical fractions of oat grains // J. Sci. Fd. Agr. 1973. V.24. Pр. 1241–1250.
9. Cooke R.G., Cliff E.M. The characterization of oat cultivar by electrophoresis // J. Nat. Inst. Agric. Bot. 1984. V.16. Pр. 415–429.
10. Kim S.J., Charbonnier L., Mosse J. Heterogeneity of avenin, the oat prolamin. Fractionation, molecular weight and amino acid
composition // Biochem. Biophys. Acta. 1978. V.537. Pр. 22–30.
11. Губарева Н.К., Юмагузина Х.А., Павлова Н.Е. Электрофорез авенина в сортовой идентификации овса // Труды по при-
кладной ботанике, генетике и селекции. 1987. Т.114. С.76–82.
12. Лоскутов И.Г. Современная система рода Avena L. // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2006. Т.162.
С. 84–96.
13. Генетический контроль авенинов и принципы их классификации / Портянко В.А., Поморцев А.А., Калашник Н.А.,
Богачков В.И., Созинов А.А. // Генетика. 1987. Т.23. С. 845–853.
14. Баталова Г.А., Лисицын Е.М., Русакова И.И. Биология и генетика овса. Киров: Зональный НИИСХ Северо-Востока,
2008. 456 с.
15. Созинов, А.А. Полиморфизм белков и его значение в генетике и селекции. М.: Наука, 1985. 272 с.
16. Bushuk W., Zillman R.R. Wheat cultivar identification by gliadin electrophoregrams. I. Apparatus, method and nomenclature
// Canadian Journal of Plant Science. 1978. V. 58 (2). Pр. 505–515.
17. Metakovsky E.V., Novoselskaya A.Yu. Gliadin allele identification in common wheat. 1. Methodological aspckts of the analysis
of gliadin patterns by one-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis // J. Genet and Breed. 1991. V.45 (4). Pр. 317–324.
18. Остапенко А.В., Тоболова Г.В. Изучение полиморфизма авенина сортов овса посевного (Avena sativa L.) в Тюменской
области // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. 2013. Т.171. С. 38–42.

Usage of the Method of Prolamine Electrophoresis in Primary Seed Breeding by


the Example of Otrada Oat Variety
M.N. Fominа1, G.V. Tobolova2, A.V. Ostapenko2
1
Research Agricultural Institute of the Northern Trans-Ural, ul. Burlaki, 2, pos. Moskovskii, Tyumenskii r-n, Tyumenskaya obl., 625501,
Russian Federation
2
State Agrarian University of the Northern Trans-Ural, Roshchinskoe shosse, 18, Tyumen’, 625041, Russian Federation
Summary. At the premises of the laboratory of forage crops breeding of FGBNU “Research Agricultural Institute of the Northern Trans-Urals”
and the laboratory of varietal identification of seeds of FGBOU VPO “State Agrarian University of the Northern Trans-Urals” the biotype composi-
tion of the new oat variety Otrada was studied and determined in 2014-2015. The variety was characterized by morphological, biological and
economically valuable traits. It was selected 2500 panicles for examination in 2014. During morphological analysis 1115 families were selected
for further study; they were investigated by the method of electrophoresis of storage alcohol-soluble proteins – prolamines. Three kernels from
each family were selected in a random way for the electrophoretic analysis. Thirty-five types of electropherograms were revealed. The first and
the second biotypes were characteristic for the most investigated families (89.9 %) and were present in the population at the ratio of 2:1. As a
result of identification of alleles of avenin-coding loci (ACL), it was found that the first and thesecond biotypes differed by the allele of locus Avn A.
The genetic formula of Otrada variety is Avn Anew + 4B4C1. In 2015 the families of the first and the second biotypes were crowded into separate
blocks and sown at the experimental field. After harvesting kernels from unthreshed panicles of 320 families of the first biotype and 255 families
of the second biotype were analyzed to control the biotype composition. During the electrophoretic analysis the lines heterozygous at ACL, as
well as mechanical impurities, were revealed. These families were excluded from the further breeding. The use of electrophoresis of prolamines
in primary seed breeding allowed to get the original seeds quite quickly and efficiently at the first stages of breeding and introduction of the variety
into cultivation, as well as to maintain their purity and the ratio of biotypes during the process of further variety cultivation.
Key words: oat, variety, electrophoresis, storage proteins, avenin, allele, biotype composition.
Author Details: M.N. Fominа1, Cand. Sc. (Agr.), chief research fellow (e-mail: maria_f72@mail.ru); G.V. Tobolova2, Cand. Sc. (Agr.),
assoc. prof.; A.V. Ostapenko2, post-graduate student
For citation: Fominа M.N., Tobolova G.V., Ostapenko A.V. Usage of the Method of Prolamine Electrophoresis in Primary Seed Breeding
by the Example of Otrada Oat Variety. Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2016. V.30. No. 12. Pp. 14-16 (in Russ.).

16 Достижения науки и техники АПК. 2016. Т. 30. № 12