Вы находитесь на странице: 1из 5

КОНТРОЛЬ

КАЧЕСТВА

УДК 663.51; 542.8

Капиллярный электрофорез —
высокоэффективный аналитический метод
исследования состава сложных биологических сред

В
Н. В. Шелехова, настоящее время метод капил- Важно отметить, что капиллярный
канд. экон. наук; лярного электрофореза широ- электрофорез  — перспективный и
В.А. Поляков, ко применяют для определе- высокоинформативный метод анали-
д-р техн. наук, профессор, ния широкого круга соединений в за, который хорошо зарекомендовал
академик РАН; различных биологических средах. себя как экспрессный и эффектив-
Л. В. Римарева, Метод отличается простым аппара- ный метод разделения многокомпо-
д-р техн. наук, профессор, турным оформлением, доступными нентных смесей веществ.
академик РАН расходными реактивами и материа- Немалое количество публикаций
ВНИИПБТ — филиал ФГБУН лами, минимальным объемом вво- в научных журналах демонстрирует
«ФИЦ питания и биотехнологии» димой пробы (1–2 нанолитра), экс- высокий интерес научного сообще-
прессностью анализа и хорошей со- ства к методу капиллярного электро-
четаемостью с различными методами фореза [1–7]. Высокую практическую
детектирования. значимость метода подтверждают
Капиллярный электрофорез  — как действующие, так и разрабаты-
относительно молодой метод, полу- ваемые стандарты для определения
чивший свое развитие в 80‑х годах содержания катионов, анионов орга-
прошлого столетия. В основе ка- нических и неорганических кислот в
пиллярного электрофореза лежат воде, кормах, соках, винодельческой
электрокинетические явления  — продукции и др. [8–12].
электромиграция ионов и других Следует отметить, что контроль
заряженных частиц и электроосмос технологических процессов произ-
[1]. водства этилового спирта из зерно-

B
1
2 18
0,338 4 27
3 5 7 20 22
6
89 19 21
23
10
111213
15 24
14
16 25 26 28
0,336 17

5 10 15

Рис. 1. Э лектрофореграмма градуировочной смеси: 1 — хлориды; 2 — нитриты;


3 — нитраты; 4 — сульфаты; 5 — оксалаты; 6 — формиаты; 7 — фториды;
8 — фумараты; 9 — тартраты; 10 — малаты; 11 — цитраты; 12 — сукцинаты;
13 — гликоляты; 14 — ацетаты; 15 — лактаты; 16 — фосфаты; 17 — бензоаты;
18 — аммоний; 19 — калий; 20 — кальций; 21 — натрий; 22 — магний;
23 — марганец; 24 — стронций; 25 — этаноламин;
26 — пропиламин; 27 — литий; 28 — барий

34 ПИВО и НАПИТКИ   2 •  2017


КОНТРОЛЬ
КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА
КАЧЕСТВА

вого сырья — важная и актуальная Массовая концентрация Спиртзавод (Алтайский край)


задача. Кроме того, регулирование ионов, мг / дм3 Исходная вода Na-катионирование
технологических процессов произ- Хлориды 1,25 0,82
водства входит в состав работ, вы- Сульфаты —  —
полняемых в рамках разработанной Фториды 0,25 0,23
Комплексной системы контроля и Аммоний 0,12 0,11
регулирования технологических про- Калий 1,39 0,38
цессов производства спирта [13, 14]. Кальций 56,69  —
Исследования проводили в ла- Натрий 14,42 43,97
бораторных и производственных
Магний 19,74 0,27
условиях с использованием анали-
Стронций 0,37  —
тического оборудования: системы
капиллярного электрофореза PrinCE Жесткость, ° Ж 4,46 0,022
560 и Agilent 7100. Объектами иссле-
дований были технологическая вода, для градуировочной зависимости ставлены результаты исследований
поступающая на производство спир- составляет не менее 0,997. По ре- ионного состава образцов зерновых
та, замесы, сусло, бражка, барда, лю- зультатам теоретических и экспери- замесов кукурузы, тритикале, ржи,
терная вода, питательные среды для ментальных исследований методи- пшеницы с гидромодулем 1:1,8.
ведения дрожжей. ка аттестована в ФГУП ВНИИМС. Показано, что применение разра-
В целях обеспечения оперативно- Установлено, что методика измере- ботанной методики позволяет кон-
го контроля и регулирования биотех- ний соответствует предъявляемым к тролировать и регулировать микроэ-
нологических процессов, происходя- ней метрологическим требованиям и лементный состав замеса, подбирать
щих на стадии брожения, проведены обладает основными метрологически- оптимальный по содержанию микро-
исследования по разработке мето- ми характеристиками. Границы от- элементов вид сырья для дальнейше-
дики определения ионного состава носительной погрешности методики го его использования при получении
замесов, сусла, бражки, лютерной измерений ±δi, % (Р = 0,95) в диапа- этилового спирта.
воды, барды, воды на различных ста- зоне от 0,5 до 10 мг / дм3 составляют С применением разработанной
диях водоподготовки. Для решения не более 28 %, в диапазоне от 10 до методики исследован ионный состав
поставленной задачи выбран метод 20 мг/ дм3 не более 22 %. Методика зернового сусла и бражки. Получены
капиллярного электрофореза, обла- легла в основу ГОСТ Р 55761–2013 новые экспериментальные данные по
дающий высокой эффективностью, «Замесы, сусло, бражка из пищевого влиянию ферментных комплексов с
экспрессностью, низкой себестои- сырья. Определение массовой концен- различной субстратной специфич-
мостью анализа. трации катионов, анионов неорганиче- ностью на ионный состав зернового
Впервые для одновременного ских и органических кислот методом сусла и эффективность конверсии
определения массовой концентрации капиллярного электрофореза» [17]. его в процессе сбраживания. Кро-
катионов, анионов неорганических Разработанная методика широко ме того, применение разработанной
и органических кислот разработан применяется в фундаментальных науч- электрофоретической методики по-
электролит, содержащий: гистидин, ных исследованиях ВНИИПБТ [17–23]. зволило установить оптимальный
2‑морфолиноэтансульфоновую кис- С использованием разработанной состав ферментов для биокатали-
лоту, краун-эфир, тритон Х-100 и методики в производственных усло- тической подготовки концентриро-
деионизованную воду. Проведены виях исследован ионный состав ис- ванных сред в ресурсосберегающей
исследования по подбору оптималь- ходной воды и воды после водопод- технологии спирта и установить раз-
ных режимных параметров системы готовки (натрий катионирование), личия в метаболизме промышленных
капиллярного электрофореза. Новиз- используемой в спиртовом произ- рас спиртовых дрожжей с осмофиль-
на технических решений подтверж- водстве. Определен качественный ными свойствами [21–23].
дена двумя патентами РФ [15, 16]. и количественный состав микроэле- Известно, что в процессе выделе-
Сущность методики основана на ментов в технологической воде до и ния и очистки спирта образуются по-
разделении катионов, анионов вслед- после водоподготовки, рассчитана бочные продукты, такие как барда и
ствие их различной электрофоре- жесткость (таблица). лютерная вода — отходы спиртового
тической подвижности в процессе Из данных таблицы следует, что в производства, рациональная перера-
миграции по кварцевому капилляру результате Na-катионирования жест- ботка которых — это важная задача.
в электролите под воздействием элек- кость воды уменьшилась на 99,5 %. Исследован ионный состав барды
трического поля с последующей реги- Таким образом, методика позволяет (рис. 3) и лютерной воды (рис. 4).
страцией кондуктометрическим детек- контролировать и регулировать ион- Электрофореграмма лютерной во-
тором. На рис. 1 приведена электрофо- ный состав воды, поступающей на ды приведена на рис. 5.
реграмма градуировочной смеси. спиртовое производство, рассчиты- Полученные экспериментальные
Проведены исследования по вы- вать ее жесткость. данные могут быть применены при
явлению наличия линейной зави- Известно, что микроэлементный повторном использования фугата
симости аналитического сигнала от состав зерна варьирует даже в пре- барды и лютерной воды в спиртовом
количества определяемого вещества делах одного вида злаков и зависит производстве в целях решения про-
в градуировочных растворах в преде- от сорта растения, условий его про- блемы эффективного использования
лах аналитической области методики. израстания, вносимых удобрений вторичных ресурсов при переработке
Значение коэффициента корреляции и других факторов. На рис. 2 пред- зернового сырья в этанол.

2 •  2017 ПИВО и НАПИТКИ 35


КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

В результате проведенных иссле- и отходов спиртового производства, цев, Н. В. Комарова, А. А. Корашенников


дований, разработана быстрая, точ- образующихся на каждой стадии тех- // ЭКВАТЭК-2002: тезисы докл. 5‑го
ная и чувствительная электрофоре- нологического процесса производства Международного конгресса.  — Москва,
тическая методика одновременного этилового спирта на заводах отрасли. 2002. — С. 608–610.
определения массовой концентрации Разработанная методика открыва- 3. Полякова, Е. В.  Определение неоргани-
катионов, анионов неорганических и ет новые возможности для дальней- ческих анионов методом капиллярного
органических кислот в замесах, сус- ших исследований в области регули- электрофореза с необращенным электро-
ле, бражке, лютерной воде, барде, рования технологических процессов осмотическим потоком // Е. В. Полякова,
воде. Методика позволяет за один производства спирта. О. В.  Шуваева //Аналитика и контроль.
анализ определять 28 компонентов за 2009. — Т. 13. — № 3. — С. 147–152.
20–25 мин с минимальной пробопод- ЛИТЕРАТУРА 4. Рождественский, Е. А. Определение ионно-
готовкой (фильтрация, разведение), 1. Комарова, Н. В., Каменцев Я. С. Практиче- го состава пластовых вод методом капил-
что дает возможность значительно ское руководство по использованию си- лярного электрофореза / Е. А. Рождествен-
сократить время и расход реактивов стем капиллярного электрофореза «КА- ский, В. А Кувшинов В. А., Д. А. Филатов//
для проведения исследования. ПЕЛЬ» — СПб.: ООО «Веда», 2006. — 212 с. Приволжский научный вестник. — 2012. —
Методика представляет не только 2. Каменцев, Я. С.  Возможности метода ка- № 5 (9). — С. 3–7.
научный, но и практический интерес, пиллярного электрофореза для контроля 5. Захарова, М. В.  Методика определения
так как позволяет контролировать ион- качества питьевых, поверхностных, сточ- массовой концентрации винной, яблоч-
ный состав продуктов, полупродуктов ных и технологических вод / Я. С. Камен- ной, янтарной, лимонной кислот с приме-

2500

2000
Содержание, мг/дм3

1500

1000

500

0
Хлориды

Нитраты

Сульфаты

Оксалаты

Формиаты

Фумараты

Малаты

Цитраты

Сукцинаты

Гликоляты

Ацетаты

Лактаты

Фосфаты

Аммоний

Калий

Кальций

Натрий

Магний
Кукуруза    Тритикале    Рожь    Пшеница (Воронеж)    Пшеница (Осетия)

Рис. 2. Ионный состав зерновых замесов из кукурузы, тритикале, ржи, пшеницы

3000

2500
Содержание, мг/дм3

2000

1500

1000

500

0
Хлориды

Сульфаты

Оксалаты

Формиаты

Фумараты

Малаты

Цитраты

Сукцинаты

Гликоляты

Ацетаты

Лактаты

Фосфаты

Аммоний

Калий

Кальций

Натрий

Магний

Марганец

Этаноламин

Литий

Кукуруза (Сев. Осетия)   Кукуруза (Сев. Осетия)   Пшеница (Воронежская обл.)    Зерносмесь пшеница/рожь

Рис. 3. Ионный состав барды

36 ПИВО и НАПИТКИ   2 •  2017


КОНТРОЛЬ
КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА
КАЧЕСТВА

160

140

120
Содержание, мг/дм3

100

80

60

40

20

0
Хлориды

Нитриты

Нитраты

Сульфаты

Оксалаты

Формиаты

Фториды

Ацетаты

Лактаты

Фосфаты

Аммоний

Калий

Кальций

Натрий

Магний

Марганец

Стронций

Пропиламин
Спирзавод (Алтай)    Спирзавод (Осетия)    Спирзавод (Воронежская обл.)    Спирзавод (Осетия)    Спирзавод (Хабспирт)

Рис. 4. Ионный состав лютерной воды

электрофореза. — Введ. 2016‑01‑07. — М.:


Стандартинформ, 2015. — 20 с.
13. Шелехова, Н. В.  Комплексная система
контроля производства этилового спирта
и спиртных напитков / Н. В.  Шелехова,
В. А. Поляков, Л. В. Римарева//Хранение
и переработка сельхозсырья. — 2015.  —
№ 12. — С. 53–56.
14. Шелехова, Н. В. Научное обеспечение кон-
троля биотехнологических процессов про-
изводства этилового спирта / Н. В. Шеле-
хова, Л. В. Римарева, В. А. Поляков//Пиво
и напитки. — 2016. — № 1. — С. 16–20.
15. Поляков В. А., Мицен В. Е., Шелехова Т. М.,
Веселовская О. В., Скворцова Л. И., Овчинни-
ков О. А., Космынин А. В., Шелехова Н. В. Ра-
бочий электролит для определения капил-
Рис. 5. Электрофореграмма лютерной воды лярным электрофорезом ионного состава
жидких сред. // Патент РФ № 2315299.
Заявка № 2006133558. Приоритет от
нением капиллярного электрофореза / За- 9. ГОСТ 31765–2012 Вина и виноматериалы. 20.09.2006. Регистрация в Госреестре изо-
харова М. В., Ильина И. А., Лифарь Г. В., Определение синтетических красителей бретений РФ 20.01.2008. — Бюл. № 2. — 4 с.
Якуба Ю. Ф. // Методическое и аналити- методом капиллярного электрофореза. — 16. Поляков В. А., Мицен В. Е., Шелехова Т. М.,
ческое обеспечение исследований по садо- Введ. 2013‑01‑07. — М.: Стандартинформ, Веселовская О. В., Скворцова Л. И., Овчин-
водству. — Краснодар, 2010. — С. 283–289. 2013. — 12 с. ников О. А., Космынин А. В., Шелехова Н. В.
6. Маркосов, В. А.  Применение капилляр- 10. ГОСТ Р 56373–2015 Корма и кормовые до- Способ определения ионного состава жид-
ного электрофореза для анализа вино- бавки. Определение массовой доли орга- ких сред. // Патент РФ № 2313781. Заявка
дельческой продукции / В. А.  Маркосов, нических кислот методом капиллярного № 2006133559. Приоритет от 20.09.2006.
Т. И. Гугучкина, Н. М. Агеева, Ю. Ф. Якуба электрофореза. — Введ. 2016‑01‑07. — М.: Регистрация в Госреестре изобретений РФ
// Виноградарство и виноделие. — 2007. — Стандартинформ, 2015. — 19 с. 27.12.2007. — Бюл. № 36. — 5 с.
№ 2. — С. 23–25. 11. ГОСТ Р 56374–2015 Корма, комбикор- 17. ГОСТ Р 55761–2013 Замесы, сусло, бражка
7. Ябловская, П. Е.  Анализ водных объектов ма, комбикормовое сырье. Определение из пищевого сырья. Определение массо-
окружающей среды методом капиллярно- массовой доли катионов аммония, ка- вой концентрации катионов, анионов
го электрофореза / П. Е. Ябловская//Inter- лия, натрия, магния и кальция методом неорганических и органических кислот
national journal of applied and fundamental капиллярного электрофореза.  — Введ. методом капиллярного электрофореза. —
research. — 2013. — № 8. — С. 200–203. 2016‑01‑07.  — М.: Стандартинформ, Введ. 2015‑01‑07. — М.: Стандартинформ,
8. ГОСТ Р 52841–2007 Продукция винодель- 2015. — 20 с. 2014. — 18 с.
ческая. Определение органических кислот 12. ГОСТ Р 56375–2015 Корма, комбикорма, 18. Серба, Е. М. Исследование метаболитов,
методом капиллярного электрофореза. — комбикормовое сырье. Определение мас- сопутствующих синтезу этанола при
Введ. 2009‑01‑01. — М.: Стандартинформ, совой доли хлорид-, сульфат-, нитрат- и сбраживании концентрированного зерно-
2008. — 8 с. фосфат-ионов методом капиллярного вого сусла осмофильным штаммом дрож-

2 •  2017 ПИВО и НАПИТКИ 37


КОНТРОЛЬКАЧЕСТВА
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

жей Saccharomyces cerevisiae / Е. М. Серба, капиллярного электрофореза / Н. В.  Ше- 1039 при культивировании на зерновом
М. Б. Оверченко, Л. В. Римарева, Н. И. Иг- лехова, Л. В. Римарева//Хранение и пере- сусле / Л. В.  Римарева, М. Б.  Оверченко,
натова, О. В. Веселовская, Н. В. Шелехова работка сельхозсырья. — 2015. — № 8. — Н. И. Игнатова, Н. В. Шелехова, Е. М. Сер-
//Производство спирта и спиртных напит- С. 12–15. ба, А. Ю.  Кривова, Н. Н.  Мартыненко//
ков. — 2013. — № 2. — С. 16–19. 21. Римарева, Л. В.  Исследование ионно- Хранение и переработка сельхозсырья. —
19. Серба, Е. М. Научно-практические аспек- го состава питательной среды в про- 2016. — № 5. — С. 23–27.
ты получения бад на основе конверсии цессе генерации спиртовых дрожжей 23. Римарева Л. В. Влияние ферментных ком-
вторичных биоресурсов /  Е . М.  Сер- Saccharomyces cerevisiae с осмофильными плексов на метаболизм спиртовых дрож-
ба, М. Б.  Оверченко, В. Е.  Давыдкина, свойствам / Л. В.  Римарева, М. Б.  Овер- жей и накопление ионов неорганической
Н. В. Шелехова, Л. В. Римарева, В. А. По- ченко, Н. И.  Игнатова, Н. В.  Шелехова, природы в концентрированном зерновом
ляков//Хранение и переработка сельхоз- Е. М.  Серба, Н. Н.  Мартыненко//Хра- сусле / Л. В.  Римарева, М. Б.  Оверченко,
сырья. — 2015. — № 2. — С. 44–50. нение и переработка сельхозсырья.  — Н. И. Игнатова, Н. В. Шелехова, Е. М. Сер-
20. Шелехова, Н. В.  Исследование ионного 2016. — № 3. — С. 41–45. ба, Н. Н.  Мартыненко, А. Ю.  Кривова //
состава полупродуктов и отходов спирто- 22. Римарева, Л. В.  Накопление метаболи- Вестник Российской сельскохозяйствен-
вого производства с применением метода тов дрожжами Saccharomyces cerevisiae ной науки. — 2016. — № 3. — С. 28–31.

Капиллярный электрофорез — Capillary Electrophoreis


высокоэффективный аналитический метод as Effective Analytical Method of Research
исследования состава сложных биологических сред the Composition of Complex Biological Media
Ключевые слова Key words
анионы органических и неорганических кислот; барда; бражка; за‑ anions of organic and inorganic acids; brew from food raw material;
месы; капиллярный электрофорез; катионы; кондуктометрический batches; capillary electrophoresis; cations; conductometric detector;
детектор; лютерная вода; определение жесткости; сусло; электролит. determination of hardness; sugar mash; electrolyte.

Реферат Abstract
В современных условиях метод капиллярного электрофореза широко In modern conditions the method of capillary electrophoresis is widely
применяют для определения широкого круга соединений в различных used to determine a wide range of compounds in various biological me‑
биологических средах. Капиллярный электрофорез — высокоинформа‑ dia. Capillary electrophoresis is a highly informative method of analysis
тивный метод анализа, который зарекомендовал себя как экспрессный that has proven itself as a rapid and efficient method for the separation
и эффективный метод разделения многокомпонентных смесей веществ. of multicomponent mixtures of substances. A large number of publica‑
Большое количество публикаций показывает высокий интерес научного tions show the high interest of the scientific community to the method
сообщества к методу капиллярного электрофореза. Высокую практиче‑ of capillary electrophoresis. High practical value of the method as confirm
скую значимость метода подтверждают как действующие, так и разраба‑ existing, and develop a standard for the determination of cations, anions,
тываемые ГОСТ для определения содержания катионов, анионов органи‑ organic and inorganic acids in water, feed, juice, wine production. Based
ческих и неорганических кислот в воде, кормах, соках, винодельческой on the foregoing, it can be concluded that capillary electrophoresis is a
продукции и др. На основании вышеизложенного, можно заключить, что promising method of analysis. It is important to note that the regulation
капиллярный электрофорез — перспективный метод анализа. Важно of technological processes of production of ethyl alcohol from grain raw
отметить, что регулирование технологических процессов производства materials is an important and urgent task that involves the practical ap‑
этилового спирта из зернового сырья является важной и актуальной за‑ plication of modern analytical equipment and methods analysis. To solve
дачей, подразумевающей практическое применение современного ана‑ this problem VNIIPBT developed electrophoretic method for the simultane‑
литического оборудования и методов анализа. Для решения этой задачи ous determination of the mass concentration of cations, anions, organic
ВНИИПБТ разработана электрофоретическая методика одновременного and inorganic acids for water analysis at different stages of water treat‑
определения массовой концентрации катионов, анионов органических ment, batches, sugar mash, brew from food raw material. In addition, the
и неорганических кислот для анализа воды на различных стадиях водо‑ developed method can be applied to determine the hardness of the water
подготовки, замесов, сусла, бражки, лютерной воды, барды, питательных used in alcohol production. The range of measured mass concentrations of
сред. Кроме того, разработанная методика может быть применена для cations, inorganic anions and organic acids in production of semiproducts
определения жесткости воды, используемой в спиртовом производстве. alcohol and water from 0.5 to 20.0 mg / dm3. Limits of the relative error of
Диапазон измеряемых концентраций катионов, анионов неорганических the method ranges from 22 % to 28 %. The developed method is of scientific
и органических кислот в полупродуктах спиртового производства и воде and practical interest. Application of the developed method will facilitate
от 0,5 до 20,0 мг / дм3. Границы относительной погрешности составляют the implementation of operational control and regulation of technological
от 22 % до 28 %. Разработанная методика представляет научный и прак‑ processes in alcohol production.
тический интерес. Применение разработанной методики будет способ‑
ствовать осуществлению оперативного контроля и регулирования техно‑
логических процессов производства спирта. Authors
Shelehova Natalia Victorovna, Candidate of Economical Science;
Авторы Polyakov Victor Antonovich,
Шелехова Наталия Викторовна, канд. экон. наук; Doctor of Technical Science, Professor, Academic of RSA;
Поляков Виктор Антонович, д-р техн. наук, профессор, академик РАН; Rimareva Lyubov Vyacheslavovna,
Римарева Любовь Вячеславовна, д-р техн. наук, профессор, академик РАН Doctor of Technical Science, Professor, Academic of RSA
ВНИИПБТ — филиал ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии», VNIIPBT — branch of FGBUN «FRC of nutrition and biotechnology»
111033, Москва, ул. Самокатная, д. 4 Б, 4b Samokatnaya St., Moscow, 111033, Russia,
satella@mail.ru, 4953624495@mail.ru, lrimareva@mail.ru satella@mail.ru, 4953624495@mail.ru, lrimareva@mail.ru

38 ПИВО и НАПИТКИ   2 •  2017