2 слайд. Выделение и очистка продуктов биоферментации – завершающая стадия
биотехнологического процесса Целевой продукт накапливается в клетке Целевой продукт выделяется в культуральную жидкость Целевым продуктом является сама клеточная масса Определяющие факторы: Природа конечного продукта. 3 слайд. Важным этапом отделения продукта является фракционирование культуральной жидкости. Культуральная жидкость представляет собой двухфазную систему, где твердой фазой является биомасса, а жидкой вода с растворенными осадками питательной среды и внеклеточными продуктами биосинтеза. Каждая фаза представляет собой сложную многокомпонентную систему, поэтому применяют различные методы химической технологии для выделения конечного продукта в чистом виде. 4 слайд. Отделение биомассы и методы разрушения клеток при накоплении целевого продукта в клетках Отделение клеток от культуральной жидкости Разрушение клеток Очистка конечного продукта от массы компонентов разрушенных клеток. 5 слайд. Сепарация Сепарация – это разделение культуральной жидкости и биомассы Флотация Фильтрация Ультрацентрифугирвоание. 6 слайд. Флотация – применяется, если клетки из-за низкой смачиваемости накапливаются в поверхностных слоях жидкости биореактора. Основной движущей силой флотации являются всплывающие пузырьки газа, они захватывают клетки и выносят их на поверхность. Оборудование – флотаторы. Преимущества метода: Метод экономичен; Высокопроизводителен; Возможность применения в непрерывном процессе. 7 слайд. Центрифугирование – метод основан на осаждении взвешенных в жидкости частиц с применением центробежной силы. Данный метод применим если: Суспензия фильтруется медленно; Необходимо максимальное освобождение культуральной жидкости от содержащихся частиц; Необходим непрерывный процесс сепарации в условиях, когда фильтры рассчитаны только на периодическое действие. В некоторых производственных процессах используют одновременно процессы фильтрации и центрифугирования – фильтрационные центрифуги. 8 слайд. Методы разрушения клеток Физические методы Химические методы Химико-ферментативные методы 9 слайд. Отделение клеточных стенок. Центрифугирование (более высокие скорости). Фильтрация (меньший размер пор). 10 слайд. Отделение, очистка и разделение продуктов. Осаждение Экстракция Адсорбция 11 слайд. Осаждение Физические методы Нагревание, охлаждение, разбавление или концентрирование растворов Химические методы Перевод в малорастворимые соединения 12 слайд. Современные методы разделения веществ Современные методы разделения веществ основаны на принципах экстракции и адсорбции. Хроматография – разделение веществ, основанное на неодинаковом распределении между двумя несмешивающимися фазами. 13 слайд. Концентрирование, обезвоживание, модификация и стабилизация продукта. Концентрирование Обратный осмос Ультрафильтрация Выпаривание 14 слайд. Прямой осмос При прямом осмосе, благодаря диффузии веществ через мембрану, происходит их разделение. Если к раствору приложить внешнее давление, которое превышает осмотическое давление, то растворитель вытекает через полупроницаемую мембрану против градиента концентрации растворенного вещества. Т.е происходит концентрирование раствора. 15 слайд. Ультрафильтрация При ультрафильтрации происходит отделение веществ с помощью мембранных фильтров. Одни фильтры предназначены для отделения крупных частиц, другие мембраны, с более мелкими порами, задерживают молекулы органических кислот. 16 слайд. Выпаривание При выпаривании для удаления воды или иного растворителя, раствор необходимо нагреть – основной недостаток метода. Для того, чтобы ослабить негативное влияние нагревания используют вакуум-выпарные установки. Используют также дисковые и пленочные выпарные аппараты, в них испарение усиливается из-за растекания жидкости тонким слоем по нагретой поверхности. 17 слайд. Обезвоживание продукта (сушка) Факторы, влияющие на выбор метода сушки: 1. Физико-химические свойства продукта: вязкость раствора, стабильность или жизнеспособность биообъекта при повышенных температурах.