Вы находитесь на странице: 1из 5

Микроспектрофотометрия - прием определения спектрального поглощения пигментов в клетке.

Микроспектрофотометр предназначен для анализа концентраций нуклеиновых кислот и белков в малых объёмах.
Микроспектрофотометрия используется в исследовании гистологических срезов.
Использование люминесцентной микроскопии в фармации: -
для качественного и количественного определения витаминов, специфических белков, ферментов.
-для изучения иммунофлюоресценции -для выявление
физиологического состояния клеток -для определения качества
водной среды.
Люминесцентные зонды. Примером использования является метод люминесцентной ангиографии –
контрастирование сосудов флуоресцеином и их последующее фотографирование. Этот краситель вводится
внутривенно пациентам. Он разносится с током крови по всему организму и диффундирует в дерму и эпидермис.
Диагностическая значимость этого метода заключается в том, что по скорости появления люминесценции в
поверхностных тканях судят об участках тела с пониженным кровообращением, в них флуоресцеин появляется
позже, чем в участках тела с нормальным кровообращением.
Люминесцентные метки. Флуоресцирующие молекулы можно ковалентно связывать с определенными
молекулами и затем эту систему ввести в исследуемый объект. Примером является использование
флуоресцентно-меченых антител. Если добавить такие антитела к суспензии смеси клеток, то они связываются
только с теми из них, на поверхности которых находятся специфические к данному антителу антигены. Возникает
яркая люминесценция определенных клонов клеток, наблюдаемая в люминесцентном микроскопе. Данная
методика используется в иммунологических исследованиях крови.
79. Свободные радикалы в биологических системах. Основные типы, физико-химические свойства и методы
обнаружения свободных радикалов: хемилюминисценция, ЭПР, ЯМР. Роль свободно–радикальных процессов в
патологии.
Свободные радикалы — частицы (как правило, неустойчивые), содержащие один или несколько неспаренных
электронов на внешней электронной оболочке. По другому определению
свободный радикал — вид молекулы или атома, способный к независимому существованию и имеющий один или
два неспаренных электрона.

Свойства свободных радикалов: 1. Высокая реакционная способность (наличие неспаренного электрона – наличие
свободной валентности). 2.
Парамагнетизм (относительная магнитная проницаемость , магнитный момент не равен нулю).
Реакции свободных радикалов
Реакции обрыва цепи:
1. Рекомбинация
2. Диспропорционирование.

Реакции роста цепи:


1. Отрыв радикалом атома или группы атомов от нейтральной молекулы

2.Присоединение радикала к кратной связи.

3. Разложение радикалов.

4. Перегруппировка радикалов.

Как правило, перегруппировка направлена на образование более устойчивого радикала.


Хемилюминесценция – явление испускания кванта электромагнитного излучения веществом при протекании в нем
некоторых химических реакций экзотермического типа.
Сущность метода: при окислении испускается квант сверх слабого свечения и чем больше количество реакций
рекомбинаций свободных радикалов протекает в единицу времени, тем большая интенсивность свечения,
следовательно, тем большее количество свободных радикалов.
*Пример: р-я рекомбинации.
Классификация:
Биолюминесценция представляет собой свечение, связанное с наличием специализированных ферментных
систем, специально предназначенных для генерации квантов света.
Митогенетические лучи (МЛ).
Сверхслабое свечение клеток и тканей.
Активированная хемилюминесценция.
Индуцированная ХЛ
Явление электронного парамагнитного резонанса заключается в регистрации поглощения электромагнитной
энергии при переходах между спиновыми уровнями основного орбитального уровня.
Применение спектров ЭПР в медико-биологических исследованиях:
- даёт уникальную информацию о парамагнитных центрах.
-однозначно различает примесные ионы, входящие в решётку от микровключений.
Ядерный магнитный резонанс (ЯМР) — резонансное поглощение или излучение электромагнитной энергии
веществом, содержащим ядра с ненулевым спином во внешнем магнитном поле, на частоте ν (называемой
частотой ЯМР), обусловленное переориентацией магнитных моментов ядер.
Сущность:
Отличие сигнала ЯМР от сигнала стандартного вещества позволяет определить так называемый химический
сдвиг, который обусловлен химическим строением изучаемого вещества.
Применение:
*является важным методом изучения в химии и биологии.
*ЯМР позволяет определять пространственные структуры молекул, например, структуры белков
*в химии и фармакологии является важным методом для установления правильности синтезированного препарата.
Роль свободных радикалов в патологии: на примере развития экспериментального рака печени у животных:

80. Оптические квантовые генераторы (лазеры), классификация. Индуцированное излучение. Инверсная


заселённость уровней. Метастабильные уровни. Принцип работы рубинового и гелий-неонового лазера.
Использование лазерного излучения в медицине, фармации.
Индуцированное излучение (вынужденное) — генерация нового фотона при переходе квантовой системы
(атома, молекулы, ядра и т. д.) с более высокого на более низкий энергетический уровень под воздействием
индуцирующего фотона, энергия которого равна разности энергий этих состояний.
Чтобы создать инверсную заселённость уровней, надо, чтобы возбуждённый уровень был метастабильным.
Метастабильный уровень – такой, на котором атом задерживается больше, чем 10-3 с, значительно дольше, чем
на обычном уровне (10-7 с). На метастабильном уровне можно «накопить» достаточное количество атомов для
создания инверсной заселённости.

Рубиновый лазер:
В состав прибора входит камера с резонатором, а также источник энергии, который возбуждает атомы кристалла.
В качестве активатора вспышки может использоваться ксеноновая импульсная лампа. Световой источник
располагается вдоль одной оси резонатора, имеющего цилиндрическую форму. На другой оси располагается
рубиновый элемент.
При активации устройства за счет включения лампы происходит эффект инверсии с повышением уровня хромовых
ионов в кристалле, в результате чего начинается лавинное увеличение количества числа испускаемых фотонов.
При этом на резонаторе наблюдается обратная связь, обеспечиваемая зеркальными поверхностями на торцах
стержня. Так происходит выработка узконаправленного потока. Принцип работы рубинового лазера строится и на
эффекте обратной связи. Это значит, что интенсивность светового потока начинает поддерживаться за счет зеркал,
взаимодействующих с оптическим резонатором.
Гелий-неоновый лазер:
Активной средой является газообразная смесь гелия и неона. Генерация осуществляется за счет переходов между
энергетическими уровнями неона, а гелий играет роль посредника, через который энергия передается для
создания инверсной заселенности.
При пропускании тока через гелий-неоновую смесь газов атомы гелия возбуждаются до состояний 2S, которые
являются метастабильными. При прохождении тока атомы накапливаются на этих уровнях. Когда возбужденный
атом гелия сталкивается с невозбужденным атомом неона, энергия возбуждения переходит к последнему.
Вследствие этого на уровнях 3S и 2S неона образуется инверсная заселенность относительно уровней 2P и 3P,
приводящая к возможности генерации лазерного излучения.
В медицине для терапии чаще используются маломощные газовые гелий- неоновые лазеры. Свет этого лазера
используется для ускорения заживления трофических язв, лечения заболеваний кожи и т.д. Свет красного гелий-
неонового лазера используется для внутреннего облучения крови.
81. Зонная энергетическая структура рабочего тела рубинового и гелий-неонового лазера. Основные режимы
работы лазера. Импульсная мощность лазера. Биофизические механизмы действия лазерного излучения на
организм человека (классификация, особенности и условия воздействия, последствия).
Зонная энергетическая структура рабочего тела рубинового лазера:
Рубин представляет собой окись алюминия, в которой часть атомов алюминия замещена атомами хрома.
Активным веществом служат ионы хрома Cr 3+. Рубиновый стержень помещают в спиральную импульсную
ксеноновую лампу, витки которой охватывают его со всех сторон. Вспышка лампы длится миллисекунды. За это
время лампа потребляет энергию в несколько тысяч джоулей, большая часть которой уходит на нагревание
прибора. Другая, меньшая часть, в виде голубого и зеленого излучения поглощается рубином. Эта энергия и
обеспечивает возбуждение ионов хрома.
Зонная энергетическая структура рабочего тела гелий-неонового лазера: В гелий-неоновом
лазере рабочим веществом (активной средой) является смесь гелия и неона. Основой устройства гелий-неонового
лазера, является разрядная трубка, заполненная смесью гелия под давлением 1 мм рт. ст. и неона под давлением
0,1-0,2 мм рт. ст. На концах трубки имеются зеркала, одно из которых полупрозрачно.
По временному режиму работы лазеры: непрерывные, импульсные.
Лазеры непрерывного действия используют, как правило, газовый или жидкостный резонатор, способы их накачки
могут быть достаточно разнообразными (часто используется тлеющий электрический разряд). К этому типу
относятся СО2 и He-Ne лазеры, а также многие лазеры на красителях.
Импульсные лазеры излучают свет в виде вспышек света (импульсов) длительностью в тысячные, миллионные и
даже миллиардные доли секунды, но передаваемая каждой из них энергия сравнительно велика. К импульсным
лазерам относятся рубиновый, александритовый, неодимовый, диодные лазеры, а также лазеры на красителях.
Большинство из них основано на твердом сердечнике с ламповой накачкой. Механизм работы импульсных
лазеров предполагает накопление энергии в течение относительно длительного промежутка времени, чтобы
«выплеснуть» ее в одно мгновенье.
Импульсная мощность— среднее значение мощности сигнала за время длительности импульса.
Импульсная мощность Ри и ее среднее значение Р за период Т повторения импульсов связаны соотношением:

где τ — длительность импульса; Q — скважность последовательности импульсов.


Биофизические механизмы действия лазерного излучения на организм человека: 1)
Фотодеструктивное воздеи̌ствие, при котором тепловой, гидродинамический, фотохимический эффекты света
вызывают деструкцию тканей. Этот вид лазерного взаимодеи̌ствия использует в лазерной хирургии.
2) Фотофизическое и фотохимическое воздеи̌ствие, при котором поглощенный биотканями свет вызывает
фотохимические и фотофизические реакции. На этом виде взаимодеи̌ствия основывается применение лазерного
излучения как терапевтического.
3) Невозмущающее воздеи̌ствие, когда биосубстанция не меняет своих свойств, в процессе взаимодеи̌ствия со
светом. Это такие эффекты, как рассеивание, отражение и проникновение. Этот вид используют для диагностики (к
примеру - лазерная спектроскопия
82. Биологические мембраны, их основные функции. Структура биологических мембран. Исследование структуры
биологических мембран с помощью физических методов. Жидкостно-мозаичная модель мембран.
Функции биологических мембран:
1.Ограничивают клетку и клеточные органеллы, разделяя клетку на отдельные области (компартаменты), что
позволяет поддерживать неравновесное состояние организма
2. Формируют межклеточные контакты
3. Обеспечивают механическую защиту клеток

Вам также может понравиться