МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ
ТОМСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
Химический факультет

ЛАБОРАТОРНЫЙ ПРАКТИКУМ
ПО ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Учебно-методическое пособие по дисциплине

«Газовая хроматография» для студентов химического факультета
направлений подготовки 04.03.01 (020100) – Химия и специальности,
020201 – Фундаментальная и прикладная химия и специальности
04.05.01 (020201.65) – Фундаментальная и прикладная химия

Томск
Издательский Дом Томского государственного университета
2016
РАССМОТРЕНО И ОДОБРЕНО методической комиссией химического
факультета
Протокол от «06» октября 2015 г. № 26

Председатель комиссии,
доцент В.В. Хасанов

Учебно-методическое пособие является составной частью программ

курсов «Методы приготовления и исследования катализаторов. Часть 2.
Хроматография» и «Методы исследования материалов. Часть 2. Газовая
хроматография».
Лабораторные работы выполняются с использованием газовых хрома-
тографов «Кристалл – 5000.1» и «Кристалл – 5000.2», что дает возмож-
ность студентам на практике освоить современное аналитическое обору-
дование, научится уверенно и грамотно применять полученные теоретиче-
ские знания при прохождении производственных практик, а также ис-
пользовать полученные навыки в своей профессиональной деятельности.

СОСТАВИТЕЛИ: О.И. Сидорова, С.И. Галанов

2
 СОДЕРЖАНИЕ

Предисловие ............................................................................................... 4
I. Классификация хроматографических методов анализа ..................... 5
II. Основные принципы работы газового хроматографа ....................... 7
Хроматографические колонки .............................................................. 10
Детекторы ................................................................................................ 13
Дозирование пробы ................................................................................ 17
III. Теоретические основы хроматографии ............................................. 19
Хроматографический процесс ............................................................... 20
Хроматограмма ....................................................................................... 22
Эффективность колонки (число теоретических тарелок) ................... 26
Влияние скорости потока газа-носителя на эффективность
насадочной колонки. Диаграмма Ван-Деемтера ................................. 28
Влияние температуры на параметры процесса разделения ............... 35
IV. Качественные газохроматографический анализ .............................. 43
Сравнение экспериментальных и приведенных в литературе
параметров удерживания ....................................................................... 44
Использование корреляционных зависимостей .................................. 48
Идентификация по эталонным веществам ........................................... 51
Аналитическая реакционная газовая хроматография ......................... 52
V. Количественный газохроматографический анализ ........................... 53
Параметры пика как характеристика количества вещества ............... 53
Методы измерения площади пиков ...................................................... 57
VI. Рекомендации при работе с газовыми хроматографами
«Кристалл-5000.1» и «Кристалл-5000.2» ................................................ 59
VII. Лабораторные работы ........................................................................ 71
Лабораторная работа № 1 ...................................................................... 71
Лабораторная работа № 2 ...................................................................... 74
Лабораторная работа № 3 ...................................................................... 76
Лабораторная работа № 4 ...................................................................... 77
Лабораторная работа № 5 ...................................................................... 78
VIII. Охрана труда при эксплуатации приборов газовой
хроматографии ........................................................................................... 78
Дополнительные материалы при освоении курса
«Газовая хроматография» ......................................................................... 84
Список литературы .................................................................................... 87

3
 ПРЕДИСЛОВИЕ
Хроматография – один из самых распространенных современных ме-
тодов разделения и анализа многокомпонентных смесей. Его важные до-
стоинства – высокая точность, чувствительность, возможность определе-
ния малых количеств веществ, сравнительная простота аппаратурного
оформления и возможность автоматизации, экспрессность, гибкость из-
менения условий разделения.
Среди хроматографических методов значительное место занимает га-
зовая хроматография. Газохроматографическое разделение основано на
различиях в летучести и растворимости (или адсорбируемости) компо-
нентов разделяемой смеси. Этот метод можно использовать для анализа
газообразных, жидких и твёрдых веществ с молекулярной массой меньше
400, которые должны удовлетворять определённым требованиям, глав-
ные из которых – летучесть, термостабильность, инертность, лёгкость
получения. Этим требованиям в полной мере удовлетворяют, как прави-
ло, органические вещества, поэтому газовую хроматографию широко
используют как серийный метод анализа органических соединений.
Настоящее пособие составлено в соответствии с современными тре-
бованиями к терминологии и изложению основ хроматографического
анализа. Первая часть пособия посвящена общим вопросам хроматогра-
фии, вторая – практическому применению газовой хроматографии как
одному из важнейших способов хроматографического определения раз-
личных компонентов в объектах окружающей среды и технологических
средах.

4
 I. Классификация хроматографических методов анализа

Хроматография – физико-химический метод разделения смесей, осно-

ванный на сорбционном распределении компонентов между двумя фаза-
ми, одна из которых – подвижная фаза (газ или жидкость) – перемещает-
ся относительно другой – неподвижной фазы (сорбента). Смесь веществ,
отличающихся разной сорбируемой способностью, разделяется на от-
дельные компоненты в процессе движения по слою сорбента.
В основу классификаций хроматографических методов положены
принципы, учитывающие следующие различные особенности процесса
разделения:
• различия в агрегатном состоянии фаз используемой хрома-
тографической системы;
• различия в характере взаимодействий разделяемых веществ
с неподвижной фазой;
• экспериментальные различия в способах проведения про-
цесса хроматографического разделения.

Таблица 1
Классификация вариантов хроматографии по фазовым состояниям

Подвижная фаза Неподвижная фаза Название метода

Адсорбент Газоадсорбционная
Газ
Жидкость Газожидкостная
Адсорбент Жидкостно-адсорбционная
Жидкость
Жидкость Жидкость-жидкостная
Газ или пар в сверхкри- Адсорбент Флюидно-адсорбционная
тическом состоянии Жидкость Флюидно-жидкостная
Сложная композиция
Коллоидная система твердых и жидких компо- Полифазная хроматография
нентов

5
 Таблица 2
Варианты хроматографии по характеру взаимодействий

Механизм процесса разделения Вариант хроматографии

По размеру молекул Ситовая
За счет физической адсорбции или растворения Молекулярная
За счет ионного обмена Ионообменная
За счет водородных связей, химического сродства и др. Хемосорбционная

Таблица 3
Варианты хроматографии, различающиеся по характеру взаимодействий
разделяемых соединений с неподвижной фазой

Механизм процесса разделения Название варианта

По размеру молекул Ситовая хроматография
За счет физической адсорбции Молекулярная хроматография
За счет растворения Распределительная хроматография
За счет ионного обмена Ионообменная хроматография
За счет образования водородной связи,
Хемосорбционная хроматография
проявления химического сродства и др.
За счет образования координационных
связей разделяемых органических молекул
Лигандообменная хроматография
с катионами металлов в привитых на по-
верхности адсорбента группах (лигандах)
За счет образования прочного комплекса
только одним из разделяемых компонен-
Аффинная хроматография
тов с привитой специфической группой
неподвижной фазы

Таблица 4
Варианты хроматографии по способу проведения процесса

Способ проведения Вариант хроматографии

В цилиндрическом слое сорбента Колоночная
В слое сорбента на плоской поверхности Планарная
В пленке жидкости или слое сорбента,
Капиллярная
размещенном на внутренней стенке трубки
В полях электрических, магнитных,
Хроматография в полях сил
центробежных и других сил

В зависимости от цели проведения хроматографического процесса

различают аналитическую, неаналитическую, препаративную и промыш-
ленную хроматографию.
Аналитическая хроматография предназначена для определения каче-
ственного и количественного состава исследуемой смеси.

6
 Неаналитическая хроматография – метод исследования физико-
химических характеристик веществ при использовании хроматографиче-
ской аппаратуры и на основании параметров хроматографических зон.
Препаративная хроматография применяется для выделения неболь-
ших количеств чистых компонентов (или смесей) в лабораторных усло-
виях.
Промышленная хроматография используется для получения чистых
веществ в значительных количествах.
Приведенная выше классификация хроматографических методов не
является исчерпывающей, так как в последние годы появился ряд ком-
плексных (гибридных) хроматографических методов.

II. Основные принципы работы газового хроматографа

Устройство ввода (рис. 1) подает в поток газа-носителя определенное
количество анализируемой смеси в газообразном состоянии непосред-
ственно перед колонкой. В хроматографической колонке осуществляется
разделение смеси на отдельные составляющие компоненты за счет про-
цессов сорбции и десорбции веществ на неподвижной фазе. При этом
слабо сорбируемые вещества, будут переноситься подвижной фазой по
колонке с большей скоростью и наоборот. Из колонки разделенные ком-
поненты смеси попадают в детектор.

Рис. 1. Принципиальная схема хроматографа

Детектор регистрирует присутствие веществ, отличающихся по физи-

ческим или физико-химическим свойствам от газа-носителя, и преобра-
зует возникающие изменения в электрический сигнал. Далее происходит

7
усиление и аналого-цифровое преобразование полученного сигнала. Реги-
стрирующий прибор (компьютер или самописец) строит график зависимости
сигнала детектора от времени, называемый хроматограммой (рис. 2).

Рис. 2. Хроматограмма

Прохождение в детекторе газа-носителя без пробы на хроматограмме

отражается фоновым сигналом детектора, который называется нулевой
линией. Нулевая линия имеет высокочастотные колебания – шум. Изме-
нение сигнала нулевой линии детектора во времени называется дрейфом.
При прохождении через детектор анализируемого компонента проис-
ходит отклонение уровня сигнала детектора от нулевой линии. Это от-
клонение отображается на хроматограмме в виде пика. Пик на хромато-
грамме имеет следующие характеристики:
Время удерживания – время от начала анализа до выхода максимума
пика. Время удерживания – качественная характеристика анализируемого
компонента, площадь и высота – количественные характеристики.
Площадь – область, ограниченная профилем пика и базовой линией.
Высота – расстояние от вершины пика до базовой линии.
В газовой хроматографии подвижной фазой является газ. Стационар-
ной фазой является либо пористое полимерное твердое вещество, либо, в
большинстве случаев, жидкость с высокой вязкостью, которая в форме
тонкой пленки нанесена на носитель. Материал, на который наносится
жидкая фаза, может быть или мелкодисперсным твердым веществом с
известным гранулометрическим составом (носитель для заполненных
хроматографических колонок) или стеклянным (кварцевым) капилляром.

8
 Поток подвижной фазы обозначают в газовой хроматографии как газ-
носитель, который движется вдоль жидкой стационарной фазы, при этом
разделение веществ происходит за счет многократного повторения про-
цесса распределения каждого компонента между обеими фазами. Газ-
носитель осуществляет перенос компонентов от устройства ввода через
хроматографическую колонку к детектору. Разделение при этом основы-
вается на различных эффектах:
• всегда вносит вклад температура кипения пробы;
• важный момент – растворимость вещества в стационарной жидкой
фазе;
• существенный вклад в разделение вносит адсорбция.
Соединения с высоким давлением пара и/или низкой растворимостью
удерживаются в жидкой фазе лишь на короткое время. Наоборот, соеди-
нения с низким давлением пара и/или более высокой растворимостью
медленно элюируются со стационарной фазы. Транспорт пробы происхо-
дит исключительно в газовой фазе, а разделение – в стационарной фазе.
Качество разделения зависит от вида и частоты взаимодействия между
пробой и стационарной фазой, это определяется функциональными груп-
пами или полярностью пробы и стационарной фазы.
При выборе газа-носителя следует учитывать, что природа газа-
носителя оказывает влияние как на характеристики разделения компо-
нентов анализируемой смеси в хроматографической колонке, так и на
параметры работы детектора. В этой связи не всегда оптимальный для
данного детектора газ-носитель является наилучшим с точки зрения
обеспечения высокоэффективного разделения веществ анализируемой
смеси, и наоборот.
Исходя из этого, и определены следующие основные требования,
предъявляемые к газу-носителю:
• газ-носитель должен способствовать обеспечению оптимального
разделения компонентов смеси;
• газ-носитель должен обеспечить максимально высокую чувстви-
тельность детектора;
• газ-носитель должен характеризоваться химической инертностью по
отношению к компонентам разделяемой смеси, наполнителю хромато-
графической колонки, материалу, из которого изготовлена колонка и
подводящие газ магистрали;
• газ-носитель должен иметь достаточно высокую степень чистоты
(99,9 - 99,99 % основного компонента);

9
 • газ-носитель должен существенно хуже удерживаться неподвижной
фазой по сравнению с любым из разделяемых компонентов, поскольку
только в этом случае выполняются условия элюентного анализа;
• газ-носитель должен иметь небольшую вязкость для поддержания
минимального перепада давления в колонке, минимального значения
разности давлений газа-носителя на входе в колонку и на выходе из нее;
• газ-носитель должен обеспечивать оптимальное значение коэффици-
ентов диффузии разделяемых компонентов, способствующее минималь-
ному размыванию полос;
• газ-носитель должен быть взрывобезопасен;
• газ-носитель должен быть достаточно дешев.
В практике газовой хроматографии в качестве газа-носителя чаще
всего используются индивидуальные газы, газообразные соединения и
смеси газообразных соединений: азот, водород, гелий, аргон, углекислый
газ, воздух.

Хроматографические колонки

Основная задача хроматографической колонки состоит в том, чтобы

разделить многокомпонентную анализируемую смесь на серию последо-
вательно выходящих из колонки бинарных смесей, индивидуальный
компонент – газ-носитель, которые затем используются в соответствии с
назначением хроматографической колонки.
Хроматографические колонки в соответствии с их назначением под-
разделяются на колонки аналитические, колонки препаративные и так
называемые предколонки.
Главное назначение аналитической хроматографической колонки со-
стоит в том, чтобы разделить многокомпонентную смесь на серию би-
нарных смесейкомпонент-газ-носитель, для которых уже может быть
применен прибор, регистрирующий состав этой смеси и позволяющий
установить качественный состав анализируемой смеси и количественное
содержание каждого из компонентов.
Препаративные хроматографические колонки предназначены для по-
лучения методами газовой хроматографии в чистом виде необходимых
количеств тех или иных компонентов, присутствующих во вводимой в
колонку пробе.
Предколонки позволяют решить задачу предварительного концентри-
рования компонентов пробы из достаточно больших объемов для после-

10
дующего их разделения или решить задачу извлечения из объема анали-
зируемой пробы мешающих разделению компонентов.
На данном этапе изучения программного материала наибольший ин-
терес для нас представляют хроматографические колонки аналитического
назначения.
Аналитические колонки в зависимости от величины внутреннего диа-
метра, способа размещения неподвижной фазы и соответственно органи-
зации внутреннего пространства подразделяются следующим образом:
• насадочные колонки, характеризующиеся величиной внутреннего
диаметра 2-5 мм;
• микронасадочные колонки с величиной внутреннего диаметра 1.0–
2.0 мм;
• макрокапиллярные колонки с величиной внутреннего диаметра 0.3–
0.5 мм;
• микрокапиллярные колонки с величиной внутреннего диаметра
0.10–0.25 мм.
Для капиллярных колонок существует дополнительная классифика-
ция:
• колонки, содержащие неподвижную жидкую фазу непосредственно
на гладких внутренних стенках колонки;
• колонки, содержащие на гладких внутренних стенках слой пористо-
го сорбента;
• колонки, содержащие на внутренних стенках твердый носитель,
пропитанный неподвижной жидкой фазой;
• колонки с химически привитой неподвижной жидкой фазой, в кото-
рых неподвижная жидкая фаза химически связана с внутренней поверх-
ностью капилляра.
Основные требования, предъявляемые к материалу колонки следую-
щие:
• материал колонки не должен быть химически активным или дей-
ствовать каталитически по отношению к неподвижной фазе и разделяе-
мым компонентам;
• должен обеспечивать возможность изготовления колонок необходи-
мой формы;
• должен выдерживать нагревание до нужной температуры.
Из насадочных колонок наиболее удобны в изготовлении и эксплуа-
тации металлические колонки из нержавеющей стали, меди, алюминия.
В этом плане следует, однако, обязательно учитывать, что медь реагирует

11
с ацетиленовыми углеводородами, катализирует разложение спиртов.
Алюминиевые колонки, в свою очередь, непригодны для заполнения мо-
лекулярными ситами. Разделение хелатов металлов следует производить
в основном на колонках из боросиликатного стекла.
Длина насадочных колонок обычно от 1 до 3 м, реже до 10 м. Форма
колонок – прямая, U-образная, W-образная, спиральная. Длина и форма
насадочных колонок определяется, как правило, размерами термостата
колонок.
При изготовлении спиральных колонок следует учитывать, что диа-
метр витка спирали не должен быть чрезмерно маленьким, так как длина
пути газа по внешней и внутренней поверхности трубки будет суще-
ственно различаться, и это вызывает дополнительное размывание зоны.
Обычно отношение радиуса спирали к радиусу колонки составляет вели-
чину порядка 80.
Промежуточное положение между насадочными и капиллярными ко-
лонками занимают микронасадочные колонки. Они появились в
1962 году в результате попытки сочетать достоинства насадочных и ка-
пиллярных колонок.
Капиллярные колонки изготавливают преимущественно из стекла, так
как стекло обладает наименьшей адсорбционной и каталитической ак-
тивностью. Колонки, изготовленные из меди, нержавеющей стали, при-
меняют в основном для анализа углеводородов.
С 1977 года широко применяются капиллярные колонки из кварца. Их
преимущество заключается в низком содержании оксидов металлов: ще-
лочных, алюминия, железа, бора. Оксиды способны легко взаимодей-
ствовать с молекулами – донорами электронов, сильные основания
(например, амины) могут хемосорбироваться и вообще не выходить из
колонки. Для придания капиллярным колонкам дополнительной прочно-
сти их внешняя поверхность покрывается лаком специального состава.
Второй класс хроматографических колонок составляют препаратив-
ные колонки. Вследствие своего назначения – получения достаточно
больших количеств особо чистых веществ – хроматографические колон-
ки этого класса характеризуются величиной внутреннего диаметра от
10 мм и более, длиной от одного до нескольких десятков метров. Основ-
ной материал для их изготовления – нержавеющая сталь.
Хроматографические колонки третьей группы (предколонки) изготав-
ливаются из материалов и имеют характеристики, отвечающие их назна-
чению в каждом конкретном случае.

12
 Детекторы

Хроматографический детектор – устройства для количественного и

качественного определения веществ разделяемой смеси в потоке по-
движной фазы на выходе из хроматографической колонки. Детекторы
хроматографические можно рассматривать также как преобразователь-
ный элемент, в котором изменение состава проходящей через него смеси
преобразуется в изменение выходного сигнала. Различают детекторы
хроматографические дифференциального и интегрального типа. Первые
регистрируют мгновенное значение одной из характеристик (концентра-
ции или потока), вторые суммируют количество вещества за определен-
ный промежуток времени. Основными характеристиками детекторов
хроматографических является чувствительность, предел обнаружения,
линейный динамический диапазон.
Чувствительность – отношение изменения выходного сигнала к изме-
нению концентрации (или массовой скорости) анализируемого вещества,
поступающего в детектор. Предел обнаружения минимальная концентра-
ция или минимальная массовая скорость анализируемого вещества, кото-
рые еще можно обнаружить. Предел обнаружения хроматографической
методики наименьшее содержание контрольного вещества, определяемое
хроматографическим детектором с заданной доверительной вероятностью;
при этом выходной сигнал должен в 2 раза превышать уровень флуктуаци-
онных шумов. Линейный динамический диапазон интервал, в котором со-
храняется линейная зависимость показаний детектора от концентрации или
кол-ва анализируемого вещества. Он определяется как отношение макси-
мальной концентрации, при которой сохраняется линейность, к минималь-
ной определяемой концентрации. Значение чувствительности детектора в
линейном динамическом диапазоне величина постоянная.
Детекторы хроматографические должны обладать: низким пределом об-
наружения; минимальным размыванием хроматографических зон; широким
линейным динамическим диапазоном; низким значением дрейфа выходного
сигнала во времени под влиянием различных факторов и низким уровнем
шума; малой инерционностью; слабой зависимостью показаний от состава
подвижной фазы, изменения скорости ее потока и пульсаций, а также от из-
менения температуры; надежностью и простотой в обслуживании.
В газовой хроматографии практически используют только детекторы
дифференциального типа, которые подразделяют на концентрационные и
потоковые.

13
 В концентрационном детекторе величина сигнала зависит от концентра-
ции компонента i в потоке газа-носителя, то есть значение выходного сигна-
ла Ес = Sс с, где Sc – чувствительность (коэффициент пропорциональности),
с – мгновенное значение концентрации определяемого вещества в объеме
детектора; площадь хроматографического пика Spc = Sc.q/F, где q – количе-
ство вещества, прошедшего через камеру детектора, F – скорость потока
газа-носителя. В таких детекторах (площадь пика зависит от скорости пото-
ка) при этом концентрацию вещества рассчитывают по высоте пика.
В потоковом детекторе значение выходного сигнала Еj=Sj.j, где Sj -
чувствительность, j– мгновенное значение массовой скорости вещества,
поступающего в детектор, j = dq/dt (t-время); площадь пика Spj = Sj.q. В
таких детекторах количество вещества определяют по площади пика.
Принадлежность детекторов к одному из типов устанавливают, измеряя
зависимость его показаний от скорости газа-носителя. Концентрацион-
ные хроматографические детекторы, как правило, недеструктивные (не-
разрушающие анализируемые вещества), а потоковые - деструктивные.
В газовой хроматографии используется большой спектр детекторов,
которые отвечают самым различным требованиям. Выбор производится в
зависимости от поставленной проблемы и необходимой чувствительно-
сти обнаружения (рис. 3).

Рис. 3. Сравнение линейного динамического диапазона различных газохроматографических

детекторов (ФИД – фотоионизационный детектор; ПИД – пламенно-ионизационный
детектор; ДЭЗ – детектор электронного захвата; ДТП – детектор по теплопроводности;
ПФД – пламенно-фотометрический детектор)

14
 Основные характеристики применяемых детекторов представлены в
таблице 5.
Таблица 5
Характеристики детекторов

Типичное мини- Линейный

Деструк
мальное детекти- динамиче-
Название Тип струк- Селективный
руемое количество ский диапа-
тивный
(S/N=2) зон
Вещества,
ПИД
ионизируе-
(пламенно- Селек-
да мые в воз- 5 пг C/s 107
ионизационный тивный
душно-Н2-
детектор)
пламени
Все, что име-
ДТП ет теплопро-
Универ-
(детектор по теп- нет водность, 400 пг/мл 106
сальный
лопроводности) отличную от
газа-носителя
ДЭЗ Электофилы 0,1 пг Cl/с в зави-
Селек-
(детектор элек- нет в газовой симости от струк- 104
тивный
тронного захвата) фазе туры
АФД
Селек- N, P, гетеро- 0,4 пг
(азотно-фосфор- да 104
тивный атомы 0,2 пг
ный детектор)
ДЭП
0,5 пг 106
(детектор электро- Селек- галогены, N,
да 2 пг 104
литической прово- тивный S
4 пг 104
димости)
ПФД
Специ-
(пламенно- 20 пг 103
фиче- да P, S
фотометрический 0,9 пг 104
ский
детектор)
ИК-Фурье
(инфракрасная Колебания 1000 пг для сильно
Универ-
спектроскопия с нет атомов в поглощающих 103
сальный
преобразованием молекулах соединений
Фурье)
от 10 пг до 10 нг
МСД Подходит для
Универ- (полный ионный
(масс-селективный да любого со- 105
сальный ток или сканиро-
детектор) единения
вание
АЭД
Подходит для от 0,1 до 20 пг/с в
(атомно- Универ-
да любого со- зависимости от 104
эмиссионный сальный
единения элемента
детектор)

15
 Детектор по теплопроводности (ДТП) состоит из электронагреватель-
ного элемента (электрической спирали сопротивления или термистора) в
термостатируемом металлическом блоке (рис. 4). Если вещество присут-
ствует в газе-носителе, теплопроводность уменьшается, и нагревательная
спираль теряет меньше тепла, соответственно при постоянном напряже-
нии температура нагревательной спирали повышается, и ее сопротивле-
ние увеличивается. Это изменение измеряется и записывается.

Рис. 4. Схематическое изображение ДТП

ДТП – это неселективный универсальный детектор, который особенно

часто используют в анализе газов. Он работает стабильно со средней чув-
ствительностью, его просто использовать. Однако он нуждается в ста-
бильном потоке газа-носителя, а также постоянной температуре и напря-
жении питания. Измерение происходит без разрушения пробы.
Пламенно-ионизационный детектор основан на том, что электриче-
ская проводимость газов пропорциональна концентрации электрически
заряженных частиц в этих газах. Соединения сгорают в пламени водо-
родной горелки и образуют электрически заряженные частицы. Форсунка
играет роль катода (рис. 5).
Непосредственно над ней расположен электрод-коллектор в качестве
анода. Электроника отслеживает изменение и записывает сигнал.
ПИД реагирует на все «сжигаемые», то есть ионизируемые водород-
ным пламенем, компоненты. Наряду с этим ПИД реагирует также на
определенные «негорючие» контрольные вещества, которые, тем не ме-
нее, легко ионизируются благодаря своей химической структуре (напри-
мер, галоидсодержащие углеводороды). Величина сигнала ПИД для угле-
водородов непосредственно зависит от количества атомов углерода. ПИД

16
не чувствителен к таким веществам, как благородные газы, кислород,
азот, окись углерода, двуокись углерода и вода.

Рис. 5. Схема пламенно-ионизационного детектора

ПИД – это ионизационный детектор с очень хорошей чувствительно-

стью к почти всем органическим соединениям. Стабильность очень хо-
рошая, низкие эксплуатационные расходы, простой в уходе и обслужива-
нии. Со специальными дополнительными устройствами открываются
другие области применения. Анализируемые вещества при измерении
разрушаются.

Дозирование пробы

Правильный ввод пробы предполагает обязательное выполнение трех

основных требований:
• обеспечение минимального размывания пробы в системе ввода про-
бы;
• обеспечение максимальной точности и воспроизводимости дозируе-
мого количества образца;
• обеспечение неизменности количественного и качественного состава
смеси до и после дозирования.

17
 Первое требование исходит из того, что в упрощенной теории линей-
ной хроматографии идеальная модель исключает какое-либо размывание
пробы в системе ввода, поскольку предполагается, что образец в начале
хроматографической колонки занимает объем неподвижной фазы, экви-
валентный одной теоретической тарелке. Теоретическая тарелка характе-
ризует такую часть колонки по высоте, на протяжении которой одно-
кратно реализуется процесс перехода исследуемого соединения из по-
движной фазы в неподвижную и обратно. На практике конечный объем
пробы, и конечное время дозирования препятствуют этому. Тем не менее,
при стремлении к идеальной модели следует вводить минимально воз-
можные по объему пробы за минимально короткий промежуток времени.
Для практической нелинейной хроматографии мгновенный ввод пробы
не всегда приводит к оптимальным результатам, поскольку, чем выше
концентрация компонента на слое сорбента, тем сильнее размывание по-
лосы, когда изотерма адсорбции исследуемого соединения в этой области
его концентраций нелинейна.
Таким образом, при мгновенном вводе пробы разбавление образца га-
зом-носителем будет гораздо меньшим, чем при медленном дозировании,
и, следовательно, в первом случае в колонку войдет узкая полоса с высо-
кой концентрацией, а во втором – более широкая полоса с меньшей кон-
центрацией. Оптимальное соотношение этих двух противоположно дей-
ствующих факторов – ширины полосы и концентрации, обусловленное
степенью влияния каждого из них на размывание полосы, определяет
время дозирования.
Второе требование к вводу пробы предполагает дозирование образца
с высокой точностью и воспроизводимость, поскольку хроматография
является сравнительным методом анализа. Это требование усугубляется
стремлением к вводу минимального количества образца, что на совре-
менном уровне составляет примерно 1 мкл газовой пробы и 0,05 мкл
жидкой пробы.
Третье требование к вводу пробы предусматривает исключение из-
менения качественного состава пробы и количественного соотношения
анализируемых компонентов в системе ввода, например, за счет разло-
жения при контакте с нагретыми металлическими стенками испарителя,
каталитических превращений, полимеризации, селективной сорбции
компонента.
Следует обязательно учитывать, что при недостаточно высокой тем-
пературе в зоне испарения образца может происходить процесс фракцио-

18
нирования пробы. При этом тяжелые компоненты пробы не могут испа-
риться мгновенно, и поступающий в первый момент в колонку пар будет
обеднен ими. В особых случаях температура испарителя может програм-
мироваться, если стоит задача фракционирования сложной по составу
анализируемой смеси уже в испарителе.
Кроме отмеченных общих требований имеются и специфические тре-
бования к дозирующим устройствам для каждого из агрегатных состоя-
ний проб: газообразных, жидких, твердых. В зависимости от агрегатного
состояния анализируемой пробы используются различные способы их
ввода.
Ввод газообразных проб можно осуществить либо с помощью обыч-
ного медицинского шприца, либо используя специальные дозирующие
устройства. Специальные дозирующие устройства подразделяются: газо-
вый кран, газовый шток, газовая петля. При использовании этих дозиру-
ющих устройств анализируемая проба становится частью объема газа-
носителя и вместе с ним поступает в колонку.

III. Теоретические основы хроматографии

Единой стройной теории, количественно описывающей весь процесс
хроматографического разделения, до настоящего времени нет. Установ-
ление теоретической зависимости между химическим строением веществ
и его коэффициентом распределения между фазами, знание которого
позволяет предсказать хроматографическое поведение вещества, является
задачей, которая еще ждет своего решения.
Поэтому в настоящее время предложен ряд теоретических подходов,
использующих некоторые допущения и позволяющих достаточно удо-
влетворительно описывать ход хроматографического процесса.
Хроматография является динамическим процессом: транспорт каждо-
го вещества осуществляется исключительно подвижной фазой через слой
неподвижной фазы, снижение скорости миграции сорбата происходит за
счет его удерживания стационарной фазой. Разделению веществ проти-
водействует диффузия, которая вызывает выравнивание концентраций и,
тем самым, повторное смешение веществ. Это означает, что хроматогра-
фическое разделение необходимо проводить за столь короткое время,
чтобы это повторное смешение за счет диффузии оставалось на мини-
мальном уровне. С другой стороны, подвижная фаза не должна протекать

19
слишком быстро, так как процесс обмена веществ со стационарной фазой
требует определенного времени. Для каждой хроматографической систе-
мы существует оптимальная скорость потока.

Хроматографический процесс

Мерой склонности вещества к распределению между фазами служит

коэффициент распределения К(х):
cstat
K( x)  , (1)
cmob
где cstat – концентрация (активность) вещества Х в стационарной фазе; cmob –
концентрация вещества Х в подвижной фазе, или фактор емкости к´:
nstat
k'  , (2)
nmob
где nstat – число молей вещества Х в стационарной фазе; nmob – число мо-
лей вещества Х в подвижной фазе.
Стационарная и подвижная фазы должны, конечно, находиться в тес-
ном контакте друг с другом, чтобы могло установиться равновесие. Для
разделения смеси веществ нужно, чтобы различные компоненты в хрома-
тографической системе обладали различными коэффициентами распре-
деления и также различными факторами емкости.
Смесь двух компонентов 1 и 2 наносят на стационарную фазу (1 нахо-
дится преимущественно в стационарной фазе; 2 «предпочитает» подвиж-
ную фазу). В этом случае (рис. 6) приняты следующие факторы емкости:
k'=5/2=2,5 и k'=2/5=0,4.
Когда подается свежая порция подвижной фазы, то устанавливается
новое равновесие: молекулы образца, которые находились в подвижной
фазе, частично адсорбируются на «чистой» поверхности стационарной
фазы согласно своим коэффициентам распределения, в то время как ад-
сорбированные молекулы снова переходят в подвижную фазу.
Благодаря многократному повторению этого процесса оба компонента
будут разделены. Компонент 2 находится преимущественно в подвижной
фазе и мигрирует быстрее компонента 1, который сильнее удерживается
стационарной фазой.

20
 Рис. 6. Принцип хроматографического разделения

Как видно из рис. 6, равновесие устанавливается в этом случае на от-

резке пути, длина которого соответствует примерно четырем диаметрам
зерна стационарной фазы. Это расстояние составляет, таким образом,
одну теоретическую ступень разделения, «тарелку». Чем длиннее хрома-
тографический путь, тем больше он содержит ступеней разделения и тем
лучше будет разделение смеси. Этот эффект, однако, частично компенси-
руется уширением полос. Зоны веществ будет всегда тем шире, чем
больший путь прошла проба и чем больше ее время удерживания.

21
 Хроматограмма

Получаемый в процессе хроматографического анализа разделения пик

представляет концентрацию пробы в подвижной фазе на выходе из ко-
лонки как функции времени, и теоретически он может быть описан нор-
мализованной функции распределения. В большинстве случаев наблюда-
емая зависимость может быть описана функцией распределения Гаусса,
Пуассона или биноминальной функцией. Пики содержат одновременно
как качественную, так и количественную информацию об исследованной
смеси.
Качественный анализ: время удерживания одного компонента при
одинаковых условиях хроматографии является постоянной величиной.
Время удерживание – это время, которое проходит с момента введения
пробы до регистрации самописцем максимума сигнала. Условия хрома-
тографии, которые влияют на время удерживания, следующие:
– тип колонки,
– состав подвижной фазы,
– скорость потока подвижной фазы,
– температура термостатирования колонок.
Качественный анализ, то есть заключение о том, из каких веществ со-
стоит проба, может быть сделано только на основе времен удерживания,
если предполагаемые вещества в виде стандартов ввести на колонку и
время их удерживания сравнить с временем удерживания пробы. Основ-
ной предпосылкой являются, конечно, одинаковые условия хроматогра-
фии стандарта и пробы. Может, однако, случится, что при выбранных
условиях хроматографии два совершенно различных вещества имеют
одинаковое время удерживания, что может приветси к неправильному
заключении. Есть ряд возможностей провести достоверный качественный
анализ. Например, и пробу и стандарт хроматографируют два раза в раз-
ных хроматографических условиях и сравнивают времена удерживания в
первом и втором случае. При этом маловероятно, что два разных веще-
ства в отличных хроматографических условиях снова покажут одинако-
вое время удерживания. Или выбирают соответствующие детекторы, ко-
торые могут дать дальнейшую информацию о каждом.
Количественный анализ: только после качественного анализа, когда
вещества идентифицированы с как можно более высокой достоверно-
стью, возможен количественный анализ. Существует два способа количе-
ственной обработки хроматограмм: в одном случае количество вещества

22
принимается пропорциональным площади пика, в другом случае – высо-
те пика. Если различные стандарты с точно известными концентрациями
были введены на колонку, определены соответствующие площади или
высоты пиков и построены калибровочные кривые, то затем концентра-
цию вещества для неизвестной пробы можно определить из площади или
высоте его пика.
Какой метод – по площади или по высоте пика – лучше, определенно
сказать нельзя. Целесообразно проверить оба метода, чтобы установить,
какой из них дает более воспроизводимые результаты. Низкая воспрои-
водимость результатов в хроматографии обычно указывает на ошибки
при введении пробы, детектировании или интегрировании сигнала.
Для описания удерживания имеются два разных времени, которые от-
личаются на величину мертвого времени.

Рис. 7. Сигнал, фиксируемый на хроматограмме

– t0: мертвое время колонки – это время, которое необходимо подвиж-

ной фазе, чтобы пройти по колонке от места подачи пробы к детектору.
Неудерживаемое вещество, то есть вещество, которое не удерживается
стационарной фазой, появится на конце колонки спустя время t0.

23
 – tR: время удерживания – это время, за которое анализируемое веще-
ство доходит от места ввода пробы до детектора.
– t'R: чистое время удерживания – это время, которое равно времени
удерживания, уменьшенному на величину мертвого времени.
Как видно из рисунка tR= t0+t'R, t0 одинаково для всех элюируемых
веществ и является временем их пребывания в подвижной фазе. Разде-
ленные вещества отличаются величинами t'R, которые являются мерой их
удерживания стационарной фазой. Чем дольше находится вещество в
стационарной фазе, тем позже оно элюируется из колонки.
Время удерживания зависит от скорости потока подвижной фазы
(скорости газа-носителя) и длины колонки. Уменьшение скорости газа-
носителя или увеличение длины колонок ведет к увеличению времени t0
и, тем самым, к увеличению tR. Поэтому время удерживания не годится
для характеристики веществ в хроматографии. Лучше использовать фак-
тор удерживания, обозначаемый как k' и который равен отношению ко-
личества вещества в стационарной фазе к количеству вещества в по-
движной фазе. Фактор удерживания можно определить также как отно-
сительное удерживание и рассчитать из чистого времени удерживания
сорбата и мертвого времени колонок:

k' = t'R/t0 = (tR–t0)/t0, (3)

где k' не зависит от длины колонки и скорости потока подвижной фазы

(скорости газа-носителя).
Время удерживания несорбирующегося компонента может быть
определено или экспериментально, или расчетным методом. При экспе-
риментальном определении времени удерживания несорбирующегося
компонента в хроматографическую колонку вводятся вещества с мини-
мальной молярной массой, способные регистрироваться используемым
детектором. Так, при использовании детектора по теплопроводности в
качестве несорбирующегося компонента используется воздух, а при ис-
пользовании пламенно-ионизационного детектора − метан.
Для определения времени удерживания несорбирующегося компо-
нента расчетным методом следует получить хроматограмму трех ве-
ществ, являющихся соседними членами одного и того же гомологическо-
го ряда (например, гексана, гептана и октана), и, используя соотношение

24
 (4)
где y0 – расстояние на хроматограмме от момента ввода пробы до макси-
мума второго пика; y1 – расстояние на хроматограмме между вершинами
первого и второго пиков; y3 – расстояние на хроматограмме между вер-
шинами второго и третьего пиков, рассчитывают параметры удержива-
ния несорбирующегося компонента. Время выхода несорбирующегося
компонента зависит от плотности упаковки насадки в колонке и длины
колонки: для колонок одинаковой длины с ростом плотности упаковки
насадки в колонке это время будет уменьшаться.

Рис. 8. Графическое определение индексов удерживания Ковача:

1, 2, 4, 5 – н-алканы (стандарты); 3 – анализируемое соединение

25
 Эффективность колонки (число теоретических тарелок)

Теория тарелок представляет стационарную фазу, состоящую как бы

из отдельных участков, каждый из которых соответствует теоретической
ступени разделения. Эффективность колонки выражается в этом случае
числом теоретических тарелок. Эта величина является мерой разрешаю-
щей способности хроматографической колонки. Часто число тарелок от-
носят к длине колонки (в метрах), что позволяет легко сравнивать между
собой колонки различных размеров. Это приводит к выражению числа
теоретических тарелок на метр длины колонки (число тарелок/метр). Вы-
ражения «теоретические тарелки» и «число тарелок» описывают один и
тот же параметр.
Когда две колонки с одинаковыми фазами используются в оптималь-
ных условиях, колонка с более высоким числом тарелок на метр обеспе-
чивает лучшее разделение. Близко элюируемые компоненты на одной
колонке разделяются до базовой (нулевой) линии, а на другой с такой же
фазой и размерами выйдут едва разделенными, если число тарелок на
метр для второй колонки будет меньше. Такие отличия эффективностей
колонок могут, очевидно, привести к проблемам идентификации и не-
точному количественному анализу. Еще одна причина в пользу выбора
колонок с более высокой разделяющей способностью – это то, что они
позволяют достичь более низкой границы обнаружения веществ. Лучшая
эффективность ведет к меньшему уширению пиков каждого отдельного
компонента. При этом пики получаются более узкими и, вместе с тем,
более интенсивными, а соотношение сигнал/шум улучшается.
Далее логично будет рассмотреть связь степени разделения с пара-
метрами хроматографической колонки. Способом оценки степени разде-
ления двух веществ, регистрируемых на хроматограмме в виде соседних
пиков, является вычисление величины отношения удвоенного расстояния
“а” между максимумами пиков к сумме ширины пиков у основания w1 и
w2 (рис. 9).
Это отношение служит мерой разделения двух компонентов, называ-
ется степенью разделения Rs и позволяет непосредственно из хромато-
граммы оценить степень эффективности разделения. Для случая доста-
точного разделения соблюдается равенство:
2a
Rs  (4)
w1  w2

26
 Рис. 9. Разделение хроматографических пиков

Если расстояние между вершинами пиков “a” заменить разностью

времен удерживания (t2–t1), ширину пиков у основания выразить через
размывание (σ), использовать выражения для относительного удержива-
ния (α) и числа теоретических тарелок (n) соотношение (4) преобразуется
в уравнение:
1 α  1 k2
Rs  n , (5)
2 α 1  k2
которое позволяет установить влияние числа теоретических тарелок (n) и
коэффициента емкости колонки для второго компонента (k2) на величину
степени разделения двух соединений.
С помощью этого уравнения можно рассчитать, какой эффективно-
стью должна характеризоваться хроматографическая колонка для полу-
чения заданного значения степени разделения Rs при заданном значении
емкости колонки по отношению ко второму компоненту k2 и заданном
значении относительного удерживания разделяемых компонентов α.
Если в соотношении (5) число теоретических тарелок выразить через
отношение длины колонки к высоте, эквивалентной теоретической та-
релки (ВЭТТ) n=L/h, то поскольку в зафиксированных условиях процесса
разделения большая часть параметров этого уравнения остается постоян-
ными, величина степени разделения оказывается пропорциональной кор-
ню квадратному из длины хроматографической колонки Rs  L .
Это соотношение показывает, что в первом приближении повысить
эффективность процесса разделения можно простым увеличением длины
колонки, при сохранении остальных параметров процесса разделения
постоянными.

27
 Влияние скорости потока газа-носителя на эффективность
насадочной колонки. Диаграмма Ван-Деемтера

Число теоретических тарелок зависит от скорости потока подвижной

фазы (скорости подачи газа-носителя). Эта зависимость была обнаружена
Ван-Деемтером в газовой хроматографии и в общем виде эффективность
насадочной хроматографической колонки и скорость потока газа-
носителя (u) связаны между собой уравнением Ван-Деемтера:
2γDg 8 k d 2f
h  2λd p   u (6)
u π (1  k ) 2 Dl
где h − высота, эквивалентная теоретической тарелке; dp − диаметр ча-
стиц носителя; λ − коэффициент заполнения колонки, характеризующий
степень плотности упаковки насадки в колонке; Dg − коэффициент диф-
фузии хроматографируемого вещества в газовой фазе; γ − коэффициент
извилистости пути потока газа-носителя; Dl − коэффициент диффузии
хроматографируемого вещества в неподвижной жидкой фазе; df − эффек-
тивная толщина слоя неподвижной жидкой фазы на поверхности твердо-
го носителя; k − коэффициент емкости колонки.
В общем виде уравнение Ван-Деемтера можно представить в следу-
ющей форме:
B
h  A   Cu (7)
u
Каждое из слагаемых уравнения (7) количественно представляет
вклад различных параметров процесса разделения, приводящих к изме-
нению профиля зоны исследуемого соединения в хроматографической
колонке. Графическое отображение уравнения Ван-Деемтера показано на
рис. 10.
Коэффициент А характеризует эффекты размывания, которые наблю-
даются при омывании частиц стационарной фазы потоком элюента фазы.
Эта вихревая диффузия (или диффузия Эдди) определяется видом мате-
риала носителя. А является константой и не зависит от скорости потока.
Заметное понижение величины h и, тем самым, улучшение разделяющей
способности колонки можно достичь путем уменьшения размера частиц
сорбента и повышением гомогенности упаковки стационарной фазы.
Коэффициент В учитывает молекулярную диффузию по длине колон-
ки. В не зависит от размера частиц неподвижной фазы и особенно мал
для материалов с неразветвленными порами.

28
 Рис. 10. Зависимость высоты эквивалентной теоретической тарелки от скорости потока

Коэффициент С отражает скорость установления равновесия, то есть

перенос вещества между подвижной и стационарной фазами. Эта вели-
чина также зависит от размера частиц стационарной фазы. Маленькие
частицы способствуют массообмену, тогда как большой размер частиц
ухудшает разделяющую способность, причем пропорционально квадрату
диаметра частицы.
С помощью уравнения Ван-Деемтера хроматографическая система мо-
жет быть целенаправленно оптимизирована. Оптимальной скорости потока
и, вместе с тем, наименьшему уширению полос соответствует минимум кри-
вой Ван-Деемтера. Коэффициент В в жидкостной хроматографии имеет
меньшее значение, чем в газовой, поскольку коэффициенты диффузии в
жидкостях меньше, чем в газах. Соответственно, подъем кривой Ван-
Деемтера при малых скоростях потока подвижной фазы в газовой хромато-
графии становится особенно заметным. Новые типы стационарных фаз мо-
гут понизить коэффициент А, так, например, в настоящее время проводятся
эксперименты с капиллярными колонками и сорбентами очень мелкого зер-
нения. Коэффициент С связан с затруднением массообмена в колонке и
определяет подъем кривой Ван-Деемтера при высоких скоростях потока по-
движной фазы. Эта константа отражает тот факт, что процессы адсорбции и
десорбции требуют определенного времени и при высоких скоростях состо-
яние равновесия не успевает установиться. Таким образом, три основных
причины уширения пиков следующие:

29
 – вихревая диффузия,
– молекулярная диффузия,
– затруднение массообмена.
Влияние природы газа-носителя на эффективность колонки представ-
лено на рис. 11.

Рис. 11. Влияние природы газа-носителя на эффективность хроматографической колонки

Оптимальная практическая скорость изменяется в широкой области в

зависимости от площади поперечного сечения колонки, температуры,
толщины пленки неподвижной жидкой фазы, коэффициента емкости ко-
лонки и природы используемого газа-носителя.
В практической газовой хроматографии следует различать понятия
линейная скорость потока газа-носителя и расход газа-носителя (объем-
ная скорость потока газа-носителя). При работе, как правило, измеряется
только расход газа-носителя. В теоретических рассуждениях употребля-
ется понятие линейной скорости потока газа-носителя.
Расход газа-носителя (w) и линейная скорость потока газа-носителя
(u) связаны соотношением:
4w
u (8)
60Θd l2

30
где dl − величина внутреннего диаметра колонки; Θ − коэффициент, ве-
личина которого для насадочных колонок составляет 0,45−0,50.
Связь между длиной колонки, ее диаметром, размером частиц сорбен-
та и расходом газа-носителя иллюстрируется в табл. 6.
Соблюдение приведенных в таблице условий способствует достиже-
нию максимальной эффективности хроматографической колонки.
Таблица 6
Условия оптимального функционирования насадочных колонок

Размер частиц (мм)

Диаметр Расход газа-носителя см3/мин
в колонках длиной
колонки
до 3 м более 3 м N2 He или H2
2 мм 0.11−0.12 0.12−0.18 8−15 15−30
3 мм 0.11−0.12 0.12−0.18 15−30 30−60
4 мм 0.12−0.18 0.18−0.25 30−60 60−100

Для насадочных колонок оптимальная практическая скорость лежит в

области менее 1м/мин.
Таким образом, эффективность насадочной хроматографической ко-
лонки улучшается, если:
– используются частицы носителя неподвижной жидкой фазы малого
диаметра, равномерно заполняющие колонку;
– разделение проводится при наименьшей практически возможной
температуре;
– содержание неподвижной жидкой фазы оптимальное;
– газ-носитель имеет большой молекулярный вес;
– скорость потока газа-носителя оптимальная.
При переходе от насадочных колонок к капиллярным, вследствие из-
менения характера внутреннего пространства, претерпевают изменения и
представления Ван-Деемтера.
Теория процесса разделения веществ в капиллярных колонках разра-
ботана М. Голеем из следующих предположений:
– размывание зоны вещества в колонке происходит только вследствие
процессов диффузии в потоке газа-носителя;
– в хроматографической колонке реализуется только ламинарный ха-
рактер течения газа-носителя по колонке;
– неподвижная жидкая фаза зафиксирована на внутренней стенке ка-
пилляра в виде гомогенной жидкой пленки.
Развернутая форма уравнения Голея записывается:

31
 2 Dg 1  6k  11k 2 r 2 2k d 2f 
h   u , (9)
 24(1  k ) Dg 3(1  k ) Dl 
2 2
u
в котором r – радиус капиллярной колонки.
В общем виде уравнение Голея записывается:
B
h   (C g  Cl )u (10)
u
Если принять, что Сg >>Cl, то можно рассчитать значение hmin
1  6k  11k 2
hmin  r (11)
3(1  k ) 2
Из приведенного уравнения следует, что величина hmin пропорцио-
нальна радиусу капилляра и является функцией коэффициента емкости
колонки.
Для несорбирующегося компонента (k = 0) hmin = 0,58r, для компонен-
та с величиной k > 100 hmin = 1,9r.
Исходя из того же допущения, что Сg >>Cl, можно рассчитать и вели-
чину оптимальной скорости потока газа-носителя
Dg 3(1  k ) 2
uопт  4 (12)
r 1  6k  11k 2
Видно, что с уменьшением радиуса капилляра оптимальная скорость
газа-носителя возрастает пропорционально коэффициенту диффузии ис-
следуемого соединения в газе-носителе и величине коэффициента емко-
сти колонки.
Для несорбирующегося компонента с k = 0 численное значение опти-
мальной скорости потока газа−носителя рассчитывается по соотношению
Dg D
uопт  6,9 , а для компонента с k = 100 uопт  2,1 g .
r r
Графическая зависимость высоты эквивалентной теоретической та-
релки от скорости потока газа-носителя, при его ламинарном течении,
аналогична, как и для насадочных колонок.
На рис. 11, а представлено влияние величины внутреннего диаметра
капиллярной колонки, а на рис. 11, б – влияние величины коэффициента
емкости капиллярной колонки к исследуемому соединению на ее эффек-
тивность.

32
 Рис. 11. График зависимости высоты тарелки от линейной скорости газа-носителя
для полой капиллярной колонки (н-гексан, газ-носитель – гелий) (a – влияние внутреннего
диаметра колонки (k = 1): 1−dc = 0,1 mm; 2–dc = 0,25 mm; 3–dc = 0,5 mm; б – влияние
коэффициента емкости колонки (dc =0.25 mm):1 – k = 0; 2 – k = 1;
3 – k = 2; 4 – k = 5; 5 – k = 10)

Однако дальнейшее увеличение объемной скорости потока газа-

носителя приводит к изменению характера течения – ламинарное течение
сменяется турбулентным, для которого характерны внезапные локальные
изменения скорости, изменение направления движения потока, измене-
ние величины давления.
Обычно тип течения жидкости определяется величиной критерия
Рейнольдса Re, определяемого из соотношения:
2ur
Re  (13)
ν
где u − линейная скорость потока газа-носителя; r − радиус капилляра;
v − кинематическая вязкость газа-носителя.
Графическая зависимость высоты эквивалентной теоретической та-
релки от величины критерия Рейнольдса приведена на рис. 12.
Для капиллярных колонок оптимальная практическая линейная ско-
рость потока газа-носителя лежит в области от 3 до 8 м/мин.

33
Рис. 12. Зависимость высоты эквивалентной теоретической тарелки от величины критерия
Рейнольдса (а – область ламинарного течения,
б – область турбулентного течения потока газа-носителя)

Кроме этого, стоит отметить, что немаловажным для эффективности

капиллярных колонок является влияние толщины пленки неподвижной
жидкой фазы. При исследовании этого вопроса для капиллярной газовой
хроматографии необходимо принимать во внимание следующие два об-
стоятельства:
– толщина пленки неподвижной жидкой фазы входит в уравнение (8)
в качестве самостоятельной величины;
– с изменением толщины пленки изменяется и величина фазового от-
ношения β, определяемая отношением объемов газовой и жидкой фаз в
соответствии с уравнением
Vg r
β  , (14)
Vl 2d f
а, следовательно, изменяется и величина коэффициента емкости колонки
k, определяемая соотношением
K
k (15)
β
Следовательно, при выборе конкретной капиллярной колонки всегда
следует учитывать, какая практическая цель при этом преследуется с
учетом следующих положений:

34
 – тонкая пленка приводит к малым значениям и, следовательно, к
необходимости увеличения числа теоретических тарелок. Однако в этом
случае допустимы высокие скорости потока газа-носителя, что позволяет
сократить время анализа;
– разделение на тонкой пленке можно производить при более низких
температурах;
– колонки с тонкой пленкой имеют малую емкость, что предопределя-
ет малый объем вводимого образца и, следовательно, использование вы-
сокочувствительных детекторов.
В этой связи толщина пленки неподвижной жидкой фазы должна со-
ответствовать некоторой оптимальной величине, удовлетворяющей от-
меченным требованиям. Обычно это десятые доли микрометра.

Влияние температуры на параметры процесса разделения

Температура колонки оказывает одно из самых решающих влияний на

ход газохроматографического разделения, что обусловлено следующими
причинами.
Величина коэффициента распределения исследуемого соединения Ki
связана с величиной исправленного удерживаемого объема соотношени-
ем: V′=Vl/Ki , где Vl − объем неподвижной фазы в колонке; V′ − исправлен-
ный удерживаемый объем исследуемого соединения.
Для определенной хроматографической колонки объем неподвижной
фазы Vl можно считать постоянным. Следовательно, для того чтобы ве-
личина исправленного удерживаемого объема исследуемого соединения
находилась в приемлемых пределах, величина коэффициента распреде-
ления этого вещества между фазами Ki также должна находиться в соот-
ветствующей области численных значений, которая во многом и опреде-
ляется температурой процесса разделения.
В принципе повышение температуры обусловливает более короткое
время удерживания, а тем самым и время анализа. Это объясняется тем,
что коэффициент распределения вещества между фазами Ki имеет поло-
жительный температурный коэффициент, его численные значения с ро-
стом температуры процесса разделения уменьшаются, а, следовательно,
уменьшается и удерживаемый объем исследуемого соединения.
Исправленный удерживаемый объем изменяется с обратной абсолют-
ной температурой экспоненциально, как показано на рис. 13.

35
 Рис. 13. Изменение величин исправленных удерживаемых объемов от температуры

Мертвый объем колонки при повышении температуры также умень-

шается.
Таким образом, если бы хроматографические разделения велись толь-
ко при комнатной температуре, газовую хроматографию можно было бы
использовать для анализа только ограниченного набора веществ, суще-
ственно различающихся при этой температуре по величинам констант
распределения между фазами. Одно только использование сильной тем-
пературной зависимости коэффициента распределения позволяет значи-
тельно расширить число анализируемых веществ.
Температуру хроматографической колонки следует довести до такого
значения, при котором различия в коэффициентах распределения иссле-
дуемых веществ между фазами находятся в пределах, необходимых для
осуществления эффективного хроматографического разделения.
Так как температуру колонки обычно варьируют в диапазоне от 20 до
300°С, целесообразно учитывать эмпирическое правило, согласно кото-
рому методом газовой хроматографии при заданной температуре колонки
можно с достаточной эффективностью разделить все вещества с темпера-

36
турами кипения, отличными от температуры колонки не более чем на
±60°С.
Кроме изменения величин коэффициентов распределения разделяе-
мых компонентов между фазами, изменение температуры процесса раз-
деления приводит:
– к изменению объема газовой фазы во внутреннем объеме колонки;
– к изменению объема неподвижной жидкой фазы во внутреннем объ-
еме колонки;
– к изменению скорости потока газа-носителя;
– к изменению величины перепада давления газа-носителя на входе в
колонку и на выходе из колонки;
– к изменению величин коэффициентов диффузии разделяемых со-
единений в газе-носителе;
– к изменению величин коэффициентов диффузии разделяемых со-
единений в неподвижной жидкой фазе.
Суммарным результатом всех имеющих место изменений является
изменение эффективности используемой хроматографической колонки
при изменении температуры процесса разделения.
Рассмотрим особенности влияния изменения температуры процесса
разделения на скорость потока газа-носителя и перепад давления газа-
носителя в колонке. Газохроматографические разделения, как правило,
осуществляются в одном из двух возможных режимах:
– при постоянной скорости потока газа-носителя в течение всего вре-
мени процесса разделения;
– при постоянном перепаде давления газа-носителя на входе и выходе
из колонки в течение процесса разделения.
В любой хроматографической колонке давление газа-носителя на входе в
колонку должно быть выше, чем на выходе из колонки, чтобы направить
поток газа-носителя от входа к выходу. С изменением температуры колонки
меняется сопротивление потоку газа-носителя, что обусловлено, главным
образом, изменением вязкости газа-носителя при изменении температуры.
Если при изменении температуры колонки в ходе процесса разделения пере-
пад давления газа-носителя остается постоянным, то скорость потока газа-
носителя в процессе разделения будет изменяться, и наоборот, если при из-
менении температуры скорость потока газа-носителя поддерживать посто-
янной, то будет иметь место изменение величины перепада давления.
Таким образом, изменение, как скорости потока газа-носителя, так и
перепада давления газа-носителя с изменением температуры колонки

37
влияет как на время анализа, так и на эффективность хроматографиче-
ской колонки.
В условиях газовой хроматографии линейная скорость потока газа-
носителя прямо пропорциональна перепаду давления в колонке и обратно
пропорциональна вязкости газа-носителя. Вязкости идеальных газов не
зависят от давления и плотности. Следовательно, изменение вязкости с
давлением незначительно даже в наиболее жестких условиях газовой
хроматографии. Для всех используемых газов-носителей вязкость увели-
чивается с возрастанием температуры (рис. 14).

Рис. 14. Изменение вязкости газов-носителей от температуры

Абсолютная величина изменения вязкости наименьшая у водорода,

который в этом отношении стоит отдельно от остальных газов. С точки
зрения, как минимального перепада давления, так и наименьшего изме-
нения перепада давления от температуры водород имеет бесспорное пре-
имущество в качестве газа-носителя. Установлено, что вязкости газов,
пригодных в качестве газов-носителей, возрастают прямо пропорцио-
нально величине абсолютной температуры в степени 0,7. При работе с
постоянной скоростью потока газа-носителя величина перепада давления
будет увеличиваться по мере возрастания температуры.

38
 При работе при постоянных давлениях на входе и на выходе из ко-
лонки скорость потока газа-носителя на выходе уменьшается пропорцио-
нально росту температуры в степени − 1,7.
Однако, стоит отметить, что наиболее существенное влияние измене-
ние температуры оказывает и на величины коэффициентов диффузии
разделяемых соединений в газе-носителе и в неподвижной жидкой фазе.
Установлено, что коэффициенты диффузии разделяемых соединений в
газовой фазе пропорциональны температуре в степени 1,8. Так, при по-
вышении температуры с 25 до 150°С коэффициенты диффузии возраста-
ют в 2 раза, а при повышении температуры до 310°С – в 4 раза.
Таким образом, при работе с постоянными давлениями на входе и на
выходе из колонки изменение скорости потока газа-носителя пропорцио-
нально изменению температуры колонки в степени − 0,7.
Именно поэтому слагаемое B/u в уравнении Ван-Деемтера увеличива-
ется с ростом температуры колонки в степени 2,5.
В коэффициенте С уравнения Ван-Деемтера
8 k d 2f
C 2 , (16)
π (1  k ) 2 Dl
где все три параметра k, df, Dl зависят от температуры.
Наименьшим является изменение с температурой величины d2f, отра-
жающее влияние коэффициента термического расширения жидкости.
Так, например, для динонилфталата при повышении температуры от 0 до
150°C d2f увеличивается на 20%. Коэффициент емкости колонки k быстро
уменьшается с повышением температуры. Численное значение сомножи-
теля k/(1+k)2 сначала растет, поскольку при низких температурах k имеют
высокие численные значения, проходит через максимум при k = 1, а затем
при дальнейшем повышении температуры уменьшается.
Поскольку при оптимальном хроматографическом режиме значение k
обычно несколько больше единицы, в большинстве случаев повышение
температуры колонки будет вызывать увеличение численного значения
этого сомножителя.
Наконец, коэффициенты диффузии разделяемых соединений в непо-
движной жидкой фазе Dl быстро увеличиваются с повышением темпера-
туры. Коэффициенты диффузии разделяемых соединений в наиболее
распространенных неподвижных жидких фазах увеличиваются с повы-
шением температуры; логарифм коэффициента диффузии линейно связан
с обратным значением абсолютной температуры.

39
 Таким образом, с повышением температуры колонки численное зна-
чение df слегка возрастает, численное значение 1/Dl – сильно уменьшает-
ся, а численное значение k/(1+k)2 – либо увеличивается, либо уменьшает-
ся в зависимости от величины k.
Влияние температуры колонки на высоту тарелки для
2.3-диметилбутана для колонки длиной 1 м, содержащей 39 % ПЭГ−400
приведено на рис. 15.

Рис. 15. Влияние температуры колонки на высоту,

эквивалентную теоретической тарелке

Следовательно, с ростом температуры эффективность колонки долж-

на улучшаться (высота, эквивалентная теоретической тарелке уменьша-
ется), однако при любой постоянной температуре невозможно выбрать
скорость потока газа-носителя такой, чтобы обеспечить максимальную
эффективность колонки для всех разделяемых веществ, различающихся
температурами кипения.
Последнее заключение послужило предпосылкой для разработки спе-
циального варианта разделения сложных по составу смесей, основу кото-
рого составляет изменение температуры хроматографической колонки
непосредственно в ходе процесса разделения. Действительно, если в со-
став анализируемой смеси входят легко летучие компоненты и компо-
ненты, кипящие при достаточно высоких температурах, хроматограммы,

40
полученные в различных изотермических режимах, будут иметь различ-
ный вид (рис. 16).

Рис. 16. Изотермические хроматограммы смеси, кипящей до 226°С

(а – температура колонки 45°С; б – температура колонки 120°С) (пики 1–6 соответствуют
н-алканам от пропана до октана; 7 – бромоформ; 8 – м-хлортолуол)

Из приведенных хроматограмм следует, что разделение легко летучих

компонентов следует проводить при минимальной рабочей температуре
колонки, а эффективное разделение высококипящих компонентов дости-
гается только при гораздо более высоких температурах колонки.
При постоянной температуре термостата колонок (разделение в изо-
термическом режиме) с достаточной эффективностью возможно осу-
ществление разделения только 5–6 последовательных членов одного го-
мологического ряда. Для анализа более сложных по составу проб необ-
ходимо выполнение нескольких повторяющихся разделений одной и той
же анализируемой смеси веществ при последовательно повышаемых на
50°С температурах процесса разделения.

41
 Из отмеченного следует, что оптимальным температурным режимом
процесса разделения является низкая температура колонки в самом нача-
ле процесса разделения и постепенное возрастание температуры колонки
по мере выхода из нее легко летучих компонентов анализируемой смеси.
Режим изменения температуры процесса разделения во времени мо-
жет быть самым различным и зависит от свойств веществ, входящих в
состав разделяемой смеси. Температура может меняться по линейному
закону (с постоянной скоростью увеличения), по нелинейному закону
или ступенчато.

Рис. 17. Хроматограмма смеси веществ из рис. 16, полученная при линейном
программировании температуры (номера пиков как и на рисунке 16; 9 – м-бромтолуол)

На рис. 17 приведена хроматограмма разделения той же смеси, что и

на рис. 16, только с использованием линейного программирования тем-
пературы колонки.
Использование рационального режима программирования температу-
ры позволяет для хроматографической колонки с числом теоретических
тарелок равным 3000 разделить с достаточной эффективностью смесь,
состоящую из 40−50 компонентов. При использовании более эффектив-
ной колонки с числом теоретических тарелок 100 000, число разделяемых
компонентов может достигать 300.

42
 IV. Качественный газохроматографический анализ

Функция хроматографической колонки заключается в разделении

сложной по составу смеси на последовательно выходящие из колонки
бинарные смеси индивидуальных компонентов с газом-носителем. Уста-
новление природы разделяемых компонентов и тем самым установление
качественного состава смеси осуществляется за пределами колонки с ис-
пользованием различных приемов в зависимости от поставленной анали-
тической задачи.
В этой связи можно выделить следующие основные задачи качествен-
ного анализа:
– отнесение к индивидуальным соединениям пиков на хроматограмме
смеси, состав которой ориентировочно известен;
– выполнение группового анализа;
– полная идентификация компонентов.
Далее, в зависимости от характера поставленной задачи, используе-
мые приемы качественного анализа подразделяются:
– на чисто хроматографические;
– на варианты, сочетающие газовую хроматографию с другими физи-
ко-химическими методами анализа, позволяющими решить поставлен-
ную задачу.
Из первой группы, группы чисто хроматографических приемов
наиболее часто используются следующие:
– сравнение экспериментально установленных значений параметров
удерживания разделяемых соединений с приведенными в литературе
значениями этих параметров для известных веществ;
– получение для гомологических групп веществ корреляционных за-
висимостей типа параметр удерживания – физико-химические характери-
стики вещества;
– идентификация по эталонным веществам;
– использование селективных детекторов;
– реакционная хроматография.
Во вторую группу методов идентификации входят приемы, преду-
сматривающие последовательный препаративный сбор фракций, выхо-
дящих из газохроматографической колонки, с их последующим исследо-
ванием с использованием подходящих физико-химических методов ана-
лиза. Сначала рассмотрим подробнее чисто хроматографические приемы
идентификации.

43
 Сравнение экспериментальных и приведенных
в литературе параметров удерживания

В этом случае наиболее часто качественными характеристиками раз-

деляемых веществ являются определенные в заданных условиях величи-
ны параметров удерживания. Из широкого набора параметров удержива-
ния для целей идентификации при сопоставлении с опубликованными
данными используют чаще всего относительные параметры удерживания
и индексы удерживания Ковача.
Величины относительных параметров удерживания разделяемых ком-
понентов рассчитываются из экспериментальных данных как отношение
значения исправленного удерживаемого объема (или исправленного вре-
мени удерживания) этих компонентов к величине исправленного удер-
живаемого объема (или времени удерживания) вещества, входящего в
состав разделяемой смеси (или специально введенного) и выбранного в
качестве стандарта. Это может быть, например, нонан – один стандарт
для всех разделяемых веществ или отдельные представители для разных
классов разделяемых соединений, например, пентан – для гомологиче-
ского ряда алканов, масляная кислота – для класса жирных кислот.
Установленные величины относительных параметров удерживания
сопоставляются с табличными, и по результатам сопоставления делается
вывод о качественном составе анализируемой пробы.
В основе метода идентификации по индексам удерживания Ковача
лежит использование линейной зависимости между логарифмом исправ-
ленного удерживаемого объема и числом атомов углерода в молекуле
нормальных углеводородов.
Ковач предложил присвоить членам гомологического ряда нормаль-
ных углеводородов постоянные значения индексов удерживания, вели-
чина которых не зависит от условий процесса хроматографического раз-
деления, всегда остается постоянной и рассчитывается как произведение
числа атомов углерода в молекуле на 100. Тогда величина индекса удер-
живания Ковача для метана оказывается равной 100, для этана – 200, для
пропана – 300 и т.д.
Для идентификации вещества в данных строго зафиксированных
условиях процесса разделения на данной неподвижной жидкой фазе сна-
чала определяют величины логарифмов исправленных объемов удержи-
вания таких членов гомологического ряда нормальных углеводородов,
которые элюируются из колонки по времени до и после анализируемого

44
соединения и строят зависимость lgV' − индекс удерживания Ковача. За-
тем в этих же условиях определяют величину lgV' исследуемого соеди-
нения и из полученной ранее графической зависимости (рис. 18) опреде-
ляют соответствующее значение величины индекса удерживания этого
соединения.

Рис. 18. График зависимости логарифма исправленного объема удерживания

от числа атомов углерода в молекулах гомологического ряда алканов

Сопоставление полученных значений индексов удерживания Ковача с

табличными значениями для индивидуальных соединений в этих же
условиях разделения позволяет установить качественный состав анали-
зируемой пробы.
Для определения индекса удерживания можно также использовать и
расчетный метод. Для этого точно определяют время удерживания анали-
зируемого вещества и двух н-алканов, один из которых (с числом атомов
углерода в молекуле – z) элюируется из колонки до, а второй (c числом
атомов углерода в молекуле − z+1) – после определяемого соединения.
Затем определяют время удерживания несорбирующегося компонента и
рассчитывают исправленные времена удерживания всех трех соединений
(t'i, t'z, t'z+1). Величина индекса удерживания рассчитывается по соотно-
шению:
lg t /  lg t z/
I i  100 z  100 /i (16)
lg t z 1  lg /z

45
 Чтобы сопоставление было корректным, необходимо измерения вы-
полнять в условиях, идентичных тем, при которых получены опублико-
ванные данные. Эти условия должны контролироваться в первую очередь
по следующим позициям:
– тип насадки (марка, фирма-изготовитель, количество неподвижной
жидкой фазы и характеристики твердого носителя, условия предвари-
тельной активации или обработки насадки, условия кондиционирования
колонки);
– температурные режимы колонки и системы ввода пробы;
– параметры (длина, диаметр, материал) и условия предварительной
подготовки колонки;
– объем вводимой пробы;
– расход, входное и выходное давление газа-носителя;
– способ измерения мертвого времени.
Отклонения от номинальных условий неизбежно приводят к погреш-
ностям в измерениях параметров удерживания. Так, например, для опре-
деления неисправленного объема удерживания с погрешностью 1% необ-
ходимо поддерживать температуру и расход газа-носителя с погрешно-
стью не выше ± 0.1°С и ± 0.5 % соответственно. На серийных газовых
хроматографах и насадочных колонках с содержанием неполярной непо-
движной жидкой фазы на твердом носителе 15−20 % (мас.) межлабора-
торная воспроизводимость индексов удерживания Ковача составляет 1−3
единицы. При переходе к полярным неподвижным фазам расхождения
могут возрастать до 5 единиц индекса.
Межлабораторная воспроизводимость индексов удерживания на ка-
пиллярных колонках, как правило, составляет 1–2 единицы индекса. Ка-
залось бы, что при такой низкой погрешности прямое сопоставление
набора экспериментально определенных численных значений параметров
удерживания на нескольких неподвижных фазах различной полярности с
соответствующими справочными данными обеспечивает надежную
идентификацию веществ. Однако на практике, когда используются
насадки с 3–5% неподвижной жидкой фазы, при очень хорошей сходимо-
сти может быть получена очень плохая воспроизводимость результатов
(по отношению к опубликованным).
Причина этого – отсутствие стандартизованных насадок и колонок
при наличии неконтролируемых факторов:
– так, в насадочных колонках для газожидкостной хроматографии ис-
пользуют твердые носители, характеристики которых от партии к партии

46
могут существенно различаться. Их поверхностные свойства зависят
также от длительности и условий хранения;
– контроль химического состава, молекулярно-массового распределе-
ния, чистоты наносимых неподвижных жидких фаз не проводится;
– процедуры подготовки твердого носителя, нанесения неподвижной
фазы, кондиционирования насадки могут незначительно расходиться в
деталях, которые сказываются на качестве жидкой пленки и сорбцион-
ных свойствах готовой насадки;
– по мере эксплуатации характеристики колонки меняются во време-
ни за счет процессов уноса и старения неподвижной жидкой фазы, а так-
же эффекта “памяти” к предыдущим пробам.
Отмеченное относится и к капиллярным колонкам, в которых, как
правило, и отсутствует твердый носитель, но присутствует многоступен-
чатая процедура подготовки внутренней поверхности капилляра к нане-
сению неподвижной жидкой фазы: промывка, травление, выщелачива-
ние, дезактивация, модификация, силилирование.
Низкую межлабораторную воспроизводимость обычно связывают с
наличием систематических погрешностей. И литературные и экспери-
ментальные данные отягощены (в различной степени) не исключенными
составляющими систематической погрешности, но говорить о правиль-
ности результата измерения в данном случае трудно, поскольку досто-
верно неизвестно истинное значение измеряемого параметра. Следова-
тельно, и невоспроизводимость при сопоставлении параметров удержи-
вания нельзя объяснить систематическими погрешностями, т.е. неясно,
какой из результатов (справочный или экспериментальный) ближе к ис-
тинному. Фактически измерения проводят на различных насадках и рас-
хождения в измеряемых параметрах есть мера, характеризующая степень
их неидентичности.
Таким образом, несовпадение (как на одном, так и на нескольких
насадках) численного значения найденного параметра удерживания
предполагаемого компонента Х с опубликованным для известного веще-
ства А еще не означает, что А≠Х. Точно также, как и совпадение парамет-
ров удерживания А и Х на одной насадке еще не означает, что А=Х. Толь-
ко совпадение параметров удерживания А и Х на нескольких насадках
различной природы позволяет с некоторой степенью достоверности, доля
которой растет с увеличением числа используемых насадок, заключить,
что А=Х.

47
 Использование корреляционных зависимостей

При установлении корреляционных зависимостей параметров удер-

живания и физико-химических характеристик разделяемых веществ ос-
новными способами идентификации являются следующие:
– идентификация, основанная на использовании величин относитель-
ных параметров удерживания разделяемых веществ;
– идентификация, основанная на зависимости логарифма исправлен-
ного объема удерживания разделяемых соединений от температуры ки-
пения вещества и температуры процесса разделения.
Использование первого из названных способов оказалось возможным,
поскольку внутри одного класса соединений график зависимости lgV'отн−
n (n − число атомов углерода в молекуле) обычно представляет собой
прямую линию (рис. 19).

Рис. 19. Характер зависимости величины логарифма относительного

исправленного объема удерживания от числа атомов углерода в молекуле

Если в анализируемой смеси содержатся компоненты различных

классов соединений, то для их идентификации следует построить не-
сколько калибровочных графиков для полярной и неполярной неподвиж-
ных жидких фаз. Повысить достоверность идентификации можно путем
совмещения графических зависимостей lgV'отн − n для полярной и непо-
лярной неподвижных жидких фаз: на оси ординат откладывают lgV'отн
для полярной, а на оси абсцисс − lgV'отн для неполярной неподвижной

48
жидкой фазы для одного и того же вещества. Получаемая зависимость
прямолинейна для каждого гомологического ряда (рис. 20).

Рис. 20. Характер билогарифмической зависимости величин относительных

исправленных объемов удерживания на неподвижных фазах разной полярности

Если вместо lgV'отн использовать сами величины исправленных отно-

сительных объемов удерживания, то при одинаковом масштабе осей по-
лучаются прямые, выходящие из начала координат и различающиеся уг-
лом наклона для различных гомологических рядов (рис. 21).

Рис. 21. Характер зависимости абсолютных значений величин относительных

исправленных объемов удерживания на неподвижных фазах разной полярности

49
 Следовательно, имея значения величин исправленных относительных
объемов удерживания на полярной и неполярной неподвижных жидких
фазах для идентифицируемого вещества, устанавливают его принадлеж-
ность к тому или иному классу соединений и, по положению точки на
прямой для этого класса, устанавливают исследуемое соединение.
Существенными недостатками метода являются:
– необходимость очень точного соблюдения условий разделения;
– наличие эталонных веществ различных гомологических рядов, что
не всегда практически осуществимо.
Следует учитывать, что воспроизводимость определения относитель-
ных величин удерживания для значений в диапазоне от 0,2 до 5 не лучше,
чем 5 %. Для значений за пределами этого диапазона воспроизводимость
становится плохой, и для определения относительных параметров удер-
живания должен использоваться другой стандарт.
Способ идентификации по зависимости логарифма исправленного
объема удерживания от температуры кипения вещества предусматривает
использование прямолинейной зависимости между lgV′ и безразмерным
параметром Z, представляющим собой отношение величины температуры
кипения вещества к температуре хроматографической колонки в процес-
се разделения.
Для членов гомологических рядов неполярных веществ эта зависи-
мость прямолинейна (рис. 22).

Рис. 22. Характер зависимости величины логарифма исправленного объема удерживания

от величины параметра Z

50
 По графику, из определенного значения lgV′ исследуемого соедине-
ния, определяют величину параметра Z и, зная температуру хроматогра-
фической колонки, рассчитывают температуру кипения исследуемого
соединения Tкип =Tкип·Z.
Сопоставляя полученное значение Ткип с табличными значениями тем-
ператур кипения соединений данного гомологического ряда, идентифи-
цируют анализируемые компоненты.
Достоинством метода является возможность определения исправлен-
ных объемов удерживания при различных температурах хроматографи-
ческой колонки, что очень важно при анализе смесей соединений с резко
различающимися температурами кипения.
Недостатками метода являются:
– необходимость очень точного соблюдения условий хроматографи-
ческого разделения;
– необходимость наличия чистых индивидуальных веществ всех ис-
следуемых гомологических рядов.

Идентификация по эталонным веществам

В хроматографической практике этот метод получил название метод

метки. Обычно этот метод применяют для отнесения компонентов анали-
зируемой смеси к предполагаемым соединениям и в простейшем вариан-
те он реализуется как метод добавки: сравниваются две полученные в
одинаковых условиях хроматограммы – исходного образца и образца с
добавкой вещества-эталона.
Если на второй хроматограмме появился дополнительный пик, это
означает, что в анализируемой смеси добавленное эталонное соединение
отсутствует. Если один из пиков, имеющийся на первой хроматограмме,
увеличился в размере на второй, то, вероятно, добавляемое эталонное
соединение присутствует и в анализируемой смеси. Однако следует учи-
тывать, что, если добавляемое эталонное соединение входит в состав ис-
следуемой смеси, на второй хроматограмме увеличится высота соответ-
ствующего пика, а ширина пика у основания останется неизменной. Если
же одновременно имеет место и изменение ширины пика у основания, то
добавляемое эталонное соединение относится к другому классу соедине-
ний и имеет место простое совпадение параметров удерживания этих
соединений. В этой связи для повышения надежности заключения следу-
ет повторить опыты по разделению на нескольких неподвижных фазах,

51
отличающихся по своим характеристикам. Количество добавляемого эта-
лона должно примерно соответствовать количественному содержанию
идентифицируемого компонента в анализируемой пробе. При больших
добавках пик эталона может наложиться на несколько пиков первона-
чальной хроматограммы. В случае, когда малое количество анализируе-
мой пробы не позволяет проводить манипуляции с добавками либо когда
нежелательно загрязнять пробу добавками эталонных соединений, стан-
дарт хроматографируют до и после хроматографирования исследуемого
образца и проводят сопоставление параметров удерживания.
Следует обязательно предпринять меры, чтобы зависимость парамет-
ров удерживания от нагрузки хроматографической колонки пробой не
исказила результаты сравнения. Необходимо сопоставлять параметры
удерживания примерно равных по величине пиков либо экстраполиро-
вать параметры удерживания к нулевому объему пробы.

Аналитическая реакционная газовая хроматография

Аналитическая реакционная газовая хроматография – самостоятель-

ное направление газовой хроматографии, которое характеризуется свои-
ми специфическими методами, особой областью применения, рядом осо-
бенностей аппаратурного оформления.
В отличие от других вариантов газовой хроматографии в аналитиче-
ской реакционной газовой хроматографии эффективность хроматографи-
ческой колонки и чувствительность детектирования, как правило, остаются
неизменными, однако в результате химической трансформации анализиру-
емой смеси образуются новые соединения, что приводит в общем случае к
изменению коэффициентов разделения и чувствительности детектирова-
ния. При анализе сложных по составу смесей в реакционной газовой хро-
матографии наиболее часто используются следующие реакции:
– реакции гидрирования и дегидрирования;
– реакции получения эфиров;
– реакции гидролиза;
– реакции дегидратации;
– реакции декарбоксилирования;
– реакции окисления;
– реакции образования нелетучих соединений;
– реакции процесса пиролиза.

52
 При применении реакционной газовой хроматографии к анализу при-
месей используются специфические химические реакции:
– реакции поглощения основного компонента (образование нелетучих
соединений);
– превращение анализируемой примеси в летучее соединение;
– химическое концентрирование примесей;
– химические превращения примесей и основного компонента с це-
лью изменения чувствительности детектирования.
Самостоятельной областью реакционной газовой хроматографии яв-
ляется пиролитическая газовая хроматография, которая сочетает в единой
методике процессы пиролиза вещества и хроматографическое определе-
ние продуктов его термического разложения.
Как правило, этим методом исследуют нелетучие вещества, в частно-
сти полимеры, для которых нельзя использовать обычные варианты газо-
хроматографического анализа.

V. Количественный газохроматографический анализ

В газовой хроматографии хроматограмма представляет собой графи-
ческое изображение зависимости концентрации компонентов в газе-
носителе на выходе из колонки от времени.
Хроматографический пик, соответствующий индивидуальному ком-
поненту пробы, отражает изменение во времени концентрации этого
компонента в газе-носителе на выходе из колонки и может быть охарак-
теризован рядом параметров.

Параметры пика как характеристика количества вещества

Параметром хроматографического пика называется величина, функ-

ционально связанная с количеством соответствующего данному пику
вещества. Эта величина может быть определена:
– путем измерений на полученной хроматограмме;
– путем непосредственной обработки выходного сигнала детектора.
На практике используют три основных параметра хроматографиче-
ского пика:
1) высота пика h;

53
 2) произведение высоты пика h на время удерживания t или пропор-
циональное ему расстояние на хроматограмме от момента ввода пробы
до регистрации максимума пика l, т.е. ht или hl;
3) площадь пика А или величины, приближенно характеризующие ее
значение.
Установлено, что для хроматограммы, полученной в идеальных усло-
виях, применение любого из указанных параметров для количественных
определений должно давать одинаковые результаты. Поскольку реальные
хроматограммы получаются в условиях более или менее далеких от иде-
альных, то в зависимости от конкретных условий анализа и применяемо-
го оборудования ценность того или иного параметра пика может оказать-
ся различной.
Основные критерии, которые определяют ценность параметра в кон-
кретных условиях, можно сформулировать следующим образом:
1) Простота и точность измерения величины параметра. Так, напри-
мер, полная площадь пика в большинстве случаев является приемлемым
параметром. Однако измерение площади на реальных хроматограммах
обычно сопряжено с большими затратами труда и времени либо требует
применения специального оборудования, стоимость которого соизмерима
со стоимостью хроматографа. Поэтому такой параметр стараются заме-
нить другим.
2) Линейность связи значения параметра с количеством соответству-
ющего ему вещества (линейность параметра). Связь значения параметра с
количеством компонента в пробе должна быть максимально близка к
линейной, по крайней мере, в пределах изменения концентрации
определяемого вещества в смесях, для которых методика предназначена.
Разумеется, можно работать и с нелинейным калибровочным графи-
ком. Однако при этом следует установить, не окажутся ли затраты труда,
связанные с систематической проверкой нелинейного графика по не-
скольким точкам настолько большими, что экономия времени на измере-
нии параметра не будет иметь существенного значения.
Например, использование в качестве параметра высоты пика часто
приводит к необходимости использовать нелинейный калибровочный
график, в то время как использование параметра hb дает линейный гра-
фик. Бывают случаи, когда вследствие асимметрии пика оба эти парамет-
ра дают нелинейную связь с количеством вещества. В таком случае ис-
пользуют тот параметр, который проще измерить.
3) Устойчивость к изменению условий анализа.

54
 Численное значение параметра пика определяется не только количе-
ством вещества, которому этот пик соответствует, но и условиями анали-
за, в которых он получен. Чем меньше влияют условия анализа на пара-
метры пика, тем он более устойчив. При этом особенно важны те условия
анализа, которые влияют одновременно и на работу хроматографической
колонки и на работу детектора.
Так, скорость потока газа-носителя в большинстве случаев одновре-
менно влияет и на работу колонки и на работу детектора. Температура
колонки связана с температурой детектора, если последний размещается
в термостате колонок. Если же детектор размещен в отдельном термоста-
те, то температура в термостате колонок на него практически не влияет.
Ток моста детектора теплопроводности или расход вспомогательных га-
зов детектора ионизации в пламени – факторы, которые можно считать
независимыми от условий работы колонки.
Во всех этих случаях речь идет о сравнительно небольших отклоне-
ниях от подобранных для конкретной методики и прибора условий.
При рассмотрении вопросов устойчивости параметров следует иметь
в виду возможность использования для расчетов как его абсолютных, так
и относительных значений. Относительные значения параметров полу-
чаются путем деления значения параметра каждого пика данной хрома-
тограммы на значение такого же параметра одного из пиков, значение
которого принимается равным единице. Относительные значения пара-
метров пиков более устойчивы, чем абсолютные, однако их получение
требует больших затрат времени.
Если проанализировать влияние возможных отклонений температуры
колонки и скорости потока газа-носителя от средних значений, соизме-
римых по длительности с продолжительностью регистрации пика на
устойчивость и линейность параметра h, то получим следующее:
– флуктуация температуры колонки изменяет распределение концен-
траций в газе-носителе, выходящем из колонки (концентрационный про-
филь), который существенно зависит от температуры в момент десорб-
ции компонента со слоя насадки в конце колонки. При этом может изме-
няться как абсолютное, так и относительное значение h при работе с лю-
бым детектором;
– флуктуации скорости потока газа-носителя, очевидно, не скажутся
на абсолютных и относительных значениях h при работе с концентраци-
онным детектором. При использовании потокового детектора будут ме-
няться как абсолютные, так и относительные значения h;

55
 – параметр h весьма чувствителен к перегрузке колонки.
Линейная связь между количеством введенной пробы и параметром h
нарушается, если вводимые количества пробы существенно больше до-
пустимых.
Таким образом, при использовании в качестве параметра пика абсолют-
ного значения h необходимо строго стабилизировать условия анализа.
Высота пика h является наиболее легко измеряемым параметром, и по
этой причине случайные ошибки, связанные с измерениями на хромато-
грамме, как правило, минимальны.
Параметр h рекомендуется применять в следующих случаях:
– при работе с хроматографом, обеспечивающим хорошую стабиль-
ность условий анализа и высокую точность задания температуры и ско-
рости потока газа-носителя (желательно использовать детектор по тепло-
проводности);
– при анализе сходных по составу проб и при работе на непрерывно
включенных приборах, например, автоматических хроматографах, установ-
ленных в потоке или в производственных лабораториях при круглосуточной
работе. В этом случае линейность параметра достаточно велика, поскольку
пределы изменения содержания компонентов незначительны;
– при выполнении быстрых анализов, когда имеется возможность по-
вторить измерения, вызывающие сомнения;
– если есть возможность точно дозировать пробу;
– если легко выполнить и проверить калибровку прибора;
– при расчете хроматограмм, содержащих плохо разделенные пики,
приближенной оценки результатов.
Параметр h не рекомендуется применять в случаях:
– если калибровка прибора затруднена;
– при использовании потокового детектора, если скорость потока га-
за-носителя задается и поддерживается недостаточно точно.
Влияние изменения условий хроматографических разделений на па-
раметр А (площадь пика) сводятся к следующему:
– флуктуации температуры не искажают площадь пика при работе с
детекторами обоих типов;
– флуктуации скорости потока газа-носителя при использовании кон-
центрационных детекторов могут искажать как абсолютные, так и отно-
сительные значения параметра А;
– перегрузка колонки пробой, если она не ухудшает разделения до не-
допустимых пределов, практически не влияет на площадь пика.

56
 Площадь пика для детекторов, используемых в количественной хро-
матографии, является универсальным параметром, применимым во всех
случаях, когда отсутствуют необратимые процессы в колонке и когда
детектор работает в области нормальных рабочих условий.
Применение потоковых детекторов при использовании параметра А
предпочтительнее.
Имеются сведения о количественной характеристике устойчивости
различных параметров пика. Так, изменение относительной высоты пика
составляет 0,3−0,9 % при изменении температуры на 1 К. Точность 2%
при анализе методом абсолютной калибровки по высотам пиков может
быть достигнута при стабилизации температуры с точностью до 0.1 К и
скорости газа-носителя до 1 мл/мин. Трудно получить результаты с отно-
сительной погрешностью менее 2,8–3,2% при концентрации компонента
в пробе 1−2 %, если в качестве параметра пика используется его высота.
Для детектора по теплопроводности в сочетании с измерением пло-
щади пика получены следующие значения допустимых погрешностей
задания параметров (при условии получения погрешности результата не
более 1 %).Большой вклад в погрешность вносит давление на выходе из
колонки. Поскольку эта величина определяется изменением атмосферно-
го давления, ее колебания могут быть достаточно велики (до 3 %). Между
тем, в практической хроматографии это часто не учитывается. В резуль-
тате возникают существенные погрешности при использовании для рас-
четов абсолютных значений параметров. По этой причине детектор иони-
зации в пламени считается более пригодным для количественных изме-
рений, чем детектор по теплопроводности.
Для получения погрешности менее 1% при определении времени
удерживания требуются не столь жесткие условия по стабильности аппа-
ратуры: давление на входе в колонку можно поддерживать с точностью
0,4%, температуру с точностью 0,5 К и выполнять измерения величины
площади с точностью 0,5%.

Методы измерения площади пиков

Методы измерения полной площади пика можно подразделить на ав-

томатические и выполняемые вручную.
Для измерения полной площади пика вручную чаще всего используют
два способа: планиметрирование и взвешивание вырезанных по контуру
хроматограммы пиков.

57
 Планиметрирование пиков обычными планиметрами с достаточной
точностью удается осуществить лишь в случае широких и больших по
площади пиков. Поскольку такие пики встречаются сравнительно редко,
этот метод не нашел применения в количественной хроматографии.
Вырезание и последующее взвешивание пиков является довольно
удобным и сравнительно точным методом определения полной площади
пика и рекомендуется для особо трудных измерений, в частности, для
сильно асимметричных и перекрывающихся пиков. Недостатком этого
метода является то, что он требует сравнительно больших затрат труда и
разрушает хроматограмму. Для устранения последнего недостатка и од-
новременно повышения точности измерений предложено вырезать и
взвешивать копию пика на металлической фольге. Плотность последней
значительно больше плотности бумаги, вследствие чего уменьшаются
ошибки взвешивания. Кроме того, фольга более однородна по плотности.
Трудность измерения полной площади пика при отсутствии специ-
альных приборов привела к разработке ряда приближенных способов
измерения этой величины. Рассмотрим следующие приближенные мето-
ды вычисления площадей пиков:
– Произведение высоты пика на ширину пика на половине высоты
(hb). Этот метод приближенного вычисления площади получил настолько
широкое распространение в практике, что часто площадь пика отож-
дествляется с произведением hb.
– Произведение высоты пика на среднее значение ширины пика, изме-
ренной на нескольких уровнях. Частным случаем этого способа является
метод Кэндала−Боша: вычисление произведения высоты пика на полусум-
му значений ширины пика, измеренных на уровнях 0.15 h и 0.85 h.
– Разбивка на простые фигуры (трапеции, прямоугольники, треуголь-
ники).
– Измерение площади треугольника, образованного пересечением ка-
сательных в точках перегиба кривой. Иногда этот метод называют мето-
дом описанного треугольника.
– По первой производной профиля хроматографического пика.
Для симметричных пиков все методы практически равноценны. Для
асимметричных пиков метод hb дает неправильные результаты по срав-
нению с двумя последними методами. При измерении площади пика ме-
тодом описанного треугольника получается более близкое к истинному
абсолютное значение площади пика. Однако отношение площадей раз-
личных пиков, измеренное этим методом, такое же, как и в методе изме-

58
рения hb. Между тем выполнение дополнительных построений здесь бо-
лее трудоемко, поскольку требуется находить точки перегиба кривой.
Одной из автоматизированных программных продуктов регистрации
и обработки хроматограмм является программа «Хроматэк-Аналитик».

VI. Рекомендации при работе с газовыми хроматографами

«Кристалл – 5000.1» и «Кристалл – 5000.2»
Основой успешного использования газовых хроматографов «Кристалл –
5000.1» и «Кристалл – 5000.2» является работа с программным обеспечени-
ем (ПО) «Хроматэк Аналитик», которое предназначено для сбора и обработ-
ки хроматографической информации, поступающей от хроматографов серии
“Кристалл” и другого аналитического оборудования.
ПО «Хроматэк Аналитик» позволяет:
– управлять хроматографами серии «Хроматэк Кристалл», а так же
другим хроматографическим оборудованием, таким как Блок сбора дан-
ных, Формирователь газовых потоков и т.п.;
– осуществлять автоматизированный сбор и хранение хроматографи-
ческой и разнообразной диагностической информации;
– выполнять обработку хроматографической информации с выдачей
результатов анализов;
– оформлять отчеты по выполненным анализам в соответствии с тре-
бованиями пользователя;
– преобразовывать хроматографические данные в различные файло-
вые форматы для использования этих данных в программах других про-
изводителей;
– выполнять различные узкоспециализированные расчеты по кон-
кретных аналитическим задачам с помощью приложений не входящих в
стандартную поставку ПО.

Запуск соединения

Запуск соединения для начала работы с программой Панель управле-

ния может быть осуществлен тремя способами:
1. Наиболее простой (и рекомендуемый) способ заключается в запус-
ке соединения непосредственно с помощью его ярлыка, расположенного
на рабочем столе Windows.

59
 2. Второй способ предполагает запуск программы Панель управления
с помощью одного из ярлыков на рабочем столе Windows: Кристалл
ПМ2, Кристалл ПМ1, Кристалл 2000. Запущенная таким образом Панель
управления автоматически предлагает оператору выбрать соединение из
списка.
3. Третий способ – автозапуск соединения при загрузке компьютера.
Он возможен в случае, если вы отметили соответствующую опцию на
стадии создания соединения. Необходимо помнить, что хроматограф в
этом случае нужно включить перед включением компьютера.

Главное окно программы

Главное окно программы Панель управления, показанное на рисунке

23, состоит из следующих элементов (сверху вниз):
• заголовок окна;
• главное меню;
• панель инструментов;
• информационная область с закладками;
• строка состояния.

Рис. 23. Главное окно программы

60
 Заголовок главного окна Панели управления содержит информацию о
названии соединения и типе прибора (в примере на рисунке название
соединения – Анализ нефти, тип прибора – Кристалл-ПМ2).
Главное меню содержит набор команд, необходимых для работы с
программой.
На панели инструментов расположены кнопки быстрого доступа
(дублирующие наиболее часто используемые команды меню).
В нижней части окна программы расположена строка состояния. Она
предназначена для индикации этапа работы хроматографа (в примере на
рисунке хроматограф находится на этапе «Подготовка»). Рядом с назва-
нием этапа указано его текущее время.

Закладки главного окна

В рабочей области программы расположены информационные за-

кладки:
1. Состояние. На данной закладке выводится таблица заданных и изме-
ренных значений температур (колонки, испарителя, детектора, обогревае-
мых зон различных периферийных устройств), расходов и давлений газов.
Если данные не поступали из прибора в течение 3-х секунд на месте значе-
ния выводится прочерк. Параметры, находящиеся вне допуска, отмечаются
красным восклицательным знаком, расположенным слева от названия па-
раметра, а также выводятся в нижней области закладки (рис. 24).

Рис. 24. Закладка «Состояние»

61
 2. Детекторы. На данной закладке выводятся измеренные значения
сигналов детекторов, присутствующих в хроматографе, и частота детек-
торных каналов. Во время анализа в столбце Старт выводится канал стар-
та (Старт 1 или Старт 2, рис. 25).

Рис. 25. Закладка «Детекторы»

3. Диагностика. Эта закладка служит для отображения различной ди-

агностической информации, такой как напряжения на клапанах РРГ, зна-
чения АЦП, температура окружающей среды и т.п. (рис. 26).

Рис. 26. Закладка «Диагностика»

4. Журнал. В журнале сохраняются все записи об операциях, выпол-

няемых с данным прибором, а также фатальные аварии и ошибки прибо-
ра (рис. 27).

62
 Рис. 27. Закладка «Журнал»

5. Сигнал. На данной закладке отображаются графики изменения сигна-

лов со всех диагностических и детекторных каналов за последний час
(рис. 28). Канал, график сигнала с которого необходимо просмотреть,
выбирается из выпадающего списка. Для того, чтобы масштабировать
график, выполните на нем двойной щелчок левой кнопкой мыши. На
экране появится окно, показанное на рис. 28.

Рис. 28. Закладка «Сигнал»

6. Сеансы. На этой закладке (рис. 29) выводится список сеансов, создан-

ных для текущего соединения. В столбце Активность показано состоя-
ние каждого сеанса: значение Да – сеанс активен и может быть автомати-
чески запущен при старте анализа (если имеет привязку к данному кана-
лу старта), значение Нет – сеанс не будет запущен даже при старте свя-
занного с ним анализа (соответственно, в этом случае не будет получено
никаких хроматограмм или диагностических графиков).

Рис. 29. Закладка «Сеансы»

63
 Настройка конфигурации хроматографа
Основные сведения

После первого запуска хроматографа необходимо настроить его кон-

фигурацию. Для разных типов процессорных модулей состав конфигура-
ционных настроек и их диалоги различны, но в общем случае оператор
должен выполнить следующие операции:
1) Указать наличие или отсутствие в хроматографе компонентов и
устройств, которые не могут быть обнаружены автоматически, и задать
их параметры.
2) Задать параметры автоматически обнаруженных устройств хрома-
тографа, если такие присутствуют.
3) Задать блокировки температур термостатов колонок, детекторов и
испарителей, а также дополнительных термостатов, если такие присут-
ствуют.
4) Задать параметры поджига пламени для пламенных детекторов
(ПИД, ТИД, ПФД) при их наличии в хроматографе.
1. Общее (рис. 30). Отметьте наличие дополнительной нагревательной
платформы для Испарителя 2 и Детектора 2. Если в хроматографе ка-
кая-либо из дополнительных нагревательных платформ отсутствует, со-
ответствующий признак должен быть отключен.

Рис. 30. Диалог «Конфигурация». Страница «Общее»

64
 Если вы хотите, чтобы нажатие клавиш на клавиатуре хроматографа
сопровождалось звуковым сигналом, отметьте опцию Звуковая индика-
ция нажатия клавиш на клавиатуре прибора. Установите опцию По-
дача звукового сигнала при наличии параметров вне допуска, если
хотите продублировать звуковым сигналом световой индикатор Допуск.

2. Настройка параметров клапанов. На странице Клапаны (рис. 30)

задайте параметры электромагнитных клапанов. Если клапан отсутствует
в хроматографе, выберите из выпадающего списка параметр Выключен.
Если необходимо, чтобы при включении питания хроматографа клапан
был открыт, выберите из выпадающего списка параметр Нормальное
состояние клапана – «открыт». Если необходимо, чтобы при включе-
нии питания хроматографа клапан был закрыт, выберите из выпадающего
списка параметр Нормальное состояние клапана – «закрыт».

3. Настройка параметров колонок. На страницах Колонка 1 и Колонка

2 (рис. 31) введите параметры используемых в работе колонок. Как пра-
вило, если в хроматографе применяются капиллярные колонки, то капил-
лярная колонка 1 обслуживается парой газовых регуляторов Газ 1 — Газ
2, а капиллярная колонка 2 — парой Газ 3 — Газ 4.

Рис. 31. Диалог «Конфигурация». Группа параметров «Колонки»

65
Часть параметров колонок несет исключительно информативный харак-
тер, поэтому эти параметры заполнять не обязательно. Обязательными
для заполнения являются:
– Длина и Диаметр колонки. Данные параметры используются при рас-
чете газового режима капиллярных колонок в соответствующем диалоге.
Параметры Колонки 1 используются в расчете газового режима для пары
регуляторов Газ 1 – Газ 2, а параметры Колонки 2 – в аналогичном рас-
чете для пары Газ 3 – Газ 4.
– Макс. температура колонки. Данный параметр вводится для предот-
вращения перегрева колонки. Для ускорения процесса заполнения пара-
метров колонок вы можете воспользоваться их каталогом. Для этого
нажмите кнопку Каталог. На экране появится диалоговое окно. В данном
диалоге выберите необходимую колонку из списка, отсортированного по
производителю колонок, и нажмите кнопку ОК.

4. Настройка блокировок. Назначение страницы Блокировки – задание

максимальных температур термостатов, времен аварии и ожидания, пе-
реключение режимов работа/поверка. Окно диалога Конфигурация с
выбранной страницей Блокировки показано на рис. 32.

Рис. 32. Диалог «Конфигурация». Страница «Блокировки»

66
 На данной странице:
– Задайте предельные значения температур термостатов колонки, испа-
рителей и детекторов.
Эти параметры предназначены для защиты от перегрева: если по каким-
либо причинам хотя бы одна из температур превысит заданное предель-
ное значение на 10 градусов, прибор, выдав сообщение Фатальная ава-
рия, начнет принудительное охлаждение.
Предельная температура термостата колонок определяется макси-
мальной температурой сорбентов используемых колонок. Температура
термостатов испарителей определяется природой анализируемых ве-
ществ и обычно не превышает 300 °С.
Температура детекторов определяется также конструкцией детектора:
– для ПИД, ТИД, ЭЗД, ПФД – не выше 400 °С;
– для ДТП – не выше 300 °С
– для ФИД – не выше 250 °С.

5. Настройка параметров поджига. Назначение страницы Поджиг –

задание параметров режима поджига пламенных детекторов. Обычно эти
параметры устанавливаются только один раз на заводе-изготовителе,
но в случае необходимости вы можете изменить их.

Рис. 33. Диалог «Конфигурация». Страница «Поджиг»

67
– В группе Режим газа задайте значения параметров газов, поддержива-
емые на этапе Поджиг. При поджиге пламени измеряемый фон пламен-
ных детекторов увеличивается. Для того чтобы хроматограф зафиксиро-
вал наличие пламени, фон должен превысить некоторое пороговое значе-
ние, задаваемое параметром Порог приращения фона. Конкретные зна-
чения порога для различных пламенных детекторов описаны в руковод-
стве по эксплуатации хроматографа.
– Укажите способ поджига.
– Если вы выбрали способ поджига по водороду, укажите значение при-
ращения водорода при каждой последующей попытке поджига. В зави-
симости от использования различных пламенных детекторов, этап под-
жиг начинается, так, для ПИД, ПФД – по достижении температуры 150
градусов при условии, что прошло не менее 10 минут с момента пересе-
чения температуры 80 градусов.

6. Детекторы. В группе Детекторы расположены настройки тех детек-

торов, чьи усилители обнаружены хроматографом. Детекторы обладают
рядом общих параметров (настройка данной конфигурации зависит от
схемы хроматографа делается опытным работником).

7. Газовые регуляторы. Назначение – выбор типа регулятора газа по

каждому газовому каналу и проведение настройки регуляторов в соот-
ветствии с поставленной задачей. Страница настроек каждого из газовых
регуляторов содержит три закладки (настройка данной конфигурации
зависит от схемы хроматографа делается опытным работником).

Режим хроматографа Кристалл

В левой области диалога Режим хроматографа расположен список

страниц, каждая из которых содержит определенную группу параметров
режима.
1. Страница «Общие». На странице Общее задается время анализа
(рис. 34).

68
 Рис. 34. Страница «Режим хроматографа»

2. Страница «Температуры». На странице Температуры (рис. 34) за-

дайте температуры колонки, детекторов и испарителей. В правой части
диалога приведены справочные значения блокировок температуры, кото-
рые выставлены в диалоге Конфигурация. Для редактирования значений
блокировок необходимо открыть указанный диалог. Кроме этого данная
закладка позволяет программировать температуру в термостате во время
анализа для оптимизации условий хроматографирования.

3. Страница «Газы». На странице Газы задайте значения параметров

газов. Режимы газов: расход, давление, скорость или поток задаются в
диалоге Конфигурация на странице Газовые регуляторы. Данная за-
кладка очень полезна при оптимизации хроматографического анализа.

4. Страница «Продувка». На странице Продувка задайте значения па-

раметров газов и температуру колонки, которые хроматограф будет отра-
батывать на этапе продувка после анализа. Используйте продувку после
анализа в тех случаях, когда анализируемая проба содержит компоненты
с большими временами удерживания, детектирование которых не требу-
ется. В этом случае время анализа может быть небольшим и определяется
последним выходящим целевым компонентом. Для того чтобы более вы-
сококипящие, но ненужные для количественного или качественного рас-
чета компоненты были удалены из хроматографического тракта.

69
 Сохранение и загрузка режима

Созданный режим можно сохранить, если в дальнейшем он будет ча-

сто использоваться. Для этого служат команды Загрузить и Сохранить в
меню Режим. При выборе команды Сохранить появляется стандартный
диалог Windows, в котором нужно выбрать место сохранения файла, вве-
сти его имя и нажать кнопку ОК. После этого будет выдан запрос Загру-
жать данный режим автоматически при следующем подключении к
прибору?. Если вы выберите ответ Да, то при каждом новом запуске
данного соединения, хроматограф будет автоматически отрабатывать
сохраненный режим. В случае ответа Нет, функция автозапуска не будет
активизирована, но вы можете в любой момент выбрать и запустить со-
храненный режим вручную, с помощью команды Запустить.

Охлаждение хроматографа

Режим охлаждения прибора используется после окончания работы,

перед выключением хроматографа. Для вызова диалога в меню Режим
выберите команду Охлаждение. В данном диалоге:
– Задайте значения температур термостатов на этапе Охлаждение.
– Введите значения параметров газов при охлаждении прибора.
– Запустите режим Охлаждение и при достижении прибором указанных
условий произведите выключение прибора.

Рис. 35. Диалог «Охлаждение»

70
 VII. Лабораторные работы
Лабораторная работа № 1.
Подбор режимов работы хроматографа и условий программирования

Теоретическая часть
Если в анализируемой смеси имеются компоненты, сильно различа-
ющиеся специфичностью адсорбции, а, следовательно, и величинами
удерживаемых объемов, то целесообразно применять программирование
температуры колонок, что делает этот метод весьма эффективным для
разделения и анализа сложных смесей. Однако следует иметь в виду, что
возможности выбора неподвижных фаз в хроматографии с программиро-
ванием температуры ограничены, так как сравнительно небольшое число
неподвижных фаз имеет удовлетворительную термическую стабильность
при тех высоких температурах, которые приходится применять при про-
граммировании. Программирование температуры может быть с успехом
применено и в капиллярной хроматографии. Если при выборе оптималь-
ных условий опыта учитываются особенности метода, разделительная
способность практически не уменьшается и высокая эффективность ка-
пиллярных колонок сочетается с преимуществами программирования
температуры. Для успешного применения программирования температу-
ры важно знать количественные соотношения между температурами
удерживания отдельных веществ и их характеристиками при изотермиче-
ской хроматографии, с одной стороны, и условиями опыта – с другой.
Это позволяет не только установить зависимость между различными ве-
личинами удерживания в изотермических и неизотермических условиях,
но и получить важные данные для выбора оптимальных условий опыта.
Ради полноты картины следует упомянуть о некоторых неизотермиче-
ских методах, основанных на использовании термических эффектов, различ-
ным образом воздействующих на разделение. Развитие этих вариантов, об-
ладающих довольно существенными недостатками, относится к периоду,
когда применялась преимущественно газоадсорбционная хроматография.
Вследствие ограниченности выбора сорбентов приходилось добиваться из-
вестных эффектов разделения, изменяя термические условия опыта.
Что касается количественной расшифровки хроматограмм, то наибо-
лее точные результаты могут быть получены при работе в режиме линей-
ного программирования температуры. Однако нельзя использовать метод
подсчета, учитывающий время выхода. Необходимо измерять толщину

71
пиков. При удачном выборе параметров анализа можно добиться того,
что толщина пиков будет приблизительно одинаковой. Количественный
расчет при этом заметно упрощается, так как концентрации компонентов
будут пропорциональны высотам пиков.
Программируемый анализ. Необходимости в большом числе поиско-
вых экспериментов можно избежать, если пользоваться анализом с про-
граммированием условий. В газовой хроматографии, как правило, про-
граммируют температуру, с этой целью после ввода образца обычно по-
степенно повышают температуру печи. Наиболее широко используют
линейную программу. Основное достоинство такой программы - возмож-
ность элюирования большого количества компонентов в оптимальных
условиях в рамках одного эксперимента. При этом соединения с опти-
мальными значениями коэффициентов емкости выходят первыми при
низких температурах, в то время как соединения, требующие более высо-
ких температур, выходят позднее. Следовательно, для выбора начальных
условий не требуется никакой информации об образце.
Газовая хроматография может решать значительную часть проблем
аналитической химии. В зависимости от сложности смесей и природы
анализируемых объектов газовая хроматография, являясь чрезвычайно
гибким методом, позволяет решать очень многие аналитические задачи
путем выбора хроматографической системы и рабочих условий (капил-
лярная газовая хроматография, программирование температуры, высокое
давление, специфические методы детектирования).
Степень универсальности и гибкости газовой хроматографии во мно-
гом определяется существующим техническим уровнем аппаратуры.
В некоторых случаях можно ускорить выбор подходящих начальных па-
раметров разделения при помощи программируемого анализа, т. е. програм-
мирования температуры в газовой хроматографии или программируемого
изменения состава подвижной фазы в жидкостной хроматографии.
Метод газовой хроматографии является одним из самых современных
методов анализа. Его отличительные черты - экспрессность, высокая точ-
ность, чувствительность, возможность автоматизации. С помощью этого
метода могут быть решены многие аналитические проблемы выбором
хроматографической системы и рабочих условий. Широкий набор стаци-
онарных жидких фаз и адсорбентов, с одной стороны, программирование
температуры, высокое давление, специфические методы детектирования,
с другой стороны, позволяют разделять и количественно определять со-
единения с едва заметной разницей в давлении пара. Степень универ-

72
сальности и гибкости метода газовой хроматографии во многом опреде-
ляется существующим техническим уровнем аппаратуры. Если в каче-
ственной газовой хроматографии надежная идентификация компонентов
смеси может быть чаще всего обеспечена лишь сочетанием с другими.
Решение применить газовую хроматографию с программированием
температуры для разделения и анализа основывается главным образом на
результатах сопоставления данных о пределах температур кипения ком-
понентов смеси. Выбор этого метода может быть также обусловлен необ-
ходимостью ввести пробу в течение длительного времени без потери эф-
фективности колонки и с минимальным разложением пробы.
Цель работы: провести подбор режимов работы хроматографа и
условий программирования для разделения 3-х компонентной смеси.
Принадлежности к работе: газовый хроматограф Кристалл 5000.1
(5000.2) (комплектация насадочных колонок соответствует данному ана-
лизу), программное обеспечение Хроматэк-Аналитик, смесь веществ для
разделения (вода, ацетонитрил, ацетон, этиловый спирт), индивидуаль-
ные вещества.
Порядок выполнения работы: Открыть газовый баллон с газом-
носителем (гелием). Включить газовый хроматограф. Используя про-
граммное обеспечение Хроматэк-Аналитик, запустить режим «Лабора-
торная 1». Дождаться выхода на соответствующий режим хроматографа.
Режим «Лабораторная 1» включает в себя температуру термостата –
120°С, скорость газа-носителя – 30 мл/мин. При этих условиях проанали-
зировать все индивидуальные компоненты, вводя в испаритель хромато-
графа пробу объемом 1 мкл. Заполнить данные в таблицу.

компонент Время удержи-

вания

Анализ времен выхода индивидуальных компонентов, составляющих

анализируемую смесь при заданной температуре термостата колонок
позволяет не только оптимизировать температурный режим, но и иден-
тифицировать компоненты по времени удерживания в хроматографиче-
ской колонке. После выявления времен удерживания индивидуальных
веществ, проанализировать 3-х компонентную смесь. Задача считается
выполненной, если полученная хроматограмма анализируемой смеси
представляет собой (рис. 36). Все хроматографические пики индивиду-

73
альных веществ должны быть четко разделены для возможности кор-
ректного обсчета.

Рис. 36. Пример хроматограммы

Лабораторная работа № 2.
Калибровка газового хроматографа

Теоретическая часть
Калибровка хроматографа заключается в нахождении для каждого
компонента анализируемой смеси зависимости определяющего парамет-
ра пика (высоты или площади) от концентрации данного компонента в
смеси. Эту зависимость выражают либо графически, либо в виде калиб-
ровочных коэффициентов.
Способ калибровки хроматографов по искусственно приготовленным
контрольным смесям получил наибольшее распространение в практике ко-
личественного газового анализа. Однако значительные погрешности, связан-
ные с методом их приготовления, и технологические трудности, вызванные
необходимостью иметь специальное оборудование, заставляют обратить
внимание на способ абсолютной калибровки по чистым газам.
Приготовление контрольных смесей для калибровки хроматографов.
Наибольшее распространение при калибровках хроматографов для ана-
лиза продуктов горения получил объемный метод приготовления кон-

74
трольных смесей, заключающийся в том, что отмеряемые с помощью
газовых бюреток объемы чистых газов вводятся в аспиратор, где разбав-
ляются до атмосферного давления воздухом или азотом.
Проведение калибровки хроматографа по чистым газам. Этот метод
калибровки является очень простым, однако точность получаемых ре-
зультатов, в основном зависит от той точности, с которой измерены объ-
емы вводимых микродоз и рабочей зоны. Не располагая специальным
прецизионным оборудованием, обеспечить точное измерение объемов
микродоз не представляется возможным. В самом деле, для того чтобы
обеспечить проведение калибровки предназначенного для анализа про-
дуктов горения хроматографа по горючим компонентам в пределах от
0,001 до 0,1% об. при объеме рабочей дозы до 5 см3. При этом погреш-
ность, допущенная при измерении столь малых объемов, целиком отра-
зится на результатах анализа и не обеспечит требуемой точности в опре-
делении химической неполноты горения. В связи с изложенным в ЭНИН
разработан способ калибровки хроматографов по чистым газам, при ко-
тором исключается необходимость непосредственного определения объ-
емов вводимых при калибровке микродоз и объема рабочего дозатора.
Разработанный способ калибровки прост в осуществлении, не требует
специального оборудования и обеспечивает высокую точность калибров-
ки хроматографа (относительная погрешность 1%). Расчет количествен-
ного содержания компонентов смеси проводят по площадям пиков мето-
дом абсолютной калибровки. Для этого вводят поочередно в испаритель
хроматографа микрошприцем 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 мкл, например, воды, ди-
метилформамида и этилацетата. Каждое хроматографирование повторя-
ют три раза. Строят градуировочные графики зависимости площадей пи-
ков воды, диметилформамида и этилацетата от хроматографируемого
количества. Вычисляют площадь пика каждого компонента на хромато-
грамме смеси как среднеарифметическую из трех измерений и по графи-
ку находят массу каждого компонента в хроматографируемом количестве
смеси. Метод абсолютной калибровки может применяться при анализе
газовых смесей. В этом случае в колонку дозируют определенные коли-
чества компонента, измеряют площади пиков и строят калибровочный
график, дозируя затем известное количество смеси в колонку и пользуясь
калибровочным графиком, рассчитывают содержание компонента в сме-
си. Способ применяется редко из-за погрешностей при дозировании мик-
рошприцем (особенно велики погрешности при дозировании жидкостей)
и необходимости строго постоянного режима работы хроматографа при

75
калибровке и анализе. Методы внутреннего стандарта и нормализации не
требуют знания количества пробы, введенной в колонку.
Цель работы: провести калибровку газового хроматографа.
Принадлежности к работе: газовый хроматограф Кристалл 5000.2
(комплектация колонок соответствует анализу смеси углеводородов),
программное обеспечение Хроматэк-Аналитик, калибровочная газовая
смесь с паспортом соответствия.
Порядок выполнения работы: Открыть газовые баллоны с газами-
носителями. Включить газовый хроматограф. Используя программное
обеспечение Хроматэк-Аналитик, запустить режим «Газ». Дождаться
выхода на соответствующий режим хроматографа.
К газовому крану-дозатору подключить с помощью гибкого газопро-
вода баллон с калибровочной смесью. Ввести с помощью крана дозатора
пробу в хроматограф на анализ и нажать кнопку «Старт» на панели хро-
матографа. При заполнении паспорта хроматограммы в программе «Хро-
матэк-Аналитик» обязательно сделать пометку «Градуировка». После
того как все идентифицируемые компоненты зафиксированы на хромато-
грамме анализ можно остановить, путем нажатия кнопки «Стоп». При
идентификации пиков необходимо воспользоваться закладкой на панеле
программы «Хроматэк-Аналитик» «Обработка/Операции/Сгенерировать
компоненты». Затем в закладке хроматограммы аккуратно внести наиме-
нование компонента и его количество, согласно паспорту к калибровоч-
ной смеси. Данную операцию проводят точно зная времена удерживания
и порядок выхода компонентов смеси на хроматограмме в данных усло-
виях хроматографирования. Далее снова вводим в хроматограф калибро-
вочную смесь на анализ и повторяем вышеизложенные операции. Калиб-
ровка хроматографа содержит не менее 3 анализов. Выбирается наиболее
оптимальный из анализв и в программе «Хроматэк-Аналитик» делается
пометка «Метод» в паспорте к его хроматограмме.

Лабораторная работа № 3.
Анализ смеси постоянных газов (О2, N2, CO, CO2)

Цель работы: провести анализ смеси основных газов с использовани-

ем газового хроматографа.
Принадлежности к работе: газовый хроматограф Кристалл 5000.1,
программное обеспечение Хроматэк-Аналитик.
Порядок выполнения работы: Открыть газовые баллоны с газами-
носителями. Включить газовый хроматограф. Используя программное

76
обеспечение Хроматэк-Аналитик, запустить режим «Газ». Дождаться
выхода на соответствующий режим хроматографа.
Ввести с помощью крана-дозатора анализируемую пробу в хромато-
граф на анализ и нажать кнопку «Старт» на панели хроматографа. При
заполнении паспорта хроматограммы в программе «Хроматэк-Аналитик»
обязательно сделать пометку «Количественный анализ». После того как
все идентифицируемые компоненты зафиксированы на хроматограмме
анализ можно остановить, путем нажатия кнопки «Стоп». Для идентифи-
кации компонентов выбираем метод обсчета «Рассчитать по методу» и
выбрать «Метод». Произвести обсчет хроматограммы и распечатать ре-
зультаты анализа. При необходимости анализ можно повторить, варьируя
количества компонентов.

Лабораторная работа № 4.
Анализ смеси горючих газов

Цель работы: провести анализ смеси горючих газов с использовани-

ем газового хроматографа.
Принадлежности к работе: газовый хроматограф Кристалл 5000.1,
программное обеспечение Хроматэк-Аналитик.
Порядок выполнения работы: Открыть газовые баллоны с газами-
носителями. Включить газовый хроматограф. Используя программное
обеспечение Хроматэк-Аналитик, запустить режим «Газ». Дождаться
выхода на соответствующий режим хроматографа.
Ввести с помощью крана-дозатора анализируемую пробу в хромато-
граф на анализ и нажать кнопку «Старт» на панели хроматографа. При
заполнении паспорта хроматограммы в программе «Хроматэк-Аналитик»
обязательно сделать пометку «Количественный анализ». После того как
все идентифицируемые компоненты зафиксированы на хроматограмме
анализ можно остановить, путем нажатия кнопки «Стоп». Для идентифи-
кации компонентов выбираем метод обсчета «Рассчитать по методу» и
выбрать «Метод». Произвести обсчет хроматограммы и распечатать ре-
зультаты анализа. При необходимости анализ можно повторить, варьируя
количества компонентов.

77
 Лабораторная работа № 5.
Анализ бензина с расчетом октанового числа

Цель работы: провести анализ бензина с использованием газового

хроматографа.
Принадлежности к работе: газовый хроматограф Кристалл 5000.2,
программное обеспечение Хроматэк-Аналитик.
Порядок выполнения работы: Открыть газовые баллоны с газами-
носителями. Включить газовый хроматограф. Используя программное
обеспечение Хроматэк-Аналитик, запустить режим «Бензин». Дождаться
выхода на соответствующий режим хроматографа.
Ввести с помощью шприца-дозатора в испаритель хроматографа ана-
лизируемую пробу объемом 1 мкл на анализ и нажать кнопку «Старт» на
панели хроматографа. При заполнении паспорта хроматограммы в про-
грамме «Хроматэк-Аналитик» обязательно сделать пометку «Количе-
ственный анализ». Дождаться окончания анализа. Для идентификации
компонентов выбираем метод обсчета «Рассчитать по методу» и выбрать
«Метод». Обсчет хроматограммы будет произведен автоматически, далее
распечатать результаты анализа. При необходимости анализ можно по-
вторить.

VIII. Охрана труда при эксплуатации приборов

газовой хроматографии
1. Общие требования охраны труда
1.1. Настоящие рекомендации по охране труда распространяются на
работы, выполняемые на газовых хроматографах.
1.2. К самостоятельной работе с газовыми хроматографами допуска-
ются студенты (сотрудники) не моложе 18 лет, прошедшие инструктаж
на рабочем месте по охране т руда при работе с электрооборудованием и
баллонами со сжатыми и сжиженными газами. Кроме того, необходимо
пройти обучение и проверку знаний по безопасной эксплуатации балло-
нов со сжатыми газами и по работе с приборами газовой хроматографии
под руководством опытного работника.
1.3. К временной (разовой) работе с хроматографами допускаются
студенты (сотрудники), прошедшие инструктаж и обученные для работы

78
с баллонами со сжатыми газами, ответственным за ОТ назначается пре-
подаватель (опытный работник лаборатории).
1.4. При работе с газохроматографическими приборами возможны
следующие источники опасности:
а) ток высокого напряжения;
б) горячие поверхности;
в) механические и электромеханические устройства с движущимися
частями;
г) загазованность помещения водородом и органическими вещества-
ми.
1.5. Помещение должно быть оборудовано и укомплектовано следу-
ющими первичными средствами пожаротушения:
– огнетушитель углекислотный ОУ-2 1 шт.
– асбестовое одеяло 1 шт.
– ящик с песком 1 шт.
1.6. В случае получения травмы, отравления и других аварийных си-
туаций пострадавший или очевидец должны поставить в известность
преподавателя (или непосредственного руководителя).
1.7. При обнаружении неисправности электрооборудования и в ава-
рийных ситуациях приборы должны быть обесточены. Продолжение ра-
бот на неисправном оборудовании запрещается.
1.8. О неисправности и принятых мерах студент (сотрудник) обязан
сообщить преподавателю (руководителю лаборатории)
1.9. Студент (сотрудник), работающий с приборами обязан:
– соблюдать требования технических инструкций по эксплуатации
приборов и требования охраны труда;
– следить за исправностью приборов и герметичностью подводящих
газовых линий;
– следить за чистотой и порядком на рабочем месте;
– соблюдать правила личной гигиены при выполнении работы;
– прекратить работу при неконтролируемом повышении температуры
в термостате, при повышении давления газов, при утечке водорода и т.д.

2.Требования охраны труда перед началом работы

2.1. Перед началом работы необходимо в обязательном порядке вклю-
чить вытяжную вентиляцию.
2.2. Работа выполняется в спецодежде (халат хлопчатобумажный
ГОСТ 12.4.131-83).

79
 2.3. Проверить целостность корпуса прибора, питающих шнуров, ви-
лок, розеток, исправность заземления.
2.4. Убрать ненужные для работы приборы, посуду. На рабочем месте
не должны находиться реактивы, не используемые в данной работе.
2.5. Подготовить исходные вещества, необходимые для работы, про-
верив соответствие квалификации веществ требованиям методики.

3. Требования охраны труда во время работы

3.1. В качестве газов-носителей в газовых хроматографах использо-
вать азот, гелий, аргон, а в пламенно-ионизационном – водород для зажи-
гания пламени горелки.
3.2. Не допускать утечки водорода в помещении, а сразу после пуска
водорода в газовую линию (включении генератора водорода) поджечь
горелки автоматически (система хроматографа) или в ручном режиме
используя программу «Хроматэк-Аналитик». Проверить горят ли горел-
ки, поднося зеркало к выходным отверстиям устройства детектора.
3.3. Запрещается проводить самостоятельно какие-либо ремонтные
работы, регулировку и осмотр внутренних блоков электроустановок, осо-
бенно во включенном состоянии.
3.4. Все работы в термостате хроматографа (замена колонок, прокла-
док и т.д.) проводить после отключения нагрева при температуре не вы-
ше 50°С во избежание ожогов о горячие поверхности.
3.5. Для промывки шприцов-дозаторов применять наименее токсич-
ные растворители: нормальные углеводороды, этиловый спирт, ацетон,
этилацетат. Промывку проводить в вытяжном шкафу.

4. Требования охраны труда по окончанию работы

4.1. Охладить термостат хроматографа.
4.2. Выключить хроматограф в соответствии с инструкцией по экс-
плуатации прибора.
4.3. Выключить все блоки прибора.
4.4. Отключить электропитание прибора.
4.5. По окончании работы перекрыть все газовые линии; закрыть вен-
тили на входе в прибор, при необходимости на газовых баллонах
4.6. Убрать рабочее место; промыть и просушить шприц-доз; тор,
убрать склянки с анализируемыми веществами и растворителями на от-
веденные места.

80
 5. Требования охраны труда при работе с баллонами
5.1. К работам по эксплуатации и хранению газовых баллонов допус-
каются лица не моложе 18 лет, прошедшие:
– обучение по охране труда, безопасным методам и приемам вы-
полнения работ, оказанию первой помощи при несчастных случаях на
производстве,
– вводный и первичный инструктаж по охране труда на рабочем месте,
– стажировку на рабочем месте и проверку знаний требований
охраны труда, безопасных методов и приемов выполнения работ;
– предварительные и периодические медицинские осмотры.
5.2. Перед началом работы работнику необходимо:
– проверить и убедиться в исправности измерительных приборов
на баллонах для газов, оборудования, приспособлений и инструмента,
ограждений, вентиляции;
– проверить устойчивость баллонов и правильность их закрепления
в ячейках;
– убедиться в отсутствии на рабочем месте пожароопасных мате-
риалов.
5.3. Работнику не следует приступать к работе при следующих нару-
шениях требований охраны труда:
– нарушении целостности газового баллона (наличии трещин или
вмятин), а также при отсутствии на баллоне с газом клейма с датой его
испытания;
– неисправности газового редуктора (неплотность примыкания
накидной гайки редуктора, повреждение корпуса редуктора и т.п.);
– неисправности манометра на редукторе (отсутствие клейма о
ежегодном испытании или несвоевременном проведении очередных ис-
пытаний, разбитом стекле или корпусе, неподвижности стрелки при по-
даче газа в редуктор, повреждениях корпуса);
– недостаточной освещенности рабочего места и подходовк нему;
– отсутствии вытяжной вентиляции при работе в закрытых поме-
щениях;
– наличии в зоне работы взрыво- и пожароопасныхматериалов;
– неисправности инструмента, оснастки,приспособлений.
5.4. Баллоны с газами следует хранить в одноэтажных складах с по-
крытиями легкого типа, оборудованных вентиляцией, без чердачных по-
мещений. Стены склада необходимо выполнять из негорючих материа-
лов; окна и двери должны открываться наружу. Высота складского по-

81
мещения должна быть не менее 3,25 м; освещение должно быть выпол-
нено во взрывозащищенном исполнении.
5.5. Полы в складском помещении необходимо выполнять из матери-
алов, исключающих искрообразование при ударе о них металлическими
предметами. Полы должны настилаться не ниже 0,1 м от уровня земли.
5.6. Ацетиленовые, кислородные баллоны и баллоны со сжиженным
газом необходимо хранить раздельно. Баллоны устанавливаются в верти-
кальном положении с навернутыми колпаками и заглушками на штуце-
рах вентилей.
5.7. Баллоны необходимо прочно закреплять хомутами или цепями и
защищать от попадания солнечных лучей и воздействия нагревательных
приборов и устройств.
5.8. Баллоны с газом, устанавливаемые в помещении, следует распо-
лагать на расстоянии не менее 1 м от радиатора отопления и не менее 5 м
от источника тепла с открытым огнем.
5.9. При устройстве экрана, предохраняющего баллоны от нагревания,
расстояние между баллоном и отопительным прибором может быть
уменьшено до 0,5 м. Расстояние между баллонами и предохранительным
экраном должно быть не менее 10 см.
5.10. При работе на открытой площадке в солнечный день следует
накрыть баллоны куском брезента.
5.11. Баллоны у стен зданий необходимо устанавливать на расстоянии
не менее 0,5 м от дверей и окон первого этажа и 3 м – от окон и дверей
цокольных и подвальных этажей, а также канализационных колодцев и
выгребных ям.
5.12. Не допускается размещение газовых баллонов у запасных (по-
жарных) выходов из помещений, со стороны главных фасадов зданий, в
проездах с интенсивным движением транспорта.
5.13. Хранить горючие материалы и производить работы, связанные с
применением открытого огня (кузнечные, сварочные, паяльные и др.), в
радиусе ближе 25 м от склада баллонов запрещается.
5.14. Запрещается эксплуатировать газовые баллоны, срок освиде-
тельствования которых истек, а также при наличии наружных поврежде-
ний (трещины, коррозия корпуса, заметные изменения формы и т.п.), не-
исправных вентилях, переходниках.
5.15. Выбракованные баллоны должны иметь надпись "Брак"; на резь-
бе таких баллонов должны быть нанесены насечки, исключающие даль-
нейшую эксплуатацию.

82
 5.16. Подогревать баллоны для повышения давления запрещается.
5.17. Перевозку наполненных газом баллонов необходимо произво-
дить на рессорном транспорте или автокарах в горизонтальном положе-
нии с обязательной установкой прокладок (деревянные бруски, резино-
вые или веревочные кольца и др.) между баллонами.
5.18. Совместная транспортировка кислородных баллонов и баллонов
с горючими газами как наполненных, так и пустых на всех видах транс-
порта запрещается, за исключением доставки двух баллонов на специ-
альной ручной тележке к рабочему месту.
5.19. Баллоны необходимо перемещать на специально предназначен-
ных для этого тележках, контейнерах и других устройствах, обеспечива-
ющих устойчивое положение баллонов. Переноска баллонов на руках
или плечах не допускается.
5.20. Транспортировку баллонов внутри помещения допускается про-
изводить путем кантования в слегка наклонном положении.
5.21. Необходимо надежно укрепить баллоны и установить их так, чтобы
исключалась всякая возможность ударов и падений на них предметов верху,
попадание на кислородный баллон, редуктор и шланги жиров и масел.
5.22. Снимать колпак баллона ударами молотка, зубила и другим ин-
струментом, который может вызвать искру, запрещается. Если колпак не
снимается, следует сменить баллон.
5.23. При эксплуатации баллонов запрещается выбирать полностью
находящийся в них газ. Остаточное давление газа в баллоне должно быть
не менее 0,05 МПа (0,5 кгс/см2).
5.24. При проведении сварочных работ присоединение кислородного
редуктора к баллону следует производить специальным ключом; подтя-
гивание накидной гайки редуктора при открытом вентиле баллона за-
прещается.
5.25. Во время работы на сварочном посту должно находиться одно-
временно не более двух баллонов - с кислородом и горючим газом.
5.26. Если давление в баллонах окажется выше допустимого, необхо-
димо кратковременным открыванием вентиля выпустить часть газа в ат-
мосферу или охладить баллон холодной водой в целях понижения давле-
ния. При выпуске газа из баллона или продувке вентиля или горелки ра-
ботнику необходимо находиться в стороне, противоположной направле-
нию выпуска газа.
5.27. Выпуск газов из баллонов в емкости с меньшим рабочим давлением
следует производить через редуктор, предназначенный для данного газа.

83
 5.28. При выполнении работ в зимнее время в случае замерзания вен-
тиля на баллоне отогревать его следует только горячей водой.
5.29. Работы необходимо остановить:
– если давление в сосуде поднялось выше допустимого;
– при выявлении неисправности предохранительных клапанов;
– при неисправности манометра;
– при возникновении пожара, непосредственно угрожающего сосу-
ду, находящемуся под давлением.
5.30. По окончании работы необходимо:
– привести в порядок рабочее место. Убедиться, что после работы
не осталось тлеющих предметов (ветоши, изоляционного материала и
т.д.), а при наличии тления - залить их водой;
– убрать газовые баллоны, шланги и другое оборудование в отве-
денные для них места. При этом необходимо убедиться, что вентили на
баллонах закрыты, а газ из шлангов выпущен.
Обо всех неисправностях, замеченных во время работы, сообщить
преподавателю (или непосредственному руководителю).

Дополнительные материалы при освоении курса

«Газовая хроматография»
Оценочные средства для текущего контроля успеваемости, промежуточ-
ной аттестации по итогам освоения дисциплины и учебно-методическое
обеспечение самостоятельной работы студентов

Примерная тематика рефератов:

1. Хроматографический анализ газов.
2. Ионообменная и ионная хроматография.
3. Хроматография неорганических веществ.
4. Высокоэффективная жидкостная хроматография.
5. Капиллярная газовая хроматография.
6. Применение масс – спектрометрии в хроматографии.
7. Применение газовой хроматографии для контроля технологи-
ческих процессов в промышленности.

Темы модулей для самостоятельной работы

Модуль 1. Предмет и основные понятия хроматографии.

84
 Модуль 2. Газовая хроматография приборное оформление
Модуль 3. Жидкостная хроматография приборное оформление
Модуль 4. Принципы физико-химического анализа газовой хро-
матографией.

Примеры типов заданий компетентностного, межпредметного характера

для текущего контроля на лабораторных и семинарских занятиях

Пример задания для промежуточного контроля за усвоением модуля

Вариант 1.
1. Варианты хроматографии, различающиеся по агрегатному состоя-
нию фаз.
2. Потоковые и концентрационные детекторы в газовой хроматогра-
фии.
3. Хроматограмма и хроматографические параметры.
Вариант 2.
1. Варианты хроматографии, различающиеся по характеру взаимо-
действия разделяемых соединений с неподвижной фазой.
2. Детекторы в жидкостной хроматографии (оптические, рефракто-
метрические, электрохимические).
3. Методы расчета хроматограмм при количественном определении
веществ (абсолютная калибровка, внутренний стандарт, внутренняя
нормализация, метод стандартной добавки).

Примеры тестовых заданий для быстрой проверки готовности

к выполнению лабораторной работы

правильных ответов в каждом задании их может быть больше 1.

Вариант 1

1. Закончите определение: время удерживания компонента в колонке — это время ….

… от начала ввода пробы до начала сигнала детектора.
… от момента ввода пробы до максимального выхода компонента из колонки.
… от начала сигнала детектора до выхода компонента из колонки.
… от момента ввода пробы до последнего максимального сигнала детектора.

2. Укажите метод, не относящийся к методам количественного определения?

Метод нормализации.
Метод внутреннего стандарта.
Применение веществ-тесторов.

85
 Метод абсолютной градуировки.

3. Закончите формулировку: эффективность хроматографической колонки характери-

зуют …
… относительная ширина пиков и число теоретических тарелок.
… материал, из которого изготовлена колонка и ее форма.
… диаметр и длина колонки.
… высота и ширина пиков.

4. Укажите параметр, по которому идентифицируют вещества в газовой хроматогра-

фии.
Температура кипения.
Площадь хроматографического пика.
Время удерживания.
Высота хроматографического пика.

Вариант 2

1. Закончите формулировку: детектор предназначен для …

… получения и регистрации аналитического сигнала.

… равномерного перемещения смеси в колонке.
… введения пробы в хроматограф.
… статистической обработки результатов.

2. Как измеряется время удерживания по хроматограмме?

От начала пика до его конца.

По расстоянию между пиками.
От момента ввода пробы до начала пика.
От момента ввода пробы до максимума пика.

3. Закончите формулировку: площадь хроматографического пика характеризует …

… качественный состав пробы.
… полноту разделения.
… количественное содержание компонентов в пробе.
… последовательность выхода компонентов из колонки.

4. Укажите основное требование, предъявляемое к неподвижной фазе в газовой хрома-

тографии.

Способность растворять определяемые вещества.

Инертность к определяемым веществам.
Небольшая вязкость.
Высокая селективность по отношению к определяемым веществам.

86
 Список литературы

а) Основная литература
1. Конюхов В.Ю. Хроматография. Санкт-Петербург : Лань, 2012. 224 с.
2. Яшин Я. И., Яшин Е. Я., Яшин А. Я. Газовая хроматография. Москва :
РосКонсульт, 2009. 528 с.
3. Беккер Ю. Хроматография. Инструментальная аналитика. Методы
хроматографии и капиллярного электрофореза. Москва : Техносфера,
2009. 472 с.
4. Хенке Х. Жидкостная хроматография. Москва : Техносфера, 2009.
264 с.
б) Дополнительная литература
1. Пецев Н., Коцев Н. Справочник по газовой хроматографии. Москва :
Мир, 1987. 261 с.
2. Руководство пользователя по подготовке и проведению анализа на
аппаратно-программном комплексе ''Хроматэк - Кристалл''. Атмо-
сферный воздух, воздух рабочей зоны, промышленные выбросы. Га-
зохроматографический метод определения предельных углеводоро-
дов С1-С10. Йошкар-Ола : Издательство ЗАО СКБ «Хроматэк», 2010.
354 с.
3. Gazes J., Scott R.P.W. Chromatography Theory. New York, 2002. 475 p.
4. Царев Н.И., Царев В.И., Катраков И.Б. Практическая газовая хрома-
тография. Барнаул : Издательство Алтайского государственного уни-
верситета, 2000. 156 с.
5. Белявская Т. А. Хроматография неорганических веществ. Москва :
Высшая школа:, 1986. 206 с.
6. Гольберт К.А., Вигдергауз М.С. Введение в газовую хроматографию.
Москва : Химия, 1990. 351 с.
в) Электронные ресурсы
1. Хроматография [Электронный ресурс] : интерактив. справочник. –
URL: http://chromatography.narod.ru/links/index.html (дата обращения
06.09.2016).
2. Библиотека ЗАО СКБ «Хроматэк» [Электронный ресурс] : интерак-
тив. справочник – URL: http://chromatec.ru/library/articles/ (дата обра-
щения 03.10.2016)
3. ЗАО СКБ «Хроматэк» [Электронный ресурс] : интерактив. витрина –
URL: http: http://chromatec.ru/products (дата обращения 03.10.2016)

87
 Издание подготовлено в авторской редакции

Отпечатано на участке цифровой печати

Издательского Дома Томского государственного университета

Заказ № 2101 от «4» октября 2016 г. Тираж 100 экз.

88