Репродукция вируса папилломы человека 16 генотипа и интеграция

вирусной ДНК в измененном цервикальном эпителии

В.А. ЕРШОВ1, А.А. ВЯЗОВАЯ2, Е.В. ИЛЬИНСКАЯ3, А.С. ЛИСЯНСКАЯ1, Д.А. КУЕВДА4, О.Б. ТРОФИМОВА4,
О.Ю. ШИПУЛИНА4, О.В. НАРВСКАЯ2

1
СПб ГУЗ «Городской клинический онкологический диспансер» (гл. врач — д-р мед. наук Г.М. Манихас), 2ФГУН «Санкт-
Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера» (дир. — член-корр. РАМН
А.Б. Жебрун) Роспотребнадзора, 3ФГБУ «Научно-исследовательский институт гриппа» (дир. — акад. РАМН О.И. Киселев)
Минздрава РФ, Санкт-Петербург; 4ФГУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» (дир. — акад. РАМН
В.И. Покровский) Роспотребнадзора, Москва

Human papillomavirus genotype 16 reproduction and viral DNA integration in the altered cervical
epithelium
V.A. ERSHOV1, A.A. VYAZOVAYA2, E.V. ILYINSKAYA3, A.S. LISYANSKAYA1, D.A. KUEVDA4, O.B. TROFIMOVA4,
O.YU. SHIPULINA4, O.V. NARVSKAYA2

1
Municipal Clinical Oncology Dispensary, Saint Petersburg; 2Saint Petersburg Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology,
Russian Inspectorate for the Protection of Consumer Rights and Human Welfare, Saint Petersburg; 3Research Institute of Influenza, Ministry
of Health of Russia, Saint Petersburg; 4Central Research Institute of Epidemiology, Russian Inspectorate for the Protection of Consumer
Rights and Human Welfare, Moscow

Исследованы 57 цервикальных биоптатов эпителиальных неоплазий и смежных с ними участков цитологическим, ги-
стологическим, иммуноморфологическим, электронно-микроскопическим методами и методом полимеразной цепной
реакции. При нарастании тяжести повреждения цервикального эпителия снижалась встречаемость эписомной и низкой
степени интегрированной форм генотипа ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) 16 и экспрессии капсидного белка L1.
Степень интеграции генотипа ДНК ВПЧ 16 более 33% обнаружена только в случаях высокой степени интраэпителиаль-
ного повреждения плоского эпителия и плоскоклеточного рака. Экспрессию капсидного белка L1 наблюдали у женщин с
псевдоэрозией шейки матки и слабой формой дисплазии в дифференцированных клетках плоского и метаплазирован-
ного цервикального эпителия. Продукция капсидного белка L1 ВПЧ 16 атипичными клетками выявлена в 2,3% случаев
HSIL. В остальных случаях HSIL и в случаях плоскоклеточного рака белок L1 продуцировали клетки плоского и метапла-
зированного эпителия смежных с CIN участков и в паратуморальной зоне.
Ключевые слова: капсидный белок L1 вируса папилломы человека 16, экспрессия, шейка матки.

Fifty-seven from human papillomavirus (HPV)-positive cervical epithelial neoplasias and their adjacent sites were studied using
cytology, histology, immunomorphology, electron microscopy, and polymerase chain reaction. The occurrence of episomal
and low-grade integrated forms of HPV 16 DNA and the expression of its L1 capsid protein decreased with the higher grade
of cervical epithelial lesion. More than 33% integration of HPV 16 DNA was found only in cases of high-grade intraepithelial
squamous epithelial lesion (HISEL) and squamous cell carcinoma (SCC). HPV 16 L1 capsid protein production by atypical cells
was detected in 2.3% of HISEL cases. L1 protein was produced by the cells of the squamous and metaplastic epithelium adjacent
to the CIN sites and in the paratumoral zone in the other cases of HISEL and in cases of SCC.
Key words: HPV 16 L1 capsid protein, expression, cervix uteri.

После проникновения в базальную клетку много-
слойного плоского (МПЭ) или резервногенного эпителия
освободившаяся от капсида ДНК вируса папилломы че-
ловека высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР) по-
ступает в ядро, где поддерживается в виде эписомы.
В жизненном цикле папилломавируса важнейшую
роль играет «ранний» вирусный белок Е2, который регу-
лирует репликацию вирусного генома, его сегрегацию в
ходе митоза и процессы транскрипции онкогенов E6 и E7
[1—3]. Процессы репродукции ВПЧ или интегрирования
© Коллектив авторов, 2013
вирусной ДНК в клеточные хромосомы с формированием
цервикальной неоплазии происходят только в делящихся
клетках [4].
Встраивание ВПЧ в клеточный геном сопровождается
снижением функциональной активности вирусного бел-
ка Е2, приводящей к повышенной экспрессии вирусных
белков Е6 и Е7 [5—8]. Морфологическими признаками
этого процесса принято считать изменения, характерные
для низкой (LSIL) и высокой (HSIL) степеней интраэпи-
Ершов Владимир Анатольевич — канд. мед. наук, врач патолого-
анатомического отд-ния; 198255 Санкт-Петербург, пр. Ветера-
нов, д. 56; e-mail: goronkod@zdrav.spb.ru

ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013 21

 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
телиального повреждения плоского эпителия с возмож-
ным последующим озлокачествлением.
Признаками репликации и транскрипции вирус-
ной ДНК с последующим формированием вирусных
частиц служат наличие в цервикальном эпителии кап-
сидного белка L1 и выявление вирионов при электрон-
ной микроскопии. Отмечено, что связанные с ВПЧ ВКР
L1-отрицательные слабые и умеренные диспластические
поражения цервикального эпителия в 4 раза чаще про-
грессируют в рак, чем L1-положительные неоплазии. Ре-
зультаты этих наблюдений предлагаются к практическому
использованию в качестве прогностического фактора раз-
вития неоплазии [9, 10], хотя существует и противополож-
ная точка зрения [11].
Целью настоящего исследования являлось изучение
репродукции генотипа ВПЧ 16 и интеграции вирусной
ДНК в цервикальном эпителии.
Проведен анализ результатов цитологического, имму-
ноцитохимического, гистологического, иммуногистохи-
мического, электронно-микроскопического и молекуляр-
но-генетического методов исследования эпителия шейки
матки у 57 ВПЧ-инфицированных женщин в возрасте 22—
61 года, находившихся на лечении по поводу цервикальной
интраэпителиальной неоплазии в Санкт-Петербургском
ГУЗ «Городской клинический онкологический диспан-
сер» с октября 2010 г. по май 2011 г. включительно.
Материал соскобов с влагалищной части шейки мат-
ки и из цервикального канала для цитологического ис-
следования в течение 10 мин распределяли на предметные
стекла с помощью центрифуги Rotofix 32A при скорости
6000 об/мин, фиксировали в течение 5 мин в 95% растворе
этилового спирта и окрашивали по методу Папаниколау.
Для гистологического исследования использовали
материал, полученный при электроэксцизии шейки мат-
ки, который фиксировали в 10% растворе формалина,
обезвоживали в этиловых спиртах восходящей концен-
трации, заливали в парафиновые блоки, с помощью ми-
кротома готовили срезы толщиной 5—6 мкм, окрашивали
гематоксилином и эозином.
Для ультраструктурного исследования использовали
материал, полученный при электроэксцизии шейки мат-
ки у больной с тяжелой формой дисплазии. Кусочки ткани
измельчали до 1 мм3, фиксировали в 2,5% растворе глюта-
ральдегида на 0,1 М какодилатном буфере и в 1% раство-
ре четырехокиси осмия на том же буфере, обезвоживали
в серии этиловых спиртов восходящей концентрации и
заключали в смесь смол эпона и аралдита. Ультратонкие
срезы изготавливали на ультратоме LKB-100 (Швеция) и
анализировали в просвечивающем электронном микро-
скопе JEM-1011 (Япония).
В 34 случаях проводили иммуноцитохимическое и
в 23 — иммуногистохимическое исследования с исполь-
зованием системы детекции Ultra Vision LP Detection
System HRP Polymer & Dab Plus Chromogen (TL-015-HD)
производства фирмы «Thermo Scientific» для «Lab Vision
Corporation» (США) и моноклональных антител (разведе-
ние 1:100) к капсидному протеину L1 ВПЧ 16 (CAMVIR-1,
Mob 394) производства «DBS». Полученные результаты
оценивали в цитологических или гистологических пре-
паратах полуколичественным способом среди всех ати-
пичных клеток, характерных для интраэпителиальной
неоплазии, в смежных с ними клетках МПЭ и метаплази-
рованных резервных клетках, а также во всех опухолевых
22
клетках морфологического препарата и клетках паратумо-
ральной зоны.
Заключения результатов цитологических исследо-
ваний формулировали в соответствии с классифика-
цией «The Bethesda System for reporting cervical cytologic
diagnoses» [12], гистологических исследований — в соот-
ветствии с последней редакцией гистологической класси-
фикации ВОЗ [13].
Выявление и генотипирование ДНК ВПЧ в соско-
бе цервикального канала проводили методом мульти-
плексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режи-
ме реального времени на приборе Rotor Gene («Corbett
Research», Австралия) с использованием комплектов ре-
агентов ФГУН ЦНИИЭ.
Физический статус генотипа ДНК ВПЧ 16 оценивали
по соотношению количества вирусных генов Е2/Е7 с уче-
том стандартного отклонения и коэффициента вариации
[14—16]. При эписомной форме это соотношение счита-
ли равным 1, при 100% интеграции — 0, при смешанной
(эписомная + интегрированная) форме — от 0 до 1.
Расчет степени интеграции ДНК ВПЧ 16 осуществля-
ли по формуле:
(1 – Е2/Е7) ×100%,
где Е2 — число копий гена Е2, Е7 — число копий гена
Е7.
Степень интеграции ДНК ВПЧ 16 определяли как
низкую (от 1 до 33%), умеренную (от 34 до 66%), выра-
женную (от 67 до 99%), полную (100%).
Достоверность различий полученных результатов
оценивали на основании критерия Фишера с уровнем
значимости p<0,05.
В результате морфологического исследования опера-
ционного материала у 3 женщин 32—50 лет верифициро-
вана псевдоэрозия шейки матки, у 54 на ее фоне выявлены
изменения МПЭ. Из них у 4 женщин 22—46 лет диагно-
стирована слабая (CINI, LSIL), у 12 больных 25—54 лет —
умеренная (CINII, HSIL), у 24 пациенток 22—60 лет — тя-
желая форма дисплазии (CINIII, HSIL). У 6 женщин 29—61
года верифицирован интраэпителиальный рак (CINIII,
carcinoma in situ, HSIL), у 8 пациенток 27—48 лет — плоско-
клеточный рак шейки матки (SCC).
Среди женщин 40—49 лет слабая форма дисплазии
выявлена у 2 (50%), интраэпителиальный рак диагности-
рован у 2 (33,33%) и плоскоклеточный рак — у 4 (50%).
Среди пациенток 30—39 лет выявлена умеренная диспла-
зия у 5 (41,67%) и тяжелая — у 10 (41,67%).
ВПЧ 16 обнаружен в 40 (70,18%) случаях, его соче-
тания с папилломавирусами филогенетической группы
(ФГГ) α9 — в 14 (24,46%), с ФГГ α9 и ФГГ α7 — в 1 (1,75%)
и с ФГГ α7 — в 2 (3,51%) случаях.
По результатам ПЦР эписомная форма вирусной
ДНК (степень интеграции 0) выявлена у 9 (15,79%) па-
циенток. Низкая степень интеграции обнаружена у 30
(52,63%), умеренная — у 10 (17,54%), выраженная — у 3
(5,27%), полная — у 5 (8,77%) пациенток соответственно
(см. таблицу).
Капсидный белок L1 выявлен во всех наблюдениях
псевдоэрозии шейки матки (см. таблицу). У женщин с
эписомной формой ДНК ВПЧ экспрессию L1 наблюда-
ли только в ядрах [17] поверхностных (рис. 1, а) и приле-
жащих к ним промежуточных (см. рис. 1, б) клеток МПЭ,
что характерно для продуктивного типа жизненного цик-
ла папилломавируса [18, 19]. В этих же случаях белок L1
ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013
Экспрессия капсидного белка L1 и физический статус ДНК ВПЧ 16 в измененном цервикальном эпителии
Степень интеграции ДНК ВПЧ, %
Морфологическая структура L1 Итого
0 1—33 34—66 67—99 100
Псевдоэрозия шейки матки + 2 1 3
– 3
Слабая дисплазия (LSIL, CINI) + 1 2 3
– 1 1 4
Умеренная дисплазия (HSIL, CINII) + 4 2 1 1 8
– 3 1 4 12
Тяжелая дисплазия (HSIL, CINIII) + 1 8 2 1 2 14
– 3 4 2 1 10 24
Carcinoma in situ (HSIL, CINIII) + 1 2 3
– 1 1 1 3 6
Плоскоклеточный рак (SCC) + 2 1 3
– 1 3 1 5 8
Всего 9 30 10 3 5 57

Примечание. + — положительная реакция на антитела к L1; – — отсутствие экспрессии L1.

выявлен и в просвете дистального отдела цервикального При электронно-микроскопическом исследовании

канала, что иллюстрирует элиминацию вируса из кле-
ток. У больной с низкой степенью интеграции вирусной
ДНК капсидный белок обнаружен в ядрах парабазальных
клеток.
В случаях низкой степени интраэпителиального по-
вреждения плоского эпителия экспрессия L1 отмечена в
3 (75%) наблюдениях (см. таблицу), что в 1,5 раза превы-
сило частоту выявления белка L1 в случаях LSIL в других
исследованиях [9, 20]. Независимо от физического статуса
генотипа ДНК ВПЧ 16 вирусные частицы, выявляемые с
помощью антител к белку L1, обнаружены лишь в просве-
те цервикального канала, что считают признаком продук-
тивной формы папилломавирусной инфекции.
Капсидный белок L1 обнаружили в 8 (66,67%) слу-
чаях умеренной дисплазии (см. таблицу). Его экспрессию
наблюдали у 1 (8,33%) пациентки с умеренной степенью
интеграции ДНК ВПЧ 16 в ядрах клеток, характерных
для HSIL (см. рис. 1, в), что отмечали и другие исследо-
ватели [9], и у 7 (58,33%) женщин в смежных с очагом
CINII участках эпителия. Из них в 1 случае низкой степе-
ни интеграции вирусной ДНК белок L1 выявлен в ядрах
поверхностных клеток плоского эпителия, в 3 случаях
низкой степени и в 1 полной интеграции ДНК ВПЧ —
в метаплазированных резервных клетках (см. рис. 1, г).
В 1 наблюдении с умеренной степенью и в 1 с выраженной
степенью интеграции ДНК ВПЧ 16 капсидный белок L1
присутствовал только в просвете дистального отдела цер-
викального канала.
В 14 (58,33%) случаях тяжелой дисплазии (см. табли-
цу) экспрессию L1 наблюдали в участках эпителия, смеж-
ных с очагом CINIII. Из них у 1 пациентки с эписомной
формой вирусной ДНК и у 6 — с разными степенями ее
интеграции экспрессия L1 выявлена в ядрах поверхност-
ных и прилежащих к ним промежуточных клеток. Не-
зависимо от степени интеграции ДНК ВПЧ в 3 случаях
капсидный белок выявлен в ядрах базальных (см. рис. 1, д)
и парабазальных (см. рис. 1, е) клеток, в одном — в ядрах
метаплазированных резервных клеток. У 3 пациенток бе-
лок L1 обнаружен в просвете эндоцервикальных желез
участка регенерации пораженного МПЭ, а также в про-
свете дистального отдела цервикального канала и внутри
обнаруженных там же сегментоядерных лейкоцитов.
случая тяжелой дисплазии наблюдали эпителиоциты как
вытянутой, так и округлой формы, в которых форма ядер
повторяла форму клетки. В ядрах, заполненных крупны-
ми глыбками гетерохроматина, и в околоядерной зоне
цитоплазмы, содержащей тонофиламенты и большое
количество свободных рибосом, а также немногочислен-
ные короткие цистерны гладкого и шероховатого эндо-
плазматического ретикулума, обнаружены вирусоподоб-
ные частицы сферической формы размером около 50 нм
(рис. 2), что соответствует размеру частиц ВПЧ [21] и
свидетельствует о репликации и транскрипции вирус-
ной ДНК [21—23]. Кроме того, за пределами некоторых
из этих клеток также обнаружили подобные частицы. Во
многих из них различима электронно-темная централь-
ная часть, что считается признаком зрелого вириона [21].
Некоторые вирусоподобные частицы, расположенные
внутри- и внеклеточно, имели равномерную электрон-
ную плотность по всей площади, свидетельствующую об
отсутствии ДНК вируса внутри капсида. Независимо от
локализации вирусные частицы располагались раздельно
или образовывали аморфные скопления без формирова-
ния кристаллических фигур, что отмечено и другими ис-
следователями [23, 24].
Во всех L1-положительных случаях интраэпителиаль-
ного рака (50%) независимо от степени интеграции ВПЧ
(см. таблицу) экспрессия белка L1 обнаружена в ядрах по-
верхностных и прилежащих к ним промежуточных клеток
паратуморальной зоны, что согласуется с данными лите-
ратуры о наличии папилломавирусов в эпителии вокруг
carcinoma in situ [7]. В одном из этих наблюдений белок L1
также выявлен в пласте метаплазированного резервного
эпителия, перекрывающего выводной проток эндоцерви-
кальной железы.
В нашем исследовании частота выявления L1 в ати-
пичных клетках HSIL (2,38%) была в 6—10 раз ниже при-
водимой в литературе [9, 20]. Капсидный белок в смежных
с очагами CINII и CINIII участках отмечен в половине
всех наблюдений, что в 1,5 раза реже частоты выявления
папилломавирусов вокруг интраэпителиальной неопла-
зии в наблюдениях других авторов [7].
Положительная реакция на антитела к белку L1 опре-
делена у 3 (37,50%) больных плоскоклеточным раком

ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013 23

 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

а б

д е ж

Рис. 1. Капсидный белок генотипа L1 ВПЧ 16 в цервикальном эпителии. Иммунопероксидазное окрашивание.

а — внутриядерная экспрессия L1 в поверхностной клетке МПЭ в цитологическом препарате псевдоэрозии шейки матки. ×600;
б — внутриядерная экспрессия L1 в промежуточной клетке МПЭ в цитологическом препарате псевдоэрозии шейки матки. ×600;
в — внутриядерная экспрессия L1 в атипичных клетках в гистологическом препарате умеренной дисплазии шейки матки. ×400;
г — экспрессия L1 в метаплазированном эпителии в цитологическом препарате умеренной дисплазии шейки матки. ×400;
д — внутриядерная экспрессия L1 в базальных клетках МПЭ в гистологическом препарате тяжелой дисплазии шейки матки. ×1000;
е — внутриядерная экспрессия L1 в парабазальных клетках МПЭ в цитологическом препарате тяжелой дисплазии шейки матки. ×1000;
ж — внеклеточные скопления L1 и их фагоцитоз лейкоцитами в просвете цервикального канала в гистологическом препарате пло-
скоклеточного рака шейки матки. ×100.

24 ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013


Рис. 2. Электронограмма клетки цервикального эпителия.
Частицы ВПЧ указаны стрелками. ЭК — эпителиальная клетка;
Я — ядро.
шейки матки (см. таблицу). У 1 больной с полностью ин-
тегрированной формой ДНК ВПЧ экспрессия L1 обна-
ружена в атипичных клетках типа клеток парабазального
и базального слоев МПЭ участка паратуморальной зоны
с характерными для слабой дисплазии изменениями и
в просвете цервикального канала. У 2 больных с низкой
степенью интеграции вирусной ДНК капсидный белок
наблюдали в метаплазированном резервном эпителии па-
ратуморальной зоны и в просвете дистального отдела цер-
ЛИТЕРАТУРА
1. Mole S., McFarlane M., Chuen-Im T., Milligan S.G., Millan D.,
Graham S.V. RNA splicing factors regulated by HPV16 during cer-
vical tumour progression. J. Pathol. 2009; 219 (3): 383—91.
2. Ramírez-Salazar E., Centeno F., Nieto K., Valencia-Hernández A.,
Salcedo M., Garrido E. HPV16 E2 could act as down-regulator in
cellular genes implicated in apoptosis,proliferation and cell differ-
entiation. Virol. J. 2011; 20 (8): 247.
3. Xue Y., Bellanger S., Zhang W., Lim D., Low J., Lunny D., Thi-
erry F. HPV16 E2 is an immediate early marker of viral infection,
preceding E7 expression in precursor structures of cervical carci-
noma. Cancer Res. 2010; 70 (13): 5316—25.
4. Pyeon D., Pearce S.M., Lank S.M., Ahlquist P., Lambert P.F. Es-
tablishment of human papillomavirus infection requires cell cycle
progression. PloS. Pathog. 2009; 5 (2): e1000318.
ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013
викального канала (см. рис. 1, ж). Отсутствие экспрессии
капсидного белка L1 в клетках плоскоклеточного рака в
наших исследованиях не противоречит наблюдениям дру-
гих авторов [20]. При этом частота обнаружения вирус-
ных частиц в клетках паратуморальной зоны была в 2 раза
ниже таковой в других наблюдениях [7].
Наблюдаемые в гистологических и цитологических
препаратах морфологические критерии поражения ВПЧ
16 атипичных клеток и окружающих их клеток в препа-
ратах LSIL, HSIL и SCC [13, 25] не позволили отличить
L1-отрицательные от L1-положительных случаев без ис-
пользования иммуноморфологических маркеров.
Полученные нами результаты о разнообразии форм
существования ДНК ВПЧ 16 (см. таблицу) при CIN и SCC
не противоречат наблюдениям других авторов [26, 27].
Вместе с тем при прогрессировании повреждения
цервикального эпителия отмечено снижение выявляемо-
сти ДНК ВПЧ 16 в эписомной и низко интегрированной
формах — с 25% при LSIL до 12,5% при SCC и с 75% при
LSIL до 33,3% при carcinoma in situ соответственно. Чис-
ло случаев с умеренной степенью интеграции вирусной
ДНК, наоборот, возрастало с 25% при CINII до 50% при
carcinoma in situ. Показатели встречаемости ДНК ВПЧ с
выраженной и полной интеграцией также повышались с
8,3% при CINII до 12,5% при SCC.
Выводы
1. При нарастании тяжести повреждения цервикаль-
ного эпителия снижается встречаемость эписомной и
низкой степени интегрированной форм генотипа ДНК
ВПЧ 16 и выявляемость его капсидного белка L1.
2. Степень интеграции генотипа ДНК ВПЧ 16 более
33% обнаружена только в случаях высокой степени интра-
эпителиального повреждения плоского эпителия и пло-
скоклеточного рака.
3. Экспрессию капсидного белка L1 ВПЧ 16 наблюда-
ли у женщин с псевдоэрозией шейки матки и слабой фор-
мой дисплазии только в дифференцированных клетках
плоского и метаплазированного цервикального эпителия.
4. Продукция капсидного белка L1 ВПЧ 16 атипичны-
ми клетками выявлена в 2,3% случаев HSIL. В остальных
случаях HSIL и плоскоклеточного рака белок L1 экспрес-
сировали клетки плоского и метаплазированного эпите-
лия смежных с CIN участков и паратуморальных зон.
5. Вязовая А.А., Куевда Д.А., Трофимова О.Б., Ершов В.А., Нарв-
ская О.В. Интеграция ДНК вируса папилломы человека 16
генотипа в геном клеток цервикального эпителия при фо-
новых процессах и неоплазии шейки матки. В кн.: Папил-
ломавирусная инфекция и рак. Интегрированная система
надзора и профилактики. Материалы II симпозиума с меж-
дународным участием. СПб.: НИИЭМ им. Пастера; 2011:
12—4.
6. Киселева В.И., Крикунова Л.И., Любина Л.В., Безяева Г.П.,
Панарина Л.В., Куевда Д.А. и др. Интеграция ДНК ВПЧ-16 в
клеточный геном и прогноз рака шейки матки. В кн.: Моле-
кулярная диагностика — 2010: Сборник трудов VII Всерос-
сийской научно-практической конференции с международ-
ным участием. М.; 2010; т. 3: 371—3.
25
 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
7. Badaracco G., Venuti A. Physical status of HPV types 16 and 18
in topographically different areas of genital tumours and in paired
tumour-free mucosa. Int. J. Oncol. 2005; 27 (1): 161—7.
8. Doorbar J. The papillomavirus life cycle. J. Clin. Virol. 2005; 32
(Suppl. 1): 7—15.
9. Griesser H., Sander H., Walczak C., Hilfrich R.A. HPV vaccine
protein L1 predicts disease outcome of high-risk HPV+ early
squamous dysplastic lesions. Am. J. Clin. Pathol. 2009; 132 (6):
840—5.
10. Stemberger-Papić S., Vrdoljak-Mozetic D., Ostojić D.V., Rubesa-
Mihaliyevic R., Manestar M. Evaluation of the HPV L1 capsid
protein in prognosis of mild and moderate dysplasia of the cervix
uteri. Coll. Anthropol. 2010; 34 (2): 419—23.
11. Kösel S., Burggraf S., Engelhardt W., Olgemöller B. Correlation
of HPV16 L1 capsid protein expression in cervical dysplasia with
HPV16 DNA concentration, HPV16 E6*I mRNA and histologic
outcome. Acta Cytol. 2009; 53 (4): 396—401.
12. Apgar B.S., Zoschnick L., Wright T.C. Jr. The 2001 Bethesda sys-
tem terminology. Am. Fam. Physician. 2003; 68 (15): 1992—8.
13. In: Tavassoli F.A., Devilee P., eds. Pathology and genetics of tu-
mours of the breast and female genital organs. WHO classification
of tumours. Lyon: IARC Press; 2003. 432 p.
14. Куевда Д.А., Ермакова Н.В., Шипулина О.Ю., Минкина Г.Н.,
Киселева В.И., Шинкаркина А.П. Высокая вирусная нагруз-
ка и интеграция ВПЧ в геном человека как молекулярные
маркеры диспластических изменений шейки матки. В кн.:
Покровский В.И., ред. Генодиагностика инфекционных бо-
лезней — 2007: Сборник трудов. М.: Университетская книга;
Паис; 2007; т. 3: 430.
15. Andersson S., Safari H., Mints M., Lewensohn-Fuchs I., Gyllensten
U., Johansson B. Type distribution, viral load and integration sta-
tus of high-risk human papillomaviruses in pre-stages of cervical
cancer (CIN). Br. J. Cancer. 2005; 92: 2195—200.
16. Jiang M., Baseman J., Koutsky L., Feng Q., Mao C., Kiviat N., Fu
L. Sequence variation of human papillomavirus type 16 and mea-
surement of viral integration by quantitative PCR. J. Clin. Micro-
biol. 2009; 47 (3): 521—6.
26
17. McMurray H.R., Nguyen D., Westbrook T.F., Mcance D.J. Biology
of human papillomavirus. Int. J. Pathol. 2001; 82: 13—33.
18. Cumming S.A., Cheun-Im T., Milligan S.G., Graham S.V. Human
papillomavirus type 16 late gene expression is regulated by cellular
RNA processing factors in response to epithelial differentiation.
Biochem. Soc. Trans. 2008; 36 (3): 522—4.
19. Kukimoto I., Mori S., Sato H., Takeuchi T., Kanda T. Transcription
factor human Skn-1a enhances replication of human papilloma-
virus DNA through the direct binding to two sites near the viral
replication origin. FEBS J. 2008; 275 (12): 3123—35.
20. Ungureanu C., Socolov D., Anton G., Mihailovici M.S., Teleman S.
Immunocytochemical expression of p16INK4a and HPV L1 capsid
proteins as predictive markers of the cervical lesions progression
risk. Rom. J. Morphol. Embryol. 2010; 51 (3): 497—503.
21. Karageosov I., Dimova R., Makaveeva V. Electron microscopic de-
tection of viruses in cervix papilloma. Zentralbl. Gynäkol. 1985;
107 (3): 187—91.
22. Multhaupt H.A., Rafferty P.A., Warhol M.J. Ultrastructural local-
ization of human papilloma virus by nonradioactive in situ hybrid-
ization on tissue of human cervical intraepithelial neoplasia. Lab.
Invest. 1992; 67 (4): 512—8.
23. Sato S., Chiba H., Shikano K. Ultrastructural observationof hu-
man papillomavirus particles in the uterine cervix intraepithelial
neoplasia. Gan No Rinsho. 1988; 34 (8): 993—1000.
24. Wang H.-K., Duffy A.A., Broker T.R., Chow L.T. Robust produc-
tion and passaging of infectious HPV in sguamous epithelium of
primary human keratinocytes. Genes Dev. 2009; 23: 181—94.
25. Ершов В.А., Нарвская О.В. Фоновые процессы и неоплазия
эпителия шейки матки. СПб.: Человек; 2007. 80 с.
26. Badaracco G., Venuti A., Sedati A., Mareante M.L. HPV 16 and
HPV 18 in genital tumors: significantly different levels of viral inte-
gration and correlation to tumor invasiveness. J. Med. Virol. 2002;
67: 574—82.
27. Pirami L., Giache V., Becciolini A. Analysis of HPV 16, 18, 31 and
35 DNA in preinvasive and invasive lesions of the uterine cervix. J.
Clin. Pathol. 1997; 50: 600—4.
Поступила 06.12.2011
ОНКОЛОГИЯ. ЖУРНАЛ им. П.А. ГЕРЦЕНА, 1, 2013