Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
PRESENTACION
Fibrinógeno
REF 3510301 Fibrinogen 5 x 2 mL METODO DE CLAUSS
Determinación del tiempo de Fibrinógeno
Sólo para uso diagnóstico in vitro
FUNDAMENTO
El método de Clauss mide el índice de conversión del fibrinógeno − Respetar la proporción de 9 partes de sangre y 1 parte de citrato.
en fibrina en presencia de un exceso de trombina, este método ha Variaciones en esta relación pueden afectar el resultado de las
demostrado ser una prueba rápida, sensible y exacta. pruebas. No deben usarse conectores o catéteres heparinizados.
Cuando el plasma diluido se coagula por exceso de trombina, el Se recomienda que las pruebas de coagulación se realicen con
nivel el fibrinógeno es inversamente proporcional al tiempo de muestras procedentes de la segunda o tercera extracción.
coagulación.
2. Preparación del Plasma
− Mezclar bien por inversión y centrifugar 15 minutos a 2.500 x g,
COMPOSICION DE LOS REACTIVOS lo antes posible tras la extracción. Transferir el plasma a un tubo
de plástico, a menos que las muestras vayan a ser analizadas
Fibrinogen Trombina bovina liofilizada ≈100 NIH U/mL en inmediatamente. Plasmas hemolizados o con más de 10,000
tampón, estabilizantes y conservantes. plaquetas por mL, no deben usarse en pruebas de coagulación.
QUALITY SYSTEM CERTIFIED LINEAR CHEMICALS S.L. Joaquim Costa 18 2ª planta. 08390 Montgat, Barcelona, SPAIN
ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990 Fax. (+34) 934 693 435. website www.linear.es
2. Preparar una dilución 1:10 de la muestra de plasma o plasma NOTAS
control con Tampón de Imidazol (p.e. 25 μL + 225 μL).
3. Pipetear 100 μL de plasma diluido en una cubeta de pruebas. 1. Si el tiempo de coagulación de la dilución 1:10 del plasma
o
4. Incubar el plasma a 37 C durante 2 minutos. excede al tiempo de coagulación del ultimo punto de la curva de
5. Adicionar 50 μL del reactivo precalentado. Simultáneamente calibración, hacer una dilución 1:5 de plasma y repetir la prueba.
poner en marcha el cronómetro del instrumento. Multiplicar el resultado obtenido por 5 en lugar de 10 para tener
6. Registrar el tiempo de coagulación. en cuenta el factor de dilución. Así obtendremos la
concentración final del plasma del paciente sin diluir.
Para técnicas semi-automáticas, seguir las instrucciones de uso de 2. Si el tiempo de coagulación de la dilución 1:10 del plasma es
los instrumentos empleados. inferior al tiempo de coagulación del ultimo punto de la curva de
calibración, hacer una dilución 1:20 de plasma y repetir la
CALCULOS prueba. Multiplicar el resultado obtenido por 20 en lugar de 10
para tener en cuenta el factor de dilución. Así obtendremos la
Calcular el tiempo de coagulación promedio de los duplicados de concentración final del plasma del paciente sin diluir.
las muestras y controles. La diferencia entre duplicados debe ser
inferior al 5%. Repetir la prueba si es superior.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
El Tiempo de Fibrinógeno puede ser expresado en g/L, a partir de
la extrapolación en curva de calibración. − La dilución inferior recomendada es de 1:3. Las muestras de
Calibración de Fibrinógeno: Recomendamos usar la CURVA plasma no deben ser analizadas sin dilución previa, ya que las
MASTER incluida en el kit. sustancias interferentes e inhibidoras pueden afectar la
Muestras con tiempo de fibrinógeno <1 g/L deben diluirse 1:5 y exactitud de los resultados. La heparina a niveles terapéuticos
repetir el ensayo. de hasta 3,0 U/mL no afecta los resultados obtenidos. La
muestra del paciente sin diluir da unos resultados aproximados
de 5 U/mL. Los productos de la degradación de la Fibrina (FDP)
VALORES DE REFERENCIA pueden inhibir la acción de la trombina en la polimerización del
fibrinógeno y de la fibrina. En muestras con los niveles normales
Rango normal: 2-4 g/L. el fibrinógeno, el FDP tiene efectos mínimos. Sin embargo, en
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada muestras con concentraciones de fibrinógeno por debajo de 150
laboratorio establezca sus propios valores de referencia. mg/dl y concentraciones de FDP superiores a 100 μg/mL, el
ensayo puede ser cada vez más inhibido. La dilución adicional
CONTROL DE CALIDAD del plasma de la prueba reducirá esta interferencia.
QUALITY SYSTEM CERTIFIED LINEAR CHEMICALS S.L. Joaquim Costa 18 2ª planta. 08390 Montgat, Barcelona, SPAIN
ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990 Fax. (+34) 934 693 435. website www.linear.es
Fibrinogen
MASTER CURVE
LOT Nº 35021
g/L SEC.
4 7.9
3 10.5
2 15.6
1 30.7
QUALITY SYSTEM CERTIFIED LINEAR CHEMICALS S.L. Joaquim Costa 18 2ª planta. 08390 Montgat, Barcelona, SPAIN
ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990 Fax. (+34) 934 693 435. website www.linear.es