Вы находитесь на странице: 1из 92

1.

Основные представления о биологической активности и скрининге


ксенобиотиков. Виды и примеры скрининга. Факторы, определяющие разнообразие
проявления биологической активности ксенобиотиков.
Биологическая активность ксенобиотика - его способность изменять
функциональные возможности либо компонентов организма, либо живого организма в
целом, либо сообщества организмов. Ксенобиотики, попавшие в клетку, могут проявить
биологическую активность под влиянием дополнительных физических или химических
факторов среды.
Факторы, обуславливающие разнообразие видов биологической активности
ксенобиотиков:
1) множество биологических объектов, их состояния и протекающие в них реакции
(индивидуальная реакция на ксенобиотик);
2) способы попадания в организм (доза, физическая форма вещества, временной
режим введения, место введения и т.д.);
3) наличие или отсутствие дополнительных воздействий. Одновременное действие
нескольких ксенобиотиков.
4) способ, время наблюдения, принцип подбора биообъекта, анализ информации и
т.д.
Скрининг - проверка большого массива ксенобиотиков на один или несколько
видов биологической активности.
Цели скрининга:
- выявление соединений, обладающих полезными для человеческого организма
свойствами
- обнаружение вредных для человеческого организма биологических активностей у
испытуемых ксенобиотиков.
- нахождение ксенобиотиков, влияющих на продуктивность и биологическое
равновесие естественных и искусственных экосистем
-установление БА, которые могут вызвать неконтролируемое или недостаточно
прогнозируемое нарушение биологического равновесия природных экосистем.
-нахождение химических соединений, которые могут быть реактивами
- накопление знаний, позволяющих предсказать виды БА по химической структуре
вещества.
Система тестирования ксенобиотиков по видам биологической активности может
включать два взаимосвязанных подхода. Первый – уровень целевого объекта испытаний
(человек, животное), на который направлено действие искомого ксенобиотика, и второй
подход – совокупность тест-объектов, базирующихся на использовании более
примитивной организации живой материи, чем целевой.
2. Особенности биотрансформации, поступления и выведения ксенобиотиков у
разных организмов.

Основные пути поступления токсических ксенобиотиков в организм человека –


это органы дыхания и кожа, а также пищеварительный тракт.
Существенным фактором, влияющим на распределение ксенобиотиков и их
способность к дальнейшей биотрансформации и экскреции является растворимость в
липидах (коэффициент распределения).
Экскреция ксенобиотиков и их метаболитов через различные выделительные
системы – заключительный этап в процессе поступления и трансформации. Экскреция
осуществляется через почки, легкие, кожу, кишечник, слюнные, потовые, слезные,
сальные железы, а также молочные железы при лактации.
Почечная экскреция ксенобиотиков – основной путь удаления из организма КБ. В
основе почечной экскреции лежат: а) клубочковая фильтрация (вода, глюкоза,
аминокислоты и др), канальцевая секреция (этим путем в мочу попадают химические
вещества: органические кислоты или органические основания), канальцевая реабсорбция
(обратное всасывание метаболитов и ксенобиотиков в канальцах нефрона,).
У растений поступление чужеродных веществ происходит через корни и листья.
Ксенобиотик проникает в ткань листа через устьица или кутикулу. Через кутикулу
соединения диффундируют медленнее, чем через устьица. В последующем
распределении ксенобиотиков в тканях и органах растений большую роль играют
сосуды ксилемы и флоэмы. Растения не имеют системы выделения, сравнимой с
системой выделения животных, но их защитный механизм может включать связывание
посторонних веществ некоторыми молекулами углеводов и накопление их в местах,
лишенных метаболической активности (например, в вакуолях).
Различия между организмами в их реакции на действие ксенобиотиков
обусловлены разной способностью метаболизировать эти вещества. В пределах одного
вида уровень микросомной активности зависит от пола, организма и стадии его развития.
В разных органах – печени, кишечнике, легких и т. д. – активность также различна.
Микроорганизмы обычно содержат большое число ферментов, участвующих в
процессах трансформации ксенобиотиков. Многие микроорганизмы внешней среды
способны к более глубокой деградации ксенобиотиков (разрыву ароматических ядер).
Продукты расщепления служат для микроорганизмов единственным источником
углерода.
В микробиологической трансформации ксенобиотиков различаются процессы
метаболизма и кометаболизма. Под первым понимают превращение соединения до
конечного продукта реакции, который не участвует в трансформации. Кометаболизм – это
изменение структуры молекулы ксенобиотика, катализируемое ферментами
микроорганизмов, которые выросли на субстратах или их метаболитах. Субстраты
оказывают индуцирующее действие на такие ферменты.
генетическая способность некоторых штаммов бактерий разрушать КБ плазмид.
3. Влияние ксенобиотиков на физико-химические свойства цитоплазмы, проницаемость
биологических мембран и метаболические процессы в клетке.

Вязкость. цитозоль содержит систему микрофиламентов. Коллоидный раствор


может быть золем (невязким) или гелем (вязким). Внешние слои цитоплазмы по своей
конституции ближе к гелям.
Взаимодействие гидратированных ионов ксенобиотиков с заряженными белковыми
молекулами цитоплазмы может вызывать переходы золь – гель и обратно. Катионы,
имеющие поливалентный заряд, притягиваются сильнее к заряженной коллоидной
частице по сравнению с одновалентными. Поэтому в первом случае молекула коллоидной
частицы теряет часть гидратной воды, и цитоплазма превращается в вязкую гелеобразную
массу. Во втором случае из-за слабого притяжения гидратные оболочки белка и иона
сливаются и цитоплазма оводняется, превращается в жидкий раствор – золь.
Движение цитоплазмы в клетках довольно распространенное явление, которое
играет важную роль в осуществлении обмена и распределении веществ внутри клетки, а
также характеризует уровень жизнедеятельности клетки. Скорость движения зависит от
света, температуры, рН, ксенобиотиков.
Изоэлектрическая точка цитоплазмы. Все амфолиты способны давать
двойственные ионы: положительные и отрицательные.
На ионизацию кислых и основных групп белка влияет значение рН среды. В кислой
среде аминокислоты присоединяют ион водорода, образуя положительный заряд, в
щелочной диссоциирует карбоксильная группа, становясь отрицательно заряженной.
Значение рН, при котором белок имеет минимальный электрический заряд,
принято называть ИЭТ.
Влияние ксенобиотиков на проницаемость мембран. Биологическая
способность ксенобиотиков определяется их способностью взаимодействовать с
клеточной мембраной и, следовательно, изменять ее проницаемость.
4. Общее преставление об изберательном действии ксенобиотиков. Определение
понятия изберательность Роль физико-химических свойств ксенобиотиков в
процессах избирательности.

Избирательность вещества – это его способность воздействовать на клетки,


ткани, организмы только одного определенного типа и не влиять на другие, даже
находящиеся в контакте с первыми.
Для количественной оценки избирательности ксенобиотика вводят коэффициент
избирательности (КИ), он характеризует степень выраженности избирательности. Этот
показатель определяется отношением среднетоксических доз (LD50): КИ = LD50 одного
организма / LD50 другого организма.
Существует три основных фактора механизма, определяющих возможность
проявления избирательного действия вещества:
Избирательность действия, обусловленная преимущественным накоплением и
распределением вещества, может быть вызвана морфологическими особенностями. Этот
тип избирательности основывается на различии в распределении и накоплении. Агент,
токсический как для полезных, так и для вредных клеток, накапливается только в
последних. Примеры: избирательное действие серной кислоты на посевы;
Различие распределения между клетками, тканями, органами. Пример: тетрациклин
накапливается в клетках бактерий.
Избирательность, обусловленная биохимическими различиями.
Избирательность действия ксенобиотиков определяется различиями в процессах их
биотрансформации, а также зависит от его влияния на какой-либо важный биохимический
процесс, который у чувствительного организма имеется, а у устойчивого или отсутствует,
или не столь чувствителен. Примеры. Инсектицид ДДТ блокирует ионные каналы у
хлоднокровных. У теплокровных не могут – не образуются связи между препаратом и
поверхностью мембраны около устья канала
Цитологические различия как основа избирательного действия. Строение
клеток у животных и растений различно. Различаются между собой даже клетки одного
организма, но разных тканей. Примеры. 1. У растений нет нервной системы и мышечных
клеток. И фосфорорганические соединения, блокируя проведение нервного импульса,
поражают насекомых, а не растения. 2. Уникальность такой структуры, как хлоропласта,
представляет возможность, например, для уничтожения растений (сорняков), не причиняя
вреда пчелам и др.
Свойства самого ксенобиотика оказывают большое влияние на избирательность
действия и, в частности, степень его ионизации. Ионы не образуют с местами связывания
ковалентных связей, а, следовательно, могут легко отрываться. Поэтому для поддержания
активного центра в насыщенном состоянии необходимо, чтобы в растворе, окружающем
рецептор, постоянно находился избыток данных ионов.
5. Общие принципы тестирование биологической активности ксенобиотиков.
Стандартизация и подбор тест-систем. Специфические и неспецифические модели

Для определения биологической активности ксенобиотиков необходимы тест-


объекты, на которых регистрируются разные виды биологической реакции (гибель,
изменение роста, и т. д.); эти реакции - тест-реакции. Рассмотрим принципы отбора и
стандартизации тест-объектов при классификации ксенобиотиков по видам
биологической активности.
Совокупность набора тест-объектов клеточно-тканевого уровня должна
удовлетворять главному принципу системы – представительности выбранных
биологических тест-объектов (БТО) по отношению к моделям биосферы и организму
человека с соответствующим набором характеристик (тест-реакций), т. е. максимально
удовлетворять поставленным задачам.
Предлагается подбирать тест-объекты по следующим критериям: по
молекулярным рецепторам, являющимся мишенями для веществ с данными видами
активности; по принципу надмолекулярной организации и молекулярному составу
(близость по структуре); по функциональному сходству; по органному или тканевому
происхождению; по близости патологического состояния тест-объекта и реального
объекта.
Приемы стандартизации тест-объектов (целостные организмы): • поддержание
идентичных условий содержания тест-объекта, • введение контрольных карт
(отбраковка животных, для которых отклонения согласно карте превышают
определенную величину), • использование дополнительных воздействий, переводящих
тест-объект в заданное состояние, • нормирование регистрируемых параметров
(приведение к норме), • выбор тест-реакций, минимальным образом зависящих от
индивидуальности тест-объектов.
Для каждого тест-объекта клеточно-тканевой природы следует создать
формализованный стандарт в виде набора количественных параметров,
характеризующих стационарные и кинетические показатели тест-объектов.
Автоматизированная система испытаний, требования: • высокая
производительность системы, • эталонный набор ксенобиотиков, • соответствующие
методы регистрации, • наличие физических воздействий для получения стандартных
реакций, • стандартность тест-объектов, позволяющая сопоставить полученные в разное
время результаты испытаний
Необходимо отметить, что следует различать специфические и неспецифические
модели тест-объектов. Первые как раз и имеют четко выраженные молекулярные мишени-
рецепторы, реагирующие на определенные химические соединения, т.е. на определенные
виды биологической активности.
Неспецифическая модель является обязательным компонентом для классификации
ксенобиотиков. Благодаря ей оказывается возможным различать химические соединения,
обладающие разными видами активности на полностью неспецифической для этих
активностей модели. (методика для регистрации 16 параметров эритроцитов)
6.Реакции биотрансформации неорганических ксенобиотиков.

Реакции восстановления атомов с переменной валентностью. Трансформация


арсенатов As5+ в арсениты с As3+, селенатов с Se6+ в селениты Se4+. При трансформациях
этого типа токсичность вещества нередко возрастает.
Реакции метилирования. Недавно было доказано, что микроорганизмы могут
использовать реакции метилирования для превращения металлов в металлорганические
соединения. Особое значение имеет способность некоторых микроорганизмов превращать
ионы ртути в метил- и диметилртуть:
В отличие от металлической ртути метилртуть почти полностью поглощается
организмом и лишь незначительная часть выводится из него. Метилртуть распределяется во
всех тканях. Кофактором, принимающим участие в переносе метильной группы к иону
ртути, является метилкорриноид – вещество, содержащее витамин В12.
Реакции конъюгации. Неорганический цианид обезвреживается в живых
организмах конъюгацией с серой, в результате которой образуется тиоцианит.
Процесс катализирует роданаза. Фермент находится в митохондриях печени
различных видов животных и растений. Донорами серы служат тиосульфаты,
тиосульфонаты, полисульфиды.
Путь биотрансформации сернистого газа (SO2). Довольно подробно изучен в
растениях. Первая стадия – окисление в сульфиты и сульфаты, происходит в клеточной
стенке при участии пероксидазы, затем происходит включение в фотосинтетический
метаболизм серы.
Аденозинфосфосульфат–первый продукт в реакции взаимодействия SO42- с АТФ.
Активированный сульфат связывается с серосодержащим переносчиком белковой
природы и образуется комплекс C–SO3, который восстанавливается до сульфида при
участии света через ферродоксин. При переносе на о-ацетилсерин образуется цистеин и
метионин. В случае высокого содержания сульфаты аккумулируются в виде глутатиона.
Если восстанавливающая сила превышает имеющиеся в наличии источники углерода,
сера, соединяясь с водородом, образует дисульфид (H2S), который теряется в результате
газового обмена.
Эффективность реакций детоксикации ограничена. При продолжительном
поглощении SO2 и увеличении кислотности буферная способность цитоплазмы становится
недостаточной, уровень сульфитов в хлоропластах увеличивается, и SO2 занимает места
связывания СО2 на рибулозодифосфаткарбоксилазе. В результате этого происходит
ингибирование вторичных процессов фотосинтеза и разрушение третичной структуры
ферментов.
7. Общие представления о стадиях биотрансформации ксенобиотиков.
Ферментные системы, основные закономерности действия ферментов. Индукция
защитных свойств организма.

Общая тенденция биотрансформации– превращение экзогенного вещества в более


полярную форму и последующее связывание образовавшегося производного с
высокополярным фрагментом, который облегчает выделение ненужных организму
веществ посредством имеющихся у него соответствующих функций. Растения не имеют
системы выделения, сравнимой с системой выделения животных, но их защитный
механизм может включать связывание посторонних веществ некоторыми молекулами
углеводов и накопление их в местах, лишенных метаболической активности (например, в
вакуолях).
Наиболее широко в живых организмах представлены ферменты и ферментативные
системы, катализирующие процессы окисления, восстановления, гидролиза
ксенобиотиков и синтеза метаболитов, содержащих эндогенные соединения.
Такие ферменты локализованы в различных органах и тканях организмов,
отличаются субстратной специфичностью и зависят от физиологических и внешних
факторов. В клетках высших организмов наиболее активной системой являются
микросомные фракции, содержащие микросомные ферменты. Их большей частью
извлекали из печени высших организмов, хотя они имеются и в других тканях. Ферменты
соединяются в мембранную систему - эндоплазматический ретикулум.
Реакции, участвующие в путях биотрансформации чужеродных веществ разделяют
на 4 класса: окисление, восстановление, гидролиз, конъюгация.
Ферменты. Все биохимические реакции в живых системах носят ферментативный
характер. Все ферменты имеют белковую макромолекулярную природу и активные и
регуляторные центры. Как сам фермент, так и его центры состоят из упорядоченно
расположенных, создающих определенный пространственный узор полимерных нитей,
построенных из аминокислот.
Реакция начинается после того, как образуется фермент-субстратный комплекс, т.
е. как только ключ субстрата войдет в замочную скважину активного центра фермента,
для чего необходимо строгое геометрическое соответствие их форм (пространственных и
зарядовых геометрий).
Ферменты высоко специфичны. Для процесса взаимодействия двух веществ А и В
с образованием продукта С необходимо, чтобы к моменту столкновения А и В они
обладали таким запасом энергии, которого было бы достаточно для разрыва и
новообразования прочных химических связей, превращающих субстраты А и В в новый
продукт С. Этот энергетический барьер - энергия активации. Действие же фермента
сводится к снижению высоты барьера. С этой целью фермент вступает в прямой контакт с
молекулами субстрата, снижая энергетический барьер несколькими способами. Во-
первых, на упругом полимерном каркасе фермента может растянуться и ослабиться
«неугодная» химическая связь между атомами субстрата. Во-вторых, субстрат на
ферменте может приобрести способность принимать множество конфигураций, из
которых хотя бы одна облегчит переход к новому веществу. В-третьих, не исключена
возможность сближения и принятия нужной ориентации реагирующих молекул субстрата.
8. Принципы организации системы тестирования БА ксенобиотиков.
Основные цели биотестирования.
Цели определения биологической активности в общем виде сводятся к
следующим:– Выявление соединений, с полезными для человека свойствами. –
Обнаружение вредных для человеческого организма биологических актичностей; -
Нахождение ксенобиотиков, влияющих на равновесие экосистем. – Установление
активностей, которые могут вызвать неконтролируемое опасное или недостаточно
прогнозируемое нарушение биологического равновесия природных экосистем). –
Нахождение реактивов для исследовательских работ. – Накопление знаний, позволяющих
предсказать виды биологической активности по химической структуре вещества.
Индустриальные масштабы испытаний требуют введения принципа, который
позволил бы обеспечить возможность работы с малым количеством испытуемого
вещества.
Нужны исследования на тканевом, клеточном, молекулярном уровнях строения
живого. Принципа эпиморфизма– принцип подобного отражения элементарных свойств
сравнительно простого живого организма в более высокоорганизованном с постепенным
усложнением этих свойств. Главные методологические трудности: нужно определить
оптимальный уровень детализации модели по отношению к целостному организму.
Общий принцип организации биологических испытаний КБ – это многоуровневый
набор тестов с повышающейся на каждом уровне сложностью биологического тест-
объекта и соответственно растущей детализацией и надежностью прогноза вида
биологической активности. Первый уровень – базовый, через него проходят все
соединения, которые в соответствии с результатами прохождения этого первого уровня
направляются затем к специализированным тестам.
Организация испытаний КБ. Первый уровень – базовый.
Базовый уровень состоит из трех подуровней. Биологическая активность ксенобиотика
уже включена в его химическую структуру. Поэтому на первом подуровне сравниваем
структуру вещества с базой. На втором подуровне определяем дополнительные физико-
химические характеристики веществ. На третьем подуровне в систему вводятся тест-
объекты. Итог - биологический «паспорт».
Второй – надстройка, работает в режиме ориентации на две цели: (1) нахождение
химического соединения, обладающего полезными для и (2) вредными для человеческого
организма биологических активностей испытуемых химических соединений.
Сначала работаем на упрощенных системах, нам необходимо предсказать вид
биологической активности и определить ксенобиотики, которые не обладают
определенными активностями или токсичны.
Основная идея предыспытания состоит в том, чтобы реализовать следующий
методологический подход. Заменить модели организменного уровня некоторой
совокупностью моделей доорганизменного уровня. Таким образом, достигается цель
более экономного расхода химического соединения на единичное испытание и реальнее
становится автоматизация испытаний с технологической стороны.
9 . Биологический эпиморфизм
Индустриальные масштабы испытаний требуют введения принципа, который позволил бы
обеспечить возможность работы с малым количеством испытуемого вещества.
Биологический эпиморфизм – принцип подобного отражения элементарных свойств
сравнительно простого живого организма в более высокоорганизованном с постепенным
усложнением этих свойств.
Принцип эпиморфизма – принцип конструктора: из небольшого количества деталей
построить как можно большее количество Фигур. Главные методологические трудности:
чтобы определить оптимальный уровень детализации модели по отношению к целостному
организму. Этого можно достичь исходя из того, что у тест-объектов в совокупности
определяются все основные реакции (гибель, повреждение, и т. д.)
(ЧИТАЙ ТОК ЕСЛИ БУДЕТ ВРЕМЯ. ИЛИ ПЕРЕХОДИ К СЛ ВОПРОСУ)
Организация испытаний КБ. Первый уровень – базовый.
Базовый уровень состоит из трех подуровней. Биологическая активность ксенобиотика
уже включена в его химическую структуру. Поэтому на первом подуровне сравниваем
структуру вещества с базой. На втором подуровне определяем дополнительные физико-
химические характеристики веществ. На третьем подуровне в систему вводятся тест-
объекты. Итог - биологический «паспорт».
Второй – надстройка, работает в режиме ориентации на две цели: (1) нахождение
химического соединения, обладающего полезными для и (2) вредными для человеческого
организма биологических активностей испытуемых химических соединений.
Сначала работаем на упрощенных системах, нам необходимо предсказать вид
биологической активности и определить ксенобиотики, которые не обладают
определенными активностями или токсичны.
Основная идея предыспытания состоит в том, чтобы реализовать следующий
методологический подход. Заменить модели организменного уровня некоторой
совокупностью моделей доорганизменного уровня. Таким образом, достигается цель
более экономного расхода химического соединения на единичное испытание и реальнее
становится автоматизация испытаний с технологической стороны.
10.Биоаккумулирование ксенобиотиков. Коэффициент накопления. Одно- и
многоразовые дозы.
Способность накапливать различные элементы даже при очень низком содержании
их в среде называется аккумулированием вещества организмом (кумулятивный
эффект).
Способность организмов к накоплению веществ характеризуется таким
параметром, как коэффициент накопления.
Nв-ва = концентрация в организме/ концентрация в среде
ФАКТОРЫ, влияющие на аккум-е: • устойчивость ксенобиотика; • площадь
поверхности соприкосновения; • коэффициент распределения (жир); • среда обитания;
•размер частиц и количество потребляемой пищи; • цепь питания
Примеры накопления: ПХБ (полихлорбифенил). В окр среде разлагается долго
(полураспад 5 лет), в значительной степени аккумулируется организмами. Например, в
угрях, выловленных из воды с содержанием ПХБ 0,1 мкг/л, концентрация этого вещества
составила 7,9 мг/кг, т.е. коэффициент накопления ПХБ был равен 80 000. Включение ПХБ
в трофические цепи типа: водоросли (планктон) - ракообразные - рыбы - человек может
привести к поступлению в организм человека с продуктами питания больших количеств
этого в-ва. Поступление ПХБ с материнским молоком в организм ребенка может
достигать 3 мкг/кг массы в сутки
Разовая доза и период полувыведения из организма. Введение в организм
разовой дозы вещества приводит к появлению определенного количества этого вещества в
тканях. В процессах метаболизма и экскреции это вещество выводится из организма с
определенной скоростью.
Многократное дозирование. Если в окружающей среде вещество распределено
повсеместно, организм подвергается его воздействию непрерывно.
Со временем содержание вещества в организме достигает некоторого предельного
максимального значения, так как при повышении концентрации в тканях ежедневное его
выведение увеличивается и становится равным дозе, вводимой ежедневно.
При увеличении первоначальной вводимой дозы повышается количество
выводимого вещества и его содержание в организме, т.е. устанавливается новое
равновесие. (принцип емкости с краном и дыркой)
Максимальная концентрация вещества в тканях зависит от размера дозы
(повышается при ее увеличении) и от периода полувыведения или скорости выведения.
Другим важным фактором является время, необходимое для достижения состояния
равновесия.
Следует отметить, что организмы, таким образом, накапливают вещество в своих
тканях в соответствии со скоростями его введения и выведения. Причем степень
накопления вещества в организме изменяется в широких пределах и во многих случаях
коррелирует с коэффициентом распределения вещества.
11. Характеристика факторов, влияющих на биоаккумулирование
ксенобиотиков. Трофические цепи и экологические пирамиды.

Поскольку явление аккумулирования включает взаимодействие вещества с


организмом, то факторы включают характеристики и самого ксенобиотика, и организма.
Одной из характеристик самого вещества является устойчивость. Любое
аккумулирующееся вещество должно быть устойчивым к возможным в данной среде
процессам разрушения.
Площадь поверхности. Если процесс аккумулирования включает физические
стадии (адсорбция, диффузия), степень накопления чужеродного вещества зависит от
площади поверхности контакта организма с окружающей средой.
Распределение. Большинство организмов содержит значительные жировые
отложения; в этих тканях накапливаются ксенобиотики с большими значениями
коэффициента распределения.
Способность ксенобиотика распределяться в жировых депо организма также может
влиять на его период полувыведения. Жировые ткани в процессах метаболического
преобразования являются не самыми активными.
Устойчивые в окружающей среде ксенобиотики очень плохо растворяются в воде.
Следовательно, среда обитания конкретного организма может существенно влиять на
его способность аккумулировать ксенобиотики. (рыбки на дне)
Размер частиц, проглатываемых организмами. Поскольку на более мелких
частицах адсорбированное чужеродное вещество содержится в более высоких
концентрациях, организмы, проглатывающие такие частицы, будут подвергаться
воздействию более высокого содержания ксенобиотика.
Количество потребляемой пищи. Организмы, нуждающиеся в относительно
большом количестве пищи, аккумулируют больше КБ, если процесс накопления КБ не
компенсируется более активным процессом его выведения.
Цепь питания. Находясь во внешней среде, чужеродные соединения
взаимодействуют с микроорганизмами, растениями, животными, поступая в конечном
итоге по трофическим цепям в организм человека.
Установлено, что по мере движения ксенобиотика по пищевой цепи к следующему
консументу, в организме которого он метаболизируется в незначительной степени,
происходит существенное увеличение концентрации чужеродного вещества.
Для лучшего понимания закономерностей движения по пищевым цепям продуктов
питания, а также попавших в биоценозы ксенобиотиков строятся экологические
пирамиды. В экологических пирамидах схематически учитывают плотности популяций,
биомассы или продуктивность в энергетических эквивалентах (Дж на 1 м2 в год) для всех
членов каждого трофического уровня в данном биоценозе.
В условиях поступления в организм чужеродных химических веществ, медленно
распадающихся, начинается накопление их по ходу цепи.
12. Биоаккумулирование техногенных наноматериалов. Критерии и
методические блоки оценки их безопасности .
Наноматериалы накапливаются в клетках биообъектов в результате активной
коагуляция, адсорбции, адгезии, эндоцитоза. Они могут не распознаваться защитными
системами организма, не подвергаться биотрансформации и накапливаются.
По трофической цепи наночастицы могут попасть в организм человека.
Согласно решению Пленума, безопасность наноматериалов должна оцениваться
последующим основным блокам методически значимых проблем: 1). методы
обнаружения, идентификации и количественного определения наноматериалов в объектах
окружающей среды, пищевых продуктах и биологических средах, позволяющие отличить
наноматериалы от их аналогов в традиционной форме; 2). изучение взаимодействия
наноматериалов с липидами, белками, нуклеиновыми кислотами в системах in vitro; 3).
изучение механизмов проникновения наноматериалов через биомембраны и связывания с
мембранными рецепторами в системе in vitro; 4) изучение изменения характеристик
наночастиц в составе модельных систем, воспроизводящих различные среды организма;
5) определение параметров острой, подострой и хронической токсичности,
органотоксичности и отдаленных эффектов (мутагенность, канцерогенность), а также
распределения наноматериалов по органам и тканям; 6). определение параметров I и II
фазы метаболизма ксенобиотиков и системы антиоксидантной защиты; 7) изучение
влияния наноматериалов на экспрессию генов, генотоксичность, апоптоз, протеомный и
метаболомный профили, потенциальную аллергенность; 8) изучение влияния в моделях in
vitro выживаемости пробиотических микроорганизмов нормальной микрофлоры ЖКТ в
присутствии наноматериалов, процессов всасывания наноматериалов в желудочно-
кишечном тракте на моделях in situ и in vivo и определение влияния наноматериалов на
микробиоценоз желудочно-кишечного тракта
13 Характеристика вредного влияния ксенобиотиков на экосистемы:
критерии вредного влияния, последствия и формы, зависимость от времени.
К важнейшим задачам при анализе воздействия ксенобиотиков на экосистему
относится выявление их вредного влияния (качественное и количественное) и разработка
мероприятий, предотвращающих это негативное влияние.
Под вредным воздействиям, наносимым соответствующей экосистеме, понимают:
– явственные изменения обычных колебаний численности популяции;
– долгосрочные или необратимые изменения состояния экосистемы.
Возможные последствия и формы вредного воздействия:
- Полное разрушение экосистемы в результате нарушения целостной интактной
структуры (биотопа) и ее функций (биоценоза). Пример: уничтожение мангровых лесов в
результате применения дефолиантов во время войны во Вьетнаме.
- Глубокие изменения биотопа. Пример: засоление пресноводных биотопов;
«современное ухудшение состояния лесов»
- Постоянное загрязнение биотопа. Пример: эвтрофикация рек и озер в результате
попадания в них значительных количеств биогенных элементов (азот, фосфор)
- Массированные загрязнения. Пример: загрязнение рек и водоемов нефтью
- Уменьшение видового разнообразия. Пример: использование пестицидов и
удобрений в агроценозах.
- Направленное уничтожение отдельных видов растений и животных.
Изменения, вызываемые ксенобиотиками в экосистемах в значительной мере
определяются временем воздействия. Нарушения поведения в биохимических реакциях
наступают немедленно, а физиологические и морфологические – часы и недели;
изменения индивидуального жизненного цикла – сутки и месяцы; месяцы – годы приводят
к популяционным воздействиям, а десятилетия вызывают экологические нарушения.
14 Система оценки первичной безопасности ксенобиотиков: характеристика
тест-объектов и тест-реакций.

Рассмотрим, как можно решить одну из упомянутых целей биологического


испытания – первичную оценку биологической безопасности ксенобиотика на
субклеточном и тканевом уровнях в автоматизированном режиме. В этом случае система
включает три подсистемы: информации, экспериментальную и управляющую.
Первая подсистема производит автоматизированный сбор, обработку полученных
теоретических экспериментальных данных и формирует итоговый документ о БА КБ.
Управляющая подсистема производит работы по последовательному переключению
испытаний на соответствующую тест-систему, осуществляет смену и дозировку
экспериментальных растворов, поддерживает заданный (временной) режим испытаний и
т.д. Основные события по выявлению биологической активности ксенобиотика
разыгрываются в экспериментальной подсистеме, базирующейся на многоуровневом
подборе тест-объектов, позволяющих провести оценку токсических, мутагенных,
канцерогенных и других эффектов.
Примерный перечень тест-объектов и тест-реакций, используемых в системе
первичной оценки безопасности ксенобиотиков
Биологическая Тест-объект Функциональное назначение
активность (тест-реакция)
Генерализиров Водоросли, бактерии, Определение концентрации, при
анная реакция клеток дрожжи которой наблюдаются изменения формы,
размеров клеток, отделы структур и т. д.
Проницаемость Кожа лягушки, стенка Определение скорости
желудка и стенка тонкого проникновения ксенобиотика, оценка
кишечника крысы и др. изменений
Острая Бактерии, дрожжи, Установление зависимости эффект-
токсичность водоросли, эритроциты, концентрация (доза) – время (LD50 , LC50 )
лимфоциты
Токсичность Бактерии, дрожжи, Определение тропности к ДНК,
для элементов водоросли, клетки высших способность вызывать мутации
генетической системы растений, дрозофила
Токсичность Эритроциты, Установление концентрационно-
для иммунной лимфоциты, альбумиты, временных эффектов, реакция антиген-
системы и клеток сыворотка крови антитело, бласттрансформация лимфоцитов
крови

Токсичность Сперматозоиды, Влияние на подвижность, деление


для половых клеток яйцеклетки
15 Биоэкологический мониторинг окружающей среды. Биотесты и
биоиндикаторы. Использование приемов биотестирования в системе экологического
мониторинга.
Одного из наиболее перспективных направлений в процедуре контроля – использование
биологических объектов и разработка на их основе биодатчиков.
Все чаще начинают использовать биологические методы контроля, в которых
наблюдение ведется за реакцией на загрязнение живого объекта.
Возможны три различных подхода к применению биологических объектов в
качестве тестовых:
1. Использование организмов, входящих в данный биогеоценоз, за состоянием
которых ведется слежение (биоиндикаторы).
2. Использование организмов, исходно не имеющих отношения к тестируемому
биогеоценозу, но вводимых туда искусственно (экзогенные биоиндикаторы).
3. Использование объектов, не имеющих отношения к данному биогеоценозу,
выращенных или взятых в контролируемых условиях и применяемых в качестве
чувствительных элементов прибора, контролирующего состояние среды (биодатчик).
Одной из неотложных задач охраны природы является создание мониторинга –
системы непрерывного контроля за химическим загрязнением среды. Законодательно
допустимый уровень загрязнения среды химическими веществами определяется
предельно допустимой концентрацией (ПДК) для каждого вещества.
Для создания системы мероприятий, обеспечивающей безопасность людей в среде,
загрязненной продуктами химической деятельности человека, необходимы: разработка
научно обоснованных подходов для выбора критериев, определяющих безопасность
человека и других живых компонентов биосферы, а также развитие технологических и
инженерно-технических методов и техники экспресс–анализа, обеспечивающих
непрерывный контроль за состоянием среды.
Биоиндикация - оценка качества природной среды по состоянию её биоты.
Основана на наблюдении за составом и численностью видов-индикаторов. Метод
биоиндикаторов основан на исследовании воздействия изменяющихся экологических
факторов на различные характеристики биологических объектов и систем. В качестве
биоиндикаторов выбирают наиболее чувствительные к исследуемым факторам
биологические системы или организмы. Изменения в поведении тест-объекта оценивают в
сравнении с контрольными ситуациями, принятыми за эталон.
Примеры: 1) Англия, аквариум, ток воды, форель – ослабевают и падают ниже по
течению.
2) Наиболее удачными для использования в качестве индикаторов являются
споровые и кокковые микроорганизмы. Это позволяет получить информацию о
содержании ряда КБ с учетом процессов их трансформации в природных объектах. В
качестве тест реакций – ростовые параметры, ферментативные реакции.
16. Диффузия ксенобиотиков через биологические мембраны. Закон Фика
При простой диффузии ксенобиотики проходят через мембрану в результате
случайного молекулярного движения, и величина потока линейно зависит от
концентрации и коэффициента проницаемости мембраны для данного вещества.
«Сердцевина» мембраны - гидрофобна, поэтому неполярные вещества легче
проникают в клетки.
В качестве количественного параметра проникновения любого вещества в клетку
вводится коэффициент проницаемости. В этом случае скорость переноса определяют с
помощью закона Фика:

где D – коэффициент диффузии; А – площадь поверхности; Кр – коэффициент


распределения, представляющий отношение концентрации растворенного вещества в
мембране к концентрации вне мембраны.
dS/dt = PA(Cн – Cв), Р (коэф-т проницаемости) – длина в единицу времени, см/с.
Отношение концентраций какого-либо вещества, состоящего из простых молекул,
в двух находящихся в равновесии фазах имеет постоянное значение и называется
константой распределения Кр:
Кр = С2/С1, где С1 – водная фаза, С2 – неводная фаза (масло, липид). Пассивный
перенос – это движение вещества по градиенту электрохимического потенциала без
затраты энергии.
Химический потенциал определяется условным уровнем энергии. (мю* - константа
аддитивности)

Если через мембрану переносятся незаряженные частицы, то


, где ` – энергия на единицу количества вещества
(Дж/моль); Cj – концентрация вещества; Zj – заряд; – электрический потенциал; R –
газовая постоянная; Т – абсолютная температура. (Фактор RT необходим для перевода
активности в единицы энергии на 1 моль.).
Если система в состоянии равновесия и нет градиента электрохимического
потенциала, то вещество проходит из-за беспорядочного теплового движения

– Потенциал Нернста
Хорошо проникают через мембраны такие гидрофильные вещества, как глицерин,
мочевина и др., радиус молекул которых не превышает 0,3 нм. Эти молекулы проходят
через поры либо заряженные частицы проникают через ионные каналы. Канал – имеет
узкий селективный фильтр вблизи наружной поверхности мембраны и воротное
устройство вблизи ее внутренней поверхности. Пространство между селективным
фильтром и воротами получило название туннеля. Сенсор напряжения, расположенный в
липидном слое, управляет открытием ворот под влиянием внутримембранного поля.
Облегченная дифф - Транспорт ксенобиотиков с участием подвижных
переносчиков
-Транспорт ксенобиотиков фиксированными переносчиками
Характерные отличия облегченной диффузии от простой: - при простой диффузии
поток ксенобиотика пропорционален внешней концентрации; - наличие специфических
переносчиков обусловливает зависимость проникающей способности вещества от его
химической структуры и, в частности, от пространственной конфигурации его молекул; -
облегченная диффузия может ингибироваться некоторыми соединениями
17. Транспорт ксенобиотиков с помощью переносчиков через биологич
мембраны, отличительные черты
Облегченная диффузия
Вещества, нерастворимые в липидах, с размером молекулы более 0,3–0,4 нм, не
диффундируют через мембраны.
Концепция «переносчиков». Такая облегченная диффузия происходит по градиенту
концентрации без затрат энергии и относится к пассивному транспорту.
Механизм: обратимое соединение транспортируемого вещества с переносчиком, и
образующийся комплекс вещество–переносчик диффундирует внутри мембраны от
наружной поверхности к внутренней, где комплекс диссоциирует с высвобождением
вещества внутрь клетки. Свободный же переносчик диффундирует назад.
Развивается также тетрамерная модель облегченного переноса. 4 субъединицы.
Конформационный переход субъединиц является непосредственной причиной переноса
субстрата через мембрану
Процесс переноса веществ через мембраны с помощью переносчика
описывается в рамках кинетики Михаэлиса – Ментен.
Скорость переноса пропорциональна концентрации вещества в интервале низких
концентраций, а затем снижается по мере ее роста и в конце концов приближается к
максимуму (происходит насыщение)
Для регуляции переноса веществ используются ионофоры – небольшие
гидрофобные молекулы, которые растворяются в липидных бислоях и повышают их
проницаемость для ионов. Ионофоры широко применяются для повышения
проницаемости мембран по отношению к определенным ионам. Существуют два класса
ионофоров – подвижные переносчики ионов и каналообразующие ионофоры. Ионофоры
обоих типов действуют, экранируя заряд транспортируемого иона так, чтобы последний
мог пройти гидрофобную внутреннюю область липидного бислоя. Поскольку ионофоры
не связаны ни с каким источником энергии, они лишь позволяют ионам двигаться по
электрохимическим градиентам. Примером каналообразующего ионофора является
грамицидин А. Валиномицин – переносчик ионов.
18. Механизмы транспорта техногенных наноматериалов в клетку и пути их
поступления в организм.
Поступление наноматериалов в организм:
1) кожа (липофильные)
2) ЖКТ (растворимые)
3) Органы дыхания(гидрофобные)

Поступление через органы дыхани: большие частицы задерживаются в носу, млые –


уходят в альвиолы. Через кожу проникают с косметическими веществами.
Поступление в растения: - через корневые волоски, - через устьица, - по плазмадесмам
Поступление в клетки: - эндоцитоз, пиноцитоз макропиноцитоз. – диффузия облегенная, -
по плазмодесмам.
19. Основные закономерности влияния физиологических и генетических и
факторов окружающей среды на биотрансформацию ксенобиотиков. (пиздецки
большой)
К генетическим факторам относятся видовые различия и различия внутри одного
вида.
Различия процессов биотрансформации между видами могут быть
количественными (идинтичные реакции протекают с неодинаковой скоростью) и
качественными (различные метаболические реакции).
пример: у собак не происходит ацетилирования ароматических аминов, у кошек
нет N-ацетилтрансферазы, у морских свинок не образуются меркаптанконьюгаты.
Видовые различия в действии ксенобиотиков связан, например с особенностями
реакций коньюгации у разных животных. Пример: коньюгация фенилуксусной кислоты. У
человека и шимпанзе она коньюгирует с глутамином, у большинства других
млекопитающих – с глицином и глюкуроновыми кислотами, а у кур – с орнитином
Различия между линиями внутри одного вида как у животных, так и человека.
Хорошо известен пример генного полиморфизма при ацетилировании
ксенобиотиков. Причина этого явления в различной активности N-ацетилтрансферазы –
фермента, катализирующего реакции коньюгации ариламинов с ацетил-КоА. Было
обнаружено, что полиморфизм ацетилирования наблюдается для ксенобиотиков, молекула
которых трансформируется путем присоединения по атому азота ацетильной группы с
участием N-ацетилтрансферазы:
Данный феномен определяется генетическими факторами.
К физиологическим факторам, которые влияют на метаболизм, относятся
возраст, пол, состояние питания, заболевания и т. д.
Возраст. У новорожденных отсутствуют микросомальные ферменты, в том числе и
цитохром Р-450. Таким образом, эмбрионы и новорожденные особенно чувствительны к
токсикантам. Способность новорожденных синтезировать коньюгаты также заметно
снижена.
Пол. У взрослых самцов чужеродные соединения метаболизируется быстрее, чем у
взрослых самок. Это обусловлено действием половых гормонов на синтез ферментов
микросомного окисления. Цитохром Р-450 состоит из набора изоэнзимов, а содержание
некоторых из них зависит от пола.
Питание и диета. У мышей голодание приводит к уменьшению скорости
гидроксилирования одних ксенобиотиков и увеличению других. У крыс, находящихся на
диете с дефицитом белка, наблюдается уменьшение активности ферментов
моноксигеназных систем.
Гормоны. Введение крысам тироксина вызывает уменьшение активности
ферментов монооксигеназной системы. Напротив, стероидные гормоны стимулируют
активность микросомных ферментов.
Беременность. В конце беременности заметно уменьшается глюкуронидная
конъюгация ксенобиотиков, из-за наличия в тканях протестерона.
Влияние факторов окружающей среды (стресс, температура, химические соединения
и др.) на биотрансформацию ксенобиотиков.
К факторам окружающей среды :
Стресс. Неблагоприятные внешние условия приводят к стрессовым состояниям и
увеличению микросомального окисления, зависящего от НАДФН, т. е. интенсивность
метаболического превращения повышается. Ионизирующая радиация подавляет
образование НАДН и НАДФН, и поэтому возможно нарушение микросомального
окисления в печени.
Температура. Температурный коэффициент Q10 показывает насколько меняется
скорость (V) того или иного процесса при изменении температуры на 10 оС. Q10 =
Vt/V(t-10), Q10 для физико-химических процессов находится в интервале 1,1–1,5,
химических реакций – 2–3.
Чужеродные соединения. Активирование метаболизма чужеродных соединений
введением других ксенобиотиков, таких как медикаменты, пестициды и полициклические
углеводороды, хорошо известно и широко изучается в связи с отношением этого
феномена к лекарственному синергизму и толерантности, а также индукции ферментов и
канцерогенезу. Полярные соединения не стимулируют микросомальные ферменты.
Однако может наблюдаться и снижение активности цитохрома Р-450 в живых организмах.
Чужеродное вещество либо связывается с гидрофобными сайтами (конкурентное
ингибирование), либо взаимодействует с железом геминовой группы (неконкурентное
ингибирование). Соединения, разрушающие мембрану ЭР, в которую встроены ферменты
биотрансформации также их ингибируют.
20. Пути поступления и выведения гидрофильных и гидрофобных
ксенобиотиков живыми организмами.

Основные пути поступления токсических ксенобиотиков в организм человека – это


органы дыхания и кожа, а также пищеварительный тракт. Через слизистую оболочку
дыхательных путей и пищ. тракта поступают ксенобиотики, находящиеся в газо- и
парообразном состоянии. Через кожу проникают преимущественно липофильные
вещества, находящиеся в жидком или газообразном состоянии при непосредственном
контакте. Через всасывание из пищеварительного тракта: участок всасывания
определяется физико-химическими свойствами ксенобиотика, его способностью к
ионизации, взаимодействию с мембранами эпителиацитов. Экскреция ксенобиотиков и их
метаболитов через почки, легкие, кожу, кишечник, слюнные, потовые, слезные, сальные
железы, а также молочные железы при лактации. 1)Почечная экскреция ксенобиотиков –
основной путь удаления гидрофильных ксенов. В основе почечной экскреции лежат
следующие биологические процессы: клубочковая фильтрация, канальцевая секреция,
канальцевая реабсорбция. В клубочковой фильтрации подвергаются вода, глюкоза,
аминокислоты, белки, ксенобиотики-неэлектролиты. Канальцевая секреция (органические
кислоты или органические основания). Канальцевая реабсорбция – процесс обратного
всасывания метаболитов и ксенобиотиков, неионизированные формы веществ
подвергаются реабсорбции и экскреции путем пассивной диффузии.
2) Экскреция ксенобиотиков легкими. удаляются в основном летучие и
газообразные вещества, а также продукты печеночной биотрансформации многих
токсических веществ.
3) Экскреция ксенобиотиков печенью. Выделение через систему желчных ходов
или после обратного всасывания в синусоиды – через почки. Однако для многих полярных
КБ выделение в желчь из гепатоцитов осуществляется путем активного транспорта против
градиента электрохимического потенциала. У растений нет спец. путей поступления и
выведения ксенобиотиков. Поступление в корни происходит в две фазы: 1) быстро
протекающая диффузия в апопласт и 2) продолжительное поступление. КБ поступают в
растение через листья: через устьица или кутикулу. Через кутикулу соединения
диффундируют медленнее, чем через устьица. Однако из водных растворов поступление
через устьица неэффективно (образуется мениск).
21. Характеристика процессов поведения ксенобиотиков в экосистемах.
Для ксенобиотиков, попавших в экосистемы и входящие в них организмы, можно
выделить следующие этапы.
1. Реакции превращения ксенобиотиков (ОВР, гидролитические и реакции
конъюгации). 2. Адсорбция ксенобиотиков на частицах биологического и абиотического
происхождения. 3. Переход ксенобиотиков из одной среды в другую.
Ферментативные превращения. Конъюгация КБ с различными органическими в-
вами. Смысл: Придать повышенную водорастворимость КБ.
Воздействие физико-химических факторов. Фотохимические превращения, три
стадии: - акт адсорбции, поглощение излучения определенной длинны волны. –
первичный фотохимический процесс. – «темновые» реакции. Степень деструкции КБ
зависит от его свойств.
ОВ превращения. КБ принимают или отдают электроны. – окисленные и
востановленные формы КБ могут различаться по свойствам. – есть значительные
вариации в окислительных или восст-х условиях в окружающей среде, что влияет на
трансформацию КБ.
Гидролиз. Обуславливает способность в-ва вступать в реакции с водой.
Адсорбция ксенобиотиков на частицах. Доступность ксенобиотика для ферментов,
и его «деградабельность» снижается в результате сорбции молекул на частицах. Процессы
сорбции–десорбции ксенобиотиков нередко определяют их устойчивость и взаимосвязаны
с переносом в биосфере на большие расстояния. Пример: многие пестициды в почве
гидролизуются с образованием соединений, которые адсорбируются на частицах почвы,
связываются с гумусом и сохраняются длительное время, т. е. возрастает устойчивость
этих токсикантов. В адсорбированном состоянии они не разрушаются, только по мере
разрушени гумуса.
Переходы веществ из одной среды в другую. Изменения физико-химических
свойств веществ в результате модификации структуры их молекул и др оказываются
существенными при переходе веществ из одного блока биогеоценоза в другой. Подобные
переходы могут иметь решающее значение для крупномасштабного перемещения
ксенобиотиков. Например, летучесть ряда пестицидов (особенно хлорорганических), их
переход в результате испарения из почвы или воды в воздух обусловливает их
дальнейший перенос на большие расстояния. Однако не менее серьезные проблемы
возникают и вследствие затрудненности перехода подобного типа. Например, переход
ртути из почвы в воду происходит очень медленно (период полувыведения из почвы в
поверхностные воды составляет 850 лет). Попавшая в водоемы ртуть далеко не безвредна:
она метилируется и накапливается в гидробионтах. Поэтому возникает огромное
запаздывание в миграции ртути по биосфере.
22.Процессы метаболического окисления органических ксенобиотиков,
основные ферменты и типы реакций.
1. Окисление спиртов и альдегидов осуществляется алкогольдегидрогеназой,
альдегидоксидазами и др. ферментами. дегидрогеназы удаляют водород; например,
окисление спиртов до альдегидов, которые в свою очередь окисляются до карбоновых
кислот. Окисление спиртов в альдегиды или кетоны.
Окисление альдегидов в карбоновые кислоты.
RCHO  RCOOH.
2. Окисление аминов (включая арил-замещенные алифатические амины). Один из
примеров – реакция диэтиламина с нитритом в кислой среде желудка, в результате
которой получается канцероген – диэтилнитрозамин.
3. Окисление ароматических аминов. Эти вещества подвергаются N-
гидроксилированию с участием оксигеназ, что может вызывать появление канцерогенных
продуктов.
4. Окисление ароматических алкил-замещенных соединений. Они обычно
расщепляются между атомами С1 и С2 боковой цепи с образованием соответствующей
ароматической кислоты, при участии фермента диоксигеназы. Эти реакции происходят с
участием микроорганизмов, а также в растениях.
5. Гидроксилирование кольцевых систем. Алициклические кольцевые структуры
гидроксилируются легче, чем ароматические. Если в ароматическом кольце есть
неуглеродный заместитель, то гидроксилирование обычно происходит в пара-положении.
Однако если последнее занято, то в ортоположении с образованием в некоторых случаях
канцерогенных метаболитов. Катализируют реакции оксигеназы.
6. Ароматизация алициклических соединений. Происходит в случае окисления
некоторых циклогексанкарбоновых кислот (с четным числом СН 2-групп в боковой цепи) с
участием митохондрий. Конечный продукт – бензойная кислота.
7. При реакциях окисления с участием фермента эпоксидазы образуется
эпоксидное кольцо (реакция эпоксидации)
8. Окисление или окислительное замещение органической серы. Гетероциклическая
сера обычно окисляется в сульфоксиды или дисульфоны. Сера в алифатических
комбинациях или ароматических боковых цепях иногда замещается кислородом.
Превращение связи P=S в связь P=O приводит к повышению токсичности продуктов.
9. Окислительное дезалкилирование О- и N-атомов. Эти реакции требуют
молекулярного кислорода и осуществляются монооксигеназами. Наиболее часто
дезалкилированию подвергаются ксенобиотики следующих классов: динитроанилины
фенилмочевины (гербициды хлороксурон), и др. ксенобиотики. Эти реакции
осуществляются оксигеназами микроорганизмов, а также клетками печени.
Монооксигеназа – это фермент, катализирующий реакцию элементарного
кислорода с некоторым субстратом, в процессе которой один из атомов кислорода входит
в состав субстрата, тогда как второй атом кислорода реагирует с другим акцептором
(водородом). Монооксигеназные системы содержат цитохром Р-450, основная функция
цитохрома – обезвреживание эндогенных субстратов. В каталитических реакциях
монооксигеназ выполняет роль активного центра. Он взаимодействует с субстратом и
молекулярным кислородом, а также принимает электроны от соответствующих доноров.
Различают микросомальную, митохондриальную и бактериальную монооксигеназные
системы цитохрома Р-450.
Одной из особенностей окислительных ферментов является их избирательность к
субстрату в зависимости от вида тканей, в которых они находятся. Другая важная
особенность- их активность может вызываться самими веществами, на которые они
воздействуют.
23. Общая схема и основные реакции конъюгации в живых системах.
Ферменты, катализирующие эти реакции. (большой ска)
К конъюгационным относятся процессы биосинтеза, в результате которых из
ксенобиотиков или их метаболитов и эндогенных продуктов (глюкуроновой кислоты,
ацетилсульфата, глицина и др.) образуются сложные вещества.
Схематически реакцию конъюгации можно представить в следующем виде:
фермент
RX + эндогенное соединение (донорное в-во)  конъюгат.
Это энергозависимые процессы, подразделяющиеся на две группы. Первую группу
составляют процессы, в результате которых образуются активированные конъюгирующие
агенты:
энергия субстрат
конъюгирующий  активированный  продукт
агент конъюгирующий агент конъюгации.
Для второй группы характерно образование активированного субстрата:
энергия конъюгирующий агент
субстрат  активированный ––––– продукт
субстрат конъюгации.
К первому типу относятся реакции метилирования, ацетилирования, образование
глюкуронидов, гликозидов и сульфатов, к второму – аминокислотная конъюгация.
Реакции конъюгации катализируются ферментами трансферазами, переносящими
заместитель в другое соединение. Наиболее изучены реакции конъюгации, в которых
участвуют следующие молекулы:
1. Ацетат конъюгируется при участии ацетил-КоА с некоторыми
ароматическими аминами и сульфонамидами. Ацетилирование катализируется
соответствующими ацетил-трансферазами.
2. Глицин. Его конъюгация с бензойной кислотой – одна из первых изученных
реакций биотрансформации. Глицин служит также конъюгирующим агентом при
метаболизме никотиновой кислоты.
3. Глутатионовая конъюгация. Трипептид глутатион – эффективный
конъюгирующий агент для конденсирования кольцевых (нафталин). Катализирует
реакции глутатион-S-трансфераза.
4. Алкилирование с участием метионина и этионина.
5. Орнитин используется при детоксикации бензойной кислоты в организме
рептилий и птиц, а аргинин – в организме членистоногих.
6. Глутамин у приматов используется для конъюгации фенилуксусной кислоты и
некоторых ее гетероциклических аналогов.
7. Рибоза и глюкоза. Оба соединения часто используются для конъюгации;
конъюгаты глюкозы особенно широко представлены в растениях, у моллюсков и
насекомых.
8. Конъюгация ксенобиотиков с глюкуроновой кислотой (образование
глюкуронидов) – наиболее важный механизм детоксикации ксенобиотиков. В реакции
участвует активная форма глюкуроновой кислоты – УДФГ. Катализирует процесс
уридиндифосфатглюкуронозилтрансфераза (УДФГТ), локализованная в мембранах ЭР
гепатоцитов, легких, кожи, кишечника, почек.
9. Лигнин. С ним могут ковалентно связываться молекулы пестицидов 2,4-Д
(дихлорфеноксиуксусная кислота), пентахлорфенола.
10. Сульфатная конъюгация (сульфатирование) – В нее вступают фенолы, спирты,
и тд. Происходит с участием сульфат-аденилтрансферазы, аденил-сульфаткиназы,
возможно, и других ферментов группы сульфотрансфераз, донорной молекулой является
3'-фосфоадено-5'-фосфосульфат (ФАФС).
24. Антагонизм, аддитивность и синергизм биологического действия
ксенобиотиков. Примеры синергизма и схема антагонистических взаимодействий.
(если мне попался этот - начинай с другого вопроса)
Механизм развития биологической реакции при действии 2х ксенобиотиков может
соответствовать 3 ситуациям: аддитивность, синергизм и антагонизм.
Аддитивность – отсутствие влияния одного ксенобиотика на характер действия
другого, т.е. биологическая реакция является суммой эффектов, вызванных каждым
веществом.
Синергизм – усиление биологического ответа при совместном действии
ксенобиотиков по сравнению с эффектами, вызываемыми каждым веществом в
отдельности.
Примеры: наркотич. действие хлоралгидрата (седативное, снотворное) в сочетании
с алкоголем; расширение зрачка атропином и адреналином. Совместное применение
наркозных средств с психоседативными дает возможность повысить обезболивающий
эффект и снизить их дозы. А это позволяет уменьшить токсическое действие наркозных
средств.
Антагонизм – ослабление или подавление биологического эффекта при
совместном действии по сравнению с влиянием отдельных агентов.
Агонисты – вещества, связывающиеся с рецептораими и индуцирующие
биологический ответ. Антагонисты – соединения, препятствующие взаимодействию
агониста и не вызывающие или ослабляющие биол.реакцию.
Антагонизм подразделяется на:
1) Химический антагонизм, или антагонизм через нейтрализацию, проявляется
при непосредственном взаимодействии антагониста с агонистом: представим в виде
обратимой бимолекулярной реакции образования неактивного комплекса Е:
А + В↔ Е
с константой диссоциации КВ = СА · СВ / СЕ,
где СА, СВ и СЕ – концентрация агониста, антагониста и продукта реакции
соответственно.
Это конкурентный тип взаимодействия, снижающий кажущуюся константу
диссоциации агонист-рецепторного комплекса вследствие «конкуренции» между
антагонистом и рецепторами за связывание с агонистом.
2) Конкурентный антагонизм проявляется, когда антагонист взаимодействует с
теми же сайтами, что и агонист, но в отличие от агониста - антагонист не вызывает
биологической реакции. Частичный агонист проявляет во взаимодействии с полным
агонистом конкурентный дуализм: усиливает влияние низких концентраций полного
агониста, а высоких – ослабляет.
3) Неконкурентный антагонизм. Взаимодействие неконкурентного антагониста с
собственными рецепторами не приводит к независимому биологическому эффекту, а
снижает эффект при образовании комплекса агонист-рецептор. Обычно НА уменьшает
стимул, вызванный образованием агонист-рецепторных комплексов, или снижает
способность эффекторной системы реагировать на данный стимул.
Антагонизм, приводящий к уменьшению внутренней активности агониста –
метакоидный антагонизм. В случае, когда антагонист занимает неконкурентный центр
(рецептор антагониста), что вызывает изменения рецептора агониста с последующим
снижением его сродства к агонисту, называется метаффиноидным антагонизмом.
4)Функциональный и физический антагонизмы.
Функциональный антагонизм характеризуется взаимодействием агониста и
антагониста с независимыми рецепторными системами, причем вызывается
противоположное влияние в одной и той же эффекторной системе. Пример: антагонизм
между действием ацетилолина и норадреналина на гладкую мускулатуру кишечника
Физический антагонизм вызывается противоположным физиологическим
действием анатагониста и агониста, активирующих полностью независимые рецептор-
эффекторные системы.
Пример: влияние на кровяное давление вазодилятаторов и лекарств,
стимулирующих деятельность сердца (ССС как единая эффекторная система).
5) Бесконкурентный антагонизм (более сложный вид) предполагает
инактивацию комплекса агонист-рецептор лигандом, не способным образовывать
комплекс с рецептором, не занятым агонистом.
Взаимодействие бесконкурентного антагониста с агонист-рецепторным
комплексом возможно лишь тогда, когда агонист и антагонист обладают сродством к
различным функциональным группам рецептора.
6) Смешанный антагонизм представляет собой более общую схему
взаимодействия агониста А и антагониста В с рецепторами, допускающую
комплексообразование рецепторов с обоими лигандами, а также образование тройного
комплекса.
Смешанный антагонизм формально эквивалентен действию смеси конкурентного и
бесконкурентного антагонистов в равных концентрациях.
25. Образование хелатных комплексов. Характеристика лиганд
(хелатирующих агентов). Сродство, коэффициент устойчивости.
(скажи мне названия на картинке и иди к сл вопросу. вернешься, если будет
время)
Известно много веществ (лигандов), способных связываться с металлами. Они
часто образуют с ними хелатные соединения. Если металл оказывается заключенным в
лиганде между такими элементами, как N, O или S, то образуется хелатное кольцо.
В зависимости от количества вступивших во взаимодействие атомов металлов и
лиганд могут образовываться комплексы 1:1, 1:2 (в случае избытка лиганд) и др.
3 основных вида лигандов, образующих одно кольцо в комплексе 1:1 с Cu2+

При содержании двух электронодонорных групп заряд катиона металла при


образовании хелатного соединения не меняется (этилендиамин). Лиганды могут
содержать также одну электронодонорную и одну анионную группы, как в глицине, при
этом заряд металла уменьшается на 1. Лиганд может содержать две анионные группы
(щавелевая кислота)- заряд металла уменьшается на 2.
Для оценки прочности связей применяют константы устойчивости ( θ ),
характеризующие равновесие между одним или несколькими лигандами и одним ионом
металла, подчиняющееся закону действия масс. Для комплекса в соотношении 1:1
θ рассчитывается, где в числителе находится концентрация комплекса, а в знаменателе –
концентрация образующих его компонентов.
Часто необходимо знать общую константу устойчивости (), представляющую
собой произведение частных констант. Произведение двух частных констант обозначают
как 2 (2 = 12 – катион металла + 2 молекулы лиганда).
По сравнению с ферментами, обладающими высокой специфичностью в
отношении определен. металла, среди синтетических металлосвязывающих агентов
подобная избирательность встречается значительно реже. Металлы по своему сродству к
большинству хелатирующих агентов располагаются примерно в следующем порядке (от
наибол. сродства к наимен.):
Fe3+, Hg2+, Cu2+, Al3+, Ni2+, Pb2+, Co2+, Zn2+, Fe2+, Cd2+, Mn2+, Mg2+, Ca2+, Li+, Na+, K+.
Факторы , определяющие сродство металлов к лиганду:
1) Ионный радиус. Некоторые из приведенных двухвалентных металлов
расположены друг за другом в периодической системе следующим образом (в скобках
указаны атомные номера): Mn (25), Fe (26), Co (27), Ni (28), Cu (29), Zn (30). В этом ряду,
называемом первым рядом переходных элементов, сродство к хелатирующим агентам
последовательно увеличивается, достигая максимума у меди (Cu2+). Повышение сродства
к хелатирующим агентам является следствием уменьшения ионного радиуса.
2) Степень ионизации. Хелатообразование зависит от степени ионизации
хелатообразующих агентов. Вещество, обладающее меньшим
сродством к металлу (из-за низкой конст.устойч-ти), может
присоединить большее количество катионов металла, чем
вещества, у которых это сродство больше. Это объясняется тем, что
для хелатообразования необходимо не только наличие сродства между лигандом и
металлом, но также быстрое образование анионов лиганда из агента (или молекул
лиганда). Т.о., существует своего рода конкуренция между константами устойчивости и
константами ионизации.
3) Окислительно-восстановительный потенциал. Также влияет изменение
окислительно-восстановительного потенциала металла, вызванного образованием
хелатных соединений с металлами, имеющими переменную валентность (например, Cu,
Fe, Co, Mn, Mo, V). Вследствие хелатообразования такие металлы могут даже изменять
первоначальную валентность. Пример: Соли двухвалентного кобальта обычно
устойчивы в водных растворах, а соли трехвалентного кобальта мгновенно разлагаются
водой с выделением кислорода. Тем не менее после образования хелатного соединения с
этилендиамином потенциал падает настолько резко, что комплекс с двухвалентным
кобальтом легко окисляется до более стабильного соединения.
26. Концепция рецепторов. Определение, выделение, химическая природа
рецепторов. Критерии отнесения молекулы к рецептору.
Ксенобиотик – чужеродное организму вещество, поэтому он взаимодействует с
неспецифическими местами связывания на мембране или выполняет роль антагониста.
Среди большого количества КБ есть вещества, специфиески связывающиеся с мембраной
или рецептором, вызывая гонадо- и эмбриотоксический эффект (из-за гормоноподоных
свойств). Их поэтому называют гормоноподобные КБ (ГПК). Однако гормоноподобная
активность ниже, чем у эндогенных гормонов
Рецептор – центр связывания агента, выполняющую регуляторную ф-цию в
организме, связывание с которым инициирует специфическую реакцию.
П. Куатреказас перечислил основные признаки рецепторов:
1) взаимодействие эффектора с рецептором должно отвечать требованиям определ.
пространственной и структурной специфичности
2) ограниченное кол-во мест связывания
3) тканевая специфичность связывания эффектора, соответствующая его
биол.специфичности
4) места связывания должны обладать высоким сродством к гормону (их
концентрация должна соответствовать физиол.концентрации гормона)
5) обратимое связывание эффектора рецептором.
Существует 2 метода для выделения рецепторов.
1 – мембранные белки освобождают от липидов (солюбилизируют) с помощью
детергента, а затем очищают хроматографическими методами.
2 – сначала лиганд (гормон) обрабатывают фотореактивным агентом и связывают
(сшивают) с рецептором под действием света. Далее мембрану обрабатывают детергентом
и выделяют комплекс лиганд-рецептор, используя радиоактивную метку.
Для доказательства наличия рецепторов на мембр. – выделить его, очистить,
встроить в искусств. бислойную липидн.мембр., показать сохранение биол. активности.
Структура рецепторов:
1. Гликопротеин/гликолипид
2. Молекула состоит из 2х частей (связывающий и
предающий участки)
Наружная часть (благодаря полисахаридным цепям) – для связывания вещества
(гормона). Вторая (менее полярная) – закрепления в липидном бислое и передачи
принятого сигнала внутрь клетки.
Взаимодействие между связывающими и передающими участками осуществляется
благодаря конформационным перестройкам, происходящим в результате «посадки»
эффектора (агониста) на связывающий участок рецептора. Потом происходят небольшие
изменения на отдельных участках мембран, результаты которых передаются внутрь
клетки, усиливаясь и в конце концов определяют течение внутриклеточных процессов.
27. Амфифильные ксенобиотики, их классификация (на примере ПАВ).
Характеристика этапов их взаимодействия с биологическими мембранами, характер
изменения селективности мембраны.
(если попалось это дуй к след вопросу))) потом вернешься если время будет
Молекулы этих веществ обычно состоят из длинных углеводородных цепей,
связанных с короткой полярной «головкой». В большинстве случаев полярность
«головки» обусловлена наличием атомов азота или кислорода, не обобществленные пары
электронов которых образуют водородные связи с молекулами воды. С другой стороны,
для попадания в воду углеводородная цепь должна разорвать водородные связи между
молекулами воды, которые энергически препятствует этому разрыву.
Типичными представителями амфифильных ксенобиотиков являются
поверхностно-активные вещества (ПАВ). По характеру диссоциации все ПАВ делятся на:
– анионные, функциональные группы, молекулы которых в результате ионизации
в растворе образуют отрицательно заряженные ионы, обусловливающие поверхностную
активность;
– катионные ПАВ, образуют положительно заряженные ионы;
– неионогенные, практически не образующие в водном растворе ионов;
– амфолитные ПАВ, образующие в водном растворе в зависимости от условий
(рН, растворимость и др.) катионные или анионные соединения.
При обработке клеток поэтапно увеличивающейся концентрацией детергента ПАВ
выявлены четыре различные стадии: связывание детергента с мембраной, лизис,
диссоциация мембраны на смесь комплексов липид–детергент, протеин–липид–детергент
и высвобождение из комплексов чистых белков.
Эти стадии могут быть описаны следующим образом:
Изменение селективности мембран
Мембрана обладает выраженной селективностью по отношению к различным
веществам из-за того, что молекулярные и надмолекулярные структуры мембраны
упорядочены. Нарушения этой упорядоченности сказываются на показателях
селективности. Пока ПАВ относительно малы, большая часть связывающихся с
мембраной молекул «разрыхляет» участки мембраны и каждая из них действует как бы
независимо. Поэтому, наступающее снижение селективности примерно пропорционально
числу связанных молекул и является суммой отдельных вкладов каждой из них. Но по
мере роста концентрации ПАВ молекулы располагаются все плотнее, так что присутствие
одной из них усиливает разрушающий эффект другой. Наконец, образуя большие
скопления, приводящие в конечном счете к появлению пор, молекулы ПАВ, связанные с
мембраной, еще более резко снижают ее селективность.
28. Влияние физико-химических факторов окружающей среды на
превращения ксенобиотиков. (большой сука)
1. Фотохимические превращения. Солнечная радиация хорошо поглощается
некоторыми молекулами. Во многих случаях поглощенная энергия способна
индуцировать изменения в молекуле. Ионизирующее излучение не настолько
сконцентрировано, чтобы вызвать заметный эффект. Энергия инфракрасного излучения
достаточна лишь для продуцирования миним. молекулярных изменений, но не для
полного превращения молекул. Ультрафиолетовое излучение наряду с видимой
областью спектра также поглощается молекулами нек. КБ.
Фотохимические превращения проходят в 3 стадии:
– акт абсорбции, который приводит к поглощению излучения определенной
длины волны и появлению возбужденного состояния;
– первичный фотохимический процесс, включающий преобразование
электронно-возбужденного состояния и его переход в невозбужденное состояние;
– вторичные или «темновые» реакции, происходящие в результате первичного
фотохимического процесса.
Активные частицы, образующихся в первичных фотохимических процессах,
особенно свободные радикалы, могут реагировать с др.молекулами в своем
непосредственном окружении(с молек. кислорода или воды).
Степень деструкции КБ в фотохим. процессах зависит от его свойств:
*В-во должно поглощать электромагнитн излучение в доступном интервале длин
волн *обладать потенциальной способностью к хим изменению(иметь реагирующие на
воздействие излучения связи, которые при соответствующих уровнях энергии могут
перестраиваться или разрываться).
2. Окислительно-восстановительные (ОВ) превращения. Многие неорг и орг в-
ва могут принимать (восстанавливаться) или отдавать электроны (окисляться). Важное
значение приобретают эти превращение КБ, т.к :
– окисл-е и восстан-е формы данного КБ могут существенно различаться по
биологич. и экологическим свойствам;
– существуют значительные вариации в окислительных или восстановительных
условиях в окружающей среде, что влияет на трансформацию КБ.
ОВ способность окружающей среды характеризуется величиной рƐ, она позволяет
установить, в какой форме в данной среде может существовать КБ.
рƐ = – lg [е-],
где рƐ – показатель активности электрона, указывающий на способность среды
отдавать или принимать электроны; рН – показатель активности протона – lg[Н +], т. е.
высокий рН соответствует низкой активности Н+, низкий рН – высокой активности Н+.
Высокий рƐ соответствует низкой активности электронов, низкий рƐ соответствует
высокой активности электронов.
Азот (в зависимости от ОВ способности, присущей природным водам) может
существовать в различной степени окисления. Нитраты содержат азот в самой высокой
степени окисления и образуются при высоких значениях рƐ. Являясь сами по себе
токсичными, нитраты в ряде случаев способны восстанавливаться до нитритов.
Присутствие последних опасно для здоровья людей вследствие их специфического
сродства к гемоглобину. Еще более опасна способность нитритов образовывать
нитрозоамины, которые являются канцерогенами. Нитриты далее могут
восстанавливаться до аммиака, который, вероятно, при природных значениях рН
существует в виде ионов аммония. При низк.значениях рƐ азот существует в виде ионов
аммония, а в промежуточной области значений рƐ – в форме нитритов.
Окисление КБ может происходить в водной среде за счет растворенного в воде
кислорода посредством перекиси водорода, которая выделяется в воду некоторыми
гидробионтами, и окислением с участием свободных радикалов.
3. Гидролиз. Реакции гидролиза обусловлены способностью в-ва вступать в
реакции с водой. Вода, особенно при нагревании, быстро разрушает многие вещества.
Эфирные связи, напр, в молекулах фосфорорганических соединений,
высокочувствительны к действию воды, чем определяется умеренная стойкость этих
соединений в окруж. среде.
Способность вещества реагировать в воде с ионами водорода или гидроксила в
большей степени определяется распределением заряда в его молекуле. При оценке
способности в-ва вступать в реакции гидролиза необходимо учитывать влияние рН.
Водородные ионы и др.группы с дефицитом электронов называются
электрофильными. Они особенно сильно притягиваются к атому с небольшим
отрицательным зарядом, к свободной электронной паре или электронам двойной связи.
Вещества с избытком не связывающихся электронов являются нуклеофилами.
Наиболее изучены по сравнению с др. реакции гидролиза эфиров(карбоновых кислот,
амидов).
4. Адсорбция ксенобиотиков на частицах.
29. Связь структура – активность. Приемы установления биологической
активности ксенобиотиков по их структуре.
Структура – строение вещества, определяющее все его физические и химические
свойства. Активность – это взаимодействие вещества с центрами-мишенями, которое
может быть связано длинной цепью событий с наблюдаемым физиологическим эффектом.
Параметры веществ, изучаемые при установлении соотношения "структура-
активность" : молек.масса, плотность, молек.объем, критическое давление, коэф.
теплопроводности, теплоемкость, поверхност.натяжение, вязкость и тд. В подавляющем
большинстве биологич. активность КБ коррелирует с их способностью определенным
образом распределяться между липидной и водными фазами .
Для оценки биол. активности КБ по его физико-химическим свойствам применяют
методы:
1) основанные на поиске корреляционных связей между этими показателями и
биологической активностью.
2) поиск аналогий в строении молекулы нового соединения и молекул,
биологическое действие которых уже охарактеризовано.
3) метод с использованием теории распознавания образов (в том случае, если
рассматривается более 1 признака)
На практике к анализу привлекаются лишь некоторые основные, обладающие
характерным проявлением биоактивности, соединения. При оценке "близости" структуры
и свойств нового вещества с каждым из исследованных соединений необходимо:
* определить более точно характер действия
* располагать сведениями о проявлении соответствующего характера действия
соединений известной структуры.
Также при исследовании закономерностей изменения био акт в ряду аналогов
некоторого вещества модификации, вызывающие сдвиг био активности, обычно
разделяют на 2 группы: модификации связанные с изменением сродства молекулы к
мембранактивным структурам (рецептору),и модификации, нарушающие развитие
реакции системы на образование комплекса "вещество-рецептор".
Далее следует считаться с тем обстоятельством, что молекулы многих в-в имеют в
растворе несколько стабильных конформаций, причем для осуществления акта
взаимодействия с активным центра необходима лишь 1 или некоторые из них. Поэтому на
ряду с определением спектра стабильных конформаций молекулы КБ возникает
необходимость выявления так называемой "биологически активной конформации".
30. Яды и токсины. Понятия токсичности и опасности ксенобиотиков для
живых систем. Классификация ксенобиотиков по видам биологической активности.
(прочитай голубой кусочек и иди к сл вопросу. вернешься, если будет время)
Негативное действие КБ на организм человека, животного или растения может
осуществляться не только путем непосредственного влияния, но и в результате
поступления его по пищевым цепям вследствие биоконцентрации. Многие из КБ и
поллютантов являются сильнодействующими ядовитыми веществами.
Яды – это химические вещества экзогенного происхождения, которые после
проникновения в организм вызывают структурные и функциональные изменения,
сопровождающиеся развитием характерных патологических состояний. Яды и токсины –
вещества высочайшей биологической активности и исключительной селективности,
вызывающие отравление. Токсичность – мера несовместимости вещества с жизнью,
величина, обратная абсолютному значению средне смертельной дозы (1/LД50) или
концентрации 1/LС50.
Опасность – вероятность появления вредных для здоровья эффектов в реальных
условиях их производства и применения.
Классы токсичности (опасности): I – чрезвычайно токсичные (опасные) II - высоко
токсичные (опасные) III - умеренно токсичные (опасные) IV – мало токсичные (опасные).
Яды и токсины в целом делят на 2 группы:
*общие, основанные на каком-либо одном принципе оценки: по хим св-вам
(химическая) ; по целям применения (практическая); по степени токсичности
(гигиеническая); по виду токсического действия (токсикологическая); по избирательной
токсичности.
* специальные, отражающие связь между отдельными физико-химическими или
другими признаками в-в и проявлениями их токсичности: по типу гипоксии; по механизму
взаимодействия с ферментными системами; по хар-ру биологического последствия
отравлений; по степени канцерогенной, мутагенной и прочих видов активностей.
В зависимости от источника происхождения и практического применения:
1) Промышленные яды: органические растворители (ацетон); в-ва, применяемые в
качестве топлива (метан); красители (анилин); химические реагенты, полупродукты
органического синтеза;
2) Хим. удобрения и средства защиты растений;
3) Лекарственные средства и полупродукты фармацевтической промышленности;
4) Бытовые химикаты;
5) Растительные и животные яды;
6) Боевые отравляющие вещества.
По характеру их токсического действия на организм:
1. Нервно-паралитическое действие (никотин)
2.Кожно-резорбтивное действие (мышьяк)
3. Общетоксическое действие (алкоголь)
4. Удушающее действие (фосген)
5. Слезоточивое и раздражающее действие (пары крепких кислот и щелочей)
6. Психотическое действие (кокаин)
По избирательной токсичности
1) Сердечные яды (гликозиды)
2) Нервные яды (транквилизаторы)
3) Печеночные яды (фенолы)
4) Почечные яды (соединения тяжелых Ме)
5) Кровяные яды (анилин)
6) Желудочно-кишечные яды (концентрированные кислоты)
7) Легочные яды (фосген).
Для характеристики токсичности используют значения LD50 или LC50.
ЛД50— средняя доза вещества, вызывающая гибель половины членов испытуемой
группы.
ЛС 50 – Применяются обычно для ядовитых газов, обозначая летальную
концентрацию газа в воздухе и время воздействия.
Недостатки использования параметра LD50 (LC50):
-проведенные в 65 европейских лабораториях определения LD50 для таких веществ
как анилин, ацетанилид, салицилат, хлорид кадмия в сходных условиях на одних и тех же
животных показали, что полученные величины отличались для одного и того же вещества
в 5– 10 раз;
- несостоятельность использования животных с этической и гуманной точек
зрения.
31. Реакция метаболического восстановления и гидролиза органических
ксенобиотиков, основные типы и ферменты.
Реакции восстановления. Если восстановленная форма будет лучше
экскретироваться из организма, то реакции восстановления будут преобладать над
реакциями окисления, несмотря на более сложные процессы. Ферменты в ЭР.
Все ферменты, участвующие в реакциях восстановления ксенобиотиков, относят к
классу редуктаз.
1) Некоторые альдегиды и кетоны могут восстанавливаться в спирты под
действием алкогольдегидрогеназ. Однако ацетон может прямо входить в цикл аэробного
метаболизма через ацетоацетат и ацетил-КоА.
2) Восстановление нитро- и азогрупп: Способны восстанавливаться в
соответствующие амины (нитробензол→аланин) нитроредуктазами, находящейся в
микросомальной и растворимой фракциях печени и почек.
Возможно образование продуктов, содержащих также гидроксиамино- или
нитрозогруппы. Нитрозосоединения - мутагенные и/или канцерогенные.
Активность нитроредуктаз зависит от наличия в среде инкубации НАДН и
НАДФН, но ингибируется кислородом.
Восстановление азосоединений катализируется азоредуктазами. В одном случае в
процессе принимают участие НАДФН-цитохром с редуктазов, в другом – цитохром Р450.
НАДФН-цитохром с редуктазой передает электроны на субстрат через флавины, которые
полностью или частично восстановлены цитохромом с.
3) Восстановление N-оксидов: Процесс катализируется N-оксидоредуктазами,
которые обнаружены в микросомной и растворимой фракциях клеток, а так же в
митохондриях.
4) Немикросомное метаболическое восстановление:
1. восстановление дисульфидов с образованием тиолов;
2. восстановление двойных связей
3. дегидроксилирование, например восстановление замещенных катехолов с двумя
ОН-группами до соответствующих замещенных монофенолов.
Гидролиз. Сложные чужеродные в-ва могут гидролизоваться рядом
гидролитических ферментов (гидролаз), находящихся в печени и плазме крови,
некоторые могут быть в микросомной фракции печени.
1. Гидролиз эфиров карбоновых кислот: Катализируется ферментами эстеразами,
которые классифицируются по группам в-в, на которые они действуют, и по их
отношению к ингибиторам:
*арилэстеразы – гидролизуют ароматические эфиры;
*карбоксилэстеразы – алифатические эфиры;
*холинэстергидролазы – эфиры холина;
*ацетилэстеразы – подобны арилэстеразам, но по-другому реагируют на
воздействие ингибиторов.
2. Гидролиз амидов, гидразидов, нитролов: происходит с участием амидаз (многие
из изученных амидаз являются внеклеточными гидролазами). Гидролиз амидов
происходит в меньшей скоростью, чем эфиров карбоновых кислот. Иногда на этом
эффекте основано действиелекарственных препаратов.
3. Фосфорорганические вещества гидролизуются с помощью ферментов,
атакующих эфирные связи или действующих на ангидриды киислот.
Фермент, гидролизующий связь "углерод-кислород" в оксирановом кольце,
называется эпоксидгидратазой; локализован в ЭР клеток печени, почек, легких и
кишечника.
32.Активный транспорт ксенобиотиков через биологические мембраны:
определение и характеристика основных механизмов.
Активный транспорт – перенос ксенобиотиков с затратой энергии против
электрохимического потенциала. Осуществляется либо за счет сопряжения
электрохимических градиентов, либо выполняется молекулярными машинами
(АТФазами). Следует различать первичный и вторичный (или сопряженный) активный
транспорт.
Первичный активный транспорт – трансмембранный векторный перенос
веществ – осуществляется непосредственно в ходе реакции энергетического
преобразования в АТФазных системах или в ОВЦ, т е используется энергия либо АТФ,
либо ОВ (окислительно-восстановительных) реакций. Подразделяется на:
а. электрогенный активный транспорт, т.е. непосредственный перенос в-в через
мембрану во время АТФазной или ОВ реакции, сопровождающийся генерацией
электрического потенциала.
б. электронейтральный актив.транспорт, т.е. перенос в-в, не сопровождающийся
генерацией электрического потенциала.
Вторичный активный перенос совершается, когда в качестве энергетических
источников используются градиенты электрохимических потенциалов других ионов.
Напр, электрохимический градиент ионов Н+ для сопряженного транспорта анионов,
сахаров, АК и других в-в в клетку (котранспорт), или, наоборот, для вывода ионов Na + из
клетки (противотранспорт).
Классическая модель активного переноса: Активация – видоизменение носителя в
результате поглощения метаболической энергии (АТФ), в результате приобретается
сильное сродство к подлежащей переносу молекуле и присоединение ее к себе →
Переориентация – образованный комплекс проходит через мембрану → Релаксация –
потеря сродства и высвобождение молекулы в результате второй хим реакции. Затем цикл
повторяется. Процессов, идущим с потреблением энергии, является модифицирование
структуры молекулы.
Согласно традиционной точке зрения, для каждого в-ва имеется свой носитель,
который модифицирует свою структуры. Но в настоящее время большую популярность
набирает точка зрения, согласно которой меняется один универсальный механизм
энергообеспечения активного переноса различный соединений, как заряженых, так и
нейтральных – электрохимические потенциалы ионов натрия или протонов, которые
образуются благодаря работе Na+/K+-зависимой АТФазы (животные клетки), Н+-АТФазы
(растительные и др.)
Функционирование Н+-АТФазной помпы плазмолеммы: При переносе
положит. заряженной частицы наружу на мембране устанавливается более высокий по
абсолютной величине потенциал ΔΨ (внутренняя сторона заряжена отрицательно по
отношению к наружной) и изменяется разность концентраций переносимого иона, в
данном случае ΔрН. В результате положит. ион (калий) по градиенту электрохимического
потенциала, а протон по градиенту концентрации входят в клетку. (из обл с большим ΔΨ в
обл меньшего ΔΨ). Вторичный актив транспорт приводится в действие за счет энергии,
запасенной в градиентах в-в, а не путем прямого гидролиза АТФ.
Очень важный механизм транспорта КБ – функционирование Р-гликопротеина,
являющегося транспортной АТФазой. Когда гидрофобное в-в, в т ч противораковое
лекарство (ПРЛ), проникает в клетку, то оно удаляется из нее Р-гликопротеоном за счет
энергии гидролиза АТФ. Это снижает эффективность химиотерапии рака.
В переносе в-в через мембраны принимают участие редокс-цепи мембран, т е
окислительно-восстановительные реакции (напр, ОВ дыхательной цепи). Исходным
звеном РЦ выступают восстановленные пиридиннуклеотиды, а конечных акцептором
электронов является кислород.
33.Характеристика процессов адсорбции ксенобиотиков. Изотерма Лэнгмюра.
34. Специфическая и неспецифическая адсорбция (если попался какой-то из
этих вопросов – читай голуое и иди к следующему, к этому вернешься потом)
Адсорбция — увеличение концентрации растворенного вещества у поверхности
раздела двух фаз (твердая фаза — жидкость; две несмешивающиеся жидкости).
Адсорбирующая поверхность в клетке может на несколько порядков превышать объем.
Когда говорят об адсорбции какого-либо в-ва, подразумевают, что оно обратимо
концентрируется на поверхности. Процесс адсорбции обусловлен ван-дер-вальсовыми,
водородными и ионными связями. Адсорбцию на поверхности подразделяют на:
1. Неспецифическая адсорбция характерна для веществ амфифильной природы,
имеющих концевую гидрофильную группу, связанную с относительно большим
гидрофобным остатком. (мыло)
2. Специфическая адсорбция свойственна гидрофобным веществам, которые
стремятся разместиться на поверхности, имеющей химически комплементарный
характер.
Если при адсорбции не происходит образование ковалентных связей, то это
обратимый процесс, и положение его равновесия устанавливается в соответствии с
законом действующих масс. В 1918г Ленгмюр вывел из этого закона уравнение,
позволяющее получить количественные хар-ки адсорбции. При выводе соотношения были
сделаны следующие предположения:
*энергия адсорбции постоянна и не зависит от степени заполнения поверхности;
* адсорбция происходит на локальных центрах, и адсорбированные молекулы
между собой не взаимодействуют;
* максимальная возможная адсорбция соответствует полному заполнению
монослоя.
Число молей вещества Г, адсорбированного на поверхности:
С
Г= Г max , где Ксд – константа сорбции-десорбции, Г max – число молей
Ксд+С
растворенного в-ва, адсорбированного на поверхности адсорбента с образованием
полностью заполненного монослоя, С – концентрация КБ в растворе.
Изотерму Ленгмюра можно представить и в линейной форме:
1 1 Ксд
= +
Г Г max Г max С
Это уравнение показывает, что адсорбент насыщается при высоких значениях С, т е при
образования монослоя.

При адсорбции различных агентов часто наблюдается такое явление, когда биологический
эффект от каждого последующего удвоения становится все менее ощутимым, при этом кривая
зависимости эффекта от дозы представляет собой гиперболу. Существуют несколько типов
кривых, характеризующих процесс адсорбции, напр 3 распространенных:
Н-кривые: характеризующие случаи с высокой степенью сродства; на этих кривых
начальные значения концентраций
адсорбированного в-ва очень велики; такие
кривые часто получаются, если в-во
адсорбируется в виде мицелл, а так же при
адсорбции ионов, имеющих высокую степент
сродства и способных обмениваться с ионами,
обладающими малой степенью сродства.
L-кривые: нормальны изотермы Ленгмюра,
характеризующие адсорбцию моолекул,
ориентированных на поверхности горизонтально; чем больше в-ва адсорбированно, тем более
затруднена дальнейшая адсорбция.
S-кривые: соответствующие вертикальной ориентации молекул относительно поверхности.
На этапе, который характеризуется начальным участком сигмоидной кривой, чем больше в-ва
уже адсорбированно, тем легче происходит дальнейшая адсорбция. Этот эффект получил
название кооперативного.
35.Экологическая и токсикологическая характеристика органических
ксенобиотиков: полихлорбифенилы, нефть и нефтепродукты, поверхностно-
активные вещества.
Полихлорбифенилы (ПХБ). Промышленное использование ПХБ обусловлено их
химической инертностью, негорючестью и высокой диэлектрической постоянной -
применять их в гидравлических системах, в трансформаторах, в рецептурах смазочных
масел и пестицидов.
Загрязнение атмосферы ПХБ связано с утилизацией отходов при сжигании на
свалках, утечка ПХБ при транспортировке, при авариях на производстве и при удалении
жидких промышленных отходов.
Попадая в атмосферу, ПХБ достаточно быстро сорбируются на взвешенных
частицах, которые или быстро оседают, или вымываются из атмосферы с осадками.
Большая часть ПХБ, переносимая с потоком воздуха, находится в парообразной фазе.
ПХБ весьма устойчивые соединения.
Микроорганизмы чрезвычайно медленно метаболизируют ПХБ. Высокая
липофильность. Токсичность ПХБ возрастает с увеличением содержания галогена.
ПХБ экологически опасны в силу высокой способности накапливаться в жировых
тканях человека и животных, молоке и во всех гидрофобных средах.. Пневмонии и
абсцесс легких. Может быть действуют и на репродуктивную функцию органов.
Нефть и нефтепродукты. Нефть весьма медленно разлагается в окружающей среде.
В основном она состоит из ароматических углеводородов; в некоторых случаях, в
зависимости от происхождения содержит алициклические углеводороды, альдегиды,
кетоны.
На поверхности воды она разливается на большие расстояния с образованием тонкой
пленки со всеми вытекающими. Растворимые в воде окисленные компоненты нефти могут
обладать токсическим действием, обладают концерогенным эффектом. Нефть, попавшая в
природную среду, подвергается микробиологическому разложению (в течение недель и
месяцев). За это время ее легколетучие компоненты испаряются, а оставшиеся подвергаются
медленному окислению - образованию сгустков, которые постепенно опускаются на дно и
оказывают влияние на придонные организмы.
Поверхностно-активные вещества (ПАВ). Амфифильные соединения, хорошо
растворимы в воде, эффективно переносятся с водными массами на большие расстояния.
Модифицируют биологические мембраны, воздействуют на их транспортно-
барьерные свойства; при высоких концентрациях ПАВ наблюдаются более сильные
эффекты – солюбилизация мембран. ПАВ оказывают влияние на активность ферментов в
мембране. Механизм мембранотропного действия этой группы соединений связан со
способностью неполярной части молекулы встраиваться в липидные структуры
мембраны.
Их применение сопровождается пенообразованием. Возросшая потребность в ПАВ
на промышленных предприятиях, а также их интенсивное использование в быту привели
к большим скоплениям пены в руслах рек и водоемах. Пена препятствует судоходству, а
высокая токсичность ПАВ приводит к гибели рыб.
36. Взаимодействие ксенобиотиков с биологическими мембранами: виды
мембранотропных эффектов и типы мембранотропности ксенобиотиков. (большой)
Говоря о мембранотропном действии какого-либо вещества, имеют в виду
прямую или косвенную (опосредованную) модификацию мембранных структур,
вызываемую соответствующими соединениями, и наступающие в результате этого
изменения свойств биологической мембраны, прежде всего транспортных
характеристик.
Часто при обсуждении биологической активности химических соединений
используется термин «специфическое» или «неспецифическое» действие. Но такая
классификация не предполагает существования вполне четкой границы между двумя
группами веществ.
Соединения, вызывающие изменение каких-либо характеристик биологических
мембран, можно разделить на вещества прямого мембранотропного действия и агенты,
действующие опосредованно через вмешательство в цитоплазматический метаболизм
или иным косвенным путем.
Например, соединения, влияющие на транспорт веществ через мембрану, обычно
разделяют по их влиянию на пассивный или активный перенос. Поскольку часто оба
процесса зависимы, нарушение одного из них сказывается также и на другом.
Влияние агента на мембрану редко ограничивается изменением какого-то одного
структурного элемента, функции или одной регистрируемой характеристики. В общем
случае реакция мембраны должна рассматриваться как некий многомерный
показатель. Таким образом, рациональный способ параметризации этой реакции не может
быть определен однозначно.
Схематически выделяют следующие типы мембранотропности ксенобиотиков.
Во-первых, мембранная рецепция. Она может считаться доказанной, если
установлено, что вещество не проникает внутрь клетки, избирательно накапливается в
мембранах или специфически связывается, а также если эффекты отсутствуют в
бесклеточных системах, по крайней мере в таких, которые не содержат мембранной
фракции. Во всех этих случаях можно говорить о прямой мембранотропности.
Во-вторых, стимуляция или угнетение биосинтетических процессов,
протекающих в мембранах. Под этим подразумевается изменение активности мембранных
ферментов, скорости синтеза мембранных белков, липидов и т. д. Первичность или
опосредованность эффекта оценивается в каждом случае отдельно.
В-третьих, изменения под влиянием ксенобиотиков барьерно-транспортных
свойств мембраны. Мембранотропность такого рода может быть прямой и
опосредованной.
В-четвертых, функциональное взаимодействие с веществами, действие которых
на уровне мембран можно считать установленным. Экспериментально выявляется
стимуляция или угнетение под влиянием ксенобиотиков ряда гормональных веществ,
природных соединений, а также аналогичное обратное действие указанных веществ.
Интерпретация этих взаимоотношений сложна.
При рассмотрении всякого экзогенного влияния ксенобиотика на биологический
объект предполагается, что молекулы эффектора сначала связываются с некими центрами
сродства на мембране, инициируя тем самым определенную реакцию клетки (организма).
Соответственно такой процесс и его анализ делятся на три части:
а) установление характера и локализация центров связывания;
б) оценка сродства к ним эффектора;
в) исследование развития реакции объекта на образование комплексов центров
связывания с молекулами эффектора.
Остановимся на характеристике специализированных мест связывания эффектора и
силах, определяющих это взаимодействие.
37. Описание процессов связывания молекул ксенобиотиков с активными
сайтами биологических мембран в отсутствии диффузионных ограничений при
стехиометрии 1:1. Развитие биологической реакции на действие эффектора.
Многоканальная система передачи сигнала. (Г.О.В.Н.О)
Ряд ксенобиотиков вызывает биологическую реакцию, взаимодействуя с определенными
местами связывания на мембране. Анализ развития мембранотропных эффектов должен
опираться на совокупность модельных представлений, отражающих течение двух основных
этапов: связывание молекул эффектора с некими центрами сродства (рецептор), инициирующими
процесс, и последующее развитие реакции (биологический ответ).
При рассмотрении взаимодействия химического агента с биологическими мембранами
объектами анализа оказываются процессы доступа эффектора к мембраноактивным центрам, сам
акт их взаимодействия и последующее развитие реакции (биологический ответ).
Обычно для анализа кинетических зависимостей в токсикологии и фармакологии используются
соотношения, соответствующие случаю отсутствия диффузионных ограничений, т. е. процессы
диффузии полагаются быстрыми в сравнении с развитием реакции.
В простейшем случае, предполагая, что образование комплекса лиганд
(ксенобиотик)/мембраноактивный центр происходит при отсутствии диффузионных ограничений
со стехиометрией 1:1 и независимости мест связывания друг от друга (образование комплекса с
одним из мембраноактивных центров не влияет на взаимодействие остальных активных центров с
молекулами лиганда), реакция связывания лиганда А с активным сайтом (рецептор) R запишется в
виде

Полагая общую концентрацию мест связывания – рецепторов (занятых и незанятых) в данной


системе, равной Q, при концентрации эффектора С, имеем следующее равенство для скорости
изменения концентрации Z-комплексов лиганд-рецептор во времени в условиях избытка лиганда
(С >> Q):

Следовательно, когда процессы диффузии оказываются быстрыми в сравнении с развитием


биологической реакции, образование комплексов опишется уравнением

Развитие реакции биологического ответа на химический раздражитель обычно


рассматривается как некоторая функция количества образованных комплексов. Принято полагать,
что регистрируемая реакция  является функцией количества центров связывания, занятых
молекулой эффектора
Известно также, что для большинства процессов рассматриваемого типа зависимость (Z)
представляется выпуклой функцией, все менее возрастающей с увеличением Z и выходящей в
конце концов на плато
наблюдая за развитием реакции, мы регистрируем при 14 4 малых концентрациях лишь
сигнал, распространяющийся через посредство наиболее чувствительного канала, связывающего
элементы С и  (рис. 6.8). По мере увеличения примененной концентрации проявляются эффекты
иных каналов связи, сигналы которых, очевидно, могут отличаться по знаку (вклад отдельных
сигналов может быть как положительным (стимулирующим реакцию), так и отрицательным
(угнетающим).
Здесь можно рассмотреть два случая: а) лиганд взаимодействует с мембраноактивными
центрами одного типа, разветвление характера действия происходит на каких-то следующих
стадиях; б) лиганд взаимодействует с центрами разных типов, каждый из которых инициирует
процесс, различающийся по конечному эффекту на регистрируемую реакцию. В первом случае
справедливо представление реакции в виде  = (Z). Второй случай – взаимодействие вещества с
несколькими типами рецепторов – представляет особый интерес, поскольку взаимодействие
может происходить не только со специфическими рецепторами, но и с другими центрами
связывания. Известно, например, что некоторые биологически активные пептиды уже в довольно
низких концентрациях способны действовать неспецифически, т. е., помимо рецепторов,
модифицировать свойства клеточных мембран. Это, несомненно, должно отразиться и на
развитии регистрируемой реакции.
38.Экологическая и токсикологическая характеристика тяжелых металлов.
Наиболее часто металлы, в том числе и высокотоксичные, попадают в
окружающую среду в результате промышленных сбросов в водоемы со сточными водами,
не прошедшими эффективной очистки, а также использование пестицидов.
Тяжелые металлы вызывают острое или хроническое отравление. Токсичность
тяжелых металлов проявляется в подавлении роста и развития растений и
микроорганизмов, нанесения серьезного ущерба здоровью человека и животных.
Длительное воздействие их может вызвать развитие рака, аллергии, физических и
неврологических дегенеративных процессов.
Свинец. Основной источник – этилированный бензин. Активно всасываниется в
пищ тракте человека и накопл. в костях.
В наибольшей степени опасному воздействию свинца подвергаются рабочие,
занятые на его добыче в шахтах. Свинцовая интоксикация вызывает нарушение
биосинтеза гемоглобина на уровне ингибирования левулинатдегидратазы и гемсинтетазы.
Главной мишенью воздействия свинца при хронических отравлениях являются
центральная и периферическая нервные системы (свинцовая энцелопатия: появление
головной боли, нарушение сна, памяти, возникновение тремора, галлюцинаций и т. д.).
Некоторые растения интенсивно накапливают свинец (листья салата и бобов).
Ртуть – вещество общетоксического действия, вызывающие у людей летальный
исход, попадая в организм с питьевой водой в количестве 75–300 мг в сутки. Наиболее
токсична сулема. Ртуть характеризуется высокой нефротоксичностью, приводящей к
быстро развивающейся почечной недостаточности. Выведение ртути осуществляется
почками, через пищеварительный тракт, потовыми и молочными железами.
При отравлениях ртутью, отчетливо выражены симптомы поражений нервной
системы (парезы, параличи, нарушения зрения и слуха).
В 1953 г. в Японии у 121 жителя побережья Минамата было выявлено заболевание,
сопровождающееся ломотой в суставах, нарушением слуха и зрения - «болезнь
Минамата». На ацетиленовом производстве ртутные отходы сбрасывались в реку,
впадающую в бухту Минамата. Ртуть микробиологическим путем превращалась в
метилртуть, которая через планктон, моллюсков и рыб в конце концов концентрировалась
и дойдя до человека достигала токсичной концентрации.
Кадмий губительно влияет на организм. Накапливается в печени, почках,
поджелудочной и щитовидной железах и др. Кадмий характеризуется выраженной
нефротоксичностью при попадании в организм с питьевой водой.
Высокой чувствительностью к действию кадмия характеризуются водные
организмы. Так, пребывание рыб (гуппи, карп, карась и др.) на протяжении суток в воде с
содержанием Cd2+ 0,001–0,3 мг/л приводит к их гибели. Для кадмия период
полувыведения из организма человека составляет более 10 лет, поэтому при
систематическом попадании даже следов кадмия могут быть серьёзые последствия.
39.Модели для описания S-образных кривых при взаимодействии
ксенобиотиков с активными центрами биологических мембран. (Ж.О.П.А. я б даже
сказала пиздец. переходи ко второму вопросу, потом вернешься)
( от «Но часто кривая развития процесса»)

Один из них – это модель «биофазы». «Биофаза» – располагающийся внутри


мембраны компартмент, содержащий рецепторы и находящейся в контакте со средой.
Описание процесса проводят на базе балансовых уравнений. В этом случае можно
записать систему дифференциальных уравнений, характеризующих динамику
перемещений эффектора в компартмент при стехиометрии 1: 1следующим образом:
Решения с различными приближениями приводят к описаниям кривых,
характеризующихся наличием лаг-фазы. Аналогичный результат дает также численное
интегрирование системы. Рассмотренные выше примеры предполагают связывание с
одним рецептором одной молекулы лиганда. В принципе можно допустить существование
комплексов лиганд-рецептор RAn с любыми стехиометрическими коэффициентами.
Могут, например, существовать многовалентные места (рецепторы), образующие
комплексы RAn путем последовательного присоединения лигандов:
R +A = RA1,
RA1 + A = RA2,
......
RAn-1 +А = RAn.
Когда присоединение каждой последующей молекулы облегчается вследствие
посадки предыдущей, то говорят о положительной кооперативности, если, наоборот,
затрудняется, – имеем отрицательную кооперативность. Положительную
кооперативность можно продемонстрировать на примере связывания кислорода
молекулой гемоглобина, которая состоит из четырех субъединиц: двух - и двух -цепей.
Каждая из субъединиц может связывать одну молекулу кислорода. Оказалось, что
сродство к кислороду отдельного центра связывания (гема) тем выше, чем больше других
центров связывания уже занято молекулами кислорода.
Существует несколько характерных приемов установления признаков
кооперативности. Препарат рецепторов, насыщенный радиоактивным лигандом, можно
перенести в среду, не содержащую его, и измерить скорость диссоциации «меченых»
комплексов. При этом часть препарата помещается в раствор, содержащий высокую
концентрацию немеченого лиганда, часть – в раствор без лиганда. Если в первом случае
скорость распада комплекса выше, это может свидетельствовать о наличии отрицательной
кооперативности: нерадиоактивный лиганд, связываясь со свободными, незанятыми
радиоактивными рецепторами, ослабляет меченые комплексы. И наоборот, если в
присутствии нерадиоактивного лиганда скорость диссоциации снижается, говорят о
проявлении положительной кооперативности. Можно рассчитать константы скорости
связывания лиганда препаратом рецепторов при высоких и низких концентрациях; если
они окажутся различными, это также можно рассматривать как признак кооперативности
– положительной или отрицательной, в зависимости от того, в каком именно случае эта
величина окажется больше. Но самый популярный среди исследователей способ
выявления кооперативности – это анализ характера отличий концентрационной
зависимости количества связывающегося лиганда от классического уравнения.
Представляя полученные данные в скэтчардовских координатах, при вогнутой кривой
говорят об отрицательной кооперативности, при выпуклой – о положительной.
40. Фаго- и пиноцитоз ксенобиотиков. Определение и основные этапы.
Фагоцито́з— процесс, при котором специально предназначенные для этого клетки
крови и тканей организма (фагоциты) захватывают и переваривают твердые частицы.
Пиноцито́з — 1) Захват клеточной поверхностью жидкости с содержащимися в
ней веществами. 2) Процесс поглощения и внутриклеточного разрушения макромолекул.
Экзоцитоз — у эукариот клеточный процесс, при котором внутриклеточные
везикулы (мембранные пузырьки) сливаются с внешней клеточной мембраной.
При пиноцитозе во впячивание клеточной оболочки попадает окружающая
жидкость с содержащимися в ней веществами. При фагоцитозе клеточная мембрана как
бы обволакивает, затягивает одну относительно крупную частицу – белки,
полинуклеотиды, полисахариды, а также твердые частицы. Тем не менее в большинстве
клеток указанные вещества проходят в обоих направлениях через плазматические
мембраны.
Механизмы, с помощью которых осуществляются эти процессы, сильно
отличаются от механизмов, опосредующих транспорт небольших молекул и ионов. При
переносе макромолекул или твердых частиц происходит инвагинация (впячивание или
выпячивание) мембраны с последующим образованием пузырьков (везикул). Например,
для того чтобы секретировать инсулин, клетки, индуцирующие этот гормон, упаковывают
его во внутриклеточные пузырьки, которые сливаются с плазматической мембраной и
отрываются во внеклеточное пространство, высвобождая при этом инсулин.
Клетки способны также поглощать макромолекулы и частицы и в обратном
направлении. Этот процесс называется эндоцитозом. Тем не менее каждый пузырек
сливается только со специфическими мембранными структурами, что гарантирует
правильный перенос макромолекул и их распределение между внеклеточным
пространством и внутренностью клеток. Одни секретируемые молекулы адсорбируются
на поверхности клетки и становятся частью клеточной оболочки, другие включаются в
межклеточный матрикс, а третьи попадают в интерстициальную жидкость и (или) в кровь,
где они служат для других клеток в качестве питательных веществ или каких-то сигналов.
Пиноцитоз подразделяется на несколько этапов:
1) адсорбция на мембране молекул вещества;
2) впячивание или вы¬пячивание (инвагинация) мембраны, образование
пиноцитозного пузырька и отрыв его от мембраны с затратой энергии АТФ;
3) миграция пузырька внутрь протопласта, органеллы или наружу;
4) растворение мембраны пузырька (при действии фермента) или просто ее разрыв.
Исходя из функционирования транспортных механизмов на мембранах, последние
делят на четыре типа.
К первому типу относят мембраны, через которые транспорт ве-. ществ
осуществляется путем простой диффузии, а скорость переноса прямо пропорциональна
разности концентраций по обеим сторонам мембраны. Они препятствуют прохождению
ионов и пропускают нейтральные молекулы. Через такие мембраны быстрее всего
диффундируют молекулы веществ с высоким коэффициентом распределения в системе
масло-вода, т. е. веществ, обладающих выраженными липо- фильными свойствами.
Мембраны второго типа характеризуются наличием в них специфического
переносчика, обеспечивающего облегченную диффузию и способствуют всасыванию ряда
веществ, плохо проникающих через мембраны первого типа из-за высокой степени
ионизированности или высокой гидрофильности. Транспортируемая молекула в мембране
обратимо соединяется с переносчиком. Иллюстрацией может служить транспорт глюкозы
в эритроциты человека. Особый интерес представляет облегченная диффузия в клетку
молекулы холина. Простая диффузия ионизированной гидрофильной молекулы холина
невозможна, однако специфический переносчик быстро доставляет его в эритроциты и
другие клетки.
Мембраны третьего типа (наиболее сложные из всех) способны при
необходимости переносить вещества против градиента концентрации. Эта так называемая
система активного транспорта требует затраты энергии, высокочувствительна к
изменениям температуры.
Примерами а) транспорт Na+ и К+ в клетки млекопитающих, перенос Н+ и К+ в
клетках растений и т. д.; б) всасывание и выведение различных ионизированных и
неионизированных веществ почечными канальцами и в меньшей мере через мембраны
эпителия желудочно- кишечного тракта; в) захват бактериями неорганических ионов,
Саха¬ров и аминокислот; г) накопление ионов йода щитовидной железой;
Мембраны четвертого типа отличаются от первого типа наличием пор (каналов),
диаметр которых можно оценить по размерам самых больших молекул, проникающих
через них. Один из наиболее изучен¬ных примеров мембран четвертого типа представлен
почечным клу¬бочком в капсулах Боумана. Мембраны четвертого типа встречаются в
основном в капиллярах млекопитающих и в паренхиме почек.
41. Пассивный транспорт ксенобиотиков. Общие закономерности пассивного
транспорта. Движущие силы пассивного транспорта. Электрохимический
потенциал. (читай следующий вопрос, к этому потом вернешься)

Пассивный транспорт - перенос веществ из области высокой концентрации в


область низкой без затрат энергии.
К пассивному транспорту относятся простая и облегченная диффузия.
При простой диффузии ксенобиотики проходят через мембрану в результате
случайного молекулярного движения, и величина потока линейно зависит от
концентрации и коэффициента проницаемости мембраны для данного вещества.
«Сердцевина» мембраны представляет собой в основном гидрофобную область,
поэтому неполярные вещества сравнительно легко проникают в клетки. Гидрофобные
группы способствуют увеличению проникающей способности, полярные – ее
уменьшению (пропиловый спирт проникает в эритроциты в 3 раза быстрее, бутиловый в
10 раз быстрее, чем этиловый).Проницаемость неэлектролитов зависит также и от
липидного состава мембраны.
Пассивный перенос – это движение вещества по градиенту электро-химического
потенциала без затраты энергии, т. е. движущей силой пассивного транспорта веществ
служит градиент электрохимического потенциала.
Хорошо проникают через мембраны малые гидрофильные вещества (глицерин,
мочевина). Предполагают, что эти молекулы проходят через «поры» (каналы).
Аналогично считают, что заряженные частицы (ионы) движутся через ионные каналы.
Канал – это белковая макромолекула, субъединицы которой образуют в мембране
пору через бислой липидов. В поре имеется узкий селективный фильтр вблизи наружной
поверхности мембраны и воротное устройство вблизи ее внутренней поверхности.
Пространство между селективным фильтром и воротами получило название туннеля.
Сенсор напряжения, расположенный в липидном слое, управляет открытием ворот под
влиянием внутримембранного поля. Расширенные части канала у наружной и внутренней
поверхности образуют устья (или вестибюли).
Облегченная диффузия. Вещества, нерастворимые в липидах, с размером
молекулы более 0,3–0,4 нм, не диффундируют через мембраны. Сахара, аминокислоты
связываются с переносчиками, которые «облегчают» их прохождение через мембрану.
Такая облегченная диффузия происходит по градиенту концентрации без затрат энергии.
Механизм- обратимое соединение транспортируемого вещества со специфическим
переносчиком– комплекс – диффундирует через мембрану – комплекс диссоциирует –
свободный переносчик диффундирует. Цикл повторяется.
Есть тетрамерная модель облегченного переноса – транспорт осуществляется не в
результате присоединения субстрата к переносчику, а путем «внутреннего» переноса
субстрата через белковый тетрамер, встроенный в мембрану (фиксированный
переносчик). Тетрамер состоит из две из 2 субъединицс высоким сродством к субстрату и
2 с низким. 2 конформации, переход происходит, когда молекула субстрата
присоединяется к одной из субъединиц – причиной переноса субстрата через мембрану.
Отличия между облегченной и простой диффузией.
1. При простой диффузии поток вещества пропорционален внешней концентрации.
При облегченной диффузии кривая, описывающая поток веществ через мембрану,
стремится к насыщению при концентрациях, обеспечивающих связывание всех молекул
переносчика.
2. При облегченной диффузии из-за наличия переносчиков есть зависимость
проникающей способности вещества от его химической структуры и от пространственной
конфигурации его молекул.
3. Облегченная диффузия может ингибироваться некоторыми соединениями,
которые блокируют переносчик.
В плазматических мембранах многих животных клеток существуют различные
белки-переносчики, которые действуют как системы симпорта и антипорта.
Для регуляции переноса веществ используются ионофоры –это небольшие
гидрофобные молекулы, которые растворяются в липидных бислоях и повышают их
Существует два класса ионофоров – подвижные переносчики ионов и
каналообразующие ионофоры. Ионофоры обоих типов действуют, экранируя заряд
транспортируемого иона так, чтобы последний мог пройти гидрофобную внутреннюю
область липидного бислоя. Поскольку ионофоры не связаны ни с каким источником
энергии, они лишь позволяют ионам двигаться по электрохимическим градиентам.
Примером каналообразующего ионофора является грамицидин А. – линейный
пептид, состоящий из 15 аминокислот; все они имеют гидрофобные боковые цепи –
образует трансмембранный канал, позволяющий моновалентным катионам передвигаться
по электрохими-ческим градиентам.
Подвижный переносчик (ионофор) валиномицин осуществляет перенос ионов
калия через мембраны по его электрохимическому градиенту – полимер и имеет
кольцеобразную структуру. Наружная гидрофобная часть его молекулы состоит из
боковых цепей валина и контактирует с углеводородной сердцевиной липидного бислоя.
42. Определение термина «ксенобиотик». Масштабы химического загрязнения
биосферы. Основные типы и причины роста глобального химического загрязнения.
Ксенобиотики – чужеродные для организма вещества. чужеродным: по отношению
к конкретному виду организмов (широкая трактовка термина) или по отношению ко всей
биосфере (узкая трактовка термина). Однако и сам термин ксенобиотик довольно
условный.
Выделяют следующие типы глобального химического загрязнения биосферы:
-загрязнение газообразными веществами;
-тяжелыми металлами;
-удобрениями и биогенными элементами;
-органическими соединениями;
-радиоактивными веществами (радионуклидами).
Серьезные экологические проблемы, возникшие перед человечеством и
биологическими науками, в частности ксенобиологией, связаны с действием двух
основных факторов: быстрым повышением народонаселения в мире (демографический
взрыв): с I млрд человек в 1825 г. до 6,0 млрд в 2000 г. и ростом промышленного
производства, приведшим к большому антропогенному прессу на природу.
К основным причинам, усложнившим экологическую проблему, можно
отнести следующие:
-значительное увеличение объема промышленного производства, связанное с
повышением производительности труда;
-появление экологически опасных видов техники и технологии;
-накопление на химпредприятиях больших запасов опасных токсических веществ;
-резкое повышение расходования природных ресурсов (нефть, газ, уголь, сланцы) с
выбросом продуктов из хозяйственного использования в биосферу;
-повышение сложности технических систем, с которыми оперирует человек,
приводящее к увеличению частоты промышленных аварий и катастроф.
В настоящее время считают, что в биосфере находится более 6 млн
индивидуальных химических соединений, не говоря уже об их комбинациях. Из всех
веществ, имеющихся в биосфере, 90 % – синтетического происхождения, которые в
подавляющем большинстве являются для организма чужеродными.
43. Неорганические ксенобиотики. Металлы. Двухфазность биореакции на
действие тяжелых металлов. Факторы, способствующие хелатообразованию.
Биологические эффекты хелатирующих агентов определяются действием самих
металлов на отдельные клетки, органы и т. д.
Живые организмы нуждаются в катионах металлов: медь, железо, молибден,
кобальт и иногда марганец принимают участие в ОВР; действие цинка, магния и
марганца связано с процессами гидролиза и переноса групп и тд
Когда речь идет о тяжелых металлах, то многие из них необходимы в следовых
количествах. Ряд металлов, например свинец, ртуть и др., являются чужеродными.
Факторы:
Повышение сродства к хелатирующим агентам является следствием уменьшения
ионного радиуса. С увеличением валентности металла происходит уменьшение его
радиуса
Хелатообразование зависит от степени ионизации хелатообразующих агентов.
Вещества, обладающие меньшим сродством к металлам за счет различий в значениях рКа
могут образовывать значительно больше анионов, чем другие агенты. Вещество,
обладающее меньшим сродством к металлу, может присоединить большее количество
катионов металла, чем вещества, у которых это сродство больше.
Еще одним фактором, влияющим на относительное сродство ряда металлов, служит
изменение окислительно-восстановительного потенциала металла, вызванного
образованием хелатных соединений с металлами, имеющими переменную валентность
(это можешь не читать)
Наличие двухфазной реакции организма на металлы свидетельствует о
существовании двух разных механизмов действия хелатирующего агента в биологических
системах:
I – удаление металлов из клетки или «маскировка» их в клетке (в виде
комплексов)
II – накопление в клетке металлов в большем количестве, чем в обычных
условиях. Дальнейшее подразделение зависит от того, являются ли исследуемые металлы
жизненно важными или токсичными для организма.
Механизм I. Большинство хелатирующих агентов получили распространение в
качестве антидотов, предназначенных для «маскировки» или удаления из организма
токсичных металлов, случайно попавших в организм
Антидоты подразделяются на 4 группы препаратов:
- химические противоядия контактного действия;
- химические противоядия парентерального действия;
- биохимические противоядия;
- фармакологические противоядия. Первый антидот – димеркапрол, при
отравлениях мышьяксодержащим боевым отравляющим веществом.
Механизм II (накопление) обусловлен таким явлением, как перевод вещества из
одной формы в другую, и облегчает поступление кб-ка в организм. В качестве примера
можно привести использование хелатообразования для подкормки деревьев железом.
Кооперативный эффект – явление возрастания химической актив-ности
ксенобиотика вследствие хелатообразования
В зависимости от количества вступивших во взаимодействие атомов металлов и
лиганд могут образовываться комплексы 1:1 (бидентатные лиганды), 1:2 и др.. Комплексы
в соотношении 2:1 могут образовываться в присутствии избытка лигандов.
44. Характеристика связи процессов ионизации молекул ксенобиотиков с их
биологической активностью.
В зависимости от степени ионизации ксенобиотики обладают различной
биологической активностью:
1) ксенобиотики, обладающие большей биологической активностью в
ионизированном состоянии. Известно, что алифатические амины, при рН 7
существующие в виде катионов, проявляют бактерицидное действие. Было доказано, что
при повышении рН антибактериальное действие усиливается за счет повышения степени
ионизации (анионной) рецепторов бактерий. В 1941 году ученые доказали, что существует
количественная связь между антибактериальным действием и степенью ионизации по
катионному типу.
2) ксенобиотики, обладающие большей биологической активностью в
неионизированном состоянии. Неионизированные вещества могут обладать очень
сильным физиологическим действием (эфир, хлороформ). В 1921 г Вермст обнаружил,
что многие слабые кислоты наиболее полно проявляют своё действие в неионизированном
состоянии (салициловая кислота-нейтральные молекулы ингибируют деление клеток).
Также было доказано, что кол-во вещества, необходимое для эффекта, остается
постоянным независимо от рН, если рН на 1 единицу меньше, чем рКа, потому что не
происходит ионизации ксена. Эффективность слабых оснований повышается с
повышением рН, эффективность слабых кислот повышается с понижением рН, в обоих
случаях идёт подавление ионизации.
3) ксенобиотики, проявляющие биологическое действие в виде ионов и
неионизированных молекул. Многие вещества, проникнув в клетки в неионизированном
состоянии, проявляют свое действие как ионы (поступление бензойной кислоты в клетки
дрожжей обратно пропорционально степени ионизаци, хлоридин-поступает в виде
нейтральных молекул, действуют катионы). Но обнаружено, что у большинства веществ,
активных в неионизированном состоянии, ионы также обладают активностью
(фунгицидное действие динитрофенола). Те есть вещества, проявляющие свое действие в
виде ионов и неионизированных молекул, и вещества, проникающие в виде
неионизированных молекул и вызывающие эффект в виде ионов.
45. Поверхностные явления в системах воздух-вода, масло (липид) - вода.
Классификация поверхностно-активных веществ. Мицеллообразование. Виды
мицелл.
Ван-дер-Ваальсовы силы обеспечивают взаимное притяжение всех молекул,
находящихся в контакте друг с другом. На границе воздух-вода молекулы испытывают
незначительные воздействия воздуха, поэтому притяжение их жидкостью почти не имеет
противодействия. В результате молекулы на поверхности утягиваются вглубь, и
поверхность приобретает фигуру с минимальной площадью-шар, поэтому форма капель
жидкости-сферическая.
Амфифильные вещества стремятся сконцентрироваться на границе раздела
несмешивающихся жидкостей. Молекулы состоят из гидрофильной головки и
гидрофобного хвоста. И на границе раздела фаз масло-вода амфифильные вещества
располагаются так, что гидрофильная головка обращена к воде, а хвост размещается в
масле. Накопление амфифильного вещества на границе раздела прекращается при
образовании мономолекулярного слоя. Типичные представители амфифильных
ксенобиотиков – ПАВ.
По характеру диссоциации ПАВ делятся на:
1) анионные - функциональные группы в результате ионизации образуют анионы,
обуславливающие поверхностную активность,
2) катионные - образуют катионы,
3) неионогенные - практически не образуют ионов в воде,
4) амфолитные – образуют в зависимости от рН катионные или анионные
соединения.
При высокой концентрации амфифильных веществ наступает резкое изменение
поверхностного натяжения (пониженное), осмотического давления и электропроводности,
обусловленное появлением новой диспергированной фазы, образованной мицеллами.
Мицеллы – агрегаты, состоящие из множества молекул, они термодинамически стабильны
и не изменяются до тех пор, пока под действием внешних факторов не сместится
равновесие, в котором находилась система.
Мицеллообразование можно представить поэтапно:
1) при низких концентрациях молекулы детергента связываются с мембранами
посредством внедрения во внешнюю фазу липидного бислоя без существенного
изменения его структуры,
2) при повышении концентрации молекул становится достаточно для
дестабилизации мембран. ПАВ встраиваются в мембрану, могут образовывать поры,
довольно крупные, через которые могут проникать крупные молекулы,
3)при больших концентрациях вся мембрана перемешивается с детергентом, что
приводит к фазовому переходу – распадение на смесь мицелл, содержащих ПАВ-липид
или ПАВ-липид-протеин.
4) при ещё большем увеличении концентрации ПАВ происходит полное разделение
фракций белков и липидов.
Виды мицелл: При концентрациях ПАВ в растворе начинают формироваться
сферические мицеллы. Далее, с увеличением концентрации ПАВ строение мицелл
усложняется: сферические превращаются в глобулярные (сплюснутые с полюсов сферы) и
цилиндрические мицеллы. За счёт объединения цилиндрических мицелл, могут
формироваться ориентационно упорядоченные гексагональные мицеллярные структуры.
Далее, в растворе образуются пластинчатые мицеллы, имеющие бислойную структуру из
молекул ПАВ. Возникновение бислоя приводит к формированию дискообразных или
пластинчатых мицелл. В зависимости от природы ПАВ из пластинчатых бислойных
мицелл формируется упорядоченная многослойная структура, называемая ламеллярной
фазой. Коллоидные растворы, содержащие ламеллярную фазу, находятся в
жидкокристаллическом состоянии. При дальнейшем увеличении ПАВ в растворе не
только изменяется форма и увеличивается размеры мицелл, но и происходит их активное
объединение. При концентрации выше точки гелеобразования система становится
связнодисперсной из-за возникновения сплошной гелеобразной структуры из мицелл.
46. Наноматериалы. Токсикологическая характеристика техногенных
наноматериалов. Оценка их безопасности. (большой)
Для наночастиц характерна высокая стабильность. Они практически не
подвержены биотрансформации и не элиминируются из клеток, вызывая в них
деструктивные процессы.
Негативное влияние наночастиц на окружающую среду связано с повышенной
адсорбцией ими ксенобиотиков, что резко расширяет возможности транспорта внутрь
клеток и клеточных органелл, нарушая их биологические функции. Наночастицы не
распознаются защитными системами организма.
Токсикологические эффекты наночастиц зависят от их размеров. Чем меньше
размер наночастиц оксида железа, тем дольше они находятся в крови.
Сегодня появился термин «зеленая нанотехнология», как способ создания и
использования наноматериалов и нанопродукции без нанесения ущерба окружающей
среде и здоровью человека.
Согласно решению Пленума Научного совета по экологии человека, безопасность
наноматериалов должна оцениваться по следующим основным блокам методически
значимых проблем:
– методы обнаружения, идентификации и количественного определения
наноматериалов в объектах окружающей среды, пищевых продуктах и биологических
средах, позволяющие отличить наноматериалы от их аналогов в традиционной, то есть
макродисперсной форме;
- изучение взаимодействия наноматериалов с липидами, белками, нуклеиновыми
кислотами (ДНК, РНК, клеточные мембраны, рибосомы, ферменты, цитохромы Р-450) в
системах in vitro;
– изучение механизмов проникновения наноматериалов через биомембраны и
связывания с мембранными рецепторами в системе in vitro;
– изучение изменения характеристик наночастиц в составе модельных систем,
воспроизводящих различные среды организма (желудочное и кишечное содержимое,
кровь, лимфа, желчь, моча и др.);
– определение параметров острой, подострой и хронической токсичности,
органотоксичности (нейро-, гепато-, кардио-, иммуно-, нефротоксичность и др.) и
отдаленных эффектов (мутагенность, эмбриотоксичность, тератогенность,
канцерогенность), а также распределения наноматериалов по органам и тканям;
– определение параметров I и II фазы метаболизма ксенобиотиков и системы
антиоксидантной защиты;
– изучение влияния наноматериалов на экспрессию генов, генотоксичность,
апоптоз, протеомный и метаболомный профили, потенциальную аллергенность;
– изучение влияния в моделях in vitro выживаемости пробиотических
микроорганизмов нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта в присутствии
наноматериалов, процессов всасывания наноматериалов в желудочно-кишечном тракте на
моделях in situ и in vivo и определение влияния наноматериалов на микробиоценоз
желудочно-кишечного тракта.
Как пример можно привести проведенную оценку риска для трех областей
окружающей среды – воды (реки и озера), воздуха, почвы швейцарскими специалистами.
Авторы исследования рассмотрели весь жизненный путь продуктов, содержащих
наночастицы – от производства до утилизации, и оценили риск их использования для трех
областей окружающей среды: воды, воздуха, почвы. Риск выражался как отношение
прогнозируемой концентрации в окружающей среде к концентрации, которая не вызывает
отрицательных эффектов. Материалы, для которых это отношение меньше единицы,
считаются безопасными.
Результаты проведенного моделирования показали, что величины прогнозируемой
концентрации в окружающей среде для углеродных нанотрубок (УНТ) – самые низкие.
Частицы наносеребра и нанооксида титана в основном находятся в воде и почве, при этом
содержание наносеребра в 20–200 раз ниже, чем наноTiO2. УНТ в воду практически не
попадают. То есть в настоящее время УНТ не представляют риска для окружающей
среды. А вот прогнозируемая концентрация наноTiO2 в воде такова, что возможен
значимый риск.
47. Экологическая и токсикологическая характеристика пестицидов,
удобрений и биогенных элементов.
Среди КБ особое место занимают средства защиты сельскохозяйственных растений
от сорняков, насекомых, грибов – пестициды.
Применение пестицидов приводит к возникновению проблем экологических и
медицинских. Это связано с их высокой токсичностью, мутагенностью и
канцерогенностью. Некоторые из них превращаются в более токсичные продукты.
Способностью мигрировать в экосистеме и биосфере.
Наиболее широко распространены два класса пестицидов – фосфорорганические
(ФОП) и хлорорганические (ХОП) пестициды.
ФОП – вызывают тяжелые отравления людей как в условиях
сельскохозяйственного производства, так и в быту. Бытовые отравления хлорофосом
характеризуются высокой степенью летальности (20–30) %. В основе токсического
действия ФОП лежит их взаимодействие с холинэстеразой (ХЭ), ведущее к торможению
ее активности и последующему быстроразвивающемуся нарушению метаболизма
ацетилхолина - подавление передачи нервного импульса в холинреактивных системах.
При этом наблюдается слюнотечение, отек легких, колики, тошнота, ухудшение зрения,
увеличение кровяного давления, мышечные спазмы и судороги, паралич дыхательных
путей и др.
ФОП оказывают повреждающее действие на мембрану: снижают скорость АТФ-
зависимого транспорта Са2+ в микросомах печени крыс и тд. Наиболее вероятные пути
поступления ФОП в организм человека и животных – ЖКТ, кожу и ингаляционным
путем.
Быстро деградирует в почве (в почве не накапливается). При попадании ФОП в
водоемы их деградация идет преимущественно по гидролитическому пути.
ХОП стали применяться давно. Классический представитель (ДДТ). ДДТ – это
типичный контактный яд, который сравнительно быстро проникает через кожу. ДДТ
нарушает нормальный цикл в мембранах нервных клеток, влияя на Na-насос, поэтому
после возбуждения не происходит восстановления первоначальной величины потенциала
покоя.
Высокая кумулятивная способность, что и определяет возможность хронических
отравлений. Длительное пребывание ХОП в почве приводит к накоплению их в
культурных растениях.
У человека ХОП поражает нервную, пищеварительную, кроветворную и сердечно-
сосудистую системы. Являясь высоколипофильными соединениями, ХОП вызывают
повреждения биологических мембран.
Общее потребление минеральных удобрений составляет около 100 млн т в год.
Наиболее опасны азотные удобрения, т.к. высокое содержание нитратов и нитритов в
питьевой воде, в овощах, кормах токсикологически опасно для человека и животных.
Попадая вместе с пищей в организм, нитраты микробиологическим путем
восстанавливаются до нитритов, в результате чего в крови образуются нитрозил-ионы,
которые препятствуют связыванию кислорода с гемоглобином, т.к. окисляют
двухвалентное железо до трехвалентного
Растения используют часть внесенных минеральных удобрений. Хорошо
растворимые в воде удобрения, вымываются дождями и попадают в грунтовые и
поверхностные воды.
48. Основные типы химических связей, определяющие связывание молекул
ксенобиотиков с мембранактивными сайтами (рецепторами).
Рецептор – мембранный центр связывания, взаимодействие которого с молекулой
КБ инициирует реакцию клеточных мембран.
Оказавшись в непосредственной близости от места связывания рецептора,
молекула в-ва немедленно вступает во взаимодействие. Длительность и избирательность
определяется особенностями химической природы в-ва и рецептора, и типом связей
между ними.
1) Ковалентная связь образуется за счет обобществления 2мя атомами пары
электронов, принадлежащих этим атомам. Эта связь значительно прочнее остальных.
Энергия = 230-1000 КДж/моль (С-С, С-О 350КДж/м; С=С 600). Если действие веществ
можно предотвратить простым отмыванием, то это значит, что ковалентная связь не
образовывалась. Если отмывается с трудом, то это не означает образование ковалентной
связи, возможно просто включение в полимер. Характерна необратимость.
2) Электростатические (ионные) взаимодействия: эти связи играют важную роль
при взаимодействии веществ с мембранными структурами, это объясняется тем, что
притяжение атомов происходит на большом расстоянии. 2я особенность – легкость
обмена ионами. В биологических средах эти связи долго не существуют из-за
конкурирующих ионов, но может длительно существовать если расстояние способствует
образованию еще и короткодействующих связей. 20КДж/м. Обычно связь возникает
между ионами:
-ионная связь (NaCl) - между ионами, связь не имеет строгой направленности в
пространстве. Энергия взаимодействия обратно пропорциональна квадрату расстояния
между молекулами.
-ион-дипольная (пример: вода+ион = гидратирование ионов): между молекулой,
некоторые из составляющих атомов несут частично положительный, а другие частично
отрицательный заряд, и ионом. Связь чуть слабее, чем ионная.
-слабые диполь-дипольные связи - между 2мя диполями, энергия взаимодействия
обратно пропорциональна третьей степени расстояния между молекулами.
3) Водородные связи образуются только на малых расстояниях между атомами,
строго ориентировано в пространстве. Обладают строгой избирательностью и
направленностью, что очень важно при связывании вещества с рецептором и в
стабилизации структур молекул. Энергия 12-20 кДж/моль. Легко разрываются при
нагревании. Чем больше различия в сродстве к электрону у двух атомов, связанных
водородной связью, тем она прочнее. Примеры твердых в-в, механические свойства
которых зависят от этой связи – лёд, бумага, нейлон.
4) Ван-дер-Ваальсовы связи могут возникать только когда геометрия молекул дает
возможность 2 атомам подойти достаточно близко друг к другу. Это играет очень важную
роль при соединении веществ с рецептором. Взаимодействие между антигеном и
антителом происходит за счет сил с малым радиусом действия – водородные и ван-дер-
ваальсовы. Образуются благодаря наличию энергии молекул, достаточной для колебания
их атомов. Инициируются временные диполи в соседних молекулах, что приводит к
возникновению притяжения между ними. Энергия сил изменяется обратно
пропорционально седьмой степени расстояния. 20КДж/м. Прочность связи увеличивается
с увеличением относительной атомной массы.
49. Автоматизированная система оценки первичной безопасности
ксенобиотиков. (большая)
Для применения на практике подходят только те соединения, которые подверглись
биологическим испытаниям и только в соответствии с результатами данных испытаний.
Испытания позволяют сформировать информационный массив знаний о биологической
активности каждого ксенобиотика и распределить их по видам этой активности.
Скрининг – массовое эффективное испытание ксенобиотиков на биологическую
активность. Система тестирования ксенобиотиков по видам биологической активности
может включать два взаимосвязанных подхода. Первый – уровень целевого объекта
испытаний, на который нацелено действие искомого ксенобиотика исходя из целей
поиска, и второй подход – совокупность тест-объектов, базирующихся на использовании
более примитивной организации живой материи, чем целевой. Для построения системы
испытаний необходимо применять принцип биологического эпиморфизма – используя как
можно меньше количество тест-объектов, определить большее количество биологических
активностей. Регистрируемые биологические реакции на тест-объектах называются тест-
реакциями.
Отбор тест-объектов проводится по следующим критериям:
1) молекулярные рецепторы (самый надёжный), 2) принцип высокой гомологии
надмолекулярной организации и молекулярный состав (близость по структуре); 3)
функциональное сходство молекулярной системы; 4) органное или тканевое
происхождение, при тестировании адаптогенов, витаминов, наркотиков; 5) близость
патологического состояния тест-объекта и реального объекта.
Организация испытаний КБ. Первый уровень – базовый.
Базовый уровень состоит из трех подуровней. Биологическая активность ксенобиотика
уже включена в его химическую структуру. Поэтому на первом подуровне сравниваем
структуру вещества с базой. На втором подуровне определяем дополнительные физико-
химические характеристики веществ. На третьем подуровне в систему вводятся тест-
объекты. Итог - биологический «паспорт».
Второй – надстройка, работает в режиме ориентации на две цели: (1) нахождение
химического соединения, обладающего полезными для и (2) вредными для человеческого
организма биологических активностей испытуемых химических соединений.
Сначала работаем на упрощенных системах, нам необходимо предсказать вид
биологической активности и определить ксенобиотики, которые не обладают
определенными активностями или токсичны.
Основная идея предыспытания состоит в том, чтобы реализовать следующий
методологический подход. Заменить модели организменного уровня некоторой
совокупностью моделей доорганизменного уровня. Таким образом, достигается цель
более экономного расхода химического соединения на единичное испытание и реальнее
становится автоматизация испытаний с технологической стороны.
Проблема первичной оценки биологической безопасности решается на
субклеточном и тканевом уровнях в автоматизированном режиме, включая 3 подсистемы:
информационная – автоматизированный сбор, обработка полученных
теоретических и экспериментальных данных и формирование «паспорта» ксенобиотика.
управляющая – последовательное переключение на соответствующую тест-
систему, осуществление смены и дозировки экспериментальных растворов, поддержание
заданного (временного) режима испытаний и т.д.
экспериментальная – непосредственное выявление биологической активности
ксенобиотиков, включающее многоуровневый подбор тест-объектов, позволяющий
провести оценку токсических, мутагенных, канцерогенных и др. эффектов.
Установление сочетанных эффектов позволяет прогнозировать результаты
комбинированного действия ксенобиотика и физического фактора; выявить действие
ксенобиотика, не проявляющегося в отсутствие физфакторов; подобрать комбинацию
соединений, уменьшающих сенсибилизацию биологических объектов по отношению к
физфакторам; использовать полученную информацию для повышения надежности
прогноза и т. д.
50. Ионизация, ее природа. Константа и степень ионизации молекул
ксенобиотиков.
Поскольку незаряженные молекулы и ионы довольно рознятся по своим физико-
химическим характеристикам, то явление ионизации, т.е. приобретение заряда,
заслуживает внимания.
За исключением немногих солей (галогениды ртути, кадмия, свинца), в
разбавленных растворах соли полностью ионизированы, соответственно биологическое
действие соли не может быть больше или меньше суммы её ионов, однако данное условие
неверно для солей, образованных слабой кислотой или слабым основанием,
соответственно биологические эффекты будут суммироваться с биологическим действием
незаряженных частиц, высвободившейся при гидролизе данной соли. Сильные кислоты и
сильные основания полностью ионизированы при значениях рН от 0 до 14, в то время как
слабые кислоты и основания в этих пределах имеют различную степень ионизации.
Существенной частью теории Аррениуса является применение закона
действующих масс для описания состояния ионного равновесия. Соотношение
произведения ионов, которые образовались при ионизации слабой кислоты или
основания, к концентрации неионизированных молекул всегда является постоянной
величиной и определяет константу ионизации (кислотности) Ка:
Например, Ka = ¿ ¿ Ka = ¿ ¿
Величины констант ионизации слишком малы, поэтому удобнее использовать их
отрицательные логарифмы:
pKa = – lgKa
Чем сильнее кислота, тем ниже её pKa. Степень ионизации любого вещества можно
рассчитать при известных величинах рН раствора и pKa вещества с помощью выражений
(эта зависимость выражается сигмовидной кривой):
100
степень ионизации (%) = – для кислот;
1+ 10( pKa – pH )
100
степень ионизации (%) = – для оснований;
1+ 10( pH – pKa )

Эти уравнения показывают, что степень ионизации данной кислоты (основания) зависит от
рН. Эта зависимость не является линейной, а выражается сигмовидной кривой.
Анализ кривой показывает, что небольшое изменение рН в определенной области может
вызывать сильные изменения ионизации. Значение рН, при котором кислота или основание
ионизированы наполовину, эквивалентно их рКа. Если рН на одну единицу ниже, чем рКа, то
кислота ионизирована на 9 %, а основание – на 91 %.
В зависимости от степени ионизации ксенобиотики обладают различной
биологической активностью и их можно разделить на три большие группы.
1. Ксенобиотики, обладающие большой биологической активностью в
ионизированном состоянии.
2. Ксенобиотики, более активные в неионизированном состоянии.
3. Ксенобиотики, проявляющие биологическое действие в виде ионов и
неионизированных молекул.
51. Экологическая и токсикологическая характеристика моно-, диоксида
углерода и озона.
В течение последних десятилетий идёт рост содержания СО2 в атмосфере за счет
сжигания ископаемого топлива, вырубки лесов, окисления органического вещества почвы.
После 1957 г. содержание СО2 увеличивалось на 0,3–0,5 %. Такие темпы прироста СО2
сохраняются. Увеличение содержания СО2 может привести к нестабильности климата,
засухам, снегопадам, наводнениям, и вызвать изменение климатических зон и глобальное
потепление. CO2 образуется при полном сгорании углеродсодержащего топлива.
СО образуется при неполном сгорании углеродсодержащих веществ. Набольшие
его количества образуются при извержениях вулканов и окисления метана в атмосфере.
Внутри помещений - при неполном сгорании топлива и курении. СО представляет собой
опасность для человека потому, что может связывается с гемоглобином крови, а также
образовывает токсичные карбонилы. Насыщение гемоглобина СО концентрацией 0,1% в
воздухе происходит за 6 часов. Накоплению СО в атмосфере препятствуют высшие
растения, водоросли микроорганизмы. У высших растений СО может связываться с
серином или происходит его окисление до СО2. В почве некоторые микроорганизмы
частично включают СО в органические соединения или окисляют до СО2.
Озон: озон, образовавшийся из выхлопных газов у поверхности быстро
разрушается, а озон, образованный фотохимически в верхних слоях тропосферы из
выхлопов самолета, вносит определенный вклад в ее нагревание. Концентрация озона в
стратосфере непрерывно понижается благодаря действию фреонов и других
антропогенных продуктов, при этом уменьшается поглощение солнечных лучей в
стратосфере и растет доля энергии, которая приходится на земную поверхность. Таким
образом, происходит нагревание земной поверхности. Высокая окисляющая способность
озона и образование во многих реакциях с его участием свободных радикалов кислорода
определяют его высокую токсичность. При действии озона на организм человека может
наблюдаться отек легких, нарушение нормального движения мерцательных волосков в
бронхах. Систематическое вдыхание озона приводит к накоплению в легких
ксенобиотиков, увеличивая опасность заболевания раком, поскольку канцерогенные
вещества задерживаются в легких дольше обычного. При концентрации озона около 2
мг/м3 наблюдается усталость, головная боль, резь в глазах и раздражение слизистых
оболочек. Чувствительные растения могут проявлять признаки угнетения после часовой
обработки озоном. Озон оказывает сильное влияние на структуру биомембран, чем
обусловлен его биоцидный эффект.
52. Техногенные наноматериалы и окружающая среда: миграция, виды
взаимодействия с объектами экосистем. Нанотехнологии в системе защиты
окружающей среды.
Для наночастиц характерна высокая стабильность. Они практически не
подвержены биотрансформации и не элиминируются из клеток, вызывая в них
деструктивные процессы. Основное токсическое действие наночастиц обусловлено не
самим веществом, из которого они получены, а их электрофизическими особенностями,
способствующими доставке токсичных соединений к активным центрам рецепторов и
формированию аномально большого количества свободных радикалов.
Использование наночастиц в различных областях народного хозяйства оказывают
влияние на различные компоненты окружающей среды:
– Пищевая упаковка (наноглина, серебро, TiO2) – почва, отходы.
– Фармацевтические препараты (наноносителли, нанопрепараты) – грунтовые и
сточные воды, почва.
– Обработка воды и восстановление окружающей среды (железо, полиуретан) –
поверхностные, грунтовые и сточные воды, почва.
– Косметические продукты (TiO2, ZnO, фуллерен) – поверхностные и сточные
воды.
– Краски и покрытия (TiO2, серебро, квантовые точки) – воздух, поверхностные и
сточные воды.
Нанотехнологии в системе защиты окружающей среды:
- нанодатчики;
- фильтры очистки воздушной и водной среды;
- наноматериалы для очистки окружающей среды от загрязнения.
Наноматериалы воздействуют на окружающую среду и в виде отходов
нанопроизводства, а также при их превращении в отходы потребления.
По решению Пленума Научного совета по экологии человека приоритетными
задачами, обеспечивающими качество и безопасность нанопродукции и нанопроизводств,
были признаны «разработка гигиенических нормативов, определяющих безопасные
уровни приоритетных видов наноматериалов в воздухе рабочей зоны, населенных пунктов
и жилых помещений, питьевой воде, продуктах питания и других объектах внешней
среды, а также регламентация процессов производства, транспортировки, использования и
утилизации токсичных наноматериалов, которая исключала бы возможность их
воздействия на человека в опасных для здоровья масштабах».
Для обеспечения безопасного будущего человечества необходимо проводить
разработки в области нанотехнологий и наноматериалов параллельно с изучением их
экологических и гигиенических аспектов, причем результаты анализа должны находиться
в открытом доступе.
Как пример можно привести проведенную оценку риска для трех областей
окружающей среды – воды (реки и озера), воздуха, почвы швейцарскими специалистами.
Авторы исследования рассмотрели весь жизненный путь продуктов, содержащих
наночастицы – от производства до утилизации, и оценили риск их использования для трех
областей окружающей среды: воды, воздуха, почвы. Риск выражался как отношение
прогнозируемой концентрации в окружающей среде к концентрации, которая не вызывает
отрицательных эффектов. Материалы, для которых это отношение меньше единицы,
считаются безопасными.
53. Периоды и этапы формирования представлений о биологической
активности химических соединений.
В процессе развития знаний о биологической активности веществ выделяют
несколько периодов и этапов.
Первый период – освоение новых природных источников биологически активных
веществ предками человека (период до завершения формирования второй сигнальной
системы). Он занимает около 600–800 тыс. лет и распространяется до появления человека
разумного. В первом периоде отсутствовали письменная традиция, биологически
активные вещества использовались прежде всего как пища: накопление и передача знаний
осуществлялась в пределах узких групп.
Второй период – первичное накопление знаний о биологически активных
веществах человеком разумным относится к истории человека: от первых сообществ
человека разумного до античного мира (40–2,5 тыс. лет до н. э.). Реальное накопление
знаний о биологической активности веществ осуществляется в основном путем случайной
выборки или «проб на зуб». Однако добавляемые сведения осознаются посредством
мышления и передаются с помощью устной, а далее и письменной речи. Этот период
включает два этапа:
– первый – до новых разделений труда;
– второй этап – начало профессионализма в передаче знаний о биологически
активных веществах.
В этом периоде появляется письменность, формируются преемственные группы
людей, добывающие, хранящие и передающие знания о биологически активных
веществах, активно развиваются технологии получения новых веществ. Накопление
эмпирических сведений, как правило, – удел узкой кастовой группы.
Третий период: от античных времен до современности. Для него характерно все
возрастающее доминирование логического мышления, стремление к систематизации
знаний о биологически активных веществах, совершенствование письменной традиции
передачи знаний, развитие экспериментальных и теоретических способов поиска и
определения биологической активности, постоянное увеличение числа задач, для решения
которых применяются биологически активные вещества.
Этот период можно подразделить на четыре этапа:
– первый – становление системы знаний о биологически активных веществах;
– второй – слияние химии и медицины;
– третий – формирование фармакологии на основе достижений химии, биологии,
медицины;
– четвертый – современные биотехнологии и ЭВМ в сфере поиска и создания
новых биологически активных веществ.
(если нужно перейти/вернуться к другому вопросу, забей на этот кусок)
На первом этапе систематизируются достигнутые ранее знания, предпринимаются
отдельные попытки ввести экспериментальные модели для определения биологически
активных веществ, получение новых активностей конструированием смесей в
соответствии с опытом и умозрительными концепциями. Основной целью поиска новых
биологически активных веществ является создание лекарств. Этот этап завершается в
первой половине ХVI в.
На втором этапе возрастает осознанный поиск новых химических веществ с
заданными свойствами и проводится их испытание на биологическую активность.
Основная цель – создание лекарств.
Третий этап проходит под знаком возрастающего прогресса химии:
неорганической, потом органической и биоорганической. Создается мощный арсенал
новых химических соединений, в т. ч. и не существовавших в природе. Постоянно
расширяется сфера применения биологически активных веществ: фармакология, сельское
хозяйство, пищевая промышленность, парфюмерия и т. д.
Четвертый этап – промежуток с 1950-х гг. до настоящего времени. С начала 50-х гг.
происходит стремительное накопление знаний о молекулярном строении основных
компонентов живого. Разрабатываются методы синтеза белков и нуклеиновых кислот.
Успехи молекулярной биологии и молекулярной генетики, развитие технологий генной,
клеточной и биохимической инженерии способствовали созданию совершенно новой
концепции в понимании механизма действия биологически активных веществ, в их
химическом и биоинженерном синтезе.
54. Роль природы превращений и процессов перемещения ксенобиотиков для
функционального состояния экосистем. (большой)
Для ксенобиотиков, попавших в экосистемы и входящие в них организмы, можно
выделить следующие явления.
1. Реакции превращения ксенобиотиков (ОВР, гидролиз, конъюгация, деградация).
2. Адсорбция ксенобиотиков на частицах биологического и абиотического
происхождения. 3. Переход ксенобиотиков из одной среды в другую.
Реакции превращения.
Важное значение имеет скорость превращения ксенобиотиков. Высокая скорость
превращения обычно приводит к исчезновению вещества и, следовательно, к
исчезновению проблемы, связанной с загрязнением окружающей среды; при медленном
разрушении вещество сохраняется длительное время, что может вызвать его
концентрирование.
Ферментативные превращения.
Одним из типов конъюгирования ксенобиотиков может считаться их
алкилирование. Для дальнейшей судьбы ксенобиотика в организме и биогеоценозе очень
важно, что при алкилировании может существенно изменяться водо- и
жирорастворимость (липофильность) данного соединения, а последнее свойство
вещества определяет его переходы из гидрофильной среды в гидрофобную и обратно.
Переход молекулы ксенобиотика из водной среды в гидрофобную означает уменьшение
их доступности для ферментов, а следовательно, снижается вероятность их
биотрансформации и детоксикации.
Фотохимические превращения.
Степень деструкции ксенобиотика в фотохимических процессах зависит от его
свойств. Вещество должно поглощать электромагнитное излучение в доступном
интервале длин волн и, кроме того, обладать потенциальной способностью к
химическому изменению, т. е. иметь реагирующие на воздействие излучения связи,
которые при соответствующих уровнях энергии могут перестраиваться или
разрываться. Возбужденные молекулы, т.е. молекулы, эффективно поглощающие
энергию излучения, могут также передавать ее молекулам другого КБ, которые затем
разрушаются.
Окислительно-восстановительные превращения.
Многие неорганические и органические вещества могут принимать
(восстанавливаться) или отдавать электроны (окисляться).
– окисленные и восстановленные формы данного ксенобиотика могут
существенно различаться по биологическим и экологическим свойствам; –
существуют довольно значительные вариации в окислительных или
восстановительных условиях в окружающей среде, что влияет на трансформацию
ксенобиотиков.
Токсичность продуктов окисления ряда ксенобиотиков (пестицидов) выше, чем
токсичность исходных веществ. Такова ситуация при окислении гептахлора,
альдрина, фосфамида.
гидролиз.
Способность вещества вступать в реакции с водой обусловливает реакции
гидролиза. Вода, особенно при нагревании, быстро разрушает многие вещества.
Эфирные связи, например, в молекулах фосфорорганических соединений,
высокочувствительны к действию воды, чем определяется умеренная стойкость этих
соединений в окружающей среде.
Способность вещества реагировать в воде с ионами водорода или гидроксила в
большей степени определяется распределением заряда в его молекуле. При оценке
способности вещества вступать в реакции гидролиза необходимо учитывать влияние
рН.
Переходы веществ из одной среды в другую. Изменения физико-химических
свойств веществ в результате модификации структуры их молекул, сорбция
ксенобиотиков на частицах и др. оказываются существенными при переходе веществ (и
продуктов их превращений) из одного блока биогеоценоза в другой. Таковы переходы
ксенобиотиков из воды в воздух и обратно, из организмов в воду и обратно, из почвы в
воду и т. д.
Подобные переходы могут иметь решающее значение для крупномасштабного
перемещения ксенобиотиков в атмосфере и порождает экологические проблемы.
Например, летучесть ряда пестицидов (особенно хлорорганических), их переход в
результате испарения из почвы или воды в воздух обусловливает их дальнейший перенос
на большие расстояния.
Однако не менее серьезные проблемы возникают и вследствие затрудненности
перехода подобного типа. Например, переход ртути из почвы в воду происходит очень
медленно (Т1/2 = 850 лет). Попавшая в водоемы ртуть метилируется и накапливается в
гидробионтах. Поэтому возникает огромное запаздывание в миграции ртути по биосфере,
которое затрудняет борьбу с ртутным загрязнением. В самом деле, даже если удалось бы
сегодня полностью прекратить антропогенное загрязнение биосферы (в частности, почвы)
ртутью, то все равно еще сотни лет будет продолжаться ее выход (вымывание) из почвы в
водоемы, а следовательно, их загрязнение и последующее накопление в гидробионтах.
55. Биохимический механизм избирательного действия ксенобиотиков для
различных организмов.
Избирательность действия ксенобиотиков определяется различиями в процессах их
биотрансформации, а также зависит от его влияния на какой-либо важный биохимический
процесс, который у чувствительного организма имеется, а у устойчивого или отсутствует,
или не столь чувствителен к данному веществу.
Из трех факторов (накопление и распределение, биохимический, цитологический)
избирательного действия ксенобиотиков самый изученный биохимический. В настоящее
время установлен целый ряд соединений, действие которых определяется протеканием
метаболических процессов в клетке и организме в целом. Известны вещества:
▪ влияют на синтез ДНК, ингибируя начальные стадии синтеза ДНК;
▪ вещества, взаимодействующие с ДНК (ингибиторы, останавливающие как ее
репликацию, так и транскрипцию);
▪ вещества, разрушающие ДНК (повышается температура плавления, вязкость,
уменьшается плотность);
▪ вещества-ингибиторы синтеза РНК;
▪ вещества-ингибиторы синтеза белков, ферментов;
▪ вещества-ингибиторы различных путей катаболизма (метаболизм азота и
фосфора), метаболизма углеводов, липидов, цикла трикарбоновых кислот, транспорта
электронов.
Сульфаниламиды обладают антибактериальным действием. Они ингибируют
стадии синтеза ДНК.
Механизм инсектицидного действия ДДТ связан с его способностью блокировать
ионные каналы у холоднокровных. Избирательность действия ДДТ обусловлена тем, что
при более высокой температуре, которую имеют тела теплокровных, не образуется
донорноакцепторной связи между бензольными кольцами препарата и противоположно
заряженной поверхностью мембраны около устья канала.
Устойчивый организм способен разрушать ксенобиотик до нетоксичных
соединений, а чувствительный - не способен. Прямо противоположным образом обстоит
дело, когда ксенобиотик не обладает токсичностью и превращается в токсическое
соединение в самих организмах, после чего убивает их; в таких ситуациях любой
организм, не способный осуществлять это превращение, будет устойчив к данному
веществу.
Избирательность действия вещества определяется чувствительностью ферментов-
аналогов, т. е. ферментов, выполняющих внешне идентичные функции в разнородных или
одних и тех же организмах. Ингибирование в этом случае зависит от концентрации
используемого ксенобиотика.
56. Механизмы биологического действия хелатирующих агентов (лиганд).
Характеристика антидотов.
Существует 2 разных механизма действия хелатирующего агента в биологических
системах. Механизм I. Большинство хелатирующих агентов, биологическое действие
которых осуществляется по механизму I, получили распространение в качестве антидотов,
предназначенных для «маскировки» или удаления из организма токсичных металлов,
случайно попавших в организм, т. е. в этом случае происходит уменьшение токсического
действия металла в результате хелатообразования.
Понятие «антидот» должно включать:
а) вещества, инактивирующие яды посредством прямого химического (или физико-
химического) взаимодействия с ними в организме;
б) вещества, устраняющие последствия воздействия ядов на биологические
структуры.
Требования, предъявляемые к антидоту:
– возможность принимать большими дозами без всякой опасности;
– должен действовать на токсикант при температуре тела человека или еще более
низкой;
– его действие должно быть быстрым;
– должно связываться с токсикантом в среде желудочного, слизистого и других
соков, которые могут находиться в желудке;
– должно лишать вредных свойств токсиканта. +наличие полярных групп, чтобы
легко выводиться почками и не должен проникать из кровотока в клетки.
Антидоты подразделяются на 4 группы препаратов:
-оказывающие влияние на физико-химическое состояние токсического вещества в
желудочно-кишечном тракте;
-оказывающие специфическое физико-химическое действие на токсические
вещества в гуморальной среде;
-обеспечивающие выгодное изменение метаболизма токсических веществ в
организме или направления биохимических реакций, в которых они участвуют
(биохимические противоядия);
-оказывающие лечебный эффект в силу фармакологического антагонизма с
действием токсических веществ на одни и те же функциональные системы организма.
Первый антидот – димеркапрол, при отравлениях мышьяксодержащим боевым
отравляющим веществом.
Однако «маскировка» может приводить и к негативным результатам. Синильная
кислота связывает свободные валентности железа в цитохромоксидазе, не затрагивая при
этом четырех его связей с порфириновым ядром. Фермент лишается возможности
соединяться со своим субстратом, и дыхание прекращается.
Механизм II (накопление) обусловлен таким явлением, как перевод вещества из
одной формы в другую, и облегчает поступление ксенобиотика в организм. В качестве
примера можно привести использование хелатообразования для подкормки деревьев
железом. Оно находиться в почве в недоступной для растений форме. При опрыскивании
почвы ЭДТА, формируется комплекс ЭДТА-железо, поглощаемые корнями растений.
Другой пример использования хелатных соединений – инъекция больным,
страдающим недостатком кальция, комплекса кальция с глюконовой кислотой, медленно
разрушающегося в организме с выделением ионов кальция.
Кооперативный эффект – явление возрастания химической активности
ксенобиотика вследствие хелатообразования.
Эффект распределения. Известно, что клеточные мембраны точно регулируют
поглощение катионов тяжелых металлов, поскольку даже жизненно важные катионы,
необходимые в следовых количествах, в избытке оказываются токсичными. Так,
пероральное введение больших доз сульфата двухвалентного железа может привести к
некрозу печени человека, наступающему через 48 часов.
57. Определение избирательности действия ксенобиотиков. Накопление и
распределение как один из механизмов избирательного действия ксенобиотиков.
Цитологический механизм избирательного действия.
Избирательность вещества – это его способность воздействовать на клетки, ткани,
организмы только одного определенного типа и не влиять на другие, даже находящиеся в
контакте с первыми.
Избирательным действием обладают многие вещества: большинство
лекарственных средств, применяемых в медицине или ветеринарии, а также все
фунгициды, инсектициды и гербициды, используемые в сельском хозяйстве.
Существует три основных фактора (механизма), определяющих возможность
проявления избирательного действия вещества. Соединение может, во-первых,
избирательно накапливаться в различных клетках, органах и т. д.; во-вторых,
вмешиваться в биохимические процессы, происходящие в живых организмах, и, в третьих,
взаимодействовать с цитологическими структурами, существующими только в
определенных видах клеток и организмах.
Избирательность действия, обусловленная преимущественным накоплением и
распределением вещества, может быть вызвана морфологическими особенностями.
Например, сильная опушенность сорняков по сравнению с культурными злаками или
относительно большая (в расчете на единицу веса или объема) уязвимая поверхность тела
насекомых по сравнению с млекопитающими приводит к большой площади контакта
распыляемого агента с вредным видом.
Этот тип избирательности основывается на различии в распределении и
накоплении. Агент, токсический как для полезных, так и для вредных клеток,
накапливается только в последних. Иногда полезные и вредные клетки находятся в
организмах разных видов.
Безусловно, при опырскивании серная кислота повреждает цитоплазму и пшеницы,
и сорняка. Однако листья пшеницы имеют гладкую и скользкую поверхность, а у
двудольных сорняков она грубая и морщинистая; поэтому серная кислота скатывается с
побегов пшеницы и задерживается на сорняках.
Избирательность действия тетрациклинов, широко применяемая для лечения
бактериальных инфекций у млекопитающих, определяется в первую очередь различиями
в распределении, так как эти препараты накапливаются преимущественно в клетках
бактерий.
Другим ярким примером избирательного действия, обусловленного
специфичностью распределения, может служить йод, избирательно накапливающийся в
щитовидной железе. В зависимости от дозы йод может понижать повышенный уровень
метаболизма в железе или повреждать ее, вызывая возникновение опухоли.
Такой препарат, как гризеовульфин, накапливается у человека только в
ороговевших клетках – эпидермисе, волосах и ногтях. Поэтому он применяется при
лечении грибковых поражений этих тканей, поскольку у грибов гризеофульвин блокирует
митоз.

Цитологические различия как основа избирательного действия. Известно, что


строение клеток у животных и растений различно.
У растений нет нервной системы и мышечных клеток. Поэтому
фосфорорганические соединения, блокируя проведение нервного импульса, поражают
насекомых и не приносят заметного вреда растениям. На этом явлении основана весьма
эффективная система химической защиты растений от насекомых.
Однако у растений, в отличие от насекомых и животных, имеются клеточная
стенка, хлоропласты и механизмы, осуществляющие фотосинтез.
Клеточные стенки многоклеточных растений состоят из микрофибрилл целлюлозы
различной длины, включенных в амфотерный матрикс из гемицеллюлозы и пектинов.
Клеточная стенка грибов представляет собой мозаику из различных углеводов с
отдельными включениями липидов и белков.
У дрожжей клеточные стенки состоят из глюкана (полиангидрид глюкозы) и
маннанпротеинового комплекса, компоненты которого соединены между собой
дисульфидными связями.
Избирательность действия зависит от того, на синтез каких компонентов клеточной
стенки влияет ксенобиотик.
Стенка грамположительных бактерий примерно наполовину состоит из муреина;
остальная ее часть представлена тейхоевой кислотой. Стенка грамотрицательных
бактерий устроена сложнее − муреин с наружной стороны покрыт мембраной, состоящей
из липопротеидов и монополисахаридов; в стенках отсутствует тейхоевая кислота.
Действие некоторых антибиотиков обусловлено нарушением различных стадий
биосинтеза клеточной стенки бактерий. Так, механизм противомикробного действия
бензилпенициллина заключается в образовании ковалентной связи с ферментом, в норме
образующим поперечные сшивки в муреине на последней стадии биосинтеза. В
результате этого растущая бактерия теряет способность строить новую стенку и погибает.
Различие функций организма существует и внутри клеток благодаря наличию
компартментов, отделенных друг от друга избирательно проницаемыми мембранами, в
которых одновременно протекают различные взаимоконкурирующие реакции.
Метаболические реакции, протекающие в определенном порядке при участии
ферментов в отдельных компартментах на поверхности раздела фаз и на мембранах
органелл, могут подавляться различными ксенобиотиками.
58. Общая схема процесса метаболического превращения органических
ксенобиотиков. Детоксикация, токсификация. Ферментные системы, основные
закономерности функционирования ферментов.
Под биотрансформацией понимают биохимическое превращение проникающих в
организм ксенобиотков, в результате чего образуются либо менее токсические вещества
(детоксикация), либо соединения более токсичные, чем исходные (токсификация).
У растений защитный механизм может включать связывание посторонних веществ
некоторыми молекулами углеводов и накоплением в местах, лишённых метаболической
активности, например, в вакуолях. Микроорганизмы же способны разлагать многие
сложные органические вещества до СО2 и воды.
Основная тенденция метаболических процессов в организмах высших животных
заключается в снижении сложности молекулы, введении в неё при необходимости
полярных заместителей и в дальнейшем повышении растворимости в воде посредством
сопряжения (конъюгирования) ещё до выхода из организма с последующей секрецией.
Метаболизм ксенобиотиков происходит в разных частях клетки, но наиболее
активные системы находятся в ЭР и гиалоплазме. Ферменты биотрансформации
ксенобиотиков присутствуют в основном в микросомах и в цитозоле и незначительная
часть – в митохондриях, ядре и лизосомах. В клетках высших организмов наиболее
активной системой являются микросомные фракции.
Общая схема метаболических превращений органических ксенобиотиков в высших
организмах:
Ксенобиотик диссимиляция
→ продукты окисления, восстановления, гидролиза
синтез Конъюгат

Существует две фазы метаболических превращений:


I фаза метаболизма – этап биотрансформации (реакции окисления, восстановления
и гидролиза), в ходе которого к молекуле соединения либо присоединяются полярные
функциональные группы, либо осуществляется экспрессия таких групп, находящихся в
субстрате в скрытой форме.
II фаза метаболизма – этап биотрансформации, при котором происходит
конъюгация продуктов первой фазы метаболизма (промежуточные соединения) с
эндогенными молекулами.
Наиболее широко в живых организмах представлены ферменты и ферментативные
системы, катализирующие процессы окисления, восстановления, гидролиза
ксенобиотиков и синтеза метаболитов, содержащих эндогенные соединения. Такие
ферменты локализованы в различных органах и тканях организмов, отличаются
субстратной специфичностью и зависят от физиологических и внешних факторов.

Все биохимические реакции в живых системах носят ферментативный характер.


Все ферменты имеют белковую макромолекулярную природу, на их поверхности
располагаются активные и регуляторные центры. Для каждого фермента характерна
строгая геометрия активного и регуляторного центров, что определяет его высокую
специфичность к превращаемым веществам-субстратам.
Реакция начинается после того, как образуется фермент-субстратный комплекс,
для чего необходимо строгое геометрическое соответствие их форм
(пространственных и зарядовых геометрий).
Для процесса взаимодействия веществ А и В с образованием продукта С необходимо,
чтобы к моменту столкновения А и В они обладали таким запасом энергии, которого было
бы достаточно для разрыва и новообразования прочных химических связей,
превращающих субстраты А и В в новый продукт С. Этот энергетический барьер –
энергия активации – ограничивает скорость химической реакции. Действие фермента
сводится к снижению высоты барьера. Что касается снижения энергетического барьера, то
это может происходить посредством:

 растяжения и ослабления исходной химической связи между атомами


субстрата на упругом полимерном каркасе фермента;
 способностью субстрата на ферменте принимать множество конфигураций,
из которых хотя бы одна облегчит переход к новому веществу;
 возможность сближения и принятия нужной ориентации реагирующих
молекул субстрата.
Есть еще и регуляторные центры. В них не происходят каталитические
превращения. В зависимости от избытка или недостатка продуктов ферментативной
реакции эти центры замедляют или ускоряют ход процесса. В самом простом случае
при избытке продукт присоединяется к центрам и предотвращает наработку новых.
Когда продукта мало, регуляторные центры освобождаются и перестают тормозить
работу активных центров.
59. Закономерности перемещения ксенобиотиков в цепи питания. Особенности
аккумулирования ксенобиотиков наземными и водными организмами.
Существуют два механизма перемещения чужеродного вещества в данной
конкретной цепи питания — непосредственное его поглощение из среды и перемещение
по цепи питания. Ксенобиотики в массовых количествах поступают в неорганические
элементы биосферы (воздух, воду, почву). Находясь во внешней среде, чужеродные
соединения взаимодействуют с различными органическими элементами биогеоценозов –
микроорганизмами, растениями, животными, поступая в конечном итоге по трофическим
цепям в организм человека.
В этих условиях суммарное количество ксенобиотиков, поступающих в организм
человека, в значительной степени определяется интенсивностью их разрушения под
действием физико-химических факторов среды (света, воды, тепла и др.), скоростью их
деструкции в предшествующих элементах трофических цепей и закономерностями
биоконцентрации.
Установлено, что по мере движения ксенобиотика по пищевой цепи к следующему
консументу, в организме которого он метаболизируется в незначительной степени,
происходит существенное увеличение концентрации чужеродного вещества.
Для лучшего понимания закономерностей движения по пищевым цепям продуктов
питания, а также попавших в биоценозы ксенобиотиков строятся так называемые
экологические пирамиды. В экологических пирамидах схематически учитывают
плотности популяций (число особей на 1 м2), биомассу (грамм сухого или влажного
вещества на 1 м2) или продуктивность в энергетических эквивалентах (джоулей на 1 м2 в
год) для всех членов каждого трофического уровня в данном биоценозе.
В условиях поступления в организм чужеродных химических веществ, которые не
могут быстро метаболизироваться и полностью экскретироваться во внешнюю среду,
начинается накопление этих веществ по ходу пищевой цепи. При этом, поскольку
организмы-потребители, стоящие на более высоких уровнях экологической пирамиды,
обладают меньшей суммарной биомассой по сравнению с организмами предыдущего
уровня, происходит последовательная биоконцентрация токсикантов, достигающая
максимальных значений у конечных консументов, которыми могут являться люди.
Пример: накопление диоксидa титана водорослями, а затем мелкими
ракообразными из зоопланктона – дафниями. Затем наночастицы передаются рыбам и
далее могут попасть в аквакультуру.
С явлениями биоконцентрации связаны и кадмиевые катастрофы в 70х гг. в ФРГ и
Японии. Тысячи японских граждан пали жертвой болезни «итай-итай» вследствие
употребления зараженных кадмием питьевой воды и овощей в результате выбросов в
окружающую среду отходов нефтекомбинатов. Воздействие даже незначительных
концентраций кадмия может привести к серьезным заболеваниям нервной системы и
костных тканей.
Итак, в результате процессов абсорбции, распределения и биоконцентрации,
зависящих как от физико-химических свойств ксенобиотиков, так и от экологических
взаимоотношений в пищевых цепях, в организмах человека, животных и растений
происходит аккумулирование ксенобиотиков, сопровождающееся в ряде случаев их
специфическим токсическим действием.

В водной среде аккумулирование ксенобиотика может протекать по двум


механизмам:
– непосредственной адсорбции вещества и (или) его распределения из водной
среды;
– распределения по цепи питания.
В большинстве случаев отмечается, что непосредственное поглощение из водной
среды имеет большее значение, чем распределение по цепи питания. Распределение
непосредственно из среды обитания может быть определяющим процессом, но при
условии, что поверхность контакта организма с водой не является лимитирующим
фактором (у рыб жабры –> развита поверхность –> эффективная аккумуляция из водной
среды).
В условиях наземной среды чужеродные вещества в конечном итоге оказываются в
почве, и их аккумулирование организмами должно происходить по цепи питания.
Воздействие на организм ксенобиотика из атмосферы вследствие испарения из почвы
может показаться аналогичным его общему воздействию на организм в водной среде.
Однако концентрация чужеродного вещества в воздухе при испарении очень мала, а его
способность рассеиваться в открытом пространстве настолько велика, что в большинстве
случаев аккумулирование ксенобиотика по механизму распределения из атмосферы
минимально. Исключение могут составлять роющие животные, существующие в более
ограниченной среде.
В отличие от водных организмов у наземных животных биоаккумулирование
происходит в основном за счет питания. У наземных высших растений накопление
происходит, главным образом, за счет поступления ХС из почвы.
Таким образом, процесс аккумулирования ксенобиотика наземными организмами
должен включать его поглощение и последующее перемещение по наземной цепи
питания. Степень, до которой организм аккумулирует определенный ксенобиотик, зависит
не только от положения организма в цепи питания, но и от его физиологических и
морфологических особенностей.
60. Экологическая и токсикологическая характеристика оксидов азота, серы и
фторсодержащих углеводородов.
Количество выбросов оксидов азота с аммиаком: 200–350 млн т в год.
Часть присутствующих в атмосфере оксидов (NO, SO) и диоксидов (NO2, SO2) азота и серы
образуются в ходе естественно протекающих природных процессов – вулканических
извержений, разрядов атмосферного электричества, жизнедеятельности микроорганизмов. Доля
природных процессов: 100 млн т этих соединений, антропогенная часть: 53 млн т.
Оксиды появляются в меньшей доле в результате эксплуатации бытовых газовых приборов и
курения (выкуривание одной сигареты сопровождается появлением в воздухе помещения 160–
500 мг оксида азота).
Основную токсикологическую опасность представляют диоксиды азота. Длительное
воздействие диоксида азота вызывает целый спектр изменений физиологических систем
организма животных (нарушение рефлекторной деятельности, гематологические изменения и т.
д.). Диоксид азота в концентрациях 40–140 мг/м 3 при экспозиции не более часа может вызывать
развитие бронхита и бронхопневмонии.
Наиболее опасное проявление острого отравления оксидами азота – отек легких. При оценке
биохимических эффектов диоксидов азота в ранние сроки от начала воздействия в тканях
легких и печени прежде всего снижается содержание глутатиона.
В результате утилизации ископаемого топлива 150 млн т серы появляется в атмосфере. При
выплавке меди, свинца и цинка - 15 млн т.
Мишень воздействия оксидов серы - дыхательные пути, что приводит к увеличению
респираторных заболеваний у населения, ослабляет иммунитета.
Определенное количество выброшенных в атмосферу окислов азота и серы удаляется в
результате сорбции почвой, растительным покровом, водой и кислотных дождей. Образование
кислотных дождей происходит с участием УФ-излучений, кислорода воздуха и озона.
Осаждающиеся на земную поверхность окислы азота и серы снижают интенсивность
фотосинтеза, вызывают гибель наземных растительных сообществ, подкисление водоемов и
связанную с ним гибель гидробионтов. Отдельные рыбы, моллюски сильно подвержены (связано
с нарушением кальциевого обмена), (кислотные осадки с рН 3,0 снижали образование стручков у
бобовых на 7 %).
Фторсодержащие углеводороды. Общие выбросы углеводородов в атмосферу составляют
не менее 200 млн т в год. Особенно опасны полициклические ароматические углеводороды, в
частности бенз(а)пирен, образующиеся при сгорании различных видов топлива и других
высокотемпературных процессах и вызывающие мутагенные и канцерогенные эффекты.
Фторхлорсодержащие углеводороды вызывают разрушение озонового слоя в стратосфере.
Это связано с тем, что под действием УФ-излучения образуются активные радикалы Cl*. При
фотолизе кроме хлора образуются ряд других активных соединений, которые могут разрушать
фторхлоруглеводороды (ФХУ) с образованием радикалов ClO* и Cl*. Радикалы участвуют в
разрушении озона.
Вместе с СО2 галогенуглероды участвуют в создании парникового эффекта в атмосфере, т. к.
они поглощают ИК-излучение в области 700–1300 нм, т. е. в той области, в которой СО 2 их
пропускает. Разрушение озона в тропосфере приводит к резкому нагреванию тропосферы, т. к.
все больше богатых энергией УФ-излучений проникает в тропосферу и поглощается в ней. УФ-
излучение значительно увеличивает опасность раковых заболеваний у людей, особенно со
светлой кожей.
61. Классификация наноматериалов по происхождению и в соответствии с их
химической природой.
Наноматериалы – материалы, содержащие структурные элементы, геометрические
размеры которых хотя бы в одном измерении не превышают 100 нм, и обладающие
качественно новыми свойствами, функциональными и эксплуатационными
характеристиками.
Классификация наноматериалов по происхождению:
- естественные (пылевые бури, вулканическая пыль, лесные пожары);
- антропогенные (сжигание топлива, мусора, сварка, радиоактивные выбросы при авариях);
- техногенные (промышленное производство).
Наноматериалы классифицируют в соответствии с их химическим составом. За
основу принята классификация, используемая в международном реестре наночастиц и
наноматериалов:
– металлические наночастицы;
– наночастицы оксидов металлов и неметаллов;
– полупроводниковые наночастицы;
– углеродные наночастицы;
– наночастицы органически модифицированных слоистых силикатов и
алюмосиликатов;
– наночастицы из органически разветвленных полимеров;
– квантовые точки.
Многие вещества при переходе в наносостояние приобретают новые
биологические свойства: способность проникать внутрь биологических структур,
проходить через мембраны клеток, и более того, они обретают большую каталитическую
активность. Даже абсолютно инертное исходное вещество в наносостоянии способно
вызывать существенный эффект, поскольку суммарная поверхность его частиц очень
велика. Например, у кубика вещества с размером ребра 1 см суммарная поверхность
составляет 6 квадратных сантиметров. Если раздробить его до 2–3 нанометров, то
суммарная площадь всех наночастиц будет размером примерно 400–500 квадратных
метров!
Физико-химические особенности веществ в наносостоянии:
- увеличение химического потенциала;
- большая удельная поверхность;
- небольшие размеры и разнообразие форм;
- высокая адсорбционная активность;
- высокая способность к аккумуляции.
62. Физико-химические особенности наноксенобиотиков.
Наночастицы и наноматериалы обладают комплексом физических, химических
свойств и биологическим действием, которые часто отличаются от свойств этого же
вещества в обычной форме В наносостоянии можно выделить ряд физико-химических
особенностей поведения веществ:
1. Увеличение химического потенциала веществ на межфазной границе высокой
кривизны. Для макрочастиц (более микронного размера) данный эффект незначителен (не
более долей процента). Большая кривизна поверхности наночастиц и изменение
топологии связи атомов на поверхности приводит к изменению их химических
потенциалов. Вследствие этого существенно изменяется растворимость, реакционная и
каталитическая способность наночастиц и их компонентов. Эти эффекты могут быть
использованы для создания биологически активных препаратов нового поколения, но они
же несут и потенциальные риски.
2. Большая удельная поверхность наноматериалов. Очень высокая удельная
поверхность наноматериалов увеличивает их адсорбционную емкость, химическую
реакционную способность и каталитические свойства. Это может приводить, в частности,
к увеличению продукции свободных радикалов и активных форм кислорода, и далее к
повреждению биологических структур (липиды, белки, нуклеиновые кислоты, в
частности, ДНК).
3. Небольшие размеры и разнообразие форм наночастиц. Наночастицы, вследствие
своих небольших размеров, могут связываться с нуклеиновыми кислотами, вызывая
образование аддуктов ДНК. Изменять пространственную структуру и активность белков,
барьерные функции мембран, проникать в клеточные органеллы и, тем самым, влиять на
функции биоструктур. Следует обратить внимание на то, что наночастицы могут не
вызывать иммунный ответ.
Процессы переноса наночастиц в окружающей среде с воздушными и водными
потоками, их накопление в почве, донных отложениях могут также значительно
отличаться от поведения частиц веществ более крупного размера.
4. Высокая адсорбционная активность. Из-за своей огромной поверхности
наночастицы обладают свойствами высокоэффективных адсорбентов, способных
поглощать на единицу своей массы во много раз больше адсорбируемых веществ, чем
макроскопические дисперсии. Это делает их потенциально полезными для удаления
вредных продуктов. Многие наноматериалы обладают гидрофобными свойствами или
являются электрически заряженными, что усиливает как процессы адсорбции на них
различных химических агентов, так и их проникающую способность. Последнее может
резко увеличивать их токсичность.
5. Высокая способность к аккумуляции. Возможно, что из-за малого размера
наночастицы не распознаются защитными системами организма, не подвергаются
биотрансформации и не выводятся из организма. Это ведет к накоплению наноматериалов
в растительных, животных организмах, а также микроорганизмах, передаче по пищевой
цепи, что, тем самым, увеличивает их поступление в организм человека.
63. Аденилатциклазный и ионизитолфосфатный циклы передачи сигнала в
клетке.
Молекула любого рецептора состоит из двух частей. Одна из них, наружная,
служит для связывания вещества (гормона). Вторая, менее полярная часть молекулы
рецептора, служит для ее закрепления в липидном бислое и передачи принятого сигнала
внутрь клетки. Взаимодействие между связывающими и передающими участками
осуществляется благодаря конформационным перестройкам, происходящим в результате
«посадки» эффектора (агониста) на связывающий участок рецептора. В этом случае
происходят небольшие изменения на отдельных участках мембран, результаты которых
передаются внутрь клетки, усиливаясь с помощью определенного («релейного»)
механизма, и в конце концов определяют течение внутриклеточных процессов. В основе
передачи в ряде случаев лежит активация и инактивация фермента – аденилатциклазы
(АЦ), расположенного в мембране. Этот фермент отвечает за синтез нуклеотида – цАМФ.
В нормальном состоянии активность аденилатциклазы подавлена.
Но при взаимодействии агониста с рецептором Р аденилатциклаза активируется. В
результате усиливается синтез цАМФ, увеличивается концентрация последнего внутри
клетки и активируется один или несколько ферментов, расположенных внутри клетки.
Таким образом, химический сигнал передается от одного посыльного к другому.
Первичным посыльным является эффектор (гормон, медиатор), через ГТФ-связывающий
G-белок и аденилатциклазу он передает сообщение внутрь клетки.
Вторичные посредники не только способствуют передаче внешнего сигнала во
внутриклеточный, но и обеспечивают значительное усиление первоначального сигнала.
Однако постоянная активация АЦ не нужна, поэтому цАМФ регулируется также с
помощью фосфодиэстеразы (ФДЭ).
Циклический АМФ регулирует внутриклеточные реакции. Действие его
основано на активации специфических ферментов цАМФ-зависимых протеинкиназ,
которые фосфорилируют многие белки, в частности белки рибосом, ряд ферментов,
транспортные мембранные белки и др. Фосфорилирование белков – это их активация. В
неактивированное состояние они возвращаются путем дефосфорилирования с помощью
фосфопротеинфосфотазы (ФПФ).
Признанными вторичными мессенджерами являются ионы кальция. Кальций
участвует в регуляции внутриклеточных процессов в комбинации с двумя другими
вторичными посредниками: инозитолтрифосфатом и диацилглицеролом.
Эффектор (медиатор) связывается с рецептором Р, который через ГТФ-
связывающие белки (G) активирует фосфодиэстеразу фосфатидилинозитолтрифосфата
(ФИФ2). При расщеплении ФИФ2 образуется инозитолтрифосфат (ИФ3) и диацилглицерол
(ДАГ). ИФ3 растворим в воде, поэтому он диффундирует в цитоплазму, где вызывает
высвобождение Са2+ из внутриклеточного депо – эндоплазматического ретикулума (ЭПР).
Высвобожденный Са2+ активирует кальмодулинзависимую протеинкиназу (Са2+/КаМ
киназа), фосфорилирующую белки-мишени, вызывая клеточный ответ. ДАГ, будучи
гидрофобным, остается в мембране, где активирует Са2+ – фосфолипидзависимую
протеинкиназу, которая фосфорилирует другие белки, вызывая также клеточный ответ.
64. Общие представления о мутагенезе и канцерогенезе. Основные причины
их возникновения под действием ксенобиотиков.
Пристального внимания заслуживают проявления отдаленных эффектов
биологической активности, такие как мутагенность, канцерогенность и др. Потенциально
опасными мутагенами и канцерогенами являются такие ксенобиотики как ДДТ, ПХБ и
полиароматические углеводороды (ПАУ).
Мутагенез – процесс возникновения в организме наследственных мутаций,
появляющихся естественно (спонтанно) или вызываемых (индуцируемых) различными
физическими или химическими факторами — мутагенами.
Канцерогене́з – сложный патофизиологический процесс зарождения и развития
опухоли.
Опасное воздействие указанных ксенобиотиков на человека проявляется в
результате длительного контакта. По данным экспериментов, проведенных в результате
двухступенчатого механизма: «генотоксической инициации» и «эпигенетического
промотирования». Инициаторы в процессе взаимодействия с ДНК вызывают необратимые
соматические мутации при очень малой дозе инициатора; предполагают, что в этих
случаях не существует пороговых величин концентраций, т. е. любая малая доза в
конечном итоге вызывает эффект.
Промотору требуется более длительное время воздействия на организм, чтобы он
вызывал появление опухоли. Промоторы усиливают действие инициатора, а их
собственное действие на организм в течение некоторого времени является обратимым. К
промоторам относят ДДТ и ПХБ (инициатор: диметилнитрозамин), хлороформ (N–
нитрозо–N–метилмочевина), ТХДД (диэтилнитрозамин).
В настоящее время доказано мутагенное действие ПАУ (например, бензопиренов),
нитроароматических соединений и многих пестицидов. Многие соединения способны
приводить к значительным генотоксическим эффектам и в, конечном итоге, вызывать
генетические изменения. Мутагены могут вызывать генетическую мутацию или привести
к мутациям более крупных биохимических единиц (хромосомы, ДНК), образованию
аддуктов, необратимому нарушению структуры. Следующими стадиями мутаций могут
оказаться хромосомная аберрация, обмен хроматид и т. п.
Процесс возникновения мутаций можно показать на примере реакций
алкилирующих веществ. Введение алкильных групп в основание ДНК приводит к
прекращению воспроизведения последовательности оснований в цепочке ДНК.
Воздействие чужеродных веществ на гены в половой или соматической клетке
приводит либо к наследуемым либо к фенотипическим изменениям в организме.
В нереплицируемых соматических клетках искажение процесса транскрипции
приводит к необратимому повреждению ДНК, а следовательно к изменению фенотипа
клеток. Однако из-за того, что такие изменения не наследуются, их нельзя называть
генетическими в обычном понимании этого термина.
Хромосомные аберрации в половых клетках приводят к смерти эмбриона или
аномалии развития новорожденных. Воздействие на соматические клетки химических
веществ, приводящие, например, к нарушению митоза, трудно поддаются распознаванию
и прогнозу. Это объясняется тем, что такие клетки изолируются и заменяются на здоровые
самим организмом.
К основным причинам, вызывающим мутагенез (канцерогенез) под действием
ксенобиотиков следует отнести:
- активирование ферментов, изменение ДНК и нуклеофильных групп;
- ограниченная способность клеток удалять химически модифицированные участки
ДНК и восстанавливать ее структуру;
- способность химических веществ активировать ферменты в зависимости от вида
клетки и стадии ее развития (фазы пролиферации), а также от вида организма;
- многоступенчатость процесса канцерогенеза и обуславливающие факторы,
которые частично зависят от «микроокружения» раковой клетки.
- способность мутагенных химических соединений выступать в качестве
промоторов появления опухолей; мутации лишь в определенных условиях приводят к
образованию опухолей;
- возможность химических канцерогенов действовать либо непосредственно (без
метаболического активирования, например, эпоксиды), либо опосредовано через
метаболиты (после предварительного активирования в результате биохимического
окисления или гидроксилирования, например, азо-, нитрозосоединения, ароматические
амины, металлы).
65. Общие закономерности поведения ксенобиотиков в экосистемах и
последствия этих взаимодействий.
Для ксенобиотиков, попавших в экосистемы и входящие в них организмы, можно
выделить следующие явления.
1. Реакции превращения ксенобиотиков (ОВР, гидролиз, конъюгация, деградация).
2. Адсорбция ксенобиотиков на частицах биологического и абиотического
происхождения. 3. Переход ксенобиотиков из одной среды в другую.
Реакции превращения.
Важное значение имеет скорость превращения ксенобиотиков. Высокая скорость
превращения обычно приводит к исчезновению вещества и, следовательно, к
исчезновению проблемы, связанной с загрязнением окружающей среды; при медленном
разрушении вещество сохраняется длительное время, что может вызвать его
концентрирование.
Ферментативные превращения.
Одним из типов конъюгирования ксенобиотиков может считаться их
алкилирование. Для дальнейшей судьбы ксенобиотика в организме и биогеоценозе очень
важно, что при алкилировании может существенно изменяться водо- и
жирорастворимость (липофильность) данного соединения, а последнее свойство
вещества определяет его переходы из гидрофильной среды в гидрофобную и обратно.
Переход молекулы ксенобиотика из водной среды в гидрофобную означает уменьшение
их доступности для ферментов, а следовательно, снижается вероятность их
биотрансформации и детоксикации.
Фотохимические превращения.
Степень деструкции ксенобиотика в фотохимических процессах зависит от его
свойств. Вещество должно поглощать электромагнитное излучение в доступном
интервале длин волн и, кроме того, обладать потенциальной способностью к
химическому изменению, т. е. иметь реагирующие на воздействие излучения связи,
которые при соответствующих уровнях энергии могут перестраиваться или
разрываться.
Окислительно-восстановительные превращения.
Многие неорганические и органические вещества могут принимать
(восстанавливаться) или отдавать электроны (окисляться).
– окисленные и восстановленные формы данного ксенобиотика могут
существенно различаться по биологическим и экологическим свойствам; –
существуют довольно значительные вариации в окислительных или
восстановительных условиях в окружающей среде, что влияет на трансформацию
ксенобиотиков.
Вода.
Способность вещества вступать в реакции с водой обусловливает реакции
гидролиза. Вода, особенно при нагревании, быстро разрушает многие вещества.
Эфирные связи, например, в молекулах фосфорорганических соединений,
высокочувствительны к действию воды, чем определяется умеренная стойкость этих
соединений в окружающей среде.
Адсорбция ксенобиотиков на частицах. Доступность ксенобиотика для
ферментов,и его «деградабельность» снижается в результате сорбции молекул на
частицах. Процессы сорбции–десорбции ксенобиотиков нередко определяют их
устойчивость и взаимосвязаны с переносом в биосфере на большие расстояния. Пример:
многие пестициды в почве гидролизуются с образованием соединений, которые
адсорбируются на частицах почвы, связываются с гумусом и сохраняются длительное
время, т. е. возрастает устойчивость этих токсикантов. В адсорбированном состоянии они
не разлагаются фотохимически и не гидролизуются водой. По мере разрушения гумуса
грибами (что является ферментативным процессом) ранее связанные молекулы пестицида
освобождаются и могут проявить свое токсическое действие на организмы данной
экосистемы.
Переходы веществ из одной среды в другую. Изменения физико-химических
свойств веществ в результате модификации структуры их молекул, сорбция
ксенобиотиков на частицах и др. оказываются существенными при переходе веществ (и
продуктов их превращений) из одного блока биогеоценоза в другой. Таковы переходы
ксенобиотиков из воды в воздух и обратно, из организмов в воду и обратно, из почвы в
воду и т. д.
Подобные переходы могут иметь решающее значение для крупномасштабного
перемещения ксенобиотиков в атмосфере и порождает экологические проблемы.
Например, летучесть ряда пестицидов (особенно хлорорганических), их переход в
результате испарения из почвы или воды в воздух обусловливает их дальнейший перенос
на большие расстояния.
Однако не менее серьезные проблемы возникают и вследствие затрудненности
перехода подобного типа. Например, переход ртути из почвы в воду происходит очень
медленно (Т1/2 = 850 лет). Попавшая в водоемы ртуть она метилируется и накапливается
в гидробионтах. Поэтому возникает огромное запаздывание в миграции ртути по
биосфере, которое затрудняет борьбу с ртутным загрязнением. В самом деле, даже если
удалось бы сегодня полностью прекратить антропогенное загрязнение биосферы (в
частности, почвы) ртутью, то все равно еще сотни лет будет продолжаться ее выход
(вымывание) из почвы в водоемы, а следовательно, их загрязнение и последующее
накопление в гидробионтах.
66. Характеристика процессов взаимодействия наноматериалов с
окружающей средой.
Наиболее существенным свойством, детерминирующим специфику действия
наночастиц, является их чрезвычайная стабильность. В силу данного свойства они
практически не подвержены биотрансформации и не элиминируются из клеток, вызывая в
них деструктивные процессы. По мнению Г.В. Яковлевой и А.А. Стехина, «основное
токсическое действие наночастиц обусловлено не самим веществом, из которого они
получены, а их электрофизическими особенностями», способствующими доставке
токсичных соединений к активным центрам рецепторов и формированию аномально
большого количества свободных радикалов.
Негативное влияние наночастиц на окружающую среду также связано с
повышенной адсорбцией ими ксенобиотиков, что резко расширяет возможности
транспорта внутрь клеток и клеточных органелл, нарушая их биологические функции.
При этом «наночастицы не распознаются защитными системами организма. Это ведет к
накоплению их в растениях, животных организмах и микроорганизмах, что увеличивает
возможность поступления в организм человека».
Использование наночастиц в различных областях народного хозяйства оказывает
влияние на различные компоненты окружающей среды:
– Пищевая упаковка (наноглина, серебро, TiO2) – почва, отходы.
– Фармацевтические препараты (наноносителли, нанопрепараты) – грунтовые и
сточные воды, почва.
– Обработка воды и восстановление окружающей среды (железо, полиуретан) –
поверхностные, грунтовые и сточные воды, почва.
– Косметические продукты (TiO2, ZnO, фуллерен) – поверхностные и сточные
воды.
– Краски и покрытия (TiO2, серебро, квантовые точки) – воздух, поверхностные и
сточные воды.
Сегодня появился термин «зеленая нанотехнология», как способ создания и
использования наноматериалов и нанопродукции без нанесения ущерба окружающей
среде и здоровью человека. К зеленой нанотехнологии, с одной стороны, относится
производство наноматериалов и продуктов с использованием принципов зеленой химии и
зеленых технологий (что улучшает окружающую среду косвенным образом), а с другой, –
создание нанопродуктов, которые непосредственно участвуют в решении прошлых,
настоящих и будущих проблем, связанных с защитой природы и здоровьем людей
(например, сорбенты для очистки сточных вод или питьевой воды, новые катализаторы,
энергетические системы).
Наноматериалы воздействуют на окружающую среду не только сами по себе, но и
в виде отходов нанопроизводства, а также при их превращении в отходы потребления.
Так, ученые, проанализировав один из самых распространенных методов производства
нанотрубок – химическое осаждение в паровой фазе, – обнаружили, что в процессе
химических превращений в окружающую среду поступает свыше 10 ароматических
углеводородов, в том числе канцероген – полициклический бензапирен. Остальные
компоненты «коктейля» негативно влияют на озоновый слой планеты.
Однако, не имеет смысла останавливать развитие прогрессивной технологии,
которая открывает качественно новые перспективы для человеческого общества. Вместе с
тем целесообразно активизировать научный потенциал в области разработки
экологических и гигиенических проблем нанотехнологий.
67. Вредное влияние ксенобиотиков на экосистемы: критерии, формы,
временные зависимости.
К важнейшим задачам при анализе воздействия ксенобиотиков на экосистему
относится выявление их вредного влияния (качественное и количественное) и разработка
мероприятий, предотвращающих это негативное влияние.
Высокая скорость превращения обычно приводит к исчезновению вещества и к
исчезновению проблемы, связанной с загрязнением окружающей среды; при медленном
разрушении вещество сохраняется длительное время, что может приводить к его
концентрированию.
При оценке экологической опасности необходимо учитывать природу вещества и
процессы метаболических превращений. Важно помнить тот факт, что почти любой
органический ксенобиотик может метаболизироваться в каком-либо организме, и часто в
результате довольно сложных последовательностей реакций образуются многочисленные
метаболиты. Степень накопления метаболитов в организме зависит от относительных
скоростей их образования и последующего метаболизирования и (или) вывода из
организма. Метаболит накапливается в организме, если он вырабатывается с относительно
высокой скоростью, тогда как последующие метаболические реакции идут с меньшей
скоростью или скорость выведения метаболита из организма мала по сравнению со
скоростью его образования.
Под вредным воздействием, наносимым соответствующей экосистеме, понимают:
– явственные изменения обычных колебаний численности популяции;
– долгосрочные или необратимые изменения состояния экосистемы.
Возможные последствия и формы вредного воздействия ксенобиотиков
классифицируют в соответствии со следующей схемой:
Полное разрушение экосистемы в результате нарушения целостной интактной
структуры (биотопа) и ее функций (биоценоза).(уничтожение мангровых лесов в
результате применения дефолиантов во время войны во Вьетнаме)
Глубокие изменения биотопа (засоление пресноводных биотопов; «современное
ухудшение состояния лесов»)
Постоянное загрязнение биотопа (эвтрофикация рек и озер в результате попадания
в них значительных количеств биогенных элементов (азот, фосфор))
Массированные загрязнения (загрязнение рек и водоемов нефтью при авариях
танкеров)
Широко распространенное уменьшение видового разнообразия (использование
пестицидов и удобрений в агроценозах)
Направленное уничтожение отдельных видов растений и животных.
(использование пестицидов, в особенности в урбанизированных экосистемах)
Нарушения поведения в биохимических реакциях наступают немедленно, а
физиологические и морфологические – часы и недели; изменения индивидуального
жизненного цикла – сутки и месяцы; месяцы – годы приводят к популяционным
воздействиям, а десятилетия вызывают экологические нарушения.

Вам также может понравиться