Вы находитесь на странице: 1из 9

PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN

Q-003

ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS
( Método NIST SRM 935a)

EDICIÓN 0

TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA


PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

INDICE

1.OBJETO
2.ALCANCE
3.GENERAL
4.EQUIPOS A USAR EN LA CALIBRACION
5.OPERACIONES PREVIAS
6.REALIZACION
7.TOMA DE DATOS
8.RESULTADOS DE LA CALIBRACIÓN
9.CRITERIOS DE ACEPTACION

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 2/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

1.- OBJETO

El presente procedimiento tiene por objeto definir el proceso a seguir para realizar la
calibración de la exactitud y linealidad de la escala de Absorbancia en UV siguiendo el
método NIST SRM 935a (Exactitud y Linealidad fotométrica)

2.- ALCANCE

El ámbito de aplicación del presente procedimiento es para Espectrofotómetros UV/VIS en


la medida de Absorbancia mediante disoluciones acidas (acido sulfúrico o acido perclórico)
de Dicromato Potasico en longitudes de onda de 350nm, 313nm, 257 nm y 235 nm.

Este método puede ser complementado con la calibración de la longitud de onda, mediante
métodos ópticos con patrones Filtros de Holmio y Didimio y patrones de transmitancia y
con la construcción de la curva de calibrado para la calibración de la respuesta del equipo a
un analítico determinado.

3.- GENERAL

Documentación de referencia

EA-4/02 Expression of the Uncertainly of Measurement in Calibration

Guía EURACHEM/CITAC

Publicación NIST SRM 935a Certification and Use of Acidic Potassium Dichromate
Solutions as an Ultraviolet Absorbance Standard

4.- EQUIPOS A UTILIZAR EN LA CALIBRACIÒN

Como patrón para realizar la calibración se usará:

Reactivos: Disoluciones ácidas de Dicromato potásico de concentración 0


(blanco), 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm y 100 ppm (mg/l).

Para la medición de las condiciones ambientales, un termómetro de resolución


igual o inferior a 0,5 ºC.

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 3/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

5.- OPERACIONES PREVIAS

Se anotarán las condiciones ambientales durante la calibración del recinto en el que están
ubicadas los equipos sujetos a calibración. Las condiciones ambientales se deben
encontrar entre 20 ± 2 ºC en temperatura y la humedad debe ser menor que 65% Hr.

Todos los equipos y utensilios necesarios para la calibración deben permanecer 30 minutos
para estabilizar la temperatura antes de la calibración.

Antes de iniciar la calibración conviene estar familiarizado con el manejo del equipo, así
como de sus especificaciones técnicas ( Rango de longitud de onda, ancho de banda, paso
óptico de la cubeta).

Inspección visual del equipo. Verificar el buen funcionamiento del equipo. Es necesario
encender el instrumento 15-30 min para permitir un calentamiento homogéneo de las
partes electrónicas y mayor estabilidad de la fuente de excitación (lámpara).

Realizar limpieza de la cubeta del equipo en que va a ser vertida la disolución de medida.

La cubeta o celda solo puede ser tocada por las caras que no se utilizaran como superficie
de incidencia de la luz ( caras estriadas)

Seleccionar la anchura de rendija menor. Seleccionar la longitud de onda a la que se va a


efectuar las medidas.

6.- REALIZACION

La medida de la absorbancia se realizará en las longitudes de onda de medida. En cada


una de las longitudes de onda, se seleccionaran cinco valores de Absorbancia
determinados por las cinco disoluciones acidas preparadas de dicromato potásico, de
diferentes concentraciones: 20 ppm, 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm y 100 ppm (mg/l).

Previamente a la calibración, para comprobar el buen funcionamiento del equipo y la


limpieza de sus partes se analizara un patrón del blanco (sin dicromato potásico). Para ese
valor habrá que ajustar a cero el equipo, salvo en aquellos casos en los que el ajuste se
realiza automáticamente.

Una vez ajustado el equipo, y sin variar las condiciones experimentales prefijadas en las
etapas previas se procede a la realización de la lectura de absorbancia para cada una de
las disoluciones ácidas de dicromato potásico.

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 4/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

Para la realización de las mediciones hay que llenar todas las cubetas hasta la línea de
enrase, en caso de que no existan estas marcas, se debe tener la precaución de llenar las
cubetas tal que el haz de luz atraviese la disolución.

En el caso de que los patrones estuvieran preparados en celdas directamente se mediría,


sin tener que verter la disolución en la cubeta.

Se realizaran cinco reiteraciones en cada uno de los puntos elegidos de calibración.

Una vez finalizada la calibración a una longitud de onda se reitera todo el proceso a una
nueva longitud de onda, en el caso de ser necesario.

7.- TOMA Y TRATAMIENTO DE DATOS

Todas las anotaciones y observaciones que se realicen durante la calibración quedarán


reflejadas en la correspondiente hoja de calibración o bien directamente sobre la hoja de
cálculo.

Se deberán anotar como mínimo en la HTD los siguientes datos:

• Identificación del instrumento y de los patrones utilizados.

• Campo de medida y división de escala del equipo. Ancho de banda y paso


óptico de la cubeta

• Condiciones de medida.

• Lecturas obtenidas durante la calibración.

• Anomalías antes y durante la calibración

• Condiciones ambientales

• Fecha de realización

• Técnico que realiza la calibración

•Cualquier observación que pudiera afectar a la realización correcta del informe


de calibración, o que sea necesaria para poder reproducir totalmente la
calibración.

8.- RESULTADOS DE LA CALIBRACION

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 5/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

La calibración de la escala de absorbancia de un equipo de espectrofotometria con


dicromato potásico se basa en comparar la absorbancia aparente medida A, con la
absorbancia noaminal A0 obtenida a través de los valores de la absorbancia específica
aparente (ε a) dados en la tabla 1 para una fracción de masa nominal de dicromato
potásico conocida (valores reflejados en el método NIST SRM 935)

La asignación de incertidumbres de calibración se realiza según el documento EA/4-02 .


Los cálculos a realizar están expresados a continuación.

Función modelo

En primer lugar se determina la expresión de la magnitud de salida que es la corrección de


medida de la absobancia del espectrofotometro en cada una de las longitudes de ondas a
calibrar y en cada uno de los puntos , en función de las distintas magnitudes de entrada.

Magnitud de salida y= Corrección de la lectura del espectrofotómetro.

y= A0 -A

Ao= ε a. b.c,

siendo ε a la Absorbancia especifica aparente, b el paso de luz de la cubeta expresado


en cm y c la fracción de masa de la disolución de dicromato potásico expresada en g/ Kg

FRACCIÓN 235nm 257nm 313nm 350nm INCERTIDUMBRE


DE MASA
EXPANDIDA U
NOMINAL
K2Cr2O7 k=2
g/kg
0.020 12.260 14.262 4.805 10.672 ± 0.034
0.040 12.304 14.318 4.811 10.682 ± 0.020
0.060 12.347 14.374 4.816 10.692 ± 0.020
0.080 12.390 14.430 4.821 10.701 ± 0.020
0.100 12.434 14.486 4.827 10.711 ± 0.020
0.120 12.480 14.541 4.835 10.722 ± 0.04
0.140 12.524 14.605 4.840 10.731 ± 0.04
0.160 12.567 14.658 4.846 10.742 ± 0.04
0.180 12.609 14.711 4.851 10.751 ± 0.04

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 6/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

0.200 12.649 14.763 4.856 10.759 ± 0.04

TABLA 1: Absorbancia especifica aparente ε a kg/g.cm para una cubeta de 1 cm


(NIST SMR 935)

Calculo de la corrección de la temperatura

Los valores de la Tabla 1 corresponden a una temperatura de calibración de 23,5 ºC, para
la corrección dentro del rango permitido de 20-30 º C debe utilizarse la siguiente fórmula:

ε at = ε a 23,5 ( 1 + k/100 ( t-23.5))

Longitud de onda Coeficiente de


temperatura k ( % ºC)
235 -0.05
257 -0.05
313 -0.02
350 -0.05

A = Media de los valores obtenidos durante la calibración.

Componentes en el calculo de incertidumbre

1. Incertidumbre típica asociada a A0 Es la incertidumbre de medida asociada al patrón


uo.

La incertidumbre típica se calcula a partir de las incertidumbres de ε a , b y c según la


siguiente expresión:

u(A)2=(b.c. u(ε a))2 +(ε a c. u(b ))2+(ε a b. u(c ))2

Siendo b las dimensiones de la cubeta en cm

c la fracción de masa de Dicromato Potásico K2Cr2O7 en g/kg de la disolución

ε a Absorbancia especifica aparente en kg/g.cm para la cubeta de ancho b.


En la tabla se recogen los valores para una cubeta de b=1. En el caso de que la
cubeta fuera diferente los valores de la tabla corresponden a fracciones
másicas/ancho de la cubeta.

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 7/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

Ejemplo: Si la cubeta es de 3 cm y la longitud de onda es 350 nm el valor indicado en


la tabla 16.672 corresponde a una c de 0,020/3 =0,0066g/kg

u(ε a) Incertidumbre típica asociada a ε a según tabla 1 (En la tabla se indica


la incertidumbre expandida para k=2)

u(b) Incertidumbre típica asociada a b, obtenida de la calibración dimensional


de la cubeta.

u(c ) Incertidumbre típica asociada a la disolución

2. Incertidumbre típica asociada a A (valor medio observado). debido a la falta de


repetibilidad de las medidas realizadas.

S
u ( A) =
n

Siendo S la desviación típica (n-1) de las reiteraciones observadas.


n el numero de reiteraciones. (n=5)

Balance de las incertidumbres. Cálculo de u (y).

Coeficien
Mejor valor Distribución de
Incertidumbre te de Contribución a la
Magnitud xi estimado de la probabilidad
típica u(xi) sensibilid incertidumbre ui(y)
magnitud xi considerada
ad ci
Corrección
según
A0
certificado del
uo normal 1 uo(y)
equipo patrón
S S
A xi u ( x1) = normal -1 u1( y) =
n n
y y= A0 -A ----- ---- ----- u(y)

u 2 ( y) = ∑u 2
i ( y)
i

Cálculo de la incertidumbre expandida

La incertidumbre expandida se calcula multiplicando la incertidumbre típica u(y) por un


factor de cobertura k

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 8/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA
PROCEDIMIENTO DE CALIBRACIÓN
ESPECTROFOTOMETROS UV-VIS Q-003

Incertidumbre expandida U= ± k* u (y)

Como n<10 se calcula los grados de libertad efectivos, de tal manera que se aumenta el
factor de cobertura para conseguir una probabilidad de cobertura del 95%.

Grados de libertad de una magnitud de entrada de tipo A= v= n-1

Grados de libertad de una magnitud de tipo B v= ∞

Calculo del vef:

u 4 ( y)
vef =
n u 4 ( y)
∑ i
i =1 v i

Una vez calculado el vef se calcula el factor de cobertura, a partir de la tabla:

vef 1 2 3 4 5 6 7 8 10 20 50 ∞
k 13.97 4.53 3.31 2.87 2.65 2.52 2.43 2.37 2.28 2.13 2.05 2

9.- CRITERIO DE ACEPTACION

Una vez realizada la calibración y sus cálculos asociados un equipo se considerara apto si
el valor de la corrección calculada más su incertidumbre asociada es inferior a la
Incertidumbre admisible para el equipo de medida.

Todos los cálculos los resultados de la calibración se recogerán en el Certificado de


Calibración.

Los resultados del certificado se refieren al momento y condiciones en que se realizaron las
mediciones.

Edición: 00 Revisión: 00 Fecha: 15 de Octubre del 2005 Pág. 9/9


TCM AUTORIZA EXCLUSIVAMENTE EL USO DE ESTE PROCEDIMIENTO A CM Y CIA LTDA