Вы находитесь на странице: 1из 4

СОСТОЯНИЯ ПОТОМСТВА КРЫС-САМЦОВ, ПОЛУЧАВШИХ

ИНГИБИТОРЫ ТОПОИЗОМЕРАЗНОЙ АКТИВНОСТИ

Т.Г. Боровская1, Ю.Ф. Щемерова1, В.Е. Гольдберг2


ГУ «НИИ фармакологии Томского научного центра СО РАМН»1
ГУ «НИИ онкологии Томского научного центра СО РАМН»2

В эксперименте выявлен ряд патологических изменений в потомстве крыс-самцов, получавших однократно в макси-
мально переносимой дозе за 1, 3 и 6 мес до скрещивания противоопухолевые препараты, принадлежащие к ингибиторам
топоизомеразной активности (вепезид, иринотекан). Генетически детерминированные изменения у потомства выражены в
большей степени на фоне введения ингибитора топоизомеразы II вепезида, чем ингибитора топоизомеразы I иринотекана.
Наиболее оптимальным сроком скрещивания с точки зрения наименьшего повреждающего действия на потомство как для
того, так и другого препарата являются 3 мес после цитостатического воздействия.

EFFECT OF TOPOISOMERASA ACTIVITY INHIBITORS ON THE POSTERITY OF MALE RATS


T.G. Borovskaya1, Yu.F. Schemerova1, V.E. Goldberg2
Pharmacolgy Research Institute, Tomsk Scientific Center of SB RAMS1
Oncology Research Institute, Tomsk Scientific Center of SB RAMS2
A series of pathological changes in the posterity of male rats was observed after administration of anti-tumor drugs (Vepeside
and Irinotekan) at a single maximum tolerable dose 1, 3 and 6 months before crossing. Genetically determined changes in the poster-
ity of male rats were pronounced in a greater extent after administering Vepeside (topoisomerasa II inhibitor) than after Irinotekan
(topoisomerasa I inhibitor). In view of the least adverse effect on the posterity, the most preferable time for crossing is 3 months
after administration of these cytostatic drugs.

В настоящее время возрастает количество вепезид. Клинические наблюдения последних


случаев рождения детей у онкологических лет свидетельствуют о том, что эти препараты
пациентов, находящихся в полной длительной обладают более широкими потенциальными
ремиссии после цитостатической химиоте- возможностями в отношении как солидных
рапии [6, 11, 12]. Особенно это касается лиц, опухолей, так и гемабластозов [4, 7, 9]. Случаи
перенесших лекарственное лечение по поводу появления потомства у пациентов, получавших
таких заболеваний, как лимфогранулематоз, схемы лечения, включающие ИТА, описаны ря-
опухоли яичка, считающихся принципиально дом авторов [11, 12]. Однако данные о состоянии
излечимыми. В то же время известно, что про- здоровья детей при этом носят фрагментарный
тивоопухолевые препараты, являясь заведомо характер. В экспериментальных исследованиях
мутагенными соединениями, оказывают токси- выявлена возможность появления потомства у
ческое действие не только на соматические, но крыс-самцов, перенесших воздействие ИТА-1
и на половые клетки [5]. Генетически детерми- иринотеканом и ИТА-2 вепезидом [2, 10].
нированные изменения выявлены у потомства Целью настоящей работы явилось изучение
экспериментальных животных, получавших состояния потомства крыс-самцов, получавших
антрациклиновые антибиотики, алкилирую- ингибиторы топоизомеразной активности
щие соединения [3]. Менее изученными в этом (вепезид, иринотекан) за 1, 3 и 6 мес до скре-
плане являются антибластомные средства, при- щивания.
надлежащие к ингибиторам топоизомеразной
активности (ИТА). Между тем препараты этой Материал и методы
группы занимают прочные позиции в арсенале Эксперименты проведены на 30 беспородных
современной противоопухолевой химиотера- крысах-самцах и 180 крысах-самках, массой
пии. К числу наиболее широко используемых 250–300 г. Животные получены из лаборатории
из них относится ингибитор топоизомеразы биологического моделирования НИИ фармако-
I иринотекан и ингибитор топоизомеразы II логии ТНЦ СО РАМН. Содержание животных
осуществлялось в соответствии с правилами,
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2006. №4 (20)
Т.Г. БОРОВСКАЯ, Ю.Ф. ЩЕМЕРОВА, В.Е. ГОЛЬДБЕРГ
34
принятыми Европейской конвенцией по защите Результаты и обсуждение
позвоночных животных, используемых для экс- Результаты интегральной оценки состояния
периментальных и иных научных целей (Страс- потомства по всем тестируемым показателям
бург, 1986). Вепезид (этопозид, Тева, Израиль) представлены в таблице. Установлено, что на
и иринотекан (Кампто, Rhone-Poulens Rorer, фоне однократного введения в МПД ИТА-1 не
Великобритания) вводили крысам-самцам (10 наблюдалось увеличения эмбриональной смерт-
животных в каждой группе) однократно, внутри- ности по сравнению с контролем. У крыс-самок,
венно в максимально переносимых дозах (МПД), скрещенных с самцами, получавшими ИТА-2
которая составила как для того, так и другого (за 1 и 6 мес до начала опыта), возрастала доля
препарата 30 мг/кг. Дозу препаратов рассчиты- преимплантационных потерь (до 25,45 ± 5,16 % ;
вали методом графического пробит-анализа. в контроле – 7,27 ± 4,57 %; р≤0,05). Полученные
Самцы контрольной группы (n=10) получали данные подтверждают выявленную на мышах-
эквиобъемное количество растворителя. Через 1, самцах способность вепезида индуцировать
3, 6 мес после введения препаратов крыс-самцов доминантные летальные мутации в мужских по-
подсаживали к интактным крысам-самкам (n=20 ловых клетках [5]. Повышенная эмбриональная
на каждый срок эксперимента). Спаривание ре- летальность выявляется также при скрещивании
гистрировали с помощью вагинальных мазков. крыс-самцов после длительного введения вепе-
Часть самок на 20-й день беременности забивали зида в низких дозах [10].
методом дислокации шейных позвонков, вскры- При макроскопическом осмотре всех исследу-
вали и подсчитывали количество желтых тел в емых живых плодов и крысят грубых внешних
яичниках, мест имплантации в матке, живых и аномалий развития обнаружено не было. Ди-
мертвых плодов (из расчета на 1 самку). Затем намика массы, индекс выживаемости, скорость
вычисляли показатели пре- и постимплантаци- физического развития крысят в опыте, и в кон-
онной гибели [8]. Плоды извлекали, взвешивали, троле были сходными. В то же время потомствo
проводили макроскопический осмотр, часть из крыс-самцов, получавших как вепезид, так и
них помещали в раствор Боуэна для фиксации иринотекан, характеризовалось в антенатальном
и последующего исследования состояния вну- периоде возрастанием по сравнению с контро-
тренних органов по методу Вильсона, а часть – в лем на 6–15 % (р≤0,05 ) числа плодов с гемопе-
96 % спирт для фиксации и окраски по методу рикардом, нефроптозом, тимомегалией. На фоне
Доусона с целью изучения процессов оссифика- введения вепезида значительно увеличивалось
ции [8]. Остальных самок оставляли до родов. количество плодов с кровоизлияниями на 30 %
Состояние потомства оценивали в течение 2 мес (р≤0,05). В потомстве обеих экспериментальных
после рождения. Определяли индекс выживае- групп была выявленa также задержка процесса
мости, следили за общим физическим развитием формирования скелета. В значительной степени
(динамика массы тела, сроки отлипания ушной это касалось костей черепа, замедление оссифи-
раковины, появление первичного волосяного по- кации которого отмечалось у 23–37 % плодов, в
крова, прорезание резцов, открытие глаз, половое контроле – у 4–10 % (р≤ 0,05). Степень выражен-
созревание), на 5, 15 и 30-й дни жизни изучали ности отмеченных выше токсических эффектов
скорость созревания сенсорно-двигательных в обеих опытных группах была в основном
рефлексов по тестам «переворачивание на пло- сходной. Однако, судя по срокам проявления,
скости», «избегание обрыва», «мышечная сила», ИТА-1 оказал большее повреждающее действие
«открытое поле». На 60-й день жизни оценивали при воздействии на сперматоциты (скрещивание
способность к выработке условного рефлекса через 1 мес), а ИТА-2 – на сперматогонии (скре-
пассивного избегания (УРПИ) [8] и адаптивному щивание через 3 мес).
поведению в тесте Хандерсона в модификации В постнатальном периоде у 55–69 % крысят в
Н.А. Бондаренко [1]. При статистической об- потомстве обеих опытных групп выявлялся по-
работке использовали критерий Манна–Уитни ниженный по сравнению с контролем мышечный
и угловое преобразование Фишера. тонус (р≤0,05). Оно характеризовалось также

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2006. №4 (20)


Состояния потомства крыс-самцов, получавших ингибиторы топоизомеразной активности
35
Таблица
Состояние потомства интактных крыс-самок и самцов, скрещенных через 1, 3 и 6 мес после введения ИТА

Показатели 1В 3В 6В 1И 3И 6И

Преимплантационная смертность + - + - - -

Постимплантационная смертность - - - - - -

Внешние аномалии - - - - - -
Патологические изменения внутренних органов
плодов + ++ + ++ + +
Состояние процессов оссификации
плодов + ++ + + ++ +

Динамика массы крысят _ _ _ _ _ _

Индекс выживаемости _ _ _ _ _ _

Физическое развитие _ _ _ _ _ _

Мышечный тонус + - + + - -
Рефлексы «переворачивания на плоскости» и «из-
++ - + - - -
бегания обрыва»
Поведение в условиях «открытого поля» + - ++ + - -

Способность к обучению - ++ + - - ++

Адаптивное поведение + - ++ - - -

Примечание:
«- » – отсутствие токсического эффекта по тестируемому показателю;
«+» – умеренная степень выраженности токсического эффекта;
«++» – высокая степень выраженности токсического эффекта.
«В» – вепезид, «И» – иринотекан; 1, 3, 6 – срок скрещивания после введения препарата.

угнетением вертикальной двигательной актив- к адаптивному поведению. Так, количество


ности, «норкового рефлекса», эмоциональной крысят в этой опытной группе с более поздним
реакции (тест «открытое поле»), значительным формированием рефлексов «переворачивания
снижением способности крысят к обучению. на плоскости», «избегания обрыва» возрастало
Так, процент животных с выработанным УРПИ на 10–33 % по сравнению с контролем (р≤0,05).
уменьшался на 43–70 % от контроля (р≤0,05). Способность к избеганию в стресс-ситуации
Степень выраженности этих токсических эф- была нарушена у 17 % крысят, в то время как
фектов была сходной в обеих опытных группах. все крысята контрольной группы подныривали
Однако на фоне введения вепезида они вы- под край внутреннего цилиндра (р≤0,05).
являлись во все сроки исследования, что было Анализируя состояние потомства в зависи-
нехарактерно для потомства крыс-самцов, по- мости от сроков скрещивания после цитоста-
лучавших иринотекан. О более выраженных от- тического воздействия, следует отметить, что
рицательных последствиях для потомства ИТА-2 патологические изменения на фоне введения
по сравнению с ИТА-1 свидетельствуют также вепезида, выявленные при скрещивании через
выявленные только на фоне использования вепе- 1 мес, наблюдались и при спаривании через 6
зида факты замедления скорости формирования мес после начала опыта. Причем степень их вы-
ряда других сенсорно-двигательных рефлексов, раженности в ряде случаев возрастала (в тестах
а также снижения и нарушения способности «открытое поле», «адаптивное поведение»).

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2006. №4 (20)


Т.Г. БОРОВСКАЯ, Ю.Ф. ЩЕМЕРОВА, В.Е. ГОЛЬДБЕРГ
36
Токсическое действие на потомство ириноте- нарушений у потомства. Наиболее оптимальный
кана было выражено, как правило, в большей срок скрещивания для обоих препаратов с точки
степени при скрещивании животных через 1 зрения наименьшего повреждающего действия
мес, чем через 3 и 6 мес после цитостатического на потомство – 3 мес после цитостатического
воздействия. Введение как того, так и другого воздействия.
препарата за 3 мес до спаривания оказывало
наименьшее повреждающее действие. Литература
Cледует отметить, что отмеченные выше 1. Бондаренко Н.А. Рукопись дел ВИНИТИ. 1980. № 20. С.
38–80.
на фоне использовагния ИТА патологические 2. Боровская Т.Г., Гольдберг В.Е., Щемерова Ю.А. и
изменения у потомства не являются специфи- др. Влияние ингибиторов топоизомеразной активности на
морфологические и функциональные показатели сперматогенеза
ческими и наблюдаются после введения анти- крыс // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2005. Прил. 1. С. 26–30.
бластомных средств, принадлежащих к другим 3. Гольдберг Е.Д., Боровская Т.Г. Гонадотоксические эффекты
классам химических соединений. Однако одним противоопухолевых препаратов // Бюл. эксперим. биол. и мед.
2003. № 3. С. 244–252.
из последствий реализации мутагенных эффек- 4. Демина Е.А. Лимфома Ходжкина. Возможности современной
тов антибластомных средств таких групп, как терапии первичных больных // Русский медицинский журнал.
aнтрациклиновые антибиотики, комплексные 2004. Т. 12, № 19. С. 1113–1116.
5. Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Мутагены (скрининг и
соединения платины, может быть появление у фармакологическая профилактика воздействий). М., 1998. 327 с.
потомства внешних уродств, снижение индекса 6. Моисеенко Е.И., Заева Г.Е., Озолин Г.Э. и др. Показатели
здоровья новорожденных лиц, в детстве излеченных от
выживаемости, торможение физического раз- злокачественных новообразований // Материалы VI Всесоюзного
вития [3]. При использовании ИТА отмеченные съезда онкологов. Ростов н/Д. 2005. Т. 2. С. 55.
изменения не выявлялись. В то же время осо- 7. Орел Н.Ф. Возможности использования паклитаксела,
этопозида, цисплатина, метотрексата и 5-фторурацила у больных
бенностью состояния потомства крыс-самцов, солидными опухолями // Русский медицинский журнал. 2004.
получавших препараты этой группы, явля- Т. 12, № 19. С. 1001–1007.
ется значительное снижение способности к 8. Руководство по экспериментальному (доклиническому)
изучению новых фармакологических веществ / Под ред.
обучению, наблюдаемое при скрещивании в Р.У. Хабриева. М., 2005. 560 с.
наиболее отдаленные сроки после введения 9. Селинов Н.Н. Кампто в химиотерапии злокачественных
опухолей // Фарматека. Онкология ASCO. 2005. С. 22–26.
препаратов. 10. Freitas F.E.L., Mori F.C., Cerri E.S. et al. Alterations of
Таким образом, потомство крыс-самцов, spermatogenesis in etoposide – treated rats stereological study // INCI.
получавших ИТА-1 и 2 за 1, 3 и 6 мес до скре- 2002. Vol. 27. P. 1–17.
11. Gaffan J., Holden L., Newlands E. et al. Infertility rates follow-
щивания, характеризовалось сниженной жизне- ing POMB/ACE chemotherapy for male and female germ cell tumours
способностью. Более токсичным в этом плане – a retrospective long – term follow – up study // Br. J. Cancer. 2003.
оказался ИТА-2, о чем свидетельствовала по- Vol. 89, № 10. P. 1849–1854.
12. Pectasides M., Pectasides D., Farmakis D. Testicular function
вышенная антенатальная гибель и более высокая cancer treated with bleomycin – etoposide – carboplatin combination
частота обнаружения других патологических chemotherapy // Eur. Urol. 2004. № 2. P. 187–193.
Поступила 3.04.06

СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2006. №4 (20)

Вам также может понравиться