Министерство образования и науки РС(Я)

ГБПОУ РС(Я) «Якутский медицинский колледж»

ДНЕВНИК ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ ПРАКТИКИ

ПМ. 01 Проведение лабораторных микробиологических исследований

МДК 01.01 Теория и практика микробиологических исследований

по специальности среднего профессионального образования:
31.02.03 «Лабораторная диагностика»

Студента: Павлова Андрея Владимировича

Группы: ФЛ-20-2 (2 бригада)
Место прохождения практики: Учебно-научная микробиологическая
лаборатория СВФУ им. М.К. Аммосова
Срок практики: с 20 декабря по 25 декабря 2021 г.
Общий руководитель: старший фельдшер-лаборант Горохова Наталья
Олеговна
Непосредственный руководитель: врач высшей категории, Отличник
здравоохранения РФ и РС(Я), заведующая УНМЛ Иларова Вера
Иннокентьевна
Методический руководитель практики: Иларова Вера Иннокентьевна

г. Якутск, 2021 г.
 Инструктаж
По технике безопасности в период преддипломной практики для студентов

ГБПОУ(Я) «ЯМК»

Студент-может быть допущен к производственной практики (стажировке)

после прохождение первичного инструктажа по технике безопасности во
время производственной практики.

1.ТЕХНИКА ПРОТИВОПОЖАРНОЙ БЕЗОПАСТНОСТИ:

-пройти инструктаж ПП безопасности;

-знать способы применения средств пожаротушения, противопожарной

защиты и сигнализации, места их расположения в ЛПУ;

-НЕЛЬЗЯ: - сжигать мусор на территории учреждения;

- курить в помещениях ЛПУ

- хранить на рабочем месте легко воспламеняющиеся, горючие жидкости и

материалы.

2. ТЕХНИКА БЕЗОПАСТНОСТИ ПО ПРЕДУПРЕЖДЕНИЮ ЭЛЕКТРОТРАВМЫ:

- соблюдать правила эксплуатации электрооборудования в соответствии с

инструкциями

- не оставлять без присмотра включенные аппараты, приборы, устройства;

- иметь отчетливые представления об опасности поражения электрическим

током;

- уходя с работы включать электроприборы, краны водоснабжения.

3. В ЦЕЛЯХ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ДТП НА ДОРОГАХ

- быть острожными при переходе через дорогу и улицу;

- переходить строго н а светофоре и пешеходном переходе;

- не садитесь на неисправный автотранспорт;

- не садитесь к водителю, который находиться в состоянии алкогольного
опьянения

- не садитесь в грузовой автотранспорт не приспособленный к перевозке

пассажиров;

4.ТЕХНИКА БЕЗОПАСТНОСТИ НА МАЛОМЕРНЫХ СУДАХ ПО РЕКАМ И ОЗЕРАМ:

-ЗАПРЕЩАЕТСЯ переплавляться во время ледокола

5. ПОВЕДЕНИЕ В ПРАЗДНИЧНЫЕ ДНИ ВО ВРЕМЯ ПРОИЗВОДСТВЕННОЙ

ПРАКТИТКИ – во время праздничных дней соблюдать правила поведения
студентов ГБПОУ РС(Я) «ЯМК»; - не участвовать в маевках, выходах на
природу, разжигать костры в лесу.

6. ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСТНОСТЬ:
- соблюдать требования производственной санитарии и личной гигиены,
иметь чистый халат, колпак, маски;

- все манипуляции проводить в резиновых перчатках, избегать порезов,

уколов острыми инструментами, разбитой посудой;

- все повреждения на руках закрывать лейкопластырем,

водонепроницаемыми повязками; - в рабочих помещениях, где существует
риск профессионального загрязнения запрещается есть, пить, наносить
косметику, брать в руки контактные линзы.

С инструктажем ознакомлен______________/Павлов А.В./Дата 29.06.2021

 Таблица 1. График прохождения производственной практик

№ Наименование Количество
отделения МО Дней Часов
По Фактичес По Фактически
плану ки плану
1 Учебно-научная
микробиологическая 6 48
лаборатория СВФУ им. 6 48
М.К. Аммосова

Итого: 6 6 48 48

Таблица 2. График учета рабочего времени

№ Дата Время Прихода Время Ухода Подпись

1 20.12.21 08:00 15:00
2 21.12.21 08:00 15:00
3 22.12.21 08:00 15:00
4 23.12.21 08:00 15:00
5 24.12.21 08:00 15:00
6 25.12.21 08:00 15:00
Да Содержание Оце
та нка
Лаборатория делится на «чистую» и «заразную» зону. В «чистой»
20 зоне лаборатории должны располагаться следующие
12 помещения:
*гардероб для верхней одежды;
*помещения для проведения подготовительных работ;
*(препараторская, моечная, приготовление и розлив питательных
сред и др);
*помещение для стерилизации питательных сред и лабораторной
посуды (стерилизационная)
*помещение с холодной камерой или холодильниками для
хранения питательных сред и диагностических препаратов;
*помещения для работы с документами и литературой;
*помещение отдыха и приема пищи;
*кабинет заведующего;
*помещение для хранения и одевание рабочей одежды;
*подсобные помещения;
В “заразной” зоне должны размещаться;
*помещения для приема и регистрации материала;
*боксированные помещения с предбоксами или помещения,
оснащенные боксами биологической безопастности;
*помещения для имунологических исследований;
*помещение для люминесцентной микроскопии;
*помещения для паразитологических исследований;
*помещение для ПЦР-диагностики;
*термостатная комната;
*помещения для обеззараживания материала (автоклавная).

Ознакомление с оснащением лаборатории, её оборудованиями,

аппаратами и приборами. В каждой лаборатории должны быть:
1. Приборы для микроскопии: биологический иммерсионный
микроскоп с дополнительными приспособлениями
(осветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный
конденсор, люминесцентный микроскоп и др.)
2. Термостаты (t = 37 C) и холодильники
3. Приборы для приготовления питательных сред, растворов и
т.д.: аппарат для получения дистиллированной воды
(дистиллятор), технические и аналитические весы, pH-
метры, аппаратура для фильтрования, водяные бани,
центрифуги
4. Набор инструментов для манипуляций с микробами:
 бактериологические петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.
5. Лабораторная посуда: пробирки, колбы, чашки Петри,
флаконы, ампулы, пастеровские и градуированные пипетки
и др., аппарат для изготовления ватно-марлевых пробок.
Проведение мероприятий по соблюдению санитарно-
эпидемиологического режима в бактериологической
лаборатории. Входят:
1. Влажная уборка всех помещений;
2. Поддержание в них чистоты и порядка;
3. Дезинфекция и стерилизация предметов медицинского
назначения;
Влажная уборка отделения проводится с применением
дезинфицирующих средств, не реже 2 раза в сутки 1%
раствором хлорамина или 3% перекись водорода с 0,5 %
моющими средством, или аламинол 1% или 0,75% раствор
хлорамина с 0,5% моющим средством.

Да Содержание Оцен
та ка
Ознакомление с медицинской техникой:
20 - холодильник для хранения питательных сред при температуре
12 +3, +5
- термостаты для создания оптимальной температуры при
выращивании культур микроорганизмов, при температуре 37 С,
18-24 часа
- анаэростат – прибор, предназначенный для культивирования в
чашках Петри микроорганизмов группы облигатных анаэробов и
микроаэрофилов.
- Назначение бактерицидного рециркулятора –
обеззараживание воздуха в помещении. Устройство позволяет
уничтожить присутствующие в воздухе бактерии,
микроорганизмы и вирусы. Оно используется для профилактики
вирусных инфекций, которые распространяются воздушно-
капельным путем.
- гигрометр психрометрический содержащее сухой и
смоченный термометры устройство для косвенного
измерения влажности газов прежде всего воздуха по
понижению температуры смоченного твёрдого
тела — датчика температуры; влажность газа вычисляют
посредством психрометрической формулы по разности
температур сухого и смоченного термометров.
-WASP – автоматизированная система посева клинических
образцов, полная роботизация микробиологических
исследований. Это роботизированная система, объединившая в
себе автоматизированный процесс микробиологического
посева, приготовление мазка и пересев в бульон.
- ламинарные боксы – лабораторный прибор для работы с
биологическими объектами в стерильных условиях.
Представляет собой шкаф, оборудованный осветителями,
ультрафиолетовыми лампами и системой подачи стерильного
воздуха.
- дистиллятор - специальное оборудование, которое
автоматически проводит очищение воды до состояния
дистиллированной.
- автоклав – это специализированный аппарат, предназначенный
для осуществления нагрева веществ при высоком давлении.
Создаваемые в нем условия позволяют сдвинуть точку кипения
жидкости вверх, обеспечив более высокотемпературную
обработку

.
Правила подготовки и сбора биологического материала.
При сдаче любого биологического материала необходимо
соблюдать следующие условия:
- Нельзя проводить такие исследования в период приема любых
антибактериальных препаратов. Необходимо решить вопрос с
врачом о временной отмене лекарственных препаратов;
- Пробу собирают только в стерильную посуду или пробирки с
транспортными средами, заранее полученную в поликлинике
или лаборатории, которая ведёт исследование биоматериала;
- Мочу для проведения бактериологических исследований
собирают после тщательного туалета наружных половых
органов.  Первую порцию мочи (2-4 секунды) cпустить в унитаз,
среднюю порцию в количестве 3-5 мл собрать в стерильную
герметически закрывающуюся посуду. Мочу доставить в
лабораторию в течение 1-2 часов;
- За 2-3 дня до визита в клинику для сдачи мазка из половых
органов следует прекратить использование любых влагалищных
таблеток, шариков, свеч (и лечебных, и противозачаточных). Эти
исследования не сдаются в период менструации и в течение 1-2
дней после её окончания;
- Накануне вечером и с утра в день взятия мазка не следует и
спринцеваться;
- В холодное время года доставляемый материал необходимо
предохранить от замерзания.
Хранение: не хранить! Срочно сдать в лабораторию!
Предохранять от замораживания и перегрева!
Материал для исследования дисбактериоза
кишечника необходимо доставлять в лабораторию в течение 1-2
часов.
- Исследованию подлежит утренний кал.
- При отборе материала следует брать стерильной ложечкой
среднюю порцию фекалий, не прикасаясь к стенкам
подкладного судна.
- Кал собирают в подкладное судно (можно использовать
бытовую одноразовую тарелку).
- Количество кала не должно превышать 5-6 лопаточек.
- Исследование на дисбактериоз проводится 2-3-кратно с
интервалом не менее 14 дней.
Хранение: не хранить! Срочно сдать в лабораторию!
Предохранять от замораживания и перегрева!
На исследование клостридий (Clostridium difficile), ротавирусов,
аденовирусов, норовирусов.
- На исследования материал отбирают в стерильный контейнер с
ложечкой, вмонтированной в крышку.
- Исследованию подлежит утренний кал.
- Кал собирают в подкладное судно (можно использовать
бытовую одноразовую тарелку).
- При отборе материала следует брать стерильной ложечкой
среднюю порцию фекалий, не прикасаясь к стенкам
подкладного судна.
- Количество кала не должно превышать 2-3 лопаточек.
Хранение: не хранить! Срочно сдать в лабораторию!
 Предохранять от замораживания и перегрева!
На энтеропатогенные кишечные бактерии, на иерсинии, на
золотистый стафилококк.
- На каждый вид исследования материал отбирают в отдельную
пробирку с транспортной средой в процедурном кабинете
врача-инфекциониста.
- Материал берут стерильным тампоном, непосредственно из
прямой кишки, вводя его на 6-7см.
- Вскрывают пробирку со средой и помещают в нее тампон с
биоматериалом, следя за тем, чтобы пробка, в которую
вмонтирован тампон, плотно закрывала пробирку.
- Проводят маркировку образца, используя этикетку на
пробирке.
Хранение: не хранить! Срочно сдать в лабораторию!
Предохранять от замораживания и перегрева!

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
20 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Изучение питательных сред, правил их приготовления.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
МЖСА (молочно-желточный солевой агар):
1 л. солевой раствор (1 л дистиллированная вода + 65 гр. соли) +
100 мл. молока + 100 мл. желточной смеси (1 желток + 100 мл
физраствора)
ГРМ 77 гр на 2 литра дистиллированной воды = сварить, затем
автоклавирование.
В 1 литр агара добавляют 1 желток +100 мл физраствора
(желточная смесь). В тёплый агар добавляют солевой раствор,
затем холодное молоко, затем добавляется желтая смесь.
Разливаем по стерильным чашкам и оставляем на несколько
часов. После остывания указываем число(дату) изготовления.
Стерилизация при температуре 121℃, под давлением 1 атм., в
течении 15 минут.
Кровяной агар: Агар специального назначения.
1 литр дистиллированной воды добавляем 38,5 гр ГРМ агара,
затем нагревать до полного растворения, остудить.
1 л. остывшего агара + 50 мл. эритроцитарной массы (крови).
Стерилизация при температуре 121℃, под давлением 1 атм., в
течении 15 минут.
Шоколадный агар:
В 1 литр дистиллированной воды добавляем 38,5 гр. ГРМ агара,
нагревать до полного растворения агара.
1 л. горячего агара + 100 мл. крови. Стерилизация при
температуре 121℃, под давлением 1 атм., в течении 15 минут.
Агар Мюллера-Хинтона:
В 1 л. дистиллированной воды добавляем 38 гр. порошка агара М-
Х, нагреваем. Стерилизация при температуре 121℃, под
давлением 1 атм., в течении 15 минут.
Агар Ацетат:
В 1 литр дистиллированной воды добавляем 29 гр. порошка
acetate differential agar, нагреваем. Разливаем по стерильным
пробиркам под углом, оставляя площадь для укола. Стерилизация
при температуре 121℃, под давлением 1 атм., в течении 15
минут.
Агар Симмонс:
В 1 литр дистиллированной воды добавляем 24,3 гр. порошка
Simmons citrate agar, нагреть до полного растворения порошка,
простерилизовать. Стерилизация при температуре 121℃, под
давлением 1 атм., в течении 15 минут.
Агар Маннит:
В литр дистиллированной воды добавляем 123 гр. порошка
питательной среды № 10 ГРМ, нагреть до полного растворения
порошка, простерилизовать. Стерилизация при температуре
121℃, под давлением 1 атм., в течении 15 минут.
Агар КТА (кровяно-теллуритовый агар):
В 1 литр дистиллированной воды добавляем 44 гр. порошка,
нагреть до полного растворения порошка, простерилизовать,
затем добавки.
На 1 л. агара + 12,5 гр. 2%-ого теллурита калия. Стерилизация при
температуре 121℃, под давлением 1 атм., в течении 15 минут.
Агар Олькеницкий:
В 1 литр дистиллированной воды добавляем 67 гр. порошка,
нагреть до полного растворения порошка, простерилизовать.
Стерилизация при температуре 110℃, под давлением 0,5 атм., в
 течении 15 минут.
Индольные полоски:
Фильтровальная бумага поместить в ёмкость с раствором 50 мл.
96% спирта, 5 гр. бензоата натрия, 10 мл. ортофосфорной
кислоты. Просушить, затем нарезаем на полоски.

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
20 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Для приготовления питательных сред и растворов, используемых
при микробиологическом анализе, допускается применение
химических веществ по степени чистоты не ниже ЧДА (чистая для
анализа). Основным фактором, определяющим качество и
дальнейшую пригодность питательной среды, является
правильность её приготовления. Приготовление сред должно
осуществляться со строгим соблюдением рецептуры
приготовления и условий стерилизации, определенных
изготовителем. Контроль питательных сред на этапе
приготовления включает:
- оценку внешнего вида готовой среды;
- измерение pH питательной среды до и после автоклавирования;
- определение стерильности (отсутствия контаминации) готовой
среды;
- постановку качественного контроля биологических свойств
среды;
Оценку состояния работ по контролю питательных сред на этапе
приготовления проводят на основании данных,
зарегистрированных в Журнале приготовления и контроля
питательных сред. Контролю подвергают каждую серию
приготовленной среды.
Оценка внешнего вида готовой среды. Оценку внешнего вида
готовой питательной среды проводят визуально. Цвет,
прозрачность и консистенция приготовленной среды должны
быть типичны для данной питательной среды и соответствовать
нормативной документации изготовителя.
Измерение рН.
Значение водородного показателя определяют с помощью рН-
метров для агаризованных и жидких питательных сред.
Определение проводят согласно инструкции по использованию
приборов. Величину водородного показателя измеряют у
стерилизованной среды, а при работе с плотной средой измеряют
у стерилизованной среды после её отвердения. Результаты
регистрируют в журнале.
Определение стерильности.
Определение стерильности (для стерилизуемых сред) и
отсутствия контаминации (для нестерилизуемых сред) проводят
путем выдержки в течение 48-72 часов при температуре 35-37℃.

Анализ мочи на микрофлору должен быть назначен дважды,

включая первичное исследование для выявления возбудителя
инфекции, а также контрольную диагностику. Посредством этого
исследования в урине больного можно обнаружить:
- стрептококки;
- стафилококки;
- энтерококки;
- кандиды;
- протей;
- эшерихии;
- клебсиеллы.
Проводится в отделе исследования на воздушно-капельные
инфекции, микрофлору, идентификации выделенных культур.
Перед проведением работы, проводим текущую уборку. Для
посева мочи используются: материал, горелка,
бактериологическая петля, среды УТИ и cled-агар.
Среда УТИ – хромогенная среда для выделения уропатогенов.
Цвет: прозрачно-желтый.
Среда cled-агар – для культивирования патогенных бактерий из
мочевых путей, прозрачный, темно-зеленого цвета.
На данных средах делаются 2 анализа. Перед взятием материала,
баночку с мочой взбалтываем, не доводя до пены,
бактериологическую петлю обеззараживаем огнём с помощью
горелки. При помощи специальной бактериологической петли
небольшое количество урины наносят на подготовленные среды.
Пробы закрываем крышкой, затем помещаем в термостат на 18-
24 часа при температуре 37℃. Далее происходит наблюдение за
бактериями и изучение образовавшихся микроорганизмов
врачом.
Микробиологическое исследование мокроты проводится, чтобы
выявить возбудителя заболевания и определить его
чувствительность к антибактериальным лекарственным
средствам. Для посева мокроты берутся следующие среды:
кровяной агар, шоколадный агар, МЖСА, сабуро и эндо.
Используются инструменты: горелка, бактериологическая петля. С
материала стараемся брать сгусток на бактериологическую петлю.
На кровяной и шоколадные агары делаются анализы на 1
материал.
На среды МЖСА, сабуро и эндо делаются по два анализа. Каждый
раз, как сеем петлей, бактериологическая петля обязательно
обеззараживается огнём при помощи горелки.
Сеянные чашки ставим в термостат на 18-24 часа при температуре
37℃.
Культивирование анаэробных бактерий производят в анаэробных
условиях. Анаэробные условия можно создать при
культивировании в анаэростате, эксикаторе (на дно которого
устанавливается зажженная свеча, либо наливается щелочной
раствор пирагалола, поглощающий кислород) и биологическим
методом по Фортнеру и др.
В практических лабораториях обычно для выделения чистых
культур анаэробов используются методы Цейсслера или
Вейнберга. Процесс выделения чистой культуры можно разделить
на несколько этапов.
Метод Цейсслера
1. Микроскопия и окраска по Граму.
2. При обнаружении подозрительных на анаэробы микробов
исследуемую среду засевают на Китта-Тароцци. Пробирки
заливают слоем парафина или вазелинового масла. Инкубация
37°C 18-24 часа.
3.Просмотр посевов и описание характера роста. 4. Окраска по
Граму и микроскопия.
5.Пересев на сахарно-кровяной агар для получения
изолированных колоний. Чашки помещают в анаэростат.
Инкубация 37°C 18-24 часа.
6.Просмотр посева, изучение изолированных колоний и описание
характера роста. Для изучения морфологии бактерий производят
микроскопию окрашенного по Граму мазка. 7.Для выделения и
накопления чистой культуры пересевают подозрительные
колонии в пробирку со средой Китта-Тароцци. Инкубация 37°C 18-
24 часа.
7.Изучение характера роста чистой культуры. Проверка чистоты
выделенной культуры путем микроскопии.

Выделение чистой культуры аэробных бактерий Чистой культурой

называется популяция бактерий одного вида, выращенная на
питательной среде. Выделение чистой культуры аэробных
бактерий достигается механическим разобщением исследуемого
материала при посеве на питательные среды в присутствии
кислорода. В практических лабораториях обычно для выделения
чистых культур используется метод Дригальского - поверхностный
последовательный рассев исследуемого материала петлей на три
чашки (три сектора) в МПА. Процесс выделения чистой культуры
можно разделить на несколько этапов.
1. Приготовление мазка из исследуемого материала.
2. Окраска по Граму или другим методом.
3. Микроскопия.
4. Просмотр посевов на следующий день и изучение
изолированных колоний.
5. Микроскопия изолированных колоний. 6.Пересев в пробирку
со скошенным МПА (инкубация 37 °C 18-24 часа)
6. Изучение характера роста чистой культуры. Постановка
биохимических тестов для дальнейшей идентификации или
изучение Аг свойств реакцией агглютинации.
Реакция агглютинации
• РА-это склеивание крупных корпускулярных АГ (О-Аг –
соматический антиген;Н-Аг – жгутиковый антиген) под действием
специфических АТ в присутствии раствора электролитов. Антиген
в РА – агглютиноген, а АТ-агглютинин. Образующийся комплекс из
двух компонентов называется - агглютинат.
• Виды РА:
1. Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА или
РПГА)
 2. Реакция обратной непрямой гемагглютинации (РОНГА)

Итог дня
 Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись
м/с

20.12.2021 Изучение техники и методов посева 1

клинических материалов и
бактериальных культур: посев мочи и
мокроты

Выделение чистой культуры аэробных 1

и анаэробных микроорганизмов

Организация практики, инструктаж по 1

охране труба и технике безопасности

Ознакомление с планом строения 1

учебно-научной микробиологической
лаборатории

Ознакомление с оборудованиями и 1
приборами

Проведение мероприятий по 1
соблюдению санитарно-
эпидемиологического режима в
бактериологической лаборатории

Проведение текущей уборки 2

Изучение устройства и оборудования 1

бактериологической лаборатории

Подготовка клинического материала 1

для бактериологического
исследования

Проведение текущей уборки 2

Изучение питательных сред, правил их 1

приготовления

Проведение текущей уборки 2

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
21 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
 Анализ ЦК
 Среды: МЖсА; Кровяной; Сабура; Эка; Эндо.
 Способ анализа
 Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса
(шкаф) приносим или же подготавливаем инструменты для
анализа а после приносим образцы в металлическом ящике
заранее распределив их по номерам. И тоже самое делаем
со средами (ложим среды сверху вниз МЖсА; Кровяной;
Сабура; Эка; Эндо). Делим с помощью маркера на одну
четвертую (1/4) и пронумеровываем по номерам анализов
для посева. Наносим аккуратно на площадку рисуя елочкой
частыми линиями без возвращения назад и время от
времени покручивая анализ и на последней среде
заполняем полностью до краев не заходя за метку
маркером. После обратно ложим анализ на штатив
аккуратно распределив образец с другими образцами и
продолжаем так же делать на других анализах для ЦК.
После окончания посевов чашки помещаются в термостат
на 18-24 часов при температуре 37℃.
Анализ Зев-нос
 Среды: МЖСА; Кровяной; Шоколадный; Сабуро; Эндо.
 Способ анализа
Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса
(шкаф) приносим или же подготавливаем инструменты для
анализа а после приносим образцы в металлическом ящике
заранее распределив их по номерам. Распределяем их
сверху вниз ( МЖСА; Кровяной; Шоколадный; Сабуро;
Эндо). Среду нужно с помощью маркера разделить
пополам и пронумеровать по номерам образца. (ВАЖНО На
среде сабура пишем номера только зеф) И после этого мы
 берём среду и анализ. Наносим аккуратно на площадку
время от времени покручивая анализ и на последней среде
заполняем полностью до краев не заходя за метку
маркером. После обратно ложим анализ на штатив
аккуратно распределив образец с другими образцами и
продолжаем так же делать на других анализах для Зев-Нос
По окончании посева чашки помещаем в термостат. Если
материал ухо, рана, глаз и кожа, то после посева, ватную
палочку с материалом помещаем в сахарный бульон,
нумерируем пробирку и помещаем в термостат.

Начало рабочего дня с 08:00.

21 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Изучение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
Определение чувствительности микроорганизмов -
возбудителей инфекционных заболеваний человека к
антибактериальным препаратам (АБП) - приобретает все более
важное значение в связи с появлением и широким
распространением антибиотико -резистентности у бактерий.
Оценка антибиотикочувствительности, независимо от
конкретного метода, предполагает последовательное
выполнение нескольких этапов:
- приготовление питательных сред;
- приготовление суспензии исследуемых микроорганизмов
(инокулюма);
- инокуляция;
- инкубация;
- учет и интерпретация результатов, формулировка
рекомендаций по лечению.
Диффузионные методы включают также этап наложения дисков
или полосок Е-теста на плотную питательную среду.

Для определения чувствительности следует использовать

только стандартизированные качественные диски. Изготовление
дисков с АБП, необходимых для определения чувствительности
диско-диффузионным методом, в лабораторных условиях
нецелесообразно. Это связано с жесткими требованиями к
исходным материалам (субстанциям АБП, картону) и со
значительной трудоемкостью методов контроля качества дисков.

Для получения правильных результатов определения

чувствительности, необходимо строго соблюдать правила
хранения и использования коммерческих дисков, в противном
случае содержание в них антибиотиков может снизиться ниже
допустимого уровня (прежде всего в результате увлажнения) еще
до истечения срока годности.
Долговременное хранение дисков с АБП осуществляют в
герметичной упаковке в морозильной камере при температуре -
18 °С и ниже. Небольшие партии дисков, используемые при
повседневной работе, можно хранить в холодильнике при
температуре 4-8 °С, плотно укупоренными так, чтобы
гарантировать невозможность попадания во флакон влаги, кроме
того, для дополнительной защиты от влаги во флаконах
(картриджах) с дисками содержится специальный
влагопоглотитель (силикагель).
Флаконы (картриджи) с дисками следует извлекать из
холодильника за 1 ч до начала работы и выдерживать герметично
закрытыми до достижения ими комнатной температуры, что
предотвращает образование конденсата на дисках после
открывания флаконов.
Результаты вносим в журнал. Если диаметр определенного
антибиотика больше 2 см = S (чувствительна), если вокруг нет
никаких подавлений роста, то пишем R (нечувствительна)
Проведение идентификации бактериальных культур с
использованием бактериофагов
В процессе идентификации чистой культуры, используют видовые
и типовые бактериофаги
- Видовые бактериофаги используются для фагоиндикации.
Выделенную чистую культуру засевают газоном на агаризованную
питательную среду и наносят на него каплю определенного
видового бактериофага. Если культура относится к искомому
виду, то в месте нанесения капли наблюдается лизис культуры,
если фаг не соответствует культуре, в месте нанесения капли фага
будет наблюдаться бактериальный рост. Иногда после нанесения
бактериофага чашку Петри наклоняют, давая капле стечь в краю
чашки (из-за чего метод называют «стекающая капля»);
- Типовые бактериофаги используются для фаготипирования;
 Итог дня

Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись м/с

21.12.2021 Изучение чувствительность 1

микроорганизмов к антибиотикам

Проведение идентификации 1
бактериальных культур с
использованием бактериофагов

Проведение текущей уборки 2

Проведение текущей уборки 2

Проведение посевов ЦК 17

Проведение посевов зев/нос 13

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
22 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Проведение микробиологической диагностики инфекций
- Микроскопический (бактериоскопический) метод основан на
изучении морфологических свойств микроорганизмов с
использованием различных видов микроскопии; в бактериологии
микроскопический метод получил название –
бактериоскопичсекий
- Бактериологический (культуральный) метод, основан на
выделении чистых культур бактерий и их дальнейшей
идентификации;
- Иммунологический метод представляет собой совокупность
методов, общим для которых служит использование в
диагностических целях иммунологических реакций;
- Биологический метод (экспериментальный) основан на
заражении лабораторных животных, исследуемым материалом с
целью воспроизведения у них инфекционного заболевания;
- Молекулярно-генетический метод основан на обнаружении
фрагментов генома (молекул днк, рнк) возбудителя в
биологическом материале;
При диагностике инфекционного заболевания, часто один из них
методов является основным, а другие – вспомогательными.
Изучение техники и методов посева клинических материалов:
посев дизгруппы
Для посева потребуется: бактериологическая петля, горелка,
среда SS-агар, материал в стерильной баночке. В среде делается
два анализа. Делим пополам маркером на дне чашки среды,
нумерируем. Материал приходит либо в баночке, тогда надо
брать стерильные ватные палочки и им провести площадку по
среде, либо на ватных палочках со специальной средой.
Проводим площадку на среду, затем начиная с самой площадки
начинаем делать «змейку», чтобы при этом линии находились
чуть далее друг от друга.
 Петлю каждый раз обязательно обеззараживаем. После посева,
сеянные чашки помещаем в термостат на 18-24 часа. Если там
указаны, что данный материал должен быть в селените, то после
сеяния, палочку с материалом помещаем в среду селенит и
помещаем в термостат на 18-24 часа. Затем, на следующий день,
самой палочкой сеем на SS-агар частыми линиями. В чашке среды
обязательно указываем, что сеяли селенит. Дальше проверяется
врачом.

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
22 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.

Анализ на Дифтерия
Среды: КТА
Способ Анализа
На одну среду делается 2 анализа. Делим среду на две части,
нумерируем. Палочку с материалом сеем на среду частыми
линиями, без возвращения назад. Сеянные чашки помещаем в
термостат на 18-24 часа при t= 37

Анализ Стафилококк
Среда: МЖСА
Способ Анализа
Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса (шкаф)
приносим или же подготавливаем инструменты для анализа а
после приносим образцы в металлическом ящике заранее
распределив их по номерам. И тоже самое делаем со средами.
Делим по ¼ и пронумеровываем. После этого мы берём среду и
анализ. Наносим аккуратно площадку время от времени
покручивая анализ и досеиваем полностью среду. После обратно
ложим анализ на штатив аккуратно распределив образец с
другими образцами и продолжаем так же делать на других анал.
 Итог дня

Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись м/с

22.12.2021 Проведение посева Стафилококк 24

Проведение посева клинических 22

материалов: посев Дифтерия
Проведение текущей уборки 2

Посев Зев-Нос 46

Проведение микробиологический 1
диагностики инфекций.

Проведение текущей уборки 2

Посев ЦК 14

Да Содержание Оце
та нка
 Начало рабочего дня с 08:00.
23 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Изучение микроскопического метода исследования.
Составные части микроскопа:
1 – окуляры;
2 – бинокулярная насадка;
3 – штатив;
4 – рукоятка грубой; настройки на резкость;
5 – рукоятка точной; настройки на резкость;
6 – рукоятки перемещения предметного столика вправо/влево
7 – коллектор;
8 – конденсор;
9 – предметный столик;
10 – объективы;
11 – револьверное устройство.
Механическая часть биологического микроскопа включает штатив
с предметным столиком; бинокулярную насадку; рукоятку грубой
настройки на резкость; рукоятку точной настройки на резкость;
рукоятки перемещения предметного столика вправо/влево,
вперед/назад; револьверное устройство. Оптическая часть
микроскопа включает осветительный аппарат, конденсор,
объективы и окуляры.
Приемы микроскопирования живых микроорганизмов.
Нативные (прижизненные) препараты готовят для исследования
живых неокрашенных бактерий. Наиболее распространенными
являются методы «висячей капли», «раздавленной капли»,
«отпечаток», «агаровая пленка», микрокамеры с плотными
средами. Препараты живых клеток обычно рассматривают с
«сухими» системами микроскопа. Для прижизненного изучения
бактерий часто используют фазово-контрастную и темнопольную
микроскопию. Морфологическое разнообразие бактерий можно
изучить при приготовлении негативного тушевого препарата,
когда окрашивают суспензию тушью. В поле зрения микроскопа
на общем темном фоне туши отчетливо видны неокрашенные
клетки микроорганизмов различной формы, разных размеров,
расположенные в разнообразных сочетаниях. Препараты, работа
с которыми закончена, прежде чем вымыть, выдерживают в
дезинфицирующем растворе.
Препарат «раздавленная капля».
На предметное стекло наносят каплю стерильной водопроводной
воды, помещают в нее небольшое количество клеток изучаемых
микроорганизмов, размешивают и накрывают покровным
стеклом. Для этого покровное стекло ставят на ребро у края капли
и постепенно опускают на нее. Микроорганизмы, 35 выращенные
на плотной или в жидкой питательной среде, переносят в каплю
воды бактериологической петлей; выращенные в жидкой среде –
переносят стерильной пипеткой. В последнем случае каплю воды
на предметное стекло можно не наносить. Капля исследуемого
материала должна быть настолько мала, чтобы из-под
покровного стекла не выступал избыток жидкости. Если он
образовался, его необходимо удалить фильтровальной бумагой.
Препарат можно микроскопировать с использованием
иммерсионной системы.
Препарат «висячая капля».
Каплю суспензии микроорганизмов петлей или обычным пером
наносят на покровное стекло, которое поворачивают каплей вниз
и помещают на специальное предметное стекло с углублением
(лункой) в центре. Капля должна свободно висеть, не касаясь
краев и дна лунки. Края лунки предварительно смазывают
вазелином. Капля оказывается герметизированной во влажной
камере, что делает возможным многодневное наблюдение за
объектом. При работе с бактериями этот метод используется
редко.
Препарат «отпечаток».
Из агаризованой среды, на которой растут микроорганизмы,
вырезают скальпелем небольшой кубик и переносят на
предметное стекло так, чтобы поверхность с микроорганизмами
была обращена вверх. Затем к газону или к колонии
прикладывают чистое покровное стекло, слегка надавливают на
него петлей или пинцетом и тотчас же снимают, стараясь не
сдвинуть в сторону. Полученный препарат помещают отпечатком
вниз в каплю воды или метиленового синего (1: 40) на
предметное стекло. Отпечаток можно получить и на предметном
стекле, если касаться поверхности колонии или газона
предметным стеклом. Препарат «отпечаток» используют в
основном при исследовании спороношения стрептомицетов.
Препарат «микрокультура» (или «агаровая пленка»).
На тонкое, простерилизованное и нагретое предметное стекло
 наносят стерильной нагретой пипеткой 0,2–0,3 мл горячей
агаризованной питательной среды и распределяют ее по всей
поверхности стекла. После застывания среды удаляют петлей
лишний агар, оставляя два тонких участка пленки величиной с
покровное стекло каждый. В центр квадратов бактериальной
петлей или пипеткой наносят каплю жидкой культуры или
суспензии клеток микроорганизма. Стекло помещают во влажную
камеру (чашка Петри со слоем мокрой фильтровальной бумаги),
которую ставят в термостат. Перед микроскопированием на
пленку с выросшей микрокультурой наносят 36 каплю красителя
или каплю воды в случае подсыхания пленки, и затем осторожно
накрывают покровным стеклом. Выращивание микроорганизмов
непосредственно на предметном стекле позволяет вести
микроскопическое наблюдение за процессами их роста и
развития, изучать цикл развития, способ размножения (деление-
почкование), влияние на эти процессы каких-либо агентов. На
препаратах не нарушается естественное расположение клеток в
растущей микроколонии. Выращивание микроколонии можно
проводить в аэробных или анаэробных (под покровным стеклом,
загерметизированном лаком) условиях. Агаровую пленку можно
нанести на покровное стекло и приготовить препарат «висячая
капля». На таком препарате можно наблюдать движение
бактерий по типу скольжения. Движение бактерий за счет
жгутиков можно наблюдать во влажных препаратах, применяя в
большинстве случаев светлопольный микроскоп. Наиболее
эффективно наблюдение за подвижностью в темнопольном
микроскопе.

Да Содержание Оце
та нка
Изучение морфологии бактерий. Окраска мазка простым
23 методом.
12 Морфологические типы бактерий, в сравнении с высшими
организмами, немногочисленны. Клетки большинства бактерий
имеют следующие три формы: сферическую, цилиндрическую
или извитую, но существует небольшая группа
мицелийобразующих форм, нитчатых бактерий и бактерий,
образующих выросты. В соответствии с этим все бактерии по
форме подразделяют на следующие группы.
- Кокки (сферические клетки) могут быть одиночными
(микрококки), парными (диплококки, например, нейссерия);
тетракокки, располагающиеся по 4 в форме квадратов;
пакетообразные кокки, располагающиеся «этажами» (сарцины);
располагающиеся цепочками (стрептококки); образующие
бесформенные скопления в виде виноградных гроздьев
(стафилококки). Диаметр клеток – 0,5–2 мкм.
- Палочковидные бактерии – наиболее многочисленная группа,
клетки представляют собой цилиндрические структуры. Размеры
таких клеток сильно варьируют и могут быть от сотых долей до 5–
10 мкм, чаще 1–3 мкм. Такие бактерии часто образуют пары или
цепочки клеток (например, палочка сибирской язвы), но могут
быть и одиночными (например, энтеробактерии).
- Извитые бактерии могут быть трех типов: вибрионы, спириллы и
спирохеты. Вибрионы – бактерии, изогнутые в виде запятой
(холерный вибрион, кампилобактер); спириллы имеют несколько
крупных обычно неравных завитков (возбудитель возвратного
сыпного тифа); спирохеты имеют вид тонких спиралевидных
клеток со множеством равных завитков и петель (возбудитель
сифилиса, большая зубная спирохета, малая зубная спирохета).
Простыми методами окрашивания называют окрашивание
препаратов каким-либо одним красителем. Некоторые
микроорганизмы (спирохеты), плохо выявляемые с помощью
позитивных красителей, легко выявляются при окрашивании
негативными красителями. Техника приготовления препарата
заключается в следующем. Фиксированный препарат помещают
на параллельные стеклянные рейки (мостик), которые лежат над
кюветой. На мазок наносят с помощью капельницы 1 % водный
раствор фуксина или метиленового синего на 1–2 мин. Следят за
тем, чтобы во время окрашивания раствор красителя не
подсыхал. После завершения окрашивания, краситель сливают.
Препарат промывают водой до тех пор, пока стекающая воде не
станет бесцветной. Затем препарат высушивают. Для этого
нижнюю сторону препарата промокают фильтровальной бумагой,
а верхнюю сторону осторожно обсушивают с боков, не
дотрагиваясь до мазка. Препарат окончательно досушивают на
воздухе или высоко над пламенем спиртовки. Для получения
более чистых препаратов краситель наносят на мазок, покрытый
фильтровальной бумагой. Метод окрашивания в модификации 46
Синева позволяет использовать вместо раствора красителя
заранее пропитанную им фильтровальную бумагу. В правильно
окрашенном и хорошо промытом препарате поле зрения светлое
и чистое, окрашены только клетки. Микроскопируют препараты с
иммерсионной системой.

Бактериальная клетка состоит из клеточной стенки,

цитоплазматической мембраны, цитоплазмы с включениями и
ядерного аппарата, называемого нуклеоидом. Имеются другие
структуры: мезосома, хроматофоры, тилакоиды, вакуоли,
включения полисахаридов, жировые капельки, капсула
(микрокапсула, слизь), жгутики, пили.
Окраска по методу Грама.
Окраска по методу Грама является самым универсальным из
сложных методов окраски. Окраска положена в основу
дифференциации бактерий и отражает способность клеток
воспринимать и удерживать внутри клетки красящий комплекс
генцианового фиолетового и йода либо терять его после
обработки спиртом. Соответственно выделяют
грамположительные (Bacillus, Clostridium, Staphylococcus,
Streptococcus, Lactobacillus, Sarcina, etc.) и грамотрицательные
(Escherichia, Pseudomonas, Erwinia, Neisseria, Rickettsia, etc.)
формы.
Этапы дифференцированного окрашивания по Граму:
• Фиксированный мазок покрывают кусочком фильтровальной
бумаги (1,5 х 1,5 см) и на него до полного смачивания наносят
карболовый раствор генцианового фиолетового или
кристаллический фиолетовый (чаще используют модификацию
Синева). Окрашивание проводят на протяжении 1–2 мин.
• Бумажку снимают, краситель сливают и, не промывая препарат
водой, наносят на препарат раствор Люголя на 1–2 мин до
почернения мазка.
• Сливают раствор Люголя, окрашенный мазок обесцвечивают
96º этиловым спиртом. Для этого препарат 2–3 раза помещают в
стакан со спиртом до прекращения отхождения фиолетовых
струек (время обесцвечивания – не более 30 с), либо наливают 2–
4 капли спирта на мазок на 30–45 с.
• Препарат быстро промывают водой (как описано выше).
• Мазок дополнительно окрашивают на протяжении 1–2 мин
водным раствором фуксина (фуксин Пфейффера).
• Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают
фильтровальной бумагой.
• микроскопируют с иммерсионной системой.
• Грамположительные бактерии окрашиваются в
фиолетовый цвет, грамотрицательные – в розовый
(красный).
  Анализы ДГ (Дизгруппа)
 Среды: СС Агар
 Способ анализа
Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса (шкаф)
приносим или же подготавливаем инструменты для анализа а
после приносим образцы в металлическом ящике заранее
распределив их по номерам. Среду нужно с помощью маркера
разделить пополам и пронумеровать по номерам образца. И
после этого мы берём среду и образец. Для начала мы берем
спиртовку и осторожно поджигаем его с помощью спички или
зажигалки и нагреваем петлю ровно под 45 градусов после
открываем крышку образца и с помощью петли берем немного
анализа и делаем на среде площадку и после повторного нагрева
намаживаем всю оставшую площадь. Сеянные чашки помещаем в
термостат на 18-24 часа при t= 37

Итог дня

Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись

м/с
23.12.2021 Посев ДГ (Дизгруппа) 36

Окраска мазка простым методом. 1

Изучение строения бактериальной 1

клетки. Окраска мазка по методу
Грама.

Проведение текущей уборки 2

Посев Мочи 35

Изучение микроскопического метода 1

исследования.

Изучение морфологии бактерий. 1

Проведение текущей уборки 2

Посев Стафилококк 27

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
24 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
 Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего
места который осуществляется протираем всех сторон
ламинарного бокса (шкаф) с помощью дизраствора.
Подготовка сред для посева. Запись измерений на
термостатах и гигрометров.
 Дизраствор берется из емкости наполненная до краев
дизраствором после этого берем тряпку и тщательно
протираем рабочее место и после повторно намочив тряпку
отставляем его на рабочем месте заранее расположив его
таким образом чтобы она не мешала фильтрам
 Транспортировка анализов происходит при помощи
специальных ящиком каждый который имеет ярлык
объясняющий (помогающий) практикантам в каких ящиках
нужно транспортировать заранее пронумерованные
анализы
 Анализ Мочи
 Среды: Клет Агар
 Способ анализа
Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса (шкаф)
приносим или же подготавливаем инструменты для анализа а
после приносим образцы в металлическом ящике заранее
распределив их по номерам. Среду нужно с помощью маркера
разделить пополам и пронумеровать по номерам образца. И
после этого мы берём среду и образец. Медленно замешиваем
образец чтобы осадок на дне поднялся. Для начала мы берем
спиртовку и осторожно поджигаем его с помощью спички или
зажигалки и нагреваем петлю ровно под 45 градусов после
открываем крышку образца и с помощью петли берем только
одну каплю анализа и намаживаем прямой линией 1/3 среды а
после петлей делаем зигзагообразные линии и потом последний
раз нагреваем петлю. Сеянные чашки помещаем в термостат
Да Содержание Оце
та нка
 Окраска кислотоустойчивых микроорганизмов.
24
12 В природе существует группа микроорганизмов, устойчивых к
действию кислот, щелочей и спиртов. Они относятся к роду
Mycobacterium (возбудители туберкулеза, паратуберкулеза
крупного рогатого скота, проказы человека). Химическая
структура цитоплазмы и клеточной оболочки микроорганизмов
данной группы отличается содержанием значительного
количества жировосковых веществ, в частности стеариновых
кислот (в том числе фтионовой кислоты до 40%) поэтому
проникновение красителя в клетку затруднено. Для их окраски
используют протравливание (нагревание мазка с красителем над
пламенем). Окрасившись, они прочно удерживают краску и не
обесцвечиваются кратковременным действием кислоты.

Окраска по Циль-Нильсену.

1. Фиксированный на пламени мазок покрывают полоской

фильтровальной бумаги, наливают на нее карболовый раствор
фуксина и подогревают; при появлении паров прекращают
нагревание и оставляют краску на препарате еще на несколько
минут (2—3 минуты). Дав препарату остыть удаляют пинцетом
бумажку и обмывают мазок водой.

2. Обесцвечивают препарат 5—10% водным раствором серной

кислоты в течение 3—5 секунд (до желтоватого оттенка мазка).
Вместо серной кислоты можно применить 5% раствор азотной
или 3% раствор соляной кислоты.

3. Мазок тщательно промывают водой.

4. Споласкивают 96°спиртом.

5. Снова промывают водой.

6. Докрашивают в течение 3—5 минут леффлеровской

метиленовой синькой или водным раствором 1: 1000
малахитовой зелени или метиловой зелени.

7. Краску смывают водой и препарат высушивают.

Микроскопическая картина: туберкулезные палочки - рубиново

красные, остальные, за исключением возбудителя
паратуберкулеза, кислото - и спиртоустойчивых сапрофитов, -
синие. Для обесцвечивания мазков при окраске по Циль-
Нильсену вместо растворов кислот и спирта особо рекомендуется
применение солянокислого алкоголя (соляной кислоты 3 мл+96°
спирта 97 мл) до слабо заметного розоватого оттенка препарата.
После этого мазок ополаскивают водой и докрашивают
метиленовой синькой и т. д. по основной прописи. Указанным
методом достигается одновременное испытание бацилл на
кислото - и спиртоустойчивость. Среди видов кислотоустойчивых
сапрофитов встречаются спиртоподатливые разновидности,
палочки же туберкулеза и паратуберкулеза всегда кислото - и
спиртоустойчивы.

Споры образуются при неблагоприятных для клетки условиях и

могут существовать в агрессивной среде довольно длительное
время. То, что хорошо для сохранения клетки, плохо для ее
изучения. Споры очень плотные и почти не пропускают жидкости,
кроме того, они кислотоустойчивы. Следовательно, простое
окрашивание или метод Грама оставят споры бесцветными.

Метод Ожешко сходен с методом Циля-Нильсена, но отличается

использованием раствора соляной кислоты в качестве протравы,
разрыхляющей оболочку споры, которая плохо воспринимает
красители. После протравы соляной кислотой при нагревании в
течение 2-3 мин мазок фиксируется и окрашивается по методу
Циля-Нильсена.

Метод Бурри-Гинса используется для окраски капсульных

бактерий и основан на том, что капсула не воспринимает
красители. Капсулу выявляют негативным контрастированием
фона по Бурри. Для этого черную тушь смешивают с культурой и
высушивают. После этого проводят фиксацию в пламени горелки,
окрашивают тела микробных клеток по Гинсу - водным фуксином
в течение 1 минуты и промывают водой 5-10 секунд.
В результате на темном фоне хорошо видна бесцветная капсула и
красные тела микробов.

Изучение подвижности бактерий

Выделив чистую культуру на жидкой питательной среде,

определяют подвижность бактерий.
Подвижность или ее отсутствие у бактерий является одним из
многих признаков для определения их вида.

Органами движения у некоторых видов бактерий являются

жгутики. Они состоят из белковых веществ, отличающихся от
белков тела клетки. Жгутики – очень тонкие образования,
диаметр их 0,02-0,05 мкм. Они во много раз длиннее бактерий.

Передвижение бактерий связано со спиралевидными

движениями жгутиков.

Обнаруживают жгутики у бактерий различными способами.

Строение их и другие детали изучаются методом электронной и
фазово-контрастной микроскопии. Расположение и количество
жгутиков можно рассмотреть под световым микроскопом,
применяя «сверхокраску» по методу Леффлера. Сложность и
недоступность этих методов исключает их использование в
условиях практических лабораторий. По расположению жгутиков
подвижные микробы условно разделяют на 4 группы.

1. Монотрихи – бактерии с одним жгутиком на конце.

2. Лофотрихи – бактерии с пучком жгутиков на одном конце.

3. Перитрихи – бактерии со жгутиками по всей поверхности тела

4. Амфитрихи – бактерии с двумя жгутиками, расположенными на

обоих полюсах клетки

Для изучения подвижности микроорганизмов используют

нативные препараты, приготовленные по методу «висячей» и
«раздавленной капли».

Метод «висячей капли». Препарат готовят на покровном стекле, в

центр которого наносят одну каплю исследуемого материала.
Затем специальное предметное стекло с лункой, края которой
предварительно смазывают вазелином, прижимают к
покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки.
Быстрым движением переворачивают препарат покровным
стеклом вверх. В правильно приготовленном препарате капля
должна свободно висеть над лункой, не касаясь ее дна или края.
Для микроскопии вначале используют объектив малого
увеличения (8х или 10х), находят край капли, а затем
 устанавливают объектив 40х или иммерсионный и исследуют
препарат.

Метод «раздавленной» капли. На поверхность обезжиренного

предметного стекла наносят каплю исследуемого материала или
суспензию бактерий и покрывают ее покровным стеклом. Капля
должна быть небольшой, не выходящей за край покровного
стекла.

Итог дня

Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись

м/с

24.12.2021 Посев Мочи 36

Проведение текущей уборки 2

Посев Дизгруппа 17

Изучение подвижности бактерий. 1

Изучение окраски спорообразующих и 1

кислотоустойчивых бактерий (по
Ожешко и Циль-Нильсену)

Проведение текущей уборки 2

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
25 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
 посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Дизраствор берется из емкости наполненная до краев
дизраствором после этого берем тряпку и тщательно протираем
рабочее место и после повторно намочив тряпку отставляем его
на рабочем месте заранее расположив его таким образом чтобы
она не мешала фильтрам
Транспортировка анализов происходит при помощи специальных
ящиком каждый который имеет ярлык объясняющий
(помогающий) практикантам в каких ящиках нужно
транспортировать заранее пронумерованные анализы
Анализ мокроты
 Среды: целиком- Кровяной, Шоколадный. По половине
МЖСА, Сабура Эндо.
 Способ анализа
 Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса
(шкаф) приносим или же подготавливаем инструменты для
анализа а после приносим образцы в металлическом ящике
заранее распределив их по номерам. Среду нужно с
помощью маркера разделить пополам и пронумеровать по
номерам образца. (ВАЖНО. Кровяной и Шоколадный
целиком) И после этого мы берём среду и анализ. Наносим
аккуратно на площадку время от времени покручивая
анализ и на последней среде заполняем полностью до
краев не заходя за метку маркером. После обратно ложим
анализ на штатив аккуратно распределив образец с
другими образцами и продолжаем так же делать на других
анализах для Зев-Нос

Да Содержание Оце
та нка
Начало рабочего дня с 08:00.
25 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
 сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Дизраствор берется из емкости наполненная до краев
дизраствором после этого берем тряпку и тщательно протираем
рабочее место и после повторно намочив тряпку отставляем его
на рабочем месте заранее расположив его таким образом чтобы
она не мешала фильтрам
Транспортировка анализов происходит при помощи специальных
ящиком каждый который имеет ярлык объясняющий
(помогающий) практикантам в каких ящиках нужно
транспортировать заранее пронумерованные анализы

 Анализ Стафилококк
 Среды: МЖсА;.
 Способ анализа
Сперва нужно подготовить рабочее место для этого нужно
протереть все внутренние стороны ламинарного бокса (шкаф)
приносим или же подготавливаем инструменты для анализа а
после приносим образцы в металлическом ящике заранее
распределив их по номерам. И тоже самое делаем со средами.
Делим с помощью маркера на одну четвертую (1/4) и
пронумеровываем по номерам анализов для посева. Наносим
аккуратно на площадку время от времени покручивая анализ и на
последней среде заполняем полностью до краев не заходя за
метку маркером. После обратно ложим анализ на штатив
аккуратно распределив образец с другими образцами и
продолжаем так же делать на других анализах для Стафилококк.
По окончании посева, сеянные чашки помещаем в термостат на
18-24 часа, при температуре +37

Да Содержание Оце
та нка
 Начало рабочего дня с 08:00.
25 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего места
12 который осуществляется протираем всех сторон ламинарного
бокса (шкаф) с помощью дизраствора. Подготовка сред для
посева. Запись измерений на термостатах и гигрометров.
Сперва проверяются холодильники для хранения питательных
сред на наличие сред. Записываем у себя каких сред не хватает и
сколько.
Дизраствор берется из емкости наполненная до краев
дизраствором после этого берем тряпку и тщательно протираем
рабочее место и после повторно намочив тряпку отставляем его
на рабочем месте заранее расположив его таким образом чтобы
она не мешала фильтрам
Транспортировка анализов происходит при помощи специальных
ящиком каждый который имеет ярлык объясняющий
(помогающий) практикантам в каких ящиках нужно
транспортировать заранее пронумерованные анализы

 Анализ на Селенит
 Среда: СС Агар
 Способ анализа

Сперва нужно подготовить рабочее место а после приносим

образцы в металлическом ящике заранее распределив их по
номерам. И тоже самое делаем со средами. Делим по полам и
пронумеровываем. Среду нужно с помощью маркера разделить
пополам и пронумеровать по номерам образца. И после этого мы
берём среду и образец. Делаем площадку и после закрашиваем
всю оставшую среду. По окончании посева, сеянные чашки
помещаем в термостат на 18-24 часа, при температуре +37
Да Содержание Оце
та нка
 В начало рабочего дня начинается с подготовки рабочего
25 места который осуществляется протираем всех сторон
12 ламинарного бокса (шкаф) с помощью дизраствора.
Подготовка сред для посева. Запись измерений на
термостатах и гигрометров.
 Дизраствор берется из емкости наполненная до краев
дизраствором после этого берем тряпку и тщательно
протираем рабочее место и после повторно намочив тряпку
отставляем его на рабочем месте заранее расположив его
таким образом чтобы она не мешала фильтрам
 Транспортировка анализов происходит при помощи
специальных ящиком каждый который имеет ярлык
объясняющий (помогающий) практикантам в каких ящиках
нужно транспортировать заранее пронумерованные
анализы
 С 14:00 работал в средоварке заполнял пробирки натриям
хлоридом 5%. А также пронумеровывал среды по числу
изготовления и после того когда среды остыли отправили их
в холодильники

Итог дня
 Дата Наименование манипуляций Кол-во Подпись м/с

25.12.2021 Посев мокроты 28

Проведение текущей уборки 2

Посев ЦК 47

Посев стафилококка St 42

Проведение текущей уборки 2

Посев Дизгруппа 27

Посев ЦК 24

Посев Селенит 36

Проведение текущей уборки 2

Работа в средоварке 50

Таблица 3. Сводная таблица манипуляций (общий итог)

№ Наименование манипуляций Кол-во
1 Организация практики, инструктаж по охране труда. 1
2 Ознакомление с планом строении УНМЛ 1
3 Ознакомление с оборудованием и приборами 1
4 Изучение питательных сред 1
5 Убивка Биоматериала 27
6 Изучение посева Ц/К 1
7 Изучение посева на зев-нос 1
8 Посев анализов ЦК 84
9 Посев анализов зев-нос 51
10 Подготовка рабочего места для исследования биологического 16
материала
11 Утилизация отработанного материала , дезинфекции 16
использованной лабораторной посуды, инструментария, рабочего
места.
12 Заполнение журналов учета температуры (термостат, холодильник) 9
и влажности воздуха
13 Изучение посева дизгруппы 1
14 Изучение посева стафиллакок 1
15 Посев анализов дизгруппы 68
16 Посев анализов стафиллакок 60
17 Помещение детских анализов на дизгруппу в селенит 12
18 Посев анализов мочи 41
19 Изучение автоклава 1

Подпись старшего лаборанта и печать ЛПУ