1

Лабораторная работа №1. Биотехнологическая лаборатория. Принципы

организации и техника безопасности.

Цель работы: ознакомиться со структурой и организацией работы

лабораторий «Биотехнология и генная инженерия растений», «Биотехнология и
генная микроорганизмов», «Промышленная биотехнология»; пройти
инструктаж по технике безопасности; заполнить журнал инструктажа по
технике безопасности, получить разрешение на работу в лаборатории.
Материалы, реактивы и оборудование: оснащенные лаборатории
«Биотехнология и генная инженерия растений», «Биотехнология и генная
микроорганизмов», «Промышленная биотехнология», аудитории 505, 506, 508,
510, 512, 514 корпуса «б», организованная на базе кафедры ботаники и
физиологии растений и биотехнологий, института Биохимических технологий,
экологии и фармации (структурного подразделения) ФГАОУ ВО КФУ им. В.И.
Вернадского.
Ход выполнения работы:
1. Изучить теоретический материал работы, сделать краткий конспект.
2. Выполнить задания, представленные в практическом материале
лабораторной работы.
3. Подготовить ответы на контрольные вопросы к лабораторной работе.

Правила безопасной работы в лаборатории

1. Выполнять работу в лабораторном халате (обучающиеся без
лабораторного халата к занятию не допускаются).
2. Каждый должен работать на закрепленном за ним рабочем месте.
Переход на другое место без разрешения преподавателя не допускается.
Рабочее место следует поддерживать в чистоте, не загромождать его посудой и
вещами.
3. Не допускать появления в лаборатории мух, других насекомых,
грызунов.
4. Перед работой в биотехнологическом боксе обработать помещение
бактерицидной лампой в течение 45 минут.
5. После обработки в бокс разрешается входить только через 30 – 60
минут.
6. В лаборатории запрещается принимать пищу, воду, не допускать
излишних разговоров и хождения.
7. Опыт необходимо проводить в точном соответствии с его описанием в
методических указаниях, особенно придерживаться очередности добавления
реактивов внимательно наблюдайте за ходом опыта, отмечая каждую его
особенность (выпадение и растворение осадков, изменение окраски,
температуры и т.д.). Без указания преподавателя не проводить никаких
дополнительных опытов.
8. Использовать оборудование с осторожностью и по назначению.
 2

9. Аккуратно обращаться с химическими реактивами, не просыпать, не

оставлять реактивы без подписи; с летучими веществами работать только с
использованием вытяжного шкафа.
10. Соблюдать осторожность при работе со стеклянной посудой;
обязательно дождаться охлаждения посуды и инструментов после обработки в
сухожаровом шкафу или автоклавирования.
11. В опытах с нагревом необходимо пользоваться посудой, которая имеет
соответствующую маркировку (ТС-термостойкое стекло), колбы с кипящей
средой нельзя ставить на холодную (мокрую, металлическую) поверхность.
12. В случае пореза стеклом нужно осмотреть рану и извлечь из нее
осколки стекла, если они есть, а затем промыть повреждённые ткани 0,05%-
ным раствором хлоргексидина биглюконата, или 3%-ным раствором перекиси
водорода, смазать йодом и завязать бинтом или заклеить лейкопластырем.
13. Сухие реактивы брать с помощью лопаток, пластмассовых или
металлических шпателей. Шпатель должен быть всегда сухим и чистым. При
отборе реактива пипеткой, ни в коем случае нельзя той же пипеткой, не вымыв
её брать реактив из другой емкости. При наливании реактивов нельзя
наклоняться над сосудом, предотвращая попадание брызг на лицо или одежду.
14. Нельзя брать химические вещества руками и пробовать на вкус.
Следует изучать запах вещества, направляя пары к себе движением ладони,
делая неглубокий вдох.
15. Разливать кислоты следует в вытяжном шкафу и только при
включенной вентиляции; для приготовления растворов кислот необходимо лить
кислоту в воду, а не наоборот; во время переливания кислоты нужно
размешивать жидкость; при составлении смеси кислот следует приливать
кислоту с большей удельной плотность к кислоте с меньшей удельной
плотностью.
16. Растворять твердые щелочи следует путем медленного добавления их
небольшими кусочками к воде при непрерывном перемешивании. Кусочки
щелочи нужно брать только щипцами.
17. В случае попадания кислоты на одежду следует смыть ее большим
количеством воды, а затем нейтрализовать 3 – 5%-ным раствором питьевой
соды или разбавленным раствором аммиака.
18. При попадании на кожу или одежду щелочи, после смывания ее
большим количеством воды, нужно провести обработку 2 – 3%-ным раствором
борной, лимонной или уксусной кислотами.
19. Перед зажиганием спиртовки необходимо убедиться, что ее корпус не
имеет повреждений, фитиль выпущен на необходимую высоту. Зажженную
спиртовку запрещается переносить с места на место. Нельзя зажигать одну
спиртовку от другой. Тушить спиртовку нужно накрывая пламя колпачком
спиртовки. Задувать пламя запрещается!
20. Нагревание реакционных смесей в пробирках и других стеклянных
сосудах нужно проводить осторожно, предварительно насухо вытерев внешние
стенки сосуда и не допускать разбрызгивания; горловина сосуда должна был
 3

направлена в сторону от себя, и от тех, кто работает рядом; запрещено

наклоняться над жидкостью, которая нагревается.
21. Не оставлять без присмотра включенные электроприборы.
22. Категорически запрещается работать на неисправном и незаземленном
оборудовании.
23. В случае возгорания электрических приборов обесточить линию,
выключив рубильник, и гасить огонь сухим песком или углекислотным
огнетушителем. Воду в этом случае применять категорически запрещено.
24. В случае возгорания одежды ни в коем случае не бежать; гасить пламя,
обернувшись одеялом, войлоком, пальто, плотной тканью.
25. В случае возникновения очага возгорания в помещении лаборатории
или в ламинарном боксе, в срочном порядке накрыть очаг плотным, стеганным
одеялом для предотвращения доступа кислорода, или использовать
углекислотный огнетушитель.
26. В случае любой нестандартной ситуации, незамедлительно сообщить
преподавателю или лаборанту кафедры.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЫ

Объекты изучения биотехнологии находятся на разных ступенях

организации:
а) субклеточные структуры (вирусы, плазмиды, ДНК митохондрий и
хлоропластов, ядерная ДНК);
б) бактерии и цианобактерии;
в) грибы;
г) водоросли;
д) простейшие;
е) культуры клеток растений и животных.
В связи с этим помещения и особенно оборудование биотехнологических
лабораторий определяются в значительной мере характером исследований и
объектом. Следовательно, невозможно рекомендовать какой-то один
определенный набор, комплект оборудования, тип планировки
биотехнологической лаборатории. В этой связи, необходимо рассматривать
только принципы организации, стандартную планировку лаборатории и ее
оборудование, которые могут быть использованы в качестве основы при
разработке различных проблем.
Основой планирования помещения биотехнологической лаборатории
является специализированный блок, состоящий из моечной комнаты,
помещения для стерилизации сред, инструментов и материалов, комнаты для
приготовления питательных сред, асептического и термостатированного
помещений, лабораторных комнат, банка изолированных культур, вивария –
помещения, предназначенного для содержания лабораторных животных (белых
мышей, белых крыс, морских свинок, кроликов и др.).
 4

Комната для приготовления питательных сред оборудуется

лабораторными столами, шкафами для хранения чистой посуды и реактивов,
холодильниками для хранения питательных сред. В случае отсутствия весовой
комнаты в ней можно установить аналитические весы для отвешивания
минеральных солей, углеводов, агара и других компонентов питательных сред
(рис. 1.1).

Рис. 1.1. Комната для приготовления питательных сред (а, б - вид комнаты
с разных ракурсов)
 5

Моечная комната при большом объеме работы должна быть свободной по

площади и укомплектованной моечными машинами или мойками,
снабженными холодной и горячей водой, бутылями с дистиллированной и
бидистиллированной водой. Мойки изготовляют из кислотоупорного
материала, рассчитывая на то, что при мытье посуды могут применяться
крепкие кислоты и щелочи. Для обработки посуды кислотами желательно
иметь отдельный отсек, эмалированные кюветы и сосуды. В моечной комнате
устанавливаются стеллажи для сушки посуды, сушильные шкафы, устройство
со сжатым воздухом для сушки пипеток.
Помещение для стерилизации сред, инструментов и материалов
оборудуется автоклавами, сушильными шкафами для стерилизации сухим
жаром, аппаратами для дистилляции и бидистилляции воды, столами для
размещения стерилизуемых сред и материалов, шкафами для их хранения.
Стерильное помещение (бокс, операционная комната) наиболее важное в
биотехнологическом блоке. Его следует располагать как можно дальше от
источников заражения, сквозняков, нагревательных устройств и мест с
усиленным движением. Асептическое помещение должно, по возможности, не
иметь наружных стен здания, быть большим (около 15 м2), не иметь окон и
газовой проводки. В настоящее время широкое распространение получают
ламинарные боксы (камеры ламинарного потока стерильного воздуха), которые
производятся в ряде стран (рис. 1.2). В зависимости от объема выполняемых
работ в помещении устанавливается несколько таких камер.

Рис. 1.2. Шкафы с ламинарным потоком воздуха в стерильной комнате

Двери, которые ведут в асептическую комнату, должны закрываться

герметично. Перед входной дверью необходимо построить тамбур с
 6

автоматически закрывающейся дверью. Желательно использовать рабочие

столы, покрытые гладким, легко стерилизующимся материалом. Пол, потолок,
стены и другие поверхности должны быть покрыты материалами, на которые
мало садится пыль, и их можно легко мыть и дезинфицировать. В бокс должен
поступать стерильный кондиционированный воздух. Для этой цели используют
специальные очистительные фильтры. Стерильность воздуха достигается также
с помощью бактерицидных ламп.
Культуральная комната – термостатированное помещение с
кондиционированным воздухом, строго регулируемой температурой (для
большинства культур 25 – 27 °С) и относительной влажностью воздуха (70%)
на стеллажах и полках размещают культуры клеток растений, животных и
микроорганизмов.
Лабораторные помещения содержат оборудование, необходимое для
биохимических, гисто- и цитогенетических микробиологических и других
исследований, сопряженных с основными работами (рис. 1.3). Лабораторные
комнаты могут быть обособленными и находиться отдельно от других
помещений культурального блока.

Рис. 1.3. Лабораторное оборудование для микробиологических

исследований

Банк клеточных культур – комната, где в условиях глубокого

замораживания хранят ценные клеточные линии растений, штаммы
микроорганизмов и др.
Кабинет – комната для обработки и хранения данных экспериментальной
работы.
 7

ПРАКТИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЫ

Задание 1. Пройти инструктаж по технике безопасности при работе в

лабораториях «Биотехнология и генная инженерия растений», «Биотехнология
и генная микроорганизмов», «Промышленная биотехнология».
Задание 2. Ознакомиться с организацией и правилами работы в
лабораториях «Биотехнология и генная инженерия растений», «Биотехнология
и генная микроорганизмов», «Промышленная биотехнология» (экскурсия в
помещения лаборатории).
Задание 3. Зарисовать в тетрадях для лабораторных работ и заполнить
таблицу 1.1.

Таблица 1.1
Структура и назначение помещений биотехнологической лаборатории

Помещения биотехнологической Назначение помещения

лаборатории
Моечная комната
Помещение для стерилизации сред,
инструментов и материалов
Стерильное помещение
Культуральная комната
Комната для приготовления питательных
сред
Лабораторные помещения
Банк клеточных культур
Кабинет

Важная информация.
Оборудование биотехнологических лабораторий определяются в
значительной мере характером исследований и объектом. Следовательно,
невозможно рекомендовать какой-то один определенный набор, комплект
оборудования, тип планировки биотехнологической лаборатории. В
этой связи, необходимо рассматривать только принципы
организации, стандартную планировку лаборатории и ее
оборудование, которые могут быть использованы в качестве
основы при разработке различных проблемных вопросов. Также,
необходимо определить приоритетные специфические
 8

потребности лаборатории исходя из количества сотрудников, финансовых

возможностей и планируемых направлений исследования.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ К ЛАБОРАТОРНОМУ ЗАНЯТИЮ

1. Перечислите необходимые помещения биотехнологической

лаборатории и их назначение.
2. Какие изменения возможны в принципах организации
биотехнологической лаборатории в зависимости от объектов исследования?
3. Обоснуйте необходимость соблюдения условия стерильности при
работе в биотехнологической лаборатории.
4. Для каких целей в биотехнологическом блоке необходимы моечная,
стерильная и культуральная комнаты?
5. Охарактеризуйте возможные варианты оснащения биотехнологической
лаборатории в случае отсутствия необходимого количества отведенных для её
организации помещений.