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Escuela de Postgrado
TEMA :
BIOINFORMATICA Y MEJORAMIENTO GENETICO DE
PLANTAS
Abril, 2011
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BIOINFORMATICA Y MEJORAMIENTO GENETICO DE PLANTAS
Caceres, V.1
1
Estudiante de la Maestría en Agricultura Sustentable. Escuela de Postgrado. Universidad
Nacional Agraria La Molina. Av. La Molina S/N. Lima. Perú.
vladimir_caceres25@yahoo.es
INTRODUCCIÓN
Durante las últimas décadas, los principales avances en biología molecular y tecnologías de
genómica han dado lugar a un crecimiento explosivo de la información biológica generados
por la comunidad científica. Esta avalancha de información genómica a su vez, genera la
necesidad de bases de datos informatizadas para almacenar, organizar, y herramientas
especializadas para ver y analizar los datos.
Con la publicación del genoma de la secuencia completa de Arabidopsis thaliana y del
proyecto de investigación sobre la secuencia completa de la genoma del arroz, y la industria
han entrado en la era de la genómica. Numerosos aplicaciones de la información genómica
han creado muchas oportunidades para la integración de la información y además de los
proyectos a gran escala genómica sistemática funcional. Con esta acumulación de varios
tipos de datos, el universo de "entendimiento genómico" está abierto. Con este
entendimiento, es posible modelar y diseñar la cantidad y sentido de los cambios en el nivel
de expresión de los genes o cómo localizar las proteínas y evaluar sus interacciones con
otros genes y proteínas
La bioinformática nos facilita el cumplimiento y la evaluación de una multitud de
diferentes secuencias de genomas. Como una ciencia de la gestión de datos en genómica y
la proteómica, y como una disciplina joven en la tecnología de la información, la
bioinformática ha progresado muy rápidamente en los últimos años. Se práctica en todo el
mundo para acceder a distintas bases de datos y el intercambio de información para la
comparación, la confirmación, el almacenamiento y análisis. Hasta la fecha hay varias
bases de datos sobre las proteínas y ADNs de los seres humanos, animales, plantas,
bacterias y otras formas de vida.
El fitomejoramiento describe los métodos para la creación, selección, y la fijación de los
fenotipos en las plantas superiores, el desarrollo de variedades mejoradas adaptadas a las
necesidades de agricultores y consumidores. Los objetivos primarios del mejoramiento
genético en cultivos agrícolas y hortícolas que normalmente destinadas a la mejora de los
rendimientos, calidad nutricional, y otras características de valor comercial. El
fitomejoramiento sigue evolucionando y aprovechar de los descubrimientos en los campos
relacionados. En la actualidad, dos grandes áreas de investigación están teniendo un gran
impacto en el mejoramiento de plantas, la biotecnología (especialmente la genómica, junto
con la transformación de la planta), y la bioinformática (base de datos de genomas)
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Dentro de los objetivos del trabajo de investigación podemos encontrar a los siguientes:
OBJETIVO GENERAL
Analizar y describir la bioinformática para el mejoramiento genético de plantas
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Señalar la importancia de la bioinformática en el mejoramiento genético moderno
Determinar las herramientas bioinformáticas para el mejoramiento moderno de las
plantas
Describir mediante un ejemplo los programas bioinformaticos usados para el
mejoramiento genético contra el tizón tardío en el cultivo de papa
MARCO TEÓRICO
ANTECENDENTES
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que contienen secuencias completas de lectura abierta. Se detallo mediante análisis de
computo las secuencias FLcDNA para obtener una instantánea de la estructura genética de
P. infestan.
Estos análisis nos ayudaran a ver las características estructurales de P. infestans, utilizando
una base de datos validada. También se determinó el grado de conservación de la secuencia
dentro del género Phytophthora y la identificación de un conjunto de genes que
evolucionan rápidamente. Por último, la identificación de un conjunto de genes que se
comparten entre Phytophthora y otros hongos fitopatógenos, pero ausente en hongos
patógenos de los animales. Estos resultados confirman que los hongos oomicetos y otros
hongos comparten componentes de virulencia, y sugieren que los patógenos microbianos
eucariotas comparten similares estilos de vida. También comparten un conjunto similar de
genes, independientemente de su parentesco filogenético. (8)
BASES TEÓRICAS
La bioinformática es una nueva ciencia que combina la potencia de los ordenadores, los
algoritmos matemáticos y estadísticos con los conceptos de las ciencias de la vida para
resolver problemas biológicos. A través de la bioinformática, los científicos han sido
capaces de analizar los genomas diferentes. Ejemplos de estos son los de maíz (en
http://www.tigr.org/tdb/tgi/plant.shtml) y especies de cítricos (en http://harvest.ucr.edu/).
(2)
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ÁREAS DE INVESTIGACIÓN BIOINFORMÁTICA
La bioinformática, se divide en 3 áreas de análisis, dentro de las cuales cada uno cumple
una función, tal como se puede apreciar en la figura: (12)
El análisis estructural
El análisis de secuencias
El análisis funcional
La infraestructura parte del formato de datos que se obtiene de las plantas, luego se
desarrolla la base de datos para almacenar la información, pasa por el desarrollo de las
herramientas de consultas para llegar finalmente al de la interfaces. Toda esta información
es proporcionada a los distintos usuarios que ingresan al sistema. (12)
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PLANTAS MODELO UTILIZADAS EN LA BIOINFORMÁTICA
La genómica comparativa de genomas de plantas ha demostrado que la organización de los
genes de las distintas especies de plantas se ha mantenido evolutivamente más conservada
de lo que originalmente se pensaba. Estos descubrimientos sugieren que la información
obtenida de sistemas modelo de cultivos pueda ser utilizada para mejorar otros cultivos de
interés. (12).
MaizeGDB: http://www.maizegdb.org
Gramene: http://www.gramene.org
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NAVEGADOR DE MAPAS GENÓMICOS
Los navegadores de mapas genéticos nos permiten tener una vista interactiva de la
secuencia y de las anotaciones realizadas sobre un genoma particular. Entre ello citamos al
NCBI Map Viewer (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/mapview/) (14)
ANÁLISIS DE SECUENCIAS
Los cambios que ocurren en el ADN funcional son la materia prima para la evolución.
Estos cambios crean variación en los organismos, luego la selección natural trabaja sobre
esa variación haciendo prosperar y reproducir el ADN de los organismos que tienen
mutaciones ventajosas, mientras que extingue a los que poseen mutaciones desventajosas.
La comparación entre secuencias (alineamiento) y el análisis de la estructura de secuencias
de genes son algunos de los procesos utilizados para entender la evolución de secuencias.
(12)
HERRAMIENTAS BIOINFORMATICAS
Encontramos a los siguiente softwar´s bioinformáticos: (15,16)
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BIOINFORMATICA EN EL MEJORAMIENTO GENÉTICO DE LAS PLANTAS
Durante siglos, los humanos han seleccionado variedades de plantas que mejor se ajusten a
sus propósitos, las plantas tienen muchas ventajas frente a los desastres naturales, al
desarrollo de la calidad, cantidad y a las prácticas agrícolas. Sin embargo, los rasgos
multifactoriales involucrados a la resistencia y la calidad han demostrado ser
extremadamente difíciles de mejorar, sobre todo en combinación. La revolución de las
ciencias por la genómica a cambiado radicalmente la escala y el alcance de nuestra
investigación experimental y de su aplicación en el fitomejoramiento. La escala y el poder
de la genómica de alta resolución permiten realizar una comprensión genética más detallada
del rendimiento de la planta a diferentes niveles de agregación. Los procesos biológicos
complejos que constituyen los mecanismos de resistencia a patógenos y ofrecer calidad a
nuestros cultivos ya están abiertas para un análisis funcional sistemático. Estos análisis se
realizan con software específico por el gran volumen de datos generados en las bases de
datos. (6,7)
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genómico de papa diploide (BAC), del que se ha obtenido la huella genética y alineado en
7000 ~ contigs de mapa físico. Además, los extremos terminales BAC se han secuenciado y
están a disposición del público. Aproximadamente 30000 BACS están anclados al mapa
genético de ultra alta densidad de la papa, compuesto de 10000 marcadores AFLPTM
únicos. De esta mapa genético-físico integrado, entre 50 a 150 semillas BACs han sido
identificadas para cada cromosoma. Experimentos de hibridación in situ fluorescente en
clones BAC selectos confirman estos puntos de anclaje. Los clones semillas proveen el
punto de partida para la estrategia de secuenciación de BAC a BAC. Esta estrategia se
complementa con los enfoques de secuenciación escopeta del genoma completo usando los
instrumentos 454 GS FLX e Illumina GA2. El ensamblaje y anotación de los datos de la
secuencia serán realizados mediante herramientas públicas disponibles y hechas a la
medida. La disponibilidad de los datos anotados ayudará a caracterizar las colecciones de
germoplasma basándose en variación alélica y ayudará a los fitomejoradores de papa a
explotar más plenamente el potencial genético de la papa (10)
El Phytophthora Base de Datos (PD) se estableció para los datos del catálogo como una
web de acceso y de búsqueda. Para facilitar la identificación de nuevos aislamientos de
Phytophthora a través de la comparación de sus secuencias en uno o más locis con las
secuencias correspondientes derivados de los aislamientos archivados en la PD, se
generaron y depositaron la secuencia de datos de más de 1,500 aislados en representación
de la que se conoce la diversidad del género, herramientas de búsqueda y análisis de datos
en la PD incluyen BLAST, Phyloviewer (Un programa para la construcción de árboles
filogenéticos utilizando secuencias de los aislados seleccionados). El Virtual Gel (es un
programa para la preparación de patrones de restricción para las secuencias dadas). La PD
también proporciona un medio personalizado de almacenar y compartir datos a través de la
web. El PD es un modelo que fácilmente se pueden adoptar para desarrollar bases de datos
para otros grupos agentes patógenos importantes. (11)
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MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. MATERIALES
El software y hardware utilizados en el presente trabajo serán:
Software:
› EMBOSS sequence analysis package
› Muscle
› T-Coffee
› BLAST (NCBI)
Hardware:
› 01 Laptop HP Pavilion Core i3.
› Impresora Hp 1006
3.3. MÉTODO
Se tomara datos del proyecto Genoma de papa realizado por la Universidad Peruana
Cayetano Heredia (Dr. Gisella Orjeda), también del National Center for Biotechnology
Information (NCBI), para poder obtener información de las secuencias del Phytophthora
infestans, en el cultivo de la papa.
RESULTADOS Y DISCUCIÓN
Antecedentes:
Un documento ha enumerado una serie de supuestos marcadores de SSR para el
diagnóstico de Phytophthora infestans, que causa el tizón tardío de la papa.
En el documento ha incluido a las adhesiones Genbank para las tecnologías ecológicamente
racionales de los marcadores que se obtuvieron a partir de esta.
En este ejemplo computacional se valido que si un EST de papel es un buen marcador para
el diagnóstico de Phytophthora infestans. La adhesión en el NCBI para la EST es
CV960716.
Instrucciones detalladas:
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2. La página de resultados es de Entrez, una herramienta de NCBI que busca en todos
los NCBI bases de datos. Usted debe ver los resultados como se muestra en la
siguiente imagen:
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3. Lugo al hacer clic en GenBank para la EST. Nos visualiza la ficha completa
GenBank. Se puede identificar la división del GenBank el registro GenBank,
información sobre la biblioteca donde está el EST
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5. Se mantiene un registro de su trabajo en un editor de texto como el Bloc de notas.
Se abre el bloc de notas en Windows (Inicio -> Ejecutar - notepad en la opción
"Abrir:" el recuadro). La secuencia de FASTA se puede copiar y pegar directamente
desde el navegador en el bloc de notas.
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9. Se puede mirar el Informe Transcripción de la Asamblea. ¿Cuántas
componentes (EST) se encuentran en la asamblea. ¿Cuál es su orientación en
relación a la asamblea? ¿Cuál es la longitud de la asamblea? ¿Cómo se compara
con la longitud de la EST. ¿De dónde viene la EST se alinean con la asamblea?
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10. Luego para determinar los primers copiamos otra vez el FASTA guardado en el
block de notas y generamos los primers
~ 14 ~
11. Ahora tenemos la Primers localizado en la secuencia de montaje, ahora tenemos
todos los valores necesarios para tener las cartillas Primer3 selección que flanquean
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CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
3. Faccioli, F, Michele, A., Caterina, S., Valeria, M. 2009. From DNA Sequence to
Plant Phenotype: Bioinformatics Meets Crop Science. Current Bioinformatics,
2009, 4, 173-176
Disponible: http://www.benthamscience.com/cbio/Samples/cbio4-3/0001CBIO.pdf
~ 16 ~
Disponible: http://web.mac.com/sophien/KamounLab/pdfs/FGB_06.pdf
9. Brian J. Haas et al. 2009. Genome sequence and analysis of the Irish potato famine
pathogen Phytophthora infestans.
Disponible. http://www.nature.com/nature/journal/v461/n7262/pdf/nature08358.pdf
10. Visser, R., et al.2009. Sequencing the Potato Genome: Outline and First Results to
Come from the Elucidation of the Sequence of the World’s Third Most Important
Food Crop. Am. J. Pot Res. (2009) 86:417 – 429
11. Park, J. et al. 2008. Phytophthora Database: A Forensic Database Supporting the
Identification and Monitoring of Phytophthora. Plant Disease / Vol. 92 No. 6
Disponible: http://apsjournals.apsnet.org/doi/pdf/10.1094/PDIS-92-6-0966
15. Gary R. Skuse y Chunguang Du. 2008. Bioinformatics Tools for Plant Genomics Int
J Plant Genomics. 2008; 2008: 910474.
Disponible: http://www.hindawi.com/journals/ijpg/2008/910474/
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