Микробиологическая диагностика, методы. Микроскопия. Виды.

Этапы микробиологической диагностики.

I этап- ПРЕАНАЛИТИЧЕСКИЙ- это взятие материала для исследования
доставка его в лабораторию.
Вид материала в зависимости от заболевания:
Заболевание Материал
Воздушно-капельная инфекция Мазки и смывы из носоглотки, мокрота
Кишечные инфекции Рвота, каловые массы, желчь
Гнойные инфекции Гнойное отделяемое, пунктат из очага
Кровяные инфекции Кровь из вены, пальца, КМ
Менингиты Спинномозговая жидкость
Венерические заболевания Отделяемое уретры, влагалища, шейки матки
Урогенные инфекции Моча
Секционный материал Кусочки органов, кровь из сердца, КМ,
жидкость из полых органов

II Этап- АНАЛИТИЧЕСКИЙ -включает собственно микробиологическую

диагностику.

МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

(знать как свои 5 пальцев)
1.Микроскопический -заключается
в приготовлении окрашенных препаратов из
материала и установления диагноза на
основании морфологических и
тинкториальных свойств.
3.Серологический -заключается в животного, воспроизведении у него картины
обнаружении в сыворотке крови человека
специфических АТ к возбудителю заболевания
и определение их титра
5.Аллергологический -заключается
в выявлении повышенной чувствительности
организма к возбудителю или продуктам его
жизнедеятельности (аллергенам) путем
постановки кожно-аллергических проб
2.Бактериологический -
заключается в выделении чистой культуры
возбудителя и ее идентификации
4.Биологический -заключается в
заражении материалом лабораторного
заболевания, обнаружении и выделении
возбудителя при вскрытии.
6.Молекулярно-генетический
-заключается в выделении ДНК возбудителя
и доказательства ее гомологии с эталонными
молекулами (ПЦР-реакция)

III Этап-ПОСТАНАЛИТИЧЕСКИЙ- интерпретация результатов

лаб.исследований и выдача заключения.
 ПРИЗНАКИ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЦИИ
МИКРООРГАНИЗМОВ
1.Морфологические
-это форма, величина и
характер расположения
относительно друг другу.
Например, тетракокки это
шаровидные бактерии,
расположенные по 4 штуки.
(О других формах напишу
ниже)
4.Антигенные -
особенности химического
состава микробных клеток
(антигенной структуры),
выявляемые с помощью
специфических иммунных
сывороток.
5.Биохимические-
способность микроорганизмов
потреблять различные
вещества с образованием
характерных конечных
продуктов, или наличие у
микроорганизмов ферментов.
(Подробно поговорим позднее)
Например, образуют индол,
или сворачивают молоко.
Морфологическая классификация бактерий
1.Шаровидные кокки
3.Извитые
Вибрионы Спириллы
2.Тинкториальные – 3.Культуральные -это
Это способность окрашиваться особенности роста микробов
различными красителями. на жидких и плотных
Например, окраска по Грамму питательных средах.
+/- (некоторые микробы Что это значит? – то есть
окрашиваются сине- колонии бактерий выглядят
фиолетовым, другие-розовым) по- разному на питательных
средах. Например, кишечная
палочка будет иметь вид
колоний малиново-красного
цвета с характерным
металлическим оттенком,
6.Чувствительность к
специфическим фагам -
способность бактерий
лизироваться эталонными
специфическими фагами.
Фаги- попросту говоря, это
вирусы бактерий.
Определенный вид фага
«убивает» определенный вид
бактерии
2.Палочковидные (цилиндрические)
Бациллы Бактерии Клостридии
(В данном контексте бактерии подразумевают собой
палочки, не образующие спор)
4.Нитевидные (Микобактерии, микоплазмы
и коринебактерии)
Спирохеты
 КЛАССИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ ПО НАЛИЧИЮ ЖГУТИКОВ:

Монотрих -один жгутик

Лофотрих (не ЛОХ!!)-много
жгутиков на одном конце
Амфитрих- один или несколько
жгутиков на противоположных
концах
Перитрих- хаотичное
расположение жгутиков
а

Самая главная
характеристика
микроскопа-
разрешающая
способность.

𝜆
А=0,61•
𝑛•𝑆𝑖𝑛𝛼

Это наименьшее
расстояние между двумя
точками, на котором они
еще видны раздельно.

МАКСИМАЛЬНАЯ РАЗРЕШАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ МИКРОСКОПА

= 0,2 МКМ!!!!!
Общее увеличение микроскопа - это произведение увеличения объектива и
увеличения окуляра.
Свободное рабочее состояние- это расстояние между препаратом и нижней
поверхностью фронтальной линзы. (его необходимо знать для того, чтобы правильно
настроить микроскоп)
8х-8,5мм 40х-0,4мм 90х-0,2 мм
 ОСНОВНЫЕ ВИДЫ МИКРОСКОПИЙ
Фазово-контрастная Темнопольная
Светлые на темном
Темные на светлом
фоне!!!
фоне!!!
Препарат освещаем
Используем
косыми лучами. В
конденсор с набором
объектив попадают
кольцевых диафрагм
только отклоненные от
+фазово-
препарата путем
контрастный
дифракции,
объектив с фазовым
преломления и
кольцом.
отражения лучи.
Люминесцентная Электронная

Зеленые, желтые,
оранжевые,
красные на темном Изображение в
фоне!!! зависимости от вида
Луч света проходит Просвечивающая-
через сине- плоскостное
фиолетовый фильтр. изображение Важно знать этапы прохождения
Препарат Сканирующая - пучка электронов:
1.Генерация пучка электронов от
окрашиваем 3хмерное изображение пушки
флуорохромами- Пучок света замещен на 2.конденсорные линзы
акридиновый пучок электронов. 3.исследуемый объект (лучи
оранжевый и тд. У микроскопа 3 отклоняются под разными
углами)
Над окуляром стоит системы: -оптическая, 4.объективная линза
желтый фильтр, вакуумная, (формируется полезное
который электропитания. увеличение)
задерживает синий, 5.промежуточная линза (плавное
изменение увеличения
но пропускает микроскопа
остальные цвета. 6.Проекционная линза (конечное
увеличение)
7.флуоресцирующий экран
Раздавленная капля(как вид Висячая капля( как вид световой
световой микроскопии) микроскопии)
Темные клетки на
светлом!!!
Темные клетки на
ОПРЕДЕЛЯЕМ
светлом!!!
ПОДВИЖНОСТЬ
ОПР На
На обезжиренное
обезжиренное покровное стекло наносим
предметное стекло каплю жидкой культуры и
наносим каплю кладут каплей вверх на
жидкой культуры, стол. На спец.стекло с
накрываем луночкой наносим вокруг
покровным стеклом луночки вазелин, затем
и микроскопируем. переворачивают стекло
лункой вниз и накрывают
им предметное стекло, т.е.,
чтобы капля оказалась
внутри луночки.
Выделяют микроскопию окрашенных препаратов.
Для этого необходимо приготовить препарат-мазок.
 ЭТАПЫ: (Знать от и до)
1. Обезжириваем предметное стекло 1% NaОН или насухо натираем сухим хоз.мылом всю
поверхность
2. Салфеткой протираем насухо предметное стекло от мыл. По стеклу капля должна
растекаться, если оно обезжиренное.

3. Определяем, где будет мазок с помощью стеклографа

(рисуем круг, где будет мазок на обратной стороне и обозначаем +)

4. На чистое предметное стекло наносят каплю воды. Прокаленной и остуженной петлей

захватывают очень небольшое количество микробной массы и касаются ею капли так,
чтобы оставить в ней облако помутнения.

5. Прокалить и остудить петлю и, перемешав каплю, размазать ее тонким слоем по стеклу.

6. Петлю снова прокалить и поставить в штатив.

7. Подсушить мазок на воздухе. Зафиксировать путем проведения через пламя 3-4 раза
(термическая, жесткая фиксация. Это основной способ! И на экзамене говорить его).
(Иногда используют химическую фиксацию, щадящую-проводят 96% этанолом)

8. Приложить препарат на мостик для окраски мазком вверх и окрасить нужным методом
(простой способ- используем один краситель, сложные-несколько)

9. После окрашивания тщательно промыть водой и обсушить, промокая (не вытирая!)

фильтровальной бумагой.

При фиксации Фиксация считается Для окрашивания препаратов

препарата решаются хорошей, если стекло, используем анилиновые (основные)
3 ВАЖНЕЙШИХ приложенное к красители, так как обладают большим
задачи: тыльной поверхности сродством к бактериям.
1.Микроорганизмы(м/о) кисти, дает ощущение Красные- фуксин основной, фуксин
погибают и перестают жжения. кислый, сафранин, нейтр.красный,
быть опасными Отсутствие жжения- конгорот.
2.М/о закрепляются на препарат может Синие-метиленовый и толуидиновый
предметном стекле смыться синий
3. М/о начинают хорошо Ощущение ожога- Фиолетовые- гинциан фиолет,
прокрашиваться микроскоп.картина метиловый фиолетовый,
красителями будет искажена кристалл.фиолетовый
Желто-коричневые- везувин, хризоидин
Простая окраска фуксином- споры бесцветные, клетки розовые
Зеленые- бриллиантовый зеленый,
Окраска метиленовым синим (явление метахромозии)- зерна
волютина фиолетовые при окрашивании синим малахитовый зеленый
 Сложные способы окрашивания микроорганизмов
1.По Граму (Самая распространенная! Знать!)

1 ЭТАП- На препарат кладем кусочек фильтровальной бумаги, пропитанной карболовым

раствором ГЕНЦИАНВИОЛЕТА и высушенный, затем увлажняем нанесением 2-3 капель воды.
(окрашиваем 2 МИНУТЫ)
2 ЭТАП- Сбросив пинцетом фильтровальную бумагу , на препарат наливаем раствор ЛЮГОЛЯ
(водно-спиртовой р-р йодистого К и кристаллического йода)- Окрашиваем 2 МИНУТЫ.
3 ЭТАП- Слив р-р Люголя , НЕ ПРОМЫВАЯ препарат водой, наливаем на него для
обесцвечивания несколько капель 96% СПИРТА. (Обесцвечивание должно происходить при
покачивании стекла). Длительность 30 СЕКУНД.
4 ЭТАП – Быстро смыв спирт водой, препарат докрашиваем р-ом ФУКСИНА ПФЕЙФФЕРА,
после чего промывает водой и высушиваем. Окрашивание 2 МИНУТЫ.

ПРИ ОКРАШИВАНИИ ПРЕПАРАТА БАКТЕРИИ ОКРАШИВАЮТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ:

Контроль окраски по Граму!!!

НА ОДНОМ СТЕКЛЕ ГОТОВИМ 3 МАЗКА И
СРАВНИВАЕМ.

Мазок Мазок Мазок

КИШЕЧНОЙ СТАФИЛОККА
изучаемой
(Г+)
Грамотрицательные Грамположительные ПАЛОЧКИ (Г-) культуры
Это связано с различным строением стенки
Г+ и Г- бактерий
(см.главу по строению бактерий)
2.Окраска по Нейссеру (для окраски зерен волютина)
1- уксуснокислая синька Нейссера (5мин)
2- промываем водой и затем р-р Люголя (1мин)
3- НЕ ПРОМЫВАЯ водой, докрашиваем везувином (15 сек)
Зерна волютина- темно-фиолетовый
Тело бактерий- желто-коричневый
3.Окраска по Леффлеру(для окраска зерен волютина)
1-щелочной р-р метиленового синего (3-5 мин)
2-промываем водой и высушиваем
Цитоплазма- голубой цвет
Зерна-темно-синий или фиолетовый
4.Окраска по Бурри-Гинсу (для обнаружения капсул бактерий)
1-На предметное стекло -капля туши+исследуемая культура
2-ребром второго предметного стекла делаем мазок, как для исследования крови,
затем высушиваем и фиксируем над пламени спиртовки, затем наносим несколько
капель водного фуксина на 2-3 минуты, промываем и высушиваем.
Бактериальные клетки-окрашены фуксином, светлый овал-капсула
5.Окраска по Клейну (для обнаружения спор)
1-покрываем фильтровальной бумаги, на бумагу карболовый фуксин Циля и
подогреваем над спиртовкой до появления паров 4-5 раз
2-пинцетом снимаем бумажку, обесцвечиваем, погружая в 1% р-р серной кислоты
на 5-6 сек.
3-промываем и докрашиваем метиленовым синим 3-5 мин, затем снова
промываем и высушиваем
Споры-красные, клетки-синие
 Морфология бактерий
СТРОЕНИЕ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ (Г- БАКТЕРИЙ!!!)
1-клеточная стенка
(есть только у эубактерий) Отличие прокариот
2-цитоплазматическая мембрана
3-цитоплазма от эукариот
4-нуклеоид 1.Нет аппарата митоза,
5-мезосома ядрышек и центриолей
6-периплазматическое пространство
2.Нет гистоновых белков
7-включения
3.Двунитевая кольцевая
8-рибосома
9-капсула сверхспирализованная
10-микрокапсула ковалентно связанная
11-жгутик нуклеосома
12-плазмида 4. Нет нуклеолемы
13-ворсинка 5. Рибосомы 70S
14-фимбрии(реснички) 6.Размножаются делением
Влючения: капельки 15-перемычки надвое
нейтральных липидов, воска,
серы, гранулы гликогена, зерна
волютина (ист-к АТФ)

ПЕПТИДОГЛИКАН
СОСТОИТ ИЗ ДВУХ ЧАСТЕЙ:
В-гликозидная связь 1 -остов – это совокупность чередующихся
молекул аминосахаров (N-ацетилглюкозамин
и N-ацетилмураминовая кислота
2 часть-пептидные цепочки:
Боковые-набор тетрапептидов (здесь
ДИАМИНОПИМЕЛИНОВАЯ кислота)
Поперечные-набор пентапептидов
ЗАПОМИНАЕМ, ЧЕМ
РАЗРУШАЮТСЯ ТЕ ИЛИ ИНЫЕ СВЯЗИ
В-гликозидная- ЛИЗОЦИМОМ
Межпептидные- ЭНДОПЕПТИДАЗОЙ
Связь между N-ацетилмураминовой и
боковыми тетрапептидами- АМИДАЗОЙ

Имеет 2 слоя : наружный- пластичный (липопротеины+ЛПС),

внутренний -ригидный (пептидогликан…строение знать!!!)
Функции Клеточной стенки:
1. Определяет и сохраняет постоянную форму м/о
2. Защищает внутреннюю часть клетки от
механических и осмотических факторов
3. Регулирует рост и деление клеток
4. Несет антигенную структуру
5. Обеспечивает связь с внешней средой через
каналы и поры
6. Нарушение ее синтеза приводит к L-
трансформации
7. В ней сосредоточены рецепторы для фагов
Функции пептидогликана
(наделяет иммуннобиологическими св-ми):
1.В его составе содержатся родоспецифические и
видоспецифические АГ-детерминанты
2.Запускает классический и альтернативный пути
активации системы комплимента
3.Тормозит фагоцитарную активность
4.Угнетает миграцию макрофагов
5.Индуцирует ГЗТ
6.Обладает противоопухолевым и пирогенным
действиями.
 СТРОЕНИЕ НАРУЖНОГО СЛОЯ:
1.Липопротеины- связывают наружную мембрану с пептидогликаном
2
2.Липополисахарид - это совокупность липида А и полисахарида (ядро, одинаковое
для всех + терминальная цепочка, индивидуальная для каждой бактерии)
ЭТО ЭНДОТОКСИН!!!
Выполняет 2 важнейшие функции: определяет АГ-специфичность бактерии и
является одним из главных факторов патогенность

3.Наружная мембрана- представлена двойным слоем липидов, но значительная часть

фосфолипидов замещена на липополисахариды + набор белков (3-4 из них главные-
белки порины, которые пронизывают весь слой и образуют поры. Остальные
выполняют вторичные функции (транспорт, конъюгацию и т.д.)

Сравнение клеточной стенки Г+ и Г- бактерий

1.ТОЛСТАЯ 20-60нм (у Г- ТОНКАЯ 14-18нм)
2.У Г+ есть ТЕЙХОЕВЫЕ КИСЛОТЫ (у Г- нет)
3. У Г+ НЕТ диаминопимелиновой кислоты!!!
4. Все, что я описала выше присуще только Г- бактериям!! (Липопротеины, ЛПС и нар.мембрана).
У Г+ есть только пептидогликан!!!

L-трансформация бактерий
Факторы, которые способствуют
образованию:
Антибиотики (пенициллин,
цефалоспорины)
Ферменты (лизоцим, амидаза,
эндопептидаза)
Антимикробные АТ
Все обладают сходными св-ми:
1.Сходство морфологических изменений-
образование нитевидных, волокнистых
,колбасовидных, шаровидных и
гранулярных форм
2.Сходные культуральные св-ва
(анаэробные и микроаэрофильные
условия роста, потребность в ХС и
сывороточном белке, колонии 2-х типов)
3.Постепенное превращение Г+ в Г-
4.Образование стабильных и
нестабильных L-форм
5. Изменение АГ св-в (утрата К и О- АГ)
6. Снижение вирулентности
7. Длительное персистирование
8.Способность к возвращению в
исходную форму
Колонии образуют
«Яичницу глазунью»
центральная зона+
фестончатая
периферическая
(Микоплазмы на плотной
пит.среде растут ТАКЖЕ)
Значение L-форм
Долго персистируют в организме и вызывают
рецидив заболевания (Поэтому и говорят о
привыкании к антибиотикам)
ММикоплазмы (M.pneumoniae,
M.hominis, M. Atritidis,M.fermenans и др)
Очень похожи на L-формы бактерий
(на питательной среде растут также)
Главное отличие- у них нет КС!!!
-Очень мелкие 100-450нм
-Полиморфные
-Неподвижные
-Размножаются бинарным делением или
почкование
-Вызывают респираторный микоплазмоз,
урогенитальные заболевания, артриты
 СТРОЕНИЕ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ:
(аналогична любой биологической мембране, поэтому строение даже описывать не буду)
Функции цитоплазматической
мембраны:
1.Воспринимает все химические сигналы
из внешней среды
2.Основной осмотический барьер
3.Регуляция клеточного деления, роста,
репликации и сегрегации хромосом и
плазмид
4.Участие в синтезе компонентов КС
5.С ней связаны жгутики
6.В ней сосредоточены ферменты- в т.ч.
системы переноса электронов
7.Участие в процессах транспорта всех
веществ
8.Стабилизация рибосом
9.Образование мезосом
Жгутики
Состоят из белка- флагеллина.
Определяют подвижность бактерий.
Имеют 3 части:
1.Спиральная жгутиковая нить
постоянной толщины
2.Крючок- соединен с базальным
тельцем и к нему присоединяется нить
3.Базальное тельце- состоит из
центрального стержня, заключенного в
систему колец
Капсулы:
1.Микрокапсула - выявляется только при ЭМ в виде
мукополисахаридных фибрилл.
2. Капсула- представляет собой слизистой слой,
который связан с КС. Имеет важные функции: образуют
мощную оболочку, предохраняет от высыхания,
определяет АГ-специфичность и иммуногенные
свойства, могут являться факторами патогенности,
предотвращают фагоцитоз.
3. Слизистые слои
Ворсинки-состоят из полости и особого белка.
Являются носителями конъюгативных плазмид (F-
плазмид, R-плазмид) и служат аппаратом конъюгации
(донорные пили)
Фимбрии, или реснички -короткие нити, в большом
количестве окружающие бактериальную клетку. Служат
фактором патогенности, т.к. прикрепляются к клеткам.
Споры- это покоящиеся клетки, образующиеся при
неблагоприятных условиях.
Они очень устойчивы , благодаря наличию СОЛИ
ДИПИКОЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ.
СТРОЕНИЕ
1.ПРОТОПЛАСТ (ядро)- содержит ЦМ, ЦП,
хромосому и компоненты белок-синтезирующей
системы
2.СТЕНКА СПОРЫ-представлена пептидогликаном
3.КОРТЕКС-самый толстый слой, состоит из
пептидогликана, содержащего мало поперечных
сшивок, поэтому легко разрушается лизоцимом.
4.ОБОЛОЧКА СПОРЫ- состоит из
кератиноподобного белка.
5.ЭКЗОСПОРЫ- липопротеиновая оболочка,
содержащая немного углеводов.
 СПОРООБРАЗОВАНИЕ
А,Б- конденсация нуклеоида и отделение его за счет
образования септы (на одном из полюсов)
В-ЦП обрастает протопласт споры и возникает складка-
из двух слоев ЦМ
Г- Далее они сшиваются , образуя предспору
(двойная оболочка)
Д-Между двумя мембранами формируется слой кортекса

ПРОРАСТАНИЕ СПОР:

Активация Начальная стадия Стадия роста

Обязательное условие- Автолизин(лизоцим) разрушает Появляется новая растущая
кислая среда, кортекс, поступает вода, клетка (протопласт+КС),
повышенная высвобождаются соли происходит деление этой
температура, дипикалиновой кислоты, клетки, и в конечном итоге-
мех.повреждение образуется полноценная
разрушаются другие
клетка
компоненты.

Генетика бактерий:
Особенности генетики бактерий
1.Хромосомы расположены свободно в ЦМ,
молекула ДНК находится
в суперспирализованном состоянии
2.Передача генетической информации
происходит не только по вертикали
(от родительской -дочерней, но и по горизонтали
(конъюгация, трансдукция, трансформация)
3.Помимо хромосомного генома,
имеется еще и плазмидный
4.Являются гаплоидными организмами, однако
содержание ДНК непостоянно.
Белоксинтезирующая система
1.РИБОСОМЫ- функции:
-Связывание всех компонентов системы
-Каталитическая (гидролиз АТФ
и образование пептидных связей)
-Транслокация растущего пептида, связанного с тРНК,
с одного участка рибосомы на другой и продвижение
рибосомы вдоль мРНК.
2. мРНК
3. 20 АМИНОАЦИЛ-ТРНК, для образования
которых необходимы аминокислоты,
аминоацил-тРНК-синтетазы , тРНК и АТФ. (это
заряженная Е и связанная с тРНК аминокислота,
готовая к подвозу к рибосоме и включению в
синтезирующийся на ней пептид)
4. БЕЛКОВЫЕ Ф-РЫ ИНИЦИАЦИИ (IF-1,IF-2,IF-
3)-участвуют в организации активного комплекса из
30S и 50S, мРНК и аминоацил-тРНК, который
запускает работу рибосом- трансляцию мРНК.
5.БЕЛКОВЫЕ Ф-РЫ ЭЛОНГАЦИИ (EF-tu, EF-ts,
EF-g)-участвуют в удлинении полипептидной цепи
6.БЕЛКОВЫЕ Ф-РЫ ТЕРМИНАЦИИ (RF-1,2,3)-
обеспечивают отделение полипептида от рибосомы и
окончание синтеза белка.
7.Некоторые другие белковые факторы
(ассоциации, диссоциации)
8.ГТФ (другую нельзя!!!)
9.Неорганические катионы- Mg,Ca,K,NH4
ФОРМЫ ОБМЕНА ГЕНЕТИЧЕСКИМ МАТЕРИАЛОМ У БАКТЕРИЙ:

1.Трансдукция – передача генетического материала от донора реципиенту при помощи

бактериофага. При этом формируются дефектные фаги, не способные к продуктивному процессу,
и бактерия с новыми свойствами.
Трансдукция может быть: 1) Неспецифической – передаётся любой ген
2) Специфической – только 1 определенный ген (например, lac+).

2. Конъюгация – передача генетического материала от бактерии-донора бактерии-реципиенту

посредством прямого контакта через F-пили (половая пиль)

3. Трансформация – передача генетического материала при помощи изолированной ДНК

4. Трансфекция – трансформация фаговой ДНК.

5. Сексдукция – перенос генов от донора реципиенту при помощи F'-фактора.

РАССМОТРИМ МЕХАНИЗМЫ ТРАНСДУКЦИИ И КОНЪЮГАЦИИ:

1. Адгезия бактериофага на поверхности бактерии-
донора с последующим проникновением
2. Размножение бактериофага внутри клетки
3. Самосборка фаговых частиц и образование
дефектного бактериофага (сохраняет инфекционные
свойства и содержит
какой-либо фрагмент ДНК бактерии донора)

4. Перенос дефектным бактериофагом включенной

ДНК в клетку-реципиент
5. Рекомбинация и включение перенесенной ДНК в
клетку-реципиент, а следовательно, изменение ее
свойств.

1.В процессе конъюгации донорная клетка образует F-

пили (половая пиль, плазмида)
(1-2 из общего количества ворсинок).
2.Прикрепление F-пили к клетке-реципиенту.
3.Образование прямого контакта посредством
цитоплазматического мостика (канала), через который
осуществляется перенос ДНК.
4.Когда реплицируется весь F-фактор (плазмида) и
передастся в реципиентную клетку, происходит
достройка второй нити и замыкание кольцевидной
двунитиевой F- плазмиды. Исходная F-плазмида
остается в донорной клетке.
5.Результат: в клетку-реципиент переходит F-
плазмида, и клетка становится новым донором.
 ЧТО ТАКОЕ ПЛАЗМИДЫ И КАКИМИ ОНИ БЫВАЮТ?
ПЛАЗМИДЫ – наипростейшие автономные организмы, лишенные оболочки, собственных систем синтеза
белка и мобилизации энергии и представляющие собой особый класс абсолютных внутриклеточных
паразитов, наделяющих своих бактерий-хозяев полезными для них свойствами.
Бывают следующих видов:

F-плазмиды – контролируют синтез F-пилей и передачу генетического материала от бактерий-доноров

(F+) к бактериям-реципиентам (F-) в процессе конъюгации.

Плазмиды бактериоциногении (Col – плазмиды) – кодируют синтез бактериоцинов – белковых

продуктов, вызывающих гибель бактерий того же или близких видов (антогонист бактерий)

R-плазмиды – кодируют устойчивость к лекарственным препаратам

Плазмиды патогенности – контролируют вирулентные свойства бактерий и токсинообразование.

- Hly-плазмиды – кодируют синтез гемолизина
- Ent-плазмиды – кодируют синтез энтеротоксина
- Tox-плазмиды – кодируют синтез экзотоксина
Плазмиды биодеградации – кодируют способность утилизировать органические соединения
(углеводородные, циклические, ароматические) в качестве источника углерода и энергии.

Криптические плазмиды – биологические функции неизвестны.

Физиология бактерий:
Инициация процесса репликации в месте прикрепления ДНК особым рецептором
к ЦМ→ обр. дочерняя молекула ДНК и также прикрепляется к рецептору на ЦМ

Удлинение области ЦМ между Клетка удваивает свою длину и точно по ее экватору, между
двумя молекулами ДНК дочерними ДНК, формируются встречные инвагинации ЦМ и
(родительской и дочерней) связанной с ней области КС

После слияния инвагинированных участков ЦМ и КС обр. межклеточная перегородка, и

родительская клетка разделяется на две равные дочерние клетки.
 МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ МИКРОБОВ:

Стационарный:
С питательными средами Глубинный с аэрацией:
не производят никаких Применяются специальные
манипуляций, и они реакторы, которые
сохраняются представляют собой котлы с ПС
постоянными. и автоматическим
Выход биомассы поддерживанием tºC, pH , r𝐇𝟐
незначительный, т.к. и дозированным поступление
преобладают питательных веществ.
анаэробные условия Реакторы постоянно
культивирования. продуваются стерильным
воздухов и перемешиваются,
что создает условия для ↑
концентрация О𝟐 и создания
Периодические аэробных условий для
культуры протекания энергетических
микроорганизмов процессов → Максимальный
выход биомассы
Проточный:
Позволяет создать условия в
аппарате (хемостате, с
постоянным добавлением
свежей ПС и турбидостата, с
постоянной плотностью
бактериальной популяции),
при которых клетки могут
находиться в определённой фазе
роста длительное время, т.к.
обеспечивается неизменность
условий культивирования →
Максимальный выход биомассы
Непрерывные
культуры
микроорганизмов

Фазы роста периодической культуры: Лаг-фаза (латентная): адаптация бактерий у

питательной среде, начало размножения

Экспоненциальная фаза: бактерии активно

размножаются

Стационарная фаза: концентрация бактерий в среде

постоянная

Фаза отмирания: малое количество жизнеспособных

бактерий, постепенное отмирание

ТРЕБОВАНИЯ, ПРЕДЪЯВЛЯЕМЫЕ К ПИТАТЕЛЬНЫМ СРЕДАМ:

1. Должны содержать необходимый набор питательных веществ

(макро- и микроэлементы, факторы роста)

2. Иметь оптимальную для микроба pH

3. Иметь оптимальную концентрацию солей (изотоничность)

4. Иметь достаточную влажность

5. Среда должна быть стерильной

 КЛАССИФИКАЦИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД:

ПО НАЗНАЧЕНИЮ: ПО ПРОИСХОЖДЕНИЮ:
1) Общего назначения (универсальные) – для Естественные
выращивания всех микробов (МПБ, МПА) (неопределённого состава)
2) Специальные – для изучения свойств и Искусственные
диагностики микробов (определённого состава)
• Избирательные (элективные):
предназначены для определенного вида микробов
(МСА, желчный МПБ, щелочной МПА)
• Дифференциально-диагностические: среды, ПО КОНСИСТЕНЦИИ:
позволяющие отличать одни виды бактерий от Жидкие (МПБ, желчный МПБ)
других, по их ферментативной активности или Плотные (жидкая среда, уплотненная
культуральным проявлениям 1,5-2% агар-агара: МПА, МСА, ЖСА)
• Накопительные
Полужидкие (конц. агар-агара 0,5-0,7%)
• Транспортные
• Среды для хранения культур Твёрдые (отходы растениеводства)

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СРЕДЫ:
Состав среды Эндо:
Какие бывают разновидности? ● Питательная основа - МПА
● Среды для обнаружения способности микробов ● Углевод - лактоза
расщеплять определённые углеводы (сахара) и ● Индикатор - обесцвеченный фуксин
многоатомные спирты (полиолы). Состав среды Плоскирева:
(Эндо, Плоскирева, Левина, среды Гисса ("пёстрый ряд")) ● Питательная основа - ЖСА
● Среды для обнаружения протеолитической и (желчно-солевой агар),
гемолитической способности микроорганизмов бриллиантовый зеленый
(расщепление белков и крови). (Свёрнутая сыворотка, ● Углевод - лактоза
питательная желатина, кровяной агар) ● Индикатор – нейтральный красный
● Среды с определёнными химическим веществами,
которые служат источником питания для одних видов, и
не усваиваются другими (Цитратная среда для кишечной
палочки).
● Среды для обнаружения редуцирующей способности
микроорганизмов. (Лакмусовое молоко и др.)

ТИПЫ ПИТАНИЯ БАКТЕРИЙ

ПО ИСТОЧНИКУ ЭНЕРГИИ:
ПО СПОСОБУ УГЛЕРОДНОГО ПИТАНИЯ:
Фототрофы - синтезируют энергию за счет
Аутотрофы - использующие CO2 и др.
солечного света (цианобактерии, архебактерии,
неорганические соединения.(нитрифицирующие
пурпурные и зеленые бактерии)
бактерии, серобактерии, железобактерии)
Хемотрофы - используют энергию, получаемую
Гетеротрофы - питающиеся за счёт готовых орг.
за счет окисления неорганических соединений
соединений. (Сапрофиты - утилизирующие орг.
(нитрифицирующие, водородные, анаэробные
остатки отмерших организмов в окр. среде;
метанообразующие бактерии, некоторые
Облигатные и факультативные паразиты)
железобактерии, аминобактерии)
 МЕХАНИЗМЫ ПИТАНИЯ БАКТЕРИЙ:
АКТИВНЫЙ ТРАНСПОРТ:
Протекают с участием
связывающих белков,
локализованных в
периплазматическом
пространстве. У них отсутствует
каталитическая активность, но
они обладают очень высоким
сродством к определенным
питательным веществам и
функционируют только в
комплексе со специфическими
пермеазами, осуществляющими
активный перенос субстрата через
мембрану. Энергия используется
для снижения сродства пермеазы
к своему субстрату на внутренней
поверхности мембраны.
Против градиента
концентрации,
с затратами энергии.
ТИПЫ ДЫХАНИЯ
БАКТЕРИЙ:
ОБЛЕГЧЕННАЯ ДИФФУЗИЯ: ПАССИВНАЯ ДИФФУЗИЯ:
Характеризуется выраженной Происходит в направлении от
субстратной специфичностью и большей концентрации к
протекает при обязательном меньшей, т. е. по градиенту
участии специфических белков концентрации.
(пермеазы), локализованных в Субстратная специфичность
мембране, которые распознают и отсутствует,
связывают молекулу субстрата на без затрат энергии
внешней стороне мембраны и
обеспечивают перенос через
мембрану. На внутренней
поверхности мембраны комплекс
пермеаза—субстрат
диссоциирует, молекула
субстрата включается в общий
метаболизм клетки, а пермеаза
повторяет цикл переноса.
По градиенту концентрации без
затрат энергии, но с более
высокой скоростью.
Строгие (облигатные) аэробы:
размножаются только в присутствии
кислорода 21%
АЭРОБЫ
Микроаэрофилы:
нуждаются в уменьшенной
концентрации свободного кислорода
Факультативные анаэробы: могут
потреблять глюкозу и размножаться
как в аэробных, так и в анаэробных
условиях
Строгие (облигатные) анаэробы:
размножаются только в
АНАЭРОБЫ бескислородных условиях, т.к.:
1) О2 угнетает анаэробные
энергообразующие реакции
2) Нет фермента каталазы → в
присутствии О2 накапливается Н2О2
оказывающая бактерицидное
действие
3) отсутствует система редокс-
потенциала
 МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ
АНАЭРОБОВ:
Способы удаления 𝑶𝟐 :
1. Механические:
● Посев уколом вглубь высокого столбика ПС
(метод Вайнберга)
● Заливка ПС минеральным маслом
● Использование аэростатов
● Посев в среду Вильсон-Блера
2. Физические:
● Регенерация ПС кипячением
● Замена обычной атмосферы, атмосферой
индифферентного газа (𝑁2 , 𝐻2 , Ar, Kr)
● Посев в среду Китта-Тароцци
3. Химические:
● Добавление в ПС редуцирующих веществ
(глюкоза)
● Использование веществ химически
анаэробов (щелочной раствор пирогаллола)
Состав среды Вильсон-Блера (плотная среда):
● Сахарный агар (агар + глюкоза)
● Сернистокислый натрий 1%
● Хлорное железо 0,08%
Строгие анаэробы окисляют 𝑺𝑶𝟑 до 𝑯𝟐 𝑺, а тот
взаимодействует с Fe с образованием чёрного
𝑭𝒆𝟐 𝑺𝑶𝟒 , который окрашивает колонии бактерий.
Состав среды Китта-Тароцци (жидкая среда):
● МПА
● 0,5% глюкозы (для связывания остатков O2 )
● Кусочки печени/почек/мозга
(для адсорбции остатков O2 )
● Залита слоем вазелинового мазла
(препятствует повторному растворению O2 )
Перед посевом проводят РЕГЕНЕРАЦИЮ для
удаления растворенного O2

ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СРЕДЫ ГИССА («ПЁСТРЫЙ РЯД»)

Это жидкие с поплавком или полужидкие среды,

разлитые в пробирки столбиком, в состав которых входит
индивидуальный углевод (глюкоза, лактоза, сахароза,
мальтоза, арабиноза, манит и др.) и индикатор, изменяющий
окраску в кислой среде.
● Питательная основа – 1% пептонная вода (жидкая среда)
0,5% агар (полужидкая среда)
● Углевод - индивидуально
● Индикатор:
В жидкой среде Андреде (бесцветный → красный)
В полужидкой – ВР (розоловая кислота и водный голубой)
(Желтый, оранжевый → голубой, зеленоватый)

Если микроб расщепляет сахар, образуется кислота,

цвет среды изменяется.
Некоторые микроорганизмы образуют и газ,
пузырьки которого накапливаются в поплавке или
застревают в полужидком агаре.
 Инфекция и иммунитет:

ОСНОВНЫЕ ПОНЯТИЯ:
АСЕПТИКА – комплекс мер предосторожности в медицине, клинической
микробиологии, фармации, направленных на предупреждение заноса в рабочую зону
посторонних микроорганизмов с тела человека, из воздуха, других объектов внешней
среды и предотвращение развития нежелательных процессов (инфицирование
человека, контаминация лекарственных форм, ПС, посуды, чистых культур и т.п.)
АНТИСЕПТИКА – совокупность способов подавления роста и размножения
патогенных и условно-патогенных микробов на интактных и (или) поврежденных
кожных покровах, слизистых оболочках и объектах внешней среды
ДЕЗИНФЕКЦИЯ – мероприятия, направленные на полное уничтожение
вегетативных и покоящихся форм патогенных и условно патогенных микробов на
объектах внешней среды, в т.ч. медицинского назначения, и ставящие целью
предупреждение передачи возбудителя от зараженного организма к незараженном.
СТЕРИЛИЗАЦИЯ – комплекс мероприятий, направленных на полное уничтожение в
объекте живых микроорганизмов в любых формах (вегетативных и спор).
ПАСТЕРИЗАЦИЯ — процесс уничтожения вегетативных форм микроорганизмов
(кроме термофильных) в жидких средах, пищевых продуктах путём однократного и
непродолжительного их нагрева до температур ниже 100 °C.
ТИНДАЛИЗАЦИЯ — метод уничтожения спорообразующих микроорганизмов в
различных объектах путем дробного воздействия теплом

МЕТОДЫ СТЕРИЛИЗАЦИИ

МЕХАНИЧЕСКИЕ: ФИЗИЧЕСКИЕ: ХИМИЧЕСКИЕ:

ФИЛЬТРАЦИЯ 1. УФ-излучение:
Применяется для Бактерицидные лампы БУВ
обработки растворов и ПС, открытого и закрытого типов
не выдерживающих t c◦ (воздуха и поверхности).
обработку. Используют 2. Ионизирующее излучение:
мембранные и свечевидные гамма-лучи (2,5 Мрад).
мелкопористые фильтры (пластмасса одноразового
(D пор – 0,2-0,4 мкм), применения, перевязочные
задерживающие клетки материалы, некоторые
м/о. Оказывают ↑ лекарственные препараты)
сопротивление при 3. Термическая стерилизация
фильтрации, в приемной ● Прокаливанием в пламени
емкости создают вакуум, (бактериологическая петля,
что ↑ процесс фильтрации. скальпель, пинцет);
(НО, через фильтры ● Кипячением в 2% содовом
проходят вирусы и растворе (изделия из стекла);
L-формы бактерий) ● Горячим воздухом в сухожаре
● Паром под давлением в
автоклавах
1. Газовая стерилизация в
газовых камерах (окисью
этилена и пропилена, озоном,
метилбромидом, парами
формальдегида,
(эндоскопические
инструменты, аппараты для
искусственного
кровообращения и
искусственная почка, кетгут,
пластмассовые изделия).
Метод требует длительного
выдерживания после
стерилизации.
2. Растворы химических
реагентов
 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА СТЕРИЛИЗАЦИИ:
● ХИМИЧЕСКИЙ:
Используются вещества с определенной температурой плавления:
Температура
Вещество
плавления
Бензонафтол 110
Антипирин 115
Сера 119
Бензойная кислота 120-122
Манноза и 132-133
мочевина
● БИОЛОГИЧЕСКИЙ:
Биотесты – полоски фильтровальной бумаги, марли и т.п., на которых находятся
споры бактерий с известной термостойкостью, споры с известной численностью и
проч.

Абортивная

Латентная
ИНФЕКЦИОННЫЙ ПРОЦЕСС
Процесс взаимодействия между м/о Дремлющая
(1 компонент) и макроорганизмом
(2 компонент - человек), Типичная
протекающий в определённых
условиях внешней среде.
(3 компонент). Атипичная
В зависимости от свойств М/О и
макроорганизма выделяют Хроническая
следующие формы инфекции:
Медленная

Бактерионосительство

КЛАССИФИКАЦИЯ ИНФЕКЦИЙ:

ПО ИСТОЧНИКУ: ПО ЭТИОЛОГИИ:
1. Антропонозы (болеет только человек)
2. Зоонозы (болеют животные, но человек
1. Вирусные
может тоже заразиться)
2. Грибковые (микозы)
3. Зооантропонозы
3. Бактериальные
(болеют как животные, так и люди)
4. Протозойные (протооозы)
4. Сапронозы (источников является
внешняя среда, в основном вода и почва)
 ПУТИ И СПОСОБЫ ЗАРАЖЕНИЯ

АЭРОГЕННЫЙ: ФЕКАЛЬНО-ОРАЛЬНЫЙ:
● воздушно-капельный, ● Прямой (грязные руки)
● воздушно-пылевой ● Водный (питьевая вода)
(стафилококки, туберкулез, ● Пищевой (алиментарный)
ОРЗ, коклюш, ангина) ● «Мушиный фактор»
КОНТАКТНЫЙ ТРАНСМИССИВНЫЙ
(прямой и непрямой) (кровососущие насекомые)

ВЕРТИКАЛЬНЫЙ МАНИПУЛЯЦИОННЫЕ
(трансплацентарный) (артификационный-врачебный)

ПОЛОВОЙ

ПАТОГЕННОСТЬ
Это потенциальная, генетически заложенная
способность микроорганизма вызвать в
чувствительном к нему макроорганизме
развитие той или иной формы инфекционного
процесса
(НЕ ОБЯЗАТЕЛЬНО ЗАБОЛЕВАНИЕ!)
ВИРУЛЕНТНОСТЬ
Это степень, или мера патогенности.
(авирулентные, высоко - слабовирулентные)
Измеряется в специальных единицах:
DLM (dosis letalis minima) – погибает 95 %
DCL (dosis certa letalis ) погибает 100%
DL50 –погибает 50 %

КАЧЕСТВЕННОЕ ПОНЯТИЕ! КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ПОНЯТИЕ!

ТОКСИНЫ БАКТЕРИЙ
ЭКЗОТОКСИН: ЭНДОТОКСИН:
ЛПС клеточной стенки Г «-» бактерий,
Белки, выделяемые в среду живыми бактериями
выделяется только после разрушения клетки
1. Имеются у Г «-» и Г «+» бактерий 1. Имеются только у Г «-» бактерий
2. Белки, прижизненная секреция во внешнюю 2. ЛПС высвобождается только при
среду разрушении клетки
3. Высокая токсичность! 3. Менее токсичны!

4. Специфичность и избирательность действия 4. НЕТ специфичности и избирательности

5. Термолабильны 5. Термостабильны
6. Индуцируют образование антимикробных
6. Индуцируют образование антитоксинов
антител (АТ)
7. Превращаются в анатоксины при обработке
7. НЕ превращаются в анатоксины
формалином
АНАТОКСИН (АГ) – экзотоксин, подвергшийся специальной обработки (формалин 40Сº, 30 дней), в
результате чего он утрачивает свою токсичность, но сохраняет иммуногенность и способность
вызывать в организме синтез специфических АНТИТЕЛ (АТ).
Используется для создания искусственного антитоксического иммунитета (вариант вакцины)
АНТИТОКСИНЫ – специфические антитела (АТ), вырабатывающиеся в организме в ответ на
введение ЭКЗОТОКСИНА.
Группа ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ БАКТЕРИЙ
1. Факторы адгезии и колонизации (прикрепление бактерий к клеткам слизистой) -
взаимодействия со

фимбрии, белки наружной мембраны, липополисахарид (ЛПC)

слизистыми
Факторы

2. Факторы пенетрации (проникновение бактерий в клетки слизистой) - белки

наружной мембраны

3. Факторы инвазии (проникновение через слизистую) - белки наружной мембраны,

гиалуронидаза
Антифагоцитарные

4. Факторы, препятствующие фагоцитозу - капсулы, белок А, компоненты клеточной

стенки - пептидогликан, V-антиген, белки v-w, фракция I и др.
факторы

5. Факторы, подавляющие фагоцитоз - белок М, продукты жизнедеятельности бактерий

6. Ферменты "защиты и агрессии":

● Плазмокоагулаза – свертывает плазму крови вокруг бактерии и они становятся
Ферменты защиты и

недоступными для фагоцитоза и АТ

● Фибринолизин (стрептокиназа) – растворяет фибриновый сгусток вокруг бактерии и
агрессии

высвобождает ее для распространения по крови

● Лецитиназа – разрушает лецитин в мембранах клеток, клетки разрушаются (летальный
токсин)
● Гемолизин – разрушает эритроциты крови (вызывает гемолиз)
● Гиалуронидаза – разрушает гиалоурановую кислоту в соединительной ткани (фактор
распространения)
● ДНК-аза
микробов
Токсины

7. Токсины микробов – экзотоксины и эндотоксины

Иммунитет

ВРОЖДЕННЫЙ
(видовой, наследственный, ПРИОБРЕТЕННЫЙ
неспецифический, естественная (специфический, индивидуальный)
резистентность)

АКТИВНЫЙ ПАССИВНЫЙ

ЕСТЕСТВЕННЫЙ ИСКУССТВЕННЫЙ ИСКУССТВЕННЫЙ ЕСТЕСТВЕННЫЙ

(после перенесенного (Введение вакцины) (Введение (передача АТ от
заболевания) сывороток с АТ) матери к ребенку)
 ЧТО ТАКОЕ АНТИГЕН (АГ), ЕГО СВОЙСТВА И КАКИМ БЫВАЕТ?
АГ(белки, гликопроетины) - это любые вещества, в т.ч. содержащиеся в микроорганизмах и
клетках, или выделяемые ими, которые несут признаки генетически чужеродной информации и при
введении в организм вызывают различные формы иммунного ответа.
СВОЙСТВА:
• Чужеродность – по отношению к тому организму, в который попал
• Специфичность – отличием от других АГ структурными особенностями
• Антигенность – способность вызывать иммунный ответ в конкретном организме
• Иммуногенность – способность АГ формировать в организме иммунитет (иммунологич. память)
• Толлерогенность- способность вызывать развитие неотвечаемости или иммунной толерантности
• Высокая молекулярная масса (больше 10 кДА)
• Коллоидная природа (растворимость в жидкостях организма)
• Способность подвергаться метаболизированию в организме

СТРОЕНИЕ АНТИГЕНА (АГ):

● ЭПИТОП – участок молекулы АГ из нескольких АК

остатков, специфически взаимодействующий с АГ-
связывающим центром (паратопом) антигенраспознающих
рецепторов лимфоцитов или АТ.
(бывают линейными и конформационными)

● ШЛЕППЕР (высокомолекулярный носитель) – выполняет

роль стабилизатора стереохимической структуры эпитопа в
наиболее выгодном положении для соединения с рецепторной
группой АТ.
АНТИГЕНЫ БЫВАЮТ:
● ПОЛНОЦЕННЫМИ - обладают и специфичностью, и иммуногенностью, обеспечивают запуск
иммунного ответа и взаимодействие с продуктами иммунных реакций.
(белки, липопротеиды, гликопептиды, ЛПС)
● НЕПОЛНОЦЕННЫМИ (гаптены) - обладают только специфичностью, не способны вызывать
иммунный ответ самостоятельно, но могут взаимодействовать готовыми АТ. (полисахариды, липиды,
нуклеиновые кислоты (НК))
● ПОЛУГАПТЕНЫ – низкомолекулярные вещества и соединения, фактически готовые эпитопы.
● СУПЕРАНТИГЕНЫ – неспецифически взаимодействуют с рецепторами лимфоцитов и вызывают
поликлональную активацию лимфоцитов
КЛАССИФИКАЦИЯ АНТИГЕНОВ БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ:

1. Жгутиковые Н-антигены (белок флагеллин)

2. Соматические О-антигены (связан с клеточной стенкой бактерий)

3. Капсульные (слизистого слоя) К-антигены

(часто маскируют О-антигены, располагаясь более поверхностно)
4. Оболочечные антигены:
1-я группа — Ј, В, Vi (полисахариды, нетоксичны, вызывают
образование антител и обеспечивают диагностику заболеваний)
2-я группа - А, М (белковый и полисахаридный комплекс, токсичны, подавляют фагоцитоз)

5. Антигены бактериальных токсинов (секретируемые) НЕОБХОДИМО ЗНАТЬ, ДЛЯ:

● изготовления новых вакцин;
6. Протективные антигены (образуются при попадании в ● совершенствования
организм человека, обеспечивают инфекционный иммунитет) классификации МО;
7. Перекрестно реагирующие АГ (гетероантигены) ● идентификации возбудителей
 КТО ТАКИЕ АНТИТЕЛА (АТ), ИХ СВОЙСТВА И КЛАССЫ?
АНТИТЕЛА (АТ) – уникальные сывороточные белки – иммуноглобулины (гамма-глобулины),
которые вырабатываются клетками лимфоидных органов в ответ на парентеральное поступление в
организм антигена и способные с ним специфически взаимодействовать
СВОЙСТВА:
• Специфичность – способность взаимодействовать только с комплементарным АГ
• Валентность – количество антидетерпинант в молекуле АТ, как правило, биваленты, хотя
существуют 4 и 10 валентные АТ
• Аффиность – прочность связи между детерминантами АГ и детерминантами АТ
• Авидность – характеризует прочность связи АГ с АТ в реакции АГ-АТ
СТРОЕНИЕ АНТИТЕЛА (АТ):

● 2 ИДЕНТИЧНЫЕ ТЯЖЕЛЫЕ Н-ЦЕПИ

(состоят из доменов VH, CH1, шарнира, CH2 и CH3)

● 2 ЛЁГКИХ L-ЦЕПИ (состоят из доменов VL и CL)

Домены АТ – компактные структуры, скрепленные
дисульфидной связью
Виды и функции доменов:
• VL-VH - связывание антигена
• CL-CH1 - нековалентное соединение L и H-цепей
• Шарнирная область - обеспечение подвижности Fab
фрагмента, влияние на функциональное состояние Fc
фрагмента, связь тяжелых цепей.
• CH2 - активация комплемента
• CH3 - цитотропная активность (фиксация на клетках-
мишенях)
Fab-фрагмент - определяет АТ специфичность Ig, АГ-связывающий фрагмент.
Fc-фрагмент - определяет способность АТ проходить через плаценту, нейтрализовать вирусы,
усиливать фагоцитоз, связывать комплемент, фиксироваться на клетках кожи (постоянный АК сост.)
ПЕРВИЧНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ
Возникает после первой встречи
организма с данным АГ
Клеточные механизм:
1. Биосинтез АТ начинается после
распознавания АГ и формирования
клеток, которые способны
синтезировать антитела к нему
(через 3 – 5 дней)
2. Скорость синтеза АТ относит. мала
3. Титры синтезируемых АТ НЕ
достигают MAX значений
4. Первыми синтезируются IgМ, затем
IgG. Позже всех появляются, но не во
всех случаях, IgA и IgE.
ВТОРИЧНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ
Возникает при повторном контакте с
одним и тем же АГ спустя 2 – 3 недели
Клеточные механизм:
1. Латентный период пределах нескольких
часов
2. Кривая нарастания АТ имеет
логарифмический характер
3. Титры АТ достигают MAX значений
4. Синтезируются сразу АТ - IgG.
Вторичный иммунный ответ обусловлен
формированием клеток иммунной памяти

РАЗЛИЧАЮТСЯ ПО СЛЕДУЮЩИМ ПРИЗНАКАМ:

● Продолжительность латентного периода
● Скорость нарастания титра АТ
● Общее количество синтезируемых АТ
● Последовательность синтеза иммуноглобулинов различных классов

ВАКЦИНА – иммунобиологический препарат, в основе которого находится

специфический антиген и который предназначен для создания искусственного
активного иммунитета.

ВАКЦИНЫ БЫВАЮТ:
1. ЖИВЫЕ (БЦЖ, коревая, сибиреязвенная, полиомиелитная и др.)
2. УБИТЫЕ (против кишечных инфекций, лептоспирозов, коклюша и др.)
3. ХИМИЧЕСКИЕ - в состав входят полные АГ
(химическая сорбированная брюшнотифозная)
По количеству входящих АГ делят на: МОНО-, ДИ-, ТРИ-, ПОЛИВАКЦИНЫ.
КОМБИНИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ - комплексные препараты из различных
вакцин и анатоксинов.
 ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
НЕМЕДЛЕННОГО ТИПА
К реакциям ГЧНТ относят:
Сывороточную анафилаксию,
сывороточную болезнь, сенную
лихорадку, бронхиальную астму,
крапивницу.
Состояние ↑ чувствительности к АГ
возникает через 7-14 дней после его
попадания в организм. Для его
выявления вводят разрешающую дозу
АГ (внутривенно или внутрикожно)
Особенности реакции анафилаксии:
1. Иммунологическая специфичность
2. Немедленность проявления
3. Опосредованность антителами
ВЫДЕЛЯЮТ 3 ФАЗЫ:
1. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ:
взаимодействие АГ с АТ (в т.ч. IgE),
фиксированным на клетках
сенсибилизированного организма
(тучных клетках и базофилах).
2. ПАТОХИМИЧЕСКАЯ: активация
протеолитических ферментов, в
результате действия которых из клеток
высвобождаются биологически
активные вещества – гистамин,
серотонин, брадикинин, лейкотриены.
3. ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ:
результат действия биологически
активных веществ на системы органов.
У человека страдает ССС.
СИМПТОМЫ: гипотония, учащение
мочеиспускания и дефекации, отек,
лейкопения, тромбоцитопения,
снижение титра комплемента,
понижение свертываемости крови и
температуры тела.
ГИПЕРЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ
ЗАМЕДЛЕННОГО ТИПА
Возникает при инфекционных болезнях
(туберкулез, бруцеллез), гельминтозах, и
выявляется с помощью кожных реакций
(специф. диагностические пробы)
Протекает с участием
сенсибилизированных ЛФ, поэтому -
патология клеточного иммунитета.
Замедление реакции на АГ объясняется
необходимостью более продолжительного
времени для скопления лимфоцитарных
клеток в зоне действия АГ.
Отличительные особенности ГЗТ:
1. Сроки развития – 6-72 часа
2. Эффекторы – Т-лимфоциты
3. в очаге воспаления преобладают
моноциты и лимфоциты
4. НЕ может быть передан пассивно с
помощью сыворотки
5. Проявляется только в отношении того
АГ, который индуцировал ее развитие
ВЫДЕЛЯЮТ 3 ФАЗЫ:
1. ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ:
Сенсибилизация с образованием Т-клеток-
памяти
При повторном поступлении того же
аллергена
Т-клетки памяти продуцируют цитокины
(лимфокины), опосредующие
воспалительный ответ.
2. ПАТОХИМИЧЕСКАЯ:
Стимулированные Т-лимфоциты
синтезируют большое количество
лимфокинов (цитокинов) — медиаторов
ГЧЗТ. Они вовлекают в ответную реакцию
на чужеродный АГ клетки других типов,
таких, как моноциты/макрофаги,
нейтрофилы.
3. ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКАЯ:
биологически активные вещества,
выделенные поврежденными или
стимулированными клетками, определяют
дальнейшее развитие аллергических
реакций замедленного типа.
 ИММУННЫЕ СЫВОРОТКИ – дефибринизированная плазма крови
иммунизированных животных или человека, использующаяся в диагностических и
лечебных целях.

БЫВАЮТ СЛЕДУЮЩИХ ВИДОВ:

1. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ – для их получения используют кроликов;
2. ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ сыворотки:
3. АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЕ (мл)
4. АНТИТОКСИЧЕСКИЕ (МЕ – количество сыворотки, нейтрализующее
определенное количество доз токсина для животных определенного вида и веса).
5. ТИТР СЫВОРОТКИ – количество ее МЕ в 1 мл. Титрование проводят на
животных и in vitro в реакциях флокуляции.

ЧТО ТАКОЕ СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА И КАКОВЫ ЕЁ ФУНКЦИИ?

СИСТЕМА КОМПЛЕМЕНТА – сложный комплекс (26 белков) сыворотки крови,
которые последовательно соединяются с комплексом АГ-АТ и необходимы для
протекания иммунологических реакций.
ФУНКЦИИ КОМПЛЕМЕНТА:
1. Разрушение (лизис) клеток
2. Опсонизация чужеродных клеток
3. Стимуляция хемотаксиса (привлечение лейкоцитов в очаг воспаления)
4. Стимуляция фагоцитоза
5. Повышение сосудистой проницаемости
6. Индукция и контроль воспаления
7. Регуляция адаптивного иммунного ответа
ПУТИ АКТИВАЦИИ СИСТЕМЫ КОМПЛЕМЕНТА:
1. Классический - активация системы комплемента АТ, связанными с АГ
(иммунными комплексами), агрегированными IgG или IgM.
2. Альтернативный - запускается при спонтанном расщеплении C3 или под
влиянием C3-конвертаз, а также ряда сывороточных либо микробных протеаз.
3. Лектиновый - активация комплемента через лектин, связывающий маннозу.