Práctica 6. División Celular en Lilium sp.

El Ciclo Celular de una célula somática constituye una serie ordenada de eventos
macromoleculares que culminan con la división de la célula madre en dos células hijas,
cada una de las cuales contiene una carga cromosómica idéntica a la de la célula madre. Las
cuatro fases principales en las que se divide este ciclo celular se muestran en la figura 1. La
célula sintetiza ARN y proteínas durante la fase G1 y de esta forma se prepara para
sintetizar ADN y replicar los cromosomas durante la fase S (síntesis) (Lodish et al., 2005).
Por tanto, el inicio de la replicación del ADN es lo que marca la transición de la fase G1 a la
fase S (Lewin, 2004).

En los organismos multicelulares puede ocurrir que muchas células diferenciadas salgan del
ciclo celular y entren en un estado de latencia en el que pueden sobrevivir por dias,
semanas, o incluso en algunos casos nunca volver a dividirse durante el resto del tiempo de
vida del organismo. Ejemplos de ello son las células nerviosas y las células del ojo, entre
otras. Esta fase de latencia es llamada fase G0, y el retorno de las células al ciclo, luego de
haber entrado en esta fase, es regulado y provee un control de la proliferación celular
(Lodish et al., 2005).

Figura 1. Fases del Ciclo Celular de una Célula Somática. Fuente: Lodish et al. (2005).

Después de la fase S, la célula entra en la fase G2, en la cual se sintetizan el ARN y las
proteínas requeridas para la división celular mitótica (Lodish et al., 2005). Las fases G1 y
G2 constituyen intervalos (gaps) del ciclo en los que no ocurre síntesis de ADN. Estas son
fases de preparación de la célula para la fase siguiente que funcionan como puntos de
restricción para el control del ciclo (Lewin, 2004; Alberts et al., 2006). Por su parte, las
fases G1, S y G2 son también llamadas en conjunto la Interfase, la cual se caracteriza por ser
el período del ciclo, previo a la división celular, en el cual la cromatina está dispersa en el
núcleo (Alberts et al., 2006; Clayton, 2006). El período de interfase culmina cuando la
célula sale de la fase G2 y entra en la fase M (Mitosis) la cual se divide en varias etapas, tal
como se muestra en la figura 2 (Lodish et al., 2005). En la profase, la cromatina dentro del
núcleo se condensa formando cromosomas visibles al microscopio óptico. Esta etapa
finaliza con ruptura de la envoltura nuclear. Comienza entonces la metafase con la
formación del huso mitótico, donde cada microtúbulo se conecta a un cromosoma por el
centrómero para reubicarlo en el plano ecuatorial de la célula. A continuación se inicia la
anafase, etapa en la que las cromátidas hermanas se separan y son dirigidas por la red de
microtúbulos hacia polos opuestos de la célula. De esta forma se divide la carga
cromosómica de los núcleos hermanos (Clayton, 2006). La telofase inicia al completarse la
separación de los cromosomas, se desensambla la red de microtúbulos que constituyen el
huso mitótico, se descondensa la cromatina y comienza a formarse nuevamente la envoltura
nuclear alrededor de cada grupo de cromosomas. Se inicia entonces la división física del
citoplasma o citocinesis (Lodish et al., 2005).

Figura 2. Etapas de la mitosis en una célula vegetal. Fuente: Molist, Pombal y Megías (2008).

En la mayoría de las células vegetales la telofase está acoplada a la citocinesis. La división

celular se logra a través de la formación de una placa celular. Esta acción es facilitada por
un sistema de microtúbulos llamado fragmoplasto el cual dirige el movimiento de vesiculas
formadas en los dictiosomas. Estas vesículas contienen el material peptídico necesario para
la formación de la placa. La unión de las membranas de esas vesículas forman una nueva
membrana contínua que dividirá a la célula madre en dos nuevas células hijas idénticas
(Clayton, 2006).

La división celular es la culminación de una serie de eventos que ocurren desde la última
vez que la célula se ha dividido. El período entre dos divisiones mitóticas define el ciclo de
una célula somática. La división meiótica, por su parte, define el ciclo de las células
sexuales (Lewin, 2004). La Meiosis es un proceso de división nuclear que difiere de la
mitosis en que esta incluye dos secuencias de división, obteniéndose como resultado cuatro
núcleos hermanos genéticamente distintos. Cada uno de estos núcleos tiene la mitad del
número de cromosomas del núcleo parental original. Debido a esto, la meiosis constituye el
proceso de reproducción sexual en los eucariotas. Las etapas de la meiosis se muestran en
la figura 3. Las etapas de Profase I, Metafase I, Anafase I y Telofase I corresponden a la
primera secuencia de división o Meiosis I, la cual es equivalente al proceso de mitosis. Las
etapas restantes (Profase II, Metafase II, Anafase II y Telofase II) corresponden a la
segunda secuencia de división o Meiosis II. En esta etapa los núcleos provenientes de la
Meiosis I presentan entrecruzamiento cromosómico durante la Profase II y luego se
dividen, reduciendo así su carga genética a la mitad y obteniéndose como resultado cuatro
células hijas genéticamente distintas a la célula madre. En las plantas el resultado de la
meiosis es la formación de las esporas en las anteras mediante el mecanismo de
microsporogénesis. Estas esporas producen una generación haploide que, al activarse,
producen gametos por mitosis que se agrupan para formar los granos de polen (Clayton,
2006).

Figura 2. Microsporogenesis en Lilium sp. Fuente: Clayton (2006).

Objetivos:

• Entender los procesos bioquímicos y estructurales implicados en los procesos de división

celular.
• Identificar las diferentes fases de la mitosis en células provenientes de los pimpollos de
Lilium sp.
• Reconocer las diferentes fases de la meiosis en células provenientes de las anteras de
Lilium sp.

Actividades previas que debe realizar el estudiante:

− Estudie las características de las etapas del ciclo celular eucariota que ocurren durante la
interfase.
− Investigue cada uno de los eventos bioquímicos y estructurales que se presentan en cada
una de las fases de los procesos de división celular.
− Diferencie cómo ocurre el proceso de citocinesis en células animales y en células
vegetales.
− Describa y Esquematice el proceso de Microsporogénesis.
Materiales que debe traer el estudiante:

− Pimpollos (los de menor tamaño) de lirio amarillo. Estos deben ser llevados al laboratorio
el día previo a la sesión práctica.

Actividades a realizar durante la sesión práctica:

− Coloque los pimpollos en una placa de cultivo con agua destilada, por 5 minutos, para
eliminar el fijador (Carnoy 3:1). Pasado ese tiempo retire el agua y realice 2 lavados
adicionales.
− Luego de descartar el agua correspondiente al último lavado, añada HCl y déjelo actuar
durante 15 minutos.
− Descarte el ácido clorhídrico y lave utilizando tres cambios de agua destilada por 5
minutos cada uno.
− Coloque una pequeña fracción del pimpollo en una lámina portaobjetos y añádale 1 gota
de ácido acético.
− Coloque la lámina cubreobjetos encima de la preparación y presione hasta disgregar el
tejido completamente (que sólo se vea una capa transparente).
− Levante la lámina cubreobjetos, añada a la preparación 1 gota de orceína y cubra
nuevamente. Evite que queden burbujas de aire en la preparación.
− Luego de 1 minuto, coloque la lámina ente hojas de papel de filtro y presione firmemente
con el dedo pulgar. Tenga mucho cuidado para evitar romper las láminas cubreobjetos.
− Observe la preparación al microscopio e identifique las fases de la división celular.

Bibliografía

9 Lewin, B. 2004. Genes VIII. Pearson Prentice Hall. USA. 843-844 pp.
9 Stansfield, W., Colomé, J. y Cano, R. 2003. Molecular and Cell Biology. McGraw-Hill.
USA. 9-15 pp.
9 Lodish, H., Berk, A., Matsudaira, P., Kaiser, C., Krieger, M., Scott, M., Zipursky, S. y
Darnell, J. 2005. Molecular Cell Biology. 5th ed. W. H. Freeman & Co. USA. 853-858
pp.
9 Alberts, A., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K. y Walter, P. 2006. Molecular
Biology of the Cell. 4th ed. Garland Science. USA. 983-985 pp.
9 Molist, P., Pombal, M. y Megías, M. 2008. Atlas de Histología Animal y Vegetal.
Departamento de Biología Funcional y Ciencias de la Salud.
Facultad de Biología. Universidad de Vigo. España. Disponible en:
http://webs.uvigo.es/mmegias/inicio.html. Fecha de consulta: 16/06/09/.
9 Clayton, M. 2006. Lilium Microsporogenesis. Department of Botany. The University of
Wisconsin. USA. Disponible en: http://botit.botany.wisc.edu/. Fecha de consulta:
16/06/09/.