Información importante sobre Histología

Técnica Histológica - Los fundamentos para su uso correcto durante

el año

Hola, chicos. Soy Mariano Alberti, director del área pregrado del Instituto
CTO Medicina. Quería compartir con ustedes un tema clave que considero
fundamental para manejarse durante los trabajos prácticos de Histología. En
cada clase práctica ustedes deberán reconocer, por medio del uso de un
preparado histológico y un microscopio, cada una de las células y tejidos que
conforman a todos los órganos del cuerpo humano. Por como se lee, suena muy
complicado.

La realidad es que podemos buscar simplificar los conceptos con el fin de poder
comprender tal universo aparentemente infinito. Pues bien. Marquemos los 3
conceptos fundamentales que todo alumno debe tener en cuenta para poder
encarar tranquilo esta materia:

1. Todo se reduce a formas geométricas

2. La técnica de H y E se basa en la unión (o no, ya veremos que

algunas estructuras no se tiñen) de dos colorantes a los componentes
de una célula

3. Las células en el cuerpo cumplen una función especial. Para poder

hacerlo, requieren tener más desarrollada una o varias organelas por
encima del resto. Y este desarrollo hace que se tiña de un color u
otro.(no olvidar que en realidad la coloración final de una célula es
el resultado del predominio de un color sobre otro, es decir, en la
célula hay sustancias basófilas y acidófilas; las que predominen van
a dar la coloración final de dicha célula)

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 1. TODO SE REDUCE A FORMAS GEOMETRICAS
Todas las células, fibras, moléculas tienen una forma geométrica
tridimensional, por ejemplo: cubos, esferas, ovoide, cilindros, etc. Pero tienen
que tener en claro un concepto: La técnica histológica nos muestra imágenes
bidimensionales de estructuras que en la naturaleza son tridimensionales. Es
decir, si yo corto a un cubo lo voy a ver cuadrado; si corto a un cilindro lo veo
redondo (si es un corte transversal) o rectangular (si es longitudinal);
finalmente, si uno corta una esfera, se verá redonda la imagen. Hagan la prueba
mental o dibújenla y verán que estoy en lo cierto. Por eso, si uno aprende a
reconocer los contornos de una estructura y la reconoce como una forma
geométrica, se nos facilita las cosas para poder comenzar a organizarnos. De
todas maneras, tengan en cuenta que existe algo llamado “incidencia de corte”,
por lo que

podemos llegar a ver las estructuras bidimensionales segmentadas, es decir, a

un cuadrado lo puedo llegar a ver por la mitad, a una esfera la puedo ver de
menor tamaño que la realidad, etc, Igual, no se preocupen: eso viene con la
práctica!

2. LA TECNICA DE H Y E USA A LA HEMATOXILINA Y A LA EOSINA

En los preparados de rutina, teñidos con la técnica de hematoxilina-eosina,
podemos observar (desde el punto de vista tintorial) tres tipos de estructuras:
A) Basófilas
B) Acidófilas (eosinófilas)
C) Negativas (Se ven de color blanco por no ser coloreadas con esta técnica)

¿Qué significa que una estructura del preparado sea de color azulado?
Las estructuras basófilas, por definición poseen afinidad por los colorantes
básicos (baso = básico; filo = afinidad). El colorante básico del método de
hematoxilina-eosina es la hematoxilina.

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La hematoxilina es de color azulado - violácea

Por consiguiente, toda estructura de un tejido que sea basófila se teñirá con
hematoxilina, y obviamente se observará de color azulado - violácea.

A su vez, sabemos que las sustancias básicas presentan afinidad por las ácidas,
debido a su composición química.

Por ende, las estructuras basófilas (como el núcleo de la célula) son aquellas
con una composición fundamentalmente ácida.

En resumen: Una estructura de la célula rica en moléculas ácidas (por ejemplo

el núcleo) será basófila, y por esta razón tenderá a unirse con un colorante
básico (hematoxilina) el cual por ser de color azulado - violáceo, dará al núcleo
su color en una imagen de microscopía óptica (siempre y cuando se halla
tratado al tejido con la técnica de hematoxilina y eosina).

¿Qué significa que una estructura del preparado sea de color rosado claro?

Una situación inversa a la recién descripta sucede con la eosina, el cual es el

componente ácido de la técnica de hematoxilina y eosina, y que por esta razón
tiñe las estructuras básicas.

La eosina es de color rojo pálido o rosado. (No confundir con PAS, que si bien
lo describiremos luego, adelantamos que es de color rosado intenso)

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De modo que una célula con estructuras que contienen gran cantidad de
componentes básicos (por ejemplo las proteínas de la mitocondrias) tenderá a
ser teñida por un colorante ácido (eosina), y por tal motivo se observará al
microscopio óptico de color rosado pálido (acidófila)

¿Cómo se interpreta una estructura que no se tiñe?

Puede existir la eventualidad de que un conjunto de células posean citoplasmas
que presenten imágenes negativas, es decir que se vean blancas o
transparentes.

Esto puede significar que no poseen afinidad, ni por la hematoxilina ni por la

eosina, o simplemente, puede significar que la célula ha perdido parte de su
contenido debido a los pasos de la técnica histológica; en esta última
eventualidad, al haberse perdido el contenido, obviamente, ya no queda nada
por teñir.

Este último caso ocurre con los lípidos, los cuales no resisten los pasajes de
alcoholes de la técnica de hematoxilina y eosina; por consiguiente, cuando se
colorea un preparado rico en lípidos, luego de este pasaje de alcoholes, los
mencionados lípidos simplemente han desaparecido.

Los lípidos se pueden teñir con la técnica de Sudan. Esta técnica tiñe a
los lípidos de color negro - parduzco.

¿Toda estructura que no se tiñe se interpreta como rica en lípidos?

No. Las estructuras con alto contenido de glúcidos, como ser glucógeno,
mucoproteínas o proteoglicanos, no poseen afinidad por la hematoxilina ni por
la eosina, y por ende determinan la formación de una imagen negativa con esta
técnica, a pesar de no ser eliminadas por los alcoholes.

Se pueden teñir a las mencionadas estructuras con la técnica de PAS, la cual le

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da un color rosa intenso (más intenso que la eosina).

ATENCIÓN: La técnica histológica ha desarrollado colorantes muy específicos

para observar los detalles más sutiles de los preparados. Las mencionadas
técnicas escapan a los objetivos de este capítulo, que intenta aportar
CONCEPTOS GENERALES que faciliten la metodología de diagnóstico
diferencial.

¿Qué estructuras de la célula son basófilas?

Todas las ricas en moléculas ácidas, por ejemplo:

 Ribosomas (ricos en ÁCIDO ribonucleico)

 Retículo endoplasmático rugoso (rico en ribosomas)

 Núcleo celular (rico en ÁCIDO desoxirribonucleico)

¿Qué estructuras de las células son acidófilas?

Todas las ricas en moléculas básicas
 Mitocondrias

 Proteínas contráctiles (músculo)

 Vesículas de almacenamiento de proteínas de exportación (no todas)

 Proteinas (no todas):

-Intracelulares: citoesqueleto
-Extracelulares: colageno, elastina

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¿Qué estructuras son PAS positivas?

Todas las ricas en glúcidos

 Vacuolas de células caliciformes

 Vesículas de glándulas mucosas

 Glucocálix

 Membrana basal de los epitelios

¿Qué estructuras son sudanófilas?

Todas las ricas en lípidos
 Vaina de mielina de las neuronas

 Gotas de inclusión de colesterol (en células de la corteza suprarrenal por

ejemplo).

 Tejido adiposo que almacena lípidos como una gota de inclusión

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3) LAS CÉLULAS EN EL CUERPO CUMPLEN UNA FUNCIÓN ESPECIAL.
Los organismos pluricelulares como el ser humano han conseguido a lo largo de
la evolución que existan grupos de células que cumplan funciones especiales
distintas al resto. Pero ojo, estas funciones permiten que el ser humano como
un TODO funcione correctamente. Ahora bien, podemos decir que, si bien las
funciones de una célula de un acino seroso y un plasmocito es distinta (una
produce enzimas y la otra produce anticuerpos), ambas coinciden en una cosa.
Ambas producen proteínas. Y toda célula que produce proteínas debe tener una
maquinaria biosintética específica para producirla.

CONCLUSION: Si la célula produce proteínas, siempre tiene que tener el

núcleo de cromatina laxa con nucleolo evidente. La laxitud nos muestra que se
está transcribiendo ARNm para producir una proteína, y el nucleolo nos pone en
evidencia que se están armando ribosomas en esa zona, fundamentales para
poder sintetizar esa proteína.

Fíjense entonces que la célula, si su función es producir proteínas en forma

activa, tiene que tener un núcleo de cromatina laxa con nucleolo evidente, y su
citoplasma debe tener polirribosomas en gran cantidad (si la proteína no se
exporta) o un REG y un Golgi desarrollados (siempre que haya REG desarrollado
hay un golgi importante), por lo que la célula finalmente, según todo lo
antedicho, tiene un citoplasma basófilo.

Y esto es bueno, porque sabiendo cuales son las funciones de las organelas, si a
nosotros nos preguntan como es una célula que produce proteínas de
exportación, rápidamente podremos responder que se trata de una “célula con

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núcleo de cromatina laxa, nucleolo evidente y citoplasma basófilo, donde se
evidencia un REG desarrollado y un Golgi importante”. De todas maneras,
recuerden que existen células como el fibroblasto, que si bien tiene una
actividad biosintética muy importante, con un núcleo de cromatina laxa y
nucleolo evidente, su citoplasma es acidófilo. Por que? Dato interesante para
averiguar. Un desafío interesante es buscar células que produzcan proteínas en
los libros y ver que dice... Eso sí, Lo que diferencia a una célula productora de
proteínas de otra es la forma celular, la ubicación y forma del núcleo y la
proteína que produce. El resto, son iguales.

Y así como podemos hacer grupo de pertenencia de célula productora de

proteínas, podemos formar varios grupos más. Por ejemplo, cómo serían las
siguientes células cuyas funciones son:
1) Producir hormonas esteoroideas
2) Tener actividad macrofágica
3) Ser célula madre
4) Contraerse