БИОЛОГИЯ РАЗВИТИЯ

Том 1 Начала
сравнительной
эмбриологии

А. К. ДОНДУА

' ИЗДАТЕЛЬСКИЙ ДОМ

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО ,
ГОСУДАРСТВЕННОГО
УНИВЕРСИТЕТА
Г1 1J
'
 А. К. Дондуа

БИОЛОГИЯ РАЗВИТИЯ

Том I

Н А Ч А Л А СРАВНИТЕЛЬНОЙ
ЭМ БРИОЛОГИИ

Рекомендовано Ученым советом Санкт-Петербургского

государственного университета в качестве учебника для студентов
университетов, обучающихся по направлению «Биология» и
биологическим специальностям

Издательство С.-Петербургского университета

2005
ББК 28.63
Д67

Рецензенты: докт. биол. наук Л. В. Белоусос (Моек гос. ун-т им. М. В. Ломоносова), докт. биол.
наук С. Г. Васецкий, докт. биол. наук В. И. Миташов (Ин-т биологии развития
им. Н. К. Кольцова, РАН)

Печатается по постановлению
Редакционно-издательского совета
С.-Петербургского государственного университета

Дондуа А . К .
Д67 Биология развития: Учебник. В 2 т. Т. 1: Начала сравнительной эмбрио­
логии. — СПб.: Йзд-во С.-Петерб. ун-та, 2005. — 295 с.
ISBN 5-288-03472-9 (Т. 1),
ISBN 5-288-03474-5
В первом томе учебника рассматриваются вопросы общей и сравнительной эмбриоло­
гии. Дается краткий очерк истории становления современной эмбриологии, рассматрива­
ются проблемы гаметогенеза, оплодотворения, дробления, гаструляции, зародышевых лист­
ков, прямого и личиночного развития, метаморфоза. Излагаются данные по сравнительной
эмбриологии губок, стрекающих, гребневиков, аннелид, моллюсков, круглых червей, чле­
нистоногих, иглокожих, оболочников, бесчерепных, низших и высших позвоночных.
Учебник предназначен для студентов биологических факультетов университетов, пре­
подавателей биологии средней школы и всех интересующихся проблемами эмбриологии.

Б Б К 28.63

© А. К. Дондуа, 2005
ISBN 5-288-03472-9 (Т. 1), © Издательство С.-Петербургского
ISBN 5-288-03474-5 университета, 2005
 ОГЛАВЛЕНИЕ

От автора. . ........... 5
От описательной эмбриологии к биологии развития......... 6

Часть I. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А О С Н О В Н Ы Х Э Т А П О В
И Н Д И В И Д У А Л Ь Н О Г О Р А З В И Т И Я ........................................................... 19
Глава 1. Гаметогенез..........................................................................................................
1.1. Сегрегация линии половых клеток. Первичные половые клетки....... 23
1.2. Гонии . . . . .................................................................... 31
1.3. Мейоз........... ...................................................................... 32
1.4. Оогенез .. ......................................................................................................... 34
1.5. Сперматогез ............................................................................................... 49
Глава 2. Оплодотворение.......................... .............................................................................. 59
Глава 3. Дробление.............................................................................................................. ....... 79
Глава 4. Гаструляция. Зародышевые листки............................. 99
Глава 5. Личиночное развитие. Метаморфоз......................................................................... 104

Часть II. О С Н О В Н Ы Е Т И П Ы Р А З В И Т И Я Ж И В О Т Н Ы Х .................. 113

Глава 6. Губки (Porifera)................................... ................................................ 116
Глава 7. Двуслойные (Diploblastica)............................. .............................................. 125
7.1. Стрекающие (Cnidaria) . . . ......................
7.2. Гребневики (Ctenophora) 132
Глава 8. Билатеральные. Lophotrochozoa........................... 139
8.1. Спиральные (Spiralia)................................................................................................
8.2. Щупальцевые (Lophophorata).............................................. ...................... 153
Глава 9. Билатеральные. Ecdysozoa................... 157
9.1. Круглые черви (Nematoda).....................................................................................
9.2. Членистоногие (Arthropoda)................................................................................. 161
Глава 10. Deuterostomia. Иглокожие (Echinodermata). 185
Глава 11. Deuterostomia. Низшие хордовые............................................................................ 196
11.1. Оболочники (Tunicata).......................................................................................... —
11.2. Головохордовые, или Бесчерепные (Cephalochordata, Acrania)................. 203
Глава 12. Deuterostomia. Низшие позвоночные (Anamnia)................................................ 209
12.1. Круглоротые (Cyclostomata). Минога................................................................ 210

3
 12.2. Амфибии (Amphibia)............... 21]
12.3. Костистые рыбы (Teleostei)...................................... 226
Глава 13. Deuterostomia. Высшие позвоночные (Anamnia) .................. 237
13.1. Рептилии и Птицы (Sauropsida) 238
13.2. Млекопитающие (Mammalia) . 251
Глава 14. Онтогенез и эволюция .. 266
Предметный указатель.................................................................................................................. 278
 От автора

Сложилось абсолютно неоправданное несоответствие между блестящими дости­

жениями науки в области биологии развития и скудостью учебной литературы на
русском языке, призванной дать представление о современном состоянии этой ин­
тенсивно развивающейся отрасли биологии. Достаточно сказать, что для изучения
биологии развития российским студентам рекомендуется трехтомный учебник Скот­
та Гилберта, который был переведен в 1990-х годах с первого издания этой замеча­
тельной книги, выдержавшей к настоящему времени семь переизданий, каждое из
которых вносило существенные изменения и дополнения.
В основу настоящего учебника положен курс лекций по биологии развития, кото­
рый читался автором в течение ряда лет на биолого-почвенном факультете Санкт-
Петербургского университета. С учетом того, что с 2003 года учебным планом
СПбГУ предусмотрено чтение двух курсов— «Основы сравнительной эмбриологии»
и «Биология развития», казалось целесообразным материал нового учебника по био­
логии развития представить в виде двух томов. В первом томе рассматриваются
преимущественно проблемы сравнительной эмбриологии. Во втором томе главное
внимание будет уделено механизмам, лежащим в основе индивидуального развития,
и прежде всего молекулярно-биологическим аспектам управления развитием.
Автор приносит глубокую признательность Т. Ф. Андреевой, JI. В. Белоусову,
С.Г. Васецкому, Е.Р. Гагинской, А. В. Ересковскому, В.И. Ефремову, С. М. Ефре­
мовой, Р. П. Костюченко, Ю . В. Мамкаеву, В. И. Миташову, А. П. Перевозчикову,
Д. Г. Полтевой, О. Г. Строевой за весьма полезное обсуждение содержания, за кри­
тические замечания и пожелания, которые автор постарался учесть при подготовке
рукописи к печати. Естественно, найти согласие по всем затронутым в книге вопро­
сам невозможно. Автор отдает себе отчет в том, что его точка зрения иногда может
показаться субъективной. Можно лишь надеяться на то, что в недалеком будущем
появятся новые книги, авторы которых раскроют свое видение непростых и живо­
трепещущих проблем биологии развития. Автор будет признателен всем и в первую
очередь студентам, которым эта книга предназначается, за критические замечания
по ее содержанию и оформлению.

5
 ОТ ОПИСАТЕЛЬНОЙ ЭМ БРИ ОЛОГИ И
К Б И О Л О ГИ И Р А З В И Т И Я

Эмбриология, если формально следовать за термином, это наука о зародышах и

зародышевом развитии. Действительно, греческое слово эмбрион (ejippucov) означа­
ет нечто растущее внутри оболочек, чрева и т. п. Однако эмбриология никогда не
ограничивала себя столь узкими рамками. Реальное ее содержание состоит в изу­
чении морфогенетических процессов на разных этапах индивидуального развития
независимо от того, является ли это развитие следствием полового или бесполого
размножения. Существенным разделом эмбриологических исследований всегда бы­
ли морфогенетические процессы, происходящие и в ходе регенерации органов жи­
вотных. Можно сказать, что основная задача современной эмбриологии состоит в
изучении механизмов морфогенеза и их эволюции.
Специфика биологии развития состоит в том, что она рассматривает формообра­
зовательные процессы в четырех измерениях: не только в пространстве, но и во вре­
мени. Важно при этом иметь в виду, что эмбриология имеет дело главным образом
с ациклическими, неповторяющимися явлениями, так что процесс индивидуального
развития представлен последовательным радом этапов или стадий. Каждая стадия
отличается своими специфическими функциями и создает предпосылки для следу­
ющих этапов развития. Половому размножению животных предшествует период,
в течение которого происходит гаметогенез, т. е. образование специализированных
мужских и женских половых клеток. Роль женских половых клеток в предопреде­
лении свойств зародыша столь велика, что формирование женских гамет иногда на­
зывают проэмбрионалъным развитием. Эмбриональное развитие начинается после
оплодотворения, которое создает предпосылки для образования многоклеточного
зародыша. Возникающая в ходе дробления яйца многоклеточность создает предпо­
сылки для дифференциации клеток. По завершении дробления клетки зародыша
приобретают способность к двигательной активности. Благодаря этому становят­
ся возможными разнообразные морфогенетические движения клеток и клеточных
пластов. Морфогенетические процессы, в ходе которых формируются зачатки заро­
дыша, скоординированы в пространстве и во времени с процессами пролиферации
и дифференциации клеток.
Индивидуальное развитие возможно лишь благодаря координации элементарных
процессов, лежащих в основе онтогенеза, а именно благодаря интеграции клеточно­
го размножения, клеточной дифференциации и морфогенетических движений. Пе­
ред современной эмбриологией стоит колоссальной сложности задача — не только
изучить механизмы, лежащие в основе элементарных составляющих процесса инди­

6
видуального развития, но и выяснить закономерности их соподчинения в условиях
динамической смены частных программ развития, действующих на разных этапах
онтогенеза.
Отличительной особенностью современной эмбриологии является ее интегратив­
ный характер. Понимание закономерностей развития организма может быть достиг­
нуто только при синтезе морфологических, молекулярно-биологичеких, генетиче­
ских и эволюционных подходов. Интегративный характер современной эмбриологии
подчеркивается ее новым наименованием. Эмбриология наших дней это не просто
наука о развитии, это биология развития. Новое название подчеркивает вместе с
тем, что в круг интересов этой новой отрасли биологии входят все явления, связан­
ные с развитием формы и функции. Если эмбриология родилась как особая дис­
циплина в результате ветвления единого ствола зоологической науки, то биология
развития как наука о движущих силах развития возникла благодаря интеграции
подходов всех отраслей биологии, изучающих живую материю на разных уровнях
ее организации.
Современная биология развития ведет интенсивные исследования молекуляр­
ных, биохимических и генетических механизмов различных формообразовательных
процессов, активно изучает особенности субклеточной и клеточной организации за­
родышей. Естественно, что не утратили своего значения гистологические и анатоми­
ческие исследования. Безусловную актуальность сохраняют исследования эволюции
онтогенеза и прежде всего исследования эволюции механизмов онтогенеза. Это но­
вое направление — эволюционная биология развития — в англоязычной литературе
получило сокращенное наименование «Evo-Devo».
Нетрудно заметить, что онтогенез имеет выраженное внутреннее противоречие.
Действительно, он отличается (во всяком случае, на ранних этапах) высокой сте­
пенью динамизма, постоянной сменой одних состояний другими. Однако при рас­
смотрении развития животных в ряду поколений обнаруживается высокая консер­
вативность организации индивидуального развития особи данного вида, благодаря
которой и возможна преемственность поколений. Отсюда следует, что должен суще­
ствовать некий механизм, который обеспечивает в ряду поколений передачу способ­
ности к развитию идентично организованных во времени и пространстве структур.
Любая теория, претендующая на объяснение индивидуального развития, должна
найти решение этой проблемы. История эмбриологии на протяжении последних трех
столетий в теоретическом плане, по существу, является историей соотношения двух
основных идей, претендовавших на объяснение природы консерватизма и развития
в эмбриогенезе.
Преформизм и эпигенез, В XVII- XVIII вв. сложилось убеждение, что в поло­
вых клетках животных уже имеются предобразованные, преформированные, струк­
туры. Сущность формирования зародыша состоит, согласно этим взглядам, в уве­
личении размеров и в уплотнении изначально имеющихся структур. Преформисты
полагали, что органы будущего индивидуума предобразованы (буквально — пред­
начертаны; теория пределинеацин, от лат. ргае — впереди; linea — линия, черта) в
миниаиоре либо в яйце, либо в сперматозоиде. Сторонники первой точки зрения —
овисты обосновывали свои взгляды известными в то время фактами партеногене­
за, девственного развития без осеменения (Бонне, 1740); сторонники второй — ани­
малькулисты находили подтверждение своим взглядам в структуре спермия. На­
блюдения над биологией размножения вольвокса, тлей и других организмов, с одной

7
стороны, и логика преформизма, с другой, явились основанием теории вложений,
согласно которой в половых клетках прародительской формы должны быть струк­
турно оформлены все последующие генерации животного. Теория вложений была
прекрасным, хотя и абсурдным, с современной точки зрения, объяснением единства
развития и наследуемости.
Период расцвета преформистских идей закончился в результате накопления фак­
тов, которые не укладывались в рамки этой теории. Главными источниками этих
противоречащих преформизму данных были тератология, генетика и эмбриология.
Так, основатель экспериментальной тератологии Сент-Иллер и его последователи
убедились в том, что при определенных воздействиях на развивающийся организм
структура возникающих органов существенно отличается от «предначертанных».
Образующиеся при скрещивании промежуточные формы, несущие и материнские
и отцовские признаки, будь то метисы или гибридные формы табака (Кельрейтер,
1766), также не могли найти объяснения в рамках наивного преформизма.
Наконец, данные эмбриологии, свидетельствующие о разной скорости развития
различных систем органов или об изменениях положения органа в ходе индиви­
дуального развития, делали все более привлекательной идею эпигенеза, согласно
которой структуры р .редобразованы, а возникают заново.
Надо заметить, что первая формулировка эпигенетической теории развития при­
надлежит великому Аристотелю, жившему в IV веке до нашей эры. Аристотель,
который по праву может считаться первым эмбриологом и которому принадлежит
первое научное описание развития куриного зародыша, полагал, что форму развива­
ющегося зародыша создает особая сила - - энтелехия, присущая мужскому семени,
тогда как материалом, подвергающимся действию энтелехии, служит кровь (у чело­
века - менструальная кровь). Для всех эпигенетических теорий (термин «эпигенез»
был предложен Вильямом Гарвеем в XVII столетии) вопрос о загадочной «движу'-
щей силе» эмбрионального развития представлял наибольший интерес.
В основополагающем труде, посвященном развитию
куриного эмбриона, Каспар Фридрих Вольф (1734-1794)
(рис. 1), впоследствии член Петербургской академии, в
1759 году на основании тщательного описания анатоми­
ческих изменений зародыша строго доказал, что кишеч­
ная и нервная трубки возникают путем сворачивания
или выпячивания клеточных пластов с последуюхцим их
обособлением. Эти прямые наблюдения не оставляли и
тени сомнения в иллюзорности идей преформизма: в ин­
дивидуальном развитии организма происходит реальное
формообразование. Что касается механизма этого фор­
мообразования, то, подобно Аристотелю, Вольф зашиф­
ровывает его в термине vis essentialis — «существенная
сила».
Рис. 1. Каспар Фридрих Аналогичная идея развивалась современником Воль-
Вольф (1734-1794). ф а Иоганном Влюменбахом (1742-1840), который объ­
яснял морфогенетические процессы, наблюдаемые при
регенерации гидры, действием «формообразовательного импульса» — Bildungstrieb,
или nisus formativus. Согласно Блюменбаху, эпигенез направляется преформиро-
ванной в половых клетках «силой развития», которая может рассматриваться как
некая инструкция, предопределяющая морфогенез зародыша. Если это так, то ключ
к пониманию явления развития состоит в раскрытии природы этих «инструкций».
Нетрудно заметить, что такого рода идеи, высказанные во второй половине XVIII
столетия, являются своего рода логическим предвосхищением современных пред­
ставлений о механизмах индивидуального развития.
История эмбриологии, в известном смысле, это история поисков объяснения
сочетания консервативного начала индивидуального развития, которое проявля­
ется в постоянстве типа развития, и эпигенеза — развития разнообразных струк­
тур из недифференцированного яйца. В течение ряда столетий, на протяжении
которых идет этот поиск, высказано немало интересных идей и теорий. Согласно
JI. В. Белоусову (1987), все их многообразие подразделяется на несколько групп. Бе­
лоусов выделяет пять ведущих идей, или принципов, лежащих в основе объяснения
причин развития, а именно целевой, или финалистический, типологический, исто­
рический, каузально-аналитический и, наконец, синергетический.
Финалистический принцип. В соответствии с финалистическим принципом
(Аристотель, 384-322 до н.э.) процесс развития определяется целью финалом, к
которому он направлен: зачаток органа закладывается потому, что данный орган
обязательно должен быть у взрослой особи. Этот принцип объяснений из небиоло­
гического естествознания изгнан как ненаучный еще в XVII веке (Фрэнсис Бэкон,
1561-1626). В эмбриологии же он в определенной мере сохраняет свои позиции, под­
черкивая предопределенность индивидуального развития.
Типологический принцип. Этот принцип объясняет то или иное направле­
ние развития и н д и в и д у у м о в особенностями типа животных, к которому они отно­
сятся. Основываясь на этом принципе, можно предсказать некоторые особенности
эмбриогенеза исследуемого объекта. Например, фундаментальной чертой развития
позвоночных является закладка жаберных щелей. Можно смело предсказать, что у
зародыша птицы, эмбрионы которой никогда не описывались, жаберные щели обя­
зательно появятся на строго определенной стадии развития.
Разрабатывая проблему организации онтогенеза,
Карл фон Бэр (1792-1876) (рис. 2), прародитель совре­
менной эмбриологии, установил, что каждый морфоло­
гический тип животных (по Кювье, четыре типа: По­
звоночные, Членистые, Мягкотелые и Лучистые) име­
ет свой особый план развития. При этом Бэр сформу­
лировал закон эмбриональной дивергенции, согласно ко­
торому общее для данного типа образуется в эмбриоге­
незе раньше, чем специальное. Сначала закладываются
признаки, характерные для всех без исключения пред­
ставителей данного типа, затем более частные и лишь
в последнюю очередь специальные. Обнаруженный Бэ­
ром принцип развития от общего к частному сохраняет
в полной мере свое значение и в наше время. Им же по­
стулирован и закон зародышевого сходства, согласно ко- Рис- КаРл Максимович
й , Бэр (1792 1876).
торому эмбрионы высшей формы данного типа никогда v
не походят на другую форму взрослого животного, но только на ее зародыш.
Исторический принцип. Важное место (и по затратам труда, и по достигну­
тым результатам) в объяснении движущих сил онтогенеза занимает исторический

9
 принцип, который был сформулирован прежде всего
в трудах Чарльза Дарвина (1809-1882), Фрица Мюл­
лера (1821-1897) и Эрнста Геккеля (1834 1919). Сущ­
ность этого принципа состоит в том, что ход онтоге­
неза, последовательность его стадий определяется ис­
торией происхождения вида, особенностями его эволю­
ции. С этой точки зрения эмбриональная дивергенция,
отмеченная Бэром, отражает’ дивергенцию соответству­
ющих видов в ходе эволюции, а общность зародышей
разных видов обусловлена общностью происхождения
этих видов. Зародыши рассматриваются как «потуск­
невший портрет» прародителя, так что па основании
данных о строении зародыша можно судить о пред-
„ „ Л ,
ги с. 3. Александр Онуфриевич
ках данного
^
животного. Примером такого родах ^
«ре-
х
Ковалевский (1840-1901). ставрации» могут служить исследования эмбриологии
асциднй, выполненные А. О. Ковалевским (1866, 1871)
(рис. 3), которые показали существование хорды у личинки асцидий, что позволило
установить истинное положение асцидий в системе.
Одним из редких примеров довольно полной рекапитуляции филогенеза может
служить исследованное Ф. Мюллером развитие пальмового вора Birgus latro, веду­
щего наземный образ жизни ракообразного, близкого к ракам-отшельникам. Эм­
бриональное и личиночное развитие этого животного происходит в морской среде.
После выхода из яйцевых оболочек свободноплавающей личинки зоэа и прохожде­
ния нескольких линек формируются молодые рачки с мягким изогнутым брюшком,
которое они подобно ракам-отшельникам прячут в раковину моллюска. Следующий
этап развития связан с выходом на сушу и соответствует филогенетической стадии
наземных раков-отшельников. На де­
финитивной стадии подгибание брюш­
ка исчезает, и индивидуум приобрета­
ет свойства и черты пальмового вора.
Таким образом, как полагают, онтоге­
нез этих животных очень полно повто­
ряет (рекапитулирует) филогенез дан­
ного вида, причем рекапитулируют не
только морфологические особенности
предковых форм, но и их инстинкты,
характер питания и др.
В 1866 г. Эрнст Геккель (рис. 4)
сформулировал бгюгенетический за­
кон, согласно которому онтогенез есть
краткое повторение филогенеза.. По
мнению Э. Геккеля, филогенез — это
«механическая причина» онтогенеза.
Отдавая должное плодотворности ис­
торического метода изучения эмбрио­
генеза, нельзя не заметить, что по­
Рис. 4. Эрнст Геккель (1834-1919). следнее утверждение абсолютизирует

10
роль исторического фактора и, по существу, отвергает причинный (каузальный)
анализ реальных механизмов онтогенеза. Для современного исследователя очевид­
на ограниченност ь «закона» Геккеля. Ясно, что онтогенез в принципе не может быть
кратким повторением филогенеза, так как сущность филогенеза состоит в форми­
ровании все новых и новых генотипов, правомочность существования которых опре­
деляется естественным отбором, тогда как онтогенез— это всего лишь реализация
потенций существующего генотипа.
К утверждению о том, что онтогенез — это краткое повторение филогенеза, мож­
но относиться лишь как к метафоре. Этот тезис идеализирует ситуацию, даже ес­
ли онтогенез рассматривать с сугубо морфологической точки зрения. Действитель­
но, обычно речь идет о рекапитуляции не всего онтогенеза, а лишь каких-либо от­
дельных признаков. Начиная с Э. Геккеля, различают налингенетические (от греч.
itaXiv - снова, опять; yeveaic; — творение, происхождение) и ценогенетические (от
греч. xaivoc — новый) признаки (структуры). К первым относятся структуры, обра­
зование которых рекапитулирует органы предковых форм (например, хорда, жабер­
ные щели у позвоночных), ко вторым — новоприобретенные структуры и признаки,
дающие зародышу возможность приспособиться к условиям среды, в которой про­
исходит развитие данного вида,— амнион, желточный мешок, аллантоис и др.
Сфера применения биогенетического закона для восстановления филогенетиче­
ских отношений ограничивается также различного рода гетерохрониями — измене­
ниями в ходе эволюции времени закладки органов. При этом различают задержку,
или ретардацию (от лат. retardatio — замедление) и ускорение, или акселерацию (от
лат. acccleratio — ускорение) закладки и развития органов. Аналогичное действие
оказывают и гетеротопии, т. е. изменения области тела., в которой происходит за­
кладка. органа у данного вида сравнительно с предковой формой. Парадокс состоит
в том, что эти «затемняющие» биогенетический закон явления и составляют зна­
чительную часть эволюционных преобразований, лежащих в основе филогении жи­
вотных.
Исследования, опирающиеся на исторический принцип анализа движущих сил
онтогенеза, сыграли важную роль в развитии современной эмбриологии. Они дали
целый ряд крупных для своего времени теоретических обобщений, таких как теория
зародышевых листков, теория происхождения многоклеточности у животных, тео­
рия филэмбриогепезов (подробнее см. гл. 14) и др., ко­
торые в известной мере сохранили свою актуальность
до наших дней, хотя и нуждаются в критическом пе­
реосмыслении с учетом современных данных биологии
развития.
Неоценимая роль идей эволюционизма состояла и в
том, что они дали мощный стимул дальнейшему разви­
тию описательной эмбриологии. Именно во второй по­
ловине XIX столетия описательная эмбриология откры­
ла поразительное разнообразие форм эмбрионального
развития и создала материальную основу эмбриологии
как науки. В развитии сравнительной и эволюционной
эмбриологии выдающуюся роль сыграли многие рос­
сийские исследователи, такие как А. О. Ковалевский, Рис 5 Шья Ильич Мечников
И. И. Мечников (рис. 5), К. Н. Давыдов, А. Н. Северцов, (1845-1901).

11
 П. П. Иванов (рис. 6) и др. Описательная, или сравни­
тельная эмбриология в полной мере сохраняет свое зна­
чение и в наши дни. Современная описательная эмбрио­
логия располагает мощным и разнообразным арсена­
лом микроскопической техники, включая методы уль-
траструктурного анализа.
Важным направлением описательной эмбриологии,
отчасти роднящим ее с экспериментальной эмбриоло­
гией, были исследования, ставившие своей целью про­
следить движения клеток и клеточных пластов эмбри­
она. Используя методы витального окрашивания или
иные способы мечения зачатков, исследователи полу­
чили возможность следить за судьбой этих зачатков, за
Рис. 6. Петр Павлович
перемещениями клеток по зародышу, существенно обо­
Иванов (1878-1942) — гатив таким образом арсенал методов описания разви­
основатель Петербургской тия. В. Фогт и его школа, впервые использовавшие ме­
школы сравнительной и тод маркирования клеток в 1930-х годах, создали карты
эволюционной эмбриологии.
презумптивных (от лат. praesumptio — предположение)
зачатков зародышей амфибий, проследив, какие органы возникают из тех или иных
областей бластулы. Метод маркирования с использованием радиоактивных меток
или флуоресцентных красителей широко используется и в современной эмбриоло­
гии. Вершин своего развития этот метод достиг при использовании генетическо­
го маркирования, которое предполагает трансплантацию зачатков, клетки которых
легко обнаруживаются благодаря своей генетической природе и особому антигенно­
му составу.
При всей важности и плодотворности исторического принципа нельзя не заме­
тить, что при таком подходе поиск движущих сил эмбриогенеза в лучшем случае
выносится за пределы развивающегося индивидуума, в филогенез. Внутренние при­
чины и реальные механизмы контроля над клеточной репродукцией, дифференци­
ацией и морфогенезом остаются вне внимания исследователей. Уязвимость этого
подхода состоит и в том, что исследователи, сосредотачиваясь на анализе морфо­
логии, пытаются найти ключ к пониманию развития структур без учета истории
становления и преобразования молекулярных и генетических механизмов этого раз­
вития. И если этот разрыв между структурой и механизмом ее развития объективно
существовал во второй половине XIX столетия, когда биология клетки и генетика
находились в зачаточном состоянии, то в наше время очевидно, что эволюцию инди­
видуального развития можно понять только при условии ясного представления об
эволюции его молекулярно-генетических механизмов. Современная эволюционная
эмбриология переживает естественный кризис, который, несомненно, будет преодо­
леваться по мере становления эволюционной биологии развития.
Каузально-аналитический принцип. Открывшаяся, как полагали во второй
половине XIX столетия, возможность воссоздания эволюционного древа Metazoa
на основе биогенетического закона, явилась мощным стимулом для сравнительно­
эмбриологических исследований. Благодаря этому был накоплен огромный факти­
ческий материал, в том числе и характеризующий особенности раннего эмбриоге­
неза. Эти данные заложили основу для понимания роли ядра и цитоплазмы в про­
цессах индивидуального развития и в жизни клетки вообще. Именно изучение про­

12
цессов гаметогенеза, оплодотворения и дробления у разных животных во многом
способствовало формированию представлений о хромосомах и ядре как носителях
наследственных свойств.
Первое описание кариокинеза было сделано немец­
ким зоологом Антоном Шнейдером в 1873 году при ис­
следовании дробления у некоторых плоских червей. В
1874 году Отто Бючли описал веретено деления дробя­
щихся яиц круглых червей и моллюсков. В 1882 году
вышел в свет классический труд Вальтера Флемминга
(1843-1905), в котором дается близкое нашим современ­
ным представлениям описание клеточных делений. Ис­
следование бельгийского биолога Эдуарда ван-Бен . дена
(1845-1910) дробления у лошадиной аскариды позволи­
ло ему сделать заключение о постоянстве числа и фор­
мы хромосом. В 1875 году Оскар Гертвиг (1849-1922)
(рис. 7) установил, что сущность оплодотворения состо­
ит в слиянии клеточных ядер сперматозоида и ооцита.
Рис. 7. Оскар Гертвиг
Именно в эти годы была открыта, редукция числа хро­ (1849-1922).
мосом при гаметогенезе и восстановление диплоидности
при оплодотворении. Все более убедительным становилось представление о ядре как
носителе наследственных свойств (Гертвиг, 1884). К концу столетия стало очевид­
ным, что «удивительная формативная энергия зародыша не поступает в него извне,
но является врожденным свойством яйца, унаследованным от родителей» (Эдмунд
Вильсон, 1856-1939).
Поскольку начинающий свое развитие организм представлен одной клеткой,
естественны попытки эмбриологов конца XIX столетия выяснить, какую роль в про­
цессах индивидуального развития играют основные элементы клетки — цитоплазма
и ядро. Среди исследователей, пытавшихся при построении теории развития опе­
реться на процессы, происходящие в самом зародыше, заметное место занимает
Вильгельм Гис (1831-1904). Гис был активным противником представлений Геккеля
о значении истории вида для эмбриогенеза. Он считал, что эволюционная теория
не только ничего не дает для понимания проблемы развития зародыша, но просто
запутывает ее. Гис сформулировал принцип органообразующих областей зародыша,
каждая из которых связана с развитием определенных органов индивидуума. Он
отвергал преформистские идеи прелокализации структур или специфического стро­
ительного материала, но тем не менее полагал, что цитоплазма, яйца имеет некую
пространственную организацию. Представление Гиса о зиготе как о специализи­
рованной клетке с особым распределением материальных субстанций, важных для
детерминации судьбы зачатков зародыша, легли в основу последующих исследова­
ний, которые действительно выявили в яйце особые цитоплазматические факторы
формообразования (подробнее см. гл. 3).
Важную роль в становлении эмбриологии как науки сыграла, теория зародыш,е-
вой плазмы Августа. Вейсмана (1834-1914) (рис. 8 ). Эта теория была., по существу,
первой научной попыткой объединить явления индивидуального развития и наслед­
ственности. Согласно этой теории (1883), хромосомы содержат особую плазму, или
идиоплазму (от греч. i6io c— особый), которая представляет собой совокупность на­
следственных факторов. Эти факторы, или ядерные детерминанты дискретны. Они

13
 контролируют выработку разных веществ, определя­
ющих свойства цитоплазмы. При дроблении яйца и
расхождении хромосом ядерные детерминанты рас­
пределяются неравномерно между дочерними клетка­
ми. Поскольку их воспроизведение, по Вейсману, не
является обязательным, клетки дробящегося зароды­
ша получают разные детерминанты, вследствие чего
происходит их дифференциация (рис. 9). Идея о кле­
точной дифференциации как следствии неравномер­
ного распределения ядерных детерминант диктовала
необходимость раннего обособления линии половых
клеток («зародышевый путь»), которые для поддер­
жания преемственности поколений должны сохранять
полный набор детерминант данного вида животного.
fu c . 8. Август ьеисман
(1834-1914).
Из теории Вейсмана вытекали два важных следствия.
Фотография любезно предо­ Одно из них состояло в признании принципиальной
ставлена проф. К. Зандером. невозможности наследования признаков, приобретен­
ных соматическими клетками, другое — в утвержде­
нии, что зародыш животного уже на ранних стадиях своего развития представляет
собой мозаику клеток с различными наследственными факторами. Как известно в
настоящее время, централь­
ный постулат теории Вей­
Линия
смана о неравнонаследствен­
половых ных делениях не соответству­
клеток ет действительности Вме­
сте с тем идея о генети­
ческом «неравенстве» диф­
ференцирующихся клеток са­
ма по себе оказалась плодо­
творной и привела в итоге
к открытию функциональной
Линия регуляции активности генов
соматических
клеток как предпосылки детермина­
ции и дифференциации кле­
ток. Следует заметить, что
А.
титезы своей теории допус­
кал и принципиально иную
Рис. 9. Схема, иллюстрирующая идею А. Вейсмана о
неравнонаследственном делении как основе процессов возможность, а именно, что
дифференциации: в линии половых клеток сохраняются все эмбриональная дифференци­
наследственные факторы, в линиях соматических клеток ация может быть обусловле­
происходит их дифференциальное распределение. на межклеточными взаимо­
действиями, что впоследствии привело к открытию явления эмбриональной ин­
дукции.
Наряду с теоретической разработкой проблемы факторов индивидуального раз­
вития 1880-е годы ознаменовались возникновением новой отрасли — эксперимен­
тальной эмбриологии. Основоположником этого направления по праву считается

14
Вильгельм Ру (1850-1924) (рис. 10) Ру дал концеп­
туальное обоснование необходимости создания меха­
ники развития как науки о движущих силах ин­
дивидуального развития, основанной на каузалыю-
аналитическом подходе к исследованию онтогенеза.
Предметом каузально-аналитического направления, с о ­
средоточенного на изучении «непосредственных» при­
чин развития, стало осмысление роли в процессах диф­
ференциации физических и химических факторов, яд­
ра и цитоплазмы, взаимодействий между клетками и
зачатками зародыша. Для этого направления характер­
но стремление разложит! сложные процессы развития
на элементарные события и выяснить причинную связь
между ними. В таких исследованиях широко использу­
ется воздействие на зародыш — общее или локальное-- рис ю Вильгельм Ру
различными химическими и физическими факторами с (1850-1924).
целью усилить или подавить какие-то события и таким образом установить их зна­
чение в эмбриогенезе. Экспериментальная эмбриология, исповедующая каузально­
аналитический принцип j широко использует разного рода преднамеренные наруше­
ния естественных святей между' клерками и зачатками органов методами микрохи­
рургии. В частности, применяются всевозможные трансплантации, или пересадки
за .атков в несвойственные им, или эктопические области тела. Различают гомо- и
гетеротрансплантации в зависимости от того, пересаживается зачаток реципиенту
того же вида, что и донор, или же реципиенту другого вида. При прослеживании
с у д ь б ы изолированного зачатка часто используют методы эксплантации in vitro.
Удаление, или экстирпация зачатка применяется в тех случаях, когда исследуется
значение этого зачатка для нормального морфогенеза.
Для понимания роли межклеточных взаимодействий широко используется дис­
социация зародыша или его органов на клетки и, наоборот, агрегация клеток разных
типов в единую систему. Наряду с экстирпацией применяется локальное уничтоже­
ние клеток путем облучения рентгеновскими, ультрафиолетовыми или лазерными
лучами, а также специфическое «выключение» функций с помощью разного ро­
да ингибиторов. На современном этапе развития экспериментальная эмбриология
сохраняет свою принципиальную установку на раскрытие причинно-следственных
отношений между' различными событиями, наблюдаемыми в индивидуальном раз­
витии. В ее арсенале появились не только модификации старых аналитических при­
емов с более высокой степенью разрешения, но и методики, позволяющие экспери­
ментатору вмешиваться непосредственно в транскрипционную активность генома,
контролировать и регулировать ее.
Исследования изменений потенций клеток в раннем развитии, открывшие путь
к пониманию механизма клеточной дифференциации, на долгое время стали одной
из центральных задач эмбриологии. Представление о мозаичном характере дробле­
ния, которое предполагалось Гисом и постулировалось теорией Вейсмана, вытека­
ло также из опытов Вильгельма Ру. Ру установил, что плоскость первого деления
дробления у лягушки обычно соответствует медиальной плоскости, которая делит
зародыш на две симметричные - левую и правую - части. Прижигая один из двух
бластомеров раскаленной иглой, Ру обнаружил, что из неповрежденного бластоме­

15
ра, сохранявшего контакт с убитым, развивалась половинная нейрула. Из этих опы­
тов он сделал вывод, что зародыш лягушки представляет собой мозаику способных
к автономной дифференциации частей, поскольку уже на стадии двух бластомеров
каждая клетка снабжена специфическими неидентичными детерминантами.
Уверенность в правильности или, по крайней ме­
ре, в универсальности мозаичной теории Вейсмана — Ру
была поколеблена экспериментами Ганса Дриша (1867
1941) (рис. 11), который изолировал бластомеры дро­
бящегося яйца морского ежа или, сдавливая дробяще­
еся яйцо, добивался смещения бластомеров в несвой­
ственное им положение. Дриш показал, что изолирован­
ные бластомеры способны к формированию нормаль­
ных животных. После изоляции бластомеров на ста­
дии двух или четырех клеток формировались личин­
ки, которые отличались от нормальных животных лишь
меньшими размерами. Способность к эмбриональной
регуляции, т. е. к восстановлению нормального хода раз­
вития, была обнаружена и в опытах по изменению по­
Рис. 11. Ганс Дриш ложения бластомеров дробящегося зародыша. Из экс­
(1867-1941). периментов Дриша следовало, что развитие зародыша
Фотография любезно морского ежа, по крайней мере, на стадии раннего дроб­
предоставлена
проф. К. Зандером.
ления, не носит мозаичного характера, что первые де­
ления дробления равнонаследственны, а образующиеся
бластомеры имеют одинаковые потенции, т. е. эквипотенциальны. Проспективная
потенция части организма оказалась более широкой, чем ее реальная судьба, кото­
рая находится в зависимости от положения клетки или зачатка в целостной системе
и, возможно, обусловлена какими-то взаимодействиями с окружающими клетками
или зачатками. Эксперименты Дриша поставили сложные вопросы перед эмбрио­
логией, показав, что не все проблемы развития решаются в рамках однозначного
детерминизма (Белоусов, 1987). Данные о том, что бластомеры яйца могут быть
одновременно и частью целого и целым привели Дриша к витализму, к призна­
нию некоей идеальной силы — энтелехии, которая является носителем идеи целого
и предопределяет целостность развивающегося организма независимо от того, раз­
вивается он из яйца или из его части. Историческое значение экспериментов Дриша
несомненно. Они открыли принципиально новое явление и сыграли существенную
роль в становлении современной биологии развития. Вместе с тем нельзя и абсолю­
тизировать регулятивность, считая ее имманентным свойством зародыша. У некото­
рых животных способность к регуляции проявляется на ранних стадиях развития,
но затем исчезает; у других она отсутствует изначально, у третьих может появиться
на относительно поздних стадиях онтогенеза.
Самые крупные достижения каузально-аналитической эмбриологии в первой по­
ловине X X столетия связаны с открытием явления эмбриональной индукции. Ганс
Шпеман (1869-1941) (рис. 12), его ученики и последователи показали, что диффе
ренциация тканей и зачатков многих органов зародышей амфибий и других позво­
ночных животных имеет зависимый характер и возможна только при взаимодей­
ствии этих зачатков. В процессе индукции способная к восприятию индуцирующего
сигнала компетентная ткань детерминируется под действием этого сигнала в стро­

16
го определенном направлении. Развитие предстало в
виде последовательного ряда индуктивных взаимодей­
ствий, в цепи которых завершение одного индуктивного
события открывает возможности для реализации после­
дующего. В результате этих исследований стало ясно,
что представление о мозаичной автономной дифферен­
циации как единственном или, по крайней мере, глав­
ном способе определения судьбы частей развивающего­
ся зародыша не соответствует действительности.
Открытие взаимодействующих систем как факто­
ра дифференциации поставило вопрос о природе сиг­
налов, с помощью которых осуществляется это взаи­
модействие, а также о механизмах, генерирующих эти
сигналы в нужное время и в нужном месте. Реальный
Прогресс В ЭТОЙ Области намеТИЛСЯ ЛИШЬ ВО ВТОРОЙ ПО- рш: 12. Ганс Шпеман
ловине XX столетия, когда благодаря молекулярной ге- (1869-1941).
нетике было доказано, что управление всеми жизненными проявлениями клетки,
ее метаболизмом и спецификацией ее функциональных белков связано с генами,
которые ранее рассматривались лишь как факторы наследственности. Стало оче­
видно, что решение проблемы межклеточных взаимодействий в раннем эмбриогене­
зе лежит в плоскости раскрытия механизмов, с помощью которых осуществляется
пространственно-временная регуляция активности генов
В тридцатые годы X X столетия выдающийся эм­
бриолог и генетик Томас Морган (1866-1945) (рис. 13)
предложил концепцию, согласно которой в основе диф­
ференциации зародыша лежит последовательное вклю­
чение цепи генов: активность более ранних генов пред­
определяет активность последующих. В конечном сче­
те последовательное включение все новых и новых ге­
нов приводит к возникновению разнообразных призна­
ков. Эта идея долгое время не воспринималась серьез­
но экспериментальной эмбриологией, как слишком аб­
страктная и далекая от реальных событий, происходя­
щих в период эмбрионального развития. Открытие в се­
редине X X столетия ДНК, се роли в хранении и пере­
даче наследственной информации и, что особенно важ­
но, в управлении биологической активностью клетки в j 3 Томас Морган
корне изменило ситуацию. Хотя у некоторых животных (1866-1945)
в раннем онтогенезе дифференциация и может быть связана с необратимыми изме­
нениями генома, в настоящее время общепризнанным является утверждение, что
генеральный путь дифференциации зародыша обеспечивается дифференциальной
экспрессией генов.
В предлагаемой книге мы постараемся показать, что морфологическое разнооб­
разие животных формируется в процессе индивидуального развития. Мы постара­
емся также показать, что развитие животных во всех его проявлениях контролиру­
ется генетическими программами. Но если мы докажем, что морфология животного
возникает в процессе развития, а процесс развития контролируется генетическими

17
программами, то мы придем к неизбежному и существенному заключению, что эво­
люция морфологии животных происходит на основе эволюгщи этих генетических
программ.

Литература
М узрукова Е. Б. Развитие цитоэмбриологических исследований в конце XIX - нача­
ле X X столетий / / Т. X. Морган и генетика: научная программа школы Т. X. Моргана в
контексте развития биологии XX столетия. М., 2002. С. 15-61.
М узрукова Е. Б. Т. X. Морган и эмбриология / / Там же. С. 62-85.
Некрасов А . Д ., А рт ем ов Н. М. Александр Онуфриевич Ковалевский / / А. О. Ковалев­
ский. Избранные работы. М., 1951. С. 536-621.
Райков Б. Е. О жизни и научной деятельности К. М. Бэра / / К. М. Бэр. История разви­
тия животных. В 2 т. Т. 1. М., 1950. С. 383-438.
Саксен Л., Тойвонен С. Исторические основы проблемы индукции / / Первичная эм­
бриональная индукция. М., 1963. С. 17-26.
Филипченко Ю. А. Предмет и методы экспериментальной морфологии / / Эксперимен­
тальная зоология. М., 1932. С. 1-10.
 Часть I
ХАРАКТЕРИСТИКА ОСНОВНЫХ ЭТАПОВ
ИНДИВИДУАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ

Индивидуальное развитие животных имеет ациклический, поступательный ха­

рактер. Обычно онтогенез подразделяется на ряд стадий, каждая из которых имеет
свои функциональные и морфологические особенности и создает основу для даль­
нейшего развития. Последовательная смена стадий развития во времени отражает
закономерное изменение программ развития: активацию одних и выключение дру­
гих генетических систем управления развитием. На ранних этапах развития — на
стадиях оплодотворения, дробления и формирования бластулы — на первый план
выступают клеточные механизмы, обеспечивающие активацию метаболизма, проли­
ферацию и межклеточные связи раннего зародыша. Подчеркивая эту особенность
раннего онтогенеза, стадии дробления и формирования бластулы называют цито-
типическим периодом развития, в отличие от органотипического периода, когда
включаются механизмы морфогенетических движений и начинается формирование
сложной пространственной организации тела животного с его разнообразными тка­
нями и органами.
Ранние стадии развития имеют универсальный характер. Огромное морфологи­
ческое разнообразие этих стадий у разных животных достигается на основе комбина­
ций ограниченного, в сущности, числа клеточных механизмов, краткое рассмотрение
которых и составляет содержание первой части книги. Особенности раннего онтоге­
неза во многом определяются свойствами женских гамет. Для понимания процессов,
происходящих в раннем развитии, необходимо иметь представление о гаметогенезе,
в ходе которого происходит формирование половых клеток, обязательных для обес­
печения индивидуального развития животных.

Глава 1. ГАМЕТОГЕНЕЗ

Гаметогенез — это процесс формирования половых клеток, способных при опре­

деленных условиях обеспечить воспроизводство новых особей. Гаметогенез играет
исключительно важную роль в создании необходимых предпосылок продолжения
жизни.
Зрелые половые клетки, или гаметы (от греч. yajiot; — свадьба, брак) представ­
ляют собой высокоспециализированные клетки, дифференциация которых связана
как со специфическими изменениями ядерного аппарата и прежде всего с редукцией
числа хромосом, так и с существенным преобразованием клетки в целом.

19
 В ходе оогенеза (от греч. coov— яйцо; y e v e o k ; — творение, происхождение), т. е.
при формировании женских половых клеток, их специализация определяется в
первую очередь необходимостью создания запасов веществ, обеспечивающих энер­
гетические потребности эмбриона до начала периода активного питания, которое
становится возможным только по достижении относительно высокого уровня раз­
вития зародыша. У многих животных дифференциация женских половых клеток
сопряжена с формированием анизотропии яйцевой клетки, в частности с образова­
нием ее первичной полярности. Неоднородность разных областей яйца обусловле­
на неравномерным распределением разного рода органелл, белков, иРНК и других
соединений. Некоторые из этих веществ играют роль цитоплазматических детерми­
нантов, т. е. факторов, предопределяющих направление дифференциации клеток, в
которые они попадают при дроблении. В процессе оогенеза формируется сложно ор­
ганизованный цитоскелет, который необходим для дробления и перераспределения
компонентов яйцевой клетки после ее активации.
Дифференциация мужских гамет, или сперматогенез (от греч. акЕр[ао( — семя)
характеризуется иной стратегией: она направлена на максимальную компактизацию
ядерных структур, развитие органелл движения или иных органелл, обеспечиваю­
щих встречу и соединение спсрмия с яйцеклеткой.
У мужских и женских половых клеток глубокую специализацию претерпевает
и поверхностный аппарат, который обеспечивает высокую точность распознавания
родственных гамет противоположного пола. Специализированные плазматические
мембраны гамет при определенных условиях создают возможность видоспецифиче­
ского слияния гамет.
Одной из центральных проблем эволюционной биологии развития является во­
прос о механизмах спецификации половых клеток. Организация процесса гаметоге-
неза обнаруживает поразительное разнообразие форм. По необходимости в учебнике
могут быть изложены данные лишь по некоторым наиболее полно изученным объ­
ектам, но у читателя не должно создаться впечатления, что эти данные можно без
оговорок экстраполировать на другие виды. Тем не менее, в процессе гаметогене-
за можно выделить несколько последовательных этапов, каждый из которых имеет
свои морфофункциональные характеристики (рис. 1- 1 ).
Клетки половой линии обычно обособляются на ранних этапах эмбрионального
развития. Клетки, потомки которых дают начало исключительно гаметам, называ­
ются примордиальными (от лат. primordium — начало, зарождение), или первичны­
ми половыми клетками (ППК). На более ранних стадиях иногда обнаруживаются
презумптивные примордиальные половые клетки, в результате асимметричных де­
лений которых образуются клетки половой и соматической линий.
Известны два способа спецификации клеток половой линии: эпигенетический,
при котором свойства половой клетки индуцируются внешними по отношению к
клетке факторами, и преформационный, обусловленный материнскими детерминан­
тами, унаследованными клеткой вместе с цитоплазмой ооцита (рис. 1- 2 ).
Как свидетельствует распространение этих способов спецификации линии по­
ловых клеток, эпигенетический путь является эволюционно первичным (Extavour,
Akam, 2003) (рис. 1-3).
ППК представляют собой диплоидные клетки, способные к митотическим деле­
ниям. У многих животных они способны к миграции и благодаря этому заселяют
зачатки гонад, которые закладываются и формируются независимо, а иногда и на

20
 Набор Количество
Период Половые продукты
хромосом ДНК
Период
размножения
Вне гонад Первичные 2N 2С/4С
половые клетки

В гонадах Гонии 2N 2С/4С

Период
созревания
Первичные ооциты
Первый мейотический цикл и сперматоциты 2N 4С

Вторичные ооциты
Второй мейотический цикл и сперматоциты N 2С

Период
формировании
Спермиогенез Сперматиды N С

Яйцеклетки
Гаметы и сперматозоиды N С

Рис 1-1. Периодизация гаметогенеза.

половых клеток у насекомых и млекопитающих

(по: Extavour, Akam, 2003).

А — у дрозофилы специфические материнские детерминанты транспортируют­

ся из цистоцитов и образуют в задней области ооцита половую плазму, сегрегация
которой в клетках дает начало популяции первичных половых клеток; Б — у мыши
клетки эпибласта, экспрессирующие «гены половой компетенции» (заштрихованы),
воспринимают индуктивные сигналы из внезародышевой эктодермы (черная стрел­
ка) и энтодермы (светлая стрелка) и дают начало клеткам половой линии (светлые
кружки).

21
 —И Porifera
■ Ctenophora
—Ш Cnidaria
—И Acoelomorpha
—□ Priapulida
—Ш Kynorhyncha
—О Nematoda
—ЦБ Onychophora
—■ Tardigrada
—Ш Arpthropoa
—О Rotifera
—Ш Plathelminthes
—■ Gastrotricha
—■ Phoronida
—■ Brachiopoda
—■ Ectoprocta
—□ Entoprocta
■ Nemertea
—Щ] Annelida
—■ Pogonophora
—■ Echiura
—■ Sipunculida
НЮ Mollusca
-D Gnathostomata
—О Chaetognatha
—■ Echinodermata
—■ Hemichordata
—О Urochordata
—■ Cephalochordata
■ Agnatha
—Щ ] Chondrichthyes
—OH Actinopteiygii
—■ Dipnoi
—О Anura “ Iл
CaudataJ Amphlbla
Testudines “ I
T .j - Reptilia
LepidosaunaJ
-О Archosauria
Monotremata"
Metatheria Mammalia
Eutheria
Puc. 1-3. Способы спецификации половых клеток у Metazoa (по: Extavour, Akam, 2003).
■ — эпигенетическая спецификация; О — преформационная спецификация; Ь — имеются оба
способа спецификации; □ — не исследовано.

значительном расстоянии от мест возникновения половых клеток. ППК, заселившие

зачатки гонад, называют гониями. Гонии, как и ППК, являются диплоидными и спо­
собны к митотическим делениям. Гонии мужских гонад называют сперматогония-
ми, а женских — оогониями. Этап развития, который представлен ППК и гониями,
называют периодом размножения половых клеток, а следующий за ним — перио­
дом созревания. В период созревания клетки полового пути теряют способность к
митотическим делениям. В ходе так называемого мейоза (от греч. [iEicov — меньше)
они претерпевают сложный процесс редукции числа хромосом и превращаются в
гаплоидные клетки.
Мейоз включает два последовательных деления, которые называются мейотиче-
скими, или делениями созревания. Половые клетки, вступившие на путь делений

22
созревания, называют цитами: в мужских и женских гонадах различают соответ­
ственно сперматоциты и ооциты. До завершения первого деления созревания поло­
вые клетки называют первичными сперматоцитами ( ооцитами), или сперматоци-
тами (ооцитами) первого порядка. После первого деления созревания это уже вто­
ричные сперматоциты ( ооциты) или сперматоциты ( ооциты) второго порядка.
После завершения деления созревания вторичный ооцит становится зрелой яйцевой
клеткой. Вторичный сперматоцит в результате второго деления созревания образует
гаплоидную сперматиду. В процессе сперматогенеза различают особый период фор­
мирования, в течение которого сперматида преобразуется в зрелый сперматозоид.

1.1. Сегрегация линии половых клеток. Первичные половые клетки

Клетки-родоначальницы половых клеток, или примордиальные половые клетки

часто обособляются на самых ранних этапах эмбрионального развития. Например ,
у животных, входящих в состав группы типов Ecdysozoa, различия между клетка­
ми полового пути и соматическими клетками обычно обнаруживаются уже в ходе
первых делений оплодотворенного яйца.
У некоторых животных в ходе делений дробления в соматических клетках про­
исходит отбрасывание части материала хромосом, или диминуция хроматина (от
лат. diminuo — расщеплять). Это явление впервые наблюдал Т. Бовери у нематоды
Ascaris megalocephala (1887) Уже в самом начале развития, когда зародыш нахо­
дится на стадии двух бластомеров, хромосомы одного из них фрагментируются, и
концевые их части отбрасываются (рис. 1-4). Как показал дальнейший анализ, из
бластомера, где произошла диминуция, возникают соматические клетки. При следу­
ющем делении бластомера с неповрежденными хромасомами вновь обнаруживается
диминуция хроматина в одном из его потомков. И в этом случае клетка с неполны­
ми хромосомами дает начало лишь соматическим тканям. Диминуция повторяет­
ся еще в двух клеточных генерациях, после чего возникает клетка-родоначальница
клона половых клеток, которые отличаются от соматических набором полноценных
хромосом. Учитывая сказанное, можно предположить, что информация, содержа­
щаяся в отбрасываемых частях хромосом, важна исключительно для гаметогенеза,
но не затрагивает дифференциации и функционирования к четок сомы. Аналогич­
ные данные были получены и в отношении некоторых других аскарид. Диминуция
хроматина описана также у плавунца Dytiscus, а среди позвоночных у некоторых
миксин.
У нематоды Caenorhabditis elegans диминуции хроматина не происходит. Тем не
менее обособление клеток половой линии прослеживается начиная с первого деле­
ния дробления. В яйце С. elegans имеются полярные, или Р-гранулы, которые со­
держат специфический антиген и поэтому легко выявляются иммуноцитохимически
(рис. 1-5). Перед началом дробления Р-гранулы, которые до оплодотворения равно •
мерно распределены по ооциту, концентрируются на одном полюсе яйца, маркируя
будущий задний конец зародыша. В ходе первых делений дробления Р-гранулы по­
следовательно сегрегируются в примордиальных половых клетках (Ро —> Pj —> Р 2
—> Р 3 —> Р4) и в конце концов попадают в клетки-предшественницы первичных по­
ловых клеток. Прямое участие этих гранул в дифференциации половых клеток не
доказано. Установлено, однако, что все выявленные к настоящему времени белки
Р-гранул обладают способностью связывать РНК. В связи с этим высказывается

23
 Рис. 1-4•Диминуция хроматина в раннем дроблении лошадиной аскариды
(по: Boveri, 1899).
А — начало второго деления дробления; Б — фрагментация хромосом в бласто­
мере АВ в ходе второго деления; В - на стадии 4 бластомеров фрагменты хромосом
наблюдаются в бластомерах А и В; Г — начало третьего деления: фрагментация
хромосом в бластомере EMSt. АВ, А, В, EMSt — бластомеры соматической линии;
P i , Р 2 — бластомеры половой линии; е — фрагменты хромосом.

Рис. 1-5. Раннее обособление клеток полового пути у нематоды

Caenorhabditis elegans (по: Seydoux, Strome, 1999).
А — половые, или Р-гранулы в бластомере Р 2 , выявленные с помощью антител
к белкам этих гранул; Б — экспрессия гена pes-Ю, характерная для соматических
бластомеров А, В и EMSt, отсутствует в бластомере Р 2 .

24
 Ро Р0

г- L - , I— I— I
AB P, AB P.
I I
I-------Л I------- I
EMS P, EMS P,
,2 I I2
MS E С P, MS E "MS" "E"

— 1 I— *--- 1 I Ц I— ^---I
END-1:GFP D P, END-1:GFP END-1 :GFP

Z2 Z3
Рис. 1-6.Образование клеток половой линии у нематоды
Caenorhabditis elegans (по: Seydoux, Strome, 1999).
А — клетки половой линии (темные) отделяются от соматических (светлые) в
период раннего дробления (2-7). ППК Z2 и Z3 возникают у стоклеточного зародыша
(8) и дают начало всем половым клеткам личинки (9, 10) и взрослого животного
(1). Ядра клеток половой линии всегда содержат белок MES. Транскрипционная
инертность ядер клеток половой линии поддерживается белком PIE-1. АВ, EMS,
С, D — соматические бластомеры; Р 0 -Р 4 ~ - клетки половой линии. Б — мутация
гена p iel (-) нарушает нормальное развитие клеток половой линии. В отсутствии
белка PIE-1 в клетках половой линии начинается преждевременная транскрипция,
и бластомер Р 2 дает клетки соматической природы.

предположение, что материал Р-гранул влияет на регуляцию метаболизма иРНК в

цитоплазме клеток половой линии, который имеет иной характер по сравнению с
соматическими клетками. Оказалось, что у С. elegans бластомеры половой линии
в отличие от бластомеров, дающих соматические зачатки, не синтезируют иРНК
вплоть до стоклеточной стадии, когда обособляются две первичные половые клетки
Z2 и Z3. Подавление экспрессии генов в клетках половой линии объясняется действи­
ем материнских факторов, в том числе действием белка PIE-1. Действительно, при

25
мутации материнского гена pie-1 у зародышей вместо бластомера половой ишии Рз
после третьего деления дробления образуется соматическая клетка (рис. 1- 6 ).
Нечто подобное описано у ракообразных. Например, у некоторых копепод в пе­
риод дробления при митотических делениях происходит асимметричное распреде­
ление особых телец, эктосом, которые маркируют клетки половой линии вплоть до
образования первичных половых клеток (рис. 1-7).

Рис. 1-7. Маркеры линии половых клеток — эктосомы в дробящемся яйце

веслоногого рачка Cyclops fuscus (по: Amma, 1911).
А — первое деление; Б — второе деление; В — конец пятою деления дробления.
Зернистое включение — эктосомы при делениях концентрирую! ся на одном полюсе
митотического веретена. Благодаря такой асимметрии митоза эктосомы попадают в
первичную половую клетку, которая дает начало линии половых клеток животного.

У многих насекомых в процессе гаметогенеза ооцит дифференцируется таким об­

разом, что цитоплазма той области яйца, где впоследствии возникнут задние струк­
туры зародыша приобретает свойства, предопределяющие формирование первич­
ных половых клеток. Эту цитоплазму называют полярной плазмой. Например, у
некоторых галлиц в период дробления в ядрах будущих соматических клеток про­
исходит элиминация большинства хромосом. В линии половых клеток элиминация
предотвращается специфическими факторами, сосредоточенными в полярной плаз­
ме задней области ооцита (рис. 1- 8 ).
Полярная плазма ооцита насекомых играет роль в первичном программирова­
нии пути развития (спецификации) первичных половых клеток и в тех случаях,
когда хромосомы не элиминируются. Уже в начале X X столетия было известно, что
разрушение задней области яйца приводит к дефектам развития половых клеток и
стерильности насекомых. Наиболее подробно формирование клеток полового пути
было изучено у дрозофилы. Оказалось, что полярная плазма ооцитов дрозофилы
содержит особые, выявляемые с помощью электронного микроскопа, состоящие из
РНК и белка гранулы, которых нет в других областях яйца. Ультрафиолетовое об­
лучение задней области яйца вызывает стерилизацию животных. Однако инъекция
полярной плазмы из необлученного яйца в облученное восстанавливает способность
зародыша формировать нормальные половые клетки (рис. 1-9). Доказательство то­
го, что в полярной плазме яйца дрозофилы локализованы факторы, необходимые
для дифференциации половых клеток, вытекает из экспериментов по транспланта­
ции полярной плазмы (Ilmensee, Mahowald, 1974).
К. Ильменей и А. Маховолд инъецировали полярную плазму яйца дрозофилы
дикого типа (форма А, рис. 1-10) в переднюю область яйца генетически маркирован-

26
 в

Рис. 1-8. Обособление клеток линии полового пути у двукрылых.

А, Б — Miastor metraloas (Cecidomyidae) (по: Kahle, 1908): А — деление
ядра в задней области зародыша, дающее начало линии половых клеток;
Б — элиминация хромосом в ядрах соматических линий. 1 — полярная плаз­
ма; 2 — митоз в полярной плазме; 3 - редукционные тельца; 4 — митозы;
5 — элиминированные хромосомы; 6 — полярные клетки (ППК). В — схема
элиминации хромосом у галлицы Wachtliela persicariae (по: Geyer-Duszynska,
1959): заштрихована область полярной плазмы (внизу); ядро, попавшее в эту
плазму на стадии 8 ядер, сохраняет весь набор хромосом и дает начало ППК.
В остальных клетках из 38 хромосом элиминируется 30.

Рис. 1-9. Схема эксперимента, в котором трансплантация полярной плазмы

из необлученного яйца дрозофилы восстанавливала способность
облученного зародыша к гаметогенезу (по: Гилберт, 1994).

27
ной формы В, имеющей мутации multiple wing hair и ebony (mwh, e). В этом случае
закладка половых клеток под влиянием полярной плазмы происходила не только
в задней области, как обычно, но и в передней области зародыша. Для того чтобы
эти половые клетки попали в гонады и превратились в зрелые гаметы, их пересажи­
вали из передней в заднюю область зародышей генетической формы С (например,
yellow или white). Часть прооперированных зародышей завершила развитие и дала

Трансплантация полярной плазмы

A (WT) В (mwh, е)

С (у, w)

I5

Рис. 1-10. Схема опыта, демонстрирующего роль полярной плазмы

в спецификации клеток половой линии.
1 — трансплантация полярной цитоплазмы от зародыша генетической линии А
(дикий тип) зародышу линии В; 2 — выход ядер на поверхность, в том числе в перед­
ней области зародыша, куда была трансплантирована полярная плазма линии А; 3 —
образование половых клеток с генотипом В на заднем и переднем концах зародыша;
4 — трансплантация половых клеток с переднего конца зародыша В в заднюю об­
ласть зародыша линии С; 5 — образование имаго с гонадами, содержащими половые
клетки с генотипами В и С.

28
фертильных животных, гаметы которых имели не только ожидаемый генотип С, но
и генотип В. Таким образом, эти опыты отчетливо показали, что полярная плазма
яйца дрозофилы формы А инициировала образование половых клеток на переднем
конце яйца дрозофилы формы В (рис. 1-10).
Участие полярной плазмы в детерминации половых клеток дрозофилы подтвер­
ждается и данными анализа ряда мутаций, при которых образуется стерильное
потомство. Так, у гомозиготных мутантных самок grandchildless, скрещенных с нор­
мальными самцами, потомство стерильное. У этих мутантов ядра дробления не ми­
грируют в заднюю область яйца, в результате чего формирование половых клеток
становится невозможным. При мутации agametic наблюдается быстрый распад гра­
нул полярной плазмы и резкое уменьшение числа половых клеток.
Состав полярной плазмы ооцита дрозофилы довольно сложен. Он отличается
большим количеством митохондрий, фибрилл и гранул. Важными составными эле­
ментами полярной плазмы служат белки GCL (Germ cell-less), Oskar, Nanos и Vasa,
митохондриальная РНК. Непосредственное участие в спецификации половых кле­
ток дрозофилы принимает белок GCL. Соответствующая иРНК синтезируется под
контролем гена gel в период гаметогенеза в цистоцитах (см. с. 30), транспортиру­
ется в ооцит и концентрируется в его задней области. Транспортировка иРНК 6 ,
nPHKosfcar, а также белка Staufen в заднюю область ооцита блокируется при мута­
ции генов cappuccino и spire. Синтез белка GCL происходит вскоре после оплодотво­
рения. В спецификации половых клеток каким-то образом участвует и белок Oskar.
Ро всяком случае, эктопическая инъекция nPHKosfcar вызывает появление половых
клеток в несвойственных для них местах.
Интригующие данные были получены японскими исследователями С. Кобаяши и
М. Окада (1989), которые установили, что компонентом полярной плазмы дрозофи­
лы является также рибосомальная РНК митохондрий (мтрРНК), которая входит
в состав полярных гранул. Если зародышам после ультрафиолетового облучения
в дозах, подавляющих гаметогенез, инъецировать мтрРНК, то формирование по­
ловых клеток восстанавливается. В составе полярных гранул дрозофилы и других
животных сравнительно недавно обнаружены модуляторы трансляции — микроРНК
(miRNA; Ambros, 2001). Таким образом, возможно, полярные гранулы участвуют в
образовании микроРНК или же способствуют их объединению с иРНК, трансляция
которых контролируется.
Характерной морфологической особенностью первичных половых клеток многих
животных является наличие так называемых перинуклеарных телец. Они описаны
у кишечнополостных, нематод, полихет, щетинкочелюстных, асцидий, ланцетника,
практически у всех позвоночных. Функции этих образований в настоящее время не
известны. В большинстве случаев они, скорее, могут служить лишь маркерами кле­
ток половой линии. В отношении некоторых животных имеются лишь косвенные
свидетельства возможной роли цитоплазматических факторов в спецификации кле­
ток половой линии. Например, у бесхвостых амфибий ультрафиолетовое облучение
вегетативной области яйца, где сосредоточены половые гранулы (рис. 1- 11 ), ведет к
развитию стерильного животного.
Раннее обособление клеток половой линии не является универсальным правилом.
Часто линия половых клеток возникает на сравнительно поздних стадиях дробления
или даже в период гаструляции. Первичные половые клетки на стадии дробления
были выявлены среди позвоночных лишь у бесхвостых амфибий, у которых они об-

29
 Рис. 1-11. Половая цитоплазма в бластомерах лягушки
Rana temporaria (по: Бунур, 1968).
Перемещение половой цитоплазмы с периферии клетки (А) в область
ядра (Б): 1 - половая цитоплазма; 2 — ядро; 3 — митохондрии.

разуются в тесной связи с энтодермой. ПИК у хвостатых амфибий, как полагают,

возникают в период гаструляции благодаря индуцирующим воздействиям энтодер­
мы, т. е. эпигенегически. Эпигенетический характер формирования ППК описан и
у млекопитающих. У мыши возникновение половых клеток, которые маркируются
высоким содержанием щелочной фосфатазы (Everett, 1945), обнаружено на стадии
6,5 суток после спаривания. ППК появляются в эпибласте задней области зародыша
в результате индуцирующего действия факторов BMP (подробнее см. том 2).
У зародыша человека ППК возникают на стадии 16 сомитов. При некоторых
экспериментальных условиях ППК можно получить и из зачатка нейроэктодермы,
из которого при нормальном развитии они никогда не- образуются. По-видимому, у
млекопитающих спецификация ППК также осуществляется в результате индуциру­
ющих влияний факторов внутренней среды.
Первичные половые клетки обычно обладают амебоидной подвижностью. Бла­
годаря этому ППК мигрируют от места своего возникновения до зачатка гонады,
который они заселяют. Миграция половых клеток обычно носит активный харак­
тер. Продолжая митотически делиться, первичные половые клетки преодолевают
значительные расстояния, выбирая направление движения на основе контактного
ориентирования. Например, у млекопитающих ППК перемещаются в период ми­
грации от основания аллантоиса по дорсальному мезентерию в область половых
гребней и, заселяя их, способствуют образованию гонад. В период миграции ППК
активно делятся, благодаря чему численность популяции ППК возрастает примерно
от ста клеток до пяти тысяч.
У амфибий ППК, которые образуются в энтодерме (Anura) или в мезодерме
(Urodela), движутся в область половых валиков по внеклеточному матриксу ме­
зентерия. Направление их миграции предопределяется предварительной разметкой
пути движения, который устанавливается благодаря ориентированному расположе­
нию нитей фибронектина. Действительно, обработка мезентерия антителами против
фибронектина препятствует миграции ППК.
У рептилий и птиц ППК, возникающие из клеток эпибласта, мигрируют в ги-
побласт на переднем крае area pellucida (см. гл. 13) и образуют здесь скопление в
виде полумесяца. Из этой области ППК пассивно перемещаются в составе гипобла-

30
 5
Рис. 1-12. Схема диапедеза первичных половых клеток в кро
веносные сосуды куриного эмбриона (по: Дьюкар, 1978).
1-4 -первичные половые клетки; 5 — клетки кров!.; 6 -
э: .догелиальная клетка стенки кровеносного сосуда. Стрелка
ми показано направление движения ППК.

ста в переднем направлении, а затем по кровеносным сосудам зародыша (рис. 1- 12)

с током крови к зачатку половой железы. В области зачатка гонад наблюдается
активное выселение ППК из кровеносных сосудов — диапедез (от греч. Sia — через;
7tr)Saco — прыгать). Причину этого локализованного выселения связывают с особы­
ми свойствами эндотелия кровеносных сосудов в области зачатка половой железы
или же с хемотаксическим действием каких-то факторов, вырабатываемых в этом
зачатке.

1.2. Гонии
ППК, заселившие гонады, называют гониями. У многих животных выявлены
особые стволовые половые клетки (СПК), которые поддерживают непрерывность
гаметогенеза в течение долгого периода времени, а то и на протяжении всей жизни
животных. Различают два типа СПК — стереотипный и популяцгюнный. Стволо­
вые клетки первого типа характеризуются асимметричным делением, в результате
которого одна из дочерних клеток остается стволовой, а другая вступает на путь
дифференциации. Например, у дрозофилы стволовая клетке, которая находится в
терминальной области гермария яйцевой трубки (см. рис. 1-17), делится и образует
две клетки: дочернюю СПК, сохраняющую контакт с апикальными соматическими
клетками терминальной нити, и цистобласт — клетку, последующие деления кото­
рой дают ооцит и связанные с ним цистоциты. При делении СПК популяционного
типа образуются две равнозначные клетки, судьба которых зависит от место но чо-
жения клетки в яйцевой трубке. Так, у С. elegans клетки, которые оказываются
близ дистальной концевой клетки трубчатой гонады, сохраняют способность к ми­
тотическим делениям. Эта способность поддерживается сигналами, исходящими из
концевой клетки. По мере удаления гоний от источника сигнала, поддерживающего
митотическую активность, клетки переходят к дифференциации и вступают в фазу
мейоза. Митогенный сигнал концевой клетки опосредуется геном glp-1 (рис. 1-13).
Мутация этого гена ведет к резкому снижению уровня пролиферации гоний. Так, в
семенной трубке С. elegans при рецессивной мутации glp-1 вместо полутора тысяч
образуется всего лишь десяток спермиев.
У зародыша мыши гонии, заселившие зачатки яичника, продолжают размно­
жаться, существенно увеличивая число женских половых клеток. Наибольшее число
оогоний наблюдается у 13,5-суточных зародышей, когда гонии прекращают мито­
тические деления и вступают в мейоз, становясь ооцитами. Идентичные процессы
происходят и в яичнике плода человека, где максимальное число оогоний (около
7-10е) приходится на 20-ю неделю беременности. Следует заметить, что у родив­
шихся особей женского пола млекопитающих число ооцитов значительно меньше.
Ко времени рождения у мышей, крыс и человека более 2/3 пула потенциальных
женских половых клеток уничтожается путем апоптоза. У женщин при рождении
имеется около одного миллиона ооцитов, при достижении половой зрелости их оста-

31
 I _ „ .Промежуточная . _ .
р—Зона м е и о з о в — 30н а ------ — Зона митозов—*,

клетка

В се клетки в мейозе

Рггс. 1-15. Поддержание пролиферативного статуса гоноцитов

в гонаде нематоды Caenorhabditis elegans (по: Gilbert, 2000).
А - нормальная гонада с концевой регуляторной клеткой: в дисталь­
ной части гонады поддерживаются митотические деления гоноцитов (свет­
лые кружки), по мере удаления от дистального конца гонады клетки всту­
пают в мейоз (темные кружки). Б - гонада после умерщвления концевой
клетки лазерным лучом, все клетки проходят мейоз.

ется меньше 4-105, а к 50 годам менее 1-103, т. е. к этому моменту погибает 99,9%
ооцитов, имевшихся в яичниках при рождении.

1.3. Мейоз

Деления созревания, или мейотические деления являются обязательным событи­

ем в развитии гамет животных. В результате двух последовательных мейотических
делений происходят редукция числа хромосом, и образуются гаплоидные гаметы.
Вступившие в мейоз половые клетки называют сперматоцитами и ооцитами. В про­
цессе мейоза кроме 1)едукции числа хромосом осуществляется комбинативная из­
менчивость генома половых клеток. Эта изменчивость достигается в результате,
во-первых, случайного распределения родительских хромосом по дочерним клет­
кам, и, во-вторых, рекомбинации участков гомологичных хромосом, происходящей
в ходе кроссинговера.
Переключение с митотических делений, характерных для гоний, на мейоз нахо­
дится под контролем многих генов, в частности генов, контролирующих репликацию
ДНК. Премейотический синтез ДНК, которым начинается этот период гаметогенеза,
заметно отличается по ря;;у параметров от обычного синтеза ДНК, предшествую­
щего митозу. Эти отличия проявляются не только в большей продолжительности
периода премейотической репликации ДНК, но и в иной последовательности ре­
пликации отдельных участков ДНК. Завершение премейотического синтеза ДНК
может происходить после существенной паузы — уже в профазе мейоза. В мейозе
имеет место лишь одна фаза синтеза ДНК и два (первое и второе) мейотических де­
ления. Мейотические деления подразделяются, как и в случае митоза, на профазу,
метафазу, анафазу и телофазу.
В профазе первого мейотического деления (первичные ооциты и первичные спер­
матоциты) различают несколько последовательных стадий. На стадии лептотеиы

32
вследствие начавшейся конденсации хроматина появляются тонкие нити хромосом,
состоящих из двух хроматид Затем следует зиготени, стадия, на которой с по­
мощью особого синаптонемного комплекса осуществляется попарное соединение
гомологичных хромосом, или их конъюгация. Попарно соединенные хромосомы —
биваленты отчетливо видны на стадии толстых нитей, или пахитены. На, стадии
зиготены — пахитены начинается кроссинговер (от англ. crossing-over — перекрест).
Разрушение синаптонемного комплекса и расхождение гомологов происходит на ста­
дии двойных нитей, или диплотены. Гомологичные хромосомы в это время связаны
между' собой лишь в области хиазм. Завершается профаза мейоза конденсацией
бивалентов, состоящих из четырех хроматид. Сестринские хроматиды связаны цен-
тромерными областями, а хроматиды гомологов - - хиазмами. Эту стадию называют
диакинезом.
Процесс мейоза находится под строгим генетическим контролем. Так, например,
образование синаптонемного комплекса у мыши связано с экспрессией гетта Sycpl.
Кодируемый им белок необходим для построения центрального элемента комплекса
и сперм атоцитов, и ооцитов. Экспрессия одного и того же гена Sycpl у мужских и
женских особей обеспечивается благодаря существованию у этого гена специфиче­
ских «мужского» и «женского» промоторов.
У млекопитающих первое мейотическое деление ооцитов обычно имеет весьма
продолжительную профазу, так как они в своем развитии останавливаются на ста­
дии диакинеза. На этой стадии первичные ооциты окружаются специализированны­
ми соматическими клетками и образуют первичные фолликулы. Стадия диакинеза
может продолжаться годы (у человека до 50 лет). После образования полости фол­
ликул называют вторичным. Полость заполняется фолликулярной жидкостью, ее
объем достигает максимума на стадии граафова пузырька — третичного фоллику­
ла, который выступает над поверхностью яичника.

Рис. 1-14■Деление созревания в оплодотворенном яйце нематоды

Ascaris megalocephala (по: Hertwig, 1923).
А — яйцо в момент оплодотворения; Б — анафаза первого деления со­
зревания; В — выделение первого редукционного тельца и формирование
мужского пронуклеуса; Г — второе мейотическое деление; Д — яйцо с дву­
мя редукционными тельцами: женский и мужской проиуклеусы находятся в
центре яйца; Е — метафаза первого деления дробления.

33
 Вслед за профазой следуют мета-, ана- и телофаза первого мейотического деле­
ния. После завершения первого мейотического деления образуются вторичные спер­
матоциты и ооциты. Ранее полагали, что именно первое деление созревания является
редукционным вследствие расхождения гомологичных хромосом, тогда как второе
деление, следующее за первым без дополнительного синтеза ДНК, —эквационное, в
ходе которого расходятся хроматиды (рис. 1-14). В действительности, в ходе и пер­
вого и второго мейотического деления в одних бивалентах расходятся гомологичные
хромосомы (т. е. происходит редукционное деление), а в других — хроматиды (эква­
ционное деление).
В ходе мейоза осуществляется не только редукция числа хромосом. Благодаря
случайному распределению гомологичных хромосом по клеткам возможное число
генетических комбинаций при гаметогенезе равно 2П, где п — число пар хромосом.
Так, у человека каждая особь может дать теоретически около 8,5 миллионов (223)
генетически различающихся типов гамет. Учитывая же кроссинговер, можно ска­
зать, что это разнообразие практически бесконечно.

1.4. Оогенез

Процесс развития женских половых клеток, или оогенез сопряжен со сложными

структурными и функциональными перестройками ядра, цитоплазмы и поверхност­
ного аппарата клетки. В ходе оогенеза наряду с мейотическими преобразованиями
ядра происходит интенсивное накопление энергетически богатых и пластических
веществ, которые обеспечивают высокую скорость развития и известную автоном­
ность зародышей до начала периода активного питания. В период оогенеза форми­
руются механизмы, необходимые для оплодотворения и активации яйца, а также
для блокировки полиспермии. Процесс оогенеза иногда называют проэмбриогталь-
ным периодом, так как в это время под контролем материнского генома происходит
выработка разного рода морфогенетически активных веществ, специфическая ло­
кализация которых в ооците во многом предопределяет характер развития и поляр­
ность зародыша после оплодотворения. Наконец, в период оогенеза формируются
разнообразные оболочки яйца, которые выполняют защитную функцию, а в период
оплодотворения обеспечивают начальные этапы взаимодействия яйца со спермато­
зоидом. В результате оогенеза образуется яйцо, т. е. ооцит, окруженный системой
оболочек.

1-4-1- Яйцевые оболочки

В зависимости от способа образования различают первичные, вторичные и тре­

тичные яйцевые оболочки. Первичными называют оболочки, продуцируемые сами­
ми яйцеклетками; вторичными — оболочки, которые формируются благодаря ак­
тивности фолликулярных клеток яичника; третичными — структуры, которые об­
разуются при участии желез половых протоков самки.
Примером первичной оболочки может служить желточная оболочка, которая
располагается непосредственно на поверхности ооцита и является по своей сути
надмембранным комплексом клетки. Как видно на рис. 1-15, желточная оболочка
полихеты Nereis virens имеет сложную структуру. Она построена из фибриллярного
материала гликопротеиновой природы и характеризуется эластичностью и способно­
стью к растяжению. Наружный отдел желточной оболочки богат полисахаридами.

34
 Рис. 1-15. Схема строения желточной оболочки яйца полихеты
Nereis virens.
1 — микроворсинка; 2 —воротничок; 3 — наружный слой; 4 — промежу­
точный слой; 5 — срез через канал желточной оболочки; 6 — внутренний
слой.

Оболочка пронизана каналами, через которые проходят микроворсинки ооцита. У

рыб первичную оболочку называют лучистой оболочкой, или zona radiata. Иногда
желточная оболочка имеет более сложный генезис. Например, у земноводных, птиц
и млекопитающих в образовании желточной оболочки участвуют и ооцит и клетки
фолликулярного эпителия. У млекопитающих эта сложная оболочка носит название
оолемма, или блестящий слой — zona pellucida.
Вторичные оболочки хорошо развиты у наземных и пресноводных животных,
хотя имеются и у животных, ведущих морской образ жизни, таких как голово­
ногие моллюски. К вторичному типу оболочек относится, например хорион мече­
хвостов, паукообразных, ракообразных и насекомых. Хорион представляет собой
плотную, эластичную или жесткую оболочку, которая в этом случае напоминает
скорлупу. Белок хориона — хорионин — по химическому составу близок роговому ве­
ществу. Как правило, хорион — многослойное образование, и подразделяется на от­
носительно тонкий внутренний отдел — эндохорион, и толстый внешний экзохорион.
Например, хорион палочника Bacillus libanicus состоит из эпдохориона, толщиной
около 7 мкм, и семислойного экзохориона, достигающего в толщину 50 мкм. Для
проникновения сперматозоида в хорионе имеется канал, открывающийся наружу
отверстием — микропиле.
Третичные оболочки яйца формируются обычно у животных с внутренним осе-
мене) шем. Их образование происходит в половых протоках самки после овуляции и
оплодотворения. К третичным оболочкам относятся, например белковые, пленчатые
подскорлуповые и известковая оболочки яйца птиц.

35
 1.4 -2. П ут и формирования энергетических запасов

Процесс эмбрионального развития, подобно любому иному биологическому про­

цессу, может осуществиться только при наличии источников энергии (рис. 1-16). В
раннем развитии различаются два типа источников энергии: внутренние и внешние.
Доступность внешних источников определяется временем дифференциации орга­
нов, которые обеспечивают возможность перехода на активное питание. Использо­
вание зародышем внешних источников питания наблюдается также при паразитиз­
ме, когда эмбриональное развитие происходит в тканях хозяина, а также в случае
живорождения, когда питание зародыша обеспечивается материнским организмом.
Внутренние энергетические источники создаются в период оогенеза путем накопле­
ния в яйце энергетически богатых веществ (желток, липиды и др.). Кроме прямого
может быть и косвенный путь накопления энергии в яйце. Действит ельно, в период
роста яйца происходит образование большого количества органелл, синтез или сбор­
ка которых требует больших энергетических затрат. О масштабах запасов веществ
и органелл можно судить, например, по соотношению этих компонентов в яйцевой
клетке и клетке печени шпорцевой лягушки Xenopus laevis:
Компонент: Яйцеклетка / Клетка печени
Сапок 300 000:1
рРНК 200000:1
митохондрии 100 000:1
Р Н К-иолимеразы 100 000:1
ДНК-полимераза 100000:1
гистоны 15 000:1
тРНК 10 000:1

Продукция больших количеств митохондрий, рибосом, ДНК- и РНК-полимераз

и других энергоемких соединений в период оогенеза освобождает эмбриональный
период развития от соответствующих энергетических затрат.

( РАЗВИТИЕ )

- активное питание
Прямые Косвенные
- внутриутробное
энергетически сборка органелл,
развитие
богатые синтез энергоемких
соединения: соединений, в т.н. - паразитизм
- желток - митохондрии
- липиды - рибосомы
- гликоген - иРНК
- АТФ и др. - тРНК
- полимеразы НК

Рис. 1-16. Источники энергии, необходимой

для обеспечения индивидуального развития.

36
 Создание необходимого запаса энергоемких структур и веществ в яйцевой клетке
сопряжспо с существенным увеличением размеров яйца. Если принять за единицу
диаметр средней соматической клетки взрослого животного (15 мкм), то диаметр
яйца морского ежа (150 мкм) превосходит его на порядок, диаметр яйца лягушки
(примерно 1500 мкм) в 100 раз, а яиц рептилий и птиц более чем в 1000 раз. У птиц
95% массы яйца составляет так называемый желток.
Объем запасов энергетических и пластических веществ в яйце зависит от слож­
ной комбинации многих условий, которые у данного вида иногда могут действовать в
противоположных направлениях. Среди факторов, влияющих на объем запасаемых
веществ, можно назвать время достижения стадии, когда становится возможным
активное питание. Чем раньше наступает активное питание, тем меньше требуется
запасов в яйце. Другим фактором является высота организации животного. При
прочих равных условиях более сложная структурная организация животного тре­
бует большего времени для своего развития, и, соответственно, больших запасов
энергии и пластических веществ. Существенное значение имеет характер трофиче­
ских связей зародыша с окружающей его средой. При паразитическом развитии,
когда зародыш питается за счет хозяина, запасы в яйце минимальны. Аналогичная
картина наблюдается и при внутриутробном развитии.

1.4-3. Типы оогенеза

Формирование таких гигантских образований, как яйцевые клетки, требует осо­

бых механизмов для преодоления ограниченных возможностей матричной активно­
сти генома диплоидной клетки. Сравнение организации оогенеза у представителен
разных групп животных показывает, что это ограничение обычно преодолевается
интеграцией метаболической активности многих сотен и даже тысяч клеток, как
половой, так и соматической природы. Проявления этого принципа кооперативно-
сти весьма разнообразны.
Хотя у некоторых групп животных оогенез идет по так называемому солитар-
гтому типу, при котором синтез желточных включений происходит непосредственно
в ооците, генеральной линией эволюции оогенеза является вынесение синтеза ви-
теллогенина, белка-предшественника желточных включений, за пределы гонады.
У позвоночных с высоким уровнем синтеза внтеллогенина его выработка проис­
ходит в клетках печени. Общая схема регуляции этого процесса представлена на
рис. 1-17. Под действием гипофизарного гонадотропина в фолликулярных клетках
яичника образуется эстроген, наличие которого служит сигналом для инициации
синтеза внтеллогенина в клетках печени. Этот предшественник желтка с током кро­
ви транспортируется в яичник, где клетки фолликулярного эпителия, по-видимому,
при действии фолликулстимулирующего гормона осуществляют перенос этого белка
в ооцит. У насекомых синтез внтеллогенина происходит в клетках жирового тела при
действии гормона, также вырабатываемого фолликулярным эпителием яичника, ко­
торый, в свою очередь, стимулирован ф о л л и к у л о т р о п н ы м гормоном, продуцируе­
мым особым нейросекреторным органом — corpora allata. У полихет описан синтез
внтеллогенина в целомоцитах под действием гормона головного ганглия (рис. 1-17).
Таким образом, у представителей всех трех групп билатеральных животных син­
тез внтеллогенина происходит вне гонады. Поскольку он осуществляется негомоло­
гичными структурами, эти данные свидетельствуют о независимом, параллельном
возникновении у Lophotrochozoa, Ecdysozoa и Deuterostomia внегонадного синтеза

37
 ПОЗВОНОЧНЫЕ НАСЕКОМЫЕ АННЕЛИДЫ

Синтез желтка

Рис. 1-17. Параллельные ряды нейрогуморальной регуляции вителлогенеза

у представителей трех ветвей билатеральных животных.

основного по своей массе белка, необходимого для оогенеза, что, безусловно, говорит
о высоком адаптивном значении такой организации вителлогенеза.
Разные типы гонад и оогенеза служат одной из причин большого многообра­
зия яйцевых клеток животных. Бросается в глаза, в частности, разнообразие форм
яиц, связанное с пространственной локализацией желточных и иных трофических
включений. Как правило, животные имеют эндолецитальные яйца, у которых жел­
ток сосредоточен внутри ооцита. По характеру локализации желточных включений
различают изолецитальные (гомолецитальные), телолецитальные и центролециталь-
ные яйца. Изолециталъными называют яйца с равномерным распределением желт­
ка; телолецитальные характеризуются концентрацией желтка у одного из полюсов
яйца; к центролециталъным относят такие яйца, у которых плотные желточные
включения сосредоточены в центральной области, тогда как цитоплазма, свободная
от включений, располагается преимущественно на периферии яйца. По количеству
желтка различают алециталъные (без желтка), олиголециталъные (с малым содер­
жанием желтка), мезолециталъные (с умеренным содержанием желтка) и полиле-
циталъные (с большим содержанием желтка) яйца. Иногда, если желтка в яйце
очень мало, как, например, в яйцах Eutheria, говорят об алецитальных яйцах, хотя

38
 Рис. 1-18. Экзолецитальный тип развития у плос­
кого червя Monocehs fusca (подкласс Neoophora) (по:
Giesa, 1966).
1 — желточный эпителий; 2 — желточные клетки;
3 — зародыш; 4 — капсула.

в этом случае было бы точнее говорить об олиголецитальных яйцах, содержащих

все же небольшое количество желтка. Тем не менее в некоторых случаях образуют­
ся действительно алецитальные — безжелтковые ооциты. Например, среди плоских
червей различают две группы, каждая из которых характеризуется своеобразной
стратегией энергетического обеспечения раннего развития. Одна группа (Acoela,
Polycladida и др.) представлена животными с типичными эндолецитальными яй­
цами, у которых желток сосредоточен в ооците. У плоских червей другой группы
(Tricladida, паразитические классы) ооциты лишены желтка. Развитие в этом слу­
чае обеспечивается особыми желточными клетками, которые вместе с яйцом на­
ходятся в окруженной оболочкой капсуле (рис. 1-18). В соответствии с этим плоские
черви подразделяются на группу архоофора (примитивный тип с эндолецитальны­
ми яйцами) и группу неоофора с эктолецитальными яйцами. У представителей
пеоофора наряду с яичником имеются особые желточные железы, продуцирующие
желточные клетки. Ооцит по яйцеводу и желточные клетки по желточным прото­
кам поступают в бурсу, где после осеменения яйцо вместе с желточными клетками
окружается капсулой и далее через яйцежелточный проток выводится наружу. Есте­
ственно, указанные группы животных имеют разные программы раннего развития.
Нечто похожее наблюдается у немертины Lineus ruber, у которой некоторые яйца,
из отложенных в коконе, служат питающими клетками и потребляются другими
особями данного кокона.
В ооцитах многих животных, например у плоских, круглых и кольчатых чер­
вей, моллюсков, членистоногих, иглокожих и хордовых, в том числе у ланцетника,
миног, осетровых и костистых рыб, амфибий, рептилий, млекопитающих в ходе оо­
генеза происходит накопление особых кортикальных гранул, которые формируются
при участии элементов Гольджи. Изначально они рассеяны по всей цитоплазме, но
на завершающих этапах оогенеза концентрируются в кортикальной области ооцита.
Обычно это сравнительно мелкие пузырьки, диаметром до 1 мкм, но у осетровых
они достигают 3-4 мкм, а у костистых рыб, у них они называются кортикальными
альвеолами, даже 30-40 мкм. Кортикальные гранулы содержат разного рода фер­
менты, сульфомукополисахариды и другие вещества, которые играют важную роль
в процессе оплодотворения (см. гл. 2 ).
Среди всего многообразия форм оогенеза наиболее распространенным являются
диффузный, солитарный, полигеномный и гипертранскрипционный типы оогенеза.

39
 Рис. 1-19. Полигеномный тип оогенеза у гидры (по: Айзенштадт, 1984).
Поперечный разрез через женскую гонаду: 1 — эпидермис; 2 — ооциты с
питающими клетками; 3 — мезоглея; 4 — гастродерма.

Диффузный тип оогенеза встречается у низших Metazoa. Ооциты в этом случае об­
ладают амебоидной подвижностью и способностью к фагоцитозу. Солитарный тип
оогенеза с автономным синтезом макромолекул в ооците имеет весьма ограниченное
распространение. Полигеномный тип оогенеза можно рассматривать как своеобраз­
ное проявление принципа кооперативности. Для этого типа характерно подключение
к формированию яйцевой клетки большого числа однотипных геномов. В ходе эво­
люции неоднократно и независимо возникал неполный цитокинез митотически деля­
щихся гоний, в результате чего последние формировали синцитиальную структуру.
Один из элементов синцития становился ооцитом, все остальные вспомогательны­
ми клетками. Полигеномный тип оогенеза с синцитиальными клеточными клонами,
формирующимися из клеток половой линии, описан у некоторых книдарий (рис. 1-
19), гребневиков (рис. 1- 20), аннелид, насекомых, у отдельных видов позвоночных.
Неполный цитокинез, характерный для полигеномного типа оогенеза, в процессе
эволюции иногда трансформировался в эндомитоз, в результате которого возникали
многоядерные ооциты. Такие полигеномные ооциты описаны у хвостатой лягушки
Ascaphus truei (гладконог). У сумчатой лягушки Flectonotus pygmaeus ооциты на­
считывают до 3000 ядер, из которых лишь одно становится женским пронуклеусом.
Возможно образование многоядерности и в результате слияния многих ооцитов, что
наблюдается, например, у аннелиды Dinophilus.
У ктенофор гонии проходят несколько циклов митотических делений с непол­
ным цитокинезом, образуя комплекс, который состоит приблизительно из ста вза­
имосвязанных клеток, одна из которых становится ооцитом (рис. 1-20). Как пола­
гают, наиболее близко лежащие к ооциту питающие клетки синтезируют желток и
формируют центральную эндоплазму ооцита, тогда как находящиеся на периферии

40
комплекса клетки участвуют в формировании эктоплазмы — поверхностного слоя
ооцита.
Полигеномный тип оогенеза у дрозофилы. У многих насекомых в составе
аналогичного синцития или цисты различают ооцит и вспомогательные клетки
цистоциты. В литературе сохранилось историческое название этих вспомогатель­
ных клеток — «.питающие» клетки, или «трофоциты» (от греч. трофос; — кормя­
щий, питающий), которое отражает устаревшее представление о главной функции

Рис. 1-21. Полигеномный тип оогенеза у дрозофилы (по:

Koch et al., 1967).
А — яйцевая трубка дрозофилы: 1 — стволовая клетка;
2 — цистобласт; 3 — цистоцит; 4 — префолликулярная мезо­
дерма; 5 — фолликулярный эпителий; 6 - - ооцит, связанный
цитоплазматическими мостиками с цистоцитами. Б — циста из
16 цистоцитов, связанных между собой цитоплазматическими
мостиками. Клетки с наибольшим числом мостиков (1 и 2) —
проооциты.

41
этих клеток. Взаимоотношения между цистоцитами и ооцитом у разных видов насе­
комых варьируют. В политрофных трубочках ооцит и цистоциты образуют относи-
тельно компактный комплекс. Окруженная мезодермальным фолликулярным эпи­
телием циста представляет собой яйцевую камеру (рис. 1 -21). В телот.рофных яйце­
вых трубочках гонады «трофоциты» занимают проксимальную область, тогда как
ооцит смещается дистально, сохраняя, однако, связь со своей «питающей клеткой»,
поскольку цитоплазматические мостики трансформируются в удлиненные транс­
портные каналы (рис. 1 22). Полигеномность усиливается благодаря многократной

Рис. 1-22. Схема строения телотрофной яйцевой трубки жука

Bruchidius obtectus (по: Buning, 1984).
А — полностью сформированная овариола: 1 — терминальная нить;
2 — интерстициальные клетки; 3 — ядро цистоцита; 4 — префолликулярная
ткань; 5 — питающий канал; 6 — tunica propria; 7 — фолликулярный эпи­
телий; 8 — ооцит; 9 — кариосома; 10 — зона превителлогенного роста; 11 —
трофариум. Б - последовательные стадии формирования трофариума и об­
разование питающих каналов.

42
полнплоидизации цистоцитов. Благодаря полиплоидизации в цисте дрозофилы, со­
стоящей из диплоидного ооцита и пятнадцати полиплоидных цистоцитов, насчиты­
вается около 7000 диплоидных эквивалентов, работающих на один ооцит.
Основная функция цистоцитов в яичнике насекомых состоит в выработке рРНК,
иРНК и многих нежелтковых белков. Из цистоцитов в ооцит поступают много­
численные митохондрии. Синтез предшественника желтка — внтеллогенина, однако,
происходит за пределами яичника — в жировом теле, откуда транспортируется по
гемолимфе и поглощается ооцитом путем пиноцитоза. У дрозофилы при мутации
гена fs29 нарушается функция рецепции внтеллогенина. Такие мутанты стерильны,
так как в их ооцитах желток не накапливается, несмотря на интенсивный синтез его
предшественника в жировом теле.

Фолликулярная клетка
/-----N

DPP .DPP
Стволовая ПК

Цистобласт

Ядро

Спектросома

Рис. 1-23. Особенности экспрессии генов в клетках концевого отдела

яйцевой трубочки дрозофилы.
В фолликулярных клетках экспрессируются гены kh, yb, piwi. Белок НН поддер­
живает пролиферацию фолликулярных клеток. Спектросома, содержащая спектри-
ны и белок HTS, обеспечивает асимметричное деление стволовой половой клетки.
Экспрессия гена pumilio необходима для поддержания статуса стволовой клетки.
Затухание экспрессии гена рит при усилении активности генов bam и nannos пред­
определяет начало дифференциации цистобластов.

У дрозофилы оогенез начинается с асимметричного деления стволовых поло­

вых клеток (СПК), располагающихся в концевых отделах яйцевых трубочек- гер-
мариях. Исследованиями последних лет выявляется сложная система генетическо­
го контроля, которая, с одной стороны, поддерживает коммитированное состояние
стволовых половых клеток, а с другой, обеспечивает их переход к дифференциации
(рис. 1-23). Поскольку принципиальная схема такого контроля представляет общий
интерес для понимания процессов дифференциации коммитированных стволовых
клеток, остановимся на этих данных несколько подробнее.

43
 В результате асимметричного митоза образуются дочерняя стволовая клетка и
так называемый цистобласт (см. рис. 1-21, А; 1-23). Асимметричность деления
СПК обусловлена наличием особых цитоплазматических структур — спектросом.
Спектросомы содержат мембранные пузырьки и скелетные мембранные белки — а-
и /3-спектрин, анкирин и HTS (HULITAISHAO). Во время митоза спектросома нахо­
дится в контакте с тем полюсом митотического веретена, который обращен к базаль­
ной клетке терминальной нити (рис. 1-23). Спектросомы, связываясь с веретеном,
определяют его ориентацию таким образом, что одна из образующихся при деле­
нии клеток остается в контакту с терминальной нитью, а другая отдаляется от нее.
Вместе с тем спектросомы играют роль и в локализации некоторых регуляторных
молекул, например циклина А.
Расхождение путей развития клеток, возникших в результате деления СПК, у
дрозофилы связывают с активностью генов pumilio (рит), па,nos (nos) и bag o f mar­
bles (bam). Активность гена рит необходима для поддержания линии стволовых
клеток. Связывающийся с РНК белок Pum служит фактором репрессии трансля­
ции и, видимо, избирательно подавляет трансляцию некоторых РНК уже комми-
тированной стволовой клетки, препятствуя, таким образом, началу ее дифферен­
циации. Переход к дифференциации коррелирует с резким снижением уровня Pum
(см. рис. 1-23). Ген nos необходим для дифференциации цистобластов. Переход от
СПК к цистобласту сопровождается существенным увеличением содержания белка
Nos. В процессе переключения СПК на путь дифференциации важную роль играет
также ген bam., мутации которого закрывают путь дифференциации клеток поло-

Bicaudal-D иРНК Bic-D

----------------

Синтез белка

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ
ООЦИТА

Рис. 1-24. Участие белка Bic-D в дифференциации ооцитов дрозофилы.

На схеме слева представлены гены. Для дифференциации ооцита необ­
ходимы локализация иРНК Bic-D, обеспечиваемая геном egl, и фосфорили-
рование белка Bic-D.

44
вой линии. Значительные количества белка В а т характерны для цистобластов и
цистоцитов, что существенно отличает их от стволовых клеток.
Асимметричность делений СПК определяется и сигналами, исходящими из со­
матических клеток гонады. Так, уничтожение лучами лазера апикальной части тер­
минального филамента дрозофилы увеличивает частоту делений СПК. Как выяс­
няется, участие клеток терминального филамента в регуляции делений СПК обу­
словлено активностью генов piwi и fs{ 1) Yb ( Yb). В отсутствии этих генов стволовые
клетки не сохраняются. По-видимому, путь, контролируемый геном Yb, специфичен
для женских гонад, тогда как ген pivd необходим для поддержания линии СПК в
гонадах обоих полов.
Важную роль в сохранении линии СПК, вероятно,
играет и белок Dpp (гомолог ВМ Р2/4), кодируемый
геном dpp (decapentaplegic). Показано, что сигнал Dpp
вырабатывается соматическими клетками, окружаю­
щими СПК. Впрочем, не исключено, что Dpp может
быть и паракринным фактором дифференцирующих­
ся половых клеток или даже аутокринным фактором,
вырабатываемым самими стволовыми клетками.
Хотя цисгобласты и сохраняют способность к
митотическим делениям, последние характеризуются
неполным цитокинезом, благодаря чему между обра­
зующимися клетками сохраняются цитоплазматиче­
ские мостики, или кольцевые каналы. У дрозофилы
в результате четырех делений цистобласта образуется
циста из шестнадцати клеток (см. рис. 1-21, Б). При
этом две клетки цисты — проооциты имеют по четы­
ре кольцевых канала, соединяющих их с соседними
клетками. Одна из этих клеток становится ооцитом,
тогда как остальные 15 оогоний превращаются в по­
липлоидные цистоциты.
Необходимым условием развития ооцита дрозофи­
лы является экспрессия гена Bicaudal-D (Bic-D) (рис.
1-24). Мутация Bic-D ведет к стерильности самки,
поскольку в этом случае все 16 клеток цисты раз­
виваются как цистоциты. Локализация viPHKB%c~D в
будущем ооците зависит от активности гена egalitar­
ian (egl), мутация которого также вызывает стериль­
ность. Незадолго ДО вителлогенеза нРНКВгс~С транс- Рис- 1-25- Схема строения па-
лируется, и образующийся белок после фосфорилиро- ноисгической яйцевой грубочки
_ кузнечика lachycines.
вания приобретает свойства фактора, который обес- j _ гермарий; 2 — вител-
печнвает дифференциацию ооцита. В случае мутации лярий. Питающие клетки отсут-
гена Bic-D возникает дефектный белок Bic-D, кото- ствуют. Снаружи трубочка по-
г , , Г) крыта фолликулярным эпители-
рыи не способен к фосфорилированию. Вследствие
этого необходимый для дифференциации фактор не
образуется, и развития ооцита не происходит.
Суммарный гаплоидный эквивалент цистоцитов составляет более 14000 С.
С учетом того, что гаплоидный набор хромосом дрозофилы содержит примерно

45
250 рибосомных генов, в яйцевой камере имеется около 3,8-106 рибосомных генов,
работающих на обеспечение одной яйцевой клетки. Благодаря этому за трое суток
оогенеза в ооците запасается до 160 нг рРНК. Интересно, что количество рРНК
может быть фактором, ограничивающим скорость оогенеза у дрозофилы. Так, в
случае мутации bobbed, при которой происходит делеция разных участков кластера
рибосомных генов, продолжительность оогенеза зависит от числа оставшихся ри-
босомалъных генов: при наличии 1/3 нормального сод ерж ан т рДНК оогенез про­
должается почти в три раза дольше (206 час вместо 75). Благодаря такой задержке
зрелые яйца самок bobbed содержат нормальное количество рРНК.
Кроме рРНК в цистоцитах под контролем материнских генов (гены материнского
действия) синтезируются иРНК, которые после оплодотворения яйца обеспечивают
морфогенетически значимой информацией процесс раннего эмбриогенеза. Хромо­
сомы ооцита у дрозофилы инактивированы. Эта инактивация, впрочем, не обяза-

Рис. 1-26. Хромосома типа «ламповой щетки»

(А, Б — ф ото С. Е. Дерюшевой, А. Г. Кургановой и Е. Р. Гагинской; В — рисунок И. В. Соловей).
Хромосома 5 домашней курицы Gallus gallus domesticus: А — участок митотической мета-
фазной пластинки: видны ярко флуоресцирующие гомологичные хромосомы 5; Б — диплотенный
бивалент, образованный гомологичными хромосомами 5, из ооцита на стадии «ламповых щеток»
при том же увеличении, что и метафазные хромосомы на рис. А ); В — схематическое изображение
бивалента 5 в стадии «ламповых щеток», гомологичные хромосомы соединены хиазмами. А, Б —
выявление хромосомы 5 методом «chromosome painting» с использованием зонда, специфичного к
хромосоме 5.

46
тельна при полигеномном осгенезе. У некоторых насекомых, например у комаров,
жуков и полужесткокрылых, геном ооцита активно участвует в создании пула раз­
ных типов РНК. В ооцитах жука-плавунца Dytiscus, долгоножки Tipula (Diptera),
Chrysopa (Neuroptera) происходит амплификация генов рРНК. Амплифицирован-
ная ДНК сконцентрирована в виде небольшого тельца, которое располагается в яд­
ре ооцита, но отсутствует в ядрах цистоцитов. У Dytiscus ДНК-содержащее тельце
несет около 3-106 амплифицированных генов рРНК.
Перемещение РНК и белков из цистоцитов в ооцит обеспечивается механизмами
внутриклеточного транспорта. Пслагают, что перемещению макромолекул может
способствовать электрический градиент (1 В /см ), который устанавливается в систе­
ме цистоциты — ооцит. На завершающих этапах оогенеза содержимое цистоцитов
транспортируется в ооцит благодаря сократительным движениям этих клеток.
Полигеномный принцип организации оогенеза обеспечивает высокие скорости
формирования яиц. Продолжительность оогенеза у дрозофилы, где на каждый
ооцит приходится 1 ,4-104 гаплоидных геномов, составляет всего 3-5 дней. У сверчка
с его паноистическим типом оогенеза (рис. 1-25), при котором цистоциты отсут­
ствуют и формирование ооцита обеспечивается всего четырьмя гаплоидными экви­
валентами, оогенез продолжается более трех месяцев. Нельзя не отметить, что па-
ноистический способ оогенеза характерен для прямокрылых (Orthoptera) и стрекоз
(Odonata), т. е. для наиболее примитивных отрядов подкласса Настоящих насеко­
мых.
Гипертранскрипционный тип оогенеза с участием хромосом типа лам­
повых щеток. Природе известен и другой путь существенной интенсификации
метаболических процессов, необходимых для формирования яйцевых клеток. Этот
путь характерен для вторичноротых. Здесь не происходит превращения части по­
ловых клеток во вспомогательные. Вителлогенин и в этом случае синтезируется
вне гонады. Однако интенсивное накопление в яйце разных форм РНК обеспечива­
ется благодаря функциональному и структурному видоизменению хромосом само­
го ооцита, создающему предпосылки максимальной продуктивности транскрипции.
Подобный тип организации оогенеза мы будем называть гипертранскрипционным.
Впервые такие видоизмененные хромосомы были описаны в 1882 году
В. Флеммингом в ооцитах тритона, а в 1892 году они были подробно исследованы
И. Рюккертом в ооцитах акулы. Поскольку эти хромосомы имеют большое число
боковых петель ДНК, которые на микроскопических препаратах имеют вид отрост­
ков, расположенных на центральной оси, Рюккерт назвал их «ламповыми щетками»,
подразумевая их сходство с «ершиком», использовавшимся в те далекие времена для
очистки стекол керосиновых ламп.
Хромосомы типа ламповых щеток появляются в профазе мейоза. Они представ­
ляют собой биваленты, т. е. спаренные в области хиазм гомологичные хромосомы
(рис. 1-26). Каждая хромосома бивалента состоит из двух дуплексов конденсиро­
ванной ДНК. Каждый дуплекс ДНК образует многочисленные симметричные пет­
ли, образованные идентичными последовательностями. Боковые петли деконденси-
рованной ДНК служат местом интенсивного синтеза РНК. У гомозиготных жи­
вотных каждый активный локус представлен четырьмя петлями (по две на каж­
дом гомологе). Локализация некоторых крупных петель и их форма может иметь
специфический для вида характер (см. рис. 1-26). Число петель и единиц тран­
скрипции хромосомы не совпадает, так как одна петля может содержать более од­

47
ной единицы транскрипции. Расправление (спрединг) хромосом по Миллеру сделало
возможным визуализацию транскрипции в электронном микроскопе. В результате
была обнаружена исключительно высокая плотность молекул РНК-полимеразы на
петле ДНК. В хромосомах типа ламповых щеток расстояние между последователь­
но расположенными молекулами РНК-полимеразы составляет 100-200 нуклеотидов.
Такая плотная посадка полимераз предопределяет высокую продуктивность тран­
скрипции. Действительно, в ооците с хромосомами типа ламповых щеток, где одна
молекула РНК-полимеразы приходится на 102 нуклеотидов ДНК, в 1 мин произво­
дится 2 пг РНК. В соматических же клетках, где одна молекула РНК-полимеразы
приходится примерно ria 104 нуклеотидов нити ДНК, за такое же время синтезиру­
ется всего 0,015 пг РНК.
Продукты транскрипции после сплайсинга и полиаденплирования экспортиру­
ются в цитоплазму ооцита. До 80% иРНК в цитоплазме образует комплексы с бел­
ками секвестрации, которые инактивируют иРНК. Эти запасаемые в ооците и акти­
вируемые после оплодотворения РНП-част.щы были названы А. Спириным инфор-
мосомами (1966).
Синтез рРНК при гипертранскрипциопном оогенезе происходит в ооците или в
фолликулярных клетках. У рыб и амфибий имеет место многократная репликация
ДНК рибосомных генов, или амплификация (от англ. amplification —увеличение)
рДНК. У Xenopus в результате амплификации количество рДНК в ооците увеличи­
вается примерно в 1000 раз. Амплификация начинается на стадии гоний и достигает
пика на стадии пахитены. Амплифицированные гены рРНК образуют многочислен­
ные экстрахромосомные ядрышки.
Оогенез с участием хромосом типа ламповых
щеток имеет очевидные адаптивные преимуще­
ства. Благодаря постоянному обновлению иРНК
создаются предпосылки длительного поддержания
жизнеспособности яйцевой клетки, находящейся
в яичнике. Это позволяет при неблагоприятных
условиях избегать обязательной откладки яиц сра­
зу же после завершения оогенеза.
Своеобразный характер приобретает принцип
кооперативности в оогенезе птиц и рептилий. У
рептилий синтез рРНК осуществляется грушевид­
ными клетками фолликулярного эпителия (рис. 1-
Рис. 1-27. Предполагаемая схема
участия клеток фолликулярного
27). На определенном этапе своего развития гру­
эпителия в формировании ооцита у шевидные клетки соединяются с ооцитом, образуя
пресмыкающихся (по: Айзенштат, цитоплазматический мостики. Если у насекомых
1984). с полигепомным типом оогенеза функцию постав­
1 - оболочка яичника; 2 фол­
ликулярные клетки; 3 — ооцит; 4 — щика рРНК выполняют цистоциты, которые пред­
грушевидная клетка. ставляют собой впдоизмененпые половые клетки,
то у рептилий аналогичную функцию выполняют
соматические фолликулярные клетки. Если в первом случае цитоплазматические
мостики, через которые транспортируется рРНК, образуются вследствие неполно­
го цитокинеза при делении гоний, то у рептилий они, по-видимому, образуются при
слиянии мембран половой и фолликулярной клеток. В каждом фолликуле ящерицы
насчитывается до 10 000 грушевидных клеток.

48
 Рис. 1-28. Образование трансосом клетками фолликулярного эпителия у птиц
(по: Press, L964).
1 — желточная оболочка ооцита; 2 —ооцит; 3 — трансосомы; 4 - фолликулярная
клетка.

У птиц синтез рРНК, которая поставляется в ооцит, также происходит в клетках

фолликулярного эпителия. Однако транспортным средством для доставки рРНК
в ооцит здесь служит особая органелла — трансосома (рис. 1-28). Фолликулярные
клетки образуют длинные отростки, которые погружены в цитоплазму ооцита. Кон­
цевые отделы этих отростков, в которых накапливаются большие количества рРНК,
отшнуровываются от фолликулярной клетки. После разборки мембран рРНК из
трансосомы поступает в цитоплазму ооцита.

1.5. Сперматогенез

Направление дифференциации мужских половых клеток резко отличается от

стратегии формирования женских гамет. Дифференциация мужских гамет предпо­
лагает максимальную редукцию цитоплазматического тела и развитие двигатель­
ного аппарата. Объем спермия определяется практически размерами компактизо-
ванного ядра, нескольких митохондрий, центросомы и величиной жгутика. Следует
обратить внимание на то, что развитие мужских и женских гамет, столь различаю­
щееся по дифференциации клеточных структур, происходит в соответствии с одной
и той же принципиальной схемой ядерных преобразований, в ходе которых дипло­
идные первичные половые клетки (ППК) превращаются в гаплоидные гаметы.
Первые описания подвижных живчиков («зверьков», лат. animalculi) в семени
животных принадлежат И. Гаму и А. Левенгуку (1677). Аналогичные образования
были обнаружены и в семени человека, сперматозоид которого был увековечен на
известном рисунке Николаса Хартсекера (1694) (рис. 1-29) Стоявший на позициях
анималькулизма Хартсекер предполагал, что именно в этих подвижных клетках
заложены в миниатюре все структуры взрослого организма, отвергая тем самым
гипотезы о паразитарной природе живчиков. Термин сперматозоид был введен в

49
 научную литературу К. Бэром (LSI 7). Окончатель­
ное решение вопроса о природе сперматозоидов как
мужских половых клеток принадлежит Альберту
Кёлликеру (1817-1905), который на нескольких десят­
ках видов беспозвоночных доказал развитие спермиев
из клеток семенников. Кёлликер не только продемон­
стрировал все переходные формы от недифференциро­
ванной ППК до высокоспециализированного спермия,
но и установил видовую специфичность спермиев и да­
же обнаружил у некоторых видов полиморфизм спер­
миев. Тем не менее явление редукции числа хромосом
в ходе сперматогенеза оставалось незамеченным вплоть
до последней четверти XIX столетия, когда Ван Бене-
ден, исследуя развитие мужских и женских половых
клеток аскариды, описал мейоз (van Beneden, 1884). Но­
вая страница в изучении структуры и функции сперми­
ев была открыта в 50-е годы XX столетия, когда с ис­
пользованием электронной микроскопии обнаружились
принципиально новые особенности тонкой организации
половых клеток.
По структурной организации и способу функци­
онирования сперматозоиды можно подразделить на
несколько типов. У подавляющего большинства ви-
Рис. 1-29. Сперматозоид че-
ловека в изображении Нико- Д0Б сперматозоиды жгутиковые. Гакие сперматозоиды
ласа Хартсёкера (Nicolas Hart- обычно имеют три четко выраженных отдела: головку,
soeker, 1694; по: Нидхеы, 1947). Б которой расположено ядро, среднюю часть, или шейку
и жгутик (рис. 1-30). Известны некоторые группы жи­
вотных, у которых спермин не имеют жгутиков. Безжгутиковые сперматозоиды
характерны для некоторых Ecdysozoa. Так, у круглых червей сперматозоиды аме­
боидные (рис 1-31). Своеобразные безжгутиковые спермин обнаружены и у многих
членистоногих, их спермин округлой или звездчатой формы (рис. 1-32, 1-33) могут
перемещаться с помощью псевдоподий или остаются неподвижными.

Рис. 1-30. Схема строения сперматозоида.

1 — хвост; 2 — плазматическая мембрана; 3 — средняя часть (шей­
ка); 4 — головка; 5 — спиралевидная митохондрия; 6 — центриоль; 7 —
ядро; 8 — акросомный пузырек.

50
 Рис. 1-31. Амебоидный спермий нематоды Enoplus de-
mani (по: Yushin, Malakhov, 1994)
1 — псевдоподии; 2 — митохондрии; 3 — плотные мем­
бранные образования; 4 - мембранные образования; 5 —
ядерная оболочка; 6 — ядро.

Рис. 1-32. Схема строения безжгутиковых спермиев членистоногих

(по: Дроздов, Иванков, 2000).
Спермин: А — клеща Ambliorna dissimili, Б — десятиногого рака из подотряда
Reptania, В — многоножки Spirostreptus. 1 — акросома; 2 — ядро; 3 — митохондрий;
4 — центриоль.

Сперматозоиды, как правило, микроскопических размеров. Спермин гидры име­

ют жгут длиной до 30 мкм. У некоторых книдарий его длина достигает 90 мкм.
Известны и гигантские спермии. Например, у Drosophila bifurca длина сперматозо­
ида составляет 58 мм. В этом случае спермий в 20 раз длиннее тела взрослой особи
и в 15 000 раз длиннее спермия человека.
Хроматин ядра спермия сильно конденсирован и плотно упакован. В процессе
формирования сперматозоида объем его ядра резко уменьшается (например, у пе­
туха от 110 до 2 мкм3). Конденсация хроматина обусловлена замещением гистонов,
характерных для соматических клеток, переходными белками, а затем и особыми
высокоосновными спермийными белками — протаминами и иными аргининбогатыми
белками.
 Рис. 1-33. Спермин ракообразных (по: Shino, 1968).
А — Leandcr aspersus\ Б — Ethusa marascone (вид сбоку); В — Е. rnarascone (вид
сверху); Г — Galathea squamifera.\ Д — сперматофор Galathea\ Е — Antaeus fhmiatilis.

Жгутиковые сперматозоиды обычно имеют акросому (от греч. ахрос — крайний,

ссоца — тело), хотя у многих животных, таких, как гидра, некоторые моллюски, ко­
стистые рыбы, акросома отсутствует. Акросома представляет собой секреторный
пузырек, который формируется при участии аппарата Гольджи и содержит раз­
нообразные гидролитические ферменты. У многих животных, в частности у мле-

Рис. 1-34■ Спермиогенез у морской свинки (по: Fawcett et al., 1971).

1 — ядро; 2 — акросома; 3 — манжетка; 4 — жгутик; 5 — канал жгутика; 6 — ядерное кольцо;
7 — межклеточный мостик; 8 — аннулус (кольцевая центриоль); 9 — акросомная шапочка; 10 —
митохондриальная оболочка; 11 — фиброзная оболочка; 12 — резидуальная цитоплазма.

52
копитающих, акросомный пузырек в процессе формирования спермия принимает
вид шапочки, облегающей переднюю часть ядра (рис. 1-34). У иглокожих между
акросомным пузырьком и ядром имеется субакросомное пространство, в котором
локализуются молекулы глобулярного актина.
Митохондрии часто сливаются между собой, образуя крупную хондросферу. Они
обычно локализуются в основании жгутика зокруг центриоли и, как полагают, гене­
рируют энергию для движения жгутика. Иногда, например в сперматидах насеко­
мых, моллюсков и кольчатых червей, слившиеся митохондрии располагаются в виде
«побочного ядра» сбоку от ядра. Тзм не менее, в конечном счете, митохондриальное
побочное ядро окружает аксонему жгутика, или располагается рядом с ним.
Центриолъ, которая в период делений сперматогониев и сперматоцитов опре­
деляет формирование веретена, в ходе спермиогенеза преобразуется в базальное
тельце жгутика. Эта трансформация центриоли дрозофилы происходит при уча­
стии центросомина, особого белка центросомы. Мутация m/s, при которой синтез
центросомина не происходит, вызывает нарушение спермиогенеза и, как следствие
этого, стерильность самцов.
Основу жгутика составляет так называемый осевой комплекс, или аксонема, со­
стоящая из двух центральных одиночных мнкротрубочек, вокруг которых распо­
ложены девять дублетов микротрубочек. Кроме этого комплекса спермии многих
видов имеют еще одно внешнее кольцо, также состоящее из девяти фибрилл и прида­
ющее жгутику необходимую жесткость. Иногда в заднем отделе спермия образуется
•ундулирующая мембрана.
До настоящего времени не разгадано явление полиморфизма спермиев: у ря­
да животных в семеннике развиваются спермии двух разновидностей. Например, у
некоторых гастропод (Prosobranchia) наряду с типичными жгутиковыми, или эупи-
ренными сперматозоидами, обладающими оплодотворяющей способностью, разви­
ваются короткие червеобразные апиренные формы, часто с аномальным гаплоид­
ным набором хромосом. В других случаях апиренные спермии имеют два жгутика.
Доля апиренных сперматозоидов постоянна для данного вида.
У ряда американских сумчатых наблюдается феномен попарного соединения зре­
лых спермиев, поступивших в эпидидимис. При этом лежащая над акросомой плаз­
матическая мембрана одного сперматозоида плотно соединяется с соответствующей
областью другого. Предполагается, что это объединение спермиев, жгутики которых
расположены асимметрично относительно ядра, улучшает их подвижность.
Число спермиев, выводимых при осеменении, огромно. Так, у опоссума оно до­
стигает 13 млн, у кролика их на порядок больше. У человека ежедневно может
формироваться более 100 млн спермиев. Естественно, что этот интенсивный процесс
требует координации пролиферации стволовых клеток и включения программ спер­
матогенеза, контролирующих преобразование диплоидных сперматогониев в зрелые
гаплоидные сперматозоиды.
Сперматогенез подразделяется на несколько фаз (рис. 1-35) Первая из них — фа­
за размножения, в течение которой образующиеся после деления стволовых клеток
сперматогонии митотически делятся. Число митотических циклов у разных видов
варьирует от 1 до 14. Вторая фаза — фаза коммитации, в течение которой вклю­
чаются генетические программы инициации сперматогенеза. Третья фаза — фаза
созревания. Этот этап охватывает премейотический синтез ДНК и два мейотиче-
ских деления. Мужские половые клетки, находящиеся в первом мейотическом цик-

53
 возобновление
резерва второе
стволовых мейотичес- енез
клеток инициация премейоти- первое кое деле-г Л 1
ние (1N/1C]
/
'^спермато-
\ генеза
ческий мейотичес-
синтезДНК кое деле
ние ( c rv
c rv
c rv
Коммитиро- Первичный Вторичные Сперма-
c rv
Спермато- Спермин
гоний ВаНтогони1рМа~ спеРмат°Цит сперматоциты тиды

ФАЗА ФАЗА ФАЗА

РАЗМНОЖЕ­ КОММИТАЦИЯ
НИЯ СОЗРЕВАНИЯ ФОРМИРОВАНИЯ

Рис. 1-35. Фазы сперматогенеза. Объяснения в тексте

ле, называют первичными сперматоцитами (сперматоциты первого порядка), а во

втором — вторичными сперматоцитами (сперматоциты второго порядка). После вто­
рого мейотического деления образуется гаплоидная сперматида и наступает заклю­
чительная фаза — фаза формирования спермия. В ходе спермиогенеза происходит
резкое уменьшение объема ядра в результате элиминации нуклеоплазмы и конден­
сации хроматина. Изменение структуры хроматина в первую очередь обусловлено
заменой соматических гистонов специфическими спермийными. В этот период обра­
зуется жгутик и завершается формирование акросомы. Характерной особенностью
сперматогенеза является неполный цитокинез в период митотических делений спер-
матогоний и первого мейотического деления сперматоцитов. В результате потом­
ки одного сперматогония образуют синцитиальную цисту. Полагают, что наличие
цитоплазматических мостиков, связывающих сперматоциты, обеспечивает высокую
синхронность дифференциации мужских половых клеток, входящих в состав одной
цисты. Не исключено, что синцитиальная структура важна для поддержания фе­
нотипической эквивалентности цитоплазмы сперматид, что особенно важно в отно­
шении иРНК половых хромосом, так как многие белки, важные для спермиогенеза,
контролируются генами X и Y хромосом. Так, например, описан перенос иРНК че­
рез межклеточные мостики гаплоидных сперматид мыши с помощью белка TB-RBP
(testis-brain-RN A-binding protein).
Индивидуализация мужских гамет осуществляется на завершающем этапе спер­
миогенеза, когда происходит «сбрасывание» цитоплазмы вместе со всеми органел-
лами — рибосомами, эндоплазматической сетью, аппаратом Гольджи. У некоторых
животных эта остаточная, или резидуальная (от лат. residuum — остаток) цитоплаз­
ма (см. рис. 1-34), отделяющаяся от головки спермия, фагоцитируется клетками
фолликулярного эпителия семенника.
В опытах по так называемому микрооплодотворению, когда мужские половые
клетки вводятся в ооцит с помощью микроинъекции или путем искусственного
«сшивания» гамет, выяснилось, что уже ранние сперматиды и даже вторичные и
иногда первичные сперматоциты обладают потенцией к образованию зиготы, спо­
собной к дальнейшему развитию. Другими словами, сложные процессы цитодиф­
ференциации, происходящие в период спермиогенеза, необходимы прежде всего для

54
образования аппарата движения, формирования механизмов заякоривания и слия­
ния с женской гаметой.
Процесс сперматогенеза предполагает тесную корреляцию митотических и мей­
отических циклов со сложной программой клеточной дифференциации. О суще­
ствовании относительной автономии программы мейоза свидетельствует мутация
twine, вызывающая у дрозофилы существенные аномалии мейоза и вместе с тем не
затрагивающая заметным образом дифференциацию сперма,тид. Несмотря на нару­
шения сегрегации мейотических хромосом и цитокинеза, в семенниках мутантных
самцов наблюдаются половые клетки, у которых происходит конденсация хромати­
на, характерное видоизменение формы ядра и образование жгутика. Наряду с этим
известны мутации, которые блокируют одновременно и мейоз и спермиогенез. Эти
мутации свидетельствуют о том, что на определенной стадии сперматогенеза дей­
ствует сопряженная программа развития, в равной степени необходимая как для
мейотического цикла, так и для дифференциации сперматид.
Семенник позвоночных подразделен на два отдела: семенные канальцы и межка-
нальцевое пространство, или соединительнотканную строму. В последней находится
обширная сеть кровеносных сосудов, интерстициальные клетки или клетки Лейди-
га, а также макрофаги, фибробласты, .лимфоциты и тучные клетки. Семенные ка­
нальцы отделены от стромы так называемой ограничивающей мембраной, которая
образована уплощенными клетками, расположенными в 2-3 слоя. Полагают, что эти
клетки могут превращаться в клетки Лейдига. Эпителий семенных канальцев имеет
сложный состав и образован клетками двух типов: половыми (гоноциты) и сомати­
ческими клетками фолликулярного эпителия. Последние часто называют клетками
Сертоли, или опорными клетками. Реже их называют сустентоцитами (от лат.
sustentas — поддерживающий). Между половыми и опорными клетками в течение
всего сперматогенеза (у крысы цикл сперматогенеза длится 42 дня, у человека 74
дня) сохраняется постоянная взаимосвязь. Клетки Сертоли многофункциональны.
Они обеспечивают питание дифференцирующихся мужских половых клеток и спо­
собствуют созданию необходимой для нормального сперматогенеза концентрации
андрогенов. Опорные клетки играют также важную роль в перемещении половых
клеток из базального отсека канальца в околополостной. Они участвуют в созда­
нии гематотестикулярного барьера, который предохраняет половые клетки от раз­
ного рода метаболитов и токсинов, а также предотвращает автоиммунизацию орга­
низма против собственных спермиев. Благодаря строго скоординированной сборке
и разборке плотных контактов между клетками Сертоли происходит своего рода
«шлюзование» сперматоцитов в околополостной компартмент канальца с сохране­
нием непроницаемой границы между отсеками (рис. 1-36).
Функциональная активность семенника у позвоночных во многом определяет­
ся гормональной регуляцией со стороны гипоталамо-гипофизарной системы. Ини­
циация сперматогенеза обусловлена секрецией лютеинизирующего гормона (ЛГ) и
фолликулстимулирующего гормона (ФСГ) (рис. 1-37), которые вырабатываются в
передней доле гипофиза. В канальцах мишенями ФСГ являются клетки Сертоли, а
в строме — макрофаги. Действие ЛГ на сперматогенез опосредовано клетками Лей­
дига: под действием ЛГ в этих клетках активируется синтез мужского полового
гормона тестостерона, наличие которого является непременным условием сперма­
тогенеза. В обоих случаях происходит выработка паракринных (т. е. действующих
вблизи от места секреции) факторов, поддерживающих активность клеток Лейди-

55
 Рис. 1-36. Схема, перемещения первичного сперматоцита
млекопитающих в околополостной отсек семенной трубки из базального.
Отсеки существуют благодаря наличию плотных контактов между клет­
ками Сертоли (черные полоски). Скоординированная сборка-разборка плот­
ных контактов при перемещении сперматоцитов поддерживает непроницае­
мость барьера, образуемого клетками Сертоли.
А — сперматоцит в базальном, Б — транзитном, В — в околополостном от­
секах.

Рис. 1-3 7. Принципиальная схема

паракринных регуляторных взаимодей­
ствий в семеннике млекопитающих (по:
Tahka, 1989).
1 — клетка Сертоли; 2 — мужские по­
ловые клетки; 3 — сперматоцит; 4 — клет­
ка Лейдига; 5 — макрофаг; 6 — капилляр;
7 — перитубулярная клетка. ЛГ — лютеи-
низирующий гормон; Т С — тестостерон;
ФСГ — фолликулстимулирующий гор­
мон; ПКФ — паракринные факторы се­
менного канальца, вырабатываемые клет­
ками Сертоли.
га. ФСГ стимулирует также аккумуляцию тестостерона в клетках Сертоли, созда­
вая предпосылку нормального сперматогенеза. Дифференциация клеток Сертоли у
мыши по времени совпадает с экспрессией гена Тяг, что дает основание предпола­
гать участие этого гена в осуществлении специфической функции клеток Сертоли —
обеспечении сперматогенного цикла у животных, достигших половой зрелости. Для
поддержания этой функции необходимы и белки, продуцируемые клетками Лейди-
га. Показано, что эти белки (Gas 6 , S) служат лигандами, которые воспринимаются
специфическими тирозинкиназными рецепторами клеток Сертоли.
Поступающие извне сигналы инициируют активность генетических программ
сперматогенеза. Методом иммуноблотинга было показано, что у мыши в период
сперматогенеза в результате экспрессии генов в половых клетках появляется целый
ряд специфических для этого периода антигенов (рис. 1-38). Глобальная транскрип­
ция прекращается за несколько дней до завершения спермиогенеза. В период спер-
миогенеза активируется трансляция ранее синтезированных иРНК. В частности,
активируется трансляция транскриптов протамина. Благодаря динамической моди­
фикации хроматина и точной координации процессов транскрипции и процессинга
иРНК достигается экспрессия белков, специфических для разных этапов спермио­
генеза.

Масса
беяка, Сиермато- Спермато- Сиерма- Спермий
гоний цит тида
кДа
105
100
93
88
85
80
71
67
58
55
48
35
31
26
Рис. 1-38. Экспрессия различных антигенов в половых клетках мыши
в период сперматогенеза (по: Tanake, Nishimune, 1998).
Каждая стадия характеризуется экспрессией специфического на­
бора антигенов.

Решающую роль в активации генов, ответственных за сперм иогенез и экспресси­

рующихся в гаплоидном геноме, играет цАМФ-зависимый транскрипционный фак­
тор CREM. Оказалось, что необходимым элементом для экспрессии генов в период
спермиогенеза является активация аденилатциклазной системы мужских половых
клеток. Было показано, что гонадотропные гормоны гипофиза, взаимодействуя с
рецепторами мембран, активируют G-белок и связанную с ним аденилатциклазу.
Это в конце концов индуцирует накопление цАМФ в клетках Сертоли, восприни­
мающих сигнал ФСГ, и в клетках Лейдига, взаимодействующих с ЛГ. Повышение
уровня цАМФ вызывает диссоциацию неактивного комплекса протеинкштазы А. на
две субъединицы — регуляторную и каталитическую. После диссоциации каталити­
ческая субъединица фосфорилпрует ядерные транскрипционные факторы класса
bZIP, которые связываются со специфической нуклеотидной последовательностью
TGACGTCA в промоторах генов-мишеней. Этот сайт называют CRE (от сАМ Р

57
responsive element). Соответственно транскрипционные факторы, связывающиеся с
CRE, называются CREB (C R E binding protein) и CREM (C R E modulator). Оказа­
лось, что эти факторы играют важную роль в спермиогенезе. У мышей половое со­
зревание сопровождается появлением больших количеств фактора CREM. Ген сгет
экспрессируется в сперматоцитах начиная со стадии пахитены. Синтез же соответ­
ствующего белка происходит только на стадии ранней сперматиды. У сперматозо­
идов белок CREM отсутствует. Наблюдения на нокаутированных мышах сгет~
показали, что такие мыши не имеют видимых отклонений от нормы за исключе­
нием изменения семенников, масса которых на 20-25% меньше массы семенников
нормальных мышей. Гомозиготные самцы сгет.~/~ в отличие от самок были сте­
рильными: в семенной жидкости сперматозоиды отсутствовали. При микроскопи­
ческом исследовании семенных канальцев оказалось, что сперматогенез у мышей,
лишенных гена сгет, не шел дальше стадии ранней сперматиды. Спермиогенез был
полностью подавлен, хотя клетки Сертоли имели нормальный вид.
У дрозофилы во время спермиогенеза экспрессируется специфический для муж­
ских половых клеток ген don juan. Начало синтеза белка Don Juan приходится
на стадию удлиненной сперматиды и продолжается в течение всего спермиогене­
за. Этот белок молекулярной массой 29 кДа характеризуется высоким содержанием
лизина. Как полагают, белок Don Juan участвует в дифференциации митохондрий
и обеспечивает морфогенез жгутика спермия.
Важный момент в дифференциации сперматид — экспрессия специфических для
сперматозоидов трансмембранных белков, которые обеспечивают адгезию мужской
гаметы и ооцита. У млекопитающих эту функцию выполняют /3-1,4-галактозил-
трансфераза, зонадгезин и фертилин. Последний принадлежит семейству белков
ADAM (a disintegrin and metalloprotease), одна из функций которых состоит в про­
цессинге рецепторов плазматической мембраны.

Л итература

Айзенштат Т. Б. Цитология оогенеза. М., 1984. 247 с.

Алберте Б., Брей Д ., Л ьюис Док., Рэфф М. и др. Молекулярная биология клетки. М ,
1987. Глава 14. Половые клетки и оплодотворение. С. 7 51.
Дроздов А. А ., Иванков В .Н . Морфология гамет животных. М., 2000. 458 с.
Иванова-Казас О. М. Эволюционная эмбриология животных. Глава 2. Половые клетки
и оплодотворение. СПб., 1995. С. 19-31.
Рузен-Ранге Э. Сперматогенез у животных. М., 1980. 255 с.
Современные проблемы сперматогенеза. М., 1982. 259 с.
Сперматогенез и его регуляция. М., 1983. 232 с.
Ambros V. microRNAs: tiny regulators with great potential / / Cell. 2001. Vol. 107. F. 823-
826.
Davidson E. H. Gene activity in early development. N.-Y., 1986. 670 p.
Extavour C. G., Akam M Mechanisms of germ cell specification across the motazoans:
epigenesis and preformation / / Development. 2003. Vol. 130. P. 5869-5884
 Глава 2. ОПЛОДОТВОРЕНИЕ

Оплодотворение, исходный момент возникновения новой генетической индиви­

дуальности, представляет собой процесс соединения женской и мужской гамет. В
результате оплодотворения возникает одноклеточный зародыш с диплоидным набо­
ром хромосом и активируется цепь событий, лежащих в основе развития организма.
Биологическое значение оплодотворения огромно: будучи предпосылкой разви­
тия новой индивидуальности, оно вместе с тем является условием продолжения жиз­
ни и эволюции вида.
Следует подчеркнуть, что оплодотворение представляет собой не одномомент­
ный акт, но именно процесс, занимающий более или менее продолжительный от­
резок времени. Это многоступенчатый процесс-, в котором различаются следующие
этапы: привлечение сперматозоида яйцом, связывание гамет и, наконец, сльлпие

Рис. 2-1. Основные этапы Рис. 2-2. Осеменение яйца

оплодотворения ооцита морского ежа. озерной форели (по: Гинзбург, 1968).
1 — привлечение сперматозоидов; 2 —- контакт1 — zona гad iat а; 2 концевой ка-
со студенистой оболочкой ооцита; 3 — акросом- налец микропиле; 3 — оплодотворя-
ная реакция; 4 — слияние плазмалемм спермия ющий спермий; 4 — кортикальные
и ооцита; 5 — вхождение ядра спермия в ооплаз- альвеолы; 5 — ооплазма.
му; б — студенистая оболочка; 7 — плазматиче­
ская мембрана ооцита; 8 — ооплазма.

59
мужских ii женских половых клеток (рис. 2-1). В научной литературе события, свя­
занные со сближением гамет иногда называют осеменением различая наружное и
внутреннее осеменение, в зависимости от того, выводятся мужские половые клетки
в окружающую среду или в половые органы женской особи. Наружное осеменение
характерно для животных, обитающих в водной среде. Внутреннее осеменение при­
суще главным образом наземным животным, хотя оно достаточно часто встречается
и у обитателей водной среды. Осеменение может быть свободным при котором все
области ооцита доступны спермиям, но может быть и ограниченным, когда на по­
верхности яйцеклетки имеется плотная оболочка с микропиле (рис. 2-2). При внут­
реннем осеменении у ряда животных мужские гаметы передаются самкам в виде
сперматофоров (от греч. сптер^а — семя; (ророс — несущий), особых капсул, содер­
жащих сперматозоиды. Сперматофоры сначала выводятся в окружающую среду, а
затем тем или иным способом переносятся в половые пути самки.
Соединение гамет предопределяет возможность кариогамии (от греч. xapuov —
орех, ядро; уб^ос — брак), или слияния ядер. Благодаря кариогамии происходит объ­
единение отцовских и материнских хромосом, ведущее к образованию генома новой
особи. В результате слияния гамет возникает диплоидная зигота, восстанавливает­
ся способность к репликации ДНК и начинается подготовка к делениям дробления.
Механизмы активации яйца к развитию относительно автономны. Их включение мо­
жет быть осуществлено и помимо оплодотворения, что происходит, например, при
естественном или искусственном девственном развитии, или партеногенезе (от греч.
Ttap’Sevioc — девственный).
Интерес к проблеме оплодотворения выходит далеко за рамки собственно эм­
бриологии. Слияние гамет — плодотворно используемая модель для изучения тонких
молекулярных и клеточных механизмов специфического взаимодействия клеточных
мембран; для изучения молекулярных основ активации метаболизма и пролифе­
рации соматических клеток. Общебиологический интерес представляет и то, что
оплодотворение являет собой яркий и, может быть, уникальный пример полного об­
ращения клеточной дифференциации. Действительно, высокоспециализированные
половые клетки не способны к самовоспроизведению. Они гаплоидны и не могут
делиться. Однако после слияния они превращаются в тотипотентную клетку, кото­
рая служит источником формирования всех клеточных типов, присущих данному
организму.
История открытия оплодотворения теряется в глубине веков. Во всяком слу­
чае, в XVIII столетии итальянский естествоиспытатель аббат Лаццаро Спалланца­
ни (1729-1799) экспериментально доказал, что оплодотворение зависит от наличия
спермы, и впервые осуществил искусственное оплодотворение яиц лягушки, смеши­
вая их со спермой, полученной из семенников. Тем не менее смысл происходящих
при этом событий оставался неясным практически до последней четверти XIX ве­
ка, когда Оскар Гертвиг (1849-1922) в конце 1870-х годов, изучая оплодотворение у
морских ежей, пришел к заключению, что сущность этого процесса состоит в сли­
янии ядер половых клеток. Вместе с работами бельгийца Эдуарда ван Бенедена
(1883, аскарида), немецкого ученого Теодора Бовери (1887, аскарида), швейцарско­
го зоолога Германа Фоля (1887, морская звезда) исследования О. Гертвига заложили
основу современных представлений об оплодотворении. Следует подчеркнуть, что
именно эти работы послужили веским основанием для предположения о том, что
ядро является носителем наследственных свойств. Именно Т. Бовери (1862-1915) в

60
серии блестящих цитологических исследований обосновал в конце 1880-х годов тео­
рию индивидуальности хромосом и создал основу цитогенетики.
Вскоре после выяснения сущности оплодотворения исследователи сосредоточи­
ли внимание на механизмах, лежащих в основе этого процесса. Эта область иссле­
дований сохраняет актуальность и в наше время. Пальма первенства в построении
теории оплодотворения принадлежит американскому исследователю Франку Лилли
(1862-1915). Изучая свойства «яичной воды», т. е. морской воды, в которой некото­
рое время находились неоплодот воренные яйца морского ежа АгЪасга или полихеты
Nereis, Лилли обнаружил, что из яиц выделяется вещество, которое обладает способ­
ностью склеивать спермин в комки. Наблюдаемая агглютинация оказалась видоспе­
цифичной, и Лилли назвал фактор агглютинации, выделяемый неоплодотворенным
яйцом, веществом оплодотворения, или фертилизином (от англ. fertilization — опло­
дотворение). Суть выдвинутой Лилли теории оплодотворения состоит в признании
того, что в периферической области яйца находится фертилизин, который имеет
сродство к поверхностным рецепторам спермия (антифертилизин спермия). Благо­
даря этому сродству фертилизин связывает, согласно Лилли, спермии (рис. 2-3).
Однако, чтобы претендовать на универсальность и объяснить не только механизм
соединения гамет, но и причины агглютинации спермиев, возможность предотвраще­
ния полиспермии, высокую специфичность процесса оплодотворения и т д., теория
фертилизина нуждалась в многочисленных допущениях, под гнетом которых она в
конце концов и угасла.

sp .gr

Рис. 2-3. Схема, иллюстрирующая теорию ферти­

6
r
4
o v .g r

лизина Ф. Лилли (по: Дорфман, 1945).

1-3 — последовательные этапы оплодотворения;
4 — сперматозоид с рецептором (черная точка на голов­
ке); 5 — фертилизин с двумя зонами: областью sp. gr.,
воспринимающей рецептор сперматозоида, и областью
ov. gr., взаимодействующей с рецептором яйца; 6 — ре­
цептор яйца.

Уже в ходе ранних исследований оплодотворения возникло представление о га-

монах — веществах, которые обеспечивают активацию или блокирование отдельных
этапов оплодотворения. В соответствии с их происхождением различали гиногамо-
ны, выделяемые яйцеклетками, и андрогамоны, вырабатываемые мужскими поло­
выми клетками. Так, полагали, что гиногамон 1, диффундируя из яйца, активирует
движение сперматозоида, преодолевая действие андрогамона 1 , который ингибиру­
ет движение сперматозоида. Гиногамон 2 — синоним фертилизина, а андрогамон 2 —
антифертилизина спермия.
В пятидесятые годы X X столетия идея о взаимодействии фертилизина с ан-

61
тифертилизином трансформировалась в гипотезу специфического фагоцитоза. Со­
гласно этой концепции, наличие на поверхности яйца и спермия взаимодействующих
молекул обеспечивает комплементарную реакцию по принципу застежки «молнии»,
благодаря которой спермий оказывается поглощенным яйцом.
Несмотря на известную умозрительность, эти и многие другие подобные гипоте­
зы о механизмах взаимодействия сперматозоидов и яиц сыграли свою положитель­
ную роль, обнаружив, во-первых, существование целого семейства специфических
молекул на поверхности взаимодействующих гамет и, во-вторых, положив начало
планомерным исследованиям природы этих молекул.
Вторая половина прошлого столетия — период расцвета ультраструктурных и
молекулярно-биологических исследовании, которые выявили большое разнообразие
конкретных форм клеточного взаимодействия при оплодотворении. Стало ясно, что
универсальная теория оплодотворения, если и может существовать, то только как
свод некоторых самых общих принципов организации этого процесса.
Конкретные механизмы оплодотворения зависят от множества факторов. Доста­
точно сказать о своеобразии оплодотворения у животных с наружным и внутренним
осеменением. Очевидно, что определенные различия процесса оплодотворения обу­
словлены и тем, что у разных животных проникновение спермия в яйцо происходит
на разных этапах оогенеза. У многих аннелид, моллюсков, нематод и ракообразных
сперматозоид проникает в ооциты первого порядка на стадии профазы. У других
кольчатых червей, моллюсков и у насекомых — на стадии метафазы первичного
ооцита. Для многих позвоночных характерно осеменение на стадии метафазы вто­
ричного ооцита. У некоторых кишечнополостных и у морских ежей оплодотворение
происходит на стадии зрелого яйца уже после завершения делений созревания и вы­
деления направительных, или редукционных телец. Наконец, нельзя не вспомнить
и разнообразие типов сперматозоидов, среди которых имеются жгутиковые формы
и спермии без жгутиков (например, амебоидные спермии нематод), с акросомой и
без нее, имеющие акросомную нить и лишенные ее. Естественно, что в каждом та­
ком случае конкретные механизмы, обеспечивающие тонкое взаимодействие между
половыми клетками, различаются.
Активация движения спермиев. Сперматозоиды, энергетический ресурс ко­
торых ничтожен, и активная жизнь в лучшем случае продолжается считанные часы,
находятся в семенниках и семенной жидкости в неподвижном состоянии. Процесс
активации сперматозоидов широко распространен в животном мире и у разных жи­
вотных, изученных в этом отношении, обнаруживаются различные ее механизмы.
Во многих случаях инициация движения сперматозоидов обусловлена сигнала­
ми, идущими из внешней среды. Среди этих сигналов — разнообразные физические
и химические факторы, такие, как изменение соотношения О 2/С О 2, pH, концентра­
ции тяжелых металлов и др.
У лососевых рыб спермии неподвижны в среде с высокой концентрацией К + ,
характерной для семенной жидкости. В среде с низкой концентрацией К + спермии
приобретают подвижность, что, видимо, связано с выходом К + через соответству­
ющие каналы плазматической мембраны. Действительно, блокаторы К +-каналов,
подавляющие выход К+, предотвращают и начало движения спермиев. При выхо­
де К+ изменяется заряд плазматической мембраны спермия и повышается концен­
трация внутриклеточного Са2+, который высвобождается из внутренних депо или
поступает извне. При этом происходит активация аденилилциклазы и усиливает­

62
ся синтез циклического АМФ, который активирует протеинкиназу А. Активность
этого фермента является предпосылкой активации тирозинкиназы. Последняя обес­
печивает фосфорилирование тирозипоных остатков особого фосфопротеина (MIPP,
motility initiating phosohoprotein). локализованного в основании жгутика спермия,
по-видимому, в его центриолярной области и ин1щиирующего его движение.
Сперматозоиды костистых рыб и некоторых других животных находятся в со­
стоянии покоя, если среда изотояична семенной жидкости, осмолярность которой
у рыб составляет около 300 мОсм/кг. У пресноводных костистых рыб и амфибий
спермин приобретают подвижность при разбавлении семенной жидкости гипотони­
ческим раствором, тогда как у морских костистых рыб тот же эффект достига­
ется гипертоническим раствором. Другими словами, подвижность спермиев у рыб
обусловлена не абсолютным значением осмолярности, а ее соответствием условиям
среды, в которой происходит естественный нерест животного (рис.2-4).

Иглобрюх Данио
(солоноводная форма) (пресноводная форма)
-700^
-300 8 -
-150В

о'S4 100 100

к
S
о.

50 50
6
о
к
и
fc
о
t
с
75 120
Время, с

Рис. 2-4- Зависимость подвижности спермиев рыб

от осмолярности среды.
В опыте с иглобрюхом осмолярность воды повышали добавлением
5 М NaCl, в опыте с данио ее понижали добавлением воды.

Привлечение спермиев. Регуляция активности и направления движения спер­

матозоидов обусловлена некими сигналами, которые обеспечивают взаимодействие
гамет на расстоянии. Различают хемокинез — процессы, регулирующие активность
движения спермиев, и хемотаксис — процессы, регулирующие направление их дви­
жения.
У многих морских животных с наружным осеменением (например, у кишечнопо­
лостных, моллюсков, иглокожих, первичнохордовых) описаны привлекающие спер­
мин вещества, или аттрактанты (от лат. attractio — притяжение), которые выде­
ляются яйцом во внешнюю среду. Природа этих видоспецифических аттрактантов
мало изучена. Иногда выделение такого рода гамонов приурочено к определенной
стадии оогенеза. Например, у некоторых кишечнополостных яйцо приобретает спо­
собность привлекать сперматозоиды только по завершении второго мейотического
деления.

63
 Спермии S. purpuratus Спермин A. punctulata

Рис. 2-5. Аминокислотный состав сперакта и резакта морских ежей

и специфичность их действия на сперматозоиды.
Сперакт видоспецифически активирует спермии S. purpuratus, резакт — спермии
A. punctulata.

У морских ежей из студенистой оболочки яйца выделены небольшие пептиды,

насчитывающие 10-14 аминокислотных остатков, которые видоспецифически сти­
мулируют и метаболизм сперматозоидов, и их подвижность. Наиболее подробно
исследованы сперакт, пептид, полученный из яиц Strongylocentrotus purpuratus, и
резакт, выделенный из яиц Arbacia punctulata (рис. 2-5). Сходные пептиды (SAP,
sperm activating peptides) обнаружены у представителей всех отрядов морских ежей.
Все они имеют видовую специфику и не могут активировать спермии другого вида.
Диффундируя в морскую воду, эти пептиды оказывают не только активирующее,
но и положительное хемотаксическое действие на сперматозоиды своего вида. При
этом, например, скорость движения сперматозоида в градиенте резакта возрастает
до 130 мкм/с.
Указанные пептиды взаимодействуют со специфическими рецепторами плазма­
тической мембраны сперматозоида. Рецепторы сперакта и резакта представляют
собой кислые гликопротеины молекулярной массой соответственно 77 и 160 кДа.
Эти рецепторы либо связаны с гуанилилциклазой (как в случае рецептора сперак­
та), либо сами обладают гуанилилциклазной активностью (рецептор резакта). Уже
через 3 с после взаимодействия мембраны с сигнальным пептидом гуанилатциклаза
дефосфорилируется и приходит в активное состояние. В результате этого в клетке
накапливается цГМФ, активируются протеинкиназы, индуцируется приток N а+ и
отток Н+ из спермия, что приводит к увеличению внутриклеточного pH, стимуля­
ции скорости дыхания и усиленной активности жгутика.
Первичное связывание гамет. Процесс связывания спермия с поверхностью
яйца обусловлен двумя механизмами. У ряда животных взаимодействие половых
клеток осуществляется специальными молекулами, которые встроены в плазмати­
ческие мембраны гамет, у других соответствующие молекулы появляются на поверх­
ности спермия в результате акросомной реакции. Например, первичное связывание

64
половых клеток у нематоды С. elegans обусловле­
но интегральным белком плазматической мембраны
спермия — SPE-9, который в качестве лиганда (от
лат. ligo — связывать) взаимодействует с соответству­
ющим рецептором ооцита (рис. 2-6). У млекопитаю­
щих первичное связывание спермия с яйцом происхо­
дит только после изменения структуры его плазмати­
ческой мембраны и надмембранного комплекса. Спер­
матозоид, взятый из эпидидимиса и уже способный к
активному движению, тем не менее, не может закре­
питься на поверхности яйцевой клетки. Эту способ­ Рис. 2-6. Первичное связыва­
ность спермии приобретают в половых путях самки, ние гамет нематоды Caenorhabdi-
tis elegans.
где под воздействием среды происходит преобразова­ 1 — белок SPE-9; 2 — рецептор
ние мембраны сперматозоида — так называемая капа- ооцита.
ситация (от англ. capacity — способность). В ходе ка-
паситации, как полагают, происходит изменение липидного состава плазматической
мембраны спермия, ведущее к ее дестабилизации в области акросомного пузырька.
Важными элементами капаситации являются удаление своеобразного молекуляр­
ного покрова с поверхности спермия и разблокировка молекул адгезии, которые
обеспечивают первичное соединение спермия с яйцеклеткой. У млекопитающих мо­
лекулы адгезии сперматозоида представлены, в частности, ферментом галактози-
лтрансферазой. Галактозилтрансфераза (ГалТаза) принадлежит к обширному се­
мейству гликозилтрансфераз, участвующих обычно в синтезе полисахаридных це­
пей разных гликоконъюгатов, включая гликопротеины, гликолипиды и др. Функция
гликозилтрансфераз состоит в переносе сахарного остатка с молекулы донора на
акцептор. В отсутствии акцептора гликозилтрансферазы образуют инактивирован­
ный комплекс с молекулой-донором. Галактозилтрансфераза обнаруживается уже
на стадии первичных половых клеток, где она как молекула клеточной адгезии,
видимо, обеспечивает миграцию первичных половых клеток в зачатки гонад. На
ранних этапах сперматогенеза ГалТаза равномерно распределена по поверхности
сперматоцитов, но при формировании сперматид она концентрируется в той области
клетки, которая дает переднюю половину головки спермия. В эпидидимисе ГалТаза
спермия инактивируется благодаря взаимодействию с галактозамингликаном —N-
ацетилгалактозамином, молекулы которого плотно прикрывают активные участки
галактозилтрансферазы. В ходе капаситации эти полимерные молекулы удаляются
с поверхности сперматозоида, в результате чего молекулы плазматической мембра­
ны последнего приобретают способность к взаимодействию с поверхностью яйца
(рис. 2-7).
Значение галактозилтрансферазы для оплодотворения у млекопитающих ярко
проявляется у мышей, имеющих мутации комплекса T/t. Этот комплекс, распо­
ложенный в проксимальной области 17-й хромосомы, состоит из большого числа
аллелей — доминантных (Т ) и рецессивных (t). При мутациях комплекса T/t обна­
руживаются различного рода нарушения сперматогенеза, оплодотворения и ранне­
го эмбриогенеза. Сперматозоиды, имеющие мутантные аллели, отличаются большей
оплодотворяющей способностью по сравнению с нормальными спермиями. Если при
скрещивании самцов дикого типа ( + / + ) и мутантных самок (tl2 / + ) соотношение
потомков с генотипами ( + / + ) и (tl2 / + ) составляет 1: 1, то среди потомков сам-

65
 Рис. 2-7. Распределение встроенной в мембрану галактозилтрансферазы
(ГалТаза) на разных этапах сперматогенеза и
у функционально зрелого сперматозоида (по: Shur. 1989).
А — первичная половая клетка; Б — сперматопит; В — сперматида; Г —
спермий из эпидидимиса, инактивированный лактозамингликаном (LAG);
Д — капаситация, деблокировка ГалТазы; Е — взаимодействие ГалТазы спер­
мия с молекулами zona pellucida яйца.

цов (t l 2 / + ) н самок ( + / + ) 95% имеют мутантный аллель (И 2/ + ) Очевидно, что

спермии « tl2 » при оплодотворепии имеют явные преимущества перед спермиями
«+ ». Поскольку спермии «И 2 » отличаются необычно высоким уровнем содержания
ГалТазы в плазматической мембране, логично предположить существование кор­
реляции между оплодотворяющей способностью сперматозоида и активностью его
галактозилтрансферазы.
Возможно, капаситация имеет более широкое распространение, чем это пред­
ставляется в настоящее время. Выяснилось, например, что, как и у млекопитаю­
щих, спермии креветки Sicyonia ingentis перед тем, как они приобретут способ­
ность к оплодотворению, также претерпевают некоторые преобразования, нахо­
дясь в семяприемниках самки. Оплодотворяющую способность спермии гидроидно­
го полипа Obelia приобретают лишь после прохождения через крышечку гонангия.
Сравнительно-эмбриологические исследования молекулярных механизмов капаси-
тации спермиев животных еще только начинаются.
А к р о со м н а я реакция. Как уже было отмечено, у многих животных первич­
ное связывание половых клеток осуществляется в ходе так называемой акросомной
реакции. Акросомная реакция в деталях существенно различается у разных видов
животных в зависимости от структурных и функциональных особенностей сперма­
тозоидов. Сущность этой реакции, однако, неизменна: она состоит в секреции содер­
жимого акросомного пузырька. В результате экзоцитоза находящиеся в акросомном
пузырьке гидролитические ферменты попадают на поверхность яйца и разрушают
оболочки, прикрывающие его плазматическую мембрану.
Извест ны, по крайней мере, два Tima акросомной реакции. В одном случае акро­
сомная реакция служит необходимым условием связывания гамет. Так, например,
у иглокожих в результате экзоцитоза содержимого акросомного пузырька на по­
верхности спермия открываются молекулы, которые обеспечивают его закрепление
на яйцеклетке. Возможны, однако, и обратные отношения, когда акросомная реак­
ция становится возможной лишь после закрепления сперматозоида на поверхности
яйца. Этот Tim взаимодействий характерен для млекопитающих.
Триггером акросомной реакции у иглокожих служат некоторые компоненты
студенистой оболочки яйца. Так, у морской звезды Asterina pectinifera в студени­

66
стой оболочке выявлен сульфатированный гликопротеин (ARIS, acrosome reaction
inducible substance), который при наличии особого кофактора видоспецифически
индуцирует акросомную реакцию. У морских ежей аналогичную функцию выпол­
няют гликопротеины 82 и 138 кДа. Восприятие этих сигналов обеспечивается соот­
ветствующими рецепторами мембраны спермия, в частности гликопротеином, кото­
рый, возможно, является Са2+-каналом или же эффектором поступления внешнего
Са2+.
В результате активации указанных рецепторов увеличивается концентрация
Са2+ в цитозоле клетки, усиливается выход Н+ и повышается pH внутри сперма­
тозоида. Как известно, увеличение концентрации ионов кальция в клетке обычно
служит предпосылкой различного рода секреторных процессов, будь то секреция
инсулина в клетках поджелудочной железы или выделение нейротрансмиттеров в
синаптических окончаниях. У сперматозоида повышение уровня внутриклеточного
кальция сверх определенного порога служит сигналом к началу экзоцитоза содер­
жимого акросомного пузырька, в ходе которого мембрана пузырька сливается с
плазматической мембраной сперматозоида. Благодаря этому содержимое пузырька
секретируется во внешнюю среду, а различные гидролитические ферменты, нахо­
дившиеся в акросомпом пузырьке, приходят в контакт со студенистой и желточной
оболочками яйца и начинают их разрушать (рис. 2- 8 ).

Рис. 2-8. Акросомная реакция спермия морског о ежа (по Saunders, 1970).
А — головка спермия до акросомной реакции; Б, В — экзоцитоз акро­
сомного пузырька; Г, Д — формирование акросомной нити (полимеризация
актина) .
X— мембрана акросомного пузырька; 2 — плазматическая мембрана: 3 —
гранулярный актин; 4 - - экзоцитоз акросомного пузырька; 5 — акросомная
нить; 6 —фибриллярный актин; 7 — область локализации биндина.

Повышение внутриклеточного pH, обусловленное выведением Н+ и поступле­

нием Na+ , вызывает, по крайней мере, два важных события. Во-первых, происхо­
дит полимеризация актина, сосредоточенного в субакросомальной области спер­
мия морского ежа в виде мономеров. Благодаря этому возникает акросомная
пить, образованная актиновыми микрофиламентами и мембраной акросомного пу­
зырька. Во-вторых, защелачивание внутренней среды спермия способствует ак­
тивации АТФазы и тем самым интенсификации движения жгута сперматозоида
(рис. 2-9).
В результате экзоцитоза содержимого акросомного пузырька и формирования
акросомной нити на ее поверхности оказывается один из главных компонентов мем­
браны акросомной гранулы- биндин (от англ. to bind — связывать) (рис. 2-10). Пер­
воначально биндин транслируется как крупная молекула, насчитывающая более 480
аминокислотных остатков (а.о.). Однако примерно половина этой молекулы игра­
ет вспомогательную роль при транспортировке и упаковке биндина в акросомной

67
 Выведение Разрушение I
гидролаз желточной
оболочки
Экзоцитоз
►tCa2' акросомного
пузырька
ARIS Связывание
Экспозиция сперматозоида
биндина с ооцитом
Рецептор
спермия
Полимеризация Образование
акросомной
актина нити
iH 3 Рост pH

Усиление
Активация подвижности
АТфазы сперматозоида

Рис. 2-9. Схема событий, ведущих к акросомной реакции и активации сперматозоида.

грануле на завершающих стадиях сперматогенеза. Зрелый биндин у разных ви­

дов морских ежей имеет в своем составе всего 220-240 а.о. Оказалось, что в со­
ставе биндинов, выделенных из спермиев представителей разных групп морских
ежей (Clypeasteroidea, Arbaciidae, Strongylocentrotiidae), которые в ходе эволюции
разошлись около 200 млн лет тому назад, имеется консервативная последователь­
ность примерно из 60 а.о. Эта консервативная центральная область фланкирована
более изменчивыми амипотерминальной и карбокситерминалыюй областями. Заме­
чательной особенностью этих участков является то, что они содержат повторяю­
щиеся элементы, благодаря которым биндин приобретает свойства белкового клея,
придающие ему дополнительные адгезивные свойства Изолированный биндин ви­
доспецифически агглютинирует яйца, что указывает на наличие на поверхности
яиц особых рецепторов биндина. Рецептором биндина у морских ежей служит ком-

Рис. 2-10 Иммуноцитохимическая локализация биндина

в области прикрепления спермия к яйцу морского ежа
(по: Моу, Vaquier, 1979).
Стрелкой указана область сосредоточения преципитата, образова­
ние которого инициировано антителом к биндину. Отчетливо видна
локализация преципитата между акросомной нитью и микроворсин-
кой яйца. 1 — ядро спермия; 2 — ядерная ямка, в которой распола­
гался акросомный пузырек; 3 — микроворсинка яйца; 4 — цитоплазма
яйца.

68
плекс из четырех одинаковых гликопротеиновых субъединиц Каждая субъедини­
ца 350 кДа имеет короткую карбокситерминальную цитоплазматическую область,
трансмембранную область и, наконец, внеклеточный взаимодействующий с бинди-
ном домен, часть которого имеет структурное сходство с белком теплового шока
Hsp 70. Во внеклеточном домене выявлена зона с высоким содержанием цистеина.
Как полагают, именно здесь образуются дисульфидные мостики, соединяющие субъ­
единицы в гомотетрамер— функционально активный рецептор биндина. Яйцо мор­
ского ежа содержит около 1,25-106 молекул этого рецептора, которые распределены
на поверхности яйца неравномерно, что в известной степени предопределяет воз­
можную область проникновения сперматозоида в яйцо. Предполагается, что кроме
связывания сперматозоида с яйцом биндин участвует в процессе слияния мембран
взаимодействующих гамет.
У млекопитающих акросомной реакции предшествует заякоривание спермия на
оболочке яйца. Акросомная пить у них не образуется (рис. 2-11). Аналогом желточ­
ной оболочки у млекопитающих служит zona pellucida, которая представляет собой
своего рода внеклеточный матрикс, образующийся вокруг ооцита в период роста
последнего. ГГри оплодотворении zona pellucida выполняет несколько важных функ­
ций, в том числе она обеспечивает узнавание яйца спермием, первичное связывание
спермия, запуск акросомной реакции и, наконец, блокировку полиспермии. Zona pel­
lucida образована гликопротеинами, число разновидностей которых у разных видов
млекопитающих колеблется от 2 до 4. У мыши выделены три гликопротеина ZP. ZP2
и ZP3 образуют гетеродимеры, которые соединяются в виде цепочек. ZP1 образуют
гомодимеры, служащие поперечными связками этих цепочек. Главным компонен­
том является гликопротеин ZP3 (83 кДа), который кроме структурной выполняет

Рис.. 2-11. Оплодотворение у млекопитающих (по: Muller, Hassel, 1999).

А — связывание сперматозоида с гликопротеином ZP3 яйцевой оболочки;
Б — акросомная реакция: экзоцитоз протеолитических ферментов и образо­
вание канала в яйцевой оболочке; В — слияние мембран взаимодействующих
гамет, обособление ядра и митохондрий. 1 — ядро сперматозоида; 2 — акро-
сома; 3 — ZP3; 4 zona pellucida; 5 — плазматическая мембрана яйцеклетки;
6 — кортикальные гранулы; 7 — обособленное ядро спермия в цитоплазме
яйца; 8 — митохондрии; 9 — экзоцитоз кортикальных гранул.

69
еще, по крайней мере, две функции, обеспечивая первичное связывание сперматозо­
ида и индуцируя акросомную реакцию. Карбокситерминальная область белка ZP3
сильно гликозилирована. Эта углеводная часть молекулы играет главную роль в
связывании сперматозоида. Что касается акросомной реакции, то она определяется
и углеводной и белковой частями этого гликопротеина.
Первичное связывание гамет у мыши обеспечивается, по меньшей мере, тремя
разными белками плазматической мембраны сперматозоида, взаимодействующими
с гликопротеином ZP3. Во-первых, это упоминавшаяся уже галактозилтрансфераза
мембраны спермия, которая взаимодействует с терминальной N-ацетилглюкозамин-
ной группой олигосахарида, входящего в состав ZP3. Во-вторых, у сперматозоида
имеется особый рецептор, взаимодействующий с остатком галактозы ZP3, и, на­
конец, на поверхности мужской гаметы обнаружена протеаза, которая специфиче­
ски связывается с определенным участком гликопротеина ZP3. После оплодотворе­
ния ZP3 под действием гликозидаз кортикальных гранул ооцита модифицируется
и утрачивает свою биологическую активность. Гомологи ZP3 выявлены у других
млекопитающих и человека. По-видимому, у млекопитающих разных видов имеется
своя специфика молекулярных механизмов первичного (до акросомной реакции) и
вторичного (после нее) связывания сперматозоида на поверхности оболочки яйца.
У мыши во вторичном заякоривании участвует белок ZP2. У спермиев свиньи оно
опосредуется содержащимся в акросоме проакрозином, предшественником протео-
литического фермента акрозина. Проакрозин в качестве молекулы адгезии функци­
онирует как белок, способный к связыванию фукозы zona pellucida. Особые белки
связывания обнаружены и у морской свинки.
Условием начала акросомной реакции у сперматозоидов мыши, по-видимому, яв­
ляется его взаимодействие с олигосахаридами молекулы ZP3. Предполагается, что
начало акросомной реакции обусловлено агрегацией соответствующих рецепторов
(белок 95 кДа и другие) в плоскости плазматической мембраны спермия. Эта агре­
гация стимулирует активность встроенной в мембрану тирозинкиназы и инициирует
тем самым цепь процессов, ведущих к акросомному экзоцитозу.
Закрепление сперматозоида на яйцевой оболочке создает условия, обеспечиваю­
щие высокую локальную концентрацию протеолитических ферментов, излившихся
из акросомного пузырька. Важную роль в разрушении zona pellucida играет, напри­
мер, /J-N-ацетилглюкозаминидаза, которая высвобождается при акросомной реак­
ции и облегчает прохождение спермия сквозь яйцевую оболочку.
У моллюска Hciliotis rufescens (морское ушко) в ходе акросомной реакции вы­
деляется белок лизин (16 кДа), который образует отверстие в желточной оболочке
яйца на основе неферментативного стоихиометрического механизма. Действие ли­
зина в высшей степени видоспецифично.
Так или иначе, в результате акросомной реакции оболочка яйца подвергается
энергичному разрушению. Прохождению сперматозоида сквозь оболочки яйца спо­
собствует и усиление двигательной активности жгута. Все это приводит к установ­
лению тесного контакта между плазматическими мембранами мужской и женской
гамет.
Ключевым элементом механизма активации акросомной реакции сперматозои­
дов животных служат гуаниннуклеотид-связывающие белки, или G-белки. Эти бел­
ки плазматической мембраны играют роль посредника между рецепторами мем­
браны и разнообразными белками-эффекторами клетки. G-белки стимулируют или

70
ингибируют эффективные белки, интегрируя сигналы от разного рода рецепторов,
усиливая сигналы рецептора и т. п.
Участие G-белков в процессах активации гамет, по-видимому, является одним из
древнейших свойств эукариот. Известно, например, что у дрожжей Saccharomyces
cerevisiac в половом процессе участвуют клетки а- и a -типов спаривания, которые
вырабатывают особые факторы спаривания — феромоны. Показано, что феромоны
одного партнера активируют G-белки другого партнера, запуская, таким образом,
целый ряд процессов, необходимых для спаривания клеток: блокируются клеточ­
ные деления, высвобождаются ионы кальция, изменяется активность транскрипции
генов. В частности, начинается экспрессия генов молекул адгезии — агглютининов,
обеспечивающих взаимное связывание клеток. Феромоны индуцируют также экс­
прессию генов fusl и fus2, белковые продукты которых локализуются на вершинах
клеточных отростков и обеспечивают слияние взаимодействующих клеток.
Слияние гамет. Место слияния мембран сперматозоида и яйцеклетки обыч­
но ограничено областью связывания сперматозоида. В ооцитах многих животных в
этой области часто возникает особый цитоплазматический вы рост— конус оплодо­
творения (рис. 2- 12 ), и образуются многочисленные микроворсинки, охватывающие
сперматозоид. Актиновый цитоскелет микроворсинок служит дополнительным ис­
точником энергии, направленной на погружение мужской гаметы в яйцо.

Рис. 2-12. Конус оплодотворения у мор­

ского ежа (по: Gilbert, 2003).
1 — цитоплазматический вырост; 2 —
ядро; 3 — митохондрия.

Молекулярный механизм слияния мембран взаимодействующих гамет еще не

раскрыт полностью. Известно, что слияние плазматических мембран клеток проис­
ходит при участии особых фузогенных белков (белков слияния). Такими свойствами,
в частности, обладают НА-белок вируса гриппа и F-белок вируса Сендай. Характер­
ной особенностью этих белков является наличие домена гидрофобных аминокислот.
Подобные белки обнаружены также в плазмалемме головки сперматозоида. Пред­
полагается, что в этом процессе может играть роль и биндин поскольку in vitro он
способствует слиянию фосфолипидных пузырьков.
Слившиеся мембраны спермия и яйца образуют единую систему, так что у мор­
ского ежа специфический гликопротеин 210 кДа плазматической мембраны спермия
через 45 мин после слияния гамет распределяется по всей плазматической мембране
зиготы.
Активация ооцита и блокирование полиспермии. Слияние мембран вза­
имодействующих гамет не только обеспечивает проникновение ядра сперматозоида

71
в яйцо, но и служит фактором активации последнего. Одновременно возникают
разнообразные явления, препятствующие множественному проникновению сперма­
тозоидов, или полиспермии, поскольку последняя ведет к нарушениям развития и
даже к гибели зародыша (рис. 2-13). У морского ежа одним из следствий связыва­
ния сперматозоида оказывается кратковременное поступление Na+ в яйцо, которое,
возможно, обусловлено действием акросомных белков на Ма+-каналы. Увеличение
концентрации Na+ в клетке ведет к ее деполяризации, связанной с резким изменени­
ем потенциала покоя. Перед оплодотворением потенциал покоя яйца морского ежа
составляет около -70 мВ. Спустя несколько секунд после слияния мембран гамет он
возрастает до +20 мВ. При этом плазматическая мембрана яйца теряет способность
к взаимодействию с мембраной добавочных спермиев. Это явление называют быст­
рой блокировкой полиспе-рмии. При сохранении потенциала покоя на уровне —70 мВ
или при низкой концентрации Na+ в среде полиспермия не блокируется. Наобо­
рот, при искусственном поддержании в пеоплодотворенном яйце положительного
потенциала взаимодействие гамет (и, следовательно, оплодотворение) становится
неосуществимым.

Рис. S-1S. Негативные последствия полиспермии у морского ежа

(по: Гилберт, 1997).
А — диспермное оплодотворение; женский и два мужских пронуклеуса
содержат по 18 хромосом. Б — образование четырех вместо нормальных двух
веретен деления; хромосомы распределяются между веретенами случайным
образом. В - - анафаза первого деления; хромосомы, прошедшие деление, кон­
центрируются в четырех точках. Г — на стадии четырех клеток ядра заро­
дыша содержат неравное число хромосом. Д — гибель зародыша. 1 — ооцит;
2 — мужские пронуклеусы, 3 — веретена деления.

Важным элементом молекулярного механизма активации яйца при оплодо­

творении служит изменение концентрации внутриклеточного свободного кальция
([Са2+];). Временное увеличение [Са2н ]; запускает сложный каскад сигналов, кото­
рые, по-видимому, регулируют разнообразные функции яйцеклетки вплоть до тран­
скрипции генов. Полагают, что амплитуда, частота и локализация кальциевых сиг­
налов может кодировать некую информацию, которая предопределяет нормальное
развитие событий в одноклеточном зародыше.
До недавнего времени существовало представление о том, что у первичноротых
животных (аннелиды, моллюски, членистоногие) и у вторичноротых (иглокожие,
асцидии, позвоночные) механизмы формирования кальциевых сигналов существен­
но различаются. Полагали, что у первичпоротых оплодотворение вызывает «кор­

72
тикальную вспышку» — активацию ионных каналов плазматической мембраны яй­
ца, благодаря которой происходит синхронный приток Са2+ из внешней среды по
всей поверхности яйца. Этому механизму противопоставляли выведение эндогенно­
го Са2+, из внутренних депо яйцеклетки вторичноротых, которое начинается в точке
проникновения сперматозоида и распространяется в виде волны по всему яйцу. Од­
нако изучение динамики концентрации ионов кальция с помощью конфокального
лазерного сканирующего микроскопа показало необоснованность такого протпвопо-
ставления. Оказалось, что и у морских ежей в момент связывания спермия с яй­
цом в кортикальном слое последнего происходит почти мгновенный подъем [Са2+|
в результате открытия Са2+-каналов оолеммы. Са 2+-волна, независимая от внеш­
них источников кальция, наблюдалась лишь через некоторое время после быстрого
подъема [Са2+].
Описаны два главных типа кальциевых волн в оплодотворенных яйцах. Так, у
иглокожих, рыб и амфибий обнаруживается единичная кальциевая волна. У мле­
копитающих и асцидий наблюдается серия многократных (12-25 раз) подъемов
[Ca2+ ]j. Природа этих осцилляций не вполне ясна. Предполагается, что в сперма­
тозоидах млекопитающих имеется особый осцилогенный фактор. Действительно,
эффект кальциевой осцилляции можно получить в опытах по микроинъекции спер­
матозоида в яйцо или после инъекции в яйцо фактора, экстрагированного из спер­
матозоида.
Исследование особенностей динамики содержания ионов Са2+ после оплодотво­
рения у новых объектов обнаруживает большее разнообразие типов, чем это пред­
полагалось ранее. Например, у немертин вслед за возникающей через 30 с после
контакта со сперматозоидом «кортикальной вспышкой», и характерной для первич­
норотых, начинается кальциевая осцилляция, типичная для млекопитающих. Эта
осцилляция обусловлена периодическим высвобождением Са2+ из внутриклеточ­
ного депо, поскольку она продолжается и при перенесении оплодотворенных яиц
немертины в бескальциевую воду.
К настоящему времени подробно исследованы молекулярные механизмы вы­
свобождения Са2+ из запасов яйцеклетки у вторичноротых. Ведущим событием
здесь является активация G-белков, которые, в свою очередь, активируют фос-
фолипазу С (рис. 2-14). Этот фермент расщепляет связанный с мембраной ли­
пид фосфатидилинозитол-4,5-дифосфат па диацилглицерол и инозитолтрифосфат
(ИТФ). ИТФ способствует высвобождению внутриклеточного запаса Са2+, тогда
как диацилглицерол, активируя протеинкпназу С, усиливает функцию Na+ /H +-
насоса. Результатом этой активации является откачка Н+ во внешнюю среду, под-
кнсление которой отмечалось уже первыми исследователями физиологии оплодо­
творения, описавшими выделение «кислоты оплодотворения». Повышение внутри­
клеточного pH, которое обусловлено активацией N a + /H + -HacocoB, служит необхо­
димым условием для стимуляции синтеза ДНК, синтеза белков, для активации си­
стем внутриклеточного транспорта. Как полагают в неоплодотворенной яйцеклет­
ке имеется фактор, ингибирующий ключевой, или «критический» белок (например,
один из белков рибосомы), подавление функциональной активности которого ве­
дет к угнетению фундаментальных клеточных процессов. Гипотеза «критического
белка» допускает, что имеется пороговое значение pH, превышение которого ведет к
диссоциации комплекса «ингибитор/критический белок» и к активации этого белка.
Эта гипотеза согласуется с данными о том, что у морского ежа клеточный транс-

73
 Рис. 2-14• Схема, иллюстрирующая возможные механизмы высвобождения Са2+
в оплодотворенном яйце (по: Myazaki et al., 1993).
Затемнена область слияния плазматических мембран (ПМ) спермия и ооцита (светлая).
X — гипотетический фактор плазматической мембраны спермия; Y — гипотетический цито­
зольный фактор спермия; R — рецептор илазмалеммы ооцита; САМ — молекула клеточной
адгезии; DAG — диацилглицерол; ER — эндоплазматическая сеть; G — G-белок; IP 3 —
инозитолтрифосфат; PIP 2 — фосфатидилинозитол-4,5-дифосфат; РКС - протеинкиназа С;
PLC — фосфолипаза С; РТК — протеинтирозинкиназа.

порт активируется уже через 5 мин после оплодотворения, а репликация ДНК —

через 25 мин.
Кроме инозитол-индуцируемого пути (IICR — inositol-induced Са release) в ооци-
тах ряда животных обнаружен и иной механизм высвобождения кальция, который
идентифицируется по специфическим, чувствительным к алкалоиду рианодину, ре­
цепторам. В этом случае высвобождение эндогенного Са2+ индуцируется ионами
кальция (O C R — Ca-induced Са release).
Повышение концентрации Са2+ в яйце вызывает экзоцитоз кортикальных гра­
нул. Роль Са2+ в экзоцитозе была продемонстрирована в опытах in vitro на препара­
тах кортекса яйца, а также в опытах, где ингибитор высвобождения Са2+ прокаин
подавлял активацию яйца, тогда как облегчающий транспорт Са2+ ионофор А23187,
напротив, активировал неоплодотворенные яйца. При очевидной доказанности роли
ионов кальция в экзоцитозе кортикальных гранул пока еще нет ясного понимания
молекулярных механизмов этого сопряжения. Поскольку между увеличением кон­
центрации Са2+ и началом экзоцитоза кортикальных гранул существует длящаяся
около 8 с пауза, сопряжение этих процессов, по-видимому, опосредовано каким-то
промежуточным звеном.
Содержимое кортикальных гранул попадает в перивителлиповое пространство,
ограниченное плазматической мембраной яйца и желточной оболочкой. Экзоцитоз в
яйцах морского ежа начинается примерно через 25 с после слияния гамет и длится
около 40 с, распространяясь по поверхности яйца от точки вхождения спермато­
зоида (рис. 2-15). Среди разнообразных компонентов кортикальных гранул имеют­
ся сульфомукополисахариды, протеазы и карбогидразы. Сульфомукополисахариды,
связывая воду, сильно разбухают, вследствие чего желточная оболочка заметно при­
поднимается над поверхностью яйца, образуя оболочку оплодотворения. Протеазы
разрушают некоторые белки оболочки и рецепторы биндина. Благодаря этому обо­
лочка оплодотворения теряет способность к первичному связыванию сперматозои-

74
 Рис. 2-15. Кортикальная реакция ооцита морского ежа
(по: Muller, Hassel, 1999).
1 — рецептор биндина; 2 — плазматическая мембрана ооцита; 3 — биндин; 4 — акро­
сомная нить; 5 — спермин; 6 Н+-насос; 7 — Na+ -канал; 8 — оболочка оплодотворения
(отслаивающаяся желточная оболочка); 9 — эндоплазматическая сеть; 10 — кортикальная
гранула; 11 — экзоцитоз кортикальной гранулы. DAG — диацилглицерол; 1Рз — инози-
толтрифосфат; PIP 2 — фосфатидил-инозитолдифосфат; РКС — протеинкиназа С; PLC —
фосфолипаза С; черными кружками обозначены ионы Са2 + .

дов. Карбогидразы, отщепляя некоторые углеводные компоненты желточной обо­

лочки, способствуют ее задубливанию. Все эти процессы — образование оболочки
оплодотворения, ее задубливание и утрата рецепторов биндина, — составляют эле­
менты медленной блокировки полиспермии.
Кортикальные гранулы имеют различные размеры и содержат разные вещества.
У морского ежа наблюдается строго координированная последовательность экзоци­
тоза разных видов кортикальных гранул, что хорошо видно на примере формирова­
ния гиалинового слоя на поверхности зародыша. Гиалиновый слой «цементирует»
бластомеры и, будучи фактором ограничения их подвижности, играет важную роль
в морфогенетических процессах. Главным компонентом гиалинового слоя является
белок гиалин, содержание которого в неоплодотворенном яйце достигает около 0 , 1%
общего белка. Кроме гиалина в этом слое обнаружены гомодимерный гликопротеин
эхинонектин и другие белки. Все эти компоненты выводятся на поверхность яйца из
кортикальных гранул в определенной последовательности. Примерно через 20 с по­
сле активации яйца выводится гиалин и антиген 1В10, через 2 мин — антиген 8 d ll,

75
а эхинонектин через 5 мин. Такая последовательность выведения компонентов, по-
видимому, и определяет многослойность гиалинового слоя.
Формирование мужского пронуклеуса. Важным событием процесса опло­
дотворения является преобразование ядра спермия в мужской пронуклеус. У мор­
ского ежа ядро спермия имеет коническую форму. Хроматин ядра, содержащий
специфические спермийные гистоны (SpHl, SpH2), сильно конденсирован. После
попадания ядра спермия в цитоплазму яйцеклетки оно утрачивает свою оболочку.
Sp-гпстоны фосфорилируются и заменяются «гистонами стадии дробления» (CS-
гистоны, cleavage stage) (рис. 2-16). В результате этой замены в хроматине восста­
навливается обычная длина нуклеосомного повтора (210 нуклеотидов), хроматин
деконденсируется, и таким образом создаются необходимые предпосылки для воз­
обновления репликации ДНК и транскрипции РНК.

I--------------- 1 V
J______________________ I______________________ !_________________

CS1 Н 0,2

Spl - о

Рис. 2-16. Формирование мужского пронуклеуса в процессе подготовки

к первому делению дробления у морских ежей (по: Poccia, 1989).
А — морфологические изменения, связанные с деконденсацией хрома­
тина: линия слева — продолжительность деконденсации пронуклеуса, линия
справа — период конденсации хромосом перед митозом. Б — изменение коли­
чества ДНК в мужском пронуклеусе после оплодотворения: пунктирная ли­
ния — количество ДНК. В — изменение количества гистона Н1 в хроматине
пронуклеуса: Spl — спермийный шетон HI, СЕ1 — гистон Н1, характерный
для периода дробления. По оси абсцисс — время после оплодотворения, мин,
по оси ординат — количество ДНК (Б) и гистонов (В), уел. ед.

Одновременно с преобразованием структуры хроматина происходит сборка ла-

минов и возникает новая ядерная оболочка. Образовавшееся гаплоидное ядро, гото­
вое к осуществлению матричных процессов, называют мужским пронуклеусом. Его
объем у морского ежа в 15 раз превышает объем ядра спермия (рис. 2-17). Оболочка
мужского пронуклеуса имеет сложный состав. В ее образовании участвуют элемен­
ты и материнской и отцовской природы: сохранившиеся везикулы ядерной оболочки
спермия и эндоплазматической сети яйца, и отчасти компоненты мембраны, синте­
зированные de novo. Преобразование ядра спермия в мужской пронуклеус — много­

76
ступенчатый процесс. Условия этого превращения успешно исследуются в опытах
по микроинъекции изолированных ядер мужских гамет в ооцитьг разных стадий со­
зревания, до и после оплодотворения. В такого рода экспериментах было показано,
в частности, что развитое мужского пронуклеуса не зависит от концентрации Са2+.
но требует определенного уровня pH.

Рис. 2-П . Формирование мужского пронуклеуса

(по: Zirkin et al., 1989).
А — ядро сперматозоида хомячка (указано стрелкой), инъециро­
ванное в ооцит; Б — деконденсация хроматина и увеличение разме­
ров ядра сперматозоида (стрелка) вскоре после оплодотворения; В —
мужской пронуклеус (стрелка).

Центриолярный аппарат. Вместе с ядром сперматозоида в цитоплазму яйце­

клетки попадает и центриоль, которая после поворота ядра оказывается между муж­
ским и женским пронуклеусами. Начиная с классических исследований Т. Бовери
(Boveri, 1900), утвердилось представление об отцовском происхождении центросо­
мы зиготы. Т. Бовери считал, что в ходе оогенеза центросома яйца утрачивается.
Действителыго, в зрелых яйцеклетках центриоли обычно отсутствуют. Следует под­
черкнуть, что исчезновение центросомы в ходе оогенеза не имеет фатального харак­
тера, и в случае партеногенеза, естественного или искусственного, центросома вос­
станавливается из материала ооцита. При активации яйца морского ежа аммонием
или с помощью ионофора А23187 центросомный антиген, исходно диспергирован­
ный по всей цитоплазме, начинает концентрироваться и в конце концов образует
компактную центросому, расположенную в центральной области яйца. В ходе этого
процесса, еще до его завершения, вокруг формирующейся центросомы образует­
ся скопление радиально расположенных микротрубочек, которые разрастаются и
формируют звезду. Вывод о том, что в цитоплазме ооцита сохраняются какие-то
элементы, которые при определенных условиях восстанавливают центросому, выте­
кает также из экспериментов, в которых центросому и центриоли получали de novo
в экстрактах из неоплодотворенных яиц.
Классическое представление об отцовской природе центросомы зародыша срав­
нительно недавно было поколеблено исследованиями лаборатории Джеральда Ш ат-
тена. Оказалось, что у мыши центросома зиготы имеет материнское происхождение
(Schatten et al., 1985). Не исключено, что материнская природа центросомы харак­
терна для всех млекопитающих.
Синкарион. В области центриоли формируется звезда (спермастер). Формиро-
вгшие спермастера, лучи которого, образованные микротрубочками, пронизывают
всю цитоплазму яйцеклетки, представляет собой, по существу, создание внутрикле­
точной транспортной системы, которая обеспечивает сближение пронуклеусов и их
последующее слияние. Женский пронуклеус, где бы он ни находился относительно

77
точки вхождения сперматозоида, неизбежно приходит в контакт с микротрубочками
звезды, после чего начинает мигрировать в направлении минус-конца микротрубо­
чек, сближаясь таким образом с мужским пронуклеусом. Слияние пронуклеусов,
или кариогамия завершает процесс оплодотворения. Объединившиеся пронуклеусы
образуют диплоидное ядро зиготы, или синкарион, хотя у ряда видов самостоятель­
ные пронуклеусы сохраняются вплоть до первого деления дробления.
В некоторых случаях активность синкариона проявляется тотчас после его воз­
никновения. У животных, яйца которых богаты желтком, часто наблюдается есте­
ственная полиспермия, при которой в ооцит попадает несколько спермиев. У трито­
на Cynops, например, в яйце бывает до 20 мужских пронуклеусов. При нормальном
развитии после образования синкариона невостребованные пронуклеусы дегенери­
руют, и образуется нормальное митотическое веретено. Если же синкарион из зи­
готы удатить, то центриоли дополнительных спермиев образуют мультиполярное
веретено, при этом нормальный ход дробления нарушается. В опытах с наложени­
ем лигатуры, отделяющей синкарион от дополнительных мужских пронуклеусов,
выяснилось, что синкарион Cynops является источником фактора ASSA (accessory
sperm suppression activity). ASSA подавляет, в частности, репликацию центриолей,
привнесенных сверхчисленными сперматозоидами, и таким образом предотвращает
нарушение процессов дробления.
Зиготическая центросома дуплицируется и расщепляется непосредственно пе­
ред завершением оплодотворения. Образование диплоидного ядра зиготы, восста­
новление способности к репликации ДНК и транскрипционной активности, нако­
нец, формирование центриолярного аппарата — все эти процессы финального этапа
оплодотворения — необходимые звенья в цепи событий, подготавливающих начало
следующей стадии эмбрионального развития стадии дробления.

Л итература

А лберт е Б., Б рей Д ., Л ью и с Дснс. и др. Оплодотворение / / Молекулярная биология

клетки. Т. 4. М., 1987. С. 40-49.
Гилберт С. Оплодотворение / / Биология развития. В 3 т. Т. 1. М., 1993. С. 35-73.
Гинзбург А. С. Оплодотворение у рыб и проблема полиспермии. М., 1968. 351 с.
И ванова-К азас О. М. Оплодотворение / / Эволюционная эмбриология животных. СПб.,
1995. С. 31-36.
 Глава 3. ДРОБЛЕНИЕ

Дробление представляет собой серию последовательных делений яйца, в резуль­

тате которых одноклеточная зигота превращается в многоклеточный зародыш и
восстанавливается характерное для соматических клеток соотношение объемов яд­
ра и цитоплазмы. У многих животных в период дробления происходит распределе­
ние цитоплазматических детерминант по бластомерам — ооплазматическая сегре­
гация. Наличие этих сигнальных молекул обеспечивает в разных областях зароды­
ша дифференциальную экспрессию генов и формирование клеточных клонов, ко­
торые представляют собой зачатки органов и тканей. Как мы увидим при знаком­
стве с развитием животных, на стадии дробления часто происходи!' детерминация
осей симметрии зародыша. В некоторых случаях циклически повторяющиеся раун­
ды клеточной репродукции, вероятно, выполняют и функцию биологических часов,
определяющих время экспрессии тех или иных событий. В результате дробления яй­
цо делится на клетки- бластомеры. Дробление завершается формированием бла­
стулы, морфологически недифференцированного многоклеточного зародыша, часто
имеющего внутреннюю полость.
Типы дробления. У разных видов животных дробление имеет свою особенную
организацию, характер которой определяется прежде всего строением яйца, в част­
ности распределением и количеством желтка, а также положением митотического
веретена в бластомерах относительно анимально-вегетативной оси яйца.
Дробление бывает полным — голобластическим, неполным — меробластическим
и поверхностным — абластическим (рис. 3-1). Полным называется дробление, при
котором яйцо делится на бластомеры целиком. При неполном дроблении деления
затрагивают только часть яйца, тогда как другая часть, обычно с высокой кон­
центрацией желтка, не делится. При поверхностном типе дробления яйцеклетка не
делится вовсе, и дело ограничивается лишь кариокинезом — делениями ядер.
Голобластическое дробление (от греч. оХос — целый, весь; рХасттос — росток, от­
прыск). Такое дробление характерно для яиц, содержащих сравнительно мало желт­
ка, т. е. для олиго- и мезолецитальных, а также для умеренно телолецитальных яиц.
Если в результате дробления образуются бластомеры примерно одинаковых раз­
меров, говорят о равномерном дроблении, если же бластомеры явно различаются
по величине — о неравномерном (рис. 3-2). Неравномерность дробления может быть
связана с концентрацией желтка в вегетативном полушарии (рис. 3-2, А). Иногда
она обусловлена сосредоточением в отдельных бластомерах больших объемов специ­
ализированной цитоплазмы, например цитоплазмы полярной лопасти у некоторых

79
 Рис. 3-1. Типы дробления.
А — голобластический тип: дробление яйца голотурии Leptosynapta inhaerens
(по: Runnstrom, 1927); Б — меробластическпй тип: дпскоидальное дробление кара­
катицы (по: Vialleton, 1888); В — абластический тип: раннее развитие наездника
Prcstwichia aquatica (по: Иванова-Казас, 1У50), слева видна оосома. — маркер клеток
половой линии.

Рис. 3-2. Неравномерное дробление.

А — дробление усоногого рака Sacculina carcini (по. Bocquet-Vedrine, 1964): мик­
ромеры на анимальном полюсе вступилп в четвертое деление дробления; обогащен­
ные желтком макромеры делятся более медленно. Б — стадия 2 бластомеров у мол­
люска Ilyanassa (по: Clement, Lehman, 1956): бластомер CD имеет полярную лопасть;
кружочками обозначены капельки липидов. В — дробление морского ежа Parac.cn-
trotus lividus (по: Bovery, 1907): вид сбоку на стадии 16 бластомеров; в анимальном
полушарии расположены мезомеры (светлые); вегетативное полушарие образовано
4 макромерами (зачернены) и 4 микромерами (светлые).

моллюсков (рис. 3-2, Б), или иными причинами, как в случае образования микро­
меров у морского ежа (рис. 3-2, В).
Меробластическое дробление (от греч. церос; — часть, доля). Этот тип дробления
наблюдается у животных с телолецитальнъгми яйцами, которые отличаются высокой
степенью концентрации желтка в вегетативной области. У головоногих моллюсков,
многих рыб, а также у рептилий и птиц дробление происходит только в относитель­
но небольшой части яйца, образующей как бы диск на поверхности яйцеклетки, —
дискоидальное дробление.

80
 Рис. 3-3. Основные типы дробления.
А — радиальное; Б — билатеральное; В — бирадиальное; Г — спиральное;
Д — полиаксиальное; Е — табличная палинтомия. I — стадия 4 клеток; II —
стадия 8 клеток; III — стадия 16 клеток.

Абластическое дробление (греч. а — в сложных словах «не»). Такое дробление ха­

рактерно для центролецитальных яиц насекомых, поэтому его называют также цен-
тралециталъным. В этом случае не происходит цитокинеза и деления цитоплазмы.
Делятся только ядра, которые находятся в центральной области яйца, откуда они
мигрируют по цитоплазматическим тяжам, пронизывающим яйцо, на поверхность.
Длительное время зародыш имеет синцитиальную структуру. Попав в поверхност­

81
ную цитоплазматическую бластему, или периплазму ( от греч. Tiepi — вокруг) ядра
образуют синцитиальную бластодерму, которая позднее целлюляризуется и дает на­
чало клеточной бластодерме зародыша.
По характеру расположения бластомеров в развивающемся зародыше различа­
ют несколько типов дробления, в частности радиальное, бирадиальное, спиральное,
билатеральное, ротационное и неупорядоченное дробление, а также табличную па-
линтомию и полиаксиальный тип дробления (рис. 3-3).
Радиальное дробление. У многих животных (книдарии, иглокожие, некоторые
первично-хордовые, рыбы и амфибии) дробящееся яйцо имеет радиальную ось сим­
метрии, при которой плоскость, проходящая через любой меридиан, делит зародыш
на две геометрически тождественные половины. При радиальном дроблении два
первых деления проходят во взаимно перпендикулярных меридиональных плоско­
стях, а третье — в экваториальной плоскости. Последующие деления чередуются в
широтной и меридиональной плоскостях. Если третье деление происходит в эква­
ториальной плоскости, то дробление равномерное, если же плоскость этого деления
смещена в анимальное полушарие, то дробление неравномерное и ведет к образова­
нию микромеров в анимальном и макромеров в вегетативном полушариях.
Спиральное дробление. У аннелид и моллюсков в результате первых двух взаимно
перпендикулярных меридиональных делений образуется стадия четырех бластоме­
ров. Начиная с третьего деления дробления митотические веретена располагаются
под некоторым углом к меридиональной плоское™. Благодаря этому образующиеся
четыре клетки анимального полушария несколько смешаются относительно клеток
вегетативного квартета и располагаются в промежутках между его бластомерами
квадрантами (рис. 3-4). Если смещение происходит по часовой стрелке (при наблю­
дении с анимального полюса), дробление называют дексиотропным (от лат. dexter —
правый), если же смещение происходит в противоположном направлении, дробление
называют леотропным. При последующих делениях наклоны веретен чередуются:
за дексиотропным следует леотропное деление и наоборот. В случае спирального
дробления его неравномерность может обнаружиться уже после первого деления
дробления. Если на стадии 4 бластоыеров все клетки одинаковых размеров, гово­
рят о гомоквадрантном дроблении, если же они различаются по размерам, то — о
гетероквадрантном (рис. 3-5).
Неравномерност ь дробления может проявляться и вдоль анимально-вегетативной
оси: при достаточно больших запасах желтка основной (вегетативный) квартет пред­
ставлен макроморами, а анимальный —- микромерами. В ходе спирального дробле­
ния бластомеры занимают строго фиксированное положение в системе и обознача­
ются специальными индексами (см. подробнее 8 .1).

Рис. 3-4- Спиральный тип дробле­

ния.
Дробление яйца моллюска Trochus
(по: Robert, 1902), стадия 8 бластоме­
ров: А — вид с анимального полюса;
В — вид сбоку. LQ — макромер; l q —
микромер.

82
 Рис. 3-5. Гомоквадрантное и гетероквадрантное дробление.
Стадия четырех бластомеров: А — эхиуриды Urechis саиро (по:
Newby, 1940), Б — полихеты Arenicola (по: Child, 1900).

Билатеральный тип дробления (рис. 3-6). Этот тип дробления характерен для
нематод, а также для многих низших хордовых, в том числе для асцидий, аппен-
дикулярий и бесчерепных. Характерной его особенностью является раннее проявле­
ние билатеральной симметрии. Например, у оболочников подразделение на левую
и правую части происходит уже при первом меридиональном делении дробления,
плоскость которого рассекает желтый серп оплодотворенного яйца на две симмет­
ричные половины. Билатеральность становится очевидной, когда вторая, тоже мери­
диональная борозда отделяет крупные передние бластомеры от задних более мелких
клеток.

Рис. 3-6. Билатеральный тип дробления у асцидии Styela partita

(по: Conklin, 1905)
А — стадия 16 бластомеров: черными точками показана миоплаз-
ма; Б — стадия 64 бластомеров. 1 — презумптивная нейроэктодерма; 2 —
клетки-предшественницы хорды; 3 - энтодерма; 4 — презумптивная ме­
зенхима; 5 — мезодерма. Вид с вегетативного полюса, передняя область
зародыша вверху.

Некоторые авторы выделяют в особый, ротационный, тип дробления млекопита­

ющих, у которых бластомеры при втором дроблении делятся во взаимно перпенди­
кулярных плоскостях. Наконец, у некоторых животных описано вращение бластоме­
ров. Изменеш-те положения бластомеров относительно анимально-вегетативной оси,
вероятно, характерно для ряда кишечнополостных. Согласно некоторым исследова­
ниям, у книдарий иногда наблюдается слабая взаимосвязь между клетками, которая
приводит к возникновению так называемого анархического, или неупорядоченного
дробления (см. 7.1).
Что определяет характер дробления? От чего зависит положение плоскости дроб­
ления? Что является причиной того или иного расположения митотического верете­

83
на? Конечно, характер дробления, как мы видели, отчасти определяется особенно­
стями распределения желтка в яйцеклетке: увеличение концентрации желтка обыч­
но приводит к замедлению образования борозд в вегетативном полушарии или даже
к полному прекращению делений. В этих случаях наблюдается меробластическое
или абластическое дробление.
Вместе с тем очевидно, что особенности того или иного типа дробления являют­
ся результатом длительной эволюции и контролируются не только концентрацией
желтка, но многими факторами, природа которых но многом остается еще не рас­
крытой.
Сравнение разных типов дробления у животных позволило выдающемуся немец­
кому исследователю конца XIX — начала X X столетня О.Герткигу вывести эмпири­
ческие правила («правила Гертвига»), которые, как первоначально казалось, дают
ключ к пониманию причины того или иного положения плоскости деления яйца или
бластомеров. Согласно одному из этих правил, ядро в яйцеклетке или бластомере
занимает центр «активной» (то есть незагруженной желтком) цитоплазмы. Таким
образом, при асимметричном расположении активной цитоплазмы предопределяет­
ся и аналогичное положение ядра. Согласно другому правилу Гертвига, ось верете­
на деления совпадает с направлением наибольшей протяженности цитоплазмы. Во
многих случаях правила, установленные Гертвигом, оправдываются. Тем не менее
они верны не всегда и, очевидно, будучи лишь результатом визуального анализа, не
раскрывают реальных механизмов детерминации плоскостей дробления.
Выполненные в конце 1930-х годов известным шведским эмбриологом Свеном
Герстадиусом (1898 1996) опыты на морском еже показали, что положение веретен
в последовательные моменты дробления предопределяется какими-то процессами в
цитоплазме, которые активируются после оплодотворения. Герстадиус обнаружил,
что, помещая яйца морского ежа в гипотоническую сред,' или подвергая их встряхи­
ванию, можно задержать то или иное деление дробления. При этом оказалось, что
время появления того или иного положения веретена относительно момента оплодо­
творения остается неизменным. Например, если задержать первое деление на один
цикл, то экваториальное деление, которое в норме является третьим, произойдет на
стадии двух бластомеров, хотя при нормальном развитии для этой стадии характер­
но меридиональное деление. Как известно, микромеры вегетативного полушария у
морского ежа возникают при четвертом делении дробления, т. е. на стадии образо­
вания 16-клеточного зародыша. Однако при задержке третьего деления дробления
формирование микромеров происходит строго «по расписанию», т. е. через такое же
время после оплодотворения, что и при нормальном развитии, но на стадии 4 бла­
стомеров, а не 8 , как при нормальном развитии (рис. 3-7).
Из опытов Герстадиуса вытекало два важных следствия. Во-первых, они сви­
детельствовали, что в дробящемся яйце имеется некий счетчик времени, который,
будучи независимым, тем не менее сопряжен с процессами, непосредственно контро­
лирующими кариокинез. Во-вторых, эти опыты указывали на существование меха­
низма, который предопределяет последовательный ряд событий, реализующих ге­
нетически детерминированную ориентацию веретен деления.
Важный вклад в понимание проблемы дробления примерно в то же время внесла
американский эмбриолог Этель Гарвей (1885-1968), работы которой также показа­
ли, что механизмы кариокинеза и цитокинеза относительно автономны и могут быть
разобщены в эксперименте. Центрифугируя неоплодотворенные яйца морского ежа

84
 Рис. 3-7. Схема эксперимента Герстадиуса по задержке делений дробления
у морского ежа (по: Гилберт, 1994).
А — нормальное развитие; Б — развитие при подавлении первого клеточного
цикла; В — развитие при подавлении третьего клеточного цикла.

в растворе сахарозы той же плотности, что и яйца, она смогла разделить яйцо на
две половины — мерогоны. В легкой половине оставалось ядро, а в тяжелой концен­
трировался желток и пигментные зерна. После активации гипертонической морской
водой наблюдалась партеногенетическая мерогоиия: безъядерные половинки начи­
нали дробиться и формировали аномальные бластулы, которые после вылупления
погибали, поскольку составляющие их клетки не имели ядер.
Относительная автономия кариокинеза и цитокинеза обусловлена тем, что в их
основе лежат различные клеточные механизмы. Поскольку эти механизмы и, в част­
ности, роль цитоскелета в осуществлении клеточного деления подробно рассматри­
ваются в курсе цитологии, здесь мы ограничимся лишь кратким упоминанием о

Кариокинез происходит при участии митотического веретена, основу которого

составляют микротрубочки, построенные из белка тубулина. Цитокинез осуществ­
ляется сократительным кольцом, которое образуется в области борозды дробления
из актиновых микрофиламентов. Если дробящееся яйцо обработать ингибитором
сборки микротрубочек (например, колхицином или нокодазолом), то кариокинети-
ческие деления блокируются в метафазе. При действии ингибиторов формирования
микрофиламентов (например, цитохалазина) деление ядер сохраняется, но подавля­
ется цитокинез.
При нормальном развитии образование веретена и борозды дробления скоорди­
нированы. Уже давно была отмечена связь между положением митотического ве­
ретена и направлением борозды дробления: последняя всегда проходит в плоскости
метафазной пластинки, перпендикулярно длинной оси веретена. Эксперименталь­
ные воздействия, ведущие к изменению положения веретена, неизбежно вызывают
смещение борозды дробления в соответствии с новым положением веретена. Неуди­
вительно поэтому, что появление сверхчисленных веретен (например, при полиспер­
мии) резко нарушает нормальный ход развития (см. рис. 2-15), а разрушение звезд
веретена ведет к остановке дробления. Возможно, однако, что образование бороз­
ды дробления зависит главным образом от взаимодействия двух звезд, поскольку в
экспериментальных условиях удается вызвать появление борозды между звездами,

85
не связанными между собой веретеном. Можно предполагать, что область форми­
рования сократительного кольца микрофиламентов определяется взаимодействием
микротрубочек звезд с кортексом яйца.
Положение митотического веретена, а следовательно, и звезд зависит не толь­
ко от элементов цитоскелета, но и от других цитоплазматических факторов, хотя
реальный механизм их действия пока не известен. Например, у животных со спи­
ральным типом дробления обнаружено, что ориентация плоскости третьего деления
в правую или левую сторону (т. е. дексиотропность или леотропность) контролиру­
ется цитоплазматическим фактором, который синтезируется под контролем генов
материнского организма в период оогенеза. Значение этого фактора было показано
как в опытах, в которых цитоплазму из яиц одного типа инъецировали в яйца дру­
гого типа, так и в генетических исследованиях закрученности раковины у моллюска
Lymnea, которая коррелирует с ориентацией веретена при дроблении. Так, у Lym-
пеа аллель правозакрученности доминантен (D), а левозакрученности рецессивен
(d). При скрещивании самок DD с самцами dd все потомки Dd были правозакру­
ченными. При скрещивании самцов DD с самками dd все потомки Dd были левоза­
крученными, а при скрещивании самцов Dd с самками Dd потомки (1DD: 2Dd: ldd)
были все правозакрученными.
Прямые доказательства участия генетических факторов в определении характе­
ра дробления получены на нематоде Caenorhabditis elegans, у которой первое деление
дробления дает крупный передний бластомер АВ и задний бластомер Р1 меньших
размеров. При втором делении образуется характерная Т-образная фигура, так как
оси митотических веретен в указанных бластомерах располагаются взаимно пер­
пендикулярно. Асимметрия деления яйца у С. elegans определяется белками PAR и
МЕХ, локализованными в кортикальном слое. Обнаружено 6 генов par (partitioning-
defective). У большинства мутантов par первое деление равномерное, а веретена до-
черних клеток расположены вдоль одной оси, а не взаимно перпендикулярны. Эти
нарушения коррелируют с изменениями локализации белков PAR. У животных ди­
кого типа белки PAR-3 и PAR -6 локализованы в передней области кортекса, тогда
как PAR-1 и PAR-2 — в задней. Отсутствие одного из белков передней группы ведет
в распространению задних факторов вперед. В отсутствии PAR-2 факторы перед­
него комплекса распространяются назад.
В настоящее время эмбриология не располагает данными, которые позволили бы
дать сколько-нибудь связный очерк механизмов, лежащих в основе формирования
тех или иных конкретных типов дробления. Тем не менее даже те отрывочные све­
дения, которые имеются в нашем распоряжении, позволяют утверждать, что тип
дробления определяется сложным комплексом факторов, в том числе генетиче­
скими и клеточными механизмами, которые контролируют и интегрируют мно­
гие элементарные процессы. Среди последних особое значение имеют события, свя­
занные с синтезом ДНК, организацией митотического деления ядра (кариокинез)
и делением цитоплазматического тела клетки (цитокинез). Относительная автоно­
мия этих элементарных процессов создает предпосылки для формирования в ходе
эволюции животных разнообразных типов дробления. Например, в основе возникно­
вения поверхностного типа дробления лежит возможность разобщения кариокинеза
и цитокинеза.
Особенности клеточного цикла в период дробления. Дробление оплодо­
творенного яйца представляет собой палинтомический процесс (от греч. KaXiv —

86
 Рис. 3 ‘S. Схема палинтомического (А)
и моно!омического (Б) клеточных циклов.
Т1 - Т 4 —последовательные клеточные циклы. Штриховая линия - количество
ДНК (2С — 4С), сплошная — масса клетки. При палинтомическом цикле отсутствует
компенсаторный рост клетки; цикл не имеет gap-ф эз. Клеточный цикл монотомиче-
ского типа имеет фазу синтеза ДНК (S), иресинтетическую (G1) и иремитотическую
(G2) фазы, а также фазу митоза (М ). После каждого деления масса клетки восста­
навливается до исходного уровня.

опять, снова; cojir] — разрезание, разделение), для которого характерен непрерыв­

ный ряд клеточных делений, следующих одно за другим без компенсаторного роста
клетки (рис. 3-8, А) У соматических клеток, сохранивших способность к пролифе­
рации, наблюдается монотомия (греч. [ю\юс — один, единственный), при которой
после митотического деления наступает период компенсаторного роста, а следую­
щее деление возможно лишь при достижении клеткой определенной массы. Клеточ­
ный цикл монотомического типа характеризуется тем, что фаза синтеза ДНК (S)
и фаза митотического деления (М) разделены во времени фазами G1 (пресинте-
тическая фаза) и G 2 (премитотическая фаза), в течение которых происходит рост
клетки, а также подготовка к репликации ДНК и митозу (рис. 3-8, Б). При делени­
ях дробления синтез ДНК одного цикла, как правило, начинается уже в телофазе
предыдущего деления, так что фаза М и фаза S перекрываются. Этот сверхранний
синтез ДНК начинается еще на не вполне деконденсированных хромосомах, т. е. до
восстановления структуры интерфазного ядра. Синтез ДНК обычно инициируется в
кариомерах (от греч. xapuov — орех, ядро; [lepoc — часть, доля), которые представля­
ют собой отдельные хромосомы, окруженные собственной оболочкой, состоящей из
двух мембран. Впоследствии кариомеры сливаются между собой, образуя типичное
интерфазное ядро. Можно предполагать, что сверхранний синтез ДНК, наблюда­
емый при дроблении, коррелирован с формированием оболочек вокруг отдельных
хромосом.
При палинтомии происходит постоянное уменьшение массы отдельных клеток
в ходе дробления, что ведет к восстановлению обычного для соматических кле­
ток ядерно-цитоплазматического отношения. Клеточные циклы в период дробле­
ния отличаются от циклов соматических клеток не только своей структурой. Важ­
ной особенностью, имеющей очевидный адаптивный характер, является высокая
скорость прохождения клеточного цикла, его быстротечность, предопределяющая
высокую частоту клеточных делений. Например, у дрозофилы деления ядер в это
время происходят при 24° С каждые 9,5 мин, причем синтез ДНК продолжается
не более 3,5 мин, тогда как у взрослых животных генерационное время в разных
тканях исчисляется многими часами (генерационное время около 20 ч, фаза S —
10 ч).

87
 Дробление Стадия нейрулы

Рис. 3-9. Особенности воспроизводства реплпконов ДНК в период дробления

и во время перехода на монотомический цикл.
А - - синхронная репликации всех репликонов; Б — последовательная инициация
синтеза ДНК в разных репликонах. 1-12 — последовательные моменты времени.
Si — длительность фазы синтеза ДНК при дроблении; S2 — длительность фазы син­
теза в период перехода на монотомический цикл. Вертикальные столбики — отрезок
молекулы ДНК, состоящий из нескольких единиц репликации.

Скорость репродукции генетического материала в период дробления у животных

сравнима со скоростью репликации генома бактерии Escherichia coli. Столь быст­
рый синтез ДНК возможен благодаря тому, что нить ДНК в хромосоме эукариот
подразделена на большое число относительно автономных единиц репликации —
репликонов. В период дробления имеет место высокая степень синхронности репли­
кации всех репликонов (рис. 3-9). По завершении периода дробления организация ре­
пликации изменяется. При этом устанавливается определенная последовательность
репликации разных участков ДНК. Известно, например, что транскрипционно ак­
тивные участки ДНК, входящие в состав эухроматина, репродуцируются в начале
фазы синтеза ДНК, тогда как гетерохроматиновые участки реплицируются в конце
этой фазы, длительность которой при этом возрастает до нескольких часов.
У большинства видов различают периоды синхронного дробления и период асин­
хронного дробления, хотя у ряда животных (губки, некоторые книдарии и немато­
ды, млекопитающие и др.) дробление с самого начала носит асинхронный характер.
Десинхронизация дробления связана с изменением структуры цикла: увеличени­
ем продолжительности фазы S, появлением <^ар»-фаз (G i и G 2). Эта перестройка
цикла, обычно коррелирует с интенсификацией транскрипционной активности зиго-
тического генома.
Факторы, инициирующие и контролирующие циклический процесс клеточной ре­
продукции, имеют цитоплазматическую локализацию. Действительно, частота де­
лений, длительность синтеза ДНК у межвидовых гибридов имеют те же характе­
ристики, что и материнский вид. Темп клеточных делений у одного вида можно
изменить, инъецируя цитоплазму другого вида. При этом свойство изменять часто­
ту делений цитоплазма яйца приобретает только после разрушения зародыше р
пузырька, когда смешиваются цитоплазма и кариоплазма.
 В качестве осцилляторов ритмических процессов в дробящемся яйце рассмат­
ривались колебания энергетического метаболизма, связанные с периодической ак­
тивацией гликолитической системы. Пристальное внимание привлекали, например,
тиоловые циклы, связанные с периодическими изменениями активности SH-rpynn.
Оказалось, что подавление тиоловых циклов ведет к нарушению делении. Было
показано, что SH-белки связаны с активацией ДНК-полимеразы, в связи с чем воз­
никла идея о возможном участии этих белков в регуляции периодичности синтеза
ДНК. С другой стороны, было обнаружено, что повышение уровня SH-групп в тубу-
лине способствует его полимеризации в микротрубочки. Экспериментально показа­
на роль биогенных моноаминов в периодических явлениях цитотомии (Г. Бузников,
1967). В 1980-х годах была предложена гипотеза автономного осциллятора (New­
port, Kirschner, 1984), согласно которой в дробящемся яйце лягушки клеточный
цикл контролируется осциллятором, важную роль в активности которого играет
так называемый фактор созревания (рис. 3-10). У амфибий появление этого ци­
топлазматического фактора, обладающего способностью активировать клеточную
пролиферацию, совпадает с гормональной стимуляцией ооцита. Известно, что пер­
вое мейотическое деление созревания ооцита Xenopus, находящегося в профазе пер­
вого деления созревания, происходит при стимуляции прогестероном. Если в ци­
топлазму такого стимулированного прогестероном ооцита интродуцировать ядро,
взятое из терминально дифференцированной, закончившей пролиферацию клетки
(например, из нервной клетки взрослого животного), то это ядро вновь приобре­
тает способность к кариокинезу. С другой стороны, если в оплодотворенное яйцо
Xenopus, из которого предварительно удалено ядро (эпуклеированное яйцо), вве­
сти с помощью микропипетки клонированные фрагменты ДНК, то эти фрагменты
будут периодически реплицироваться, причем ритм репликации экзогенной ДНК
соответствует периодичности синтеза ДНК в нормальном ядре.

Рис. 3-10. Модель автономного осциллятора клеточных циклов

в период дробления яйца лягушки (по: Мюррей, Киршнер, 1989).
Длинная стрелка — момент действия прогестерона; короткие стрелки — моменты
появления фактора, противодействующего MPF; CSF — время действия цитостати-
ческого фактора.; Са.~+ — момент высвобождения ионов кальция после оплодотво­
рения. Внизу — стадии развития, соответствующие периодам на оси времени.

89
 Поиск молекул, инициирующих деления созревания ооцитов Xenopus, привел к
обнаружению фактора созревания, или MPF (maturation promoting factor), слож­
ного фосфопротеииа, состоящего из двух субъединиц. Впоследствии оказалось, что
MPF не только выполняет свою функцию при мейозе, но и выступает в роли факте -
ра регуляции митотических клеточных циклов, так что теперь аббревиатура MPF
расшифровывается как mitosis promoting factor. Было установлено, что активность
MPF изменяется циклически: она достигает максимальных значений в митозе и су­
щественно падает в фазе синтеза ДНК (рис. 3-11). При этом обнаруженная циклич­
ность не связана непсср*. дственно с ядром, поскольку она наблюдается и в энукле-
ированных яйцах.
Если дробящееся яйцо обработать ин­
гибитором синтеза белка то дробление
окажется заблокированным в интерфа­
зе. Микроинъекция очищенной фракции
MPF в такое яйцо восстанавливает про­
цесс клеточной репродукции: после инъ-
екциг наблюдаются разрыв ядерной обо­
лочки, конденсация хромосом и харак­
терная реорганизация цитоскелета, свя­
Рис. 3-11. Изменение содержания циклина (1)
и MPF (2) в ходе клеточных циклов в период занная с подготовкой к митозу.
дробления яйца лягушки (по: Епифанова, 1997). Изучение структуры MPF показало,
М — митоз. Черные стрелки — активация MPF, что малая субъединица комплекса пред­
светлые — деструкция MPF. По оси абсцисс —
время, по оси ординат — концентрация белка,
ставляет собой протеинкшшзу. Наличие
уел. ед. этой протеи нкиназы обеспечивает фос-
форилирование ряда белков. В частно­
сти, фосфори.пирование гистона Hi ведет к конденсации хромосом, а гиперфосфо-
рилирование белков ядерной оболочки (ламинов) служит предпосылкой разборки
этой оболочки. Протеинкиназа MPF обладает высокой степенью консервативности,
она идентична белку р34 дрожжей, который контролируется одним из генов регуля­
ции клеточного цикла (так называемые cdc-гены, cell division cycle), а именно геном
cdc2 (p34cdc2). У мутантных по гену cdc2 форм дрожжей митотические деления
подавлены. Однако, если у этих мутантов интродуцировать ген малой субъединицы
MPF, то деление дрожжевых клеток восстанавливается.
Большая субъединица MPF представляет собой белок 56 кДа, идентичный дрож­
жевому белку р56Ыс13. Этот белок был назван циклином, поскольку его взаимодей­
ствие с протеинкшгазой периодически меняется в ходе клеточного цикла. Оказалось,
что активность взаимодействия начинает расти в S-фазе цикла, достигает макси­
мума в начале митоза, но в начале анафазы резко падает из-за быстрой деграда­
ции белка (см. рис. 3-11). Распад циклила ведет к инактивации малой субъединицы
MPF. После инактивации протеинкиназы прекращается фосфорилирование гистона
Н1, ламинов и других белков мишеней, а это, в свою очередь, вызывает завершение
митоза и переход в интерфазу.
В яйцах Xenopus был выявлен цитостатический фактор CSF (cytostatic factor),
контролируемый геном c-mos. Этот фактор блокирует мейоз в метафазе второго
деления созревания (см. рис. 3-10). Блокирующее действие CSF обусловлено тем,
что он предотвращает деградацию циклина. В результате сохраняется активность
MPF, и клетка не выходит из митоза. При оплодотворении, как мы знаем, в яйце

90
происходит увеличение концентрации ионов Са2+, что вызывает инактивацию CSF
и завершение делений созревания.
Если в период дробления синтез циклина и других активаторов протеинкиназы
идет на материнских матрицах, запасенных в период оогенеза, то к концу дробле­
ния этот запас исчерпывается. Так, после 13-го деления у дрозофилы происходит
деградация материнской иРНКл/Г!Г'г/ и на 14-м цикле начинается ресинтез зиготиче-
ской формы циклина. Возможно, что это обстоятельство является одной из причин
замедления и десинхронизации делений клеток, наблюдаемых в это время.
Ооплазматическая сегрегация. В ходе дробления происходит распределение
различных веществ, содержащихся в цитоплазме яйцеклетки, по бластомерам. При
этом разнородные по составу участки цитоплазмы попадают в клетки, которые да­
ют начало разным зачаткам. Так, наиболее богатые желтком вегетативные участки
яйца попадают при дроблении в бластомеры, которые дают начало энтодерме.
Особое значение для судьбы развивающегося зародыша имеет, однако, сегрега­
ция инструктивных молекул, наблюдаемая в период дробления у многих животных.
Материнские цитоплазматические факторы, попадая в те или иные бластомеры,
активируют специфические программы развития и детерминируют разнообразные
зачатки.
Истоки исследований цитоплазматической локализации морфогенетических
факторов в раннем эмбриональном развитии обнаруживаются в эмбриологических
работах конца X IX столетия. А. О. Ковалевский (1840-1901), изучавший эмбрио­
нальное развитие аннелпд, по-видимому, впервые (1871), описал стволовые клет­
ки мезодермы телобласты (от греч. теАсс — конец, окончание; рХсготос; — росток),
деление которых приводит к образованию парных мезодермальных полосок червя.
Позднее К. Уитменом (1878) у пиявки Clepsine были описаны не только мезотелоб-
ласты, но и пейробласты, дающие соответственно мезодермальную и нейральную
зачатковые полоски.
Благодаря относительно небольшому числу клеток и в высшей степени консер­
вативному характеру дробления у зародышей аннелид и моллюсков удалось с боль­
шой точностью проследить судьбу каждого бластомера. Поклеточное прослежива­
ние (cell lineage) показало, что в основе развития многих структур животного лежат
клеточные клоны, возникающие в результате деления индивидуальных бластомеров.
Так, у полихеты Polyyordius клетки прототроха возникают из шестнадцати тро-
хобластое, личиночные органы выделения, протонефрндии, из нефробластое, пе­
редняя кишка из стомагпобластов и т.п. Такой принцип формирования тела, при
котором бластомеры в ходе дробления становятся основателями клонов специфи­
чески дифференцирующихся клеток, можно назвать телобластическим. Развитие
с образованием клеток-основателышц клонов широко распространено у животных.
Существование телобластов свидетельствует о том, что у зародыша имеются генети­
чески обусловленные механизмы дробления, которые обеспечивают строгое наследо­
вание данным бластомером определенной области цитоплазмы яйца. Распределение
разнородных компонентов цитоплазмы ооцита по зародышу создает своеобразную
мозаику цитоплазматических детерминант, почему такой тип развития и стали на­
зывать мозаичным.
Детерминированный характер бластомеров, возникающих в ходе мозаичного
дробления подтвердился в многочисленных экспериментах по изоляции или устра­
нению бластомеров и частей зародыша.

91
 Оказалось, что зародыш моллюска Patella после содержания в бескальциевой
морской воде распадается на отдельные клетки. После переноса, в нормальную среду
эти изолированные клетки могут продолжить развитие. При этом, например, тро-
хобласты сохраняют нормальный ритм делений, и их потомки, как при нормальном
развитии, образуют группы ресничных клеток. Изолированные макромеры основ­
ного квартета, дают энтодермальные клетки, а клетки анимального полушария —
сенсорные (чувствительные) клетки.
У малощетинкового червя Tubifex яйцо в полярных областях имеет два скопле­
ния свободной от желтка и богатой митохондриями цитоплазмы (рис. 3-12). Бла­
годаря активности цитоскелета яйца эти полярные зоны (рис. 3-13) соединяются в
общую массу, которая в процессе дробления попадает сначала в бластомер CD, а за­
тем в макромер D. Если ультрафиолетовым облучением убить клетки, содержащие
полярную плазму, то в ходе развития возникают уродливые зародыши, состоящие
из скопления энтодермальных клеток, прикрытых эктодермальным колпачком. Ес­
ли же облучить все клетки, кроме бластомера D, то среди потомков последнего, как
и в норме, образуются первый и второй соматобласты — клетки 2d и 4d, которые со­
держат материал полярной плазмы и дают соответственно эктодерму и мезодерму.
Если убить бластомер 2d, то подавляется развитие эктодермы зародыша, тогда как
мезодерма дифференцируется нормальным образом. Более того, за счет потомков
второго соматобласта, дающего в норме мезодерму, возникают типично эктодер­
мальные производные: эпидермис, нервная система и передняя кишка. При облуче­
нии бластомера 4d или мезодермальных телобластов развитие мезодермы полностью
подавляется, тогда как дифференциация эктодермы происходит нормально. Опыты
на олигохете Tubifex интересны тем, что они обнаружили не только роль полярной

Г " i Прозрачная цитоплазма KBS Желток

Рис. 3-12. Ооплазматическая сегрегация у аннелид (по: Shimizu, 1999). Вид сбоку.
А — однополюсная сегрегация прозрачной цитоплазмы у полихет: G V — заро­
дышевый пузырек. Б — биполярная сегрегация прозрачной цитоплазмы у олигохет.
Стрелками в кружках показано направление движения светлой цитоплазмы, ани-
мальный полюс вверху.

92
 Рис. 3-1S. Локализация F-актина (светлые обла­
сти) в полярных скоплениях прозрачной цитоплазмы
у малощетинкового червя Tubifex (по: Shimizu, 1999)
Вид сбоку, анимальный полюс вверху.

плазмы в процессах дифференциации и высокую степень детерминативности дроб­

ления червей но и способность к регуляции повреждений за счет мезодермальных
клеток.
Способ развития, при котором попадание цитоплазмы определенного типа в бла­
стомеры коррелирует с направлением дифференциации их потомков, широко рас­
пространен у животных, включая и некоторых вторичноротых. Классическим объ­
ектом исследований локализации морфогенетических потенций в яйце вторичноро­
тых служат асцидии. Эти исследования, начатые в конце XIX — начале X X столетия
известным американским эмбриологом Эдвином Конклином (1863-1952), продолжа­
ются и в наши дни. Счастливой для эмбриолога особенностью этого объекта явилось
то, что разные области яйца многих асцидий имеют разную пигментацию, что су­
щественно облегчило прижизненное изучение перемещения и локализации разных
видов цитоплазмы.
У асцидии Styela partita Конклин (1905)
описал 5 видов цитоплазмы яйца: темно­
желтую, светло-желтую, светло-серую, тем­
но-серую и, наконец, прозрачную. После
оплодотворения или искусственной актива­
ции яйца происходит перераспределение ци­
топлазмы, которое можно наблюдать визу­
ально. В результате билатерального дробле­
ния различные виды цитоплазмы распреде­
ляются по разным бластомерам. Уже на ста­
дии 4 бластомеров выявляется сагиттальная
плоскость, которая проходит через с е р е д и н у
желтого серпа. Эта плоскость разделяет ле­
вую и правую пары бластомеров с каждой
стороны. При этом относительно крупные Рис. 3-14■ Расположение зачатков на ста­
бластомеры соответствуют переднему кон­ дии гаструлы у асцидии Styela partita (по:
цу зародыша, а более мелкие — заднему. При Conklin, 1905).
1 — клетки, потомки которых образу­
втором делении дробления цитоплазма жел­ ю т нервную пластинку; 2 — клетки будущей
того серпа симметрично распределяется по хорды; 3 — презумптивная мезенхима; 4 —
двум задним бластомерам. Третье деление клетки-родоначальницы мускулатуры хво­
ста личинки.
проходит в экваториальной плоскости. На
стадии 8 бластомеров материал желтого серпа сосредотачивается в задних веге­
тативных бластомерах. В передние вегетативные бластомеры попадает темно-серая
цитоплазма, клетки, дающие целомическую мезодерму личинки, получают светло-
желтую. На стадии гаструлы светло-серая цитоплазма обнаруживается в клетках-

93
предшественницах хорды и нервной ткани, темно-серая попадает в клетки, дающие
начало энтодерме, а прозрачная цитоплазма оказывается в клетках будущей экто­
дермы (рис. 3-14).
Свои выводы Конклин обосновал не только описанием судьбы бластомеров при
нормальном развитии, но и опытами с разрушением и изоляцией бластомеров. Ока­
залось, что развитие изолированных бластомеров детерминировано и соответствует
развитию при нормальном эмбриогенезе. Современные исследования в принципе
подтвердили выводы Конклина, хотя и внесли в них ряд уточнений. Показано, что
у зародышей асцидий уже в период дробления происходит экспрессия генов, специ­
фических для разных зачатков.
Происходящая в период дробления ооплазматическая сегрегация лежит в основе
явления автономной детерминации (см. том 2 , гл. 2 ), которая наряду с эмбриональ­
ной индукцией (см. том 2 , гл. 3), представляет собой один из важнейших модусов
детерминации зачатков зародыша.
Детерминативный и регулятивный типы развития. Традиционно в эм­
бриологии различают животных с детерминативным и регулятивным типом раз­
вития. При этом под детерминативным (от лат. determinatio — определение) по­
нимают развитие, при котором определение судьбы клеток происходит в период
дробления, еще до начала морфогенетических движений клеточных масс. Детерми­
нативный характер развития присущ представителям Ctenophora, Lophotrochozoa,
Ecdysozoa и низшим Deuterostomia. Регулятивный тип развития с относительно
поздним определением судьбы зачатков характерен для многих книдарий и выс­
ших Deuterostomia. У позвоночных животных, как это было показано московским
эмбриологом А. А. Нейфахом (1962), активность собственного генома и детермина­
ция зачатков наблюдаются обычно после завершения дробления, на стадии, когда
зародыш представлен многими тысячами клеток.
У насекомых с синцитиальной структурой зародыша, возникающей при абласти-
ческом типе дробления, образование клонов (за исключением рано обособляющихся
первичных половых клеток) в период дробления невозможно в принципе. Специ­
фикация клеток у этих животных происходит только на стадии целлюляризации в
соответствии с позиционными сигналами, установка которых осуществляется еще в
период оогенеза.
Здесь будет уместно заметить, что под детерминацией зачатка понимается со­
вокупность процессов, благодаря которым устанавливается (определяется) судьба
его развития. Если речь вдет о детерминации отдельных клеток, чаще использу­
ется термин коммитирование (от англ. commitment — арест). Ранний, обратимый
этап детерминации, в течение которого происходит первоначальное программирова­
ние судьбы зачатка или клетки, называют спецификацией (от англ. specification —
определение, уточнение).
Естественным следствием ранней детерминации клеток является снижение ре­
гулятивных потенций зародыша. Напротив, способность к регуляции должна сохра­
няться дольше в развитии тех животных, у которых судьба клеток детерминируется
на относительно поздних стадиях эмбриогенеза. Подразделение на регулятивный и
детерминативный типы развития весьма условно. По мере накопления сведений о
молекулярно-биологических особенностях раннего эмбриогенеза, по-видимому, все
труднее говорить об обособленных типах развития. Скорее, их можно рассматривать
как основные тенденции эволюции эмбриогенеза. При детерминативном типе раз­

94
витая ка первый план выступает клеточный механизм формирования тела за счет
специфического паттерна дробления, р ходе которого клетки-родоначальницы кло­
нов занимают строго определенное положение в зародыше. Спецификация клеток-
основательниц клонов, которые впоследствии формируют разные зачатки зароды-
in;. коррелирует с ранней экспрессией генов Например, у морских ежей зародыши
в конце дробления представлены мозаикой клеток с разной судьбой. Начинающаяся
сразу же после оплодотворения транскрипция достигает максимального уровне (в
расчете на одно ядро) именно на средних стадиях дробления (Davidson, 2000).
Ограничения потенций формообразования, наблюдаемые при детерминативном
типе развития, в процессе эволюции преодолевались разными способами. Один из
них, по-видимому, состоял в достройке онтогенеза примитивных анцестральных
форм, которые у некоторых современных морских билатеральных беспозвоночных
сохранились в виде личинок (см. том 2, гл. 5 и 10). Другой путь, возможно, был свя­
зан с появлением механизмов, которые обеспечивали отсрочку детерминации клеток
зародыша в результате продолжительной паузы транскрипции, вплоть до стадии
бластулы. Благодаря длительному выключению транскрипции в период дробления
происходило в основном накопление клеточной массы. При этом цитоплазматиче­
ские детерминанты материнского происхождения могли оказывать свое действие
главным образом после достижения стадии, на которой начинаются морфогенети­
ческие движения.
Как считает известный американский исследователь Э. Дэвидсон (2000), если
сг дификация клеток и зачатков у животного происходит в период дробления, то
пространственная организация тела создается на уровне паттерна дробления, т. е.
она предопределяется прежде всего осями яйцеклетки и положением веретен де­
лений дробления относительно этих осей. У животных с поздней спецификацией
зачатков, по Дэвидсону, имеются особые системы генетической регионализации за­
родыша, которые будут рассмотрены во втором томе.
Прежние представления о причинах ранней детерминации клеток в эмбриогенезе
базировались исключительно на предположении об ооплазматической сегрегации, в
ходе которой происходит асимметричное распределение цитоплазматических фак­
торов яйца, инициирующих то или иное направление дифференциации клеток. Оче­
видно, однако, что в качестве механизма ранней детерминации бластомеров может
выступать и индуктивное взаимодействие клеток, обусловленное передачей неких
сигналов от клетки к клетке.
Бластула. Процесс дробления завершается образованием бластулы — обычно
однослойного многоклеточного зародыша, состоящего из внешне недифференциро­
ванных клеток. В настоящее время мы знаем, однако, что эти клетки во многих
случаях определенным образом специфицированы. Граница, отделяющая стадию
дробления от стадии бластулы достаточно условна. Тем не менее в отношении каж­
дого конкретного вида обычно имеются вполне определенные критерии, которые
позволяют не только отличать стадию бластулы от более ранних и более позд­
них этапов развития, но и подразделять стадию бластулы на раннюю, среднюю и
позднюю. Разнообразные типы дробления, естественно, дают огромное число разно­
видностей бластулы. Бластулы некоторых животных имеют полость — бластоцелъ.
Эта полость носит название первичной, или бэровской полости животного. Клет­
ки бластулы поляризуются. Обращенные к полости базальные поверхности клеток
формируют базальную мембрану. Благодаря активности бластомеров бластоцель

95
заполняется жидкостью, объем которой может возрастать и играть определенную
формообразовательную роль.
Однослойный сферический зародыш с обширной первичной полостью называет­
ся це.побластулой (рис. 3-15, А). При неравномерном дроблении телолецитальных
яиц бластоцель расположен в анимальном полушарии (рис. 3-15, Б). В этом случае
стенка бластулы, образованная мелкими клетками анимального полушария, фор­
мирует крышу, а крупноклеточная стенка вегетативного полушария — дно бластулы.
Если в конце дробления образуется зародыш без полости, его называют морулой (от
лат. morum — тутовая ягода) (рис. 3-15, Д ). В отличие от морулы, представляющей
собой плотный конгломерат бластомеров, в котором имеются и периферические и
внутренние клетки, однослойную бластулу без выраженной полости, состоящую из
высоких цилиндрических клеток, называют стерробластулой (от греч. сттеррос —
твердый, плотный) (рис. 3-15, В, Г). Если полость бластулы занята желточными
включениями, как, например, при развитии насекомых, а на поверхности желтка
располагается слой клеток — бластодерма, зародыш называют перибластулой (от
греч. Kepi- вокруг). При дискоидальном типе дробления образуется дискобласту­
ла (рис. 3-15, Е) — уплощенный зародыш с щелевидной подзародышевой полостью
между бластодермой и желтком.

Рис. 3-15. Типы бластул (по Иванова-Казас, 1995).

А — целобластула; Б — неравномерная целобластула; В — стерробласту-
ла; Г — неравномерная стерробластула; Д — морула; Е — дискобластула;
Ж — плакула.
У низших позвоночных животных, бластула которых образована многими слоя­
ми клеток, различают раннюю, или бластомерную бластулу, и позднюю эпители­
альную бластулу, поверхностные клетки которой связаны между собой межклеточ­
ными контактами.
В некоторых сравнительно редких случаях разные области бластулы имеют при­
знаки морфологической дифференциации. Так, например, дробление у некоторых
губок завершается образованием зародыша, одна половина которого представлена
мерцательными клетками со жгутиками, а другая — крупными зернистыми клет­
ками. Такой тип зародыша носит название амфибластулы (от греч. ajicpi — с обеих
сторон) (см. гл. 6 ).
Дробление как счетчик времени. При исследовании ряда физиологических
и биохимических свойств зародышей позвоночных, в частности амфибий, оказалось,

96
что многие параметры существенно изменя­
ются на стадии средней бластулы. На гра­
фике (рис. 3-16) видно, что после 12-го цик­
ла генерационное время резко возрастает. У
Xenopus laevis период между двумя последо­
вательными митозами в течение первых 11
циклов составляет немногим более 30 мин, но
на 12-м цикле достигает 70 мин и продол­
жает увеличиваться. Естественно, что в это
время происходит уменьшение прироста ДНК
в единицу времени в расчете на одного за­
родыша. Одновременно наблюдается измене­
ние двигательной активности клеток. Если по­ Рис. 3-16. Точка перехода (М В ТР) на
движность бластомеров до 11-го цикла выра­ стадии средней бластулы у амфибий.
1 - генерационное время; 2 - прирост
жается лишь в сокращениях кортекса, то в количества ДН К в единицу времени в рас­
период 12-го цикла бластомеры приобретают чете на одного зародыша; 3 — количество
способность к образованию псевдоподий и аме­ синтезируемой РНК.
боидной подвижности. Синтез РНК, о котором
судили по включению радиоактивного уридинтрифосфата, у X. laevis в течение пер­
вых 11 циклов очень слаб; 12-й цикл характеризуется резким возрастанием включе­
ния этого предшественника РНК, что связано с началом массового синтеза малых
ядерпых РНК (так называемых «снурп’ов», snurp — small nuclear R N P ) и транс­
портной РНК. Чем объясняется это одновременное изменение таких разнородных
параметров, как синтез ДНК, частота клеточных делений, синтез РНК и клеточная
подвижность? Поскольку аналогичное совокупное изменение ряда параметров про­
исходит не только в целом зародыше, но и в изолированных бластомерах, логично
предположить существование какого-то механизма клеточной природы, действую­
щего одновременно во всех клетках зародыша и выполняющего функцию биологи­
ческих часов.
Предположение о том, что в установлении этой ритмики играют роль деления
дробления у X. laevis было отвергнуто опытами с цитохалазином, который подав­
лял цитотомию, но не влиял ни на синтез ДНК, ни на время наступления активации
процессов синтеза РНК. Как и в условиях нормального развития, изменения пара­
метров синтеза нуклеиновых кислот в опытах с цитохалазином наблюдались лишь
через 6 ч после оплодотворения.
Время изменения свойств бластомеров X. laevis (так называемая точка перехода
на стадии средней бластулы, или МВТР, mid blastula transition point) не зависит
и от синтеза РНК. Если использовать ингибитор синтеза РНК аманитин на стадии
средней бластулы, то синтез РНК подавляется на 80-100%. Если же воздейство­
вать аманитином на яйцо Xenopus, то дробление вдет нормально, и изменение его
частоты происходит, как и в контроле, на 12-м цикле.
Наступление точки перехода на стадии бластулы не зависит и от числа прошед­
ших раундов синтеза ДНК. Это было показано в эксперименте, в котором на яйцо
накладывали лигатуру и после начала дробления одну половину яйца в течение
двух циклов сохраняли безъядерной. Затем, ослабив лигатуру, пропускали ядро в
недробившуюся половинку яйца. При этом оказалось, что точка перехода в этой
половине наступала на два клеточных цикла позднее. Другими словами, в той по­

97
ловине, где дробление начиналось раньше, точка перехода приходилась на 12-й цикл
репликации, а в другой, где дробление задерживалось, на 14-й цикл.
Из этих наблюдений следует, что критическим параметром, контролирующим
наступление точки перехода, может быть ядерно-цитоплазматическое отношение.
В пользу такого предположения говорит и то, что точка перехода в гаплоидных
яйцах наступает на один цикл позднее, тогда как при искусственно вызванной по­
лиспермии, увеличивающей исходное количество ДНК примерно в 4 раза, начало
активного синтеза РНК наблюдали на два цикла раньше, чем в норме. Связь между
нормализацией ядерно-цитоплазматического отношения и началом транскрипцион­
ной активности развивающегося зародыша впервые была исследована известным
московским эмбриологом А. А. Нейфахом (1926-1997).
Таким образом, наступление точки перехода на стадии средней бластулы у низ­
ших позвоночных животных определяется ядерно- цитоплазматическим отношением
или, возможно, соотношением количества ДНК и цитоплазмы. Высказано предпо­
ложение, что в яйце имеется цитоплазматический компонент, который служит инги­
битором какой-то ключевой реакции, необходимой для активации таких разнород­
ных функций, как синтез РНК, клеточное движение и события клеточного цикла,
и вместе с тем имеет сродство к ДНК. Согласно этой гипотезе (гипотеза «истоще­
ния») каждое ядро связывает определенное количество ингибитора, и образующиеся
в ходе дробления ядра как бы «титруют» цитоплазму. При увеличении концентра­
ции ДНК, обусловленном отсутствием компенсаторного роста бластомеров, по мере
дробления происходит уменьшение концентрации ингибитора до некоего порогового
значения, достижение которого и знаменует собой точку перехода (МВТР.)
Гипотеза истощения нашла свое подтверждение в опытах с инъекцией плазмиды
с дрожжевым геном транспортной РНК в оплодотворенное яйцо X . lac vis. В пери­
од дробления транскрипция инъецированной дрожжевой т-РНК прекращалась, что
указывало на наличие ингибитора в цитоплазме ооцита. После прохождения МВТР
синтез РНК восстанавливался. Если же в яйцо инъецировали большие количества
экзогенной ДНК, супрессии транскрипции не происходило, как предполагалось, из-
за связывания ингибитора с избыточной экзогенной ДНК.

Литература

Алберте Б. и др. Рост и деление клеток / / Молекулярная биология клетки. В 5 т. Т. 3.

М., 1987. С. 139 200.
Алберте Б. и др. Дробление и образование бластулы / / Там же. Т. 4. М., 1987. С. 54-56.
Дондуа А. К. Сравнительно-эмбриологический очерк особенностей клеточных циклов в
раннем развитии животных / / Клеточное размножение и процессы дифференциации. Л.,
1983. С. 22-54.
Дъюкар Э. Межклеточные взаимодействия в период дробления / / Клеточные взаимо­
действия в развитии животных. М., 1978. С. 73-91.
Епифанова О. И. Лекции о клеточном цикле. М., 1997. 144 с.
Иванова-Казас О. М. Дробление яйца / / Эволюционная эмбриология животных. СПб.,
1995. С. 42-152.
Мюррей Э., Киршнер М. Чем регулируется клеточный цикл? / / В мире науки. М., 1991.
N5. С. 24-32.
Ротт Н. Н. Клеточные циклы в раннем эмбриогенезе животных. М., 1987. 207 с.
 Глава 4. ГАСТРУЛ ЯЦИЯ. ЗАРОДЫШЕВЫЕ Л И СТКИ

Стадия дробления завершается образованием многоклеточного зародыша. В кон­

це дробления восстанавливается ядерно-цитоплазматическое отношение, характер­
ное для соматических клеток. В это же время происходит изменение структуры
клеточного цикла, появляются пресинтетическая и постсинтетическая фазы. Всту­
пает в действие механизм, разрешающий деление лишь тем клеткам, масса которых
достигает исходного уровня, и, следовательно, восстанавливается компенсаторный
рост. В силу этих причин палинтомический цикл сменяется монотомическим.
В определенный момент развития (у позвоночных это точка перехода на стадии
бластулы) клетки зародыша приобретают способность к двигательной активности.
В жизни развивающегося организма начинается новый этап — этап морфогенети­
ческих преобразований, характерной особенностью которого является становление
пространственной организации зародыша.
Морфогенез зародыша обусловлен целым рядом скоординированных процессов,
в том числе регулируемой пролиферацией, изменениями формы клеток и клеточны­
ми перемещениями. Морфогенетические движения обусловлены как перемещениями
отдельных клеток (различного рода миграции), так и движением клеток в составе
эпителиального пласта (эпителиальные морфогенезы). Одновременно с морфогене­
тическими событиями может происходить и спецификация клеток, в ходе которой
инициируется возникновение разнообразных типов клеток, предназначенных для
выполнения различных функций. Важно подчеркнуть, что цитодифференциация и
морфогенетические движения имеют самостоятельные генетические системы кон­
троля. Эти процессы вполне автономны, но вместе с тем они в каждом конкретном
случае связаны между собой определенными механизмами сопряжения. Благодаря
этому достигается высокая степень корреляции различных элементов морфогенеза
и клеточной дифференциации.
К концу дробления у разных животных клетки зародыша могут находиться на
различных этапах дифференциации. Они могут быть еще полностью тотипотентны-
ми, способными, попадая в разные области зародыша и воспринимая разнородные
сигналы, формировать различные зачатки. Они могут быть коммитированными к
дифференциации в определенном направлении, но тем не менее способными при
определенных условиях изменить направление своего развития. Детерминация кле­
ток в этот ранний период развития может быть и достаточно жесткой, иногда необ­
ратимой. Практически у всех исследованных животных обнаружены клетки, по­
лучающие в процессе дробления цитоплазматические детерминирующие факторы
ооцита. По завершении дробления эти клетки в ходе морфогенетических движений
занимают строго определенные позиции.

99
 Процесс первоначального морфо 1гнетического преобразования бластулы, в ходе
которого возникает пространственное обособление зачатков, дающих при дальней­
шем развитии покровы, нервную ткань, пищеварительную систему и — у трехслой­
ных животных -мускулатуру и ткани внутренней среды, называется гаструляцией
(от греч. уаатгр — желудок). У двухслойных животных речь идет о двух основных
зачатках — наружном и внутреннем. Наружный листок, или эктодерма (от греч. ех-
тос — вне, снаружи; Бер^а — кожа) является источником покровной и нервной ткани.
Внутренний листок, или энтодерма (греч. evxoc;— внутри, в) дает пищеварительную
систему. У трехслойных животных кроме этих двух зачатков имеется еще средний
листок, или мезодерма (греч. [ieooc — средний, находящийся в середине), которая
образует мускулатуру, соединительную ткань, кровь, целомический эпителий, хря­
щевой и костный скелеты.
Гаструляция происходит у всех типов многоклеточных животных за исключени­
ем губок, у которых нет пищеварительной системы, образованной энтодермой (по­
дробнее см. гл. 6). По завершении гаструляции обычно образуются обособленные в
пространстве клеточные территории — зародышевые листки. Впервые зародышевые
листки были описаны у позвоночных животных. К. Бэр считал, что зародышевые
листки — универсальные структуры, которые возникают на ранних этапах эмбрио­
генеза всех позвоночных животных. Важным этапом развития учения о зародыше­
вых листках было установление принципа специфичности, согласно которому каж­
дый зародышевый листок у разных животных дает одинаковый круг производных.
Позднее А. О. Ковалевский (1871) показал, что формирование зародышевых листков
является общим свойством эмбрионального развития многоклеточных животных,
включая беспозвоночных. Провозглашая идею единства происхождения многокле­
точных, он постулировал гомологию зародышевых листков у представителей всех
групп животных.
В соответствии с биогенетическим законом Геккеля утвердилось более чем спор­
ное представление, согласно которому гомология зародышевых листков является
следствием того, что они рекапитулируют первичные органы примитивных Metazoa.
Привнесение «рекапитуляционного мотива» в теорию зародышевых листков завело
ее в тупик неразрешимых противоречий.
В основе формирования зародышевых листков лежат различные морфогенети­
ческие процессы, в том числе иммиграция, или ингрессия, эпиболия, деламинация
и инвагинация (рис. 4-1). Гаструляция путем иммиграции обычна для стрекающих,
у которых энтодерма возникает в результате выселения клеток из стенки бластулы
внутрь зародыша. Если выселение носит повсеместный характер, говорят о муль-
типолярной иммиграции, если же оно сосредоточено в одной области зародыша, ее
называют униполярной. При гаструляции путем деламинации элементы энтодермы
образуются в результате направленного деления клеток бластулы, митотические ве­
ретена которых ориентированы перпендикулярно поверхности зародыша. Моруляр-
ной де.паминацией называют образование энтодермы путем спецификации клеток,
занимающих внутреннюю часть морулы. Гаструляция может происходить и вслед­
ствие впячивания эпителиальной стенки бластулы, или инвагинации. Если эптодер-
мальный слой образуется в результате обрастания внутренних клеток поверхност­
ными, говорят об эпиболии. У позвоночных при образовании зародышевых листков
обычно имеется сложное сочетание разных типов клеточных движений.

100
 Рис. 4~1■ Типы морфогенетических процессов, наблюдаемые при гаструляции
(по: О.М. Иванова-Казас, 1995).
А — мультиполярная иммиграция; Б — униполярная иммиграция; В — моруляр-
ная делами нация; Г — клеточная деламинация; Д — инвагинация; Е — эпибол ия.
Стрелками показано направление движения клеток.

Морфогенетические движения, которые обеспечивают гаструляцшо, имеют в сво­

ей основе различные и вполне устойчивые клеточные, молекулярные и генетические
механизмы, которые активируются на стадии поздней бластулы. Но если в основе
морфогенетических процессов, связанных с образованием зародышевых листков у
различных животных, лежат механизмы, которые контролируются разными гене­
тическими системами, то становится очевидной бесперспективность идеи о том, что
образование зародышевых листков у животных повторяет (рекапитулирует) про­
цесс, происходивший у некой предковой формы. Признание в качестве примитив­
ных Metazoa животных типа Фагоцителлы Мечникова является веским аргументом
против утверждения рекапитуляционного принципа, как элемента теории зароды­
шевых листков: по своим генетическим и клеточным механизмам инвагинация за­
родышевых листков не имеет ничего общего с выселением клеток внутренней среды
Фагоцителлы.
Представление о зародышевых .чистках как своего рода рекапитуляции первич­
ных органов примитивных предков вольно или невольно жестко связывает возник­
новение листков с клеточной дифференциацией. Однако анализ развития животных
свидетельствует о том, что первичное предопределение судьбы клеток обычно свя­
зано не с гаструляцией. Первичная спецификация клеток зародыша часто происхо­
дит уже в период дробления, задолго до образования листков. Мы уже отмечали,
что у многих животных имеет место телобластический принцип формирования за­
чатков. Бластомеры-зачатки описаны у гребневиков, аннелид, моллюсков, круглых
червей, коловраток, асцидий и других животных с так называемым детерминатив­
ным развитием. Методами молекулярной биологии доказана ранняя спецификация
бластомеров у иглокожих и амфибий.
Против представления о процессе формирования зародышевых листков, как сво­
его рода рекапитуляции первичных органов Metazoa, говорит и часто обнаруживае­

101
мый сложный состав зародышевых листков. Например, в составе первичной кишки
зародыша амфибий обнаруживается материал не только будущей энтодермы, но и
клетки-предшественницы мезодермы.
По-видимому, нет и достаточных теоретических оснований для предположения,
что спецификация клеток в раннем эмбриогенезе должна быть напрямую связана
с морфогенетическими движениями. Наоборот, имеются многочисленные данные,
которые свидетельствуют о том, что спецификация клеток представляет собой са­
мостоятельный класс явлений и что она, не будучи жестко связанной с морфогене­
тическими движениями в раннем эмбриогенезе, может реализоваться как в период
дробления, так и после него. Представление о первичной сопряженности формиро­
вания зародышевых листков и цитодифференциации ошибочно.
Наличие зародышевых листков в онтогенезе всех многоклеточных животных за
исключением губок объясняется отнюдь не тем, что в онтогенезе этих животных
происходит рекапитуляция процессов, характерных для некой анцестральной фор­
мы. Оно может быть понято с учетом того, что обособление клеток в виде зароды­
шевых листков — важный элемент и универсальный инструмент формообразования.
Гаструляция не является каким-то уникальным и высоко специфическим морфоге­
нетическим процессом. Характерные для гаструляции перемещения клеточных пла­
стов или миграции мезенхимы — это частное проявление общих морфогенетических
принципов. Перемещения пластов ни в коей мере не зависят от того, являются ли
они гетерогенными, содержащими различные презумптивные зачатки, или же одно­
родными, дифференцирующимися в ходе или после завершения гаструляции.
Универсальные механизмы эпителиального формообразования, равно как и ме­
ханизмы, обеспечивающие миграцию мезенхимы гаи эпиболию, при которой один
слой клеток распространяется по поверхности другого слоя, возникли в эволюции
независимо от гаструляции. Разнообразные морфогенетические движения, которые
обеспечивают гаструляцию двухслойных и трехслойных животных, существовали
уже у губок, хотя у них гаструляция отсутствует. Нельзя не отметить, что у тех
стрекающих, у которых гаструляция происходит путем иммиграции или делами-
нации, эпителиальный морфогенез с его инвагинациями и эвагинациями широко

~Т"
ЭКТОДЕРМА МЕЗОДЕРМА ЭНТОДЕРМА
Производные эктодермы: Производные мезодермы: Производные энтодермы:

- Кожный эпителий и - Мыщцы - Средняя кишка

его производные: - Кости - Пищеварительные
- волос - Целомический железы
- перо эпителий - Печень
- чешуя - Кровеносная система - Легкие
- передняя и задняя - Соединительная
кишка ткань
- Нервная система - Органы выделения
- Органы чувств

Рис. Схема, иллюстрирующая принцип специфичности зародышевых листков.

102
 —►[]—*E S> —►О —►CD

Рис. Jr 3. «Тропы дифференциации» различных зачатков.

Начальные отрезки путей спецификации у разных зачатков могут быть
общими. Благодаря этой общности зачатки предстают как производные од­
ного зародышевого листка.

используется при морфогенетических процессах на более продвинутых стадиях он­

тогенеза (Белоусов, 1987). Существование автономных механизмов эпителиального
формообразования, закрепленных в виде особых генетических программ, видимо, и
лежит в основе независимого возникновения инвагинации в процессах гаструляции
в разных группах Metazoa (Беклемишев, 1964).
Теория зародышевых листков постулировала принцип специфичности (рис. 4-2),
подчеркивающий, что у животных, занимающих различное положение на филоге­
нетическом древе, имеется вполне определенный сходный круг производных экто­
дермы, мезодермы и энтодермы. Эта закономерность развития зародышевых лист­
ков, возможно, служит указанием на существование неких «троп дифференциа­
ции», предпочтительных путей последовательного включения генетических про­
грамм, контролирующих спецификацию, детерминацию и дифференциацию (рис. 4-
3). Очевидно, что предпочтительные пути тем не менее не единственно возможные,
поскольку принцип специфичности листков далеко не абсолютен и широко известны
многочисленные исключения из этого правила.
Конкретные механизмы гаструляции разнообразны. Они будут рассмотрены в
главах, посвященных очерку сравнительной эмбриологии животных

Литература

Д ондуа А. К. Теория зародышевых листков: дискуссионные аспекты / / Онтогенез. 1994.

Т. 25, №6. С. 68-76.
Иванов А . В. Классические гипотезы колониального происхождения Metazoa / / Проис­
хождение многоклеточных животных. JL, 1968. С. 110-154.
И ванова-Казас О. М. Зародышевые листки и гаструляция / / Эволюционная эмбриоло­
гия животных. СПб., 1995. С. 153-264.
Иванова-Казас О. М ., К рининская Е. Б. Курс сравнительной эмбриологии беспозвоноч­
ных животных. Л., 1988. Разделы: Онтогенез Многоклеточных животных Теория зароды­
шевых листков. С. 27-53.
 Глава 5. ЛИЧИНОЧНОЕ РАЗВИТИЕ. М ЕТАМ О РФ ОЗ

Ранний онтогенез подразделяют на эмбриональный и постэмбриональный пери­

оды. Эмбриональным периодом принято называть отрезок времени от начала раз­
вития до рождения или до момента выхода зародыша из яйцевых оболочек. В конце
эмбрионального периода развивающийся индивидуум может иметь план строения,
характерный для взрослой формы, но может и существенно отличаться от нее по
целому ряду важных параметров. В первом случае говорят о животных с прямым
развитием, у которых в результате эмбриогенеза возникает ювенильная (от лат.
juvenis — молодой) форма. Ювенильное животное отличается от взрослой формы
неполным развитием, в частности неполным развитием половой системы, меньши­
ми размерами, иными пропорциями тела и некоторыми второстепенными чертами
(рис. 5-1). Во втором случае речь идет о животных с непрямым, или личиночным
развитием. Личинка — стадия развития, на которой животное, не достигнув дефи­
нитивного плана строения, характерного для половозрелой формы, обнаруживает
тем не менее способность к активному движению и, часто, к самостоятельному пи­
танию. Личинки обычно имеют специализированные органы движения, достаточно

Рис. 5-1. Прямое развитие у насекомых (по: Правдин, 1984).

Последовательные стадии постэмбрионального развития перелетной
саранчи Locusta migratoria.

104
 Рис. 5-2. Непрямое развитие
у насекомых (по: Правдин, 1984).
Последовательные стадии развития
крыжовниковой пяденицы Abraxas
grossul lariata.
1 — гусеница; 2 — куколка; 3 —
имаго.

развитую нервную систему и органы чувств, дифференцированную пищеваритель­

ную систему. План строения личинки может резко отличаться от плана строения
взрослого организма (рис. 5-2). Как правило, у личинок отсутствует половая систе­
ма. Исключение представляют лишь неотенические личинки (см. ниже).
Происхождение личиночной стадии является предметом оживленной дискуссии
зоологов. Очевидно, что личиночная стадия возникала в онтогенезе животных неод­
нократно и разными способами. Можно допустить, например, что личинка совре­
менного животного является видоизмененной дефинитивной формой предка. В этом
случае личиночная стадия соответствует взрослой предковой форме, давшей начало
современному животному путем надстройки анцестрального онтогенеза (рис. 5-3).
Эта идея предполагает, что репродуктивная функция смещается на стадии, которые
возникли в результате указанной надстройки. Такого рода личинки, исходно суще­
ствовавшие как взрослые формы анцестральных животных, можно назвать первич­
ными. Во избежание недоразумения надо иметь в виду, что в научной литературе
термин «первичная личинка» используется также для обозначения личинок живот­
ных, в отношении которых предполагается их изначальное существование. Нель­
зя не заметить, что сторонники имманентности личиночной стадии обходят вопрос
о механизмах возникновения онтогенеза, в ходе которого происходит смена одно­
го плана строения организма другим. В дальнейшем первичными мы будем назы­
вать личинок, возникших предположительно в результате трансформации взрослых
предковых форм каких-то древних микроскопических животных.

1
О-

Рис. 5-3. Схема возникновения непрямого развития путем достройки

анцестрального онтогенеза.
А — анцестральная форма онтогенеза; Б — производная форма онтогенеза,
где дефинитивная стадия А предка становится личиночной стадией.

105
 Личиночная стадия может возникнуть и как вставочная фаза в онтог енезе, имев­
шем ранее установку на развитие дефинитивной формы (рис. 5-4). Адаптивное зна­
чение такой вставки, по-видимому, состоит в разделении фазы репродукции, свой­
ственной половозрелой форме, и фазы накопления энергетических ресурсов, которое
становится теперь прерогативой главным образом личинки. Появление личиночной
фазы может расширить ареал обитания вида благодаря освоению личинкой допол­
нительных экологических ниш. Личинок, возникающих в результате видоизменения
прямого развития, будем называть вторичными. У подобного рода личинок часто
имеются высокоспециализированные органы, характерные только для этой стадии
онтогенеза.

Эмбриональный Дефинитивная
период стадия
Анцестральная
форма

I
Производная
форма
Эмбриональный Личинка Дефинитивная
период стадия

Рис. 5-4- Возникновение непрямого развития в результате интеркаляции

личиночной стадии между эмбриональным и дефинитивным периодами.

Вопрос о первичности или вторичности личинок не прост для решения. Вторич-

ность личиночной стадии морских беспозвоночных признавалась многими выдаю­
щими эмбриологами XX столетия (П. П. Иванов, 1937; Г. А. Шмидт, 1951; Н. А. Ли­
ванов, 1955). Достаточно основательной представляется идея о вторичности личи­
нок губок и книдарий (А. В. Ересковский, 2001), хотя в настоящее время нельзя ис­
ключить и иную точку зрения. Согласно О. М. Ивановой-Казас (1995), К. Нильсену
(Nielsen, 1998), предки древних Metazoa вели пелагический образ жизни. Впослед­
ствии, в силу надстройки онтогенеза, они освоили новую экологическую нишу —
бенталь, и дали формы с пелаго-бештгческим жизненным циклом. При этом преж­
няя дефинитивная форма сохранилась в виде пелагической личинки. С этой точки
зрения развитие низших Metazoa с личинкой носит первичный характер. Разнообра­
зие форм пелагических личинок, отражающее эволюцию предковых дефинитивных
форм животных, представлено на рис. 5-5.
Проблема возникновения личиночной стадии в онтогенезе в последние годы при­
обрела особую актуальность в связи с развернувшимися исследованиями генетиче­
ских механизмов индивидуального развития низших билатеральных животных и
попытками осмыслить филогенез многоклеточных с учетом данных об эволюции их
генома. Так, Эрик Дэвидсон и соавторы (Cameron, Peterson, Davidson, 1998; Peter­
son, Davidson, 2000) полагают, что для большинства видов билатеральных морских
беспозвоночных характерны первичные личинки. Согласно их взглядам, морские
животные, которые были похожи на личинок современных видов с непрямым раз­
витием, существовали задолго до Кембрия. Так же как и современные личинки, они
имели микроскопические размеры (меньше 1 мм) и состояли всего из нескольких
тысяч клеток, представленных весьма ограниченным числом разновидностей.

106
 id а

Личинка с хюстом
Утрата питания с
помощью ресничек

■ ■ Диплеврупа
Ресничный шнур,
окаймляющий роговую
впадину

Рис. 5-5. Схема возникновения разнообразия пелагических личинок

современных Metazoa, обусловленного эволюцией анцестральных форм
(по: Nielsen, 1998).

Дэвидсон и соавторы считают, что в онтогенезе предка билатеральных животных

должна была быть аналогичная стадия. Эта стадия как у анцестральных форм, так
и у современных животных достигается в результате эмбриогенеза «примитивного
типа». Для такого эмбриогенеза характерно дробление со строго определенным и
неизменным для данного вида положением бластомеров, в результате которого об­
разуются клетки-основательницы нескольких клеточных линий, экспрессирующих
специфические гены и формирующих различные части зародыша. Эмбриогенез за­
вершается спустя 8-12 клеточных циклов. Спецификация клеток-основательниц мо­
жет быть автономной, определяемой цитоплазматическими детерминантами яйца,
или зависимой, требующей межклеточных взаимодействий. Крупномасштабные пе­
ремещения эмбриональных клеток у этих животных происходят только после спе­
цификации клеток. По Дэвидсону, при примитивном тине развития отсутствует пе­
риод транскрипционного покоя, и зиготическая транскрипция осуществляется уже
на стадии дробления.
На основании сравнительного исследования генетических систем контроля ран­
него эмбриогенеза Дэвидсон высказывает предположение, что эти системы долж­
ны были существовать уже у предков современных билатеральных животных. По
Дэвидсону, первичные билатеральные животные напоминали личиночные формы
современных морских беспозвоночных с непрямым развитием. По его мнению, ан-
цестральные формы отличались от современных личинок тем, что генерировали
половые клетки — яйца и спермии. Надстройка онтогенеза и появление новых форм
животных, характерных для современной фауны Metazoa, стали возможными бла­
годаря появлению у предковых форм особой популяции резервных клеток («set-aside
cells»), которые на начальных этапах онтогенеза не дифференцировались. Проли­

107
ферация и спецификация этих резервных клеток подпадала под действие вновь
возникавших генетических систем управления. Можно предположить, что подоб­
ные резервные клеточные популяции могли формироваться, например, в результате
временной блокировки дифференциации первичных половых клеток. Исходно такая
форма онтогенеза с отсроченной спецификацией части клеток по-видимому, имела
некоторые преимущества перед анцестральной, поскольку способствовала накопле­
нию энергетических ресурсов, необходимых для гаметогенеза. Не являются ли от­
крытые недавно белки полярных гранул, блокирующие процессы транскрипции в
первичных половых клетках ряда беспозвоночных, отзвуком этих событий далекого
прошлого?
В природе наблюдается обратная зависимость между числом производимых
ооцитов и количеством запасенного в них желтка. Многие животные производят
огромное количество яиц относительно бедных желтком. Так, самки некоторых мор­
ских ежей за год продуцируют примерно 400 млн яиц. Запасов питательных веществ
в япце часто хватает лишь для формирования очень просто устроенной личинки.
В этих случаях именно активное питание создает предпосылки для постепенного
усложнения личинки. В онтогенезе многих животных наблюдается последователь­
ный ряд сменяющих друг друга личиночных форм. Наиболее продвинутые в разви­
тии личинки превращаются в ювенильные формы животных. Например, у полихет
в результате спирального дробления образуется личинка трохофора, которая сег­
ментируется и становится метатрохофорой. В ходе дифференциации метатрохофо-
ра принимает червеобразный вид и превращается в нектохету, ювенильную форму
червя. За счет пролиферативной активности в зоне роста нектохеты и в результате
сегментации растущего тела происходит многократное увеличение размеров живот­
ного, которое постепенно приобретает дефинитивные черты.
Функции, выполняемые личинками, разнообразны. Одна из функций состоит в
обеспечении последующего развития энергией. Среди пелагических личинок беспо­
звоночных животных различают лецитотрофные и планктотрофные формы. Энер­
гетическим ресурсом лецитотрофных личинок (от греч. ХёхпЭос — яичный желток;
тросрос — кормилец) служит желток, запасенный в яйце. Планктотрофные личинки
питаются, поглощая главным образом фитопланктон. У плапктотрофных личинок
имеются особые личиночные органы -ресничные кольца (трохофора) или реснич­
ные шнуры (диплеурула), с помощью которых пищевые частицы направляются в
область ротового отверстия. Питание личинок может происходить и за счет раство­
римых предшественников макромолекул, поглощаемых из морской воды непосред­
ственно тканями личинки (Дондуа, Федорова, 1986; Jackie, 1995).
Наличие планктотрофной личинки и возможность раннего перехода к активному
питанию позволяет обойтись минимальными запасами желтка в яйце, что особенно
валено при отсутствии у животного специализированных гонад. Стратегия разви­
тия, направленная на скорейшее включение механизма активного питания, позво­
ляет производить большое количество яиц с умеренными запасами желтка и других
энергоемких веществ и органелл. У лецитотрофных личинок развитие пищевари­
тельной системы, напротив, может запаздывать. Так, у бластулоподобных личинок,
паренхимул и планул низших Metazoa структурно оформленная пищеварительная
система отсутствует.
Важной функцией личинок является расселение особей по ареалу, а также (у
бентосных форм) выбор субстратов, подходящих для дальнейшего развития. Адап­

108
тивный характер распространения личинок за пределы ареала, занимаемого роди­
тельскими организмами, обусловлен и тем, что расселение создает предпосылки для
генетического взаимодействия с представителями других популяций и интенсифи­
цирует, таким образом, процесс формирования генетического разнообразия. Реа­
лизация этой функции становится возможной благодаря возникновению разнооб­
разных органов движения, развитию элементов нервной системы и формированию
специализированных клеток или органов, обеспечивающих прикрепление личинки
к субстрату.
У многих паразитических животных ли­
чинка осуществляет выбор хозяина. Ли­
чинка моногенетических сосальщиков — он-
комирацидий - снабжена ресничными поя­
сами, обеспечивающими двигательную ак­
тивность (рис. 5-6). Онкомирацидий име­
ет мозговой ганглий, глаза, кишечник, про­
тонефридии. С помощью прикрепительного
аппарата, несущего разнообразные крючки,
плавающий мирацидий закрепляется на по­
верхности тела головастика, а позднее пре­
терпевает метаморфоз и проникает в ткани
хозяина (рис. 5-7). У дигенетических сосаль­
щиков в ходе сложного жизненного цикла
образуются разные формы личинок, обеспе­
чивающих смену хозяев. Из попавшего в вод­
ную среду яйца образуется ресничная ли­
чинка — мирацидий (от греч. ^арахюоБ^с —
детский). На переднем конце личинки распо­
лагается хоботок со стилетом, глазки и нерв­
ный ганглий. Мирацидий проникает в про­
межуточного хозяина (обычно моллюски) и
превращается в спороцисту, у которой ор­
ганы мирацидия редуцируются. Особые ге­
Рис. 5-6. Онкомирацидий моногенетиче- неративные клетки спороцисты дают начало
ского сосальщика Polystomum integerrimum новому партеногенетическому поколению —
(по: Halkin, 1901).
редиям (по имени Ф.Реди), которые остают­
1 — ротовое отверстие; 2 — светочувстви­
тельные органы; 3 — глотка; 4 — протоне­ ся в первичном хозяине и за счет своих гене­
фридий; 5 — кишка; 6 — прикрепительный ративных клеток образуют новое личиноч­
диск; 7 - ресничные пояса. ное поколение — церкарии (от греч. херхос —
хвост). Церкарии имеют характерный хво­
стовой придаток, две присоски, иногда стилет и глазки (рис. 5-8). Церкарии покида­
ют первичного хозяина и после периода свободной жизни в водной среде проникают
в ткани вторичного промежуточного хозяина, где и претерпевают очередной ме­
таморфоз. При поедании промежуточного хозяина личинка паразитического червя
попадает в пищеварительный тракт окончательного хозяина, где и превращается в
дефинитивное половозрелое животное.
Превращение личинки во взрослую форму, или метаморфоз (от греч. ^lexqiop-
фосо — преображать, превращать в другой вид) предполагает замену дифференци-

109
 Рис. 5-7. Метаморфоз онкомирацидия Polystomum integerrimum
(по: Быховский, 1957).

Рис. 5-8. Различные типы церкарий (по: Гинецинская, 1968).

А — церкария Diplodiscus subclavata; Б — трихоцеркария из сем. Lep-
ocreadidae; В — фуркоцеркария из сем. Gymnophallidae. 1 — глазки; 2 —
выделительные каналы; 3 — кишечник; 4 — мочевой пузырь; 5 — хвост; 6 —
протонефридии

рованных личиночных структур дефинитивными. Личиночные органы обычно под­

вергаются разрушению. Клеточный материал при этом утилизируется или, если спе­
циализация не зашла слишком далеко, дедифференцируется и используется вновь

110
при образовании дефинитивной формы животного. В некоторых случаях при мета­
морфозе происходит отторжение личиночных структур. Например, у немертин из
отряда Heteronemertini имеет место некротический метаморфоз (рис. 5-9). У этих
животных дефинитивное тело образуется за счет особых эктодермальных впячи-
ваний — имагинальных дисков, которые погружаются внутрь личинки и, срастаясь
между собой, формируют новый дефинитивный кожный покров. Молодая немер-
тина, сформировавшаяся внутри пилидия, покидает покровы личинки и съедает
их. Глубина метаморфоза зависит от уровня специализации личиночных тканей и
органов: чем более специализирована личинка, тем более глубокие преобразования
происходят при ее превращении.

Рис. 5-9. Образование тела немертины из имагинальных дисков

во время метаморфоза личинки представителя отряда Heteronemertini
(по: Иванова-Казас, 1975).
1 — эктодерма личинки; 2 — головной диск; 3 — церебральный диск; 4 —
туловищный диск; 5 — кишка; 6 — амнион; 7 — дефинитивная эктодерма.

У ряда животных личинки обладают способностью к бесполому размножению

(например, у некоторых мшанок, асцидий, иглокожих). Известна также способность
некоторых личинок к половому размножению. В этом случае у личинок формиру­
ется половая система, подобная половой системе взрослых животных, что можно
рассматривать как проявление своеобразной гетерохронии. При этом различают
прогенез, или раннее развитие половых продуктов до достижения взрослой ста-

111
дни, и неотению, или задержку развития соматических органов. Широко известна
неотения амбистом — хвостатых амфибий, имеющих половозрелых личинок — аксо­
лотлей. Задержка развития соматической сферы взрослых животных у амбистом
связана с пониженной функцией щитовидной железы. Популяции аксолотлей могут
поддерживать свое существование без достижения конечной фазы развития.

Литература

Иванова-Казас О. М. Постэмбриональное развитие, личинки и метаморфоз / / Эволю­

ционная эмбриология животных. СПб., 1995. С. 296-439.
Nielsen С. Origin and evolution of animal life cycles / / Biol., Rev. 1998. Vol. 73. P. 125-155.
P eterson K. J., Davidson E. H. Regulatory evolution and the origin of the bilaterians. PNAS
USA, 2000. Vol. 97. P. 4430-4433.
 Часть II
ОСНОВНЫЕ ТИПЫ
РАЗВИТИЯ ЖИВОТНЫ Х

Знакомство с конкретными формами развития животных обнаруживает их

огромное разнообразие. Различия касаются даже самых ранних этапов развития -
дробления, первичной дифференциации зародыша, закладки осей животного, не
говоря уже о более поздних стадиях, когда осуществляется органогенез. Развитие,
как мы видели, может быть прямым, и в этом случае план строения тела взрослого
животного закладывается уже в эмбриональном периоде. Другой характер имеет
непрямое развитие, при котором сначала в эмбриогенезе формируется личинка, ко­
торая затем, в ходе метаморфоза, путем сложных морфогенетических перестроек
преобразуется в дефинитивную форму. Тем не менее разнообразие форм развития
может быть сведено к нескольким типам. Очевидно, что классификация типов раз­
вития во многом зависит от субъективной оценки ее авторами значения тех или
иных элементов эмбриогенеза.
В первой половине XIX столетия К. М. Бэр на основании имевшихся в его распо­
ряжении сравнительно скудных данных о развитии разных видов животных сделал
вывод о наличии четырех основных планов развития, каждый из которых соответ­
ствует тому или иному типу организации животных (1828, 1837). Ведущей характе­
ристикой плана развития, по К. М. Бэру, служит тип симметрии формирующегося
зародыша. Бэр полагал, что выделенные им типы животных эволюционно между
собой не связаны, но допускал, что в пределах типа возможна эволюция от низших
форм к высшим.
Современный классик сравнительной и эволюционной эмбриологии О. М. Ивано­
ва,-Казас насчитывает восемнадцать типов развития. Под типом развития Иваиова-
Казас понимает сложившийся в ходе эволюционного развития комплекс взаимосвя­
занных морфогенетических процессов, как очень древних, унаследованных от отда­
ленных 'предков, так и возникших в болев позднее время. В пределах типа развития
имеются варианты, которые обусловлены условиями существования, а также стра­
тегией размножения. По мнению О. М. Ивановой-Казас (1995), особенности каждого
нового типа развития определяются неким ведущим онтогенетическим процессом,
выяснение природы которого и составляет одну из задач эволюционной эмбрио­
логии.
Тип развития той или иной группы животных формируется в процессе эволю­
ции и определенным образом связан с филогенезом этой группы. Эта связь иногда
очевидна, но, как мы увидим при рассмотрении конкретного материала, животные,

113
 Lophotrochozoa Ecdysozoa Deuterostomia
II
s
eо
|E 3&§k
H iilii
i S
йhй оrigi
О .С Ц И
R ca
С О <D R О
е й ? s e e d 14

1леиие/-к 1 О Настоящая
(Линька хорда

for из r S Анус из
onacronopaV^y- \__у ода-----
[астонора
Двулучевая
радиальная
( Асимметрия______ - А Трехслоиность,
и б ш«латеральная
ж ------------симметрия

Двуслойностъ,
радиальная симметрия

НАСТОЯЩИЕ
МНОГОЮШТОЧНЫЕ

КОЛОНИАЛЬНЫЕ
ПРОТИСТЫ

Рис. 6-1. Современная схема филогении многоклеточных животных.

принадлежащие к одному монофилетическому типу, могут и заметно различаться

по целому ряду важных параметров индивидуального развития.
Современная филогенетика при установлении родства различных классов и ти­
пов животных решающее значение придает данным молекулярной биологии о сход­
стве и различиях нуклеотидных последовательностей ДНК разных генов у предста­
вителей различных групп многоклеточных, например, гена 18S рРНК или кластер­
ных Н ох-генов. Согласно этим данным, современные Metazoa представлены пятью
основными группами (рис. 6-1). Одну из наиболее обособленных и древних групп
представляют Губки (Porifera). Другую группу образуют двухслойные животные
(Diploblastica), в состав которых входят Placozoa, Cnidaria. и Ctenophora. Следую­
щие три группы характеризуются трехслойностыо и билатеральностью (Triploblas-
tica или Bilateria). Это, во-первых, Ecdysozoa, включающие Приапулид, Нематод
и Членистоногих; во-вторых, Lophotrochozoa, объединяющие Моллюсков, Червей,
Брахиопод, Мшанок, Форонид и Плоских червей, и, наконец, Deuterostomia, или
Вторичноротые, в составе которых находятся: Иглокожие, Полухордовые, Первич­
нохордовые, Головохордовые и Хордовые. Все эти группы имеют свои специфиче­
ские особенности раннего развития. Так, для вторичноротых характерно образо­
вание трех зародышевых листков и закладка ротового отверстия независимо от

114
бластопора (первичного рта), возникающего в процессе гаструляции. У Ecdysozoa
и Lophotrochozoa также имеются эктодермальные, мезодермальные и энтодермаль-
ные производные, но эти группы относятся к первичноротым животным, у которых
рот возникает на месте бластопора.
Стрекающие (Cnidaria) — животные с двумя листками: эктодермой и энтодер­
мой. В онтогенезе губок дифференциация клеточных элементов отличается боль­
шим своеобразием: у них нет энтодермы, а следовательно, нет и зародышевых лист­
ков, хотя некоторые исследователи, стремясь подчеркнуть единство всех Metazoa,
ошибочно сближают губок с двухслойными животными.
В пределах данной книги нет необходимости, да и возможности, описать все
многочисленные типы развития, присущие современным многоклеточным живот­
ным. Мы ограничимся общей характеристикой развития лишь некоторых основных
типов. При этом с учетом задачи учебника, предпочтение будет отдано тем группам,
представители которых стали модельными объектами биологии развития.
За последние двадцать лет вновь усилился интерес к проблемам эволюцион­
ной эмбриологии. Стало очевидным потенциальное значение современной биоло­
гии развития для решения общих проблем эволюционной биологии. Исследование
молекулярно-генетических механизмов эмбрионального развития обнаружило свое­
образный парадокс, суть которого состоит в том, что все многообразие форм разви­
тия животных, принадлежащих к морфологически различным типам, часто контро­
лируется и направляется генами, структура которых в высшей степени консерватив­
на. Современная биология развития подошла к решению вопроса о закономерностях
эволюции генетических механизмов онтогенеза. Раздел биологии развития, который
исследует эту проблему, называют эволюционной биологией развития. Очевидно,
что вопрос о том, как эволюция молекулярно-генетических систем, контролирую­
щих индивидуальное развитие, преобразуется в эволюционные изменения морфо­
логии животных, является ключевым для понимания проблем макроэволюции, т.е.
имеет общебиологическое значение.
В самом общем виде можно сказать, что в основе эволюции форм лежит воз­
никновение новых программ развития. Суть этих процессов состоит в мутацион­
ном, наследуемом изменении многоступенчатой генетической программы, которая
обеспечивает формирование определенного фенотипа. Если естественный отбор со­
храняет видоизмененный фенотип, сохраняется и новая программа развития. Если
внутривидовые эволюционные изменения морфологии требуют, по крайней мере,
трех событий — мутации, репрограммирования и отбора, то эволюция, выходящая
за пределы вида, нуждается, кроме того, и в репродуктивной изоляции (W. Arthur,
2002).
В первом томе учебника основное внимание обращено на морфологическую ха­
рактеристику разных типов развития, В отдельных случаях делается попытка оце­
нить возможное значение видоизменений онтогенетических путей становления фе­
нотипа для процессов макроэволюции. Более глубокое рассмотрение проблем эво­
люционной биологии развития возможно после ознакомления с основными механиз­
мами генетического контроля над развитием и их эволюцией, представленными во
втором томе.

115
 Глава 6. ГУБКИ (PORIFERA)

Губки — древнейшая группа многоклеточных животных, возникшая не позже

600 млн лет тому назад, в докембрии. Они образуют изолированную ветвь наиболее
просто организованных Metazoa, что предопределяет и своеобразие их эмбриональ­
ного развития. В настоящее время науке известно около 9000 видов губок, которые
объединяются в три основных класса, различающихся прежде всего строением сво
его скелета. У известковых губок (Calcispongiae) скелет построен из кальцита. Стек­
лянные губки (Hexactinjllida) имеют шестилучевые кремниевые иглы, а обыкновен­
ные губки (Demospongiae) характеризуются наличием четырехлучевых и одноосн.лх
кремниевых игл. К Demospongiae относятся и роговые губки.
Примитивность организации губок проявляется как на анатомическом, так и
на гистологическом уровне. Тканевые элементы у губок не всегда строго детерми­
нированы и часто обладают способностью к взаимным превращениям. У губок пет
энтодермы. Отсутствует нервная и мышечная системы, хотя у некоторых губок име­
ются миоциты, обеспечивающие сокращения оскулюма. Среди тканевых элементов
губок различают пинакодер.му — плоский эпителий поверхности тела и каналов водо­
носной системы, представленный уплощенными или грибовидными пинакоцитами,
и хоанодерму, состоящую из воротничковых жгутиковых клеток, или хоаноцитов,
образующих жгутиковые каналы и жгутиковые камеры (рис. 6-2). Между пипа-
кодермой и хоанодермой расположен мезохил (мезоглея). В мезоглее встречаются
звездчатые клетки, секретирующие коллаген, — кол./гепциты\ клетки, участвующие
в формировании скелета: органического— спонгоциты и неорганического— склеро-
циты, а также блуждающие амебоциты. У демоспонгий среди амебоцитов различа­
ют тотипотентные клетки— археоциты, способные дать начало всем типам клеток,
в том числе и половым (рис. 6-3). У известковых губок тотипотентньши клетками
являются хоаноциты.

Рис. 6-2. Схема строения однооскулюмной губки

(по: Weissenfels, 1989).
1, 9 — приносящий канал; 2 — прозопиль; 3 — пора; 4 — апопиль; 5 —
оскулюм; 6 — выносящий канал; 7 — спикула; 8 — хоаноцитная камера.

Примитивность губок выражается в отсутствии гонад и половых протоков. Во

время сперматогенеза у представителей Demospongiae формируются временные сфе-

116
 10 9 8
Рис. 6-3. Схема строения и клеточный состав губок
(по: Вощ у-Esnault, Rutzler, 1997).
1 — экзопинакоцит; 2 — актиноцит; 3 — склероцит: 4 — археоцит; 5 — эндопинако-
цит; 6 — колленцит; 7 — хоаноцит; 8 — спонгин; 9 — базопинакоцит; 10 — сферульная
клетка; 11 — коллаген.

рические образования, ограниченные уплощенными соматическими клетками, или

сперматоцисты, в которых происходит сперматогенез. У Calcispongiae сперматозои­
ды одиночные. Женские половые клетки обычно разбросаны в мезохиле, иногда они
образуют небольшие скопления. Среди губок имеются как раздельнополые (гопохо-
ристы), так и гермафродитные виды. Ооциты на ранних этапах оогенеза имеют вид
амебоидных клеток и принимают характерную сферическую форму лишь по мере
роста и накопления желточных гранул. Доставка питательных веществ и оргапелл
в ооциты осуществляется различными способами (рис. 6-4). Во-первых, транспорт
веществ может происходить через плазматическую мембрану ооцита, в частности,
путем пиноцитоза (рис. 6-4, А); во-вторых, у ряда губок содержимое особых пи­
тающих клеток в ооцит перемещается, по-видимому, по цитоплазматическим мо­
стикам (рис. 6-4, Б); в-третьих, описано поглощение ооцитами амебоцитов мезохила
(рис. 6-4, В). Наконец, у ряда губок имеется эндогенное желткообразование. Своеоб-

Рис. 6-4. Схема взаимоотношений ооцитов губок

со вспомогательными клетками в период вителлогенеза
(по: Ересковский, Короткова, 1999).
А — поглощение ооцитом питательного материала,
секретированного вспомогательными клетками в пери-
ооцитарное пространство; Б — передача материала от
вспомогательных клеток ооциту через цитоплазмати­
ческий мостик; В — фагоцитоз вспомогательных кле­
ток ооцитом; Г — вспомогательные клетки остаются
плотно ассоциированными с ооцитом, передача пита­
тельного материала осуществляется в ходе эмбриоге­
неза.

117
разная стратегия снабжения будущего зародыша питательными веществами у неко­
торых губок состоит в том, что вспомогательные клетки образуют своего рода ассо­
циацию с ооцитом, и их содержимое используется уже в ходе эмбриогенеза (рис. 6-4,
Г). В период вителлогенеза ооциты достигают дефинитивных размеров, которые у
разных видов варьируют от 40 до 500 мкм. Принято считать, что ооциты губок не
имеют яйцевых оболочек, хотя, по крайней мере, у одного вида ( Tetilla japonica)
недавно была описана типичная желточная оболочка.
У некоторых губок оплодотворение происходит во внешней среде, куда половые
клетки выводятся через оскулюм. Чаще, однако, эмбриональное развитие идет в
тканях материнского организма. Эмбриональное развитие живородящих губок про­
исходит в особых капсулах — фолликулах, формирующихся в конце вителлогенеза
уплощенными соматическими клетками различной природы.
У всех изученных к настоящему времени видов губок дробление полное. Оно
может быть равномерным и — реже — неравномерным. Процесс дробления заверша­
ется образованием бластулы.
У известковых губок подкласса
Calcinea и, возможно, некоторых де-
моспонгий бластула имеет выражен­
ную полость и называется целобла-
стулой (от греч. xoiXoc— имеющий
полость; рХаотос - зародыш) (рис. 6-5,
А). Иной характер строения у личин­
ки Calcinea — калъцибластулы. Клет­
ки кальцибластулы снабжены жгути­
ками, обеспечивающими ее подвиж­
ность. Благодаря ингрессии клеток
полость кальцибластулы заполняется
клетками (рис. 6-5, Б). На этой стадии
личинка прикрепляется к субстрату и
распластывается по нему (рис. 6-5, В).
Рис. 6-5. Схема развития Calcinea Между периферическими клетками и
(рис. А. В. Ересковского). внутренней клеточной массой возни­
А — целоблаетула; Б — личинка кальцибластула;
В — метаморфоз.
кают лакуны. При этом находящиеся
на поверхности клетки уплощаются и
дифференцируются как гпшакоциты, а внутренние дают начало хоаноцитам и скле-
робластам. Предполагается, что клетки прикрепившейся личинки еще не коммити-
рованы и дифференцируются в соответствии с занимаемым положением.
У известковых губок из подкласса Calcaronea развитие идет иным путем
(рис. 6- 6 ). У них дробление завершается образованием бластулы, уже состоящей
из клеток двух типов — микромеров, которые формируют жгутики, и зернистых
макромеров. При этом на стадии ранней бластулы— стомобластулы (от греч.
oxojia — рот; рХаотос — зародыш) между макромерами остается отверстие — фиало-
пор (от греч. cpiccXr)— чаша; тсорос — проход). Микромеры имеют жгутики, обращен­
ные внутрь полости бластулы (рис. 6- 6 , А). На следующем этапе, благодаря со­
гласованной амебоидной активности клеток материнского организма и зернистых
клеток зародыша, происходит выворачивание бластулы через фиалопор, так назы­
ваемая инверсия бластулы, или экскурвация (рис. 6- 6 , Б). В результате этого про-

118
 Рис. 6-6. Схема развития Caicaronea.
(рис. А. В. Ересковского).
А — стомобластула; Б — экскурвация; В — личинка амфибластула.

цесса образуется амфибластула (от греч. ajicpi — с двух сторон; рХиотос зародыш),
состоящая из двух по-разному дифференцированных областей. Передняя область
образована столбчатыми клетками со жгутиками, обращенными во внешнюю среду,
а задняя — крупными округлыми гранулярными клетками (рис. 6- 6 , В). Амфибла­
стула прикрепляется к субстрату передним концом, клетки которого теряют свои
жгутики, и принимает вид уплощенного диска. Из зернистых клеток задней области
личинки образуются пинакоциты. Клетки внутренней массы, которые возникают из
погружающихся внутрь клеток переднего конца личинки, дифференцируются на
периферические и центральные, периферические клетки образуют мезохил с ха­
рактерными для него элементами — склеробластами и спикулами, а центральные —
дают хоанодерму. После формирования пор и оскулюма возникает трубкообразная
молодая губка— олинтус (от греч. бХи'йос — незрелый инжир).
У многих Demospongiae (рис. 6-7) в результате неупорядоченного хаотическо­
го дробления формируется стерробластула (от греч. атеррос— плотный; рХасттос —
зародыш), или морула (рис. 6-7, А). В дальнейшем она трансформируется в удли­
ненную вдоль передне-задней оси личинку — паренхимулу, покрытую жгутиковыми
клетками. Иногда на заднем полюсе или на обоих полюсах личинки жгутиковые
клетки отсутствуют (рис. 6-7, Б). Внутри личинки дифференцируются амебоциты,
а также иные типы клеток, характерные для взрослых особей, в том числе секретор­
ные клетки и склеробласты, образующие спикулы скелета. У личинок пресноводных
губок (бадяг) имеются хоаноциты, которые уже на этой стадии могут формировать
хоаноцитные камеры (6-7, В). Паренхимулы прикрепляются к субстрату передним

119
 г

Рис. 6-7. Схема развития Demospongiae е паренхимулой

(по: Ересковский, 1999).
А — стерробластула (морула); Б — паренхимула; В — паренхимула прес­
новодных губок; Г — метаморфоз паренхимулы. 1 — фолликул; 2 - - передний
полюс; 3 — личиночные спикулы; 4 — хоаноциты; 5 — личиночная полость;
6 — экзопинакобласты.

полюсом. Основную морфогенетическую роль при метаморфозе паренхимулы игра­

ют ее внутренние клетки — личиночные археоциты. Часть этих клеток мигрирует
на поверхность личинки, дифференцируясь в пинакоциты. Археоциты, оставшиеся
внутри развивающегося животного, дают начало склеробластам и другим элементам
мезохила. Покровные, жгутиковые и безжгутиковые клетки личинки оказываются
внутри формирующейся куколки (рис. 6-7, Г). Судьба жгутиковых клеток личинки
может быть, по-видимому, различной. У одних видов, они подвергаются апоптозу,
у других частично превращаются в хоаноциты, у третьих — дифференцируются и
как хоаноциты, и как клетки мезохила. После формирования функционирующей
водоносной системы молодая однооскулюмная губка демоспонгий носит название
рагон.
Следует заметить, что без специальных исследований с применением надежных
маркеров, позволяющих следить за перемещением и трансформациями клеток, бы­
ло бы опрометчиво делать какие-либо окончательные выводы о детерминации кле­
ток на ранних этапах развития губок. Немногочисленные экспериментальные ис­
следования свидетельствуют о том, что проблема формирования клеточных линий
в онтогенезе губок сложнее, чем это представляется на первый взгляд. Действи­
тельно, при разрезании амфибластулы губки Sycon на переднюю (жгутиковую) и
заднюю части из передней области возникали бластулообразные личинки, которые
далее не дифференцировались, тогда как зернистые клетки заднего отдела обнару­
живали тотипотентность и давали все элементы взрослой губки. У других видов
раздельное культивирование жгутиковых клеток и клеток внутренней массы парен­
химулы показало, что хоаноциты развиваются в обоих случаях. В опытах с мечени-
ем радиоактивным йодом поверхностных клеток личинки Microciona prolifera было
установлено, что эти клетки погружаются во внутреннюю массу, где их фагоци­
тируют амебоциты, тогда как хоаноциты возникают из клеток внутренней массы.

120
По-впдимому, в онтогенезе губок хоаноциты могут возникать из разных источников,
в том числе из археоцитов. Так или иначе имеющиеся данные не дают оснований
говорить о наличии у губок зародышевых листков, как особых клеточных популя­
ций, дающих начало определенным тканевым образованиям, которые можно было
бы назвать эктодермой или энтодермой.
Наиболее продвинутым в эволюционном отношении следует считать развитие
Homoscleromorpha, выделяемых ныне в ранг отдельного класса (Ересковский, 2002).
При анатомической простоте организации, только эта группа губок имеет настоя­
щую базальную мембрану, в состав которой входят тенасцин, ламинин и коллаген
IV типа , т. е. обладает признаками истинных тканей Eumetazoa. Базальная мем­
брана подстилает хоанодерму и пинакодерму губки, а в период размножения она
подстилает также сперматоцисту, фолликул яйца и зародыша. Базальная мембрана
характерна и для жгутикового эпителия личинок этих губок.
Для развития Homoscleromorpha характерны следующие основные особенности.
Сперматозоиды имеют акросому. Дробление полное равномерное, неупорядоченное,
приводящее к формированию равномерной неполяризованной морулы (рис. 6- 8 , А).
В результате своеобразной мультиполярной эмиграции, в ходе которой происхо­
дит центробежный выход клеток морулы на периферию, образуется целобластула
(рис. 6- 8 , Б). В конце стадии формирования личинки проявляется передне-задняя
полярность. Личинка цинктобластула (от лат. cinctus — опоясанный) состоит из
однослойного жгутикового эпителия, ограничивающего обширную центральную по­
лость (рис. 6- 8 , В). Для цинктобластулы характерен пояс жгутиковых клеток с внут-

Рис. 6-8. Схема развития Homoscleromorpha

(по: Ересковский, 2002).
А — морула; Б — целобластула; В --личинка цинктобластула; Г — мета­
морфоз. 1 — фолликул; 2 — базальная мембрана; 3 — переходные клетки.
121
риядерными кристаллоидами. Личинки Homoscleromorpha имеют уникальный для
губок ресничный эпителий эуметазойного типа с базальной мембраной и опоясы-
ваютцими десмосомами. При метаморфозе цинктобластул происходит инвагинация
переднего полушария, и формируются карманообразные впячивания жгутикового
слоя, которые позднее образуют хоаноцитные камеры (рис. 6- 8 , Г). Другими слова­
ми, воротничковые клетки губки образуются путем прямой трансформации реснич­
ных клеток личинки. Клетки мезохила формируются в результате дедифференциа­
ции жгутиковых клеток, которые выселяются из эпителия личинки. При метамор­
фозе передне-задняя ось личинки становится апико-базальной осью губки.
Губкам присуще бесполое размножение, разные формы которого представлены
на рис. 6-9. При ф'рагментации отламывающиеся под механическим воздействием
кусочки губок проявляют способность к заживлению раны и ограниченной регене­
рации. Широко распространено у губок латеральное почкование, в ходе которого
развитие новой особи происходит на боковой поверхности тела материнской губ­
ки. Для почек обычно характерна присущая губкам пространственная организа­
ция, хотя нередко они утрачивают исходную полярность и образованы скоплением
недифференцированных элементов — археоцитов, которые после отделения почки
от материнской особи вместе со склеробластами формируют новую губку.

Рис. 6-9. Формы бесполого размножения у губок.

1 — фрагментация; 2 — почкование; 3 — геммулообразование.

Особый интерес представляет геммулогенез, в ходе которого образуется огром­

ное число геммул (от лат. gemmula — маленькая почка), особых репродуктивных
тел, возникающих путем агрегации полипотентных клеток. Образование геммулы —
достаточно сложный морфогенетический процесс, который начинается с агрегации
клеток мезохила— археоцитов, трофоцитов, особых склероцитов и спонгоцитов. Ар-
хеоциты фагоцитируют питающие клетки, интенсивно растут и накапливают значи­
тельные массы разного рода включений, которые иногда называют «ложным желт­
ком». Такие археоциты называют тезоцитами (от греч. -деак; — установка, заклад­
ка). На поверхности скопления тезоцитов обычные археоциты формируют плоский
эпителий — временный покров. Под этим покровом спонгоциты образуют столбча­
тый эпителий и секретируют капсулу геммулы. В области микропиле, через которое
впоследствии выходит молодая губка, капсула относительно тонка. Склероциты до­
ставляют в геммулу особые скелетные элементы — амфидиски, которые встраивают­
ся между спонгоцитами и включаются в состав капсулы. После диапаузы, которая

122
продолжается в течение периода, неблагоприятного для жизни губки, происходит
прорастание геммулы. Перед вылуплением тезоциты многократно делятся, теряя
при этом свои включения и трансформируются, таким образом, в популяцию ги-
стобластов. После разрушения оболочки в области микропиле гистобласты мигри­
руют из капсулы и образуют двуслойную пинакодерму. В образовавшийся мешочек
выселяются тезоциты, которые дают начало археоцитам и склеробластам, форми­
рующим мезохил новообразованной губки. На конечных этапах развития молодой
губки из археоцитов возникают хоаноциты, образующие хоаноцитные камеры. Ги­
стобласты принимают участие в образовании внутренних каналов губки (рис. 6- 10 ).

Рис. 6-10. Развитие губки из геммулы (по: Fel\ 1997).

1 — капсула геммулы; 2 — тезоцит; 3 — гистобласт; 4 — пинако-
дерма; 5 — базальная мембрана; 6 — микропиле.

Сравнительное исследование индивидуального развития губок обнаруживает у

них два типа организации онтогенеза. В первом случае, изредка встречающемся у
некоторых Demospongiae (род Tetilla), осуществляется прямое, т. е. безличиночное
развитие. Формирование тела молодой губки начинается сразу же после прохожде­
ния стадии бластулы. Второй тип онтогенеза с личиночным развитием и метамор­
фозом характерен для подавляющего большинства губок. При развитии с личин­
кой паренхимулой во время метаморфоза происходит замещение личиночных по­
кровных структур. Источником нового покровного эпителия в этом случае служат
клетки внутренней массы личинки. При развитии с личинками бластулами (каль-
цибластулы, амфибластулы и др.) деструктивные процессы в ходе метаморфоза не
имеют существенного значения. Дифференциация клеточных элементов молодой
губки происходит главным образом на основе ресничных клеток бластулы.
Важной особенностью развития всех губок является регионализация тела заро­
дыша, т. е. подразделение личинки на переднюю и заднюю области. Эта ранняя по­
ляризация тела развивающегося индивидуума предопределяет образование апико-
базальной оси молодого животного. Другой характерной чертой развития губок
является сравнительно поздняя спецификация клеток, механизмы которой прак­
тически не исследованы. Насколько можно судить, детерминация судьбы клеток и
направление их дифференциации определяется местоположением клеток и межкле­
точными взаимодействиями. Эти черты резко отличают эмбриональное развитие
губок от развития низших билатеральных животных.
Обращает на себя внимание то, что в раннем развитии губок происходят раз­
нообразные морфогенетические движения клеток. Перемещаться могут и индиви­

123
дуальные клетки, и эпителиальные пласты. Первое наблюдается в случае ингрес-
сии (погружение клеток с поверхности внутрь) или в случае эмиграции (вселение
клеток из глубинных слоев в наружные). Наблюдаемые в раннем онтогенезе губок
элементы морфогенетических процессов, в том числе эпителиальные морфогенезы,
характерны для всех Metazoa. По-видимому, именно общность механизмов морфо­
генетических процессов определяет внешнее сходство личинок губок и стрекающих.
Итак, мы можем констатировать, что у губок имеется весь спектр элементар­
ных морфогенетических движений, которые характерны и для двухслойных, и для
трехслойных животных Это дает основание предположить, что появление систем
клеточной адгезии и механизмов ее пространственного и временного контроля было
необходимой предпосылкой возникновения всех Metazoa.

Литература

Е ресковский А. В. Сравнительная эмбриология губок (Porifera). СПб., 2004 (в печати).

Иванов А. В. Эмбриональное развитие губок и их положение в системе животного ми­
ра / / Журн. общ. биол. 1971. Т. 32, вып. 5. С. 557-572.
И ванова-Казас О. М. Тип Porifera (Spongia) / / Сравнительная эмбриология беспозво­
ночных животных. Новосибирск, 1975. С. 102-13С.
 Глава 7. ДВУСЛОЙНЫ Е (DIPLOBLASTICA)

К числу древнейших многоклеточных относится и группа Двуслойных

(Diploblastica), в состав которой входят тип Стрекающих (Cnidaria) и тип Гребневи­
ков (Ctenophora). Для животных этой группы характерны радиальный план строе­
ния тела и образование в раннем развитии двух зародышевых пластов: эктодермы
и энтодермы. У гребневиков и некоторых стрекающих в ходе развития наблюдается
преемственность между полюсом яйца, где закладывается первая борозда дробле­
ния, задней областью личинки и оральной областью взрослого животного.

7.1. Стрекающие (Cnidaria)

Тип Стрекающих насчитывает около 9000 видов, объединенных в несколько

классов, среди которых наиболее обширными являются Hydrozoa, Scyphozoa и Ап-
thozoa. В огромном большинстве стрекающие — морские животные, хотя имеются
виды, освоившие пресные и солоноватые воды. Это радиально-симметричные жи­
вотные с орально-аборальной главной осью симметрии и относительно простым пла­
ном строения. Стенка тела образована двумя эпителиальными пластами — внешним,
или эпидермисом и внутренним — гастродермисом. Последний выстилает гастровас-
кулярную полость — целентерон, которая выполняет и пищеварительную функцию,
и обеспечивает циркуляцию веществ по телу животного. Гастроваскулярная полость
сообщается с внешней средой отверстием, выполняющим одновременно функции и
ротового отверстия и ануса.
В состав эпителиальных пластов входят разнообразные клеточные элементы
(рис. 7-1). В эпидермальном слое имеются эпителиально-мышечные, чувствитель­
ные, нервные, железистые и стрекающие клетки — нематоциты, а также недиф­
ференцированные мультипотентные интерстициальные клетки (i-клетки). В гастро-
дермисе имеются эпителиально-мышечные и железистые клетки. Между эпители­
альными пластами расположен внеклеточный матрикс — мезоглея, степень развития
которой сильно варьирует у разных видов. В мезоглее различают характерный для
базальных мембран коллаген IV типа, фибронектин, гепаран-сульфат-протеогликан,
ламинин и др. У Scyphozoa в мезоглее имеется самоподцерживающаяся популяция
амебоцитов.
Для стрекающих характерны два типа организации — полипоидная и медузо-
идная. У многих видов, например, принадлежащих к метагенетическим Hydrozoa
или к Scyphozoa, происходит закономерное чередование этих форм, или метагенез

125
 Рис. 7-1. Микроскопическая ана­
томия стенки Hydrozoa (по: Ruppert,
Barnes, 1994).
1— эпидермис; 2 — книдоциль; 3 —
нематоциста; 4 — книдоцит; 5 — рес­
ничный рецептор; 6 — эпителиально-мы­
шечная клетка; 7 — интерстициальная
клетка; 8 — сенсорная клетка; 9 — ней­
рон; 10 — продольные мышечные фиб­
риллы; 11 — мезоглея; 12 — базальная
мембрана; 13 — гастродермис; 14 —
кольчатые мышечные фибриллы; 15 —
ядро; 16 - железистая клетка; 17 — гра­
нулярный секрет; 18 — ресничка; 19 -
формирующаяся пищевая вакуоль; 20 -
гастродермально-мышечная клетка.

(рис. 7-2). В этом случае половое размножение связано с медузоидным поколением,

тогда как для полипоидного поколения характерно бесполое размножение. Медузо-
идная фаза может быть редуцированной или полностью отсутствовать (например,

Рис. 7-2. Метагенез у Hydrozoa (по: Ruppert, Barnes, 1994).

А — яйцо; Б — планула; В - начало образования колонии; Г — зрелая
колония; Д — медуза. 1— столон, или гидрориза; 2 — гастроваскулярная по­
лость; 3 — ценосарк; 4 — перисарк; 5 — эпидермис; 6 — гастродермис; 7 —
гастрозооид; 8 — гидрокалус; 9 — рот; 10 — гиносчом; 11 — щупальце; 12 —
гидротека; 13 — медузоидная почка; 14 — гонозооид; 15 — репродуктивный
полип; 16 — манубриум; 17 — гонада; 18 —радиальный канал.

126
у представителей отряда Hydrida). Стадия медузы отсутствует и у кораллов, у ко­
торых и половое и бесполое размножение обеспечивается полипами. Однако есть
формы, представленные только медузами. Так, в жизненном цикле животных из
отряда Trachylida нет полипоидной фазы.
Часто полипы образуют колонии с общей гастроваскулярной полостью. В коло­
нии Hydrozoa имеются разные типы полипов, или зооидов (см. рис. 7-2). Большая их
часть представлена гастрозооидами, или питающими полипами; у некоторых видов
образуются дактилозооиды, выполняющие благодаря обилию книдоцитов (от греч.
xvi6r] — крапива) защитную функцию. Репродукцию осуществляют гонозооиды, или
медузоидные почки, производящие гаметы. Медузоиды либо отделяются от колонии
и превращаются в медуз, либо остаются в составе колонии в виде гонофоров.
Половые клетки образуются из интерстициальных клеток. Как показали иссле­
дования, выполненные на гидрах, среди i-клеток имеется особая популяция, комми-
тированная как линия половых клеток. В процессе оогенеза важную роль в снаб­
жении ооцита питательными веществами играют фагоцитоз и слияние клеток. Для
представителей данного типа характерны временные гонады, хотя у Scyphozoa об­
разуются постоянные гонады.
Оплодотворение у стрекающих обычно наружное. Тем не менее во всех классах
стрекающих имеются виды с внутренним оплодотворением, вплоть до своеобразной
копуляции, описанной у актинии Sagartia. В последнем случае педальные диски
родительских особей образуют общую камеру, в полость которой выводятся гаметы
и в которой оплодотворенные яйца развиваются до стадии личинки.
Два первых деления дробления меридиональные, а третье — экваториальное. Об­
ращает на себя внимание то, что борозды делений дробления не кольцевые, а вре­
зающиеся: они начинаются у одного полюса оплодотворенного яйца и постепенно
распространяются к противоположному, где связь между бластомерами наблюдает­
ся сравнительно длительное время (рис. 7-3).
Стрекающие отличаются большим разнообразием типов дробления. При полном
и равномерном дроблении часто наблюдается радиальный характер расположения
бластомеров. У некоторых видов, однако, связь между бластомерами слабая, так что
они могут изменять свое положение относительно других клеток. Если происходит
вращение бластомеров, то могут возникать фигуры, напоминающие по внешнему
виду спиральное дробление, т. е. возникает псевдоспиральность (см. рис. 7-3). В
других случаях дробящийся зародыш теряет определенность геометрических форм
(анархический тип дробления, рис. 7-4). При неравномерном дроблении расположе­
ние неупорядочено и рисунок его изменчив. В яйцах, богатых желтком, цитотомия
может запаздывать. У некоторых видов центральная масса желтка вообще не де­
лится. В этом случае дробление становится поверхностным.
Разнообразие форм дробления сказывается и на структуре бластулы. У стрека­
ющих описано несколько типов бластул: полая целобластула, образованная одним
рядом клеток, которые окружают обширный бластоцель; плотная стерробластула,
также образованная одним рядом клеток, но не имеющая бластоцеля, морула и,
наконец, перибластула, для которой характерно расположение внешнего слоя кле­
ток на поверхности желточной массы. Клетки целобластулы снабжены жгутиками,
которые обеспечивают ее движение.
На следующем этапе развития происходит гаструляция, в ходе которой у стрека­
ющих образуются два основных пласта тела: наружный пласт, или эктодерма (от

127
 Рис. 7-3. Дробление и формирование бластулы у Rathkea fasciculata
(по: Мечников, 1886)-
А - яйцо; Б - стадия 2 клеток; В — вторая борозда дробления; Г — ста­
дия 4 бластомеров; бластомер слева еще не завершил деление; Д , Е — ложно
спиральное дробление, обусловленное поворотом делящегося бластомера; Ж ,
3 — бластула; И — разрез через бластулу.

Рис. 7-4- Анархический тип дробления.

А — развитие Stomotoca (по: Rittenhose, 1910); Б — развитие Oceania
armata (по: Мечников, 1886).

128
греч. ехтос; -в н е , сн а р уж и ; бер^а— кож а, ш к у р а ), и внутренний — энтодерма (греч.
evtoc — внутри, в).
У стрекающих животных описаны разнообразные клеточные механизмы форми­
рования пластов тела. Широко распространена ингрессия (от лат. ingressus — вступ­
ление, вхождение), или иммиграция клеток. При ингрессии некоторые клетки стен­
ки целобластулы утрачивают жгутики, приобретают амебоидную подвижность и
вселяются в полость бластулы, заполняя ее полностью. Различают униполярную ин-
грессию, которая происходит в области зародыша, где впоследствии закладывается
ротовое отверстие, и мулътиполярную ингрессию, при которой вселение происходит
по всей поверхности зародыша.
Заселение полости бластулы отдельными клетками может происходить и в ре­
зультате ориентированных делений клеток стенки бластулы. Этот процесс называют
деламинацией (от лат. de — отделение, lamina — пластинка, пласт). Клетки, попада­
ющие после деления в полость бластулы, формируют энтодерму. Погружение клеток
стенки бластулы может происходить и в составе эпителиального пласта. Такой тип
эпителиального морфогенеза называют впячиванием, или инвагинацией (от лат. in-
vaginatio — впячивание).
Образование эктодермы и энтодермы у мо-
рулы происходит в результате реаранжировки
клеток. Клетки, занимающие внутреннюю об­
ласть зародыша, дают энтодерму, клетки внеш­
него слоя - эктодерму. Это разделение пластов
называют морулъной, или вторичной делами­
нацией.
Наконец, у многих видов описана эпибо-
лия (от греч. етароХг] - облачение, покров), или
обрастание крупных макромеров делящимися
микромерами. Широко представлены также и
смешанные типы обособления пластов.
В результате процесса гаструляции воз­
никает обычно радиально-симметричная дву­
слойная личинка планула (от греч. TcXavoc —
блуждающий) (рис. 7-5). Наружный эктодер­
мальный слой планулы образован ресничны­
ми клетками. Между эктодермой и энтодермой
различается тонкий слой внеклеточного мат­
рикса — мезоглея. На стадии планулы происхо­
дит дифференциация клеточных пластов. Так,
в составе эктодермального эпителия появляют­
ся эпителиально-мышечные, железистые и сен­ Рис. 7-5. Планула Hydrozoa
сорные клетки. В промежутках между эпите­ (по: Martin et al., 1983)
1 — эктодерма; 2 - сенсорная клет­
лиальными располагаются интерстициальные ка; 3 — энтодермальная эпителиально­
клетки и их производные, в том числе стре­ мышечная клетка; 4 — нервная клетка;
кательные клетки. Местом образования интер­ 5 — железистая клетка; 6 — эктодермаль­
стициальных клеток служит энтодерма, где ная эпителиально-мышечная клетка; 7 —
мезоглея; 8 — интерстициальная клетка;
и происходит их коммитирование. В энтодер- 9 — энтодермальная клетка; 10 — немато-
мальном эпителии образуются пищеваритель­ бласт; 11 — нематоцит.

129
ные и железистые клетки. Плапула имеет удлиненную форму и слегка расширена
на переднем конце, который является преемником вегетативной области дробящего­
ся зародыша. Обычно планулы лецитотрофны и необходимое для их жизни питание
в виде желточных зерен, запасенных в период оогенеза, находится в их клетках. У
некоторых Anthozoa описаны планктотрофные планулы, у которых после заверше­
ния инвагинации на месте бластопора образуется ротовое отверстие.
Преобразование личинки во взрослую форму носит название метаморфоз В хо­
де этого процесса личинка прикрепляется к субстрату передним концом или боко­
вой поверхностью. Обычно тело планулы сплющивается в продольном направлении
и превращается в диск, на котором вырастает полип, соединенный с диском сте­
бельком (рис. 7-6). У этого первичного гидранта — р о д о н а ч а л ь н и к а колонии -- обра­
зуются щупальцы и ротовое отверстие. В других случаях планула превращается в
гидроризу — распластанное по субстрату нитевидное тело, на поверхности которого
формируются полипы. Колониальные формы возникают в результате почкования
первичных гидрантов.
Иногда формирование структур полипа начинается очень рано, еще на стадии
плавающей личинки. В этих случаях личинка сжимается по передне-задней оси.
При этом передняя (будущая аборальная) область уплощается, а задняя (будущая

Рис. 7-6. Метаморфоз у Gonothyrea loveni

(по: Kuhn, 1913).
А — планула; Б, В — прикрепление планулы к субстрату; Г — форми­
рование полипа. 1 — передний конец; 2 — задний конец; 3 — эктодерма; 4 —
энтодерма. Наличие зернистости в энтодерме заднего конца планулы озна­
чает, что именно эта область дает начало оральной области полипа.

130
оральная) принимает вид конуса, на вершине которого образуется отверстие с окру­
жающим его венчиком щупалец. На аборальном полюсе формируется стебелек. Воз­
никший свободный полип, или актинула (от греч. c / k t l v o c — луч) вскоре оседает и
прикрепляется к субстрату (рис. 7-7).

Рис. 7-7. Развитие Tubularia с образованием актинулы

(по: Ruppert, Barnes, 1994).
А — гидроидный полип; Б — гонофор; В — происходящее в гонофоре
превращение планулы в актинулу; Г — актинула; Д — актинула, прикрепив­
шаяся к субстрату; Е — колония гидроидов.

У книдарий широко распространено бесполое размножение, которое может про­

исходить как у полипов, так и у медуз. В результате бесполого размножения пер­
вичного полипа возникают колониальные формы. При бесполом размножении гид­
роидных медуз резко возрастает численность популяции животных, способных к
половому размножению
У Scyphozoa образующийся после оседания одиночный полип называется сцифи-
стомой, характерной особенностью которой являются септы — вертикальные склад­
ки энтодермы, подразделяющие гастральную полость полипа на четыре кармана.
Полипам Scyphozoa свойственно бесполое размножение почкованием и стробиляци-
ей. Стробиляция начинается в оральной области полипа и распространяется в або­
ральном направлении. Она состоит в последовательном образовании дисковидных
элементов путем поперечных делений тела. Полип в фазе стробиляции называют
стробилой (от лат. strobilus — шишка). Отделяющиеся от стробилы диски образу­
ют эфиры, или личинки медузы. Формирование эфиры предполагает радикальную
перестройку, связанную с утратой провизорных органов сцифистомы и развитием
органов формирующейся медузы.
У некоторых Scyphozoa в результате почкования полипов образуются подоцисты,
которые могут длительное время находиться в покое. Затем подоцисты трансфор­
мируются в подвижных личинок. Нечто аналогичное имеет место и у Hydrozoa. На­
пример, у представителей отряда Leptolida происходит фрустуляция, (от лат. frustu-
lum — кусочек) — своеобразная форма бесполого размножения путем фрагментации,
в ходе которой возникают планулообразные личинки фрустулы.
Таким образом, у представителей разных классов стрекающих бесполое размно­
жение, происходящее на полипоидной или на медузоидной фазе жизненного цикла,

131
может привести к формированию подвижной личинки, характерной для полового
размножения. Это явление, по-видимому, можно расценить как свидетельство су­
ществования относительно автономных модульных подпрограмм развития, которые
могут инициироваться как при половом, так и при бесполом размножении. Проверка
этого предположения требует специального исследования.

7 2, Гребневики (Ctenophora)

Гребневики, или ктенофоры (от греч. xteic — гребень; срЕрсо— нести) образуют
обособленный тип животных, в составе которого насчитывается около 200 видов.
Гребневики, как и стрекающие, относятся к радиальным животным (Radiata). В
то же время они характеризуются двулучевой (бирадиальной) симметрией. На по­
верхности тела у гребневиков имеется восемь продольных рядов гребных пласти­
нок. Гребневики — двуслойные животные. Поверхность тела покрыта эпидермисом,
поверхность кишки— гастродермисом. Сильно развит внеклеточный матрикс, об­
разующий толстый слой мезоглеи. Имеются специализированные мышечные эле­
менты и мезенхима, которые, впрочем, не образуют выраженного мезодермального
слоя. Тело вытянуто вдоль орально-аборальной оси. Имеются две основные плоско­
сти симметрии: сагиттальная, или глоточная, совпадающая с плоскостью глотки, и
перпендикулярная ей латеральная, или щупальцевая, проходящая через основания
щупалец. Различают и третью, анальную, плоскость симметрии, которая проходит
через диагонально расположенные анальные поры.
На оральном конце расположена глотка, имеющая эктодермальную выстилку.
Глотка открывается в эптодермальный желудок с меридиональными каналами. Осо­
бые, анальные, каналы соединяют желудок с анальными порами. Имеется прими­
тивная нервная система. На аборальном конце расположен апикальный сенсорный
орган со статоцистом, который воспринимает направление силы тяжести и коорди­
нирует двигательную активность гребных пластинок.
Обычно гребневики — гермафродиты. Мужские и женские гонады попарно рас­
полагаются вдоль меридиональных энтодермальных каналов (рис. 7-8) под рядами
гребных пластинок. Из половых желез гаметы поступают в половые синусы и затем
выводятся через половые протоки. Возникновение у гребневиков постоянных гонад,
в частности яичников, по-видимому, создало необходимые условия для формирова­
ния яйцевых клеток с локализованными в пространстве сигнальными молекулами,
которые обеспечивают раннюю спецификацию разнообразных клеточных линий.
Яйца у гребневиков центролецитального типа: на поверхности расположена экто­
плазма, богатая митохондриями и элементами эндоплазматической сети. Эктоплаз­
ма окружает массив богатой желточными включениями эндоплазмы. Ядро распо­
ложено эксцентрично, занимая пограничное между экто- и эндоплазмой положение.
Размеры яиц у разных видов варьируют от 130 до 1200 мкм. Яйцо одето желточной
оболочкой, которая в период овуляции разбухает, и студенистой оболочкой, выраба­
тываемой секреторными клетками яйцевода. У некоторых видов описана диссогения
(от греч. бю а ос—двойной; y£vo<; — род), при которой половозрелость индивидуума
достигается дважды — в личиночном и во взрослом состоянии. Размеры яиц при
этом заметно различаются: личинки продуцируют мелкие яйца, взрослые — круп­
ные, диаметр которых в 2-3 раза больше диаме тра личиночных яиц.

132
 Рис. 7-8. Расположение и структура муж­
ских и женских гонад у гребневиков.
А — в левой части рисунка видны ряды
гребных пластинок; в правой — расположенные
под ними гонады (по: Martindale, Henry, 1997):
Т -Т — тентакулярная плоскость; S-S - сагит­
тальная плоскость. Б — поперечный разрез че­
рез меридиональный энтодерм альный канал и
расположенные над ним гонады (по: Freeman,
Reynolds, 1973). 1 — яичник; 2 — семенник; 3 —
щупальце; 4 гребные пластинки; 5 — субтен-
такулярный меридиональный канал; 6 — суб-
сагиттальный меридиональный канал; 7 — эпи­
дермис; 8 — гонопор; 9 — стенка семенника;
10 — сперматиды; 11 — сперматозоиды; 12 — те­
стикулярный синус; 13 — сперматогонии; 14 —
сперматоциты; 15 — пищеварительные клетки;
16 — ресничные клетки гастродермы; 17 — ме­
зоглея; 18 — полость меридионального канала;
19 отростки пищеварительных клеток; 20 —
ооциты; 21 — питающие клетки; 22 — желези­
стый эпителий; 23 — яйцевод; 24 — женский го­
нопор; 25 — стенка яичника; 26 — ресничная
бороздка.

Дробление ктенофор отличается большим своеобразием (рис. 7-9). Деления дроб­

ления, подобно дроблению многих стрекающих, униполярны. Расположенная на по­
верхности яйца эктоплазма перед началом дробления концентрируется па одном
полюсе яйца. Именно здесь возникает борозда, которая, врезаясь в цитоплазму, рас­
пространяется к противоположному полюсу, увлекая за собой прозрачную эктоплаз­
му. Обычно первая борозда дробления закладывается на редукционном полюсе, где
выделяются редукционные тельца, образующиеся в ходе делений созревания. Пе-

Рис. 7-9. Дробление яйца гребневи­

ка Beroc ovata (по: Ziegler, 1898).
А, Б — прохождение врезающейся
борозды от орального к аборальному по­
люсу; Б — второе деление; Г — третье
деление; Д, Е, Ж — отделение микроме­
ров на аборальном полюсе; 3, И — вид
с аборального полюса на зародыша на
стадиях 32 и 40 бластомеров: абораль-
ные микромеры заштрихованы.

133
ред следующим делением эктоплазма вновь стягивается к редукционному полюсу и
вновь вместе с бороздой перемещается к аборальному полюсу. После третьего деле­
ния эктоплазма остается в аборальной области. Своеобразие характера дробления
обнаруживается при третьем делении, плоскость которого располагается почти па­
раллельно плоскости первого деления дробления, но все же под некоторым углом
к ней. В результате возникает пластинка из восьми клеток, расположенных в два
ряда. Четыре концевых бластомера (Е-бластомеры, от англ. end — конец) несколько
мельче клеток, остающихся в середине полоски, или М-бластомеров (от англ. mid­
dle — середина) (см. рис. 7-13). Благодаря косому расположению плоскости третьего
деления дробления концевые клетки смещены к аборальному полюсу.

Рис. 7-10. Зависимость местообразования оральной области личинки

гребневика от расположения первой борозды дробления
(по: Freeman, 1977).
А — в опыте, где маркировали редукционный полюс, место возникнове­
ния первой борозды дробления и оральный п о л н а , личинки были мечеными.
Б — в опыте, где маркированную область первой борозды дробления сме­
щали относительно редукционного полюса, меченой была оральная область.
В — в опыте, где маркировали редукционный полюс и центрифугировани­
ем смещали точку инициации первой борозды дробления, оральный полюс
личинки был немеченым.

Надо заметить, что вопрос о полярности яиц низших Metazoa в литературе по­
следних лет подвергается переосмыслению. О. М. Иванова-Казас (1995) предлагает
различать первичную (протозойную) и анимально-вегетативную полярность. Пер­
вичная полярность, по Ивановой-Казас, определяется местом образования редук­
ционных телец, тогда как анимально-вегетативная полярность отражает проспек­
тивное значение различных областей цитоплазмы яйца. Цитоплазма, занимающая
анимальную область, связана с развитием эктодермальных производных, вегета­
тивная — с развитием энтодермы и мезодермы. С этой точки зрения анимально-
вегетативная полярность у губок отсутствует, поскольку у них нет эктодермы и эн­
тодермы, и в ходе эволюции появляется лишь у двуслойных. У двуслойных факторы
спецификации энтодермы, насколько можно судить по имеющимся данным, обычно

134
локализуются в области редукционного полюса. Эта область дает, как мы видели,
заднюю часть планулы стрекающих, а позднее — оральную область взрослого жи­
вотного, в которой происходит закладка энтодермы. Из сказанного следует, что если
редукционный полюс яиц двуслойных функционально соответствует вегетативному
полюсу, то образование борозд дробления у них начинается на вегетативном по­
люсе. Гомология вегетативных областей зародышей билатеральных и двуслойных
подчеркивается данными об экспрессии ряда генов. Так, у стрекающих в оральной
области, воспреемнице вегетативной области зародыша, и в задней области личинки
(у форм с личинкой), где происходит образование энтодермы, экспрессируются гены
brachyury, wnt, goosecoid, активность которых у зародышей Билатеральных также
локализована в области бластопора. Вопрос о полярности зародышей стрекающих
требует дополнительных специальных исследований. Анимально-вегетативная по­
лярность сохраняется у всех двуслойных и трехслойных Metazoa. Однако у Bilateria
редукционному полюсу соответствует не вегетативный, как у двуслойных, а ани-
мальный полюс. Этот признак настолько консервативен, что обычно главным кри­
терием анимального полюса у билатеральных животных служит именно отделение
редукционных телец, происходящее в области яйца с наименьшей концентрацией
желточных зерен. Цитоплазма, обогащенная желточными включениями, занимает
вегетативную область зародыша и дает начало энтодерме
Экспериментально было показано, что у гребневиков оральным полюсом личин­
ки становится полюс яйца, на котором появляется врезающаяся борозда дробления.
Фримен (1977) маркировал редукционный полюс яйца перед дроблением и, под­
вергая оплодотворенные яйца центрифугированию, добивался смещения места воз­
никновения униполярной борозды. В другом опыте он маркировал зону появления
первой борозды (рис. 7-10). Выяснилось, что оральная область личинки формирует­
ся в той части яйца, где закладывается борозда первого деления дробления. Она не
связана жестко с редукционным полюсом, где образуются редукционные тельца, хо­
тя при нормальном ходе событий все эти явления (редукционные деления, закладка
первой борозды, образование оральной области) сопряжены между собой. Пробле­
ма эволюции полярности яйца еще ожидает своего решения, для чего необходимо
понимание эволюции молекулярных механизмов, управляющих процессами редук­
ционных делений, делений дробления и первичной спецификации клеток зародыша.
Первые деления дробления у гребневиков предопределяют формирование осей
животного. Так, плоскость первой борозды соответствует сагиттальной плоскости
будущего гребневика. Перпендикулярная ей плоскость второго деления предопреде­
ляет положение латеральной плоскости симметрии. При четвертом дроблении от­
деляются обогащенные эктоплазмой аборальные микромеры (см. рис. 7-9). В ходе
следующих делений эти клетки дают скопление относительно мелких клеток, кото­
рые в результате эпиболии распространяются от аборального к оральному полюсу
зародыша (рис. 7-11).
Одновременно с этим происходит отделение и оральных микромеров, которые
вместе с макромерами погружаются внутрь зародыша (рис. 7-11). В результате это­
го погружения образуется ротовое отверстие. Вскоре после гаструляции начинается
органогенез, в ходе которого развивается пищеварительная система, закладываются
зачатки щупалец и формируются гребные пластинки. На аборальном полюсе диф­
ференцируется сенсорный орган. После выхода зародыша из оболочек происходит
формирование взрослой особи. Некоторые авторы считают, что поскольку на этой

135
 Рис. 7-11. Схема гаструляции у гребневиков.
Оральный полюс внизу, аборальный вверху (по: Давыдов, 1914).
А — эпиболия эктодермальных клеток от аборального к оральному полюсу; об­
разование оральных мезоглеальных микромеров. Б — образование кишки и пер­
вичного ротового отверстия (бластопора). В — смещение оральных микромеров в
аборальную область. 1 — эктодерма; 2 — энтодерма; 3 — оральные микромеры; 4 —
гастральная полость; 5 — мезенхима.

стадии у гребневиков основной план строения тела сформирован, то у них нет ли­
чиночной стадии, и развитие у них — прямое. Однако, поскольку на этой стадии
животные имеют небольшие размеры, а форма тела все же существенно отличает­
ся от формы взрослых животных, многие исследователи полагают, что личиночная
стадия у гребневиков все же имеется.
В опытах по изоляции или удалению бластомеров выявлен детерминативный ха­
рактер раннего эмбриогенеза гребневиков, при котором спецификация клеточных
линий происходит в период дробления. Уже в конце XIX столетия было показано,
что разделение зародыша на стадии двух бластомеров ведет к образованию двух
«половинных» личинок, каждая из которых имеет не восемь, а только четыре греб­
ные пластинки. При изоляции клеток на стадии четырех бластомеров формируются
личинки лишь с двумя рядами гребных пластинок.
Позднее было обнаружено, что ограничение потенций разных областей яйца про­
исходит в период оплодотворения. Яйца разрезали по экваториальной (рис. 7-12, А)
или орально-аборальной (рис. 7-12, Б) плоскости на половинки и оплодотворяли. В
обоих случаях обе половинки обнаружили плюрипотентность: каждая из них давала
личинку с полным набором гребных пластинок и щупалец. Однако, если разреза­
ние в экваториальной плоскости производили на стадии закладки первой борозды,
т.е. в период, когда эктоплазма концентрируется у орального полюса, развивалась
лишь содержащая ядро оральная половинка, которая давала нормальную личинку.
Аборальная часть яйца при изоляции погибала (рис. 7-12, В). При разделении за­
родыша надвое в плоскости первой борозды дробления (рис. 7-12, Г), каждый из
двух бластомеров давал «половинную» личинку, которая имела лишь 4 гребных
пластинки, половинку апикального сенсорного органа и одно щупальце. Дезагрега­
ция зародыша на стадии четырех бластомеров (рис. 7.-12, Д) вела к образованию
«четвертинок» с двумя гребными пластинкам и, зачаточными щупальцами и руди­
ментарным апикальным органом.
Как оказалось, гребные пластинки образуются главным образом из микромеров,
которые отделяются от бластомеров Е (е-микромеры). Если на стадии 16 клеток
удалить все четыре микромера el, то гребные пластинки не закладываются. Лока­
лизация факторов, ответственных за развитие гребных пластинок и находящихся в
эктоплазме яйца, происходит после оплодотворения в ходе первого деления дробле­
ния. Оказалось, что аналогично ведут себя и факторы, ответственные за специфика-

136
 е

О
Д О
Рис. 7-12. Схема экспериментов по изоляции частей яйца
и бластомеров у гребневиков (по: Freeman, 1977).
А, Б — нормальное развитие после разрезания яйца (А — по экватору, Б —
по орально-аборальной оси) на две половины до оплодотворения; В — нормальное
развитие оральной половинки, содержащей ядро, в опыте по изоляции оральной и
аборальной половинок после начала образования первой борозды дробления; Г —
развитие половинных личинок при изоляции клеток на стадии двух бластомеров;
Д — развитие личинок лишь с двумя рядами гребных пластинок, редуцированны­
ми щупальцами и апикальным органом, при изоляции клеток на стадии четырех
бластомеров.

137
 Рис. 7-13. Схема распределения факторов, детерминирующих развитие
гребных пластинок (С), фотоцитов (L), анальных каналов (А)
и глоточной мускулатуры (М) (по: Mart indale, Henry, 1997).
А — зигота (вид сбоку, оральный полюс внизу); Б — стадия четырех бластоме-
ров: фактор С сконцентрирован на внешнем крае бластомеров, фактор L — вдоль
сагиттальной плоскости в области орального полюса. Производные расположенных
по диагонали бластомеров Е М /, содержат фактор М и дают глоточные и продольные
мышцы; производные бластомеров ЕМ\, которые содержат фактор А, даю т клетки,
образующие эктодермальный анальный канал. Т — тентакулярная плоскость. В —
стадия восьми бластомеров: фактор С сосредоточен преимущественно в бластоме­
рах e l; детерминанты фотоцитов сконцентрированы в макромерах М. Г — стадия
16 бластомеров. Б -Г — вид с аборального полюса.

цию фотоцитов — клеток, которые при раздражении генерируют свет. Д о дробления

эти факторы распределены по всему яйцу, но в ходе дробления они сосредотачива­
ются в центральных М-бластомерах и при последующих делениях сохраняются в
макромерах (рис. 7-13).

Л итература

И ванова-Казас О. М. Тип Cnidaria (стрекающие) / / Сравнительная эмбриология бес­

позвоночных животных. Новосибирск, 1975. С. 137-205.
И ванова-Казас О. М. Тип Ctenophora (гребневики) / / Там же. С. 206-215.
И ванова-Казас О. М. Проблема полярности яйца / / Эволюционная эмбриология жи­
вотных. СПб., 1995. С. 38-41.
 Глава 8. БИЛАТЕРАЛЬНЫ Е. LOPHOTROCHOZOA

В отличие от традиционной, современная филогенетика использует кроме мор­

фологических молекулярно-биологические критерии. Анализ генов 18S рРНК и
структуры кластерных Нох-тепоъ существенно изменил наши представления о
филогенетических взаимоотношениях билатеральных животных. По современным
взглядам, Bilateria подразделяются на три основные группы — Ecdysozoa и Lophotro-
chozoa, которые объединяют несколько типов Первичноротых, и Deuterostomia, или
Вторичноротые (см. рис. 6.1-2). Нематоды и некоторые другие группы объединены
теперь вместе с членистоногими в группу Ecdysozoa. К Lophotrochozoa относятся
Немертины, Плоские черви, Моллюски, Аннелиды, т. е. типы, которые характери­
зуются спиральным типом развития, но также Брахиоподы, Мшанки и Форониды,
раннее развитие которых основано на иных принципах. Вторичноротые объединяют
Полухордовых, Иглокожих, Головохордовых и Хордовых. Как можно видеть, совре­
менная филогенетика отказывается от концепции членистых животных как единой
группы, включающей аннелид и членистоногих, сближая последних с нематодами.
Можно думать (подробнее см. том 2), что появлению и дивергенции различных
типов билатеральных животных предшествовал длительный период эволюции, в
течение которого произошло существенное возрастание сложности кластера Нох-
генов.
Как полагают, общий предок первичноротых имел в кластере, по крайней мере, 8
анцестральных Нох-геиов (Peterson, Davidson, 199В). Среди них были 5 «передних»
(lab, pb, НохЗ, Dfd, Scr), два «центральных» (один из которых впоследствии дал
fushi tarazu, Antp, Lox5 и другие .Лпф-подобные гены, а другой — Ubx) и один «зад­
ний» (Л 6гШ-подобиьш ген). У общего предка всех билатеральных животных было 6
Ноя: генов.

8.1. Спиральные (Spiralia)

Относимые к Lophotrochozoa животные за исключением почти всех щупальце­

вых, а именно немертины, многие плоские черви, кольчатые черви и моллюски име­
ют так называемый спиральный тип развития. Отклонения от этого типа, наблюдае­
мые у некоторых турбеллярий, а также у паразитических форм — цестод и трематод,
коррелируют с особенностям»! генезиса желтка и потребления питательных веществ
в раннем эмбриогенезе.

139
 Спиральный тип дробления возник в глубокой древности и стал важной предпо­
сылкой ранней эволюции билатеральных животных. Основные представления об
особенностях спирального чипа развития были заложены исследованиями кница
XiX — начала X X столетия (Kowalevsky, 1871; Whitman. 1878; Wilson, 1889, 1892;
Child, 1900; Ivanoff, 1928 и др.). Исследования эмбриологии Spiralia в настоящее
время переживают новый подъем, обусловленный развитием новых методов.
Несмотря на очевидные различия морфологии взрослых животных, особенности
раннего развития немертии, моллюсков, аннелид и многоветвистых турбеллярий
свидетельствуют о едином принципе организации начальных этапов их онтогенеза,
что, естественно, дает веские основания для предположений о филогенетической
близости этих билатеральных первичноротых. Так, использование современной тех­
ники маркировки клеток позволило Д. Генри и М. Мартиндейлу (1998) установить
очевидное сходство карт презумптивных зачатков у немертин, плоскпх червей с со­
ответствующими картами аннелид и моллюсков.
Спиральный тип дробления характеризуется четко выраженной и неизменной
последовательностью событий. Это чрезвычайно существенно, так как благодаря
своей инвариантности спиральный тип дробленгя стал эффективным инструментом
пространственной организации паттерна (от англ. pattern — рисунок, узор) личи­
ночных структур. В процессе дробления происходит направленная сегрегация цито­
плазматических факторов яйца, которые специфицируют разнообразные клеточные
линии в строго определенных областях зародыша.
Первые две борозды дробления проходят меридионально под прямым углом друг
к другу (рис. 8-1). После первого деления образуются бластомеры, которые обозна­
чаются индексами АВ и CD. При втором делении возникают бластомеры А, В, С и
Г), которые называют квадрантами (от лат. quadrans— четвертая часть). При описа­
нии последующих стадий развития часто говорят о принадлежности потомков этих
бластомеров к тому или иному квадранту зародыша. В случае равномерных первых
двух делений имеет место гомоквадрантное дробление, при неравномерных делени­
ях, что бывает значительно чаще, — гетероквадрантное (рис. 8- 2 ).
Бластомер D («Д э большое») содержит факторы, играющие важную роль в спе­
цификации клеточных линий, дающих начало эктодерме и мезодерме взрослых жи­
вотных. Благодаря концентрации активной цитоплазмы этот бластомер часто вы­
деляется своими крупными размерами и несколько эксцентричным положением. У
некоторых видов аннелид и моллюсков активная цитоплазма в период первых деле­
ний дробления обособляется в виде полярной лопасти, материал которой в период
второго деления попадает в бластомер D (рис. 8-3). При гомоквадрантном дробле­
нии спецификация макромера D как предшественника стволовых мезодермальных
клеток происходит принципиально иным способом, а именно в результате взаимодей­
ствия между макромерами и микромерами, которые впервые появляются при тре­
тьем делении дробления. Известный голландский эмбриолог Ио ван ден Биггелаар
показал, например, что у моллюска Patella, имеющего гомоквадрантное дробление,
бластомер 4d образует мезодермальные клетки лишь в том случае, если перед сто
обособлением макромер 3D вступит в контакт с микромерами анимального полуша­
рия. Следует подчеркнуть, что именно в этот период развития между указанными
бластомерами образуются щелевые соединения (gap junction), что создает условия,
необходимые для прохождения низкомолекулярных веществ из клетки в клетку.
Характерной особенностью спирального дробления является косое расположение

140
Рис. 8-1. Гомоквадрантное дробление яйца брюхоногого моллюска Crepidula plana;
вид с анимального полюса (по: Conklin, 1897).
А — стадия 2 бластомеров: видны веретена второго деления дробления; Б —
подразделение зародыша на равные квадранты А, В, С, D; В — стадия 8 бластоме­
ров: отделение первого квартета микромеров (la — Id); Г — стадия 12 бластомеров:
образование второго квартета микромеров (2а — 2d); Д — переход к стадии 16 бла­
стомеров: деление первого квартета микромеров; Е — стадия 16 бластомеров. 1 —
полярные тельца; 2 — ядра.

141
 Рис. 8-2. Гетероквадрантное дробление яйца полихеты Arenicola\
вид с анимального полюса (по: Child, 1900).
А — стадия 2 бластомеров: видны веретена второго деления дробления и поляр­
ные тельца; Б — стадия 4 бластомеров: своими крупными размерами выделяется
квадрант D; В — стадия 8 бластомеров: обособление первого квартета микромеров
(la — Id).

Рис. 8-3. Дробление лопатоногого моллюска Dentalium

(по: Wilson, 1904).
А—Е — последовательные стадии дробления. Образование полярной ло­
пасти (11 , Ь ), связанной на стадии 2 клеток с бластомером CD, а на стадии
4 клеток с бластомером D.

веретен делений относительно анимально-вегетативной оси яйца. Наклонное распо­

ложение веретен характерно для всех делений, включая и самые первые, но наи­
более четко оно проявляется начиная с третьего деления, в результате которого
в анимальном полушарии образуются микромеры, которые располагаются в проме­
жутках между макромерами (рис. 8-4). Смещение бластомеров при третьем делении
обычно происходит по часовой стрелке (вправо), если смотреть на дробящееся яйцо с
анимального полюса. Такое деление называют дексиотропным (от лат. dexter — пра­
вый, греч. тротгас — поворот, направление), или правозакрученным. Смещение бла­
стомеров против часовой стрелки называют левозакрученным, или леотропным (от
лат. laevus —левый) делением (рис. 8-5). При последующих делениях макромеров
происходит чередование наклонов веретена: если третье деление правозакрученное,

142
 Рис. 8-4•Дробление яйца брюхоногого моллюска Trochus
(по: Robert, 1902).
А — стадия 4 бластомеров; Б и В - стадия 8 бластомеров: вид с анимального
полюса (Б) и сбоку (В). Микромеры первого квартета располагаются в промежут­
ках между крупными бластомерами основного квартета. 1Q — квадрант основного
квартета; l q — квадрант первого квартета.

Рис. 8-5. Корреляция дексиотропности (леотропности)

дробления с правозакрученностью (левозакрученностью) раковины
брюхоногого моллюска Lymnaea peregra
(по: Рэфф , Кофмен, 1986).

то таким же будут все нечетные деления макромеров (пятое, седьмое и т.д.), тогда
как четные деления будут левозакрученными. Этот характер дробления генетически
детерминирован и коррелирует с левым или правым положением бластомера D, а у
моллюсков и с характером закручивания висцеральных органов и раковины. В опы­
тах на Lymnaea peregra показано, что инъекция цитоплазмы из декстралъных яиц в
синистралъные (от лат. sinister — левый), дающие левозакрученных животных, вос­
станавливала правозакрученный характер раковины, тогда как реципрокная инъек­
ция цитоплазмы от синистральных яиц в декстральные не оказывала действия. Это
указывает на доминирующий характер материнских факторов правозакрученности,
которые, как можно полагать, синтезируются в период оогенеза под контролем гена
правозакрученности.

143
 Морфологические и экспериментальные исследования показали, что судьба каж­
дого бластомера при спиральном дроблении предопределена. Начиная с третьего де­
ления дробление обычно идет квартетами: каждый раз практически одновременно
отделяются четыре клетки — по одной в каждом квадранте. Квартеты обозначают­
ся буквенными и цифровыми индексами. Буква означает принадлежность к тому
или иному квадранту, а цифра — номер квартета. При этом квартеты макромеров
обозначаются прописными буквами, а квартеты микромеров — строчными. Так, ос­
новной квартет A —D при третьем делении дробления отделяет первый квартет
микромеров 1а («один а малое»), lb, lc, Id, превращаясь при этом в первый квар­
тет макромеров 1А, IB, 1C, 1D. В ходе четвертого деления дробления образуется
второй квартет микромеров 2а — 2d и второй квартет макромеров 2А - - 2D. Обыч­
но образуется четыре квартета микромеров, после чего деления квартета макро­
меров приостанавливаются. Продукты делений микромеров сохраняют обозначение
исходного микромера, которое дополняется цифровыми показателями — одним при
первом делении микромера, двумя — при втором и т.д. Например, при делении мик­
ромера первого квартета из квадранта A l a образуются две клетки — 1а 1 («один
а малое один») и 1а2, при делении 1а2 возникают микромеры la zl («один а малое
два один») и 1а22 н т.д. После седьмого-восьмого деления дробления закономерное
чередование дексиотропных и леотропных делений нарушается.
Как уже отмечалось, детерминируется не только положение бластомера, но и его
судьба. Продукты деления первых трех квартетов микромеров дают эктодерму и эк­
томезодерму. Так, производные первого квартета образуют эктодерму предротовой
области личинки трохофоры. Расположенные в области анималыюго полюса клетки
la 1 — Id 1 образуют апикальный сенсорный орган личинки. Клетки la 2 — Id 2 дают
первичные трохобласты (рис. 8- 6 ), продукты деления которых рано дифференци­
руются и формируют двигательный орган личинки -прототрох. Клетки второго
квартета 2а — 2d дают эктодерму остальной части личинки. Бластомер 2d называ­
ют первым соматобластом, так как продукты его деления дают эктодермальную

Рис. 8-6. Дробление яйца полихеты Nereis virens (А — R) до стадия 16 бластомеров.

Штриховкой выделены первичные трохобласты
(рис. Р. П. Костюченко)

144
спинную пластинку зародыша, а некоторые производные этой клетки образуют зону
роста тела червя.
Клетка 4d, или второй соматобласт у гастропод дает начато как энтеробластаы,
так и парным симметрично расположенным мезобластам. Пролиферация этих ство­
ловых клеток ведет к образованию билатеральных мезодермальных полосок, кото­
рые впоследствии формируют мезодерму туловища.
Клетки основного квартета вместе с энтеробластами, возникшими при делении
4d, впоследствии погружаются в глубь зародыша и образуют энтодерму.
В период дробления одновременно с увеличением клеточной массы и специфи­
кацией клеточных линий происходит детерминация осей будущей личинки. Так,
положение микромеров 2d и 4d, за счет которых образуется большая часть тела
взрослого животного, соответствует дорсальной стороне. Медиальная линия, под­
разделяющая тело на левую и правую половины, проходит, как правило, между
нечетными квартетами микромеров квадранта С и D. Оси будущего зародыша во
многом определяются уже на стадии четырех бластомеров. При этом анимальный
полюс соответствует переднему концу зародыша, а вегетативный — заднему. Появле­
ние первого квартета микромеров, как было уже сказано, определяет сагитт альную
плоскость и билатеральную симметрию зародыша.
В результате дробления образуется бластула. У многих видов моллюсков и ан-
нелид формируется стерробластула, у которой бластоцель отсутствует или слабо
выражен. Вместе с тем известны виды, у которых возникает типичная целобласту-
ла (например, у моллюска Patella).
После выделения клеточных линий происходит гаструляция — морфогенетиче­
ский процесс, в ходе которого уже детерминированные клеточные линии преобра­
зуются в зародышевые зачатки — эктодерму, мезодерму и энтодерму.
При наличии бластоцеля гаструляция происходит путем инвагинации клеток ве­
гетативной области. У Patella и некоторых других моллюсков описана особая форма
инвагинации — плотное врастание, или эмболия, при которой макромеры вытягива­
ются вдоль анимально-вегетативной оси зародыша., заполняя таким образом бласто­
цель (рис. 8-7). Затем вследствие деламннации клеток внутреннего слоя образуется
энтодермальный зачаток — первичная кишка, или архентерон.

Рис. 8-1. Процесс эмболии в развитии брюхоногого моллюска Patella

(по: Patten, 1886).
А — стадия бластулы; Б — гаструляция. 1 — энтодерма; 2 — апикальный
орган; 3 — эктодерма.

145
 Наиболее распространенным способом гаструляции у моллюсков и аннелид явля­
ется эпиболия, в ходе которой клетки, образующие шапочку анимальных микроме­
ров, распространяются в направлении вегетативного полюса, обрастая макромеры и
образуя эктодермальный слой личинки (рис. 8- 8). В конце эпиболии остается неза­
мкнутым небольшой участок на вегетативном полюсе — бластопор. Мезобласты и
продукты их делений также оказываются под эктодермой и образуют зачаток мезо­
дермы.

(
Рис. 8-8. Процесс эпиболии у брюхоногого моллюска
Crepidula plana (по: Conklin, 1897).
А — стерробластула; Б — гаструляция. 1 — эктодерма; 2 — энто­
дерма. Стрелками показано направление обрастания.

Среди животных со спиральным типом развития различаются формы с непря­

мым и прямым развитием. В первом случае после гаструляции формируется билате­
ральносимметричная личинка, имеющая обычно все
основные (кроме репродуктивной) системы жизне­
обеспечения: пищеварительную, нервную, локомотор­
ную. выделительную.
У многощетинковых червей и некоторых моллюс­
ков эта личинка называется трохофорой (от греч.
хромое — круг, среро— нести). Типичная трохофора
(рис. 8-9) имеет особый орган движения — прото-
трох, который в виде кольца ресничных клеток окру­
жает тело личинки, располагаясь перед ее ротовым
отверстием. Прототрох подразделяет тело личинки на
две области: головной отдел, или эписферу (просто-
миум), лежащую перед ротовым отверстием, и зад­
ний отдел, или гипосферу (перистом), расположен­
ную сзади от прототроха (рис. 8-10). В задней обла­
сти личинки формируются зона роста и несегменти-
рующаяся часть тела— пигидий (от греч. Kuyoaov —
зад, гузка). У многих видов кроме прототроха имеют-
Рис. 8-9. Трохофора полихеты ся дополнительные круги ресничных клеток. Напри-
Pomatoceros (по: Segrove, 1941). ^ _
,
1 “ апикальныи орган; 2
. о ■ мер, впереди пигидия образуется телотрох, в сред-
ротовое отверстие; 3 — протоне- ней части перистома — мезотрох и т. п. В постораль-
фридий; 4 — мезодермальный за- ной области трохофоры располагаются мезобласты,
чаток; 5 — прототрох; 6 — мета- в ре3ультате деления которых образуются две би-
трох; 7 — желудок.
латерально расположенные мезодермальные полоски.
Рост мезодермальных полосок коррелирует с удлинением задней части тела ли­
чинки.

146
 Рис. 8-10. Трохофора брюхоногого
моллюска Patella. Вид со спинной
стороны (по: Patten, 1886).
1 — эписфера; 2 — прототрох; 3 —
гипосфера; 4 — раковинная железа.
Рис. 8-11. Метатрохофора полихеты
Pomatoceros (по: Segrove, 1941).
1 — глаз; 2 — прототрох; 3 — пита­
ющие реснички; 4 — метатрох; 5-7 —
щетинки 1-го, 2 и 3-го ларвальных сег­
ментов; 8 — кишка; 9 — зона роста;
10 — нейротрохоид; 11 — желудок.

Позднее у полихет происходит сегментация тела личинки, которая осуществля­

ется в два этапа. Сначала в эктодерме посторального отдела трохофоры появляют­
ся зачатки параподий, а на брюшной стороне — зачатки нервной цепочки. Вслед за
этим сегментируются и мезодермальные полоски. При этом клетки мезодермальных
сегментов расходятся и образуют целомические полости. Сегментированную личин­
ку называют метатрохофорой, или нектохетой (рис. 8-11). В посегментно распо­
ложенных щетинконосных мешках нектохеты формируются щетинки. Все сегменты
метатрохофоры появляются одновременно. Число этих первичных, или ларвальных
сегментов обычно специфично для вида. В отличие от ларвальных сегменты те­
ла червя, или постларвальные сегменты образуются последовательно в зоне роста
личинки, плюрипотентные клетки которой, как полагают, образуются в результа­
те дедифференциации эктодермы задней области тела нектохеты. Зона роста дает
начало не только эктодермальным производным (покровы, параподии, нервные ган­
глии), но и мезодерме червя. Возникающая в зоне роста мезодерма образует по обе­
им сторонам кишечника симметрично расположенные скопления клеток, которые
со временем преобразуются в целомические мешочки.
Существование принципиальных различий в развитии сегментов тела живот­
ных было открыто нашим выдающимсй соотечественником П. П. Ивановым (1912,

147
1928). Оно было названо им первичной гетерономностъю сегментов, в отличие от
вторичной гетероном ности сегментов, которая может возникать в ходе адаптивной
эволюции как приспособительное видоизменение морфологии сегмента.
Различия между ларвальными и пост ларвальным и сегментами касаются не толь­
ко способов их развития. Они обнаруживаются и в особенностях их дефинитивного
строения. Так, в ларвальных сегментах пе образуются половые железы, целомо-
дукты, хлорагогенные клетки, имеются некоторые отличия в строении брюшной
нервной цепочки и кровеносной системы. Накапливающиеся данные по генетике
развития полихет дают основание предполагать, что свойства ларвальных и пост-
ларвальных сегментов определяются неидентичными генетическими программами
развития.
Несомненно, что первичная гетерономцость сегментов имеет глубокие филоге­
нетические основания, сущность которых еще предстоит раскрыть. Возникновение
онтогенетического механизма, который обеспечиваег субтерминальный рост тела
животного за счет зоны роста, расположенной на переднем крае анальной лопасти,
по-видимому, стал важным этапом в эволюции животных, открыв путь для разви­
тия разнообразных полимерных форм Metazoa.
У некоторых наиболее примитивных видов моллюсков из подкласса Proso-
branchia имеются свободноживущие трохофоры. Обычно, однако, наблюдается эм-
брионизация, т. е. смещение стадии трохофоры в эмбриональный период, так что из
яйца выходит характерная для моллюсков личинка велигер (от лат. velum — парус)
(рис. 8- 12), которая имеет видоизмененный, сильно разросшийся прототрох — парус,
и зачаток раковинной железы, за счет активности которой формируется личиночная
раковина. У представителей ряда семейств пластинчатожаберных моллюсков (на-

Рис. 8-12. Велигер брюхоногого моллюска Crepidula,

вид сбоку (по: Werner, 1955).
1 — парус; 2 — нога; 3 — статоцист; 4 — пищеварительная железа; 5 —
желудок; 6 — сердце; 7 — почка; 8 — кишка; 9 — церебральный ганглий.

148
пример, из семейства Unionidae) образуются осо­
бые личинки — глохидии (от греч. уXayic, — острие
стрелы). Створки раковинок глохидиев снабжены
крючковидными шипами, что позволяет этим ли­
чинкам паразитировать на жабрах и коже рыб
(рис. 8-13).
Многие пресноводные и наземные представите­
ли Spiralia утратили стадию личинки и характе­
ризуются прямым развитием, при котором из яиц
выходят уже сформированные молодые животные,
минуя личиночную стадию. Прямое развитие ха­ Рис. 8-13. Глохидий
пластинчатожаберного моллюска
рактерно для пиявок, олигохет, многих легочных
Unio (по: Lillie, 1895).
моллюсков. 1 — створка раковины; 2 — аддук-
ТурбеллярИИ. Характеризуя спиральный Т И П т о р — м ы ш ц а , з а м ы к а ю щ а я р а к о в и -
дробления, нельзя не упомянуть об особенностях НУ г л о х и д и я ; 3 — л и ч и н о ч н а я н и т ь ,
развития турбеллярий, плоских свободноживущих
червей. Развитие паразитических форм плоских червей, которые представлены тре­
мя классами: Моногенеи, Цестоды и Трематоды, в данной книге не рассматрива­
ется.
Турбеллярии издавна привлекают внимание; эволюционистов-зоологов. Интерес
к этой группе определяется прежде всего предполагаемым ключевым положением
Ресничных червей в филогении Metazoa (В. Н. Беклемишев, 1964; Ю. В. Мамкаев,
1967; А. В. Иванов, 1968; О. М. Иванова-Казас, 1995). Согласно классической точке
зрения, бескишечные турбеллярии (Acoela), составляющие один из отрядов реснич­
ных червей, произошли от фагоцителлообразных предков и дали начало всем пер­
вичноротым животным (А. В. Иванов, 1968). Считается, что отсутствие кишечника
(ротовое отверстие у них открывается непосредственно в пищеварительную парен­
химу7) свидетельствует о примитивности Acoela. Нельзя не заметить, однако, что
данные об ультраструктуре пищеварительной паренхимы, а также специализиро­
ванный дуэтный тип дробления, напротив, расценивается некоторыми исследовате­
лями как безусловное свидетельство эволюционной вторичности этой группы (Smith,
Tyler, 1985; Ellis, Fausto-Sterling, 1997). Тем не менее молекулярно-биологические ис­
следования говорят в пользу существования особого типа Acoelomorpha, в который
входят Acoela и Nemertodermatida. С одной стороны, тип Acoelomorpha является
анцестральным, стоящим у основания билатеральных животных, с другой сторо­
ны, турбеллярии Rhabditophora и родственные им Catenulida близки таким трохо-
форным целомическим животным, как моллюски и кольчатые черви (Lockier et al.,
2002).
Дробление у представителей Acoela имеет своеобразный дуэтный тип, при кото­
ром в основе формирования зародыша лежат не четыре квадранта, а всего лишь два
основных макромера. Спиральное дробление соответственно начинается уже при пе­
реходе к стадии четырех бластомеров: при втором делении базальные макромеры
отделяют «дуэт» — два микромера, которые располагаются в борозде между мак­
ромерами. Вслед за первым дуэтом отделяется еще несколько (рис. 8-14). Деление
микромеров начинается обычно после обособления всех дуэтов. За счет микромеров
образуется эктодерма. Макромеры погружаются в глубь зародыша и дают начало
общему энтомезодермальному зачатку, представленному клеточной паренхимой.

149
 Рис. 8-14■ Дуэтный тип дробления у бескишечных турбеллярий (по: Gardiner, 1895).
А — стадия 2 бластомеров; Б — стадия 4 бластомеров (два дуэта); В — стадия 8
бластомеров.

Среди турбеллярий различают две группы животных. Представители одной из

них (Archoophora) имеют обычные эндолецитальные яйца. У других (Neoophora)
описан экзолецитальный тип развития. В последнем случае яйцо лишено желт­
ка, но зато имеются специализированные желточные клетки, которые вместе с яй­
цом откладываются в особый кокон, или капсулу, где и происходит развитие за­
родыша.
Дробление у турбеллярий спиральное, голобластическое и отличается большим
разнообразием форм. У многоветвистых турбеллярий имеет место спиральное дроб­
ление с типичными квартетами микромеров и чередованием дексиотропных и лео-
тропных делений (рис. 8-15). У некоторых турбеллярий описана сольная, или «мо­
нетная» (от греч. [iovoc — один) форма спирального дробления, при которой мик­
ромеры возникают последовательно из одного макромера. У червей из подкласса
Neoophora спиральный характер дробления часто нарушается и становится неупо-

2 8 7

Рис. 8-15. Спиральное дробления у многоветвистых турбеллярий

Planocera inquilina (А—Г, по: Surface, 1907) и Monocelis fusca
(Д, Е, по: Giesa, 1966).
А — зигота; Б — стадия 2 бластомеров; В — стадия 4 бластомеров; Г —
стадия 8 бластомеров; Д — ранняя гаструла; Е — средняя гаструла. 1 — зиго­
та; 2 — желточные клетки; 3 — капсула; 4 — бластомеры; 5 — эмбриональная
оболочка ; 6 — зародышевый диск; 7 — фагоцитированная желточная клетка;
8 — ресничная клетка.

150
рядоченным. Заметно варьирует и время спецификации бластомеров. Как показы­
вают опыты по изоляции бластомеров, дробление у представителей Polyclada носит
детерминативный характер, в отличие от регулятивного развития бескишечных тур-
беллярий.
У более высокоорганизованных турбеллярий из отряда Polyclada богатые желт­
ком бластомеры 4а — 4с и 4А — 4D не участвуют в построении тела зародыша. Они
разрушаются и используются как питательный материал. Источником образова­
ния энтодермы и мезодермы становится бластомер 4d. В результате деления это­
го мезэнтобласта образуется клетка-родоначальница мезодермы (4dJ) и клетка-
родоначальница энтодермы (4d2). Из микромеров первого квартета образуются
нервные клетки. Эктодерма возникает из микромеров первых трех квартетов. С
помощью прижизненного мечения бластомеров показано, что каждый квадрант (А,
В, С, D) дробящегося яйца дает определенный квадрант личинки (Henry et al., 1995)
(рис. 8-16).

Производные квадрантов
ША О В Й С B D

Рис. 8-16. Участие квадрантов дробящегося яйца в формировании

билатерально-симметричной личинки многоветвистой турбеллярии Hoploplana
(по: Henry et al., 1995).
А — общий вид личинки; Б — вид справа; В — вид слева; Г — вид с
дорсальной стороны. 1 — апикальная сенсорная ресничка; 2 — стомодеум;
3 — анальная сенсорная ресничка. АР — передне-задняя ось; DV — дорсо-
вентральная ось; RL — право-левая ось.

Развитие турбеллярий может быть прямым или с личинкой. Лобофора (от греч.
Хорос — лопасть, срорёсо— носить), или мюллеровская личинка имеет удлиненное
билатерально-симметричное тело, покрытое ресничками и несущее восемь лопастей,
окаймленных ресничным шнуром (рис. 8-17).

151
 Рис. 8-17. Мюллеровская личинка
Polyclada (по: Lang, 1884).
А — общий вид; Б — сагиттальный
разрез. 1 — глаз; 2 — мозг; 3 — паренхима;
4 —личиночные мышцы; 5 — кишка; 6 —
глотка.

Экзолецитальное развитие Neoophora отличается рядом особенностей. Так, спи-

ральность дробления различима только на ранних этапах дробления. Возникшая
целобластула уплощается, и часть ее клеток обра­
зует своего рода зародышевую оболочку, которая
распространяется по скоплению желточных кле­
ток. Желточные клетки фагоцитируются особыми
вителлофагами (рис. 8-18).
При рассмотрении особенностей раннего разви­
тия животных, относимых к группе Spiralia, нельзя
не обратить внимания на существенные различия
типов, входящих в эту группу. Действительно, мы
видим среди Spiralia как паренхиматозных, не име­
Рис. 8-18. Формирование зароды­
ющих вторичной полости тела животных (плоские
шевого диска у турбеллярии Мопо-
celis fusca (по: Giesa, 1966). черви, немертины), так и животных с хорошо раз­
1 — эмбриональная оболочка; 2 — витой целомической полостью (а.ннелиды, моллюс­
желточная клетка; 3 — «бластопо- ки). Тело может быть несегментированным (плос­
ральная» клетка; 4 — вителлофаги.
кие черви, немертины), сегментированным (анне-
лиды) или утратившим сегментацию (моллюски). В эволюции животных со спи­
ральным типом развития обнаруживаются две взаимоисключающие тенденции: по­
лимеризация (аннелиды) и олигомеризация (моллюски) тела.
Таким образом, спиральный тип дробления с его механизмами строго детер­
минированного распределения цитоплазматических факторов спецификации кле­
точных линий по бластомерам, с образованием уже в период дробления телобла-
стов — клеток-предшественниц зачатков разнообразно дифференцированных орга­
нов и тканей создает предпосылки быстрого и эффективного формирования ли­
чинки трохофорного типа. С одной стороны, направление дальнейшего развития
личинки непосредственно не связано со спиральным типом дробления и обеспечива­
ется иными механизмами. По-видимому, именно возникновение в процессе эволюции
новых механизмов постларвального развития и предопределило становление прин­
ципиально различных типов животных, общность происхождения которых, тем не
менее, обнаруживается в организации их раннего онтогенеза. С другой стороны,

152
утрата механизмов спирального дробления, вызванная теми или иными причинами,
по-видимому, лежит в основе формирования брахиопод и других Lophotrochozoa,
ранний онтогенез которых не несет признаков спиральности.
Сопоставляя спиральный тип развития с развитием радиальных животных, сле­
дует подчеркнуть важную особенность, которая наблюдается у Spiralia, а именно
возникновение функциональной асимметрии квадрантов дробящегося яйца. Дей­
ствительно, если у ктенофор эмбриональные квадранты следуют практически иден­
тичным программам дробления и генерируют очень сходные по своему тканевому
составу и общей морфологии области тела, то у Spiralia происходит специализация
квадранта D, предопределяющая его участие в образовании эктодермы и мезодермы
туловища животного.

8.2. Щупальцевые (Lophophorata)

Вторую обширную группу, входящую в состав Lophotrochozoa, составляют жи­

вотные, относящиеся к типу Щупальцевых (Tentaculata). Этот тип объединяет фо-
ронид, мшанок и плеченогих. Щупальцевые представлены преимущественно мор­
скими формами. Несмотря на сидячий образ жизни они сохраняют билатеральную
симметрию. Характерной особенностью является наличие целома. Ротовое отвер­
стие окружено щупальцами, которые располагаются на особом выросте — лофофоре
(от греч. Хофос — грива, султан; сророс— несущий).
У наименее специализированных форм щупальцевых, а именно, у некоторых фо-
ронид дробление имеет признаки спиральности (рис. 8-19), хотя у многих видов оно
является радиальным. В ходе дробления образуется целобластула. В процессе ин­
вагинации образуется энтодермальный зачаток, тогда как мезодерма обособляется
вследствие иммиграции клеток из вентральных областей архентерона.

Рис. 8-19. Дробление яйца форониды Phoronis viridis

(по: Rattenbury, 1954).
А — стадия 2 бластомеров; Б — стадия 4 бластомеров; В — стадия 8 бла­
стомеров; Г —переход к стадии 16 бластомеров; Д — стадия 16 бластомеров;
Е — бластула. 1 — редукционные тельца; 2 — оболочка оплодотворения.

153
 У форошщ образуется пелаги­
ческая планктотрофная личинка —
актинотроха (рис. 8-20). У акти-
нотрохи имеется предротовая ло­
пасть, или капюшон, по краю ко­
торого проходит ресничное кольцо,
гомологичное прототроху аннелид
(Иванова-Казас, 1977). За ротовым
отверстием формируется подково­
образный эктодермальный валик,
на котором закладываются зачат­
ки щупалец личинки. Венчик щу­
палец также снабжен длинными
ресничками, что дает основание го-
мологизировать его с метатрохом
аннелид. Наконец, на заднем конце
личинки образуется телотрох, рас­
положенный впереди от анального
отверстия. Находящиеся в первич­
ной полости мезодермальные клет­
ки образуют цечомический эпите­
Рис. 8-20. Актинотроха форониды
лий, мышцы и кровеносные сосу­
(по: Selys-Longchamps, 1907). ды. В послеротовой области позд-
1 — капюшон; 2 — личиночное щупальце; 3 - брюш- нее закладывается брюшной кар­
ной карман; 4 — телотрох. ман, представляющий собой экто­
дермальное впячивание.
Превращение актинотрохи в дефинитивную форму обусловлено разрастанием
цилиндрического выступа на брюшной стороне личинки как раз в области закладки

Рис. 8-21. Превращение актинотрохи в дефинитивную форму

(по: Korschelt, Heider, 1936).
А — стадия перед образованием кишечной петли; Б — стадия формиро­
вания брюшного кармана. 1 — капюшон; 2 — теменной орган; 3 — телотрох;
4 — кишечник; 5 — метасома; 6 — рот; 7 — дефинитивные щупальца.

154
брюшного кармана (рис. 8-21). Разрастаясь, этот выступ дает стебелек будущей
форониды. В процесс образования стебелька вовлекается и кишка, которая как бы
втягивается в стебелек, образуя характерную для всех щупальцевых петлю. Вмест е
с тем анальное отверстие остается в области лофофора, т.е. неподалеку от ротового
отверстия.
Развитие мшанок, несмотря на длительную историю его изучения, таит еще мно­
го невыясненных вопросов. В результате дробления, которое у мшанок обычно имеет
радиальный характер, образуется целобластула. Гаструляция у разных видов проис­
ходит разными способами. У некоторых мшанок происходит погружение вегетатив­
ных клеток внутрь зародыша (эмболия), у других наблюдается иммиграция. У ряда
видов имеется эпиболия. Интересной особенностью развития многих мшанок явля­
ется то, что у их личинок не образуется энтодермальный кишечник. В этих случаях
возникающая в ходе гаструляции внутренняя клеточная масса личинки представле­
на только мезодермальными клетками.
Типичной личинкой мшанок явля­
ется так называемый цифонаут (рис.
8-22). Эта личинка имеет конусовид­
ную форму. Оральная область на­
ходится в основании конуса, а або-
ральная на его вершине. 11о краю
оральной области расположен кольце­
видный локомоторный орган, образо­
ванный несколькими рядами реснич­
ных клеток. Из эктодермы формиру­
ется мантия, клетки которой генери­
руют хитиноидную двустворчатую ра­
ковину. У планктотрофного цифонау-
та имеется вполне развитая пищевари­
тельная система с ротовым отверсти­
ем, глоткой, энтодермальным желуд­
ком, эктодермальной задней кишкой и
Рис. 8-22. Цифонаут мшанки Electra pilosa
анальным отверстием. (по: Prouho, 1892).
У большинства видов мшанок пи­ 1 — аборальный орган; 2 —глотка; 3 — нервно­
щеварительный канал недоразвит или мускульный тяж; 4 — раковина; 5 — грушевидный
полностью отсутствует. Например, у орган чувств; 6 — проктодеум; 7 — задняя кишка;
8 — желудок.
Bugula neritina внутренняя полость
личинки заполнена паренхимой (рис. 8-23).
Для мшанок из отряда Круглоротых характерно явление полиэмбрионии. Раз­
витие зародышей происходит в фолликулах, которые образуются в теле гонозоои-
дов за счет мезодермальных элементов. Фолликулы, имеющие синцитиальное стро­
ение, обеспечивают питание зародыша. Бластомеры дробящегося яйца обнаружива­
ют значительную автономность. Они могут разъединяться и вновь соединяться друг
с другом, образуя морулоподобный зародыш, который состоит из клеток эктодер­
мальной и мезодермальной природы. За счет питающего синцития такой первичный
зародыш растет и, достигая определенных размеров, фрагментируется на вторич­
ные зародыши, сохраняя при этом преемственность наружного (эктодермального)
и внутреннего (мезодермального) листков. Вторичные зародыши при обособлении

155
 1

Рис. 8-23. Схема строения личинки

мшанки Bugula neritina (по: Woollakott,
Zimmer, 1971).
1 — аборальный орган; 2 — верхняя бла­
стема; 3 — мантийная складка; 4 — нижняя
бластема; 5 — клетки ресничного венчика;
6 — нервное кольцо; 7 — крыша присоско­
видного органа; 8 — стенка присосковидного
органа; 9 — шейка присосковидного органа;
10 — реснички грушевидного органа; 11 —
железистое поле грушевидного органа.

имеют около 60 клеток. У некоторых видов описана и т рет ичная генерация заро­
дышей, которые образуются в результате фрагментации вторичных. В результате
из одного яйца может сформироваться более ста личинок. Образующиеся личинки
имеют относительно простое строение. У них нет кишечника, ресничного венчика
и некоторых других органов, типичных для цифонаута. По-видимому, цифонаут,
который многие исследователи рассматривают как своеобразно измененную тро-
хофорную личинку, в ходе эволюции мшанок подвергся вторичному упрощению,
в ходе которого редуцировались многие личиночные органы. Причины и значение
этих эволюционных преобразований мало понятны и являются вызовом для новых
поколений эмбриологов.

Литература
Иванова-Казас О. М. Тип Annelida — кольчатые черви. Класс Polychaetr — многощетин-
ковые черви / / Сравнительная эмбриология беспозвоночных животных. М ., 1977. С. 20-62.
Иванова-Казас О. М. Тип Mollusca — моллюски. Класс Gastropoda—брюхоногие мол­
люски / / Там же. С. 111-141.
Рэфф Р., Кофмен Т. Эволюция и структурная организация яиц и зародышей / / Эмбри­
оны, гены и эволюция. М., 1986. С. 129-143.
 Глава 9. БИЛАТЕРАЛЬНЫ Е. ECDYSOZOA

Молекулярно-биологические исследования обнаружили филогенетическое един­

ство некоторых типов билатеральных животных, в том числе Круглых червей и
Членистоногих, для которых характерна линька и которые теперь объединяются в
новый монофилсгический таксон Ecdysozoa (от греч. Ехбиснс — вылупление, линька).
Для представителей Ecdysozoa характерно тело, покрытое экзоскелетом, который по
мере роста животного периодически обновляется в ходе линек.

9.1. Круглые черви (Nematoda)

Круглые черви, или Нематоды — обширная группа, представленная как свобод-

иоживущими, так и паразитическими формами, поражающими растения и живот­
ных. Нематоды отличаются огромной эволюционной пластичностью, что позволило
им занять практически все экосистемы — водные, наземные, почвенные, а с уче­
том форм, паразитирующих на птицах и насекомых, и воздушные. По современным
оценкам тип K j>утлых червей- один из самых крупных в царстве животных, в со­
ставе которого имеется, по-видимому, более ста миллионов видов.
Тело круглых червей несегментировано, имеет кожномускульный мешок и пер­
вичную полость. Характерной особенностью нематод является их неспособность
формировать реснички. Тело покрыто жесткой кутикулой (экзоскелет), которая
вместе с подлежащей гиподермой противостоит мощному гидростатическому дав­
лению внутри тела («гидроскелет»).
Развитие прямое: выходящее из яйцевых оболочек животное представляет собой
ювенильную форму. Рост молодых животных, так называемых «личинок», возмо­
жен благодаря линькам, во время которых старая кутикула замещается новой. У
многих круглых червей описана эутелия (от греч. еитеХт]С— экономный, бережли­
вый), т. е. постоянное, характерное для данного вида число клеток, образующих
тело животных. В конце эмбрионального развития особи мужского пола нематоды
Caenorhabditis elegans состоят всего из 560 клеток, а взрослые самцы из 1031, тогда
как гермафродитные особи из 959 соматических клеток.
Эмбриональное развитие подробно изучено лишь у паразитической нематоды
Parascaris equorum и у почвенной нематоды Caenorhabditis elegans, которая стала
модельным объектом биологии развития и прежде всего объектом молекулярной
биологии развития. Естественно, что столь ограниченное число исследованных объ­
ектов не позволяет выявить в полной мере особенности организации эмбриогенеза,

157
характерные для всего типа в целом. Действительно, до последнего времени суще­
ствовало мнение, что развитие круглых червей характеризуется высокой степенью
детерминативности и инвариантности. Лишь сравнительно недавно исследование
ряда видов морских свободноживущих нематод показало, что раннее предопределе­
ние судьбы бластомеров происходит, вероятно, далеко не у всех видов. На основа­
нии опытов с маркировкой бластомеров морской нематоды Enoplus brevis делается
вывод даже о плюрипотентности бластомеров и регулятивном характере раннего
эмбриогенеза. Очевидно, что дальнейший сравнительно-эмбриологический и экспе­
риментальный анализ внесет ясность в эту важную проблему.
Первым исследователем эмбриологии аскарид был Теодор Бовери (1862-1915),
который дал ставшее классическим описание ранних стадий развития Ascaris теда-
locephala (по современной номенклатуре — Parascaris equorum). Он обратил внима­
ние на то, что в течение нескольких первых делений дробления во время митоза
происходит так называемая диминуция (от лат. diminuo — дробить) хроматина, от­
брасывание небольших фрагментов хромосом. Оказалось, что диминуция хроматина
наблюдается лишь в тех бластомерах, потомки которых образуют соматические тка­
ни. Диминуция хроматина отсутствует в клетках полового пути (рис. 9-1, А). Как
выяснил Бовери в опытах с нарушением дробления при диспермном оплодотворении
и после центрифугирования оплодотворенных яиц, диминуция хроматина или ее от­
сутствие определяются разными свойствами цитоплазмы, образующей анимальную
и вегетативную области яйца (рис. 9-1,Б). Следует заметить, что у большинства
нематод, в том числе у С. elegans, диминуции хроматина не наблюдается.
Дробление Parascaris полное, билатерально симметричное (рис. 9-2). Положе­
ние бластомеров в пространстве строго фиксированное. Первое деление происходит
в экваториальной плоскости, в результате чего образуются два бластомера — ани-
мальный АВ (S1) и вегетативный Р 1 . Индекс «Р » указывает на принадлежность

Рис. 9-1. Роль полярной плазмы в подавлении диминуции хроматина у нематоды

Parascaris (по: VVaddington, 1966).
А — нормальное развитие: в клетках, содержащих полярную плазму, диминуции хрома­
тина не происходит; Б — дробление после центрифугирования зиготы, в результате которого
изменено положение борозды дробления: на стадии 2 бластомеров полярная плазма содер­
жится в обоих бластомерах, и диминуции в них не происходит. 1 — полярная плазма; 2 —
диминуция хромосом; 3 — отсутствие диминуции хромосом; 4 — стволовая клетка.

158
 Рис. 9-2. Дробление нематоды Parascaris equorum (по: Boveri, 1899).
А — стадия 2 бластомеров; Б — стадия 4 бластомеров, Т-образная фигура; В, Г — та
же стадия, формирование ромба.

этой клетки к линии клеток полового (или, как иногда не вполне корректно го­
ворят, «зародышевого») пути. Индекс «S» свидетельствует о соматической приро­
де клетки. Действительно, бластомер АВ является источником эктодермы. Второе
деление бластомеров происходит в разных направлениях. Бластомер АВ делится
меридионально на клетки А и В, а борозда, делящая бластомер Р1, расположе­
на параллельно экваториальной плоскости. При делении Р 1 возникают бластомеры
S2 (EMSt) и Р2. В результате зародыш принимает Т-образную конфигурурацию
(рис. 9-2, Б), которая, однако, вскоре сменяется ромбовидной, поскольку располо­
женный на вегетативном полюсе бластомер Р2 смещается в переднем направлении
и приходит в контакт с бластомером В (рис. 9-2, В,Г)).
При следующем делении S2 образует переднюю клетку MSt й заднюю Е. Бла­
стомер MSt при последующих делениях дает начало популяциям мезодермальных
клеток ( т и [i) и клеткам зачатка стомодеума (st и ах). Р2 делится на вентральную
РЗ и дорсальную S3, или C-клетку — основательницу клона дорсальной эктодермы.

159
 При переходе к стадии 16 бластомеров РЗ делится на эктодермальную клетку
D и клетку-основательницу полового зачатка Р4, которая делится и образует две
первичные половые клетки G 1 и G2.
Генеалогия бластомеров и паттерн раннего развития P.equorum имеют большое
сходство с таковыми С. elegans (рис. 9-3, рис. 9-4). Тем больший интерес представ­
ляют результаты исследования эмбриогенеза этого модельного объекта биологии
развития, выполненные с помощью цейтраферной видеозаписи и компьютерного
анализа изображений (Schnabel et al., 1997). Точная регистрация времени делений
клеток, их первоначального положения в развивающемся зародыше и последующего
перемещения обнаружила вариабельность этих параметров, которая ранее ускольза­
ла от исследователей. Вместе с тем, несмотря на выявленную изменчивость ранних
зародышей, перед началом морфогенеза возникает инвариантная стадия со строго
фиксированными дискретными областям!, клетки которых имеют вполне опреде­
ленную спецификацию. Инвариантность клеточной судьбы, как полагают, определя­
ется специфическими индуктивными межклеточными взаимодействиями на ранних
стадиях развития, когда топология бластомеров у разных зародышей еще достаточ­
но однообразна, чтобы обеспечить воспроизводимость паттернов индукции.
На стадии 24 клеток, т. е. после выделения клетки полового зачатка Р4, дочер­
ние клетки бластомера Е погружаются внутрь зародыша, где после нескольких де­
лении образуют среднюю кишку, состоящую из 20 клеток. При этом перемещении

t, мин Число
клеток
0 Оплодотворенное яйцо
10
20 Р0
30 АВ (Зигота)
40
2 ___ I___
EMS
50 4
60 Гиподерма MS
8
70 Нейроны
Мыщцы глотки
80 Одна мыщца тела
90 24 Железы D
100 (389)
Мыщцы тела
110 Мыщцы глотки Кишка
120 Нейроны
Железы (20) Гиподерма
130 (80) Мыщцы тела
140 Два нейрона
150 (47)
Мыщцы тела
160
170
100 (20)
п
G 1G 2
Линия
половых
клеток

Рис. 9-3. Генеалогия бластомеров нематоды Caenorhabditis elegans

(по: Гилберт, 1994).
Левая шкала — время после оплодотворения; правая шкала — число бласто­
меров. Цифры в скобках — число клеток в дефинитивном зачатке. Объяснения в
тексте.

160
 Рис. 9-4■ Основные варианты раннего дробления нематод
(по: Иванова-Казас, 1975).
А — аскаридный; Б — промежуточный; В — параллельный; Г — линей­
ный. Объяснения в тексте.

дочерних клеток бластомера Е на вентральной поверхности зародыша возникает

слабо выраженный бластоиор. Через это же отверстие внутрь зародыша позднее
переместятся и первичные половые клетки, располагающиеся под зачатком кишки.
Уходят внутрь зародыши и потомки бластомера MSt. Процесс погружения клеток-
основательниц внутрь зародыша круглых червей сопровождается эпиболией, или
распространением эктодермального пласта в вентральном направлении и заверша­
ется замыканием бластопора. Совокупность этих перемещений, в результате кото­
рых клетки-основательницы энтодермального и мезодермального клонов, равно как
и клетки полового зачатка и зачатка глотки оказываются внутри зародыша, создает
предпосылку формирования трехслойного зародыша и может быть названа гастру-
ляцией (от греч. уасттгр — желудок).

9.2. Членистоногие (Arthropoda)

Членистоногие — самый обширный тип животных. Это билатеральные живот­

ные, имеющие сегментированное тело и метамерно расположенные членистые ко­
нечности. Сегментация гетерономная, т. е. сегменты в разных областях тела резко
различаются своим строением. Сходные сегменты образуют крупные отделы тела,

161
или тагмы (от греч. тс/у[1с/— строй, порядок). У членистоногих насчитывают три
тагмы — голова, грудь и брюшко. Сегменты и тагмы могут сливаться друг с другом,
образуя сложные комплексные структуры. Спереди тело ограничено головной ло­
пастью, или акроном (от греч. axpov — на самом краю), сзади — анальной лопастью,
или телъсоном (от греч. teXctov — граница). Членистоногие имеют наружный хити­
новый скелет. Хитиновая кутикула ограничивает рост развивающегося животного,
который поэтому возможен только при линьке, т. е. периодической смене затверде­
вающего покрова. Как у всех Ecdysozoa, у членистоногих отсутствуют ресничные
покровы.

Рис. 9-5. Возможные филогенетические отношения в типе Членистоногих.

Слева — представлен™, основанные на данных молекулярной биологии о структуре ДНК неко­
торых генов; справа — традиционные представления морфологов (по: Gilbert, 1997).

Тип Членистоногих подразделяется на четыре основных подтипа: подтип ныне

вымерших Трилобитов (Trilobitomorpha), подтип Хелицеровых (Clielicerata), Ж а-
бернодышащих (Branchiata) п Трахейных (Tracheata). Филогенетические отноше­
ния между подтипами Членистоногих в настоящее время представляются дискус­
сионными (рис. 9-5). Данные молекулярной филогении, основанные на анализе по­
следовательностей ДНК рибосомных генов и некоторых митохондриальных генов,
сближают насекомых с ракообразными. Однако, согласно традиционным взглядам,
насекомые объединяются вместе с многоножками в подтип Трахейных, или Непол­
ноусых, поскольку у этих животных имеется лишенный конечностей интеркалярный
сегмент, возникший вследствие редукции второго аптеннального сегмента ракооб­
разных. В пользу родства многоножек и насекомых как будто бы говорит нали­
чие у них трахейной системы, которая отсутствует у ракообразных. Согласно со­
временным взглядам, образование и трахейной системы, и мальпигиевых сосудов
у многоножек и насекомых происходило в ходе эволюции независимо, копвергент-
но, и, таким образом, представляет собой гомоплазию (от греч. ojiot; — одинаковый,
ттАаак; — образование) (Wilkins, 2001). По сравнению с ракообразными у насекомых

162
происходит редукция числа иреоральных и туловищных придатков, а также исчез­
новение ветвления ног. Интересно, что такой важный систематический признак, как
неразветвленность ног насекомых обусловлен сравнительно простым генетическим
механизмом — отсутствием активности гена wnt в дорсальной области имагиналь-
ного диска конечности (Struhl, Basler, 1993).

9.2.1. Хелицеровые

Характерной особенностью хелицеровых является деление тела на два отдела —

просом у (от греч. про- - находящийся впереди, гто[!а — тело), которая образуется в
результате слияния головы и груди, и оп ист ом у (от греч. отиосрюс — задний) или
брюшко. На головогруди имеется 6 пар конечностей. Впереди рта расположена пер­
вая пара конечностей — хелицеры , выполняющие роль челюстей. Позади рта нахо­
дятся педипалъпы.
М е ч е х в о с т ы . Довольно крупные яйца мечехвостов (2-3,5 мм) богаты желтком и
имеют толстую оболочку — хорион (от греч. ^copiov — укрепление), которая защища­
ет яйцо, откладываемое в песок. Дробление полное, расположение борозд не имеет
фиксированного паттерна. Своеобразная анархичность дробления проявляется и в
характере делений п ер ви ч н ы х бластомеров морулы, состоящей из 120-130 клеток.
Деления первичных бластомеров асинхронны, поэтому некоторое время зародыш
представляет собой мозаику из мелкоклеточных областей (результат деления пер­
вичных бластомеров) и крупных клеток, еще не возобновивших деления (рис. 9-6).

Рис. 9-6. Дробление у мечехвоста

Limulus moluccanus (по: Иванов, 1933).
А — морула; Б — асинхронное деле­
ние первичных бластомеров и образова­
ние участков с мелкими клетками.

Зародышевые листки образуются путем деламинации: поверхностные, сравни­

тельно бедные желтком клетки дают эктодерму. Крупные клетки, расположенные
внутри зародыша, становятся энтодермой.
В будущей вентральной области зародыша образуется сгущение эктодермы — за­
роды ш евое пят но , или зароды ш евы й диск. Между этим эктодермальным утолщени­
ем и энтодермой в результате деления одного из бластомеров формируется мезодер­
ма, которая вскоре после своего обособления дает начало четырем парам сегментов.
В задней области зародыша пролиферативная активность поверхностного эпителия
лежит в основе независимого возникновения еще одного скопления мезодермальных
клеток. Выселение клеток мезодермы из наружного слоя клеток (эктобласта) сосре­
доточено в узкой области на заднем конце, которую иногда называют первичной
полоской (Иванов, 1924, 1933). Здесь образуется своего рода зона р ост а , за счет
клеток которой образуется мезодерма всех остальных сегментов (рис. 9-7). Как и
у аннелид, одновременно возникающие четыре сегмента называют ларвальны м и, а
образующиеся в зоне роста на заднем конце — пост ларвальным и, хотя они и фор-

163
 Рис. 9-7. Образование постларвальной мезодермы в зоне роста
у мечехвоста Limulus moluccanus (по: Иванов, 1933).
1 — эктодерма; 2 — телопор; 3 — мезодерма; 4 — целомический мешок.

мируются б период эмбрионального развития. Четыре ларвальных и три передних

постларвальных сегмента образуют головогрудь. За счет остальных постларвалъпых
сегментов формируется брюшко.
Наличие двух способов формирования мезодермы у мечехвостов, которые, как
мы видели, характерны и для аннелид, можно, по-видимому, считать свидетель­
ством существования подобного явления у представителей некой анцестральной
группы билатеральных животных, давшей начало видам, представленным в линиях
Lophotrochozoa и Ecdysozoa.
Паукообразные. Класс Паукообразных (Arachnoidea) представлен разнообраз­
ными, главным образом наземными животными. К паукообразным относятся скор­
пионы, сольпуги, пауки, сенокосцы, клещи и другие. Многообразны и типы развития
этих животных.
Яйца у многих паукообразных центролецитальные. Лишь у некоторых скорпио­
нов они имеют телолецитальный характер. Дробление может быть соответственно
поверхностным или дискоидальным. В центролецитальных яйцах пауков цитотомии
не происходит и делятся только ядра центральной области. Образующиеся ядра по
тяжам цитоплазмы выходят на поверхность и образуют бластодерму, уплощенные
клетки которой окружают желток. Ж елток иногда подразделяется на отдельные
территории, не имеющие, впрочем, клеточной структуры.
Зародышевые листки в случае дискоидального дробления образуются путем де-
ламинации (скорпионы). При поверхностном дроблении перед гаструляцией за счет
концентрации клеток на будущей вентральной стороне зародыша сначала формиру­
ется зародышевый диск, который позднее вытягивается в полоску. На заднем конце
зародышевой полоски происходит ингрессия клеток эктобласта с образованием либо
мезэнтодермы, которая лишь впоследствии подразделяется на энтодерму и мезо-

164
 Рис. 9-8. Образование амниона и серозы у скорпионов (по: Иванова-Казас, 1979).
А — закладка зародышевых оболочек; Б — стадия формирования зародышевой полоски
(сагиттальные разрезы, анимальный полюс вверху). Стрелкой указано направление роста
зародыша. 1 — кольцевая амниотическая складка; 2 — бластодиск; 3 — амнион; 4 — сероза;
5 — эктодерма; 6 — мезодерма; 7 — энтодерма; 8 — вителлофаги

Рис. 9-9. Бластокинез у паука Лде-

lena (по: Foelix, 1982).
А — начало реверсии: расщепление
зародышевой полоски вдоль средин­
ной линии, каждая половинка движет­
ся в латеральном направлении; Б —
продолжение реверсии; В — смыка­
ние стенок тела на дорсальной сто­
роне; Г — завершение процесса: желток
окружается тканями зародыша. Рим­
скими цифрами обозначены соответ­
ственно первая, вторая, третья и чет­
вертая пары ног. 1 — головная лопасть;
2 — хелицера; 3 — хвост; 4 — желток;
5 — медиальная линия.

165
дерму (пауки), либо мигрирующие клетки изначально репрезентируют энтодерму и
мезодерму (клещи).
Как и у мечехвостов, у паукообразных мезодерма возникает из двух источников.
После образования первичной мезодермы, которая сегментируется и дает несколь­
ко «ларвальных» сегментов, на заднем конце зародыша образуется зона роста, где
благодаря миграции клеток эктобласта образуется мезодерма, входящая в состав
последовательно закладывающихся «постларвальных» сегментов. Местоположение
границы между этими группами сегментов варьирует, но часто оно соответствует
заднему краю просомы.
У скорпионов, которые развиваются с образованием зародышевого диска, из пе­
риферической области последнего развиваются зародышевые оболочки — амнион и
сероза — структуры, которые независимым образом, конвергентно, возникают и в
эмбриогенезе насекомых (рис. 9-8).
У пауков подробно описано замечательное явление — бластокинез, или реверсия
(рис. 9-9) Благодаря реверсии масса желтка, которая в период формирования за­
родышевой полоски находится на спинной стороне зародыша, попадает на его вен­
тральную сторону. Симметричные половинки полоски разъединяются по медиаль­
ной вентральной линии за исключением головного и хвостового участков, и вслед за
этим начинают движение, как бы «плывут», по поверхности желтка. Поверхность
яйца в промежутке между расходящимися половинками полоски покрыта лишь тон­
ким слоем эктодермы. Движение клеток завершается, когда ранее свободные лате­
ральные участки полоски смыкаются друг с другом на спинной стороне.

9.2.2. Многономски

Многоножки — типичные наземные животные, в составе их удлиненного тела

различается головной отдел и сегментированное туловище. Многочисленные чле-
ники туловища снабжены конечностями.
Яйцо многоножек содержит большое
количество желтка и имеет сравнитель­
,АОо о ° / о r<\Qy но крупные размеры. У обычной для на­
т
ших широт сколопендры шарообразные
. о
яйца достигают 3 мм в диаметре. Яд­
/Q 0>^4sO\ f r Q / O о. О
ро, окруженное скоплением цитоплаз­
(cpFj СРр ° “ — а д ' ° п |>|
мы, расположено в центре яйца.
) фобление обычно имеет поверх­
СсГо QjO< О СР - о
\ о < - Г ° С г , О ~ ностный характер, хотя у некоторых
многоножек из группы Symphyla дроб­
ление полное и завершается формирова­
C&og/O
bc нием морулы. Часто при дроблении про­
ч° 4 О, . 4 4 С исходит образование желточных пира­
м и д— конусовидных участков желтка,
разделенных цитоплазматическими тя­
Рис. 9-10. Дробление яйца
сколопендры (по: Heymons, 1901). жами. По этим тяжам происходит высе­
1 — центральные энергиды; 2 — желточные ление ядер из центральной области яй­
пирамиды; 3 — интеркалярные клетки. ца на его периферию (рис. 9-10). Выход
ядер на поверхность яйца сопровождается целлюляризацией, в результате которой

166
возникает бластодерма. В силу асимметричной миграции ядер или благодаря нерав­
номерной интенсивности пролиферации на поверхности яйца образуется зародыше­
вый диск, состоящий из нескольких слоев клеток.
Зародышевый диск вытягивается в длину, в результате чего образуется зароды­
шевая полоска, Под поверхностным эктодермальным слоем клеток зародышевой по­
лоски располагаются два симметричных тяжа мезодермы, разделенных свободным
пространством по срединной линии зародыша (рис. 9-11). Выселяющиеся из полоски
клетки располагаются на поверхности желтка, образуя энтодермальный эпителий,
или погружаются в желток, давая начало так называемым желточным клеткам, или
вителлофагам (от лат. vitellus — желток, греч. (payeiv — пожирать), участвующим в
переработке и утилизации желтка. Интересно, что у Scutigera, одного из предста­
вителей губоногих многоножек, вителлофаги, по-видимому, формируют среднюю
кишку, так что их можно рассматривать как энтодермальный зачаток. У других ви­
дов энтодерма возникает помимо вителлофагов. Анализируя проблему образования
энтодермы у многоножек, О. М. Иванова-Казас (1981) отмечает большое разнообра­
зие способов ее возникновения. Так, у губоногих многоножек энтодерма образуется
путем диффузной иммиграции клеток вдоль всей зародышевой полоски или путем
иммиграции на переднем и заднем концах полоски, или, наконец, в результате уни­
полярной иммиграции на заднем конце полоски. У двупарноногих многоножек энто­
дерма образуется иным способом, а именно обособляясь от зародышевой полоски в
виде клеточных тяжей, врастающих внутрь зародыша. Что касается мезодермы, то
она образуется в результате ингрессии клеток по всей длине зародышевой полоски.
Сегментация тела у многоножек происходит в два этапа. Первый этап приурочен
к эмбриональному периоду, когда одновременно образуется относительно небольшое
число сегментов. Второй этап происходит после вылупления личинки, когда сегмен­
ты формируются последовательно за счет активности особой зоны роста.

1 2 3

Рис. 9-11. Последовательные стадии (А, Б) образования мезодермы

в зародышевой полоске сколопендры Scolopendra cingulata (по: Heymons, 1901).
1 — энтодерма; 2 — желток; 3 — желточная клетка; 4 — мезодерма; 5 — вен­
тральная полоска эктодермы; 6 — эктодерма; 7 — клетки крови.

167
 После сегментации вследствие продолжающегося роста зародышевой полоски ее
передний и задний концы загибаются на спинную сторону. Завершающий этап фор­
мирования тела животного, как и у пауков, связан с бластокинезом, в ходе которого
происходит, во-первых, расхождение симметричных половинок зародышевой полос­
ки в дорсальном направлении и, во-вторых, движение переднего и заднего отделов
зародыша в направлении вентральной стороны тела. Вследствие этих процессов го­
лова и задняя область туловища возвращаются на вентральную сторону, где обра­
зуется разделяющая их глубокая складка.

9.2.3. Жабродышащие. Ракообразные

Класс Ракообразных — единственный в подтипе Жабродышащих. Ракообраз­

ные — первичноводные членистоногие. Они отличаются большим разнообразием
форм и подразделяются на пять подклассов, из которых четыре относятся к низ­
шим, а один — к высшим ракам.
Тело обычно четко подразделено на три отдела — голову, грудь и брюшко. Число
сегментов, составляющих тело, у разных видов сильно варьирует (от 5 до 50). Голов­
ной отдел состоит из акрона и четырех сегментов, снабженных придатками. Акрон
несет антеннулы, на первом сегменте развиваются антенны, а остальные головные
сегменты являются челюстными: они снабжены видоизмененными конечностями,
которые обеспечивают измельчение захваченной пищи.
Число сегментов грудного отдела и брюшка стабильно только у высших раков.
У Malacostraca грудь образована восемью, а брюшко — шестью сегментами. Имеет­
ся анальная лопасть, или тельсон. Конечности груди, снабженные жабрами, служат
для передвижения. Брюшные конечности имеются только у высших раков. Часто
они выполняют не двигательную, а какую-либо иную функцию, в частности дыха­
тельную.
Типы яйцевых клеток, равно как и способы дробления, у ракообразных многооб­
разны. У видов с изолецитальными яйцами дробление обычно равномерное и имеет
черты спиральности. При наличии телолецитальных яиц дробление гомо- или гете-
роквадрантное, и может быть отнесено к радиальному типу. В случае центролеци-
тальных яиц дробление поверхностное.
У веслоногих и ветвистоусых,
яйца которых содержат мало желт­
ка, дробление полное (рис. 9-12).
Характер расположения бласто­
меров обнаруживает значительное
разнообргзие. У некоторых жи­
вотных обнаруживаются признаки
спиральности. У тех же видов, яй­
ца которых характеризуются оби­
лием желтка, как, например, у вет­
Рис. 9-12- Дробление яйца веслоногого рачка
Cyclops viridis (по: Fuchs, 1914). вистоусого рачка Leptodora, дроб­
А — стадия 4 бластомеров; Б — стадия 16 бласто­ ление поверхностное. Делящиеся
меров. ядра по цитоплазматическим тя­
жам перемещаются из центральной области яйца на его периферию, где они об­
разуют бластодерму. Поверхностный характер дробления наблюдается и у высших

168
 Рис. 9-13. Дробление и формирование зародышевого диска
у равноногого рака Iron (по: Nair, 1956).
А, Б — последовательные стадии выхода ядер дробления на по­
верхность яйца; В — миграция клеток к вегетативному полюсу; Г —
зародышевое пятно (диск).

Рис. 9-14• Меробластическое асинхронное дробление яйца паразитического

веслоногого рака Lernaeocera branchialis (по: Педашенко, 1898).
А — стадия 3 бластомеров (АВ, С и D); Б — стадия 4 бластомеров;
В — стадия 5 бластомеров; Г — позднее дробление.

169
раков с богатыми желтком яйцами. Выход ядер на поверхность яйца и образование
бластодермы наблюдается, например, у мизид. После образования бластодермы за
счет клеток, концентрирующихся на будущей вентральной стороне зародыша, фор­
мируется зародышевый диск (рис. 9-13). У некоторых видов этот диск образуется
благодаря амебоидной подвижности индивидуальных клеток, вышедших на поверх­
ность зародыша.
У некоторых паразитических веслоногих дробление резко неравномерное. В ходе
дробления на поверхности очень крупной и богатой желтком клетки, из которой
впоследствии образуется энтодерма, формируется колпачок мелких клеток (рис. 9-
14). Эти клетки, продолжая делиться, дают начало эктодерме и мезодерме.
Разнообразны у ракообразных и способы гаструляции. В этом классе образование
мезодермального и энтодермального листков происходит в результате иммиграции,
полярного врастания клеток, путем эпиболии и, наконец, с помощью инвагинации.
Часто отмечается двухфазность гаструляции, что проявляется в разновременном об­
разовании мезодермы и энтодермы. У жаброногого рака Arthemia salina гаструляция
имеет именно такой сложный характер. Сначала происходит иммиграция клеток на

Рис. 9-15. Гаструляция у жаброногого рачка Artemia salina (по: Benesch, 1969).
А — вселение клеток вегетативного полушария в бластоцель; Б — завершение гастру­
ляции. 1 — бластоцель; 2 — стомодеум; 3 — мезодерма 1-го антеннального сегмента; 4 —
энтодерма; 5 — половой зачаток; 6 — мезодерма мандибулярного сегмента.

4
Рис. 9-16. Гаструляция у веслоногого рачка Cyclops (по: Fuchs, 1914).
А — сагиттальный разрез через зародыш в конце дробления; Б — начало гаструляции; В — ин-
вагинационная гаструла, в архентероне которой представлены клетки-родоначальницы мезодермы,
энтодермы и полового зачатка. 1 — эктодермальные клетки; 2 — клетки-родоначальницы мезодер­
мы; 3 — клетки-родоначальницы энтодермы; 4 — первичная половая клетка.

170
заднем конце зародыша. Эти клет­
ки образуют мезодермальный зача­
ток, который вскоре сегментируется
(рис. 9-15). Несколько позже в перед­
ней области в виде единого зачатка
инвагинирует эпителиальная стенка
бластулы, содержащая материал энто­
дермы и эктодермального стомодеума.
Типичная инвагинационная гаструла
характерна дня развития циклопов )
(рис. 9-16) Гаструляция путем эпибо­
лии ярко выражена у паразитическо­
го веслоногого Lernaeocera br'anchialis
(рис. 9-17). Своеобразие этого эпи-
болического процесса состоит в том,
что он не ограничивается просто об­ Рис. 9-17. Гаструляция путем эпиболии у
паразитического веслоногого рачка Lernaeocera
растанием эктодермальных клеток, но
branchiahs (по: Kohler, 1976).
сопровождается одновременным отде- 1 — эктобласт; 2 — желточная клетка; 3 — крае-
лением (деламинацией) мезодермаль- вая клетка; 4 — клетка полового зачатка. Стрелка-
НЫХ клеток, которые располагаются ми показано направление движения эктобласта по
желточной клетке.
между экто- и энтодермой.
У некоторых ракообразных уже перед началом гаструляции удается устано­
вить судьбу клеток, расположенных в разных областях зародышевого диска. Так,

Рис. 9-18. Карта презумптивных зачат­
ков в области зародышевого пятна у мизи-
ды Hemimysis lamomae (по: Manton, 1928).
1 — эктодерма; 2 — эктотелобласты; 3 —
головные лопасти; 4 — мезодерма; 5 — энто­
дерма; 6 — половой зачаток.
Рис. 9-19. Закладка конечностей науплиуса
веслоногого Lernaeocera branchialis (по Kohler,
1976).
1 — зачаток антенны I; 2 — зачаток антенны
II; 3 — зачаток мандибулы; 4 — зона пролифе­
рации; 5 — мезодерма.

171
у Hemimysis lamornae зародышевое пятно имеет V-образную форму (рис. 9-18). В
его средней части располагаются клетки рано обособляющейся половой линии, ко­
торые дадут половой зачаток. Каудальнее располагается материал будущей энто­
дермы, а латеральнее лежат эктотелобласты, служащие источником образования
постларвальной эктодермы, а также клетки, которые в ходе гаструляции образуют
мезодерму.
Знакомство с развитием ракообразных убедительно свидетельствует о том, что
формирование основного плана строения животного не зависит напрямую ни от ти­
па дробления, ни от способа гаструляции: один и тот ж е план строения может
достигаться разными путями. Все разнообразные способы дробления и гастру­
ляции у ракообразных ведут к развитию билатерально-симметричного зародыша с
тремя парами зачатков конечност ей (антенпулы, антенны и мандибулы) в головной
области (рис. 9-19). На заднем конце зародыша возникает зона роста, в которой
расположены эктодермальные и мезодермальные телобласты, за счет активности
которых формируется тело животного с его грудными и абдоминальными сегмен­
тами. По-видимому, в яйце имеется какая-то система сигналов, предопределяющая
направление морфогенетических процессов. Природа генетических программ разви­
тия, существо молекулярно-биологических механизмов, лежащих в основе морфо­
генетических процессов, у ракообразных практически не исследованы.
Экто- и мезотелобласты являются стволовыми клетками, т. е. клегками, деления
которых асимметричны: одна из дочерних клеток сохраняет статус стволовой, тогда
как другая вступает на путь специализации. При каждом делении эктотелобласто в
возникает один ряд эктодермальных клеток. В результате пролиферации этих кле­
ток формируется пространственно ограниченная совокупность клеток, своего рода
«генеалогическая единица». В результате дифференциации этой клеточной сово­
купности формируется парасегмент, который соответствуег задней четверти одного
сегмента и трем четвертям следующего сегмента. Таким образом, каждое деление

Рис. 9-20. Науплиус усоногого рака (по: Brusca, Brusca, 1990).

1 — аитеннула; 2 — антенна; 3 — мандибула.

172
эктотелобластов обеспечивает формирование одного парасегмепта. Эта особенность
развития, связанная с парасегментной организацией тела развивающегося живот­
ного, характерна, как мы увидим, и для насекомых.
Обычно эмбриональное развитие ракооб­
разных завершается образованием личинки —
шуплиуса (рис. 9-20). У высших раков, од­
нако, науплиальная стадия проходит в яйце,
и эмбриональный период завершается обра­
зованием молодого животного или личинки,
тело которой образовано не только наупли-
альными, но и метанауплиалъными сегмен­
тами, которые последовательно возникают в
зоне роста за счет активности экто- и мезоб-
ластов.
Как у всех Ecdysozoa, покровный эпителий
у Ракообразных секретирует кутикулу, ко­
торая, затвердевая, ограничивает рост. Рост
становится возможным благодаря периодиче­ Рис. 9-21. Зоэа краба Callinectes sapidus
ским линькам, в промежутках между которы­ (по: Brusca, Brusca, 1990).
ми к ларвальным сегментам науплиуса добав­
ляются новые сегменты. Эта особенность развития является одной из причин су­
ществования многочисленных метанауплиальных форм ракообразных. В качестве
примера можно привести креветок, у которых науплиус после линьки трансформи­
руется в протозоэа. Протозоэа после ряда линек дает личинку зоэа с характерным
заостренным шлемом, стебельчатыми глазами и тремя парами максиллопедий (рис.
9-21). Наконец, зоэа превращается в ювенильную форму животного.

9.2.4■ Насекомые

Класс Насекомых отличается огромным разнообразием видов. Он подразделяет­

ся на два подкласса: подкласс Первичнобескрылых (Apterygota) и подкласс Крыла­
тых насекомых (Pterygota). В теле насекомых выделяются три отдела, или тагмы
голова, грудь и брюшко. Голова состоит из акрона и пяти слившихся сегментов;
грудь образована тремя сегментами. В составе брюшка 10-12 сегментов и тслъсон.
Сегменты первых двух отделов имеют характерные придатки. В голове различают
антенны, верхнюю губу, мандибулы, максиллы и нижнюю губу. Все сегменты гру­
ди имеют по одной паре ног. На дорсальной стороне второго и третьего сегмента
груди крылатых насекомых образуются крылья. Сегменты брюшка обычно лишены
конечностей.
По характеру развития крылатые насекомые подразделяются на две группы. Для
представителей одних отрядов характерно постепенное превращение ювенильных
постэмбриональных форм во взрослое животное. Для представителей других отря­
дов, напротив, характерно радикальное изменение личинки. Соответственно этому
различают насекомых с неполным превращением (Hemimetabola) и с полным пре­
вращением (Holometabola). Согласно одной из гипотез, полное превращение явля­
ется эволюционным приобретением и характеризует сравнительно молодые отряды.
По-видимому, имеется определенная корреляция между характером развития и осо­

173
бенностями организации оогенеза. Если для Apterygota и Hemimetabola характерны
паноистические яйцевые трубки, то Holomet.abola присущи в основном мероистиче-
ские яичники, причем у перепончатокрылых, бабочек и мух это так называемые по-
литрофные мероистические яичники (см. гл. 1). Такая корреляция примечательна.
Она позволяет думать, что эволюционные преобразования, затрагивающие репро­
дуктивную систему животных, важны не только непосредственно для репродуктив­
ных процессов per se, но, открывая новые возможности для организации оогенеза,
косвенным образом могут затрагивать сущностные события онтогенеза животных.
За исключением бескрылых ногохвосток и ряда живородящих и паразитических
видов крылатых насекомых (щитовки, наездники и др.), у которых дробление пол­
ное, насекомые имеют поверхностньт тип дробления яйца, что связывают с исклю­
чительно высоким содержанием желтка. Яйцо обычно имеет достаточно жесткую
наружную оболочку — хорион, защищающий зародыш от механических поврежде­
ний и высыхания. При осеменении спермии проникают в яйцо через особое отверстие
хориона— микропиле, которое обычно расположено на переднем конце яйца, хотя
у некоторых насекомых, например у прямокрылых (Orthoptera), положение микро­
пиле может быть и иным.
Деление ядра зиготы, которое окружено цитоплазматическим «двориком», про­
исходит автономно, т. е. не сопровождается делением цитоплазмы. В результате син­
хронных кариокинетических делений возникают многочисленные ядра. Ядерные
энергиды, т. е. ядра с окружающей их цитоплазмой, согласованно перемещаются по
цитоплазматическим тяжам из глубоких слоев яйца на его периферию (рис. 9-22).
В период делений ядер и вплоть до их выхода на поверхность яйца зародыш
имеет синцитиальную структуру. Это своеобразие ранних этапов развития имеет

Рис. 9-22. Поверхностное дробление у дрозофилы (по: Foe et all., 1993).

Цифры над рисунками — время после откладки яйца, мин.; цифры под рисунками — число ядер
в данный момент времени. Первичные половые или полярные клетки появляются на стадии 512
ядер, тогда как целлюляризация бластодермы происходит спустя еще 3 ч. 1 — ядерные синергиды;
2 — синцитиальная бластодерма; 3 — первичные половые клетки; 4 — клеточная бластодерма; 5 —
половой зачаток.

174
 'м
Рис. 9-23. Целлюляризация поверхности яйца дрозофилы
(по: Fullibove, Jacobson, 1971).
А, Б - митотическое деление и возникновение борозды дробле­
ния; В, Г — удлинение ядра и распространение режущей борозды в
глубь цитоплазмы; Д — клеточная бластодерма. 1 — поверхность яй­
ца; 2 — формирующаяся борозда дробления; 3 — ядро; 4 — желток.

175
существенные физиологические последствия. Действительно, отсутствие разделяю­
щих ядра клеточных мембран исключает возможность межклеточных взаимодей­
ствий с помощью лигандов и мембранных рецепторов, но обеспечивает свободную
диффузию РНК и белков, запасенных в период оогенеза или синтезированных по­
сле оплодотворения, по всему зародышу, если они специально не зафиксированы
в какой-либо области яйцевой клетки. Эти условия распространения сигнальных
молекул у ранних зародышей насекомых резко отличаются от того, что имеется у
животных, дробящиеся зародыши которых имеют клеточную структуру.
После выхода ядер в поверхностный слой цитоплазмы яйца— периплазму (у дро­
зофилы это происходит в конце 9-го цикла дробления), образуется синцитиальная
бластодерма (рис. 9-23, А-Б). В результате формирования мембран, разграничива­
ющих клеточные территории, поверхность зародыша дробится на отдельные клетки
(«поверхностное» дробление) и возникает клеточная бластодерма (рис. 9-23, Д).
Часть энергид дробления остается в желтке, становясь вителлофагами. Вител-
лофаги —это специализированные, часто полиплоидизированные клетки, которые
участвуют в переработке и усвоении желтка. Образуемый вителлофагами желточ­
ный синцитий, возможно, играет и морфогенетическую роль, способствуя направ­
ленному разрастанию зародышевой полоски.
Зародышевая полоска представляет собой сгущение клеток бластодермы, кото­
рое обычно возникает на вентральной стороне яйца. Сгущение клеток происходит
прежде всего благодаря изменению их формы — в области полоски они становятся
столбчатыми. Различают три типа зародышевых полосок: короткие, полудлшшые
(промежуточные) и длинные (рис. 9-24). Короткие полоски имеют вид диска, мате­
риал которого дает начало сегментам головы, тогда как рост зародыша обеспечива­
ется лежащей сзади от диска пролиферативной зоной. Полудлинные зародышевые
полоски широко распространены у Hemimetabola, они образуют два вентролате-
ральных скопления клеток, которые смыкаются на вентральной стороне и дают
начало голове и сегментам груди, тогда как остальные сегменты формируются за
счет клеток зоны рост'а. Длинные полоски характерны для Holometabola. Они содер­
жат материал всех сегментов и не имеют зоны роста, занимая не менее 80% длины
яйца.
Как показывают наблюдения за судьбой клеток зародышевой полоски, ее меди­
альная часть на большем протяжении занята материалом презумптивной мезодер­
мы, тогда как передняя и задняя области полоски — презумптивной энтодермой. По
бокам от медиальных зачатков располагаются симметричные полоски нейроэкто­
дермы.

%
100

80

60

40

20 Рис. 9-24- Типы зародышевых поло­

сок у насекомых (по: Pflugfelder, J952).
0 Объяснения в тексте.

176
 Способы обособления зародышевых листков у насекомых многообразны. Погру­
жение материала будущей мезодермы и энтодермы может происходить одновремен­
но, но иногда эти процессы разобщены во времени. Разнообразны и механизмы пе­
ремещения клеточного материала с поверхности зародыша. У многих насекомых
происходит иммиграция, т. е. выселение отдельных клеток, которые располагаются
между эпибластом и желтком. У некоторых видов погружающиеся вглубь клетки
не теряют эпителиальной структуры. Так, например, у Scolia quadrijmnctata имеет
место своеобразная эпиболия. R ходе этого процесса медиальная часть зародышевой
полоски отделяется продольными бороздами от ее латеральных частей. Последние
своими свободными краями нарастают по поверхности отделившейся медиальной
полоски навстречу друг другу и смыкаются, в конце концов, по средней линии за­
родыша. У многих насекомых, в том числе и у дрозофилы, происходит инвагинация
медиальной части зародышевой полоски, в результате которой формируется про­
дольно расположенная мезодермальная трубка (рис. 9-25). На стадии гаструляции
в той области, где происходит иммиграция, инвагинация или эпиболия, некоторое
время сохраняется продольная бороздка.

Рис. 9-25. Последовательные этапы обособления мезодермы в ходе гаструляции

у дрозофилы (по: Leptin, 1991).
Клетки мезодермальной природы на фотографии имеют темную окраску ядер,
выявляющую локализацию антитела к белку, активирующему гены мезодермализа-
ции.

После отделения или инвагинации презумптивной мезодермы эктодерма ла­

теральных областей зародыша смыкается по вентральной медиальной линии
(рис. 9-26). Этот материал специфицирован как нейроэктодерма, которая служит
источником нейронов и глиальных клеток и дает начало нервной системе насеко­
мого. Нервные элементы иммигрируют с поверхности зародыша и располагаются
под эктодермой. Нейроны каждого сегмента образуют ганглии, которые с помощью
нейральных отростков объединяются в единую систему. Симметричные ганглии, ле-

177
 Рис. 9-26. Схема формирования брюшной нервной цепочки у насекомых
(по: Johansen, Butt, 1941). Поперечные срезы. Вентральная область внизу.
А — стадия обособления мезодермального зачатка и образования первичной бо­
роздки; Б, В — последовательные стадии спецификации нейробластов; Г — образо­
вание брюшной нервной цепочки. 1 — желточное ядро; 2 — мезодерма; 3 — амнио­
тическая складка; 4 — эктодерма; 5 — первичная бороздка; 6 — сероза; 7 — амнион;
8 - нейробласты; 9 — целом; 10 — висцеральный листок мезодермы; 11 — клетки
крови; 12 — жировое тело; 13 — соматический листок мезодермы; 14 — брюшная
нервная цепочка.

178
жащие в пределах одного сегмента, соединяются двумя компссурами. С ипсилате-
ральными ганглиями, т. е. с ганглиями, .лежащими на одной и той же стороне тела
(от лат. ipse — сам), они соединяются с помощью копнектив.
Энтодермальные зачатки средней кишки образуются обычно на переднем и зад­
нем концах зародышевой полоски (рис. 9-27). Впоследствии в област и этих зачатков
происходит инвагинация эктодермы и образуются — на переднем конце стомодеум,
эктодермальный зачаток передней кишки, и на заднем конце проктодеум, экто­
дермальный зачаток задней кишки. На границе между задней и средней кишкой
формируются органы выделительной системы насекомого — мальпигиевы трубоч­
ки, открывающиеся в заднюю кишку.
Одновременно с гаструляцией происходит растяжение зародышевой полоски. У
видов с длинной зародышевой полоской в результате этого процесса она, распро­
страняясь по срединной линии зародыша, огибает заднюю оконечность желточной
массы и движется в переднем направлении по спинной стороне зародыша. При
этом задний конец полоски приближается к ее переднему концу. В период растя­
жения полоска обнаруживает первые признаки метамеризации, поскольку образу­
ются парасегменты и /детерминируются границы будущих сегментов тела (подроб­
нее см. том 2). На следующем этапе развития происходит укорочение зародыше­
вой полоски, и ее задний конец вновь совпадает с задней оконечностью желточной
массы.

Рис. 9-27. Последовательные стадии формирования средней кишки

у насекомых (по: Chapman, 1982).
А — стадия закладки переднего и заднего зачатков энтодермы;
Б — стадия формирования стомо- и проктодеума; В, Г — стадии ф ор­
мирования средней кишки. 1 — передний зачаток энтодермы; 2 — эк­
тодерма; 3 — мезодерма; 4 — задний зачаток энтодермы; 5 — стомо­
деум; 6 — мальпигиевы сосуды; 7 — проктодеум; 8 — средняя кишка.
Передний конец зародыша — справа, вентральная область — внизу.

179
 Рас. 9-28. Схема развития амниотической полости у насекомых
(по: Chapman, 1982).
А — появление латеральных складок, растущих в медиальном направлении (ука­
зано стрелками); Б — смыкание складок; В — слияние складок с образованием двух
оболочек — амниона и серозы. 1 — бластодерма; 2 — желток; 3 — зародышевая
полоска; 4 — амниотическая складка; 5 — сероза; 6 — амнион; 7 — амниотическая
полость.

Однослойная эктодерма, находящаяся за пределами зародышевой полоски, обра­

зует боковые складки, которые растут навстречу друг другу в вентральном направ­
лении, смыкаясь по медиальной линии (рис. 9-28). В результате возникают две заро­
дышевые оболочки. Внешний листок складки становится серозой (от лат. serosus —
водянистый), которая распространяется на дорсальную область зародыша. Внутрен­
ний листок формирует амнион (от греч. cqivtov — чаша, в которую собирали кровь
жертвенного животного), эпителиальный пласт которого составляет единое целое
с эктодермой зародыша. В результате этого процесса образуется замкнутая амнио­
тическая полость, которая заполняется особой амниотической жидкостью, омыва­
ющей зародыш. Возникновение в процессе эволюции серозы и амниона обеспечило
благоприятную среду для развития зародыша и, предотвратив опасность высыхания
зародыша, послужило важным фактором завоевания суши насекомыми.
Предполагается, что формирование зародышевых оболочек первоначально воз­
никло как следствие своеобразного перемещения зародыша в глубь яйца, процесса,
который носит название бластокинеза. Бластокинез характерен для видов с корот­
кой и полудлинной зародышевой полоской и состоит из двух фаз.
В первой фазе, которая обозначается как анатрепсис (от греч. ava— вверх;
трело — поворачивать), происходит погружение зародыша в желток. Погружение на­
чинается на заднем конце зародышевой полоски. Задний конец погружается внутрь
желтка и поворачивается там на 180°. Благодаря движению задней области полос­
ки в направлении переднего конца яйца зародыш приобретает сначала U-образную
форму, а затем вновь принимает линейную форму, но теперь головная область по­
груженного в желток зародыша обращена назад. При этом перемещении связанная
с зародышем внезародышевая эктодерма также увлекается в глубь желтка, в ре­
зультате чего между вентральной стороной зародыша и желтком образуется амнио­
тическая полость, ограниченная со стороны желтка однослойной внезародышевой
оболочкой, амнионом (рис. 9-29). Остающаяся на поверхности яйца внезародышевая
эктодерма представляет собой серозу.
Вторая фаза бластокинеза, или кататрепсис (от греч. ката — сверху вниз,
трёко — поворачивать) характеризуется обратным направлением процесса, в резуль-

180
 6
Рис. 9-29. Бластокинез у стрекозы Calopteryx (по: Johansen, Butt, 1941).
A- В — анатрепсис; Г -Е — кататрепсис. 1 — оболочка яйца (хорион); 2 — сероза;
3 — желток; 4 — задний конец зародыша; 5 — амнион, 6 — передний конец зародыша;
7 — амниотическая полость.

тате которого зародыш, теперь уже сегментированный и имеющий развитые придат­

ки, выходит на поверхност ь. У эволюционно относительно молодых видов с длинной
полоской истинный бластокинез отсутст вует, хотя описанное выше растяжение и со­
кращение зародышевой полоски, в ходе которых также образуются амнион и сероза,
видимо, можно рассматривать как процесс, имеющий общие корни с бластокинезом
(О. М. Иванова-Казас, 1995).
В эмбриональный период происходи'!' и формирование гонад. Если у представите­
лей примитивных отрядов первичные половые клетки обособляются на сравнитель­
но поздних стадиях развития, то у многих Holometabola, например у дрозофилы,
они возникают, как уже говорилось, в период дробления и образования бластодер­
мы (см. гл. 1).
Iкшадающие в заднюю область яйца ядра дробления окружаются полярной
плазмой и обособляются в виде полярных клеток, которые как бы выталкиваются
на поверхность яйца (см. рис. 9-22). В ходе гаструляции первичные половые клет­
ки погружаются внутрь зародыша, локализуясь в заднем зачатке средней кишки.
В период растяжения полоски они перемещаются на дорсальную сторону яйца и
вместе с задней областью средней кишки смещаются вперед (рис. 9-30). Соматиче­
ская часть гоиады формируется за счет латеральной мезодермы. В мезодермальном
зачатке гонады экспрессируется ген columbus. Соответствующий белок служит ат-
трактантом, привлекающим мигрирующие первичные половые клетки. У дрозофи­
лы зачаток гонады закладывается в V брюшном сегменте, при этом в состав гонады
I’.ходит мезодерма V -V III брюшных сегментов. Мезодермальные элементы проника­
ют между гоноцитами и образуют фолликулярный эпителий яйцевых трубочек и
сперматоцист.
Эмбриональный период у насекомых завершается появлением личинки. От
взрослых насекомых вылупившиеся личинки отличаются прежде всего небольшими
размерами и в тысячи раз меньшей массой. У личинок не полностью развита поло-

181
 Рис. 9-30. Перемещение полового зачатка в ходе формирования зародышевых листков
у мухи Dacus (по: Anderson, 1962).
1 — задний зачаток средней кишки; 2 — половой зачаток; 3 — проктодеум; 4 — желточ­
ный синцитий; 5 — бластодерма; 6 — стомодеум; 7 — передний зачаток средней кишки; 8 —
мезодерма; 9 — эктодерма.

вая система, отсутствуют крылья и некоторые другие органы взрослых форм, или
имаго (от лат. imago — изображение, портрет). Вместе с тем личинки имеют свои
специфические органы, позволяющие им продолжать развитие, рост и накопление
энергетических резервов, которые потребуются на стадии имаго для процессов раз­
множения. Адаптивное значение личиночной стадии очевидно. Именно благодаря
личиночной стадии становится реальным создание энергетического запаса, необхо­
димого для достижения дефинитивного состояния и продолжения рода.
Поскольку покровный эпителий насекомых, как и у всех Ecdysozoa, вырабаты­
вает жесткий кутикулярный экзоскелет, рост и развитие личинки возможны только
благодаря периодическим линькам, в ходе которых покровы животного утрачива­
ют связь с кутикулой. После линьки, или эк&изиса (от греч. ех6и<ж — удаление)
открывается возможность роста. У насекомых, как и других членистоногих, име­
ются особые гормоны, контролирующие процессы линьки. Гормоном линьки слу­
жит экдизон, который вырабатывается в особых проторакальных (экдизиальных)
железах личинок. Под влиянием экдизона в гиподерме личинки стимулируется про­
лиферация клеток и инициируется отделение кутикулы. Поддержание способности
к линькам обеспечивается ювенильным гормоном, который продуцируется так на­
зываемыми прилежащими телами (corpora allata). Хирургическое удаление corpora
allata ведет к преждевременному прекращению линек и формированию карликовых
животных. Наоборот, трансплантация прилежащих тел от молодых личинок позд­
ним продлевает период линек и способствует образованию ненормально крупных
насекомых (Pflugfelder, 1958).
Начавшийся после линьки период роста завершается образованием экзоскелета,
после чего рост останавливается. Периодическое сбрасывание кутикулярного покро­
ва завершается по достижении имагинальной стадии. У некоторых насекомых число
линек строго детерминировано и обычно невелико (до шести линек), у других чис­
ло линек зависит от условий существования и достигает 20 (поденки) или даже 40
(платяная моль).

182
 У Hemimetabola вышедшая из яйцевых оболочек молодь имеет значительное
сходство с имаго, хотя и отличается от взрослых форм размерами и отсутствием
крыльев, зачатки которых, впрочем, появляются уже после первой линьки. Юве­
нильные формы (от лат. juvenilis — юный) Hemimetabola называются нимфами (от
греч. vujifpa — девица, невеста) или (у веснянок, поденок, стрекоз) наядами (от греч.
vaiac — нимфа вод). По мере развития нимфы растут и приобретают все характер­
ные для имаго признаки.
У Holometabola личинки резко отличаются от взрослых форм. Как правило, они
имеют червеобразное тело. У некоторых видов личинки лишены ног, у других имеют
только грудные ноги, личинки третьих обладают и грудными и брюшными конеч­
ностями. В отличие от нимф личинки Holometabola в процессе роста и развития
сохраняют свой личиночный облик. Трансформация в этом случае происходит на
стадии куколки, когда возникают специфические признаки взрослого животного с
характерным членением тела, с конечностями и крыльями. Появлению взрослого
животного предшествует последняя линька.
В ходе развития многие ткани личинки полиплоидизируются и при превращении
личинки во взрослую особь замещаются диплоидными. Глубина метаморфоза личи­
нок варьирует. Например, у многих мух и перепончатокрылых в ходе метаморфоза
практически вся личиночная гиподерма разрушается и замещается имагинальной.
Разрушаются личиночные лабиальные железы. Радикальной перестройке подверга­
ется мускулатура. Новый облик приобретает трахейная дыхательная система. Раз­
рушение личиночных тканей происходит путем гистолиза и фагоцитоза. Активную
роль в процессах метаморфоза играет апоптоз.
Построение новых органов взрослой особи происходит при участии специальных
зачатков — так называемых имагинальпых дисков, или особых резервных скоплений
диплоидных имагинальных клеток — гистобластов, входящих в состав функциони­
рующих полиплоидных тканей личинки. Дифференциация имагинальных дисков и
гистобластов начинается при получении соответствующего гормонального сигнала
на стадии куколки, тогда как спецификация клеток происходит на стадии бласто­
дермы. Характер спецификации клеток, образующих впоследствии имагинальные
диски, зависит от положения этих клеток вдоль передне-задней и дорсо-вентральной
осей. Эти детерминированные на образование дисков клетки практически не про­
лиферируют, однако на личиночной стадии клеточные деления возобновляются, и
соответственно происходит рост дисков. У дрозофилы имеется десять основных пар

Рис. 9-31. Типы имагинальных

дисков насекомых (по: Иванова-К а-
зас, 1981).
А — наружный; Б — свободный;
В—Д — погруженные диски, в том
числе: Г — погруженный обращен­
ный, Д — погруженный стебельча­
тый.

183
имагинальных дисков и один непарный диск в задней области тела, идущий на
построение репродуктивных органов животного. Наиболее крупный диск дрозофи­
лы — имагинальный диск крыла содержит около 60 тыс. клеток, имагинальные дис­
ки ног или жужжалец — примерно по 10 тыс. клеток.

Рис. 9-32. Схема развития имагинального диска ноги дрозофилы

(по: Fristrom, Fristrom, 1975).
А — имагинальный диск на ранних стадиях развития, вид с поверхности;
Б - то же на продольном разрезе; В - - выворачивание зачатка ноги. ± — то­
ракальная гиподерма; 2 — презумптивное бедро; 3 — презумптивная голень.
л1—л5 — членики лапки.

Имагинальные диски закладываются у вылупившихся личинок в виде эпители­

альных утолщений. Различают несколько типов дисков (рис. 9-31). Наиболее про­
сто устроены наружный и свободный диски, располагающиеся непосредственно под
кутикулой. Более сложно устроены погруженные диски. В этом случае гиподер­
ма образует впячивание, погруженная часть которого образует собственно диск,
соединенный с гиподермой периподиальным стебельком. На стадии куколки при
действии гормона экдистерона происходит выворачивание имагинальных дисков
наружу. При этом центральная часть диска телескопически выдвигается и образу­
ет дистальную область органа. Периферическая часть диска дает проксимальную
область конечности (рис. 9-32).

Литература
И ванова-Казас О. М. Класс Nematodes — круглые черви / / Сравнительная эмбриология
беспозвоночных животных. Новосибирск, 1975. С. 102-136.
И ванова-Казас О. М. Класс Arachnoidea— паукообразные / / Сравнительная эмбриоло­
гия беспозвоночных животных. Членистоногие. М., 1979. С. 54—76.
И ванова-Казас О. М. Класс Crustacea —ракообразные / / Там же. С. 112-174.
И ванова-Казас О. М. Крылатые насекомые / / Сравнительная эмбриология беспозво­
ночных животных. Неполноусые. М., 1981. С. 47-83.
Иванова-Казас О. М. Многоножки / / Там же. С. 5-20.
Иванова-Казас О. М. Вторичные личинки / / Эволюционная эмбриология животных.
СПб., 1995. С. 406-421.
 Глава 10. DEUTEROSTOM IA.
ИГЛОКОЖ ИЕ (ECHINODERM АТА)

Третья ветвь билатеральных животных — Вторичноротые, или Deuterostomia

была выделена как особая группа еще в начале X X века на основании морфологиче­
ских особенностей индивидуального развития. По современным представлениям, ко
Вторичноротым относятся Иглокожие (Echinodermata), Полухордовые (Hemichorda-
t,a) и Хордовые (Chordata).
Основными отличительными признаками вторичноротых ранее считались спо­
соб закладки ротового отверстия и ануса, а также особенности образования мезо­
дермы. В отличие от первичноротых (современные Lophotrochozoa и Ecdysozoa), у
которых ротовым отверстием становится бластопор, у вторичноротых рот закла­
дывается независимо от бластопора. Бластопор у вторичноротых превращается в
анальное отверстие или в нервно-кишечный канал в задней области зародыша. Хо­
тя имеется целый ряд отклонений от этого правила и судьба бластопора не может
служить универсальной характеристикой первично- и вторичноротых, тем не менее
возникновение Deuterostomia связывают с такой перестройкой онтогенеза, при ко­
торой закладка рта развивающегося животного сдвигается вперед от бластопора по
брюшной стороне (В. Н. Беклемишев, 1964). Поскольку поверхность зародыша за­
мкнута, эта тенденция смещения закладки рта вперед могла привести к изменению
положения рта, который с нейрогенной стороны должен был переместиться на про­
тивоположную, контрнейрогенную сторону. Расположение рта на контрнейрогенной
стороне тела, и те преимущества, которые получало животное при обращении ро­
тового отверстия к донной поверхности, могли способствовать превращению контр­
нейрогенной стороны тела в вентральную область животного, обращенную к центру
силы тяжести. Этот процесс некоторые исследователи рассматривают как своеоб­
разную инверсию дорсо-вентральной оси взрослого животного, которая происходит
в ходе эволюции хордовых животных (В. В. Малахов, 1982). Так или иначе, эволю­
ция вторичноротых связана с существенными изменениями дефинитивной полярно­
сти тела. Закладка ротового отверстия у вторичноротых смещается в анимальную
область, а нейрогенная область зародыша становится у взрослых животных дор­
сальной.
Типичным для низших вторичноротых признается энтероцелъный способ обра­
зования мезодермы. В этом случае мезодерма закладывается в виде эпителиальных
мешочков, которые обособляются от стенки архентерона. Типичным для первич­
норотых считается телобластический принцип образования мезодермы. При этом

185
мезодермальный зачаток образуется благодаря пролиферации особых стволовых
клеток — мезотелобластов, коммитирование которых происходит на стадии дроб­
ления.
В действительности у билатеральных животных имеются разнообразные спосо­
бы формирования мезодермы. Мы видели, например, что у многих членистоногих,
мезодерма специфицируется в виде двух симметричных вентролатеральных поло­
сок, расположенных вдоль длинной оси зародыша, которые погружаются в глубь
зародыша, сохраняя эпителиальную структуру Наоборот, у позвоночных мезодер­
ма образуется главным образом в результате иммиграции клеток зародышевой по­
лоски. В наиболее отчетливом виде телобластический и энтероцельный способы об­
разования мезодермы сохранились лишь у наиболее примитивных представителей,
соответственно первично- и вторичноротых.

Иглокожие представлены рядом ископаемых и современных классов. Среди по­

следних — морские лилии, морские звезды, морские ежи, офиуры и голотурии. Это
донные обитатели морей — сидячие или ведущие свободный образ жизни. Взрослые
животные радиально-симметричные, обычно 5-лучевые. Радиальную симметрию иг­
локожие приобрели вторично, что находит свое отражение в процессе онтогенеза.
На личиночных стадиях это типично билатерально-симметричные животные. До­
стижение дефинитивной стадии развития, однако, сопряжено у них с радикальным
изменением типа симметрии. В ходе метаморфоза иглокожих происходит корен­
ная перестройка плана строения тела, в результате которой они превращаются в
радиально-симметричных животных.

Рис. 10-1. Дробление у иглокожих (по: Wray, 1997).

А — равномерное дробление у морских звезд и голотурий; Б — неравномерное дробление
у морских ежей; В — зародыш морского ежа на стадии 16 бластомеров; Г — то же на стадии
56 клеток. 1 — мезомеры; 2 — макромеры; 3 — микромеры; 4 — большие микромеры; 5 —
малые микромеры, anl, ап2 — анимальные венцы клеток (производные мезомеров); vegl,
veg2 — вегетативные венцы (производные макромеров). В скобках — число бластомеров.

186
 Характерной особенностью иглокожих является наличие биоминерального эн­
доскелета, представленного различного рода пластинками и иглами, лежащими
в соединительной ткани. Другой особенностью иглокожих служит наличие амбу­
лакральной, или водно-сосудистой системы, которая обеспечивает локомоторную
функцию органов движения.
Дня иглокожих характерно наружное оплодотворение. Дробление обычно
полное, радиальное, завершающееся формированием подвижной целобластулы
(рис. 10-1). Два первых деления меридиональные, их плоскости проходят перпенди­
кулярно друг другу. Третья борозда — экваториальная. У многих иглокожих (мор­
ские звезды, голотурии) дробление равномерное. У морских ежей, начиная с четвер­
того цикла, дробление приобретает неравномерный характер, так как бластомеры
анимального полушария делятся меридионально, тогда как вегетативная четверка
делится широтной бороздой на мелкие вегетативные клетки и крупные, лежащие
в экваториальной области Таким образом, на стадии 16-бластомеров образуются 8
анимальных мезомеров, за которыми следуют 4 макромера и, наконец, на вегета­
тивном полюсе располагаются 4 микромера (рис. 10-1, В). При следующем делении
микромеры дают большие, прилегающие к макромерам, и малые микромеры, кото­
рые занимают вегетативную оконечность зародыша. Как обнаруживается в опытах
с прижизненной маркировкой бластомеров, а также в опытах по изоляции бласто­
меров, мезомеры анимального полушария представляют собой зачаток эктодерм!,i
зародыша и по завершении дробления образуют жгутики.
Известный шведский исследователь Свен Херстадиус (Horstadius, 1939) изолиро­
вал разные области зародыша морского ежа на стадии 64 клеток. Из изолированных
анимальных венцов бластомеров (рис. 10- 2 ) возникали миниатюрные бластулопо-

Д CD

Рис. 10-2. Потенции клеток зародыша морского ежа на стадии 16 бластомеров

(по: Wray, 1997),
А нормальное развитие; Б — при удалении микромеров скелетные иглы личинки продуци­
руются некоторыми потомками макромеров; В — изолированный венец мезомеров дает лишь эк­
тодермальную «вечную» бластулу, не способную к дифференциации; Г — мезомеры в сочетании с
микромерами способны к образованию кишечника и пигментных клеток, которые при нормальном
развитии возникают только из макромеров; Д — изолированные мезомеры способны дать начало
зачатку кишки, первичным и вторичным мезенхимным клеткам.

187
добньге зародыши, в составе которых были только эктодермальные клетки. Такие
зародыши получили наименование «вечной бластулы», так как они активно пла­
вали, но их развитие дальше не шло, гаструляция не происходила, и никаких иных
дифференцированных элементов кроме эктодермальных жгутиковых клеток не воз­
никало. Клетки вегетативного полушария имеют более широкий круг производных,
включая эктодерму, энтодерму и мезодерму. При изоляции анимачьных венцов вме­
сте с вегетативными клетками развивались аномальные зародыши, но тем не менее
с кишечником и элементами скелета.
Ведущая роль в спецификации клеток развивающегося зародыша морского ежа
принадлежит микромерам. В частности, микромеры способны индуцировать обра­
зование энтодермы. Как было показано в экспериментах Герстадиуса, при объедине­
нии мезомеров анимальной половины с микромерами часть клеток презумптивной
эктодермы превращалась в энтодермальный зачаток, и формировался плутеус. Роль
микромеров в индукции энтодермы была продемонстрирована в опытах по пересадке
микромеров на анимальное полушарие зародыша морского ежа на стадии 16 клеток.
Посте такой трансплантации у зародыша энтодерма возникала и на вегетативном и
на анимальном полюсе. Соответственно возникали две области инвагинации и фор­
мировались два архентерона (рис. 10-3).

Рис. 10-3. Трансплантация микромеров на анимальный полюс 16-клеточного зародыша

морского ежа (по: Ransick, Davidson, 1993).
А — местоположение трансплантированных микромеров; Б — симметричная инвагинация энто-
дермального зачатка: нормальная на вегетативном и индуцированная на анимальном полюсе; В —
элонгация анимального и вегетативного архентеронов. 1 — трансплантированные микромеры; 2 —
мезомеры; 3 — макромеры; 4 — микромеры; 5 — выселение мезенхимы в анимальном полушарии;
6 - инвагинация энтодермы на анимальном полюсе; 7 — скелетные элементы, образующиеся из
трансплантированных микромеров; 8 — то же из вегетативных микромеров.

Ранняя спецификация клеток в разных областях бластулы коррелирует с экс­

прессией разных генов, что позволило Эрику Дэвидсону выделить у зародышей
морского ежа в конце дробления пять зон, каждая из которых экспрессирует свой
уникальный набор генов (рис. 10-4) (Davidson, 1989, 1991). В числе этих зон: ораль­
ная эктодерма, аборальная эктодерма, крупные микромеры, дающие скелетогенные
клетки; малые микромеры, производные которых образуют целомическую мезодер­
му; наконец, вегетативная пластинка, материал которой используется на построение
кишечника и отчасти дает вторичную мезенхиму.
Формирование бластулы сопряжено с эпителизацией зародыша, в ходе которой
возникают специализированные клеточные контакты и начинается выработка на­
ружного и внутреннего внеклеточного матрикса. В клетках бластулы образуется
также особый фермент вылупления, благодаря которому облегчается разрыв жел-

188
 Б
Оральная Аборальная Оральная Аборальная
эктодерма эктодерма эктодерма эктодерма
(18) (22)

Вегетативная
пластинка
(8 )
Скелетогенные Скелетогенные
микромеры микромерь: Малые
( 8) Малые микромеры
микромеры
(4)
Рис. 10-4 Регионализация бластулы морского ежа (по: Davidson, 1989).
А — объемная модель: Б — схема расположения зачатков, экспрессирующих разные регуля­
торные гены и имеющих, соответственно, различные проспективные значения, перед началом га­
струляции. В скобках — число клеток, составляющих данную зону.

точной оболочки (оболочки оплодотворения) и выход активно плавающей бластулы

в окружающую среду.
Дня иглокожих типична гаструляция путем инвагинации эпителия вегетативной
области бластулы. Вегетативная пластинка изгибается, образуя впячивание. Одно­
временно с изгибанием происходит инволюция, или перемещение клеток, располо­
женных по периметру возникшего широкого бластопора, внутрь зародыша. Благо­
даря этим двум процессам образуется относительно короткая и широкая первичная
кишка— архентерон (рис. 10-5). У морского ежа процесс инвагинации предваряет­
ся ингрессией (вселением) в полость бластулы первичной мезенхимы, клетки кото­
рой образуются из крупных микромеров. Первичная мезенхима представляет собой
популяцию скелетогенных клеток, которые образуют кольцо и два симметричных
скопления в вегетативной области, где и начинается формирование скелетных игл
личинки.

Рис. 10-5. Формирование архентерона в ходе гаструляции

у морского ежа (по: Wray, 1997).
А — закладка архентерона путем впячивания стенки бластулы; Б — труб­
кообразный узкий архентерон после завершения роста. 1 — архентерон; 2 —
вторичная мезенхима.

189
 Рис. 10-6. Рост архентерона мор­
ского ежа за счет ре аранжировки его
клеток (по: Wray, 1997).
Прослеживается изменение по­
ложения клеток (1-7), ведущее к
растягиванию архентерона.

Следующий этап гаструляции обусловлен реаранжировкой клеток архентерона, в

результате которой первичная кишка становится длинной и узкой (рис. 10-6). Из вер­
шины архентерона у морского ежа выселяется вторичная мезенхима, клетки которой
образуют длинные нитчатые отростки — филоподии (от лат. filum — нить; греч. nouz,
/:060 с — нога). Полагают, что эти клетки соединяются при помощи своих отростков с
архентероном и стенкой бластулы и благодаря сокращению филоподий могут участ­
вовать в растяжении архентерона. По-видимому, вторичная мезенхима участвует и
в морфогенетических процессах, связанных с изгибанием первичной кишки в сто­
рону будущей оральной области. При этом изгибании архентерона происходит его
сближение с эктодермой личинки, которая инвагинирует и образует стомодеум. В
области контакта образуется ротовое отверстие, тогда как первичный рот — бласто-
пор становится анусом личинки.
Одновременно с этим у морских ежей происходит сужение анимальной обла­
сти гаструлы и расширение вегетативной так, что личинка приобретает коническую
форму — стадия призмы. На этой стадии становится отчетливой орально-абораль-
ная ось (рис. 10-7). Бывшая вегетативная область с бластопором становится брюш­
ной стороной личинки.
Если спецификация анимально-вегетативной оси зародыша, которая проявляется
в образовании венцов эктодермы, энтомезодермы и скелетогенной мезенхимы, обу­
словлена процессами, происходящими в период гаметогенеза, то положение оралыю-
аборальной оси у морских ежей фиксируется уже после оплодотворения, на стадии
дробления. Заметную роль в предопределении местоположения орально-аборальной
оси играет, как оказалось, интенсивность окислительно-восстановительных процес­
сов. Усиление окислительных процессов способствует формированию оральной об­
ласти, их подавление, наоборот, дает преимущество развитию аборальных струк­
тур. Асимметрия дыхательных процессов коррелирует' с дифференциальной актив­
ностью гена РЗА2, который служит негативным регулятором, репрессирующим ген
СуШа в проспективной оральной эктодерме (Coffman, Davidson, 2001).

190
 Рис. 10-7. Начальные стадии формирования личинки морского ежа
(по: Onoda, 1931).
А — переход от стадии гаструлы к стадии призмы: A-V — анимально-ве-
гетативная ось; or-abor — орально-аборальная ось. Б — стадия призмы: 1 —
пищевод; 2 — желудок; 3 — скелетная игла; 4 — бластопор.

Непосредственно перед образованием ротового отверстия из состава первичной

кишки выделяется целомическая мезодерма. Этот процесс у разных видов иглоко­
жих протекает различно. Чаще всего целомический мешок возникает на вершине

Рис. 10-8. Дифференциация целомической мезодермы у личинки морского ежа

Paracentrotus lividus (по: Ubisch, 1913).
А — стадия обособления непарного целома; Б — стадия образования двух цело­
мических мешков; В — стадия разделения целомических мешков на аксогидроцели
и соматоцели; Г — стадия формирования каменистого канала и ампулы. Римскими
цифрами обозначены руки личинки в порядке их формирования. 1 — рот; 2 — анус;
3 — целомический мешок; 4 — левый аксогидроцель; 5 — правый аксогидроцель;
6 — левый соматоцель; 7 — правый соматоцель; 8 — желудок; 9 — ампула; 10 —
амниотическое впячивание; 11 — мадрепоровый пузырек.

191
архентеропа (непарный энтероцель), хотя иногда целомические мешки возникают
как парное образование на боковых стенках первичной кишки. Непарный мешок
личинки морского ежа (рис. 10-8) подразделяется на правый и левый целомы. Они,
в свою очередь, делятся перешнуровками на передний, средний и задний отделы —
аксоцелъ, гидроцелъ и соматоцелъ соответственно. На основе левых аксо- и гид-
роцеля происходит развитие амбулакральной системы животного Левый аксоцель
дает начало поровому каналу, а левый гидроцель в ходе развития принимает фор­
му 5-лопастного диска и впоследствии формирует амбулакральное кольцо, основу
водно-сосудистой системы взрослого животного. Правые аксо- и гидроцели часто де­
генерируют, а соматоцели обычно образуют мезентерий и целомическую выстилку
полости тела.
Развитие иглокожих обычно непрямое, хотя у многих видов развитие с личин­
кой может утрачиваться. При непрямом развитии после гаструляции формируется
личинка, которая затем претерпевает метаморфоз и превращается во взрослое жи­
вотное.
Имеется два основных типа развития с личинкой: развитие с планктотроф-
ной личинкой типа диплеврулы, которая питается микроскопическими организмами
планктона, и развитие с лецитотрофной личинкой, т. е. личинкой, имеющей боль­
шие запасы питательных веществ в виде желтка, синтезированного еще в период
оогенеза в материнском организме. В первом случае личинки имеют разнообраз­
ные приспособления к пелагическому образу жизни. У морских звезд пелагическая

Рис. 10-9. Личинка бипиннария морской звезды Aslerias rubens

(по: Стрелков, 1985).
А — вид с брюшной стороны; Б — вид сбоку. 1 — фронтальное поле;
2 — преоральный шнур; 3 — посторальный шнур; 4 — ротовое отверстие; 5 —
передняя кишка; 6 — правый целом; 7 — средняя кишка; 8 — анальное поле;
9 — задняя кишка; 10 — анальное отверстие.

192
 Рис. 10-10. Аурику лярия голотурии
Synapta villata (по: Mortensen, 1937).
А — вид с брюшной стороны; Б — вид
сбоку. 1 — известковое тельце; 2 — реснич­
ный шнур; 3 — рот; 4 — личиночная нервная
система; 5 желудок; 6 — анус. д

личинка носит название бипиннарии (рис. 10-9), голотуриям свойственны личинки

аурикулярии (от лат. auricula — мочка уха) (рис. 10-10). Для этих личинок характер­
ны разнообразные лопасти тела, по которым про­
ходит ресничный шнур, основной локомоторный
орган личинки. На более поздних стадиях, перед
метаморфозом, у голотурий образуются долиоля-
рии (от лат. doliolum — бочонок) (рис. 10-11). У
долиолярии нет изви чистого ресничного шнура.
Ее тело окаймлено четырьмя—пятью ресничными
кольцами. Долиолярии не питаются и претерпева­
ют быстрый метаморфоз.
У морских ежей и офиур формируются так
называемые плутеусы (от лат pluteus — стена из
ивовых прутьев), соответственно эхиноплутеусы
(рис. 10-12) и офиоплутеусы (рис. 10-13). Плуте­
усы обладают длинными, поддерживаемыми внут­
ренним скелетом выростами — руками («ивовые
прутья»), по периметру которых, окаймляя ораль­
ную поверхность личинки, проходит ресничный
шнур.
При развитии с лецитотрофной личинкой неза­
Рис. 10-11. Долиолярия голотурии
висимо от таксономической принадлежности у иг­ Cucwmaria planci (по: Selenka, 1876).
локожих обычно образуются личинки типа долио­ 1 — преоральная лопасть; 2 — рот;
лярии. 3 — анус. Х орош о видны ресничные
кольца, опоясывающие тело личин­
Метаморфоз у иглокожих животных сложный ки.
и, пожалуй, не имеющий аналогий морфогенети­
ческий процесс, в ходе которого происходит преобразование билатерального типа
организации тела в радиальный. В настоящее время о механизмах этого процесса,
в том числе и о его молекулярно-биологических основах, практически ничего не
известно. Увлекательная расшифровка этого своеобразного явления еще впереди.
При метаморфозе у иглокожих в теле билатеральной личинки образуется
радиально-симметричный зачаток будущей дефинитивной формы, который назы-

193
 10
Рис. 10-12. Эхиноплутеус морского ежа Strongylocentrotus droebachiensis.
Вид со спинной стороны (по: Стрелков, 1985).
1 — ротовое отверстие; 2 — преоральная лопасть; 3 — передние
дорсальные руки; 4 — посторальные руки; 5 — задние дорсальные
руки; 6 — гидропор; 7 — передний левый целом; 8 — средний левый
целом; 9 — задний левый целом; 10 — задняя кишка; 11 — средняя
кишка; 12 — эполеты; 13 — скелет рук; 14 — передняя кишка; 15 —
известковая дужка; 16 — мезенхима; 17 — ресничный шнур.

Рис. 10-13. Офиоплутеус офиуры (по: Стрелков, 1985).

1 — ротовое отверстие; 2 —ресничный шнур; 3 — передняя кишка; 4 —
целомы; 5 — задняя кишка; 6 — средняя кишка; 7 — скелет; 8 — задняя боко­
вая рука; 9 — задняя спинная рука; 10 —посторальная рука; 11 — передняя
латеральная рука.

вают имагинальным диском, или имагинальным зачатком (рис. 10-14). У морского

ежа образование этого зачатка связано с перестройкой левого гидроцеля, который
принимает форму 5-лопастного диска. Другой составляющей имагинального зачат-

194
ка служит впячивание эктодермы на левой
же стороне тела личинки. Это впячива­
ние называют амниотическим. Амниотиче­
ское впячивание иногда полностью отшну-
ровывается от поверхности тела в виде за­
мкнутого мешочка, хотя у некоторых ви­
дов оно может сохранять связь с внеш­
ней средой. Утолщенная эктодерма, кото­
рая образует дно амниотической полости,
в области 5-лучевого гидроцеля также ста­
новится 5-угольной и представляет собой
зачаток органов оральной области будуще­
го животного. Во время метаморфоза на
правой стороне личинки начинают форми­
роваться органы аборальной области мор­
ского ежа. Одновременно происходит ре­ Рис. 10-14•Метаморфоз у морских ежей
(по: Mac Bride, 1905).
дукция личиночных органов, перестройка 1 — правый передний целом; 2 — мадрепоро-
кишечника и развитие дефинитивного ске­ вый пузырек; 3 — левый передний целом; 4 —
лета. правый задний целом; 5 — амниотическая по­
лость; 6 — гидроцель; 7 — левый задний целом;
8 — педицеллярий.

Л итература

Иванова-Казас О. М. Класс Echinoidea —морские ежи / / Сравнительная эмбриология

беспозвоночных животных. Иглокожие и полухордовые. М., 1978. С. 43-59.
Малахов В. В. Новый взгляд на происхождение хордовых / / Природа. 1982. Т. 5. С. 12-
19.
 Глава 11. DEUTEROSTOM IA. НИЗШ ИЕ ХОРДОВЫЕ

Хордовые — билатерально-симметричные животные, имеющие в эмбриональном,

личиночном, а иногда и во взрослом состоянии осевой скелет — хорду. Хорда, или
спинная струна (chorda dorsalis) представляет собой тяж плотной ткани, проходящий
вдоль тела. Он располагается между кишечной и нервной трубками. По бокам от
хорды находится мускулатура. В переднем отделе кишечника имеются жаберные
щели.
В типе Хордовых различают три подтипа: Оболочники (Tunicata), Бесчерепные
(Acrania) и Позвоночные (Vertebrata). Первые два подтипа объединяются понятием
Низшие хордовые. У низших хордовых осевой скелет представлен только хордой.
У позвоночных вокруг хорды всегда развивается хрящевой или костный скелет. У
бесчерепных и некоторых оболочников (аппендикулярии) хорда имеется не только
у зародышей, но и у взрослых животных. У асцидий хорда существует только на
эмбриональной и личиночной стадиях.

11.1. Оболочники (Tunicata)

Оболочники представлены несколькими классами морских животных, среди ко­

торых имеются как сидячие формы (асцидии), так и пелагические (аппендикулярии,
сальпы, долиолиды и пиросомы). Для оболочников характерно образование туни­
ки — особого покрова, или оболочки тела, главным компонентом которой является
туницин — целлюлозоподобное вещество, секретируемое эпидермисом. Хорда в тече­
ние всей жизни сохраняется лишь у аппендикулярий. У асцидий хорда обнаружи­
вается, как это впервые установил А. О. Ковалевский (1866, 1871), только на ранних
этапах онтогенеза, а в ходе метаморфоза, когда личинка превращается во взрослое
животное, хорда резорбируется. Обычно оболочники характеризуются непрямым
развитием, однако у некоторых асцидий, а также у некоторых других оболочников
личиночная стадия выпадает, и возникает прямое развитие.
Проблема филогении оболочников является предметом оживленной дискуссии. С
учетом данных молекулярной биологии, основанных на изучении нуклеотидных по­
следовательностей некоторых гомологичных участков ДНК, оболочники предстают
как монофилетическая группа, которая обособилась позднее иглокожих, но раньше,
чем возникли головохордовые и позвоночные (рис 11-1). Среди Tunicata первыми,
согласно этим взглядам, обособились аппендикулярии. Линии, ведущие к Ascidiacea
и Thaliacea (группа, которая представлена сальпами, бочоночниками и огнетелка-

196
 Chordata
I----------------------------------------------------------------------------------------- 1
Tunicata Cephalochordata Vertebrata

Puc. 11-1. Схема филогенетических отношений между вторичноротыми

по данным о сходстве последовательностей 18S рДНК
(по: Wada, Satoh, 1994).

ми), разошлись позднее. Согласно этим взглядам, анцестральные Оболочники, по-

видимому, имели организацию, напоминающую организацию аппендикулярий или
личинок асцидий. Иной точки зрения при­
держивается О. М. Иванова-Казас (1995),
согласно которой бесчерепные обособи­
лись от эволюционного ствола, ведущего
к позвоночным, раньше, чем оболочники
(рис. 11-2).
С конца XIX столетия, когда экспери­
ментально был показан детерминативный
характер раннего развития асцидий, они
становятся излюбленным объектом эм­
бриологических исследований. Этому спо­
собствовал ряд обстоятельств, в том чис­
ле легкость получения эмбрионального ма­
териала. Асцидии удобны для морфологи­
ческой и экспериментальной работы, по­
скольку их зародыши и личинки отли­
чаются сравнительно небольшим числом
Рис. 11-2. Схема филогенетических отноше­
клеток, что позволяет прослеживать судь­
ний в типе Хордовых по данным морфологии
бу практически любого бластомера. Га­ (по: О. М. Иванова-Казас, 1995).
струляция у асцидий начинается по дости­
жении примерно ста клеток. Личинка асцидии насчитывает всего около 2,5 тыс. кле­

197
ток, представленных шестью типами тканей. Асцидии привлекают внимание еще и
потому, что у многих видов разные области яйца по-разному окрашены, и при дроб­
лении естественным образом маркированная цитоплазма попадает в разные бласто­
меры. Это обстоятельство в сочетании с малым числом клеток и быстрым темпом
развития (менее суток от оплодотворения до плавающей личинки) облегчает деталь­
ное исследование родословных разных клеточных линий. В наши дни обнаружилось
еще одно привлекательное свойство асцидий как модельного объекта. Оказалось, что
у асцидий сравнительно небольшой геном, а это существенно облегчает процедуру
выделения и клонирования генов, контролирующих процессы развития.
Дробление у асцидий билатеральное. Уже первая борозда, которая проходит по
меридиану через середину желтого серпа (рис. 11-3, Б, В), делит яйцо на симмет­
ричные половины, так что миоплазма равномерно распределяется между левым,
и правым бластомерами. Вторая борозда также меридиональная, но проходит под
прямым углом к первой и делит зародыш на переднюю и заднюю половины. Мио­
плазма при этом остается в задних бластомерах (рис. 11-3). Третья борозда — эква­
ториальная. Она делит зародыш на анимальную и вегетативную половины, каждая
из которых на этой стадии насчитывает по 4 клетки.

Рис. 11-3. Дробление яйца асцидии Styela (по: Conklin, 1905).

А, Б образование желтого серпа после оплодотворения; В — стадия 2 бластомеров:
борозда проходит через середину желтого серпа, обозначая медиальную плоскость ж ивот­
ного; Г — стадия 4 бластомеров, вид с вегетативного полюса: материал желтого серпа со­
средоточен в задних бластомерах В. Д, Е — стадия 8 бластомеров: Д — вид сбоку, Е — с
анимального полюса.

Для удобства описания клеточных родословных Е Конклином была введена си­

стема индексов, состоящая из двух литер, цифр и подчеркивания (Conklin,1905). Ли­
теры А предназначены для обозначения передних бластомеров, В — задних. Клетки
анимального полушария обозначаются строчными литерами (а, Ь), а вегетативного
полушария — прописными (А, В). Индексы клеток правой половины зародыша под­

198
черкиваются снизу. Индексы левой половины остаются без подчеркивания. Цифра,
следующая за литерой, указывает номер генерационного цикла: яйцо — первая ге­
нерация, 2 бластомера — вторая, 4 бластомера — третья и т.д. Вторая цифра, отде­
ленная от первой точкой, обозначает номер клетки в данном квадранте зародыша:
номера идут в определенной последовательности, а именно, от передних вегетатив­
ных к задним вегетативным и далее от передних анимальных к задним анимальпым.
Эти номера являются «сквозными» для данного квадранта. Например, на стадии 16
клеток в каждом квадранте имеется по 4 клетки, и вторая цифра индекса принимает
значения 1, 2, 3, 4; на стадии 32 клеток — от 1 до 8.
Первые два бластомера обозначаются как АВ2 и АВ2 На стадии 4 клеток име­
ются две передние клетки АЗ, АЗ и две задние ВЗ и ВЗ. На стадии 8 бластомеров в
вегетативном полушарии спереди расположены клетки А4.1 и А4.1. а сзади В4.1 и
В4.1, тогда как в анимальном полушарии спереди расположены а4.2 и а4.2, а сзади
Ь4.2 и Ь4.2. Итак, если клетка имеет, например, индекс В6.8, то это означает, что
это клетка 32-клеточного зародыша (индекс 6; 2^6-1^ — 32), что она расположена
в вегетативном полушарии слева (прописная литера без подчеркивания), причем
занимает крайнее заднее положение (8 — последний номер, так как на стадии 32
клеток в каждом квадранте 32 :4 = 8 клеток).
Изучение клеточных родословных позволя­
ет построить карту презумптивных зачатков на
разных стадиях развития. Так, эта карта, спро­
ецированная на яйцо, показывает, какие обла­
сти яйца дают в ходе дробления те или иные
зачатки (рис. 11-4). Видно, что материал ани-
малъной области яйца в процессе дробления по­
падает в бластомеры, дающие начало эктодер­
ме личинки, тогда как цитоплазма вегетативной
области — в клетки будущей энтодермы. Судьба
Рис. 11-4- Карта презумптивных за­
цитоплазмы экваториальной области различна.
чатков асцидии на стадии двух бласто­
В будущей задней области расположен матери­ меров (по: Brien, 1958).
ал желтого серпа, или миоплазма, связанная с 1 — редукционные тельца на анималь­
дифференциацией мезенхимы и мускулатуры, а ном полюсе; 2 — эктодерма; 3 — нейраль­
ный зачаток; 4 — материал хорды; 5 —
в будущей передней области лежит цитоплазма,
энтодерма; 6 — мезодерма; 7 — каудаль­
которая войдет в состав бластомеров, дающих ная мезодерма.
начало хорде и зачатку нервной системы.
Органообразующие области хорошо просматриваются и на стадиях дробления.
Так, на стадии 32 бластомеров из 16 клеток анимального полушария 14 дают впо­
следствии эктодерму. В вегетативном полушарии в центре расположены 6 богатых
желтком бластомеров, потомки которых образуют энтодерму, имеется 6 бластоме-
ров, содержащих миоплазму и соответственно дающих начало клеткам мезодермы,
и, наконец, 4 клетки у переднего края —зачаток хорды и нервной системы.
В результате дробления, которое завершается на седьмом цикле, возникает
несколько уплощенная в анимально-вегетативном направлении бластула, не име­
ющая выраженной полости.
Следующий этап развития — гаструляция — у асцидий обеспечивается тремя ско­
ординированными процессами перемещения клеток — инвагинацией, инволюцией и
эпиболией (рис. 11-5).

199
 Рис. 11-5. Гаструляция у асцидий (по: Conklin, 1905).
А -В — последовательные стадии процесса: 1 — редукционные тельца;
2 — эктодерма; 3 — энтодерма; 4 — нейральный зачаток; 5 — хорда; 6 —
каудальная мезодерма; 7 — мезенхима. Стрелкой обозначена передне-задняя
ось тела.

Инвагинация, или впячивание затрагивает центральные клетки вегетативного

полушария (зачаток энтодермы). Процесс инволюции, т.е. движение эпителиально­
го пласта в глубь зародыша по поверхности других клеток, характерен для хордо-
мезодермы, клетки которой лежат по периферии энтодермального зачатка. Инво­
люция начинается на переднем конце зародыша, где клетки зачатка хорды через
переднюю губу бластопора перемещаются по остающейся на поверхности зародыша
эктодерме. Распространяясь назад, инволюция захватывает расположенный лате-
рально материал мезенхимы и, наконец, дойдя до заднего конца, вовлекает и мезо-
дермальные клетки. Эти клетки, перемещаясь внутрь зародыша, формируют на его
заднем конце зачаток мускулатуры хвоста личинки.
Эпиболия характерна для клеток эктодермы. Эктодермальные клетки уплоща­
ются и обрастают клетки вегетативного полушария, формируя покров личинки. Од­
новременно происходит вытягивание зародыша вдоль передне-задней оси. При этом
клетки нейрального зачатка принимают вид нервной пластинки, которая вытягива­
ется вдоль медиальной оси зародыша, располагаясь над клетками зачатка хорды.
Следует обратить внимание на то, что у асцидий презумптивная нейрогенная зо­
на па стадии гаструлы располагается в вегетативной области зародыша (рис. 11-6).
Как по своему положению, так и по действующим в этой области молекулярно­
генетическим механизмам спецификации нервной ткани нейрогенная зона гомоло­
гична соответствующей зоне членистоногих. Эта гомология очевидна, несмотря на
то, что область, где у членистоногих формируется нервная цепочка, является пред­
течей брюшной стороны, а нейрогенная область хордовых — спинной стороны фор-

200
 Рис. 11-6. Презумптивные зачатки асцидии Styela на стадии бластулы
и ранней гаструлы (по: Conklin, 1905).
А — стадия 64 бластомеров; Б — ранняя гаструла (переход к 128 бластомерам).
1 — энтодерма; 2 — хорда; 3 — нейральный зачаток; 4 — мезенхима; 5 — каудальная
мезодерма.

мирующегося животного. Во избежание путаницы мы должны осознать, что по­

нятия «спинной», или «дорсальный» и «брюшной», или «вентральный» являют­
ся вторичными в применении к эмбриогенезу. Они заимствованы из терминологии,
разработанной для дефинитивных форм, и характеризуют положение частей те­
ла взрослого животного относительно оси гравитации. Например, под вентральной
стороной зародыша можно понимать область, где формируются органы животно­
го, обращенные к центру гравитации. Противоположная сторона будет дорсальной.
При таком понимании терминов ротовое отверстие хорда и нервная трубка у обо­
лочников формируются на дорсальной стороне тела (рис. 11-7).
Вопрос о том, почему структуры, закладывающиеся в вегетативной области за­
родышей, у первичноротых становятся вентральными, а у низших хордовых дор­
сальными, нельзя признать окончательно решенным. По-видимому, заслуживает
внимания точка зрения, согласно которой существенной причиной сохранения это­
го изменения в эволюции животных могло быть перемещение закладки ротового
отверстия на контрнейрогенную сторону. Другим фактором морфогенеза, который
должен был способствовать сохранению функциональной инверсии дорсальности

Рис. 11-7. Личинка асцидии Сгопа. Вид с левой стороны (по: Kowalevsky, 1871).
1 — прикрепительные присоски; 2 — подбородок; 3 — эндостиль; 4 — ротовое отверстие; 5 —
мозговой пузырь; 6 — глаз; 7 — кишка; 8 — нервная трубка; 9 — хорда; 10 — место образова­
ния анального отверстия; 11 — оттолит; 12 — отверствие перибранхиальных мешков; 13 — мышцы
хвоста; 14 — жаберная глотка; 15 — жаберные щели.

201
у высших хордовых, возможно, было распространение зачатков хорды и нервной
системы до самого переднего конца зародыша, которое стало возможным после ука­
занного перемещения закладки ротового отверстия.
Вслед за гаструляцией происходит нейруляция, или процесс формирования нерв­
ной трубки. Суть нейруляции состоит в том, что нервная пластинка изгибается
внутрь, образуя сначала желобок, который затем замыкается на спинной стороне.
Замыкание нервной трубки начинается на заднем ее конце и затем распространяет­
ся вперед. Небольшое отверстие, которое соединяет полость нервной трубки с внеш­
ней средой, нейропор, сохраняется на переднем конце зародыша до конца нейру­
ляции. Передний конец нервной трубки расширяется и принимает вид пузырька
(чувствительный, или церебральный пузырек). Из стенок пузырька образуются ор­
ганы чувств личинки — глаз и статолит. Задняя часть трубки дифференцируется
как спинной мозг.

Рис. 11-8. Метаморфоз асцидии Clavelina (по: Brien, 1948).

А -В — последовательные этапы метаморфоза: субстрат на схеме расположен внизу. 1 — хвост;
2 — кишечная петля; 3 — сердце; 4 — ротовой сифон; 5 — прикрепительный сосочек; 6 — эпикард;
7 — клоакальный сифон.

Формирование взрослой асцидии происходит в результате метаморфоза личинки

(рис. 11-8), которая передним концом прикрепляется к субстрату и утрачивает хвост,
мышцы и хорду.

202
 11.2. Головохордовые, или Бесчерепные (Cephalocliordata, Acrania)

Подтип Головохордовые представлен небольшой группой животных, которая

объединяет всего два семейства сравнительно мелких (до 6 см в длину) морских
беспозвоночных. Отличительными особенностями головохордовых служат следую­
щие признаки: хорда простирается вдоль всего тела до самого переднего конца,
выходя за пределы нервной системы; вокруг хорды не образуется ни хрящевого,
ни костного скелета; отсутствует череп, головной мозг не дифференцирован; ор­
ганы чувств развиты слабо: на переднем конце тела имеются обонятельная ямка
и светочувствительное пигментное пятно, а также осязательные клетки в ротовых
щупальцах и в коже; сердце и специальные органы дыхания отсутствуют. Мускула­
тура представлена двумя продольными латеральными лентами, подразделенными
на несколько десятков (до 80) сегментов, или миомеров. Множественные половые
железы и выделительные органы расположены поссгментно.
Типичным представителем подтипа является ланцетник Branchiostoma lanceola-
tum, имеющий удлиненное, заостренное с обоих концов тело. Долгое время в лите­
ратуре ланцетник был известен как Amphioxus (от греч. c^icpi - оба, 6с;ис— острый).
Вдоль тела ланцетника проходят дорсальный, вентральный и каудальный плав­
ники.
Первоначально бесчерепные рассматривались как продукт регрессивной эво­
люции каких-то рыбообразных позвоночных, однако исследования эмбриологии и
морфологии низших хордовых показали ошибочность такого взгляда. По мнению
О. М. Ивановой-Казас, Acrania возникли как обособленная ветвь первичнохордовых
(Иванова-Казас, 1995) (см. рис. 11-2). Недавно было обнаружено ископаемое бес­
черепное животное, жившее 520 млн лет тому назад (средний кембрий), которое
имеет большое сходство с ланцетником, что свидетельствует о независимом от по­
звоночных возникновении бесчерепных (Briggs et al., 1994). Против представления о
бесчерепных, как о результате регрессивной эволюции, свидетельствуют и исследо­
вания системы Дож-генов ланцетника. Показано, что у представителей бесчерепных
имеется лишь один кластер Нох-генов, тогда как эволюция позвоночных произошла
на фоне д>гпликации кластеров Дож-генов, число которых у них достигает четырех.
Тем не менее по ряду молекулярно-биологических характеристик бесчерепные стоят
ближе к позвоночным, чем к асцидиям (см. рис. 11-1).
Эмбриональное развитие ланцетника изучено детально. Оно привлекло внима­
ние многих исследователей после того, как А. О. Ковалевский впервые дал подроб­
ное описание развития этого животного (1867, 1877) и обнаружил черты сходства с
развитием иглокожих. Детальное морфологическое описание развития ланцетника
принадлежит Е. Конклину (1932).
Яйца ланцетника сравнительно бедны желтком и достигают в диаметре 120 мкм.
После оплодотворения периферическая цитоплазма образует в области проникно­
вения сперматозоида субэкваториальное скопление в виде серпа. Это образование
называют мезодермалъным серпом, его положение соответствует задней области бу­
дущего животного. Нельзя не заметить, что процессы цитоплазматической сегре­
гации, предопределяющие спецификацию мезодермы и положение передне-задней
оси животного, аналогичны тому, что происходит в раннем эмбриогенезе асцидий.
Эта аналогия подчеркивается и тем, что положение мезодермального серпа пред­
определяет также ось билатеральной симметрии. Действительно, первая борозда

203
 Рис. 11-9. Дробление яйца ланцетника (по Conklin, 1932).
А — яйцо перед началом дробления (сагиттальный срез); Б —
стадия 4 бластомеров (вид с анимального полюса); В — стадия 8
бластомеров (вид сбоку: передние бластомеры слева, анимальный по­
люс вверху); Г — стадия 32 бластомеров. 1 — редукционное тельце;
2 — мужской и женский пронуклеусы. Стрелкой показано положение
передне-задней оси.

дробления, которая проходит меридионально через середину мезодермального сер­

па, делит зародыш на симметричные левую и правую половины. Как и у асцидий, у
ланцетника большая часть анимального полушария дает эктодерму и соответствует
* вентральной стороне будущего животного, тогда
\ как большая часть вегетативного полушария идет
на построение структур дорсальной стороны.
Дробление полное и, несмотря на рано возни­
кающую билатеральность зародыша, внешне име­
ет радиальный характер (рис. 11-9). Вторая бороз­
да проходит также меридионально, но под прямым
углом к первой и делит зародыш на переднюю и
заднюю половины. Третья борозда проходит эква­
ториально и отделяет 4 анимальных бластомера,
имеющих несколько меньшие размеры, чем веге­
тативные, что позволяет говорить о микромерах
Рис. 11-10. Бластула ланцетника и макромерах. После седьмого деления дробление
в оптическом разрезе становится асинхронным. Клеточные циклы в раз­
(по: Conklin, 1932). ных областях формирующейся бластулы различа­
1 — презумптивная энтодерма; 2 —
ются своей продолжительностью. Наибольшей ин­
презумптивная мезодерма. Стрелкой
показана передне-задняя ось. тенсивностью митотических делений отличаются
клетки мезодермального зачатка. Проспективные

204
эктодермальные клетки анимального полушария делятся быстрее, чем энтодермаль-
ные, занимающие центральную область вегетативного полушария.
После пятого деления дробления внешняя билатеральность зародыша утрачива­
ется. В результате дробления образуется целобластула (рис. 11-10). Полость бласту­
лы заполнена студенистым веществом, роль которого, возможно, связана с растя­
жением зародыша. Исследование судьбы клеток, занимающих разные области бла­
стулы, позволило построить карту презумптивных зачатков на стадии дробления
(рис.11-11, Б). На вегетативном полюсе расположены относительно крупные клет­
ки, дающие после гаструляции начало энтодермальному зачатку. Сзади этот зача­
ток ограничен презумптивной мезодермой, клетки которой наследуют цитоплазму
мезодермального серпа оплодотворенного яйца. Впереди от презумптивной энтодер­
мы располагаются клетки, которые впоследствии образуют хорду и нервную ткань.
Сравнение карт презумптивных зачатков ланцетника и асцидий убеждает в принци­
пиальном сходстве пространственной организации зародышей представителей под­
типа Бесчерепных и подтипа Оболочников (см. рис. 11-4 и 11-11).

2
2
3
5

Рис. 11-11. Карта презумптивных зачатков на стадии восьми бластомеров

у асцидии Сгопа intestinalis (А ) (по: Ortolani, 1954) и ланцетника
Branchyostoma belcheri (Б) (по: Tung et al., 1962).
1 — эктодерма; 2 — нейральный зачаток; 3 — хорда; 4 — энтодерма; 5 — мышцы;
б — мезенхима.

Как и у асцидий, вегетативная область, занятая презумптивной энтодермой, сна­

чала уплощается, а затем впячивается внутрь бластоцеля. Эта инвагинация эпи­
телиального пласта обозначает начало гаструляции (рис. 11-12). Инвагинация со­
провождается инволюцией, в ходе которой перемещающиеся через край бластопора
клетки вегетативной области попадают внутрь гаструлы и, сохраняя эпителиаль­
ную структуру, движутся вдоль базальных частей клеток наружного слоя. Раньте
всего начинается инволюция клеток зачатка хорды. Несколько позже инволюиру-
ют клетки, расположенные на границе латеральных губ бластопора, которые дают
материал мезенхимы и латеральной мезодермы, а затем и мезодермальные клетки
задней области. Характерной особенностью гаструляции ланцетника является рост
передней губы бластопора в заднем направлении. Растущая передняя губа бласто­
пора, содержащая материал хордомезодермы и нейрального зачатка, прикрывает
собой гастроцель и формирует дорсальную стенку тела зародыша. В результате ин­
вагинации бластоцель уменьшается, а затем и полностью вытесняется первичной
кишкой, стенка которой при этом приходит в соприкосновение с эктодермой, воз-

205
 Рис. 11-12. Гаструляция у ланцетника (по: Шмидт, 1953)-
А — начало гаструляции: видно легкое впячивание энтодермаль-
ной пластинки (справа); Б — ранняя гаструла; В — средняя гаструла,
завершение инвагинации; Г — поздняя гаструла.

пикающей за счет клеток анималытого полушария. Клетки эктодермы снабжены

ресничками, активность которых обеспечивает движение зародыша.
В результате гаструляции зародыш ланцет­
ника становится двухслойным. Очевидно, что
эти слои не являются однородными зародышевы­
ми листками. Расположенная внутри зародыша
первичная кишка имеет сложный состав (рис. 11-
13). В ее дорсальной области расположены клет­
ки, которые после обособления образуют зачаток
хорды, простирающийся вдоль всего тела и распо­
ложенный непосредственно под нейроэктодермой.
Дорсолатеральные области первичной кишки об­
разуют симметричные складки, или желобки, ко­
торые затем замыкаются и обособляются от ар-
хептерона в виде парных мезодермальных тяжей.
В передней области они имеют вид трубок. Позд­
Рис. 11-13. Расположение презумп­ нее мезодермальные тяжи подразделяются на от­
тивных зачатков на стадии гаструлы
у ланцетника (по: Conklin, 1932).
дельные сомиты (рис. 11-14).
1 — нервная пластинка; 2 — пре­ После выделения материала хорды и зачатков
зумптивная хорда; 3 — редукционное мезодермы в составе архентерона остается пре­
тельце. Стрелкой обозначена передне-
зумптивная энтодерма, которая занимала вентро-
задняя ось.

206
латеральные и вентральную области первич­
ной кишки. Замыкаясь в трубку, этот матери­
ал образует зачаток кишки личинки.
Вслед за гаструляциеи происходит нейру-
ляция, в течение которой формируется за­
чаток центральной нервной системы (рис. 11-
15). На начальных этапах нейруляции ней­
роэктодерма, занимающая дорсальное поло­
жение, утрачивает связь с эктодермальным
пластом. При этом свободные концы экто­
дермального пласта получают возможность
расти по поверхности нервной пластинки, в
результате чего последняя изолируется от
внешней среды покровным эпителием. Лате­
ральные концы нервной пластинки приподни­
маются и образуют желобок, смыкающийся
позднее вдоль дорсальной линии в трубку. На
переднем конце полость нервной трубки неко­
торое время сообщается с внешней средой с
помощью пейропора, тогда как на заднем об­ Рис. 11-14• Образование сомитов и
нервной трубки у ланцетника (по: Conklin,
разуется первно-кишечный канал, связываю­ 1933).
щий полость нервной трубки с полостью ар­ 1 — хорда; 2 — кишка; 3 — нервная труб­
хентерона. Как и гаструляция, нейруляция у ка; 4 — нервно-кишечный канал; 5 — соми­
ланцетника и асцидий обнаруживает большое ты.

сходство.

1 ?

Рис. 11-15. Нейруляция и обособление мезодермы у ланцетника

(по: Serfontaine, 1906).
А — начало процесса; Б — стадия обособления мезодермальных тяжей. 1 — нерв­
ная пластинка; 2 — хорда; 3 — мезодерма; 4 — энтодерма; 5 — эктодерма.

Формирование личинки имеет целый ряд интересных особенностей, значение ко­

торых продолжает оставаться неразгаданным. Так, ротовое отверстие закладыва­
ется асимметрично на левой стороне тела. Асимметрично (на правой стороне) за­
кладываются и жаберные щели. Восстановление билатеральной симметрии происхо­

207
дит лишь на стадии метаморфоза. Некоторые исследователи придают наблюдаемой
асимметрии закладки органов филогенетическое значение, усматривая в ней исто­
рические свидетельства происхождения бесчерепных животных.

Литература
Иванова-Казас О. М. Подтип Acrania / / Сравнительная эмбриология беспозвоночных
животных. Низшие хордовые. М., 1978. С. 5 23.
Иванова-Казас О. М. Класс Ascidiacea — асцидии / / Там же. С. 23-56.
Иванова-Казас О. М. Очерки по филогении низших хордовых / / Труды СПбОЕ. 1995.
Т. 84. Вып. 4. 159 с.
Малахов В. В. Новый взгляд на происхождение хордовых / / Природа. 1982. Т. 5. С. 12-
19.
 Глава 12. DEUTEROSTOM IA.
НИЗШ ИЕ ПОЗВОНОЧНЫЕ (A N A M N IA )

Отличительной особенностью позвоночных служит внутренний скелет, представ­

ленный у зародышей хордой, а у взрослых животных хрящевым или костным позво­
ночником. Верхние дуги позвонков образуют особый канал, в котором расположен
спинной мозг. Нервная система выдается вперед относительно хорды. На переднем
конце позвоночник сочленен с черепом, в котором расположен головной мозг и ор­
ганы чувств — органы зрения, слуха и обоняния. Имеется сердце. Органы дыхания
представлены жабрами у водных животных и легкими у наземных.
Среди позвоночных различают Бесчелюстных (Agnatha) и Челюстноротых
(Gnathostomata). Первые не имеют дифференцированных челюстей, у вторых обра­
зуются челюстной аппарат, сочлененный с черепной коробкой. К Agnatha принад­
лежат Круглоротые (миноги, миксины). К Челюстноротым относятся два класса
рыб — Хрящевые и Костные рыбы, а также Земноводные, Пресмыкающиеся, Птицы
и Млекопитающие.
Эволюция онтогенеза позвоночных животных ознаменовалась изменением, имев­
шем глобальное значение, а именно возникновением зародышевых оболочек и преж­
де всего амниона. Возникновение амниона и других зародышевых оболочек открыло
перед позвоночными новые горизонты. Сделав их размножение независимым от вод­
ной среды, оно создало необходимые предпосылки для широкого освоения суши и,
таким образом, открыло новые перспективы для эволюции животного мира.
С учетом этого изменения индивидуального развития позвоночные подразделя­
ются на два надкласса. Высшие позвоночные — рептилии, птицы и млекопитающие
объединяются в надкласс Amniota, т. е. в группу животных, зародыши которых име­
ют амнион — особую зародышевую оболочку, создающую водную среду для разви­
вающегося эмбриона. Бесчелюстные позвоночные, а также Рыбы и Земноводные
образуют надкласс Anamnia, представители которого не имеют амниона.
У низших позвоночных различают два основных типа развития: более прими­
тивное развитие с полным дроблением (круглоротые, двудышащие рыбы, хряще­
вые ганоиды, костные ганоиды, кистеперые, амфибии) и развитие с дискоидальным
дроблением, характерное для животных, яйца которых отличаются высоким содер­
жанием желтка (костистые рыбы, селяхии). В качестве примеров развития Anam­
nia с полным дроблением рассмотрим развитие миноги (Круглоротые) и некоторых
амфибий. Развитие Anamnia с дискоидальным дроблением будет рассмотрено на
примере онтогенеза костистых рыб.

209
 12.1. Круглоротые (Cyclosfomata). Минога

Дробление яйца миноги полное, неравномерное. Первые две борозды меридио­

нальные. Третья борозда проходит в широтной плоскости и делит яйцо на микроме­
ры анимального полушария и богатые желтком макромеры вегетативного. В резуль­
тате дробления образуется целобластула. Бластула миноги отличается от бластулы
низших хордовых своей многослойностью, что характерно для всех позвоночных. В
анимальном полушарии стенка бластулы миноги состоит из двух-трех, а в вегета­
тивном полушарии — из шести-семи слоев.
На карте презумптивных эмбриональных зачатков миноги видно, что их рас­
положение, по существу, не отличается от картины, наблюдаемой у ланцетника
(рис. 12-1). Перед спинной губой бластопора лежат клетки, которые впоследствии
дифференцируются как клетки хорды. Впереди от клеток презумптивной хорды
расположена зона нейроэктодермы. Латеральные и вентральная губы бластопора
окружены материалом, дающим начало мезодерме. Центральная область вегетатив­
ного полушария занята клетками презумптивной энтодермы, тогда как анимальное
полушарие занимают эктодермальные клетки.
Такое распределение материала предопределяет принципиальное сходство га­
струляции миноги с гаструляцией ланцетника, хотя, естественно, она имеет свое­
образные черты, обусловленные особенностями строения многослойной бластулы.
Образование зародышевых листков обеспечивается различными формами кле­
точных движений, среди которых раз читают инволюцию, эпиболию, движение пла-

Рис. 12-1. Схема расположения презумп­
тивных зачатков перед гаструляцией у ми­
ноги (рис. Чекановской из; Иванов, 1945).
1 — нейральный зачаток; 2 — зачаток
хорды; 3 — эктодерма; 4 — мезодерма; 5 —
энтодерма. Ж ирной линией обозначено ме­
стоположение спинной губы бластопора.
Рис. 12-2. Сагиттальный разрез через гастру-
лу миноги на стадии нарастания спинной губы
бластопора (по: Иванов, 1945)-
1 — бластоцель; 2 — бластопор; 3 — зачаток
хорды; 4 — нейральная пластинка; 5 — энто­
дерма.

210
ста в результате конвергентного удлинения. Сколько-нибудь заметной инвагинации
не наблюдается. Закладка спинной губы бластопора происходит в результате ин-
грессии. Вслед за этим в результате деления, но главным образом вследствие интер-
каляции смещающихся в медиальном направлении клеток, формирующих спинную
губу, последняя растет в заднем направлении, прикрывая при этом не гастроцель,
как у ланцетника, а энтодермальный зачаток, образованный клетками вегетативно­
го полушария (рис. 12-2).
Боковые и задняя губы бластопора образуются на завершающей стадии гастру­
ляции и окончательно закрывают зачаток энтодермы. Дальнейшее развитие состо­
ит в дифференциации нервной трубки, хорды, мезодермы и кишечника. Следует
подчеркнуть своеобразие нейруляции у миноги, у которой первоначально заклады­
вается нервный тяж, тогда как полость нервной трубки, как и у рыб, возникает
позднее.

12.2. Амфибии (Amphibia)

Амфибии, прежде всего некоторые лягушки и тритоны, представляют собой из­

любленный объект эмбриологических исследований. Легко доступные исследовате­
лю, обладающие довольно крупными яйцами, неприхотливые при содержании пред­
ставители этого класса животных стали классическим объектом биологии развития.
На амфибиях выполнены разнообразные экспериментальные, в том числе микрохи­
рургические исследования, которые внесли неоценимый вклад в понимание таких
фундаментальных проблем морфогенеза, как эмбриональная индукция и детерми­
нация осей животного.
Амфибии представлены тремя отрядами, а именно. Безногими (Apoda), Хвоста­
тыми (Urodela) и Бесхвостыми (Anura). Вопрос о монофилетическом или полифи-
летическом происхождении амфибий остается открытым. Эмбриональное развития
безногих практически не изучено. В развитии хвостатых и Бесхвостых имеются су­
щественные различия, хотя принципиальная схема развития у них общая.
Из бесхвостых модельными объектами биологии развития стали южноафрикан­
ская шпорцевая лягушка Xenopus laevis и, в меньшей мере, представители родов
Rana и Bufo. Среди хвостатых наибольшей популярностью пользуются аксолотль
Ambystoma mexicanum, японский тритон Cynops pyrrhogaster и европейский тритон
Pleurodeles waltl.
Яйца амфибий телолецитального типа, с высокой концентрацией желтка в ве­
гетативном полушарии (рис. 12-3). Кортикальный слой анимального полушария у
многих лягушек сильно пигментирован. После оплодотворения происходит корти­
кальная ротация, в ходе которой кортекс яйца поворачивается примерно на 30° по
меридиану, проходящему через точку вхождения сперматозоида, которая находит­
ся в анимальном полушарии. Вследствие вращения кортикального слоя становится
видимой скрытая ранее серая цитоплазма анимального полушария: образуется так
называемый серый серп (рис. 12-4).
Кортикальная ротация представляет собой очень важное событие в развитии ам­
фибий, так как она обусловливает перемещение и активацию ряда морфогенетиче­
ских факторов и предопределяет положение осей зародыша. Серый серп расположен
на будущей спинной стороне зародыша и обозначает место, где начнется образование

211
 Рис. 12-3. Схема строения ооцита амфи­
бии (по: Brachet, 1980).
В левой части схемы представлено рас­
пределение желточных гранул; в правой —
распределение рибосом. 1 — ядро; 2 — жел­
точные гранулы; 3 — рибосомы; 4 — фолли­
кулярные клетки. А и V — соответственно
анимальный и вегетативный полюс

—►
твс

Рис. 12-4- Кортикальное вращение и образование серого серпа

в оплодотворенной яйцеклетке амфибии (по: Ellinson, Rowning, 1988).
A i — внешний вид зиготы перед ротацией кортикального слоя; Аг — то
же после кортикальной ротации; Бх — сагиттальный разрез яйца до кор­
тикальной ротации; В 2 — то же после вращения. А, V — соответственно
анимальный и вегетативный полюс яйцеклетки: ТВС — точка вхождения
сперматозоида. 1 — кортикальный пигментированный слой; 2 — кортикаль­
ный непигментированный слой; 3 — область серого серпа; 4 — слабо пигмен­
тированная цитоплазма.

212
спинной губы бластопора. Плоскость меридиана, который проходит через середину
серого серпа, представляет собой сагиттальную плоскость зародыша.
Дробление синхронное, полное, но неравномерное. Первые две борозды проходят
меридионально и перпендикулярно друг другу. Первая борозда проходит через сере­
дину серого серпа и делит яйцо на правую и левую части (рис. 12-5), подобно тому,
как это происходит у асцидий и ланцетника. Третья борозда — широтная, или ла-
титудиналъная (от лат. latitudo — географическая широта) проходит в плоскости,
параллельной экваториальной, и отделяет анимальные бластомеры меньших разме­
ров от крупных вегетативных (рис. 12-5). В результате четвертого меридионального
и пятого широтного деления образуется стадия 32 бластомеров. В процессе дроб­
ления кортикальная цитоплазма, сопровождающая борозды дробления, частично
перемещается в глубь зародыша, что ведет к новым связям между основными ком­
понентами яйца. На 12-м клеточном цикле наступает момент, так называемая точка
перехода на стадии средней бластулы (М ВТ point), когда синхронность дробления
нарушается.

Рис. 12-5. Дробление яйца ам­

фибии (по: Hiittner, 1949).
А — первая борозда делит яй­
цо на две симметричные половины;
Б — стадия 4 клеток; В — стадия
8 бластомеров; Г — четвертое деле­
ние дробления. Прохождение борозд
в вегетативном полушарии происхо­
дит медленнее, чем в анимальном.

В процессе дробления образуется полость — бластоцель. У амфибий бластоцель

содержит жидкость, концентрация солей в которой на порядок выше концентра­
ции солей в окружающей среде. Бластоцель расположен в анимальном полушарии
(рис. 12-6). Крыша бластоцеля состоит из нескольких радов клеток. Вегетативное
полушарие образовано крупными, богатыми желтком клетками, среди которых име­
ются и первичные половые клетки.
При рассмотрении карты презумптивных зачатков амфибий обращает на себя
внимание ее принципиальное сходство с соответствующими картами миноги, ланцет­
ника и асцидий (рис. 12-7). В центре вегетативной области здесь также расположе­
ны клетки, которые при дальнейшем развитии дают зачаток энтодермы. Впереди от
клеток энтодермы лежат клетки будущей головной кишки и хорды. Еще далее впс-

213
 Рис. 12-6. Схема строения бластулы амфи­
бии (по: Huttner, 1949).
ИМЗ — инволюирующая область мар­
гинальной зоны; КБ — крыша бластоцеля;
М3 — маргинальная зона. 1 — бластодель; 2 —
первичные половые клетки
Рис. 12-7. Схема расположения презумп-
тивных зачатков перед гаструляцией зароды­
ша амфибии (по: Иванов, 1947).
1 — нейральный зачаток; 2 — зачаток хорды;
3 — мезодерма; 4 — мезенхима; 5 — эктодерма;
б — энтодерма; 7 — зачаток головной кишки.
Ж ирной линией обозначено местоположение
спинной губы бластопора.

ред, в зоне, расположенной в основном в анимальном полушарии, находятся клетки,

которые формируют нервный зачаток.
Вместе с тем нетрудно заметить и существенное отличие карты презумптивных
зачатков амфибий от соответствующих карт круглоротых и низших хордовых. И это

Рис. 12-8. Карта презумптивных зачатков на стадии ранней гаструлы

аксолотля (А) и Xenopus (Б ) (по: R. Ellinson, 1997).
В отличие от многих исследованных амфибий у Xenopus лежащие на поверхности
гаструлы клетки никогда не образуют мезодерму, последняя формируется только из бо­
лее глубоко лежащих клеток. А, V — соответственно анимальный и вегетативный полюс.
1 — область, дающая головной мозг; 2 — зачаток нервной трубки. 3 — хордомезодер-
ма; 4 — материал, дающий сомиты; 5 — спинная губа бластопора; б — энтодерма; 7 —
материал латеральной мезодермальной пластинки; 8 — презумптивный эпидермис.

214
отличие касается прежде всего презумптивного нейрального зачатка, большая часть
которого у амфибий перемещается на анимальную полоЕину зародыша. Смеще­
ние нейрогенной зоны в анимальное полушарие, возможно, коррелирует с прогрес­
сивным развитием нервной системы в ряду «низшие хордовые — низшие позвоноч­
ные», и создает предпосылки для вовлечения в процесс нейрогенеза большего числа
клеток.
Отношение между положением нейрального зачатка и основной осью зародыша
варьирует у хвостатых и бесхвостых: у аксолотля нейрогенная зона распространя­
ется практически до самого анимального полюса, тогда как у шпорцевой лягуш­
ки граница нейрального зачатка отстоит от анимального полюса примерно на 45°
(рис. 12-8).
Гаструляция у амфибий благодаря развитию массивного энтодермального зачат­
ка представляется еще более сложным процессом, чем у круглоротых. Первым при­
знаком начавшейся гаструляции служит появление спинной губы бластопора. Она
возникает на дорсальной стороне в маргинальной области, разделяющей бластулу
на анимальное и вегетативное полушария. Спинная губа бластопора возникает в ви­
де небольшой дугообразной щели, врезающейся в поверхность зародыша в области
серого серпа (рис. 12-9, 12-10). Появление этого щелевидного углубления обуслов­
лено сокращением апикальных концов, удлинением тела и расширением базальных
областей лежащих здесь клеток энтодермального зачатка. Благодаря указанным из­
менениям клетки принимают бутылковидную форму (рис. 12-11, В). Процесс фор­
мирования бутылковидных клеток распространяется по окружности в латеральном

Рис. 12-9. Последовательные стадии гаструляции Xenopus laevis.

Вид с вегетативного полюса (по: Детлаф, Руднева, 1975).
А, Б — появление спинной губы бластопора; В, Г — образование латеральных губ бласто­
пора; Д — замыкание бластопора на вентральной стороне и образование желточной пробки;
Е — уменьшение размеров желточной пробки.

215
 Рис. 12-10. Схема гаструляции у лягушки. Сагиттальный срез
(по: Шмидт, 1953).
А — бластула; В — начало гаструляции; В — стадия серповидного бластопора;
Г — стадия подковообразного бластопора; Д, Е — стадия желточной пробки. 1 — бла­
стоцель; 2 — спинная губа бластопора; 3 — полость первичной кишки; 4 — эктодерма;
5 — энтодерма.

216
направлении, а позднее — назад, вызывая появление соответственно латеральных и
вентральной губ бластопора.

Рис. 12-11. Морфогенетические

движения, обеспечивающие гаструля-
цню у амфибий (по: Balinsky, 1981).
А — генерирующее эпиболию рас­
тяжение поверхностных клеток экто­
дермы в области крыши бластоцеля;
Б — конвергенция клеток в дорсаль­
ной маргинальной области, вызываю­
щая сужение и удлинение этой зоны;
В — образование бутылковидных кле­
ток в области спинной губы бласто­
пора, способствующее инвагинации по­
следней. к /у — конвергентное удлине­
ние.

Гаструляция завершается погружением энтодерм атгьного зачатка, клетки кото­

рого оказываются прикрытыми наружным листком в результате нарастания, или
эпиболии эктодермы. Эпиболия у амфибий связана с перестройкой или реаранжи­
ровкой многорядной стенки бластулы. Ее клетки встраиваются между клетками
контактирующих рядов (рис. 12-11, А). В ходе такой реаранжировки клетки наруж­
ного ряда, лежащие впереди спинной губы бластопора, уплощаются, стенка бласту­
лы становится тоньше, а клеточный пласт движется в направлении бластопора.
В области бластопоральной щели слой наружных клеток инволюируст (подво­
рачивается) внутрь зародыша. Попавшие внутрь клетки продолжают двигаться по
внутренней поверхности стенки бластулы, перемещаясь теперь в обратном направ­
лении, гг.е. к анимальному полюсу. Это движение обусловлено конвергенцией или
стягиванием внутренних клеток маргинальной зоны к медиальной линии. В резуль­
тате стягивания клеток в более узкую полоску происходит ее растяжение или удли­
нение в переднем направлении (рис. 12-11, Б). Благодаря этим процессам бутылко­
видные клетки п архентерон в целом перемещаются в сторону' анимального полюса,
оттесняя бластоцель к вентральной стороне зародыша. В отличие от схем преж­

217
них лет, которые широко распространены в учебной литературе, в настоящее время
признается, что полость архентерона, в том числе и его крыша, выстлана энто­
дермой.
Процессы, которые начинаются на спинной стороне зародыша, постепенно рас­
пространяются латерально и назад, что приводит к образованию на поверхности
зародыша кольцевого бластопора, в центре которого долгое время сохраняются за­
нимавшие вегетативный полюс богатые желтком клетки энтодермального зачатка,
так называемая желточная пробка.
Значение отдельных элементов морфогенетических движений у разных видов
амфибий заметно варьирует. В частности, у некоторых хвостатых амфибий и у ля­
гушки Rana pipiens движущей силой гаструляции служит направленная миграция
клеток, тогда как у X. laevis образование архентерона может происходить и в от­
сутствии миграции клеток.
После гаструляции основные зачатки зародыша располагаются следующим об­
разом. Поверхность гаструлы образована эктодермой, вентральная область которой
впоследствии становится эпидермисом зародыша, а дорсальная дифференцируется
как нейральная ткань. Непосредственно под эктодермой в дорсальной области ле­
жит дорсальная мезодерма, которая без резких границ переходит в латеральную и
далее в вентральную мезодерму. Полость архентерона образована энтодермой, кры­
ша архентерона однослойна, тогда как его дно сформировано массивным зачатком,
состоящим из крупных, богатых желтком клеток.
Нейроэктодерма дорсальной области представлена столбчатыми клетками, ко­
торые образуют нервную пластинку, лежащую непосредственно над зачатком хор­
ды. У хвостатых амфибий клетки нервной пластинки, граничащие с эпидермисом,
сильно вытягиваются в высоту, сокращаясь при этом на вершинах. Края нервной
пластинки приподнимаются в виде нервных складок. Эти складки растут в меди­
альном направлении и смыкаются по срединной линии зародыша. В области смыка­
ния складок эпидермальные слои левой и правой стороны зародыша соединяются в
непрерывный пласт покровного эпителия, а нейроэктодерма складок замыкается в
нервную трубку. При этом дорсальная часть материала нервных складок обособля­
ется в виде нервного гребня (рис. 12-12, 12-13), клетки которого обладают широкими
потенциями и, мигрируя в разные части тела, дифференцируются в разнообраз­
ные структуры. У бесхвостых нервная пластинка состоит из поверхностного слоя и
внутреннего — сенсорного. Нервная трубка у них образуется только за счет клеток
сенсорного слоя (рис. 12-13).
Процесс образования нервных валиков начинается в головной области и после­
довательно распространяется в заднем направлении. Скорость сближения нервных
валиков различна вдоль передне-задней оси зародыша. Она максимальна в средней

Рис. 12-12. Схема образования нерв­

ной трубки и клеток нервного гребня у
хвостатых амфибий (по: Balinsky, 1981).
Темным цветом показана локализа­
ция материала клеток нервного гребня в
нервной пластинке (А) и нервных склад­
ках (Б, В). Г, Д — обособление нерв­
ной трубки и выселение клеток нервного
гребня.

218
области туловища. Благодаря этому за­
мыкание нервной трубки сначала про­
исходит в средней части тела и из этой
области распространяется вперед и на­
зад. Как и у низших хордовых, у амфи­
бий на переднем конце образуется ней-
ропор, связывающий полость нервной
трубки с внешней средой. Задние кон­
цы нервных валиков при смыкании об­
разуют свод, прикрывающий бластопор,
который таким образом превращается в
нервно-кишечный канал.
Механизмы удлинения нервной пла­
стинки у хвостатых и бесхвостых ам­
фибий, по-видимому, также различны.
Во всяком случае в условиях орган­
ной культуры однослойная нервная пла­
стинка A. mexicanum растет в длину
только при наличии зачатка хорды, то­
гда как у X. laevis удлинение многоряд­
ной нейроэктодермы происходит и в от­
сутствии хорды, за счет механизма кон­
вергенции и растяжения.
Следует заметить, что возникнове­
ние механизмов формообразования го­
ловы с обособленным головным мозгом,
органами чувств и челюстями — органа­
ми, которые сделали возможным и мно­
гократно интенсифицировали активное
питание животных, стало важнейшей
вехой в их эволюции. Появление этих
механизмов, естественно, в сочетании
с другими преобразованиями онтогене­ Рис. 12-13. Схема формирования
за, открыло новые пути эволюции по­ нервной трубки у Xenopus laevis
звоночных, которые привели к появле­ (по: Elinson, 1997).
А — нервная пластинка, состоящая из поверх­
нию Рыб, Амфибий, Рептилий, Птиц и
ностного (светлый) и сенсорного (темный) слоя;
Млекопитающих. Указанием на эволю­ Б, В — формирование нервной трубки за счет
ционную новизну краниогенеза, видимо, клеток сенсорного слоя.
может служить то обстоятельство, что
принципиальная схема развития головы
заметно отличается от схемы развития туловища.
Головной мозг у амфибий возникает из широкой передней части нервной пла­
стинки. Рядом перетяжек головной мозг подразделяется на три главных отдела —
передний (prosencephalon), средний (mesencephalon) и задний (rhombencephalon)
мозг (рис. 12-14). Передний мозг после своего обособления подразделяется на две
области - лежащий впереди конечный мозг (telencephalon) и расположенный непо­
средственно за ним промежуточный мозг (diencephalon), который сзади граничит

219
 со средним мозгом. Конечный мозг
подразделяется билатерально, образуя
симметричные левое и правое полуша­
рия и лежащие впереди от них обоня­
тельные доли. У амфибий полушария
головного мозга развиты слабо. Проме­
жуточный мозг дает начало глазным
пузырям, гипоталамусу и нейральной
части гипофиза, этого важнейшего ор­
гана внутренней секреции.
Развитие глаза. После того, как
Шпеманн обнаружил зависимое разви­
тие структур глаза, обусловленное ин­
дукционными взаимодействиями (см.
том 2), развитие глаза амфибий стало
Рис. 12 -Ц ■ Строение головного мозга классической моделью эксперименталь­
зародыша амфибий (по: Hugh, 1951). ной эмбриологии. Зачатки глаз возни­
1 — конечный мозг (telencephalon); 2 — проме­
жуточный мозг (diencephalon); 3 — средний мозг
кают в виде глазных пузырей — сим­
(mesencephalon); 4 — задний, или ромбовидный метричных выростов, связанных с про­
мозг (rhombencephalon); 5 — спинной мозг; 6 межуточным мозгом глазным стебель­
глотка; 7 — печеночный вырост, 8 — закладка ком. Вначале короткий и широкий глаз­
сердца; 9 — зачаток стомодеума.
ной стебелек по мере развития глаза
становится длинным и узким. Глазные пузыри растут в дистальном направлении
и достигают' эктодермы зародыша. Эктодермальные клетки в области контакта с
глазным пузырем становятся столбчатыми и образуют так называемую хрустали-

Рис. 12-15. Схема развития хрусталика (по: Лопашов, Строева, 1963).

А — формирование хрусталиковой плакоды; Б, В — впячиванне материала плакоды; Г — от­
деление хрусталикового пузырька; Д, Е — образование первичных волокон хрусталика в задней
стенке пузырька; Ж — образование вторичных хрусталиковых волокон.

220
 Г1
1 1
Рис. 12-16. Схема дифференциации голов­
ного мозга и закладка органов чувств у позво­
ночных (по; Waddington, 1956).
1 — передний мозг: 1.1 — telencephalon;
1.2 — diencephalon; 2 — средний мозг (mesen­
cephalon); 3 — задний мозг: 3.1 — metencephalon;
3.2 — myencephalon; 4 — обонятельная плакода;
5 — инвагинация хрусталиковой плакоды; 6 —
слуховая плакода; 7 — сомит.

коеую плакоду (от греч. ттХахоО<; — лепешка, пирожок) (рис. 12-15). Обращенная к
плакоде стенка глазного пузыря инвагинирует в первичную полость глаза и обра­
зует двухслойную чашу— глазной бокал (рис. 12-16). Внутренний листок глазного
бокала представляет собой зачаток сетчатки, а наружный листок — зачаток пиг­
ментного эпителия. Хрусталиковая плакода также инвагинирует и образует пузы­
рек, который затем отшнуровывается от покровной эктодермы (см. рис. 12-15) и
дифференцируется как хрусталик.
В процессе формирования глазной чаши первичная полость глаза исчезает, так
как ее листки тесно смыкаются, хотя и не срастаются друг с другом. Снаружи
глазной бокал окружается мезенхимными клетками, которые впоследствии дают
начало сосудистой оболочке и склере глаза. Кожный эпителий в области зачатка
глаза после обособления материала хрусталика дает начало роговице.
Нервный гребень. Важное значение в развитии позвоночных животных имеют'
клетки нервного гребня — удивительная популяция клеток эктодермального проис­
хождения, дающая необычайно широкий спектр производных. Возникая на стыке
эпидермального и нейрального эпителиев, эти клетки в момент смыкания нервных
складок и образования нервной трубки теряют эпителиальную структуру и актив­
но мигрируют', иногда на весьма большие расстояния. Среди производных нервного
гребня имеются разного рода пигментные клетки, спинальные ганглии, ганглии веге­
тативной нервной системы, клетки глии, шванновские клетки, клетки эндокринных
желез, мезенхима и соединительная ткань, хондробласты, одонтобласты.

221
 Рис. 12-17. Распространение клеток нервного гребня
в головной области зародыша амфибии (по: Stone, 1929).
А — нейрула; Б — стадия ранней хвостовой почки; В — стадия поздней хвостовой почки. 1 -
мандибулярный, 2 — гиоидный и 3 — жаберный потоки миграции клеток нервного гребня; 4 —
зачаток глаза; 5 — обонятельная плакода; 6 — слуховая плакода; 7 — пронефрос.

Особую роль играют клетки нервного гребня переднего отдела нервной трубки,
дающего головной мозг. Действительно, они дифференцируются не только как эле­
менты сенсорной нервной системы (тройничный, лицевой, языкоглоточный, блужда­
ющий ганглии), не только как парасимпатические ганглии, но и как скелетогенные
элементы, за счет которых строится большая часть черепа. После замыкания нерв­
ной трубки наблюдается три основных потока миграции клеток нервного гребня —
мандибулярный, гиоидный и жаберный (рис. 12-17). Этот процесс столь интенсивен,
что на стадии поздней нейрулы массу мигрирующих клеток можно наблюдать при­
жизненно по вздутиям эктодермы. Самый передний (мандибулярный) поток обра­
зуется клетками гребня, расположенного в области среднего мозга. Мандибулярный
поток огибает зачатки глаз и устремляется вперед, окружая ротовое отверстие. Эти
клетки формируют переднюю часть нейрокраниума и хрящи челюстей. Гиоидный
поток образуется в зоне, расположенной впереди слухового пузырька, и дает хрящ,
подстилающий дно рта. В области, лежащей за слуховым пузырьком, мигрируют
клетки, которые образуют жаберные дужки. У головастика имеется четыре жабер­
ные щели, через которые вода выводится из глотки наружу. Жаберные дужки свя­
заны с образованием наружных жабр, которые во взрослом состоянии сохраняются
у хвостатых амфибий, а у бесхвостых заменяются на внутренние жабры.
Широкое участие клеток краниального нервного гребня в формировании хряще­
вого черепа рассматривается как свидетельство в пользу гипотезы о том, что голова
позвоночных возникла как эволюционное новообразование, дополнившее план тела
протохордат (Gans, Northcutt, 1983). Реализация этого новообразования, как можно
полагать, оказалась возможной благодаря тому, что клетки краниального нервного
гребня вопреки, казалось бы, своей эктодермальной природе приобрели способность
стать новым источником хряща, который заменил отсутствующий в краниальной
области традиционный источник скелетогенной мезодермы — сомиты.
После завершения нейруляции зародыши амфибий приобретают общий для всех
позвоночных план строения тела (рис. 12-18), характерный для стадии фарингулы
(от лат. pharynx — глотка), т. е. стадии, на которой происходит образование жабер­
ных щелей, лежащих по обе стороны глотки. На этой стадии под эпидермальным
эпителием находятся нервная трубка, которая преобразуется в спинной мозг, а так­
же нервный гребень туловища. В отличие от краниального отдела клетки нервного
гребня туловища не способны к хондрогенезу.

222
 Рис. 12-18. Поперечный разрез через зародыш амфи­
бии на стадии фарингулы (по: Balinsky, 1981).
1 — нервный гребень; 2 — нервная трубка; 3 — сомит;
4 — субхордальный стержень; 5 — задняя кардинальная
вена; в — мезонефрос; 7 — мезодерма боковой пластинки;
8 — аорта; 9 — хорда; 10 — боковая линия; 11 — эктодерма;
12 — мезенхима; 13 — кишка.

Мезодерма. Под нервной трубкой расположена хорда, которая представляет

собой проходящий вдоль всего тела опорный стержень, образованный вакуолизиро-
ванными клетками. Вентральнее хорды лежит аорта. По обе стороны от нервной
трубки и хорды располагается параксиальная мезодерма. В ходе развития эта мезо­
дерма сегментируется на метамерно расположенные сомиты. Каждый сомит подраз­
деляется на склеротом, дерматом и миотом. Клетки склеротома дифференцируют­
ся как хондробласты и дают начало хрящам осевого скелета животного. Дерматом
служит источником развития соединительной ткани дермы. Миотом представляет
собой зачаток поперечно-исчерченной мускулатуры.
Вентральнее миотома по обе стороны от эктодермальной кишки располагают­
ся мезодермальные боковые пластинки. Латеральная мезодерма образует целомиче­
скую полость тела. Она подразделяется на внешний, лежащий под покровным эпите­
лием, париетальный листок (соматическая мезодерма) и внутренний, граничащий с
кишкой, висцеральный листок (спланхническая мезодерма). Париетальный листок
вместе с эпидермисом называют соматоплеврой, а висцеральный листок вместе с эн-
тодермальным эпителием — спланхноплеврой. Париетальный листок служит источ­
ником поперечно-исчерченной мускулатуры, а висцеральный листок — источником
гладкой мускулатуры и мезентерия. Между сомитами, представляющими дорсаль­
ную часть мезодермы (эпимер), и боковой пластинкой (гипомер) расположена про­
межуточная мезодерма (мезомер). Промежуточная мезодерма служит источником
формирования половой и выделительной системы, которая у амфибий представлена
на разных стадиях пронефросом и, позднее, мезонефросом.
Развитие конечности. Как у всех Tetrapoda, конечности у амфибий заклады­
ваются в виде четырех зачатков (рис. 12-19). Первым морфологическим признаком
закладки конечности служит скопление мезенхимы, которая образуется за счет от­
дельных клеток, выселившихся из париетального листка боковой мезодермальной
пластинки. Вскоре это скопление становится видимым с внешней стороны — сна­
чала как небольшое вздутие, которое постепенно, по мере накопления мезенхимы,
увеличивается в размерах и становится почкой конечности. Другим источником ме-

223
 Рис. 12-19. Последовательные стадии
формирования почки конечности у амфи­
бий (по: Balinsky, 1981).
А — стадия скопления мезенхимы на бо­
ковой поверхности тела зародыша; Б — об­
разование почки конечности. 1 — спинной
мозг- 2 — хорда; 3 — пронефрос; 4 — ме­
зенхима зачатка конечности; 5 — париеталь­
ный листок мезодермы; 6 — висцеральный
листок мезодермы; 7 — почка конечности.

зенхимы почки конечности служат сомиты. Выселяющаяся из сомитов мезенхима

впоследствии образует мышечные элементы конечности, тогда как мезенхима пари­
етального листка дает хондрогенные клетки. Наконец, третьим источником м�