БИОЛОГИЯ РАЗВИТИЯ

Том 1 Начала
сравнительной
эмбриологии

А. К. ДОНДУА

' ИЗДАТЕЛЬСКИЙ ДОМ

САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО ,
ГОСУДАРСТВЕННОГО
УНИВЕРСИТЕТА
Г1 1J
'
 А. К. Дондуа

БИОЛОГИЯ РАЗВИТИЯ

Том I

Н А Ч А Л А СРАВНИТЕЛЬНОЙ
ЭМ БРИОЛОГИИ

Рекомендовано Ученым советом Санкт-Петербургского

государственного университета в качестве учебника для студентов
университетов, обучающихся по направлению «Биология» и
биологическим специальностям

Издательство С.-Петербургского университета

2005
ББК 28.63
Д67

Рецензенты: докт. биол. наук Л. В. Белоусос (Моек гос. ун-т им. М. В. Ломоносова), докт. биол.
наук С. Г. Васецкий, докт. биол. наук В. И. Миташов (Ин-т биологии развития
им. Н. К. Кольцова, РАН)

Печатается по постановлению
Редакционно-издательского совета
С.-Петербургского государственного университета

Дондуа А . К .
Д67 Биология развития: Учебник. В 2 т. Т. 1: Начала сравнительной эмбрио­
логии. — СПб.: Йзд-во С.-Петерб. ун-та, 2005. — 295 с.
ISBN 5-288-03472-9 (Т. 1),
ISBN 5-288-03474-5
В первом томе учебника рассматриваются вопросы общей и сравнительной эмбриоло­
гии. Дается краткий очерк истории становления современной эмбриологии, рассматрива­
ются проблемы гаметогенеза, оплодотворения, дробления, гаструляции, зародышевых лист­
ков, прямого и личиночного развития, метаморфоза. Излагаются данные по сравнительной
эмбриологии губок, стрекающих, гребневиков, аннелид, моллюсков, круглых червей, чле­
нистоногих, иглокожих, оболочников, бесчерепных, низших и высших позвоночных.
Учебник предназначен для студентов биологических факультетов университетов, пре­
подавателей биологии средней школы и всех интересующихся проблемами эмбриологии.

Б Б К 28.63

© А. К. Дондуа, 2005
ISBN 5-288-03472-9 (Т. 1), © Издательство С.-Петербургского
ISBN 5-288-03474-5 университета, 2005
 ОГЛАВЛЕНИЕ

От автора. . ........... 5
От описательной эмбриологии к биологии развития......... 6

Часть I. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А О С Н О В Н Ы Х Э Т А П О В
И Н Д И В И Д У А Л Ь Н О Г О Р А З В И Т И Я ........................................................... 19
Глава 1. Гаметогенез..........................................................................................................
1.1. Сегрегация линии половых клеток. Первичные половые клетки....... 23
1.2. Гонии . . . . .................................................................... 31
1.3. Мейоз........... ...................................................................... 32
1.4. Оогенез .. ......................................................................................................... 34
1.5. Сперматогез ............................................................................................... 49
Глава 2. Оплодотворение.......................... .............................................................................. 59
Глава 3. Дробление.............................................................................................................. ....... 79
Глава 4. Гаструляция. Зародышевые листки............................. 99
Глава 5. Личиночное развитие. Метаморфоз......................................................................... 104

Часть II. О С Н О В Н Ы Е Т И П Ы Р А З В И Т И Я Ж И В О Т Н Ы Х .................. 113

Глава 6. Губки (Porifera)................................... ................................................ 116
Глава 7. Двуслойные (Diploblastica)............................. .............................................. 125
7.1. Стрекающие (Cnidaria) . . . ......................
7.2. Гребневики (Ctenophora) 132
Глава 8. Билатеральные. Lophotrochozoa........................... 139
8.1. Спиральные (Spiralia)................................................................................................
8.2. Щупальцевые (Lophophorata).............................................. ...................... 153
Глава 9. Билатеральные. Ecdysozoa................... 157
9.1. Круглые черви (Nematoda).....................................................................................
9.2. Членистоногие (Arthropoda)................................................................................. 161
Глава 10. Deuterostomia. Иглокожие (Echinodermata). 185
Глава 11. Deuterostomia. Низшие хордовые............................................................................ 196
11.1. Оболочники (Tunicata).......................................................................................... —
11.2. Головохордовые, или Бесчерепные (Cephalochordata, Acrania)................. 203
Глава 12. Deuterostomia. Низшие позвоночные (Anamnia)................................................ 209
12.1. Круглоротые (Cyclostomata). Минога................................................................ 210

3
 12.2. Амфибии (Amphibia)............... 21]
12.3. Костистые рыбы (Teleostei)...................................... 226
Глава 13. Deuterostomia. Высшие позвоночные (Anamnia) .................. 237
13.1. Рептилии и Птицы (Sauropsida) 238
13.2. Млекопитающие (Mammalia) . 251
Глава 14. Онтогенез и эволюция .. 266
Предметный указатель.................................................................................................................. 278
 От автора

Сложилось абсолютно неоправданное несоответствие между блестящими дости­

жениями науки в области биологии развития и скудостью учебной литературы на
русском языке, призванной дать представление о современном состоянии этой ин­
тенсивно развивающейся отрасли биологии. Достаточно сказать, что для изучения
биологии развития российским студентам рекомендуется трехтомный учебник Скот­
та Гилберта, который был переведен в 1990-х годах с первого издания этой замеча­
тельной книги, выдержавшей к настоящему времени семь переизданий, каждое из
которых вносило существенные изменения и дополнения.
В основу настоящего учебника положен курс лекций по биологии развития, кото­
рый читался автором в течение ряда лет на биолого-почвенном факультете Санкт-
Петербургского университета. С учетом того, что с 2003 года учебным планом
СПбГУ предусмотрено чтение двух курсов— «Основы сравнительной эмбриологии»
и «Биология развития», казалось целесообразным материал нового учебника по био­
логии развития представить в виде двух томов. В первом томе рассматриваются
преимущественно проблемы сравнительной эмбриологии. Во втором томе главное
внимание будет уделено механизмам, лежащим в основе индивидуального развития,
и прежде всего молекулярно-биологическим аспектам управления развитием.
Автор приносит глубокую признательность Т. Ф. Андреевой, JI. В. Белоусову,
С.Г. Васецкому, Е.Р. Гагинской, А. В. Ересковскому, В.И. Ефремову, С. М. Ефре­
мовой, Р. П. Костюченко, Ю . В. Мамкаеву, В. И. Миташову, А. П. Перевозчикову,
Д. Г. Полтевой, О. Г. Строевой за весьма полезное обсуждение содержания, за кри­
тические замечания и пожелания, которые автор постарался учесть при подготовке
рукописи к печати. Естественно, найти согласие по всем затронутым в книге вопро­
сам невозможно. Автор отдает себе отчет в том, что его точка зрения иногда может
показаться субъективной. Можно лишь надеяться на то, что в недалеком будущем
появятся новые книги, авторы которых раскроют свое видение непростых и живо­
трепещущих проблем биологии развития. Автор будет признателен всем и в первую
очередь студентам, которым эта книга предназначается, за критические замечания
по ее содержанию и оформлению.

5
 ОТ ОПИСАТЕЛЬНОЙ ЭМ БРИ ОЛОГИ И
К Б И О Л О ГИ И Р А З В И Т И Я

Эмбриология, если формально следовать за термином, это наука о зародышах и

зародышевом развитии. Действительно, греческое слово эмбрион (ejippucov) означа­
ет нечто растущее внутри оболочек, чрева и т. п. Однако эмбриология никогда не
ограничивала себя столь узкими рамками. Реальное ее содержание состоит в изу­
чении морфогенетических процессов на разных этапах индивидуального развития
независимо от того, является ли это развитие следствием полового или бесполого
размножения. Существенным разделом эмбриологических исследований всегда бы­
ли морфогенетические процессы, происходящие и в ходе регенерации органов жи­
вотных. Можно сказать, что основная задача современной эмбриологии состоит в
изучении механизмов морфогенеза и их эволюции.
Специфика биологии развития состоит в том, что она рассматривает формообра­
зовательные процессы в четырех измерениях: не только в пространстве, но и во вре­
мени. Важно при этом иметь в виду, что эмбриология имеет дело главным образом
с ациклическими, неповторяющимися явлениями, так что процесс индивидуального
развития представлен последовательным радом этапов или стадий. Каждая стадия
отличается своими специфическими функциями и создает предпосылки для следу­
ющих этапов развития. Половому размножению животных предшествует период,
в течение которого происходит гаметогенез, т. е. образование специализированных
мужских и женских половых клеток. Роль женских половых клеток в предопреде­
лении свойств зародыша столь велика, что формирование женских гамет иногда на­
зывают проэмбрионалъным развитием. Эмбриональное развитие начинается после
оплодотворения, которое создает предпосылки для образования многоклеточного
зародыша. Возникающая в ходе дробления яйца многоклеточность создает предпо­
сылки для дифференциации клеток. По завершении дробления клетки зародыша
приобретают способность к двигательной активности. Благодаря этому становят­
ся возможными разнообразные морфогенетические движения клеток и клеточных
пластов. Морфогенетические процессы, в ходе которых формируются зачатки заро­
дыша, скоординированы в пространстве и во времени с процессами пролиферации
и дифференциации клеток.
Индивидуальное развитие возможно лишь благодаря координации элементарных
процессов, лежащих в основе онтогенеза, а именно благодаря интеграции клеточно­
го размножения, клеточной дифференциации и морфогенетических движений. Пе­
ред современной эмбриологией стоит колоссальной сложности задача — не только
изучить механизмы, лежащие в основе элементарных составляющих процесса инди­

6
видуального развития, но и выяснить закономерности их соподчинения в условиях
динамической смены частных программ развития, действующих на разных этапах
онтогенеза.
Отличительной особенностью современной эмбриологии является ее интегратив­
ный характер. Понимание закономерностей развития организма может быть достиг­
нуто только при синтезе морфологических, молекулярно-биологичеких, генетиче­
ских и эволюционных подходов. Интегративный характер современной эмбриологии
подчеркивается ее новым наименованием. Эмбриология наших дней это не просто
наука о развитии, это биология развития. Новое название подчеркивает вместе с
тем, что в круг интересов этой новой отрасли биологии входят все явления, связан­
ные с развитием формы и функции. Если эмбриология родилась как особая дис­
циплина в результате ветвления единого ствола зоологической науки, то биология
развития как наука о движущих силах развития возникла благодаря интеграции
подходов всех отраслей биологии, изучающих живую материю на разных уровнях
ее организации.
Современная биология развития ведет интенсивные исследования молекуляр­
ных, биохимических и генетических механизмов различных формообразовательных
процессов, активно изучает особенности субклеточной и клеточной организации за­
родышей. Естественно, что не утратили своего значения гистологические и анатоми­
ческие исследования. Безусловную актуальность сохраняют исследования эволюции
онтогенеза и прежде всего исследования эволюции механизмов онтогенеза. Это но­
вое направление — эволюционная биология развития — в англоязычной литературе
получило сокращенное наименование «Evo-Devo».
Нетрудно заметить, что онтогенез имеет выраженное внутреннее противоречие.
Действительно, он отличается (во всяком случае, на ранних этапах) высокой сте­
пенью динамизма, постоянной сменой одних состояний другими. Однако при рас­
смотрении развития животных в ряду поколений обнаруживается высокая консер­
вативность организации индивидуального развития особи данного вида, благодаря
которой и возможна преемственность поколений. Отсюда следует, что должен суще­
ствовать некий механизм, который обеспечивает в ряду поколений передачу способ­
ности к развитию идентично организованных во времени и пространстве структур.
Любая теория, претендующая на объяснение индивидуального развития, должна
найти решение этой проблемы. История эмбриологии на протяжении последних трех
столетий в теоретическом плане, по существу, является историей соотношения двух
основных идей, претендовавших на объяснение природы консерватизма и развития
в эмбриогенезе.
Преформизм и эпигенез, В XVII- XVIII вв. сложилось убеждение, что в поло­
вых клетках животных уже имеются предобразованные, преформированные, струк­
туры. Сущность формирования зародыша состоит, согласно этим взглядам, в уве­
личении размеров и в уплотнении изначально имеющихся структур. Преформисты
полагали, что органы будущего индивидуума предобразованы (буквально — пред­
начертаны; теория пределинеацин, от лат. ргае — впереди; linea — линия, черта) в
миниаиоре либо в яйце, либо в сперматозоиде. Сторонники первой точки зрения —
овисты обосновывали свои взгляды известными в то время фактами партеногене­
за, девственного развития без осеменения (Бонне, 1740); сторонники второй — ани­
малькулисты находили подтверждение своим взглядам в структуре спермия. На­
блюдения над биологией размножения вольвокса, тлей и других организмов, с одной

7
стороны, и логика преформизма, с другой, явились основанием теории вложений,
согласно которой в половых клетках прародительской формы должны быть струк­
турно оформлены все последующие генерации животного. Теория вложений была
прекрасным, хотя и абсурдным, с современной точки зрения, объяснением единства
развития и наследуемости.
Период расцвета преформистских идей закончился в результате накопления фак­
тов, которые не укладывались в рамки этой теории. Главными источниками этих
противоречащих преформизму данных были тератология, генетика и эмбриология.
Так, основатель экспериментальной тератологии Сент-Иллер и его последователи
убедились в том, что при определенных воздействиях на развивающийся организм
структура возникающих органов существенно отличается от «предначертанных».
Образующиеся при скрещивании промежуточные формы, несущие и материнские
и отцовские признаки, будь то метисы или гибридные формы табака (Кельрейтер,
1766), также не могли найти объяснения в рамках наивного преформизма.
Наконец, данные эмбриологии, свидетельствующие о разной скорости развития
различных систем органов или об изменениях положения органа в ходе индиви­
дуального развития, делали все более привлекательной идею эпигенеза, согласно
которой структуры р .редобразованы, а возникают заново.
Надо заметить, что первая формулировка эпигенетической теории развития при­
надлежит великому Аристотелю, жившему в IV веке до нашей эры. Аристотель,
который по праву может считаться первым эмбриологом и которому принадлежит
первое научное описание развития куриного зародыша, полагал, что форму развива­
ющегося зародыша создает особая сила - - энтелехия, присущая мужскому семени,
тогда как материалом, подвергающимся действию энтелехии, служит кровь (у чело­
века - менструальная кровь). Для всех эпигенетических теорий (термин «эпигенез»
был предложен Вильямом Гарвеем в XVII столетии) вопрос о загадочной «движу'-
щей силе» эмбрионального развития представлял наибольший интерес.
В основополагающем труде, посвященном развитию
куриного эмбриона, Каспар Фридрих Вольф (1734-1794)
(рис. 1), впоследствии член Петербургской академии, в
1759 году на основании тщательного описания анатоми­
ческих изменений зародыша строго доказал, что кишеч­
ная и нервная трубки возникают путем сворачивания
или выпячивания клеточных пластов с последуюхцим их
обособлением. Эти прямые наблюдения не оставляли и
тени сомнения в иллюзорности идей преформизма: в ин­
дивидуальном развитии организма происходит реальное
формообразование. Что касается механизма этого фор­
мообразования, то, подобно Аристотелю, Вольф зашиф­
ровывает его в термине vis essentialis — «существенная
сила».
Рис. 1. Каспар Фридрих Аналогичная идея развивалась современником Воль-
Вольф (1734-1794). ф а Иоганном Влюменбахом (1742-1840), который объ­
яснял морфогенетические процессы, наблюдаемые при
регенерации гидры, действием «формообразовательного импульса» — Bildungstrieb,
или nisus formativus. Согласно Блюменбаху, эпигенез направляется преформиро-
ванной в половых клетках «силой развития», которая может рассматриваться как
некая инструкция, предопределяющая морфогенез зародыша. Если это так, то ключ
к пониманию явления развития состоит в раскрытии природы этих «инструкций».
Нетрудно заметить, что такого рода идеи, высказанные во второй половине XVIII
столетия, являются своего рода логическим предвосхищением современных пред­
ставлений о механизмах индивидуального развития.
История эмбриологии, в известном смысле, это история поисков объяснения
сочетания консервативного начала индивидуального развития, которое проявля­
ется в постоянстве типа развития, и эпигенеза — развития разнообразных струк­
тур из недифференцированного яйца. В течение ряда столетий, на протяжении
которых идет этот поиск, высказано немало интересных идей и теорий. Согласно
JI. В. Белоусову (1987), все их многообразие подразделяется на несколько групп. Бе­
лоусов выделяет пять ведущих идей, или принципов, лежащих в основе объяснения
причин развития, а именно целевой, или финалистический, типологический, исто­
рический, каузально-аналитический и, наконец, синергетический.
Финалистический принцип. В соответствии с финалистическим принципом
(Аристотель, 384-322 до н.э.) процесс развития определяется целью финалом, к
которому он направлен: зачаток органа закладывается потому, что данный орган
обязательно должен быть у взрослой особи. Этот принцип объяснений из небиоло­
гического естествознания изгнан как ненаучный еще в XVII веке (Фрэнсис Бэкон,
1561-1626). В эмбриологии же он в определенной мере сохраняет свои позиции, под­
черкивая предопределенность индивидуального развития.
Типологический принцип. Этот принцип объясняет то или иное направле­
ние развития и н д и в и д у у м о в особенностями типа животных, к которому они отно­
сятся. Основываясь на этом принципе, можно предсказать некоторые особенности
эмбриогенеза исследуемого объекта. Например, фундаментальной чертой развития
позвоночных является закладка жаберных щелей. Можно смело предсказать, что у
зародыша птицы, эмбрионы которой никогда не описывались, жаберные щели обя­
зательно появятся на строго определенной стадии развития.
Разрабатывая проблему организации онтогенеза,
Карл фон Бэр (1792-1876) (рис. 2), прародитель совре­
менной эмбриологии, установил, что каждый морфоло­
гический тип животных (по Кювье, четыре типа: По­
звоночные, Членистые, Мягкотелые и Лучистые) име­
ет свой особый план развития. При этом Бэр сформу­
лировал закон эмбриональной дивергенции, согласно ко­
торому общее для данного типа образуется в эмбриоге­
незе раньше, чем специальное. Сначала закладываются
признаки, характерные для всех без исключения пред­
ставителей данного типа, затем более частные и лишь
в последнюю очередь специальные. Обнаруженный Бэ­
ром принцип развития от общего к частному сохраняет
в полной мере свое значение и в наше время. Им же по­
стулирован и закон зародышевого сходства, согласно ко- Рис- КаРл Максимович
й , Бэр (1792 1876).
торому эмбрионы высшей формы данного типа никогда v
не походят на другую форму взрослого животного, но только на ее зародыш.
Исторический принцип. Важное место (и по затратам труда, и по достигну­
тым результатам) в объяснении движущих сил онтогенеза занимает исторический

9
 принцип, который был сформулирован прежде всего
в трудах Чарльза Дарвина (1809-1882), Фрица Мюл­
лера (1821-1897) и Эрнста Геккеля (1834 1919). Сущ­
ность этого принципа состоит в том, что ход онтоге­
неза, последовательность его стадий определяется ис­
торией происхождения вида, особенностями его эволю­
ции. С этой точки зрения эмбриональная дивергенция,
отмеченная Бэром, отражает’ дивергенцию соответству­
ющих видов в ходе эволюции, а общность зародышей
разных видов обусловлена общностью происхождения
этих видов. Зародыши рассматриваются как «потуск­
невший портрет» прародителя, так что па основании
данных о строении зародыша можно судить о пред-
„ „ Л ,
ги с. 3. Александр Онуфриевич
ках данного
^
животного. Примером такого родах ^
«ре-
х
Ковалевский (1840-1901). ставрации» могут служить исследования эмбриологии
асциднй, выполненные А. О. Ковалевским (1866, 1871)
(рис. 3), которые показали существование хорды у личинки асцидий, что позволило
установить истинное положение асцидий в системе.
Одним из редких примеров довольно полной рекапитуляции филогенеза может
служить исследованное Ф. Мюллером развитие пальмового вора Birgus latro, веду­
щего наземный образ жизни ракообразного, близкого к ракам-отшельникам. Эм­
бриональное и личиночное развитие этого животного происходит в морской среде.
После выхода из яйцевых оболочек свободноплавающей личинки зоэа и прохожде­
ния нескольких линек формируются молодые рачки с мягким изогнутым брюшком,
которое они подобно ракам-отшельникам прячут в раковину моллюска. Следующий
этап развития связан с выходом на сушу и соответствует филогенетической стадии
наземных раков-отшельников. На де­
финитивной стадии подгибание брюш­
ка исчезает, и индивидуум приобрета­
ет свойства и черты пальмового вора.
Таким образом, как полагают, онтоге­
нез этих животных очень полно повто­
ряет (рекапитулирует) филогенез дан­
ного вида, причем рекапитулируют не
только морфологические особенности
предковых форм, но и их инстинкты,
характер питания и др.
В 1866 г. Эрнст Геккель (рис. 4)
сформулировал бгюгенетический за­
кон, согласно которому онтогенез есть
краткое повторение филогенеза.. По
мнению Э. Геккеля, филогенез — это
«механическая причина» онтогенеза.
Отдавая должное плодотворности ис­
торического метода изучения эмбрио­
генеза, нельзя не заметить, что по­
Рис. 4. Эрнст Геккель (1834-1919). следнее утверждение абсолютизирует

10
роль исторического фактора и, по существу, отвергает причинный (каузальный)
анализ реальных механизмов онтогенеза. Для современного исследователя очевид­
на ограниченност ь «закона» Геккеля. Ясно, что онтогенез в принципе не может быть
кратким повторением филогенеза, так как сущность филогенеза состоит в форми­
ровании все новых и новых генотипов, правомочность существования которых опре­
деляется естественным отбором, тогда как онтогенез— это всего лишь реализация
потенций существующего генотипа.
К утверждению о том, что онтогенез — это краткое повторение филогенеза, мож­
но относиться лишь как к метафоре. Этот тезис идеализирует ситуацию, даже ес­
ли онтогенез рассматривать с сугубо морфологической точки зрения. Действитель­
но, обычно речь идет о рекапитуляции не всего онтогенеза, а лишь каких-либо от­
дельных признаков. Начиная с Э. Геккеля, различают налингенетические (от греч.
itaXiv - снова, опять; yeveaic; — творение, происхождение) и ценогенетические (от
греч. xaivoc — новый) признаки (структуры). К первым относятся структуры, обра­
зование которых рекапитулирует органы предковых форм (например, хорда, жабер­
ные щели у позвоночных), ко вторым — новоприобретенные структуры и признаки,
дающие зародышу возможность приспособиться к условиям среды, в которой про­
исходит развитие данного вида,— амнион, желточный мешок, аллантоис и др.
Сфера применения биогенетического закона для восстановления филогенетиче­
ских отношений ограничивается также различного рода гетерохрониями — измене­
ниями в ходе эволюции времени закладки органов. При этом различают задержку,
или ретардацию (от лат. retardatio — замедление) и ускорение, или акселерацию (от
лат. acccleratio — ускорение) закладки и развития органов. Аналогичное действие
оказывают и гетеротопии, т. е. изменения области тела., в которой происходит за­
кладка. органа у данного вида сравнительно с предковой формой. Парадокс состоит
в том, что эти «затемняющие» биогенетический закон явления и составляют зна­
чительную часть эволюционных преобразований, лежащих в основе филогении жи­
вотных.
Исследования, опирающиеся на исторический принцип анализа движущих сил
онтогенеза, сыграли важную роль в развитии современной эмбриологии. Они дали
целый ряд крупных для своего времени теоретических обобщений, таких как теория
зародышевых листков, теория происхождения многоклеточности у животных, тео­
рия филэмбриогепезов (подробнее см. гл. 14) и др., ко­
торые в известной мере сохранили свою актуальность
до наших дней, хотя и нуждаются в критическом пе­
реосмыслении с учетом современных данных биологии
развития.
Неоценимая роль идей эволюционизма состояла и в
том, что они дали мощный стимул дальнейшему разви­
тию описательной эмбриологии. Именно во второй по­
ловине XIX столетия описательная эмбриология откры­
ла поразительное разнообразие форм эмбрионального
развития и создала материальную основу эмбриологии
как науки. В развитии сравнительной и эволюционной
эмбриологии выдающуюся роль сыграли многие рос­
сийские исследователи, такие как А. О. Ковалевский, Рис 5 Шья Ильич Мечников
И. И. Мечников (рис. 5), К. Н. Давыдов, А. Н. Северцов, (1845-1901).

11
 П. П. Иванов (рис. 6) и др. Описательная, или сравни­
тельная эмбриология в полной мере сохраняет свое зна­
чение и в наши дни. Современная описательная эмбрио­
логия располагает мощным и разнообразным арсена­
лом микроскопической техники, включая методы уль-
траструктурного анализа.
Важным направлением описательной эмбриологии,
отчасти роднящим ее с экспериментальной эмбриоло­
гией, были исследования, ставившие своей целью про­
следить движения клеток и клеточных пластов эмбри­
она. Используя методы витального окрашивания или
иные способы мечения зачатков, исследователи полу­
чили возможность следить за судьбой этих зачатков, за
Рис. 6. Петр Павлович
перемещениями клеток по зародышу, существенно обо­
Иванов (1878-1942) — гатив таким образом арсенал методов описания разви­
основатель Петербургской тия. В. Фогт и его школа, впервые использовавшие ме­
школы сравнительной и тод маркирования клеток в 1930-х годах, создали карты
эволюционной эмбриологии.
презумптивных (от лат. praesumptio — предположение)
зачатков зародышей амфибий, проследив, какие органы возникают из тех или иных
областей бластулы. Метод маркирования с использованием радиоактивных меток
или флуоресцентных красителей широко используется и в современной эмбриоло­
гии. Вершин своего развития этот метод достиг при использовании генетическо­
го маркирования, которое предполагает трансплантацию зачатков, клетки которых
легко обнаруживаются благодаря своей генетической природе и особому антигенно­
му составу.
При всей важности и плодотворности исторического принципа нельзя не заме­
тить, что при таком подходе поиск движущих сил эмбриогенеза в лучшем случае
выносится за пределы развивающегося индивидуума, в филогенез. Внутренние при­
чины и реальные механизмы контроля над клеточной репродукцией, дифференци­
ацией и морфогенезом остаются вне внимания исследователей. Уязвимость этого
подхода состоит и в том, что исследователи, сосредотачиваясь на анализе морфо­
логии, пытаются найти ключ к пониманию развития структур без учета истории
становления и преобразования молекулярных и генетических механизмов этого раз­
вития. И если этот разрыв между структурой и механизмом ее развития объективно
существовал во второй половине XIX столетия, когда биология клетки и генетика
находились в зачаточном состоянии, то в наше время очевидно, что эволюцию инди­
видуального развития можно понять только при условии ясного представления об
эволюции его молекулярно-генетических механизмов. Современная эволюционная
эмбриология переживает естественный кризис, который, несомненно, будет преодо­
леваться по мере становления эволюционной биологии развития.
Каузально-аналитический принцип. Открывшаяся, как полагали во второй
половине XIX столетия, возможность воссоздания эволюционного древа Metazoa
на основе биогенетического закона, явилась мощным стимулом для сравнительно­
эмбриологических исследований. Благодаря этому был накоплен огромный факти­
ческий материал, в том числе и характеризующий особенности раннего эмбриоге­
неза. Эти данные заложили основу для понимания роли ядра и цитоплазмы в про­
цессах индивидуального развития и в жизни клетки вообще. Именно изучение про­

12
цессов гаметогенеза, оплодотворения и дробления у разных животных во многом
способствовало формированию представлений о хромосомах и ядре как носителях
наследственных свойств.
Первое описание кариокинеза было сделано немец­
ким зоологом Антоном Шнейдером в 1873 году при ис­
следовании дробления у некоторых плоских червей. В
1874 году Отто Бючли описал веретено деления дробя­
щихся яиц круглых червей и моллюсков. В 1882 году
вышел в свет классический труд Вальтера Флемминга
(1843-1905), в котором дается близкое нашим современ­
ным представлениям описание клеточных делений. Ис­
следование бельгийского биолога Эдуарда ван-Бен . дена
(1845-1910) дробления у лошадиной аскариды позволи­
ло ему сделать заключение о постоянстве числа и фор­
мы хромосом. В 1875 году Оскар Гертвиг (1849-1922)
(рис. 7) установил, что сущность оплодотворения состо­
ит в слиянии клеточных ядер сперматозоида и ооцита.
Рис. 7. Оскар Гертвиг
Именно в эти годы была открыта, редукция числа хро­ (1849-1922).
мосом при гаметогенезе и восстановление диплоидности
при оплодотворении. Все более убедительным становилось представление о ядре как
носителе наследственных свойств (Гертвиг, 1884). К концу столетия стало очевид­
ным, что «удивительная формативная энергия зародыша не поступает в него извне,
но является врожденным свойством яйца, унаследованным от родителей» (Эдмунд
Вильсон, 1856-1939).
Поскольку начинающий свое развитие организм представлен одной клеткой,
естественны попытки эмбриологов конца XIX столетия выяснить, какую роль в про­
цессах индивидуального развития играют основные элементы клетки — цитоплазма
и ядро. Среди исследователей, пытавшихся при построении теории развития опе­
реться на процессы, происходящие в самом зародыше, заметное место занимает
Вильгельм Гис (1831-1904). Гис был активным противником представлений Геккеля
о значении истории вида для эмбриогенеза. Он считал, что эволюционная теория
не только ничего не дает для понимания проблемы развития зародыша, но просто
запутывает ее. Гис сформулировал принцип органообразующих областей зародыша,
каждая из которых связана с развитием определенных органов индивидуума. Он
отвергал преформистские идеи прелокализации структур или специфического стро­
ительного материала, но тем не менее полагал, что цитоплазма, яйца имеет некую
пространственную организацию. Представление Гиса о зиготе как о специализи­
рованной клетке с особым распределением материальных субстанций, важных для
детерминации судьбы зачатков зародыша, легли в основу последующих исследова­
ний, которые действительно выявили в яйце особые цитоплазматические факторы
формообразования (подробнее см. гл. 3).
Важную роль в становлении эмбриологии как науки сыграла, теория зародыш,е-
вой плазмы Августа. Вейсмана (1834-1914) (рис. 8 ). Эта теория была., по существу,
первой научной попыткой объединить явления индивидуального развития и наслед­
ственности. Согласно этой теории (1883), хромосомы содержат особую плазму, или
идиоплазму (от греч. i6io c— особый), которая представляет собой совокупность на­
следственных факторов. Эти факторы, или ядерные детерминанты дискретны. Они

13
 контролируют выработку разных веществ, определя­
ющих свойства цитоплазмы. При дроблении яйца и
расхождении хромосом ядерные детерминанты рас­
пределяются неравномерно между дочерними клетка­
ми. Поскольку их воспроизведение, по Вейсману, не
является обязательным, клетки дробящегося зароды­
ша получают разные детерминанты, вследствие чего
происходит их дифференциация (рис. 9). Идея о кле­
точной дифференциации как следствии неравномер­
ного распределения ядерных детерминант диктовала
необходимость раннего обособления линии половых
клеток («зародышевый путь»), которые для поддер­
жания преемственности поколений должны сохранять
полный набор детерминант данного вида животного.
fu c . 8. Август ьеисман
(1834-1914).
Из теории Вейсмана вытекали два важных следствия.
Фотография любезно предо­ Одно из них состояло в признании принципиальной
ставлена проф. К. Зандером. невозможности наследования признаков, приобретен­
ных соматическими клетками, другое — в утвержде­
нии, что зародыш животного уже на ранних стадиях своего развития представляет
собой мозаику клеток с различными наследственными факторами. Как известно в
настоящее время, централь­
ный постулат теории Вей­
Линия
смана о неравнонаследствен­
половых ных делениях не соответству­
клеток ет действительности Вме­
сте с тем идея о генети­
ческом «неравенстве» диф­
ференцирующихся клеток са­
ма по себе оказалась плодо­
творной и привела в итоге
к открытию функциональной
Линия регуляции активности генов
соматических
клеток как предпосылки детермина­
ции и дифференциации кле­
ток. Следует заметить, что
А.
титезы своей теории допус­
кал и принципиально иную
Рис. 9. Схема, иллюстрирующая идею А. Вейсмана о
неравнонаследственном делении как основе процессов возможность, а именно, что
дифференциации: в линии половых клеток сохраняются все эмбриональная дифференци­
наследственные факторы, в линиях соматических клеток ация может быть обусловле­
происходит их дифференциальное распределение. на межклеточными взаимо­
действиями, что впоследствии привело к открытию явления эмбриональной ин­
дукции.
Наряду с теоретической разработкой проблемы факторов индивидуального раз­
вития 1880-е годы ознаменовались возникновением новой отрасли — эксперимен­
тальной эмбриологии. Основоположником этого направления по праву считается

14
Вильгельм Ру (1850-1924) (рис. 10) Ру дал концеп­
туальное обоснование необходимости создания меха­
ники развития как науки о движущих силах ин­
дивидуального развития, основанной на каузалыю-
аналитическом подходе к исследованию онтогенеза.
Предметом каузально-аналитического направления, с о ­
средоточенного на изучении «непосредственных» при­
чин развития, стало осмысление роли в процессах диф­
ференциации физических и химических факторов, яд­
ра и цитоплазмы, взаимодействий между клетками и
зачатками зародыша. Для этого направления характер­
но стремление разложит! сложные процессы развития
на элементарные события и выяснить причинную связь
между ними. В таких исследованиях широко использу­
ется воздействие на зародыш — общее или локальное-- рис ю Вильгельм Ру
различными химическими и физическими факторами с (1850-1924).
целью усилить или подавить какие-то события и таким образом установить их зна­
чение в эмбриогенезе. Экспериментальная эмбриология, исповедующая каузально­
аналитический принцип j широко использует разного рода преднамеренные наруше­
ния естественных святей между' клерками и зачатками органов методами микрохи­
рургии. В частности, применяются всевозможные трансплантации, или пересадки
за .атков в несвойственные им, или эктопические области тела. Различают гомо- и
гетеротрансплантации в зависимости от того, пересаживается зачаток реципиенту
того же вида, что и донор, или же реципиенту другого вида. При прослеживании
с у д ь б ы изолированного зачатка часто используют методы эксплантации in vitro.
Удаление, или экстирпация зачатка применяется в тех случаях, когда исследуется
значение этого зачатка для нормального морфогенеза.
Для понимания роли межклеточных взаимодействий широко используется дис­
социация зародыша или его органов на клетки и, наоборот, агрегация клеток разных
типов в единую систему. Наряду с экстирпацией применяется локальное уничтоже­
ние клеток путем облучения рентгеновскими, ультрафиолетовыми или лазерными
лучами, а также специфическое «выключение» функций с помощью разного ро­
да ингибиторов. На современном этапе развития экспериментальная эмбриология
сохраняет свою принципиальную установку на раскрытие причинно-следственных
отношений между' различными событиями, наблюдаемыми в индивидуальном раз­
витии. В ее арсенале появились не только модификации старых аналитических при­
емов с более высокой степенью разрешения, но и методики, позволяющие экспери­
ментатору вмешиваться непосредственно в транскрипционную активность генома,
контролировать и регулировать ее.
Исследования изменений потенций клеток в раннем развитии, открывшие путь
к пониманию механизма клеточной дифференциации, на долгое время стали одной
из центральных задач эмбриологии. Представление о мозаичном характере дробле­
ния, которое предполагалось Гисом и постулировалось теорией Вейсмана, вытека­
ло также из опытов Вильгельма Ру. Ру установил, что плоскость первого деления
дробления у лягушки обычно соответствует медиальной плоскости, которая делит
зародыш на две симметричные - левую и правую - части. Прижигая один из двух
бластомеров раскаленной иглой, Ру обнаружил, что из неповрежденного бластоме­

15
ра, сохранявшего контакт с убитым, развивалась половинная нейрула. Из этих опы­
тов он сделал вывод, что зародыш лягушки представляет собой мозаику способных
к автономной дифференциации частей, поскольку уже на стадии двух бластомеров
каждая клетка снабжена специфическими неидентичными детерминантами.
Уверенность в правильности или, по крайней ме­
ре, в универсальности мозаичной теории Вейсмана — Ру
была поколеблена экспериментами Ганса Дриша (1867
1941) (рис. 11), который изолировал бластомеры дро­
бящегося яйца морского ежа или, сдавливая дробяще­
еся яйцо, добивался смещения бластомеров в несвой­
ственное им положение. Дриш показал, что изолирован­
ные бластомеры способны к формированию нормаль­
ных животных. После изоляции бластомеров на ста­
дии двух или четырех клеток формировались личин­
ки, которые отличались от нормальных животных лишь
меньшими размерами. Способность к эмбриональной
регуляции, т. е. к восстановлению нормального хода раз­
вития, была обнаружена и в опытах по изменению по­
Рис. 11. Ганс Дриш ложения бластомеров дробящегося зародыша. Из экс­
(1867-1941). периментов Дриша следовало, что развитие зародыша
Фотография любезно морского ежа, по крайней мере, на стадии раннего дроб­
предоставлена
проф. К. Зандером.
ления, не носит мозаичного характера, что первые де­
ления дробления равнонаследственны, а образующиеся
бластомеры имеют одинаковые потенции, т. е. эквипотенциальны. Проспективная
потенция части организма оказалась более широкой, чем ее реальная судьба, кото­
рая находится в зависимости от положения клетки или зачатка в целостной системе
и, возможно, обусловлена какими-то взаимодействиями с окружающими клетками
или зачатками. Эксперименты Дриша поставили сложные вопросы перед эмбрио­
логией, показав, что не все проблемы развития решаются в рамках однозначного
детерминизма (Белоусов, 1987). Данные о том, что бластомеры яйца могут быть
одновременно и частью целого и целым привели Дриша к витализму, к призна­
нию некоей идеальной силы — энтелехии, которая является носителем идеи целого
и предопределяет целостность развивающегося организма независимо от того, раз­
вивается он из яйца или из его части. Историческое значение экспериментов Дриша
несомненно. Они открыли принципиально новое явление и сыграли существенную
роль в становлении современной биологии развития. Вместе с тем нельзя и абсолю­
тизировать регулятивность, считая ее имманентным свойством зародыша. У некото­
рых животных способность к регуляции проявляется на ранних стадиях развития,
но затем исчезает; у других она отсутствует изначально, у третьих может появиться
на относительно поздних стадиях онтогенеза.
Самые крупные достижения каузально-аналитической эмбриологии в первой по­
ловине X X столетия связаны с открытием явления эмбриональной индукции. Ганс
Шпеман (1869-1941) (рис. 12), его ученики и последователи показали, что диффе
ренциация тканей и зачатков многих органов зародышей амфибий и других позво­
ночных животных имеет зависимый характер и возможна только при взаимодей­
ствии этих зачатков. В процессе индукции способная к восприятию индуцирующего
сигнала компетентная ткань детерминируется под действием этого сигнала в стро­

16
го определенном направлении. Развитие предстало в
виде последовательного ряда индуктивных взаимодей­
ствий, в цепи которых завершение одного индуктивного
события открывает возможности для реализации после­
дующего. В результате этих исследований стало ясно,
что представление о мозаичной автономной дифферен­
циации как единственном или, по крайней мере, глав­
ном способе определения судьбы частей развивающего­
ся зародыша не соответствует действительности.
Открытие взаимодействующих систем как факто­
ра дифференциации поставило вопрос о природе сиг­
налов, с помощью которых осуществляется это взаи­
модействие, а также о механизмах, генерирующих эти
сигналы в нужное время и в нужном месте. Реальный
Прогресс В ЭТОЙ Области намеТИЛСЯ ЛИШЬ ВО ВТОРОЙ ПО- рш: 12. Ганс Шпеман
ловине XX столетия, когда благодаря молекулярной ге- (1869-1941).
нетике было доказано, что управление всеми жизненными проявлениями клетки,
ее метаболизмом и спецификацией ее функциональных белков связано с генами,
которые ранее рассматривались лишь как факторы наследственности. Стало оче­
видно, что решение проблемы межклеточных взаимодействий в раннем эмбриогене­
зе лежит в плоскости раскрытия механизмов, с помощью которых осуществляется
пространственно-временная регуляция активности генов
В тридцатые годы X X столетия выдающийся эм­
бриолог и генетик Томас Морган (1866-1945) (рис. 13)
предложил концепцию, согласно которой в основе диф­
ференциации зародыша лежит последовательное вклю­
чение цепи генов: активность более ранних генов пред­
определяет активность последующих. В конечном сче­
те последовательное включение все новых и новых ге­
нов приводит к возникновению разнообразных призна­
ков. Эта идея долгое время не воспринималась серьез­
но экспериментальной эмбриологией, как слишком аб­
страктная и далекая от реальных событий, происходя­
щих в период эмбрионального развития. Открытие в се­
редине X X столетия ДНК, се роли в хранении и пере­
даче наследственной информации и, что особенно важ­
но, в управлении биологической активностью клетки в j 3 Томас Морган
корне изменило ситуацию. Хотя у некоторых животных (1866-1945)
в раннем онтогенезе дифференциация и может быть связана с необратимыми изме­
нениями генома, в настоящее время общепризнанным является утверждение, что
генеральный путь дифференциации зародыша обеспечивается дифференциальной
экспрессией генов.
В предлагаемой книге мы постараемся показать, что морфологическое разнооб­
разие животных формируется в процессе индивидуального развития. Мы постара­
емся также показать, что развитие животных во всех его проявлениях контролиру­
ется генетическими программами. Но если мы докажем, что морфология животного
возникает в процессе развития, а процесс развития контролируется генетическими

17
программами, то мы придем к неизбежному и существенному заключению, что эво­
люция морфологии животных происходит на основе эволюгщи этих генетических
программ.

Литература
М узрукова Е. Б. Развитие цитоэмбриологических исследований в конце XIX - нача­
ле X X столетий / / Т. X. Морган и генетика: научная программа школы Т. X. Моргана в
контексте развития биологии XX столетия. М., 2002. С. 15-61.
М узрукова Е. Б. Т. X. Морган и эмбриология / / Там же. С. 62-85.
Некрасов А . Д ., А рт ем ов Н. М. Александр Онуфриевич Ковалевский / / А. О. Ковалев­
ский. Избранные работы. М., 1951. С. 536-621.
Райков Б. Е. О жизни и научной деятельности К. М. Бэра / / К. М. Бэр. История разви­
тия животных. В 2 т. Т. 1. М., 1950. С. 383-438.
Саксен Л., Тойвонен С. Исторические основы проблемы индукции / / Первичная эм­
бриональная индукция. М., 1963. С. 17-26.
Филипченко Ю. А. Предмет и методы экспериментальной морфологии / / Эксперимен­
тальная зоология. М., 1932. С. 1-10.
 Часть I
ХАРАКТЕРИСТИКА ОСНОВНЫХ ЭТАПОВ
ИНДИВИДУАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ

Индивидуальное развитие животных имеет ациклический, поступательный ха­

рактер. Обычно онтогенез подразделяется на ряд стадий, каждая из которых имеет
свои функциональные и морфологические особенности и создает основу для даль­
нейшего развития. Последовательная смена стадий развития во времени отражает
закономерное изменение программ развития: активацию одних и выключение дру­
гих генетических систем управления развитием. На ранних этапах развития — на
стадиях оплодотворения, дробления и формирования бластулы — на первый план
выступают клеточные механизмы, обеспечивающие активацию метаболизма, проли­
ферацию и межклеточные связи раннего зародыша. Подчеркивая эту особенность
раннего онтогенеза, стадии дробления и формирования бластулы называют цито-
типическим периодом развития, в отличие от органотипического периода, когда
включаются механизмы морфогенетических движений и начинается формирование
сложной пространственной организации тела животного с его разнообразными тка­
нями и органами.
Ранние стадии развития имеют универсальный характер. Огромное морфологи­
ческое разнообразие этих стадий у разных животных достигается на основе комбина­
ций ограниченного, в сущности, числа клеточных механизмов, краткое рассмотрение
которых и составляет содержание первой части книги. Особенности раннего онтоге­
неза во многом определяются свойствами женских гамет. Для понимания процессов,
происходящих в раннем развитии, необходимо иметь представление о гаметогенезе,
в ходе которого происходит формирование половых клеток, обязательных для обес­
печения индивидуального развития животных.

Глава 1. ГАМЕТОГЕНЕЗ

Гаметогенез — это процесс формирования половых клеток, способных при опре­

деленных условиях обеспечить воспроизводство новых особей. Гаметогенез играет
исключительно важную роль в создании необходимых предпосылок продолжения
жизни.
Зрелые половые клетки, или гаметы (от греч. yajiot; — свадьба, брак) представ­
ляют собой высокоспециализированные клетки, дифференциация которых связана
как со специфическими изменениями ядерного аппарата и прежде всего с редукцией
числа хромосом, так и с существенным преобразованием клетки в целом.

19
 В ходе оогенеза (от греч. coov— яйцо; y e v e o k ; — творение, происхождение), т. е.
при формировании женских половых клеток, их специализация определяется в
первую очередь необходимостью создания запасов веществ, обеспечивающих энер­
гетические потребности эмбриона до начала периода активного питания, которое
становится возможным только по достижении относительно высокого уровня раз­
вития зародыша. У многих животных дифференциация женских половых клеток
сопряжена с формированием анизотропии яйцевой клетки, в частности с образова­
нием ее первичной полярности. Неоднородность разных областей яйца обусловле­
на неравномерным распределением разного рода органелл, белков, иРНК и других
соединений. Некоторые из этих веществ играют роль цитоплазматических детерми­
нантов, т. е. факторов, предопределяющих направление дифференциации клеток, в
которые они попадают при дроблении. В процессе оогенеза формируется сложно ор­
ганизованный цитоскелет, который необходим для дробления и перераспределения
компонентов яйцевой клетки после ее активации.
Дифференциация мужских гамет, или сперматогенез (от греч. акЕр[ао( — семя)
характеризуется иной стратегией: она направлена на максимальную компактизацию
ядерных структур, развитие органелл движения или иных органелл, обеспечиваю­
щих встречу и соединение спсрмия с яйцеклеткой.
У мужских и женских половых клеток глубокую специализацию претерпевает
и поверхностный аппарат, который обеспечивает высокую точность распознавания
родственных гамет противоположного пола. Специализированные плазматические
мембраны гамет при определенных условиях создают возможность видоспецифиче­
ского слияния гамет.
Одной из центральных проблем эволюционной биологии развития является во­
прос о механизмах спецификации половых клеток. Организация процесса гаметоге-
неза обнаруживает поразительное разнообразие форм. По необходимости в учебнике
могут быть изложены данные лишь по некоторым наиболее полно изученным объ­
ектам, но у читателя не должно создаться впечатления, что эти данные можно без
оговорок экстраполировать на другие виды. Тем не менее, в процессе гаметогене-
за можно выделить несколько последовательных этапов, каждый из которых имеет
свои морфофункциональные характеристики (рис. 1- 1 ).
Клетки половой линии обычно обособляются на ранних этапах эмбрионального
развития. Клетки, потомки которых дают начало исключительно гаметам, называ­
ются примордиальными (от лат. primordium — начало, зарождение), или первичны­
ми половыми клетками (ППК). На более ранних стадиях иногда обнаруживаются
презумптивные примордиальные половые клетки, в результате асимметричных де­
лений которых образуются клетки половой и соматической линий.
Известны два способа спецификации клеток половой линии: эпигенетический,
при котором свойства половой клетки индуцируются внешними по отношению к
клетке факторами, и преформационный, обусловленный материнскими детерминан­
тами, унаследованными клеткой вместе с цитоплазмой ооцита (рис. 1- 2 ).
Как свидетельствует распространение этих способов спецификации линии по­
ловых клеток, эпигенетический путь является эволюционно первичным (Extavour,
Akam, 2003) (рис. 1-3).
ППК представляют собой диплоидные клетки, способные к митотическим деле­
ниям. У многих животных они способны к миграции и благодаря этому заселяют
зачатки гонад, которые закладываются и формируются независимо, а иногда и на

20
 Набор Количество
Период Половые продукты
хромосом ДНК
Период
размножения
Вне гонад Первичные 2N 2С/4С
половые клетки

В гонадах Гонии 2N 2С/4С

Период
созревания
Первичные ооциты
Первый мейотический цикл и сперматоциты 2N 4С

Вторичные ооциты
Второй мейотический цикл и сперматоциты N 2С

Период
формировании
Спермиогенез Сперматиды N С

Яйцеклетки
Гаметы и сперматозоиды N С

Рис 1-1. Периодизация гаметогенеза.

половых клеток у насекомых и млекопитающих

(по: Extavour, Akam, 2003).

А — у дрозофилы специфические материнские детерминанты транспортируют­

ся из цистоцитов и образуют в задней области ооцита половую плазму, сегрегация
которой в клетках дает начало популяции первичных половых клеток; Б — у мыши
клетки эпибласта, экспрессирующие «гены половой компетенции» (заштрихованы),
воспринимают индуктивные сигналы из внезародышевой эктодермы (черная стрел­
ка) и энтодермы (светлая стрелка) и дают начало клеткам половой линии (светлые
кружки).

21
 —И Porifera
■ Ctenophora
—Ш Cnidaria
—И Acoelomorpha
—□ Priapulida
—Ш Kynorhyncha
—О Nematoda
—ЦБ Onychophora
—■ Tardigrada
—Ш Arpthropoa
—О Rotifera
—Ш Plathelminthes
—■ Gastrotricha
—■ Phoronida
—■ Brachiopoda
—■ Ectoprocta
—□ Entoprocta
■ Nemertea
—Щ] Annelida
—■ Pogonophora
—■ Echiura
—■ Sipunculida
НЮ Mollusca
-D Gnathostomata
—О Chaetognatha
—■ Echinodermata
—■ Hemichordata
—О Urochordata
—■ Cephalochordata
■ Agnatha
—Щ ] Chondrichthyes
—OH Actinopteiygii
—■ Dipnoi
—О Anura “ Iл
CaudataJ Amphlbla
Testudines “ I
T .j - Reptilia
LepidosaunaJ
-О Archosauria
Monotremata"
Metatheria Mammalia
Eutheria
Puc. 1-3. Способы спецификации половых клеток у Metazoa (по: Extavour, Akam, 2003).
■ — эпигенетическая спецификация; О — преформационная спецификация; Ь — имеются оба
способа спецификации; □ — не исследовано.

значительном расстоянии от мест возникновения половых клеток. ППК, заселившие

зачатки гонад, называют гониями. Гонии, как и ППК, являются диплоидными и спо­
собны к митотическим делениям. Гонии мужских гонад называют сперматогония-
ми, а женских — оогониями. Этап развития, который представлен ППК и гониями,
называют периодом размножения половых клеток, а следующий за ним — перио­
дом созревания. В период созревания клетки полового пути теряют способность к
митотическим делениям. В ходе так называемого мейоза (от греч. [iEicov — меньше)
они претерпевают сложный процесс редукции числа хромосом и превращаются в
гаплоидные клетки.
Мейоз включает два последовательных деления, которые называются мейотиче-
скими, или делениями созревания. Половые клетки, вступившие на путь делений

22
созревания, называют цитами: в мужских и женских гонадах различают соответ­
ственно сперматоциты и ооциты. До завершения первого деления созревания поло­
вые клетки называют первичными сперматоцитами ( ооцитами), или сперматоци-
тами (ооцитами) первого порядка. После первого деления созревания это уже вто­
ричные сперматоциты ( ооциты) или сперматоциты ( ооциты) второго порядка.
После завершения деления созревания вторичный ооцит становится зрелой яйцевой
клеткой. Вторичный сперматоцит в результате второго деления созревания образует
гаплоидную сперматиду. В процессе сперматогенеза различают особый период фор­
мирования, в течение которого сперматида преобразуется в зрелый сперматозоид.

1.1. Сегрегация линии половых клеток. Первичные половые клетки

Клетки-родоначальницы половых клеток, или примордиальные половые клетки

часто обособляются на самых ранних этапах эмбрионального развития. Например ,
у животных, входящих в состав группы типов Ecdysozoa, различия между клетка­
ми полового пути и соматическими клетками обычно обнаруживаются уже в ходе
первых делений оплодотворенного яйца.
У некоторых животных в ходе делений дробления в соматических клетках про­
исходит отбрасывание части материала хромосом, или диминуция хроматина (от
лат. diminuo — расщеплять). Это явление впервые наблюдал Т. Бовери у нематоды
Ascaris megalocephala (1887) Уже в самом начале развития, когда зародыш нахо­
дится на стадии двух бластомеров, хромосомы одного из них фрагментируются, и
концевые их части отбрасываются (рис. 1-4). Как показал дальнейший анализ, из
бластомера, где произошла диминуция, возникают соматические клетки. При следу­
ющем делении бластомера с неповрежденными хромасомами вновь обнаруживается
диминуция хроматина в одном из его потомков. И в этом случае клетка с неполны­
ми хромосомами дает начало лишь соматическим тканям. Диминуция повторяет­
ся еще в двух клеточных генерациях, после чего возникает клетка-родоначальница
клона половых клеток, которые отличаются от соматических набором полноценных
хромосом. Учитывая сказанное, можно предположить, что информация, содержа­
щаяся в отбрасываемых частях хромосом, важна исключительно для гаметогенеза,
но не затрагивает дифференциации и функционирования к четок сомы. Аналогич­
ные данные были получены и в отношении некоторых других аскарид. Диминуция
хроматина описана также у плавунца Dytiscus, а среди позвоночных у некоторых
миксин.
У нематоды Caenorhabditis elegans диминуции хроматина не происходит. Тем не
менее обособление клеток половой линии прослеживается начиная с первого деле­
ния дробления. В яйце С. elegans имеются полярные, или Р-гранулы, которые со­
держат специфический антиген и поэтому легко выявляются иммуноцитохимически
(рис. 1-5). Перед началом дробления Р-гранулы, которые до оплодотворения равно •
мерно распределены по ооциту, концентрируются на одном полюсе яйца, маркируя
будущий задний конец зародыша. В ходе первых делений дробления Р-гранулы по­
следовательно сегрегируются в примордиальных половых клетках (Ро —> Pj —> Р 2
—> Р 3 —> Р4) и в конце концов попадают в клетки-предшественницы первичных по­
ловых клеток. Прямое участие этих гранул в дифференциации половых клеток не
доказано. Установлено, однако, что все выявленные к настоящему времени белки
Р-гранул обладают способностью связывать РНК. В связи с этим высказывается

23
 Рис. 1-4•Диминуция хроматина в раннем дроблении лошадиной аскариды
(по: Boveri, 1899).
А — начало второго деления дробления; Б — фрагментация хромосом в бласто­
мере АВ в ходе второго деления; В - на стадии 4 бластомеров фрагменты хромосом
наблюдаются в бластомерах А и В; Г — начало третьего деления: фрагментация
хромосом в бластомере EMSt. АВ, А, В, EMSt — бластомеры соматической линии;
P i , Р 2 — бластомеры половой линии; е — фрагменты хромосом.

Рис. 1-5. Раннее обособление клеток полового пути у нематоды

Caenorhabditis elegans (по: Seydoux, Strome, 1999).
А — половые, или Р-гранулы в бластомере Р 2 , выявленные с помощью антител
к белкам этих гранул; Б — экспрессия гена pes-Ю, характерная для соматических
бластомеров А, В и EMSt, отсутствует в бластомере Р 2 .

24
 Ро Р0

г- L - , I— I— I
AB P, AB P.
I I
I-------Л I------- I
EMS P, EMS P,
,2 I I2
MS E С P, MS E "MS" "E"

— 1 I— *--- 1 I Ц I— ^---I
END-1:GFP D P, END-1:GFP END-1 :GFP

Z2 Z3
Рис. 1-6.Образование клеток половой линии у нематоды
Caenorhabditis elegans (по: Seydoux, Strome, 1999).
А — клетки половой линии (темные) отделяются от соматических (светлые) в
период раннего дробления (2-7). ППК Z2 и Z3 возникают у стоклеточного зародыша
(8) и дают начало всем половым клеткам личинки (9, 10) и взрослого животного
(1). Ядра клеток половой линии всегда содержат белок MES. Транскрипционная
инертность ядер клеток половой линии поддерживается белком PIE-1. АВ, EMS,
С, D — соматические бластомеры; Р 0 -Р 4 ~ - клетки половой линии. Б — мутация
гена p iel (-) нарушает нормальное развитие клеток половой линии. В отсутствии
белка PIE-1 в клетках половой линии начинается преждевременная транскрипция,
и бластомер Р 2 дает клетки соматической природы.

предположение, что материал Р-гранул влияет на регуляцию метаболизма иРНК в

цитоплазме клеток половой линии, который имеет иной характер по сравнению с
соматическими клетками. Оказалось, что у С. elegans бластомеры половой линии
в отличие от бластомеров, дающих соматические зачатки, не синтезируют иРНК
вплоть до стоклеточной стадии, когда обособляются две первичные половые клетки
Z2 и Z3. Подавление экспрессии генов в клетках половой линии объясняется действи­
ем материнских факторов, в том числе действием белка PIE-1. Действительно, при

25
мутации материнского гена pie-1 у зародышей вместо бластомера половой ишии Рз
после третьего деления дробления образуется соматическая клетка (рис. 1- 6 ).
Нечто подобное описано у ракообразных. Например, у некоторых копепод в пе­
риод дробления при митотических делениях происходит асимметричное распреде­
ление особых телец, эктосом, которые маркируют клетки половой линии вплоть до
образования первичных половых клеток (рис. 1-7).

Рис. 1-7. Маркеры линии половых клеток — эктосомы в дробящемся яйце

веслоногого рачка Cyclops fuscus (по: Amma, 1911).
А — первое деление; Б — второе деление; В — конец пятою деления дробления.
Зернистое включение — эктосомы при делениях концентрирую! ся на одном полюсе
митотического веретена. Благодаря такой асимметрии митоза эктосомы попадают в
первичную половую клетку, которая дает начало линии половых клеток животного.

У многих насекомых в процессе гаметогенеза ооцит дифференцируется таким об­

разом, что цитоплазма той области яйца, где впоследствии возникнут задние струк­
туры зародыша приобретает свойства, предопределяющие формирование первич­
ных половых клеток. Эту цитоплазму называют полярной плазмой. Например, у
некоторых галлиц в период дробления в ядрах будущих соматических клеток про­
исходит элиминация большинства хромосом. В линии половых клеток элиминация
предотвращается специфическими факторами, сосредоточенными в полярной плаз­
ме задней области ооцита (рис. 1- 8 ).
Полярная плазма ооцита насекомых играет роль в первичном программирова­
нии пути развития (спецификации) первичных половых клеток и в тех случаях,
когда хромосомы не элиминируются. Уже в начале X X столетия было известно, что
разрушение задней области яйца приводит к дефектам развития половых клеток и
стерильности насекомых. Наиболее подробно формирование клеток полового пути
было изучено у дрозофилы. Оказалось, что полярная плазма ооцитов дрозофилы
содержит особые, выявляемые с помощью электронного микроскопа, состоящие из
РНК и белка гранулы, которых нет в других областях яйца. Ультрафиолетовое об­
лучение задней области яйца вызывает стерилизацию животных. Однако инъекция
полярной плазмы из необлученного яйца в облученное восстанавливает способность
зародыша формировать нормальные половые клетки (рис. 1-9). Доказательство то­
го, что в полярной плазме яйца дрозофилы локализованы факторы, необходимые
для дифференциации половых клеток, вытекает из экспериментов по транспланта­
ции полярной плазмы (Ilmensee, Mahowald, 1974).
К. Ильменей и А. Маховолд инъецировали полярную плазму яйца дрозофилы
дикого типа (форма А, рис. 1-10) в переднюю область яйца генетически маркирован-

26
 в

Рис. 1-8. Обособление клеток линии полового пути у двукрылых.

А, Б — Miastor metraloas (Cecidomyidae) (по: Kahle, 1908): А — деление
ядра в задней области зародыша, дающее начало линии половых клеток;
Б — элиминация хромосом в ядрах соматических линий. 1 — полярная плаз­
ма; 2 — митоз в полярной плазме; 3 - редукционные тельца; 4 — митозы;
5 — элиминированные хромосомы; 6 — полярные клетки (ППК). В — схема
элиминации хромосом у галлицы Wachtliela persicariae (по: Geyer-Duszynska,
1959): заштрихована область полярной плазмы (внизу); ядро, попавшее в эту
плазму на стадии 8 ядер, сохраняет весь набор хромосом и дает начало ППК.
В остальных клетках из 38 хромосом элиминируется 30.

Рис. 1-9. Схема эксперимента, в котором трансплантация полярной плазмы

из необлученного яйца дрозофилы восстанавливала способность
облученного зародыша к гаметогенезу (по: Гилберт, 1994).

27
ной формы В, имеющей мутации multiple wing hair и ebony (mwh, e). В этом случае
закладка половых клеток под влиянием полярной плазмы происходила не только
в задней области, как обычно, но и в передней области зародыша. Для того чтобы
эти половые клетки попали в гонады и превратились в зрелые гаметы, их пересажи­
вали из передней в заднюю область зародышей генетической формы С (например,
yellow или white). Часть прооперированных зародышей завершила развитие и дала

Трансплантация полярной плазмы

A (WT) В (mwh, е)

С (у, w)

I5

Рис. 1-10. Схема опыта, демонстрирующего роль полярной плазмы

в спецификации клеток половой линии.
1 — трансплантация полярной цитоплазмы от зародыша генетической линии А
(дикий тип) зародышу линии В; 2 — выход ядер на поверхность, в том числе в перед­
ней области зародыша, куда была трансплантирована полярная плазма линии А; 3 —
образование половых клеток с генотипом В на заднем и переднем концах зародыша;
4 — трансплантация половых клеток с переднего конца зародыша В в заднюю об­
ласть зародыша линии С; 5 — образование имаго с гонадами, содержащими половые
клетки с генотипами В и С.

28
фертильных животных, гаметы которых имели не только ожидаемый генотип С, но
и генотип В. Таким образом, эти опыты отчетливо показали, что полярная плазма
яйца дрозофилы формы А инициировала образование половых клеток на переднем
конце яйца дрозофилы формы В (рис. 1-10).
Участие полярной плазмы в детерминации половых клеток дрозофилы подтвер­
ждается и данными анализа ряда мутаций, при которых образуется стерильное
потомство. Так, у гомозиготных мутантных самок grandchildless, скрещенных с нор­
мальными самцами, потомство стерильное. У этих мутантов ядра дробления не ми­
грируют в заднюю область яйца, в результате чего формирование половых клеток
становится невозможным. При мутации agametic наблюдается быстрый распад гра­
нул полярной плазмы и резкое уменьшение числа половых клеток.
Состав полярной плазмы ооцита дрозофилы довольно сложен. Он отличается
большим количеством митохондрий, фибрилл и гранул. Важными составными эле­
ментами полярной плазмы служат белки GCL (Germ cell-less), Oskar, Nanos и Vasa,
митохондриальная РНК. Непосредственное участие в спецификации половых кле­
ток дрозофилы принимает белок GCL. Соответствующая иРНК синтезируется под
контролем гена gel в период гаметогенеза в цистоцитах (см. с. 30), транспортиру­
ется в ооцит и концентрируется в его задней области. Транспортировка иРНК 6 ,
nPHKosfcar, а также белка Staufen в заднюю область ооцита блокируется при мута­
ции генов cappuccino и spire. Синтез белка GCL происходит вскоре после оплодотво­
рения. В спецификации половых клеток каким-то образом участвует и белок Oskar.
Ро всяком случае, эктопическая инъекция nPHKosfcar вызывает появление половых
клеток в несвойственных для них местах.
Интригующие данные были получены японскими исследователями С. Кобаяши и
М. Окада (1989), которые установили, что компонентом полярной плазмы дрозофи­
лы является также рибосомальная РНК митохондрий (мтрРНК), которая входит
в состав полярных гранул. Если зародышам после ультрафиолетового облучения
в дозах, подавляющих гаметогенез, инъецировать мтрРНК, то формирование по­
ловых клеток восстанавливается. В составе полярных гранул дрозофилы и других
животных сравнительно недавно обнаружены модуляторы трансляции — микроРНК
(miRNA; Ambros, 2001). Таким образом, возможно, полярные гранулы участвуют в
образовании микроРНК или же способствуют их объединению с иРНК, трансляция
которых контролируется.
Характерной морфологической особенностью первичных половых клеток многих
животных является наличие так называемых перинуклеарных телец. Они описаны
у кишечнополостных, нематод, полихет, щетинкочелюстных, асцидий, ланцетника,
практически у всех позвоночных. Функции этих образований в настоящее время не
известны. В большинстве случаев они, скорее, могут служить лишь маркерами кле­
ток половой линии. В отношении некоторых животных имеются лишь косвенные
свидетельства возможной роли цитоплазматических факторов в спецификации кле­
ток половой линии. Например, у бесхвостых амфибий ультрафиолетовое облучение
вегетативной области яйца, где сосредоточены половые гранулы (рис. 1- 11 ), ведет к
развитию стерильного животного.
Раннее обособление клеток половой линии не является универсальным правилом.
Часто линия половых клеток возникает на сравнительно поздних стадиях дробления
или даже в период гаструляции. Первичные половые клетки на стадии дробления
были выявлены среди позвоночных лишь у бесхвостых амфибий, у которых они об-

29
 Рис. 1-11. Половая цитоплазма в бластомерах лягушки
Rana temporaria (по: Бунур, 1968).
Перемещение половой цитоплазмы с периферии клетки (А) в область
ядра (Б): 1 - половая цитоплазма; 2 — ядро; 3 — митохондрии.

разуются в тесной связи с энтодермой. ПИК у хвостатых амфибий, как полагают,

возникают в период гаструляции благодаря индуцирующим воздействиям энтодер­
мы, т. е. эпигенегически. Эпигенетический характер формирования ППК описан и
у млекопитающих. У мыши возникновение половых клеток, которые маркируются
высоким содержанием щелочной фосфатазы (Everett, 1945), обнаружено на стадии
6,5 суток после спаривания. ППК появляются в эпибласте задней области зародыша
в результате индуцирующего действия факторов BMP (подробнее см. том 2).
У зародыша человека ППК возникают на стадии 16 сомитов. При некоторых
экспериментальных условиях ППК можно получить и из зачатка нейроэктодермы,
из которого при нормальном развитии они никогда не- образуются. По-видимому, у
млекопитающих спецификация ППК также осуществляется в результате индуциру­
ющих влияний факторов внутренней среды.
Первичные половые клетки обычно обладают амебоидной подвижностью. Бла­
годаря этому ППК мигрируют от места своего возникновения до зачатка гонады,
который они заселяют. Миграция половых клеток обычно носит активный харак­
тер. Продолжая митотически делиться, первичные половые клетки преодолевают
значительные расстояния, выбирая направление движения на основе контактного
ориентирования. Например, у млекопитающих ППК перемещаются в период ми­
грации от основания аллантоиса по дорсальному мезентерию в область половых
гребней и, заселяя их, способствуют образованию гонад. В период миграции ППК
активно делятся, благодаря чему численность популяции ППК возрастает примерно
от ста клеток до пяти тысяч.
У амфибий ППК, которые образуются в энтодерме (Anura) или в мезодерме
(Urodela), движутся в область половых валиков по внеклеточному матриксу ме­
зентерия. Направление их миграции предопределяется предварительной разметкой
пути движения, который устанавливается благодаря ориентированному расположе­
нию нитей фибронектина. Действительно, обработка мезентерия антителами против
фибронектина препятствует миграции ППК.
У рептилий и птиц ППК, возникающие из клеток эпибласта, мигрируют в ги-
побласт на переднем крае area pellucida (см. гл. 13) и образуют здесь скопление в
виде полумесяца. Из этой области ППК пассивно перемещаются в составе гипобла-

30
 5
Рис. 1-12. Схема диапедеза первичных половых клеток в кро
веносные сосуды куриного эмбриона (по: Дьюкар, 1978).
1-4 -первичные половые клетки; 5 — клетки кров!.; 6 -
э: .догелиальная клетка стенки кровеносного сосуда. Стрелка
ми показано направление движения ППК.

ста в переднем направлении, а затем по кровеносным сосудам зародыша (рис. 1- 12)

с током крови к зачатку половой железы. В области зачатка гонад наблюдается
активное выселение ППК из кровеносных сосудов — диапедез (от греч. Sia — через;
7tr)Saco — прыгать). Причину этого локализованного выселения связывают с особы­
ми свойствами эндотелия кровеносных сосудов в области зачатка половой железы
или же с хемотаксическим действием каких-то факторов, вырабатываемых в этом
зачатке.

1.2. Гонии
ППК, заселившие гонады, называют гониями. У многих животных выявлены
особые стволовые половые клетки (СПК), которые поддерживают непрерывность
гаметогенеза в течение долгого периода времени, а то и на протяжении всей жизни
животных. Различают два типа СПК — стереотипный и популяцгюнный. Стволо­
вые клетки первого типа характеризуются асимметричным делением, в результате
которого одна из дочерних клеток остается стволовой, а другая вступает на путь
дифференциации. Например, у дрозофилы стволовая клетке, которая находится в
терминальной области гермария яйцевой трубки (см. рис. 1-17), делится и образует
две клетки: дочернюю СПК, сохраняющую контакт с апикальными соматическими
клетками терминальной нити, и цистобласт — клетку, последующие деления кото­
рой дают ооцит и связанные с ним цистоциты. При делении СПК популяционного
типа образуются две равнозначные клетки, судьба которых зависит от место но чо-
жения клетки в яйцевой трубке. Так, у С. elegans клетки, которые оказываются
близ дистальной концевой клетки трубчатой гонады, сохраняют способность к ми­
тотическим делениям. Эта способность поддерживается сигналами, исходящими из
концевой клетки. По мере удаления гоний от источника сигнала, поддерживающего
митотическую активность, клетки переходят к дифференциации и вступают в фазу
мейоза. Митогенный сигнал концевой клетки опосредуется геном glp-1 (рис. 1-13).
Мутация этого гена ведет к резкому снижению уровня пролиферации гоний. Так, в
семенной трубке С. elegans при рецессивной мутации glp-1 вместо полутора тысяч
образуется всего лишь десяток спермиев.
У зародыша мыши гонии, заселившие зачатки яичника, продолжают размно­
жаться, существенно увеличивая число женских половых клеток. Наибольшее число
оогоний наблюдается у 13,5-суточных зародышей, когда гонии прекращают мито­
тические деления и вступают в мейоз, становясь ооцитами. Идентичные процессы
происходят и в яичнике плода человека, где максимальное число оогоний (около
7-10е) приходится на 20-ю неделю беременности. Следует заметить, что у родив­
шихся особей женского пола млекопитающих число ооцитов значительно меньше.
Ко времени рождения у мышей, крыс и человека более 2/3 пула потенциальных
женских половых клеток уничтожается путем апоптоза. У женщин при рождении
имеется около одного миллиона ооцитов, при достижении половой зрелости их оста-

31
 I _ „ .Промежуточная . _ .
р—Зона м е и о з о в — 30н а ------ — Зона митозов—*,

клетка

В се клетки в мейозе

Рггс. 1-15. Поддержание пролиферативного статуса гоноцитов

в гонаде нематоды Caenorhabditis elegans (по: Gilbert, 2000).
А - нормальная гонада с концевой регуляторной клеткой: в дисталь­
ной части гонады поддерживаются митотические деления гоноцитов (свет­
лые кружки), по мере удаления от дистального конца гонады клетки всту­
пают в мейоз (темные кружки). Б - гонада после умерщвления концевой
клетки лазерным лучом, все клетки проходят мейоз.

ется меньше 4-105, а к 50 годам менее 1-103, т. е. к этому моменту погибает 99,9%
ооцитов, имевшихся в яичниках при рождении.

1.3. Мейоз

Деления созревания, или мейотические деления являются обязательным событи­

ем в развитии гамет животных. В результате двух последовательных мейотических
делений происходят редукция числа хромосом, и образуются гаплоидные гаметы.
Вступившие в мейоз половые клетки называют сперматоцитами и ооцитами. В про­
цессе мейоза кроме 1)едукции числа хромосом осуществляется комбинативная из­
менчивость генома половых клеток. Эта изменчивость достигается в результате,
во-первых, случайного распределения родительских хромосом по дочерним клет­
кам, и, во-вторых, рекомбинации участков гомологичных хромосом, происходящей
в ходе кроссинговера.
Переключение с митотических делений, характерных для гоний, на мейоз нахо­
дится под контролем многих генов, в частности генов, контролирующих репликацию
ДНК. Премейотический синтез ДНК, которым начинается этот период гаметогенеза,
заметно отличается по ря;;у параметров от обычного синтеза ДНК, предшествую­
щего митозу. Эти отличия проявляются не только в большей продолжительности
периода премейотической репликации ДНК, но и в иной последовательности ре­
пликации отдельных участков ДНК. Завершение премейотического синтеза ДНК
может происходить после существенной паузы — уже в профазе мейоза. В мейозе
имеет место лишь одна фаза синтеза ДНК и два (первое и второе) мейотических де­
ления. Мейотические деления подразделяются, как и в случае митоза, на профазу,
метафазу, анафазу и телофазу.
В профазе первого мейотического деления (первичные ооциты и первичные спер­
матоциты) различают несколько последовательных стадий. На стадии лептотеиы

32
вследствие начавшейся конденсации хроматина появляются тонкие нити хромосом,
состоящих из двух хроматид Затем следует зиготени, стадия, на которой с по­
мощью особого синаптонемного комплекса осуществляется попарное соединение
гомологичных хромосом, или их конъюгация. Попарно соединенные хромосомы —
биваленты отчетливо видны на стадии толстых нитей, или пахитены. На, стадии
зиготены — пахитены начинается кроссинговер (от англ. crossing-over — перекрест).
Разрушение синаптонемного комплекса и расхождение гомологов происходит на ста­
дии двойных нитей, или диплотены. Гомологичные хромосомы в это время связаны
между' собой лишь в области хиазм. Завершается профаза мейоза конденсацией
бивалентов, состоящих из четырех хроматид. Сестринские хроматиды связаны цен-
тромерными областями, а хроматиды гомологов - - хиазмами. Эту стадию называют
диакинезом.
Процесс мейоза находится под строгим генетическим контролем. Так, например,
образование синаптонемного комплекса у мыши связано с экспрессией гетта Sycpl.
Кодируемый им белок необходим для построения центрального элемента комплекса
и сперм атоцитов, и ооцитов. Экспрессия одного и того же гена Sycpl у мужских и
женских особей обеспечивается благодаря существованию у этого гена специфиче­
ских «мужского» и «женского» промоторов.
У млекопитающих первое мейотическое деление ооцитов обычно имеет весьма
продолжительную профазу, так как они в своем развитии останавливаются на ста­
дии диакинеза. На этой стадии первичные ооциты окружаются специализированны­
ми соматическими клетками и образуют первичные фолликулы. Стадия диакинеза
может продолжаться годы (у человека до 50 лет). После образования полости фол­
ликул называют вторичным. Полость заполняется фолликулярной жидкостью, ее
объем достигает максимума на стадии граафова пузырька — третичного фоллику­
ла, который выступает над поверхностью яичника.

Рис. 1-14■Деление созревания в оплодотворенном яйце нематоды

Ascaris megalocephala (по: Hertwig, 1923).
А — яйцо в момент оплодотворения; Б — анафаза первого деления со­
зревания; В — выделение первого редукционного тельца и формирование
мужского пронуклеуса; Г — второе мейотическое деление; Д — яйцо с дву­
мя редукционными тельцами: женский и мужской проиуклеусы находятся в
центре яйца; Е — метафаза первого деления дробления.

33
 Вслед за профазой следуют мета-, ана- и телофаза первого мейотического деле­
ния. После завершения первого мейотического деления образуются вторичные спер­
матоциты и ооциты. Ранее полагали, что именно первое деление созревания является
редукционным вследствие расхождения гомологичных хромосом, тогда как второе
деление, следующее за первым без дополнительного синтеза ДНК, —эквационное, в
ходе которого расходятся хроматиды (рис. 1-14). В действительности, в ходе и пер­
вого и второго мейотического деления в одних бивалентах расходятся гомологичные
хромосомы (т. е. происходит редукционное деление), а в других — хроматиды (эква­
ционное деление).
В ходе мейоза осуществляется не только редукция числа хромосом. Благодаря
случайному распределению гомологичных хромосом по клеткам возможное число
генетических комбинаций при гаметогенезе равно 2П, где п — число пар хромосом.
Так, у человека каждая особь может дать теоретически около 8,5 миллионов (223)
генетически различающихся типов гамет. Учитывая же кроссинговер, можно ска­
зать, что это разнообразие практически бесконечно.

1.4. Оогенез

Процесс развития женских половых клеток, или оогенез сопряжен со сложными

структурными и функциональными перестройками ядра, цитоплазмы и поверхност­
ного аппарата клетки. В ходе оогенеза наряду с мейотическими преобразованиями
ядра происходит интенсивное накопление энергетически богатых и пластических
веществ, которые обеспечивают высокую скорость развития и известную автоном­
ность зародышей до начала периода активного питания. В период оогенеза форми­
руются механизмы, необходимые для оплодотворения и активации яйца, а также
для блокировки полиспермии. Процесс оогенеза иногда называют проэмбриогталь-
ным периодом, так как в это время под контролем материнского генома происходит
выработка разного рода морфогенетически активных веществ, специфическая ло­
кализация которых в ооците во многом предопределяет характер развития и поляр­
ность зародыша после оплодотворения. Наконец, в период оогенеза формируются
разнообразные оболочки яйца, которые выполняют защитную функцию, а в период
оплодотворения обеспечивают начальные этапы взаимодействия яйца со спермато­
зоидом. В результате оогенеза образуется яйцо, т. е. ооцит, окруженный системой
оболочек.

1-4-1- Яйцевые оболочки

В зависимости от способа образования различают первичные, вторичные и тре­

тичные яйцевые оболочки. Первичными называют оболочки, продуцируемые сами­
ми яйцеклетками; вторичными — оболочки, которые формируются благодаря ак­
тивности фолликулярных клеток яичника; третичными — структуры, которые об­
разуются при участии желез половых протоков самки.
Примером первичной оболочки может служить желточная оболочка, которая
располагается непосредственно на поверхности ооцита и является по своей сути
надмембранным комплексом клетки. Как видно на рис. 1-15, желточная оболочка
полихеты Nereis virens имеет сложную структуру. Она построена из фибриллярного
материала гликопротеиновой природы и характеризуется эластичностью и способно­
стью к растяжению. Наружный отдел желточной оболочки богат полисахаридами.

34
 Рис. 1-15. Схема строения желточной оболочки яйца полихеты
Nereis virens.
1 — микроворсинка; 2 —воротничок; 3 — наружный слой; 4 — промежу­
точный слой; 5 — срез через канал желточной оболочки; 6 — внутренний
слой.

Оболочка пронизана каналами, через которые проходят микроворсинки ооцита. У

рыб первичную оболочку называют лучистой оболочкой, или zona radiata. Иногда
желточная оболочка имеет более сложный генезис. Например, у земноводных, птиц
и млекопитающих в образовании желточной оболочки участвуют и ооцит и клетки
фолликулярного эпителия. У млекопитающих эта сложная оболочка носит название
оолемма, или блестящий слой — zona pellucida.
Вторичные оболочки хорошо развиты у наземных и пресноводных животных,
хотя имеются и у животных, ведущих морской образ жизни, таких как голово­
ногие моллюски. К вторичному типу оболочек относится, например хорион мече­
хвостов, паукообразных, ракообразных и насекомых. Хорион представляет собой
плотную, эластичную или жесткую оболочку, которая в этом случае напоминает
скорлупу. Белок хориона — хорионин — по химическому составу близок роговому ве­
ществу. Как правило, хорион — многослойное образование, и подразделяется на от­
носительно тонкий внутренний отдел — эндохорион, и толстый внешний экзохорион.
Например, хорион палочника Bacillus libanicus состоит из эпдохориона, толщиной
около 7 мкм, и семислойного экзохориона, достигающего в толщину 50 мкм. Для
проникновения сперматозоида в хорионе имеется канал, открывающийся наружу
отверстием — микропиле.
Третичные оболочки яйца формируются обычно у животных с внутренним осе-
мене) шем. Их образование происходит в половых протоках самки после овуляции и
оплодотворения. К третичным оболочкам относятся, например белковые, пленчатые
подскорлуповые и известковая оболочки яйца птиц.

35
 1.4 -2. П ут и формирования энергетических запасов

Процесс эмбрионального развития, подобно любому иному биологическому про­

цессу, может осуществиться только при наличии источников энергии (рис. 1-16). В
раннем развитии различаются два типа источников энергии: внутренние и внешние.
Доступность внешних источников определяется временем дифференциации орга­
нов, которые обеспечивают возможность перехода на активное питание. Использо­
вание зародышем внешних источников питания наблюдается также при паразитиз­
ме, когда эмбриональное развитие происходит в тканях хозяина, а также в случае
живорождения, когда питание зародыша обеспечивается материнским организмом.
Внутренние энергетические источники создаются в период оогенеза путем накопле­
ния в яйце энергетически богатых веществ (желток, липиды и др.). Кроме прямого
может быть и косвенный путь накопления энергии в яйце. Действит ельно, в период
роста яйца происходит образование большого количества органелл, синтез или сбор­
ка которых требует больших энергетических затрат. О масштабах запасов веществ
и органелл можно судить, например, по соотношению этих компонентов в яйцевой
клетке и клетке печени шпорцевой лягушки Xenopus laevis:
Компонент: Яйцеклетка / Клетка печени
Сапок 300 000:1
рРНК 200000:1
митохондрии 100 000:1
Р Н К-иолимеразы 100 000:1
ДНК-полимераза 100000:1
гистоны 15 000:1
тРНК 10 000:1

Продукция больших количеств митохондрий, рибосом, ДНК- и РНК-полимераз

и других энергоемких соединений в период оогенеза освобождает эмбриональный
период развития от соответствующих энергетических затрат.

( РАЗВИТИЕ )

- активное питание
Прямые Косвенные
- внутриутробное
энергетически сборка органелл,
развитие
богатые синтез энергоемких
соединения: соединений, в т.н. - паразитизм
- желток - митохондрии
- липиды - рибосомы
- гликоген - иРНК
- АТФ и др. - тРНК
- полимеразы НК

Рис. 1-16. Источники энергии, необходимой

для обеспечения индивидуального развития.

36
 Создание необходимого запаса энергоемких структур и веществ в яйцевой клетке
сопряжспо с существенным увеличением размеров яйца. Если принять за единицу
диаметр средней соматической клетки взрослого животного (15 мкм), то диаметр
яйца морского ежа (150 мкм) превосходит его на порядок, диаметр яйца лягушки
(примерно 1500 мкм) в 100 раз, а яиц рептилий и птиц более чем в 1000 раз. У птиц
95% массы яйца составляет так называемый желток.
Объем запасов энергетических и пластических веществ в яйце зависит от слож­
ной комбинации многих условий, которые у данного вида иногда могут действовать в
противоположных направлениях. Среди факторов, влияющих на объем запасаемых
веществ, можно назвать время достижения стадии, когда становится возможным
активное питание. Чем раньше наступает активное питание, тем меньше требуется
запасов в яйце. Другим фактором является высота организации животного. При
прочих равных условиях более сложная структурная организация животного тре­
бует большего времени для своего развития, и, соответственно, больших запасов
энергии и пластических веществ. Существенное значение имеет характер трофиче­
ских связей зародыша с окружающей его средой. При паразитическом развитии,
когда зародыш питается за счет хозяина, запасы в яйце минимальны. Аналогичная
картина наблюдается и при внутриутробном развитии.

1.4-3. Типы оогенеза

Формирование таких гигантских образований, как яйцевые клетки, требует осо­

бых механизмов для преодоления ограниченных возможностей матричной активно­
сти генома диплоидной клетки. Сравнение организации оогенеза у представителен
разных групп животных показывает, что это ограничение обычно преодолевается
интеграцией метаболической активности многих сотен и даже тысяч клеток, как
половой, так и соматической природы. Проявления этого принципа кооперативно-
сти весьма разнообразны.
Хотя у некоторых групп животных оогенез идет по так называемому солитар-
гтому типу, при котором синтез желточных включений происходит непосредственно
в ооците, генеральной линией эволюции оогенеза является вынесение синтеза ви-
теллогенина, белка-предшественника желточных включений, за пределы гонады.
У позвоночных с высоким уровнем синтеза внтеллогенина его выработка проис­
ходит в клетках печени. Общая схема регуляции этого процесса представлена на
рис. 1-17. Под действием гипофизарного гонадотропина в фолликулярных клетках
яичника образуется эстроген, наличие которого служит сигналом для инициации
синтеза внтеллогенина в клетках печени. Этот предшественник желтка с током кро­
ви транспортируется в яичник, где клетки фолликулярного эпителия, по-видимому,
при действии фолликулстимулирующего гормона осуществляют перенос этого белка
в ооцит. У насекомых синтез внтеллогенина происходит в клетках жирового тела при
действии гормона, также вырабатываемого фолликулярным эпителием яичника, ко­
торый, в свою очередь, стимулирован ф о л л и к у л о т р о п н ы м гормоном, продуцируе­
мым особым нейросекреторным органом — corpora allata. У полихет описан синтез
внтеллогенина в целомоцитах под действием гормона головного ганглия (рис. 1-17).
Таким образом, у представителей всех трех групп билатеральных животных син­
тез внтеллогенина происходит вне гонады. Поскольку он осуществляется негомоло­
гичными структурами, эти данные свидетельствуют о независимом, параллельном
возникновении у Lophotrochozoa, Ecdysozoa и Deuterostomia внегонадного синтеза

37
 ПОЗВОНОЧНЫЕ НАСЕКОМЫЕ АННЕЛИДЫ

Синтез желтка

Рис. 1-17. Параллельные ряды нейрогуморальной регуляции вителлогенеза

у представителей трех ветвей билатеральных животных.

основного по своей массе белка, необходимого для оогенеза, что, безусловно, говорит
о высоком адаптивном значении такой организации вителлогенеза.
Разные типы гонад и оогенеза служат одной из причин большого многообра­
зия яйцевых клеток животных. Бросается в глаза, в частности, разнообразие форм
яиц, связанное с пространственной локализацией желточных и иных трофических
включений. Как правило, животные имеют эндолецитальные яйца, у которых жел­
ток сосредоточен внутри ооцита. По характеру локализации желточных включений
различают изолецитальные (гомолецитальные), телолецитальные и центролециталь-
ные яйца. Изолециталъными называют яйца с равномерным распределением желт­
ка; телолецитальные характеризуются концентрацией желтка у одного из полюсов
яйца; к центролециталъным относят такие яйца, у которых плотные желточные
включения сосредоточены в центральной области, тогда как цитоплазма, свободная
от включений, располагается преимущественно на периферии яйца. По количеству
желтка различают алециталъные (без желтка), олиголециталъные (с малым содер­
жанием желтка), мезолециталъные (с умеренным содержанием желтка) и полиле-
циталъные (с большим содержанием желтка) яйца. Иногда, если желтка в яйце
очень мало, как, например, в яйцах Eutheria, говорят об алецитальных яйцах, хотя

38
 Рис. 1-18. Экзолецитальный тип развития у плос­
кого червя Monocehs fusca (подкласс Neoophora) (по:
Giesa, 1966).
1 — желточный эпителий; 2 — желточные клетки;
3 — зародыш; 4 — капсула.

в этом случае было бы точнее говорить об олиголецитальных яйцах, содержащих

все же небольшое количество желтка. Тем не менее в некоторых случаях образуют­
ся действительно алецитальные — безжелтковые ооциты. Например, среди плоских
червей различают две группы, каждая из которых характеризуется своеобразной
стратегией энергетического обеспечения раннего развития. Одна группа (Acoela,
Polycladida и др.) представлена животными с типичными эндолецитальными яй­
цами, у которых желток сосредоточен в ооците. У плоских червей другой группы
(Tricladida, паразитические классы) ооциты лишены желтка. Развитие в этом слу­
чае обеспечивается особыми желточными клетками, которые вместе с яйцом на­
ходятся в окруженной оболочкой капсуле (рис. 1-18). В соответствии с этим плоские
черви подразделяются на группу архоофора (примитивный тип с эндолецитальны­
ми яйцами) и группу неоофора с эктолецитальными яйцами. У представителей
пеоофора наряду с яичником имеются особые желточные железы, продуцирующие
желточные клетки. Ооцит по яйцеводу и желточные клетки по желточным прото­
кам поступают в бурсу, где после осеменения яйцо вместе с желточными клетками
окружается капсулой и далее через яйцежелточный проток выводится наружу. Есте­
ственно, указанные группы животных имеют разные программы раннего развития.
Нечто похожее наблюдается у немертины Lineus ruber, у которой некоторые яйца,
из отложенных в коконе, служат питающими клетками и потребляются другими
особями данного кокона.
В ооцитах многих животных, например у плоских, круглых и кольчатых чер­
вей, моллюсков, членистоногих, иглокожих и хордовых, в том числе у ланцетника,
миног, осетровых и костистых рыб, амфибий, рептилий, млекопитающих в ходе оо­
генеза происходит накопление особых кортикальных гранул, которые формируются
при участии элементов Гольджи. Изначально они рассеяны по всей цитоплазме, но
на завершающих этапах оогенеза концентрируются в кортикальной области ооцита.
Обычно это сравнительно мелкие пузырьки, диаметром до 1 мкм, но у осетровых
они достигают 3-4 мкм, а у костистых рыб, у них они называются кортикальными
альвеолами, даже 30-40 мкм. Кортикальные гранулы содержат разного рода фер­
менты, сульфомукополисахариды и другие вещества, которые играют важную роль
в процессе оплодотворения (см. гл. 2 ).
Среди всего многообразия форм оогенеза наиболее распространенным являются
диффузный, солитарный, полигеномный и гипертранскрипционный типы оогенеза.

39
 Рис. 1-19. Полигеномный тип оогенеза у гидры (по: Айзенштадт, 1984).
Поперечный разрез через женскую гонаду: 1 — эпидермис; 2 — ооциты с
питающими клетками; 3 — мезоглея; 4 — гастродерма.

Диффузный тип оогенеза встречается у низших Metazoa. Ооциты в этом случае об­
ладают амебоидной подвижностью и способностью к фагоцитозу. Солитарный тип
оогенеза с автономным синтезом макромолекул в ооците имеет весьма ограниченное
распространение. Полигеномный тип оогенеза можно рассматривать как своеобраз­
ное проявление принципа кооперативности. Для этого типа характерно подключение
к формированию яйцевой клетки большого числа однотипных геномов. В ходе эво­
люции неоднократно и независимо возникал неполный цитокинез митотически деля­
щихся гоний, в результате чего последние формировали синцитиальную структуру.
Один из элементов синцития становился ооцитом, все остальные вспомогательны­
ми клетками. Полигеномный тип оогенеза с синцитиальными клеточными клонами,
формирующимися из клеток половой линии, описан у некоторых книдарий (рис. 1-
19), гребневиков (рис. 1- 20), аннелид, насекомых, у отдельных видов позвоночных.
Неполный цитокинез, характерный для полигеномного типа оогенеза, в процессе
эволюции иногда трансформировался в эндомитоз, в результате которого возникали
многоядерные ооциты. Такие полигеномные ооциты описаны у хвостатой лягушки
Ascaphus truei (гладконог). У сумчатой лягушки Flectonotus pygmaeus ооциты на­
считывают до 3000 ядер, из которых лишь одно становится женским пронуклеусом.
Возможно образование многоядерности и в результате слияния многих ооцитов, что
наблюдается, например, у аннелиды Dinophilus.
У ктенофор гонии проходят несколько циклов митотических делений с непол­
ным цитокинезом, образуя комплекс, который состоит приблизительно из ста вза­
имосвязанных клеток, одна из которых становится ооцитом (рис. 1-20). Как пола­
гают, наиболее близко лежащие к ооциту питающие клетки синтезируют желток и
формируют центральную эндоплазму ооцита, тогда как находящиеся на периферии

40
комплекса клетки участвуют в формировании эктоплазмы — поверхностного слоя
ооцита.
Полигеномный тип оогенеза у дрозофилы. У многих насекомых в составе
аналогичного синцития или цисты различают ооцит и вспомогательные клетки
цистоциты. В литературе сохранилось историческое название этих вспомогатель­
ных клеток — «.питающие» клетки, или «трофоциты» (от греч. трофос; — кормя­
щий, питающий), которое отражает устаревшее представление о главной функции

Рис. 1-21. Полигеномный тип оогенеза у дрозофилы (по:

Koch et al., 1967).
А — яйцевая трубка дрозофилы: 1 — стволовая клетка;
2 — цистобласт; 3 — цистоцит; 4 — префолликулярная мезо­
дерма; 5 — фолликулярный эпителий; 6 - - ооцит, связанный
цитоплазматическими мостиками с цистоцитами. Б — циста из
16 цистоцитов, связанных между собой цитоплазматическими
мостиками. Клетки с наибольшим числом мостиков (1 и 2) —
проооциты.

41
этих клеток. Взаимоотношения между цистоцитами и ооцитом у разных видов насе­
комых варьируют. В политрофных трубочках ооцит и цистоциты образуют относи-
тельно компактный комплекс. Окруженная мезодермальным фолликулярным эпи­
телием циста представляет собой яйцевую камеру (рис. 1 -21). В телот.рофных яйце­
вых трубочках гонады «трофоциты» занимают проксимальную область, тогда как
ооцит смещается дистально, сохраняя, однако, связь со своей «питающей клеткой»,
поскольку цитоплазматические мостики трансформируются в удлиненные транс­
портные каналы (рис. 1 22). Полигеномность усиливается благодаря многократной

Рис. 1-22. Схема строения телотрофной яйцевой трубки жука

Bruchidius obtectus (по: Buning, 1984).
А — полностью сформированная овариола: 1 — терминальная нить;
2 — интерстициальные клетки; 3 — ядро цистоцита; 4 — префолликулярная
ткань; 5 — питающий канал; 6 — tunica propria; 7 — фолликулярный эпи­
телий; 8 — ооцит; 9 — кариосома; 10 — зона превителлогенного роста; 11 —
трофариум. Б - последовательные стадии формирования трофариума и об­
разование питающих каналов.

42
полнплоидизации цистоцитов. Благодаря полиплоидизации в цисте дрозофилы, со­
стоящей из диплоидного ооцита и пятнадцати полиплоидных цистоцитов, насчиты­
вается около 7000 диплоидных эквивалентов, работающих на один ооцит.
Основная функция цистоцитов в яичнике насекомых состоит в выработке рРНК,
иРНК и многих нежелтковых белков. Из цистоцитов в ооцит поступают много­
численные митохондрии. Синтез предшественника желтка — внтеллогенина, однако,
происходит за пределами яичника — в жировом теле, откуда транспортируется по
гемолимфе и поглощается ооцитом путем пиноцитоза. У дрозофилы при мутации
гена fs29 нарушается функция рецепции внтеллогенина. Такие мутанты стерильны,
так как в их ооцитах желток не накапливается, несмотря на интенсивный синтез его
предшественника в жировом теле.

Фолликулярная клетка
/-----N

DPP .DPP
Стволовая ПК

Цистобласт

Ядро

Спектросома

Рис. 1-23. Особенности экспрессии генов в клетках концевого отдела

яйцевой трубочки дрозофилы.
В фолликулярных клетках экспрессируются гены kh, yb, piwi. Белок НН поддер­
живает пролиферацию фолликулярных клеток. Спектросома, содержащая спектри-
ны и белок HTS, обеспечивает асимметричное деление стволовой половой клетки.
Экспрессия гена pumilio необходима для поддержания статуса стволовой клетки.
Затухание экспрессии гена рит при усилении активности генов bam и nannos пред­
определяет начало дифференциации цистобластов.

У дрозофилы оогенез начинается с асимметричного деления стволовых поло­

вых клеток (СПК), располагающихся в концевых отделах яйцевых трубочек- гер-
мариях. Исследованиями последних лет выявляется сложная система генетическо­
го контроля, которая, с одной стороны, поддерживает коммитированное состояние
стволовых половых клеток, а с другой, обеспечивает их переход к дифференциации
(рис. 1-23). Поскольку принципиальная схема такого контроля представляет общий
интерес для понимания процессов дифференциации коммитированных стволовых
клеток, остановимся на этих данных несколько подробнее.

43
 В результате асимметричного митоза образуются дочерняя стволовая клетка и
так называемый цистобласт (см. рис. 1-21, А; 1-23). Асимметричность деления
СПК обусловлена наличием особых цитоплазматических структур — спектросом.
Спектросомы содержат мембранные пузырьки и скелетные мембранные белки — а-
и /3-спектрин, анкирин и HTS (HULITAISHAO). Во время митоза спектросома нахо­
дится в контакте с тем полюсом митотического веретена, который обращен к базаль­
ной клетке терминальной нити (рис. 1-23). Спектросомы, связываясь с веретеном,
определяют его ориентацию таким образом, что одна из образующихся при деле­
нии клеток остается в контакту с терминальной нитью, а другая отдаляется от нее.
Вместе с тем спектросомы играют роль и в локализации некоторых регуляторных
молекул, например циклина А.
Расхождение путей развития клеток, возникших в результате деления СПК, у
дрозофилы связывают с активностью генов pumilio (рит), па,nos (nos) и bag o f mar­
bles (bam). Активность гена рит необходима для поддержания линии стволовых
клеток. Связывающийся с РНК белок Pum служит фактором репрессии трансля­
ции и, видимо, избирательно подавляет трансляцию некоторых РНК уже комми-
тированной стволовой клетки, препятствуя, таким образом, началу ее дифферен­
циации. Переход к дифференциации коррелирует с резким снижением уровня Pum
(см. рис. 1-23). Ген nos необходим для дифференциации цистобластов. Переход от
СПК к цистобласту сопровождается существенным увеличением содержания белка
Nos. В процессе переключения СПК на путь дифференциации важную роль играет
также ген bam., мутации которого закрывают путь дифференциации клеток поло-

Bicaudal-D иРНК Bic-D

----------------

Синтез белка

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ
ООЦИТА

Рис. 1-24. Участие белка Bic-D в дифференциации ооцитов дрозофилы.

На схеме слева представлены гены. Для дифференциации ооцита необ­
ходимы локализация иРНК Bic-D, обеспечиваемая геном egl, и фосфорили-
рование белка Bic-D.

44
вой линии. Значительные количества белка В а т характерны для цистобластов и
цистоцитов, что существенно отличает их от стволовых клеток.
Асимметричность делений СПК определяется и сигналами, исходящими из со­
матических клеток гонады. Так, уничтожение лучами лазера апикальной части тер­
минального филамента дрозофилы увеличивает частоту делений СПК. Как выяс­
няется, участие клеток терминального филамента в регуляции делений СПК обу­
словлено активностью генов piwi и fs{ 1) Yb ( Yb). В отсутствии этих генов стволовые
клетки не сохраняются. По-видимому, путь, контролируемый геном Yb, специфичен
для женских гонад, тогда как ген pivd необходим для поддержания линии СПК в
гонадах обоих полов.
Важную роль в сохранении линии СПК, вероятно,
играет и белок Dpp (гомолог ВМ Р2/4), кодируемый
геном dpp (decapentaplegic). Показано, что сигнал Dpp
вырабатывается соматическими клетками, окружаю­
щими СПК. Впрочем, не исключено, что Dpp может
быть и паракринным фактором дифференцирующих­
ся половых клеток или даже аутокринным фактором,
вырабатываемым самими стволовыми клетками.
Хотя цисгобласты и сохраняют способность к
митотическим делениям, последние характеризуются
неполным цитокинезом, благодаря чему между обра­
зующимися клетками сохраняются цитоплазматиче­
ские мостики, или кольцевые каналы. У дрозофилы
в результате четырех делений цистобласта образуется
циста из шестнадцати клеток (см. рис. 1-21, Б). При
этом две клетки цисты — проооциты имеют по четы­
ре кольцевых канала, соединяющих их с соседними
клетками. Одна из этих клеток становится ооцитом,
тогда как остальные 15 оогоний превращаются в по­
липлоидные цистоциты.
Необходимым условием развития ооцита дрозофи­
лы является экспрессия гена Bicaudal-D (Bic-D) (рис.
1-24). Мутация Bic-D ведет к стерильности самки,
поскольку в этом случае все 16 клеток цисты раз­
виваются как цистоциты. Локализация viPHKB%c~D в
будущем ооците зависит от активности гена egalitar­
ian (egl), мутация которого также вызывает стериль­
ность. Незадолго ДО вителлогенеза нРНКВгс~С транс- Рис- 1-25- Схема строения па-
лируется, и образующийся белок после фосфорилиро- ноисгической яйцевой грубочки
_ кузнечика lachycines.
вания приобретает свойства фактора, который обес- j _ гермарий; 2 — вител-
печнвает дифференциацию ооцита. В случае мутации лярий. Питающие клетки отсут-
гена Bic-D возникает дефектный белок Bic-D, кото- ствуют. Снаружи трубочка по-
г , , Г) крыта фолликулярным эпители-
рыи не способен к фосфорилированию. Вследствие
этого необходимый для дифференциации фактор не
образуется, и развития ооцита не происходит.
Суммарный гаплоидный эквивалент цистоцитов составляет более 14000 С.
С учетом того, что гаплоидный набор хромосом дрозофилы содержит примерно

45
250 рибосомных генов, в яйцевой камере имеется около 3,8-106 рибосомных генов,
работающих на обеспечение одной яйцевой клетки. Благодаря этому за трое суток
оогенеза в ооците запасается до 160 нг рРНК. Интересно, что количество рРНК
может быть фактором, ограничивающим скорость оогенеза у дрозофилы. Так, в
случае мутации bobbed, при которой происходит делеция разных участков кластера
рибосомных генов, продолжительность оогенеза зависит от числа оставшихся ри-
босомалъных генов: при наличии 1/3 нормального сод ерж ан т рДНК оогенез про­
должается почти в три раза дольше (206 час вместо 75). Благодаря такой задержке
зрелые яйца самок bobbed содержат нормальное количество рРНК.
Кроме рРНК в цистоцитах под контролем материнских генов (гены материнского
действия) синтезируются иРНК, которые после оплодотворения яйца обеспечивают
морфогенетически значимой информацией процесс раннего эмбриогенеза. Хромо­
сомы ооцита у дрозофилы инактивированы. Эта инактивация, впрочем, не обяза-

Рис. 1-26. Хромосома типа «ламповой щетки»

(А, Б — ф ото С. Е. Дерюшевой, А. Г. Кургановой и Е. Р. Гагинской; В — рисунок И. В. Соловей).
Хромосома 5 домашней курицы Gallus gallus domesticus: А — участок митотической мета-
фазной пластинки: видны ярко флуоресцирующие гомологичные хромосомы 5; Б — диплотенный
бивалент, образованный гомологичными хромосомами 5, из ооцита на стадии «ламповых щеток»
при том же увеличении, что и метафазные хромосомы на рис. А ); В — схематическое изображение
бивалента 5 в стадии «ламповых щеток», гомологичные хромосомы соединены хиазмами. А, Б —
выявление хромосомы 5 методом «chromosome painting» с использованием зонда, специфичного к
хромосоме 5.

46
тельна при полигеномном осгенезе. У некоторых насекомых, например у комаров,
жуков и полужесткокрылых, геном ооцита активно участвует в создании пула раз­
ных типов РНК. В ооцитах жука-плавунца Dytiscus, долгоножки Tipula (Diptera),
Chrysopa (Neuroptera) происходит амплификация генов рРНК. Амплифицирован-
ная ДНК сконцентрирована в виде небольшого тельца, которое располагается в яд­
ре ооцита, но отсутствует в ядрах цистоцитов. У Dytiscus ДНК-содержащее тельце
несет около 3-106 амплифицированных генов рРНК.
Перемещение РНК и белков из цистоцитов в ооцит обеспечивается механизмами
внутриклеточного транспорта. Пслагают, что перемещению макромолекул может
способствовать электрический градиент (1 В /см ), который устанавливается в систе­
ме цистоциты — ооцит. На завершающих этапах оогенеза содержимое цистоцитов
транспортируется в ооцит благодаря сократительным движениям этих клеток.
Полигеномный принцип организации оогенеза обеспечивает высокие скорости
формирования яиц. Продолжительность оогенеза у дрозофилы, где на каждый
ооцит приходится 1 ,4-104 гаплоидных геномов, составляет всего 3-5 дней. У сверчка
с его паноистическим типом оогенеза (рис. 1-25), при котором цистоциты отсут­
ствуют и формирование ооцита обеспечивается всего четырьмя гаплоидными экви­
валентами, оогенез продолжается более трех месяцев. Нельзя не отметить, что па-
ноистический способ оогенеза характерен для прямокрылых (Orthoptera) и стрекоз
(Odonata), т. е. для наиболее примитивных отрядов подкласса Настоящих насеко­
мых.
Гипертранскрипционный тип оогенеза с участием хромосом типа лам­
повых щеток. Природе известен и другой путь существенной интенсификации
метаболических процессов, необходимых для формирования яйцевых клеток. Этот
путь характерен для вторичноротых. Здесь не происходит превращения части по­
ловых клеток во вспомогательные. Вителлогенин и в этом случае синтезируется
вне гонады. Однако интенсивное накопление в яйце разных форм РНК обеспечива­
ется благодаря функциональному и структурному видоизменению хромосом само­
го ооцита, создающему предпосылки максимальной продуктивности транскрипции.
Подобный тип организации оогенеза мы будем называть гипертранскрипционным.
Впервые такие видоизмененные хромосомы были описаны в 1882 году
В. Флеммингом в ооцитах тритона, а в 1892 году они были подробно исследованы
И. Рюккертом в ооцитах акулы. Поскольку эти хромосомы имеют большое число
боковых петель ДНК, которые на микроскопических препаратах имеют вид отрост­
ков, расположенных на центральной оси, Рюккерт назвал их «ламповыми щетками»,
подразумевая их сходство с «ершиком», использовавшимся в те далекие времена для
очистки стекол керосиновых ламп.
Хромосомы типа ламповых щеток появляются в профазе мейоза. Они представ­
ляют собой биваленты, т. е. спаренные в области хиазм гомологичные хромосомы
(рис. 1-26). Каждая хромосома бивалента состоит из двух дуплексов конденсиро­
ванной ДНК. Каждый дуплекс ДНК образует многочисленные симметричные пет­
ли, образованные идентичными последовательностями. Боковые петли деконденси-
рованной ДНК служат местом интенсивного синтеза РНК. У гомозиготных жи­
вотных каждый активный локус представлен четырьмя петлями (по две на каж­
дом гомологе). Локализация некоторых крупных петель и их форма может иметь
специфический для вида характер (см. рис. 1-26). Число петель и единиц тран­
скрипции хромосомы не совпадает, так как одна петля может содержать более од­

47
ной единицы транскрипции. Расправление (спрединг) хромосом по Миллеру сделало
возможным визуализацию транскрипции в электронном микроскопе. В результате
была обнаружена исключительно высокая плотность молекул РНК-полимеразы на
петле ДНК. В хромосомах типа ламповых щеток расстояние между последователь­
но расположенными молекулами РНК-полимеразы составляет 100-200 нуклеотидов.
Такая плотная посадка полимераз предопределяет высокую продуктивность тран­
скрипции. Действительно, в ооците с хромосомами типа ламповых щеток, где одна
молекула РНК-полимеразы приходится на 102 нуклеотидов ДНК, в 1 мин произво­
дится 2 пг РНК. В соматических же клетках, где одна молекула РНК-полимеразы
приходится примерно ria 104 нуклеотидов нити ДНК, за такое же время синтезиру­
ется всего 0,015 пг РНК.
Продукты транскрипции после сплайсинга и полиаденплирования экспортиру­
ются в цитоплазму ооцита. До 80% иРНК в цитоплазме образует комплексы с бел­
ками секвестрации, которые инактивируют иРНК. Эти запасаемые в ооците и акти­
вируемые после оплодотворения РНП-част.щы были названы А. Спириным инфор-
мосомами (1966).
Синтез рРНК при гипертранскрипциопном оогенезе происходит в ооците или в
фолликулярных клетках. У рыб и амфибий имеет место многократная репликация
ДНК рибосомных генов, или амплификация (от англ. amplification —увеличение)
рДНК. У Xenopus в результате амплификации количество рДНК в ооците увеличи­
вается примерно в 1000 раз. Амплификация начинается на стадии гоний и достигает
пика на стадии пахитены. Амплифицированные гены рРНК образуют многочислен­
ные экстрахромосомные ядрышки.
Оогенез с участием хромосом типа ламповых
щеток имеет очевидные адаптивные преимуще­
ства. Благодаря постоянному обновлению иРНК
создаются предпосылки длительного поддержания
жизнеспособности яйцевой клетки, находящейся
в яичнике. Это позволяет при неблагоприятных
условиях избегать обязательной откладки яиц сра­
зу же после завершения оогенеза.
Своеобразный характер приобретает принцип
кооперативности в оогенезе птиц и рептилий. У
рептилий синтез рРНК осуществляется грушевид­
ными клетками фолликулярного эпителия (рис. 1-
Рис. 1-27. Предполагаемая схема
участия клеток фолликулярного
27). На определенном этапе своего развития гру­
эпителия в формировании ооцита у шевидные клетки соединяются с ооцитом, образуя
пресмыкающихся (по: Айзенштат, цитоплазматический мостики. Если у насекомых
1984). с полигепомным типом оогенеза функцию постав­
1 - оболочка яичника; 2 фол­
ликулярные клетки; 3 — ооцит; 4 — щика рРНК выполняют цистоциты, которые пред­
грушевидная клетка. ставляют собой впдоизмененпые половые клетки,
то у рептилий аналогичную функцию выполняют
соматические фолликулярные клетки. Если в первом случае цитоплазматические
мостики, через которые транспортируется рРНК, образуются вследствие неполно­
го цитокинеза при делении гоний, то у рептилий они, по-видимому, образуются при
слиянии мембран половой и фолликулярной клеток. В каждом фолликуле ящерицы
насчитывается до 10 000 грушевидных клеток.

48
 Рис. 1-28. Образование трансосом клетками фолликулярного эпителия у птиц
(по: Press, L964).
1 — желточная оболочка ооцита; 2 —ооцит; 3 — трансосомы; 4 - фолликулярная
клетка.

У птиц синтез рРНК, которая поставляется в ооцит, также происходит в клетках

фолликулярного эпителия. Однако транспортным средством для доставки рРНК
в ооцит здесь служит особая органелла — трансосома (рис. 1-28). Фолликулярные
клетки образуют длинные отростки, которые погружены в цитоплазму ооцита. Кон­
цевые отделы этих отростков, в которых накапливаются большие количества рРНК,
отшнуровываются от фолликулярной клетки. После разборки мембран рРНК из
трансосомы поступает в цитоплазму ооцита.

1.5. Сперматогенез

Направление дифференциации мужских половых клеток резко отличается от

стратегии формирования женских гамет. Дифференциация мужских гамет предпо­
лагает максимальную редукцию цитоплазматического тела и развитие двигатель­
ного аппарата. Объем спермия определяется практически размерами компактизо-
ванного ядра, нескольких митохондрий, центросомы и величиной жгутика. Следует
обратить внимание на то, что развитие мужских и женских гамет, столь различаю­
щееся по дифференциации клеточных структур, происходит в соответствии с одной
и той же принципиальной схемой ядерных преобразований, в ходе которых дипло­
идные первичные половые клетки (ППК) превращаются в гаплоидные гаметы.
Первые описания подвижных живчиков («зверьков», лат. animalculi) в семени
животных принадлежат И. Гаму и А. Левенгуку (1677). Аналогичные образования
были обнаружены и в семени человека, сперматозоид которого был увековечен на
известном рисунке Николаса Хартсекера (1694) (рис. 1-29) Стоявший на позициях
анималькулизма Хартсекер предполагал, что именно в этих подвижных клетках
заложены в миниатюре все структуры взрослого организма, отвергая тем самым
гипотезы о паразитарной природе живчиков. Термин сперматозоид был введен в

49
 научную литературу К. Бэром (LSI 7). Окончатель­
ное решение вопроса о природе сперматозоидов как
мужских половых клеток принадлежит Альберту
Кёлликеру (1817-1905), который на нескольких десят­
ках видов беспозвоночных доказал развитие спермиев
из клеток семенников. Кёлликер не только продемон­
стрировал все переходные формы от недифференциро­
ванной ППК до высокоспециализированного спермия,
но и установил видовую специфичность спермиев и да­
же обнаружил у некоторых видов полиморфизм спер­
миев. Тем не менее явление редукции числа хромосом
в ходе сперматогенеза оставалось незамеченным вплоть
до последней четверти XIX столетия, когда Ван Бене-
ден, исследуя развитие мужских и женских половых
клеток аскариды, описал мейоз (van Beneden, 1884). Но­
вая страница в изучении структуры и функции сперми­
ев была открыта в 50-е годы XX столетия, когда с ис­
пользованием электронной микроскопии обнаружились
принципиально новые особенности тонкой организации
половых клеток.
По структурной организации и способу функци­
онирования сперматозоиды можно подразделить на
несколько типов. У подавляющего большинства ви-
Рис. 1-29. Сперматозоид че-
ловека в изображении Нико- Д0Б сперматозоиды жгутиковые. Гакие сперматозоиды
ласа Хартсёкера (Nicolas Hart- обычно имеют три четко выраженных отдела: головку,
soeker, 1694; по: Нидхеы, 1947). Б которой расположено ядро, среднюю часть, или шейку
и жгутик (рис. 1-30). Известны некоторые группы жи­
вотных, у которых спермин не имеют жгутиков. Безжгутиковые сперматозоиды
характерны для некоторых Ecdysozoa. Так, у круглых червей сперматозоиды аме­
боидные (рис 1-31). Своеобразные безжгутиковые спермин обнаружены и у многих
членистоногих, их спермин округлой или звездчатой формы (рис. 1-32, 1-33) могут
перемещаться с помощью псевдоподий или остаются неподвижными.

Рис. 1-30. Схема строения сперматозоида.

1 — хвост; 2 — плазматическая мембрана; 3 — средняя часть (шей­
ка); 4 — головка; 5 — спиралевидная митохондрия; 6 — центриоль; 7 —
ядро; 8 — акросомный пузырек.

50
 Рис. 1-31. Амебоидный спермий нематоды Enoplus de-
mani (по: Yushin, Malakhov, 1994)
1 — псевдоподии; 2 — митохондрии; 3 — плотные мем­
бранные образования; 4 - мембранные образования; 5 —
ядерная оболочка; 6 — ядро.

Рис. 1-32. Схема строения безжгутиковых спермиев членистоногих

(по: Дроздов, Иванков, 2000).
Спермин: А — клеща Ambliorna dissimili, Б — десятиногого рака из подотряда
Reptania, В — многоножки Spirostreptus. 1 — акросома; 2 — ядро; 3 — митохондрий;
4 — центриоль.

Сперматозоиды, как правило, микроскопических размеров. Спермин гидры име­

ют жгут длиной до 30 мкм. У некоторых книдарий его длина достигает 90 мкм.
Известны и гигантские спермии. Например, у Drosophila bifurca длина сперматозо­
ида составляет 58 мм. В этом случае спермий в 20 раз длиннее тела взрослой особи
и в 15 000 раз длиннее спермия человека.
Хроматин ядра спермия сильно конденсирован и плотно упакован. В процессе
формирования сперматозоида объем его ядра резко уменьшается (например, у пе­
туха от 110 до 2 мкм3). Конденсация хроматина обусловлена замещением гистонов,
характерных для соматических клеток, переходными белками, а затем и особыми
высокоосновными спермийными белками — протаминами и иными аргининбогатыми
белками.
 Рис. 1-33. Спермин ракообразных (по: Shino, 1968).
А — Leandcr aspersus\ Б — Ethusa marascone (вид сбоку); В — Е. rnarascone (вид
сверху); Г — Galathea squamifera.\ Д — сперматофор Galathea\ Е — Antaeus fhmiatilis.

Жгутиковые сперматозоиды обычно имеют акросому (от греч. ахрос — крайний,

ссоца — тело), хотя у многих животных, таких, как гидра, некоторые моллюски, ко­
стистые рыбы, акросома отсутствует. Акросома представляет собой секреторный
пузырек, который формируется при участии аппарата Гольджи и содержит раз­
нообразные гидролитические ферменты. У многих животных, в частности у мле-

Рис. 1-34■ Спермиогенез у морской свинки (по: Fawcett et al., 1971).

1 — ядро; 2 — акросома; 3 — манжетка; 4 — жгутик; 5 — канал жгутика; 6 — ядерное кольцо;
7 — межклеточный мостик; 8 — аннулус (кольцевая центриоль); 9 — акросомная шапочка; 10 —
митохондриальная оболочка; 11 — фиброзная оболочка; 12 — резидуальная цитоплазма.

52
копитающих, акросомный пузырек в процессе формирования спермия принимает
вид шапочки, облегающей переднюю часть ядра (рис. 1-34). У иглокожих между
акросомным пузырьком и ядром имеется субакросомное пространство, в котором
локализуются молекулы глобулярного актина.
Митохондрии часто сливаются между собой, образуя крупную хондросферу. Они
обычно локализуются в основании жгутика зокруг центриоли и, как полагают, гене­
рируют энергию для движения жгутика. Иногда, например в сперматидах насеко­
мых, моллюсков и кольчатых червей, слившиеся митохондрии располагаются в виде
«побочного ядра» сбоку от ядра. Тзм не менее, в конечном счете, митохондриальное
побочное ядро окружает аксонему жгутика, или располагается рядом с ним.
Центриолъ, которая в период делений сперматогониев и сперматоцитов опре­
деляет формирование веретена, в ходе спермиогенеза преобразуется в базальное
тельце жгутика. Эта трансформация центриоли дрозофилы происходит при уча­
стии центросомина, особого белка центросомы. Мутация m/s, при которой синтез
центросомина не происходит, вызывает нарушение спермиогенеза и, как следствие
этого, стерильность самцов.
Основу жгутика составляет так называемый осевой комплекс, или аксонема, со­
стоящая из двух центральных одиночных мнкротрубочек, вокруг которых распо­
ложены девять дублетов микротрубочек. Кроме этого комплекса спермии многих
видов имеют еще одно внешнее кольцо, также состоящее из девяти фибрилл и прида­
ющее жгутику необходимую жесткость. Иногда в заднем отделе спермия образуется
•ундулирующая мембрана.
До настоящего времени не разгадано явление полиморфизма спермиев: у ря­
да животных в семеннике развиваются спермии двух разновидностей. Например, у
некоторых гастропод (Prosobranchia) наряду с типичными жгутиковыми, или эупи-
ренными сперматозоидами, обладающими оплодотворяющей способностью, разви­
ваются короткие червеобразные апиренные формы, часто с аномальным гаплоид­
ным набором хромосом. В других случаях апиренные спермии имеют два жгутика.
Доля апиренных сперматозоидов постоянна для данного вида.
У ряда американских сумчатых наблюдается феномен попарного соединения зре­
лых спермиев, поступивших в эпидидимис. При этом лежащая над акросомой плаз­
матическая мембрана одного сперматозоида плотно соединяется с соответствующей
областью другого. Предполагается, что это объединение спермиев, жгутики которых
расположены асимметрично относительно ядра, улучшает их подвижность.
Число спермиев, выводимых при осеменении, огромно. Так, у опоссума оно до­
стигает 13 млн, у кролика их на порядок больше. У человека ежедневно может
формироваться более 100 млн спермиев. Естественно, что этот интенсивный процесс
требует координации пролиферации стволовых клеток и включения программ спер­
матогенеза, контролирующих преобразование диплоидных сперматогониев в зрелые
гаплоидные сперматозоиды.
Сперматогенез подразделяется на несколько фаз (рис. 1-35) Первая из них — фа­
за размножения, в течение которой образующиеся после деления стволовых клеток
сперматогонии митотически делятся. Число митотических циклов у разных видов
варьирует от 1 до 14. Вторая фаза — фаза коммитации, в течение которой вклю­
чаются генетические программы инициации сперматогенеза. Третья фаза — фаза
созревания. Этот этап охватывает премейотический синтез ДНК и два мейотиче-
ских деления. Мужские половые клетки, находящиеся в первом мейотическом цик-

53
 возобновление
резерва второе
стволовых мейотичес- енез
клеток инициация премейоти- первое кое деле-г Л 1
ние (1N/1C]
/
'^спермато-
\ генеза
ческий мейотичес-
синтезДНК кое деле
ние ( c rv
c rv
c rv
Коммитиро- Первичный Вторичные Сперма-
c rv
Спермато- Спермин
гоний ВаНтогони1рМа~ спеРмат°Цит сперматоциты тиды

ФАЗА ФАЗА ФАЗА

РАЗМНОЖЕ­ КОММИТАЦИЯ
НИЯ СОЗРЕВАНИЯ ФОРМИРОВАНИЯ

Рис. 1-35. Фазы сперматогенеза. Объяснения в тексте

ле, называют первичными сперматоцитами (сперматоциты первого порядка), а во

втором — вторичными сперматоцитами (сперматоциты второго порядка). После вто­
рого мейотического деления образуется гаплоидная сперматида и наступает заклю­
чительная фаза — фаза формирования спермия. В ходе спермиогенеза происходит
резкое уменьшение объема ядра в результате элиминации нуклеоплазмы и конден­
сации хроматина. Изменение структуры хроматина в первую очередь обусловлено
заменой соматических гистонов специфическими спермийными. В этот период обра­
зуется жгутик и завершается формирование акросомы. Характерной особенностью
сперматогенеза является неполный цитокинез в период митотических делений спер-
матогоний и первого мейотического деления сперматоцитов. В результате потом­
ки одного сперматогония образуют синцитиальную цисту. Полагают, что наличие
цитоплазматических мостиков, связывающих сперматоциты, обеспечивает высокую
синхронность дифференциации мужских половых клеток, входящих в состав одной
цисты. Не исключено, что синцитиальная структура важна для поддержания фе­
нотипической эквивалентности цитоплазмы сперматид, что особенно важно в отно­
шении иРНК половых хромосом, так как многие белки, важные для спермиогенеза,
контролируются генами X и Y хромосом. Так, например, описан перенос иРНК че­
рез межклеточные мостики гаплоидных сперматид мыши с помощью белка TB-RBP
(testis-brain-RN A-binding protein).
Индивидуализация мужских гамет осуществляется на завершающем этапе спер­
миогенеза, когда происходит «сбрасывание» цитоплазмы вместе со всеми органел-
лами — рибосомами, эндоплазматической сетью, аппаратом Гольджи. У некоторых
животных эта остаточная, или резидуальная (от лат. residuum — остаток) цитоплаз­
ма (см. рис. 1-34), отделяющаяся от головки спермия, фагоцитируется клетками
фолликулярного эпителия семенника.
В опытах по так называемому микрооплодотворению, когда мужские половые
клетки вводятся в ооцит с помощью микроинъекции или путем искусственного
«сшивания» гамет, выяснилось, что уже ранние сперматиды и даже вторичные и
иногда первичные сперматоциты обладают потенцией к образованию зиготы, спо­
собной к дальнейшему развитию. Другими словами, сложные процессы цитодиф­
ференциации, происходящие в период спермиогенеза, необходимы прежде всего для

54
образования аппарата движения, формирования механизмов заякоривания и слия­
ния с женской гаметой.
Процесс сперматогенеза предполагает тесную корреляцию митотических и мей­
отических циклов со сложной программой клеточной дифференциации. О суще­
ствовании относительной автономии программы мейоза свидетельствует мутация
twine, вызывающая у дрозофилы существенные аномалии мейоза и вместе с тем не
затрагивающая заметным образом дифференциацию сперма,тид. Несмотря на нару­
шения сегрегации мейотических хромосом и цитокинеза, в семенниках мутантных
самцов наблюдаются половые клетки, у которых происходит конденсация хромати­
на, характерное видоизменение формы ядра и образование жгутика. Наряду с этим
известны мутации, которые блокируют одновременно и мейоз и спермиогенез. Эти
мутации свидетельствуют о том, что на определенной стадии сперматогенеза дей­
ствует сопряженная программа развития, в равной степени необходимая как для
мейотического цикла, так и для дифференциации сперматид.
Семенник позвоночных подразделен на два отдела: семенные канальцы и межка-
нальцевое пространство, или соединительнотканную строму. В последней находится
обширная сеть кровеносных сосудов, интерстициальные клетки или клетки Лейди-
га, а также макрофаги, фибробласты, .лимфоциты и тучные клетки. Семенные ка­
нальцы отделены от стромы так называемой ограничивающей мембраной, которая
образована уплощенными клетками, расположенными в 2-3 слоя. Полагают, что эти
клетки могут превращаться в клетки Лейдига. Эпителий семенных канальцев имеет
сложный состав и образован клетками двух типов: половыми (гоноциты) и сомати­
ческими клетками фолликулярного эпителия. Последние часто называют клетками
Сертоли, или опорными клетками. Реже их называют сустентоцитами (от лат.
sustentas — поддерживающий). Между половыми и опорными клетками в течение
всего сперматогенеза (у крысы цикл сперматогенеза длится 42 дня, у человека 74
дня) сохраняется постоянная взаимосвязь. Клетки Сертоли многофункциональны.
Они обеспечивают питание дифференцирующихся мужских половых клеток и спо­
собствуют созданию необходимой для нормального сперматогенеза концентрации
андрогенов. Опорные клетки играют также важную роль в перемещении половых
клеток из базального отсека канальца в околополостной. Они участвуют в созда­
нии гематотестикулярного барьера, который предохраняет половые клетки от раз­
ного рода метаболитов и токсинов, а также предотвращает автоиммунизацию орга­
низма против собственных спермиев. Благодаря строго скоординированной сборке
и разборке плотных контактов между клетками Сертоли происходит своего рода
«шлюзование» сперматоцитов в околополостной компартмент канальца с сохране­
нием непроницаемой границы между отсеками (рис. 1-36).
Функциональная активность семенника у позвоночных во многом определяет­
ся гормональной регуляцией со стороны гипоталамо-гипофизарной системы. Ини­
циация сперматогенеза обусловлена секрецией лютеинизирующего гормона (ЛГ) и
фолликулстимулирующего гормона (ФСГ) (рис. 1-37), которые вырабатываются в
передней доле гипофиза. В канальцах мишенями ФСГ являются клетки Сертоли, а
в строме — макрофаги. Действие ЛГ на сперматогенез опосредовано клетками Лей­
дига: под действием ЛГ в этих клетках активируется синтез мужского полового
гормона тестостерона, наличие которого является непременным условием сперма­
тогенеза. В обоих случаях происходит выработка паракринных (т. е. действующих
вблизи от места секреции) факторов, поддерживающих активность клеток Лейди-

55
 Рис. 1-36. Схема, перемещения первичного сперматоцита
млекопитающих в околополостной отсек семенной трубки из базального.
Отсеки существуют благодаря наличию плотных контактов между клет­
ками Сертоли (черные полоски). Скоординированная сборка-разборка плот­
ных контактов при перемещении сперматоцитов поддерживает непроницае­
мость барьера, образуемого клетками Сертоли.
А — сперматоцит в базальном, Б — транзитном, В — в околополостном от­
секах.

Рис. 1-3 7. Принципиальная схема

паракринных регуляторных взаимодей­
ствий в семеннике млекопитающих (по:
Tahka, 1989).
1 — клетка Сертоли; 2 — мужские по­
ловые клетки; 3 — сперматоцит; 4 — клет­
ка Лейдига; 5 — макрофаг; 6 — капилляр;
7 — перитубулярная клетка. ЛГ — лютеи-
низирующий гормон; Т С — тестостерон;
ФСГ — фолликулстимулирующий гор­
мон; ПКФ — паракринные факторы се­
менного канальца, вырабатываемые клет­
ками Сертоли.
га. ФСГ стимулирует также аккумуляцию тестостерона в клетках Сертоли, созда­
вая предпосылку нормального сперматогенеза. Дифференциация клеток Сертоли у
мыши по времени совпадает с экспрессией гена Тяг, что дает основание предпола­
гать участие этого гена в осуществлении специфической функции клеток Сертоли —
обеспечении сперматогенного цикла у животных, достигших половой зрелости. Для
поддержания этой функции необходимы и белки, продуцируемые клетками Лейди-
га. Показано, что эти белки (Gas 6 , S) служат лигандами, которые воспринимаются
специфическими тирозинкиназными рецепторами клеток Сертоли.
Поступающие извне сигналы инициируют активность генетических программ
сперматогенеза. Методом иммуноблотинга было показано, что у мыши в период
сперматогенеза в результате экспрессии генов в половых клетках появляется целый
ряд специфических для этого периода антигенов (рис. 1-38). Глобальная транскрип­
ция прекращается за несколько дней до завершения спермиогенеза. В период спер-
миогенеза активируется трансляция ранее синтезированных иРНК. В частности,
активируется трансляция транскриптов протамина. Благодаря динамической моди­
фикации хроматина и точной координации процессов транскрипции и процессинга
иРНК достигается экспрессия белков, специфических для разных этапов спермио­
генеза.

Масса
беяка, Сиермато- Спермато- Сиерма- Спермий
гоний цит тида
кДа
105
100
93
88
85
80
71
67
58
55
48
35
31
26
Рис. 1-38. Экспрессия различных антигенов в половых клетках мыши
в период сперматогенеза (по: Tanake, Nishimune, 1998).
Каждая стадия характеризуется экспрессией специфического на­
бора антигенов.

Решающую роль в активации генов, ответственных за сперм иогенез и экспресси­

рующихся в гаплоидном геноме, играет цАМФ-зависимый транскрипционный фак­
тор CREM. Оказалось, что необходимым элементом для экспрессии генов в период
спермиогенеза является активация аденилатциклазной системы мужских половых
клеток. Было показано, что гонадотропные гормоны гипофиза, взаимодействуя с
рецепторами мембран, активируют G-белок и связанную с ним аденилатциклазу.
Это в конце концов индуцирует накопление цАМФ в клетках Сертоли, восприни­
мающих сигнал ФСГ, и в клетках Лейдига, взаимодействующих с ЛГ. Повышение
уровня цАМФ вызывает диссоциацию неактивного комплекса протеинкштазы А. на
две субъединицы — регуляторную и каталитическую. После диссоциации каталити­
ческая субъединица фосфорилпрует ядерные транскрипционные факторы класса
bZIP, которые связываются со специфической нуклеотидной последовательностью
TGACGTCA в промоторах генов-мишеней. Этот сайт называют CRE (от сАМ Р

57
responsive element). Соответственно транскрипционные факторы, связывающиеся с
CRE, называются CREB (C R E binding protein) и CREM (C R E modulator). Оказа­
лось, что эти факторы играют важную роль в спермиогенезе. У мышей половое со­
зревание сопровождается появлением больших количеств фактора CREM. Ген сгет
экспрессируется в сперматоцитах начиная со стадии пахитены. Синтез же соответ­
ствующего белка происходит только на стадии ранней сперматиды. У сперматозо­
идов белок CREM отсутствует. Наблюдения на нокаутированных мышах сгет~
показали, что такие мыши не имеют видимых отклонений от нормы за исключе­
нием изменения семенников, масса которых на 20-25% меньше массы семенников
нормальных мышей. Гомозиготные самцы сгет.~/~ в отличие от самок были сте­
рильными: в семенной жидкости сперматозоиды отсутствовали. При микроскопи­
ческом исследовании семенных канальцев оказалось, что сперматогенез у мышей,
лишенных гена сгет, не шел дальше стадии ранней сперматиды. Спермиогенез был
полностью подавлен, хотя клетки Сертоли имели нормальный вид.
У дрозофилы во время спермиогенеза экспрессируется специфический для муж­
ских половых клеток ген don juan. Начало синтеза белка Don Juan приходится
на стадию удлиненной сперматиды и продолжается в течение всего спермиогене­
за. Этот белок молекулярной массой 29 кДа характеризуется высоким содержанием
лизина. Как полагают, белок Don Juan участвует в дифференциации митохондрий
и обеспечивает морфогенез жгутика спермия.
Важный момент в дифференциации сперматид — экспрессия специфических для
сперматозоидов трансмембранных белков, которые обеспечивают адгезию мужской
гаметы и ооцита. У млекопитающих эту функцию выполняют /3-1,4-галактозил-
трансфераза, зонадгезин и фертилин. Последний принадлежит семейству белков
ADAM (a disintegrin and metalloprotease), одна из функций которых состоит в про­
цессинге рецепторов плазматической мембраны.

Л итература

Айзенштат Т. Б. Цитология оогенеза. М., 1984. 247 с.

Алберте Б., Брей Д ., Л ьюис Док., Рэфф М. и др. Молекулярная биология клетки. М ,
1987. Глава 14. Половые клетки и оплодотворение. С. 7 51.
Дроздов А. А ., Иванков В .Н . Морфология гамет животных. М., 2000. 458 с.
Иванова-Казас О. М. Эволюционная эмбриология животных. Глава 2. Половые клетки
и оплодотворение. СПб., 1995. С. 19-31.
Рузен-Ранге Э. Сперматогенез у животных. М., 1980. 255 с.
Современные проблемы сперматогенеза. М., 1982. 259 с.
Сперматогенез и его регуляция. М., 1983. 232 с.
Ambros V. microRNAs: tiny regulators with great potential / / Cell. 2001. Vol. 107. F. 823-
826.
Davidson E. H. Gene activity in early development. N.-Y., 1986. 670 p.
Extavour C. G., Akam M Mechanisms of germ cell specification across the motazoans:
epigenesis and preformation / / Development. 2003. Vol. 130. P. 5869-5884
 Глава 2. ОПЛОДОТВОРЕНИЕ

Оплодотворение, исходный момент возникновения новой генетической индиви­

дуальности, представляет собой процесс соединения женской и мужской гамет. В
результате оплодотворения возникает одноклеточный зародыш с диплоидным набо­
ром хромосом и активируется цепь событий, лежащих в основе развития организма.
Биологическое значение оплодотворения огромно: будучи предпосылкой разви­
тия новой индивидуальности, оно вместе с тем является условием продолжения жиз­
ни и эволюции вида.
Следует подчеркнуть, что оплодотворение представляет собой не одномомент­
ный акт, но именно процесс, занимающий более или менее продолжительный от­
резок времени. Это многоступенчатый процесс-, в котором различаются следующие
этапы: привлечение сперматозоида яйцом, связывание гамет и, наконец, сльлпие

Рис. 2-1. Основные этапы Рис. 2-2. Осеменение яйца

оплодотворения ооцита морского ежа. озерной форели (по: Гинзбург, 1968).
1 — привлечение сперматозоидов; 2 —- контакт1 — zona гad iat а; 2 концевой ка-
со студенистой оболочкой ооцита; 3 — акросом- налец микропиле; 3 — оплодотворя-
ная реакция; 4 — слияние плазмалемм спермия ющий спермий; 4 — кортикальные
и ооцита; 5 — вхождение ядра спермия в ооплаз- альвеолы; 5 — ооплазма.
му; б — студенистая оболочка; 7 — плазматиче­
ская мембрана ооцита; 8 — ооплазма.

59
мужских ii женских половых клеток (рис. 2-1). В научной литературе события, свя­
занные со сближением гамет иногда называют осеменением различая наружное и
внутреннее осеменение, в зависимости от того, выводятся мужские половые клетки
в окружающую среду или в половые органы женской особи. Наружное осеменение
характерно для животных, обитающих в водной среде. Внутреннее осеменение при­
суще главным образом наземным животным, хотя оно достаточно часто встречается
и у обитателей водной среды. Осеменение может быть свободным при котором все
области ооцита доступны спермиям, но может быть и ограниченным, когда на по­
верхности яйцеклетки имеется плотная оболочка с микропиле (рис. 2-2). При внут­
реннем осеменении у ряда животных мужские гаметы передаются самкам в виде
сперматофоров (от греч. сптер^а — семя; (ророс — несущий), особых капсул, содер­
жащих сперматозоиды. Сперматофоры сначала выводятся в окружающую среду, а
затем тем или иным способом переносятся в половые пути самки.
Соединение гамет предопределяет возможность кариогамии (от греч. xapuov —
орех, ядро; уб^ос — брак), или слияния ядер. Благодаря кариогамии происходит объ­
единение отцовских и материнских хромосом, ведущее к образованию генома новой
особи. В результате слияния гамет возникает диплоидная зигота, восстанавливает­
ся способность к репликации ДНК и начинается подготовка к делениям дробления.
Механизмы активации яйца к развитию относительно автономны. Их включение мо­
жет быть осуществлено и помимо оплодотворения, что происходит, например, при
естественном или искусственном девственном развитии, или партеногенезе (от греч.
Ttap’Sevioc — девственный).
Интерес к проблеме оплодотворения выходит далеко за рамки собственно эм­
бриологии. Слияние гамет — плодотворно используемая модель для изучения тонких
молекулярных и клеточных механизмов специфического взаимодействия клеточных
мембран; для изучения молекулярных основ активации метаболизма и пролифе­
рации соматических клеток. Общебиологический интерес представляет и то, что
оплодотворение являет собой яркий и, может быть, уникальный пример полного об­
ращения клеточной дифференциации. Действительно, высокоспециализированные
половые клетки не способны к самовоспроизведению. Они гаплоидны и не могут
делиться. Однако после слияния они превращаются в тотипотентную клетку, кото­
рая служит источником формирования всех клеточных типов, присущих данному
организму.
История открытия оплодотворения теряется в глубине веков. Во всяком слу­
чае, в XVIII столетии итальянский естествоиспытатель аббат Лаццаро Спалланца­
ни (1729-1799) экспериментально доказал, что оплодотворение зависит от наличия
спермы, и впервые осуществил искусственное оплодотворение яиц лягушки, смеши­
вая их со спермой, полученной из семенников. Тем не менее смысл происходящих
при этом событий оставался неясным практически до последней четверти XIX ве­
ка, когда Оскар Гертвиг (1849-1922) в конце 1870-х годов, изучая оплодотворение у
морских ежей, пришел к заключению, что сущность этого процесса состоит в сли­
янии ядер половых клеток. Вместе с работами бельгийца Эдуарда ван Бенедена
(1883, аскарида), немецкого ученого Теодора Бовери (1887, аскарида), швейцарско­
го зоолога Германа Фоля (1887, морская звезда) исследования О. Гертвига заложили
основу современных представлений об оплодотворении. Следует подчеркнуть, что
именно эти работы послужили веским основанием для предположения о том, что
ядро является носителем наследственных свойств. Именно Т. Бовери (1862-1915) в

60
серии блестящих цитологических исследований обосновал в конце 1880-х годов тео­
рию индивидуальности хромосом и создал основу цитогенетики.
Вскоре после выяснения сущности оплодотворения исследователи сосредоточи­
ли внимание на механизмах, лежащих в основе этого процесса. Эта область иссле­
дований сохраняет актуальность и в наше время. Пальма первенства в построении
теории оплодотворения принадлежит американскому исследователю Франку Лилли
(1862-1915). Изучая свойства «яичной воды», т. е. морской воды, в которой некото­
рое время находились неоплодот воренные яйца морского ежа АгЪасга или полихеты
Nereis, Лилли обнаружил, что из яиц выделяется вещество, которое обладает способ­
ностью склеивать спермин в комки. Наблюдаемая агглютинация оказалась видоспе­
цифичной, и Лилли назвал фактор агглютинации, выделяемый неоплодотворенным
яйцом, веществом оплодотворения, или фертилизином (от англ. fertilization — опло­
дотворение). Суть выдвинутой Лилли теории оплодотворения состоит в признании
того, что в периферической области яйца находится фертилизин, который имеет
сродство к поверхностным рецепторам спермия (антифертилизин спермия). Благо­
даря этому сродству фертилизин связывает, согласно Лилли, спермии (рис. 2-3).
Однако, чтобы претендовать на универсальность и объяснить не только механизм
соединения гамет, но и причины агглютинации спермиев, возможность предотвраще­
ния полиспермии, высокую специфичность процесса оплодотворения и т д., теория
фертилизина нуждалась в многочисленных допущениях, под гнетом которых она в
конце концов и угасла.

sp .gr

Рис. 2-3. Схема, иллюстрирующая теорию ферти­

6
r
4
o v .g r

лизина Ф. Лилли (по: Дорфман, 1945).

1-3 — последовательные этапы оплодотворения;
4 — сперматозоид с рецептором (черная точка на голов­
ке); 5 — фертилизин с двумя зонами: областью sp. gr.,
воспринимающей рецептор сперматозоида, и областью
ov. gr., взаимодействующей с рецептором яйца; 6 — ре­
цептор яйца.

Уже в ходе ранних исследований оплодотворения возникло представление о га-

монах — веществах, которые обеспечивают активацию или блокирование отдельных
этапов оплодотворения. В соответствии с их происхождением различали гиногамо-
ны, выделяемые яйцеклетками, и андрогамоны, вырабатываемые мужскими поло­
выми клетками. Так, полагали, что гиногамон 1, диффундируя из яйца, активирует
движение сперматозоида, преодолевая действие андрогамона 1 , который ингибиру­
ет движение сперматозоида. Гиногамон 2 — синоним фертилизина, а андрогамон 2 —
антифертилизина спермия.
В пятидесятые годы X X столетия идея о взаимодействии фертилизина с ан-

61
тифертилизином трансформировалась в гипотезу специфического фагоцитоза. Со­
гласно этой концепции, наличие на поверхности яйца и спермия взаимодействующих
молекул обеспечивает комплементарную реакцию по принципу застежки «молнии»,
благодаря которой спермий оказывается поглощенным яйцом.
Несмотря на известную умозрительность, эти и многие другие подобные гипоте­
зы о механизмах взаимодействия сперматозоидов и яиц сыграли свою положитель­
ную роль, обнаружив, во-первых, существование целого семейства специфических
молекул на поверхности взаимодействующих гамет и, во-вторых, положив начало
планомерным исследованиям природы этих молекул.
Вторая половина прошлого столетия — период расцвета ультраструктурных и
молекулярно-биологических исследовании, которые выявили большое разнообразие
конкретных форм клеточного взаимодействия при оплодотворении. Стало ясно, что
универсальная теория оплодотворения, если и может существовать, то только как
свод некоторых самых общих принципов организации этого процесса.
Конкретные механизмы оплодотворения зависят от множества факторов. Доста­
точно сказать о своеобразии оплодотворения у животных с наружным и внутренним
осеменением. Очевидно, что определенные различия процесса оплодотворения обу­
словлены и тем, что у разных животных проникновение спермия в яйцо происходит
на разных этапах оогенеза. У многих аннелид, моллюсков, нематод и ракообразных
сперматозоид проникает в ооциты первого порядка на стадии профазы. У других
кольчатых червей, моллюсков и у насекомых — на стадии метафазы первичного
ооцита. Для многих позвоночных характерно осеменение на стадии метафазы вто­
ричного ооцита. У некоторых кишечнополостных и у морских ежей оплодотворение
происходит на стадии зрелого яйца уже после завершения делений созревания и вы­
деления направительных, или редукционных телец. Наконец, нельзя не вспомнить
и разнообразие типов сперматозоидов, среди которых имеются жгутиковые формы
и спермии без жгутиков (например, амебоидные спермии нематод), с акросомой и
без нее, имеющие акросомную нить и лишенные ее. Естественно, что в каждом та­
ком случае конкретные механизмы, обеспечивающие тонкое взаимодействие между
половыми клетками, различаются.
Активация движения спермиев. Сперматозоиды, энергетический ресурс ко­
торых ничтожен, и активная жизнь в лучшем случае продолжается считанные часы,
находятся в семенниках и семенной жидкости в неподвижном состоянии. Процесс
активации сперматозоидов широко распространен в животном мире и у разных жи­
вотных, изученных в этом отношении, обнаруживаются различные ее механизмы.
Во многих случаях инициация движения сперматозоидов обусловлена сигнала­
ми, идущими из внешней среды. Среди этих сигналов — разнообразные физические
и химические факторы, такие, как изменение соотношения О 2/С О 2, pH, концентра­
ции тяжелых металлов и др.
У лососевых рыб спермии неподвижны в среде с высокой концентрацией К + ,
характерной для семенной жидкости. В среде с низкой концентрацией К + спермии
приобретают подвижность, что, видимо, связано с выходом К + через соответству­
ющие каналы плазматической мембраны. Действительно, блокаторы К +-каналов,
подавляющие выход К+, предотвращают и начало движения спермиев. При выхо­
де К+ изменяется