Копельян Н.Н.

к. мед. наук, доцент кафедры хирургической стоматологии Луганского государственного

медицинского университета имени Святителя Луки
ORCID: 0000-0001-6827-6837
Рыбовалов М.В.
Студент V курса стоматологического факультета
ORCID: 0000-0003-1420-4728, SPIN-код: , AuthorID:_
Павленко Т.А.
Студентка V курса стоматологического факультета
ORCID: 0000-0003-3084-1305, SPIN-код:_, AuthorID:_

ГУ ЛНР «ЛГМУ им. Святителя Луки», 91045, Луганск, Луганская Народная Республика

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ ПАРОДОНТИТЕ У

ПАЦИЕНТОВ, ПЕРЕНЕСШИХ КОРОНАВИРУСНУЮ ИНФЕКЦИЮ

Реферат. Материалы и методы. Результаты и обсуждение. Заключение.

Ключевые слова: цитокиновый статус, ротовая жидкость, пародонтит, СOVID-19

~Перевести на англ.~
Копельян Н.Н.
к. мед. наук, доцент кафедры хирургической стоматологии Луганского государственного
медицинского университета имени Святителя Луки
ORCID: 0000-0001-6827-6837
Рыбовалов М.В.
Студент V курса стоматологического факультета
ORCID: 0000-0003-1420-4728, SPIN-код: , AuthorID:_
Павленко Т.А.
Студентка V курса стоматологического факультета
ORCID: 0000-0003-3084-1305, SPIN-код:_, AuthorID:_

ГУ ЛНР «ЛГМУ им. Святителя Луки», 91045, Луганск, Луганская Народная Республика

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ ПАРОДОНТИТЕ У

ПАЦИЕНТОВ, ПЕРЕНЕСШИХ КОРОНАВИРУСНУЮ ИНФЕКЦИЮ
Реферат. Материалы и методы. Результаты и обсуждение. Заключение.
Ключевые слова: цитокиновый статус, ротовая жидкость, пародонтит, СOVID-19
~Перевести на англ.~

Введение. На данном этапе развития стоматологии, заболевания пародонта являются

распространённой проблемой и занимают ведущее место в структуре стоматологических
заболеваний разных стран [1]. Пародонтит способен негативно влиять на качестве жизни, что
осложняет повседневное и социальное функционирование пациентов.
Существует много современных методов лечения и профилактики данного
заболевания, однако поиск достоверных методов диагностики, которые позволили бы
качественно прогнозировать заболевание, остаётся актуальным. Проблемой большинства
традиционных диагностических методов является невозможность выявления
патологического процесса на его ранних этапах [2-3]. В этой связи актуальными являются
иммунологические методы исследования, которые весьма чувствительны и могут
использоваться в ранней диагностике.
Большинство исследователей связывают патогенез пародонтита с нарушениями
микрофлоры полости рта и местного иммунитета, что позволяет рассматривать некоторые
иммунные маркеры, которые возможно обнаружить в ротовой жидкости, в качестве
предикторов клинического течения болезни [4-5]. В процессе заболевания происходит
поэтапное поражение тканей пародонта, их разрушение, приводящее к высвобождению
различных веществ, который далее возможно определить в ротовой жидкости. В качестве
воспалительных маркеров рассматриваются C-реактивный белок, макрофагальный
воспалительный белок и другие [6-8]. Роль цитокинового статуса в патогенезе заболеваний
пародонта была изучена во многих исследований [9-11]. Известно, что, хотя
инициирующими факторами пародонтита являются микробные элементы зубного налёта,
патогенез обусловлен развитием хронического воспалительного иммунного ответа,
выраженность которого является важной составляющей прогрессирования болезни.
Роль иммунных клеток в патогенезе заболеваний пародонта основана на способности
к выработке разнообразных цитокинов [12-13]. Самые первые работы по изучении роли
цитокинов в патогенезе заболеваний пародонта могут быть датированы 80-ми годами
прошлого столетия и совпадают с подробным изучением интерлейкина-1, интерлейкина-2 и
фактора некроза опухоли-альфа [14]. С появлением ИФА интерлейкин-1 бета стал первым
цитокином, уровень которого был специально измерен у пациентов с пародонтитом. С того
времени во многих работах сообщалось об определении уровня цитокинов в супернатантах
культур клеток пародинта и ротовой жидкости [15-17]. Изначально для определения
цитокинового статуса больных пародонтитом исследовалась десенная жидкость, однако в
последние годы смешанная слюна (ротовая жидкость) стала рассматриваться как
альтернативный источник биомаркеров. Ранние исследования были сосредоточены на
образцах сыворотки и жидкости из десневой борозды для исследования цитокинов,
связанных с пародонтитом; однако в последние годы слюна привлекла внимание как
альтернативный источник биомаркеров [18].
Смешанная слюна состоит из секрета слюнных желе, смешанного с микробным
компонентом, спущенным эпителием и остатками пищи [19]. Анализ ротовой жидкости дает
лучшее представление о местных патологических изменениях в полости рта, чем анализ
сыворотки крови, что дает данному методу значимое преимущество. Также смешанная
слюна имеет ряд преимуществ перед десенной жидкостью: большая доступность,
количество, простота забора. Кроме того, в отличие от десенной жидкости, исследование
которой будет информативна в отношении лишь состояния отдельных участках пародонта,
ротовая жидкость отражает воспалительный статус всей ротовой полости, что более значимо
клинически.
Новая коронавирусная инфекция действует системно и многие ее аспекты до сих пор
не до конца изучены, однако роль цитокинов в развитии осложнений подтверждена в ряде
исследований [20-21]. Наиболее известен так называемый «цитокиновый шторм» в рамках
коронавирусной инфекции. Сам термин был впервые использован в 1993 г. и с тех пор
активно используется. Многочисленные исследования показали важную роль ряда
провоспалительных факторов в прогнозе заболевания COVID-19. Предположено, что
цитокиновый шторм имеет решающее значение в прогрессировании инфекции SARS-CoV-2
и может быть основной причиной полиорганного поражения и повышения смертности у
пациентов с ослабленным иммунитетом [22].
Ввиду того, что и COVID-19, и пародонтит способны влиять на цитокиновый статус,
актуальным является вопрос о целесообразности изучения уровня цитокинов ротовой
жидкости у лиц с заболеваниями пародонта, перенесших коронавирусную инфекцию, так как
в случае активного влияния на процесс COVID-19, полученные данные могут неверно
интерпретироваться в отношении пародонтита.

Материалы и методы. В исследовании приняло участие 100 человек с диагнозом

хронический пародонтит (код по МКБ-10: K05.3), которые были разделены на 2 исследуемые
группы:
 Группа №1 – пациенты, не болевшие COVID-19 (n=52);
  Группа №2 – пациенты, перенесшие коронавирусную инфекцию (n=48).
Среди пациентов было 65 мужчин (65%) и 35 женщин (35%), средний возраст
которых составил 31,2±3,5 лет. Факт перенесенной коронавирусной инфекции
устанавливался на основе изученных данных анамнеза и проведения иммуноферментного
анализа для выявления антител класса IgG к S-белку SARS-CoV-2.
Работа проведена в соответствие с требованиями Комитета по биомедицинский этике,
утверждёнными Хельсинской декларацией Всемирной медицинской ассоциации об
этических принципах проведения медицинских исследований с участием людей в качестве
субъектов (2000 г.). Все участники исследования подписали добровольное информированное
согласие да начала проведения исследования. Работа не ущемляла права и не подвергала
опасности субъектов исследования. Всем пациентам проводился стандартный
стоматологический осмотр.
Дополнительно проводился подсчет индекса интенсивности кариеса зубов (КПУ),
определение значения упрощенного индекса гигиены (OHIS), а также папиллярно-
маргинально-альвеолярного индекса (PMA). Цитокиновый профиль ротовой жидкости
определяли путём измерения содержания интерлейкина-2 (IL-2), интерлейкина-4 (IL-4),
интерлейкина-17 (IL-17) и васкулоэндотелиального фактора роста (VEGF) методом
твёердофазного иммуноферментного анализа с использованием тест-систем компании
«eBioscience» с регистрацией на фотометре Emax фирмы «Molecular Devices».
Нестимулированную ротовую жидкость получали не ранее 3 часов после приема
пищи и полоскания ротовой полости, сбор проводился в контейнеры для слюны Salivate
компании «Гален». Биологический материал замораживался и хранился перед началом
исследования при температуре -20°С, далее пробы размораживались и центрифугировались.
Статистическая обработка проведена в программе Statistica (v. 12.5). Полученные данные
описывались с помощью характеристик положения и рассеянности, в качестве которых
принимались среднее значение и стандартное отклонение (M±SD). Для определения
нормальности распределения использовался тест Колмогорова-Смирнова. Сравнение
результатов между группами проводилось с помощью критерии Манна-Уитни.
Корреляционный анализ проведен с применением коэффициента Спирмена. Достоверно
значимыми считали результаты при p≤0,05.

Литература:
1. Димитрова А.Г. Контролируемая индивидуальная гигиена полости рта – важный
этап противовоспалительной терапии генерализованного пародонтита у лиц молодого
возраста. – Современная стоматология. – 2015; 1: 23–26
 2.Дмитриева Л.А., Максимовский Ю.М. Терапевтическая стоматология: национальное
руководство. М: ГЭОТАР- Медиа, 2009. С. 125-128. [Dmitrieva L.A., Maksimovskiy Yu.M.
Therapeutic dentistry: national leadership]. Moscow: GEOTAR- Media, 2009, pp. 125-128.
3. Taylor J. Protein biomarkers of periodontitis in saliva. ISRN Inflamm., 2014, p.18.
4. Лепилин А.В., Дубровская М.В. Иммунологические нарушения в формировании
заболеваний пародонта у беременных // Саратовский научно-медицинский журнал, 2010. Т.
6, No 2. С. 392-396. [Lepilin A.V., Dubrovskaya M.V. Immunological disorders in formation of
periodontal diseases at pregnant women. Saratovskiy nauchno-meditsinskiy zhurnal = Saratov
Journal of Medical Scientific Research, 2010, Vol. 6, no. 2, pp. 392-396. (In Russ.)]
5. de Campos B.O., Fischer R.G., Gustafsson A., Figueredo C.M. Effectiveness of non-
surgical treatment to reduce il-18 levels in the gingival crevicular fluid of patients with periodontal
disease. J. Braz. Dent., 2012, no. 23 (4), рр. 428-432.
6. Базарный В.В., Ваневская Е.А., Полушина Л.Г., Мандра Ю.В., Цвиренко С.В.
Характеристика секреторного иммунитета при герпетическом стоматите // Клиническая
лабораторная диагностика, 2013. No 9. С. 72. [Bazarny V.V., Vanevskaya E.A., Polyshina L.G.,
Mandra Yu.V., Tsvirenko S.V. Characteristics of secretory immunity in herpetic stomatitis.
Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics, 2013, no. 9,
p. 72. (In Russ.)]
7. Базарный В.В., Журавлев В.П., Мандра Ю.В., Николаева А.А., Ваневская Е.А.,
Полушина Л.Г. Иммунологические особенности ротовой жидкости у пациентов с
герпетической инфекцией // Уральский медицинский журнал, 2013. No 5 (110). С. 5-8.
[Bazarny V.V., Zhuravleva V.P., Mandra Yu.V., Nikolaeva A.A., Vanevskaya E.A., Polyshina L.G.
Immunological features of oral fluid of patients with herpes virus infection. Uralskiy meditsinskiy
zhurnal = Ural Medical Journal, 2013, no. 5 (110). pp. 5-8. (In Russ.)]
8. Базарный В.В., Полушина Л.Г., Ваневская Е.А. Иммунологический анализ ротовой
жидкости как потенциаль- ный диагностический инструмент // Российский
иммунологический журнал, 2014. Т. 8 (17), No 3. С. 769-771. [Bazarny V.V., Vanevskaya E.A.,
Polyshina L.G. Immunological assay oral fluid as potential diagnostic tool. Rossiyskiy
immunologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Immunology, 2014, Vol. 8 (17), no. 3, pp. 769-
771. (In Russ.)]
9. AlMoharib H.S., Mubarak A.A., Rowis R.A., Geevarghese A., Preethanath R.S. Oral
Fluid Based Biomarkers in Periodontal. Disease: Part 1. Saliva. J. Int. Oral Health, 2014, no. 6 (4),
рр. 95-103.
10. Ertugrul A.S., Sahin H., Dikilitas A., Alpaslan N., Bozoglan A. Comparison of CCL28,
interleukin-8, interleukin-1β and tumor necrosis factor-alpha in subjects with gingivitis, chronic
periodontitis and generalized aggressive periodontitis. J. Periodontal Res., 2013, no. 48 (1), рр. 44-
51.
11. de Campos B.O., Fischer R.G., Gustafsson A., Figueredo C.M. Effectiveness of non-
surgical treatment to reduce il-18 levels in the gingival crevicular fluid of patients with periodontal
disease. J. Braz. Dent., 2012, no. 23 (4), рр. 428-432.
12. Kornman KS, Page RC, Tonetti MS. The host response to the microbial challenge in
periodontitis: assembling the players. Periodontol 2000 1997: 14: 33–53.
13. Preshaw PM, Taylor JJ. How has research into cytokine interactions and their role in
driving immune responses impacted our understanding of periodontitis? J Clin Peri- odontol 2011:
38 (Suppl 11): 60–84.
14. Dinarello CA. Historical insights into cytokines. Eur J Immunol 2007: 37 (Suppl 1):
S34–S45.
15. Buduneli N, Kinane DF. Host-derived diagnostic markers related to soft tissue
destruction and bone degradation in periodontitis. J Clin Periodontol 2011: 38 (Suppl 11): 85– 105.
16. Preshaw PM, Taylor JJ. How has research into cytokine interactions and their role in
driving immune responses impacted our understanding of periodontitis? J Clin Peri- odontol 2011:
38 (Suppl 11): 60–84.
17. Taylor JJ. Protein biomarkers of periodontitis in saliva. ISRN Inflamm 2014: 2014:
593151
18. Wu Y, Shu R, Luo LJ, Ge LH, Xie YF. Initial comparison of proteomic profiles of
whole unstimulated saliva obtained from generalized aggressive periodontitis patients and healthy
control subjects. J Periodontal Res 2009: 44: 636–644.
19. Baum BJ, Yates JR 3rd, Srivastava S, Wong DT, Melvin JE. Scientific frontiers:
emerging technologies for salivary diagnostics. Adv Dent Res 2011: 23: 360–368.
20. Chuan Qin, Luoqi Zhou, Ziwei Hu, Shuoqi Zhang, Sheng Yang, Yu Tao, MD, Cuihong
Xie, Ke Ma, Ke Shang, Wei Wang, Dai-Shi Tian Dysregulation of immune response in patients
with COVID-19 in Wuhan, China Clin. Infect. Diseases (2020), 71(15) Pages 762–768,
21. P. Bhargava, P. Panda, V. Ostwal, A. Ramaswamy Repurposing valproate to prevent
acute respiratory distress syndrome/acute lung injury in COVID-19: a review of
immunomodulatory action Can. Res. Statist. Treat., 3 (5) (2020), p. 65
22. Peng, X.; Wang, Y.; Xi, X.; Jia, Y.; Tian, J.; Yu, B.; Tian, J. Promising Therapy for
Heart Failure in Patients with Severe COVID-19: Calming the Cytokine Storm. Cardiovasc. Drugs
Ther. 2021, 35, 231–247.