Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 34(5): 399-405, set-out, 2001.

ARTIGO

Nveis sricos de IgG anti-Trypanosoma cruzi na evoluo da cardiopatia chagsica crnica, no perodo de 10 anos
Sera levels of Ig G anti-Trypanosoma cruzi on evolution of the chronic chagasic cardiopathy in interval of 10 years
Patrcia Lago Zauza 1 e Jos Borges-Pereira 1

Resumo Com o objetivo de investigar a relao entre os nveis de anticorpos (IgG) anti-T. cruzi e a evoluo da cardiopatia chagsica crnica, no perodo de 10 anos, foi realizado um estudo envolvendo soros de 140 pacientes no submetidos ao tratamento especfico de Virgem da Lapa, Minas Gerais. Entre os pacientes, 92 so mulheres e 48 homens, com idades ao exame inicial de 10 a 70 anos (mdia = 38 +13,7 anos). Os nveis de anticorpos foram estimados pelas mdias dos ttulos registrados atravs dos testes de imunofluorescncia indireta e hemaglutinao indireta, e pelo ndice de reatividade (D.O. da amostra /cut-off) indicado nos testes ELISA convencional e recombinante CRA+FRA. No perodo, 49 pacientes se mantiveram sem cardiopatia, 29 desenvolveram cardiopatia, 33 mantiveram o grau inicial da cardiopatia, 25 evoluram com agravamento da cardiopatia inicial e 4 normalizaram o eletrocardiograma. A anlise dos resultados de todos os testes sorolgicos mostrou aumento estatisticamente significativo dos nveis de IgG anti-T. cruzi no grupo de pacientes com evoluo progressiva da cardiopatia principalmente na faixa etria de 20 a 59 anos, independentemente do sexo. Estes resultados indicaram uma associao direta entre os nveis sricos desses anticorpos e a evoluo progressiva da cardiopatia chagsica crnica. Palavras-chaves: Doena de Chagas. Cardiopatia chagsica crnica. Sorologia. Imunoglobulinas G. Estudo longitudinal. Abstract In order to investigate the relationship between T. cruzi specific antibodies (IgG) levels and the clinical course of chronic chagasic cardiopathy, the authors analyzed sera from 140 non-treated patients with specific drugs from Virgem da Lapa, Minas Gerais, during 10 years. Of these patients, 92 were women and 48 men, varying from 10 to 70 years old (mean = 38 +13.5 years). Antibody levels were estimated by the mean of titers obtained by an indirect immunofluorescence test, indirect hemagglutination assay and by the mean reactivity indexes (OD/cut-off) obtained by ELISA tests using a conventional antigens and recombinant proteins (CRA+FRA). During the study period, the course of the disease was as follows: 49 did not present cardiac alterations, 29 coursed to cardiopathy, 33 maintained initial cardiopathy, 25 evolved with aggravation of the cardiopathy and 4 with normalization of the electrocardiogram. Statistical analysis showed a significant increase in antibody levels among patients in the group with progressive cardiopathy, as well as in patients with age interval of 20 to 59 years, independent of sex. These findings indicated a direct association between T. cruzi specific antibodies (IgG) levels and the clinical course of chronic chagasic cardiopathy. Key-words: Chagas disease. Chronic chagasic cardiopathy. Serology. Immunoglobulins G. Longitudinal study.
Apesar dos estudos longitudinais sobre a doena de Chagas demonstrarem o carter progressivo das formas clnicas2 3 6 8 13, persistem as indagaes em torno do papel de fatores ligados ao parasita, ao hospedeiro ou a ambos no processo evolutivo. Em relao ao hospedeiro, poucos estudos tm sido realizados principalmente em busca de marcadores genticos, entretanto no campo dos fatores ligados resposta imune tem sido demonstrada a participao da imunidade celular na patogenia da cardiopatia20, enquanto so controversos os resultados sobre a participao da resposta imune representada pelas imunoglobulinas12 18 21 24. H estudos que referem diferenas nos perfis qualitativos e quantitativos das imunoglobulinas sricas nas diferentes fases e formas clnicas da doena de Chagas10 11 16 19, em diferentes populaes4 17 e em

1. Departamento de Medicina Tropical do Instituto Oswaldo Cruz da Fundao Osvaldo Cruz, Rio de Janeiro, RJ, Brasil. Apoio financeiro: CNPq Endereo para correspondncia: Dra. Patrcia Lago Zauza. Av. Brasil 4365, Pavilho Arthur Neiva, Manguinhos, 21045-900 Rio de Janeiro, RJ, Brasil. e-mail: borges@ioc.fiocruz.br Recebido para publicao em 9/5/2001.

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funo do tratamento especfico1 9 14. Entretanto, verificase a carncia de estudos longitudinais por longo intervalo de tempo, com o monitoramento simultneo dos nveis sricos de anticorpos anti-T. cruzi e das formas clnicas na ausncia de tratamento especfico. A partir dessa

constatao, decidimos realizar o presente trabalho com o objetivo principal de avaliar os nveis de anticorpos anti-T. cruzi em funo da evoluo da cardiopatia chagsica crnica em pacientes no submetidos ao tratamento especfico no intervalo de 10 anos.

MATERIAL E MTODOS Casustica . De um grupo de 835 pacientes antgenos solveis totais de T. cruzi (Kit Hemacruzichagsicos crnicos de Virgem da Lapa, Minas Biolab, lote H90651G, validade junho de 2000) os soros Gerais, constitudo a partir de 1984, foram foram testados em diluies na razo 2, a partir de selecionados 140 pacientes que apresentavam 1:40, enquanto na ELISA-c empregando como evoluo clnica e eletrocardiogrfica, no intervalo antgenos frao solvel purificada de T. cruzi (Kit mdio de 10 anos (1984-1994), sem tratamento EIE-doena de Chagas, Bio-manguinhos, lote especfico principalmente por recusas, contra9906ST01Z, validade dezembro de 1999) foram indicaes e migraes peridicas para trabalhar em testados em diluio nica de 1:100 e na ELISA-r outras reas impossibilitando o controle necessrio empregando os antgenos recombinantes CRA e FRA no uso de benznidazol. Desses pacientes, 92 eram (Kit EIE-recombinante-doena de Chagas, Biodo sexo feminino e 48 do sexo masculino com idades Manguinhos, validade janeiro de 2000) foram testados de 10 a 70 anos (mdia = 38 13,7 anos) na poca 50l in natura. do primeiro exame. No estudo clnico evolutivo Consideramos como indicadores de evoluo do realizado nesse perodo, entre os 78 pacientes sem nvel de anticorpos IgG anti-T. cruzi a variao dos cardiopatia ao exame inicial, 49 permaneceram ttulos revelada pelos testes de IFI e HAI e dos ndices inalterados (G1) e 29 desenvolveram cardiopatia (G2), de reatividade (D.O da amostra/cut-off) reveladas pelas enquanto entre os 62 com cardiopatia ao exame inicial, ELISAs. Para cada teste classificamos a evoluo 33 permaneceram inalterados (G3), 25 apresentaram sorolgica nos seguintes tipos: inalterada = variao agravamento da cardiopatia (G4) e 4 apresentaram dos ttulos < 2 diluies e dos ndices de reatividade normalizao do eletrocardiograma (G5) 2 . O comprometimento do aparelho digestivo no foi (IR) < 1,5 vezes, progressiva = aumento dos ttulos considerado em decorrncia da no realizao do 2 diluies e do IR 1,5 vezes e regressiva = queda exame radiolgico na avaliao final. dos ttulos 2 diluies e do IR 1,5 vezes. Testes sorolgicos e critrios de evoluo. Foram Anlise estatstica. Os dados foram analisados com consideradas as duas amostras de soros obtidas no o auxlio do programa Epi-info verso 6.0 (Pan American intervalo de 10 anos, armazenadas a -200C na soroteca Health Organization/World Health Organization). O teste do Departamento de Medicina Tropical do Instituto de Kruskal-Wallis e o teste de anlise de varincia foram Oswaldo Cruz. A pesquisa de Ig/G srica anti-T. cruzi usados para comparar as mdias geomtricas dos ttulos foi realizada em outubro de 1999 de maneira pareada de anticorpos anti-T. cruzi e de sua tendncia no estudo atravs dos testes de imunofluorescncia indireta (IFI), evolutivo. O qui-quadrado e o teste exato de Fisher foram hemaglutinao indireta (HAI), ELISA convencional usados para comparar diferenas entre as freqncias. (ELISA-c) e ELISA com recombinantes CRA e FRA O nvel de significncia considerado foi de 95% em todas (ELISA-r), obedecendo s recomendaes dos as anlises realizadas. fabricantes quanto utilizao dos reagentes, leitura Aspectos ticos. Todas as amostras de soros e interpretao dos resultados. Na IFI empregando avaliadas neste estudo foram obtidas por consentimento como antgenos formas epimastigotas do T. cruzi ps-informao das pessoas nas ocasies dos estudos obtidas de cultivo (Kit IFI-Chagas-Bio-Manguinhos, lote realizados por Dr. Borges-Pereira e outros pesquisadores 9904CI01Z-0400, validade abril de 2000) e HAI a partir de 1984, no municpio de Virgem da Lapa. empregando hemcias de aves sensibilizadas com RESULTADOS Considerando os resultados qualitativos dos testes nas duas amostras de soros, 16 pacientes apresentaram discrepncias, sendo 14 em um dos testes e dois pela HAI e ELISA convencional (Tabela 1). A HAI mostrou negatividade nas amostras de soros de sete pacientes, negativao em dois e positivao em um. A ELISA convencional mostrou negativao em dois pacientes e positivao em outros dois e a ELISA recombinante mostrou negativao em dois pacientes e positivao tambm em outros dois pacientes. Considerando o tipo de evoluo sorolgica de cada teste empregado (Tabela 2), o percentual de pacientes com evoluo sorolgica inalterada foi significativamente maior do que o percentual de pacientes com evoluo sorolgica progressiva a partir dos resultados da IFI, HAI e ELISA-c, enquanto pela ELISA-r a diferena entre os percentuais no foi significativa. A evoluo sorolgica regressiva, identificada em maior percentual de pacientes pela ELISA-r, no foi revelada pelo teste de IFI.

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Considerando os 140 pacientes estudados, a anlise comparativa das mdias inicial e final de anticorpos IgG anti-T. cruzi nos soros mostrou a mdia final significativamente maior do que a mdia inicial em todos os testes empregados (Figura 1).

Em funo da faixa etria, a mdia final foi significativamente maior do que a mdia inicial entre os pacientes com idades de 20 a 59 anos, sendo mais acentuada na faixa de 40 a 59 anos, tanto pelos testes de IFI e HAI (Tabela 3) como pelos testes de

Tabela 1- Caractersticas dos pacientes com discrepncias nos resultados dos testes sorolgicos.
Paciente Id 143 182 249 350 378 758 892 1108 1121 1284 1287 1381 1493 1498 1513 1840 31 35 32 45 34 48 60 38 50 48 19 36 32 38 58 60 Sx M M F F F M F F F M M F F F F F EVC G4 G4 G1 G3 G2 G4 G2 G3 G2 G3 G1 G1 G3 G3 G1 G3 IFI (*) inicial 320 320 160 80 80 160 80 160 160 320 80 80 320 640 160 320 final 320 320 640 80 80 160 320 640 320 320 320 320 320 640 1280 HAI (*) inicial N 40 N N N 80 80 N N N 80 320 40 N 160 final N 80 80 N N 640 N N N N 320 160 N 640 N 1280 ELISA-c (**) inicial 1,8 5,5 2,9 3,6 2,3 3,2 2,2 4,1 2,7 2,8 0,8 2,9 2,8 12,7 6,6 0,7 final 2,1 7,5 4,4 0,7 3,7 9,7 0,7 7,9 2,7 2,7 5,4 3,8 2,8 8,8 9,8 1,2 ELISA-r (**) inicial 27,0 0,9 7,7 9,2 2,0 0,7 8,1 20,5 12,8 11,8 9,6 5,4 29,5 7,1 16,5 23,7 final 30,5 4,3 17,3 1,2 1,5 11,0 4,0 36,0 12,2 2,9 23,0 0,8 13,2 0,7 9,5 15,1

1280 1280

(*) = inverso do ttulo; (**) = ndice de reatividade, Id = idade na poca do primeiro exame; EVC = evoluo clnica; ELISA-c = ELISA convencional; ELISA-r = ELISA recombinante CRA+FRA; G1 = paciente sem cardiopatia, G2 = paciente que evoluiu para cardiopatia, G3 = paciente com cardiopatia inicial inalterada, G4 = paciente com agravamento da cardiopatia inicial, N = negativa.

Tabela 2 -Tipos de evoluo sorolgica de acordo com o teste aplicado em soros obtidos no intervalo de 10 anos de 140 pacientes chagsicos crnicos.
Testes sorolgicos IFI HAI ELISA convencional ELISA recombinante CRA+FRA * critrios em material e mtodos
IFI HAI 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 0
Mdia inicial EP Mdia final EP
0 Mdia inicial EP Mdia final EP 30

Tipos de evoluo sorolgica* Inalterada Progressiva Regressiva 88 (63,9%) 84 (60,0%) 81 (57,9%) 60 (42,9%) 52 (37,1%) 49 (35,0%) 52 (37,1%) 63 (45,0%) 0 (...) 7 (5,0%) 7 (5,0%) 17 (12,1%)

Total de pacientes 140 140 140 140

ELISA convencional ELISA CRA +FRA

(Reatividades (D.O./ Cut-off)

(Inversos dos ttulos)

Mdia de IgG Srica

*p = 0,000004 546 37,2 *p = 0,00008

Mdia de IgG Srica

863 70,2

25

24,3 1,4
*p = 0,0001

20

17,4 1,1
15

476 42,5 271 18,4

10

7,8 0,3
5

6 0,3

*p = 0,00006

EP = erro padro

* anlise de varincia

Figura 1 - Evoluo das mdias de IgG anti-T. cruzi em soros de 140 chagsicos crnicos, no perodo de 10 anos.

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ELISA-c e ELISA-r (Tabela 4). Essa diferena significativa tambm foi observada em ambos os sexos, com maior intensidade entre as mulheres. Em relao evoluo da cardiopatia (Tabelas 3 e 4), os testes empregados registraram a mdia final significativamente maior do que a mdia inicial no grupo de pacientes sem cardiopatia (G1), no grupo de casos

novos de cardiopatia (G2) e no grupo de pacientes com agravamento da cardiopatia inicial (G4). Por outro lado, no grupo de pacientes com cardiopatia inicial inalterada (G3) e no grupo com normalizao do ECG a diferena entre as mdias inicial e final no foi estatisticamente significativa.

Tabela 3 - Evoluo das mdias dos ttulos de IgG anti-T. cruzi, pela IFI e HAI, em soros obtidos de 140 pacientes chagsicos crnicos, no intervalo de 10 anos.
Variveis Pacientes Imunofluorescncia indireta mdia inicial EP 186 15,8 246 14,9 281 17,9 408 33,0 mdia final EP 462 29,8 466 35,8 609 38,6 624 39,5 0,050 0,0006 0,000000 0,274 (*) p = Hemaglutinao indireta mdia inicial EP 235 33,3 478 45,8 524 42,0 352 31,6 mdia final EP 684 48,3 838 65,1 923 79,4 752 42,3 0,066 0,006 0,002 0,055 (*) p =

Faixa etria (anos)* 10-19 20-39 40-59 > 60 Sexo Feminino Masculino Grupos de pacientes- evoluo G1- sem cardiopatia G2 - desenvolveram cardiopatia G3 cardiopatia inalterada G4 agravamento da cardiopatia inicial G5 normalizao do ECG 49 29 33 25 4 240 19,0 297 22,8 294 16,1 241 12,8 440 20,3 538 45,4 631 35,0 395 20,5 649 37,0 640 38,3 0,0005 0,049 0,065 0,044 0,452 388 38,8 488 46,6 529 46,8 566 39,1 460 47,0 756 53,8 973 60,0 844 84,5 1036 89,2 450 47,8 0,001 0,005 0,117 0,0003 0,980 92 48 278 18,5 257 18,3 543 38,7 553 34,7 0,000001 0,00002 476 44,1 475 39,8 921 70,6 753 68,8 0,00002 0,042 9 53 68 10

*ao exame inicial, (*) teste de Kruskal-Wallis e anlise de varincia

Tabela 4 - Evoluo das mdias dos ndices de reatividade de IgG anti-T. cruzi, pela ELISA convencional e recombinante (CRA+FRA), em soros de 140 pacientes chagsicos crnicos, no intervalo de 10 anos.
Variveis Pacientes ELISA convencional mdia inicial EP mdia final EP (*) p = ELISA recomendado CRA+CFA mdia inicial EP mdia final EP (*) p =

Faixa etria (anos)* 10-19 20-39 40-59 > 60 Sexo Mulheres Homens Grupos de pacientes- evoluo G1- sem cardiopatia G2 - desenvolveram cardiopatia G3 cardiopatia inicial inalterada G4 agravamento da cardiopatia inicial G5 normalizao do ECG 49 29 33 25 4 5,3 0,28 5,6 0,26 7,1 0,30 6,5 0,27 5,7 0,29 7,4 0,27 8,0 0,34 7,4 0,28 9,4 0,38 4,8 042 0,002 0,017 0,786 0,012 0,772 15,2 0,96 16,5 1,05 19,8 1,29 18,7 1,32 21,4 0,76 23,3 1,05 24,5 1,43 24,7 1,71 27,0 1,64 15,3 0,58 0,001 0,044 0,277 0,010 0,305 92 48 5,5 0,27 7,0 0,29 7,2 0,30 9,0 0,33 0,001 0,012 16,6 1,14 18,8 1,11 23,7 1,33 25,5 1,54 0,001 0,041 9 53 68 10 5,6 0,30 5,9 0,30 6,1 0,26 6,7 0,33 7,7 0,23 7,5 0,34 8,2 0,32 6,8 0,33 0,081 0,038 0,0005 0,947 15,4 0,96 16,2 1,03 18,1 1,18 20,7 1,38 22,1 1,05 24,0 1,42 25,4 1,46 20,3 1,23 0,258 0,007 0,007 0,952

*ao exame inicial, (*) teste de Kruskal-Wallis e anlise de varincia

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DISCUSSO Ao realizarmos este trabalho com soros armazenados a -20 o C por mais de uma dcada, sem antecedente na literatura, consideramos a possibilidade de que essas condies pudessem influir de maneira significativa nos resultados, o que determinaria maior freqncia de evoluo sorolgica progressiva. Contudo, observamos maior freqncia de evoluo sorolgica inalterada, alm do registro de evoluo regressiva, indicando que as condies de armazenamento citadas no influram de modo significativo nos resultados. Willcox et al25 e Castro et al5 utilizando os testes de IFI e ELISA convencional no encontraram variaes significativas nos nveis de anticorpos em soros armazenados por at dois anos a -20oC. A aplicao dos testes sorolgicos como instrumentos de medidas dos nveis de anticorpos Ig G anti-T. cruzi em soros est fundamentada no bom desempenho que os mesmos tm apresentado em estudos seccionais qualitativos e quantitativos22 23 26, alm da comprovada indicao para avaliar a eficcia do tratamento especfico na doena de Chagas1 9 14. No pequeno nmero de estudos, correlacionando os nveis sricos de anticorpos anti-T. cruzi com as formas clnicas da doena de Chagas crnica no submetida ao tratamento especfico destaca-se a investigao de natureza seccional realizada por Gusmo et al10 com soros de 217 chagsicos crnicos de Gois, observando maiores mdias desses anticorpos pela aglutinao direta no grupo de pacientes na forma clnica digestiva e cardaca grave. Tambm em estudo seccional Zauza26 avaliando soros de 835 chagsicos crnicos de Virgem da Lapa, Minas Gerais, encontrou maiores nveis pelos testes de IFI e HAI no grupo de pacientes na forma cardaca. Cotejando a literatura sobre estudos sorolgicos longitudinais envolvendo pacientes chagsicos crnicos no submetidos ao tratamento especfico verificamos o trabalho realizado por Luquetti et al15 com soros de 10 chagsicos de Gois, avaliados pelos testes de IFI, HAI e ELISA convencional, no intervalo mximo de 21 meses, encontrando variaes no significativas dos ttulos. Enquanto no presente estudo observamos aumento significativo dos nveis de anticorpos em percentuais de pacientes que variaram de 37% pela IFI a 45% pela ELISAr. Provavelmente a discordncia entre esses resultados possa ser atribuda aos diferentes intervalos de tempo, nmero e origem dos pacientes, alm das questes tcnicas dependentes de variaes nos componentes dos kits empregados assim como as diferenas laboratoriais. No presente trabalho verificamos oscilaes nos nveis de anticorpos com negativao ou positivao de soros pelas ELISAs e HAI. Estas oscilaes podem ser consideradas esperadas, diante do amplo espectro de resultados encontrados em estudos sorolgicos na doena de Chagas crnica, as quais podem ser conseqncias das caractersticas dos testes empregados ou da dinmica da interao T. cruzi homem, com repercusses tanto na resposta imune como na evoluo da doena. Merece destaque o achado de negatividade persistente nas duas amostras de soros somente pela HAI em sete pacientes com diferentes caractersticas clnicas evolutivas, de ambos os sexos e diferentes idades. No encontramos explicao consistente para este achado. Embora, admitamos a possibilidade de existirem fatores impeditivos da reao antgenoanticorpo, nos soros destes pacientes, dirigidos para o teste de HAI utilizado neste estudo. Cabe tambm salientar que no houve negativao sorolgica pelos quatro testes empregados, sinalizando para a ausncia de cura espontnea no perodo. Contudo, houve queda dos nveis de anticorpos, identificada pelos testes de HAI e ELISAs, nos quatro pacientes que evoluram com normalizao do ECG, o que pode ser indicativo de que a negativao sorolgica em pacientes sem tratamento especfico acompanha a regresso da doena, porm necessita de tempo maior para sua definio. O aumento significativo dos nveis de anticorpos revelado por todos os testes entre os pacientes na faixa etria de 20 a 59 anos e no significativo entre os pacientes maiores de 60 anos de ambos os sexos nos conduziu a uma anlise comparativa com o perfil evolutivo da doena, resultando numa correlao positiva entre a progresso da doena e aumento dos nveis de anticorpos em funo da faixa etria. Neste contexto, destacamos tambm que todos os testes identificaram aumento significativo dos nveis de anticorpos no grupo de pacientes sem cardiopatia ao exame inicial, tanto entre os que assim permaneceram (G1) como entre os apresentaram doena cardaca ao exame final (G2), indicando o elevado potencial de oscilao dos nveis de Ig G anti-T. cruzi entre os pacientes com maior potencial de evoluo progressiva da doena6 7 8. No campo das especulaes, estas observaes adquirem importncia por diversos aspectos. Em primeiro lugar, porque pode ser a expresso indireta de uma possvel instabilidade na interao entre o parasito e o homem (hospedeiro em questo) e em segundo lugar, porque, nestes pacientes, a queda dos nveis de anticorpos, com tratamento especfico ou no, pode ser indicativo de estabilizao ou reduo da intensidade desta interao ou at mesmo de cura. Esta ltima hiptese pode ser justificada pelos resultados deste trabalho que mostraram aumento significativo dos nveis de anticorpos entre os pacientes com agravamento da cardiopatia inicial (G4),

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no significativo entre os pacientes com evoluo inalterada da cardiopatia inicial (G3) e reduo dos nveis entre os pacientes que normalizaram o eletrocardiograma (G5), indicativo de possvel reduo da morbidade cardaca. A importncia do conhecimento sobre o comportamento dos nveis de anticorpos na doena de Chagas tem sido evidenciada principalmente em estudos que avaliam eficcia do tratamento especfico. Nessa direo, Andrade et al1 relatam a queda dos nveis de anticorpos anti-T. cruzi, pelos testes de IFI, HAI e ELISA convencional no grupo de chagsicos com idades de 7 a 12 anos, trs anos depois de terem sido tratados com benznidazol em comparao com o grupo controle que usou placebo. Tambm Estani et al 9, em estudo longitudinal de quatro anos, empregando os mesmos testes sorolgicos, observaram a queda significativa dos nveis de anticorpos sricos anti-T. cruzi no grupo de crianas na forma clnica indeterminada submetida ao tratamento com a mesma droga em comparao com o grupo controle que usou placebo.

O envolvimento da imunidade celular no processo determinante de leses miocrdicas no curso da infeco pelo T. cruzi20 tem sido demonstrado enquanto o envolvimento da imunidade humoral representada pelas imunoglobulinas ainda est por ser claramente definido, considerando que o conhecimento existente sobre a integrao e cooperao dos componentes celular e molecular do sistema imune durante o processo infeccioso fundamenta essa investigao. Apesar dos resultados do presente trabalho indicarem uma associao direta entre os nveis circulantes de Ig G anti-T. cruzi e a progresso da cardiopatia chagsica crnica, os limites da casustica e mtodos empregados no nos permitem concluir sobre a participao dessas imunoglobulinas na patogenia da leso miocrdica, mas, apenas, nos permitem afirmar que a intensidade da resposta imune humoral, representada por essas imunoglobulinas, est diretamente associada evoluo clnica da cardiopatia chagsica crnica.

AGRADECIMENTOS Os autores agradecem a Antonio Gomes Pinto Ferreira e Edmilson Domingos da Silva do Laboratrio de Tecnologia Diagnstica, Bio-Manguinhos, Fiocruz, pelo fornecimento dos kits para os testes sorolgicos de imunofluorescncia indireta, ELISA convencional e ELISA recombinante empregados neste trabalho; ao tcnico Jos de Souza Nogueira, Departamento de Medicina Tropical pela colaborao na realizao das tcnicas e ao Dr. Nelson Chagas pelas sugestes na aplicao dos mtodos estatsticos.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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