ESCUELA NORMAL MIXTA PCIA.

DE SAN LUIS FORMACIN PROFESIONAL PARA AYUDANTES DE LABORATORIO NOMBRE: COMISIN:

TERICO-PRCTICO N 6: MICROORGANISMOS DEL AMBIENTE INTRODUCCIN Los microorganismos pueden dividirse para su estudio en cinco grupos principales: algas, hongos, protozoarios, bacterias y virus. Estos cinco grupos pueden dividirse a su vez segn su organizacin celular en eucariotas (algas, hongos y protozoarios) y procariotas (bacterias); los virus no presentan estructura celular. Todos ellos, se encuentran presentes en todos los ambientes: en el aire, en el agua, en el suelo, en la superficie de los objetos e incluso sobre nuestra piel. El hombre sano y normal, desde el momento de su nacimiento y a lo largo de toda su vida aloja miles de especies de bacterias en diferentes sitios de su organismo, entre ellos: la piel, mucosas, boca y saliva. Las bacterias ms frecuentes de estos sitios son cocos Gram positivos, como ser: Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis y varias especies de Streptococcus. Por otro lado, el aire, adems de partculas en suspensin, es portador de bacterias en forma vegetativa o esporuladas, esporos de hongos y virus. La poblacin microbiana del aire est compuesta principalmente por esporas de hongos, especialmente de Cladosporium spp. y basidiosporas, y por bacterias, entre ellas Bacillus spp, Micrococcus spp., esporos de Clostridium y Bacillus. En la industria alimenticia la higiene es un factor importante para obtencin de alimentos seguros. La suciedad aporta gran cantidad de bacterias y la falta de higiene personal de los manipuladores puede ocasionar la contaminacin de los alimentos con microorganismos productores de intoxicaciones e infecciones alimentarias. Por otra parte, las zonas sucias en los lugares de trabajo atraen vectores (moscas y roedores) y las maquinarias e instrumentos de trabajo sucios pueden transportar grmenes a un alimento sano. Los manipuladores de alimentos tienen un gran protagonismo en la higiene alimentaria. La correcta higiene personal, el lavado cuidadoso de las manos despus de la utilizacin de los servicios, antes de empezar a trabajar y despus de cada interrupcin, adems de mantener las manos alejadas de la cara, son medidas que sirven para reducir el riesgo de contaminacin de los alimentos.

Introduccin a la Microbiologa

PARTE PRCTICA Objetivos

Poner en evidencia la presencia de los microorganismos existentes en el ambiente,

aire; superficie de materiales y del cuerpo.

Poner de manifiesto la necesidad de trabajar en estricta esterilidad en microbiologa

debido a la gran facilidad con que se puede contaminar el material de trabajo. Materiales Para el anlisis de esporas de hongos en aire por sedimentacin Placas con medio Agar Sabureau Glucosado. Placas con Agar Nutritivo Para el anlisis de superficies Hisopo estril. Placas con Agar Nutritivo

Placas Con Agar Eosina Azul de Metileno (EMB)

Para el anlisis de manipuladores Hisopo estril

Placas con Agar Nutritivo Placas de Agar Manitol Salado. Placas de Agar Eosina Azul de Metileno (EMB)
Para todos los anlisis se utilizar estufa a 37 C
Procedimientos Anlisis del aire Existen distintos mtodos para el anlisis del aire siendo el mtodo de sedimentacin uno de los ms sencillos para la determinacin de microorganismos del aire. A pesar de ello, los resultados obtenidos son orientativos de las cifras de microorganismos presentes en el aire, ya que estos niveles varan en funcin de las corrientes de aire y del tamao de las partculas en suspensin.

Anlisis de esporas de hongos por sedimentacin: 1) Destapar placas con agar Sabouraud y agar nutritivo, en un lugar cuyo nivel de
contaminacin se desee examinar, durante diferentes intervalos de tiempo: 30 minutos y 1 hora. 2) Tapar las placas e incubar durante 24-48 horas a 37 C.

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3) Discutir los resultados en grupo. Se pondrn en simultneo las placas de ambos

agares para observar sus diferencias con respecto a su selectividad. Anlisis de superficies Existen distintos mtodos para el examen microbiolgico: mtodo del hisopo, de placa de contacto, etc..

Anlisis de superficies por mtodo del hisopo

Este sistema es el ms antiguo y el ms utilizado en el examen microbiolgico de superficies, ya que sirve para el anlisis tanto de superficies planas como de no planas. 1) Elegir la superficie a investigar.

2) Delimitar la superficie que se va a analizar mediante una plantilla de papel aluminio

estril con una abertura de dimensin conocida (9 cm2). 3) Humedecer el hisopo estril en una solucin con 10 ml de solucin salina estril y frotar varias veces sobre la superficie delimitada con la plantilla. 4) Introducir de nuevo el hisopo en el tubo con solucin salina estril y dejar durante 1530 minutos de manera que los microorganismos se liberen del algodn al medio lquido. 5) Sembrar 0,1 ml de dicha solucin en una placa con agar nutritivo (para microorganismos aerobio mesfilos totales).

6) Incubar durante 24-48 hs. a 37 C. El recuento se expresa como UFC/cm2.

Anlisis de manipuladores El objetivo de un anlisis a manipuladores es comprobar que la persona que procesa el alimento no es una fuente de contaminacin. Se puede estudiar: manos, uas y fosas nasales. 1) Sin lavarse las manos, un integrante del grupo, har una impresin con el dedo pulgar sobre la superficie de una placa con agar nutritivo y con agar Sabouraud. 2) En otra placa con agar nutritivo colocar un cabello.

3) Rozar por las fosas nasales o boca un hisopo, previamente humedecido en solucin
salina estril y sembrar directamente su contenido en placas con agar nutritivo y con agar EMB.

4) Rozar por toda la palma de la mano (incluyendo uas) un hisopo, previamente

humedecido en solucin salina estril y sembrar directamente su contenido en placas con agar nutritivo y con agar EMB. 5) Toser directamente sobre placas con agar EMB o Manitol salado. 6) Llevar a incubar las placas a estufa a 35 C durante 24-48 hs (en el caso de las placas de Manitol salado y Sabouraud incubar durante 3 das). 7) Observar el crecimiento de colonias en los diferentes agares. 8) Sacar conclusiones con los compaeros.
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Realizar un informe de los resultados obtenidos.