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REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA ASIGNATURA:
REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA UNIVERSIDAD DEL ZULIA FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE MEDICINA ASIGNATURA:
REPÚBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA
UNIVERSIDAD DEL ZULIA
FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE MEDICINA
ASIGNATURA: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA
ESCUELA DE MEDICINA ASIGNATURA: BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA Tema 10: Bacilos Gram positivo Lic. Liliana Gómez Gamboa
Tema 10: Bacilos Gram positivo
Tema 10:
Bacilos Gram positivo
BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA Tema 10: Bacilos Gram positivo Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.) MARACAIBO, MAYO 2011.
BACTERIOLOGÍA Y VIROLOGÍA Tema 10: Bacilos Gram positivo Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.) MARACAIBO, MAYO 2011.
Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.)
Lic. Liliana Gómez Gamboa (M.Sc.)
MARACAIBO, MAYO 2011.
MARACAIBO, MAYO 2011.

Corynebacterium

Corynebacterium diphtheriae

Produjo grandes epidemias en los siglos XVI y XVII, en esta época, no se diferenciaba con claridad la

difteria de otras enfermedades respiratorias altas

denominadas comúnmente "catarro" .

En 1821 el anatomopatólogo Pierre Bretonneau

describió las características clínicas particulares de

la difteria, por lo que se podía diferenciar de otras

enfermedades respiratorias .

En 1883 Klebs descubrió cocos y bacilos en

cadenas en los cortes microscópicos de membranas

diftéricas .

Corynebacterium diphtheriae

En 1884 Friedrich Löeffler , quien trabajaba en el

laboratorio de Koch en Berlín, aisló por primera

vez el bacilo diftérico en cultivo puro, con la

ayuda de un medio de cultivo de su propia

creación que todavía se usa en la actualidad.

Löeffler demostró que el microorganismo podía

reproducir la enfermedad en cobayos, lo que satisfacía los postulados de Koch y que se

trataba del agente etiológico de la difteria .

Corynebacterium diphtheriae

Utilizando su medio de cultivo, Löeffler demostró

que los individuos sanos podían transportar los

microorganismos en su garganta de forma

asintomática, lo que estableció que el estado de

portador era un fenómeno importante en el mantenimiento y diseminación de la enfermedad .

Löeffler también demostró que el microorganismo

permanecía en la membrana sin invadir los tejidos

adyacentes o sitios más lejanos y postulo que las

manifestaciones neurológicas y cardíacas de la enfermedad eran causadas por una sustancia tóxica elaborada por el germen .

Corynebacterium diphtheriae

En 1888 Roux y Yersin trabajaban en el institutito

Pasteur y confirmaron el postulado de Löeffler al

demostrar que filtrados libres de bacterias de los

cultivos de bacilos diftéricos eran capaces de matar a

los cobayos .

En 1890 Von Berhing trabajaba en el laboratorio de Koch y demostró que luego de la infección el

antisuero contra la toxina podía proteger a los

animales infectados de la muerte .

En 1894 Roux demostró que la administración de antitoxina había reducido la mortalidad por difteria

entre los huerfanos de Paris del 51 % al 24 % .

Corynebacterium diphtheriae

exitosamente a niños con una mezcla de toxina y antitoxina . calentamiento la volvían atóxica
exitosamente a niños con una mezcla de toxina y
antitoxina .
calentamiento la volvían atóxica para los
receptores, sin que por ello perdiera su capacidad
para inducir respuesta de anticuerpos .

En 1913 Teobald Smith y Von Berhing vacunaron

En 1923 el instituto Pasteur comprobó que la exposición de la toxina a la formalina y su

Corynebacterium diphtheriae

En 1924 trabajos clínicos demostraron que la

inyección de este toxoide inducía un nivel

elevado de protección entre los receptores .

Durante la década de 1950 Freeman , Groman , Barksale , Pappenheimer y otros demostraron

que la producción de toxina por

Corynebacterium diphtheriae dependía de la

presencia de un fago ß-lisogénico y durante la

década siguiente quedo esclarecido el

mecanismo por el cual la toxina inhibía la

síntesis proteica .

Taxonomía

• Géneros relacionados : • Corynebacterium • Actinomyces • Actinobaculum • Propionibacterium •
• Géneros relacionados :
• Corynebacterium
• Actinomyces
• Actinobaculum
• Propionibacterium
• Propioniferax
• Arcanobacterium
• Gardnerella
• Listeria
• Erysipelothrix
• Clostridium
• Lactobacillus
Propioniferax • Arcanobacterium • Gardnerella • Listeria • Erysipelothrix • Clostridium • Lactobacillus
Familia Corynebacteriaceae Género Corynebacterium • Bacterionema • Caseobacter • 108 especies •
Familia
Corynebacteriaceae
Género Corynebacterium
Bacterionema
Caseobacter
• 108 especies
Corynebacterium
• 11 subespecies
Turicella
• Bacterionema • Caseobacter • 108 especies • Corynebacterium • 11 subespecies • Turicella
• Bacterionema • Caseobacter • 108 especies • Corynebacterium • 11 subespecies • Turicella

Género Corynebacterium

• Está compuesto por 108 especies, de las cuales 36 tiene importancia clínica. • Especies
• Está compuesto por 108 especies, de las cuales 36 tiene
importancia clínica.
• Especies importantes clínicamente :
– C. amoniagenes
– C. kutschery
– C. auriscanis
– C. mastitidis
– C. bovis
– C. mooreparkense
– C. callunae
– C. mycetoides
– C. camporealensis
– C, phocae
– C. capitovis
– C. pilosum
– C. casei
– C. renale
– C. cystitidis
– C. testudinoris
– C. efficiens
– C. terpenotabidum
– C. felinum
– C. variabile
– C. flavescens
– C. vitaeruminis
– C. glutamicum

Género Corynebacterium

• La pared celular contiene ácido meso -diaminopimélico como diaminoácido y cadenas cortas de ácidos
• La pared celular contiene ácido meso -diaminopimélico como
diaminoácido y cadenas cortas de ácidos micólicos de 22 a 36
átomos de carbono .
• El contenido G+C varia de 46 a 76 mol % .
• Al colorearse con Gram, se observan como bacilos Gram positivo
ligeramente curvos, sus lados no son paralelos y sus extremos
pueden ser ligeramente más anchos, dándoles en ocasiones forma
de raqueta, esta morfología se observa en los verdaderos
Corynebacterium
• En medios líquidos se pueden
observar como células aisladas, en
pares, en forma de V, formando
empalizadas o en grupos formado
letras chinas .
• Son catalasa positiva y las especies
médicamente relevantes son no
motiles
Hábitat Natural • La mayoría de las especies de Corynebacterium forman parte de la flora

Hábitat Natural

La mayoría de las especies de Corynebacterium forman parte de la flora normal de piel y mucosas de humanos y mamíferos .

C . diphtheriae puede aislarse de la nasofaringe y de lesiones en piel, lo que actualmente representa el principal reservorio para la diseminación de la difteria .

Las bacterias corineformes que predominan en la

orofaringe son C . durum y R . dentocariosa.

C . auris y T . otitidis poseen una preferencia casi

exclusiva por el conducto auditivo externo .

C . glucuronolyticum se aísla casi exclusivamente de muestras genitourinarias de humanos .

auditivo externo . • C . glucuronolyticum se aísla casi exclusivamente de muestras genitourinarias de humanos

Importancia Clínica

Estimar la importancia clínica de las bacterias

corineformes aisladas de muestras clínicas

frecuentemente es confuso para el microbiólogo clínico ; esto se debe principalmente al hábitat natural de estos

microorganismos, el cual puede conducir a su aislamiento en muestras mal tomadas .

Los corineformes deben ser identificados hasta el nivel de especie si son aislados :

De sitios anatómicos normalmente estériles .

De muestras clínicas tomadas adecuadamente si son el

microorganismo predominante .

De muestras de orina en cultivo puro con un contaje > 10 4 UFC/ml, o como microorganismo predominante con un contaje > 10 5 UFC/ml .

Importancia Clínica

• El significado clínico de los corineformes está fuertemente relacionado a los siguientes hallazgos :
• El significado clínico de los corineformes está fuertemente
relacionado a los siguientes hallazgos :
 Múltiples muestras son positivas para el mismo corineforme .
 En el examen directo con Gram de la muestra se observa el
corineforme y también está presente una fuerte respuesta
leucocitaria .
 Los otros microorganismos aislados de la muestra son de baja
patogenicidad .
una fuerte respuesta leucocitaria .  Los otros microorganismos aislados de la muestra son de baja

Corynebacterium diphtheriae

Corynebacterium diphtheriae • Es un bacilo pleomorfo ( 0, 3 a 0, 8 x 1 a

Es un bacilo pleomorfo ( 0, 3 a 0, 8 x 1 a 8 µm)

que se tiñe de manera irregular (gránulos

metacromáticos ) .

Esta especie se subdivide en cuatro biotipos en

función de la morfología de sus colonias y sus

propiedades bioquímicas .

C. diphtheriae es un modelo clásico de virulencia bacteriana. La toxicidad que se observa es atribuida directamente a una exotoxina secretada por las bacterias en el foco de la infección. El microorganismo no necesita penetrar en la sangre para producir los síntomas sistémicos de la enfermedad.

infección. El microorganismo no necesita penetrar en la sangre para producir los síntomas sistémicos de la

Corynebacterium diphtheriae

El gen tox que codifica la exotoxina, se introduce en las cepas

mediante un bacteriófago lisogénico.

Son necesarios dos pasos para que se secrete el producto

activo del gen: 1) escisión proteolítica de la secuencia

adelantada de la proteína tox durante la secreción desde la

pared bacteriana, y 2) escisión de la molécula de la toxina en

dos polipéptidos (A y B) que permanecen unidos mediante un

enlace disulfuro. Esta proteína de 58.300 Da es un ejemplo de

la clásica exotoxina A-B.

unidos mediante un enlace disulfuro. Esta proteína de 58.300 Da es un ejemplo de la clásica

Corynebacterium diphtheriae

Corynebacterium diphtheriae Existen tres regiones funcionales en la molécula de toxina, una región de unión al

Existen tres regiones funcionales en la molécula de

toxina, una región de unión al receptor, una región de

translocación en la subunidad B y una región

catalítica en la subunidad A. El receptor de la toxina

es el factor de crecimiento epidérmico de unión a la

heparina, que está presente en la superficie de

muchas células eucariotas, fundamentalmente en el

corazón y en las células nerviosas; su presencia

explica los síntomas cardíacos y neurológicos que se

observan en los pacientes con difteria grave.

Corynebacterium diphtheriae

La región de la translocación se inserta en la membrana endosomal y facilita el movimiento de la región catalítica hacia el citosol tras la unión de la toxina a la célula del organismo anfitrión.La subunidad A finaliza la síntesis de proteínas de dicha célula al inactivar el factor

La subunidad A finaliza la síntesis de proteínas de dicha célula al la síntesis de proteínas de dicha célula al

inactivar el factor de elongación 2 (EF-2), factor necesario para el

movimiento de las nuevas cadenas peptídicas que se están formando en

los ribosomas.

factor necesario para el movimiento de las nuevas cadenas peptídicas que se están formando en los

Corynebacterium diphtheriae

Debido a que el recambio de EF-2 es muy lento y a que sólo existe alrededor de una molécula por ribosoma en cada célula, se ha estimado que una única molécula de exotoxina puede inactivar todo el contenido de EF-2 en una célula para interrumpir por completo la síntesis de proteínas en la célula del organismo anfitrión.La síntesis de la toxina está regulada por un elemento codificado en un cromosoma, el

La síntesis de la toxina está regulada por un elemento codificadode proteínas en la célula del organismo anfitrión. en un cromosoma, el represor de la toxina

en un cromosoma, el represor de la toxina diftérica (DTxR). Esta

proteína, que se activa en presencia de concentraciones elevadas de

hierro, se puede unir al operador del gen de la toxina y evitar la

producción de la misma.

elevadas de hierro, se puede unir al operador del gen de la toxina y evitar la

Patogenia de

C. diphtheriae

Patogenia de C. diphtheriae
Patogenia de C. diphtheriae

Epidemiología de C. diphtheriae

La difteria es una enfermedad de distribución universal,

fundamentalmente en las zonas urbanas desfavorecidas

donde existen condiciones de hacinamiento y el nivel de

inmunidad inducida por la vacuna es bajo.

C. diphtheriae se mantiene en la población como consecuencia del estado de portador asintomático en la

orofaringe o en la piel de las personas inmunizadas (por la

exposición a C. diphtheriae o vacunación). Se transmite de

una persona a otra a través de gotitas respiratorias o

mediante contacto cutáneo. El ser humano representa el

único reservorio conocido de este microorganismo.

Enfermedades clínicas de

C. diphtheriae

La presentación clínica de la difteria viene determinada

por : 1) el lugar de la infección; 2) el estado inmunitario

del paciente, y 3) la virulencia del microorganismo . La

exposición a C. diphtheriae puede originar colonización

asintomática de las personas con inmunidad completa,

enfermedad respiratoria leve en las personas

parcialmente inmunizadas o enfermedad fulminante, y

algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados.

enfermedad fulminante, y algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados. DIFTERIA RESPIRATORIA DIFTERIA CUTÁNEA

DIFTERIA RESPIRATORIA

enfermedad fulminante, y algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados. DIFTERIA RESPIRATORIA DIFTERIA CUTÁNEA

DIFTERIA CUTÁNEA

enfermedad fulminante, y algunas veces mortal, en los pacientes no inmunizados. DIFTERIA RESPIRATORIA DIFTERIA CUTÁNEA

Aislamiento e Identificación

• Muestras • Pruebas para la Identificación de Género : – Catalasa – Metabolismo Fermentativo/
• Muestras
• Pruebas para la Identificación de Género :
– Catalasa
– Metabolismo Fermentativo/ Oxidativo
– Reducción de Nitratos
– Ureasa
– Hidrólisis de la Esculina
– Lipofilismo
– Pirazinamidasa
– Reacción de CAMP
– Producción de ácido a partir de :
• Glucosa
• Maltosa
• Sucrosa
• Manitol
• Xilosa

Pruebas de Susceptibilidad

La susceptibilidad a los antimicrobianos en los corineformes

no es predecible, por lo que deben realizarse pruebas de

susceptibilidad únicamente a los aislados clínicamente

significantes .

Debido a la emergencia de la resistencia a vancomicina en

Gram positivos, se hace inapropiado recomendar

glicopéptidos como drogas de primera línea para el

tratamiento de infecciones causadas por corineformes .

Algunos corineformes poseen resistencia intrínseca a

vancomicina ( Microbacterium resistens ) .

El CLSI no posee lineamientos para la realización de pruebas

de susceptibilidad para este grupo de microorganismos .

Pruebas de Susceptibilidad

Un enfoque pragmático es utilizar el método de difusión del disco en MH con 5% de sangre de carnero, incubado en

aerobiosis a 35ºC por 24 horas, extendiendo a 48 horas la

incubación para algunos Corynebacterium lipofílicos de

crecimiento lento .

Los

Arcanobacterium spp ., deben incubarse en atmósfera del 5% de CO 2 para obtener un mejor crecimiento .

Los criterios de interpretación actualmente utilizados son

Y

Corynebacterium

lipofílicos ,

Rothia

spp .

los establecidos para Streptococcus .

El laboratorio debe indicar los criterios utilizados para la

interpretación del antibiograma .

Pruebas de Susceptibilidad

• La CIM puede determinarse por E- Test o por dilución en agar o caldo
• La CIM puede determinarse por E- Test o por dilución en agar
o caldo por el método de microdilución .
• Los resultados del E- Test para Corynebacterium spp .
poseen una buena correlación con los métodos de dilución en
agar y microdilución en caldo.
• La CIM debe reportarse sin criterios de interpretación, si los
criterios son requeridos por el médico se debe indicar el
criterio utilizado y la nota de “ No existen criterios de
interpretación para bacterias corineformes ”.

Tratamiento, prevención y control

El aspecto más importante del tratamiento de la difteria es la administración precoz de la

El aspecto más importante del tratamiento de la difteria es la

administración precoz de la antitoxina diftérica con el fin de neutralizar

de forma específica la exotoxina antes de que esta se una a la célula del

organismo anfitrión. La muerte celular es inevitable tras la

internalización de la toxina.

Se usa el tratamiento antibiótico con penicilina o con eritromicina para destruir las células de C. diphtheríae e inhibir la producción de exotoxina. para destruir las células de C. diphtheríae e inhibir la producción de exotoxina.

También es importante el reposo en cama, el aislamiento para evitar

una diseminación secundaria y, en los pacientes con difteria respiratoria,

el mantenimiento de la permeabilidad de la vía aérea.

secundaria y, en los pacientes con difteria respiratoria, el mantenimiento de la permeabilidad de la vía

Tratamiento, prevención y control

La vacunación con el toxoide es necesaria tras la recuperación delpaciente, ya que un gran número de sujetos no logra fabricar anticuerpos protectores con posterioridad

paciente, ya que un gran número de sujetos no logra fabricar anticuerpos

protectores con posterioridad a una infección natural.

La difteria sintomática se puede prevenir mediante la vacunaciónprotectores con posterioridad a una infección natural. activa de las personas con toxoide diftérico. El toxoide,

activa de las personas con toxoide diftérico. El toxoide, no tóxico e

inmunogénico, se prepara tratando la toxina con formalina. Inicialmente,

los niños reciben cinco inyecciones de esta preparación con antígenos

del tétanos y de la tos ferina (vacuna DPT) a los 2, 4, 6,15 y 18 meses de

vida, así como a las 4 y 6 años. Después de esta edad, se recomienda la

administración de vacunaciones de recuerdo con el toxoide diftérico combinado con el toxoide tetánico cada 10 años. Se puede determinar la

concentración de anticuerpos antitoxina sérica por medio de una prueba de neutralización de piel de conejo o célula Vero.

• No está relacionada genéticamente con ninguno de los géneros tratados, esta remotamente relacionada con
• No está relacionada genéticamente con ninguno de los géneros tratados, esta remotamente relacionada con

No está relacionada genéticamente con ninguno de los géneros tratados, esta remotamente relacionada con Bifidobacterium.

Es la única especie perteneciente al género Gardnerella.

Posee una capa de peptidoglicano similar a la de los Gram

positivo, pero esta capa es mucho más delgada.

Lisina es el diaminoácido de la pared celular y su contenido G+C es de 42-44 mol%.

A la coloración de Gram se muestran como bacilos o cocobacilos

Gram variable.

Son catalasa negativa, no motiles y un metabolismo fermentativo lento.

Gardnerella vaginalis

Gardnerella vaginalis forma parte de la flora anorectal de

individuos sanos de ambos sexos; también forma parte de la

flora vaginal endógena de la mujer en edad reproductiva .

El pH óptimo de crecimiento está entre 6 y 7.

Este microorganismo puede ser recuperado de la uretra de hombres pareja de mujeres con vaginosis bacteriana .

Está asociada con vaginosis bacteriana y su rol en esta entidad clínica es controversial .

En mujeres embarazadas la vaginosis bacteriana puede

conducir a parto pretermino , ruptura prematura de

membranas y corioamnionitis .

También se ha recuperado de sangre de pacientes con fiebre

postparto o postabortal y puede ocasionar infecciones en el

recién nacido .

de sangre de pacientes con fiebre postparto o postabortal y puede ocasionar infecciones en el recién

Gardnerella vaginalis

Infecciones serias en otras localizaciones diferentes al

tracto genital y complicaciones obstétricas son raras,

pero se han reportado .

Muestras clínicas

Aislamiento e identificación :

Directo de secreciones vaginales

Presencia de células clave

Presencia de flora mixta, predominantemente Gram negativos

pequeños (Prevotella y Porphyromonas)

Bacilos y cocobacilos Gram variable (G. vaginalis)

) • Bacilos y cocobacilos Gram variable ( G. vaginalis ) • Lactobacillus spp . ausentes

Lactobacillus spp . ausentes o muy escasos.

Test de aminas (KOH 10 %)

Identificación de biotipos (8 )

Pruebas de Susceptibilidad

El metronidazol es la droga de elección .

Las infecciones sistémicas producidas por G . vaginalis únicamente, pueden tratarse con

ampicilina o amoxicilina ya que la producción de

betalactamasas no se ha observado hasta el

momento.

No se recomienda la realización de pruebas de susceptibilidad y no existen lineamientos para

su realización e interpretación .

Listeria

Pertenece a la Familia Listeriaceae ( Brochothrix y Listeria) .

Especies :

L . monocytogenes (hombre)

Listeria ivanovii (animales)

Listeria ivanovii subsp . ivanovii

Listeria ivanovii subsp. londoniensis

L . innocua

L . seeligeri

L . welshimeri

L . grayi

Los miembros del género son bacilos Gram positivo cortos,

regulares, no ramificados dispuestos solos o en cadenas .

Los organismos son móviles a 28 ºC por la presencia de 1 a 5 flagelos peritricos , pero son muy poco motiles a 37ºC

Listeria

La temperatura óptima de crecimiento es entre 30 y 37 ºC ;

pueden crecer a 4 ºC .

Son anaeróbicos facultativos, generalmente catalasa positiva y oxidasa negativa, producen ácido a partir de D - glucosa y otros carbohidratos .

Son Vogues - Proskauer , rojo de metilo y esculina positiva .

Son urea, gelatina, indol y H 2 S negativo.

Su pared celular posee m -DAP y ácido lipoteicoico , pero no ácido micólico .

Contenido G+C 36- 42 mol% .

Hábitat Natural

Las especies de Listeria están ampliamente distribuidas en la

naturaleza, se ha aislado de suelo, materia vegetal en

descomposición, granos, aguas, aguas servidas, alimentos

animales, pollos y gallinas frescos y congelados, carnes

frescas y procesadas, leche cruda, queso, desechos de mataderos y portadores animales humanos y asintomáticos .

L . monocytogenes ha sido aislada de numerosas especies

de mamíferos, aves, peces, crustáceos e insectos .

Debido a su amplia diseminación L . monocytogenes posee

muchas oportunidades de entrar en los ambientes de

producción y procesamiento de alimentos, y su habilidad de

crecer a 4 ºC, le permite producir enfermedad en personas

Patogenia e inmunidad

L. monocytogenes es un patógeno facultativo intracelular que puede crecer en los macrófagos, las células epiteliales y los fibroblastos en cultivo.

Los estudios con modelos animales han puesto de manifiesto que estalas células epiteliales y los fibroblastos en cultivo. infección se inicia en los enterocitos o en

infección se inicia en los enterocitos o en las células M de las placas de Peyer.

Su entrada en las células no fagocíticas está mediada por seis o más

proteínas ricas en leucina, las internalinas (p. ej., InlA, InlB, InlC), que

interaccionan con los receptores glucoproteicos de la superficie de las células

del organismo anfitrión.

Después de penetrar en las células, el pH ácido del fagolisosoma que rodea a las bacterias activa una toxina bacteriana (Iisteriolisina O) y dos enzimas

diferentes de fosfolipasa C, lo que conlleva la liberación de las bacterias en el

citosol de la célula.

y dos enzimas diferentes de fosfolipasa C, lo que conlleva la liberación de las bacterias en
y dos enzimas diferentes de fosfolipasa C, lo que conlleva la liberación de las bacterias en
y dos enzimas diferentes de fosfolipasa C, lo que conlleva la liberación de las bacterias en

Patogenia e inmunidad

Las bacterias se replican y posteriormente se mueven a través de la célula hasta la membrana celular. Este movimiento está mediado por una proteína bacteriana, ActA , la cual se localiza en la superficie celular en un extremo de la ActA, la cual se localiza en la superficie celular en un extremo de la bacteria y coordina el ensamblaje de la actina. Por tanto, la bacteria es empujada hacia la membrana celular, donde se forma una protrusión (filópodo) que obliga a la bacteria a pasar a la célula adyacente.

Una vez que la bacteria es ingerida por la célula adyacente, se repite elque obliga a la bacteria a pasar a la célula adyacente. proceso de lisis fagolisosómica, replicación

proceso de lisis fagolisosómica, replicación bacteriana y movimiento

direccional. La entrada en los macrófagos después de haber atravesado las

células que recubren el intestino conduce a las bacterias hasta el hígado y el

bazo, lo que produce la diseminación de la enfermedad.

Patogenia e inmunidad

Patogenia e inmunidad La inmunidad humoral es relativamente poco importante en el desarrollo de las infecciones

La inmunidad humoral es relativamente poco importante en el desarrollo de las infecciones por L. monocytogenes. Estas bacterias se

pueden replicar en los macrófagos y moverse en el interior de las células,

evitando así la eliminación mediada por anticuerpos. Por este motivo, los

pacientes con deficiencias de la inmunidad celular, pero no de la

humoral, son especialmente susceptibles a las infecciones graves.

con deficiencias de la inmunidad celular, pero no de la humoral, son especialmente susceptibles a las
con deficiencias de la inmunidad celular, pero no de la humoral, son especialmente susceptibles a las
con deficiencias de la inmunidad celular, pero no de la humoral, son especialmente susceptibles a las

Invasión

Invasión
Invasión

Invasión

Invasión

Importancia Clínica

En adultos no embarazados, L . monocytogenes produce

principalmente meningitis, encefalitis y septicemia.

Individuos ancianos o personas con respuesta inmune celular

disminuida son especialmente susceptibles .

L . monocytogenes posee un elevado tropismo por el sistema

nervioso central, lo que produce enfermedades severas con

una elevada tasa de mortalidad ( 20- 50% ) o secuelas

neurológicas entre los sobrevivientes.

enfermedad

bacteriémica tipo influenza que, si no es tratada, puede conducir a placentitis y amnionitis e infección del feto, lo que resulta en abortos y nacimientos prematuros, ya que el

microorganismo es capaz de atravesar la placenta.

En mujeres embarazadas produce una

Importancia Clínica

DIAGNÓSTICO PRECOZ Detección de L .

monocytogenes en sangre de la madre y en diferentes

muestras del recién nacido (LCR , sangre, líquido amniótico,

secreciones respiratorias, placenta, heridas cutáneas,

aspirado gástrico o meconio). La observación microscópica de bacilos Gram positivo en estas muestras es de invaluable

ayuda en el diagnóstico temprano de esta patología.

Infecciones localizadas raramente ocurren después de un episodio de bacteriemia, sin embargo, se ha descrito listeriosis primaria cutánea con o sin bacteriemia en veterinarios y trabajadores del campo, quienes adquieren la enfermedad a través del contacto con tejidos animales infectados.

Importancia Clínica

Infecciones como endocarditis, artritis, abscesos

intrabdominales, endoftalmitis e infecciones pleuropulmonares se

han descrito infrecuentemente.

EPIDEMIOLOGÍA.

Se aisla de la tierra, el agua, la vegetación y de varios animales, incluyendo al ser humano (portadores gastrointestinales de bajo grado).

La enfermedad se asocia con el consumo de alimentos contaminados (p. ej.,

queso no curado, leche, pavo, vegetales crudos [especialmente repollo]) o con

la diseminación transplacentaria de la madre al neonato; los casos

esporádicos y epidémicos ocurren durante todo el año pero tienen un máximo

en los meses más cálidos.

Los jóvenes, los ancianos y las mujeres gestantes, así como los pacientes con

defectos de la inmunidad celular, tienen riesgo de padecer esta enfermedad.

Diagnóstico e Identificación

Seguridad en el laboratorio .

Muestras

Clínicas

Alimentos

Aislamiento

Cultivo

Detección rápida

Diagnóstico e Identificación

Identificación

Género :

Bacilos Gram positivo

Motilidad en vueltas de payaso en gota pendiente

Catalasa positiva

Esculina positiva

Crecimiento a 4 ºC y 37 ºC

Especie

Hemólisis

CAMP ( S. aureus y R. equis )

Hipurato

Acido a partir de :

Manitol

D-metil -manosido

L -rhamnosa

Almidón

D-xilosa

Ribosa

N-acetil -β -D-manosamina

Manitol – D-metil -manosido – L -rhamnosa – Almidón – D-xilosa – Ribosa – N-acetil -

Pruebas de Susceptibilidad

Los patrones de susceptibilidad y resistencia de L . monocytogenes han permanecido relativamente estables

por mucho tiempo.

In vitro es susceptible a AM, GM, E, Te, Ra y C, pero presenta susceptibilidad moderada a quinolonas .

Penicilina o ampicilina con o sin un aminoglicósido son el

tratamiento recomendado .

Plásmidos de resistencia a TE, C y macrólidos en infecciones

graves por L . monocytogenes .

Las cefalosporinas son inactivas in vitro, sin embargo in vivo al parecer poseen cierto efecto, por lo que no se recomiendan para el tratamiento de listeriosis .

Familia Bacillaceae Género Bacillus • 247 especies • 05 subespecies
Familia Bacillaceae
Género Bacillus
• 247 especies
• 05 subespecies
B. anthracis B. cereus
B. anthracis
B. cereus
Familia Bacillaceae Género Bacillus • 247 especies • 05 subespecies B. anthracis B. cereus
Bacillus • Son bacilos Gram positivo aeróbicos, formadores de esporas de resistencia, a excepción de

Bacillus

Son bacilos Gram positivo aeróbicos, formadores de

esporas de resistencia, a excepción de B . infernus que es anaeróbico estricto .

Son catalasa y motilidad positiva .

La mayoría de las especies son mesófilos, pero existen

especies termófilas y psicrófilas .

La mayoría de los miembros son aeróbicos formadores

de esporas ampliamente distribuidos en la naturaleza,

pero algunas especies son oportunistas y patógenos

obligados de mamíferos e insectos .

El principal habitad es el suelo , todo tipo de suelos,

ácidos, alcalinos, frios , calientes, fértiles, desérticos, así

como las columnas de agua y depósitos de los fondos de

cuerpos de agua fresca y aguas marinas.

Bacillus

Sus esporas fácilmente sobreviven en el suelo, polvo y

aerosoles de una gran cantidad de ambientes naturales y

hábitat .

Alimentos secos como especies, leche en polvo y otros productos están frecuentemente contaminados con una alta carga de esporas .

B . anthracis es un patógeno obligado de animales y el hombre, ya que su multiplicación en el ambiente es muy rara.

B . cereus es un patógeno oportunista que produce

principalmente intoxicaciones alimentarias .

es muy rara. • B . cereus es un patógeno oportunista que produce principalmente intoxicaciones alimentarias

Importancia Clínica

La mayoría de los miembros del género poseen poco o ningún poder

patógeno y no están asociados a infecciones en el humano y otros mamíferos .

Las excepciones son B. anthracis , B. cereus y B. liqueniformis .

La alta resistencia de las esporas a la desecación, radiación, desinfección y al calor permiten que estos se comporten como contaminantes de quirófanos, instrumentos quirúrgicos, productos

farmacéuticos y alimentos .

Muchas especies son de utilidad biotecnológica :

. • Muchas especies son de utilidad biotecnológica : • B . licheniformis y B .

B . licheniformis y B . subtilis (bacitracina)

P . polymyxa (polimixina)

B . megaterium (vitamina B 12 y B 2 )

B . subtilis (biotina y riboflavina)

B . cereus , B . circulans, B . megaterium , B . pumilis, B . subtilis , G . stearothermophilus (ensayoe de antibióticos)

B . cereus (validación de desinfectantes)

B . subtilis (monitoreo de fumigaciones)

G. stearothermophilus (esterilización por calor)

B . pumilis (esterilización por radiación).

Bacillus cereus

Bacillus cereus es el segundo en importancia dentro del

género como patógeno humano .

Produce principalmente intoxicaciones alimentarias e

infecciones oportunistas .

Produce dos tipos de intoxicación alimentaria :

Tipo diarreica: caracterizada por dolor abdominal, con diarrea de 8

a 16 horas después de la ingestión del alimento contaminado, esta asociada a una amplia diversidad de alimentos como carnes,

vegetales, pastas, tortas, salsas y leche.

Tipo emética: caracterizada por nauseas y vómito de 1 a 5 horas después de la ingesta del alimento contaminado, está asociada

principalmente a la ingesta de arroz chino, ocasionalmente se asocia

a cremas pasteurizadas, pudines de leche, pastas y formulas

lácteas reconstituidas .

chino, ocasionalmente se asocia a cremas pasteurizadas, pudines de leche, pastas y formulas lácteas reconstituidas .

Bacillus cereus

• Ambos síndromes se deben a la capacidad de las esporas de B . cereus
• Ambos síndromes se deben a la capacidad de las esporas de
B . cereus de sobrevivir a los procedimientos de cocción
utilizados en la preparación del alimento y a malas
condiciones de almacenamiento de los alimentos después de
preparados, lo que permite la germinación de las esporas .
condiciones de almacenamiento de los alimentos después de preparados, lo que permite la germinación de las

Bacillus anthracis

El ántrax es la condición clínica causada por las especies

de Bacillus más conocida y estudiada .

Manifestaciones clínicas

Ántrax cutáneo

Ántrax respiratorio

Ántrax gastrointestinal

. • Manifestaciones clínicas – Ántrax cutáneo – Ántrax respiratorio – Ántrax gastrointestinal

Patogenicidad

Plásmidos de Virulencia

pX01

Gen cya (factor de edema)

Gen lef (factor letal)

Gen pag (antígeno protector)

pX02

Genes necesarios para la síntesis de la cápsula de ácido poli -D- glutámico

Toxina del Ántrax

Toxina letal (LeTx )

Toxina de edema ( EdTx )

de ácido poli -D- glutámico • Toxina del Ántrax – Toxina letal (LeTx ) – Toxina

Toxina del Ántrax

Toxina del Ántrax

Patogenicidad

Estructuras de superficie

Cápsula

Capa S

Exosporium

Regulación de genes de virulencia

• Estructuras de superficie – Cápsula – Capa S – Exosporium • Regulación de genes de
CÁPSULA TOXINA DE EDEMA TOXINA LETAL
CÁPSULA
TOXINA
DE
EDEMA
TOXINA
LETAL

Lafagocitosis de las células en fase de replicación. La actividad adenil ciclasa de la toxina

fagocitosis de las células en fase de replicación.

La actividad adenil ciclasa deLa fagocitosis de las células en fase de replicación. la toxina de edema origina la acumulación

la toxina de edema origina la

acumulación de líquidos

característica del carbunco.

la

cápsula

inhibe

característica del carbunco. la cápsula inhibe La actividad de la metaloproteasa de zinc de la toxina

La actividad de la metaloproteasa de zinc de la toxina letal estimula la liberación de factorcaracterística del carbunco. la cápsula inhibe de necrosis tumoral e interleucina, así como otras

de necrosis tumoral e interleucina, así como otras citocinas proinflamatorias, por parte de los

macrófagos. Esta toxina interviene, igualmente, en la lisis de macrófagos en ciertos cultivos

celulares.

PA (Antígeno protector) es la proteína dotada de una mayor inmunogenicidad (de donde proviene su nombre) de las principales proteínas de B. anthracis. Tanto Factor letal como B. anthracis. Tanto Factor letal como

Factor Edema inhiben el sistema inmunitario del organismo anfitrión.

Aislamiento e identificación

Muestras clínicas .

Coloración de Gram

Aislamiento

Crecen y esporulan a 37 ºC en los medios de

rutina utilizados en un laboratorio clínico.

los medios de rutina utilizados en un laboratorio clínico. – Consideraciones de bioseguridad. – Muestras con

Consideraciones de bioseguridad.

Muestras con flora mixta .

Asilamiento e identificación

Identificación

Antes de comenzar a identificar a nivel de especie es importante establecer que es un microorganismo aeróbico formador de endosporas .

Diámetro del bacilo (µm)

Cadenas de células

Motilidad

Esporangio

Forma, posicion, etc.

Crecimiento en anaerobiosis .

Crecimiento a 50 y 65 ºC.

Reacción en amarillo de huevo agar

Hidrólisis de la caseína, almidón y gelatina.

Arginina dehidrolasa

Producción de indol

Reducción de nitratos

Gas de carbohidratos

Acido a partir de:

D- arabinosa

Glicerol

Glicógeno

Inulina

Manitol

Salicin

D- trealosa

Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación
Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación
Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación

Aislamiento e identificación

Pruebas de Susceptibilidad

Bacillus antharcis es invariablemente susceptible a la

penicilina, solo cinco trabajos han reportado la aparición de

resistencia a penicilina .

Es susceptible a GM, E y V.

Es generalmente susceptible a estreptomicina pero resistente a cefalosporinas .

El tratamiento de elección es una fluoroquinolona combinado

con otro antibiótico al que el microorganismo sea sensible .

B . cereus y B . thuringiensis producen betalactamasa por lo

penicilina, ampicilina y

cefalosporinas , también son resistentes a TMP , pero casi siempre sensibles a CC , E, C, Va, Te, Sulfas y

tanto son resistentes

a