ESCHERICHIA COLI ENTEROHEMORRAGIQUE (EHEC)

I - AGENT INFECTIEUX
Nom scientifique: Escherichia coli entrohmorragiques (EHEC) Nom commun : aucun Maladie correspondante non dnomme Caractristiques : Bacille Gram ngatif appartenant la famille des Enterobacteriacae, et au genre Escherichia. Bactrie gnralement commensale de la microflore bactrienne normale du tube digestif de lhomme et de la plupart des animaux sang chaud, E. coli peut galement tre lorigine de pathologies extra-intestinales (mningites, infections urinaires) ou intestinales. Les souches dites VTEC (verotoxinproducing E. coli) sont toutes les souches dEscherichia coli ayant le gne stx codant les shiga-like toxines ou verotoxines Les souches isoles chez les malades sont appeles EHEC (enterohemorrhagic E. coli).
NB :Le genre Escherichia comprend cinq espces : Escherichia blattae, Escherichia coli, Escherichia fergusonii, Escherichia hermanii et Escherichia vulneri. E. coli est la seule espce ventuellement pathogne pour lhomme. Escherichia coli est caractris par une grande diversit antignique. Trois antignes de surface sont dcrits et pris en compte : les antignes O somatiques (171 au total); les antignes K capsulaires (74) et enfin les antignes H flagellaires (56). Les principaux pathotypes intestinaux, dcrits en fonction des signes cliniques engendrs et des facteurs de pathognicit exprims, sont : les E. coli entrotoxinognes (ETEC), les E. coli entropathognes (EPEC), les E. coli entroinvasifs

(EIEC) et les E. coli entrohmorragiques (EHEC). E. coli O157:H7 appartient au pathovar EHEC.

II - ATTEINTES A LA SANT
Pathognicit : Au cours des annes 1980, les EHEC et plus particulirement le srotype O157:H7 sont devenus des pathognes mergents responsables la fois de cas sporadiques et de cas groups de diarrhes souvent sanglantes pouvant voluer vers des pathologies plus graves comme le syndrome hmolytique et urmique (SHU) et le purpura thrombotique thrombocytopnique (PTT). Les EHEC sont capables de produire une ou plusieurs cytotoxines appeles verotoxines capables de tuer in vitro les cellules Vero (cellules rnales du singe vert africain) par inhibition de la synthse protique. Les toxines sont appeles galement Shiga-LikeToxin en raison de leurs similitudes avec la toxine de Shigella dysenteriae type 1. Deux types de verotoxines existent STX1, STX2 avec plusieurs variants de STX2. STX2 serait mille fois plus cytotoxique sur les cellules endothliales rnales humaines que STX1. Lhomologie entre STX1 et STX 2 varie de 50 60% avec des rgions de faibles ou de trs hautes homologies. A linstar des EPEC, les EHEC ont la capacit de causer des lsions dattachement et deffacement des micro villosits intestinales. Ils possdent en gnral le gne dattachement ou deffacement eae, localis sur le chromosome, codant pour une protine de membrane externe : lintimine. La plupart des souches dEHEC ont galement la proprit dlaborer une entrohmolysine (EHX) lorigine dune petite zone trouble dhmolyse aprs 18-24 heures dincubation sur une glose au sang contenant des rythrocytes lavs. Epidmiologie : Systme de surveillance en France : Epidmiologie des Syndromes hmolytiques et urmiques de l'enfant de moins de 15 ans / Novembre 2001 1/6

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Socit Franaise de Nphrologie Pdiatrique et Institut National de veille sanitaire Systme de surveillance en Europe : Enternet .Verocytotoxigenic E.coli in Europe : a European Commission Concerted Action Project Systme de surveillance aux USA : Pulsenet (Center for Disease Control and Prevention =CDC) Statut pidmiologique : La grande majorit des pidmies sont dues au srotype O157 :H7. Dautres srotypes ont t incrimins dont O111 et dans une moindre mesure : O26 et O103, O145.etc. Au niveau mondial, il existe une variation saisonnire marque de linfection, les pidmies les plus nombreuses sont intervenues lt et au dbut de lautomne. Les enfants de moins de 5 ans et les personnes ges de plus de 65 ans sont les classes dges les plus touches. Aux Etats-Unis selon le CDC (Center for Disease Control and Prevention dAtlanta), il y aurait chaque anne plus de 20 000 cas et au moins 250 dcs lis E. coli O157:H7, mais ces chiffres seraient sous estims tant donn lincapacit de nombreux laboratoires dtecter E. coli O157:H7. Aux Etats-Unis, en 1999 le taux de SHU tait de 1,6 pour 100 000 par an et par enfant de moins de 5 ans et de 0,8 pour 100 000 par an par enfant de moins de 15 ans avec des variations gographiques importantes. Le taux de ltalit est de 5% pour les enfants. En Europe, le taux dincidence annuel des SHU est de 1 2 pour 100.000 en Allemagne, 0,78 pour 100.000 en France et 0,3 pour 100.000 enfants de moins de 15 ans en Italie (entre 1998 et 2000). En France, le srotype O157:H7 tait lorigine en 1999 de 50% des cas de SHU dclars. La dure moyenne dhospitalisation est de 17 jours et le taux de ltalit tait de 1% pour la priode 93-96.

Rservoir : Les ruminants et notamment les bovins sont considrs lheure actuelle comme le rservoir principal dEHEC. Nanmoins, ces bactries ont t retrouves dans lintestin de nombreuses autres espces animales (porcs, chevaux, petits ruminants, volailles, chiens, chats, mouettes, cerfs.). Le portage sain chez les bovins est trs variable; 5 20% des animaux seraient porteurs sains. Le portage est plus important chez les animaux jeunes (veaux aprs sevrage, jeunes bovins de boucherie) que chez les animaux gs. Le portage dpend de plusieurs facteurs dont le principal semble tre la conduite alimentaire du troupeau (existence dun sevrage brutal, modification de la teneur protique de la ration). Dose infectieuse : Le nombre de bactries ncessaires pour produire linfection semble tre bas mais la relation dose-rponse nest pas rellement connue. Mode de transmission : Les trois principales voies de contamination sont lingestion daliments (produits dorigine animale mais aussi lgumes crus et produits laitiers au lait cru) ou deau contamins, la transmission oro-fcale de personne personne et le contact direct avec les animaux et leurs djections (notamment les bovins). Aux Etats-Unis, depuis les 5 dernires annes, les diffrents modes de transmission se rpartissent comme suit : alimentaire 66%, interhumaine 20%, par leau de boisson 8%, lors de baignades (piscines, lacs..) 4% et par contact direct avec les bovins 2% (Griffin, 2000). Priode d'incubation : de 1 8 jours ( moyenne 3-4 jours) suivant lge des malades, la virulence des souches et la dose ingre. Transmissibilit : Les souches d EHEC mises dans les selles sont directement infectantes (transmission inter-humaine frquemment cite) Novembre 2001 2/6

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III - DISSMINATION
Agent de dissmination : - Dissmination par les animaux et lhomme quils soient malades ou porteurs sains - Contamination indirecte par les fces avant tout, les produits dorigine animale et en premier lieu les steaks hachs de buf insuffisamment cuits et les produits laitiers (le lait cru et les fromages au lait cru). Mais les produits dorigine non animale contamins par les matires fcales sont de plus en plus souvent incrimins : cidre artisanal de pommes, laitues, pommes de terre, pousses de radis, etc. Dautre part, le milieu extrieur reprsente une source importante, notamment avec leau (baignade en lac ou pataugeoire contamine par de la matire fcale dorigine humaine, ou eau de boisson insuffisamment chlore), lherbe contamine, etc. Zoonose : Les EHEC producteurs de STX2e lorigine de la maladie de loedme du porc nont pas encore t dcrits dans les infections humaines. Vecteurs : aucun Surveillance des aliments : Systme de surveillance en France : non. Cependant la DGAL a organis des plans de surveillance ponctuels depuis 1995. Systme de surveillance en Europe : non Systme de surveillance aux USA : oui. Contrles vise pidmiologique (CDC, Pulsenet)

sensible la majorit des dsinfectants Inactivation par des moyens physiques : traitement thermique de type pasteurisation et rayonnements ionisants (5 KGy) Vie et Survie dans l'environnement : importante (jusqu 10 mois dans le fumier et la matire fcale)

V - ASPECTS MDICAUX
Diagnostic : Diagnostic clinique : La colite hmorragique est la principale manifestation clinique de linfection EHEC. Elle est caractrise par des crampes abdominales, et une diarrhe initialement aqueuse puis sanglante chez un patient gnralement apyrtique ou subfbrile. L'volution est gnralement spontanment favorable en quelques jours. Le tableau clinique peut se compliquer d'un syndrome hmolytique et urmique (SHU) ou d'un purpura thrombotique et thrombocytopnique (PTT), particulirement chez l'enfant et le sujet g. L'apparition du SHU se fait en moyenne une semaine aprs le dbut des symptmes digestifs. Deux 7% des patients atteints dune infection intestinale EHEC dvelopperont un SHU. Cette incidence est suprieure chez l'enfant et les personnes ges : 10% chez les enfant de moins de 10 ans et 10 20% chez les sujets gs . Le SHU est caractris par une triade typique : anmie hmolytique microangiopathique, thrombocytopnie, insuffisance rnale aigu avec complications neurologiques graves (25% des cas) entrainant souvent la mort. Lors des diffrentes pidmies, le pourcentage de patients dont linfection volue vers le SHU varie de 3 20%.

IV - VIABILIT
Sensibilit aux mdicaments (antibiotiques, antiparasitaires etc.) : aucune rsistance aux antibiotiques na encore t cite.

Diagnostic microbiologique et/ou srologique : Chez lhomme, 93 % des souches dE. coli isoles fermentent le sorbitol en moins de 24 heures. En revanche, E. coli O157:H7 se caractrise par une absence de fermentation Sensibilit aux dsinfectants : 3/6 ESCHERICHIA COLI ENTEROHEMORRAGIQUE (EHEC) Novembre 2001

du sorbitol, ou par une fermentation trs lente de celui-ci, plus de 24 heures. E. coli O157 :H7 se distingue aussi par labsence de production dune enzyme commune un trs grand nombre de souches dE. coli : la glucuronidase. Ces particularits biochimiques sont utilises en diagnostic pour lidentification du srovar O157 :H7. Les Escherichia coli entrohmorragiques (EHEC) non O157 :H7 nont par contre pas de particularits biochimiques communes permettant leur identification en routine. Le diagnostic repose sur la mise en vidence dans les selles de E.coli O157 : H7 et/ou de la toxine et/ou du gne de virulence stx. Pour la dtection de la toxine, plusieurs kits commerciaux existent. Premiers soins et traitement : Le traitement des malades est avant tout symptomatique (rhydratation, transfusion et/ou dialyse). L'administration de ralentisseurs de transit et /ou d'antibiotiques est controverse. Immunisation naturelle : Aucune immunit protectrice nest dmontre actuellement Vaccination : Aucune Prophylaxie : Aucune prophylaxie spcifique n'est recommande en dehors des recommandations habituelles de prvention des infections dissmination fcale (lavage des mains). Ces recommandations s'appliquent particulirement aux trs jeunes enfants et aux personnes tant en contact avec des sujets ou des animaux contamins ou potentiellement contamins.

Mal values. Mais plusieurs cas dinfection acquises en laboratoire ont t cits. Sources et chantillons : Fces et contenu digestif principalement Les colonies VTEC (aprs isolement ou immuno-concentration) Dangers primaires : Ingestion accidentelle de bactries (par projection sur les lvres, ou mauvaise dsinfection des mains) Dangers particuliers : Animaux infects naturellement ou exprimentalement reprsentent un danger pour le personnel de laboratoire et les prposs aux soins des animaux Classe de Confinement : Classe de l'agent-Classe 3* (cf Directive 2000/54/CE du 18 septembre 2000) Prcautions particulires : Conformes la manipulation des souches microbiennes de classe 3* Dversements accidentels : Laisser retomber les arosols; endosser des vtements protecteurs et masque bucco-nasal, couvrir soigneusement la substance dverse avec une serviette de papier absorbant et appliquer de l'hypochlorite de sodium 1 %, de la priphrie vers le centre; laisser agir pendant une priode suffisante (environ 20 minutes) avant de procder au nettoyage. Elimination : Conformit aux pratiques du niveau 3* Entreposage : Dans des contenants scells tiquets de faon approprie

VI - DANGERS POUR LE PERSONNEL DE LABORATOIRE ET MODALITES DE LA PREVENTION

Infections lies ou acquises au laboratoire :

VII - RECHERCHE DANS L'ENVIRONNEMENT ET LES ALIMENTS

Aliments, eau ou environnement. Novembre 2001 4/6

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Mthodes phnotypiques Ces mthodes ne sont applicables que pour le seul srotype O157 :H7 (cf section II, pathognicit) Compte tenu de la dose infectieuse basse, il est ncessaire de recourir une phase denrichissement (24 H 42C en bouillon trypticase soja (additionn de novobiocine ou dacriflavine) ou eau peptone tamponne additionne de vancomycine, cefsulodine et cefixime). Pour lisolement de la bactrie cible sont utiliss des milieux rvlant les proprits biochimiques de E. coli O157:H7 (sorbitol (-) et -glucuronidase (-)). Parmi ces milieux citons la glose MacConkey au sorbitol (SMAC) laquelle on ajoute souvent du cefixime et du tellurite (CT-SMAC). De nombreuses mthodes immunologiques permettent de dtecter E. coli O157:H7 dans laliment. Ces mthodes ne recherchent souvent que lantigne somatique O157 et ncessitent une tape de confirmation aprs isolement et caractrisation biochimique et srologique de la bactrie cible. En France, 2 mthodes sont valides AFNOR pour la dtection de E. coli O157:H7 dans laliment. Lune utilise limmuno-sparation magntique (IMS - Dynal), lautre lautomate VIDAS (BioMrieux). A ltranger, dautres mthodes ont reu des validations nationales. Mthodes gntiques de dtection des EHEC Ces mthodes consistent en la dtection des gnes stx codant les vrotoxines, soit directement sur le gnome total (hybridation de sondes ADN), soit aprs amplification dune partie des gnes recherchs (PCR). Il est possible aussi de dtecter des gnes spcifiques du srotype O157 :H7 : le gne uidA (gne codant la -glucuronidase), le gne fliC (gne codant la flagelline de H7), dtection du gne rbfE (gne codant lantigne O157). Des formes viables non cultivables ont t dcrites dans les conditions habituelles de dtection.

VIII - MODELES D'ETUDE EXPERIMENTAUX.

In vitro: Recherche de leffet cytopathogne sur diffrentes lignes cellulaires (VERO, HeLa ) In vivo : Diffrents modles exprimentaux ont t tests : souris ,lapin ,porcelet, rat et singe. Ces modles ne permettent pas de faire une distinction en terme de pathognicit entre les diffrentes souches de VTEC.

IX - BIBLIOGRAPHIE
Sites internet : Site du Center for Food Safety and Applied Nutrition (CFSAN), Food and Drug Adminitration,USA http://www.cfsan.fda.gov (Rubrique intressante :the Bad Bug Book, E. coli O157 :H7) Site du Center for Disease Control and Prevention (CDC),USA http://www.cdc.gov Rfrences bibliographiques Beutin L, Geier D, Zimmermann S, Karch H (1995). Virulence markers of Shiga-like toxin-producing Escherichia coli strains originating from healthy domestic animals of different species. J Clin Microbiol, 33:631635. Bolton FJ (2000). Guidelines for the control of infection with verocytotoxin producing E. coli. Commun. Dis Public Health ,3:14:23 Decludt B (1997) Syndrome hmolytiques et urmiques en France. Epidmiologie et agents responsables (avril 1995-mars 1996) RNSP. France juin 1997. Fach, P., Perelle, S., Dilasser, F. and Grout, J. (2001). Comparison between a PCR-ELISA test and the Vero cell assay for detecting Shiga toxin-producing Escherichia coli in dairy products and characterization of virulence traits of the isolated strains. Journal of Applied Microbiology 90, 809-818. 5/6

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