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.,7 3$5$ (17(52%$&7e5,$6 0,1, .,7 3$5$ (17(52%$&7e5,$6

Conjunto de meios de cultura para identificao de enterobactrias

.LW SDUD (QWHUREDFWpULDV  Para  determinaes Cada kit contm: 10 tubos de Meio de EPM modificado com 4ml 10 tubos de Meio de Lisina com 4ml 10 tubos de Meio de MIO com 5ml 10 tubos de Meio de Citrato de Simmons com 3ml 10 tubos de Meio de Rhamnose com 4ml .LW SDUD (QWHUREDFWpULDV  Para  determinaes Cada kit contm: 50 tubos de Meio de EPM modificado com 4ml 50 tubos de Meio de Lisina com 4ml 50 tubos de Meio de MIO com 5ml 50 tubos de Meio de Citrato de Simmons com 3ml 50 tubos de Meio de Rhamnose com 4ml 0LQL .LW SDUD (QWHUREDFWpULDV  Para  determinaes Cada mini kit contm: 10 tubos de Meio de EPM modificado com 2ml 10 tubos de Meio de Lisina com 2ml 10 tubos de Meio de MIO com 2ml 10 tubos de Meio de Citrato de Simmons com 1ml 10 tubos de Meio de Rhamnose com 2ml

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&20326,d2 325  0/

(30 PRGLILFDGR gar bacteriolgico: 11g; Triptona: 10g; Extrato de carne: 2g; Cloreto de sdio: 5g; Fosfato dissdico: 2g; L-triptofano: 1g; Citrato frrico amoniacal: 0,35 g; Tiosulfato de sdio: 0,35g; Sacarose: 14g; Glicose: 1,925g; Azul de bromotimol: 0,03g; gua deionizada: 1000 mL. &DOGR /LVLQD Peptona de gelatina: 5g; Extrato de levedura: 3g; Dextrose: 1g ; Cloridrato de L-lisina: 5g; Prpura de bromocresol: 0,02g ; gua deionizada: 1000 ml. 0HLR GH 0,2 Extrato de levedura: 3g ; Peptona bacteriolgica: 10g ; Triptona: 10g ; Ornitina: 5g ; Dextrose: 1g ; Prpura de bromocresol: 0,02 g ; Agar bacteriolgico: 2,4g ; gua deionizada: 1000 ml 0HLR GH &LWUDWR GH 6LPPRQV Sulfato de magnsio: 0,02g ; Fosfato de amnio dihidrogenado: 1g ; Fosfato dipotssico: 1g ; Citrato de sdio: 2g ; Cloreto de sdio: 5g ; Azul de bromotimol: 0,08 g ; Agar bacteriolgico: 15g ; gua deionizada: 1000 ml. &DOGR 5KDPQRVH Extrato de carne: 1g ; Triptona: 10g ; Cloreto de sdio: 5g ; Rhamnose: 5g ; Azul de bromotimol: 0,03g ; gua deionizada: 1000 ml.

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O diagnstico laboratorial dos bacilos Gram negativos (BGN) fermentadores de glicose baseia-se principalmente na identificao de enterobactrias. O isolamento de BGN oxidase negativa no oferece muita dificuldade quando estamos diante de cepas bioquimicamente tpicas. O desenvolvimento da Bacteriologia clnica tem forado uma melhor identificao de microrganismos que no possuem um perfil bioqumico clssico, ou seja, no apresentam reaes comuns a vrias espcies em questo. Exemplos clssicos so as cepas de (VFKHULFKLD FROL produtoras de gs sulfdrico ou ainda as de 6DOPRQHOOD fermentadoras de lactose. Nestes casos recomenda-se o uso de sistemas de identificao bioqumica mais completo. Este kit especialmente indicado para a identificao de bacilos Gram negativos atpicos, que constituem em grande parte a microbiota bacteriana isolada de pacientes hospitalizados, muitas vezes implicados em casos de infeces hospitalares.

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O kit composto de cinco tubos com os seguintes meios: Meio de EPM, Meio de Lisina, Meio de MIO, Meio de Rhamnose e Meio de Citrato de Simmons com funes determinadas, conforme descrito adiante: /  Tubo n 1: Meio de EPM (slido cor verde) tampa incolor Tubo n 2: Meio de Lisina (caldocor prpura) tampa branca Tubo n 3: Meio de MIO (semi-slido cor prpura) tampa vermelha Tubo n 4: Meio de Citrato de Simmons (slido cor verde) tampa preta Tubo n 5: Meio de Rhamnose (caldo cor verde) tampa branca

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Escolher uma colnia isolada e com auxlio de agulha bacteriolgica flambada com a extremidade dobrada, recolher metade desta colnia. - Inocular no primeiro tubo por picada e estria na superfcie inclinada do meio, deixando a tampa frouxa. - Sem flambar, semear o segundo tubo por dissoluo, selar com leo mineral estril e fechar bem a tampa. - Ainda sem flambar, semear o terceiro tubo, com picada central nica, deixando a tampa do tubo frouxa. - Recolher a outra metade da colnia e semear no quinto tubo atravs de dissoluo.Selar com leo mineral estril e fechar bem a tampa. - Voltar ao quarto tubo com a agulha bacteriolgica e estriar a superfcie. Este tubo dever ser deixado por ultimo pois o mesmo dever receber inculo leve, assim como dever ser evitado arrastar nutrientes do meio original com a agulha, uma vez que estes nutrientes podero dar reaes falso positivas. A tampa do tubo dever permanecer frouxa.

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Todos estes meios possuem frmulas adaptadas e rigorosamente controladas para fornecer leituras timas aps incubao a 36C por 18 a 24 horas , porm existem ocasies especiais que podem requerer tempo adicional.

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adequado o trabalho com colnias recm isoladas (no superior a 24 horas). Quando a cultura for conservada em geladeira, convm revitalizar a cepa realizando repiques em meios adequados (no seletivos).

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Para utilizao do MINI KIT PARA ENTEROBACTRIAS, seguir as instrues gerais de uso. Neste caso as respostas bioqumicas podero ser evidenciadas em prazo inferior a 18 horas. Ao usurio sem experincia na utilizao do MINI KIT PARA ENTEROBACTRIAS, recomenda-se primeiramente utilizar o kit convencional, pela maior facilidade na observao das reaes bioqumicas, e depois passar a utilizar a linha miniaturizada.

7XER Q  0(,2 '( (30 Permite a leitura das provas do LTD, Glicose, Gs e H2S . O LTD (desaminao do L-Triptofano) evidenciado pelo desenvolvimento de cor verde-garrafa no pice do tubo. A leitura da Glicose feita pela observao de colorao amarela na base do tubo, com ou sem produo de gs, evidenciado pelo arrebentamento do meio ou a presena de bolhas. A produo de gs sulfdrico verificada pelo aparecimento de cor negra. 7XER Q   0(,2 '( /,6,1$ Permite a leitura da reao de descarboxilao da L-Lisina. A cor amarela revela uma reao negativa e qualquer cor diferente de amarelo considerado positivo. 7XER Q  0(,2 '( 0,2 Permite a leitura das provas de Motilidade, descarboxilao da Ornitina e produo de Indol. A motilidade observada pela turvao do meio; se houver crescimento somente na picada a prova considerada negativa. A interpretao da Ornitina semelhante da Lisina, ou seja, cor amarela indica prova negativa e qualquer outra cor considerada positiva. O Indol revelado pelo acrscimo do reativo de Kovacs, aps incubao de 24 horas: a formao de anel de cor vermelha significa que houve a produo de Indol, portanto prova positiva. 7XER Q  0(,2 '( &,75$72 '( 6,00216 Responsvel pela leitura da prova de utilizao do citrato como nica fonte de Carbono. Meio de cor original verde, tornando-se azul em caso de prova positiva e permanecendo verde para provas negativas. 7XER Q  0(,2 '( 5+$0126( Permite verificar se o bacilo Gram negativo fermenta ou no este acar. Meio com cor original verde, tornandose amarelo em caso de prova positiva e permanecendo verde para provas negativas. Obs.: No EPM modificado pela Newprov a uria foi retirada da composio do meio para evitar interferncia com a prova da fermentao da glicose e produo de H2S.

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,17(535(7$d2 '26 5(68/7$'26

O kit fornece leituras de: Triptofano-Desaminase, H2S, Glicose, Gs, Lisina, Motilidade, Indol, Ornitina, Citrato e Rhamnose, conforme descrito anteriormente. A prova da Lactose verificada nos meios de isolamento primrio. Os resultados das provas so agrupados de trs em trs, sendo que cada prova possui um valor numrico. A soma de cada grupo fornece ao final um nmero com quatro dgitos, que, em consulta ao Manual para Identificao de Enterobactrias Newprov , propicia a classificao final com percentual de probabilidade e eventuais provas complementares para identificao segura do microrganismo em anlise.

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&21752/( '$ 48$/,'$'( '2 352'872 Recomendamos que seja feito periodicamente o controle de qualidade utilizando as seguintes cepas: 0LFURUJDQLVPR 3 YXOJDULV ATCC 13315 ( FROL ATCC 25922 3 DHUXJLQRVD ATCC 27853 6 IOH[QHUL ATCC 12022 6 W\SKLPXULXP ATCC 14028 . SQHXPRQLDH ATCC 13883 /7' + */, + + + + + *$6 + + + + +6 + + /,6 + + + 027 + + + ,1' + + 251 + &,7 + 5+$ + +

&21',d(6 $'(48$'$6 3$5$ $50$=(1$0(172 ( 75$163257( '2 352'872 Os tubos devem ser mantidos entre 15 e 30C. (Para regies com temperaturas elevadas, poder ser armazenado entre 4 e 8C). Valido por 10 meses aps a fabricao. Nunca utilize produtos com sua validade expirada. &8,'$'26 &20 $ $02675$ Por tratar-se de material biolgico, manusear toda amostra clnica de acordo com as normas de biossegurana e utilizando equipamentos de proteo individual (luvas, avental e mscara), em fluxo laminar. 35(&$8d(6 ( &8,'$'26 (63(&,$,6 &20 2 0$186(,2 ( '(6&$57( 6(*852 '2 352'872 Aps o seu uso os tubos devem ser acondicionados em sacos de lixo autoclavveis (*ESTERI-PROV) e autoclavados a 121C por 20 min. e descartados em local apropriado. 5(/$d2 '( 0$7(5,$,6 ( $&(665,26 1(&(665,26 1$ 87,/,=$d2 '2 .,7 ( 48( 12 62 )251(&,'26 &20 2 352'872 *leo mineral estril *Reativo de Kovacs *Agulha bacteriolgica *Manual para Identificao de Enterobactrias *Esteri-prov(Saco de lixo autoclavvel)

* Todos estes itens esto disponveis em nossa linha de produtos, consultem-nos.

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Moeller, V. Activity determination of amino acid descarboxylases in (QWHUREDFWHULDFHDH $FWD 3DWK (W 0LFUR 6FDQG. 34: 102-114, 1954. BRANSON, D. 0pWRGRV HP %DFWHULRORJLD &OtQLFD. Buenos Aires: Panamericana, 1974, p.23. BIER OTTO. %DFWHULRORJLD H ,PXQRORJLD. 22.ed. So Paulo: Melhoramentos, 1983. DIFCO MANUAL. 'HK\GUDWHG &XOWXUH 0HGLD DQG 5HDJHQWV IRU 0LFURELRORJ\. Detroit: Difco, 1982. Koser, S. A. Utilization of the salts of organic acids by the colon-aerogenes group. - %DFW 8:493-520, 1923. PILONETTO, M; PILONETTO D. V. 0DQXDO GH 3URFHGLPHQWRV HP /DERUDWRULDLV HP 0LFURELRORJLD. Curitiba: Microscience, 1998. MAC FADDIN, JEAN J. %LRFKHPLFDO 7HVWV IRU 0HGLFDO %DFWHULD. 3.ed. Baltimore: Willians, 2001.

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