Вы находитесь на странице: 1из 20

1

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ


БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ
Биологический факультет
Кафедра биохимии

Отчет по преддипломной практике

Студентки 5 курса 8 группы


Фурс А.З.

Научный руководитель:
канд. биол. наук, доцент
Губич О.И.

Руководитель практики
асс. Кузнецова Е.И.

Минск, 2013
2

Производственная практики проходила на базе кафедры биохимии


биологического факультета БГУ в период с 11.03. по 20.04. 2013 г.
Цель практики: изучить возможность коррекции гепатотоксического
действия CCl4 циклопентеноновым аналогом группы А – ТЯ - 227 in vivo.
Задачи практики:
1. Изучить эффект различных способов введения простаноида ТЯ - 227,
взятого в одной дозе, на его гепатопротекторные свойства на модели
CCl4 –индуцированной гепатотоксичности in vivo.
2. Определить оптимальное время введения простаноида ТЯ - 227 с
целью достижения максимального защитного эффекта печени от
действия CCl4.
3

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ


1.1 Реактивы

В работе были использованы следующие реактивы: набор реактивов для


определения активности ЩФ в биологических жидкостях кинетическим
методом (НТПК «Анализ Х» Беларусь), набор реактивов для определения
активности АлАТ в биологических жидкостях кинетическим методом (НТПК
«Анализ Х» Беларусь), набор реактивов «билирубин-диазо» (НТПК «Анализ
Х» Беларусь), ПГI2 («Реахим», Россия), БСА («ДиаМ», Германия), аналог Ю-
13 (ГНУ “Институт биоорганической химии НАН Беларуси”).
Остальные реактивы, использовавшиеся в работе, имели квалификацию
"ЧДА", "ХЧ" или "ОСЧ".

1.2 Схема проведения эксперимента


Работа выполнена на беспородных крысах массой 200-250 г,
находящихся на стандартной диете вивария БГУ. Все проводимые
эксперименты выполнялись в соответствии с правилами гуманного
обращения с лабораторными животными, принятыми на биологическом
факультете БГУ.
Схема проведения опыта:
Серия 1 – интактные животные.
Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1
мл/кг).
Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1,
внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин
после CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5
мл/кг).
4

Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин


после CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5
мл/кг).
Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин
после CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5
мл/кг).
В каждой серии использовалось по 5 крыс. Забой производился через
24 часа после указанных процедур.

1.3 Получение сыворотки крови


Кровь крысы (2-3мл) собирали в сухую центрифужную пробирку и
оставляли на 30 мин при 37 °С. По истечении указанного времени тонкой
стеклянной палочкой осторожно обводили стенки пробирки для отделения от
них сгустка, кровь центрифугировали (10 мин, 3000 об/мин). Полученную
сыворотку сливали в чистую пробирку [1].

1.4 Определение активности щелочной фосфатазы


Принцип метода: Кинетический метод определения каталитической
активности ЩФ основан на ферментативной реакции:
р-нитрофенилфосфат + АМР → АМР-фосфат + р-нитрофенол [2].
Ход работы:
В кювету помещали 1мл рабочего реагента состоящего из 0,01%
аминометилпропанола, 25 ммоль/л магния хлорида, 4% р-нитро-
фенилфосфата. Затем добавляли 20 мкл сыворотки крови и тщательно
перемешивали. Инкубировали 1 мин при комнатной температуре, измеряли
оптическую плотность раствора по отношению к воде при 405 нм, на
спектрофотометре Cary-50 («Varian» Австралия). Точно через 1 и 2 мин
повторяли измерения. Вычисляли среднее значение оптической плотности за
1 мин (∆А/ мин).
5

Каталитическую активность ЩФ (в Е/л) в исследуемой пробе


определяли по формуле:
Е/л = ∆А/ мин x 6000

2.4 Определение активности аланинаминотрансферазы


Принцип метода: Кинетический метод определения АлАТ основан на
следующих ферментативных реакциях:
L-аланин + 2-оксоглутарат → глутамат + пируват
Пируват + НАДН+Н+ → лактат + НАД+
Уменьшение концентрации НАДН пропорционально активности АлАТ [2]. .
Ход работы:
К 1 мл рабочего раствора, содержащего 50 ммоль/л фосфатный буфер
(рН=7,6), 5 ммоль/л НАДН, 5 ммоль/л АлАТ, 0,03% 2- оксоглутарат Na,
добавляли 0,1 мл сыворотки крови, перемешивали и инкубировали 3 мин.
при комнатной температуре. Измеряли оптическую плотность раствора по
отношению к воде при 340 нм на спектрофотометре «Cary-50» («Varian»
Австралия). Затем в течении 3 минут замеряли оптическую плотность через
каждые 60 секунд и рассчитывали среднее измерение оптической плотности
за 1 минуту (∆А/ мин).
Активность АлАТ в исследуемой пробе в Е/л определяется по формуле:
Е/л = ∆А/ мин x 1770.

2.5 Определение билирубина в сыворотке крови крыс


Принцип метода: В основу диазометода по Йендрашику, положена
реакция взаимодействия диазотированной сульфаниловой кислоты со
связанным билирубином сыворотки. По интенсивности образующейся
окраски судят о концентрации билирубина, вступающего в прямую реакцию.
При добавлении к сыворотке крови кофеинового реактива несвязанный
билирубин переходит в растворимое диссоциированное состояние, благодаря
6

чему он также вызывает окрашивание раствора со смесью диазореактивов.


По интенсивности этой окраски фотометрически определяют концентрацию
общего билирубина. По разнице между общим и связанным билирубином
находят находят содержание несвязанного билирубина [2].

Реактивы:
1. Диазосмесь, содержащая 0,5% сульфониловую кислоту; 0,5% нитрит
Na.
2. Кофеиновый реактив, содержащий 5% кофеин; 7,5% бензоат Na; 12,5%
ацетат Na.
Смешивание реагентов проводили по схеме, представленной в таблице 1.
Таблица 1. Порядок смешивания реагентов для определения свободного и
связанного билирубина
Реагенты Общий Связанный Контрольная проба
билирубин( мл) билирубин (мл) (мл)
Сыворотка 0,5 0,5 0,5
Кофеиновый 1,75 ‒ 1,75
Реактив
Физиологический ‒ 1,75 0,25
Раствор
Диазосмесь 0,25 0,25 ‒

При определении общего билирубина пробу для развития окраски


оставляли стоять при комнатной температуре на 20 мин. Для определения
связанного билирубина колориметрирование осуществляли через 10 мин
после добавления диазосмеси.
Растворы фотометрировали на спектрофотометре «Cary-50» («Varian»
Австралия) при длине волны 530 нм. Расчет проводили по градуировочному
графику (рис. 1).
7

Рис.1. Калибровочная прямая для определения содержания билирубина в


крови крыс (n=3).
Примечание: каждая точка на графике соответствует средней
арифметической из трех независимых измерений.

2.6 Определение содержания белка в сыворотке крови по методу


Бенедикта
Принцип метода: метод Бенедикта основан на способности белков
давать с раствором сернокислой меди фиолетовое окрашивание в щелочной
среде. Для этого метода необходимо наличие двух ОН-групп и трех атомов
азота, находящихся в полипептидной цепи. Группа, образующая пептидную
связь ( - ОС – NH - ) в щелочной среде, присутствует в своей таутомерной
форме. В избытке щелочи происходит диссоциация водорода енольной ОН-
группы, при этом возникает отрицательный заряд, с помощью которого
8

кислород, взаимодействуя с медью, образует соль; кроме того медь образует


дополнительные связи с атомами азота пептидных связей. Возникший
комплекс характеризуется высокой стабильностью [1].
Ход работы. К 1 мл исследуемого образца, добавляли 3 мл 3% раствора
NaOH и 0,2 мл реактива Бенедикта содержащнго 17,3 % раствора цитрата Na,
10% Na2CO3, 17% CuSO4. Раствор хорошо перемешивали и через 15 мин
определяли оптическую плотность на спектрофотометре «Cary-50» («Varian»
Австралия) при 330 нм. Содержание белка в исследуемых растворах
рассчитывали по калибровочному графику (рис.2).
Оп т. п л о тн о сть, е д . о п т.п л .

0, 8
0, 7
0, 6
0, 5
0, 4
0, 3
0, 2
0, 1
0
0, 25 0, 5 1 1,5 2

Содерж ание белка, мг

Рис.2. Калибровочная прямая для определения содержания белка в


сыворотке крови крыс по методу Бенедикта (n=3).
Примечание: каждая точка на графике соответствует средней
арифметической из трех независимых измерений.
2.7 Математический анализ и статистическая обработка результатов

Экспериментальные данные обрабатывали статистически с подсчетом


среднего арифметического (Х), стандартной ошибки среднего
9

арифметического (±Sx) и достоверности при уровне значимости p  0,05.


Статистическая обработка результатов выполнена с использованием пакета
программ Stadia 6.0

Глава 3. Результаты и их обсуждение

Как известно, ряд гепатотоксинов вызывает повреждение печени,


непосредственно воздействуя на клеточные структуры, действие других
опосредовано токсичными интермедиатами, возникающими в процессе
биотрансформации [4]. Среди наиболее известных гепатотоксинов
четыреххлористый углерод (CCl4) и родственные галогензамещенные
углеводороды занимают одно из первых мест по частоте возникновения и
тяжести протекания последствий случайных и профессиональных
интоксикаций [4]. Кроме того, CCl4 – вещество, широко используемое для
создания экспериментальных моделей острой печеночной недостаточности,
индукции цирроза печени и последующего изучения на этих моделях
молекулярных механизмов действия потенциальных гепатопротекторов
(флавоноидов, антиоксидантов, простаноидов) и ряда лекарственных
препаратов [5]. Ингибирование циклооксигеназы – ключевого фермента
синтеза эндогенных ПГ – в ходе начальной стадии отравления увеличивает
гепатотоксичность CCl4. Это служит важным доказательством наличия у
эйкозаноидов гепатопротекторного действия. Более того, в присутствии ПГI2
(простациклин), 16,16-диметил-ПГЕ2, 15-метил-ПГF2α, ПГЕ1
экспериментально установлено значительное уменьшение повреждения
гепатоцитов в культуре, а также повышение выживаемости животных с CCl4-
индуцированным некрозом печени [5]. Между тем, несмотря на детальную
изученность поражающего действия CCl4, представления о механизмах
10

гепатопротекторного действия простагландинов в настоящее время носят


фрагментарный характер.
В то же время в литературе описано немало примеров успешного
использования указанных эйкозаноидов в лечении пациентов с острой
печеночной недостаточностью, циррозом печени, а также в случаях
трансплантации печени [6]. Таким образом, анализ молекулярных и
клеточных путей реализации гепатопротекторной активности эйкозаноидов,
а также поиск новых простаноидов, обладающих подобным действием
является одной из актуальных задач современной фармакологии и
фармакотерапии.
На этом основании, перед нами была поставлена задача оценить in vivo
гепатопротекторные свойства синтетических аналогов простагландинов,
которые, как было показано в ряде работ, проведенных в НИЛ биохимии
обмена веществ при кафедре биохимии, проявляют выраженные
цитопротекторные свойства на клеточной модели повреждения печени 0,5%
CCl4 [7].
В качестве маркеров повреждения печени в нашей работе были
использованы биохимические параметры, широко используемые в
лабораторной диагностике печеночной патологии: содержание билирубина и
общего белка, активность щелочной фосфатазы и аланинаминотрансферазы в
сыворотке крови крыс.
Результаты представлены в таблице 2.

Таблица 2. Результаты измерения основных биохимических маркеров


поражения печени, используемых в клинической диагностике, в крови крыс,
в различных сериях экспериментов

Серия Измеряемые параметры (Х±Sx)


экспериментов
Активность Активность Содержание Содержание Содержание
11

щелочной АлАТ, ед/л белка, мг, свободного связанного


фосфатазы, билирубина билирубина
ед/л нмоль/л нмоль/л

Интактные 369 ±8,4 19,8±1,9 96 ±2,5 4,2 ±42 0,5±54


крысы
(100%) (100%) (100%) (100%) (100%)

Контроль 512,3 ±4 21,6 ±3,3 101,9 ±4,5 3,2 ±45 0,7 ±56
(139,2%) (109,1%) (106,1%) (76,1%) (133,7%)
раст. масло в/бр
0,5 мл /кг

0,5 мл СCl4 /кг 540,1 ±2,7 35,4 ± 2,6 110,9 ±5,5 89 ±65 210 ±580
в/ж,1-кратно (146,3%) (178,8%) (115,5%) (907,3%) (42000%)

0,5 мл СCl4/кг 417,1 ±3,6 30,97 ±2,9 100 ±6,5 170 ±64 50 ±175
в/ж+ 50 мкг /кг (113,1%) (156,4%) (104%) (4047%) (10000%)
ТЯ-227 в/бр,
через 30 мин
после введения
СCl4

0,5 мл СCl4/кг 413,4 ±5,9 14,16 ±1,4 90 ±3,6 1 ±32 40 ±154


в/ж+ 50 мкг/кг (112,3%) (71,5%) (93,75%) (23,8%) (8000%)
ТЯ-227 в/бр,
через 5 мин
после введения
СCl4

0,5 мл СCl4 /кг 412,5 ±7,1 18,5 ±1,8 108 ±2,1 70 ±62 40 ±185
+ 50 мкг /кг ТЯ- (111,8%) (93,6%) (112,5%) (1666,6%) (8000%)
227 в/ж, через 5
мин после
введения СCl4

* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5).

Как свидетельствуют данные представленные на рис.3 и 4 и в табл 2.


активность AлAT и ЩФ при развитии острой интоксикации СCl4 достоверно
возрастает. Так активность AлAT, при внутрижелудочном введении СCl4 ,
возрастает на 69,1% к контролю, активность ЩФ в сыворотке крови
12

увеличивается на 7,1% к контролю. Это хорошо согласуется с данными


литературы и свидетельствует о повреждении печени [8].
13

Рис 3. Влияние СCl4 и ПГ ТЯ-227 на изменение активности ЩФ в


сыворотке крови крыс

Серия 1 – интактные животные.


Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1 мл/кг).
Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-
кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5)
-Достоверность эффекта растительного масла рассчитана по отношению к
показателю интактной серии.
- Достоверность токсического действия СCl4 рассчитана по отношению к
эффекту растительного масла.
- Достоверность эффекта ТЯ-227 посчитана к эффекту СCl4.
14

Рис 4. Влияние СCl4 и ТЯ-227 на изменение активности АлАТ в


сыворотке крови крыс
Серия 1 – интактные животные.
Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1 мл/кг).
Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-
кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5)
-Достоверность эффекта растительного масла рассчитана по отношению к
показателю интактной серии.
- Достоверность токсического действия СCl4 рассчитана по отношению к
эффекту растительного масла.
- Достоверность эффекта ТЯ-227 посчитана к эффекту СCl4.

Рис 5. Влияние СCl4 и ТЯ-227 на изменение содержания общего белка в


сыворотке крови крыс
Серия 1 – интактные животные.
Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1 мл/кг).
15

Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-


кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5)
-Достоверность эффекта растительного масла рассчитана по отношению к
показателю интактной серии.
- Достоверность токсического действия СCl4 рассчитана по отношению к
эффекту растительного масла.
- Достоверность эффекта ТЯ-227 посчитана к эффекту СCl4.

Рис 6. Влияние СCl4 и ТЯ- 227 на изменение содержания свободного


билирубина в сыворотке крови крыс
Серия 1 – интактные животные.
Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1 мл/кг).
Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-
кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
16

Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4


(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5)
-Достоверность эффекта растительного масла рассчитана по отношению к
показателю интактной серии.
- Достоверность токсического действия СCl4 рассчитана по отношению к
эффекту растительного масла.
- Достоверность эффекта ТЯ-227 посчитана к эффекту СCl4.

Рис 7. Влияние СCl4 и ТЯ-227 на изменение содержания связанного


билирубина в сыворотке крови крыс
Серия 1 – интактные животные.
Серия 2 – контроль (растительное масло, внутрижелудочно, 1-кратно, 1 мл/кг).
Серия 3 – действие CCl4 (CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-
кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 4 – ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 30 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
Серия 5 - ТЯ-227 внутрибрюшинно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4
(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
17

Серия 6 - ТЯ-227 внутрижелудочно, 1-кратно, 50 мкг/кг, через 5 мин после CCl4


(CCl4: растительное масло = 1:1, внутрижелудочно, 1-кратно, 0,5 мл/кг).
* - результаты достоверны при р≤ 0,05 (n=5)
-Достоверность эффекта растительного масла рассчитана по отношению к
показателю интактной серии.
- Достоверность токсического действия СCl4 рассчитана по отношению к
эффекту растительного масла.
- Достоверность эффекта ТЯ-227 посчитана к эффекту СCl4.

Данный простаноид, так же как и аналог Ю-13, зарекомендовал себя


эффективным цитопротектером in vitro, проявлявшим свой защитный
эффект в конц. 10-7 моль/л. Именно поэтому тестирование свойств данного,
соединения проводились аналогично эксперементальной процедуре,
использованной для Ю-13.Установлено, что однократное внутрибрюшинное
введение ТЯ-227 в дозе 50 мкг/кг через 30 мин после ССl4 значительно не
улучшало значений анализируемых показателей (табл. 2, рис. 3-7).
На следующем этапе нашей работы мы сократили время между
введением CCl4 и ТЯ-227 до 5 минут. В этом случае наблюдалось снижение
активности АлАТ на 107,3% , снижение содержания свободного билирубина
на 52,3%, связанного билирубина в 60 раз (табл. 2, рис. 3-7). Наблюдалась
тенденция к снижению активности щелочной фосфатазы и содержание
общего белка в сыворотке крови до показателей контрольной серии. Таким
образом, в данной серии эксперимента наблюдалась частичная
гепатопротекция, не приводящая тем не менее к показателям контрольной
серии. Это может быть объяснено тем, что воздействие CCl4 на печень
определяется не только инициацией ПОЛ, но и наличием у данного
соединения эффекта растворителя, который в данном случае не
компенсируется.
18

Примечательно, что внутрижелудочное введение ТЯ-227 в


охарактеризованной дозе через 5 минут после четыреххлористого углерода
не приводила к описанным выше эффектам и даже достоверно увеличивало
такие важнейшие диагностические маркеры повреждения печени как
активность АлАТ, а также содержание в сыворотке свободного и связанного
билирубина (табл. 2, рис. 3-7).
Таким образом, в ходе проведенной работы показано наличие у
простаноида ТЯ-227 гепатопротекторных свойств на модели CCl4-
индуцированной гепатотоксичности in vivo при условии его
внутрибрюшинного введения в дозе 50 мкг/кг спустя 5 мин после введения
четыреххлористого углерода.
Выводы

1. Однократное внутрижелудочное введение СCl4 в дозе 0,5 мл/кг


массы тела крысы характеризовалось увеличением активности АлАТ на
69,1% к контрольной серии, увеличением содержания свободного
билирубина на 807%, связанного билирубина на 41866%. Наблюдалась
тенденция к увеличению активности щелочной фосфатазы и содержания
общего белка в сыворотке крови.
2. Однократное внутрибрюшинное введение 50 мкг/кг ТЯ - 227
спустя 30 мин после введения СCl4 значительно не улучшало значений
анализируемых маркеров гепатотоксичности.
3. Однократное внутрибрюшинное введение ТЯ - 227 в дозе 50
мкг/кг через 5 мин после ССl4 не улучшало значений анализируемых
показателей по сравнению с таковыми, полученными у крыс с CCl4-
индуцированной гепатотоксичностью. Так, наблюдалось снижение
активности АлАТ в 107,3%, снижение содержания свободного
билирубина в 52,3 %, связанного билирубина в 60 раз. Наблюдалась
19

тенденция к снижению активности щелочной фосфатазы, содержание


общего белка в сыворотке крови достоверно не изменилось.
4. Внутрижелудочное введение ТЯ - 227 в дозе 50 мкг/кг через 5
минут после четыреххлористого углерода не сопровождалось
гепатопротекцией и достоверно увеличивало анализируемые
диагностические маркеры повреждения печени.

Список использованной литературы

1. Биохимия белков: практикум для студентов биол.фак./ И.В.Семак, Т.Н.


Зырянова, О.И. Губич. – Минск: БГУ, 2008. – 42 с.
2. Камышников, В.С., Колб, В.Г. Справочник по клинической химии. – Мн:
Беларусь, 1982. – 366 с.
3. Трахтенберг, И.М., Сова, Р.Е., Шефтель, В.О., Оникиенко, Ф.А. Проблема
нормы в токсикологии. – М: Медицина, 1991. – 204 с.
4. Püschel, G.P., Kirchner, C., Schroder, A. et. al. Glycogenolytic and
antiglycogenolytic prostaglandin E2 actions in rat hepatocytes are mediated via
different signalling pathways // Eur. J. Biochem. – 1993. – Vol. 218. – P. 1083-
1089.
5. Brooks, A.C., Whelan, C.J., Purcell, W.M. Reactive oxygen generation and
histamine release by activated mast cells: modulation by nitric oxide synthase
inhibition // Brit. J. Pharmac. – 1999. – Vol. 128. – P. 585-590.
6. Hu, V.Y., Malley, S. COX-2 and prostanoid expression in micrurition pathways
after cyclophosphamide-induced cystitis in the rat // Am. J. Physiol. Regul.
Integr. Comp. Physiol. – 2003. – Vol. 284. – P. 574-585.
20

7. Губич, О.И., Петрова, С.М., Грицук, О.Е., Шолух, М.В. Исследование


цитопротекторного действия 9,11-этаноаналогов простагландинов группы
Н // Новости мед.-биол. наук. – 2009. - №3. – с. 57-60.
8. Тутельян, В.А., Аксенов, И.В., Кравченко, Л.В. и др. Характеристика
острого токсического действия CCl4, как модели описательного стресса //
Токсикологический вестник. – 2009. – № 1.- 12-17.
9. Гуляева, Л.С. Простагландины: выбор препаротов группы простинов //
Рецепт. – 2001. – Т. 16, №1-2. – С. 108-111.

Вам также может понравиться