Для подготовки в сжатые сроки: ключевые вопросы, на которые ссылаются многие другие:

№№7, 12.

После прочтения №7 можно не читать содержание №№3, 5, 17, 20, 22, 32, 33, 35, 37, просто
просмотрите формулировки вопросов и пробегите глазами, что нужно будет сказать.
Никакой новой информации в них не содержится.

В конце документа можно найти небольшой блок информации, которой было уделено
значительное количество времени на лекции, но для которых нет ни одного вопроса. Можно
прочесть этот блок на случай допвопросов.

СВОДКА ПО СРОКАМ*:

 Примерно 8 часов после образования мужского пронуклеуса — образование женского

пронуклеуса.
 Через сутки после оплодотворения — слияние мужского и женского пронуклеусов;
начало дробления.
 Примерно 4 сутки — морула.
 5 день — зародыш достиг стенки матки.
 6-7 день — имплантация.
 9 день — гаструляция, появление желточного мешка.
 Вторая неделя — разрастание внезародышевых
образований.
 14-16 дни — обособление ППК.
 16 день — можно увидеть нервную пластинку.
 18 день — можно увидеть нервные валики.
 3 неделя — развитие плаценты, появление пупочных сосудов.
 3,5 недели — критический период для органов слуха.
 22 день — смыкание средней части нервной трубки.
 Конец 3 недели — глазные пузыри.
 4 неделя — смыкание переднего и заднего нейропоров; обособление тела зародыша от
внезародышевых частей, дифференцировка зачатка, дающего соединительную ткань и
скелетную мускулатуру; формирование половых валиков, миграция ППК; начинается
закладка конечностей.
 6,5 недель — критический период для наружных половых органов.
 8 неделя — гонада выходит из индифферентного состояния; заканчивается закладка
конечностей; окончание основных органогенезов.
 6-7 месяц — фаза размножения и роста у оогониев.

*У Балахонова было очень много оговорок по срокам и расхождений с тем, что он говорил в
разные промежутки времени. То, где такие расхождения были, выправлено по учебникам, но
помечено гордым синим цветом.
1.СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК,
ОСНОВНЫЕ СТАДИИ ИХ РАЗВИТИЯ.

(Лекции №№2, 3)

Сперматозоид включает головку, шейку, промежуточную часть и хвост. Длина — 50-60 мкм.

Головка — основную ее часть составляет ядро с высоко конденсированными хромосомами,

крайне плотно упакованными; цитоплазмы мало; естественно, есть плазмалемма (клеточная
мембрана). Кроме того, здесь же расположена акросома (от слов «верхний» и «тело»),
занимая четвертую-пятую часть головки; она является производным аппарата Гольджи,
содержит ферменты акросомной реакции (протеолитические ферменты: особенно выделяют
акрозин). На мембране головки находятся гликопротеины ZP. Акросомная мембрана
стабилизируется холестерином (подробнее о том, зачем все эти странные соединения, в
вопросе №4).

Шейка — тонкий перехват между головкой и промежуточной частью.

Промежуточная часть — содержит гигантскую митохондрию (является конгломератом

митохондрий): дает энергию для движения сперматозоида.

Хвост — он же жгутик, строение типично. Необходим для движения.

Первые этапы развития у мужских и женских половых клеток одинаковы. Диплоидные

первичные половые клетки начинают обособляться на 14-16 дни после оплодотворения в
аллантоисе (первичный мочевой пузырь, более развит у птиц и рептилий, слабо — у
плацентарных) за две недели до появления половой железы. Таким образом, первичные
половые клетки имеют
внезародышевое и
внегонадное
происхождение.
Первичные половые клетки делятся митотически и на четвертую неделю мигрируют по
кишке, а после — в дорсальном направлении по дорсальному мезентерию в сторону будущей
гонады — к половым валикам, которые формируются в промежуточной мезодерме. До
начала шестой недели гонады находятся в индифферентной стадии ( = нельзя отличить
мужскую от женской, она обладает обоими признаками). После того, как гонады
дифференцируются в семенник или яичник, проявляются отличия в мужском и женском
гаметогенезе.

Если половые клетки «заблудятся», они могут погибнуть или начать развиваться с
образованием тератомы.

Клетки, мигрировавшие в гонаду, называются гониями. В этом случае — сперматогонии.

Они диплоидны, расположены по периферии семенного канальца, после заселения гонады
эмбриона прекращают деление. Деления возобновятся только с наступлением полового
созревания.

Цикл сперматогенного эпителия (72 дня — у человека) — созревание очередной порции

гамет от сперматогониев через сперматоциты к сперматозоидам:

1. Фаза размножения:

С началом полового созревания часть Ad-сперматогониев вступают

в митоз: одна из дочерних клеток становится Ap-сперматогонием
(начнет перемещаться к просвету семенного канальца), а вторая —
останется Ad-сперматогонием (останется на периферии, все еще
стволовая). Это опосредует неисчерпаемость половых клеток у
мужчин.

После этого первого митоза следует еще серия митозов, которая

оканчивается формированием первичных сперматоцитов.

2. Фаза роста:

Первичные сперматоциты растут, проходят через удвоение ДНК, образуя тем самым
вторичные сперматоциты.

3. Фаза созревания:

Вторичные сперматоциты вступают в мейоз, формируя гаплоидные сперматиды. Это

сопровождается приближением клеток к просвету
канальца.

4. Фаза формирования:

Сперматиды превращаются в сперматозоиды,

приобретая характерное для них строение, и
выходят в просвет семенного канальца.
В кислой среде сперматозоиды не способны к движению.

2. МЕЙОЗ.

Каждая клетка в организме человека имеет двойной набор хромосом — один от отца и один
— от матери. Его обозначают «2n» и называют диплоидным. В сперматозоиде и яйцеклетке
содержится одинарный набор хромосом, обозначаемый «n» и называемый гаплоидным.
Процесс образования гаплоидного набора из диплоидного, происходящий при
формировании половых клеток, называют мейозом. В пересчете на количество центромер
происходит сначала редукционное (от «уменьшение», мейоз I), а затем эквационное деление
(от лат. «уравнение», мейоз II). У мужчин мейоз проходит так же, как и у большинства
диплоидных видов, а у женщин данный процесс имеет некоторые особенности (см. вопросы
№№1, 25).

Значение мейоза:

1. Создание гаплоидного ядра из диплоидного (поддержание неизменности числа хромосом

в ряду поколений, так как для получения диплоидного зародыша должны будут слиться две
гаплоидные клетки).

2. Обеспечение рекомбинации генетического материала.

Пересортировка отцовских и материнских аллелей внутри хромосом, совмещенная со

случайным комбинированием гамет, создает практически бесконечное число генетических
вариаций.

Мейоз I примечателен тем, что в нем происходит генетическая рекомбинация, называемая

мейотическим кроссинговером. В ходе этого процесса гомологичные хромосомы
обмениваются элементами генетической информации (происходит рекомбинация).

Поскольку рекомбинация предполагает физическое взаимодействие двух гомологичных

хромосом в соответствующей точке в течение мейоза I, она также определяет правильность
расхождения хромосом в мейозе. Нарушения в процессе рекомбинации могут вызвать
нерасхождение хромосом в ходе мейоза I — самую частую причину хромосомных аномалий
типа синдрома Дауна.

Мейоз II следует за мейозом I без промежуточного удвоения ДНК. Как и при обычном
митозе, хроматиды расходятся зависимо: по одной хроматиде от каждой хромосомы
переходит в дочернюю клетку.

Первое мейотическое деление (мейоз I):

1. Профаза I мейоза.

Профаза мейоза I — сложный процесс, который серьезно отличается от митотической

профазы. Выделяют несколько этапов профазы. На всех этапах хромосомы непрерывно
конденсируются и становятся короче и толще.
• Пролептотена — начало конденсации хроматина.

• Лептотена («тонкие нити»). Хромосомы, уже скопированные в ходе предыдущей S-фазы,

становятся видимыми как нити. Две однотипных хроматиды каждой хромосомы так тесно
сближаются, что их невозможно различить.

• Зиготена («спаренные нити»). Конъюгация гомологичных хромосом с образованием

бивалентов, или тетрад.

• Пахитена («толстые нити»). Хромосомы становятся более толстыми. Гомологи

связываются по всей длине, образуются перекресты, или хиазмы (обычно не менее 2-3 на
хромосому), происходит кроссинговер.

• Диплотена. Происходит частичная деконденсация, небольшое расхождение с сохранением

связи в хиазмах.

• Диакинез. Максимальная конденсация, полное прекращение синтетических процессов,

растворение ядерной оболочки, расхождение центриолей.

2. Метафаза I мейоза.

Метафаза I начинается, как и в митозе, когда исчезает ядерная мембрана. Формируется

веретено деления, и спаренные хромосомы выстраиваются в плоскости экватора клетки,
ориентируя центромеры к разным полюсам — формируется метафазная пластинка.

3. Анафаза I мейоза.

Компоненты каждого бивалента движутся зависимо (один всегда отходит к одному полюсу,
а другой — к другому, то есть расходятся двухроматидные хромосомы, которые до этого
выстраивались в виде бивалентов по экватору). Этот процесс называют расхождением.
Таким образом, число хромосом уменьшается вдвое.

Разные биваленты расходятся независимо друг от друга, и в результате исходные отцовский

и материнский хромосомные комплекты сортируются в произвольных комбинациях. В
процессе деления клетки может происходить много ошибок. Некоторые заканчиваются
остановкой мейоза и гибелью клетки, другие ведут к неправильному расхождению хромосом
в анафазе. Например, оба гомолога хромосомной пары могут переместиться к одному и тому
же, а не противоположным полюсам в анафазе мейоза I. Этот патологический процесс
называется нерасхождением.

4. Телофаза I мейоза.

В телофазе гаплоидные комплекты хромосом группируются в противоположных полюсах

клетки.

5. Цитокинез.

После телофазы I клетка делится на две гаплоидные дочерние клетки и входит в

мейотическую интерфазу. При сперматогенезе цитоплазма более или менее одинаково
делится между двумя дочерними клетками; но при овогенезе одна клетка (вторичный
овоцит) получает почти всю цитоплазму, а вторая становится первым полярным тельцем. В
отличие от митоза, интерфаза очень короткая, сразу начинается второе мейотическое
деление. Следует обратить внимание на существенное различие между мейотической и
митотической интерфазами — отсутствие S-фазы (т.е. синтеза ДНК) между первым и вторым
мейотическими делениями.

Второе мейотическое деление (мейоз II):

Второе мейотическое деление подобно обычному митозу, но набор хромосом, получаемый в

результате мейоза II, — гаплоидный.

Конечный результат мейоза — две дочерние клетки мейоза I — делятся, формируя четыре
гаплоидных клетки, каждая из которых
содержит 23 хромосомы. Как уже
упоминалось, из-за кроссинговера в
мейозе I хромосомы результирующих
гамет неидентичны. Подобно тому, как
каждая родительская хромосома в паре
произвольно и независимо переходит к
дочерним клеткам в мейозе I, в ходе
мейоза также произвольно
распределяются отцовские и
материнские аллели каждого гена. Тем
не менее от того, в первом или втором
делении мейоза произошло разделение
аллелей, зависит, участвовали ли они в
процессе кроссинговера в ходе первого
мейотического деления.

Для того, чтобы отразить изменения, происходящие в ходе мейоза, используют формулы, где
через n обозначают хромосомный набор (2n или n), а через c — количество хроматид в
клетке (4c, 2c или c). Очень вероятно, что писать эти формулы заставят.
3. СУЖЕНИЕ ПОТЕНЦИЙ В ХОДЕ РАЗВИТИЯ (НА ПРИМЕРЕ ЭКСПЕРИМЕНТОВ
Г. ШПЕМАНА).

(Лекции №№1, 9.)

В идеальном мире в этот момент вы отправляетесь к вопросу №7. Там подробнейше описано
все, что нужно знать. Здесь только самые основные вырезки.

Список базовых терминов:

Дифференцировка (лат. «различие») — возникновение различий у изначально однородных

клеток; ряд последовательных изменений, которые клетка претерпевает в процессе
специализации. Как правило, необратима. Дифференцировка во взрослом организме:
регенерация, в том числе физиологическая; клетки красного костного мозга; половые клетки.
Молекулярная основа дифференцировки: строгое включение или выключение определенных
генов.

Дедифференцировка — утеря клеткой признаков, полученных в результате

дифференцировки. Может происходить при злокачественном перерождении, регенерации.
После этого часто происходит повторная дифференцировка в тот же тип клеток.

Метаплазия (греч. «превращаю») — повторная дифференцировка в другой клеточный тип

после дедифференцировки. Классический пример: вольфовская регенерация хрусталика.

Детерминация (лат. «определять») — определение судьбы клетки; она же скрытая

дифференцировка. Происходит на молекулярном уровне. В ее основе лежит
дифференциальная активность генов.

Коммитирование (англ. «фиксировать») — ограничение путей развития клетки;

возникновение такого состояния, при котором клетка может дальше развиваться только в
одном направлении, происходит ступенчато.

Хотя регулятивное развитие характеризуется тем, что проспективные возможности клеток

шире, чем их проспективная судьба, в определенный момент происходит сужение этих
возможностей.

Г. Шпеман — получил Нобелевскую премию за достижения в области эмбриологии.

Шпеман взял две гаструлы: раннюю и позднюю. Зная, из какой части должна формироваться
нейральная эктодерма ( = презумптивная нейральная эктодерма), он вырезает его у одной
и другой гаструлы и пересаживает соответственно третьему и четвертому зародышам в то
место, где в норме должен развиваться эпидермис.

У того зародыша (зародыш №3), которому на место презумптимного эпидермиса пересадили

презумптивную нейральную эктодерму от ранней гаструлы, развился эпидермис, как и было
заложено в норме.
У того зародыша (зародыш №4), которому на место презумптивного эпидермиса пересадили
презумптивную нейральную эктодерму от поздней гаструлы, развилась вторая нервная
пластинка.

Вывод: в ходе гаструляции резко меняются потенции клеток.

То есть в ранней гаструле проспективные потенции клеток были шире, чем их проспективная
судьба; они развивались в зависимости от их положения. В поздней гаструле клетки уже
прошли через сужение потенций соответственно их проспективной судьбе; их дальнейшее
развитие уже не зависит от положения в зародыше.

При этом клетки, которые уже подверглись сужению потенций, никак не отличаются внешне
от тех, которые еще не прошли этот процесс — детерминация происходит на молекулярном
уровне.

Индукция — явление, при котором одна область зародыша, взаимодействуя с другой,

побуждает эту область развиваться определенным способом. Это явление невероятно часто в
эмбриологии.

4.БИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ОПЛОДОТВОРЕНИЯ. ЭТАПЫ

ОПЛОДОТВОРЕНИЯ У ЧЕЛОВЕКА.

(Лекции №№1, 2, 4, архив)

Половой процесс (перегруппировка генетического материала без увеличения числа особей)

происходит уже у инфузории-туфельки (парамеция), но о размножении мы начинаем
говорить у хламидомонады. При этом одна особь скорее инициирует слияние («+»), а другая
— скорее подчиняется ему («-»), что можно считать прообразом сперматозоида и
яйцеклетки. Клетку, получившуюся после спаривания, называют зиготой (в древности так
называли двух волов в одной упряжи).

Оплодотворение можно изучать:

а.) на фиксированном препарате — в привычном понимании в статике или производя серию

срезов.

Наблюдение в динамике осуществляется путем одновременного оплодотворения

множества самок (лабораторных крыс, как правило). Далее каждый заданный
исследователем промежуток времени (скажем, раз в час) забивается по одной самке с
последующим изъятием из нее зародыша, приготавливаются его срезы.

+ а: можем использовать разные красители, повторно просматривать препарат при

необходимости, причем он хорошо хранится.
- а: трудоемко, сложно содержать множество животных; мы не всегда можем быть
уверены, что у разных самок крыс оплодотворение произошло в одно и то же время хотя бы
с точностью до часа.

б.) на прижизненном материале, создавая особую среду, имитирующую живую.

Биологическое значение оплодотворения

1. Генетическое — перекомбинация генетического материала родителей.

2. Репродуктивное — обеспечение непрерывной смены поколений, воспроизведение

потомков.

Процесс оплодотворения

После формирования сперматозоид выходит в просвет семенного канальца и в составе

эякулята (смесь секрета различных желез и сперматозоидов; имеет слабощелочную реакцию;
содержит различные соли, а также вещества, препятствующие капацитации (лат.
«способность») — способности к оплодотворению) попадает в верхнюю треть влагалища. На
то, чтобы добраться до яйцеклетки, сперматозоидам нужно 2-3 часа: они проходят через
цервикальную слизь матки, так что непосредственно в матку попадают только
сперматозоиды, без других
веществ, составляющих эякулят, —
значит, и без веществ,
препятствующих капацитации. При
этом происходит дестабилизация
акросомной мембраны и активация
молекул адгезии («приклеивание»).

Из нескольких миллионов
сперматозоидов до яйцеклетки
добирается только несколько сотен,
но уже в капацитированном
состоянии. В ходе их движения по
матке и яйцеводам, длящегося
несколько часов, их мембрана
претерпевает изменения: альбумин
женских половых путей снимает с
нее холестерин, что и
дестабилизирует акросомную
мембрану.

Овулировавшая яйцеклетка окружена лучистым венцом (corona radiata), которая

образована остатками фолликула (фолликулярные клетки, рыхло лежащие в матриксе,
который состоит преимущественно из гиалуроновой кислоты), и блестящей оболочкой
(zona pellucida) неклеточного строения. Оплодотворение происходит в верхней трети
яйцевода.

Блестящая оболочка — желточная.

ВНИМАНИЕ! Помним, что вопрос про человека. Здесь есть информация про морских ежей,
потому что первично мы рассматривали оплодотворение на них и я предполагаю, что про
тот же быстрый блок Балахонов может спросить. Но по умолчанию отсюда и до конца
вопроса отвечайте только то, что написано не курсивом.

Основные этапы оплодотворения:

1. Контакт сперматозоида с яйцеклеткой.

1.1. Качественный контроль — на расстоянии.

Зрелая яйцеклетка выделяет аттрактанты («привлекающие вещества), которые привлекают

сперматозоиды (они ориентируются с помощью хемотаксиса).

Качественный контроль необходим, чтобы сперматозоид одного вида не мог оплодотворить

яйцеклетку другого вида; происходит на расстоянии; осуществляется за счет того, что
яйцеклетки разных видов выделяют разные аттрактанты.

Для морских ежей это особенно важно, потому что в одном месте может быть икра
самок разных видов.

1.2. Акросомная реакция — при

непосредственном контакте.

У человека сперматозоиды сперва

рассеивают лучистый венец как с
помощью активного движения, так и
ферментировано растворяя его гиалуронидазой.

Далее сперматозоиды сцепляются с блестящей оболочкой, узнавая ее рецепторы с помощью

гликопротеинов ZP (от «zona pellucida»), и с использованием акросомной реакции
«вбуравливаются» в блестящую оболочку, благодаря чему выходят в узкое
перивителлиновое пространство (между плазмалеммой яйцеклетки и блестящей
оболочкой; «около желтка»).

У морского ежа (один из модельных организмов в эмбриологии) выбрасывается также

акросомный вырост из актиновых филаментов, который помогает сперматозоиду достичь
яйцеклетки. У человека акросомного выроста нет. У морского ежа растворяемая оболочка
называется студенистой.

Акросомная реакция осуществляется при контакте сперматозоида с оболочкой яйцеклетки:

происходит экзоцитоз протеолитических ферментов, которые растворяют белки оболочки.
Среди этих ферментов особенно выделяют акрозин.

2. Проникновение в яйцеклетку.

При этом происходит слияние плазмалемм яйцеклетки и сперматозоида с образованием

зиготы. Для этого необходимо, чтобы: а.) плазмалемма яйца была способна к слиянию: для
этого требуется, чтобы мембранный потенциал яйцеклетки находился в пределах от -70 до -
10 мВ, а ее плазмалемма плотно прилегала к оболочке.

2.1. Количественный контроль

Количественный контроль необходим для предотвращения полиспермии ( = проникновение

более, чем одного сперматозоида; обычно приводит к гибели зародыша).

У морского ежа осуществляется с помощью двух механизмов:

а.) Быстрый блок — достигается изменением мембранного потенциала яйцеклетки,

происходит через 0,1 секунды после слияния с плазмалеммой сперматозоида. До
оплодотворения он равен -70 мВ (милливольт; довольно среднее число для живых клеток),
после — резко увеличивается вплоть до положительных значений, может достигнуть +20
мВ.

Изменение потенциала опосредовано поступлением внутрь клетки ионов натрия, а наружу

— ионов калия.

Быстрый блок длится до одной минуты, после чего мембранный потенциал возвращается в
норму. Этот способ защиты есть у животных вплоть до амфибий, но уже в
млекопитающих он отсутствует.

б.) Медленный блок

Примерно через минуту после проникновения сперматозоида развивается кортикальная
реакция — мембрана яйцеклетки, прежде плотно прилегавшая к ее оболочке, отдаляется от
нее за счет выброса содержимого кортикальных гранул, и новые сперматозоиды не могут
преодолеть это расстояние.

У человека есть медленный блок.

Блестящая оболочка соединена с мембраной особыми связями.

Кортикальных гранул много, они располагаются непосредственно под мембраной

яйцеклетки и содержат пептиды и мукополисахариды. Как только сперматозоид касается
яйцеклетки, происходит экзоцитоз этих гранул в перивителлиновое пространство. Пептиды
разрушают связи между блестящей оболочкой и яйцеклеткой, вызывают затвердение
оболочки оплодотворение, отделение невезучих спермиев, а мукополисахариды создают
градиент концентраций, благодаря которому вода устремляется в перивителлиновое
пространство. Яйцеклетка же образует гиалиновый слой.

3. Слияние генетического материала

Ядерная оболочка сперматозоида разрушается, и под

воздействием агентов цитоплазмы яйцеклетки прежде
плотно уложенные хромосомы отца деконденсируются. Это
открывает возможности для ее репликации. После
деконденсации вокруг мужских хромосом снова образуется
ядерная оболочка, но уже из белков яйцеклетки, —
формируется мужской пронуклеус.

Однако не все компоненты плазматической мембраны

спермия могут входить в состав мембраны
оплодотворенного яйца. Часть материала мембраны спермия остается в месте его
прикрепления. Была предложена гипотеза, согласно которой локализация компонентов
спермия в ограниченной области приводит к возникновению в клетке асимметрии, которая
задает определенную направленность плоскости первого деления дробления и движениям
компонентов цитоплазмы в яйце (см. место появления серого серпа, вопрос №7).
Через восемь часов заканчивается мейоз яйцеклетки, образуются полярное тельце и женский
пронуклеус. Он немного крупнее, чем мужской.

Пронуклеусы равнозначны генетически, но не функционально (см. вопрос №13).

Одновременно формируется транспортная система из микротрубочек, обеспечивающая

сближение пронуклеусов. Во время их сближения в обоих пронуклеусах происходит
репликация ДНК в качестве подготовки к митозу.

Начинается профаза первого митоза дробления, в которую каждый пронуклеус вступает

самостоятельно. Объединятся они только через сутки на метафазе первого митоза.

4. Активация метаболизма яйцеклетки

для дальнейшего развития

Ответ на вопрос окончен. Для тех, кто идет по хронологии развития — добро пожаловать в
вопрос №12.

5. ДЕТЕРМИНАЦИЯ ПОСРЕДСТВОМ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ СЕГРЕГАЦИИ.

(Лекция №8.)

Это все — частности от вопроса №7. Здесь очень краткая выжимка, лучше прочесть раздел
«мозаичное развитие» (собственно, вопрос №7).

Была обнаружена Л. Шабри в 1886 году при работе с оболочниками ( = асцидиями).

Детерминация (лат. «определять») — определение судьбы клетки; она же скрытая

дифференцировка. Происходит на молекулярном уровне. В ее основе лежит
дифференциальная активность генов.

Морфогенетические детерминанты — молекулы, которые определяют развитие; в своей

сути могут быть одного из двух типов: а.) белками, являющимися факторами транскрипции
(включающими и выключающими определенные гены) и б.) мРНК. Они определяют,
сколько раз, в каком направлении и когда должен поделиться бластомер — задачу «когда»
решают клеточные часы. Морфогенетические детерминанты заякорены на цитоскелете, но
как и что их распределяет, пока для науки загадка.

Детерминация посредством цитоплазматической сегрегации происходит в связи с тем, что

при дроблении в каждый отдельный бластомер попадает определенное количество
определенных морфогенетических детерминант, находящихся в цитоплазме. Является
ведущей силой мозаичного типа развития (опять же, вопрос №7 или, если кратко, вопрос
№37).
6. СТРОЕНИЕ ЗАРОДЫША МЛЕКОПИТАЮЩИХ НА РАННИХ СТАДИЯХ
РАЗВИТИЯ. МОРУЛА, БЛАСТОЦИСТА.

(Лекции №№5, 6, 7. Примерно то же самое, что в вопросе №12, но оттуда вытащено только
то, что нужно для ответа здесь. Поэтому сначала читаем вопрос №12.)

Предположительно, для ответа достаточно строения морулы и бластоцисты, но на

всякий случай здесь расписана морфология зародыша на всех ранних стадиях. Именно
морфология — чтобы прочесть о функционировании и преобразованиях, через которые
проходит зародыш, следует обратиться к вопросу №12.

В первые часы после оплодотворения зародыш включает два пронуклеуса: мужской и

женский, причем женский образуется на восемь часов позже, чем мужской. По размеру
женский пронуклеус незначительно больше мужского. Зародыш все еще окружен блестящей
оболочкой с гиалиновым слоем под ней.

Так как дробление у млекопитающих асинхронное, уже на самых ранних стадиях развития в
зародыше может быть нечетное число клеток (2, 3, 4, 5, 6, … , n). Так как дробление
млекопитающих полное и равномерное, до стадии восьмиклеточной морулы включительно
бластомеры нельзя отличить друг от друга ни морфологически, ни биохимически;
бластомеры лежат рыхло, синтез белка не идет.

На стадии шестнадцатиклеточной морулы происходят сближение бластомеров в компактный

клеточный шар и первая дифференцировка. Клетки расположены упорядоченно: всегда три
находятся внутри, тринадцать — снаружи, полости внутри еще нет. Три внутренние клетки
впоследствии сформируют эмбриобласт («зачаток зародыша»), или внутреннюю клеточную
массу (ВКМ), а наружные — трофобласт («питающий зачаток»), необходимый для
имплантации в стенку матки. На этой стадии между ними ясны морфологические и
биохимические отличия.

! На стадии шестнадцатиклеточной морулы бластомеры еще не имеют названия трофобласта

и ВКМ. Его получат клетки-потомки этих бластомеров.

Вследствие кавитации внутри клеточного

шара образуется полость, заполненная
жидкостью, и теперь зародыш называется
бластоциста. Клетки, являющиеся
потомками ВКМ, подразделяются теперь на
два слоя: гипобласт и зародышевый
эпибласт.

В трофобласте также выделяют два слоя:

ближайший к зародышу сохраняет
клеточное строение (цитотрофобласт), а во
внешнем слое клетки сливаются
(синцитиотрофобласт).
По мере движения бластоцисты по яйцеводу она увеличивается, так как работают натриевые
насосы, продолжающие накачивать натрий внутрь бластоцели, образовавшейся в результате
кавитации, в связи с чем сохраняется осмотический градиент, и вода продолжает наполнять
бластоцель. Блестящая оболочка все еще сохраняется и предотвращает прилипание
бластоцисты к стенке маточной трубы. На 6-7 день происходит вылупление, бластоциста
больше не окружена блестящей оболочкой.

На тринадцатый день непосредственно зародыш, без учета трофобласта, включает двадцать-

тридцать клеток. Имплантация уже произошла, трофобласт разрастается, из гипобласта
образуется вторичный желточный мешок, начинают формироваться первичные
ворсинки. К началу третьей недели трофобласт уже окончательно превращается в хорион и
имеет хорошо развитые ворсинки. Между зародышевым эпибластом и амниотической
эктодермой формируется амниотическая полость, которая поначалу просто прилегает к
почти плоскому зародышу сверху, но после
начинает обхватывать его, оставляя
«неохваченной» только пупочный канатик.

Вследствие гаструляции образуется

гастроцель, она же полость первичного
кишечника; также отверстие, ведущее в
гастроцель, — бластопор.

До этого момента непосредственно зародыш составляет очень малую часть, развиваются в

основном внезародышевые образования, которые необходимы, чтобы создать условия для
дальнейшего развития самого зародыша.

Примерно на четвертой недели происходит обособление непосредственно зародыша от

внезародышевых образований и нейруляция. Передний отдел нервной трубки развивается
раньше, чем задний; к моменту, когда задний еще на замкнулся, на переднем уже появляются
мозговые пузыри. Последовательные этапы развития нервной трубки (более стройно можно
прочесть в вопросах №12 или №19): нервная пластинка (примерно 16 сутки); нервные валики
с нервным желобком (примерно 18 сутки — по всей длине); передний и задний нейропор при
сомкнувшемся среднем отделе (примерно 22 сутки), нервная трубка с нервным гребнем
(примерно 28 сутки). У нейрулы появляется вторичная полость тела.

7. СРАВНЕНИЕ ЭМБРИОГЕНЕЗА ЖИВОТНЫХ С РЕГУЛЯТИВНЫМ И

МОЗАИЧНЫМ РАЗВИТИЕМ.

(Лекции №№8, 9, 10, 13.)

Детерминация из первоначальных однородных клеток в другие клеточные типы у разных

животных может осуществляться двумя различными способами:

1. Цитоплазматическая сегрегация ( = спецификация) — сегрегация детерминирующих

молекул во время дробления.
2. Эмбриональная индукция (прогрессивная детерминация).

В развитии любого организма участвуют оба механизма, но значимы они в разной степени в
зависимости от того, какой вид мы рассматриваем.

Мозаичное развитие

доминирует цитоплазматическая сегрегация

1886 г. — Лоренс Шабри на оболочниках показал, что, если у зародыша удалять

определенные бластомеры, у личинки асцидии будут отсутствовать те структуры, которые
должны были формироваться из удаленных бластомеров. Если культивировать бластомеры
по отдельности, то каждый из них развивается автономно (определенные клетки «знают»,
что им нужно сформировать эктодерму, но другого — как нужно сформировать мышцы,
энтодерму — «не знают»). Такой способ развития — мозаичный: зародыш представляет
собой мозаику самодифференцирующихся частей. Он характерен для гребневиков,
круглых и кольчатых червей, оболочников, моллюсков.

Уже на зиготе оболочника можно показать, какая часть зиготы пойдет на какую ткань:
провести витальное ( = прижизненное, не нарушает жизнедеятельность клетки)
окрашивание различных частей ее цитоплазмы и посмотреть, в каких бластомерах будут
какие красители. Такое окрашивание работает потому, что зигота содержит
цитоплазматические ( = морфогенетические) детерминанты, которые строго
распределяются между бластомерами и определяют их дальнейшую судьбу. При этом, если
процентрифугировать зиготу оболочника, а потом наблюдать за ее развитием, бластомеры
все еще будут «знать», что образовывать, — это связано с тем, что морфогенетические
детерминанты заякорены на элементах цитоскелета, а потому не смещаются.

Можно вспомнить эксперимент Гердона с лягушкой: он удалял из зиготы ядро, и развитие

шло до гаструляции. Это связано с тем, что у лягушки собственные гены не работают аж
до начала гаструляции, развитие происходит благодаря морфогенетическим
детерминантам.

Морфогенетические детерминанты — молекулы, которые определяют развитие; в своей

сути могут быть одного из двух типов: а.) белками, являющимися факторами транскрипции
(включающими и выключающими определенные гены) и б.) мРНК. Они определяют,
сколько раз, в каком направлении и когда должен поделиться бластомер — задачу «когда»
решают клеточные часы.

Это показывают эксперименты на моллюсках: если изолировать друг от друга их

бластомеры, они делятся в том же темпе и столько же раз, сколько они делились бы в
цельном зародыше.

Еще пример: нематода Caenorhabditis elegans является модельным организмом: ее организм

всегда содержит 959 клеток, что говорит о крайне жесткой детерминации. Эмбриогенез
длится 16 часов, а геном включает три тысячи генов, что делает ее удобной для
наблюдений.
Учитывая все вышеперечисленное, Caenorhabditis elegans является ярким примером
животного с мозаичным развитием. Однако не стоит забывать, что у всех организмов
детерминация идет двумя способами, но с разной интенсивностью. Так, даже у C. elegans—
при формировании половых клеток — проявляются признаки эмбриональной индукции

Еще пример: морфогенетические детерминанты могут определять судьбу хроматина, как

это происходит у одного из видов аскарид. При дроблении в части клеток происходит
диминуция — потери некоторого количества генов, которые конкретным бластомерам не
будут нужны. Но благодаря морфогенетическим детерминантам те бластомеры, которым
предстоит дать начало половым клеткам, защищены от диминуции и сохраняют все
хромосомы в неизменном виде для передачи следующему поколению.

Еще пример: зиготы насекомых, включая Wachtiella, имеют специфическую веретеновидную

форму. Первые три деления дробления происходят без потери генетического материала, но
дальше все ядра, кроме тех, которые находятся на заднем полюсе, потеряют 32 из 40
хромосом. Задний полюс содержит так называемую полярную плазму. Если искусственно
не позволить ядрам подойти к этому полюсу, диминуция произойдет во всех ядрах.
Аналогично пойдут события, если облучить полярную плазму ультрафиолетом, тем самым
повредив цитоплазматические детерминанты.

Регулятивное развитие

доминирует прогрессивная детерминация

1888 г. — Вильгельм Ру провел

эксперимент: горячей иглой
разрушил один из бластомеров
эмбриона амфибии → на стадии
бластулы одна половина зародыша
имела нормальные клетки, другая не
развилась → образовалась лишь
половина нейрулы, соответственно, образовался только один нервный валик. Ру сделал
ошибочный вывод, что, как у оболочников, у амфибий мозаичный тип развития. Как
оказалось позже, дело было в том, что живые клетки продолжали контактировать с
мертвыми — поэтому просто выполняли свою часть общей работы, как если бы все клетки
зародыша были живы.
Но впоследствии Ганс Дриш выявил иной тип развития, который был свойственен и
амфибиям: он разделил два бластомера зародыша морского ежа → при разделении
образовались две полноценных личинки: каждый бластомер отрегулировал свое развитие,
опознав, что соседние клетки исчезли и свою функцию больше не выполняют, и смог дать
начало целому организму. Это характеризует регулятивный тип развития. Соседние
бластомеры, находясь рядом друг с другом, в этом случае находятся в постоянном
взаимодействии — происходит их индукция, влияние друг на друга. Клетки чувствуют,
окружены ли они чем-то или соприкасаются с окружающей средой — прогрессивная
детерминация.

Три вывода Дриша:

«…прочитать этот материал невозможно. Я его полистал, поскольку он меня касается…»

(с) Почти Балахонов, когда рассказывал про эти выводы.

1. Проспективная потенция каждого изолированного бластомера шире, чем его

проспективная судьба; при мозаичном развитии проспективная судьба и проспективная
потенция должны быть идентичны;

В данном случае проспективная потенция — те типы клеток, которые могли бы произойти

из бластомера, а проспективная судьба — типы клеток, которые должны формироваться
при нормальном развитии.

2. Зародыш морского ежа представляет собой гармоничную эквипотенциальную систему,

так как все ее потенциально независимые части функционируют вместе, формируя единый
организм → каждый бластомер потенциально способен образовать целый организм, но
зародыш может существовать только потому, что бластомеры реализуют только часть своего
потенциала;

3. Судьба ядра зависит исключительно от его положения в зародыше.

В начале XX века господствовал механицизм: живой организм представляли как некий

физический механизм, которую можно во всей полноте объяснить с позиции физики и
химии. Это противоречило выводам Дриша, из-за чего он обратился к энтелехии —
внутренней силе, направляющей к определенной цели.

Тот же вариант эксперимента, который поставил Дриш, впоследствии провели с

амфибиями и поняли, что и у них проявляется регулятивный тип развития — и тем самым
исправили ошибку Вильгельма Ру.

Еще пример: до определенной стадии, разделив зародыш крысы на отдельные бластомеры,

из каждого можно получить жизнеспособного крысенка.

Доказательством наличия регулятивного типа развития у человека является возможность

появления однояйцевых близнецов.
Регулятивный тип развития характерен для млекопитающих, амфибий, иглокожих. Но даже
для них наступает, раньше или позже, период, когда потенция каждого бластомера сужается,
и он уже не может воспроизвести зародыш с нуля.

Это показал Герстадиус на зародыше морского ежа: он провел два варианта разделения 8-
клеточного зародыша: а.) по меридиану —
каждая из двух половин дала нормальную
личинку. Проведя тот же эксперимент после
32-клеточной стадии, Герстадиус обнаружил,
что большая часть бластомеров по
отдельности уже не могла дать начало целой
личинке, а некоторые бластомеры теряли эту
способность начиная с 16-клеточной стадии;
б.) по экватору (на анимальный и
вегетативный полюса) — анимальная часть
превращалась в полый шар с ресничными
клетками, а вегетативная давала слегка
аномальную личинку.

Развитие зародыша амфибий:

1. Яйцеклетка и, впоследствии, зигота амфибий состоят из анимального (верхний, содержит

больше свободной цитоплазмы) и вегетативного (нижний, содержит желток, питательные
вещества) полушарий. Сперматозоид всегда проникает через анимальный полюс.

Еще до начала дробления мы можем точно сказать, из какой части зиготы будет образована
определенная часть зародыша.

2. Через несколько минут после оплодотворения анимальное полушарие смещается, и на

стороне, противоположной месту проникновения сперматозоида, возникает отличающаяся
по цвету область — серый серп.

3. Первая борозда дробления делит серый серп пополам, формируя левую и правую стороны
зародыша. Учитывая это, можно предсказать, где у зародыша будут
спинная/брюшная/прочие стороны.
Из серого серпа образуются те клетки, с которых начнется гаструляция. Из этих клеток
впоследствии будет образована дорсальная ( = спинная) губа бластопора.

Именно из-за того, что в анимальном полушарии в экспериментах Герстадиуса не оставалось

серого серпа, разделение на анимальное и вегетативное полушария давало аномальных
зародышей; напротив, при разделении по меридиану серый серп сохранялся, начало
гаструляции было возможно, развитие шло нормально. Такой же эксперимент, поставленный
на амфибиях, а не на морском еже, дает аналогичный результат.

Запрограммированность серого серпа на его судьбу инициатора гаструляции, как видно из

эксперимента Герстадиуса, обеспечивается какими-то веществами в цитоплазме.

4. С бластомеров, образовавшихся в области серого серпа, начинается гаструляция: в этом

месте происходит инвагинация будущей мезодермы с формированием сначала спинной
губы бластопора, после — первичного кишечника и кольцевого бластопора. Из этого
материала будет образована хорда; здесь же впоследствии образуется спинная сторона.

Спинная губа бластопора — это не определенная группа клеток и не орган, это просто
часть зародыша.

5. Клетки вегетативного полюса большие и богатые желтком — их инвагинация была бы

затруднительна, поэтому образовавшееся в области серого серпа впячивание охватывает,
«обрастает» вегетативное полушарие.

Благодаря этому мы можем говорить, что у амфибий гаструляция смешанная, включает

инвагинацию и эпиболию (см. вопрос №10).

Г. Шпеман — получил Нобелевскую премию за достижения в области эмбриологии.

Обратимся к его экспериментам.

1. Шпеман перевязал зиготу тритона так, чтобы

в одной части осталось ядро, а в другой —
только цитоплазма. В первой половине
дробление происходит, во второй — нет. На
шестнадцатиклеточной стадии Шпеман
ослабил перевязь и позволил одному ядру
перейти во вторую половину, прежде чем снова затянуть лигатуру — причем сильнее, чем в
прошлый раз; настолько, чтобы зародыш разделился на две части без связи между ними.
Тогда дробление пошло и во второй половине. В результате под одной оболочкой развились
два тритона-близнеца разного возраста (тритон из второй половины младше).

Вывод: ядра ранних зародышей амфибий идентичны и способны обеспечить развитие

целого организма.

2. Шпеман взял две гаструлы: раннюю и позднюю. Зная, из какой части должна
формироваться нейральная эктодерма ( = презумптивная нейральная эктодерма), он
вырезает его у одной и другой гаструлы и пересаживает соответственно третьему и
четвертому зародышам в то место, где в норме должен развиваться эпидермис.

У того зародыша (зародыш №3), которому на место презумптимного эпидермиса пересадили

презумптивную нейральную эктодерму от ранней
гаструлы, развился эпидермис, как и было заложено
в норме.

У того зародыша (зародыш №4), которому на место

презумптивного эпидермиса пересадили
презумптивную нейральную эктодерму от поздней
гаструлы, развилась вторая нервная пластинка.

Вывод: к поздней гаструляции резко меняются

потенции клеток.

То есть в ранней гаструле проспективные потенции

клеток были шире, чем их проспективная судьба; они развивались в зависимости от их
положения. В поздней гаструле клетки уже прошли через сужение потенций соответственно
их проспективной судьбе; их дальнейшее развитие уже не зависит от положения в зародыше.

При этом клетки, которые уже подверглись сужению потенций, никак не отличаются внешне
от тех, которые еще не прошли этот процесс — детерминация происходит на молекулярном
уровне.

3. Следующий вопрос, возникающий после вышеизложенных экспериментов, — а что

заставляет клетки пройти через детерминацию? Шпеман и его помощница показали, что
единственной самодифференциирующейся частью в ранней гаструле лягушки является
спинная губа бластопора. В связи с этим явлением Шпеман назвал ее
организатором.

Чтобы доказать это, Шпеман пересадил дорсальную губу от одной

ранней бластулы другой, причем в то место, где инвагинация
происходить не должна была. Параллельно со «своей» инвагинацией в
зародыше-акцепторе инвагинация пошла и там, куда был пересажен
материал дорсальной губы бластопора. Впоследствии там развились
вторая нервная трубка, второй комплекс органов. Результатом
развития такой бластулы стали два сращенных зародыша.
Индукция — явление, при котором одна область зародыша, взаимодействуя с другой,
побуждает эту область развиваться определенным способом. Это явление невероятно часто
встречается в эмбриологии.

Первичная эмбриональная индукция — процесс, при котором в ходе гаструляции

дорсальная мезодерма ( =
хордомезодерма) индуцирует эктодерму в
развитие нервной структуры.

Образование нервной пластинки напрямую

зависит от хордомезодермы, так как она
побуждает клетки развиться в нервную
пластинку. Помимо этого, она также
индуцирует развитие специфических
отделов нервной трубки, то есть проявляет
региональную специфичность ( = спецификацию). Эксперимент, показывающий это,
проводится по методике «сандвичей», разработанной Гольтфретером.

1. У ранней гаструлы вырезают кусочек недифференцированной эктодермы и дорсальной

губы бластопора. Дорсальную губу на манер сэндвича вкладывают в эктодерму, и из нее
развиваются структуры переднего головного мозга.

2. Делают все то же самое, но дорсальную губу бластопора вырезают уже из поздней

гаструлы. Тогда из итогового сэндвича появятся структуры спинного мозга.

Но как возможна эта региональная специфичность? Дело в том, что хордомезодерма

выделяет два типа веществ. Более высокая концентрация первого опосредует развитие
передних отделов, более высокая концентрация второго — задних; равная их концентрация
— развитие средних отделов.

Следующий вопрос — а что это за вещества являются нейроиндукторами?

Эксперимент: удаляем из ранней бластулы хордомезодерму и подсаживаем вместо нее

кусочек печени взрослого тритона. Внезапно, нервная трубка начинает развиваться. То же
произойдет, если подсадить мертвые клетки печени (феномен мертвых организаторов). То
же произойдет, если поместить на место удаленной хордомезодермы кристаллики
метиленового синего.

Оказалось, что нейрализующие факторы содержатся в самой эктодерме, но нужно стороннее

воздействие, чтобы их высвободить.

Согласно современным представлением, та индукция, которую Шпеман назвал первичной,

на самом деле не является первой.

! Считается, что экто- и энтодерма дифференцируются автономно, а вот для развития

мезодермы нужна индукция.
Эксперимент, показывающий это: ранняя бластула (примерно на стадии 128 клеток)
помещается в среду, в которой отсутствуют кальций и магний, из-за чего зародыш
распадается на отдельные клетки. Мы знаем, какие из этих отдельных клеток должны были
бы стать экто-, мезо- и энтодермой, и знаем также, какие молекулы (мРНК для белков
определенных элементов цитоскелета) производят только клетки
эктодермы/мезодермы/энтодермы.

После разделения, проследив, чтобы клетки не соединились снова, магний и кальций в среду
возвращают, чтобы был возможен синтез мРНК.

Оказалось, что клетки, которым было суждено стать экто- и энтодермой, производили
специфические для своего зародышевого листка мРНК. Те же, которые должны были стать
мезодермой, специфичных мРНК не давали, пока их не сближали хотя бы с одной другой
мезодермальной клеткой.

Вывод: экто- и энтодерма «знают» о своей судьбе сами по себе. Мезодерма «узнает» о ней
благодаря индукции.

Вторичные эмбриональные индукции — все индукции, следующие после первичной в

эмбриональном развитии. Составляют каскады индукций, детерминация зависит от
взаимодействия групп клеток. Примеры: развитие глаза (глазной пузырь индуцирует
развитие хрусталика).

В каскадах индукций происходит прогрессивное ограничение потенций.

Компетентность — способность реагировать на определенные сигналы, поступающие от

других клеток. Изменяется в ходе развития. Так, например, если пересадить дорсальную губу
бластопора к эктодерме гаструлы, разовьется еще одна нервная трубка; если пересадить ее к
эктодерме нейрулы, новая нервная трубка не появится. Это значит, что эктодерма нейрулы
больше не компетентна к сигналам от
хордомезодермы, зато она получит компетентность
к другим сигналам. Так, например, при развитии
хрусталика эктодерма компетентна к сигналам от
глазного пузыря.

Описание развития хрусталика:

1. Стенка переднего мозга образует выпячивание

кнаружи, в сторону эктодермального эпителия, —
глазной пузырь. С течением времени это
выпячивание становится все выраженнее.

2. В эктодерме над глазным пузырем образуется утолщение — хрусталиковая плакода.

3. Из глазного пузыря продолжает образовываться глаз — для этого развивается

выпячивание.
4. Из хрусталиковой плакоды развивается хрусталиковый пузырь — для этого она
начинает впячиваться.

5. Хрусталиковый пузырь продолжает впячиваться, пока не отшнуровывается, так что

формируется хрусталик. Параллельно из глазного пузыря формируются различные слои
глаза.

Вывод: хрусталик образуется из эктодермы, глаз — из глазного пузыря. Подтверждающий

эксперимент: пересаживаем глазной пузырь от одного зародыша к эктодерме другого, но
туда, где глаза быть не должно. Разовьется хрусталик.

Каскад вторичных индукций при развитии глаза:

1. Презумптивный эпидермис проходит через детерминацию, становясь презумптивной

эктодермой хрусталика.

2. Под влиянием хордомезодермы: презумптивная эктодерма подвергается детерминации,

становясь презумптивной нервной пластинкой. В свою очередь, презумптивная нервная
пластинка под влиянием хордомезодермы также проходит через детерминацию, становясь
презумптивной глазной чашей. Из нее развивается глазной пузырь.

2. Под влиянием глазного пузыря: из презумптивной эктодермы хрусталика развивается

хрусталиковая плакода, которая продолжает развитие до хрусталикового пузырька.

3. Под влиянием хрусталикового пузырька из презумптивной эктодермы роговицы,

располагающейся над ним, развивается роговица.

4. В это время глазной

пузырь развивается в
глазную чашу, которая
дифференцируется на
пигментную и
нейральную сетчатку.

5. Под влиянием
нейральной сетчатки:
из хрусталикового
пузырька развивается
хрусталик.

Одним из наиболее изученных примеров вторичных индукций являются эпителиально-

мезенхимные взаимодействия (см. вопрос №34).

При этом одних только вторичных индукций для формирования тела не достаточно. Какой-
то механизм должен «следить» за тем, чтобы органов развивалось верное количество, чтобы
они развивались в правильных местах. Этот механизм объясняется моделью позиционной
информации.
8. ЗАРОДЫШЕВЫЕ ЛИСТКИ В ЭМБРИОГЕНЕЗЕ ПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ,
ИХ ОБРАЗОВАНИЕ И ЗНАЧЕНИЕ.

(Лекции №№3, 7, 9, 10.)

Зародышевые листки образуются в процессе гаструляции (виды гаструляции см. в вопросе

№10). После образования зародышевых листков начинается органогенез.

Из эктодермы формируются нервная система, потовые железы, покровы отделов,

развивающихся из стомодеума и проктодеума (простым языком: переднего и заднего отделов
пищеварительной системы; подробнее — в вопросе №19); эпидермис, его производные
(волосы, ногти, рога, копыта), сальные и молочные железы, аденогипофиз, нервный гребень,
хрусталик, роговица.

Производным от эктодермы является нервный гребень, но его значение настолько велико,

что иногда его условно называют четвертым зародышевым листком. Его клетки обладают
высокой способностью к миграции и дают начало многим клеточным типам: меланоцитам
кожи; одонтобластам (клетки, синтезирующие дентин зуба); хромаффинным клеткам
надпочечников (синтезируют катехоламины); нейронам и глиальным элементам; большому
количеству скелетных и мышечных элементов висцерального черепа.

На стадии ранней гаструлы эктодерма компетентна к стимулам, получаемым от

хордомезодермы. На стадии нейрулы эта восприимчивость исчезает, но появляется
восприимчивость к другим стимулам: эктодерма получает компетенцию реагировать на
стимулы от глазного пузыря (превращение эктодермы: хрусталиковая плакода →
хрусталиковый пузырь → хрусталик). Хрусталик в дальнейшем индуцирует образование
роговицы в лежащем над ним эктодермальном эпителии.

Из энтодермы формируются эпителиальная выстилка кишечной трубки, кроме стомодеума и

проктодеума (т.е. кроме переднего и заднего отделов пищеварительной системы),
пищеварительные железы (печень, секретирующие клетки поджелудочной, кишечных и
желудочных желез), эпителий легких, трахея, бронхи; участвует в формировании
щитовидной и паращитовидных желез, мочевого пузыря, среднего уха, евстахиевой трубы.

Из мезодермы формируются сердечнососудистая система, выделительная, мышцы, кровь,

кости, хрящи, половые железы. В мезодерме формируется вторичная полость тела, или
целом. Во взрослом организме ему соответствуют плевральная, перикардиальная,
перитонеальная полости.

В ходе эмбриогенеза мезодерма формирует хордомезодерму и дорсальную губу

бластопора, которая индуцирует развитие нервной трубки из эктодермы, — первичная
индукция. Материал дорсальной губы регулирует также образование определенных отделов
нервной трубки в определенном месте — то есть обладает региональной специфичностью (
= спецификацией).
Согласно современным представления, экто- и энтодерма способны дифференцироваться
автономно, а вот для мезодермы нужна индукция (см. «первичная эмбриональная индукция,
вопрос №7). Нейрализующие факторы при этом находятся внутри самой эктодермы, но ей
нужен стимул извне (который и дает мезодерма), чтобы они высвободились и стали активны.

9. HOX-ГЕНЫ И ИХ ЗНАЧЕНИЕ В РАЗВИТИИ.

(Лекция №2.)

Нох-гены – гомеобокс-содержащие гены, регуляторные.

Эволюционно очень древние, консервативные. От них зависят: а.)
план строения всего организма (например, где голова, усики,
конечности) и б.) план строения отдельной части организма (например, где в руке локоть,
плечо, предплечье). Кодируют транскрипционные факторы.

Гомеобокс — определенная известная последовательность ДНК, содержащая 183 п.н. (пар

нуклеотидов).

Впервые обнаружены на дрозофилах, у которых вместо усиков развивалась пара лапок:

оказалось, что ген развития грудных конечностей включился не в том месте и не в то время.
Вероятно, hox появились еще у стрекающих (более полумиллиарда лет назад). У человека
hox-гены расположены кластерами ( = тесными группами), в которых сохраняется более-
менее правильный порядок расположения (условно: «головные» гены впереди, «хвостовые»
— сзади) и включения (они включаются по очереди). Такие кластеры локализованы на
четырех человеческих хромосомах.

10. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТИПОВ ГАСТРУЛЯЦИИ.

(Лекция №3.)

а.) Инвагинация (от греч. «ножны») — вдавление.

Часть эктодермы вдавливается внутрь полого шара, и образуется энтодерма, которая
выстилает полость гаструлы, — гастроцель. В месте вдавливания образуется отверстие,
являющееся входом в гастроцель, — бластопор.

б, в.) Иммиграция.

Наиболее древний тип: можем сравнить с тем, что происходит у вольвокса (клетки
постоянно мигрируют внутри колонии: «сытые» уходят внутрь, а «голодные» — наружу).

г, д.) Деляминация ( = расслоение), две стадии развития — клетки делятся в одной

плоскости (радиально), а после в какой-то момент — в другой.

е, ж.) Эпиболия ( = обрастание), две стадии развития — клетки нижнего полюса крупные,
делятся медленно; клетки верхнего полюса мелкие, делятся быстро (анимальный полюс) и
обрастают крупные клетки.

Пятый тип гаструляции — смешанный. Например, у человека можно разглядеть признаки

всех четырех типов. В принципе, это наиболее распространенный тип, хотя не обязательно
он сочетает в себе все четыре названных пути гаструляции.

У амфибий гаструляция является смешанной, сочетая инвагинацию и эпиболию.

11. ГАСТРУЛЯЦИЯ КАК ПРОЦЕСС ФОРМИРОВАНИЯ ОБЩЕГО ПЛАНА

ЗАРОДЫША.

(Лекции №№3, 9.)

Во время гаструляции возникают зародышевые листки, имеющие определенное

расположение друг относительно друга (эктодерма — на поверхности, также образует
нервную трубку и нервный гребень, погруженные в мезодерму; энтодерма выстилает
полость первичного кишечника, расположена внутри; мезодерма расположена между экто- и
энтодермой, выстилает вторичную полость тела). Зародышевые листки становятся
материалом для органогенеза; из вторичной полости, образующейся еще на стадии гаструлы,
развиваются перикардиальная, перитонеальная и плевральная полости.

Таким образом, взаимное расположение зародышевых листков, возникающих в процессе

гаструляции, формирует общий план строения зародыша.

Вместе с тем в ходе гаструляции происходит резкое изменение потенций клеток (см. вопрос
№7 или, кратко, вопрос №3). Среди них можно особенно выделить первичную индукцию
— процесс, при котором в ходе гаструляции дорсальная мезодерма ( = хордомезодерма)
индуцирует эктодерму в развитие нервной структуры. Это определяет расположение нервной
трубки и различных ее отделов, хорды, кишечника.

В качестве примера формирования общего плана зародыша в ходе гаструляции можно

рассмотреть гаструляцию амфибий (подробнее, от оплодотворения до окончания
гаструляции, см. вопрос №7).
Гаструляция начинается с бластомеров, образовавшихся в области серого серпа: в этом месте
происходит инвагинация мезодермы с формированием сначала спинной губы бластопора,
после — первичного кишечника и кольцевого бластопора. Из этого материала будет
образована хорда; здесь же впоследствии образуется спинная сторона.

Клетки вегетативного полюса большие и богатые желтком — их инвагинация была бы

затруднительна, поэтому образовавшееся в области серого серпа впячивание охватывает,
«обрастает» вегетативное полушарие.

12. РАННЕЕ ЭМБРИОНАЛЬНОЕ РАЗВИТИЕ ЧЕЛОВЕКА.

(Лекции №№3, 5, 6, 7)

(Вообще, когда это читалось, оно читалось во многом в сравнении с другими животными. Я
не нашла, куда притулить эту информацию, поэтому просто оставила ее здесь и пометила
курсивом. Вот такой я злостный нарушитель правил логики. Просто знайте и помните,
что вопрос требует только развитие человека.)

Ооцит млекопитающих, высвобождаясь из яичника, попадает в яйцевод. Оплодотворение

происходит в верхней трети яйцевода. Первое деление дробления начинается примерно через
сутки.

1. Дробление, или деление-дробление, — процесс, при котором в ходе

серии митотических делений происходит увеличение количества клеток в
зародыше, хотя масса каждой отдельной клетки уменьшается (нет роста
клеток между делениями). В результате образуются бластомеры (от
«зародыш» и «часть»).

Дробление продолжается до тех пор, пока не достигается ядерно-цитоплазматическое

соотношение бластомеров, характерное для соматических клеток.

Особенности дробления у млекопитающих:

1. Медленное; например, второе деление происходит через 12-18 часов

после первого.

В связи с этим собственные гены зародыша включаются на стадии

четырех-восьми бластомеров.

У лягушки через двое суток будут уже тысячи бластомеров, в то время как у человека —
только четыре.

У лягушки до начала гаструляции собственные гены не работают, развитие происходит

благодаря цитоплазматическим факторам. Явление показано в эксперименте Гердона: он
удалял из зиготы ядро, и развитие шло до гаструляции. Это связано с тем, что в короткое
время происходит множество делений с образованием тысяч клеток — легче запасти иРНК
от яйцеклетки, чем пытаться успеть с нуля насинтезировать их в сжатые сроки.
2. Выраженная асинхронность дробления: каждый бластомер дробится со своей скоростью.

У большинства других животных (лягушка, ланцетник) количество бластомеров растет в

геометрической прогрессии: 2, 4, 8, 16… У человека может быть, скажем, такой ряд: 2, 3,
6, 7, 9…

3. Дробление полное — дробится вся зигота.

У птиц дробление неполное.

4. Дробление равномерное.

5. Происходит компактизация, создающая условия для дифференциации. Еще на стадии

восьми бластомеров они лежат довольно рыхло (синее фото), но уже на шестнадцати
сближаются в плотный клеточный шар (оранжевое фото).

У ланцетника дробление радиальное, равномерное, первые семь циклов синхронное. Первая

борозда намечает правую и левую половины тела; третья — головной и хвостовой отделы.
Первая и вторая борозды проходят по меридиану, третья — по экватору.

2. Морула (от «тутовая ягода»). Здесь у меня затык, потому что Балахонов не давал
определение, только перевод, но он называл морулой стадии дробления (восьми-,
шестнадцатиклеточные морулы звучали точно), так что дальше я буду использовать
термин в этом значении.

На стадии восьмиклеточной морулы бластомеры нельзя отличить друг от друга ни

морфологически, ни биохимически.

Срок — 4-5 сутки. В этот момент зародыш достигает стенки матки, но еще 2-3 дня не
сможет имплантироваться.

На стадии шестнадцатиклеточной морулы происходит первая дифференцировка. Клетки

здесь расположены упорядочено: всегда три находятся внутри, тринадцать — снаружи. Три
внутренние клетки сформируют эмбриобласт («зачаток зародыша»), или внутреннюю
клеточную массу (ВКМ), а наружные — трофобласт («питающий
зачаток»), необходимый для имплантации («пересадка») в стенку
матки, которая произойдет на 6-7 день.

Впоследствии трофобласт сформирует хорион, который входит в

состав детской части плаценты. На данном этапе трофобласт
транспортирует к ВКМ ионы, создавая осмотический градиент, из-
за чего в морулу поступает жидкость, что индуцирует кавитацию
(от «полость») — образование полости. Потомки эмбриобласта
оттесняются к одному из полюсов.

ВКМ впоследствии образует зародыш, амнион, желточный мешок,

аллантоис, пупочный канатик и кровеносные сосуды, входящие в
ворсинки хориона.
Доказать, что в образовании зародыша участвуют только три бластомера, находящиеся
внутри зародыша на стадии шестнадцатиклеточной морулы, позволяют эксперименты с
химерами.

Химеризм — наличие в организме клеток, произошедших более, чем от двух родителей.

Пример — гетерохромия.

Пример эксперимента: из яйцеводов извлекают восьмиклеточных зародышей от белой и

черной мышей, с помощью проназы (протеолитический фермент) растворяют прозрачную
оболочку и приводят зародыши в контакт, вследствие чего они образуют химерную
бластоцисту, которую имплантируют самке-реципиенту. Если бы зародыш образовывался
только из одного бластомера, полосатых мышат не было бы; если бы из двух — их было бы
около половины; реальное соотношение (около 75%) реализуется, если в этом участвуют
три бластомера.

3.1. Бластоциста («пузыревидный зачаток»).

После кавитации среди клеток-потомков ВКМ можно выделить два

слоя: зародышевый эпибласт (зародыш образуется только из него)
и гипобласт. Эпибласт впоследствии образует не только сам
зародыш, но и стенку амниона, пупочный канатик.

В трофобласте также выделяют два слоя: ближайший к зародышу

сохраняет клеточное строение (цитотрофобласт), а во внешнем
слое клетки сливаются (синцитиотрофобласт). Трофобласт,
особенно синцитиотрофобласт, начинает синтезировать трипсиноподобную протеазу
(активатор плазминогена; не та же протеаза, которая используется для вылупления),
которая необходима для разрушения стенки матки и подлежащих тканей при имплантации.
Вместе с тем трофобласт обладает способностью к иммунологической маскировке.

На этой стадии дифференцировка уже произошла, но дробление

продолжается, так как еще не достигнуто необходимое ядерно-
цитоплазматическое соотношение.

По мере движения бластоцисты по яйцеводу она увеличивается,

так как работают натриевые насосы, накачивающие натрий внутрь
бластоцели, в связи с чем сохраняется осмотический градиент, и
вода заполняет бластоцель.

Блестящая оболочка все еще сохраняется и предотвращает прилипание бластоцисты к стенке

маточной трубы.

Вылупление — выход из яйцевых оболочек. В случае человека это выход из блестящей

оболочки, происходящий на 6-7 день. На бластоцисте образуется
выпячивание, в котором концентрируется трипсиноподобная
протеаза. Выпячивание контактирует с блестящий оболочкой,
растворяя ее, и зародыш выдавливается из оболочки.
В ответ на повышение уровня прогестерона начинается секреторная фаза матки: слой
эндометрия увеличивается, получает особенно богатое кровоснабжение, растет секреторная
активность маточных желез. Возникает окно имплантации — время, когда возможно
погружение зародыша в стенку матки; в остальное время эндометрий невосприимчив к
имплантации. Рецептивность — способность эндометрия принимать зародыш. Возникает за
счет того, что уменьшается число антиадгезивных молекул на поверхности матки, а вместо
них растет число адгезивных молекул. Считается, что этот процесс регулируют
преимущественно вещества, выделяемые бластоцистой.

Для приматов характерна погружная имплантация. За сутки зародыш погружается

наполовину, за двое суток — полностью, и эпителий стенки матки смыкается над ним.
Иммунологические аспекты см. в вопросе №15. Местными иммуносупрессорными
свойствами обладают хорионический гонадотропин, прогестерон.

3.2. Бластула («зачаток» + уменьшительно-ласкательный суффикс) — стадия, на которой

заканчивается дробление, а клетки не дифференцированы.

! Эта стадия отсутствует у большинства

плацентарных, если говорить строго, так как у
бластоцисты человека уже есть
дифференцировка, а дробление еще
продолжается.

У ланцетника, иглокожих внутри имеется

полость, состоит из одного слоя клеток. Это целобластула.

Бластула включает крышу, краевую зону, дно, анимальный и вегетативный полюса.

4. Гаструляция — 9 день.

Видов гаструляции множество (см. вопрос №10). У человека

происходит смешанная гаструляция. Формируется три зародышевых
листка: эктодерма, мезодерма и энтодерма. Образуется
гастроцель, она же полость первичного кишечника; также
отверстие, ведущее в гастроцель, — бластопор.

На случай допвопроса. На основании того, развивается на месте бластопора рот или

анальное отверстие, выделяют соответственно первично- (членистоногие, нематоды,
моллюски, кольчатые и плоские черви) и вторичноротых (иглокожие, асцидии и хордовые)
животных.

На тринадцатый день непосредственно зародыш, без учета трофобласта,

включает двадцать-тридцать клеток. Имплантация уже произошла,
трофобласт разрастается, из гипобласта образуется желточный мешок
(желтый на схеме), начинают формироваться первичные ворсинки. К
началу третьей недели трофобласт уже окончательно превращается в
хорион и имеет хорошо развитые ворсинки. Между зародышевым эпибластом и
амниотической эктодермой формируется амниотическая полость, которая поначалу просто
прилегает к почти плоскому зародышу сверху, но после начинает обхватывать его, оставляя
«неохваченной» только пупочный канатик, потому как через него впоследствии пойдут
сосуды к плаценте (греч. «лепешка»).

Хотя желтка у человека нет, желточный мешок возникает из-за рекапитуляции —

повторения признаков далеких предков в онтогенезе современных организмов (согласно
биогенетическому закону). Поэтому же рост кровеносных сосудов начинается от желточного
мешка.

Цель формирования ворсинок — увеличение площади поверхности, контактирующей с

материнской кровью. Другие примеры: кишечные ворсинки, извилины мозга, внутренняя
мембрана митохондрии.

До этого момента непосредственно зародыш составляет очень малую часть, развиваются в

основном внезародышевые образования, которые необходимы, чтобы создать условия для
дальнейшего развития самого зародыша.

5. Нейруляция — начало образования нервной системы, примерно вторая-четвертая недели

(головной и хвостовой концы замыкаются позже среднего отдела нервной трубки).

а.) На спинной стороне эктодерма начинает приподниматься, образуется нервная пластинка

(можно выделить уже на 16 сутки).

б.) Края нервной пластинки продолжают подниматься,

формируются нервные валики (можно выделить уже на
18 сутки). Между нервными валиками формируется
нервный желобок ( = нервная борозда).

в.) Нервные валики растут друг к другу, пока не

смыкаются, образуя нервную трубку (смыкание средней
части можно наблюдать уже на 22 сутки, смыкание
переднего и заднего нейропоров — на 28 сутки), и та
уходит под эктодерму.

Нейропор — незамкнувшаяся часть будущей нервной

трубки.

Не все клетки нервной пластинки входят в состав нервной трубки; часть их (на рисунке
помечена зеленым цветом) формирует нервный гребень. Его условно называют четвертым
зародышевым листком. Клетки нервного гребня обладают высокой способностью к
миграции и дают начало многим клеточным типам: меланоцитам кожи; одонтобластам
(клетки, синтезирующие дентин зуба); хромаффинным клеткам надпочечников
(синтезируют катехоламины); нейронам и глиальным элементам; большому количеству
скелетных и мышечных элементов висцерального черепа.

У нейрулы появляется также вторичная полость тела (имеет мезодермальную выстилку) —

целом. У человека мы можем видеть ее в плевральной, перикардиальной и перитонеальной
полостях.
Ответ на вопрос окончен. Для тех, кто идет по хронологии развития — добро пожаловать в
вопрос №19.

В большей или меньшей мере глобальная сводка «А что может пойти не так на ранних
стадиях развития зародыша, раз только три из десяти нормально имплантируются?» На
самом деле, пойти не так может все, но это пачка примеров из лекций.

1. В силу случайных причин и в женском, и в мужском пронуклеусах оказался метилирован

какой-то важный ген.

2. Механизмы защиты зародыша от иммунитета матери оказались недостаточны для

данной комбинации антигенов, и иммунитет уничтожил бластоцисту.

3. Зародыш полиплоиден. Наиболее частые варианты (триплоиды): была оплодотворена

дефектная диплоидная яйцеклетка или нормальную яйцеклетку оплодотворили несколько
зародышей.

4. Зародыш распался на несколько частей, как при формировании однояйцевых близнецов, но

не смог развиться и погиб.

13. ГЕНОМНЫЙ ИМПРИНТИНГ.

(Лекция №5.)

Геномный импринтинг (от англ. «отмечать») — эпигенетический процесс, при котором

экспрессия определенных генов осуществляется в зависимости от того, от какого родителя
поступили аллели. Именно из-за него для развития зиготы нужны и мужской, и женский
пронуклеусы.

! Не подчиняется законам Менделя.

Эпигенетическое наследование — наследование активного или неактивного состояния

определенных генов без утраты генетического материала.

Если безъядерную яйцеклетку оплодотворит гаплоидный сперматозоид, репликацией ДНК

он может восстановить диплоидность зиготы. Развитие в таком случае пойдет, но зародыш
не образуется или погибнет, зато появится гипертрофированный хорион, который образует
хорионаденому (опухоль матки). Только женские хромосомы также не способны обеспечить
развитие. Связано это с разной комбинацией метилированных цитозинов (это блокирует
чтение определенных генов) у мужского и женского пронуклеусов. В этом случае неактивная
форма гена — с метилированным цитозином, активная — с нормальным. Совсем уж
подробно можно прочесть в билетах
по генетике.
Вовсе не обязательно метилирование генов остается на всю жизнь, но даже временное
метилирование может быть критично для ранних этапов развития.

14. ОБРАЗОВАНИЕ ОДНОЯЙЦЕВЫХ И РАЗНОЯЙЦЕВЫХ

БЛИЗНЕЦОВ. СИАМСКИЕ БЛИЗНЕЦЫ.

(Лекция №6.)

Для понимания требуется материал вопроса №6 или, глобальнее, вопроса №12.

Для особенно отчаянных — про близнецов писалось в билетах по генетике.

Близнецы — дети, рожденные одновременно от одной матери.

В 98-99% случаев в течение одного менструального цикла созревает только одна яйцеклетка
— но остаются 1-2% случаев, когда из фолликула выходят две, реже — более яйцеклеток за
цикл. Каждая из них может быть оплодотворена, и в таком случае эти зародыши
имплантируются в разные участки стенки матки, каждый будет иметь собственные амнион,
хорион, плаценту — эти эмбрионы развиваются независимо, они похожи друг на друга не
более, чем два разновозрастных сиблинга. Такие близнецы могут родиться даже от разных
отцов, если в течение суток у женщины произошли несколько половых контактов с разными
мужчинами.

Процент рождений разнояйцовых близнецов варьируется в разных популяциях, в какой-то

степени он зависит от наследственных особенностей матери, расы (у монголоидной расы
реже, чем у европеоидной, а у той — реже, чем у негроидной), количества прошедших родов
(чем больше, тем вероятнее).

При ЭКО разнояйцовые близнецы рождаются чаще, чем при обычных родах, потому что
для увеличения вероятности возникновения беременности подсаживают до трех эмбрионов
единовременно.

Образование однояйцевых ( = монозиготных) близнецов — специфичный способ бесполого

размножения у человека. Однояйцовые близнецы всегда одного пола, генетически
идентичны. Частота их рождения — около 0,1%. Их развитие начинается с одной
яйцеклетки, оплодотворенной одним сперматозоидом. В силу различных причин единый
зародыш может распасться на два комплекса клеток, которые при благоприятных условиях
разовьются в полноценный эмбрион каждый. Реже комплексов клеток, а впоследствии — и
однояйцевых близнецов может быть от трех.

Процент рождения однояйцовых близнецов примерно одинаков в разных популяциях.

Науке неизвестно, почему в естественных условиях эмбрионы «разваливаются» на две

части, хотя этот процесс несложно произвести в лаборатории. Мы не знаем также, как
часто это происходит — предполагается, что частота выше, чем частота рождений, так
как часть таких клеточных комплексов, должно быть, гибнет незаметно для женщины и
идентифицируется как задержка.

Этапы, на которых может произойти разделение:

А.) Разделение произошло до формирования трофобласта (плюс-минус до восьмиклеточной

морулы, до 4-5 дней развития), вследствие чего развились две бластоцисты. У каждого
зародыша впоследствии образуются свои хорион и амниотическая полость, они
имплантированы в разных местах матки.

Около трети рожденных однояйцовых близнецов развивались так.

Б.) Разделение произошло после дифференцировки внутренней клеточной массы (ВКМ) и

трофобласта (от шестнадцатиклеточной морулы, 5-9 сутки развития), вследствие чего ВКМ
разделяется на две независимо развивающиеся части в одной бластоцисте. Впоследствии у
каждого зародыша разовьется свой амнион. Полость хориона у них будет общей.

Около двух третей рожденных однояйцовых близнецов развивались так.

В.) Разделение произошло после образования хориона и амниотической полости (после 9

дня; крайним сроком считаются 13-14 дни). У каждого зародыша свой пупочный канатик, но
общие амниотическая полость, полость хориона.

Только единичные случаи рождения однояйцовых близнецов приходятся на этот вариант.

Существование у человека однояйцовых близнецов является доказательством того, что для

нашего вида характерен регулятивный тип развития.

Сиамские близнецы — сращенные близнецы. Эмбриологически не вполне верно называть

их сращенными, так как на самом деле они «неразделенные». Сиамские близнецы
образуются, когда при разделении будущих однояйцовых близнецов по одному из указанных
выше трех вариантов оно протекает не полностью. Для второго случая — ВКМ сохраняют
связь, в том или ином виде, хотя разделение началось.

Комбинация «слияний» частей тела может быть очень разной.

15. ИМПЛАНТАЦИЯ У ЧЕЛОВЕКА.

(Лекции №№4, 5, 6, 7)

Из вопроса №12 вытянуто то, что нужно для ответа на этот вопрос.

Имплантация зародыша человека может произойти только на 6-7 день после

оплодотворения, хотя он достигнет стенки матки примерно к 5 дню. Для этого необходим
трофобласт, который развивается из тринадцати наружных клеток, образующихся на стадии
шестнадцатиклеточной морулы (первая дифференцировка, через которую проходит
зародыш).

В ответ на повышение уровня прогестерона начинается секреторная фаза матки: слой

эндометрия увеличивается, получает особенно богатое кровоснабжение, растет секреторная
активность маточных желез. Возникает окно имплантации — время, когда возможно
погружение зародыша в стенку матки; в остальное время эндометрий невосприимчив к
имплантации. Рецептивность — способность эндометрия принимать зародыш. Возникает за
счет того, что уменьшается число антиадгезивных молекул на поверхности матки, а вместо
них растет число адгезивных молекул. Считается, что этот процесс регулируют
преимущественно вещества, выделяемые бластоцистой.

Так как блестящая оболочка препятствует

прилипанию зародыша к стенкам яйцеводов, для
имплантации бластоциста должна выйти из нее —
вылупление. На бластоцисте образуется
выпячивание, в котором концентрируется
трипсиноподобная протеаза («расщепитель
белков»). Выпячивание контактирует с блестящий
оболочкой, растворяя ее, и зародыш выдавливается
из оболочки.

Трофобласт, особенно синцитиотрофобласт, секретирует другую трипсиноподобную

протеазу (активатор плазминогена), которая разрушает эпителий стенки матки и начинает
разрушать подлежащие ткани — у приматов это необходимо для имплантации.

Для приматов характерна погружная имплантация. За сутки зародыш погружается

наполовину, за двое суток — полностью, и эпителий стенки матки смыкается над ним.
Капилляры, которые контактируют с синцитиотрофобластом, разрушаются, и материнская
кровь омывает зародыш.

! Ни в один из периодов времени кровеносные системы матери и зародыша/плода не

смешиваются.
 У
некоторых копытных, например, у свиньи, тип имплантации другой, при котором зародыш
не изолируется от полости матки — как перчатка, надетая на руку, где пальцы —
зародыши, а перчатка — стенки матки.

Клетки трофобласта на своей поверхности содержат антигены, причем не только

материнские, но и отцовские — значит, для матери он является чужеродным организмом. С
началом имплантации запускается воспалительная реакция. Из-за этого зародыш может
отторгнуться (и периодически отторгается!).

У разных зародышей, зачатых одной и той же парой, вследствие перекомбинации генов в

мейозе могут быть разные комбинации антигенов, а значит, организм матери может
реагировать на них по-разному. Тем не менее предполагают, что именно
иммунологическими причинами обусловлены многие случаи «необъяснимого бесплодия».

Трансплантационный иммунитет — иммунитет, проявляющийся при трансплантации.

Такой же тип иммунитета развивается при имплантации зародыша. Эволюционно он мог
появиться как борьба со злокачественными опухолями, так как такие клетки
характеризуются появлением новых антигенов.

Хотя иммунный ответ на зародыш все-таки развивается, эволюция предложила несколько

вариантов борьбы с ним:

1. Трофобласт (а ведь только он контактирует с маткой!) обладает способностью к

иммунологической маскировке: антигены зародыша прикрываются другими молекулами.

2. Хорионический гонадотропин (ХГ) и прогестерон в определенной степени обладают

местными иммунодепрессивными свойствами.

Еще один пример иммунологических проблем — гемолитическая болезнь новорожденных (

= гемолитическая желтуха новорожденных), когда иммунитет матери разрушает
эритроциты зародыша/плода. Возникает, если мать резус-отрицательна, а ребенок —
резус-положителен. Хотя кровеносные системы матери и ребенка никогда не
смешиваются, в плаценте периодически возникают микротрещины, из-за которых
некоторые эритроциты ребенка попадают в материнскую часть плаценты. Иммунитет
матери распознает их присутствие как чужеродное, вырабатывает антитела, а уже они
могут свободно проникать в кровеносную систему ребенка. Во время беременности это не
несет для него особенной опасности, потому как питание происходит за счет матери, но и
после рождения антитела к его эритроцитам никуда не исчезают из кровеносной системы
новорожденного. И уже это — да, опасно. Поэтому, если мать резус-отрицательна, в
течение беременности непременно определяют титр антител, чтобы заметить
иммунологический конфликт и подготовиться к родам — например, направить женщину в
специализированную клинику. В таких клиниках обязательно есть большой запас донорской
крови, потому как в первый же день новорожденному требуется полное переливание. В 90%
первого переливания оказывается достаточно, чтобы ребенок продолжил развиваться
нормально.

16. ГЕНОТИПИЧЕСКОЕ И ФЕНОТИПИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОЛА У

ЧЕЛОВЕКА.

(Лекции №№7, 8).

Пол (sex, от лат. «разделяю») характеризуют первичные и вторичные половыми признаками.

Генетически пол определяет сперматозоид (половая клетка), а фенотипически —
соматические клетки индифферентных зачатков гонад.

Первичные половые признаки — анатомические и физиологические особенности,

связанные с формированием половых клеток и обеспечением их слияния в процессе
оплодотворения. У человека: половые железы, половые пути, наружные половые органы.

Вторичные половые признаки — анатомические и физиологические особенности,

играющие вспомогательную роль в продолжении рода. У человека: форма некоторых костей
(например, таза), молочные железы, характер жировых отложений, высота голоса,
распределение волос на теле. Формирование вторичных половых признаков зависит от
гормонов.

1. Пол определяется в момент оплодотворения и зависит от того, несет ли сперматозоид Y-

хромосому, в которой находится ген, переключающий развитие на мужской тип.

До восьмой недели ППК и гонады формируются одинаково и у мужчин, и у женщин. На

восьмой неделе гонада выйдет из этого
индифферентного состояния.
Способность зачатков гонад
дифференцироваться по одному из двух
путей — уникальное явление в
эмбриологии.

А. Гонады в индифферентном
состоянии. Имеются как мюллеров
(паранефрический), так и вольфов
(мезонефрический) протоки.
! Мюллеров проток необходим для образования женских половых органов, а вольфов —
мужских.

Б. При переключении на мужской тип развития зачаток гонады превратится в яички,

вольфовы протоки трансформируются в придатки яичка в краниальном отделе и в
семявыносящие протоки и семенные пузырьки — в каудальном. Формирующиеся семенники
начинают вырабатывать гормоны: антимюллеров гормон (АМГ) и дигидротестостерон
(ДГТ) Под действием АМГ клетки мюллерового протоки вступают в апоптоз.

В. При переключении на женский тип развития зачаток гонады превратится в яичники,

мюллеровы протоки трансформируются в маточные трубы в краниальном отделе, а два
слившихся в каудальном отделе мюллерова протока станут маткой и верхней частью
влагалища. Вольфовы протоки дегенерируют. Со временем яичник начинает продуцировать
эстрогены.

Балахонов об этом не говорил, но и мюллеров проток у мужчин, и вольфов проток у женщин

все-таки принимают участие в развитии половой системы. Так, например, у мужчин
мюллеров проток дает простатическую маточку.

Генный каскад определения пола:

1. Клетки пока индифферентных гонад начинают производить белок WT1 (Wilms tumor
suppressor), ген которого локализуется на одиннадцатой хромосоме.

WT1был открыт при исследовании опухоли Вильмса (опухоль Вильмса). Ген, с которого он
читается, кодирует как минимум четыре различных белка, из которых как минимум один
является транскрипционным фактором (разнообразие достигается за счет альтернативного
сплайсинга).

2.1. Если в клетке нет Y-хромосомы, WT1 активирует образование WNT4 (wingless
(прототип гена открыт у дрозофилы, мутация в нем подавляет развитие крыльев) + Int
(мутации в этом гене связаны с развитием раковых опухолей)). WNT4 запускает
продолжение генного каскада, дающее сигнал к образованию яичника.

2.2. Если в клетках есть Y-хромосома, WT1 запускает работу гена, кодирующего SRY (sex-
determining Region Y), он же TDF (testis determining factor). Этот ген, как можно понять,
расположен на Y-хромосоме.

3. SRY запускает синтез белка SOX-9 (SRY-box-related), ген которого локализуется на

семнадцатой хромосоме. SOX-9 создает самоподдерживающийся переключатель, так как он
активирует синтез самого себя. Это
необходимо, чтобы единожды принятое
решение о пути развития не было изменено
в процессе. Кроме того, появление этой
петли ингибирует прохождение каскада по
пути WNT4. Аналогичный переключатель,
но с другими генами, есть и в женском пути
развития.
Хотя это срабатывает не всегда, и иногда образуются дети с признаками обоих полов.

4. SOX-9 активирует сигнальный белок FGF (fibroblast growth factors) — он играет ключевую
роль в процессах роста и дифференциации и является белком, который и опосредует работу
самоподдерживающегося переключателя. SOX-9 также дает сигнал к образованию
семенника посредством огромного генного каскада.

Вывод: выбор пола — это «борьба за ручку переключателя», где Y-хромосома получает
преимущество. Если она не схватилась за то время, которое было отведено ей, развитие
пойдет по женскому типу.

! Чтобы показать, какие мы все умные, можно учитывать, что в профессиональной среде
название гена пишут маленькими буквами, а название его продукта — большими/с большой
буквы. Ген sry, белок — SRY.

Нарушения при формировании пола, как правило, несмертельны; главным их последствием

является бесплодие.

1. Разница между включением SRY и WNT4 (белок, обеспечивающий путь формирования

женского пола) всего несколько часов, и если SRY не успел вовремя включиться, то развитие
идет по женскому пути. Если SRY есть, но не работает вовсе, картина та же.

Итог: XY, женщина.

2. Транслокация («перемещение») SRY на X-хромосому с утерей остатка Y-хромосомы —

вместо 47 XXY (такие трисомики жизнеспособны и встречаются относительно часто)
получаем 46 XX, причем одна из хромосом несет с собой «переключатель» (SRY), а значит,
развитие пойдет по мужскому пути развития.

Итог: XX, мужчина.

3. «Истинный» гермафродитизм – наличие в организме и семенника, и яичника (у

млекопитающих и человека это всегда патология).

Связан с развитием мозаиков. Такие мозаики могут появляться, если исходная зигота —
трисомик: зигота 47 XXY → митозы → в одной из клеточных линий теряется:

а) X-хромосома — 46 XY → развитие по мужскому

б) Y-хромосома — 46 XX → развитие по женскому типу

Однако в других клетках сохраняется набор 47 XXY → получаем мозаиков (в разных клетках
разный генетический набор).

Важно знать, в какой клеточной линии произошло нарушение: а.) если потеря происходит в
тканях, из которых будут формироваться парные половые железы, с одной стороны окажется
яичник, а с другой – семенник; б.) если потеря происходит на поздних этапах формирования
половой железы, в пределах одной половой железы можно обнаружить как ткани яичника,
так и ткани семенников; в.) если потеря происходит только в соматических клетках вне
половых желез, гермафродитизм не возникает.

4. «Ложный» гермафродитизм — не связан с хромосомными нарушениями.

4.1. Мужской — больные имеют семенник, но наружные половые органы женские —

кариотип 46 XY; до наступления полового созревания, как правило, больной не замечает
нарушение.

Причины:

1) Гормональное нарушение: формируется семенник → происходит сбой → не

продуцируются нужные гормоны: АМГ и ДГТ → наружные органы развиваются по
умолчанию, т.е. по женскому пути.

2) Генетический сбой: семенник сформировался нормально и производит гормоны → из-

за генетического сбоя нет рецепторов, воспринимающих тестостерон → развитие половых
органов по умолчанию (синдром тестикулярной феминизации).

4.2. Женский — больные имеют яичник, но наружные половые органы мужские —

кариотип 46 XX; отклонения в строении наружных половых органов заметны еще при
рождении.

Причины:

1) Гормональный дисбаланс – возникает, как правило, в результате дефектов половой

железы с повышенным уровнем тестостерона. Также может быть непреднамеренно создан
искусственно: если онкобольную беременную женщину лечат мужскими половыми
гормонами, то наружные половые органы эмбриона идут по мужскому пути развития под
действием тестостерона.

5. Полное отсутствие гонад — отсутствуют вторичные половые признаки — кариотип 46

XX или 46 XY (так как нет половой железы, может быть все, что угодно) — внешний вид:
девочки-подростки. Аномалия выявляется при половом созревании.

В соматических клетках зрелой женщины можно найти тельце Барра (неработающая,

сильно спирализованная хромосома, фактический кариотип: 45 X0). Уход в тельце Барра
случайный (может уйти или нормальная хромосома, или мутантная), поэтому организм
продолжает нормально функционировать. Нормальных X-хромосом будет примерно 50%.

Тельце Барра образуется не сразу. Для того, чтобы сформировать гонаду нужны обе
нормальные работающие X-хромосомы.

17. ЭМБРИОНАЛЬНАЯ ИНДУКЦИЯ (ПРОГРЕССИВНАЯ ДЕТЕРМИНАЦИЯ).

(Лекции №№8, 9, 10.)

Это все — частности от содержания вопроса №7, поэтому советую идти читать его. Краткие
вырезки из самого важного:
Детерминация (лат. «определять») — определение судьбы клетки; она же скрытая
дифференцировка. Происходит на молекулярном уровне. В ее основе лежит
дифференциальная активность генов.

Эмбриональная индукция является ведущей силой регулятивного типа развития. Развитие

каждой клетки зависит от положения ядра в зародыше, а сам зародыш представляет собой
гармоничную эквипотенциальную систему; при этом проспективные возможности каждой
клетки шире, чем ее проспективная судьба.

Индукция — явление, при котором одна область зародыша, взаимодействуя с другой,

побуждает эту область развиваться определенным способом. Это явление невероятно часто в
эмбриологии.

Первичная эмбриональная индукция — процесс, при котором в ходе гаструляции

дорсальная мезодерма ( = хордомезодерма) индуцирует эктодерму в развитие нервной
структуры.

Образование нервной пластинки напрямую зависит от хордомезодермы, так как она

побуждает клетки развиться в нервную пластинку. Помимо этого, она также индуцирует
развитие специфических отделов нервной трубки, то есть проявляет региональную
специфичность ( = спецификацию). Эксперимент, показывающий это, проводится по
методике «сандвичей», разработанной Гольтфретером.

Вторичные эмбриональные индукции — все индукции, следующие после первичной в

эмбриональном развитии. Составляют каскады индукций, детерминация зависит от
взаимодействия групп клеток. Примеры: развитие глаза (глазной пузырь индуцирует
развитие хрусталика).

В каскадах индукций происходит прогрессивное ограничение потенций.

Компетентность — способность реагировать на определенные сигналы, поступающие от

других клеток. Изменяется в ходе развития. Так, например, если пересадить дорсальную губу
бластопора к эктодерме гаструлы, разовьется еще одна нервная трубка; если пересадить ее к
эктодерме нейрулы, новая нервная трубка не появится. Это значит, что эктодерма нейрулы
больше не компетентна к сигналам от хордомезодермы, зато она получит компетентность к
другим сигналам. Так, например, при развитии хрусталика эктодерма компетентна к
сигналам от глазного пузыря.

18. БЛИЖНИЕ ТКАНЕВЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ.

(Лекция № 13.)

Координация расположения тканей в органе достигается тем, что одна группа клеток
способна изменить какие-то характеристики другой группы клеток посредством индукций
(вторичных, в нашем случае). Такие взаимодействия на ближайших расстояниях называются
ближние тканевые взаимодействия. Они значительно облегчают развитие органов,
обеспечивая координацию в пространстве и во времени.

Так, например, закладка печени — это энтодермальная трубка, которая лежит у передней
кишки и проникает в окружающую мезенхиму. Мезенхима сигнальными молекулами
индуцирует энтодерму, вследствие чего клетки энтодермы образуют железистые клетки
печени.

Еще пример: зачаток мочеточечника окружается мезенхимой и врастает в нее, и

мезенхима индуцирует его ветвление для развития системы канальцев.

Сигнальные молекулы в ближних тканевых взаимодействиях имеют или паракринный

(«околовыделительный» — к соседним клеткам),
или юкстракринный («вблизивыделительный» —
на очень небольшие расстояния) характер. Так как
сигналы распространяются на небольшие
расстояния, каждая клетка множество раз встает на
развилках, «выбирая» путь развития: по мере роста
зародыша информация о развитии детализируется.
При этом организм «подкидывает» клетке все новые
и новые детали о том, во что она должна
развиваться. Это значит, что должна существовать
клеточная память: если клеткам «сказали», что они
будут рукой, они «запомнят» это. А потом
«запомнят» плюсом к этому, что они будут в
дистальной части руки. А потом, плюсом к этому, — что будут пальцами.

Эксперимент: конечности тритона способны к регенерации — одному тритону отрезаем

конечность на уровне запястья, другому — на уровне предплечья, третьему — на уровне
плеча. Берем еще трех тритонов, и всем им отрезаем конечность на уровне плеча.
Пересаживаем им бластему* от первых трех тритонов (см. схему). У всех тритонов-
акцепторов вырастет нормальная конечность (за счет собственной бластемы) и та часть
конечности, которая должна была бы отрасти у их доноров: запястье, предплечье или
конечность от плеча соответственно.

*Бластема — узкая область дедифференцированных клеток возле раны. Эксперимент

доказывает существование клеточной памяти, так как клетки из всех трех областей
(кисть, предплечье, плечо) не имеют дифференцировки, но все равно «помнят», где они
находились.

Типы ближних тканевых взаимодействий:

1. Разрешающие.

Ткань способна к какому-то изменению своих характеристик, но для этого ей необходимы

определенные условия: например, конкретный субстрат.

2. Инструктивные.
Ткань получает инструкции, какой набор генов требуется экспрессировать.

Примеры: эпителиально-мезенхимные взаимодействия в образовании перьев и когтей у

птиц; в образовании легкого (см. вопрос №34).

19. НЕЙРУЛЯЦИЯ И ОБРАЗОВАНИЕ ОСЕВОГО КОМПЛЕКСА ЗАЧАТКОВ.

(Лекции №№3, 7.)

Нейруляция — образование зачатков нервной системы; примерно вторая-четвертая недели

(головной и хвостовой концы замыкаются позже среднего отдела нервной трубки). Можно
подробнее рассмотреть на схеме для пищеварительной системы, ниже.

а.) На спинной стороне эктодерма начинает приподниматься, образуется нервная пластинка

(можно выделить уже на 16 сутки).

б.) Края нервной пластинки продолжают подниматься, формируются нервные валики

(можно выделить уже на 18 сутки). Между нервными валиками формируется нервный
желобок ( = нервная борозда).

в.) Нервные валики растут друг к другу, пока не смыкаются, образуя нервную трубку
(смыкание средней части можно наблюдать уже на 22 сутки, смыкание переднего и заднего
нейропоров — на 28 сутки), и та уходит под эктодерму.

Нейропор — незамкнувшаяся часть будущей нервной трубки.

Не все клетки нервной пластинки входят в состав нервной трубки; часть их формирует
нервный гребень. Его условно называют четвертым зародышевым листком. Клетки нервного
гребня обладают высокой способностью к миграции и дают начало многим клеточным
типам: меланоцитам кожи; одонтобластам (клетки, синтезирующие дентин зуба);
хромаффинным клеткам надпочечников (синтезируют катехоламины); нейронам и
глиальным элементам; большому количеству скелетных и мышечных элементов
висцерального черепа. У нейрулы появляется также вторичная полость тела (имеет
мезодермальную выстилку) — целом. У человека мы можем видеть ее в плевральной,
перикардиальной и перитонеальной полостях.

Если
к
определенному сроку передний нейропор так и не смыкается, развитие головного мозга не
идет, возникает анэнцефалия («отсутствие мозга»). Не такая уж и редкая аномалия,
легко обнаруживается на ранних сроках. Если не замыкается задний нейропор, возникает
spina bifida («расщепление спинного мозга»). Если не замкнулся небольшой участок, ребенок
выживет.

Оффтопом: нечто похожее происходит при образовании заячьей губы и волчьей пасти.
Для верхней губы существуют три закладки, которые должны слиться. Аналогично твердое
небо образуется из двух закладок. Так что эмбриологически правильнее говорить, что
произошло несмыкание, а не расщепление.

Сначала на переднем конце образуются три мозговых пузыря (четвертая неделя): передний,
средний и задний. Впоследствии появляются изгибы. Передний и задний мозговые пузыри
каждый дадут еще по два отдела, средний — только один.

На третьем месяце у зародыша виден

хвост.

Образование пищеварительной
системы:

1. В ходе формирования кишечник,

образуемый энтодермой, сообщается с
желточным мешком. В этот момент он
замкнут и со стороны будущего
ротового, и со стороны будущего
анального отверстий.

(А — 16 сутки; Б — 18 сутки.)

2. В ротовой части образуется впадина,

имеющая эктодермальную выстилку —
стомадеум. Он не сообщается с
кишечником.

(В — 22 сутки.)

3. В хвостовой части образуется

аналогичная впадина с эктодермальной
выстилкой — проктодеум. Он также не
сообщается с кишечником.

С течением времени в кишечнике

прорываются два отверстия: в
стомадеум и в проктодеум, вследствие
чего кишечник становится сквозным.

(Г — 28 сутки.)
Вывод: то, что выстилки передней и задней части пищеварительного тракта образованы
экто-, а не энтодермой, опосредовано наличием прокто- и стомодеумов.

Если одна или обе перегородки на

этой стадии не разрушатся, ребенок
родится с замкнутой (с одной или
двух сторон) пищеварительной
системой. Эту патологию можно
обнаружить с помощью методов
пренатальной диагностики. Тогда на
роды приглашают хирурга, который
на месте восстанавливает сквозное
состояние пищеварительной
системы. Это менее срочно, если не
прорвалась перегородка между
кишечником и проктодеумом. Если
же перегородка сохранилась между
кишечником и стомодеумом, требуется срочное вмешательство: трахея открывается в
глотку, а глотка не будет сообщаться со стомодеумом — при неоказании помощи ребенок
может задохнуться.

20. ПЕРВИЧНАЯ ЭМБРИОНАЛЬНАЯ ИНДУКЦИЯ И ЕЕ РЕГИОНАЛЬНАЯ

СПЕЦИФИЧНОСТЬ.

(Лекции №№9, 10.)

Угадаете, к какому вопросу я снова вас отправлю? Ага, №7, родненький. Здесь только самые
нужные вырезки.

Первичная эмбриональная индукция — процесс, при котором в ходе гаструляции

дорсальная мезодерма ( = хордомезодерма) индуцирует эктодерму в развитие нервной
структуры.

Образование нервной пластинки напрямую зависит от хордомезодермы, так как она

побуждает клетки развиться в нервную пластинку. Помимо этого, она также индуцирует
развитие специфических отделов нервной трубки, то есть проявляет региональную
специфичность ( = спецификацию). Эксперимент, показывающий это, проводится по
методике «сандвичей», разработанной Гольтфретером.

1. У ранней гаструлы вырезают кусочек недифференцированной эктодермы и дорсальной

губы бластопора. Дорсальную губу на манер сэндвича вкладывают в эктодерму, и из нее
развиваются структуры переднего головного мозга.

2. Делают все то же самое, но дорсальную губу бластопора вырезают уже из поздней

гаструлы. Тогда из итогового сэндвича появятся структуры спинного мозга.
Но как возможна эта региональная специфичность? Дело в том, что хордомезодерма
выделяет два типа веществ. Более высокая концентрация первого опосредует развитие
передних отделов, более высокая концентрация второго — задних; равная их концентрация
— развитие средних отделов.

Следующий вопрос — а что это за вещества являются нейроиндукторами?

Эксперимент: удаляем из ранней бластулы хордомезодерму и подсаживаем вместо нее

кусочек печени взрослого тритона. Внезапно, нервная трубка начинает развиваться. То же
произойдет, если подсадить мертвые клетки печени (феномен мертвых организаторов). То
же произойдет, если поместить на место удаленной хордомезодермы кристаллики
метиленового синего.

Оказалось, что нейрализующие факторы содержатся в самой эктодерме, но нужно стороннее

воздействие, чтобы их высвободить.

Согласно современным представлением, та индукция, которую Шпеман назвал первичной,

на самом деле не является первой.

! Считается, что экто- и энтодерма дифференцируются автономно, а вот для развития

мезодермы нужна индукция.

Эксперимент, показывающий это: ранняя бластула (примерно на стадии 128 клеток)

помещается в среду, в которой отсутствуют кальций и магний, из-за чего зародыш
распадается на отдельные клетки. Мы знаем, какие из этих отдельных клеток должны были
бы стать экто-, мезо- и энтодермой, и знаем также, какие молекулы (мРНК для белков
определенных элементов цитоскелета) производят только клетки
эктодермы/мезодермы/энтодермы.

После разделения, проследив, чтобы клетки не соединились снова, магний и кальций в среду
возвращают, чтобы был возможен синтез мРНК.

Оказалось, что клетки, которым было суждено стать экто- и энтодермой, производили
специфические для своего зародышевого листка мРНК. Те же, которые должны были стать
мезодермой, специфичных мРНК не давали, пока их не сближали хотя бы с одной другой
мезодермальной клеткой.

Вывод: экто- и энтодерма «знают» о своей судьбе сами по себе. Мезодерма «узнает» о ней
благодаря индукции.

21. ДИФФЕРЕНЦИРОВКА МЕЗОДЕРМЫ, ЭКТОДЕРМЫ И ЭНТОДЕРМЫ У

ПОЗВОНОЧНЫХ ЖИВОТНЫХ.

Зародышевые листки образуются в процессе гаструляции (виды гаструляции см. в вопросе

№10). После образования зародышевых листков начинается органогенез.
У позвоночных эктодерму подразделяют на внешнюю эктодерму, нервный гребень и
нервную трубку. В целом, из эктодермы формируются нервная система, потовые железы,
покровы отделов, развивающихся из стомодеума и проктодеума (простым языком: переднего
и заднего отделов пищеварительной системы; подробнее — в вопросе №19); эпидермис, его
производные (волосы, ногти, рога, копыта), сальные и молочные железы, аденогипофиз,
нервный гребень, хрусталик, роговица. Клетки нервного гребня обладают высокой
способностью к миграции и дают начало многим клеточным типам: меланоцитам кожи;
одонтобластам (клетки, синтезирующие дентин зуба); хромаффинным клеткам
надпочечников (синтезируют катехоламины); нейронам и глиальным элементам; большому
количеству скелетных и мышечных элементов висцерального черепа.

На стадии ранней гаструлы эктодерма компетентна к стимулам, получаемым от

хордомезодермы. На стадии нейрулы эта восприимчивость исчезает, но появляется
восприимчивость к другим стимулам: эктодерма получает компетенцию реагировать на
стимулы от глазного пузыря (превращение эктодермы: хрусталиковая плакода →
хрусталиковый пузырь → хрусталик). Хрусталик в дальнейшем индуцирует образование
роговицы в лежащем над ним эктодермальном эпителии.

Из энтодермы формируются эпителиальная выстилка кишечной трубки, кроме стомодеума и

проктодеума (т.е. кроме переднего и заднего отделов пищеварительной системы),
пищеварительные железы (печень, секретирующие клетки поджелудочной, кишечных и
желудочных желез), эпителий легких, трахеи и бронхов; участвует в формировании
щитовидной и паращитовидных желез, мочевого пузыря, среднего уха, евстахиевой трубы.

Из мезодермы формируются сердечнососудистая система, выделительная, мышцы, кровь,

кости, хрящи, половые железы. В мезодерме формируется вторичная полость тела, или
целом. Во взрослом организме ему соответствуют плевральная, перикардиальная,
перитонеальная полости.

Согласно современным представления, экто- и энтодерма способны дифференцироваться

автономно, а вот для мезодермы нужна индукция (см. «первичная эмбриональная индукция,
вопрос №7). Нейрализующие факторы при этом находятся внутри самой эктодермы, но ей
нужен стимул извне (который и дает мезодерма), чтобы они высвободились и стали активны.

В ходе эмбриогенеза мезодермой в своей сути являются хордомезодерма и дорсальная губа

бластопора. Хотя сейчас ясно, что не сама дорсальная губа выделяет какие-то вещества,
индуцирующие развитие нервной системой, все равно говорят, что она индуцирует развитие
нервной трубки из эктодермы, — это явление называется первичная индукция. Материал
хордомезодермы регулирует также образование определенных отделов нервной трубки в
определенном месте — то есть обладает региональной специфичностью ( = спецификацией).

22. ДЕТЕРМИНАЦИЯ ПОСРЕДСТВОМ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ

СПЕЦИФИКАЦИИ.

Дубль вопроса №5.

23. Талидомидная трагедия и ее значение для экспериментальной эмбриологии.

(Лекции №№1, 2, материалы из архива.)

Павел Георгиевич Светлов за несколько лет до Талидомидной трагедии уже говорил, что
эмбрионы более чувствительны к опасным воздействиям, чем взрослые, и предлагал
клинической медицине смотреть на результаты биологических экспериментов. В
оправдание медиков: обычно эксперименты проводили на беспозвоночных, эмбриология
млекопитающих была в зачаточном состоянии.

Талидомидная трагедия во многом стала решающим толчком для развития эксперимента как
метода в эмбриологии. До Талидомидной трагедии экспериментальная эмбриология и
медицинская тератология (наука об уродствах) существовали отдельно.

Талидомид поступил в продажу в 1957 году в Германии в

качестве успокоительного. Его рекламировали как
успокоительное, и талидомид начали назначать
беременным, он распространился в десятки стран по всему
миру (хотя, кстати, в СССР его не использовали). При этом
даже у взрослых, которые принимали его от трех месяцев,
появлялись признаки периферического неврита: судороги,
покалывания, онемение конечностей. Побочные эффекты
исчезали при прекращении приема.

В 1961 в газетах начали появляться сообщения о связи приема талидомида на ранних сроках
беременности с рождением детей с различными уродствами конечностей: фокомелия (греч.
phōkē – тюлень + греч. melos – конечность; значительная редукция конечностей), амелия
(отсутствие конечностей); также с аномалиями ЖКТ, ССС, органов чувств, почек, при этом
чаще всего дети оставались жизнеспособны. В одной только Германии родилось не менее
шести тысяч таких младенцев.

На этом моменте можно насыпать трагичности, рассказать, как тяжело воспитывать

ребенка с таким уродством, как многие пострадали.

Как оказалось, талидомид ингибировал рост сосудов. Причина в том, что до 60-х годов ни
одно из лекарств не проверялось на тератогенную активность ( = способность вызывать
уродства): эксперименты на беременных самках не проводили.

Критический период — период, в который отдельные части зародыша особенно уязвимы к

внешним воздействиям. Связан со временем развития различных органов: тератогенные
факторы с высокой вероятностью нарушают дифференциальную активность генов.
В первые две недели зародыш, как правило, не подвержен тератогенному влиянию, так как в
большинстве случаев такие воздействия оказываются для него летальны.

Примерно до 7-8 недели происходят основные органогенезы (из-за этого после девятой
недели зародыш называют не зародышем, а плодом).

Критические периоды: 6,5 недель — наружные половые органы; 3,5 недели — органы слуха.

После 8 недели возникают в основном малые структурные аномалии. Наиболее

чувствительна к тератогенным воздействия нервная система.

24. ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЕ СРОДСТВО КЛЕТОК В РАЗВИТИИ.

(Лекция №11.)

Возможные способы индукции (влияние одной клетки на другую) — два механизма:

1. Секреция веществ, способных к диффузии и координирующие морфогенетическую

активность — гормоны, факторы роста.

Эти вещества могут распространяться по всему организму.

2. Контакт соседних клеточных поверхностей.

В процессе онтогенеза клетки перемещаются и

вступают во взаимодействие с соседними
клетками — избирательное взаимодействие.
Благодаря ему клетки разных типов
располагаются упорядоченно, формируя ткани
и органы. Достигается это через избирательное
узнавание (клетка должна стремиться к одним
клеткам и «уходить» от других). Оно имеет высокое значение в передаче позиционной
информации. При этом в процессе развития избирательное сродство изменяется.

Избирательное взаимодействие показывает эксперимент: взяли два зародыша амфибий: у

одного, пигментированного, вырезали пласт презумптивных эпидермальных клеток, а у
другого, непигментированного, — пласт клеток нервной пластинки. Эти пласты
диссоциировали на отдельные клетки в среде без кальция и магния, а после клетки смешали
в нормальной среде, что позволило клеткам снова слипаться. Клетки образовали шарик, где
внутри находились клетки нервной пластинки, а снаружи — презумптивные эпидермальные
клетки. То есть произошла пространственная сегрегация. После серии таких
экспериментов оказалось, что эта пространственная сегрегация отражает расположение
клеток в зародыше.

Другой эксперимент: Боко инъецировал в полость бластулы клетки из различных

зародышевых листков и наблюдал, куда они будут мигрировать. Результат таков, что
клетки мигрируют туда, где они должны быть.

Другой эксперимент: если взять кусочек кожи взрослой мыши и разрушить его на клетки,
при слиянии дерма расположится под эпидермисом. Если позволить этой структуре
делиться, через несколько дней произойдет реконструкция ткани.

При этом известные механизмы миграции клеток

(хемотаксис, гаптотаксис, гальванотаксис, контактное
взаимодействие) не объясняют пространственную
сегрегацию. Зато ее объясняет термодинамическая
модель клеточных взаимодействий ( = гипотеза
дифференциальной адгезии). Клетки
взаимодействуют так, чтобы в итоге возникла
структура с наименьшей свободной энергией
поверхности (то есть с наименьшим поверхностным
натяжением) — а следовательно, наиболее стабильная.
Возникают три возможных варианта распределения:

а.) Клетки обладают разной силой клеточной адгезии. Тогда на поверхность конгломерата
выходят клетки с наименьшей силой клеточной адгезии. Сила клеточной адгезии зависит от
количества и видов молекул клеточной адгезии (МКА).
б.) Клетки обладают примерно равной силой клеточной адгезии. Тогда клетки
распределяются более-менее случайно.

в.) Клетки имеют одинаково высокую способность к клеточной адгезии. Тогда клетки
разделяются в конгломераты по типам.

Вывод: для сортировки достаточно, чтобы клетки имели разную силу адгезии.

Эта модель позволяет предполагать следующее: ранний зародыш находится в неизменном

состоянии, пока изменение в дифференциальной активности генов не изменит силы
клеточной адгезии так, что нынешнее состояние больше не будет самым выгодным. В таком
случае клетки будут перемещаться таким образом, чтобы зародыш пришел к наиболее
термодинамически выгодному на данный момент состоянию. Это интересно также в
изучении метастазирования раковых клеток.

Клеточная поверхность включает надмембранный комплекс, плазматическую мембрану и

молекулы, расположенные непосредственно под плазмалеммой. Положение надмембранных
белков, обеспечивающих взаимодействие со внешней средой (транспортные, рецепторные,
МКА) контролируется элементами цитоскелета.

Экспрессия молекул адгезии опосредует связь между одномерным генетическим кодом

и трехмерным организмом.

Клетки разных типов имеют разный набор МКА. Те МКА, появление которых на
поверхности клеток опосредует их принадлежность к определенному клеточному типу,
называются антигены клеточной дифференцировки («антигенами» их называют из-за
наиболее частотного способа обнаружения). Эти молекулы имеют определяющую роль в
эмбриогенезе.

Пример нарушения распределения таких антигенов: паранеопластический синдром (ПНС,

«окулоопухолевый синдром») развивается вместе со злокачественным новообразованием, но
не из-за него. Например, при мелкоклеточной карциноме легкого у некоторых больных
происходят нарушения в сетчатке вплоть до слепоты. Оказывается, что клетки
мелкоклеточной карциномы легкого содержат частично те же антигены, что и клетки
сетчатки. При этом из-за наличия гематоэнцефалического барьера (ГЭБ) иммунная
система не имеет возможности «познакомиться» с антигенами, отделенными ГЭБ. Среди
этих «незнакомых» клеток находятся и клетки сетчатки. Иммунная система впервые
сталкивается с ним и образует огромное количество антител — и, в отличие от самих
иммунных клеток, антитела проходят через ГЭБ и достигают сетчатки, разрушая ее.

*Кстати, среди «незнакомых» клеток находятся также сперматозоиды — в связи с

наличием гематотестикулярного барьера. Поэтому возможно развитие аутоиммунной
формы мужского бесплодия.

Элементы клеточной поверхности:

1. Молекулы адгезионных взаимодействий клетка-клетка (например, объединяют клетки в

эпителиальный слой):
1.1. Кадгезины — отвечают за пространственную организацию клеток для формирования
тканей и органов.

Их свойства зависят от ионов кальция. Поэтому ткань, перемещенная в среду без кальция (и
магния) диссоциирует на отдельные клетки.

1.2. Иммуноглобулиновое сверхсемейство МКА — играют значительную роль в

эмбриогенезе и регенерации.

1.3. Сахаридные МКА — узнают углеводные остатки на соседних клетках.

2. Молекулы адгезионных взаимодействий клетка-субстрат (глюкозамингликаны).

3. Молекулы клеточных контактов — обеспечивают пути для сообщения цитоплазмы

соседних клеток.

25. СТРОЕНИЕ И ФУНКЦИИ ЖЕНСКИХ ПОЛОВЫХ КЛЕТОК, ОСНОВНЫЕ

СТАДИИ ИХ РАЗВИТИЯ.

(Лекции №№2, 3, 4.)

Основные отличия женских половых клеток от

мужских: а.) неподвижность (хотя, если говорить
о наиболее примитивных организмах, это не
всегда верно), б.) наличие большого количества
питательных веществ (хотя у плацентарных
питательных веществ почти нет, так как зародыш
питается за счет плаценты), в.) большой размер (у человека она видна невооруженным
глазом) и г.) наличие множества оболочек.

Оплодотворенное яйцо содержит 120-140 клеток, так как дробление у птиц начинается
еще в яйцеводах матери.

Первые этапы развития у мужских и женских половых клеток одинаковы. Диплоидные

первичные половые клетки начинают обособляться на 14-16 дни после оплодотворения в
аллантоисе (первичный мочевой пузырь, более развит у птиц и рептилий, слабо — у
плацентарных) за две недели до появления половой железы. Таким образом, первичные
половые клетки имеют внезародышевое и внегонадное происхождение.
Первичные половые клетки делятся митотически и на четвертую неделю мигрируют по
кишке, а после — в дорсальном направлении по дорсальному мезентерию в сторону будущей
гонады — к половым валикам. Они
формируются в промежуточной
мезодерме. До начала шестой недели
гонады находятся в индифферентной
стадии ( = нельзя отличить мужскую от
женской, она обладает обоими
признаками). После того, как гонады
дифференцируются в семенник или
яичник, проявляются отличия в мужском и
женском гаметогенезе.

Если половые клетки «заблудятся», они

могут погибнуть или начать развиваться
с образованием тератомы.

Клетки, мигрировавшие в гонаду,

называются гониями. В этом случае —
оогонии.

Балахонов давал другие сроки для фаз размножения и роста, но один чудесный человек
провел ревизию книг, в том числе и книг Балахонова, и получается, что вероятнее всего он
оговорился. Тем не менее будьте осторожны.

1. Фаза размножения

На 6-7 месяцах развития оогонии проходят через серию митозов, в результате которой
формируются новые оогонии, количество которых достигает примерно семи миллионов.

Гибель половых клеток начинается уже здесь: часть оогониев гибнет, а часть
подготавливается к мейозу и вступает в него, превращаясь в ооцит I порядка.

2. Фаза роста

После седьмого месяца развития все ооциты I порядка растут, проходят через удвоение ДНК
и в это же время разом вступают в мейоз, после чего он «замораживается» на диакинезе
профазы I. Это первый блок мейоза, который впоследствии может быть снят гормонами
гипофиза (ЛГ). Ооцит переходит в стадию покоя — диктиотену. Считается, что протекание
мейоза ингибируют фолликулярные клетки яичников; стволовых клеток в яичниках, в
отличие от семенников, нет.

В диктиотене происходит массовая запрограммированная гибель ооцитов I порядка, в связи с

чем у новорожденных их количество уменьшается до одного-двух миллионов, а к семи годам
— до трехсот тысяч; к началу полового созревания — несколько десятков тысяч. При этом
на всю жизнь женщине «достаточно» шестьсот яйцеклеток.

3. Фаза созревания
С началом полового созревания ооциты получают возможность преодолеть первый блок
мейоза. Ооцит I порядка, прошедший первый блок мейоза (овулировавшая яйцеклетка),
станет ооцитом II порядка, имеющим при себе первое направительное тельце.

Про прохождение второго блока можно прочесть ниже и в вопросе про оплодотворение.
Яйцеклетка в своей цитоплазме содержит морфогенетические детерминанты (см. вопрос
№7). Потому можно сказать, что одной из функций яйцеклетки является вклад в мозаичный
тип регуляции развития.

Ооциты — самые старые клетки женского организма. Со старением яйцеклеток связано

повышение вероятности возникновения различных хромосомных синдромов, связанных с
возрастом женщины (в основном применимо к первым родам). Так, например, в среднем
вероятность рождения ребенка с синдромом Дауна = 1:700, причем в 30-34 года это 1:600
(как учили в генетике), а после 45 — 1:31.

Овуляция — выход зрелой яйцеклетки из фолликула в брюшную полость. Овулировавшая

яйцеклетка останавливается на втором блоке мейоза — метафаза II. Этот блок может снять
только оплодотворение. Яйцеклетка может быть оплодотворена только в течение суток после
овуляции — отсюда исходит календарный метод предохранения. Для предотвращения
погрешностей «опасными» считают 11-17 дни.

Из брюшной полости ооцит II порядка захватывается ворсинками маточной трубы и

начинает движение по яйцеводу. В этот момент яйцеклетка окружена остаточными
фолликулярными клетками ( = лучистый венец) и блестящей оболочкой, непосредственно
под мембранной содержится большое количество кортикальных гранул много, которые
содержат пептиды и мукополисахариды. В верхней трети яйцевода может произойти
оплодотворение, после чего с прохождением второго блока ооцит II порядка завершит мейоз.
Блестящая оболочка сохранится, но она потеряет прежнюю тесную связь с плазмалеммой из-
за медленного блока полиспермии, а в перивителлиновом пространстве появится
гиалуроновый слой (подробнее см. в вопросе №4).

Движение по яйцеводу занимает 4-5 дней, а яйцеклетка может быть оплодотворена только в
течение дня, чем и обусловлено конкретное место возможного оплодотворения (верхняя
треть маточных труб). Из этого истекает и возможность внематочной беременности. Поэтому
сужение маточной трубы опаснее, чем полное ее закрытие: это оставляет возможность
прохождения сперматозоидов и оплодотворения, что делает вероятной трубную
беременность.

Фолликул (лат. «мешочек») — яйцеклетка, окруженная фолликулярными клетками.

Менструальный, или месячный, цикл — сложный процесс, направленный на подготовку

женского организма к беременности. Включает в себя три интегрированных цикла:

1. Овариальный цикл — связан с созреванием и выделением ооцита.

2. Цервикальный цикл — создает условия, позволяющие спермию провести

оплодотворение только в определенный момент времени; происходит среди прочего
снижение кислой реакции в верхней трети влагалища (а в кислой среде, как известно,
сперматозоиды неподвижны).

3. Маточный цикл — обеспечивает условия для имплантации зародыша.

Интеграцию этих трех циклов обеспечивают гормоны гипоталамо-гипофизарной системы и

яичников. Гипоталамусом синтезируется гормон гонадолиберин; он стимулирует гипофиз к
синтезу двух гормонов: ФСГ (фолликулостимулирующий) и ЛГ (лютеинизирующий, от
«желтый», однокоренное — лютик).

*ЛГ регулирует образование желтого тела на месте деградирующего фолликула.

Менструальный цикл (в среднем 28 дней):

1. В начале месяца в яичнике имеются не более десяти фолликулов разной степени зрелости,
потенциально способных к овуляции. Их развитие индуцируется повышением уровня ФСГ
перед началом нового цикла. Выбор ооцитов для очередного цикла, как сейчас кажется,
случаен. В среднем созревает окончательно только один ооцит, остальные дегенерируют в
первые дни цикла.

В первые дни цикла крайне медленно растет концентрация ЛГ, что опосредует прохождение
первого блока мейоза.

2. После «толчка» в развитии фолликулов концентрация ФСГ начинает постепенно

уменьшаться.
3. Фолликул, он же граафов пузырек, созревает: увеличивается количество фолликулярных
клеток и увеличивается полость в фолликуле. С созреванием фолликулярные клетки
начинают выделять собственные стероидные гормоны — эстрогены. Они оказывают
системное влияние на организм: истончившийся к концу прошлого цикла эндометрий
восстанавливается и разрастается,
увеличивается количество
слизистого секрета, в верхней
трети влагалища немного
снижается кислая реакция и
прочее.

! Яйцеклетка в одном фолликуле

только одна.

4. За сутки до овуляции количество

эстрогена начинает стремительно
увеличиваться, что стимулирует
образование ЛГ. Под действием ЛГ
на 14 день происходит овуляция.

*В момент овуляции для млекопитающих характерно особое поведение, привлекающее

самца, — течка, или эструс. По-видимому, эструса нет только у человека.
Предменструальное нервное напряжение не связано с овуляцией.

5. После выхода яйцеклетки остатки фолликула превращаются в желтое тело,

секретирующее эстрогены (т.е. оно берет на себя функции исчезнувшего фолликула) и,
главное, прогестерон (лат. «для беременности», гормон беременности). Дальнейшая судьба
желтого тела зависит от наступления или ненаступления беременности.

5.1. Если оплодотворение не произошло, через 2-3 дня желтое тело постепенно исчезает,
уменьшается секреция эстрогенов и прогестерона. В ответ на это гипоталамус вновь
выбрасывает гонадолиберин, на что гипофиз реагирует выделением ФСГ. Начинается
созревание новой десятки фолликулов, отслаивается эндометрий, цикл замыкается.

5.2. Если оплодотворение произошло, на 1-2 день зародыш выделяет ХГ (хорионический

гонадотропин), который останавливают регресс желтого тела (до 6-7 недели). Благодаря
этому желтое тело продолжает секретировать эстроген и прогестерон, и утолщение
эндометрия продолжается. Имплантация зародыша произойдет только через неделю после
оплодотворения.

На 6-7 неделе начинается постепенный регресс желтого тела, синтез прогестерона возьмет на
себя плацента.

Акушерский срок беременности: 10 месяцев, или 40 недель; Акушеры используют лунные

месяцы (28,5 дней). Считают от первого дня цикла, так как его мы можем определить
однозначно. Это удобно, чтобы выписать декрет.
Эмбриологический срок беременности: 9 месяцев, или 38 недель. Считают от
оплодотворения.

Итак, список временных эндокринных структур менструального цикла: фолликул, желтое

тело.

Мейоз в оогенезе неравномерен, ассиметричен: образуется только одна яйцеклетка и три

направительных тельца. Это связывают с тем, что: а.) верно для большинства животных,
хотя для плацентарных — в меньшей степени: за небольшое количество времени требуется
запасти много питательных веществ, что проще, если нужно «взрастить» одну яйцеклетку, а
не четыре и б.) особое распределение морфогенетических детерминант (вещества,
определяющие дальнейший эмбриогенез) в цитоплазмы оогониев — при симметричном
мейозе их пришлось бы перераспределять заново, а так сохраняется то же соотношение,
пусть и только в одной клеточной линии.

Фазы формирования у женских половых клеток нет.

Чтобы дойти с яйцеклеткой до снятия второго блока мейоза, пройдите к вопросу №4.

26. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ, ЛЕЖАЩИЕ В ОСНОВЕ РАЗВИТИЯ

ЗАРОДЫША (МИГРАЦИЯ, РОСТ, ДИФФЕРЕНЦИРОВКА).

Это солянка немного из разных кусков материала. В целом, сюда помещена часть
информации из вопросов №№7, 36. Если что-то непонятно, подробнее можно почитать там.

1. Обычно клеточный рост сопровождается преимущественным увеличением объема

цитоплазмы, тогда как величина ядра изменяется в меньшей степени. Главной
характеристикой клетки в процессе ее роста является ядерно-цитоплазматическое
соотношение — соотношения между объемом ядра и цитоплазмы; они свои для разных
типов клеток.

2. Дифференцировка (лат. «различие») — возникновение различий у изначально

однородных клеток; ряд последовательных изменений, которые клетка претерпевает в
процессе специализации. Как правило, необратима.

Дифференцировка во взрослом организме: регенерация, в том числе физиологическая;

клетки красного костного мозга; половые клетки.

Молекулярная основа дифференцировки — строгое включение или выключение

определенных генов. Дифференцировка проявляется морфологически, дифференцированные
клетки разных типов можно отличить друг от друга, но этим изменениям предшествует
детерминация — такие молекулярные изменения, которые задают дальнейшую судьбу
клетки, но не проявляются внешне.

Дедифференцировка — утеря клеткой признаков, полученных в результате

дифференцировки. Может происходить при злокачественном перерождении, регенерации.
После этого часто происходит повторная дифференцировка, как правило, в тот же тип
клеток.

Метаплазия (греч. «превращаю») — повторная дифференцировка в другой клеточный тип

после дедифференцировки. Классический пример: вольфовская регенерация хрусталика.

Детерминация (лат. «определять») — определение судьбы клетки; она же скрытая

дифференцировка. Происходит на молекулярном уровне. В ее основе лежит
дифференциальная активность генов (включение определенного набора гена в соответствии
с дальнейшей судьбой клетки).

Коммитирование (англ. «фиксировать») — ограничение путей развития клетки;

возникновение такого состояния, при котором клетка может дальше развиваться только в
одном направлении; происходит ступенчато.

3. Миграция — целенаправленный процесс перемещения клеток в организме.

Возможные способы миграции:

3.1. Хемотаксис («расположение по порядку в зависимости от химических веществ») —

движение клеток по градиенту концентраций какого-то химического вещества,
содержащегося в растворе.

Примеры: а.) движение иммунных клеток в кровеносных сосудах по направлению к очагу

воспаления; б.) эмбриональный тимус привлекает к себе определенные клетки из красного
костного мозга с помощью короткого пептида; в.) миграция первичных половых клеток к
половому валику зародыша (ка-а-апельку подробнее см. в вопросах №1 или №25, там про
ППК написано одно и то же).

Еще пример: прорастание кровеносных сосудов в формирующиеся органы. Большие сосуды

имеют фиксированное положение у разных индивидуумов, а расположение капилляров
сильно отличается, так как оно развивается в зависимости от потребностей в кислороде
различных тканей. Если клеткам не хватает кислорода, они подают капилляру химический
сигнал, и сосуд начинает расти к «сигналу о помощи». Это экономичный с точки зрения
хранения информации способ (не нужно шифровать в геноме точное расположение,
достаточно понять, где капилляр нужен, и расти туда), но он же создает опасность,
потому как кровоснабжение требуют опухолевые клетки. И они его получают, потому как
у капилляров нет точной карты. Поэтому, например, Талидомид (см. вопрос №23) может
быть использован при лечении опухолей — он не дает сосудам прорастать к раковым
клеткам и питать их.

3.2. Гаптотаксис (от греч. «прикрепляюсь») — перемещение по твердой поверхности по

градиенту концентраций веществ, прикрепленных к этой поверхности, через взаимодействие
с внеклеточным матриксом.

Контроль осуществляется при участии молекул клеточной адгезии (МКА) и хемокинов.

При этом между молекулами на плазмалемме мигрирующей клетки и комплементарными им
молекулами субстрата образуются временные связи. Особая роль принадлежит белкам
фибронектину и ламинину — они маркируют «дорожку» для движения.

Формирование такой «дорожки» — довольно сложная штука. Адгезионных молекул должно

быть столько, чтобы клетки не «отклеились», но и не «приклеились» намертво, чтобы они
продолжали движение.

Пример: пронефрос (зачаток почки у амфибий) закладывается у головного конца, но в

процессе развития ползет по мезодерме до клоаки. Доказательство, что это гаптотаксис,
а не хемотаксис: при удалении клоаки движение не остановится и не изменится, как и при
изменении расположения клоаки. Значит, здесь мы имеем дело с «проложенной дорожкой»,
а не с диффузно распространяющимися сигнальными веществами, как это было бы при
хемотаксисе.

Еще пример: миграция клеток нервного гребня (подробно о том, что такое нервный гребень
и зачем оно нам надо, см. вопрос №19). Клетки нервного гребня мало дифференцированы, но
когда они доберутся до своего места, у них начнется дифференцировка; клетки нервного
гребня мигрируют очень широко.

3.3. Гальванотаксис — миграция по полярным градиентам, источником которых являются

заряженные ионы (то есть миграция по направлению изменения электрического заряда).

С помощью гальванотаксиса мигрируют преимущественно нервные клетки: очень слабые

электрические токи направляют рост нейронов в сторону отрицательного заряда. По-
видимому, слабый электрический ток обуславливает приток ионов кальция в особую зону
роста, что активирует сборку цитоскелета.

3.4. Контактное ориентирование — миграция, которую определяют физические свойства

субстрата.

Для перемещения клеток необходимо свободное пространство; если на пути возникнет

преграда, они будут вынуждены огибать ее. Образование этого свободного пространства во
многом зависит от гиалуроновой кислоты.

Пример: рост аксонов по системе упорядоченных каналов. В мозге такие упорядоченные

каналы имеют линейную ориентацию.

Если что-то мешает миграции клеток, говорят о контактном ингибировании движения.

Клетки двигаются за счет вытягивания ламеллоподий. Например, в случае с фибробластами,
когда ламеллоподия контактирует с другой клеткой, то в случае отсутствия необходимых
рецепторов клетка меняет направление движения.

27. БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ, ЛЕЖАЩИЕ В ОСНОВЕ РАЗВИТИЯ

ЗАРОДЫША (ИНДУКЦИЯ, ДЕТЕРМИНАЦИЯ, ДЕЛЕНИЕ КЛЕТОК).
Это солянка немного из разных кусков материала. В целом, сюда помещена часть
информации из вопросов №№7, 36, 39. Если что-то непонятно, подробнее можно почитать
там.

1. Деление клеток регулируется в процессе развития. Эта регуляция может осуществляться

с помощью цитоплазматических детерминант, как преимущественно происходит при
мозаичном типе развития — клетка делится ровно столько раз, ровно в таком направлении и
ровно тогда, как ее «запрограммировали», вне зависимости от окружения. Регуляцию могут
осуществлять и близлежащие клетки согласно моделям позиционной информации: каждая
клетка «понимает», где она находится, и получает инструкции или разрешения от других
клеток делиться (и дифференцироваться) определенным образом.

2. Детерминация (лат. «определять») — определение судьбы клетки; она же скрытая

дифференцировка. Предшествует дифференцировке. Происходит на молекулярном уровне. В
ее основе лежит дифференциальная активность генов (включение определенного набора
генов в соответствии с потребностями развития).

Детерминация из первоначальных однородных клеток в другие клеточные типы может у

разных животных осуществляться двумя различными способами:

2.1. Цитоплазматическая сегрегация ( = спецификация) — сегрегация детерминирующих

молекул во время дробления.

2.2. Эмбриональная индукция (прогрессивная детерминация).

В развитии любого организма участвуют оба механизма, но значимы они в разной степени в
зависимости от того, какой вид мы рассматриваем.

3. Индукция — явление, при котором одна область зародыша, взаимодействуя с другой,

побуждает эту область развиваться определенным способом. Это явление невероятно часто
встречается в эмбриологии.

Первичная эмбриональная индукция — процесс, при котором в ходе гаструляции

дорсальная мезодерма ( = хордомезодерма) индуцирует эктодерму в развитие нервной
структуры.

Вторичные индукции — все прочие индукции.

28. МЕХАНИЗМЫ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ПОЛИСПЕРМИИ.

Это вопрос №4, количественный контроль: быстрый и медленный блоки.

Эти механизмы не обладают абсолютной эффективностью. Полиплоидные зародыши,

образовавшиеся при полиспермии, или гибнут сразу, или
абортируются до второго месяца беременности. Наиболее частая
полиплоидия у человека — триплоидность. Описано всего несколько случаев рождения
триплоидов, и все они погибли в первые часы жизни.

Возможные механизмы возникновения триплоидов: а.) чаще: яйцеклетка осталась

диплоидной из-за нарушения в редукционном делении и б.) реже: в яйцеклетку проникли два
сперматозоида (на фотографии).

29. ТРАНСКРИПЦИОННЫЙ, ТРАНСЛЯЦИОННЫЙ И ПОСТТРАНСЛЯЦИОННЫЙ

ЭТАПЫ РЕГУЛЯЦИИ РАЗВИТИЯ У МНОГОКЛЕТОЧНЫХ.

(Лекция №11.)

Уровни регуляции экспрессии генов:

1. Транскрипционный уровень — работает ген или находится в выключенном состоянии.

Регулируется белками (транскрипционными факторами).

2. Этап процессинга РНК.

Процессинг — созревание иРНК.

Регуляция происходит через выбор пути альтернативного сплайсинга.

Этого этапа нет в формулировке вопроса, но мало ли, будет допвопрос от Балахонова.

3. Трансляционный уровень.

После того, как мРНК образована, она может транслироваться/не транслироваться.

Пример: на ранних стадиях развитие зародыша лягушки определяется только мРНК и

белками, уже содержащимися в клетке.

4. Посттрансляционный уровень.

Только что синтезированные белки не активны без последующих модификаций (отщепления

ингибиторного участка, который не дает ему работать). Кроме того, уже работающий белок
может избирательно и обратимо активироваться или инактивироваться. Довольно часто для
работы белка требуется его доставка в определенное место в клетке. Многие белки работают
только в сложной структуре, составленной из мономеров (гемоглобин, микротрубочки и
прочее).

Пример регуляции модификацией: инсулин не будет работать, пока от него не отщепится

ингибирующий участок. Так же работает большинство пептидных гормонов.

Пример включения: синтетазы обратимо включаются и выключаются без их разрушения.

30. ПРОБЛЕМА ТОЖДЕСТВА ГЕНОМОВ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК
ОРГАНИЗМА.

(Лекция №10.)

Очевидно, что все специализированные клетки происходят в конечном итоге как результат
митотических делений одной изначальной клетки — зиготы. Это значит, что, отбрасывая
известные нам исключения (диминуция у насекомых, аскарид, формирование лимфоцитов),
все клетки организма должны иметь одинаковый геном (так как митоз —
равнонаследственное деление). Очевидно также, что клетки разных типов значительно
отличаются морфологически, биохимически и функционально.

Стоит учитывать, что даже случаи диминуции (потери части генов) у аскарид и
насекомых является не причиной, а следствием дифференцировки. Причина
дифференцировки — всегда дифференциальная активность генов (см. вопрос №29).

Доказательства тождества геномов соматических клеток:

1. Эксперименты Дриша, Шпемана: они показали, что ядра ранних бластомеров

тотипотентны.

Тотипотентность («всеобщий») — способность клетки при определенных условиях

дифференцироваться в любую клетку. Тотипотентны клетки внутренней клеточной массы.

Иммортальность («бессмертность») — способность неограниченно долго поддерживать

свою популяцию.

Плюрипотентность («множество») — способность клетки при определенных условиях

дифференцироваться в любую клетку из широкого списка, но не в любую клетку вообще.

2. Вольфовская регенерация хрусталика (сначала стоит прочесть про развитие хрусталика в

вопросе №7).

Вольф удалял хрусталик тритона, при этом глазная чаша и эктодерма сохранялись.
Регенерация идет не так, как она происходила в эмбриогенезе, потому что глазная чаша не
испускает сигнал, да и эктодерма уже не была бы компетентна к нему из-за сужения
потенций в ходе развития.

Регенерация происходит через дедифференцировку верхних дорсальных клеток радужки:

сначала меняется форма их ядра, образуется большое количество рибосом (подготовка к
синтезу белка), происходит репликация ДНК, клетки делятся и выбрасывают меланосомы
(избавляются от признаков своей дифференциации; меланосомы впоследствии будут
уничтожены макрофагами). Дедифференцированные клетки образуют каплю, которая
постепенно растет. Клетки в ней образуют уже специфические для хрусталика белки —
кристаллины, причем их типы образуются в той же последовательности, что и при
нормальном развитии хрусталика. Капля образует новый хрусталик.

Произошла метаплазия — дедифференцировка клетки с последующей дифференцировкой в

другой тип клеток.

Этот эксперимент показывает, что в клетках радужки имеются гены, необходимые для
развития хрусталика, но, так как клетки играют роль радужки, эти гены выключены. Тем не
менее это доказательство позволяет нам однозначно сказать только о том, что геномы
тождественны у клеток одного зародышевого листка.

3. Брикс и Кинг пересадили ядро бластулы в яйцеклетку вместо ее собственного ядра.

Развитие этой неоплодотворенной яйцеклетки шло нормально. Значит, по крайней мере у
бластулы и зиготы геномы тождественны.

Следующий шаг — взять клетку более поздних стадий. Брикс и Кинг пересадили ядро из
соматической клетки со стадии хвостовой почки в яйцеклетку, но в этот раз развитие не
пошло ни разу. Они пересадили ядро половой клетки со стадии хвостовой почки — и
развитие шло как минимум в половине случаев.

Вывод — на стадии хвостовой почки «ненужные» гены соматических клеток блокированы;

гены половых клеток сохранены в незаблокированном состоянии, чтобы обеспечить
преемственность поколений.

Блокировка генов производят определенные вещества — белки-регуляторы, находящиеся в

цитоплазме. На каждой стадии они свои, поэтому постепенно «разблокировать» нужные
гены можно, постадийно двигаясь «назад»: можно проводить последовательные пересадки
одного и того же ядра со стадии хвостовой почки, ненадолго оставляя ядро в акцепторном
эмбрионе на каждом шаге, в нейрулу → гаструлу → бластулу → морулу → зиготу до
восстановления спектра потенций. Таким образом Брикс и Кинг смогли получить зиготу,
развивающуюся нормально аж до головастика.

У растений соматическая клетка всегда способна дать начало другому клеточному типу. У
животных такое достигается не всегда.

Индуцированные тотипотентные клетки, похожие на клетки внутренней клеточной

массы, также были получены в экспериментах.

4. Клонирование.

Возможность клонирования однозначно показывает, что геномы соматических клеток

идентичны. Технология клонирования уже протестирована и откалибрована на десятках
видов.

Впервые Ян Вилмут провел клонирование овечки Долли.

Для этого он удалил из яйцеклетки овцы ядро и пересадил
в нее ядро соматической клетки другой овцы. Главные требования к такой соматической
клетке — сохранение способности к многочисленным быстрым делениям. Под эти критерии
попадают, например, клетки красного костного мозга, молочной железы и эпителия
кишечника — Вилмут использовал последние.

Полученную зиготу подсадили суррогатной матери, и родился здоровый ягненок,

генетически идентичный донору ядра соматической клетки.

Правда, клоны в большинстве случаев живут меньше, чем доноры ядер, хотя погибают от
старости. Дело в теломерах — концевых участках хромосом, которые состоят из
одинаковых последовательностей шести нуклеотидов (ТТАГГГ), повторяющихся много-
много раз. С каждым последующим делением длина теломеры уменьшается, так как ДНК-
зависимая ДНК-полимераза, удваивающая ДНК перед митозом, садится на концевую
комбинацию ТТАГГГ и копирует все, кроме этих шести нуклеотидов. Следовательно,
клетка может продолжать делиться, пока не закончатся нуклеотиды в теломере. У
ребенка ее длина равна 15 тыс. пар нуклеотидов; в год утрачивается 71 пара нуклеотидов.

Первый на данный аспект обратил внимание советский ученый Оловников, но Нобелевская

премия была присуждена американским ученым.

На практике ограничение в количестве делений, задаваемое длиной теломеры, показал

Хейфлик. Он работал с фибробластами: наблюдал их деление в чашке Петри вплоть до
момента, когда клетки заполняли пространство полностью. Тогда он брал одну клетку,
пересаживал в другую чашу, клетка делилась. Он снова отслеживал время полного
заполнения чашки. Повторял действия в третий раз. В конце концов Хейфлик установил,
что деление постепенно становится медленнее, а в пятый раз деления не обеспечили
заполнение чашки Петри. Хейфлик предположил, что у соматической клетки есть предел
деления, за которым оно прекращается (примерно 70 делений, предел Хейфлика).
Эксперименты других ученых показали, что у разных соматических клеток предел делений
разный, но у всех, кроме половых и опухолевых клеток, он есть. Это значит, что длина
теломер разная у разных типов клеток; равно разную длину теломер имеют разные виды
животных. Следовательно, максимальная продолжительность жизни животного зависит
от длины теломер и скорости их потери.

Теломераза — фермент, работающий в половых и опухолевых клетках и

восстанавливающий потерянные участки теломер.

Встает проблема: как достигаются такие функциональные, морфологические и

биохимические отличия среди соматических клеток, обладающих тождественными
геномами?

Решение: в разных типах соматических клеток работают разные гены из общего набора
(тождественного генома). То есть развитие обеспечивается выборочным включением
нужных генов в нужное время в нужном месте — дифференциальная активность генов
(можно продолжить рассказать материалом вопроса №29).
31. ПРЕФОРМИЗМ И ЭПИГЕНЕЗ.

(Лекция №1, материалы из архива.)

На заре биологии развития были сформированы два ее направления.

Первое, преформизм, разработал Гиппократ (IV-V века до н.э.). Он считал, что все
необходимое для развития взрослого организма уже заложено в половых клетках, а
эмбриогенез сводится к увеличению в размерах, росту.

Второе, эпигенез, создано Аристотелем (IV век до н.э.) и предполагает, что эмбриогенез —
процесс формирования признаков с нуля. Греко-египетской доктрины Аристотель не
придерживался.

В эти времена не было понимания о половых клетках, поэтому рассуждения носили

умозрительный характер, говорили просто о мужском и женском началах. В античности
популярность имела греко-египетская доктрина, согласно которому творцом зарождения
является только отец, а мать — только кров для семени. С этим связывали возможность
создания гомункулов (упоминается, например, в Фаусте в XVI веке). У Парацельса (конец
XV – начало XVI веков) есть рецепт в книге «Трактат о природе вещей».

Можно сказать, что впервые женскую половую клетку обнаружил Ренье де Грааф (XVII век),
приняв за нее весь граафов пузырек. А с пяток лет спустя Иосиф Гам и Левенгук находят
анималькули. В это время господствовал преформизм, в связи с чем произошло разделение
на два лагеря. Более многочисленными были овисты (Марчелло Мальпиги, Шарль Бонне,
Антонио Валисснери), менее — анималькулисты (Левенгук, Иоанн Либеркюн), считавшие,
что яйцеклетка нужна только для питания. У анималькулистов получались «матрешки», так
как в зародышах уже должны были быть сперматозоиды, и некоторые работы подсчитывали
количество таких «матрешек» (теория вложения). Недостатком теории были невозможность
объяснить появление врожденных уродств, изменчивость.

Только в конце XVIII века позиции преформистов ослабевали. Особенно значимым ударом
стала работа Каспара Фридриха Вольфа «О формировании зачатков», построенная на
зародышах курицы: он однозначно показал, что части зародыша формируются из
листовидных зачатков. Но она почти не нашла признание, хотя был сделан значительный
шаг в поисках истины. Кроме того, Вольф не знал, что заставляет признаки каждый раз
появляться с нуля, поэтому он постулировал существование некой «жизненной энергии».

Христиан Иванович Пандер и Карл Максимович Бэр (создал учение о зародышевых

листках, описал хорду куриного и человеческого зародыша, в 1827 году впервые
действительно увидел яйцеклетку, сформулировал закон зародышевого сходства: творец
научной эмбриологии) окончательно разгромили преформизм в классическом его
понимании.

Можно сказать, что современная наука стоит на позициях эпигенеза, а остатки преформизма,
хотя и не в классическом его понимании, можно разглядеть в генетической детерминации
признаков.
32. ПЕРВИЧНАЯ ЭМБРИОНАЛЬНАЯ ИНДУКЦИЯ.

(Лекция №9.)

Как меня достала куча дробных подвопросов при наличии одного, который включает это
все, вы бы знали.

Отсюда лучше сразу пойти в вопрос №7 (агрессивная реклама седьмого номера, да-да) или,
если уж совсем тухло, то в вопрос №17.

Первичная эмбриональная индукция — процесс, при котором в ходе гаструляции

дорсальная мезодерма ( = хордомезодерма) индуцирует эктодерму в развитие нервной
структуры.

Образование нервной пластинки напрямую зависит от хордомезодермы, так как она

побуждает клетки развиться в нервную пластинку. Помимо этого, она также индуцирует
развитие специфических отделов нервной трубки, то есть проявляет региональную
специфичность ( = спецификацию). Эксперимент, показывающий это, проводится по
методике «сандвичей», разработанной Гольтфретером.

1. У ранней гаструлы вырезают кусочек недифференцированной эктодермы и дорсальной

губы бластопора. Дорсальную губу на манер сэндвича вкладывают в эктодерму, и из нее
развиваются структуры переднего головного мозга.

2. Делают все то же самое, но дорсальную губу бластопора вырезают уже из поздней

гаструлы. Тогда из итогового сэндвича появятся структуры спинного мозга.

Но как возможна эта региональная специфичность? Дело в том, что хордомезодерма

выделяет два типа веществ. Более высокая концентрация первого опосредует развитие
передних отделов, более высокая концентрация второго — задних; равная их концентрация
— развитие средних отделов.

Следующий вопрос — а что это за вещества являются нейроиндукторами?

Эксперимент: удаляем из ранней бластулы хордомезодерму и подсаживаем вместо нее

кусочек печени взрослого тритона. Внезапно, нервная трубка начинает развиваться. То же
произойдет, если подсадить мертвые клетки печени (феномен мертвых организаторов). То
же произойдет, если поместить на место удаленной хордомезодермы кристаллики
метиленового синего.

Оказалось, что нейрализующие факторы содержатся в самой эктодерме, но нужно стороннее

воздействие, чтобы их высвободить.

Согласно современным представлением, та индукция, которую Шпеман назвал первичной,

на самом деле не является первой.
! Считается, что экто- и энтодерма дифференцируются автономно, а вот для развития
мезодермы нужна индукция.

Эксперимент, показывающий это: ранняя бластула (примерно на стадии 128 клеток)

помещается в среду, в которой отсутствуют кальций и магний, из-за чего зародыш
распадается на отдельные клетки. Мы знаем, какие из этих отдельных клеток должны были
бы стать экто-, мезо- и энтодермой, и знаем также, какие молекулы (мРНК для белков
определенных элементов цитоскелета) производят только клетки
эктодермы/мезодермы/энтодермы.

После разделения, проследив, чтобы клетки не соединились снова, магний и кальций в среду
возвращают, чтобы был возможен синтез мРНК.

Оказалось, что клетки, которым было суждено стать экто- и энтодермой, производили
специфические для своего зародышевого листка мРНК. Те же, которые должны были стать
мезодермой, специфичных мРНК не давали, пока их не сближали хотя бы с одной другой
мезодермальной клеткой.

Вывод: экто- и энтодерма «знают» о своей судьбе сами по себе. Мезодерма «узнает» о ней
благодаря индукции.

33. ВТОРИЧНАЯ ЭМБРИОНАЛЬНАЯ ИНДУКЦИЯ.

(Лекции №№9, 10, 13.)

Отсюда лучше сразу пойти в вопрос №7 (агрессивная реклама седьмого номера, да-да) или,
если уж совсем тухло, то в вопрос №17.

Вторичные эмбриональные индукции — все индукции, следующие после первичной в

эмбриональном развитии. Составляют каскады индукций, детерминация зависит от
взаимодействия групп клеток. Примеры: развитие глаза (глазной пузырь индуцирует
развитие хрусталика).

В каскадах индукций происходит прогрессивное ограничение потенций.

Компетентность — способность реагировать на определенные сигналы, поступающие от

других клеток. Изменяется в ходе развития. Так, например, если пересадить дорсальную губу
бластопора к эктодерме гаструлы, разовьется еще одна нервная трубка; если пересадить ее к
эктодерме нейруле, новая нервная трубка не появится. Это значит, что эктодерма нейрулы
больше не компетентна к сигналам от хордомезодермы, зато она получит компетентность к
другим сигналам. Так, например, при развитии хрусталика эктодерма компетентна к
сигналам от глазного пузыря.

Описание развития хрусталика:

1. Стенка переднего мозга образует выпячивание кнаружи, в сторону эктодермального
эпителия, — глазной пузырь. С течением времени это выпячивание становится все
выраженнее.

2. В эктодерме над глазным пузырем образуется утолщение — хрусталиковая плакода.

3. Из глазного пузыря продолжает образовываться глаз — для этого развивается

выпячивание.

4. Из хрусталиковой плакоды развивается хрусталиковый пузырь — для этого она

начинает впячиваться.

5. Хрусталиковый пузырь продолжает впячиваться, пока не отшнуровывается, так что

формируется хрусталик. Параллельно из глазного пузыря формируются различные слои
глаза.

Вывод: хрусталик образуется из эктодермы, глаз — из глазного пузыря. Подтверждающий

эксперимент: пересаживаем глазной пузырь от одного зародыша к эктодерме другого, но
туда, где глаза быть не должно. Разовьется хрусталик.

Каскад вторичных индукций при развитии глаза:

1. Презумптивный эпидермис проходит через детерминацию, становясь презумптивной

эктодермой хрусталика.

2. Под влиянием хордомезодермы: презумптивная эктодерма подвергается детерминации,

становясь презумптивной нервной пластинкой. В свою очередь, презумптивная нервная
пластинка под влиянием хордомезодермы также проходит через детерминацию, становясь
презумптивной глазной чашей. Из нее развивается глазной пузырь.

2. Под влиянием глазного пузыря: из презумптивной эктодермы хрусталика развивается

хрусталиковая плакода, которая продолжает развитие до хрусталикового пузырька.

3. Под влиянием хрусталикового пузырька из презумптивной эктодермы роговицы,

располагающейся над ним, развивается роговица.

4. В это время глазной

пузырь развивается в
глазную чашу, которая
дифференцируется на
пигментную и
нейральную сетчатку.

5. Под влиянием
нейральной сетчатки:
из хрусталикового
пузырька развивается
хрусталик.
Одним из наиболее изученных примеров вторичных индукций являются эпителиально-
мезенхимные взаимодействия (см. вопрос №34).

34. ЭПИТЕЛИАЛЬНО-МЕЗЕНХИМНЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ.

(Лекция №13.)

* Мезенхима — собирательное понятие, совокупность клеток преимущественно

мезодермального происхождения, которые на определённом этапе внутриутробного развития
характеризуются сходными морфологическими признаками, но различным направлением
клеточной дифференцировки, то есть мезенхима состоит из клеток, которые в будущем дадут
клетки, относящиеся к различным дифферонам — будь то ряд клеток крови, собственно
соединительной ткани, мышечной ткани или иных клеточных линий. Таким образом,
мезенхима является предшественником развивающейся впоследствии соединительной ткани,
она дает начало всем основным группам взрослых соединительных тканей.

Эпителиально-мезенхимные взаимодействия
являются одним из наиболее изученных
примеров вторичных индукций, причем в нем
же ярко проявляется региональная
специфичность эмбриональных индукций.
Кроме того, эпителиально-мезенхимные
взаимодействия можно отнести к
региональным инструктивным тканевым
взаимодействиям.

Ключевую роль в эпителиально-мезенхимных взаимодействиях играет трансформирующий

фактор роста бета.

Кожа цыпленка может дать начало трем типам покровных структур, образуемым из
эпидермы: маховые, пуховые перья и
когти. По какому пути пойдет
эктодерма, определяет мезенхима.
Мезенхима крыльев инструктирует
эпидерму к образованию маховых
крыльев, бедра — к образованию
пуховых, нижней части конечности —
к образованию когтей.

Другой пример — образование зачатка

легкого.

А.) Если удалить мезенхиму,

окружающую зачаток легкого,
развитие легкого не пойдет вовсе.
Если пересадить к зачатку легкого…

Б.) …мезенхиму желудка, в зачатке разовьются желудочные железы.

В.) …мезенхиму кишки, разовьются кишечные ворсинки.

Г.) …мезенхиму печени, разовьются печеночные пластинки.

Д.) …мезенхиму бронхов, разовьются ветвящиеся зачатки бронхов.

Е.) …мезенхиму трахеи, будет вырабатываться коллаген, зачаток ветвиться не начнет.

Аналогичная ситуация в случае пересадок мезенхимы различного происхождения в почку

конечности: если пересадить в предполагаемую руку мезенхиму ноги, разовьется нога, и
наоборот; если пересадить в почку конечности мезенхиму, которая в норме вообще не
участвует в образовании конечности, развитие не пойдет. При удалении мезенхимы развитие
конечности также не происходит.

Классический эксперимент Шпемана и Оскара Шотте: возьмем ранние гаструлы лягушки и

тритона. Возьмем от лягушки эктодерму, которая потом образует рот, и пересадим ее в
ту же область у зародыша тритона. Ротовые структуры у личинок в норме заметно
отличаются: у лягушки это присоски, а у тритона — балансер. У полученной личинки
тритона рот сформируется, но ротовой
аппарат у него будет «лягушачий» (присоски), а
не «тритоний», хотя инструкции давала
эктодерма тритона.

Вывод: клетки способны реагировать на

воздействия в рамках тех ответных реакций, которые заложены в их геноме. Индукции при
инструктивных взаимодействиях «говорят», что нужно сделать, но не «обучают» этому.

Второй вывод: ткани могут реагировать на индукции, посылаемые мезенхимой даже

других видов

Индуцированные стволовые клетки (см. вопрос №30, эксперимент Брикса и Кинга) могут
быть использованы для выращивания человеческих органов в теле животного. Представим,
что человеку требуется пересадка поджелудочной железы. От пациента берем его клетки,
получаем индуцированные стволовые клетки. Берем зиготу свиньи, отключаем у нее ген,
ответственный за появление ее собственной поджелудочной железы, подсаживаем в
бластоцисту свиньи индуцированные стволовые клетки человека. Эти клетки сами найдут
нужное им место и окажутся под влиянием мезенхимы свиньи, которая инструктирует их
к формированию поджелудочной железы. Как и в случае с ротовыми аппаратами тритона
и лягушки, вырастет человеческая поджелудочная железа, потому как стволовые клетки
человека «не знают», как делать свиную. Причем, так как стволовые клетки получены от
пациента, иммунная реакция при пересадке не возникнет.
35. ХАРАКТЕРИСТИКА РЕГУЛЯТИВНОГО ТИПА РАЗВИТИЯ.

(Лекция №8.)

Это все часть вопроса №7. Краткая выжимка:

— Ведущей силой детерминации является эмбриональная индукция (прогрессивная

детерминация).

— Части зародыша взаимодействуют друг с другом и корректируют свою деятельность в

зависимости от деятельности остальных частей; весь зародыш образует единую в развитии
структуру.

— Часть, отделенная от зародыша, может дать полноценный новый зародыш.

— Возможно появление однояйцевых близнецов.

Или в красивых формулировках Дриша:

1. Проспективная потенция каждого изолированного бластомера шире, чем его

проспективная судьба; при мозаичном развитии проспективная судьба и проспективная
потенция должны быть идентичны;

2. Зародыш морского ежа представляет собой гармоничную эквипотенциальную систему,

так как все ее потенциально независимые части функционируют вместе, формируя единый
организм → каждый бластомер потенциально способен образовать целый организм, но
зародыш может существовать только потому, что бластомеры реализуют только часть своего
потенциала;

3. Судьба ядра зависит исключительно от его положения в зародыше → если брать зародыш
и бластулы вместе, то разовьется зародыш; если брать по отдельности – будет реализована
другая судьба.

Регулятивный тип развития характерен для млекопитающих, включая человека, амфибий,

иглокожих. При этом даже для них в тот или иной момент времени происходит ограничение
потенций отдельных клеток.

36. КЛЕТОЧНЫЕ МИГРАЦИИ В РАЗВИТИИ.

(Лекции №№11, 12.)

Миграция — целенаправленный процесс перемещения клеток в организме.

Возможные способы миграции:

1. Хемотаксис («расположение по порядку в зависимости от химических веществ») —

движение клеток по градиенту концентраций какого-то химического вещества,
содержащегося в растворе.
Примеры: а.) движение иммунных клеток в кровеносных сосудах по направлению к очагу
воспаления; б.) эмбриональный тимус привлекает к себе определенные клетки из красного
костного мозга с помощью короткого пептида; в.) миграция первичных половых клеток к
половому валику зародыша (ка-а-апельку подробнее см. в вопросах №1 или №25, там про
ППК написано одно и то же).

Еще пример: прорастание кровеносных сосудов в формирующиеся органы. Большие сосуды

имеют фиксированное положение у разных индивидуумов, а расположение капилляров
сильно отличается, так как оно развивается в зависимости от потребностей в кислороде
различных тканей. Если клеткам не хватает кислорода, они подают капилляру химический
сигнал, и сосуд начинает расти к «сигналу о помощи». Это экономичный с точки зрения
хранения информации способ (не нужно шифровать в геноме точное расположение,
достаточно понять, где капилляр нужен, и расти туда), но он же создает опасность,
потому как кровоснабжение требуют опухолевые клетки. И они его получают, потому как
у капилляров нет точной карты. Поэтому, например, Талидомид (см. вопрос №23) может
быть использован при лечении опухолей — он не дает сосудам прорастать к раковым
клеткам и питать их.

2. Гаптотаксис (от греч. «прикрепляюсь») — перемещение по твердой поверхности по

градиенту концентраций веществ, прикрепленных к этой поверхности, через взаимодействие
с внеклеточным матриксом.

Контроль осуществляется при участии молекул клеточной адгезии (МКА) и хемокинов.

При этом между молекулами на плазмалемме мигрирующей клетки и комплементарными им
молекулами субстрата образуются временные связи. Особая роль принадлежит белкам
фибронектину и ламинину — они маркируют «дорожку» для движения.

Формирование такой «дорожки» — довольно сложная штука. Адгезионных молекул должно

быть столько, чтобы клетки не «отклеились», но и не «приклеились» намертво, чтобы они
продолжали движение.

Пример: пронефрос (зачаток почки у амфибий) закладывается у головного конца, но в

процессе развития ползет по мезодерме до клоаки. Доказательство, что это гаптотаксис,
а не хемотаксис: при удалении клоаки движение не остановится и не изменится, как и при
изменении расположения клоаки. Значит, здесь мы имеем дело с «проложенной дорожкой»,
а не с диффузно распространяющимися сигнальными веществами, как это было бы при
хемотаксисе.

Еще пример: миграция клеток нервного гребня (подробно о

том, что такое нервный гребень и зачем оно нам надо, см.
вопрос №19). Клетки нервного гребня мало
дифференцированы, но когда они доберутся до своего места, у
них начнется дифференцировка; клетки нервного гребня
мигрируют очень широко.

3. Гальванотаксис — миграция по полярным градиентам,

источником которых являются заряженные ионы (то есть миграция по направлению
изменения электрического заряда).

С помощью гальванотаксиса мигрируют преимущественно нервные клетки: очень слабые

электрические токи направляют рост нейронов в сторону отрицательного заряда. По-
видимому, слабый электрический ток обуславливает приток ионов кальция в особую зону
роста, что активирует сборку цитоскелета.

4. Контактное ориентирование — миграция, которую определяют физические свойства

субстрата.

Для перемещения клеток необходимо свободное

пространство; если на пути возникнет преграда, они
будут вынуждены огибать ее. Образование этого
свободного пространства во многом зависит от
гиалуроновой кислоты.

Пример: рост аксонов по системе упорядоченных

каналов. В мозге такие упорядоченные каналы имеют
линейную ориентацию.

Если что-то мешает миграции клеток, говорят о контактном ингибировании движения.

Клетки двигаются за счет вытягивания ламеллоподий. Например, в случае с фибробластами,
когда ламеллоподия контактирует с другой
клеткой, то в случае отсутствия необходимых
рецепторов клетка меняет направление движения.

37. ХАРАКТЕРИСТИКА МОЗАИЧНОГО ТИПА РАЗВИТИЯ.

(Лекция №8.)

Это все часть вопроса №7. Краткая выжимка:

— Зародыш представляет собой мозаику самодифференцирующихся частей.

— Ключевую роль играет детерминация посредством цитоплазматической сегрегации ( =

специализации), то есть направление развития задают цитоплазматические детерминанты,
которые могут влиять на зародыш неперечислимо большим числом механизмов.

— Каждый бластомер развивается автономно: не имеет значения, изолирован он от других

бластомеров или нет.

— Каждый бластомер делится определенное количество раз, в определенном темпе и

«знает», во что должен превратиться.

— Бластомер, который должен образовать один тип тканей, не сможет образовать другой тип
тканей.
Мозаичный тип развития характерен для гребневиков, кольчатых и круглых червей,
оболочников, моллюсков.

Лоренс Шабри на оболочниках показал, что, если у зародыша удалять определенные

бластомеры, у личинки асцидии будут отсутствовать те структуры, которые должны
были формироваться из удаленных бластомеров. Если культивировать бластомеры по
отдельности, то каждый из них развивается автономно (определенные клетки «знают»,
что им нужно сформировать эктодерму, но другого — как нужно сформировать мышцы,
энтодерму — «не знают»). Такой способ развития — мозаичный: зародыш представляет
собой мозаику самодифференцирующихся частей. Он характерен для гребневиков, круглых
и кольчатых червей, оболочников, моллюсков.

Уже на зиготе оболочника можно показать, какая часть зиготы пойдет на какую ткань:
провести витальное ( = прижизненное, не нарушает жизнедеятельность клетки)
окрашивание различных частей ее цитоплазмы и посмотреть, в каких бластомерах будут
какие красители. Такое окрашивание работает потому, что зигота содержит
цитоплазматические ( = морфогенетические) детерминанты, которые строго
распределяются между бластомерами и определяют их дальнейшую судьбу. При этом, если
процентрифугировать зиготу оболочника, а потом наблюдать за ее развитием,
бластомеры все еще будут «знать», что образовывать, — это связано с тем, что
морфогенетические детерминанты заякорены на элементах цитоскелета, а потому не
смещаются.

Можно вспомнить эксперимент Гердона с лягушкой: он удалял из зиготы ядро, и развитие

шло до гаструляции. Это связано с тем, что у лягушки собственные гены не работают аж
до начала гаструляции, развитие происходит благодаря морфогенетическим
детерминантам.

38. ИНСТРУКТИВНЫЕ И РАЗРЕШАЮЩИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ В РАЗВИТИИ.

Это дробный вопрос от совсем маленького вопроса. Так что читаем сразу вопрос №18, чтобы
хотя бы что-то сказать.

39. МОДЕЛИ ПОЗИЦИОННОЙ ИНФОРМАЦИИ.

(Лекция №14.)

Эти модели отвечают на вопрос: «Как части зародыша понимают свое расположение и
координируют его?» Модели позиционной информации не являются взаимоисключающими,
они дополняют друг друга.
1. Градиентная гипотеза — в основе лежит представление о градиентах, то есть о мере
возрастания или убывания в пространстве концентрации морфогенетических («образующих
форму») веществ.

Примерно об этом же говорит хемотаксис — см. вопрос №36.

Эти вещества распространяются от источника к так называемому стоку, в ходе чего

происходит постепенный спад концентрации с
удалением от источника.

Иллюстрацией градиента является модель

французского ( = трехцветного) флага,
предложенная Вольпертом. Все клетки изначально
полипотентны и могут стать или «синими», или
«белыми», или «красными» — выбор пути зависит
от концентрации морфогена. Наибольшая
концентрация наблюдается ближе к стоку и
направляет клетки по «синему» пути развития. При
этом существует порог концентрации для синего —
такая концентрация, ниже которой морфоген будет
опосредовать развитие белых клеток. Эта граница четкая,
переходных вариантов («голубого») нет. Аналогичный порог
существует для «белого».

Согласно модели французского флага при пересадке дифференцировавшейся таким образом

клетки в другое место, что условно обозначают как пересадку кусочка ткани с флага одной
страны на флаг другой, она дифференцируется согласно новым инструкциям, но только в
рамках своих способностей. Так, например, если пересадить «синюю» ткань из левого
верхнего угла французского флага в правый угол американского флага, ткань станет красной
— то есть того цвета, какого она была бы в том же месте французского флага.

То есть в рамках градиентной гипотезы дифференцировка обладает специфичностью.

2. Временнáя модель.

В основе этой модели лежит тот факт, что клетки проводят разное время в зоне прогресса. На
примере формирования конечностей: чем больше времени клетки проводят в зоне прогресса,
тем больше у них признаков, характерных для клеток пальцев (дистальных отделов
конечности). Соответственно, клетки, которые покинули зону прогресса очень рано, дадут
плечо. Отсчет времени пребывания в зоне прогресса и количества пройденных делений
производят клеточные часы.

40. ФОРМИРОВАНИЕ ПРОСТРАНСТВЕННОЙ ОРГАНИЗАЦИИ КОНЕЧНОСТИ.

(Лекция №14.)
Здесь задействованы hox-гены (см. вопрос №9).

У человека закладка конечности начинается примерно в конце четвертой недели,

заканчивается — к восьмой. Руки немного опережают ноги.

Развитие регенерирующей и эмбриональной

конечностей у тритона схожи на 98-99%.

1. В четырех соответствующих будущим конечностям

областях формируется скопление мезенхимы, лежащее
под эктодермой. Первыми мигрируют сюда клетки из
париетального листка мезодермы. После — клетки
мезодермы из миотома. После — клетки нервного
гребня. Таким образом, эти мезенхимные скопления формируются морфологически
однотипными клетками трех разных линий, уже
прошедшими через коммитацию.

2. Эти мезенхимные скопления влияют на

эктодерму над ними, из-за чего слой эктодермы
утолщается — образуется апикальный
эктодермальный гребень.

Это все еще эпителиально-мезенхимные

взаимодействия (см. вопрос №34). Мезенхима
обладает пространственной дифференциацией:
имеет значение, из какого места взята
мезенхима, хотя клетки мезенхимы из разных
частей тела будут морфологически одинаковы.

3. Апикальный эктодермальный гребень поддерживает рост конечности, стимулируя деление

подлежащей мезенхимы. Это реципрокная («взаимная») индукция: мезенхима определяет
развитие и форму апикального эктодермального гребня, а тот, в свою очередь, определяет
деление мезенхимы.

Если оставить мезенхиму, но удалить апикальный эктодермальный гребень, развитие

конечности не пойдет.

Для понимания того, как происходит регуляция образования частей развивающегося

механизма (сколько органов и где должны развиваться?), были созданы модели
позиционной информации (см. вопрос №39).

4. Образование конечности далее следует рассматривать по трем осям: переднезадней,

проксимодистальной и дорсовентральной. Развитие по каждой из трех осей контролируется
различными морфогенами. Оси в порядке их развития:

4.1. Переднезадняя ось (линия между большим пальцем и мизинцем).

Главный регулятор развития по переднезадней
оси — зона поляризующей активности. Это
группа клеток мезенхимы, расположенная в
боковой части почки конечностей, в самой
проксимальной ее части, между телом
зародыша и конечностью. В отличие от зоны
прогресса и апикального эктодермального
гребня, в течение развития конечности зона
поляризующей активности не перемещается.
Она отвечает за то, например, чтобы на своих
местах развились мизинец и большой палец.

Механизм ее работы подчиняется градиентной

гипотезе: зона поляризующей активности
секретирует морфоген, который диффундирует от переднего к заднему концу, создавая
градиент концентраций. По-видимому, главным морфогеном этой зоны является
трансретиноидная кислота.

Эксперимент: если подсадить зародышу вторую зону поляризующей активности,

разовьется две кисти, причем дополнительный набор пальцев является зеркальным
отражением нормального.

Доказательство того, что зона поляризующей активности выделяет диффундирующий

морфоген: если отделить ее непроницаемой перегородкой, дифференцировка на передние и
задние структуры не произойдет.

Еще эксперимент: если уменьшить зону поляризующей активности вдвое (удалить половину
ее клеток), пальцы будут плохо формироваться.

Еще эксперимент: мы можем имитировать функцию зоны поляризующей активности, если

удалим ее, а на ее место подсадим гранулу, пропитанную транретиноидной кислотой. В
итоге разовьется нормальная конечность.

4.2. Дорсовентральная ось (линия между верхней и нижней поверхностями руки).

4.3. Проксимодистальная ось (линия между плечом и кончиками пальцев).

Появляется зона прогресса — небольшая группа активно делящихся клеток мезенхимы,

которая всегда прилегает к апикальному эктодермальному гребня. Именно эта зона
поддерживает удлинение конечности в проксимодистальном направлении. Чем
проксимальнее от зоны прогресса лежат мезенхимные клетки, тем медленнее они делятся
вплоть до полного прекращения размножения, после чего они формируют компактные
скопления. Эти скопления дифференцируются в хрящ, и впоследствии из него сформируются
кости конечностей по проксимодистальному градиенту (то есть кость раньше формируется в
проксимальных отделах — от плеча).

Регулирует рост в проксимодистальном направлении преимущественно апикальный

эктодермальный гребень: чем ближе к нему клетки, тем быстрее они делятся. Это явление
отражает положения градиентной гипотезы. Но в развитии конечности участвует и другая
модель — временная. В ее основе лежит тот факт, что клетки проводят разное время в зоне
прогресса: чем больше времени клетки проводят в зоне прогресса, тем больше у них
признаков, характерных для клеток пальцев (дистальных отделов конечности).
Соответственно, клетки, которые покинули зону прогресса очень рано, дадут плечо, а клетки,
которые по сути не покидали зону прогресса — кончики пальцев. Отсчет времени
пребывания в зоне прогресса и количества пройденных делений производят клеточные
часы.

Таким образом, развитие конечности по проксимодистальной оси объясняют градиентной и

временной моделями (см. вопрос №39).

БЛОК ИНФОРМАЦИИ К ДОПВОПРОСАМ

(Лекции №№12, 13.)

Пренатальная («до рождения») диагностика — методы, позволяющие понять, как

развивается живой зародыш.

Скрининг — обследование больших групп населения с целью выявления болезней до

проявления симптомов. Пример: УЗИ.

Ультразвуковая диагностика: отправляем ультразвуковую волну и, зная плотность среды,

по времени возвращения этой волны к датчику получаем картинку; ультразвуковая волна
отражается от различных тканей по-разному. Очень полезный метод, но многие аномалии с
его помощью определяются слишком поздно.

Амниоцентез — под контролем УЗИ производится пункция 15-20 мл амниотической

жидкости, которая содержит много клеток, которые в норме слущиваются с эмбриона.
Проводят центрифугирование, в итоге получают клетки, осевшие на дне (отправляются к
генетикам для хромосомного, химического анализов), и надосадочную жидкость
(отправляется к биохимикам). Метод весьма информативный, но а.) Он создает вероятность
выкидыша: при прокалывании матки она рефлекторно сокращается. Поэтому сейчас
применяют миорелаксанты. б.) При прокалывании материнских тканей на игле остаются
материнские клетки, поэтому генетикам приходится определять, какие клетки из пробирки
принадлежат зародышу, а какие — матери. в.) Клетки, которые в норме находятся в
амниотической жидкости, — в основном мертвые; при этом генетические исследования
лучше всего проводить в интерфазу. Поэтому только небольшая доля клеток может быть
взята к исследованию. г.) На седьмой неделе амниотической жидкости немного, и эмбрион
плотно прилегает к стенке амниотического пузыря, из-за чего высок риск причинить вред
зародышу.

В биохимическом анализе особенно интересен альфа-фетопротеин. Известно, сколько его

должно быть на каждом сроке беременности. Отклонения от нормы позволяют предполагать
вполне конкретные генетические болезни. Плюс этого метода в том, что его концентрацию
можно определять в крови матери, не затрагивая плод.
Кордоцентез — под контролем УЗИ производится пункция пуповинной крови. Благодаря
этому мы получаем больше материала и больше живых клеток.

Хорионбиопсия — под контролем УЗИ производится взятие ворсин хориона или через
брюшную стенку, или через стенку влагалища.

Фетоскопия — световолоконная оптика (волокна, которые даже при изгибании способны

давать свет) вводится в амниотическую полость через влагалище и шейку матки.
Используется два световода: один будет давать освещение, другой — передает отраженный
свет.

Морфогенез — возникновение и развитие органов, систем и частей тела организма как в

индивидуальном, так и в историческом, или эволюционном, развитии. Вопросы
морфогенеза: 1.) Как из клеток образуются ткани? 2.) Как ткани объединяются в органы? 3.)
Почему органы возникают в том месте, которое им определено? 4.) Как мигрирующие
клетки находят пункт назначения? 5.) Как координируется рост органов?

Главное в развитии — межклеточное взаимодействие, что разрушает теорию механицизма.

Морфогенез происходит благодаря относительно ограниченному набору клеточных

процессов: 1.) Направление и число клеточных делений; 2.) Изменение формы клеток; 3.)
Миграция клеток; 4.) Рост клеток; 5.) Изменения в составе клеточной мембраны и
внеклеточного матрикса; 6.) Избирательная гибель клеток.

Возможные механизмы гибели клеток:

1. Генетически предопределена.

Например, уничтожение хвоста у головастиков; другой пример — кисть человеческого

зародыша закладывается в виде лопаточки, а промежутки внутри нее, благодаря которым
пальцы разделяются, происходят при гибели клеток, при патологии наблюдаем
синдактилию — неразделение пальцев; гибель клеток, составляющих перегородку между
стомодеумом/проктодеумом и кишечником.

2. Ликвидация лишних клеток в постоянных тканях.

Многие развивающиеся ткани изначально производят избыточное количество клеток, а

потом, получив сигналы от других тканей, понимают, сколько клеток действительно
требуется. Например, изначально развивается больше мотонейронов, чем необходимо:
выживут те клетки, которые образуют синапс с мышцей. Аналогичные процессы происходят
с нейронами сенсорной области.

Образование избытков может нести адаптивное преимущество в меняющихся условиях

среды — преадаптация (создание условий для быстрого развития новых адаптаций).

Возможные способы индукции (влияние одной клетки на другую) — два механизма:

1. Секреция веществ, способных к диффузии и координирующие морфогенетическую
активность — гормоны, факторы роста.

Эти вещества могут распространяться по всему организму.

2. Контакт соседних клеточных поверхностей.

В процессе онтогенеза клетки перемещаются и вступают во взаимодействие с соседними

клетками — избирательное взаимодействие. Благодаря ему клетки разных типов
располагаются упорядоченно, формируя ткани и органы. Достигается это через
избирательное узнавание (клетка должна стремиться к одним клеткам и «уходить» от
других). Оно имеет высокое значение в передаче позиционной информации. При этом в
процессе развития избирательное сродство изменяется.