Gerencia General de Inspeccin y control de Medicamentos y Productos - GGIMP

GUIAS RELACIONADAS A LA GARANTA DE CALIDAD

Brasilia, 31 de octubre del 2006
www.anvisa.gov.br

Diretor Presidente Dirceu Raposo de Mello Diretores: Cludio Maierovitch P. Henriques Franklin Rubinstein Maria Ceclia Martins Brito Vitor Hugo Costa Travassos da Rosa

Gerncia Geral de Inspeo e Controle de Medicamentos e Produtos GGIMP Roberto Wagner Barbirato Gerncia de Inspeo e Certificao de Insumos, Medicamentos e Produtos GIMEP Marcelo Vogler de Moraes (Substituto)

Elaboradores Cludia Alves Pereira Marcelo Vogler de Moraes Mrcia Oliveira Fernandes Neriton Ribeiro de Souza Renata Cristina Eto Ronaldo Lcio Ponciano Gomes Svetlana Costa de Carvalho

VALIDACIN DE LIMPIEZA
Validacin de limpieza
1 Consideraciones iniciales Es importante establecer que no existe un nico camino para realizar un proceso de validacin de limpieza y que el punto comn a buscar es la existencia de criterios, parmetros y metodologas que sean cientficamente justificables y que demuestren claramente que un procedimiento de limpieza produzca resultados que estn de acuerdo con las especificaciones preestablecidas. 2 Procedimiento de limpieza El primer paso en un estudio de validacin de limpieza es proceder a evaluar el propio procedimiento de limpieza. No es raro que las empresas pierdan mucho tiempo elaborando metodologas de deteccin de residuos y planos complejos de muestreo sin antes revisar el procedimiento de limpieza para asegurar que el mismo es lgico y debe por lo tanto ser eficaz. Abajo enlistamos algunos pasos que deben ser verificados en el procedimiento de limpieza adoptado: I. Existencia de procedimientos de limpieza escritos, aprobados y con sus respectivos registros de entrenamiento anexados. Solamente los operadores entrenados pueden realizar el proceso de limpieza. II. El procedimiento debe detallar los puntos crticos del equipo y la manera en como cada punto debe limpiarse. Los cdigos de identificacin deben ser adoptados en la existencia de varios puntos crticos como registros de vlvulas en lneas largas de envasado para minimizar el riesgo de confusiones u olvidos por parte de los operadores que realizan la limpieza. III. En caso de limpieza manual, es ideal que el procedimiento detalle los tiempos, cantidades de solvente utilizado, tipo de solventes, tipo de detergente y los mtodos utilizados en la limpieza, o sea, cuantas veces una determinada rea debe ser restregada, por cuanto tiempo y en qu sentido. Eso es vital para que se evite la ocurrencia de subjetivismos entre los operadores.
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IV. El material utilizado en la limpieza debe ser estandarizado, el procedimiento debe detallar o hacer referencia a la metodologa de preparacin del detergente, estableciendo su concentracin de uso. La concentracin de uso del detergente y su marca deben ser inmutables despus de la validacin del procedimiento de limpieza, cualquier cambio en estos elementos debe estar precedida de un nuevo estudio de validacin o justificacin plausible antes de que el procedimiento sea aplicado de rutina. V. El procedimiento debe definir por cuanto tiempo el equipo puede permanecer sucio, antes de que sea realizada la limpieza, porque la eficacia de un procedimiento de limpieza es inversamente proporcional al tiempo que el mismo permanece sucio, sobre todo para productos tpicos, suspensiones, formulaciones como gelatinas, donde el secado del residuo aumenta considerablemente la dificultad de limpieza. Si se determina que el equipo puede permanecer sucio por 24 horas antes de realizar la limpieza, la realizacin de la limpieza deber siempre ser conducida en ese plazo lmite para asegurar que el procedimiento es eficaz en su peor caso. VI. El procedimiento debe definir, sobretodo para equipos utilizados en la manipulacin de productos susceptibles a contaminacin microbiolgica, por cuanto tiempo el equipo puede permanecer limpio sin que una nueva limpieza tenga que ser realizada lo que tiene por objeto evitar que una posible proliferacin microbiana en el interior del recipiente contamine el producto. Jams un equipo, despus de limpiarlo, debe permanecer con agua estancada, ya sea en su interior o en el interior de las vlvulas. El estudio de validacin debe asegurar que las operaciones de limpieza y almacenaje no permitan la proliferacin microbiana. VII Equipos de materiales dedicados pueden ser exigidos en algunos casos: filtros de lecho fluidizado, productos con alta actividad biolgica y toxicidad. En casos de campaas, donde se realizan limpiezas parciales entre diferentes lotes de produccin, la validacin de limpieza debe definir el tiempo mximo de campaa. El estudio se debe considerar la investigacin de las impurezas. La etiqueta de identificacin del status de limpieza debe contener el nombre, concentracin, lote del ltimo producto utilizado en el equipo y utensilio, plazo de validez de a limpieza, nombre de los operadores que realizaron y supervisaron la limpieza. 3 Protocolo de validacin de limpieza Abajo est enlistado el contenido clave de un protocolo de validacin de limpieza: I. Objetivo del proceso de validacin. II. Definicin de responsabilidades. III. Descripcin del equipo a ser usado como identificacin del modelo y serie, cdigo de identificacin y localizacin del equipo. IV. Procedimientos de limpieza escritos y aprobados para todos los equipos y partes de estos, de ser necesario (cita o copia del procedimiento en cuestin). V. Definicin de criterios utilizados para la eleccin del agente de limpieza.

VI Relacin de productos que son utilizados en cada equipo objeto de estudio, especificando la forma farmacutica, concentracin, principio(s) activo(s), tamao de lote, solubilidad en solventes, toxicidad, etc. Lo ideal es que esos datos estn tabulados para una mejor visualizacin. VII. Definicin del intervalo entre el final de la produccin y el inicio de los procedimientos de limpieza. VIII. Definicin del intervalo entre la limpieza del equipo y su utilizacin. IX. Procedimiento detallado de la preparacin de la solucin del detergente. X. Nmero de ciclos de limpieza evaluados consecutivamente con sus respectivos nmeros de lote de los productos. XI Cuando la empresa opta por la realizacin de monitoreos despus de la validacin de limpieza, debern ser establecidos en que casos tal monitoreo podr ser aplicado. XII. Relacin de la calificacin de los instrumentos/equipos utilizados. XIII. Procedimiento de muestreo seleccionado, incluida la justificacin tcnica de su eleccin y los procedimientos necesarios para su realizacin. XIV. Identificacin clara e inequvoca de los puntos de muestreo, incluyendo la justificacin tcnica de su eleccin. XV. Identificacin de los operadores que sern los responsables para la limpieza y para el muestreo. XVI. Estudios de recuperacin para el muestreo adoptado, cuando aplique. En el caso del hisopo, el estudio de recuperacin deber contener la razn tcnica de la eleccin del solvente utilizado en el hisopo, las pruebas que se hicieron para la definicin del factor de recuperacin (contaminacin de placas, nmero de analistas probados) y el clculo utilizado para la definicin del factor de recuperacin. En el clculo final del factor de recuperacin, se sugiere tomar en consideracin el resultado menor de la recuperacin encontrada en la media de esas recuperaciones. Los resultados con alta discrepancia, para los factores de recuperacin, obtenidos por un mismo analista o analistas diferentes deben ser investigados con el objetivo de eliminar la causa de la dispersin. Los factores de recobro por encima del 75% son deseables. Los procedimientos y clculos detallados para la realizacin de un estudio de recuperacin se encuentran en el anexo I. XVII. Metodologa analtica validada para el propsito pretendido. XVIII. El criterio de aceptacin y su explicacin cientfica abarcando residuos de productos anteriores, detergente, contaminacin microbiana y otros que sean razonables. XIX. La extensin del estudio aplicado (otros productos, procesos y equipos para los cuales el procedimiento es extensivo y puede ser considerado validado). XX. Cuando debe ser aplicada la revalidacin.
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Observaciones: Para equipos dedicados o entre campaas, la adopcin solamente del criterio de visualmente limpio es aceptable, lo mismo en un estudio de validacin de limpieza, ya que hay que evaluar conjuntamente y comprobar de que la contaminacin microbiolgica est bajo control y que no estn siendo generadas impurezas a partir de residuos del producto anterior. Durante la ejecucin del estudio, en caso de que los resultados determinados para los residuos entre las diferentes limpiezas estn muy dispersos, puede ser necesaria una investigacin para asegurar que la ejecucin por parte de los operadores viene ocurriendo de manera uniforme. En caso de que el problema sea considerado como proveniente del desempeo de los operadores, se deber realizar un nuevo programa de entrenamiento. La validacin del procedimiento de limpieza se extiende solamente a las reas donde el producto o activo farmacutico elaborado entra directamente en contacto (superficie interna de reactores, tanques, envasadoras, equipos de empaquetado primario y utensilios de pesado) y superficies que eventualmente puedan tener contacto con el producto (sellos, bridas, ejes de mezcladores, ventiladores de estufas y elementos de calefaccin). El procedimiento de limpieza de las reas donde el producto o activo farmacutico no entra en contacto directo no forma parte del estudio de validacin de limpieza. Por lo menos tres aplicaciones consecutivas del procedimiento de limpieza se deben realizar demostrando xito para que el procedimiento pueda considerarse validado. El criterio de analizar hasta que est limpio no se considera aceptable. Tal concepto involucra limpiar, muestrear y analizar, repitiendo esta secuencia hasta que se encuentra un lmite aceptable del residuo. Para un sistema o equipo con un proceso de limpieza validado, esa prctica de analizar hasta que est limpio no debe ser utilizada. La prctica de analizar hasta que est limpio no debe sustituir la necesidad de validar los procedimientos de limpieza. La propia frecuencia de monitoreo debe ser omitida o disminuida despus de la validacin, siendo su uso justificable solamente en situaciones especiales, como la realizacin del procedimiento de limpieza por un operador recin entrenado o su realizacin bajo condiciones no establecidas en el protocolo. Los mtodos analticos deben ser desafiados en combinacin con los mtodos de muestreo usados para demostrar que los contaminantes puede recuperarse de la superficie del equipo y para demostrar a que nivel los mismo son recuperados. Esa etapa es necesaria antes de la evaluacin de los resultados provenientes de las muestras pues estos deben ser corregidos por los factores de recuperacin. Las pruebas negativas pueden ser resultados de tcnicas de muestreo incorrectas. Se deben utilizar agentes de limpieza con composicin conocida y definida. 4. Muestreo.

Abajo, enlistamos los dos mtodos de muestreo ms comunes, con sus ventajas y desventajas. El mtodo de extraccin por placebo o producto tambin se establece, sin embargo, este es poco recomendable. Mtodo
Muestra directa de la superficie (hisopo)

Ventajas
Residuos secos e insolubles pueden ser retirados. Permite el establecimiento del nivel de contaminacin por rea, estableciendo el nivel de contaminacin por rea, estableciendo donde el procedimiento necesita ser mejorado y si realmente los puntos crticos corresponden a las expectativas. Permite la recuperacin del contaminante a partir de reas donde el agua de enjuague tiene contacto deficiente. Permite el muestreo de grandes reas. Permite el muestreo de reas de difcil acceso como boquillas de envase, tuberas y pequeas piezas.

Desventajas
El rea a ser muestreada debe permitir el libre acceso al operador, y que es imprctico en muchos equipos. El solvente y el material del hisopo no debe ser fuente de contaminacin adicional o interferir en la metodologa analtica. El porciento de recuperacin del activo por parte del hisopo debe ser establecido utilizando un estudio de recobro del activo por parte del hisopo que mimetice exactamente el procedimiento utilizado en la prctica. (Mismo hisopo, placa con el mismo tipo de acero del equipo, definicin de rea). La posible interferencia del material del hisopo debe ser evaluada durante el estudio de validacin de la metodologa analtica. Causa la dilucin del contaminante, lo que veces compromete o imposibilita el desempeo de la metodologa analtica. El contaminante puede no ser soluble en el solvente utilizado. El contaminante puede estar ocluido o adherido en alguna superficie, de modo que un simple enjuague no es capaz de retirarlo. La metodologa analtica utilizada debe ser especfica para el contaminante, mtodos no especficos como la adopcin del criterio farmacopeco para el agua utilizada en enjuagues no son aceptables. Diluye mucho el contaminante y aumenta considerablemente el nmero de posibles interferencias, dificultando el trabajo de la metodologa analtica utilizada. La contaminacin del placebo o del producto no es uniforme, pudiendo estar concentrada en puntos que pasaron primero por los lugares de mayor concentracin.

Muestreo indirecto de la superficie (muestras de enjuague)

Extraccin placebo producto

por o

No existen ventajas, tal metodologa no es recomendable.

Observaciones: Se recomienda que los solventes utilizados para humedecer el hisopo sea de grado analtico, de adecuada estabilidad y solubilidad para las sustancias activas que sern muestreadas. El hisopo debe ser de tamao especfico y hecho de material adecuado que no interfiera con la metodologa analtica. Las muestras deben ser manipuladas de acuerdo con su estabilidad antes de la realizacin de su anlisis. Por ejemplo: protegidas de la luz, gasificadas con nitrgeno, congelar o analizar inmediatamente. 5. Determinacin de los lmites de aceptacin. Varias metodologas han sido propuestas para la determinacin de los lmites de aceptacin. Aqu especificaremos tres de ellas con sus posibles variaciones individuales:

I. Presencia de no ms de 0.1%; 1/100 o la milsima parte de la dosis diaria mnima del contaminante en la dosis diaria mxima del producto siguiente. II. No ms de 10 ppm del contaminante en el producto siguiente. III. Ninguna cantidad de residuo debe ser visible despus de la realizacin del procedimiento de limpieza. Se recomienda aplicar el ms severo de los tres criterios, siendo que el criterio VISUALMENTE LIMPIO debe ser incluido en todos los procedimientos de limpieza realizados, excepto en aquellos en que la limpieza no puede ser verificada visualmente. Tales mtodos son aplicables a los residuos de productos y detergentes. No son aplicables a las pruebas microbiolgicas. Ejemplos de clculos utilizados para la determinacin de los lmites de aceptacin se encuentran en el ANEXO II. 6. Definicin de Peor Caso (Worst Case) El nmero de combinaciones posibles entre productos contaminantes y siguientes puede asumir proporciones tan grandes que haran inviable la realizacin de un estudio abarcando todas las posibilidades, por lo tanto, la seleccin del peor caso para lo cual un determinado procedimiento debe ser expuesto es vital para que el proceso de validacin se vuelva prctico. El peor caso es una situacin a veces hipottica, donde se establece la peor situacin que pudiera suceder en una lnea de produccin con respecto a la criticidad de la limpieza. El peor caso est formado por el contaminante (producto manipulado previamente en la respectiva lnea de produccin y que pudiera contaminar al siguiente) y el siguiente (producto que al ser contaminado llevara al paciente una mayor dosis del contaminante en cuestin). El mejor candidato a contaminante es aquel que presenta la mejor conbinacin de las siguientes propiedades: Menor solubilidad en el solvente utilizado en el procedimiento de limpieza. Ms difcil de ser removido de acuerdo a la experiencia de los operadores. Mayor toxicidad. Menor dosis teraputica. La principal caracterstica a ser observada en el contaminante es la solubilidad: la seleccin del menos soluble basta como criterio. Los otros criterios tambin pueden ser evaluados, ms dentro de un sistema de puntuacin donde la solubilidad tiene una ponderacin mayor dentro de todos los otros criterios. El candidato a mejor producto producto siguiente es aquel que presenta el menor valor para la razn:
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Menor tamao de lote Menor dosis teraputica La adopcin de plantillas electrnicas facilita la determinacin del peor caso. La empresa tambin puede adoptar la seleccin de un peor caso imaginario, no tomando en cuenta un producto siguiente real y si un imaginario que agregue las peores cualidades posibles, o sea, tal producto siguiente imaginario tendr un tamao de lote menor y una mayor dosis teraputica, un hecho que no siempre est asociado en un mismo producto. Tal criterio, aunque parece demasiado prudente, sirve para construir un estudio de validacin de limpieza robusto, que en el futuro soporte la inclusin de nuevos productos o tamaos de lote en la ruta de fabricacin, sin que haya la necesidad de realizar de nuevo la validacin. 7. Metodologa analtica Empleada La metodologa analtica utilizada debe proveer una medida que sea correlacionada a una concentracin del contaminante. No son aceptables mtodos que hacen, por ejemplo, un simple anlisis de agua de enjuague que indique que la misma cumple los criterios farmacopicos equivalente a su grado de pureza: tales mtodos no son especficos para el residuo analizado. Debe existir un trabajo de validacin para la metodologa empleada en la validacin de limpieza. Los mtodos analticos utilizados deben ser desafiados en combinacin con los mtodos de muestreo utilizados, para demostrar que los contaminantes pueden ser recuperados a partir de la superficie del equipo, con cierta consistencia. Esto es necesario antes que cualquier conclusin se haga con respecto a los resultados encontrados. Los resultados negativos pueden ser una consecuencia de una pobre metodologa de muestreo. Observaciones relativas al uso del TOC: El uso del equipo de TOC para la determinacin de residuos en validacin de limpieza ha aumentado. Su uso es posible, sin embargo, la metodologa desarrollada debe ser validada como cualquier otra, con los mismos parmetros y el lmite de aceptacin establecido debe ser correlacionado a un valor determinado de TOC, no siendo aceptables, por lo tanto, valores empricos como 500 ppb, pues tales valores no pueden por si slo establecer una correlacin con la concentracin del contaminante. Tambin, para anlisis en equipos de TOC, es necesario que los compuestos sean solubles en agua. Los compuestos solubles en agua son raros en validacin de limpieza, como el criterio de seleccin para el peor caso generalmente es la solubilidad en agua, por lo tanto, ese equipo generalmente es ms utilizado para residuos de detergentes que son plenamente solubles en agua.

Los resultados obtenidos por las lecturas de TOC deben ser corregidos por blancos analticos, representados por el agua utilizada en el proceso de limpieza ms los instrumentos utilizados en el muestreo. Observaciones relativas al uso de HPLC: Debe prestarse atencin especial en la validacin a los lmites de deteccin y cuantificacin. La validacin de limpieza generalmente significa lmites bajos de aceptacin, lo que a veces dificulta el desempeo del mtodo. Los mtodos cromatogrficos tienen una gran ventaja en relacin a los mtodos TOC, pues son especficos, o sea, el resultado encontrado y generado por el contaminante buscado. En el TOC, el resultado encontrado puede sufrir interferencia de cualquier compuesto orgnico que venga a contaminar la muestra. El lmite aceptacin adoptado para el contaminante debe estar dentro del lmite de cuantificacin de la metodologa empleada y tal lmite de cuantificacin debe haber sido probado en cuanto a su precisin y exactitud. Observaciones relativas al uso de Espectrofotometra Ultravioleta-visible: Se debe prestar atencin especial en la validacin los lmites de deteccin y cuantificacin. Esa instrumentacin ha sido muy usada para anlisis de detergentes, empleando a veces mtodos colorimtricos para tal finalidad. Se debe evaluar la longitud de onda seleccionada para la deteccin de la sustancia seleccionada, probando que la misma no sufre interferencia de otros residuos o del material utilizado en el muestreo (solvente, hisopo, etc.) siendo que tal verificacin forme parte del estudio de validacin de la metodologa. Observaciones relativas al uso de otros mtodos: Mtodos no especficos tales como conductividad, pueden ser empleados para residuos detergentes y otros compuestos inicos si estn debidamente validados para ese fin. 8. Control de cambios Puntos de validacin de limpieza sujetos a control por parte del procedimiento de control de cambios: I. Procedimientos de limpieza; II. Mtodos analticos; III. Equipos; IV. Detergentes; V. frmula de los productos; VI. Proceso de fabricacin;

9. Informe de validacin. El informe de validacin debe incluir entre otras cosas: I. El resultado de las pruebas ordenadas por el protocolo. Los datos crudos deben ser accesibles. II. Comparacin /evaluacin de los resultados contra los criterios de aceptacin predefinidos. III. Descripcin y evaluacin de los desvos en relacin a lo planeado. IV. Conclusiones y recomendaciones. Particularmente en relacin al monitoreo necesario o actividades de validacin posteriores, si es necesario V. Aprobacin formal del mtodo respectivo.

Anexo I
Determinacin de los factores de recobro para muestreo directo (hisopo) e indirecto (muestras de enjuague) por medio de estudios de recobro. Introduccin. El mtodo analtico debe ser desafiado en combinacin con el mtodo de muestreo utilizado, a fin de demostrar que los contaminantes pueden ser recuperados de la superficie del equipo y demostrar el nivel de recobro y su consistencia. Por nivel se entiende un porcentaje del residuo que puede ser recuperado del medio en el que est adherido, y por consistencia, la dispersin de los valores encontrados para muestreos repetidos hechos sobtre una misma condicin. Ese procedimiento antecede cualquier discusin con respecto a los resultados encontrados en el estudio de validacin de limpieza. Procedimiento para muestreo directo (hisopo). Los siguientes son pre-requisitos para que el estudio de recuperacin se pueda realizar: Lmite mximo de contaminante por rea de la ruta de sntesis (paso B del anexo II). Lmite de Aceptacin de la muestra analizada (Paso C del anexo II). Metodologa analtica validada, capaz de analizar el tem 2. Hisopos del mismo tipo y material que sern utilizados Placas del mismo material de los puntos de muestreo electos, con rea igual a la que ser muestreada por el hisopo, generalmente se utilizan placas de 25 cm. Por mismo material se entiende, por ejemplo, mismo tipo de acero y grado de pulido.
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Ejemplo de carcter orientativo: 0,7g/ cm2. 3,5g/ mL. OK OK Placas de acero Inox 316L com 25cm2 El procedimiento consiste en preparar una solucin del contaminante en un solvente de elevada pureza, siendo deseable tambin que sea muy voltil. La concentracin de esa solucin debe ser tal, que permita la adicin de 17.5 g* del contaminante en la placa. Si usamos una solucin de baja concentracin, el volumen a ser depositado en la placa para obtener 17.5 g ser mucho ms grande, dificultando el secado y facilitando prdidas. Sin embargo, soluciones muy concentradas depositarn pequeas cantidades en la placa para llegar a los 17.5 g, lo que puede causar una concentracin de la contaminacin en ciertos puntos de la misma, perjudicando la homogeneidad. Se debe elegir un trmino medio. En el ejemplo anterior, utilizaremos una solucin con una concentracin de 17.5 g/mL, utiliza como solvente isopropanol, de modo que 1 mL de esa solucin depositar 17.5 g en la placa. Posteriormente, un nmero x de placas, generalmente 5, 6 o 10, deben contaminarse con 1 mL de la solucin. Tales placas deben secarse. Despus de secarse, cada una de ellas debe ser muestreada de acuerdo a los siguientes pasos: Pre-tratar un hisopo con un columen de solvente de extraccin determinado (5 mL) contenido en un tubo de ensayo; Presionar el hsipo contra las paredes del tubo para retirar el exceso; Pasar el hisopo en la superficie de la placa contaminada, uniformemente con un lado en direccin horizontal y con el otro lado en direccin vertical para cubrir toda el rea; Cortar el cabo del hisopo y colocarlo en la solucin de extraccin contenida en el tubo; Extraer el contaminante del hisopo introduciendo el tubo en un bao ultrasnico. Las soluciones formadas despus de la extraccin deben ser analizadas*** contra un estndar. La respuesta de cada muestra dividida por la respuesta del estndar y multiplicada por 100 proporcionar el factor de recobro de cada una. Es deseable que tales valores estn por encima de 75%****, y que la dispersin entre ellas no sea acentuadamente elevada. El procedimiento debe ser repetido con las diferentes personas lo realizarn en la prctica para evidenciar posibles fallas individuales En caso de que los resultados no sean satisfactorios, la tcnica de uso de hisopo debe revisarse, as como el tipo de solvente utilizado en la extraccin. La causa de la no conformidad debe investigarse, los valores dispersos generalmente son debido al uso inadecuado del hisopo y los resultados bajos para un recobro generalmente son debido a solventes con bajo poder de extraccin.
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Se sugiere que todos los resultados encontrados para las muestras en el estudio de validacin de limpieza sean corregidos por el valor menor encontrado para el factor de recobro antes de ser analizados. *17.5 g = Corresponde a una cantidad de contaminante permitida en 25 cm del rea (1 placa), obtenido por el producto del paso B (0.7 g/cm) por el rea de la placa (25 cm). ** Como solucin de extraccin, se debe utilizar un solvente que, reconocidamente, sea capaz de solubilizar el contaminante. *** En caso de que las muestras sean analizadas por HPLC, la etapa de filtracin de las mismas, dependiendo del tipo de filtro utilizado, puede perjudicar el factor de recuperacin. ****Puede ser necesario emplear ms de un hisopo para obtener valores de recobro satisfactorios. Procedimiento para muestreo indirecto (muestras de enjuague). El procedimiento sigue la misma lnea que en la etapa de muestreo de placa contaminada. En este caso, hay dos maneras indicadas. Un mtodo involucra el posicionamiento vertical de la placa contaminada en el interior de un vaso, enseguida un volumen definido de solucin de extraccin se aplica sobre la placa con auxilio de una pipeta , la placa es retirada y la solucin contenida en el vaso analizada mediante el mtodo. El segundo procedimiento requiere la colocacin de la placa en una cantidad adecuada de solvente de extraccin contenido en el interior de un vaso y agitar cuidadosamente todo el conjunto por cerca de 30 segundos. La placa y la solucin de extraccin son separadas a fin de interrumpir el proceso de extraccin y enseguida esta ltima es analizada.

Anexo II
Determinacin de los lmites de aceptacin Criterio 1. 0.1% de la dosis lmite Paso A: Determinacin del lmite de aceptacin en el producto siguiente:
Factor de seguridad: 0.001, milsima parte, 0.1%. Observacin: En algunos casos pueden usarse factores diferentes. Ejemplo: Productos tpicos (0.01 o 1%); parenterales o de elevada actividad 0.0001 o 0.01%) Mnima dosis diaria del contaminante en mg. Tamao mnimo del lote del siguiente producto en g o mL Factor de conversin: mg para g

0.001

MTDcont X MBS subs MaxTDsubs

1000

Lmite mximo del contaminante en el siguiente producto, en g

Mxima dosis diaria del siguiente producto en las mismas unidades del MBS

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Paso B: Determinacin del lmite de aceptacin por rea.

Lmite de aceptacin del contaminante por mL de la solucin a ser analizada. En g/mL

A SRSA
rea compartida por los productos, en cm

Paso C: Determinacin del lmite de aceptacin en la muestra analizada

Lmite de aceptacin del contaminante por mL de la solucin a ser analizada. En g/mL Toda el rea compartida en caso del agua de enjuague o el rea muestreada en caso de hisopo, en cm

X VOLUMEN

REA

Volumen utilizado en el enjuague o volumen utilizado en el recobro del hisopo, en mL.

Consideraciones: El rea utilizada en los clculos no puede ser el rea de un nico equipo, pues, en ese caso, no estaramos llevando en cuenta la contaminacin que el producto puede sufrir a lo largo de toda la lnea de produccin. Debe ser utilizada el rea compartida por esos productos en su ruta de fabricacin. Los trminos y las unidades pueden variar. En cuanto a las unidades, solamente aquellas que son idnticas pueden ser cortadas. En posicin de los trminos y la elaboracin de frmulas puede variar, por ejemplo, el trmino MBSsubs frecuentemente aparece solamente como paso B. Tal orden no influencia el resultado final. En el caso de MTDcont la dosis teraputica mnima del contaminante no sea conocida, como en el caso de los detergentes, podr utilizarse el NOEL (nivel de efecto no observado) siendo el mismo calculado por la siguiente frmula:
LD50 expresado en mg/kg

NOEL expresado en mg

NOEL

LD50 2000

70

Constante emprica

En caso de que se utilice en NOEL, se sustituye el trmino 0.00 x MTD cont en el clculo del paso A.
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Criterio 2 10 ppm En este caso, el lmite de aceptacin del contaminante en el producto siguiente es 10 ppm, o sea, se acepta que el producto a ser removido est presente en la forma farmacutica del prximo producto en una concentracin de 10 ppm. En los clculos, solamente el Paso A se modifica, quedando como sigue: A = 10 x MBSsubs
En g o mL

En ppm, (g)/mL o g/g)

Los pasos B y C se calculan de la misma manera. La adopcin del lmite de 10 ppm se justifica solamente como lmite superior, o sea, en caso en que los otros lmites basados en la toxicidad o en la dosis teraputica se presenten ms altos, por lo mismo que los lmites altos sean justificables, su adopcin escapa a la lgica de las BPF. En otros casos no debe adoptarse, pues no es cientficamente justificable, si an as se aplica, la empresa deber presentar bibliografa que compruebe que ese nivel de contaminante especifico no acarrea riesgos a la salud. Caso 3 Visualmente limpio Es un criterio bsico y mnimo que debe estar presente como criterio de aceptacin en todo protocolo para la validacin de limpieza. Para la adopcin nica del criterio visualmente limpio, la empresa deber primeramente definir el lmite de aceptacin del contaminante en el producto siguiente (A) y enseguida el lmite de aceptacin del contaminante por unidad de rea de la ruta de fabricacin (B). Posteriormente, placas del mismo material de construccin de las diversas partes de la ruta de fabricacin debern contaminarse con valores prximos a B (idealmente, 5 puntos, 1 central y dos distribuidos en los extremos) y deber ser probado que, en las mismas condiciones de iluminacin y perspectiva de visin, el operador es capaz de detectar que las placas contaminadas se encuentran sucias, asegurando, por lo tanto, que cuando se declare que un equipo se encuentra visualmente limpio, la cantidad de contaminante presente en la superficie es menor que B establecido. Las placas sin el contaminante (blancos) debern ser incluidas en este estudio para evaluar la incidencia de falsos positivos por el operador. Para que tal proceso sea validado, el operador debe siempre diferenciar las placas contaminadas de las no contaminadas.

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