FOTOINHIBICIN Y UTILIZACIN DE LA FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILA a DEL FOTOSISTEMA II

Seminario interno grupo de Ecofisiologa- INTA-EEA Bariloche. Santiago Varela & Gonzalo Caball

Instituto Nacional de Tecnologa Agropecuaria

FOTOINHIBICIN Y UTILIZACIN DE LA FLUORESCENCIA DE LA CLOROFILA a DEL FOTOSISTEMA II

Seminario interno grupo de Ecofisiologa- INTA-EEA Bariloche. Santiago Varela & Gonzalo Caball

Introduccin: La clorofila (Fig. 1.) es una molcula compleja, formada por cuatro anillos pirrlicos, un tomo de magnesio y una cadena de fitol larga (C20H39OH). En las plantas y otros organismos fotosintticos existen diferentes tipos de clorofilas. La clorofila a se encuentra en todos los organismos fotosintticos. Los pigmentos accesorios (clorofila b, xantofilas y carotenos) absorben energa que la clorofila es incapaz de absorber. Actan as como una antena, conduciendo la energa que absorben hacia el centro de reaccin (Fig. 2.). Una molcula de clorofila en el centro de reaccin puede transferir su excitacin como energa til en reacciones de biosntesis. Si bien acerca de 50 tipos diferentes de clorofilas y bacterioclorofilas han sido identificados, solo la clorofila a y b son importantes en las plantas superiores (Amerongen et al., 2000).

Fig. 1. Formula estructural de la clorofila.

A.

B.

Fig. 2. A. Captacin de luz por parte de las molculas de pigmento y transmisin hacia el centro de reaccin. B. Esquema de la membrana de un cloroplasto de planta. Una vez que la luz incide, el electrn que se excita recorre el camino indicado por las flechas.

Podemos decir que, el espectro de accin de la fotosntesis es la eficiencia relativa en la generacin de una respuesta biolgica en funcin de la longitud de onda, de los diferentes colores, como por ejemplo la liberacin de oxgeno. Una gran parte de la radiacin incidente sobre la superficie de una hoja, no va a ser utilizada por la planta en los procesos fotoqumicos. La radiacin que no se utiliza se pierde en varias formas. Una parte de la radiacin es reflejada y otra porcin es transmitida, es decir, atraviesa la hoja sin ser absorbida. Una tercera fraccin de ella es absorbida por los pigmentos, sin embargo no todos estos fotones absorbidos por los pigmentos son utilizados en los procesos fotoqumicos. La excitacin de los pigmentos debida a la absorcin de fotones viene seguida por una des-excitacin que puede tomar cuatro formas diferentes: 1. Re-emisin de un fotn (en los procesos denominados fluorescencia y fosforescencia) 2. Des-excitacin no radiativa o relajacin trmica (emisin de calor). 3. Transferencia de la energa absorbida hacia una molcula de pigmento vecina, pudiendo esta energa ser finalmente ser trasladada a las clorofilas de los centros de reaccin. 4. Prdida de un electrn desde los centros de reaccin hacia la cadena de transferencia de electrones (actividad fotoqumica).

La ocurrencia de la emisin de fluorescencia esta bsicamente determinada por los pigmentos absorbentes, por la transferencia de la energa de excitacin y la naturaleza y orientacin de los pigmentos fluorescentes. La fluorescencia de la clorofila puede medirse fcilmente y como tal puede servir de marcador del funcionamiento fotosinttico. Se pueden observar dos mximos de fluorescencia uno a 685 nm que corresponde a fluorescencia del PSII y otro ms pequeo a los 730 nm, atribuido al PSI (Fig. 3.). La emisin de fluorescencia del PSII ocurre en el rojo/rojo lejano: La medicin de la fluorescencia esencialmente consiste en separar la fluorescencia (685 nm) de la luz de excitacin (650 nm) con un filtro de interferencia. La fluorescencia es afectada por el estado redox de los centros de reaccin y de los donantes y aceptores del PSII, siendo adems sensitiva a una amplia variedad de eventos fotosintticos.

Fig. 3. Espectro de fluorescencia desde PSI y PSII.

Existen cuatro grandes grupos de preguntas que pueden ser contestadas a travs de la aplicacin del mtodo de fluorescencia de la clorofila (Tabla 1).
Tabla 1. Cuatro grupos bsicos de preguntas que pueden ser contestadas a travs de la

aplicacin prctica del mtodo de fluorescencia de la clorofila.

Plantas

Condiciones de testeo (1)

Condiciones de testeo (2)

Condiciones qumicas en el ambiente durante el testeo de la fluorescencia

Seales de testeo

Condiciones fsicas y qumicas durante el cultivo de las muestras

Condiciones fsicas en el ambiente durante el testeo de fluorescencia

Fluorescencia como herramienta para analizar los siguientes grupos de preguntas

constante constante constante variable Grupo I:

constante variable variable constante

variable constante variable constante

I II III IV

Un material bien definido es usado bajo condiciones fsicas bien definidas para analizar su respuesta a cambios qumicos en el ambiente (estrs qumico). Varios experimentos pueden ser llevados a cabo en laboratorio utilizando, por ejemplo, inhibidores, fertilizantes, gases como CO2, O2, O3 o cualquier otro agente qumico de estrs. Grupo II: Un material bien definido es usado para analizar su respuesta a cambios en parmetros fsicos del ambiente (estrs fsico). Ej.: calidad y cantidad de luz, temperatura, etc. Grupo III: Un material bien definido es usado para analizar su respuesta a una combinacin de estrs qumico y fsico. En este tipo de experimentos puede ser analizado el sinergismo y antagonismo de las variables qumicas y fsicas de co-estrs.

Grupo IV: Biosenso: Bajo condiciones experimentales bien definidas un test de fluorescencia es elaborado para a) describir un sistema (planta o ecosistema) en trminos de: i) viabilidad, ii) productividad, iii) sensibilidad y resistencia al estrs b) para estudiar la relacin entre estructura-funcin en plantas transgnicas, c) para investigar la ecodinmica de sistemas complejos como rboles, horticultura, bosques e incluso ecosistemas completos.

Fluorescencia de la clorofila La tcnica de fluorescencia de la clorofila a tiene relativamente poca historia, comenzando con las observaciones de Kautsky & Hirsch (1934). Una alteracin en cualquiera de las tasas de las constantes que gobiernan la relajacin o mitigacin de los estados individuales de exitacin de las clorofilas van a modificar el rendimiento de la fluorescencia y de esta forma la intensidad de la fluorescencia. Este es el principio bsico para utilizar la fluorescencia de la clorofila a para el monitoreo de procesos fisiolgicos in vivo. Cuando se ilumina una hoja que estaba en oscuridad con una fuerte luz blanca, se observa una curva de fluorescencia de la clorofila caracterstica (Fig.4.). Estas curvas de fluorescencia emitidas por hojas previamente adaptadas a la oscuridad fueron descritas por primera vez en los aos treinta por Kautsky y Hirsch (1934). Dicha curva, alcanza un valor bajo (F0) durante muy poco tiempo (en el caso de un pulso de irradiacin), o puede ser monitoreada durante un largo perodo cuando la hoja se mantiene iluminada con luz intermitente (luz modulada). Este primer nivel (F0) es un indicativo de la plena actividad de los centros de reaccin. Refleja la perdida de una parte de la energa absorbida por las molculas-antenas antes que stas hayan podido transferir la energa de excitacin hacia los centros de reaccin (Krause & Weis, 1984; Briantais et al., 1986). Este nivel corresponde a un estado donde todos los aceptores primarios de electrones del PSII (QA) estn oxidados, por lo tanto es independiente de los procesos fotoqumicos. La reduccin progresiva de QA por la actividad del PSII aumenta la probabilidad de disipacin de energa por emisin de fluorescencia (y calor), debido al hecho que la probabilidad de conversin fotoqumica disminuye cuando el centro de reaccin est bajo la forma Z+ P680 QA-. Bajo esta forma no puede efectuar otras separaciones de cargas, es decir, el sistema est "cerrado". Cuando todos los QA estn reducidos, todos los centros de reaccin estn "cerrados" y la fluorescencia es mxima.

El aumento de la fluorescencia desde F 0 a Fm sigue una cintica ms o menos sigmoidal, la disminucin de la velocidad de emisin de fluorescencia es atribuida a una reoxidacin de los QA- por QB, aceptores secundarios del PSII (Briantais et al., 1986). Fluorescencia Modulada: Una medida precisa de la fluorescencia requiere de un sistema de deteccin que sea sensible a las longitudes de onda de fluorescencia pero ciego a la luz actnica que mueve la fotoqumica (espectro 400-700 nm). En instrumentos de excitacin continua, la discriminacin de estas seales se consigue con filtros de interferencia que filtran la luz proveniente de longitudes de ondas no fluorescentes. Desafortunadamente, este sistema requiere de aislar la muestra de la luz ambiental. De otro modo la componente roja y roja lejana de la luz solar se solapara con la seal de fluorescencia del PSII. Las curvas de Kautsky son una buena medida del rendimiento potencial del PSII. Sin embargo, no representan el rendimiento fotoqumico real bajo una condicin de iluminacin que es el que realmente manifiesta una planta durante las horas del da. Para resolver este problema se dise un sistema capaz de detectar la fluorescencia tanto en condicin oscura como en una condicin de iluminacin. A este sistema se le conoce como fluorometra modulada (Fig. 4.). En hojas iluminadas, cuando se las irradia con un pulso de alta radiacin, la fluorescencia se estabiliza en un valor de F, el cual es mayor que F0. cuando el pulso de luz es mayor a la saturacin del sistema, la fluorescencia mxima observada es menor que la Fm y se denomina Fm. La disminucin lenta de la fluorescencia se ha asociado a tres procesos:

1. Reoxidacin de los QA- en respuesta a la activacin del PSI y del ciclo de Calvin (componente fotoqumica de la extincin de fluorescencia, qP).El pico F m se asocia a la iniciacin de la reduccin del CO2 en el ciclo de Calvin (Ireland et al., 1984). 2. Establecimiento de un gradiente de pH fotoinducido en los cloroplastos, lo cual conduce a un aumento de la desactivacin trmica de las molculas de clorofila a excitadas (componente energtica de qN o NPQ). 3. Distribucin de la energa de excitacin entre los dos fotosistemas, la cual depende estrechamente de la localizacin de los complejos de captura de luz (LHC) en las membranas tilacoidales (Fork & Saton, 1986).

7
Fluorescencia (valores relativos)

Hoja en oscuridad
Fm

Hoja iluminada

6 5 4

Fm

3 2 1 0
mod sat mod sat

DF F F0 F0

Fig. 4. Evolucin de la fluorescencia en hojas en oscuridad e iluminadas en respuesta a un pulso de saturacin de luz. mod = pulso de luz moderado, sat = pulso muy alto de para saturar los centros de captacin de fotones.

Como se mencion anteriormente, los fotones absorbidos por la clorofila pueden ser canalizados a los centros de reaccin (cosecha fotoqumica de quantum, P), ser disipados como calor (D) o emitirse como fluorescencia ( Estos tres procesos son F). competitivos, y por lo tanto, la suma de estos tres procesos es la unidad: + D + F = 1 P Cuando todos los centros de reaccin se encuentran saturados, la P es cero, y por lo tanto la suma de la disipacin en la cosecha de quantum a saturacin de luz ( m) y la D fluorescencia a saturacin de luz (Fm) iguala a la unidad. Asumiendo que no existen cambios en ambos procesos durante el pulso de luz: m ( m) -1 = ( -1 D F D F) Como la cosecha de quantum (P) es normalmente referenciada como ya que es II originada en el PSII, la relacin mostrada puede ser expresada slo con parmetros relacionados con la fluorescencia, de la siguiente manera:

II = (Fm - m-1 F) F

La mxima cosecha de quantum (IIm) medida en hojas en oscuridad se expresa como: = (F m F0) / F m = Fv / Fm IIm donde Fv es la fluorescencia variable, la diferencia entre la mxima y la mnima fluorescencia. En muestras iluminadas, la expresin cambia a: II = (Fm F) / F m = / Fm F donde es el incremento de la fluorescencia dado por un pulso saturante de luz F superimpuesto a la radiacin que ya era recibida. La relacin / Fm es igual o menor a F Fv / Fm, y dicha diferencia se incrementa a mayores valores de radiacin. Es posible tambin, particionar la cosecha de fluorescencia en procesos fotoqumicos (qP) y no fotoqumicos (qN) de la siguiente manera: qP = (F m - F) / (Fm - F0) = / Fv F qN = 1 - (F m - F0) / (Fm - F0) = 1 - Fv / F v

Existe tambin otro trmino para la cosecha no fotoqumica (NPQ) que no requiere la determinacin de F0= NPQ = (Fm - Fm) / Fm Tasa de fotosntesis neta: Evolucin de Oxgeno: El oxgeno se genera en el proceso de fotosntesis como producto de la fotlisis del agua, esto ocurre cuando el complejo hidroltico asociado a la cara luminal del PSII, producto de la absorcin de luz por el fotosistema adquiere un potencial redox capaz de oxidar a la molcula de agua. La liberacin de oxgeno es proporcional a la velocidad de transporte de electrones, la cual est asociada a la fijacin de CO 2 mediante la reduccin del NADP a NADPH y la sntesis de ATP. La evolucin de oxigeno y la fijacin de CO2 han sido tradicionalmente usados como indicadores de fotosntesis neta (Pn), tanto en plantas terrestres como acuticas. La fotosntesis involucra procesos fotofsicos y fotoqumicos, que dependen de la intensidad lumnica, concentracin de CO 2, y de la temperatura. Una planta mantenida a temperatura ptima y CO 2 atmosfrico (360 ppm) en oscuridad

presentar una tasa negativa de evolucin de oxgeno equivalente al consumo de oxgeno en el proceso respiratorio. Si paulatinamente se ilumina a una superficie foliar determinada con intensidad lumnica creciente la Pn aumentar linealmente con la intensidad lumnica hasta alcanzar una meseta (Fig. 5A). El punto en que Pn es igual a 0 (cero), es decir, la intensidad lumnica en que la respiracin obscura y la fotosntesis bruta se igualan es conocido como punto de compensacin lumnico (PCL). La intensidad lumnica a la que se alcanza la meseta se conoce como punto de saturacin lumnica (PSL). La pendiente de la regin lineal indica el rendimiento cuntico de la fotosntesis (Pn ). La declinacin en la tasa de Pn con el aumento de la intensidad lumnica por sobre el PSL se atribuye a que a que la velocidad de carboxilacin a nivel enzimtico (Rubisco) se torna limitante (Fig. 5A). Tanto PSL como PCL dependern fundamentalmente del grado de sensibilidad de cada planta a la luz. Es as como las plantas adaptadas a la sombra presentarn PSL y PCL ms bajos que aquellas adaptadas a pleno sol. Toda la energa lumnica por sobre el punto de saturacin lumnica (PSL) se considera en exceso (Fig. 5B) lo que resulta en la regulacin negativa y disipacin de este exceso por parte de la planta lo que conduce generalmente a un descenso en el rendimiento cuntico (fotoinhibicin dinmica) o en casos extremos puede llegar a daar al aparato fotosinttico causando fotoinhibicin crnica. La fotoinhibicin puede definirse entonces como el proceso por el cual se da la inactivacin de la fotosntesis por luz visible. Este fenmeno se manifiesta a travs de una baja tasa de fijacin de CO 2 y un bajo rendimiento cuntico de la fotosntesis.

Fig. 5. Dependencia de la luz del proceso de fotosntesis.

10

El blanco principal de la fotoinhibicin es el fotosistema dos, donde al menos dos sitios son susceptibles al deterioro inducido por luz en las reacciones de transferencia de electrones. Uno de los sitios esta localizado en el lado donante del fotosistema II. Ha sido demostrado que la fotoinhibicin ocurre por reacciones virtualmente independientes simultneamente en ambos sitios. En muestras con una evolucin de O 2 intacta, el lado aceptor es claramente mas susceptible a la fotoinhibicin que el lado donante mientras que el orden opuesto de sensibilidad es observado cuando el complejo de oxidacin del agua es deteriorado. La irradiacin con UV-B genera una inhibicin preferencial del complejo de oxidacin del agua. Originalmente ha sido propuesto que la fotoinhibicin del lado aceptor de electrones es inducida por la modificacin del sitio de ligadura de QB. Posteriormente se sugiri que la misma era debida a una secuencia de eventos que comprometen un sobre reduccin del pool de plastoquinonas, una estabilizacin del aceptor primario de electrones (QA) reducido a un estado QA- seguido de una doble reduccin a QA2- y un paso a QAH2 que eventualmente deja su sitio de ligadura. En este ltimo momento, en ausencia de oxgeno, solo el ltimo estado con un sitio de ligadura del QA vaco ha sido sugerido como un estado irreversible de fotoinhibicin. La fotoinhibicin del lado donante del fotosistema dos se debe a una inactivacin de la transferencia de electrones, causada en parte por una oxidacin de los pigmentos cercanos, componentes redox o aminocidos por las formas altamente oxidantes de clorofila P680+ y/o Yz+. Estudios mas detallados sugieren tambin la contribucin de un segundo proceso que involucra adicionalmente superoxido como forma reactiva. Actualmente es aceptado que la inhibicin en las reacciones de transporte de electrones dentro de el fotosistema dos gatilla la degradacin de polipptidos D1 y, en menor
-

medida, D2, as como el reensamblaje de las unidades del fotosistema dos daadas por la incorporacin de nuevos polipptidos D1 sintetizados. La degradacin de D1 puede ser disparada no solo por el lado aceptor de electrones del fotosistema dos sino tan bien por el dao en el lado donante.

Las plantas aclimatadas a altas radiaciones disipan el exceso de energa a travs de reacciones mediadas por un grupo particular de carotenoides. Este proceso de disipacin es inducido por la acumulacin de protones en el lumen del tilacoide, que es generada por exceso de luz. La alta acidificacin del lumen induce a la conversin enzimtica del

11

carotenoide violaxantina a zeaxantina. El exceso de energa es transferido a las zeaxantinas, que actan como un corrector de luz recibiendo la energa de la forma energizada de la clorofila comnmente utilizada en la fotosntesis y disipando luego la energa nociva como calor. Esta disipacin de energa puede ser medida por el mtodo de fluorescencia de la clorofila. En ausencia del ciclo de las xantofilas, el exceso de energa puede ser transferida al oxigeno a travs de la clorofila, generando un dao fotooxidativo. El primer signo de la existencia de este dao fotooxidativo aparece en la protena D1 del fotosistema dos. Un dao ms excesivo puede generar la destruccin de las membranas y la oxidacin de la clorofila. En sitios expuestos al sol, los cambios diurnos en la irradiancia son cercanamente rastreados por los niveles de anteraxantinas y zeaxantinas. En condiciones de sombra, los flecos de luz conducen a la rpida aparicin de anteroxantinas y zeaxantinas, y valores altos son mantenidos luego del primer fleco de sol. Este mecanismo de regulacin asegura que no exista disipacin de energa cuando la luz es limitante para la fotosntesis, por cuanto el dao es prevenido cuando la luz es absorbida en exceso. El ciclo de las xantofilas es crtico para entender la respuesta bsica a la luz en las curvas de fotosntesis.

Relaciones con el rendimiento fotosinttico: El rendimiento cuntico mximo luego de la incubacin en la oscuridad (Fv /Fm) es tpicamente estable en valores cercanos a 0.8 en hojas sanas. Fv /Fm se correlaciona bien con el rendimiento cuntico fotosinttico medido como la produccin de O2 o el consumo de CO2 a bajas irradiancias. La reduccin del rendimiento cuntico por fotoinhibicin puede ser evaluada con parmetros de fluorescencia. Una reduccin en Fv/Fm puede ser generada por una reduccin en Fm y/o por un incremento en F0. Pueden distinguirse dos componentes de relajacin (lento y rpido) luego de generarse este proceso. El componente rpido genera la relajacin luego de unas pocas horas de baja radiacin u oscuridad y es slo evidente durante el da. Se supone que este mecanismo esta involucrado en la proteccin del fotosistema dos ante la sobre excitacin. El componente de relajacin lento puede llevar varios das y es considerado como una indicacin del dao del fotosistema dos. Este dao puede ser el resultado de una exposicin repentina de hojas de sombra a una condicin de luz plena o una combinacin entre altas irradiancias y altas/bajas temperaturas.

12

El rendimiento cuntico en condiciones de luz ( m) puede ser utilizada para derivar la F/F tasa de transporte de electrones (JF). J F = I m abs 0.5 F/F donde I es la irradiancia y abs es la absorcin de fotones por la hoja y 0.5 se refiere a la particin de fotones entre los dos fotosistemas. Por comparacin de JF con las tasas de intercambio gaseoso, la tasa de carboxilacin (Vc) y la oxigenacin (V0) puede conocerse la reaccin de la Rubisco.

Estrs hdrico, trmico y lumnico: En climas mediterrneos, es en el verano en el que las plantas estn sometidas a estrs hdrico, altas temperaturas, con una mayor frecuencia de das claros, con alta radiacin solar. Esta combinacin de factores de estrs puede resultar en una disminucin en la productividad fotosinttica. En las plantas, altos niveles de radiacin, provocan fotoinhibicin de la fotosntesis y destruccin fotooxidativa del aparato fotosinttico, caracterizado por una reduccin en la eficiencia de la utilizacin de la luz. La fotoinhibicin es provocada por la prdida del funcionamiento de los fotosistemas II (PSII) que se manifiesta como una disminucin, transitoria o permanente, en la eficiencia cuntica de la fotosntesis (mol de CO2 fijado por mol de fotones absorbido) en niveles de luz de baja intensidad. Esta disminucin en la eficiencia de la fotosntesis y en el funcionamiento de los PSII, podra estar o no , bajo luz saturante, acompaada por una disminucin en la mxima capacidad fotosinttica (Amax) en que bajo diferentes estrs o inherentes limitaciones en la capacidad para utilizar altos niveles de radiacin, las hojas absorben mas energa lumnica de la utilizada en la fotosntesis. La fotoinhibicin puede ser el resultado del fotodao directo en los PSII y producto de la fotoproteccin en la cual la excesiva energa de excitacin es reorientada y disipada principalmente como calor, procesos que logran un balance entre la energa recibida por el PSII con la capacidad de stos para utilizarla. La proteccin, como se mencion anteriormente, ocurre mayoritariamente por medio de un mecanismo donde interviene un gradiente de pH transtilacoidal y pigmentos del ciclo de la xantofila que actuaran, sinrgicamente, en la disipacin del exceso de energa. La mayor parte de la informacin del papel del ciclo de la xantofila en la fotoproteccin ha sido obtenida del anlisis de la fluorescencia de la clorofila a, la que corresponde a una

13

pequea parte de la energa de la luz capturada por los pigmentos fotosintticos y es predominantemente emitida por los PSII. Esta fluorescencia es baja cuando la energa de excitacin absorbida es efectivamente convertida en fotoqumica, es decir alto consumo o mitigacin fotoqumica (qP) y por otros procesos diferentes a la mitigacin fotoqumica, los llamados en conjunto mitigacin no fotoqumica (qN). Diferentes tipos de estrs ambiental que afectan la eficiencia del PSII, producen una disminucin caracterstica de la razn Fv /Fm, la que es usada como una manera de medir la eficiencia fotoqumica de los PSII. En forma similar a la fotoinhibicin que ocurre en hojas bajo exceso de luz (disminucin en Fv /Fm) es que la fotoproteccin tambin disminuye la eficiencia cuntica de la fotosntesis y son estos procesos preventivos en las antenas colectoras de luz los que tambin causan una disminucin en Fv/Fm y en Fv/Fm por perodos variables de tiempo. Esto ocurre porque el proceso de disipacin de la energa de excitacin, antes que alcance los centros de reaccin del PSII, compite con el fotoqumico por la energa de excitacin y por esto la fotoproteccin es asociada con una disminucin en la eficiencia fotosinttica intrnseca de los PSII. En plantas bajo sequa, la reduccin en la fotosntesis resulta de una baja disponibilidad de CO2 por cierre estomtico, e incapacidad de disipar la radiacin solar como calor latente, con lo que, consecuentemente, la temperatura foliar se incrementa. El estrs hdrico predispone a las hojas a sufrir fotoinhibicin debido a que en potenciales hdricos bajos, la fotosntesis puede ser alterada por efectos no estomticos, principalmente por la actividad de los PSII y las reacciones de transferencia de electrones fotosintticos. En esto, la reduccin en la conductancia estomtica da como resultado una disminucin en la actividad fotosinttica neta.

14

Nomenclatura de trminos de Fluorescencia de la Clorofila: F = fluorescencia actual en un momento determinado. F0 = fluorescencia mnima en tejido adaptado a la oscuridad; intensidad de fluorescencia con todos los centros de reaccin del PSII abiertos cundo la membrana fotosinttica se encuentra en el estado no energizado (qp= 1 y q N= 0); tambin puede ser usado como el nivel O en la nomenclatura de Kautsky. Fi = intensidad de la fluorescencia en el nivel I de la nomenclatura de Kautski. Fp = intensidad de la fluorescencia en el nivel P de la nomenclatura de Kautski. Fm = fluorescencia mxima en tejido adaptado a la oscuridad, intensidad de la fluorescencia cuando todos los centros de reaccin del PSII se encuentran cerrados (qp = 0), todos los procesos de mitigacin no fotoqumicos son mnimos (qN = 0). Fv = fluorescencia variable en tejido adaptado a la oscuridad, fluorescencia variable mxima en el estado en el que todos los procesos no fotoqumicos se encuentran en el nivel mnimo. i.e. Fm F0. Ft = intensidad de la fluorescencia en el estado T de la nomenclatura de Kautsky. Fs = fluorescencia en el estado estacionario, definida por ciertos autores como el periodo en el que la intensidad de la fluorescencia no varia en el tiempo en el que las circunstancias externas permanecen constantes. Fv/Fm = eficiencia de transferencia de exitacin en tejido adaptado a la oscuridad. (Fm-F0)/Fm

T1/2 = tiempo medio para el incremento en Fv, tiempo (mili segundos) tomados por la intensidad de la fluorescencia desde el nivel O hasta llegar a la mitad de la intensidad de la fluorescencia del nivel Fv. F0= fluorescencia mnima en tejido adaptado a la luz; intensidad de la fluorescencia cundo todos los centros de reaccin del PSII se encuentran abiertos en cualquier estado adaptado a la luz (q p = 1 y qN 0) Fm= fluorescencia mxima en tejido adaptado la luz; intensidad de la fluorescencia cuando todos los centros de reaccin del PSII estn cerrados en cualquier estado adaptado la luz (qp = 0 y qN 0) Fv = fluorescencia variable en tejido adaptado a la luz; fluorescencia variable mxima en cualquier estado adaptado a la luz. i.e. Fm-F0 Fv/Fm = eficiencia de transferencia de exitacin en tejido adaptado a la luz; (F m-F0 )/ Fm qp = mitigacin fotoqumica; (Fm-F) / (Fm - F0 ) qN = mitigacin no fotoqumica; 1 - (Fm-F0 ) / (Fm - F0 ). = eficiencia de uso de la luz en procesos fotoqumicos; (Fm -F) / Fm PSII

15

Bibliografa: Briantais, J.M.; Vernotte, C.; Krause, G. H. y Weis, E. 1986 Chlorophyll fluorescence of higher plant chloroplasts and leaves. In: Light emission by plants and photosynthetic bacteria, J.A. Govindjee y D.C. Fork Eds.: 539-577. Duysens, L.N.M. y Sweers, H.E. 1963 the mechanism of two photochemical reactions in algae as studied by means of fluorescence. In: Studies on microalgae and photosynthetic bacteria, Jap. Soc. Plant. Physiol. Ed.: 353-372. Fork, D.C. y Satoh, K. 1986 The control by state transitions of the distribution of excitation energy in phosynthesis. Ann. Rev. Plant physiol. 37: 335-361. Ireland, C. R.; Long, N.R. y Baker, N. R. 1984 The relationship between carbon dioxide fixation and chlorophyll a fluorescence during induction of photosynthesis in maize leaves at different temperatures and carbon dioxide concentrations. Planta 160: 550-558. Kautsky, H. y Hirsh, A. 1934 Clorophyllfluoreszenz und kohlensauerassimilazion. fluoreszenzverhalten grner pflanzen. Biochemische Zeitschrift 274: 423-434. Das

Krause, G.H. y Weis, E. 1984 Chlorophyll fluorescence as a tool in plant physiology. II Interpretation of the fluorescence signals. Photosynthesis Research 5: 139-157. Schreiber, U. Bilger, W. y Neubauer, C. (1995) Chlorophyll fluorescence as a nonintrusive indicator for rapid assessment of in vivo photosynthesis. En E.D. Schulze & M.M. Caldwell (Eds.) Ecophysiology of Photosynthesis. Springer-Verlag, Berlin Heidelberg.

16